Набор реагентов для иммуноферментного определения концентрации аутоиммунных антител класса G к двухцепочечной ДНК в сыворотке крови (Beктo-dsДHK-IgG) по ТУ 9398-175-23548172-2008 — инструкция и характеристики

РУ: ФСР 2009/04099 от 10.02.2009 · класс риска 2а

Производитель: АО "Вектор-Бест" (Россия)

Вид изделия: Двухспиральная ДНК антитела ИВД, набор, иммуноферментный анализ (ИФА)

В госконтрактах 44-ФЗ: 181 контракт, медианная цена за единицу 9 189 ₽.

Автоматически отфильтрованный фрагмент инструкции по применению (страницы, где похоже, что есть таблица технических характеристик) — не полный документ. Карточка РУ на портале Росздравнадзора →

Текст инструкции: технические характеристики

--- стр. 1 ---
СПРАВКА ОБ ИЗДЕЛИИ МЕДИЦИНСКОГО НАЗНАЧЕНИЯ  
набор реагентов для иммуноферментного определения  
концентрации аутоиммунных антител класса G  
к двухцепочечной ДНК в сыворотке крови  
«B eктo-dsД H K -IgG »
Представляемый с целью регистрации набор реагентов «Beктo-dsДHK-IgG» для им­
муноферментного определения концентрации аутоиммунных антител класса G к двухцепо­
чечной ДНК в сыворотке крови разработан в ЗАО «Вектор-Бест».
Область применения -  клиническая медицина, медицинская биохимия.
Метод определения основан на твердофазном иммуноферментном анализе.
На первой стадии анализа исследуемые образцы, калибровочные пробы и контрольную сы­
воротку инкубируют в лунках стрипов с иммобилизованной ёзДНК. Несвязавшийся материал 
удаляют отмывкой. Связавшиеся IgG выявляют при инкубации с конъюгатом антител к IgG 
человека с пероксидазой хрена. После второй отмывки количество связавшегося конъюгата 
определяют цветной реакцией с использованием субстрата пероксидазы -  перекиси водорода 
и хромогена -  тетраметилбензидина. Во время инкубации с раствором тетраметилбензидина 
происходит окрашивание раствора в лунках. Степень окраски прямо пропорциональна кон­
центрации IgG к с1зДНК в анализируемых пробах. После измерения оптической плотности 
раствора в лунках на основании калибровочного графика рассчитывается концентрация IgG 
к бзДНК в анализируемых образцах.
По органолептическим и физико-химическим показателям набор должег! соот- 
ветствовать характеристикам и нормам, указанным в таблице.
Таблица
Наименование показателя Характеристика  
и норма
1 2
1 Внешний вид
1.1 Планшет разборный Стрипы из прозрачного пластика в рамке из 
светлого полиэтилена
1.2 Калибровочные пробы Прозрачные жидкости желтоватого цвета
1.3 Контрольная сыворотка Прозрачная жидкость светло-желтого цвета, до­
пускается наличие опалесценции
1.4 Конъюгат, концентрат Прозрачная жидкость синего цвета
1.5 Раствор для предварительного разве­
дения сывороток
Прозрачная жидкость малинового цвета, допус­
кается наличие опалесценции
1.6 Раствор для разведения сывороток Прозрачная жидкость светло-желтого цвета, до-


--- стр. 2 ---
Наименование показателя Характеристика  
и норма
пускается наличие опалесценции
1.7 Раствор для разведения конъюгата Прозрачная бесцветная жидкость, допускается 
наличие опалесценции
1.8 25-кратный концентрат фосфатно­
солевого буферного раствора с тви- 
ном
Прозрачная бесцветная жидкость; допускается 
наличие небольшого осадка солей, исчезающего 
при нагревании
1.9 Субстратный буферный раствор Прозрачная бесцветная жидкость
1.10 Тетраметилбензидин, концентрат Прозрачная бесцветная жидкость
1.11 Стоп-реагент Прозрачная бесцветная жидкость
1.12 Пленка для заклеивания планшета Прозрачная бесцветная липкая пленка на бу­
мажной основе
1.13 Трафарет для построения калибро­
вочного графика
Бумажный лист формата А4 с нанесенной сет­
кой координат
1.14 Ванночка для реагента Ванночка из светлого полистирола
1.15 Наконечники для пипетки Наконечники из прозрачного пластика
2 Технические характеристики
2.1 Оптическая плотность калибровоч­
ной пробы, содержащей 200 МЕ/мл 
IgG к ёзДНК, ед. опт. пл., не менее
2,0
2.2 Соотношение оптических плот­
ностей калибровочных проб, содер­
жащих 0; 12,5; 25; 50; 100 и 
200 МЕ/мл IgG к с1зДНК
Во < Bi2,5<B25 < В 50 < В 100 <В 200
2.3 (Bi 2,5-  Во)/(В 2оо -  Во)х100, %, в пре­
делах
2,8-4 ,8
2.4 (Вюо- Во)/(В 2оо- Во)х 100 , %, в преде­
лах
45-65
2.5 Чувствительность, МЕ/мл, не более 2
3 Показатели правильности определения
3.1 Концентрация IgG к с1зДНК в кон­
трольной сыворотке, МЕ/мл
В пределах, указанных в паспорте и на этикетке 
флакона
3.2 Коэффициент вариации (К.В.), %, не 
более
8
3.3 Тест на «открытие», %, в пределах 90-110
3.4 Тест на «линейность», в диапазоне 
концентраций 12,5-200 МЕ/мл, %, в 
пределах
90-110
3.5 Интерсепт, МЕ/мл, в пределах 
20%
50%
80%
30-60
80-120
132-192
Примечания:
1. Во, Bi 2,5, В 25, В 50, Bioo, В 200 -  оптическая плотность раствора после остановки фер­
ментативной реакции в лунках, содержащих калибровочные пробы 0; 12,5; 25; 50; 100 и 
200 МЕ/мл IgG к dsflHK, соответственно, ед. опт. плотн.


--- стр. 3 ---
2. Чувствительность -  минимально определяемая концентрация IgG к ёзДНК, рассчи­
танная на основании среднего арифметического значения оптической плотности калибро­
вочной пробы Во плюс 2а (о -  среднее квадратичное отклонение от среднего арифметическо­
го значения Во), МЕ/мл.
3. К.В. -  коэффициент вариации результатов определений концентрации IgG к с15ДНК 
в лунках, содержащих контрольную сыворотку, %.
4. Тест на «открытие» -  соответствие измеренной концентрации IgG к ёзДНК пред­
писанной в пробе, полученной путём смешивания равных объёмов контрольной сыворотки и 
калибровочной пробы с концентрацией IgG к бзДНК 25 МЕ/мл, %.
5. Тест на «линейность» -  отклонение от расчётной величины концентрации IgG к 
бзДНК при разведении калибровочных проб, содержащих 200, 100, 50 и 25 МЕ/мл, в 2 раза, 
%.
6. Интерсепт -  значения концентраций IgG к ёзДНК (МЕ/мл), при которых соотно­
шение (В/ -  Во)/(В 2оо -  Во)х100 соответствует 20%, 50% и 80%.
Антитела против ДНК могут быть подразделены на две группы: 1) антитела, которые 
связываются только с нативной двухцепочечной ДНК (бзДНК) и 2) антитела, «узнающие» 
также одноцепочечную ДНК (ззДНК).
Большинство антител к двухцепочечной ДНК связываются с дезоксирибозофосфат- 
ными составляющими ДНК, тогда как антитела к одноцепочечной ДНК в основном связы­
ваются с основаниями, составляющими ДНК, которые в нативной ДНК «замаскированы» в 
спиральной структуре.
Аутоиммунные заболевания характеризуются присутствием антител против собст­
венных антигенных структур -  так называемых аутоиммунных антител. Наличие аутоанти­
тел к нативной ДНК типично для клинической картины при заболевании системной красной 
волчанкой; они проявляются также при различных заболеваниях ревматоидной природы.
Антитела к бзДНК обнаруживаются во время активной фазы системной красной вол­
чанки, причём концентрация их в крови положительно коррелирует с тяжестью заболевания. 
Определение концентрации аутоантител имеет важное значение также для оценки эффектив­
ности терапии у больных системной красной волчанкой.
Генеральный двде
ЗАО «BeKTop-bectA J < с/1 М.Д. Хусаинов
3


--- стр. 4 ---
УТВЕРЖДЕНА ^^^^^^^<^^ВЕРЖДАЮ»
Приказом Росздравнадзора ^ ^ ~ ^^^дакальный директор
опп кг Цот __________200__г. № ______ 1/^ [7^£^^А^145Дектор-Ьест»
- М.Д. Хусаинов
/г^  2008 г.
м.п.
ИНСТРУКЦИЯ
по применению набора реагентов для иммуноферментного определения 
концентрации аутоиммунных антител класса G 
к двухцепочечной ДНК в сыворотке крови 
(Векто-(18ДНК-18С)
1. НАЗНАЧЕНИЕ
1.1. Набор реагентов Beктo-dsДHK-IgG предназначен для определения концентрации 
аутоиммунных антител класса G (IgG) к двухцепочечной ДНК (dsДHK) в сыворотке крови 
человека методом твердофазного иммуноферментного анализа.
1.2. Антитела против ДНК могут быть подразделены на две группы: 1) антитела, ко­
торые связываются только с нативной двухцегючечной ДНК (ёзДНК) и 2) антитела, «узнаю­
щие» также одноцепочечную ДНК (ззДНК).
Большинство антител к двухцепочечной ДНК связываются с дезоксирибозофосфат- 
ными составляющими ДНК, тогда как антитела к одноцепочечной ДНК в основном связы­
ваются с основаниями, составляющими ДНК, которые в нативной ДНК «замаскированы» в 
спиральной структуре.
1.3. Аутоиммунные заболевания характеризуются присутствием антител против соб­
ственных антигенных структур -  так называемых аутоиммунных антител. Наличие аутоанти­
тел к нативной ДНК типично для клинической картины при заболевании системной красной 
волчанкой; они проявляются также при различных заболеваниях ревматоидной природы.
Антитела к бзДНК обнаруживаются во время активной фазы системной красной вол­
чанки, причём концентрация их в крови положительно коррелирует с тяжестью заболевания. 
Определение концентрации аутоантител имеет важное значение также для оценки эффек­
тивности терапии у больных системной красной волчанкой.
Инструкция составлена сотрудниками ЗАО «Вектор-Бест»: директором НИИ СД  
МЛ. Гришаевым, старшим научным сотрудником НИИ СД О.Н. Гришаевой.


--- стр. 5 ---
1.4. Набор рассчитан на проведение анализа в дубликатах 41 неизвестного образца, 
6 калибровочных проб и 1  пробы контрольной сыворотки (всего 96 определений при исполь­
зовании всех стрипов планшета).
2. ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА
2.1. Принцип метода
Метод определения основан на твердофазном иммуноферментном анализе.
На первой стадии анализа исследуемые образцы, калибровочные пробы и контрольную сы­
воротку инкубируют в лунках стрипов с иммобилизованной бзДНК. Несвязавшийся материал 
удаляют отмывкой. Связавшиеся IgG выявляют при инкубации с конъюгатом антител к IgG 
человека с пероксидазой хрена. После второй отмывки количество связавшегося конъюгата 
определяют цветной реакцией с использованием субстрата пероксидазы -  перекиси водорода 
и хромогена -  тетраметилбензидина. Во время инкубации с раствором тетраметилбензидина 
происходит окрашивание раствора в лунках. Степень окраски прямо пропорциональна кон­
центрации IgG к бзДНК в анализируемых пробах. После измерения оптической плотности 
раствора в лунках на основании калибровочного графика рассчитывается концентрация IgG 
к бзДНК в анализируемых образцах.
2.2. Состав набора
В состав набора входят:
-  планшет разборный (12 восьмилуночных стрипов) с иммобилизованной на внут­
ренней поверхности лунок двухцепочечной ДНК (бзДНК), готовый для использования -  
1  шт.;
-  калибровочные пробы на основе сыворотки крови человека, аттестованные относи­
тельно Международного стандарта ВОЗ антител класса IgG к бзДНК, Wo/80, содержащие 
известные количества IgG к бяДНК -  0; 12,5; 25; 50; 100; 200 МЕ/мл; концентрации IgG к 
бяДПК в калибровочных пробах могут несколько отличаться от указанных величин, точные 
величины указаны на этикетках флаконов, готовые для использования -  6 флаконов (по 
1,5 мл);
-  контрольная сыворотка на основе сыворотки крови человека с известным содержа­
нием IgG к бзДНК, готовая для использования -  1  флакон (1,5 мл);
-  конъюгат моноклональных антител к IgG человека с пероксидазой хрена, концен­
трат -  1  флакон (1,5 мл);
-  раствор для предварительного разведения сывороток -  1  флакон (10 мл);
-  раствор для разведения сывороток -  1  флакон (12 мл);


--- стр. 6 ---
-  раствор для разведения конъюгата -  1  флакон (13 мл);
-  25-кратный концентрат фосфатно-солевого буферного раствора с твином -  2 фла­
кона (по 28 мл);
-  субстратный буферный раствор -  1  флакон (13 мл);
-  тетраметилбензидин, концентрат -  1  флакон (1,0 мл);
-  стоп-реагент (0,5 М серная кислота), готовый для использования -  1  флакон 
(12 мл);
-  пленка для заклеивания планшета -  2 шт;
-  трафарет для построения калибровочного графика -  1  шт;
-  ванночка для реагента -  2 шт;
-  наконечники для пипеток на 4 -  200 мкл -  16 шт.
По согласованию с потребителем дополнительно поставляется:
-  планшет для предварительного разведения исследуемых образцов -  1  шт.
3. АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
3.1. Специфичность. Используемая в наборе двухцепочечная ДНК (ёзДНК) обеспечи­
вает специфическое взаимодействие с аутоантителами к с1зДНК.
3.2. Воспроизводимость. Коэффициент вариации результатов определения содержа­
ния IgG к с1зДНК в одном и том же образце сыворотки крови с использованием набора Век- 
тo-dsДHK-IgG не превышает 8%.
3.3. Линейность. Зависимость концентрации IgG к ёзДНК в образцах сыворотки крови 
при разведении их раствором для разведения сывороток имеет линейный характер в диапа­
зоне концентраций 12,5-200 МЕ/мл и составляет 90-110%.
3.4. Точность. Данный аналитический параметр проверяется тестом на «открытие» -  
соответствие измеренной концентрации IgG к ёзДНК предписанной в пробе, полученной пу­
тём смешивания равных объёмов контрольной сыворотки и калибровочной пробы 25 МЕ/мл. 
Процент «открытия» составляет 90-110%.
3.5. Чувствительность. Минимальная достоверно определяемая набором концентра­
ция IgG к бзДНК не превышает 2 МЕ/мл.
3.6. Клиническая проверка. Концентрацию аутоиммунных антител класса G к двухце­
почечной ДНК измеряли в сыворотке крови, взятой с 9 до 11 ч, у 120 здоровых доноров Юго-


--- стр. 7 ---
Восточного региона Западной Сибири в возрасте 20-50 лет. Концентрация IgG к бзДНК у 
здоровых доноров не превышает 20 Ед/мл.
3.7. Рекомендуется в каждой лаборатории при использовании набора уточнить значе­
ния концентрации IgG к ёзДНК, соответствующие нормальным у обследуемого контингента 
людей.
4. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
4.1. Потенциальный риск применения набора -  класс 2а.
4.2. Все компоненты набора, за исключением стоп-реагента (раствор серной кислоты), 
в используемых концентрациях являются нетоксичными.
Раствор серной кислоты обладает раздражающим действием. Избегать разбрызгива­
ния и попадания на кожу и слизистые. В случае попадания раствора серной кислоты на кожу 
и слизистые необходимо промыть поражённый участок большим количеством проточной 
воды.
4.3. При работе с набором следует соблюдать «Правила устройства, техники безопас­
ности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при 
работе в лабораториях (отделениях, отделах) санитарно-эпидемиологических учреждений 
системы Министерства здравоохранения СССР» (Москва, 1981 г.).
4.4. При работе с набором следует надевать одноразовые резиновые или пластиковые 
перчатки, так как образцы сыворотки крови человека следует рассматривать как потенциаль­
но инфицированные, способные длительное время сохранять и передавать ВИЧ, бирус гепа­
тита или любой другой возбудитель вирусных инфекций.
4.5. Химическая посуда и оборудование, которые используются в работе с набором, 
должны быть соответствующим образом промаркированы и храниться отдельно.
4.6. Запрещается приём пищи, использование косметических средств и курение в по­
мещениях, предназначенных для работы с наборами.
5, ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ,  
НЕОБХОДИМЫЕ ПРИ РАБОТЕ С НАБОРОМ
-  Спектрофотометр вертикального сканирования, позволяющий проводить измере­
ния оптической плотности растворов в лунках стрипов при длине волны 450 нм и/или в 
двухволновом режиме при основной длине волны 450 нм и длине волны сравнения в диа­
пазоне 620 нм - 650 нм;