Набор реагентов для дифференциального выявления ДНК вируса гепатита В, РНК вируса гепатита С и РНК вирусов иммунодефицита человека 1 и 2 типов методом ПЦР/ОТ-ПЦР в режиме реального времени (РеалБест ВГВ/ВГС/ВИЧ ПЦР) по ТУ 21.20.23-071-23548172-2021 — инструкция и характеристики

РУ: РЗН 2022/17754 от 14.07.2022 · класс риска 3

Производитель: АО "Вектор-Бест" (Россия)

Вид изделия: ВИЧ 1/ВИЧ 2/Вирус гепатита С/Вирус гепатита В нуклеиновые кислоты ИВД, набор, анализ нуклеиновых кислот

В госконтрактах 44-ФЗ: 118 контрактов, медианная цена за единицу 35 057 ₽.

Автоматически отфильтрованный фрагмент инструкции по применению (страницы, где похоже, что есть таблица технических характеристик) — не полный документ. Карточка РУ на портале Росздравнадзора →

Текст инструкции: технические характеристики

--- стр. 1 ---
• /
«УТВЕРЖДАЮ»
зальный директор 
з-Бест»
_М.Д. Хусаинов 
2022 г.
ИНСТРУКЦИЯ
по применению набора реагентов для дифференциального выявления ДНК вируса 
гепатита В, РНК вируса гепатита С и РНК вирусов иммунодефицита человека 1 и 2 типов 
методом ПЦР/ОТ-ПЦР в режиме реального времени 
«РеалБест ВГВ/ВГС/ВИЧ ПЦР»
1. НАЗНАЧЕНИЕ
Набор реагентов для дифференциального выявления ДНК вируса гепатита В, РНК ви­
руса гепатита С и РНК вирусов иммунодефицита человека 1 и 2 типов методом ПЦР/ОТ- 
ПЦР в режиме реального времени «РеалБест ВГВ/ВГС/ВИЧ ПЦР» предназначен для каче­
ственного дифференциального выявления ДНК вируса гепатита В (ВГВ), РНК вируса гепа­
тита С (ВГС) и РНК вирусов иммунодефицита человека 1 и 2 типов (ВИЧ-1 и ВИЧ-2), вьще- 
ленных из клинических образцов (сыворотка или плазма крови с ЭДТА) методом, основан­
ным на амплификации фрагмента ДНК или кДНК (полученной методом обратной тран­
скрипции из РНК) в полимеразной цепной реакции (ПЦР) с гибридизационно- 
флуоресцентной детекцией в режиме реального времени. Набор может быть применен для 
скрининга доноров крови и её компонентов.
2. ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА
2.1. Принцип метода.
Принцип анализа основан на регистрации процесса амплификации выбранного спе­
цифического фрагмента ДНК или кДНК (полученной методом обратной транскрипции из 
РНК), заключающегося в повторяющихся циклах: температурная денатурация, отжиг прай­
меров на комплементарные последовательности, достройка полинуклеотидных последова­
тельностей с этих праймеров Taq-полимеразой.
Дифференциальное выявление вирусных инфекций обеспечено независимой детекци­
ей фрагментов генома вирусов гепатита В и С (в ГРС-1), и фрагментов генома вирусов им-
Инструкцт составлена сотрудниками АО «Вектор-Бест»: Директором  
по производству Ткачевым В.К. и нач. отделения производства ПЦР-наборов Трухиной А.В.


--- стр. 2 ---
/
мунодефицита человека 1  и 2 типов (в ГРС-2), за счёт флуорогенных специфичных зондов,
детектируемых в разных каналах.
Ввиду высокого генетического разнообразия и высокой скорости возникновения мута­
ций для исследуемых патогенов для детекции целевой нуклеиновой кислоты вируса в реак­
ционной смеси используется по два набора праймеров и зондов, специфичных к двум локу­
сам генома: некодирующий концевой повтор Itr и фрагмент гена интегразы int для ВИЧ-1 и 
нетранслируемые концевые повторы 5'UTR и 3 UTR для ВГС. Для детекции целевой нукле­
иновой кислоты ВГВ и ВИЧ-2 используются смеси праймеров и зондов, специфичных к од­
ному высококонсервативному локусу генома: некодирующий концевой повтор Itx для ВИЧ-2 
и фрагмент S гена для ВГВ.
Достоверность анализа контролируется по наличию положительного результата в по­
ложительном контрольном образце (ПКО), который подвергается процедуре вьщеления НК 
вместе с анализируемыми клиническими образцами.
Учёт эффективности выделения НК из образцов обеспечивается выделением нуклеи­
новых кислот из клинических образцов совместно с внутренним контрольным образцом 
(ВКО).
2.2. Состав набора:
Компонент набора (сокращение) 
Описание.
Количество
Положительный контрольный образец (ПКО) 
Лиофилизированиыи.
1 флакон
Готовая реакционная смесь для ПЦР/ОТ-ПЦР №1 (ГРС-1) 
Лиофилизированная
48 пробирок
Готовая реакционная смесь для ОТ-ПЦР №2 (ГРС-2) 
Лиофилизированная
48 пробирок
Раствор для восстановления контрольных образцов (РВК) 1  флакон.
Бесцветная жидкость, содержит натрия азид (0,05%) 4 мл
Оптическая пленка 1,5 листа
Пластиковая крышка 1 шт.
Вкладыш со штрих-кодом 1 шт.
2.3. Условия применения.
Аналитические и диагностические характеристики набора были валидированы при 
вьщелении НК из клинических образцов (сыворотка и плазма крови с К2/КЗ-ЭДТА) объёмом 
0,25-1,0 мл и минипулов из 2-6 образцов общим объёмом 1,0 мл с использованием наборов: 
«РеалБест ДельтаМаг ВГВ/ВГС/ВИЧ» и «РеалБест экстракция 1000» производства АО «Век- 
тор-Бест».
Набор применяется с регистрирующими амплификаторами планшетного типа с тер­
моблоком для пробирок объемом 0,2 мл и каналами детекции «ROX», «РАМ», «НЕХ»: 
«СРХ96», (фирма «Bio-Rad», США); «ДТпрайм» (ООО «НПО ДНК-Технология», Россия).


--- стр. 3 ---
Набор рассчитан на проведение анализа 48 образцов, включая контрольные образцы. 
Показания к применению.
Набор реагентов используется для качественного дифференциального выявления ДНК 
вируса гепатита В (ВГВ), РНК вируса гепатита С (ВГС) и РНК вирусов иммунодефицита че­
ловека 1 и 2 типов (ВИЧ-1 и ВИЧ-2), выделенных из клинических образцов (сыворотка или 
плазма крови с ЭДТА) методом, основанным на амплификации фрагмента ДНК или к ДНК 
(полученной методом обратной транскрипции из РНК) в полимеразной цепной реакции 
(ПЦР) с гибридизационно-флуоресцентной детекцией в режиме реального времени. Набор 
может быть применен для скрининга доноров крови и её компонентов.
Противопоказаний к применению медицинского изделия нет (не применимо).
3. АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
3.1. Аналитическая чувствительность.
За аналитическую чувствительность принята величина концентрации целевой НК, для 
которой при экспериментальной проверке на двух сериях набора на 40 повторах для каждой 
серии и каждого из заявленных амплификаторов и наборов для выделения НК из 1 мл образ­
ца был получен положительный результат в 100% случаев.
Набор гарантированно выявляет (при выделении НК из 1 мл образца);
- ДНК ВГВ в концентрации 10 МЕ/мл;
- РНК ВГС в концентрации 15 МЕ/мл;
- РНК ВИЧ-1 в концентрации 30 МЕ/мл;
- РНК ВИЧ-2 в концентрации 50 МЕ/мл,
что подтверждается при выпуске каждой серии набора реагентов тестированием образцов, 
приготовленных из стандартных образцов предприятия, аттестованных относительно меж­
дународных стандартов ВОЗ (NIBSC коды: 10/266, 06/100, 16/194 и 08/150), с соответствую­
щим содержанием вирусной НК.
Эффективность выявления различных генотипов ВГВ подтверждена анализом 1-й 
международной референсной панели ВОЗ генотипов ВГВ (PEI код 5086/08, включает гено­
типы А, В, С, D, Е, F, G), а также изолятов от российских пациентов, соответствующих гено­
типам А, С и D (генотип определён секвенированием).
Эффективность выявления различных генотипов ВГС подтверждена анализом 2-ой 
панели генотипов РНК ВГС (NIBSC код 08/264, включает генотипы 1а, 2Ь, За, 4а, 5 и 6а), а 
также изолятов от российских пациентов, соответствующих генотипам 1а, 1Ь, 2, 3, 4 и 6 (ге­
нотип определён секвенированием).
Эффективность выявления различных субтипов ВИЧ-1 подтверждена анализом 2-й 
международной референсной панели ВОЗ субтипов ВИЧ-1 (NIBSC код 12/224, включает
3


--- стр. 4 ---
)гапы А, В, С, D, CRF 01_АЕ, F, G, AG-GH и группы О и N) и 1-й международной рефе- 
^ренсной панели ВОЗ циркулирующих рекомбинантных форм (CRF) ВИЧ-1 (NIBSC код 
13/214), а также изолятов от российских пациентов, соответствующих субтипам А, В, С и 
рекомбинантным формам CRF 02_AG, CRP 63_02А (субтип определён секвенированием).
3.2. Аналитическая специфичность.
Аналитическая специфичность набора реагентов «РеалБест ВГВ/ВГС/ВИЧ ПЦР» 
обеспечивается использованием специфичных для генома каждого из вирусов ВГВ, ВГС, 
ВИЧ-1 и ВИЧ-2 праймеров и флуоресцентно меченых зондов, а также строгими условиями 
реакции. Праймеры и зонды проверены на наличие возможных гомологий со всеми доступ­
ными в базах данных нуклеотидными последовательностями, которые могут быть обнаруже­
ны в крови человека.
Аналитическая специфичность дифференциального выявления ДНК вируса гепатита В, 
РНК вируса гепатита С и РНК вирусов иммунодефицита человека 1 и 2 типов была подтвер­
ждена отсутствием перекрестных ложноположительных сигналов при анализе образцов 
плазмы, содержащих ДНК/РНК возбудителей других заболеваний (вирус гепатита А, вирус 
гепатита D, вирус гепатита G, вирус клещевого энцефалита, парвовирус В19, аденовирусы 
человека, вирус ветряной оспы, вирус Эпштейна-Барр, цитомегаловирус, вирус простого 
герпеса 1 типа, вирус простого герпеса 2 типа, Staphylococcus aureus, Streptococcus agalactiae, 
вирус герпеса человека 6 типа, Borrelia burgdorferi, Borrelia miyamotoi) в концентрации 10^ - 
10^ копий на пробу.
Для проверки отсутствия интерференции между маркерами, определяемыми набором 
реагентов «РеалБест ВГВ/ВГС/ВИЧ ПЦР», проводили для каждого маркёра анализ отрица­
тельной плазмы и плазмы, содержащей этот маркёр в концентрации, равной аналитической 
чувствительности (10 МЕ/мл для ДНК ВГВ, 15 МЕ/мл для РНК ВГС, 30 МЕ/мл для РНК 
ВИЧ-1 и 50 МЕ/мл для РНК ВИЧ-2), в которые бьши добавлены другие 3 маркера в концен­
трациях 10^ МЕ/мл для ДНК ВГВ, РНК ВГС и РНК ВИЧ-1 и Ю’ МЕ/мл для РНК ВИЧ-2. Ни в 
одном случае не было выявлено влияния высоких концентраций нецелевых маркеров на пра­
вильность получаемых результатов.
3.3. Диагностическая чувствительность дифференциального выявления ДНК ВГВ: кли­
нические испытания, проведенные на 70 положительных образцах, содержащих ДНК ВГВ, 
показали 100 % чувствительность (интервал 94,9 % - 100 %, с доверительной вероятностью 
95 %).
Диагностическая чувствительность дифференциального выявления РНК ВГС: клиниче­
ские испытания, проведенные на 133 положительных образцах, содержащих РНК ВГС, пока­
зали 100 % чувствительность (интервал 97,3 % - 100 %, с доверительной вероятностью 95 %).


--- стр. 11 ---
/
Анализируемый образец считается положительным (содержащим РНК ВГС), если для 
'ж)го образца значение Ct в ГРС-1 по каналу «НЕХ» меньше или равно 40.
Анализируемый образец считается положительным (содержащим РНК ВИЧ-1), если 
для этого образца значение Ct в ГРС-2 по каналу «ROX» меньше или равно 40.
Анализируемый образец считается положительным (содержащим РНК ВИЧ-2), если 
для этого образца значение Ct в ГРС-2 по каналу «НЕХ» меньше или равно 40.
8.2.4. Если для анализируемого образца определяется Ct больше 40, рекомендуется 
проведение дополнительных исследований (в случае индивидуального образца -  повторное 
исследование данного образца, начиная с этапа выделения НК, или исследование с использо­
ванием другого набора реагентов, в случае минипула - исследование индивидуальных об­
разцов, вошедших в его состав).
8.2.5. В случае контаминации все положительные результаты по данной индивидуаль­
ной постановке ПЦР считаются недостоверными. Требуется предпринять меры по выявле­
нию и ликвидации источника контаминации и повторить анализ всех образцов данной по­
становки, для которых получен положительный результат. Образцы данной постановки, ана­
лиз которых дал отрицательный результат, следует учитьшать, как отрицательные.
9. УСЛОВИЯ ТРАНСПОРТИРОВАНИЯ, ХРАНЕНИЯ И ПРИМЕНЕНИЯ НАБОРА
9.1. Транспортировать изделия следует транспортом всех видов в крытых транспорт­
ных средствах в соответствии с правилами перевозок, действующими на транспорте данного 
вида, при температуре (2-8) °С. Допускается транспортирование при температуре до 26 °С не 
более 10 суток.
9.2. Хранение набора в упаковке предприятия-изготовителя должно осуществляться 
при температуре (2-8) °С в течение всего срока годности в холодильных камерах или холо­
дильниках, обеспечивающих регламентированный температурный режим с ежедневной ре­
гистрацией температуры.
9.3. Срок годности набора - 12 месяцев со дня выпуска. Не допускается применение 
наборов по истечении срока их годности.
9.4. Для получения надёжных результатов необходимо строгое соблюдение инструк­
ции по применению набора.
9.5. Изделие не требует технического обслуживания и не подлежит ремонту.
10. ГАРАНТИЙНЫЕ ОБЯЗАТЕЛЬСТВА
10.1. Производитель гарантирует соответствие выпускаемых изделий требованиям 
нормативной и технической документации.
Безопасность и качество изделия гарантируются в течение всего срока годности.
10.2. Производитель отвечает за недостатки изделия, за исключением дефектов, воз­
никших вследствие нарушения правил пользования, условий транспортирования и хране-
п


--- стр. 12 ---
/
либо действия третьих лиц, либо непреодолимой силы.
10.3. Производитель обязуется за свой счет заменить изделие, технические и функци­
ональные характеристики (потребительские свойства) которого не соответствуют норма­
тивной и технической документации, если указанные недостатки явились следствием скры­
того дефекта материалов или некачественного изготовления изделия производителем.
По вопросам, касающимся качества набора «РеалБест ВГВ/ВГС/ВИЧ ПЦР», следует 
обращаться в АО «Вектор-Бест» по адресу:
630117, г. Новосибирск-117, а/я 492,
тел.: (383) 252-51-62, 227-60-30; тел./факс: (383) 252-51-81, 252-51-77;
E-mail: Dlkobtk(a).vector-best. ru
Консультацию специалиста по работе с набором можно получить по тел.: (383) 252-51-75.
Начальник отделения 
производства ПЦР-наборов 
АО «Вектор-Бест»
Директор по производству 
АО «Вектор-Бест»
Проректор по научной работе 
ФГБОУ ВО НГМУ Минздрава России 
Д . М . Н . ,  профессор
м.п.
Z.<r А.В. Трухина
В.К. Ткачев
Т.И. Поспелова
12


--- стр. 13 ---
/Ьовано, пронумеровано и 
;ро печатью листов,
чет договоров НИР ФГБОУ ВО НГМУ 
ава России
Захарова Л.Н.
2 0 ^  г.
I  § 1
о  - ^ 7
/  сч  <?*//
'^025404^^ '!
'Область