Набор реагентов для определения ДНК вируса простого герпеса 1 и 2 типов методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени (РеалБест ДНК ВПГ-1,2) по ТУ 9398-221-23548172-2009 — инструкция и характеристики

РУ: ФСР 2010/06866 от 01.03.2010 · класс риска 2а

Производитель: АО "Вектор-Бест" (Россия)

Вид изделия: Вирус простого герпеса 1 и 2 тип нуклеиновая кислота ИВД, набор, анализ нуклеиновых кислот

В госконтрактах 44-ФЗ: 141 контракт, медианная цена за единицу 9 810 ₽.

Автоматически отфильтрованный фрагмент инструкции по применению (страницы, где похоже, что есть таблица технических характеристик) — не полный документ. Карточка РУ на портале Росздравнадзора →

Текст инструкции: технические характеристики

--- стр. 1 ---
«УТВЕРЖДАЮ»
Генеральный директор 
АО «Вектор-Бест»
Хусаинов М.Д. 
2020 г.
ИНСТРУКЦИЯ'
по применению набора реаген^ 
для определения ДНК вируса простого герпеса 1  и 2 типов 
методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени
«РеалБест ДНК ВПГ-1,2»
(комплект 1)
1. НАЗНАЧЕНИЕ
Набор реагентов «РеалБест ДНК ВПГ-1,2» предназначен для определения ДНК вируса 
простого герпеса 1  и 2 типов (ВПГ 1, 2), выделенной из клинических проб, методом полиме­
разной цепной реакции (ПЦР) с гибридизационно-флуоресцентной детекцией продуктов 
ПЦР в режиме реального времени.
Комплект 1  предназначен для применения с регистрирующими амплификаторами: «iQ 
iCycler», «iQ5 iCycler» и «СРХ96» (фирма Bio-Rad, США), «ДТ-96» (ООО «НПО ДНК- 
Технология», Россия) или их аналогами.
Набор реагентов может быть применен в клинической практике для анализа клиниче­
ского материала (соскоб эпителиальных клеток, моча, сыворотка, плазма крови).
Вьщеление ДНК вируса простого герпеса 1  и 2 типов из клинических проб проводится 
с помощью наборов «РеалБест ДНК-экспресс», «РеалБест ДНК-экстракция 1», «РеалБест 
экстракция 100» или «РеалБест экстракция 1000».
Комплект 1  рассчитан на проведение анализа 96 образцов, включая контрольные об­
разцы.
2. ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА
2.1. Принцип метода.
Принцип анализа основан на регистрации процесса амплификации выбранного фраг­
мента ДНК, заключающегося в повторяющихся циклах: температурная денатурация, отжиг 
праймеров с комплементарными последовательностями, достройка полинуклеотидных по-
Инструкция составлена сотрудниками АО «Вектор-Бест»: Директором  
по производству Ткачевым В. К. и нач. отделения производства ПЦР наборов Трухиной А. В.


--- стр. 2 ---
следовательностей с этих праймеров Taq-полимеразой.
В основе используемого метода регистрации лежит измерение флуоресценции в каж­
дом цикле ПЦР.
Увеличение количества флуоресценции происходит благодаря использованию специ­
фичного для данного участка ДНК ВПГ 1, 2 гибридизационного ДНК-зонда, который в ходе 
реакции связывается с одной из цепей ДНК, обеспечивая дополнительную специфичность 
метода. ДНК-зонд содержит на 5'-конце флуоресцентный краситель, а на З'-конце - гаситель 
флуоресценции, значительно снижающий ее интенсивность. В ходе полимеразного синтеза 
комплементарной цепи, благодаря 5’-3’-экзонуклеазной активности Taq-полимеразы, зонд 
расщепляется с 5'-конца и происходит разобщение красителя и гасителя, приводящее по ме­
ре накопления продукта реакции к возрастанию сигнала флуоресценции. При этом измеряе­
мая интенсивность флуоресценции пропорциональна количеству образовавшихся специфи­
ческих ампликонов и динамика нарастания флуоресценции определяется исходным количе­
ством ДНК возбудителя инфекции в образце.
Достоверность анализа контролируется по наличию положительного результата в об­
разце ПКО, который подвергается процедуре выделения ДНК вместе с анализируемыми 
биопробами.
Учёт эффективности выделения ДНК из образцов обеспечивается вьщелением ДНК 
ВПГ 1, 2 из клинических проб совместно с предварительно внесённым неконкурентным 
внутренним контрольным образцом (ВКО).
2.2. Состав набора:
- положительный контрольный образец универсальный (ПКО) -  на основе плазмид- 
ной ДНК со встройкой фрагментов ДНК возбудителей инфекций - 1  пробирка (1,0 мл);
- готовая реакционная смесь для ПЦР (ГРС), лиофилизированная -  96 пробирок (12 
стрипов по 8 пробирок).
Набор дополнительно комплектуется:
-оптической плёнкой - 1,5 листа.
Внимание! ПКО должен пройти процедуру выделения ДНК с помощью наборов: «Ре-  
алБест ДНК-экспресс», «РеалБест ДНК-экстракция 1», «РеалБест экстракция 100» или  
«РеалБест экстракция 1000» согласно инструкции к соответствующему набору.
3, АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
3.1. Чувствительность -  определение 100 копий ДНК ВПГ 1, 2 в пробах - 100%.
3.2. Специфичность определения ДНК ВПГ 1, 2 (по стандартной панели предприятия 
отрицательных ДНК-экстрактов) - 100%.


--- стр. 3 ---
4. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
Внимание! Несоблюдение приведённых ниже требований может привести к ис­
кажению результатов ПЦР.
4.1. Потенциальный риск применения набора- класс 26 (Приказ М3 РФ от 06.06.2012
№4н).
4.2. При работе с набором следует соблюдать СП 1.3.2322-08 «Безопасность работы с 
микроорганизмами II1-IV групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных 
болезней».
4.3. Для предотвращения контаминации необходимо территориально разделять этапы 
выделения ДНК и постановки ПЦР согласно МУ 1.3. 1888-04 «Организация работы при ис­
следовании методом ПЦР материала, инфицированного патогенными биологическими аген­
тами III-IV групп патогенности».
4.4. При работе с набором следует надевать одноразовые медицинские перчатки.
4.5. Каждое рабочее место должно быть снабжено собственным набором пипеток пе­
ременного объема, необходимыми вспомогательными материалами и оборудованием. За­
прещается их перемещение между рабочими местами.
4.6. Для проведения реакции амплификации с детекцией продуктов ПЦР в режиме ре­
ального времени необходимо использовать только одноразовые наконечники с фильтром для 
пипеток.
4.7. Не допускается использование одних и тех же наконечников при добавлении раз­
ных образцов.
4.8. После окончания работ для предотвращения контаминации рабочие поверхности 
ламинарных боксов и лабораторных столов следует подвергнуть действию бактерицидных 
УФ ламп в течение 1  часа. Затем обработать регламентированными санитарными правилами 
дезинфицирующими средствами (такими, как: 0,2% раствор ДП-2Т; 1-3% раствор «Диабак»; 
0,5% раствор «Лизафин»; 0,5-1% раствор «Мистраль»).
4.9. Все использованные одноразовые материалы подвергать обработке дезинфици­
рующими средствами с последующей утилизацией.
5. ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ
- амплификатор с флуоресцентной детекцией в режиме реального времени:
«iQ iCycler», «iQ5 iCycIer», «СРХ96» (фирма Bio-Rad, США), «ДТ-96» (ООО «НПО 
ДНК-Технология», Россия) или их аналог;
- ламинарный бокс И-го класса биологической защиты, предназначенный для работы 
с инфекционным материалом (фирма «Ламинарные системы», Россия);


--- стр. 8 ---
Всего прошито, пронумеровано и 
скреплено печатью ^  листов. 
Директор по технологии и качеству 
АО “Вектор-Бест”


--- стр. 9 ---
«УТВЕРЖДАЮ»
Генеральный директор 
АОд^^&ктор-Бест»
^Хусаинов М.Д. 
2020 г.
ИНСТРУКЦИЯ
по применению набора реагентов 
для определения ДНК вируса простого герпеса 1  и 2 типов 
методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени
«РеалБест ДНК ВПГ-1,2»
(комплект 2)
1. НАЗНАЧЕНИЕ
Набор реагентов «РеалБест ДНК ВПГ-1,2» предназначен для определения ДНК вируса 
простого герпеса 1  и 2 типов (ВПГ 1, 2), выделенной из клинических проб, методом полиме­
разной цепной реакции (ПЦР) с гибридизационно-флуоресцентной детекцией продуктов 
ПЦР в режиме реального времени.
Комплект 2 предназначен для применения с регистрирующими амплификаторами как 
роторного типа: «Rotor-Gene 3000», «Rotor-Gene 6000» (фирма Corbett Research, Австралия), 
так и планшетного типа: «iQ iCycIer», «iQ5 iCycler», «СРХ96» (фир.ма Bio-Rad, США), «ДТ-96» 
(ООО «НПО ДНК-Технология», Россия) или их аналогами.
Набор реагентов может быть применен в клинической практике для анализа клиниче­
ского материала (соскоб эпителиальных клеток, моча, сыворотка, плазма крови).
Вьщеление ДНК вируса простого герпеса 1  и 2 типов из клинических проб проводится 
с помощью наборов «РеалБест ДНК-экспресс», «РеалБест ДНК-экстракция 1», «РеалБест 
экстракция 100» или «РеалБест экстракция 1000».
Комплект 2 рассчитан на проведение анализа 100 образцов, включая контрольные 
образцы.
2. ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА
2.1. Принцип метода.
Ииструкг^ш составлена сотрудниками АО «Вектор-Бест»: Директором  
по производству Ткачевым В. К. и нач. отделения производства ПЦР наборов Трухиной Л.В.


--- стр. 10 ---
Принцип анализа основан на регистрации процесса амплификации выбранного фраг­
мента ДНК, заключающегося в повторяющихся циклах: температурная денатурация, отжиг 
праймеров с комплементарными последовательностями, достройка полинуклеотидных по­
следовательностей с этих праймеров Taq-полимеразой.
В основе используемого метода регистрации лежит измерение флуоресценции в каж­
дом цикле ПЦР.
Увеличение количества флуоресценции происходит благодаря использованию специ­
фичного для данного участка ДНК ВПГ 1, 2 гибридизационного ДНК-зонда, который в ходе 
реакции связывается с одной из цепей ДНК, обеспечивая дополнительную специфичность 
метода. ДНК-зонд содержит на 5'-конце флуоресцентный краситель, а на З'-конце - гаситель 
флуоресценции, значительно снижающий ее интенсивность. В ходе полимеразного синтеза 
комплементарной цепи, благодаря 5’-3’-экзонуклеазной активности Taq-полимеразы, зонд 
расщепляется с 5'-конца и происходит разобщение красителя и гасителя, приводящее по ме­
ре накопления прод>тста реакции к возрастанию сигнала флуоресценции. При этом измеряе­
мая интенсивность флуоресценции пропорциональна количеству образовавщихся специфи­
ческих ампликонов и динамика нарастания флуоресценции определяется исходным количе­
ством ДНК возбудителя инфекции в образце.
Достоверность анапиза контролируется по наличию положительного результата в об­
разце ПКО, который подвергается процедуре выделения ДНК вместе с анализируемыми 
биопробами.
Учёт эффективности выделения ДНК из образцов обеспечивается выделением ДНК 
ВПГ 1, 2 из клинических проб совместно с предварительно внесённым неконкурентньгм 
внутренним контрольным образцом (ВКО), что позволяет контролировать эффективность 
выделения ДНК из анализируемых образцов.
2.2. Состав набора:
- положительный контрольный образец универсальный (ПКО) - на основе плазмид- 
ной ДНК со встройкой фрагментов ДНК возбудителей инфекций - 1  пробирка (1,0 мл);
- реакционная смесь для ПЦР (PC), лиофилизированная -  10 пробирок, каждая на 10 
определений;
-  раствор для восстановления (РВ) -  2 флакона (по 2,0 мл).
Внимание! ПКО должен пройти процедуру выделения ДИК с помощью наборов: «Ре-  
алБест ДНК-экспресс», «РеачБест ДНК-экстракция 1». «РешБест экстракция 100» или  
«РеалБест экстракция 1000» согласно инструкции к соответствующему набору.


--- стр. 11 ---
3. АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
3.1. Чувствительность -  определение 100 копий ДНК ВПГ’ 1, 2 в пробах - 100%.
3.2. Специфичность определения ДНК ВПГ 1, 2 (по стандартной панели предприятия 
отрицательных ДНК-экстрактов) -100%.
4. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
Внимание! Несоблюдение приведённых ниже требований может привести к ис­
кажению результатов ПЦР.
4.1. Потенциальный риск применения набора -  класс 26 (Приказ М3 РФ от 06.06.2012
№4н).
4.2. При работе с набором следует соблюдать СП 1.3.2322-08 «Безопасность работы с 
микроорганизмами 11I-IV групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных 
болезней».
4.3. Для предотвращения контаминации необходимо территориально разделять этапы 
вьщеления ДНК и постановки ПЦР согласно МУ 1.3. 1888-04 «Организация работы при ис­
следовании методом ПЦР материала, инфицированного патогенными биологическими аген­
тами III-IV групп патогенности».
4.4. При работе с набором следует надевать одноразовые медицинские перчатки.
4.5. Каждое рабочее место должно быть снабжено собственным набором пипеток пе­
ременного объема, необходимыми вспомогательными материалами и оборудованием. За­
прещается их перемещение между рабочими местами.
4.6. Для проведения реакции амплификации с детекцией продуктов ПЦР в режиме ре­
ального времени необходимо использовать только одноразовые наконечники с фильтром для 
пипеток.
4.7. Не допускается использование одних и тех же наконечников при добавлении раз­
ных образцов.
4.8. После окончания работ для предотвращения контаминации рабочие поверхности 
ламинарных боксов и лабораторных столов следует подвергнуть действию бактерицидных 
УФ ламп в течение 1  часа. Затем обработать регламентированными санитарными правилами 
дезинфицирующими средствами (такими, как: 0,2% раствор ДП-2Т; 1-3% раствор «Диабак»; 
0,5% раствор «Лизафин»; 0,5-1% раствор «Мистраль»).
4.9. Все использованные одноразовые материалы подвергать обработке дезинфици­
рующими средствами с последующей утилизацией.
5. ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ
- амплификатор с флуоресцентной детекцией в режиме реального времени роторного


--- стр. 12 ---
типа: «Rotor-Gene 3000», «Rotor-Gene 6000» (фирма Corbett Research, Австралия) или план­
шетного типа: «iQ iCyder», «iQ5 iCyder», «CFX96» (фирма Bio-Rad, США), «ДТ-96» (ООО 
«НПО ДНК-Технология», Россия) или их аналог;
- ламинарный бокс П-го класса биологической защиты, предназначенный для работы 
с инфекционным материалом (фирма «Ламинарные системы», Россия);
- холодильник бытовой, поддерживающий температуру от 2 до 8 ®С;
- микроцентрифуга типа «Eppendorf Mini Spin» (фирма Eppendorf, Германия);
- пипетки полуавтоматические (дозаторы механические) одноканальные с перемен­
ным объёмом, со сменными наконечниками (фирма Ленпипет, Россия; фирма Biohit, Фин­
ляндия);
- перчатки медицинские одноразовые нестерильные неопудренные латексные или 
неопреновые (перчатки «NeoTouch», фирма Ansell Healthcare, Германия);
- одноразовые наконечники для пипеток с защитным фильтром /аэрозольным барье­
ром/ (фирма FinXip, Финляндия);
-  штативы для микропробирок вместимостью 1,5 мл, 2,0 мл и 0,2 мл (фирма Хеликон, 
Россия);
- пробирки для ПЦР вместимостью 0,2 мл (фирма Axygen, США) или аналогичные;
- контейнер для сброса отходов (например, «Контейнер для сброса острого инстру­
ментария - ЕК-01», фирма КМ-ПРОЕКТ, или аналогичный).
6. АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ
Для анализа используются пробы выделенной ДНК, полученные из клинического ма­
териала с помощью одного из наборов: «РеалБест ДНК-экспресс», «РеалБест ДНК- 
экстракция 1», «РеалБест экстракция 100» или «РеалБест экстракция 1000», согласно ин­
струкции по применению соответствующего набора реагентов.
Каждая группа образцов, проходящая через процедуру выделения ДНК, должна содер­
жать положительный контрольный образец (ПКО) и отрицательный контрольный образец 
(ОКО), который является компонентом набора для выделения ДНК.
Выделенную ДНК храпишь при температуре от 2 до 8 °С в течение 2 суток.
Положительный контрольный образец (ПКО) после вскрытия флакона хранить при  
температуре от 2 до 8 °С в течение 1 мес.
1. ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА
7.1. Подготовка компонентов набора
Перед началом работы извлечь набор из холодильника, вскрыть упаковку, отобрать 
необходимое количество (по числу подготовленных проб, включая контроли: 1  ОКО и 1