Комплект реагентов для экстракции РНК/ДНК из клинического материала "АмплиПрайм РИБО-сорб" по ТУ 9398-006-09286667-2012 в составе (см. приложение на 1 листе): — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
«УТВЕРЖДАЮ» 2d' Генеральный директор OбJД^5fjw'0^^lfpaничeннoй 9Тветс;5ве}^>#ос^рьк) «НекстБио» _Е.А. Агафонова ... 2012 г. Vv:;-../: . I i ИНСТРУКЦИЯ по применению комплекта реагентов для экстракции РНК/ДНК из клинического материала «АмплиПрайм РИБО-сорб» $ IVD ОГЛАВЛЕНИЕ НАЗНАЧЕНИЕ....................................................................................................................... ПРИНЦИП МЕТОДА............................................................................................................ ФОРМЫ ВЫПУСКА КОМПЛЕКТА РЕАГЕНТОВ............................................................ МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ........................................................................................ ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ МАТЕРИАЛЫ И ОБОРУДОВАНИЕ........................................... ВЗЯТИЕ, ТРАНСПОРТИРОВАНИЕ И ХРАНЕНИЕ ИССЛЕДУЕМОГО МАТЕРИАЛА . 5 СОСТАВ...................................................................................................................................5 ЭКСТРАКЦИЯ РНК/ДНК из ИССЛЕДУЕМЫХ ОБРАЗЦОВ...................... СРОК ГОДНОСТИ. УСЛОВИЯ ТРАНСПОРТИРОВАНИЯ и ХРАНЕНИЯ СИМВОЛЫ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ В ПЕЧАТНОЙ ПРОДУКЦИИ................... м НАЗНАЧЕНИЕ Комплект реагентов «АмплиПрайм РИБО-сорб» предназначен для экстракции (выделения) РНК/ДНК из клинического материала. ПРИНЦИП МЕТОДА Принцип действия основан на лизисе клеток и денатурации клеточных белков с помощью лизирующего раствора, содержащего хаотропный агент (гуанидин 1 тиоцианат), с последующей сорбцией нуклеиновых кислот на силике и дальнейшей экстракцией их в раствор. ФОРМЫ ВЫПУСКА КОМПЛЕКТА РЕАГЕНТОВ Комплект реагентов выпускается в 2 формах комплектации: Форма 1 включает комплект реагентов «АмплиПрайм РИБО-сорб» вариант 50. Форма 2 включает комплект реагентов «АмплиПрайм РИБО-сорб» вариант 100. Формы комплектации 1 и 2 предназначены для экстракции РНК/ДНК из клинического материала. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ Работа должна проводиться в лаборатории, выполняющей молекулярно биологические (ПЦР) исследования клинического материала на наличие возбудителей инфекционных болезней, с соблюдением санитарно-эпидемических правил СП 1.3.2322-08 «Безопасность работы с микроорганизмами III-IV групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней», СанПиН 2.1.7.2790-10 «Санитарно-эпидемиологические требования к обращению с медицинскими отходами» и методических указаний МУ 1.3.2569-09 «Организация работы лабораторий, использующих методы амплификации нуклеиновых кислот при работе с материалом, содержащим микроорганизмы I—IV групп патогенности». При работе всегда следует выполнять следующие требования: - Следует рассматривать исследуемые образцы как инфекционно-опасные, организовывать работу и хранение в соответствии с СП 1.3.2322-08 «Безопасность работы с микроорганизмами III—IV групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней». - Убирать и дезинфицировать разлитые образцы или реактивы, используя дезинфицирующие средства в соответствии с СП 1.3.2322-08 «Безопасность работы с микроорганизмами III-IV групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней». - Лабораторный процесс должен быть однонаправленным. Анализ проводится в 3 отдельных помещениях (зонах). Работу следует начинать в Зоне Выделения, продолжать в Зоне Амплификации и Детекции. Не возвращать образцы, оборудование и реактивы в зону, в которой была проведена предыдущая стадия процесса. - Неиспользованные реактивы, реактивы с истекшим сроком годности, а также использованные реактивы следует удалять в соответствии с требованиями СанПиН 2.1.7.2790-10 «Санитарно-эпидемиологические требования к обращению с медицинскими отходами». - Использовать и менять при каждой операции одноразовые наконечники для автоматических дозаторов с фильтром. Одноразовую пластиковую посуду (пробирки, наконечники) необходимо сбрасывать в специальный контейнер, содержащий дезинфицирующее средство, которое может быть использовано для обеззараживания медицинских отходов. - Поверхности столов, а также помещения, в которых проводится постановка ПЦР, до начала и после завершения работ необходимо подвергать ультрафиолетовому облучению в течение 30 мин. - Применять набор строго по назначению, согласно данной инструкции. - Допускать к работе с набором только специально обученный персонал. - Не использовать набор по истечении срока годности. - Использовать одноразовые перчатки, лабораторные халаты, защищать глаза во время работы с образцами и реактивами. Тщательно вымыть руки по окончании работы. - Избегать контакта с кожей, глазами и слизистой оболочкой. При контакте немедленно промыть пораженное место водой и обратиться за медицинской помощью. - Листы безопасности материалов (MSDS - material safety data sheet) доступны по запросу. ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ МАТЕРИАЛЫ И ОБОРУДОВАНИЕ 1. Ламинарный бокс (например, «БАВп-01-«Ламинар-С»-1,2», «Ламинарные системы», Россия, класс биологической безопасности II тип А). 2. Термостат для пробирок типа «Эппендорф» от 25 до 100 °С (например, «TEPMOf 24-15», «Биоком», Россия). 3. Вакуумный отсасыватель медицинский с колбой-ловушкой для удаления надосадочной жидкости (например, «ОМ-1», г. Ульяновск, Россия). 4. Микроцентрифуга для пробирок типа «Эппендорф» до 16 тыс об/мин (например, MiniSpin, Eppendorf, Германия). 4 'Т 5. Вортекс (например, «ТЭТА-2», «Биоком», Россия). 1Я, 6. Набор электронных или механических дозаторов переменного объема (например, 1Ы, «Ленпипет», Россия). ИЯ 7. Одноразовые полипропиленовые завинчивающиеся или плотно закрывающиеся пробирки на 1,5 мл (например, Ахудеп, США). ке 8. Штативы для пробирок на 1,5 мл (например, «ИнтерЛабСервис», Россия) и 1И наконечников (например, Ахудеп, США). к 9. Одноразовые наконечники для дозаторов переменного объема с фильтром до 200 мкл и до 1000 мкл (например, Ахудеп, США). 1Я 10. Одноразовые наконечники для дозаторов переменного объема до 200 мкл 1У (например, Ахудеп, США). 5. 11. Холодильник от 2 до 8 -с с морозильной камерой не выше минус 16 “С. о 12. Отдельный халат, шапочки, обувь и одноразовые перчатки по МУ 1.3.2569-09. а 13. Емкость ДЛЯ сброса наконечников. ь ВЗЯТИЕ, ТРАНСПОРТИРОВАНИЕ И ХРАНЕНИЕ ИССЛЕДУЕМОГО МАТЕРИАЛА Перед началом работы следует ознакомиться с методическими рекомендациями «Взятие, транолортировка, хранение клинического материала для ПЦР- диагностики», разработанными ФГУН ЦНИИЭ Роспотребнадзора, Москва, 2008 г. СОСТАВ комплект реагентов «АмплиПрайм РИБО-сорб» вариант 50 или вариант 100 - комплект реагентов для экстракции РНК/ДНК из клинического материала - включает: ---------^ ---------- О апняи т iOO Вариант 50 Объем, Реактив Описание Объем, Кол-во Кол-во мл мл Прозрачная 22,5 1 флакон 45 1 флакон Лизирующий раствор бесцветная жидкость Прозрачная 20 1 флакон 40 1 флакон Раствор для отмывки 1 бесцветная жидкость* Прозрачная 50 1 флакон 100 1 флакон Раствор для отмывки 3 бесцветная жидкость --------— --------1 i $ _ _ ----------------------------------------- Прозрачная 20 1 флакон 40 1 флакон Раствор для отмывки 4 бесцветная жидкость Суспензия белого 1,25 1 пробирка 1.25 2 пробирки Сорбент цвета Прозрачная 0,5 5 пробирок 0,5 10 пробирок РНК-буфер бесцветная жидкость ----------------------------------------------- при хранении лизирующе7о раствора и раствора для отмывки 1 при температуре от 2 до 8 возможно образование осадка в виде кристаллов. ^ Комплект реагентов вариант 50 рассчитан на экстракцию РНК/ДНК из 50 проб, включая контроли. Комплект реагентов вариант 100 рассчитан на экстракцию РНК/ДНК из 100 проб, включая контроли. ЭКСТРАКЦИЯ РНК/ДНК из ИССЛЕДУЕМЫХ ОБРАЗЦОВ (проводится в ЗОНЕ 1 - помещении для обработки проб). Объем пробы, необходимый для выделения РНК/ДНК, - 0,1 мл. ВНИМАНИЕ! Для работы с РНК необходимо использовать только одноразовые пластиковые расходные материалы, имеющие специальную маркировку RNase-free, DNase-free. Порядок работы 1. Лизирующий раствор и раствор для отмывки 1 (если они хранились при температуре от 2 до 8 °С) прогреть при температуре от 60 до 65 °С до полного растворения кристаллов. ( 2. Отобрать необходимое количество одноразовых пробирок (включая отрицательный и положительный контроли экстракции). Внести в каждую пробирку 5 мкл ВКО (если он предусмотрен для анализа данного возбудителя инфекции). Затем по 450 мкл лизирующего раствора. Промаркировать пробирки. 3. В пробирки с лизирующим раствором и ВКО (если используется) внести по 100 мкл пробы, используя наконечники с фильтром. В пробирку отрицательного контроля (ОК) экстракции внести 100 мкл ОКО. В пробирку положительного контроля (ПК) экстракции внести 90 мкл ОКО и 10 мкл ПКО (если он предусмотрен для анализа). 4. Плотно закрытые пробы тщательно перемешать на вортексе и процентрифугировать в течение 5 с при 5 тыс об/мин на микроцентрифуге для удаления капель со внутренней поверхности крышки пробирки. 5. Тщательно ресуспендировать сорбент на вортексе. В каждую пробирку отдельным наконечником добавить по 25 мкл ресуспендированного сорбента. Перемешать на вортексе, поставить в штатив на 1 мин, еще раз перемешать оставить на 5 мин. 6. Процентрифугировать пробирки для осаждения сорбента при 10 тыс об/мин в течение 30 с на микроцентрифуге. Удалить надосадочную жидкость, используя вакуумный отсасыватель и отдельный наконечник для каждой пробы. 7. Добавить в пробирки по 400 мкл раствора для отмывки 1. Перемешать на вортексе до полного ресуспендирования сорбента, процентрифугировать 30 с при 4 10 тыс об/мин на микроцентрифуге. Удалить надосадочную жидкость, используя вакуумный отсасыватель и отдельный наконечник для каждой пробы. 8. Добавить в пробирки по 500 мкл раствора для отмывки 3. Тщательно ресуспендировать сорбент на вортексе. Процентрифугировать 30 с при 10 тыс об/мин на микроцентрифуге. Удалить надосадочную жидкость, используя вакуумный отсасыватель и отдельный наконечник для каждой пробы. 9. Повторить отмывку раствором для отмывки 3, следуя п. 8. Ю.Добавить в пробирки по 400 мкл раствора для отмывки 4. Тщательно ресуспендировать сорбент на вортексе, процентрифугировать 30 с при 10 тыс об/мин на микроцентрифуге. Полностью удалить надосадочную жидкость из каждой пробирки отдельным наконечником, используя вакуумный отсасыватель. 11. Поместить пробирки в термостат при температуре 60 °С на 12-15 мин для подсушивания сорбента. При этом крышки пробирок должны быть открыты. < 12. В пробирки добавить по 50 мкл РНК-буфера, используя наконечник с фильтром, свободный от РНКаз. Перемешать на вортексе. Поместить в термостат при температуре 60 °С на 2-3 мин. Перемешать на вортексе и процентрифугировать пробирки на максимальных оборотах микроцентрифуги (12-13 тыс об/мин) в течение 1 мин. Надосадочная жидкость содержит очищенные РНК и ДНК. Пробы готовы к постановке реакции обратной транскрипции и ПЦР-амплификации. Реакцию обратной транскрипции следует проводить сразу после получения РНК/ДНК-пробы. Отбирать раствор РНК/ДНК для реакции нужно очень осторожно, не захватывая сорбент. Если сорбент взмутился, необходимо осадить его на центрифуге. Очищенная РНК может храниться до 4 ч при температуре от 2 до 8 °С. Для длительного хранения препарата, необходимо, не захватывая сорбент, перенести надосадочную жидкость в стерильную пробирку и хранить при температуре не выше минус 68 X в течение года.