| О Х И М И Ч Е С К | И Е Р Е |
| ИНСТРУКЦИИ п о | ПРИМЕНЕ |
| SPINREACr, S.A. | |
| Ctra.Santa i ;oloma, 7 | |
| E-17176 SANT ESTEVE DE BAS (G!) S | PAIN |
| Tel. +34 97: 69 08 00 Fax +34 972 69 | 00 99. |
| e-mail; spin, eact@spinreact.com | www.spinreact.ru |
CgmNREA^
“S P I N R E A C T ” И С П А Н И Я
Б И А К Т И В Ы
НИЮ
Каждая лаборатория должна определять собственную систему ведения контроля качества и действий
для коррекции при выходе онтроля за приемлемые границы.
РЕФЕРЕНТНЫЕ ВЕЛИЧИНЫ
Сыворотка; 35 - 50 г/л (3,5 - 5,0 г/дл)
Эти значения даны для ориентировочных целей, каждая лаборатория должна определять собствен
ный референсный диапазон
ХАРАКТЕРИСТИКИ ТЕСТА
Диапазон измерения: от у/ овня определения в 0,4 г/л (0,04 г/дл) до предела линейности в 60 г/л (6
г/дл). Если получаемые ре ультаты выходят за предел линейности, разведите пробы в два раза физ
раствором (NaCI 9 г/л) и y^^иoжыe результат на 2.
Воспроизводимость:
Внутри сериитестов(п=20) Между сериями тестов (п=20)
среднее (мкмоль/л) 3,38 5,80 3,30 5,67
SD 0,02 0,03 0,26 0,04
cv% 0,52 0,49 0,78 0,69
= 0,126 A.
Правильность: результаты, полученные с помощью этого теста (у) при сравнении с другими, полу
ченными с использование^! коммерческих реагентов (х) с похожими характеристиками, не давали
систематических различий
Результаты обследования >0 пациентов были следующими:
Коэффициент корреляции (г) 0,990. Уравнение регрессии; у=0,98х + 0,09.
Результаты характеристик геста зависят от используемого анализатора.
ИНТЕРФЕРЕНЦИИ
Не наблюдается интерференции с билирубином до 110 мг/л, гемоглобином до 1 гУл и липемическими
сыворотками до 10 г/л
Список лекарств и других веществ, влияющих на определение альбумина, представлен в работах
Young и др.®' .
ПРИМЕЧАНИЯ
1 Калибровка с водным :тандартом может быть причиной систематической ошибки в автоматиче
ских процедурах. В эти < случаях рекомендуется использовать калибратор на основе сыворотки.
2. Используйте чистые о; норазовые наконечники для дозирующих пипеток.
3. У SPINREACT есть а/^аптации инструкций для многих автоматических анализаторов. Инст
рукции для них доступны по запросу.
ЛИТЕРАТУРА:
1, Gendler S. Uric acid. Kaplan et al. Clin Chem The C.V. Mosby Co. St Louis. Toronto, Princeton 1984; 1268-1273 and 425.
2, Rodkey FL Clin Chem 1965 И: 478-487.
3, Webster D. Clin Chem. 1974 \cta 53: 109-115.
4 Dounnas BT Clin Chem. 1971 Acta 31: 87-96.
5. Young DS. Effects of drugs oi Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press, 1995.
6. Young DS. Effects of disease m Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001.
7. Burtis A et al. Tietz Textbook f Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999.
8. Tietz N W et al. Clinical Guidt to Laboratory Tests, 3rd ed AACC 1995.
Оптический путь: 1см
Метод: кинетика по фиксир. времени по многоточечной калибровке,
время задержки Зс, время реакции - 120с.
Установите прибор на i (Оль по дистиллированной воде.
Отдозируйте в кюветы
Метод Микрометод ChemWell
Реагент R1 (мкл) 950 мкл 475 мкл 190 мкл
Калибраторы (мкл) 10 мкл 5 мкл 2 мкл
Проба (мкл) 10 мкл 5 мкл 2 мкл
4. Перемешайте, измеры з абсорбцию (АО при 340 нм после добавления пробы.
5. Затем немедленно пипi ^тируйте в кюветы:_________
Реагент R2 (мкл) 50 мкл 25 мкл 10 мкл
6. Перемешайте и точно ' ерез 2 минуты после добавления R2 измерьте абсорбцию (Аг).
Реагенты могут быть использованы с различными автоматическими биохимическими анализаторами
или в ручных процедурах из фотометрах с подходящей длиной волны. У Spinreact есть адаптации к
различным автоматическим анализаторам, которые доступны по запросу.
РАСЧЕТЫ
Рассчитайте изменение аосорбции (ДА=А1-А2) для каждой точки калибровочной кривой (каждого
стандарта) и постройте кэпибровочную кривую зависимости концентрации каждого стандарта от его
изменения абсорбции. Ко1'центрация а2-макроглобулина в пробе рассчитывается интерполяцией ее
ДА к калибровочной криво1>
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
Для контроля характерис ик ручных и автоматических процедур рекомендуется использовать кон
трольную сыворотку Spinr- act PROT CONTROL (кат.№: 1102004). Каждая лаборатория должна пред
ставить свою собственнун. схему контроля качества и действия по исправлению, если контрол и вне
приемлемых диапазонов.
РЕФЕРЕНТНЫЕ ВЕЛИЧИНЫ'
Взрослые: 130 -300 мг/дл.
Дети (2-4 года): примерно в 2 раза выше, чем у взрослых.
Женщины (>40 лет): на i>30% выше, чем у мужчин.
Каждая лаборатория дол,м^ ла представить свой референсный диапазон.
ХАРАКТЕРИСТИКИ ТЕСТА
1 Линейность, до 550 ^/ir/дл (Примечание 1), при описанных выше условиях. Пробы с большими
концентрациями должпы быть разведены 1/5 физраствором (NaCl 9г/л) и тестированы повторно,
результат умножить h i 5. Предел линейности зависит от соотношения проба/реагент. Он будет
повышаться при сниж* ния объема сыворотки, при этом также будет пропорционально снижаться
чувствительность.
2. Определяемый урове нь: Значения ниже 1 мг/дл дают невоспроизводимые результаты.
3. Эффект прозоны: 1-Ь наблюдается эффекта прозойы до 4100 мг/дл.
4. Чувствительность Д 5,6 мА / мг/дл (33 мг/дл), Д 2,5 мА / мг/дл (262 мг/дл)
5 Воспроизводимость
Внутри серии тестов (п=10) Между сериями тестов (п=10)
Среднее (мг/дл)
SD
CV%
6. Правильность. peзyJ!ьтaты, полученные с помощью этого теста (у) при сравнении с другими, по
лученными с использ( ванием коммерческих реагентов (х) с похожими характеристиками, не да
вали систематических различий.
Результаты характеристи! теста зависят от используемого анализатора.
ИНТЕРФЕРЕНЦИИ
Не наблюдается интерференции с гемоглобином (до 19 г/л), билирубином (до 40 мг/дл), ревматоид
ными факторами (до 800 МЕ/мл) и липидами (до 5 г/л). Другие вещества могут влиять®' .
ПРИМЕЧАНИЯ
1. Линейность зависит о i концентрации калибратора.
2. Клинический диагноз )!0 должен ставиться по результатам одиночного теста; он должен быть ос
нован на совокупносп клинических и других лабораторных данных.
ЛИТЕРАТУРА:
1, Clinical Guide to Laboratory i .?sts, Edited by NW Tietz W 8 Saunders Co., Phipladelphia, 483, 1983.
2. Munck- Petersen С etal. Eut i Clin Invest 1988; 18: 596-603,
3 Viedma JA et al. Gut 1994; 3' 822-827
4 Pesce AJ and Kaplan, l_A. Mr ihods in Clinical Chemistry. The CV Mosby Connpany, St. Louis MO, 1987.
5. Dati F el al. Eur J Clin Chem i lin Biochem 1996; 34: 517-520.
6 Young DS.Effects of disease .n clinical laboratory tests, 3th ed. AACC Pres, 1997.
7. Friedman and Young. Effect; if disease on clinical laboratory tests, 3tn ed. AACC Pres, 1997.
ПРИМЕНЕНИЕ НА АНАЛИЗАТОРЕ SAPPHIRE 400
Item Name ATRYP
DATA INFORMATION CALIBRATION
Units mg/dL Type [Spline]
Decimals 1 Standard
#1 0.10X* #4 0.75 X*
ANALYSIS #2 0.25 X* #5 1.00X*
Type END #3 0,50 X* #6
Main W, Length 1 340 NORMAL RANGE
Sub W. Length 2 { ] MALE FEMALE
Method Turbidimetry LOW HIGH LOW HIGH
SERUM [90] - [200] [90] *• [200]
CORR. URINE
SLOPE INTI PLASMA
1.000 X 0
dSlysis
OTHER
Item Name ATRYP
ASPIRATION DATA PROCESS ABSORBANCE LIMIT
KIND S ini. 1:3 Double READ LOW -0.1
START END- HIGH 3.000
VOl ЧМЕ MAIN 40 41
SAMPLE 3 ^JL SUB 29 30
REAGENT 1 350 ML ENDPOINT limit
REAGENT 2 90 ML LINEAR CHECK {%) 90
FACTOR
Third mix Cn 'F ON
Blank Correction 1.000
R1 Blank Wal: r ^ R1- В
PROZONE CHECK
MONITOR START END LIMIT (%)
0 LEVEL POINT 1 FIRST
SPAN 3.000
SECOND ^ Low High
THIRD Low High
Измерение бланка (Параметр Blank) должно выполняться для получения хороших результатов ка
либровки (Окно CALIBRA i ION). Этот параметр калибровки стабилен до 30 дней.
ПРОБЫ
Свежие сыворотка или nj> 33Ma. В качестве антикоагулянтов должны быть использованы гепарин или
ЭДТА. Стабильность 7 дн^ й при 2-8“С или 3 месяца при ~20°С. Пробы с фибрином должны быть цен
трифугированы перед тес гированием, Не используйте гемолизирсванные или липемические пробы,
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
Для контроля характер ис и к ручных и автоматических процедур рекомендуется использовать кон
трольную сыворотку Spin!eact PROT CONTROL (кат,№: 1102004). Каждая лаборатория должна пред
ставить свою собственну‘0 схему контроля качества и действия по исправлению, если контроли вне
приемлемых диапазонов
РЕФЕРЕНТНЫЕ ВЕЛИЧИНи^
Новорожденные: 124 - 348 мг/дл
Взрослые: 90 200 мг/дл
Каждая лаборатория дол:; на представить свой референсный диапазон,
ИНТЕРФЕРЕНЦИИ
Не наблюдается интерференции с гемоглобином (до 8 г/л), билирубином до (40 мг/дл), ревматоидны
ми факторами (до 790 Ш /мл) и липемическими сыворотками (до 16 г/л). Другие вещества могут вли-
ЯТЬ®'^
ПРИМЕЧАНИЯ
1. Линейность зависит 01 концентрации калибратора.
2. Клинический диагноз ие должен ставиться по результатам одиночного теста; он должен быть ос
нован на совокупност; ! клинических и других лабораторных данных.
ЛИТЕРАТУРА:
1. Clinical Guide to Laboratory i ests, Edited by NWTietz W В Saunders Co., Phipladelphia, 483, 1983.
2. Dati F etal. Eur J Clin Chern 'lin Biochem 1996; 34:517-520.
3. Pesce AJ and Kaplan, LA. M thods in Clinical Chemistry. The CV Mosby Company, SL Louis MO, 1987.
4. Sharp HL Hospital Practice, May 1971: 83-96
5. Carrel RW et al. Assays Men Biochem 1978; 4: 83-119
6. Young DS.Effects of drugs о clinical laboratory tests, 4th ed. AACC Pres, 1995.
7. Friedman and Young. Effect of disease on din. laboratory tests, 3tn ed, AACC Pres, 1997.
АЛЬФА-АМИЛАЗА (о amylase-LQ) (кинетический метод с СМРСз/жидкий)
ТК41201
Кинетический метод опр< деления активности альфа-амилазы в сыворотке, плазме и моче с ис~
пользованием хлор-нитр( ренол- a-D-мальтотриозида (CNPG3).
IVD (для диагностики in vitio) Хранить при 2-8®С.
Код;ТК41201 10x40 мл
ПРИНЦИП МЕТОДА
Прямой метод определе!-ия а-амилазы использует хромогенный субстрат - 2-хлор-4-нитрофенол,
связанный с мальтотриоэЕ -й.
IOCNPG3 9 CNP + CNPGj + Сз + G
Как показано выше а-амппаза гидролизует 2-хлор-4-нитрофенил-б-Р-мальтотриозид (CNPG3) с вы
свобождением 2-хлор-4-нмтрофенола {CNP) и формированием 2-хлор-4-нитрофенол-б-0-мальтозида
(CNPG2), мальтотриозы (С ч) и глюкозы (G).
Скорость формирования (:NP может быть определена спектрофотометрически при 405 нм, измене
ние оптической плотности прямо пропорционально активности альфа-амилазы в пробе. Реакция не
прямо зависит от эндогенных ингибирующих факторов.
КЛИНИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ
а-амилаза - это фермент который помогает переварить гликоген и крахмал. Он производится в ос
новном экзокринными под келудочной и слюнными железами.
На протяжении многих лег определение уровня альфа-амилазы в сыворотке и плазме использова
лось для диагностики у п, .циентов острого панкреатита. Ранние методы были основаны на титрова
нии йода и изменении ошической плотности в наибольшем разведении комплекса между йодом и
крахмалом, расщепляемые^ альфа-амилазой. Некоторые методы были основаны на продукции НАДФ
пропорционально активности альфа-амилазы.
Большинство настоящих методов основано на продукции р-нитрофенола из насыщенного олигосаха-
ридного субстрата с блокирующими группами, присоединенными к концам молекулы сахара. Позже е
этих методах иcпoльзoвaJiиcь различные расщепляющие ферменты для гидролиза образующихся ко
ротких цепей олигосахаридов с образованием р-нитрофенола. Расщепляющие ферменты содержат
остаточную активность аг ьфа-амилазы, что может существенно уменьшать стабильность реагента.
Клинический диагноз не м*^жет быть поставлен по результату одного теста, он должен определяться
по совокупности клинических и других лабораторных данных.
СОСТАВ НАБОРА
Реагент IVIES буфег> pH 6,0 100 ммоль/л
2-ХЛОР-4-НП грофенил- a-D-мальтотриозид (CNPG3) 2,25 ммоль/л
хлорид нат( -ия 350 ммоль/л
ацетат кал[.ция 6 ммоль/л
тиоцианат i-злия 900 ммоль/л
азид натри I 0,95 г/л
ПОДГОТОВКА
Реагенты готовы к исполь юванию.
ХРАНЕНИЕ И СТАБИЛЬНО^ ТЬ
Неоткрытый реагент стабилен до указанной даты, указанной на упаковке при температуре 2-8Х. По
сле открытия реагент ста! -илен в течение 60 дней при температуре 2-8°С.
Набор не пригоден для использования при наличии:
■ частиц или мутности
• Абсорбция бланка (А) при 405 нм s 0,500.
ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ КОМПг)НЕНТЫ
■ Автоматический биохимический анализатор Sapphire 400.
• Стандартное лаборат ;рное оборудование,
ПРОВЫ
Сыворотка, гепаринизироизнная плазма или моча. Другие антикоагулянты, такие какЭДТА или цитрат
не должны быть использованы. Центрифугирование и отделение сыворотки должно производиться
как можно раньше.
Амилаза в сыворотке и ivi )че стабильна в течение 1 недели при комнатной температуре (20-25°С) и
до нескольких месяцев в (зкрытой посуде при 2-8°С.
ПРОЦЕДУРА
1. Процедура проводится при температуре реагентов и анализатора (держатель кюветы) 37°С.
2. Условия теста:
Длина волны; 340 нм (320-360hm).
Температура: 37°С,
Оптический путь: 1см
Метод: кинетика по фиксир. времени по многоточечной калибровке,
время задержки Зс, время реакции - 240с.
3. Установите прибор на ноль по дистиллированной воде.
4 Отдозируйте в кюветы:____
Метод Микрометод ChemWell
Реагент R1 (мкл) 800 мкл 200 мкл 160 мкл
Калибраторы (мкл) 10 мкл 2,5 мкл 2 мкл
Проба (мкл) 10 мкл 2,5 мкл 2 мкл
5. Перемешайте, измерьте абсорбцию (А1) при 340 нм после добавления пробы.
6. Затем немедленно пипетируйте в кюветы:
Реагент R2 (мкл) 200 мкл 50 мкл 40 мкл
7. Перемешайте и точно через 4 минуты после добавления R2 измерьте абсорбцию (А2).
Реагенты могут быть использованы с различными автоматическими биохимическими анализаторами
или в ручных процедурах на фотометрах с подходящей длиной волны. У Spinreact есть адаптации к
различным автоматическим анализаторам, которые доступны по запросу.
РАСЧЕТЫ
Рассчитайте изменение абсорбции (ДА=А1-А2) для каждой точки калибровочной кривой (каждого
стандарта) и постройте калибровочную кривую зависимости концентрации каждого стандарта от его
изменения абсорбции. Концентрация а1-кислого гликопротеина в пробе рассчитывается интерполя
цией ее ДА к калибровочной кривой.
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
Для контроля характеристик ручных и автоматических процедур рекомендуется использовать кон
трольную сыворотку Spinreact PROT CONTROL (кат.№: 1102004). Каждая лаборатория должна пред
ставить свою собственную схему контроля качества и действия по исправлению, если контроли вне
приемлемых диапазонов.
РЕФЕРЕНТНЫЕ ВЕЛИЧИНЫ^
50-120 МГ/ДЛ
Каждая лаборатория должна представить свой референсный диапазон.
ХАРАКТЕРИСТИКИ ТЕСТА
1. Линейность: до 250 мг/дл (Примечание 1), при описанных выше условиях. Пробы с большими
концентрациями должны быть разведены 1/5 физраствором (NaCI 9г/л) и тестированы повторно,
результат умножить на 5. Предел линейности зависит от соотношения проба/реагент. Он будет
повышаться при снижения объема сыворотки, при этом также будет пропорционально снижаться
чувствительность.
2. Определяемый уровень: Значения ниже 12,9 мг/дл дают невоспроизводимые результаты.
3. Эффект прозоны: Не наблюдается эффекта прозоны до 1000 мг/дл.
4. Чувствительность: Д 5,0 мА / мг/дл.
5. Воспроизводимость: Реагент был тестирован в течение 20 дней с использованием сыворотки
Внутри серии тестов (п=10) Между сериями тестов (п=10)
Среднее (мг/дл) 44,2 86 44,2 86
SD 1,53 1,95 2,67 3,25
cv% 3,5 2.3 1 6,0 3,8
6, Правильность: результаты, полученные с помощью этого теста (у) при сравнении с другими, по
лученными с использованием коммерческих реагентов (х) с похожими характеристиками, не да
вали систематических различий. Результаты обследования 51 пациента в диапазоне а1-кислого
гликопротеина 50 - 120 мг/дл были следующими:
Коэффициент корреляции: (г) 0,95. Уравнение регрессии: у=0,930х + 6,5367.
Результаты характеристик теста зависят от используемого анализатора.
ИНТЕРФЕРЕНЦИИ
Не наблюдается интерференции с гемоглобином (до 10 г/л), билирубином до (20 мг/дл), ревматоид
ными факторами (до 200 МЕ/мл) и липемическими сыворотками (до 2,5 г/л). Другие вещества могут
влиять '®.
ПРИМЕЧАНИЯ
Линейность зависит от концентрации калибратора.
Клинический диагноз не должен ставиться по результатам одиночного теста; он должен быть основан
на совокупности клинических и других лабораторных данных.
А1-кислый ГЛИКОПРОТЕИН (A1-ACID GLYCOPROTEIN (А1-АС GLY))
1102154
Турбидиметрический метод для определения а-1 кислого гликопротеина в сыворотке.
IVD (для диагностики in vitro)___________________________________________________Хранить при 2~8°С.
Код; 1102154 R1 буфер 1x40 мл, R2 антитела 1x10 мл
ПРИНЦИП МЕТОДА
Тест наа1“Кислый гликопротеин - это количественный иммунотурбидиметрический тест для опреде
ления а1-кислого гликопротеина в сыворотке и плазме человека. Антитела к а1-кислому гликопротеи
ну при добавлении к пробам, содержащим а1-кислый гликопротеин, образуют нерастворимые ком
плексы. Эти комплексы вызывают изменение абсорбции пропорционально концентрации а1-кислого
гликопротеина в пробе пациента. Расчет производится с помощью построения многоточечной калиб
ровочной кривой по нескольким калибраторам.
КЛИНИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ
а1-кислый гликопротеин (также называемый орозомукоидом) - это гликопротеин, синтезируемый в
клетках паренхимы печени, но гранулоциты и моноциты могут также вносить существенный вклад в
уровень в плазме при сепсисе. Содержится в высоких концентрациях в углеводах. Выводится с по
мощью клубочковой фильтрации. Давно известно, что он связывается с большим количеством осно
ваний и липофильных веществ (прогестерон и связанных с ним гормонов).
Относится к белкам острой фазы, показывает 3-х 4-х кратное увеличение при большинстве состоя
ний, ассоциированных с воспалениями или некрозом тканей, и может быть одним из надежнейших
индикаторов клинической активности язвенных колитов. Уровни также повышаются под действием
глюкокортикоидов. Синтез и уровень в плазме снижается под де1лствием эстрогенов.
СОСТАВ НАБОРА
R1 дилюент ТРИС-буфер 20ммоль/л, ПЭГ 8000, pH 8,3. Азид натрия 0,95 г/л.
R2 антитела Козья сыворотка. Антитела к человеческому а 1-кислому гликопротеину, pH 7.5.
Азид натрия 0,95 г/л.
Дополнительно: не Калибратор протеинов (PROT CAL), кат.№ 1102003.
входит в набор
КАЛИБРОВКА
Тест был стандартизован по Референсному Материалу CRM 470/RPPHS (Институт Референсных Ма
териалов и Измерений, IRMM). Для калибровки рекомендуется использовать Калибратор протеинов
(PROT CAL), кат.№ 1102003.
ПОДГОТОВКА
Реагенты: готовы к использованию.
Калибровочная кривая: Подготовьте следующие разведения калибратора протеинов в физрастворе
(NaCI 9г/л). Умножьте концентрацию а1-кислого гликопротеина в калибраторе на соответствующий
коэффициент, приведенный в таблице, для получения концентрации а1-кислого гликопротеина каж-
Стандарты 1 2 3 4 5 6
Калибратор (мкл) - 10 25 50 75 100
NaCI 9г/л (мкл) 100 мкл 90 мкл 75 мкл 50 мкл 25 мкл -
Концентрация 0 0,1 хС 0,25хС 0,5хС 0,75хС 1,0хС
Концентрация калибратора указана в инструкции к калибратору протеинов (С^
ХРАНЕНИЕ И СТАБИЛЬНОСТЬ
Все компоненты набора стабильны вплоть до указанной на этикетке даты (Expiration Date) при хране
нии в плотно закрытом флаконе при 2-8°С с предотвращением контаминации при использовании. Не
используйте реагенты после окончания срока годности.
Набор не пригоден для использования при наличии частиц или мутности.
Не замораживайте, замороженные антитела или дилюент могут изменять функциональную актив
ность.
ДОПОЛНИТЕЛЬНОЕ ОБОРУДОВАНИЕ
■ Термостат с 37“С.
• Спектрофотометр или термостатируемый анализатор (37°С) с фильтром 340нм (320-360нм).
ПРОБЫ
Свежая сыворотка или плазма. В качестве антикоагулянтов должны быть использованы гепарин или
ЭДТА. Стабильность 7 дней при 2-8'’С или 3 месяца при -20°С. Пробы с фибрином должны быть цен
трифугированы перед тестированием. Не используйте гемолизированные или липемические пробы.
ПРОЦЕДУРА
1. Процедура проводится при температуре реагентов и анализатора (держатель кюветы)
2. Условия теста:
Длина волны: 340 нм (320-3б0нм).
Температура: 37®С.
Оптический путь: 1см
Метод: кинетика по фиксир. времени по многоточечной калибровке,
время задержки Зс, время реакции - 240с.
3. Установите прибор на ноль по дистиллированной воде.
4. Отдозируйте в кюветы:
Метод Микрометод ChemWell
Реагент R1 (мкл) 800 мкл 200 мкл 160 мкл
Калибраторы (мкл) 10 мкл 2,5 мкл 2 мкл
Проба (мкл)______________ 10 мкл 2,5 мкл 2 мкл
5. Перемешайте, измерьте абсорбцию (А1) при 340 нм после добавления пробы.
6. Затем немедленно пипетируйте в кюветы:
Реагент R2 (мкл) 200 мкл 50 мкл 40 мкл
7. Перемешайте и точно через 4 минуты после добавления R2 измерьте абсорбцию (А2).
Реагенты могут быть использованы с различными автоматическими биохимическими анализаторами
или в ручных процедурах на фотометрах с подходящей длиной волны. У Spinreact есть адаптации к
различным автоматическим анализаторам, которые доступны по запросу.
РАСЧЕТЫ
Рассчитайте изменение абсорбции {ДА=А1-А2) для каждой точки калибровочной кривой (каждого
стандарта) и постройте калибровочную кривую зависимости концентрации каждого стандарта от его
изменения абсорбции. Концентрация а 1-кислого гликопротеина в пробе рассчитывается интерполя
цией ее ДА к калибровочной кривой.
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
Для контроля характеристик ручных и автоматических процедур рекомендуется использовать кон
трольную сыворотку Spinreact PROT CONTROL (кат.№: 1102004). Каждая лаборатория должна пред
ставить свою собственную схему контроля качества и действия по исправлению, если контроли вне
приемлемых диапазонов.
РЕФЕРЕНТНЫЕ ВЕЛИЧИНЫ^
50-120 мг/дл
Каждая лаборатория должна представить свой референсный диапазон.
ХАРАКТЕРИСТИКИ ТЕСТА
1. Линейность: до 250 мг/дл (Примечание 1), при описанных выше условиях. Пробы с большими
концентрациями должны быть разведены 1/5 физраствором (NaCl 9г/л) и тестированы повторно,
результат умножить на 5. Предел линейности зависит от соотношения проба/реагент. Он будет
повышаться при снижения объема сыворотки, при этом также будет пропорционально снижаться
чувствительность.
2. Определяемый уровень: Значения ниже 12,9 мг/дл дают невоспроизводимые результаты.
3. Эффект прозоны: Не наблюдается эффекта прозоны до 1000 мг/дл.
4. Чувствительность: Д 5,0 мА / мг/дл.
5. Воспроизводимость: Реагент был тестирован в течение 20 дней с использованием сыворотки
Внутри серии тестов (п=10) Между сериями тестов (п=10)
среднее (мг/дл) 44,2 66 44,2 86
SD 1,53 1,95 2,67 3,25
CV % 3,5 2,3 6,0 3,8
6. Правильность: результаты, полученные с помощью этого теста (у) при сравнении с другими, по
лученными с использованием коммерческих реагентов (х) с похожими характеристиками, не да
вали систематических различий. Результаты обследования 51 пациента в диапазоне а1-кислого
гликопротеина 50- 120 мг/дл были следующими:
Коэффициент корреляции: (г) 0,95. Уравнение регрессии: у=0,930х + 6,5367.
Результаты характеристик теста зависят от используемого анализатора.
ИНТЕРФЕРЕНЦИИ
Не наблюдается интерференции с гемоглобином (до 10 г/л), билирубином до (20 мг/дл), ревматоид
ными факторами (до 200 МЕ/мл) и липемическими сыворотками (до 2,5 г/л). Другие вещества могут
влиять
ПРИМЕЧАНИЯ
Линейность зависит от концентрации калибратора.
Клинический диагноз не должен ставиться по результатам одиночного теста; он должен быть основан
на совокупности клинических и других лабораторных данных.
Метод: кинетика по фиксир, времени по многоточечной калибровке,
время задержки Зс, время реакции - 240с.
3. Установите прибор на ноль по дистиллированной воде.
4. Отдозируйте в кюветы:
Метод Ми кро метод ChemWell
Реагент R1 (мкл) 800 мкл 200 мкл 160 мкл
Калибраторы (мкл) 10 мкл 2,5 мкл 2 мкл
Пр■ оба (мкл)________________ ________10 мкл________^ 2,5 мкл________ 2 мкл
5. Перемешайте, измерьте абсорбцию (А1) при 340 нм после добавления пробы.
6. Затем немедленно пипетируйте в кюветы:
Реагент R2 (мкл) 200 мкл 50 мкл 40 мкл
7. Перемешайте и точно через 4 минуты после добавления R2 измерьте абсорбцию (А2).
Реагенты могут быть использованы с различными автоматическими биохимическими анализаторами
или в ручных процедурах на фотометрах с подходящей длиной волны. У Splnreact есть адаптации к
различным автоматическим анализаторам, которые доступны по запросу.
РАСЧЕТЫ
Рассчитайте изменение абсорбции (ДА=А1-А2) для каждой точки калибровочной кривой (каждого
стандарта) и постройте калибровочную кривую зависимости концентрации каждого стандарта от его
изменения абсорбции. Концентрация а1-кислого гликопротеина в пробе рассчитывается интерполя
цией ее ДА к калибровочной кривой.
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
Для контроля хараетеристик ручных и автоматических процедур рекомендуется использовать кон
трольную сыворотку Spinreact PROT CONTROL (кат,№; 1102004). Каждая лаборатория должна пред
ставить свою собственную схему контроля качества и действия по исправлению, если контроли вне
приемлемых диапазонов.
РЕФЕРЕНТНЫЕ ВЕЛИЧИНЫ^
50 ~ 120 мг/дл
Каждая лаборатория должна представить свой референсный диапазон.
ХАРАКТЕРИСТИКИ ТЕСТА
1, Линейность: до 250 мг/дл (Примечание 1), при описанных выше условиях. Пробы с большими
концентрациями должны быть разведены 1/5 физраствором (NaCI 9г/л) и тестированы повторно,
результат умножить на 5. Предел линейности зависит от соотношения проба/реагент. Он будет
повышаться при снижения объема сыворотки, при этом также будет пропорционально снижаться
чувствительность.
2. Определяемый уровень: Значения ниже 12,9 мг/дл дают невоспроизводимые результаты.
3. Эффект прозоны: Не наблюдается эффекта прозоны до 1000 мг/дл.
4. Чувствительность: Д 5,0 мА / мг/дл.
5. Воспроизводимость: Реагент был тестирован в течение 20 дней с использованием сыворотки
Внутри серии тестов (п-10) Между сериями тестов (п=10)
Среднее (мг/дл) 44,2 86 44,2 86
SD 1,53 1,95 2,67 3,25
CV% 3.5 2.3 6,0 3,8
6. Правильность, результаты, полученные с помощью этого теста (у) при сравнении с другими, по
лученными с использованием коммерческих реагентов (х) с похожими характеристиками, не да
вали систематических различий. Результаты обследования 51 пациента в диапазоне а1-кислого
гликопротеина 50 - 120 мг/дл были следующими;
Коэффициент корреляции; (г) 0,95. Уравнение регрессии: у=0,930х + 6,5367.
Результаты характеристик теста зависят от используемого анализатора.
ИНТЕРФЕРЕНЦИИ
Не наблюдается интерференции с гемоглобином (до 10 г/л), билирубином до (20 мг/дл), ревматоид
ными факторами (до 200 МЕ/мл) и липемическими сыворотками (до 2,5 г/л). Другие вещества могут
влиять
ПРИМЕЧАНИЯ
Линейность зависит от концентрации калибратора.
Клинический диагноз не должен ставиться по результатам одиночного теста; он должен быть основан
на совокупности клинических и других лабораторных данных.
ЛИТЕРАТУРА:
1. Clinical Guide to Laboratory Tests, Edited by NW TietzW В Saunders Co., Phipladelphia, 483, 1983,
2. Dati F et al. Eur J Clin Chem Clin Biochem 1996; 34:517-520.
3. Pesce AJ and Kaplan, LA. Methods in Clinical Chemistry. The CV Mosby Company, St. Louis MO, 1987.
4. Bienvenue J et al. Clin Chem Clin Biochem 1981; 27: 721-726.
5. Young DS.Effects of drugs on clinical laboratory tests, 4th ed. AACC Pres, 1995.
6. Friedman and Young. Effects of disease on clinical laboratory tests, 3tn ed. AACC Pres, 1997.
АЛЬФА-АМИЛАЗА (a-amylase-LQ) (кинетический метод с СЫРСз/жидкий)
ТК41201
Кинетический метод определения активности альфа-амилазы в сыворотке, плазме и моче с ис
пользованием хлор-нитрофенол- a-D-мальтотриозида (CNPG3).
IVD (для диагностики in vitro) Хранить при 2-8Х.
Код:ТК41201 10x40 мл
ПРИНЦИП МЕТОДА
Прямой метод определения а-амилаэы использует хромогенный субстрат - 2-хлор-4-нитрофенол,
связанный с мальтотриозой.
lOCNPGj 9 CNP + CNPGj + G3 + G
Как показано выше а-амилаза гидролизует 2-хлор-4-нитрофенил-б-0-мальтотриозид (CNPG3) с вы
свобождением 2-хлор-4-нитрофенола (CNP) и формированием 2-хлор-4-нитрофенол-б-0-мальтозида
(CNPGz), мальтотриозы (G3) и глюкозы (G).
Скорость формирования GNP может быть определена спекгрофотометрически при 405 нм, измене
ние оптической плотности прямо пропорционально аю-ивности альфа-амилазы в пробе. Реакция не
прямо зависит от эндогенных ингибирующих факторов.
КЛИНИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ ,
а-амилаза “ это фермент, который помогает переварить гликоген и крахмал. Он производится в ос- w
новном экзокринными поджелудочной и слюнными железами.
На протяжении многих лет определение уровня альфа-амилазы в сыворотке и плазме использова
лось для диагностики у пациентов острого панкреатита. Ранние методы были основаны на титрова
нии йода и изменении оптической плотности в наибольшем разведении комплекса между йодом и
крахмалом, расщепляемым альфа-амилазой. Некоторые методы были основаны на продукции НАДФ
пропорционально активности альфа-амилазы.
Большинство настоящих методов основано на продукции р-нитрофенола из насыщенного олигосаха-
ридного субстрата с блокирующими группами, присоединенными к концам молекулы сахара, Позже в
этих методах использовались различные расщепляющие ферменты для гидролиза образующихся ко
ротких цепей олигосахаридов с образованием р-нитрофенола. Расщепляющие ферменты содержат
остаточную активность альфа-амилазы, что может существенно уменьшать стабильность реагента.
Клинический диагноз не может быть поставлен по результату одного теста, он должен определяться
по совокупности клинических и других лабораторных данных.
СОСТАВ НАБОРА
Реагент MES буфер pH 6,0 100 ммоль/л
2-хлор-4-нитрофенил- а-О-мальтотриозид (CNPG3) 2,25 ммоль/л
хлорид натрия 350 ммоль/л
ацетат кальция 6 ммоль/л
тиоцианат калия 900 ммоль/л
азид натрия 0,95 г/л
ПОДГОТОВКА
Реагенты готовы к использованию.
ХРАНЕНИЕ И СТАБИЛЬНОСТЬ
Неоткрытый реагент стабилен до указанной даты, указанной на упаковке при температуре 2-8°С. По
сле открытия реагент стабилен в течение 60 дней при температуре 2-Q"C.
Набор не пригоден для использования при наличии.
■ частиц или мутности.
■ Абсорбция бланка (А) при 405 нм ^ 0,500.
ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ КОМПОНЕНТЫ
■ Автоматический биохимический анализатор Sapphire 400,
■ Стандартное лабораторное оборудование.
ПРОБЫ
Сыворотка, гепаринизированная плазма или моча. Другие антикоагулянты, такие как ЭДТА или цитрат
не должны быть использованы. Центрифугирование и отделение сыворотки должно производиться
как можно раньше.
Амилаза в сыворотке и моче стабильна в течение 1 недели при комнатной температуре (20-25°С) и
до нескольких месяцев в закрытой посуде при 2-8“С,
РЕФЕРЕНТНЫЕ ВЕЛИЧИНЫ’
37°С
Сыворотка, плазма; < 90 Е/л
Моча: < 450 Е/л
Настоятельно рекомендуется в каждой лаборатории устанавливать свой диапазон нормы.
ПРИМЕНЕНИЕ НА АНАЛИЗАТОРЕ SAPPHIRE 400
Item Name AMY
DATA INFORMATION CALIBRATION
Units U/L Type [Factor] FACTOR 3954
Decimals 0 Standard
#1[ * ] #4
ANALYSIS #2 #5
Type RATE #3 #6
Main W. Length 1 405 NORMAL RANGE
Sub W. Length 2 [ ] MALE FEMALE
Method CNPG3 LOW HIGH LOW HIGH
SERUM [ ] - [90] [ ] - [90]
CORR. URINE [ ] - [450] [ ] - [ 450]
SLOPE INTER PLASMA
1.000 X 0
DWLYSIS
OTHER
Item Name AMY
ASPIRATION DATA PROCESS ABSORBANCE LIMIT
KIND Single Double READ LOW -0.1
START END- HIGH 3.000
VOLUME MAIN 17 29
SAMPLE 6 jjL SUB
REAGENT 1 300 pL ENDPOINT LIMIT
REAGENT2 LINEAR CHECK (%) 90
ml
FACTOR
Third mix OFF ON
Blank Correction 1.000
R1 Blank Water ^ R1-B
PROZONE CHECK
MONITOR START END LIMIT (%)
0 LEVEL POINT 1 FIRST
SPAN 3.000
SECOND ^ Low High
THIRD Low High
Измерение бланка (Параметр Blank) должно выполняться для получения хороших результатов ка
либровки (Окно CALIBRATION).
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
Рекомендуется использовать контроли с каждой серией проб. Для контроля могут быть использованы
нормальные и патологические контрольные сыворотки SP1NTR0L (Кат.№ 1002120 и 1002210). Если
значения контролей вне определенного диапазона, проверьте прибор, реагенты и калибратор на от
сутствие проблем. Каждая лаборатория должна разработать свою собственную систему контроля ка
чества и корректирующие действия, если контроли не дают приемлемые результаты.
ИНТЕРФЕРЕНЦИЯ
Гемолиз влияет на результаты’. Ферментативная активность а-амилазы зависит от температуры.
Тесты, выполняемые при температурах <37^0 или >37°С, будут показывать заниженные или завы
шенные результаты относительно реального уровня. Список лекарств и других веществ, влияющих на
определение а-амилазы, представлен Young et.al^’‘‘.
ПРИМЕЧАНИЯ
1. Ферментативная активность а-амилазы зависит от температуры. Тесты, выполняемые при темпе
ратурах <37°С или >37°С, будут показывать заниженные или завышенные результаты относи
тельно реального уровня.
2. Пот и слюна содержат альфа-амилазу. Для предупреждения загрязнения проб не всасывайте
жидкости в пипетки ртом и избегайте контакта пробы, реагента и наконечника пипетки с кожей.
3. Реактив содержит тиоцианат калия. Избегайте ингаляции или контакта реактива с кожей или гла
зами, промойте кожу или глаза водой и проконсультируйтесь с врачом, если такой контакт про
изошел.
ЛИТЕРАТУРА
1. Ying Роо А et а1. Amylase measurement with 2-chloro-4nitrophenyl maltrotrioside as substrate. Clin Chim 272,1998; 137-147.
2. McNeely M. Amylase. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V. Mosby Co. St Louis. Toronto. Princeton 1984; 1112-116.
3 Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press, 1995.
4. Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests. 4th ed AACC 2001.
5. Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999.
6. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed AACC 1995.
А-ФЕТОПРОТЕИН (A-FETOPROTEIN) TURBILATEX 43000
Турбидиметричвский метод для количественного определения а-фетопротеина (АФП).
(VD (для диагностики in vitro)______________________________________________Хранить при 2-8^С.________
Код: 43000 1x20 мл буфер, 1x10 мл латексный реагент, 1x1 мл калибратор (43002)______________
ПРИНЦИП
Количественный турбидиметричвский метод для определения а-фетопротеина в сыворотке или
плазме человека. Латексные частицы, покрытые козьими антителами к человеческому а-
фетопротеину агглютинируют при смешивании с пробами, содержащими а-фетопротеин. Агглютина
ция вызывает изменение абсорбции, в зависимости от содержания а-фетопротеина в пробе пациен
та, которое может быть количественно измерено по калибратору с известной концентрацией АФП,
КЛИНИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ
АФП - это фетопротеин с молекулярным весом примерно 7000, содержащим около 3% углеводоро
дов. Во время роста плода он присутствует в высокой концентрации, его концентрация быстро снижа
ется после рождения, и в крови нормальных здоровых людей АФП находится на исключительно низ
ких уровнях. АФП значительно повышается при первичном раке печени и имеет большое диагности
ческое значение. Следует также принять во внимание, что изменения АФП в крови используются для
оценки прогресса, эффективности терапии и постоперативного прогноза гепатомы,
СОСТАВ НАБОРА ______________
Дилюент (R1) Глициновый буфер, pH 8,3. Азид натрия 0,95 г/л. 1x20 мл
Латексные частицы, покрытые козьими антителами (IgG) к человече
Латекс (R2) 1x10 мл ^
скому а-фетопротеину, pH 7,3. Азид натрия 0,95 г/л.
Калибратор. Человеческого происхождения. Концентрация АФП ука
Калибратор (R3); 1x1 мл
зана на флаконе (43002).
Дополнительно Контроль АФП (43003)______________________________________________ 1x1 мл
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЯ
Компоненты Человеческого происхождения были тестированы и показали отсутствие HBsAg, HCV и
антител к HIV (1/2), Однако, обращение с ними должно быть как с потенциально инфекционными.
КАЛИБРОВКА
Чувствительность теста и целевое значение калибратора были стандартизованы по референсному
материалу 1“^ International Standard 1975 (ВОЗ). Использование других коммерческих калибраторов
АФП не рекомендуется.
ПОДГОТОВКА
Реагенты; готовы использованию.
Калибратор: готов использованию.
Калибровочная кривая: подготовьте следующие разведения калибратора АФП с помощью физрас
твора NaCI 0,9 г/л. Умножьте концентрацию АФП, указанную на флаконе, на коэффициент внизу таб-
лицы для расчета концентрации АФГ каждого разведения калибратора.
Стандарты 1 2 3 4 5
Калибратор АФП 100 мкл 50 мкл 25 мкл 12,5 мкл -
NaCI 0,9 г/л - 50 мкл 75 мкл 87,5 мкл 100 мкл
Концентрация 1хС 0,5хС 0,25хС 0,12бхС ОхС
ХРАНЕНИЕ И СТАБИЛЬНОСТЬ
Все компоненты набора стабильны вплоть до указанной на упаковке даты при температуре 2-8°С и
отсутствии загрязнения при использовании. Не используйте реагенты после окончания срока хране
ния.
Не замораживать реагенты, замороженные латексный реагент или буфер могут менять свои функ
циональные свойства.
Набор не пригоден к использованию при наличии частиц или мутности,
ДОПОЛНИТЕЛЬНОЕ ОБОРУДОВАНИЕ
Термостат ДЛЯ 37"С.
Термостатируемые при 37Х спектрофотометр или фотометр с длиной волны 570нм (5б0-580нм),
ПРОБЫ
Свежая сыворотка. Стабильность 7 дней при 2-В“С или 3 месяца при -20°С.
Центрифугируйте пробы с наличием фибрина перед тестированием.
Не используйте сильно гемолизированные или липемические пробы.
ПРОЦЕДУРА
1. процедура проводится при температуре реагентов и фотометра (держатель кюветы) 37“С.
2. Условия теста:
Длина волны : 570 нм (560-580 нм)
Температура : 37°С
Кювета : оптический путь 1 см
Измерение : против бланка по дистиллированной воде.
Метод : по фиксир.времени по многоточечной кривой,
<а<апЛП\1/1/м 'Яг РПвМО ПРЯК1 ШИ — 1 80С.
4. добавить в кюветы:
Полумикрометод Микрометод
Бланк Стандарт Проба Бланк Стандарт Проба
Дилюент (R1) - 670 мкл 670 мкл - 335 мкл 335 мкл
Латекс (R2) - 330 мкл 330 мкл - 165 мкл 165 мкл
Калибратор или проба - 75 мкл 75 мкл - 38 мкл 38 мкл
1. Перемешайте и измерьте абсорбцию немедленно (Ai) и через 3 минуты после добавления проб
(А2) против бланка по дистиллированной воде.
SPINREACT имеет инструкции для различных автоматических анализаторов. Инструкции для
разных приборов доступны по запросу.
РАСЧЕТ
Рассчитайте для каждого стандарта и проб ДА (А2-А1) и постройте на линейной миллиметровой бума
ге калибровочный график зависимости между ДА стандарта и его концентрацией или используйте со
ответствующую программу анализатора. Концентрация АФП пробы рассчитывается интерполяцией
ДА (А2-А1) пробы к калибровочной кривой.
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
Для контроля ручных и автоматизированных процедур выполнения теста рекомендуется использо
вать контрольную сыворотку. Контрольная сыворотка Spinreact AFP Control (код: 43003).
Каждая лаборатория должна определять собственную систему ведения контроля качества и действий
для коррекции при выходе контроля за приемлемые границы.
РЕФЕРЕНСНЫЕ ВЕЛИЧИНЫ
Ожидаемые значения в норме у взрослых до 20 нг/мл.
Каждая лаборатория должна определять собственный референсный диапазон.
ХАРАКТЕРИСТИКИ ТЕСТА
1. Предел линейности: до 250 нг/мл для описанных выше условий. Диапазон линейности и изме
рительный диапазон зависят от соотношения пробы и реагента. Он будет повышаться при
уменьшении доли пробы, чувствительность теста при этом пропорционально снижается.
Предел определения. 4 нг/мл.
Эффект прозоны: 40000 нг/мл.
Чувствительность: 0,0012 ДА. 10 нг/мл.
Воспроизводимость (внутри серии тестов): CV 4,03% (9,9 нг/мл), CV 1,37% (22,6 нг/мл), CV
0,71% (96,5 нг/мл).
Правильность: результаты, полученные с помощью этого теста (у) были сравнены с другими,
полученные с использованием коммерческих реагентов (х) с с похожими характеристиками. Были
исследованы 78 проб. Корреляционный коэффициент (г) составил 0.996 и уравнение регрессии у=
1.009X-16,64.
Результаты характеристиктеста зависят также от используемого анализатора.
ИНТЕРФЕРЕНЦИИ
Гемоглобин (2 г/л), билирубин С (30 мг/дл), билирубин F (30 мг/дл) и триглицериды (150 мг/дл) не да
ют интерференции. Однако другие вещества могут оказывать влияние .
ПРИМЕЧАНИЯ
Клинически диагноз не должен основываться на результатах одного теста, он должен включать все
клинические и лабораторные данные.
ЛИТЕРАТУРА
1. Bergstrand, G.C. et al. Scand, J. Clin. Invest. 1956; 8: 174.
2. Singer J.M. et al. Amer.J,Med. 1956; 21: 888.
3. Galvin J.P. et al. Clin.Lab.Assays (Pap Annu Clin. Lab. Assays Conf.) 1983; 4’^ 73.
4. GitlinD.Ann. NY Acad, Sci., 1975; 259: 7-16.
5. Sizerat P et al. J. Bioi. Dtand, 1976; 4:149.
6. Carasco. D. et al. Eur. J. Oncol., 1998; 31 (1): 37-39,
7. Young DS, Effects of drugs on clinical laboratory test, 4th ed. AACC Press, 1995.
КАЛИБРАТОР А-ФЕТОПРОТЕИНА (A-FETOPROTEIN (AFP) CALIBRA
TOR) 43002
Для калибровки при определении а-фетопротеина.
IVD (для диагностики in vitro) Хранить при 2-8“С
Код! 43002 1x1 мл ~
ВВЕДЕНИЕ
a-fetoprotein (AFP) calibrator - Калибратор а-фетопротеина - стабилизированная жидкая сыворотка
человека, предназначена для калибровки в качестве стандарта, и должен быть использован в соот
ветствии с инструкциями к методам.
СТАБИЛЬНОСТЬ
Материал стабилен в течение срока, указанного на этикетке, при температуре хранения 2-8°С.
ПРИГОТОВЛЕНИЕ
Калибратор готов к использованию.
Если необходимо, калибратор можно разлить на порции и заморозить при температуре -20®С. После
размораживания тщательно перемешать. Повторное замораживание не допускается.
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЯ
В производстве этих материалов использована сыворотка крови человека. Каждый донорский мате
риал тестирован с использованием рекомендованных FDA реагентов, имеет отрицательный резуль
тат на HBsAg и не дает реакции на антитела к ВИЧ. Однако не существует методов, которые могут
полностью исключить наличие вируса СПИДа, гепатита В или других инфекционных агентов, поэтому
рекомендуется, чтобы с этими продуктами обращались с такими же предосторожностями, как и с про
бами пациентов.
АТТЕСТОВАННЫЕ ЗНАЧЕНИЯ
Значения компонентов смотрите в инструкциях, прилагаемых к каждой упаковке и на этикетке флако
на.
а-фетопротеин..................нг/дл
КОНТРОЛЬ А-ФЕТОПРОТЕИНА (A-FETOPROTEIN (AFP) CONTROL)
43003
Для калибровки и контроля определения а-фетопротеина.
IVD (для диагностики in vitro)______________________________________________Хранить при 2~8°С.________
Код: 43003 1x1 мл________
w
ВВЕДЕНИЕ
a-fetoprotein (AFP) control - Контроль а-фетопротеина - стабилизированная жидкая сыворотка крови
человека, предназначена для калибровки и контроля качества в качестве пробы, и должен быть ис
пользован в соответствии с инструкциями к методам.
СТАБИЛЬНОСТЬ
Материал стабилен в течение срока, указанного на этикетке, при температуре хранения 2-8''С.
ПРИГОТОВЛЕНИЕ
Контроль готов к использованию.
Если необходимо, контроль можно разлить на порции и заморозить при температуре -20Х. После
размораживания тщательно перемешать. Повторное замораживание не допускается.
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЯ
В производстве этих материалов использована сыворотка крови человека. Каадый донорский мате
риал тестирован с использованием рекомендованных FDA реагентов, имеет отрицательный резуль
тат на HBsAg и не дает реакции на антитела к ВИЧ. Однако не существует методов, которые могут
полностью исключить наличие вируса СПИДа, гепатита В или других инфекционных агентов, поэтому
рекомендуется, чтобы с этими продуктами обращались с такими же предосторожностями, как и с про
бами пациентов.
АТТЕСТОВАННЫЕ ЗНАЧЕНИЯ
Значения компонентов смотрите в инструкциях, прилагаемых к каждой упаковке и на этикетке флако*
на.
Аттестованные значения представлены в виде среднего с максимально допустимыми отклонениями.
АНТИСТРЕПТОЛИЗИН “О” {anti-streptolysin О) ТК1107010
Турбидиметрический метод с латексом для количественного определения антистрептолизина О
(АСЛО) в сыворотке или плазме.
IVP (для диагностики in vitro)____________________________________________________ Хранить при 2-6°С.
Код: ТК1107010______________R1 буфер 2x25 мл, R2 латексный реагент 1x6 мл, 1x1 мл калибратор
ПРИНЦИП
Латексные частицы, покрытые стрелтолизином О, дают агглютинацию при смешивании с пробами,
содержащими антистрептолиэин О (АСЛО). Агглютинация вызывает изменение абсорбции, завися
щей от содержания АСЛО в пробе. Результат определяется в сравнении с калибратором с известной
^ концентрацией АСЛО.
КЛИНИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ
Стрептолизин «О» - это токсический иммуногенный экзоэнзим, продуцируемый р-гемолитическим
стрептококком групп А, С и G. Определение антител к нему (АСЛО) используется в диагностике рев
матоидной лихорадки, острых гл оме рул о нефритов и стрептококковых инфекций. Ревматическая ли
хорадка - это воспалительное заболевание, повреждающее соединительную ткань в различных ор
ганах тела человека, таких как кожа, сердце, суставы и др... Острый гломерулонефрит - это заболе
вание почек вследствие инфекции, при котором в основном повреждаются клубочки.
НАБОР РЕАГЕНТОВ
Дилюент R1 ТРИС-буфер, 20 ммоль/л, pH 8,3. Азид натрия 0.95 г/л
Латекс R2 Латексный частицы, покрытые стрептолизином О, pH 10.0. Азид натрия 0.95 г/л
AQn гл1 Калибратор АСЛО, сыворотка человека, концентрация указана на флаконе, 1x1
Аъи-иль мл (код: 1107002)
Дополнительно Контроль АСЛО/СРП/РФ, Уровень L (код: 1102114)
(не входит в набор) Контроль АСЛО/СРП/РФ, Уровень Н (код: 1102115)___________________________
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЯ
Компоненты человеческого происхождения прошли тестирование и дали отрицательный результат на
наличие HBsAg, HCV и антител к ВИЧ (1/2), Однако с такими материалами следует обращаться как с
потенциально инфекционно опасными.
КАЛИБРОВКА
Для калибровки используйте калибратор АСЛО (ASO-CAL), кат.№ 1107002. Чувствительность теста и
целевое значение калибратора были стандартизованы по ASO International Calibrator (WHO - ВОЗ).
Калибровка стабильна до 3 недель. Перекалибруйте, если результаты контроля входят за указанный
диапазон, при использовании нового набора с другим лотом, и при юстировке анализатора.
ПОДГОТОВКА
Рабочий реагент: тщательно перемешайте латексный реагент перед использованием. Подготовьте
необходимое количество следующим образом: 1 мл латексного реагента R2 + 9 мл дилюента R1.
Калибратор АСЛО: Разведите (->) с 1,0 мл дистиллированной воды. Тщательно перемешайте и ин
кубируйте при комнатной температуре около 10 минут перед тестированием.
ХРАНЕНИЕ И СТАБИЛЬНОСТЬ
Все компоненты набора табильны вплоть до указанной на этикетке даты (Expiration Date) при хране
нии в плотно закрытом флаконе при 2-8°С с предотвращением контаминации при использовании. Не
используйте реагенты после окончания срока годности. Не замораживайте, замороженные латексный
реагент или дилюент могут изменять функциональную активность.
Набор непригоден к использованию при наличии частиц или мутности.
Рабочий реагент: Стабильность 30 дней при 2-8“С
Калибратор ферритина; Стабильность до 1 месяца при 2-8Х или 3 месяца при-20‘’С.
ДОПОЛНИТЕЛЬНОЕ ОБОРУДОВАНИЕ
■ Автоматический биохимический анализатор Sapphire 400.
■ Общее лабораторное оборудование.
ПРИМЕНЕНИЕ НА АНАЛИЗАТОРЕ SAPPHIRE 400
Item Name ASO
DATA INFORMATION CALIBRATION
Units lU/mL Type [Linear]
Decimals 1 Standard
#1 0.10X* #4 0.75 X*
ANALYSIS #2 0.25 X* #5 1.00 X*
Type RATE #3 0.50 X* #6
Main W. Length 1 545 NORMAL RANGE
Sub W, Length 2 MALE FEMALE
Method Turbidimetry LOW HIGH LOW HIGH
SERUM [ ] - [200] [ ] - [200]
CORR. URINE
SLOPE INTER PLASMA
1.000 X 0
of/lYSIS
OTHER
Item Name ASO
ASPIRATION DATA PROCESS ABSORBANCE LIMIT
KIND Single Double READ LOW -0.1
START END- HIGH 3,000
VOLUME MAIN 49 50
SAMPLE 9 ML SUB 30 31
REAGENT 1 240 pL ENDPOINT LIMIT
REAGENT 2 60 mL LINEAR CHECK (%) 90
FACTOR
Third mix '^OFF ON
Blank Correction 1.000
R1 Blank Water R1-B
PROZONE CHECK
MONITOR START END LIMIT (%)
0 LEVEL POINT 1 FIRST
SPAN 3.000
SECOND Low High
THIRD Low High
Измерение бланка (Параметр Blank) должно выполняться для получения хороших результатов ка
либровки (Окно CALIBRATION). Этот параметр калибровки стабилен до 30 дней.
ПРОБЫ
Свежая сыворотка. Стабильность 7 дней при 2-8°С или 3 месяца при -20°С. Пробы с фибрином
должны быть центрифугированы перед тестированием. Не используйте гемолизированные или липе-
мические пробы.
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
Для контроля хараю-еристик ручных и автоматических процедур рекомендуется использовать контро-
ли Spinreact Controls ASO/CRP/RF Level L {кат.: 1102114) и Level Н (кат.: 1102115). Каадая лаборато
рия должна представить свою собственную схему контроля качества и действия по исправлению, ес
ли контроли вне приемлемых диапазонов.
РЕФЕРЕНТНЫЕ ВЕЛИЧИНЫ^
Взрослые: до 200 МЕ/мл
Дети до 5 лет: до 10ОО МЕ/мл
Каждая лаборатория должна представить свой референсный диапазон.
ИНТЕРФЕРЕНЦИИ
Не наблюдается интерференции с билирубином до (20 мг/дл), гемоглобином (до 10 г/л), ревматоид
ными факторами (до 600 МЕ/мл) и липемией (до 10 г/л). Другие ве1цества могут влиять^.
ПРИМЕЧАНИЯ
Клинический диагноз не должен ставиться по результатам одиночного теста; он должен быть основан
на совокупности клинических и других лабораторных данных.
ЛИТЕРАТУРА;
1. Haffejee I, Quarterly Journal of Medicine 1992, New series 84; 305; 641 - 658.
2. Alouf Jodeph E. Phamna Ther 1980; 11: 661-717.
3. M Fasani et al. Eur J Lab Med 1994; vol2.n.1; 67.
4. Todd E W. J Exp Med 1932; 55; 267 - 280.
5. Klein, GC, Applied Microbiology 1970; 19;60-61.
6. Klein GC. Applied Microbiology 1971; 21; 999-1001.
7 Young OS. Effects of drugs on clinical laboratory test, 4th ed. AACC Press, 1995.
АПОЛИПОПРОТЕИН А1 (APOLIPOPROTEIN-A1 (АР0-А1)) 1003010
Иммунотурбидиметричвский метод для определения аполипопротеина А1 в сыворотке.
IVD (для диагностики in vitro)______________________________________________________Хранить при 2-8°С.
Код: 1003010 1x80 мл буфер, 1x2 мл антисыаоротка
ПРИНЦИП МЕТОДА
Тест на аполипопротеин А1 - это количественный иммунотурбидиметричвский тест для определения
аполипопротеина А1 (Апо А1) в сыворотке и плазме крови человека. Антитела к Апо А1 при добавле
нии к пробам, содержащим Апо А1, образуют нерастворимые комплексы. Эти комплексы вызывают
изменение абсорбции пропорционально концентрации Апо А1 в пробе пациента. Расчет производит
ся с помощью построения многоточечной калибровочной кривой по нескольким калибраторам
КЛИНИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ
Апо А1 “ это основной стру1стурный аполипопротеин в ЛПВП (липопротеинах высокой плотности), и
составляет окло 70% всего белка. Апо А1 - это кофактор для лецитин-холестерин-ацилтрансферазы
(ЛХАТ), фермента отвечающего за формирование эфиров холестерина в плазме и играет важную
роль в транспорте холестерина из периферических тканей в печень для финальной экскреции. Изме
рение концентрации Апо А1 особенно важно пр определении риск заболеваний коронарных сосудов
сердца (ЗКСС), а также диагностике гиперлипопротеинемии, Концентрации <120 мг/дл () ассоцииру
ются с повышенным риском ЗКСС, тогда как концентрации si60 мг/дл могут защищать от такого рис
ка. Пациенты с дефицитом синтеза Апо А1 могут иметь высокий риск развития ЗКСС, Болезнь Танже
ра, развивающаяся вследствие дефекта катаболизма Апо А1, характеризуется тяжелым снижением
концентрации холестерина ЛПВП (хсЛПВП) в плазме, абнормальным строением ЛПВП и накоплением
фиров холестерина в основных тканях организма. Концентрации в плазме хсЛПВП и Апо А1 у гомози
гот очень низкие, Апо А2 менее 10% от нормальной концентрации. Гетерозиготы характеризуются по
ловинными от нормальных концентрациями хсЛПВП, Апо А1 и Апо А2. Современные исследования
показывают, что такие пациенты имеют повышенный риск ЗКСС.
СОСТАВ НАБОРА
R1 ДИЛЮвИТ ТРИС-буфер 100 ммоль/л, ПЭГ 4000, pH 7,2. Азид натрия 0,95 г/л.
R2 антитела Козья сыворотка, Антитела к человеческому аполипопротеину А1, pH 7 2. Азид
натрия 0,95 г/л.
Дополнительно: Калибратор аполипопротеинов (АРО CAL), кат.№ 1004011.
не входит в набор
КАЛИБРОВКА
Тест и значение калибратора были стандартизованы по Certified Reference Material WHO/IFCC SP1-01
(CDC, USA). Для калибровки рекомендуется использовать Калибратор АРО CAL, кат.№ 1004011.
ПОДГОТОВКА
Реагенты: готовы к использованию.
Калибровочная кривая; Подготовьте следующие разведения калибратора протеинов в физрастворе
(NaCI 9г/л). Умножьте концентрацию Апо А1 в калибраторе на соответствующий коэффициент, при
веденный в таблице, для получения концентрации Апо А1 каждого разведения.
Стандарты (разведения) 1 / % 2 'ч 3 г ^ 4 5
Калибратор (мкл) 50 100 100 100 100
(1-го раза.) (2-го разв.) (3-го раза.)
NaCI 9г/л (мкл) 300 100 100 100 —
Концентрация 3 1,5 0,75 0,37 0
Концентрация калибратора указана в инструкции к калибратору АРО СА
ХРАНЕНИЕ И СТАБИЛЬНОСТЬ
Все компоненты набора стабильны вплоть до указанной на этикетке даты (Expiration Date) при хране
нии в плотно закрытом флаконе при 2-8°С с предотвращением контаминации при использовании. Не
используйте реагенты после окончания срока годности.
Набор непригоден для использования при наличии частиц или мутности.
Не замораживайте, замороженные антитела или дилюент могут изменять функциональную актив
ность.
ДОПОЛНИТЕЛЬНОЕ ОБОРУДОВАНИЕ
Термостат с 37“С.
Спектрофотометр или термостатируемый анализатор (37“С) с фильтром 340нм.
ПРОБЫ
Свежая сыворотка или плазма. В качестве антикоагулянтов должны быть использованы гепарин или
ЭДТА. Стабильность 2 недели при 2-8“С или 3 месяца при -20“С. Пробы с фибрином должны быть
центрифугированы перед тестированием. Не используйте гемолизированные или липемические про
бы.
ПРОЦЕДУРА
1. Условия теста;
Длина волны: 340 нм
Температура: 37Х.
Оптический путь; 1см
Бланк: по рабочему реагенту
Метод: по конечной точке по многоточечной калибровке,
время инкубации (ЗУ^С) 10 минут.
2. Установите прибор на ноль по дистиллированной воде.
3. Разведите антисыворотку (R2) 1:41 буфером (R1). Рабочий реагент стабилен 2 недели при 2-8°С.
4. Разведите пробы и контроли 1:21 физраствором (NaCI 9 г/л).
5. Отдозируйте в кюветы:______
Метод Микрометод ChemWell
Рабочий реагент (R1+2) 1000 мкл 500 мкл 200 мкл
(мкл)
Калибраторы (мкл) 20 мкл 10 мкл 4 мкл
Проба (мкл) 20 мкл 10 мкл 4 мкл
6. Перемешайте, инкубируйте при 37°С 10 минут. Измерьте абсорбцию (А) при 340 нм.
Реагенты могут быть ислользованы с различными автоматическими биохимическими анализаторами
или в ручных процедурах на фотометрах с подходящей длиной волны. У Spin react есть адаптации к
различным автоматическим анализаторам, которые доступны по запросу.
РАСЧЕТЫ ^
Рассчитайте абсорбцию (А) для каждой точки калибровочной кривой (каждого стандарта) и постройте
калибровочную кривую зависимости концентрации ка>кдого стандарта от его абсорбции. Концентра
ция Апо А1 в пробе рассчитывается интерполяцией ее А к калибровочной кривой.
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
Для контроля характеристик ручных и автоматических процедур рекомендуется использовать кон
троль аполипопротеинов Spinreact {кат,№: 1104012). Каждая лаборатория должна представить свою
собственную схему контроля качества и действия по исправлению, если контроли вне приемлемых
диапазонов.
РЕФЕРЕНТНЫЕ ВЕЛИЧИНЫ^
122 -161 мг/дл. Каждая лаборатория должна представить свой рефереисный диапазон.
ХАРАКТЕРИСТИКИ ТЕСТА
1. Линейность, до 600 мг/дп (Примечание 1), при описанных выше условиях. Пробы с большими
концентрациями должны быть разведены 1/5 физраствором (NaCl 9г/л) и тестированы повторно,
результат умножить на 5. Предел линейности зависит от соотношения проба/реагент. Он будет
повышаться при снижения объема сыворотки, при этом также будет пропорционально снижаться
чувствительность.
2. Определяемый уровень. Значения ниже 20 мг/дл дают невоспроизводимые результаты.
3. Воспроизводимость:
Внутри серии тестов (п=10) Между сериями тестов {л=10)
Среднее (мг/дл)
SD
CV%
А. Правильность: результаты, полученные с помощью этого теста (у) при сравнении с другими, по
лученными с использованием коммерческих реагентов (х) с похожими характеристиками, не да
вали систематических различий. Результаты обследования 50 пациентов в диапазоне Апо А1 60-
180 мг/дл были следующими: Коэффициент корреляции: (г) 0,956. Уравнение регрессии:
у=0,9997х+ 1,7.
Результаты характеристик теста зависят от используемого анализатора.
ИНТЕРФЕРЕНЦИИ
Не наблюдается интерференции с гемоглобином (до 0,5 г/л), билирубином (до 40 мг/дл) и липидами
(до 20 г/л). Другие вещества могут оказывать влияние®’^.
ПРИМЕЧАНИЯ
4. Линейность зависит от концентрации калибратора.
5. Клинический диагноз не должен ставиться по результатам одиночного теста; он должен быть ос
нован на совокупности клинических и других лабораторных данных.
ЛИТЕРАТУРА:
1. Clinical Guide to Laboratory Tests, Edited by NWTietz W В Saunders Co., Phipiadelphia, 483, 1983.
2. Mahiey RWet al. J Lipids Res 1984; 25; 1277-1294.
3. Rifai N Arch Pathol Lab Med 1986:110: 694-701.
4. Freedman DS et ai. N Eng J Med 1986; 315: 721-726.
5. Sakurabayashi I et at. Clinica Chimica Acta 2001; 312: 87-95.
6. Young DS.Effects of disease on clinical laboratory tests, 3th ed. AACC Pres, 1997.
7. Friednnan and Young. Effects of disease on clinical laboratory tests, 3tn ed. AACC Pres, 1997.
АПОЛИПОПРОТЕИН В (APOLIPOPROTEIN В (АРО-В)) 1003011
Иммунотурбидиметричвский метод для определения аполипопротеина В в сыворотке.
IVD (для диагностики in vitro)______________________________________________________Хранить при 2-8°С.
Код: 1Q03011 1 X 80 мл буфер, 1x2 мл антисыворотка
ПРИНЦИП МЕТОДА
Тест на апол и по протеин В - это количественный иммунотурбидиметричвский тест для определения
аполипопротеина В (Апо В) в сыворотке и плазме человека. Антитела к Апо В при добавлении к про
бам, содержащим Апо А1, образуют нерастворимые комплексы, Эти комплексы вызывают изменение
абсорбции пропорционально концентрации Апо В в пробе пациента. Расчет производится с помощью
построения многоточечной калибровочной кривой по нескольким калибраторам.
КЛИНИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ
Апо В - это основной структурный аполипопротеин в ЛПОНП (липопротеинах очень низкой плотно
сти), ЛПНП ((липопротеинах низкой плотности)) и хиломикронах. Наиболее важная его функция -
транспорт богатых триглицеридами пипопротеинов из печени и кишечника в другие ткани. Апо В су
ществует в двух формах: Апо В-100 и Апо В-48. Апо В-100 наиболее важный компонент ЛПНП, он
синтезируется в печени и выделяется в плазму как часть ЛПОНП. Апо В-48 наиболее важный компо
нент хиломикронов, он синтезируется в кишечнике. Некоторые исследования демонстрируют, что лю
ди с заболеваниями коронарных сосудов сердца (ЗКСС) имеют изменения в сывороточных концен
трациях Апо А1 и АпоВ аналогично изменениям в ЛПВП и ЛПНП соответственно и поэтому отчасти
являются лучшими дискриминаторами для пациентов с ЗКСС, чем концентрации холестерина ЛПВП и
ЛПНП. Гипербеталипопротеинемия характеризуется повышенными концентрациями ЛПНП Апо В-100
с нормальным или слегка повышенными концентрациями холестерина ЛПНП. Отношение хсЛПНП к
Апо В-100 поэтому у таких пациентов снижается. Дефекты в структуре Апо В или пипопротеинов, со
держащих Апо В, препятствует секреции кишечных или печеночных липопротеинов, богатых тригли
церидами. Это расстройство развивается при абеталипопротеинемии или гомозиготной гипобетали-
попротеинемии.
СОСТАВ НАБОРА
R1 ДИЛЮент ТРИС-буфер 100 ммоль/л, ПЭГ 4000, pH 7,2. Азид натрия 0,95 г/л.
R2 антитела Козья сыворотка. Антитела к человеческому аполипопротеину А1, pH 7.2. Азид
натрия 0,95 г/л.
Дополнительно: Калибратор аполипопротеинов (АРО CAL), кат.№ 1004011.
не входит в набор
КАЛИБРОВКА
Тест и значение калибратора были стандартизованы по Certified Reference Material WHO/IFCC SP1-01
(CDC, USA). Для калибровки рекомендуется использовать Калибратор АРО CAL, кат.№ 1004011.
ПОДГОТОВКА
Реагенты: готовы к использованию.
Калибровочная кривая; Подготовьте следующие разведения калибратора протеинов в физрастворе
(NaCI 9г/л). Умножьте концентрацию Апо В в калибраторе на соответствующий коэффициент, приве
денный в таблице, для получения концентрации Апо В каждого разведения.
1 7 V2
Стандарты (разведения) / ' 3 / 1 ^ 4 5
100
Калибратор (мкл) 100 100 100 100
(1-го разв.) (2-го разв.) (3-го разв.)
NaCi 9г/л (мкл) 400 100 100 100 -
Концентрация 3 1.5 0,75 0,37 0
Концентрация калибратора указана в инструкции к калибратору АРО СА
ХРАНЕНИЕ И СТАБИЛЬНОСТЬ
Все компоненты набора стабильны вплоть до указанной на этикетке даты (Expiration Date) при хране
нии в плотно закрытом флаконе при 2>8°С с предотвращением контаминации при использовании. Не
используйте реагенты после окончания срока годности.
Набор не пригоден к использованию при наличии частиц или мутности.
Не замораживайте, замороженные антитела или дилюент могут изменять функциональную актив
ность.
ДОПОЛНИТЕЛЬНОЕ ОБОРУДОВАНИЕ
Термостат с 37°С.
Спектрофотометр или термостатируемый анализатор (37“С) с фильтром 340нм.
ПРОБЫ
Свежие сыворотка или плазма. В качестве антикоагулянтов должны быть использованы гепарин или
ЭДТА. Стабильность 2 недели при 2-8“С или 3 месяца при ~20°С. Пробы с фибрином должны быть
центрифугированы перед тестированием. Не используйте гемолизированные или липемические про
бы.
ПРОЦЕДУРА
1. Условия теста;
Температура: 37°С.
Оптический путь: 1см
Бланк: по рабочему реагенту
Метод: по конечной точке по многоточечной калибровке,
время инкубации (ЗУХ) 10 минут.
2. Установите прибор на ноль по дистиллированной воде.
3. Разведите антисыворотку (R2) 1:41 буфером (R1). Рабочий реагент стабилен 2 недели при 2-8Х.
4. Разведите пробы и контроли 1:15 физраствором (NaCt 9 г/л).
5. Отдозируйте в кюветы:______
Метод Микрометод ChennWell
Рабочий реагент (R1+2) 1000 мкл 500 мкл 200 мкл
(мкл)
Калибраторы (мкл) 100 мкл 50 мкл 20 мкл
Проба (мкл) 100 мкл 50 мкл 20 мкл
6. Перемешайте, инкубируйте при 37°С 10 минут, Измерьте абсорбцию (А) при 340 нм.
Реагенты могут быть использованы с различными автоматическими биохимическими анализаторами
или в ручных процедурах на фотометрах с подходящей длиной волны. У Spinreact есть адаптации к
различным автоматическим анализаторам, которые доступны по запросу.
РАСЧЕТЫ
Рассчитайте абсорбцию (А) для каждой точки калибровочной кривой (каждого стандарта) и постройте
калибровочную кривую зависимости концентрации каждого стандарта от его абсорбции. Концентра
ция АпоВ в пробе рассчитывается интерполяцией ее А к калибровочной кривой.
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
Для контроля характеристик ручных и автоматических процедур рекомендуется использовать кон
троль аполипопротеинов Spinreact (кат.№: 1104012). Каждая лаборатория должна представить свою
собственную схему контроля качества и действия по исправлению, если контроли вне приемлемых
диапазонов.
РЕФЕРЕНТНЫЕ ВЕЛИЧИНЫ^
69 -105 мг/дл. Каждая лаборатория должна представить свой референсный диапазон.
ХАРАКТЕРИСТИКИ ТЕСТА
1. Линейность, до 600 мг/дл (Примечание 1), при описанных выше условиях. Пробы с большими
концентрациями должны быть разведены 1/5 физраствором (NaCI 9г/л) и тестированы повторно,
результат умножить на 5, Предел линейности зависит от соотношения проба/реагент. Он будет
повышаться при снижения объема сыворотки, при этом также будет пропорционально снижаться
чувствительность.
2. Определяемый уровень. Значения ниже 20 мг/дл дают невоспроизводимые результаты.
3. Эффект прозоны: Нет эффекта прозоны до 280 мг/дл.
4. Чувствительность: 4.48 мА мг/дл (107 мг/дл).
5. Воспроизводимость:
........
Внутри серии тестов (n=10) Между сериями тестов (п=10)
Среднее (мгУдл)
SD
CV%
6. Правильность: результаты, полученные с помощью этого теста (у) при сравнении с другими, по
лученными с использованием коммерческих реагентов (х) с похожими характеристиками, не да
вали систематических различий. Результаты обследования 50 пациентов в диапазоне Апо В 40-
160 мг/дл были следующими: Коэффициент корреляции; (г) 0,98. Уравнение регрессии: у=0,927х +
5,96.
Результаты характеристик теста зависят от используемого анализатора.
ИНТЕРФЕРЕНЦИИ
Не наблюдается интерференции с гемоглобином (до 0,5 г/л), билирубином (до 40 мг/дл) и липидами
(до 20 г/л). Другие вещества могут влиять®'^.
ПРИМЕЧАНИЯ
Линейность зависит от концентрации калибратора.
Клинический диагноз не должен ставиться по результатам одиночного теста; он должен быть основан
на совокупности клинических и других лабораторных данных.
ЛИТЕРАТУРА:
1. Clinical Guide to Laboratory Tests, Edited by NW Tietz W В Saunders Co., Phiptadelphia, 483,1983.
2. Mahley RW at al. J Lipids Res 1984; 25; 1277-1294.
3. Brown MS at al. Science 1986; 232:34-47.
4. Freedman DS et al. N Eng J Med 1986; 315; 721-726.
5. Sakurabayashi I at al. Clinica Ctiimica Acta 2001; 312: 87-95.
6. Young DS.Effects of disease on clinical laboratory tests, 3th ed. AACC Pres, 1997.
7. Friedman and Young. Effects of disease on clinical laboratory tests, 3tn ed. AACC Pres, 1997.
АЛТ (ALT (GPT)) 41280, 41282
Аланинаминотрансфераза АЛТ (К. Ф. 2.6.1.1). УФ-кииетический метод измерения в ультрафиолете
по рекомендации МФКХ (IFCC). Жидкий реагент.
IVP (для диагностики in vitro)___________________________________________________ Хранить при 2-8°С.
Код: 41280 R1 60мл + R2 15мл Код: 41282 R1 240мл + R2 60мл __________________________
ПРИНЦИП МЕТОДА
Аланинаминотрансфераза (AJ1T-ALT) или глутаматпируваттрансаминаза (ГПТ-GPT) катализирует
обратимый перенос аминогруппы от аланина к а>кетоглютарату с образованием глютамата и пирува-
та. Образующийся пируват редуцируется в ла1ггат лактатдегидрогеназой и NADH.
АЛТ
L-аланин + а-кетоглютарат < > L-глютамат + пируват
Пируват + NADH + лактат + NAD^
Скорость снижения концентрации NADH, измеряемая фотометрически при 340 нм, прямо пропорцио
нальна каталитической активности (концентрации) АЛТ, присутствующей в пробе\
КЛИНИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ
Аланинаминотрансфераза - это клеточный фермент, представленный в высокой концентрации в пе
чени и почках. Повышенные уровни наблюдаются при заболеваниях печени, таких как гепатиты, бо
лезнях скелетной мускулатуры и травмах, но наибольшее применение тест получил в диагностике за
болеваний печени. При использовании совместно с ACT помогает в диагностике инфаркта миокарда,
при этом значения АЛТ остаются в нормальных пределах, а уровни ACT повышены^
Клинический диагноз не может быть поставлен по результату одного теста, он должен определяться
w по совокупности клинических и других лабораторных данных.
СОСТАВ НАБОРА
Реагент 1 R1 ТРИС>буфер (pH 7,8) 100 ммоль/л
Буфер Лактат дегидрогеназа (ЛДГ-LDH) 1200 Е/л
L-аланин 500 ммоль/л
Реагент 2 R2 NADH 0,18 ммоль/л
Субстрат а-кетоглютарат 15 ммоль/л
ПОДГОТОВКА
Рабочий реагент (R1+R2);
Смешайте один 4 объема буфера (R1) с 1 объемом cy6cTpaTa(R2).
Разведенный реагент стабилен 72 часа при комнатной температуре (15-25'’С) и 21 дней при 2-8°С.
ХРАНЕНИЕ И СТАБИЛЬНОСТЬ
Все компоненты набора стабильны до указанной на упаковке даты (expiration date) в плотно закрытом
флаконе при г-В^С, в защищенном от света месте и с соблюдением правил, предотвращающих кон
таминацию при использовании. Не используйте таблетки субстрата, если они разрушены. Не исполь
зуйте реагенты после окончания срока годности.
Набор не пригоден к использованию при наличии;
■ частиц или мутности.
■ абсорбция бланка (А) при 340 нм <1,000,
ДОПОЛНИТЕЛЬНОЕ ОБОРУДОВАНИЕ
• Спектрофотометр и колориметр с фильтром 340 нм (или биохимический анализатор).
■ Термостат с температурой 25, 30 или 37“С (± 0,1°С) (или биохимический анализатор).
■ Соответствующие кюветы с оптическим путем 1,0 см,
■ Общее лабораторное оборудование.
ПРОБЫ
Сыворотка или плазма\ АЛТ стабильна а сыворотке при 2-8°С минимум 7 дней.
ПРОЦЕДУРА
1, Условия теста:
Длина волны 340 нм
Оптический путь 1 см
Температура 25, 30 или 37°С (Температура должна быть стабильной (±0,5°С))
Измерение против бланка по дистиллированной воде или воздуху,
1\Летод кинетика по фактору (-1750), время задержки 60 с, время реакции 180 с.
2. Настройте прибор на ноль по дистиллированной воде или воздуху.
3. Подогреть рабочий реагент и кюветы до нужной температуры (25/30/37°С). Пипетируйте в кювету
Полумикрометод Микрометод ChemWell
Проба 100 мкл 50 мкл 20 мкл
Рабочий реагент (R1+2) 1 мл 500 мкл 200 мкл
Windows XP
Microsofr _
Пробная страница печати
W in d o w s
поздравляем!
Если эти сведения удается прочитать, драйвер принтера RiCOH Aficio МР 2510 PCL
6 правильно установлен на V0STRO13-3b7a6a .
настройка драйвера принтера и порта.
Напечатано: 9:36:06 11.05.2010
имя компьютера: V0STR013-3B7A6A
имя принтера; RICOH Aficio МР 2510 PCL 6
модель принтера: RICOH Aficio МР 2510 PCL 6
Поддержка цвета: Нет
Порт(ы): IP_10.10.10.100
Формат данных: RAW
общий ресурс:
Размещение:
комментарий:
Драйвер: RIC652K.DLL
Файл справки: RIC652.HLP
Версия драйвера: 3.20
среда: Windows NT х8б
используемые драйвером файлы:
С:\WINDOWS\System32\spool\DRIVERS\W32X86\3\RIC652P.DLL СЗ.7.0, 0)
С:\WINDOWS\System32\spool\DRIVERS\W32X86\3\RIC652C.DLL Cl.9.О, 19)
с:\WINDOWS\System32\spool\DRIVERS\W32x86\3\RIC652L.DLL (3.2.0, 0)
с :\WINDOWS\5ystein32\spOol\DRIVERS\W32x86\3\RIC652X.DLL (4.1.4, 9 (. .))
с:\WIND0WS\System32\sp00l\DRIVERS\w32x86\3\RIC652s .DLL (3.0.0. 3)
с:\WIND0WS\System32\sp00l\DRIVERS\w32x86\3\RIC652:.DLL (2.2.0. 20)
C:\WINDOWS\SyStem32\spool\DRIVERS\W32x86\3\RIC652Q.EXE (2.2.0.20)
C:\WINDOWS\System32\spoo1\DRIVERS\W32X86\3\RIC652ZU.DLL (3.2.0.0)
с:\WINDOWS\System32\spoo1\DRIVERS\W32X86\3\RIC652ZK.DLL (3.2.0.0)
с :\WINDOWS\SyStem32\spool\DRIVERS\W32X86\3\RIC652WU.DLL (2.0.0.7)
С:\WlNDOWS\System32\spool\DRIVERS\W32X86\3\RIC652WK.DLL (2.0.0.7)
с:\WlNDOWS\Systeni32\spoo1 \DRIVERS\W32x86\3\RIC652PI.DLL (3.0.0.1)
C:\WINDOWS\System32\spOOl\DRIVERS\W32X86\3\RIC652SR.EXE (1, 1. О, 2)
с:\WlNDOWS\System32\spool\DRIVERS\w32x86\3\RIC652CF.DLL (1, 1, О, 2)
с:\WIND0WS\System32\sp00l\DRIVERS\W32x86\3\RIC652X.ЕХЕ (3.0.0 .5)
с : \WINDOW5\System32\spoo'l \DRIVERS\W32X86\3\RIC652BD . DLL (5. 1. 6, 0)
с :\WlNDOWS\System32\spool\DRIVERS\w32X86\3\TrackID.DLL (1, 0. 4, 2)
с:\WlNDOWS\System32\spool\DRIVERS\w32x86\3\TIBase64.dl1 (1, О, 1, 0)
С:\WlNDOWS\System32\spoo1\DRIVERS\w32x86\3\TIFmtA.dl1 (1. 0. 4, 0)
С:\WlNDOWS\System32\spool\DRIVER5\w32x86\3\RICJC32.dll (1. 6, 4, 0)
C:\WlNDOWS\System32\spool\DRIVERS\w32x86\3\3CUl.exe (1. 6, 4, 0)
Печать пробной страницы завершена.
4. Перемешать, инкубировать в течение 1 мин.
5. Измерить начальную оптическую плотность (А), затем измерять оптическую плотность каждую
минуту в течение 3-х мин.
6. Вычислить среднее изменение оптической плотности за минуту: дА/мин.
ВЫЧИСЛЕНИЕ
Рассчитать активность АЛТ в пробе, умножая ДА/мин на следующие величины (факторы);
(Е/л)= ДА/мин х-1750
Единицы: 1 международная единица (Е/л или U/L) - это количество фермента, которое трансформи
рует 1 мкмоль субстрата в минуту при стандартных условиях. Концентрация выражается в единицах
на литр пробы (Е/л).
Фактор для перевода международных единиц (Е/л) в единицы СИ (кат/л):
-3
1 Е/л = 16.67x10'® кат/л = 16.67 х 10 мккат/л; 1 мккат/л = 60 Е/л
Коэффициенты температурной конверсии
Температура Коэффициенты конверсии для
исследования 25’C 3Q“C 37“C
25“C 1.00 1.32 1.82
30“C 0.76 1.00 1.39
37“C 0.55 0.72 1.00
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
Рекомендуется использовать контрольную сыворотку с каждой серией тестов. Мы рекомендуем кон
трольные сыворотки SPINTROL Normal и Pathological (Кат.№ 1002120 и 1002210). Если значения кон-
тролей выходят за указанный диапазон, проверьте прибор, реагенты и технику выполнения. Каждая
лаборатория должна разработать собственную систему контроля качества и соответствующие дейст
вия, если контроли не показывают приемлемых результатов.
РЕФЕРЕНТНЫЕ ВЕЛИЧИНЫ
Температура исследования 25°С 30°С 37'’С
Мужчины, до 22 Е/л 29 Е/л 40 Е/л
Женщины, до 18 Е/л 22 Е/л 32 Е/л
У здоровых новорожденных исследования показывают референсный диапазон в два раза выше, чем
у взрослых, вследствие свойств гепатоцитов новорожденных. Эти значения снижаются до уровня
взрослых примерно к 3-х месячному возрасту. Эти значения приведены для ориентационных целей;
каждая лаборатория должна представить свои собственные значения референтного диапазона.
ХАРАКТЕРИСТИКИ ТЕСТА
Диапазон измерения, от определяемого уровня в 1,2 Е/л до предела линейности 262 Е/л.
Если полученные результаты превышают предел линейности, пробы следует разбавить 1:10 физрас
твором (9 г/л NaCI) и повторить исследование, полученный результат умножить на 10.
Воспроизводимость:
Внутри серии (n=20) Ме>кду сериями (n=20)
Среднее (U/L) 33.2 128 31.3 129
SD 1.00 1.47 0.94 1.57
CV {%) 3.02 1.14 3.00 1.22
Чувствительность: 1 Е/л = 0.00052 ДА/мин.
Правильность: Результаты, полученные с помощью реагентов SPINREACT (у) не показали система
тических различий при сравнении с другими коммерческими реагентами (х).
Результаты, полученные при обследовании 50 проб, были следующие:
Коэффициент корреляции (г): 0,9946. Уравнение регрессии. у=1.0081х + 0.3629.
Результаты оценки характеристик теста зависят от используемого анализатора.
ИНТЕРФЕРЕНЦИИ
Обычно используемые антикоагулянты, такие как гепарин, фториды, оксалаты и ЭДТА не влияют на
результаты. Гемолиз оказывает влияние на тесг\ Список лекарств и других веществ, влияющих на
определение АПТ, представлен Young et.al^ ^
ПРИМЕЧАНИЕ
Процедуры для некоторых автоматических анализаторов доступны по запросу.
ЛИТЕРАТУРА:
1. Murray R. Alanine aminotransferase. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V. Mosby Co. St Louis. Toronto. Princeton 1964; 1088-
1090.
2. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press, 1995.
3. Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001.
4. Burtts A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed fiACC 1999.
5. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed AACC 1995.
ACT (AST (GOT)) 1001160, 1001161, 1001162
Аспартатаминотрансфераза ACT(К.Ф. 2.6.1.1). УФ-кинвтический метод измерения в ультрафио
лете по рекомендации МФКХ (IFCC).
IVD (для диагностики in vitro)______________________________________________________Хранить при 2-6°С.
Код: 1001160 20х2мл Код: 1001161 10х15мл Код: 1001162 10х50мл__________________
ПРИНЦИП МЕТОДА
Аспартатаминотрансфераза (ACT-AST) или глутаматоксалоацетаттрансаминаза (ГОТ-СОТ) катали
зирует обратимый перенос аминогруппы от аспартата к а-кетоглютарату с образованием гл юта мата и
оксалоацетата. Образующийся оксалоацетат редуцируется в малат малатдегидрогеназой и NADH.
Аспартат + а-кетоглютарат —> L-глютамат + оксалоацетат
Оксалоацетат + NADH + > малат + NAD^
Скорость снижения концентрации NADH, измеряемая фотометрически при 340 нм, прямо пропорцио
нальна каталитической активности (концентрации) ACT, присутствующей в пробе\
КЛИНИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ
ACT - это клеточный фермент, представленный в высокой концентрации в сердечной мышце, клетках
печени, скелетной мускулатуры и в небольших количествах в других тканях. Хотя повышенные уровни
ACT в сыворотке не специфичны для заболеваний печени, он используется в основном для диагно
стики и верификации причин этих заболеваний вместе с другими ферментами, такими как АЛТ и ЩФ.
Также используется для контроля пациентов с инфарктом миокарда, заболеваниями скелетной мус
кулатуры и другими болезнями^ '*’®. Клинический диагноз не может быть поставлен по результату од
ного теста, он должен определяться по совокупности клинических и других лабораторных данных.
СОСТАВ НАБОРА
ТРИС-буфер (pH 7,8) 80 ммоль/л
L-аспартат 200 ммоль/л
NADH 0,18 ммоль/л
Лактатдегидрогеназа (ЛДГ-LDH) 800 Е/л
Малатдегидрогеназа (1У1ДГ-М0Н) 600 Е/л
а-кетоглютарат 12 ммоль/л
ПОДГОТОВКА
Рабочий реагент (R1+R2):
Код 1001160 - Развести одну таблетку в одном флаконе буфера Реагент 1.
Код 1001161 - Развести одну таблетку в 15 мл флаконе буфера Реагент 1.
Код 1001162 - Развести одну таблетку в одном флаконе (50мл) буфера Реагент 1.
Закрыть крышкой и тщательно перемешать до полного растворения содержимого.
Разведенный реагент стабилен 72 часа при комнатной температуре (15-25“С) и 21 дней при 2-0°С.
ХРАНЕНИЕ И СТАБИЛЬНОСТЬ
Все компоненты набора стабильны до указанной на упаковке даты (expiration date) в плотно закрытом
флаконе при 2-8“С, в защищенном от света месте и с соблюдением правил, предотвращающих кон
таминацию при использовании. Не используйте таблетки субстрата, если они разрушены. Не исполь
зуйте реагенты после окончания срока годности.
Набор непригоден для использования при;
■ Наличии частиц или мутности.
" абсорбции бланка (А) при 340 нм <1,000.
ДОПОЛНИТЕЛЬНОЕ ОБОРУДОВАНИЕ
• Спектрофотометр и колориметр с фильтром 340 нм (или биохимический анализатор).
■ Термостат с температурой 25, 30 или 37°С (± 0,1''С) (или биохимический анализатор).
■ Соответствующие кюветы с оптическим путем 1,0 см.
■ Общее лабораторное оборудование.
ПРОБЫ
Сыворотка или плазма^ ACT стабильна в сыворотке при 2-8°С минимум 7 дней.
ПРОЦЕДУРА
1. Условия теста:
Длина волны 340 нм
Оптический путь 1 см
Температура 25, 30 или 37“С (Температура должна быть стабильной (±0,5°С))
Измерение против бланка по дистиллированной воде или воздуху,
Метод кинетика по фактору (-1750), время задержки 60 с, время реакции 180 с.
2, Настройте прибор на ноль по дистиллированной воде или воздуху.
3. Подогреть рабочий реагент и кюветы до нужной температуры (25/30/37°С). Пипетируйте в кювету
непосредственно перед измерением:
ОБЩИЙ БЕЛОК в моче и цереброспинальной жидкости
(total protein in urine and cerebro-spinal fluid) TK1001025
Для количественного определения концентрации общего белка в моче и цереброспинальной жид
кости. Метод с пирогаллол-красным
IVD (для диагностики in vitro)______________________________________________________Хранить при 2-8°С.
Код:ТК1001025 10x40 мл_____________________________________________________________________
ПРИНЦИП МЕТОДА
Белок в кислой среде реагирует с пирогаллолом красным и молибдатом, формируя красный ком
плекс. Оптическая плотность образующегося комплекса пропорциональна концентрации белка в про-
бе^'^
КЛИНИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ
У здоровых людей в моче не содержится белка или обнаруживаются только его следы; так как в нор
ме клубочки препятствуют прохождения белка из крови при клубочковой фильтрации. Повреждения
клубочкового аппарата вызывают повышение проницаемости для белков плазмы, что ведет к протеи-
нурии, т.е. присутствию белка в моче, Постоянное обнаружение протеинурии - это наиболее важный
индикатор заболевания почек. Повышенная концентрация белка в спинномозговой жидкости (СМЖ)
может вызываться инфекциями и внутричерепным давлением^'®'®.
Клинический диагноз не должен ставиться по результатам одиночного теста; он должен быть основан
на совокупности клинических и других лабораторных данных.
СОСТАВ НАБОРА
Реагент Пирогаллол-красный pH 2,5 50 ммоль/л
Молибдат натрия 0,04 ммоль/л
ПОДГОТОВКА
Реагент готов к использованию.
ХРАНЕНИЕ И СТАБИЛЬНОСТЬ
Все компоненты набора стабильны вплоть до указанной на упаковке даты (Expiration Date) в плотно
закрытых флаконах при 2-8®С. Избегать прямого солнечного света и контаминации при использова
нии. Не используйте реагенты после окончания срока хранения.
Набор не пригоден к использованию при;
• наличие частиц и мутности;
• абсорбция бланка (А) при 600 нм а0,300.
ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ КОМПОНЕНТЫ
• Автоматический биохимический анализатор Sapphire 400.
• Обычное лабораторное оборудование.
ПРОБЫ
■ 1\У1оча, за 24 часа. Стабильность 8 дней при 2-8°С,
■ Цереброспинальная жидкость. Стабильность 4 дня при 2-8°С.
РЕФЕРЕНТНЫЕ ВЕЛИЧИНЫ®
Моча: <100 мг/24ч (<150 мг/24ч у беременных)^ (<0,100 г/24ч (<0,150 г/24ч у беременных))
СМЖ: Дети 300-1000 мг/л (0,300-1,000 г/л) Взрослые: 150^50 мг/л (0,150-0,450 г/л)
Эти значения даны для ориентировочных целей, каждая лаборатория должна определять собствен
ный референсный диапазон.
ПРИМЕНЕНИЕ НА АНАЛИЗАТОРЕ SAPPHIRE 400
Item Name PTOR
DATA INFORMATION CALIBRATION
Units mg/L Type [Linear]
Decimals 0 Standard
#1 [ * ] #4
ANALYSIS #2 #5
Type END #3 #6
Main W. Length 1 600 NORMAL RANGE
SubW. Length 2 [ ] MALE FEMALE
Method Colorimetric LOW HIGH LOW HIGH
SERUM [ 1 - [ ] [ ] - [ ]
CORR. URINE (24h) - 100 - 100
SLOPE INTER PLASMA
1.000 X + 0 150 - 450
§i/lysis
OTHER
Item Name PTOR
ASPIRATION DATA PROCESS ABSORBANCE LIMIT
KIND Single Double READ LOW -0,1
START END- HIGH 3,000
VOLUME MAIN 52 54
SAMPLE 5 |jL SUB
REAGENT 1 250 |jL ENDPOINT LIMIT
REAGENT 2 ML LINEAR CHECK {%)
FACTOR
Third mix ^ OFF ON
Blank Correction 1,000
R1 Blank Water R1- B
PROZONE CHECK
MONITOR START END LIMIT (%)
0 LEVEL POINT 1 FIRST
SPAN 3,000
SECOND Low High
THIRD Low High
Измерение бланка (Параметр Blank) должно выполняться для получения хороших результатов ка
либровки (Окно CALIBRATION). Этот параметр калибровки стабилен до 40 дней.
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
Для калибровки необходимо использовать калибратор протеина в моче (кат.№ 1002450).
Каждая лаборатория должна определять собственную систему ведения контроля качества и действий
для коррекции при выходе контроля за приемлемые границы.
ИНТЕРФЕРЕНЦИИ
Гемолиз^'^.
Список лекарств и других веществ, влияющих на определение белка, представлен в работах Young и
др."’''
ПРИМЕЧАНИЯ
1, Калибровка с водным стандартом может быть причиной систематической ошибки в автоматиче
ских процедурах. В этих случаях рекомендуется использовать калибратор на основе сыворотки,
2, Используйте чистые одноразовые наконечники для дозирующих пипеток.
ЛИТЕРАТУРА
1. Orsonneau JL et al. An improved Pyrogallol Red-Molybdate Method for Determining Total Urinary Protein, Clin Chem 1989 (35):
2233-2236.
2. Koller A, Total serum protein, Kaplan A et al. Clin Chem The C,V, Mosby Co. St Louis. Toronto. Princeton 1984; 1316-1324 and
418,
3. Young DS, Effects of drugs on Clinical Lab, Tests, 4th ed AACC Press, 1995.
4. Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001,
5. Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chennistry, 3rd ed AACC 1999.
6. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed AACC 1995.
ОБЩИЙ БЕЛОК (total protein) ТК 1001291
Биуретовый метод. Для количественного определения концентрации общего белка в сыворотке.
IVD (для диагностики in vitro)___________________________________________________Хранить при 2-8°С.
Код: ТК 1001291 10 х 40мл
ПРИНЦИП МЕТОДА
Белок реагирует в щелочной среде с раствором сульфата меди, содержащим тартрат (биуретовый
реагент), формируя фиолетово-голубой комплекс. Иодид включен как антиоксидант. Оптическая
плотность образующегося комплекса пропорциональна концентрации белка в пробе^Л
КЛИНИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ
Белки - это макромолекулярные органические соединения, широко представленные в организме. Они
действуют как структурные и транспортные элементы. Белки сыворотки разделяются на две фрак
ции: альбумин и глобулины. Определение общего белка используется в диагностике:
■ высокие уровни белков вызываются концентрацией крови вследствие дегидратации или повыше
ния концентрации специфических протеинов.
■ низкие уровни белков вызываются гемодилюцией вследствие нарушения синтеза или потери (как
при геморрагиях) или избыточного катаболизма белков*'^.
Клинический диагноз не должен ставиться по результатам одиночного теста; он должен быть основан
на совокупности клинических и других лабораторных данных.
СОСТАВ НАБОРА
Реагент калия-натрия тартрат 15 ммоль/л
биуретовый иодид натрия 100 ммоль/л
иодид калия 5 ммоль/л
сульфат меди (il) 19 ммоль/л
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЯ
Сульфат меди (II): Опасен для окружающей среды (N): R52/53: Вреден для водных организмов, может
быть причиной длительных неблагоприятных эффектов для водной среды.
S60: Этот материал и его контейнер должны утилизироваться как опасные отходы. S61: Избегайте
высвобождения в окружающую среду. Смотрите специальные инструкцию/данные по безопасности.
ПОДГОТОВКА
Реагенты готовы к использованию:
ХРАНЕНИЕ И СТАБИЛЬНОСТЬ РЕАКТИВОВ
Все компоненты набора стабильны вплоть до указанной на упаковке даты (Expiration Date) в плотно
закрытых флаконах при 2-8°С. Избегать прямого солнечного света и контаминации при использова
нии. Не используйте реагенты после окончания срока хранения.
Набор непригоден к использованию при:
■ наличии частиц и мутности;
■ абсорбции бланка (А) при 540 нм £ 0,220.
W
ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ КОМПОНЕНТЫ
■ Автоматический биохимический анализатор Sapphire 400.
■ Обычное лабораторное оборудование.
ПРОБЫ
Сыворотка или гепаринизированная плазма\ Стабильность белка в сыворотке 1 месяц при 2-8°С.
ПРИМЕНЕНИЕ НА АНАЛИЗАТОРЕ SAPPHIRE 400
Item Name Т.PRO
DATA INFORMATION CALIBRATION
Units Type [Linear]
g/L
Decimals 1 Standard
#1 [• ] #4
ANALYSIS #2 #5
Type END #3 #6
Main W, Length 1 546 NORMAL RANGE
Sub W. Length 2 I ] MALE FEMALE
Method Biuret LOW HIGH LOW HIGH
SERUM [66] - [83] [66] - [83]
CORR. URINE
SLOPE INTER PLASMA
1,000 X + 0
Df/lVSIS
OTHER
Item Name T.PRO
ASPIRATION DATA PROCESS ABSORBANCE LIMIT
KIND Single Double READ LOW -0,1
START END- HIGH 3,000
VOLUME MAIN 52 54
SAMPLE 6 \i\- SUB
REAGENT 1 240 mL ENDPOINT LIMIT
REAGENT 2 [ 1 ML LINEAR CHECK (%)
FACTOR
Third mix OFF ON
Blank Correction 1,000
R1 Blank Water R1-B
PROZONE CHECK
MONITOR START END LIMIT (%)
0 LEVEL POINT 1 FIRST
SPAN 3,000
SECOND Low High
THIRD ^ Low High
Измерение бланка (Параметр Blank) должно выполняться для получения хороших результатов ка
либровки (Окно CALIBRATION). Этот параметр калибровки стабилен до 40 дней.
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
Рекомендуется использовать контрол и с каждой серией проб, Для контроля могут быть использованы
нор1У1альные и патологические контрольные сыворотки 8Р1МТК01(кат.№ 1002120 и 1002210), Если
результаты контроля вне определенного диапазона, проверьте прибор, реагенты и калибратор. ^
Каждая лаборатория должна определять собственную систему ведения контроля качества и действий
для коррекции при выходе контроля за приемлемые границы,
РЕФЕРЕНТНЫЕ ВЕЛИЧИНЫ1
Сыворотка: Взрослые: 66 - 83 г/л (6,6 - 8,3 г/дл)
Новорожденные: 52-91 г/л (5,2-9,1 г/дл)
Эти значения даны для ориентировочных целей, каждая лаборатория должна определять собствен
ный референсный диапазон.
ИНТЕРФЕРЕНЦИИ
Интерференция с гемоглобином и липемическими сыворотками^'^.
Список лекарств и других веществ, влияющих на определение альбумина, представлен в работах
Young и др,^’ .
ПРИМЕЧАНИЯ
1, Калибровка с водным стандартом может быть причиной систематической ошибки в автоматиче
ских процедурах. В этих случаях рекомендуется использовать калибратор на основе сыворотки,
2. Используйте чистые одноразовые наконечники для дозирующих пипеток,
ЛИТЕРАТУРА
1, КоНег А, Total serum protein, Kaplan A et ai. Clin Chem The C,V, Mosby Co, St Louis, Toronto. Princeton 1984; 1316-1324 and
418,
2, Young DS, Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press, 1995, ^
3, Young DS, Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001. ^
4, Burtis A et al, Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999,
5, Tietz N W et ai. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed AACC 1995,
р-2-МИКРОГЛОБУЛИН (р-2-M icroglobulin) ТК1107030
Турбидиметрический тест для количественного определения р-2-микрогло6улина.
IVD (для диагностики in vitro)______________________________________________________Хранить при 2-8°С.
Код: ТК1107030 R1 буфер 2x25 мл, R2 латексный реагент 1x6 мл. калибратор 1x1 мл____________
ПРИНЦИП
Этот набор основан на иммунологической реакции между р-2-микроглобулином пробы и антителами к
человеческому р-2-микроглобулину, связанному с латексными частицами. Развивающаяся агглюти
нация изменяет оптическую плотность пропорционально концентрации р-2-микроглобулина в пробе,
которая определяется при сравнении с калибратором с известной концентрацией с использованием
метода по фиксированному отрезку времени.
КЛИНИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ
р-2-микроглобулин - это белок, локализующийся на поверхности человеческих лимфоцитов и других
ядерных клеток. Свободный р-2-микроглобулин фильтруется через клубочки и затем реабсорбирует-
ся в проксимальных канальцах. Повышенная секреция р-2-микроглобулина с мочой - чувствительный
индикатор почечной недостаточности. Кроме того, уровень р-2-микроглобулина в сыворотке исполь
зуется как маркер различных заболеваний, включая карциному, лимфоидные опухоли, ревматоидные
артриты и СПИД.
СОСТАВ НАБОРА
R1 Дилюент ТРИС буфер 20 ммоль/л, азид натрия 0,95 г/л, pH 8,2 2x25 мл
R2 Латексные частицы, покрытые антителами к р-2-м, pH 7.5, азид
латексный реагент натрия 0,95 г/л
Калибратор S-2-микроглобулина; человеческая сыворотка, кон-
I |_ 1ХТ МЛ
^ центрация рп- 2уч- м указана на флаконе.
Гне"°>оди” "нГб°ор) Контроль р-2-микроглобулина (1107034)__________________________________
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЯ
Компоненты человеческого происхождения при тестировании дали отрицательные результаты на
присутствие HBsAg, HCV и антител к HIV (1/2). Однако с ними необходимо обращаться как с потенци
ально инфекционно опасными.
КАЛИБРОВКА
Используйте калибратор р-2-микроглобул и на р2-т Са1 (1107032). Тест откалиброван по 1-му Между
народному Стандарту р-2-микроглобулина ВОЗ,
Калибровка стабильна до 1 месяца. Перекалибруйте, если результаты контроля входят за приемле
мый диапазон, при использовании нового набора с другим лотом и при юстировке анализатора,
ПОДГОТОВКА И СТАБИЛЬНОСТЬ РЕАГЕНТОВ
Рабочий реагент: Реагенты необходимо тщательно перемешивать перед каждым использованием.
Подготовить необходимое количество рабочего реагента следующим образом: 1 мл р-2-м латексного
W реагента (Реагент 2) + 9 мл буфера (Реагент 1). Стабильность 30 дней при хранении при 2-8°С. Не
замораживать, замороженные реагенты меняют функциональность теста.
Калибратор р-2-м:
Для сыворотки: разведите калибратор 1,0 мл дистиллированной воды. Стабильность 30 дней при
хранении при 2-8“С или 3 месяца при -20°С.
Для мочи: разведите приготовленный калибратор 1/6 физраствором 9 г/л NaCI (50 мкл калибратор +
250 мкл 9 г/л NaCI).
Все компоненты набора стабильны до указанной на упаковке даты при хранении при 2-8Х. Не ис
пользуйте реагенты после окончания срока хранения.
ДОПОЛНИТЕЛЬНОЕ ОБОРУДОВАНИЕ
■ Автоматический биохимический анализатор Sapphire 400.
■ Общее лабораторное оборудование.
ПРИМЕНЕНИЕ НА АНАЛИЗАТОРЕ SAPPHIRE 400
Item Name B2-MGL
DATA INFORMATION CALIBRATION
Units mg/L Type [Linear)
Decimals 1 Standard
#1 0.10X* #4 0.75 X*
ANALYSIS #2 0.25 X* #5 1.00 X •
Type RATE #3 0.50 X* #6
Main W. Length 1 545 NORMAL RANGE
Sub W. Length 2 MALE FEMALE
Method Turbidimetry LOW HIGH LOW HIGH
SERUM [1.0] - [3.0] [1.0] - [3.0]
CORR. URINE 0.1 0,3 0,1 - 0,3
SLOPE INTER PLASMA
1,000 X + 0 CSF
DIALYSIS
OTHER
Item Name B2-MGL
ASPIRATION DATA PROCESS ABSORBANCE LIMIT
KIND Single Double READ LOW -0.1
START END- HIGH 3.000
VOLUME MAIN 49 50
SAMPLE 9 ML SUB 30 31
REAGENT 1 240 UL ENDPOINT LIMIT
REAGENT 2 60 LINEAR CHECK (%) 90
FACTOR
Third mix ^ OFF ON Blank Correction 1.000
R1 Blani^ Water ^ R1- В
PROZONE CHECK
MONITOR START END LIMIT (%)
0 LEVEL POINT 1 FIRST
SPAN 3.000
SECOND Low High
THIRD ^ Low High
Измерение бланка (Параметр Blank) должно выполняться для получения хороших результатов ка
либровки (Окно CALIBRATION). Этот параметр калибровки стабилен до 30 дней.
ПРОБЫ
Саежая сыворотка. Стабильность 8 дней при 2-8®С или 3 месяца при -20°С.
Свежая моча. Доведите pH проб до 7-8 добавлением К2НРО4. Стабильность 2 дня при 2-8°С или 2
месяца при -20“С.
Сыворотка должна быть получена из полностью свернувшейся крови после центрифугирования, в
ней не должно быть частиц сгустков или следов фибрина. Не используйте гемолизированные или ли-
пемические пробы,
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
Рекомендуется использовать контрольную сыворотку для контроля ручных и автоматических мето
дов, Предлагается контроль р-2-микроглобулина (Spinreact p2-m control - кат. №1107034)
РЕФЕРЕНТНЫЕ ЗНАЧЕНИЯ ^
Сыворотка: в диапазоне 1,0 - 3,0 мг/л.
Моча\ в диапазоне 0,1 - 0,3 мг/л.
В каждой лаборатории необходимо устанавливать свой референсный диапазон.
ИНТЕРФЕРЕНЦИИЯ
Билирубин: до 20 мг/л, Гемоглобин: до 10 г/л, Липиды: до 10 г/л, Мочевина (моча): до 50 г/л. Мочевая
кислота (моча): до 20 г/л, и Глюкоза (моча): до 100 г/л не дают интерференцию,
ЛИТЕРАТУРА
1. Bhalla, R, В. et а1. Clinical Chemistry 1983; 29:1560,
2 Malaguarnera М et al. Digestive Diseases and Sciences 1997; 42: 762-766.
3. Chironna et al, Int J Clin Lab Rws 1994; 24: 90-93.
4. Wibell L et al. Nephron 1973; 10; 320-331.
5. Berggard В et al. Scand J Clin Lab Invest 1980; 40; 13-25.
6. Davey PGetal. Clin Chem 1982; 28/6: 1330-1333.
7. Young DS. Effects of drugs on clinical laboratory test, 4th ed, AACC Pres, 1995.
КАЛИБРАТОР Р-2-МИКРОГЛОБУЛИНА (Р-2-m icroglobulin calibrator) 1107032
Для калибровки методов определения р-2-микроглобулина
IVD (для диагностики in vitro)______________________________________________________Хранить при 2-8°С.
Код: 1107032_______1x1 мл_________________________________________________________________________
ХАРАКТЕРИСТИКА
Калибратор р-2-микроглобулина - лиофилизированная сыворотка человека, предназначена для ис
пользования в соответствии с инструкциями ктурбидиметрическим и нефелометрическим методам.
ПОДГОТОВКА И СТАБИЛЬНОСТЬ
Осторожно откройте флакон и введите 1 мл бидистиллированной воды. Закройте флакон, переме
шайте круговыми движениями без встряхивания.
Без разведения стабилен до указанной даты при 2-8°С, Стабильность после разведения 30 дней при
2-8°С.
Если необходимо хранить более продолжительное время, контроль можно разлить на порции и замо
розить при температуре -20'’С. После размораживания тщательно перемешать. Повторное замора
живание не допускается.
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЯ
В производстве использована сыворотка человека. Каждый донорский материал тестирован с ис
пользованием рекомендованных FDA методов, имеет отрицательный результат на HBsAg и не дает
реакции на антитела к ВИЧ.
АТТЕСТОВАННЫЕ ЗНАЧЕНИЯ
Концентрацию смотрите в инструкции, прилагаемой к каждой упаковке и на этикетке флакона (эти
значения могут отличаться в разных партиях (лотах)).
(5-2-микроглобулин 10,8 мг/л
КОНТРОЛЬ р-2-МИКРОГЛОБУЛИНА (р-2-m icroglobulin control) 1107034
Для контроля определения р-2-микроглобулина
iVD (для диагностики in vitro)______________________________________________________Хранить при 2-8°С.
Код: 1107034 1x2 мл_________________________________________________________________________
ХАРАКТЕРИСТИКА
Контроль р-2“Микроглобулина - лиофилизированная сыворотка человека, предназначена для контро
ля точности и правильности и должна быть использована в соответствии с инструкциями к турбиди-
метрическим и нефелометрическим методам.
ПОДГОТОВКА И СТАБИЛЬНОСТЬ
Осторожно откройте флакон и введите 1 мл бидистиллированной воды. Закройте флакон, переме
шайте круговыми движениями без встряхивания. Стабильность после разведения 30 дней при 2>8®С.
Если необходимо хранить более продолжительное время, контроль можно разлить на порции и замо
розить при температуре -20°С. После размораживания тщательно перемешать. Повторное замора
живание не допускается.
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЯ
В производстве этих материалов использована сыворотка человека. Каждый донорский материал
тестирован с использованием рекомендованных FDA методов, имеет отрицательный результат на
HBsAg и не дает реакции на антитела к ВИЧ.
АТТЕСТОВАННЫЕ ЗНАЧЕНИЯ
Значения компонентов смотрите в инструкциях, прилагаемых к каждой упаковке и на этикетке флако
на (эти значения могут отличаться в разных партиях).
Среднее Диапазон Единицы
р-2-микроглобулин 1,95 (1,7-2,2) мг/л
БИЛИРУБИН ОБЩИЙ (Billirubin total) 1001042
Колориметрический метод с использованием ДМСО для определения общего билирубина.
IVD (для диагностики in vitro) Хранить при 2-8°С.
Код: 1001042 R1 2х150мл, R2 1x10 мл
ПРИНЦИП МЕТОДА
Билирубин превращается в окрашенный азобилирубин в реакции с диазотизированной сульфанило-
вой кислотой (ДСК) и измеряется фотометрически. В сыворотке присутствуют две фракции билируби
на: билирубин-глюкоронид и свободный билирубин, слабо связанный с альбумином, только первый
напрямую реагирует в водном растворе (прямой билирубин), тогда как свободный билирубин требует
для реакции растворения с диметилсульфоксидом (DMSO) (непрямой билирубин). При определении
непрямого билирубина прямой также определяется, результат соответствует общему билирубину.
1/1нтенсивность окраски на длине волны 540 нм прямо пропорциональна концентрации общего били
рубина в пробе^ .
КЛИНИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ
Билирубин - это продукт разложения гемоглобина, растворим в воде. Он транспортируется из селе
зенки в печень и выводится с желчью. Гипербилирубинемия - это повышение концентрации билиру
бина в плазме. Причины гипербилирубинемии:
• общий билирубин: повышение гемолиза, генетические заболевания, желтуха новорожденных, не
эффективный эритропоэз и лекарства.
■ прямой билирубин: гепатохолестаз, генетические заболевания, повреждение гепатоцитов^'®'^.
Клинический диагноз не должен ставиться по результатам одиночного теста; он должен быть основан
на совокупности клинических и других лабораторных данных.
СОСТАВ НАБОРА
Реагент 1 (R1) Сульфаниловая кислота 30 ммоль/л
Общий билирубин Соляная кислота (HCI) 50 ммоль/л
Диметилсульфоксид (ДМСО) 7 моль/л
Реагент 2 (R2) Нитрит натрия 29 ммоль/л
Дополнительно Калибратор билирубина Кат.№ 1002250
(не входит в набор)
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЯ
R1/ RT: Коррозирующее вещество (С): R35: Может быть причиной тяжелых ожогов.
S26: В случае попадания в глаза немедленно промойте большим количеством воды и обратитесь за
медицинской помощью.
ПОДГОТОВКА
Все реактивы готовы к использованию.
ХРАНЕНИЕ И СТАБИЛЬНОСТЬ РЕАКТИВОВ
Все компоненты набора стабильны вплоть до указанной на упаковке даты (Expiration Date) в плотно
закрытых флаконах при 2-8°С. Избегать прямого солнечного света и контаминации прии спользова
нии. Не используйте реагенты после окончания срока хранения.
Набор не пригоден к использованию при наличии:
■ частиц и мутности;
• появлении окраски в реагенте 2.
ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ КОМПОНЕНТЫ
■ Спектрофотометр или биохимический анализатор с фильтром 555 нм.
■ Соответствующие кюветы с длиной оптического пути 1,0 см.
■ Обычное лабораторное оборудование,
ПРОБЫ
Сыворотка или плазма, без гемолиза\ Хранить в защищенном от света месте до начала определе
ния. Стабильность в пробе до 3 месяцев при -18.. -20°С, до 4 дней при 2-8“С и 1 день при 15-25®С.
ПРОЦЕДУРА
1. Условия теста:
Длина волны: 555 (530-580) нм
Оптический путь: 1 см
Температура: 15-25“С
Измерение: против бланка по каждой пробе.
Метод: по конечной точке по фактору (326,61) или по стандарту (...),
время инкубации точно 5 мин (15-25°С)
2. Установите прибор на ноль по дистиллированной воде.
3. Отдозируйте в кюветы:
Бланк Проба Бланк Проба
Реагент 1 1,5 мл 1,5 мл 750 мкл 750 мкл
Реагент 2 (нитритный) - 50 мкл - 25 мкл
КАЛИБРАТОР р-2-МИКРОГЛОБУЛИНА {Р-2-microglobulln calibrator) 1107032
Для калибровки методов определения р<2-микроглобулина
IVD (для диагностики in vitro) ________________________________________________Хранить при 2-8°С.
Код: 1107032_______1x1 мл_________________________________________________________________________
ХАРАКТЕРИСТИКА
Калибратор р-2-микроглобулина - лиофилиэированная сыворотка человека, предназначена для ис
пользования в соответствии с инструкциями к турбидиметрическим и нефелометрическим методам.
ПОДГОТОВКА И СТАБИЛЬНОСТЬ
Осторожно откройте флакон и введите 1 мл бидистиллированной воды. Закройте флакон, переме
шайте круговыми движениями без встряхивания.
Без разведения стабилен до указанной даты при 2-8“С. Стабильность после разведения 30 дней при
2-8°С.
Если необходимо хранить более продолжительное время, контроль можно разлить на порции и замо
розить при температуре -20‘’С. После размораживания тщательно перемешать. Повторное замора
живание не допускается.
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЯ
В производстве использована сыворотка человека. Каждый донорский материал тестирован с ис
пользованием рекомендованных FDA методов, имеет отрицательный результат на HBsAg и не дает
реакции на антитела к ВИЧ.
АТТЕСТОВАННЫЕ ЗНАЧЕНИЯ
Концентрацию смотрите в инструкции, прилагаемой к каждой упаковке и на этикетке флакона {эти
значения могут отличаться в разных партиях (лотах)).
КОНТРОЛЬ р-2-МИКРОГЛОБУЛИНА (р-2-m icroglobulin control) 1107034
Для контроля определения р-2-микроглобулина
tVD (для диагностики in vitro)______________________________________________________Хранить при 2-8°С.
Код: 1107034 1x2 мл________________________________________________________________________
ХАРАКТЕРИСТИКА
Контроль р-2-микроглобулина - лиофилиэированная сыворотка человека, предназначена для контро
ля точности и правильности и должна быть использована в соответствии с инструкциями к турбиди
метрическим и нефелометрическим методам,
ПОДГОТОВКА И СТАБИЛЬНОСТЬ
Осторожно откройте флакон и введите 1 мл бидистиллированной воды. Закройте флакон, переме
шайте круговыми движениями без встряхивания. Стабильность после разведения 30 дней при 2-8°С,
Если необходимо хранить более продолжительное время, контроль можно разлить на порции и замо
розить при температуре -20°С. После размораживания тщательно перемешать. Повторное замора
живание не допускается.
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЯ
В производстве этих материалов использована сыворотка человека. Каждый донорский материал
тестирован с использованием рекомендованных FDA методов, имеет отрицательный результат на
HBsAg и не дает реакции на антитела к ВИЧ,
АТТЕСТОВАННЫЕ ЗНАЧЕНИЯ
Значения компонентов смотрите в инструкциях, прилагаемых к каждой упаковке и на этикетке флако
на (эти значения могут отличаться в разных партиях).
Среднее Диапазон Единицы
р-2-микроглобулин 1,95 (1,7-2,2) мг/л
БИЛИРУБИН ОБЩИЙ (Billirubin total) 1001042
Колориметрический метод с использованием ДМСО для определения общего билирубина.
1VD (для диагностики in vitro) Хранить при 2-8°С.
Код; 1001042 R1 2х150мл, R2 1x10 мл
ПРИНЦИП МЕТОДА
Билирубин превращается в окрашенный аэобилирубин а реакции с диазотиэированной сульфанило-
вой кислотой (ДСК) и измеряется фотометрически. В сыворотке присутствуют две фракции билируби
на: билирубин-глюкоронид и свободный билирубин, слабо связанный с альбумином, только первый
напрямую реагирует в водном растворе (прямой билирубин), тогда как свободный билирубин требует
для реакции растворения с диметилсульфоксидом (DMSO) (непрямой билирубин). При определении
непрямого билирубина прямой также определяется, результат соответствует общему билирубину.
Интенсивность окраски на длине волны 540 нм прямо пропорциональна концентрации общего били
рубина в пробе^'^' .
КЛИНИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ
Билирубин - это продукт разложения гемоглобина, растворим в воде. Он транспортируется из селе
зенки в печень и выводится с желчью. Гипербилирубинемия - это повышение концентрации билиру
бина в плазме. Причины гипербилирубинемии;
■ общий билирубин: повышение гемолиза, генетические заболевания, желтуха новорожденных, не
эффективный эритропоэз и лекарства.
^ > прямой билирубин; гепатохолестаэ, генетические заболевания, повреждение гепатоцитов^ ® ^
Клинический диагноз не должен ставиться по результатам одиночного теста; он должен быть основан
на совокупности клинических и других лабораторных данных.
СОСТАВ НАБОРА
Реагент 1 (R1) Сульфаниловая кислота 30 ммоль/л
Общий билирубин Соляная кислота (HCI) 50 ммоль/л
Диметилсульфоксид (ДМСО) 7 моль/л
Реагент 2 (R2) Нитрит натрия 29 ммоль/л
Дополнительно Калибратор билирубина Кат.№ 1002250
(не входит в набор)
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЯ
R1/ RT: Коррозирующее вещество (С): R35: Может быть причиной тяжелых ожогов.
S26: В случае попадания в глаза немедленно промойте большим количеством воды и обратитесь за
медицинской помощью.
ПОДГОТОВКА
Все реактивы готовы к использованию.
ХРАНЕНИЕ И СТАБИЛЬНОСТЬ РЕАКТИВОВ
Все компоненты набора стабильны вплоть до указанной на упаковке даты (Expiration Date) в плотно
закрытых флаконах при 2-8°С. Избегать прямого солнечного света и контаминации при использова
нии. Не используйте реагенты после окончания срока хранения.
Набор не пригоден к использованию при наличии:
■ частиц и мутности;
■ появлении окраски в реагенте 2.
ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ КОМПОНЕНТЫ
■ Спектрофотометр или биохимический анализатор с фильтром 555 нм.
■ Соответствующие кюветы с длиной оптического пути 1,0 см.
■ Обычное лабораторное оборудование.
ПРОБЫ
Сыворотка или плазма, без гемолиза\ Хранить в защищенном от света месте до начала определе
ния. Стабильность в пробе до 3 месяцев при -18.. -20°С, до 4 дней при 2-8®С и 1 день при 15-25“С.
ПРОЦЕДУРА
1. Условия теста:
Длина волны: 555 (530-580) нм
Оптический путь: 1 см
Температура: 15-25° С
Измерение; против бланка по каждой пробе.
Метод: по конечной точке по фактору (326,61) или по стандарту (...),
время инкубации точно 5 мин (15-25°С)
2. Установите прибор на ноль по дистиллированной воде.
Бланк Проба Бланк Проба
Реагент 1 1,5 мл 1,5 мл 750 мкл 750 мкл
Реагент 2 (нитритный) - 50 мкл - 25 мкл
Проба 100 мкл 100 мкл 50 мкл 50 мкл
4, Перемешать, инкубировать точно 5 мин при комнатной температуре (15-25°С
5. Измерить оптическую плотность каждой пробы против собственного бланка при 555 нм (А).
ВЫЧИСЛЕНИЕ
С калибратором;
А пробы ~ А бланка пробы
С общего билирубина (мкмоль/л) = С калибратора
А калибратора - А бланка калибратора
По фактору:
Общий билирубин (мкмоль/л) = (А пробы - А бланка пробы) х 326,61
Коэффициент пересчета: мг/дл х 17.1 = мкмоль/л.
Для всех методик по конечной точке по фактору необходимо определять коэффициент (фактор) для
конкретного прибора по стандарту (калибратору), так как возможно различие в фильтрах, длине опти
ческого пути и т.д.
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
Рекомендуется использовать контрол и с каждой серией проб. Для контроля могут быть использованы
нормальные и патологические контрольные сыворотки SP!NTROL(KaT.№ 1002120 и 1002210). Если
результаты контроля вне определенного диапазона, проверьте прибор, реагенты и калибратор.
Каждая лаборатория должна определять собственную систему ведения контроля качества и действий
для коррекции при выходе контроля за приемлемые границы.
РЕФЕРЕНТНЫЕ ВЕЛИЧИНЫ^
Общий билирубин: до 18,81 мкмоль/л (до 1,10 мг/дл)
Эти значения даны для ориентировочных целей, каждая лаборатория должна определять собствен
ный референсный диапазон.
ХАРАКТЕРИСТИКИ ТЕСТА
Диапазон измерения: от уровня определения в 1,69 мкмоль/л (0,099 мг/дл) до предела линейности в
356,5 мкмоль/л (15 мг/дл). Если получаемые результаты выходят за предел линейности, разведите
пробы в два раза физраствором (NaCI 9 г/л) и умножьте результат на 2.
Внутри серии тестов (п=20) Между сериями тестов (п=20)
Среднее {мкмоль>/л} 1,12 5,36 1,01 5,28
SD 0,02 0,12 0,03 0,12
cv% 2,33 2,27 2,70 2,32
Чувствительность: 1 мг/дл = 0,0154 А.
Правильность: результаты, полученные с помощью этого теста (у) при сравнении с другими, полу
ченными с использованием коммерческих реагентов (х) с похожими характеристиками, не давали
систематических различий.
Результаты обследования 50 пациентов были следующими:
Коэффициент корреляции; (г) 0,996. Уравнение регрессии; у=0,9884х + 0,0208.
Результаты характеристик теста зависят от используемого анализатора.
ИНТЕРФЕРЕНЦИИ
Гемолиз вызывает повышение уровня билирубина^'^’^. Список лекарств и других веществ, влияющих
на определение билирубина, представлен в работах Young и др."*'®.
ПРИМЕЧАНИЯ
1. При определении билирубина у новорожденных, для пробы дозируйте 50 мкл сыворотки. Умножь
те результат на 2,2.
2 У SPINREACT есть адаптации инструкций для многих автоматических анализаторов. Инст
рукции для них доступны по запросу.
ЛИТЕРАТУРА:
1. Kaplan А et а1. Bilirubin. Clin Chem The C.V. Mosby Co. St Louis. Toronto. Princeton 1984; 1238-1241. 436 and 650.
2. Malloy H T. et al. The determination of bilirubin with the photoelectric colorinneter. J. Biol Chem 1937; 112, 2; 481*491.
3. Martinek R. Innproved micro-method for detemriination of serum bilirubin. Clin Chinn 1966: Acta 13: 61-170.
4. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4*'’ ed AACC Press, 1995.
5. Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001.
6. Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, ed AACC 1999.
7. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, ed AACC 1995.
БИЛИРУБИН ПРЯМОЙ (Biliirubin Direct) 1001043
Колориметрический метод с использованием ДМСО для определения прямого билирубина.
IVD (для диагностики in vitro) Хранить при 2-8°С.
Код: 1001043_________R1 2х150мл, R2 1x10 мл_____________________________________________________
ПРИНЦИП МЕТОДА
Билирубин превращается в окрашенный азобилирубин в реакции с диазотизированной сульфанило-
вой кислотой (ДСК) и измеряется фотометрически. В сыворотке присутствуют две фракции билируби
на; билирубин-глюкоронид и свободный билирубин, слабо связанный с альбумином, только первый
напрямую реагирует в водном растворе {прямой билирубин), тогда как свободный билирубин требует
для реакции растворения с диметилсульфоксидом (DMSO) (непрямой билирубин). При определении
непрямого билирубина прямой также определяется, результат соответствует общему билирубину.
Интенсивность окраски на длине волны 540 нм прямо пропорциональна концентрации общего били
рубина в пробе^’^' .
КЛИНИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ
Билирубин - это продукт разложения гемоглобина, растворим в воде. Он транспортируется из селе
зенки в печень и выводится с желчью. Гипербилирубинемия - это повышение концентрации билиру
бина в плазме. Причины гипербилирубинемии;
■ общий билирубин: повышение гемолиза, генетические заболевания, желтуха новорожденных, не
эффективный эритропоэз и лекарства.
■ прямой билирубин: гепатохолестаз, генетические заболевания, повреждение гепатоцитов^'® ^
Клинический диагноз не должен ставиться по результатам одиночного теста; он должен быть основан
на совокупности клинических и других лабораторных данных.
СОСТАВ НАБОРА
Реагент 1 (R1) Сульфаниловая кислота 30 ммоль/л
Соляная кислота (HCI) 150 ммоль/л
Реагент 2 (R2) Нитрит натрия 29 ммоль/л
Дополнительно Калибратор Кат.№ 1002011, 1002012
(не входит в набор)
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЯ
R1/ RT: Коррозирующее вещество (С): R35: Может быть причиной тяжелых ожогов.
S26: В случае попадания в глаза немедленно промойте большим количеством воды и обратитесь за
медицинской помощью.
ПОДГОТОВКА
Все реактивы готовы к использованию.
ХРАНЕНИЕ И СТАБИЛЬНОСТЬ РЕАКТИВОВ
Все компоненты набора стабильны вплоть до указанной на упаковке даты (Expiration Date) в плотно
закрытых флаконах при 2-8'"С. Избегать прямого солнечного света и контаминации прии спользова
нии. Не используйте реагенты после окончания срока хранения.
Набор не пригоден к использованию при:
■ наличии частиц и мутности;
■ появлении окраски в реагенте 2.
ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ КОМПОНЕНТЫ
■ Спектрофотометр или биохимический анализатор с фильтром 555 (630-580) нм.
■ Соответствующие кюветы с длиной оптического пути 1,0 см.
■ Обычное лабораторное оборудование.
ПРОБЫ
Сыворотка или плазма, без гемолиза\ Хранить в защищенном от света месте до начала определе
ния. Стабильность в пробе до 2 месяцев при -20°С, до 4 дней при 2-8Х.
ПРОЦЕДУРА
1. Условия теста:
Длина волны: 555 (530-580) нм
Оптический путь: 1 см
Температура: 15-25°С
Измерение: против бланка по каждой пробе.
Метод: по конечной точке по фактору (239,4) или по стандарту (...),
время инкубации точно 5 мин (15-25“С)
2. Установите прибор на ноль по дистиллированной воде.
3. Отдозируйте в кюветы;
Бланк Проба Бланк Проба
Реагент 1_____________ 1,5 мл 1,5 мл 750 мкл 750 мкл
Реагент 2 (нитритный) 50 мкл 25 мкл
Проба (или калибратор) 100 мкл 100 мкл 50 мкл 50 мкл
4. Перемешать, инкубировать точно 5 мин при комнатной температуре (15-25°С).
5. Измерить оптическую плотность каждой пробы против собственного бланка при 555 нм (А).
ВЫЧИСЛЕНИЕ
С калибратором:
А пробы - А бланка пробы
С прямого билирубина (мкмоль/л) = С калибратора х ~
А калибратора - А бланка калибратора
По фактору;
Прямой билирубин (мкмоль/л) = (А пробы - А бланка пробы) х 239,4
Коэффициент пересчета: мг/дл х 17,1 = мкмоль/л.
Для всех методик по конечной точке по фактору необходимо определять коэффициент (фактор) для
конкретного прибора по стандарту (калибратору), так как возможно различие в фильтрах, длине опти
ческого пути и т.д.
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
Рекомендуется использовать контрол и с каждой серией проб. Для контроля могут быть использованы
нормальные и патологические контрольные сыворотки SPINTROL(Kar.№ 1002120 и 1002210). Если
результаты контроля вне определенного диапазона, проверьте прибор, реагенты и калибратор.
Каждая лаборатория должна определять собственную систему ведения контроля качества и действий
для коррекции при выходе контроля за приемлемые границы.
РЕФЕРЕНТНЫЕ ВЕЛИЧИНЫ1
Прямой билирубин: до 4,27 мкмоль/л (до 0,25 мг/дл)
Эти значения даны для ориентировочных целей, каждая лаборатория должна определять собствен
ный референсный диапазон.
ХАРАКТЕРИСТИКИ ТЕСТА
Диапазон измерения: от уровня определения в 0,68 мкмоль/л (0,04 мг/дл) до предела линейности в
427,5 мкмоль/л (25 мг/дл). Если получаемые результаты выходят за предел линейности, разведите
пробы в два раза физраствором (NaCI 9 г/л) и умножьте результат на 2.
Воспроизв одимость:
Внутри серии тестоа (n=20) Между сериями тестов (п=20)
Среднее (мкмоль/л) 0,64 2,28 0,68 2,53
SD 0,01 0,02 0,02 0,05
cv% 1,91 1,10 2,70 1,95
Чувствительность: 1 мг/дл = 0,073 А.
Правильность, результаты, полученные с помощью этого теста (у) при сравнении с другими, полу
ченными с использованием коммерческих реагентов (х) с похожими характеристиками, не давали
систематических различий.
Результаты обследования 50 пациентов были следующими:
Коэффициент корреляции: (г) 0,99. Уравнение регрессии: у=0,9933х + 0,0039.
Результаты характеристик теста зависят от используемого анализатора.
ИНТЕРФЕРЕНЦИИ
Гемолиз вызывает повышение уровня билирубина^Список лекарств и других веществ, влияющих
на определение билирубина, представлен в работах Young и др.'* ^
ПРИМЕЧАНИЯ
1. При определении билирубина у новорожденных, для пробы дозируйте 50 мкл сыворотки. Умножь
те результат на 2,2.
2 У SPINREACT есть адаптации инструкций для многих автоматических анализаторов. Инст
рукции для них доступны по запросу.
ЛИТЕРАТУРА:
1. Kaplan А et а1. Bilirubin. Clin Chem The C.V. Mosby Co. St Louis. Toronto. Princeton 1984; 1230-1241. 436 and 650.
2. Malloy H T. et al. The determination of bilirubin with the photoelectric colorinneter. J. Biol Chem 1937; 112, 2; 481-491.
3. Martinek R. Improved micro-method fordetemiination of serum bilirubin. Clin Chim 1966: Acta 13: 61-170.
4. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4'*’ ed AACC Press, 1995.
5. Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001.
6. Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3"“ ed AACC 1999.
7. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3"^ ed /\ACC 1995.
БИЛИРУБИН ПРЯМОЙ и ОБЩИЙ (bilirubin direct and total) 1001041
Метод Ендрассика-Гоофа для количественного определения прямого и общего билирубина в сыво
ротке.
IVD (для диагностики in vitro)_____________________________________________________ Хранить при 2-8°С.
Код: 1001041_______R1 1x60 мл, R2 1х10мл, R3 1x150 мл________________________________________
ПРИНЦИП МЕТОДА
Билирубин превращается в окрашенный азобилирубин в реакции с диазотиэированной сульфанило-
вой кислотой (ДСК) и измеряется фотометрически. В сыворотке присутствуют две фракции билируби
на: билирубин-глюкоронид и свободный билирубин, слабо связанный с альбумином, только первый
напрямую реагирует в водном растворе (прямой билирубин), тогда как свободный билирубин требует
для реакции растворения с кофеином (непрямой билирубин). При определении непрямого билируби
на прямой также определяется, результат соответствует общему билирубину. Интенсивность окраски
на длине волны 540 нм прямо пропорциональна концентрации билирубина в пробе^'^'^,
КЛИНИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ
Билирубин - это продукт разложения гемоглобина, растворим в воде. Он транспортируется из селе
зенки в печень и выводится с желчью. Гипербилирубинемия - это повышение концентрации билиру
бина в плазме. Причины гипербилирубинемии;
• общий билирубин: повышение гемолиза, генетические заболевания, желтуха новорожденных, не
эффективный эритропоэз и лекарства.
■ прямой билирубин: гепатохолестаз, генетические заболевания, повреждение гепатоцитов^ ®'^.
Клинический диагноз не должен ставиться по результатам одиночного теста; он должен быть основан
на совокупности клинических и других лабораторных данных.
СОСТАВ НАБОРА
Реагент 1 (R1) Сульфаниловая кислота 30 ммоль/л
Общий билирубин Соляная кислота (HCI) 400 ммоль/л
Реагент 2 (R2) Нитрит натрия 50 ммоль/л
Реагент 3 (R3) Кофеин 100 ммоль/л
Дополнительно (не входит в набор) Калибратор билирубина Кат.№ 1002250
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЯ
R1/ RT: Коррозирующее вещество (С): R35: Может быть причиной тяжелых ожогов.
S26: В случае попадания в глаза немедленно промойте большим количеством воды и обратитесь за
медицинской помощью.
ПОДГОТОВКА
Все реактивы готовы к использованию.
ХРАНЕНИЕ И СТАБИЛЬНОСТЬ РЕАКТИВОВ
Все компоненты набора стабильны вплоть до указанной на упаковке даты (Expiration Date) в плотно
закрытых флаконах при 2-8°С. Избегать прямого солнечного света и контаминации при использова
нии. Не используйте реагенты после окончания срока хранения.
Набор не пригоден к использованию при:
■ наличии частиц и мутности;
■ появлении окраски в реагенте 2.
ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ КОМПОНЕНТЫ
■ Спектрофотометр или биохимический анализатор с фильтром 540 нм.
■ Соответствующие кюветы с длиной оптического пути 1,0 см.
■ Обычное лабораторное оборудование.
ПРОБЫ
Сыворотка или плазма, без гемолиза\ Хранить в защищенном от света месте до начала определе
ния. Стабильность в пробе до 3 месяцев при -18.. -20°С, до 4 дней при 2-8®С и 1 день при 15-25°С.
ПРОЦЕДУРА
1, Условия теста:
Длина волны: 540 нм
Оптический путь; 1 см
Температура: 15-25°С
Измерение: против бланка по каждой пробе.
Метод; по конечной точке по фактору (299,25) или по стандарту (...),
время инкубации точно 5 мин (15-25“С)
2. Установите прибор на ноль по дистиллированной воде.
3 Отдозируйте в кюветы:
ГАММА-ГЛУТАМИЛТРАНСФЕРАЗА (y-Glutamyl Transferase) 1001185,1001186,
1001187
Кинетический колориметрический метод (карбоксильный субстрат) для количественного опреде
ления активности гамма-глутамилтрансферазы в сыворотке.
IVD (для диагностики in vitro) Хранить при г-в^С.
КОД 1001185 20х2мл Код 1001186 10х15мл Код 1001187 10 x50 мл
ПРИНЦИП
Кинетическое определение а1сгивности гамма-глутамилтрансферазы в соответствии со следующей
схемой реакции;
у-ГТ
L-Y-глутамил-З-карбокси-р-нитроанилид + глицилглицин —'------->
->5-амино-2-нитробензоат + L-y-глутамилглицин
Изменение оптической плотности (повышение) при 405 нм пропорционально активности гамма-
глутамилтрансферазы.
СОСТАВ НАБОРА
Реагент 1 ТРИС буфер (pH 8,25) 100 ммоль/л
буфер
Реагент 2 Глицилглицин 100 ммоль/л
таблетки/порошок L-Y-глутамил-З-карбокси-р-нитроанилид 3 ммоль/л
ПОДГОТОВКА И СТАБИЛЬНОСТЬ РЕАГЕНТОВ
Код 1001185: Развести одну таблетку (Реагент 2) в одном флаконе буфера (Реагент 1).
Код 1001186: Развести одну таблетку (Реагент 2) в 15 мл буфера (Реагент 1).
Код 1001187: Развести одну таблетку (Реагент 2) в 50 мл буфера (Реагент 1), тщательно перемешать.
Рабочий реагент стабилен в течение 21 дня при 2-6“С или в течение 5 дней при комнатной темпера
туре.
ПРОБЫ
Только сыворотка. Не использовать плазму. Избегать гемолиза!
Активность фермента не уменьшается в течение 1 недели как при +4°С так и при 20-25°С.
ПРОЦЕДУРА
Длина волны 405 нм (400^20 нм)
Оптический путь 1 см
Температура 25°С, 30“С, 37"С
Измерение против воздуха, возрастание оптической плотности
Подогреть рабочий реагент и кюветы до нужной температуры. Закапать в кювету непосредственно
Полумикротест Микротест
Проба 100 мкл 50 мкл
Рабочий реагент 1 мл 0,5 мл
Перемешать, инкубировать 1 мин, измерить оптическую плотность и одновременно запустить секун- ^
домер. Измерить оптическую плотность ровно через 1, 2 и 3 минуты.
ВЫЧИСЛЕНИЕ
Вычислить среднее изменение оптической плотности за минуту (ДА/мин).
Е/л (25,30,37 °С) = ДА/мин х 1190
Фактор для перевода международных единиц (Е/л) в единицы СИ (кат/л)
1 Е/л = 16.67x10'® кат/л = 16.67 х 10 мккат/л 1 мккат/л = 60 Е/л
ЛИНЕЙНОСТЬ МЕТОДА
Метод линеен до 250 Е/л. Если активность в пробе превышает 250 Е/л, то ее необходимо развести
1:10 физраствором и повторить исследование, используя это разведение в качестве пробы. Получен
ный результат умножить на 10.
РЕФЕРЕНТНЫЕ ВЕЛИЧИНЫ
Температура исследования *'С 25'^С 30“С 37“С
Мужчины 6 - 28 Е/л 8 - 38 Е/л 11 -50 Е/л
Женщины 4-18 Е/л 5 - 25 Е/л 7-32 Е/л
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
Рекомендуется использовать контроли с каждой серией проб. Мы рекомендуем контрольные сыво
ротки SPINTROL Normal и Pathological.
ЛИТЕРАТУРА
Szasz, G., Persijn,.P.J. у cols. Z.CIin.Chem.Clln.Biochem. 12, 228 (1974).
4. Перемешать, инкубировать точно 5 мин при комнатной температуре (15-25®С).
5. Измерить оптическую плотность каждой пробы против собственного бланка при 540 нм (А).
ВЫЧИСЛЕНИЕ
С калибратором;
С общего билирубина (мкмоль/л) = С калибратора х ---------А пробы - А бланка пробы------------
А калибратора - А бланка калибратора
По фактору;
Общий билирубин (мкмоль/л) = (А пробы “ А бланка пробы) х 299,25
Коэффициент пересчета; мг/дл х 17.1 = мкмоль/л.
Для всех методик по конечной точке по фактору необходимо определять коэффициент (фактор) для
конкретного прибора по стандарту (калибратору), так как возможно различие в фильтрах, длине опти
ческого пути и т.д.
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
Рекомендуется использовать контроли с каяедой серией проб. Для контроля могут быть использованы
нормальные и патологические контрольные сыворотки SPINTROL (кат.№ 1002120 и 1002210). Если
результаты контроля вне определенного диапазона, проверьте прибор, реагенты и калибратор.
Каждая лаборатория должна определять собственную систему ведения контроля качества и действий
для коррекции при выходе контроля за приемлемые границы.
РЕФЕРЕНТНЫЕ ВЕЛИЧИНЫ
Общий билирубин: до 18,81 мкмоль/л (до 1,10 мг/дл)
Прямой билирубин: до 4,27 мкмоль/л (до 0,25 мг/дл)
Эти значения даны для ориентировочных целей, каждая лаборатория должна определять собствен
ный референсный диапазон.
ХАРАКТЕРИСТИКИ ТЕСТА
Диапазон измерения: от уровня определения в 1,71 мкмоль/л (0,1 мг/дл) до предела линейности в
342 мкмоль/л (20 мг/дл). Если получаемые результаты выходят за предел линейности, разведите
пробы в два раза физраствором (NaCI 9 г/л) и умножьте результат на 2.
Воспроизводимость:
Прямой билирубин: Внутри серии тестов (п=20) Между сериями тестов (п=20)
Среднее (мкмоль/л) 0,78 I 2,28 0,80 2,18
SD 0,01 0,01 0,01 0,03
CV% 1,28 0,65 1,63 1,53
Общий билирубин: Внутри серии тестов (п=20) Между сериями тестов (п=20)
Среднее (мкмоль/л) 1,16 4,21 1,15 4,27
SD 0,02 0,04 0,02 0,13
CV% 2,03 1,06 1,91 3,10
Чувствительность: Общий билирубин: 1 мг/дл = 0,079 А; Прямой билирубин: 1 мг/дл = 0,087 А.
Правильность: результаты, полученные с помощью этого теста (у) прис равнении с другими, полу
ченными с использованием коммерческих реагентов (х) с похожими характеристиками, не давали
систематических различий.
Результаты обследования 50 пациентов были следующими:
Прямой билирубин; (г) 0,99. Уравнение регрессии: у=0,9923х + 0,0048. ^
Общий билирубин: (г) 0,99. Уравнение регрессии: у=0,9832х + 0,0224.
Результаты характеристик теста зависят от используемого анализатора.
ИНТЕРФЕРЕНЦИИ
Гемолиз вызывает повышение уровня билирубина^'^'^. Список лекарств и других веществ, влияющих
на определение билирубина, представлен в работах Young и др.'^’®.
ПРИМЕЧАНИЯ
1. При определении билирубина у новорожденных, для пробы дозируйте 50 мкл сыворотки. Умножь
те результат на 4.
2. У SPINREACT есть адаптации инструкций для многих автоматических анализаторов. Инст
рукции для них доступны по запросу.
ЛИТЕРАТУРА:
1. Kaplan А et а1. Bilirubin. Clin Chenn The С.V. Mosby Co. St Louis. Toronto. Princeton 1984; 1238-1241, 436 and 650.
2. Malloy H T et al. The determination of bilirubin with the photoelectric colorimeter. J Biol Chem 1937; 112 (2): 481 -491.
3. Jendrassik L et al. Biochennische Zeitschrift Band 1938; 297:80-89.
4. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press, 1995.
5. Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th ed. AACC 2QQ1.
6. Burtis A et al, Tietz Textbook of Clinical Chernistry, 3rd ed AACC 1999.
7. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed AACC 1995.
ГАП ТО ГЛО БИ Н (H A P TO G LO B IN ) 1102074
Турбидиметрический метод для количественного определения гаптоглобина в сыворотке.
IVD (для диагностики in vitro)______________________________________________________Хранить при 2-8°С.
Код: 1102074 R1 буфер 1x40 мл, R2 антитела 1x10 мл______________________________________________
ПРИНЦИП МЕТОДА
Тест на гаптоглобин - это количественный иммунотурбидиметрический тест для определения в сыво
ротке или плазме человека. Антитела к гаптоглобину при добавлении к пробам, содержащим гаптог
лобин, образуют нерастворимые комплексы. Эти комплексы вызывают изменение абсорбции пропор
ционально концентрации гаптоглобина в пробе пациента. Расчет производится с помощью построе
ния многоточечной калибровочной кривой по нескольким калибраторам.
КЛИНИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ
Гаптоглобин - это а-2-гликопротеин (а-2-глобулин), синтезируемый в печени, который прочно связан
с гемоглобином. Комплексы гаптоглобин-гемоглобин также, как и сам свободный гаптоглобин, играют
важную роль в сохранении железа и предупреждении возможного повреждения почек вследствие экс
креции гемоглобина. Как белок острой фазы гаптоглобин повышается при наличии воспалительного
процесса , тканевого некроза или малигнизации. Дефицит гаптоглобина в плазме есть следствие ге
молиза «in vivo», присутствия эстрогенов при беременности и приеме оральных контрацептивов, а
также при большинстве форм острых и хронических гепатоклеточных заболеваний, включая вирус
ные гепатиты. Тест на гаптоглобин в основном используется для определения и мониторинга гемоли
тических расстройств. При нормальных состояниях примерно 1% циркулирующих эритроцитов раз
рушается при циркуляции. Увеличение деструкции всего лишь до 2% в день будет полностью расхо
довать плазменный гаптоглобин при отсутствии стимулов к его продукции, таких как острые воспале
ния или кортикостероидная терапия.
СОСТАВ НАБОРА
R1 дилюент ТРИС-буфер 20ммоль/л, ПЭГ 8000, pH 8,2. Азид натрия 0,95 г/л.
R2 антитела Козья сыворотка, Антитела к человеческому гаптоглобину, pH 7.5. Азид натрия
0,95 г/л.
Дополнительно: Калибратор протеинов (PROT CAL), кат.№ 1102003.
не входит в набор
КАЛИБРОВКА
Тест был стандартизован по Референсному Материалу CRM 470/RPPHS (Институт Референсных Ма
териалов и Измерений, IRMM). Для калибровки рекомендуется использовать Калибратор протеинов
(PROT CAL), кат.№ 1102003.
ПОДГОТОВКА
Реагенты: готовы к использованию.
Калибровочная кривая; Подготовьте следующие разведения калибратора протеинов в физрастворе
(NaCi 9г/л). Умножьте концентрацию гаптоглобина в калибраторе на соответствующий коэффициент.
Стандарты 1 2 3 4 5 6
Калибратор(мкл) 10 25 50 75 100
-
NaC! 9г/л (мкл) 100 мкл 90 мкл 75 мкл 50 мкл 25 мкл -
Концентрация 0 0,1 хС 0,25хС 0,5хС 0,75хС 1,0хС
Концентрация калибратора указана в инструкции к калибратору протеинов (С
ХРАНЕНИЕ И СТАБИЛЬНОСТЬ
Все компоненты набора стабильны вплоть до указанной на этикетке даты (Expiration Date) при хране
нии в плотно закрытом флаконе при 2-8°С с предотвращением контаминации при использовании. Не
используйте реагенты после окончания срока годности.
Признаки непригодности реагентов: присутствие частиц или мутности.
Не замораживайте, замороженные антитела или дилюент могут изменять функциональную актив
ность.
ДОПОЛНИТЕЛЬНОЕ ОБОРУДОВАНИЕ
■ Термостат с 37°С.
■ Спектрофотометр или термостатируемый анализатор (37°С) с фильтром 340нм (320-360нм).
ПРОБЫ
Свежая сыворотка или плазма. В качестве антикоагулянта должны быть использованы ЭДТА или ге
парин. Стабильность 7 дней при 2-8°С или 3 месяца при -20°С. Пробы с фибрином должны быть цен
трифугированы, Не используйте гемолизированные или липемические пробы.
ПРОЦЕДУРА
Доведите реагенты и анализатор (держатель кюветы) до 37°С.
Условия теста:
Длина волны: 340 нм (320“360нм).
Температура: 37®С.
Оптический путь: 1см
Метод: кинетика по фиксир. времени по многоточечной калибровке,
рпрма РПйма _ 17Пг
Отдозируйте в кюветы:
Метод Микрометод ChemWell
Реагент R1 (мкл) 400 мкл 200 мкл 160 мкл
Калибраторы (мкл) 7 мкл 3,5 мкп 2 мкп
Проба (мкл) 7 мкл 3,5 мкл 2 мкл
Перемешайте, измерьте абсорбцию (А1) при 340 нм после добавления пробы.
Затем немедленно пипетируйте в кюветы:
Реагент R2 (мкл) 100 мкл 50 мкл 40 мкл
Перемешайте и точно через 2 минуты после добавления R2 измерьте абсорбцию (А2).
Реагенты могут быть использованы с различными автоматическими биохимическими анализаторами
или в ручных процедурах на фотометрах с подходящей длиной волны. У Spin react есть адаптации к
различным автоматическим анализаторам, которые доступны по запросу.
РАСЧЕТЫ
Рассчитайте изменение абсорбции {ЛА=А1-А2) для каждой точки калибровочной кривой (каждого
стандарта) и постройте калибровочную кривую зависимости концентрации каждого стандарта от его
изменения абсорбции. Концентрация С4 в пробе рассчитывается интерполяцией ее ДА к калибровоч
ной кривой.
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
Для контроля характеристик ручных и автоматических процедур рекомендуется использовать кон
трольную сыворотку Spinreact PROT CONTROL (кат.№: 1102004). Каждая лаборатория должна пред
ставить свою собственную схему контроля качества и действия по исправлению, если контроли вне
приемлемых диапазонов.
РЕФЕРЕНТНЫЕ ВЕЛИЧИНЫ^
30 - 200 мг/дл
Каждая лаборатория должна представить свой референсный диапазон.
ХАРАКТЕРИСТИКИ ТЕСТА
1. Линейность, до 300 мг/дл (Примечание 1), при описанных выше условиях. Пробы с большими
концентрациями должны быть разведены 1/5 физраствором (NaCl 9г/л) и тестированы повторно,
результат умножить на 5. Предел линейности зависит от соотношения проба/реагент. Он будет
повышаться при снижения объема сыворотки, при этом также будет пропорционально снижаться
чувствительность.
2. Определяемый уровень: Значения ниже 1,3 мг/дл дают невоспроизводимые результаты.
3. Эффект прозоны: Не наблюдается эффекта прозоны до 1200 мг/дл.
4. Чувствительность: Д 4,69 мА / мг/дл (100 мг/дл).
5. Воспроизводимость:
Внутри серии тестов (п=10) Ме>кду сериями тестов (п=10)
Среднее (мг/дл)
SD
CV%
6. Правильность: результаты, полученные с помощью этого теста (у) при сравнении с другими, по
лученными с использованием коммерческих реагентов (х) с похожими характеристиками, не да
вали систематических различий. При обследовании 73 проб в диапазоне от 10 до 400 мг/дл были
получены следующие результаты:
Коэффициент корреляции (г): 0,95. Уравнение регресии: у=1,086х + 13.
Результаты характеристик теста зависят от используемого анализатора.
ИНТЕРФЕРЕНЦИИ
Не наблюдается интерференции с гемоглобином (до 50 г/л), билирубином (до 50 мг/дл) и ревматоид
ными факторами (до 950 МЕ/мл). Липемия (>6 г/л) дает интерференцию. Другие вещества также мо
гут влиять®’^.
ПРИМЕЧАНИЯ
1. Линейность зависит от концентрации калибратора.
2. Клинический диагноз не должен ставиться по результатам одиночного теста; он должен быть ос
нован на совокупности клинических и других лабораторных данных.
ЛИТЕРАТУРА
1. Clinical Guide to Laboratory Tests, Edited by NW Tietz W В Saunders Co., Phipladelphia, 403, 1983.
Dati F et al. Eur J Ciin Chem Clin Biochem 1996; 34:517-520,
Pesce AJ and Kaplan, LA. Methods in Clinical Chemistry. The CV Mosby Company, St. Louis MO, 1987.
Kluthe Retal. Nature 1965; 205; 93-94.
Tarukosky PH et al. Scand J Clin Lab Invest 1966; 18: 80-86.
Young DS.Effects of drugs on clinical laboratory tests, 4th ed. AACC Pres, 1995.
Friedman and Young. Effects of disease on clinical laboratory tests, 3tn ed. AACC Pres, 1997.
ГЕМОГЛОБИН (haemoglobin) 1001230,1001232
Гемиглобинцианидный метод Драбкина.________________
Код: 1001230 4x5 мл (конц.50)______________Код: 10011232 1x1 мл Стандарт 150 г/л_________________
ПРИНЦИП МЕТОДА
Гемоглобин окисляется ферроцианидом калия с образованием метгемоглобина, который с цианидом
калия преобразуется в цианметгемоглобин. Интенсивность окраски цианметгемоглобина при длине
волны 540 нм прямо пропорциональна концентрации гемоглобина в крови^’^,
КЛИНИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ ГЕМОГЛОБИН
Гемоглобин - это белок, который содержит железо и придает крови красный цвет. Гемоглобин нахо
дится в эритроцитах и его основной функцией является транспорт кислорода от легких к тканям.
Снижение уровня гемоглобина ниже нормального диапазона называется анемией, и может быть
следствием различных причин: первичная анемия, рак, беременность, заболевания почек и кровоте
чения. Повышение уровня гемоглобина происходит вследствие: кардиопатий, дегидратации и при на
хождении в высокогорных местностях^'®'®.
Клинический диагноз не должен ставиться по результатам одиночного теста; он должен быть основан
на совокупности клинических и других лабораторных данных.
W СОСТАВ НАБОРА
Реагент (50х) Феррицианид калия 0,60 ммоль/л
Цианид калия 77 ммоль/л
Дигидрофосфат калия 2,0 ммоль/л
Дополнительно Стандарт гемоглобина (Кат.№ 10011232), 150 г/л
(не входит в набор) животного происхождения
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЯ: ТОКСИЧНО!!
Цианид калия: Опасен (Хп): R26/27/28: Очень токсичен при ингаляции, контакте с кожей и проглаты
вании. R32: При контакте с кислотами высвобождается токсичный газ.
Опасен для окружающей среды (N): R52/53: Вреден для водных организмов, может быть причиной
длительных неблагоприятных эффектов для водной среды.
S7: Хранить контейнер плотно закрытым, S28: При контакте с кожей, немедленно промыть большим
объемом воды. S29: Не выбрасывайте с обычными отходами. S45: При несчастном случае или при
плохом самочувствии немедленно обратитесь за медицинской помощью. S60: Этот материал и его
контейнер должны утилизироваться как опасные отходы. S61: Избегайте высвобождения в окружаю
щую среду. Смотрите специальные инструкции/ данные по безопасности.
Цианид (яд): Количество цианида в концентрате реагента (50х) значительно меньше, чем минималь
ная летальная доза для взрослых, При контакте с кислотами высвобождается газ гидрид цианида.
ПОДГОТОВКА
Рабочий реагент:
• На 5 мл; 4,9 мл дистиллированной воды + 2 капли реагента.
• На 250 мл; 245 мп дистиллированной воды + 5 мл реагента.
Тщательно перемешать.
Рабочий реагент стабилен 2 месяца при 2-8“С. Хранить в бутыли из темного стекла.
ХРАНЕНИЕ И СТАБИЛЬНОСТЬ РЕАГЕНТОВ
Все компоненты набора стабильны вплоть до указанной на упаковке даты (Expiration Date) в плотно
закрытых флаконах при 2-8°С. Избегать прямого солнечного света и контаминации прии спользова
нии, Не используйте реагенты после окончания срока хранения.
Признаки непригодности реагентов;
■ наличие частиц и мутности;
■ абсорбция бланка (А) по реагенту при 540нм ^0,01.
ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ КОМПОНЕНТЫ
■ Спещ-рофотометр или биохимический анализатор с фильтром 540 нм.
• Соответствующие кюветы с длиной оптического пути 1,0 см.
■ Обычное лабораторное оборудование.
ПРОБЫ
Капиллярная кровь или венозная кровь\ Можно использовать антикоагулянты: ЭДТА, гепарин или ок-
салат. Концентрация в пробах стабильна 7 дней при 2-8°С или в течение 5 месяцев при -20®С.
ПРОЦЕДУРА
1. Условия теста:
Длина волны: 540 (520-560) нм
Оптический путь: 1 см
Температура: 15-25°С
Измерение: против бланка по реагенту.
Метод: по конечной точке по фаю-ору (367,7) или по стандарту (150 г/л),
время инкубации 3 мин (15-25Х)
2. Установите прибор на ноль по дистиллированной воде.
3.
Макрометод Полумикрометод
Бланк Стандарт Проба Бланк Стандарт Проба
Стандарт - 20 мкл - - 4 мкл -
Кровь - - 20 мкл - - 4 мкл
Рабочий реагент 5 мл 5 мл 5 мл 1,0 мл 1,0 мл 1,0 мл
4, Перемешать, инкубировать 3 мин при комнатной температуре (15-25°С).
5. Измерить оптическую плотность каждой пробы и стандарта при 540 нм (А). Оптическая плотность
стабильна в течение нескольких часов при хранении в защищенном от света месте.
ВЫЧИСЛЕНИЕ
По фактору:
(г/л) * А пробы X 367,7 (ммоль/л) = А пробы х 23,52
Для всех методик по конечной точке по фактору необходимо определять коэффициент (фактор) для
конкретного прибора по стандарту (калибратору), так как возможно различие в фильтрах, длине опти
ческого пути и т.д.
По стандарту:
X 150 Г/Л
А стандарта
Фактор для перевода единиц: НЬ [г/дл] х 0,6206 = НЬ/4 [ммоль/л] НЬ/4 [ммоль/л] х 1,611 = НЬ [г/дл]
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
Рекомендуется использовать контрол и с каждой серией проб, Если результаты контроля вне опреде
ленного диапазона, проверьте прибор, реагенты и калибратор. Каждая лаборатория должна опреде
лять собственную систему ведения контроля качества и действий для коррекции при выходе контроля
за приемлемые границы.
РЕФЕРЕНТНЫЕ ВЕЛИЧИНЫ
Мужчины 140 -180 г/л 8,7 - 11,2 ммоль/л
Женщины 120-160 г/л 7,5 - 9,9 ммоль/л
Эти значения даны для ориентировочных целей, каждая лаборатория должна определять собствен
ный референсный диапазон.
ХАРАКТЕРИСТИКИ ТЕСТА
Диапазон измерения: от уровня определения в 1,0 г/л (0,1 г/дл) до предела линейности в 200 г/л (20
г/дл). Если получаемые результаты выходят за предел линейности, разведите пробы в два раза физ
раствором (NaCI 9 г/л) и умножьте результат на 2.
Воспроизводимость:
Внутри серии тестов (п=20) Между сериями тестов (п=20)
Среднее (мкмоль/л) 8,00 15,2 7,81 15.1
SD 0,29 0,33 0,19 0,26
CV% 3,59 2,19 2,51 1,74
Чувствительность: 1 г/дл = 0,027 А.
Правильность: результаты, полученные с помощью этого теста (у) при сравнении с другими, полу
ченными с использованием коммерческих реагентов (х) с похожими характеристиками, не давали
систематических различий.
ИНТЕРФЕРЕНЦИИ
Список лекарств и других веществ, влияющих на определение гемоглобина, представлен в работах
Young и др,^ .
ПРИМЕЧАНИЕ
У SPINREACT есть адаптации инструкций для многих автоматических анализаторов. Инструк
ции для них доступны по запросу.
ЛИТЕРАТУРА
1. Franco R S. Hemoglobin. Kaplan А et al. Clin Chem The C.V. Mosby Co. St Louis. Toronto. Princeton 1984; 1294-1296 and 418.
2. Van Kampen EJ et al. Standarlzation of hennoglobinometry Clin. Chim 1961;6: 438-544.
3. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press, 1995.
4. Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th ed. AACC 2001.
5. Burtis A, et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed. AACC 1999.
6. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed. AACC 1995.
ГИДРОКСИБУТИРАТДЕГИДРОГЕНАЗА (ГБДГ (HBDH)) 1001221
Кинетический метод измерения в ультрафиолете (UV). IFCC.
IVD (для диагностики in vitro)______________________________________________ Хранить при 2-8°С.
Код: 1001221 20x3 мл
ПРИНЦИП МЕТОДА
Оптимизированный кинетический метод в соответствии с рекомендациями Международной Федера
ции Клинической Химии (МФКХ - IFCC).
а-кетобутират + NADH + Н'" ' > а-гидроксибутират + NAD"^
Скорость расходования NADH определяется измерением оптической плотности при 340 нм и прямо
пропорциональна активности ГБДГ (HBDH) в пробе.
КЛИНИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ
а-гидроксибутиратдегидрогеназа (ГБДГ-HBDH) - это изофермент лаетатдегидрогеназы (ЛДГ). Сер
дечная мышца содержит высокие концентрации ГБДГ. Концентрация ГБДГ в сыворотке повышается
при повреждении миокарда. Клинический диагноз не может быть поставлен по результату одного тес
та, он должен определяться по совокупности клинических и других лабораторных данных.
СОСТАВ НАБОРА
Реагент 1 ТРИС-буфер (pH 7,5) 50 ммоль/л
буфер а-кетобутират 3 ммоль/л
Реагент 2 NADH 0,18 ммоль/л
субстрат
ПОДГОТОВКА И СТАБИЛЬНОСТЬ
Код 1001221- Развести одну таблетку (R2) в одном флаконе буфера Реагент 1 (R1).
Стабильность 24 часа при г-б^С.
ПРОБЫ
Сыворотка или плазма без гемолиза. Стабильность 3 дня при 2-8°С.
ОБЩИЕ ИНСТРУКЦИИ
Реагенты могут быть использованы с различными автоматическими биохимическими анализаторами
или в ручных процедурах на фотометрах с подходящей длиной волны.
ПРОЦЕДУРА
Температура 25 / 30 / 37°С
Длина волны 340нм
Кювета оптический путь 1 см
Бланк против воздуха или дистиллированной воды.
Метод; кинетика по фактору (-8095), время задержки 60 с, время реакции 180 (60) с
25 и 30°С 37“С
Закапать в кюветы
Макро метод Микрометод Макро метод Микрометод
Проба 40 мкл 20 мкл 20 мкл 10 мкл
Рабочий реагент 1 мл 0,5 мл 1 мл 0,5 мл
Перемешать, измерить оптическую плотность через 1 минуту инкубации. Затем измерить уменьшаю
щуюся оптическую плотность ровно через 1, 2 и 3 минуты,
Рассчитать среднее изменение оптической плотности за минуту (АА/мин).
РАСЧЕТ
При 25 и 30“С Е/л = ДЛ/мин х -4127
При ЗТХ Е/л = АА/мин X -8095
Фактор для перевода международных единиц (Е/л) в единицы СИ (кат/л):
1 Е/л = 16.67 нкат/л 1 мккат/л = 60 Е/л.
ЛИНЕЙНОСТЬ
Если ЛА/мин при 340нм больше 0,150 («739 Е/л), пробы должны быть разведены физраствором (0,9%
хлорида натрия) в отношении 1;10, полученное разведение используйте в качестве пробы. Результат
измерения умножьте на 10 (коэффициент разведения).
РЕФЕРЕНТНЫЕ ВЕЛИЧИНЫ (Е/Л)
25"С 30°С 37"С
<140 Е/л <165 Е/л <182 Е/л
Настоятельно рекомендуется в каждой лаборатории устанавливать свой диапазон нормальных зна
чений.
Коэффициенты перерасчета для разных температур
Требуемая температура
Температура теста |
25"С ЗО’С 37"С
25X 1,00 1,18 1,30
ЗОХ 0,85 1,00 1,09
37Х 0.77 0,92 1,00
ВНИМАНИЕ
Гемолиз будет мешать определению.
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
Рекомендуется использовать контроли с каждой серией проб. Мы рекомендуем контрольные сыво
ротки SPINTROL Normal и Pathological.
ЛИТЕРАТУРА
1. Zciin, Chem. & Clin. Biochem, 8, 658 (1970).
2. Elliot B.A. Clin Sci. 24; 343 (1963),