УТВЕРЖДЕНА «УТВ^ЖДАЮ»
_____ _ п'ор ООО «Мед.Гарант»
Приказом Роздравнадзора
В.В.Березовский
от 200 г. № _________
//«о/
1*г( J /Г.; ?«!1
2008 г.
по применению набора реагентов ^5^ийаоЕд:^ёления содержания мочевины
в сыворотке, плазме крови и моче
Мочевина ПАРМА
1. Назначение.
Набор предназначен для количественного определения мочевины в сыворотке, плазме
крови и моче человека в клинико-диагностических и биохимических лабораториях и в науч
но-исследовательской практике.
Набор рассчитан на проведение 100 или 500 определений при суммарном расходе 1,0 мл
реагентов на один анализ.
2. Характеристика набора.
2.1. Принцип действия.
Мочевина гидролизуется в присутствии уреазы с образованием иона аммония и СО2.
Ионы аммония реагируют с альфа-кетоглутаратом и НАДН в присутствии глутаматдегидро-
геназы (ГЛДГ) с образованием глутамага и NAD"^.
Мочевина + Н2О + 2Н^ уреаза ^ + QQ^
NH4^ + а-кетоглутарат + КАДН > Н2О + NAД'^ + L-глутамат
Концентрация NAД^ измеряется фотометрически при длине волны 340 нм в кювете с
длиной оптического пути 10 мм. Скорость окисления ЫАДН в NAД'^ пропорциональна кон
центрации мочевины в пробе.
2.2. Состав набора:
- Реагент 1: трис-(оксиметил)аминометан, 0,08 моль/л, соляная кислота, 0,1 моль/л, уреа
за, 10000 Е/л, альфа-кетоглутаровая кислота, 6 ммоль/л, натрия азид, 1 г/л - 1 флакон (80 мл)
или 4 флакона (100 мл);
- Реагент 2: глутаматдегидрогеназа, 1500 Е/л, НАДН, 0,32 ммоль/л, трис-
(оксиметил)аминометан, 0,08 моль/л, соляная кислота, 0,1 моль/л, натрия азид, 1 г/л - 1 фла
кон (20 мл) или 1 флакон (100 мл);
- Калибратор: мочевина, 8,33 ммоль/л, натрия азид, 1 г/л, -1 флакон (5 мл).
3. Аналитические и диагностические характеристики набора.
Чувствительность - не более 1,0 ммоль/л.
Линейность. Набор обеспечивает линейность при определении содержания мочевины в
диапазоне от 2,0 до 33,3 ммоль/л с отклонением от линейности не более 5%.
Инструкция составлена исполнительным директором ООО «Мед.Гарант»
П.С.Смирновым
Коэффициент вариации - не более 5%.
Качество набора может проверяться по отечественным или зарубежным контрольным
сывороткам, апестованным данным методом.
Содержание мочевины в норме составляет: в сыворотке и плазме крови - 2,5 - 8,3
ммоль/л; в моче - 330 - 580 ммоль/сут.
4. Меры предосторожности при работе с пабором.
Меры предосторожности при работе с набором - соблюдение «Правил устройства, тех
ники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной
гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) санитарно- эпидемиологических
учреждений системы Министерства здравоохранения СССР»(Москва, 1981 г.).
При работе с набором следует надевать одноразовые резиновые или пластиковые пер
чатки, так как образцы крови человека следует рассматривать как потенциально инфициро
ванные, способные длительное время сохранять и передавать ВИЧ, вирус гепатита или любой
другой возбудитель вирусной инфекции.
5. Оборудование, материалы и pear енгы:
- биохимический анализатор, длина волны 340 нм (490-515 нм), кювета с длиной опти
ческого пути 10 мм;
- пипетки, позволяющие отбирать объемы жидкостей 0,01 и 1,0 мл;
- пробирки вместимостью 5-10 мл;
- вода дистиллированная;
- перчатки резиновые или пластиковые.
6. Анализируемые пробы.
Негемолизированная сыворотка или плазма крови и моча человека. Мочу перед опреде
лением следует развести дистиллированной водой в 50 раз.
7. Проведение анализа
7.1. Приготовление рабочего реагента.
Смешать необходимые количества реагентов 1 и 2 в соотношении 4:1. Рабочий реагент
стабилен при температуре 2-8° С не более 14 суток.
7.2. Проведение анализа.
Компоненты реакционной смеси отбирать в количествах, указанных в таблице .
Непосредственно перед измерением нагреть рабочий реагент до 37° С.
Внести Опытная проба Калибровочная проба
Сыворотка, плазма кров!
- 10 мкл
или разбавленная в 50 раз мo^
Калибратор 10 мкл -
Рабочий реагент 1 ООО мкл 1000 мкл
8. Регистрация результатов.
Перемешать и измерить оптическую плотность через 30 секунд (Ei) при длине волны
340 нм в кювете с длиной оптического пути 10 мм и затем еще ровно через 60 секунд (Ег).
9. Учет результатов реакции.
Концентрацию мочевины в анализируемом образце рассчитать по формуле:
Егт-Eion х8,33.
^2 кал ^\кал
где: : Eon - оптическая плотность опытной пробы, ед. опт. плотн.;
Екал - оптическая плотность калибровочной пробы, ед. опт. плотн.;
8,33 - концентрация мочевины в калибраторе, ммоль/л.
Содержание мочевины в суточной моче определить по формуле:
,
M=CxV
где: С - концентрация мочевины, ммоль/л;
V - количество мочи, собранной за сутки, л;
10. Условия хранения и эксплуатации набора.
Хранение набора можно производить при температуре +2-8° С в упаковке предприятия-
изготовителя в течение всего срока годности (12месяцев).
Реагенты 1 и 2 после вскрытия флаконов могут храниться при температуре 2-8®С в тече
ние всего срока годности наборов при условии достаточной герметичности флаконов.
Калибратор после вскрытия флакона можно хранить при температуре 2-8®С не более 3
месяцев при условии достаточной герметичности флакона.
Для получения надежных результатов необходимо строгое соблюдение инструкции по
применению набора.
По вопросам, касающимся качества набора Мочевина ПАРМА, следует обращаться в -
ООО «Мед.Гарант» по адресу 614000, г. Пермь, ул. Сибирская, д. 9, оф. 420.
Исполнительный директор
ООО «Мед.Гарант» П.С.Смирнов
СВЕДЕНИЯ ОБ АНАЛОГАХ ИМИ ЗАРЕГИСТРИРОВАННЫХ
В РОССИСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
Набор реагентов для определения содержания мочевины в сыворотке, плазме крови и моче
(Мочевина ПАРМА)
Мочевина ПАРМА является стандартным кинетическим набором, в котором применяется
метод гидролиза мочевины в присутствии уреазы с образованием иона аммония и СО2. Ионы ам
мония реагируют с альфа-кетоглутаратом и НАДН в присутствии глутаматдегидрогеназы (ГЛДГ)
с образованием глутамата и NAD^. Концентрация КАД^ измеряется фотометрически при длине
волны 340 нм в кювете с длиной оптического пути 10 мм. Скорость окисления NAДH в NAД’^ про
порциональна концентрации мочевины в пробе.
Сфера применения таких наборов это клинико-диагностические лаборатории.
Назначение - количественное определение мочевины в сыворотке, плазме крови и моче че
ловека.
Данные по аналогичным наборам, производимых другими фирмами, и их аналитические ха
рактеристики представлены в таблице.
Таблица
Наименование про Наименование изделия Параметры изделия (аналитические характе
изводителя, ристики)
страна, Срок год Чувстви «Линей Коэффи
№РУ ности тельность ность» циент ва
(мес) (ммоль/л) (ммоль/л) риации
(%)
ЗАО «Диакон-ДС» «Мочевина ФС» 12 1,0 2,0-50 5
Россия при 2-8°С
№ФС
062а0457/10032-04
ООО «НПФ Аб- Мочевина «Сапфир» 12 1,0 2,0-33,3 5
рис+» при 2-8°С
Россия
№ФС
012а 2006/4990-06
ООО Витал Диаг Мочевина-Витал 12 1,0 2,0-33,3 5
ностике при 2-8°С
Россия
№ФС
012а 0013/1965-05
Директор ООО «Мед.Гарант» В.В.Березовский