Реагенты in vitro диагностические для радиоиммунного анализа (см. Приложение на 1 листе) — инструкция и характеристики

РУ: ФСЗ 2010/06731 · класс риска 1

Производитель: "ИММУНОТЕХ с.р.о." (Чехия)

Вид изделия: Бета-2-микроглобулин ИВД, реагент · Раковый антиген 15-3 (СА15-3) ИВД, реагент · Ферритин ИВД, реагент

Автоматически отфильтрованный фрагмент инструкции по применению (страницы, где похоже, что есть таблица технических характеристик) — не полный документ. Карточка РУ на портале Росздравнадзора →

Текст инструкции: технические характеристики

ОКП 93 9817
УТВЕРЖДАЮ
Генеральный директор
«Бекмен Культер»
н Поспишил
2012 г.
ИНСТРУКЦИЯ
по применению изделия медицинского назначения
Реагенты in vitro диагностические для радиоиммунного анализа.
Производства компании ИММУНОТЕХ с.р.о. (IMMUNOTECH s.r.o.), Чешская республика
Соответствует требованиям национальных стандартов:
ГОСТ Р 51088-97, ГОСТ Р 51352-99
Содержание:
1. Принцип метода.
2. Реагенты, входящие в состав набора.
3. Дополнительные материалы и оборудование.
4. Меры предосторожности.
5. Получение, обработка, хранение и разведение образцов.
6. Процедура анализа.
7. Результаты.
8. Контроль качества.
9. Ожидаемые значения.
10. Аналитические характеристики.
11. Ограничение метода.
2 0 1 2
И н с т р у к ц и я no
BECKMAN и с п о л ь з о в а н и ю
COULTER.
RUSSIAN
IVD
A n g io te n s in I R IA K IT а Й 1 М 3 5 1 8
РАДИОИММУНОЛОГИЧЕСКОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ АНГИОТЕНЗИНА I
С€
ДЛЯ ОЦЕНКИ АКТИВНОСТИ ПЛАЗМАТИЧЕСКОГО РЕНИНА (АПР) IN VITRO В ПЛАЗМЕ
1. ПРИНЦИП МЕТОДА
4.2 Основные правила обращения с радиоактивными веществами
Радиоиммунологический метод оценки активности плазматического ренина Получение, использование и транслортировка радиоактивных материалов должны
(АПР) основан на измерении количества образовавшегося продукта происходить в соответствии с принятыми в данной стране нормами радиационной
ферментативной реакции - ангиотензина I. безопасности и санитарными правилами работы с радиоактивными веществами.
Образование ангиотензина I в образцах плазмы крови, являющееся результатом - В лабораториях запрещается принимать пищу, курить, пользоваться косметикой.
- Не пипетировать растворы радиоактивных веществ ртом.
ферментативного расщепления субстрата ренина - ангиотензиногена,
- Для ограничения контакта с радиоактивными материалами рекомендуется
проводится в присутствии ингибитора, блокирующего превращение использовать разовые перчатки и лабораторную спецодезкру.
антотензина I в ангиотензин II. - Все манипуляции с радиоактивными веществами следует проводить в специально
Радиоиммунопогическое определение ангиотензина I относится к конкурентным оборудованных для этого помещениях, удаленных от мест постоянного
видам анализа. Исследуемые образцы, контрольные и калибровочные пробы пребывания людей.
инкубируют со '*5|-ангиотензином I в пробирках, покрытых поликлональными - Радиоактивные вещества следует хранить с использованием контейнеров в
антителами. Затем удаляют содержимое пробирок, промывают их и измеряют специально отведенных для этого местах.
- Необходимо регистрировать поступление и расход радиоактивных материалов.
связанную активность ’®|, Концентрацию ангиотензина I определяют методом
■ Лабораторное оборудование и посуду следует хранить 0тделы(0, чтобы
интерполяции по калибровочной кривой. предотвратить их зафязнение радиоактивными изотопами.
- Любой случай радиоактивного зафязнения или исчезновения радиоактивного
2. РЕАГЕНТЫ, ВХОДЯЩИЕ В СОСТАВ НАБОРА
материала должен рассматриваться в соответствии с законодательством.
Все реагенты стабильны при 2-8"С до окончания срока годности набора. ■ Утилизация радиоактивных отходов должна осуществляться в соответствии с
Условия хранения после растворения и разбавления реагентов указаны законодательством.
в разделе ‘Процедура анализа’. Сроки годности, указанные на этикетках 4.3 Азид натрия
флаконов с реагентами, относятся только к их хранению в производственных Некоторые компоненты набора содержат азид натрия в качестве консерванта.
условиях вплоть до момента комплектации набора и не распространяются на Вступая в реакцию со свинцом, медью и латунью, азид натрия образует
полученную заказчиком продукцию. взрывоопасные азиды металлов. Отработанные реагенты следует разбавлять
большим количеством водопроводной воды, после чего их можно сливать в
2.1 Пробирки, покрытые поликлональными антителами к ангиотензину I: канализацию.
2X 50 шт (готовы к использованию)
4.4 Плазма крови человека
2.2 Метка, ’’Ч-ангиотензин 1:1 флакон, 11 мл (готова к использованию) С исследуемыми образцами плазмы крови следует обращаться как с потенциально
На дату изготовления флакон содержит 260 кБк '»1-ангиотензина I инфекционным материалом, могущим содержать вирусы СПИД и гепатита.
в буфере с бычьим сывороточным альбумином и красителем. Утилизация отходов должна осуществляться в соответствии с законодательством.
2.3 Калибровочные пробы: 6 флаконов по 1 мл (готовы к использованию) 5. ПОЛУЧЕНИЕ, ОБРАБОТКА И ХРАНЕНИЕ ОБРАЗЦОВ
Калиб^вочные пробы содержат ангиотензин I в диапазоне концентраций
- Собрать кровь в охлажденные пробирки с ЭДТА.
от О до 30 нг/мл в буфере с бычьим сывороточным альбумином и азидом
- Отделить плазму центрифугированием при 2-8"С.
натрия (<0.1 %; см.п. Меры предосторожности). Точные концентрации,
- Еспи анализ не будет проводиться немедленно, образцы плазмы
калиброванные по международному стандарту RP 86/536, указаны на
следует разделить на аликвоты и заморозить при температуре <-18"С.
этикетках флаконов.
Избегать повторного замораживания-опаивания образцов.
2.4 Контрольная сыворотка: 1 флакон, 1 мл (готова к использованию) - Внимание: В процессе получения и обработки образцов температура
Флакон содержит известное количество ангиотензина I в буфере с ^чьим плазмы должна поддерживаться на уровне 2-8“С. Строгое соблюдение
сывороточным альбумином и азидом натрия (<0.1 %; см.п. Меры рекомендуемых условий позволяет предотвратить как образование, так
предосторожности). Ожидаемые диапазоны концентраций указаны на и расщепление ангиотензина I.
дополнительном листке-вкладыше.
6. ПРОЦЕДУРА АНАЛИЗА
2.5 Ингибитор феремента: 1 флакон (лиофилизованный препарат)
Препарат содержит азид натрия (<0.1 %; см.п. Меры предосторожности). 6.1. Подготовка и хранение реагентов
2.6 Промывочный раствор (20х); 1 флакон, 50 мл 6.1.1 Подготовка раствора ингибитора фермента
Концентрированный раствор должен быть перед исполыюванием Растворить содержимое флакона охлажденной до 4'С дистиллированной
разведен. водой в объеме, указанном на этикетке. Тщательно перемешать.
Подготовпенный к работе раствор ингибитора можно хранить при 2-8“С до
3. ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ МАТЕРИАЛЫ И ОБОРУДОВАНИЕ окончания срока годности набора.
Помимо стандартного лабораторного оборудования необходимо иметь
6.1.2 Приготовление промывочного раствора
следующее:
Тщательно смешать содержимое флакона с концентратом промывочного
- микропипетки (75 мкл; 100 мкп)
раствора и 950 мл дистиллированной воды.
- полуавтоматичеаие пипетки (200 мкл, 300 мкп; 2 мл)
Подготовленный к работе промывочный раствор можно хранить при 2-8"С
- водяная баня
до окончания срока годности набора.
- ледяная баня
- вихревой смеситель типа Vortex 6.2. Ферментативная стадия - образование ангиотензина I
■ горизонтальный или орбитальный встряхиватель 6.2.1 Замечания и рекомендации
- водоструйный насос - Раствор ингибитора фермента должен быть охлажден до 4*0 перед
- гамма-счетчик для измерения активности '“I. внесением в анализируемые образцы.
- Температурные усповия тепловой и Холодовой инкубаций (4*С и 37”С)
4. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
должны строго соблюдаться, так как даже небольшие отклонения от
4.1 Общие замечания: рекомендуемого режима могут привести к серьезным искажениям
- Перед внесением в пробирки раствор ингибитора фермента, результатов анализа.
калибровочные, контрольные и анализируемые образцы должны иметь - Продолжительность энзиматической стадии (инкубация при 37°С)
температуру 2-8”С. должна соблквдаться как можно более тщательно и быть практически
- Не смешивать реагенты из наборов разных серий. одинаковой для всех пробирок.
- Анализ калибровочных и неизвестных проб должен проводиться - Скорость нагрежи пробирок до 37*С и последующего их охлаждения
одновременно. имеет принципиальное значение. Для нагрева рекомендуется
- Анализ рекомендуется проводить в дубликатах. использовать водяную баню с циркуляцией воды, а для охлаждения -
- Пробирки предназначены для однократного использования. ледяную баню.
PI-3518-2012-01-26
- Для ускорения процессов нагрева и охлаждения рекомендуется 4"С, вычитается из уровня А-1, образовавшегося при 37*С, а расчет
использовать пробирки из материала, обладающего хорошей активности плазматического ренина проводится по формуле;
теплопроводностью (стекло).
- Продолхдательность тепловой инкубации в образцах с предполагаемой [Д-1(37‘0 - А-1(4’С)1 X 2
низкой активностью плазматического ренина можно увеличить до ДПР (нг Д-1/мл/час)
3 часов. Длительность энзиматической
стадии (час)
6.2.2 Энзиматическая стадия
Где:
Внимание: Не обрабатывать калибровочные и Д-1 (37°С): концентрация антотензина (нг/мл) после инкубации при 37"С
_____________контрольные пробы._____________ Д-1 (4°С): концентрация ангиотензина (нг/мл) после инк^ации при 4’С.
- В пробирки внести 200 мкл анализируемых образцов плазмы и добавить 8. КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
к ним по 200 мкл охлажденного раствора ингибитора. Тщательно В соответствии с требованиями Good laboratory practices для контроля качества
перемешать. проводимых исследований следует регулярно использовать контрольные образцы, которые
- Разделить содержимое каждой пробирки на две аликвоты по 200 мкл. должны проходить те же аадии анализа, что и анализируемые пробы. Результаты контроля
- Поставить пробирки с первой группой аликвот на ледяную баню и качества рекомендуется обрабатывать с помощью специальных статиаических методов.
поместить ее в холодильник. Данная группа пробирок предназначена В случае серьезного повреждения упаковки, или в случае несоответствия полученных
результатов аналитическим характеристикам (см.п.Ю) обратитесь, пожалуйста, к вашему
для определения базового уровня антотензина I при 4'С.
дистрибьютору или к нашим слециалисгам:Тел.:'ь420 272 017 391; Фаю: ->420 272 017 Зв5:
- Вторую фулпу пробирок, в которых будет оцениваться скорость
E-mail: imunochem(abeckman.com Тел.:+7 495 937 1664; Факс: *1495 254 64 07;
образования аншотензина I, поместить на водяную баню при E-mail: t
температуре 37*С.
- Инкубировать все пробы в течение 1 часа. 9. ОЖИДАЕМЫЕ ЗНАЧЕНИЯ
- После окончания инкубации при 37’С быстро охладить пробы до 4'С на В каждой лаборатории следует установить собственные референсные уровни
ледяной бане. АПР, соответствующие нормальным. Приведенные ниже значения являются
6.3 Радмоиммунологическмй анализ ориентировочными.
Стадия 1 Стадия 2 Стадия 3 В покое 0,5-1,9 нг/млА(ас
Внесение реагентов * Инкубация Измерение результатов После нзфузки 1,9-6,0 нг/млА(ас
В покрытые антителами Тщательно удалить 10. АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
пробирки содержимое пробирок (Более подробная информация приведена в разделе “APPENDIX")
последовательно
(кроме проб «Т») 10.1 Чувствительность
внести:
Инкубировать 2 10.1.1 Аналитическая чувствительность: 0,1 нг/мл
- 75 мкл калибровочных, часа Промыть пробирки 2 мл 10.1.2 Функциональная чувствительность: 0,2 нг/мл
контрольных и при 18-25°С промывочного раствора. 10.2. Специфичность
анализируемых проб, ** и постоянном Антитела, используемые в данном наборе, обладают высокой
прошедших встряхивании Удалить жидкость. Дважды специфичностью к ангиотензину I. Перекрестная реакция с антотензином
энзи п м р а и т и 3 ч 7 е - с С к у и ю 4 ‘ с ’С та , дию (> 280 ОСЦ./МИН.). повто а р с и п т и ь р а п ц р и о и ц . едуру I К I роме того, в ч ы р ч е и зв т ы ан ч и а е й н б о а з м ов а о л г а о ( < у 0 р , о 0 в 0 н 1 я % ан ). шотензина I исключает влияние
посторонних факторов на оценку АПР.
атаюке
Во всех пробирках 10.3 Воспроизводимость
-100 мкл метки. **
измерить активность 10.3.1 Внутри анализа
Перемешать. (имп./мин.) Анализ образцов проводили в 25 репликатах в пределах одной серии
в течение 1 минуты. определений. Коэффициент вариации не превышал 11,3 %.
* Перед внесением в пробирки калибровочные, контрольные и анализируемые 10.3.2 Между анализами
пробы должны быть охлаждены до температуры 4‘С и аккуратно Анализ образцов в дубликатах проводили в 10 различных сериях
перемешаны. определений. Коэффициент вариации не превышал 20,9 %.
*■ В две дополнительные пробирки внести по 100 мкл метки для оценки общей 10.4 Точность
активности '”1 (Т), имп./мин.
10.4.1 Зависимость от продолжительности энзиматической стадии
7. РЕЗУЛЬТАТЫ Образцы плазмы инкубировали в присутствии ингибитора фермента в
течение 60,120 и 180 минут. Никакого влияния на результаты анализа по
Результаты рассчитывают методом интерполяции по калибровочной кривой,
оценке АПР не выявлено.
полученной одновременно с анализом неизвестных образцов.
10.4.2 Тест на разведение
7.1. Калибровочная кривая
Образцы плазмы серийно разводили «нулевой» калибровочной пробой.
Результаты контроля качества набора, указанные на отдельном листке-екладыш,
получены при построении калибровочной кривой в координатах logit-log (взвешенная Величина «отфытия» составляла от 78 % до 99 %.
кубическая регрессия) с соотношением ВЯ (%) или В/Во (%) по вертикальной оси и 10.4.3 Тест на «открытие» стандартной добавки
концентрацией ангиотензина I (нг/мл) по горизонтальной оси калибровочного В образцы плазмы вносили известные количества анпадтензина I.
графика. Другие методы обсчета могут давать несколько отличающиеся Величина «открытия» составила от 104 % до 123 %.
10.5 Диапазон определений (от аналитической чувствительности до значения
Общий счет: 68 511 имп./мин.
наивысшей калибровочной пробы): 0,1-30 нг/мл
Калибровочные Ангиотензин 1 Имп^мин.
BfT(%) В/ВО (%)
пробы (нг/мл) (п-3) 11. ОГРАНИЧЕНИЯ МЕТОДА
0 0,00 17444 25,5 100 Нарушение методики проведения анализа может привести к искажению результатов
1 0,30 13732 20,0 78,7 исследования.
2 1,00 9390 13,7 53,8 Результаты определения должны быть интерпретированы в свете общей клинической
картины пациента, включая анамнез, данные других тестов и подходящую иную
3 3,00 5431 7,93 31,1
информацию
4 10,0 2746 4,01 15,7
При выполнении анализов с использованием антител возможна интерференция
5 30,0 1243 1,81 7,13 гетерофильными антителами в пробе пациента. У пациентов, имеющих постоянный контакт
(Притр типичной капи6р<яочной кривой. Не использовать дпя обсчета результатов.) с животными или проходивших иммунотерапию или диагностические процедуры с
12. Образцы использованием иммуноглобулинов ипи их фрагментов, могут вырабатываться антитела
Для каждого контрольного и анализируемого образца, прошедшего (т.е. НАМА), которые влияют на результаты иммунного анализа.
Влияние этих антител может привести к получению ошибочных результатов. Тщательно
инкубацию при 4"С и 37’С, найти на вертикальной оси калибровочного проверяйте результаты анализов пациентов с подозрением на наличие этих антител.
графика значение В/Т (%) или В/ВО (%), а на горизонтальной оси -
соответствующую концентрацию ангиотензина I в нг/мл.
7.3. Расчет активности плазматического ренина
Определение активности плазматического ренина проводится непрямым
методом по количеству ангиотензина I (А-1), образовавшегося in vitro в
течение часа. Базовый уровень А-1 в пробах, прошедших инкубацию при
ml IMMUNOTECH s.r.o - Radiovi 1 - 102 27 Prague 10 - Czech Republic - Phone.4420-272017444 - Fax: -^420-272017385
PI-3518-2012-01-26
И н с т р у к ц и я no
BECKMAN и с п о л ь з о в а н и ю
COULTER.
RUSSIAN
IVD
A l b u m i n R I A K I T IM3251
НАБОР для РАДИОИММУНОЛОГИЧЕСКОГО IN VITRO ОПРЕДЕЛЕНИЯ С€
АЛЬБУМИНА В МОЧЕ ЧЕЛОВЕКА
нормами радиационной безопасности и санитарными правилами работы с
1. ПРИНЦИП МЕТОДА радиоактивными веществами.
Определение альбумина отностися к конкурентным радиоиммунолотческим - В лабораториях запрещается принимать пищу, курить, пользоваться
видам анализа. Анализируемые образцы, контролы<ые и калибровочные пробы косметикой.
инкубируют в пробирках, покрытых антителами, в присутствии альбумина, - Для ограничения контакта с радиоактивными материалами
меченного '”1 в качестве метки. После окончания инк^ции удаляют жидкое рекомендуется использовать разовые перчатки и лабораторную
содержимое пробирок и измеряют связанную активность '“I. Концентрацию спецодежду.
альбумина определяют методом интерполяции по калибровочной кривой. - Для офаничения контакта с радиоактивными материалами
рекомендуется использовать разовые перчатки и лабораторную
2 РЕАГЕНТЫ, ВХОДЯЩИЕ В СОСТАВ НАБОРА
спецодежду.
Все реагенты стабильны при 2-8*С до окончания срока годности набора. Сроки - Все манипуляции с радиоактивными веществами следует проводить в
годности, указанные на этикетках флаконов с реагентами, относятся только к их специально оборудованных для этого помещениях, удаленных от мест
хранению в производственных условиях вплоть до момента комплектации постоянного пребывания людей.
набора и не распространяются наполученную заказчиком продукцию. - Необходимо репстрировать поступление и расход радиоактивных
Условия хранения компонентов набора после их растворения или разбавления материалов.
указаны в разделе ’Процедура анализа". - Лабораторное оборудование и посуду следует хранить отдельно, чтобы
2.1 Пробирки, покрытые антителами к альбумину: 2 х 50 шт . (готовы к предотвратить их зафязнение радиоактивными изотопами.
использованию) - Любой случай радиоактивного зафязнения или исчезновения
радиоактивного материала должен рассматриваться в соответствии с
2.2 Метка, раствор <’’1-альбумину: один флакон, 55 мл (готова к исполь­
законодательством.
зованию)
- Утилизация радиоактивных отходов должна осуществляться в
На дату изготовления флакон содержит 300 кБк '»1-альбумина в буфере с
соответствии с законодательством.
белком, азидом натрия (<0,1%; см. п. Меры предосторожности) и
красителем. 4.3 Азид натрия
Некоторые компоненты набора содержат азид натрия в качестве
2.3 Буфер для разведения альбумина (4х): 1 флакон, 25 мп
консерванта. Вступая в реакцию со свинцом, медью и латунью, азид
Препарат содержит бычий сывороточный альбумин и азид натрия (<0,1 %;
натрия образует взрывоопасные азиды металлов. Отработанные
см. п. Меры предосторожности). Концентрированный раствор должен
реагенты следует разбавлять большим количеством водопроводной воды,
быть перед использованием разведен.
после чего их можно сливать в канализацию.
2.4 Калибровочные пробы: 6 флаконов по 0,5 мл (готовы к исполь­
зованию). 5 ПОЛУЧЕНИЕ, ОБРАБОТКА, ХРАНЕНИЕ И РАЗВЕДЕНИЕ ОБРАЗВОВ
Калибровочные пробы содержат албумин в диапазоне концентраций от О - Концентрацию альбумина можно измерять в 24-х часовой моче или в
до 150 мг/л в буфере с бычьим сывороточным альбумином и азидом образцах мочи, собранной натощак (абсолютная концентрация в мг/л,
натрия (<0,1%, см. п. Меры предосторожности). Точные концентрации или соотношение альбумин/креатинин).
указаны на этикетках флаконов. Точные концентрации, калиброванные по - Друтм способом является определение альбумина в моче, собранной в
стандарту ERM-DA470. течение ночи, т.е., начиная от последнего мочеиспускания перед сном
2.5 Контрольная сыворотка: 1 флакон 0,5 мп (готова к испопьзованию) до первого утреннего мочеиспускания.
Флаконы содержат известное количество альбумина в буфере с бычьим - Образцы мочи можно хранить при 2-8 *С в течение 48 часов или в
сывороточным альбумином и азидом натрия (<0,1%, см. п. Меры течение 2 месяцев при <-18 ’С.
предосторожности). Ожидаемые диапазоны концентраций указаны на - Если концентрация альбумина в образце превышает максимальную кол.
дополнительном листке-вкладыше. пробу, его следует разбавить буфером.
3 ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ МАТЕРИАЛЫ И ОБОРУДОВАНИЕ 6 ПРОЦЕДУРА АНАЛИЗА
Помимо стандартного лабораторного оборудования необходимо иметь 6.1 Подготовка буфера для разведения
следующее: Тщательно перемешать содержимое флакона с концентратом и 75 мл
- микропипетка(50 мкл) дистиллированной воды. Подготовленный к работе буфер дня разведения
- полуавтоматическая пипетка (500 мкп) можно хранить при 2-8 *С до окончания срока годности на^ра.
- вихревой смеситель типа vortex
6.2 ПРОЦЕДУРА АНАЛИЗА (см. таблицу на следующей странице)
- горизонтальный или орбитальный встряхиватель
- водоструйный насос 7 РЕЗУЛЬТАТЫ
- гамма-счетчик для измерения активности ’“I. Результаты рассчитывают по калибровочной фивой методом интерполяции.
Анализ калибровочных проб и исследуемых образцов должен проводиться
4 МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
одновременно.
4.1 Общие замечания:
7.1 Калибровочная кривая
- Перед использованием довести реагенты до комнатной температуры.
Результаты, приведенные в этой инструкции, получены при построении
- Флаконы с калибровочными и контрольными пробами следует держать
капибровочной кривой в координатах logit-log (взвешенная кубическая
открытыми в течение как можно более кортокого промежутка времени с
ретрессия) с соотношением ВЛ'(%), или В/Во (%) на вертикальной оси
тем, чтобы предотвратить испарение воды.
калибровочного фафика и концентрацией альбумина в мг/л на
- Не смешивать реагенты из наборов разных серий.
горизонтальной оси . Друте методы обсчета могут давать несколько
- Пробирки предназначены для однократного использования.
отличающиеся результаты.
- Анализ калибровочных проб должен проводиться одновременно с
иаледуемыми образцами.
- Для получения воспроизводимых результатов очень важно соблюдать
рекомендуемые условия встряхивания пробирок.
- Анализ рекомендуется проводить в дубликатах.
4.2 Основные правила обращения с радиоактивными веществами
Получение, использование и транспортировка радиоактивных материалов
должны происходить в соответствии с принятыми в данной стране
PI-3251-2012-01-26
Общий счет: 101 153 имп./мин. Среднее Стандартное Минимум -
значение отклонение максимум
Капибровочные Альбумин Имп./мин.
пробы (мг/п) (п=3) ВП{%) в;во(%) Первая утренняя моча (мг/л) 2,70 1,52 0,93-7,60
О 70097 69.3 100 Ночная моча (мкг/мин.) 5,13 3,02 1,73-14,7
0,96 61 984 61.3 88.4 |Суточная моча (мкг/мин.) 2,92 2,26 0,35-8,93
3,85 39626 39,2 56.5
14,5 16158 16,0 23,1 10 АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
48,0 6189 6,1 8,8
(Болев подробная информация приведена в разделе APPENDIX)
145 2691 2,7 3,8
(Пример типичной калибровочной кривой. Не испопьзовть дпя обсчета результатов.) 10.1 Чувствительность
7.2 Образцы 10.1.1 Аналитическая чувствительность: 0,5 мг/л
Для каждого анализируемого или контрольного образца найти на 10.1.2 Функциональная чувствительность: 0,8 мг/л
вертикальной оси калибровочного графика соотношение 8Я или В/Во, а на
10.2 Воспроизводимость
горизонтальной оси - соответствующую концентрацию альбумина в мг/л.
Результаты, лолученные в разбавленных лробах, следует умножить на 10.2.1 Внутри анализа
фактор разведения. Образцы анализировали в 12 релликатах в одной серии определений.
Коэффициент вариации не превышал 6,1 %.
7.3 Расчеты
Суточную и ночную скорость экскреции альбумина можно рассчитать ло 10.2.2 Между анализами
формуле: Анализ образцов в дубликатах проводили в 16 различных сериях
определений. Коэффициент вариации измеренного уровня албумина в
7.3.1 24-х часовая экскреция в мочу
сыворотке крови не превышал 10 %.
альбумин (мг/24ч) = (мг/п) х \/и,{л)
10.3 Точность
7.3.2 Ночная экскреция альбумина в мочу
альбумин (мкг/мин) = [Cv»< (мг/л) х V (л) х 10ОО] /1 (мин) 10.3.1 Тест на разведение
Где Образцы мочи с высокой концентрацией альбумина серийно разводили
Сальд.: измеренная концентрация альбумина буфером для разбавления. Измеренное значение ’отфытия" составило от
V: объем мочи в литрах 80% до 100%.
t; продолжительность сбора мочи в минутах 10.3.2 Тест на "открытие"
В образцы мочи вносили альбумина в концентрации 50 мг/л. Измеренное
8 КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
значение "открытия ’ составило от 91 % до 114 %.
В соответствии с требованиями Good latxiratory practices для контроля качества
проводимых исследований следует регулярно использовать контрольные 10.4 Диапазон определений (от аналитической чувствительности до значения
образцы, которые должны проходить те же стадии анализа, что и наивысшей калибровочной пробы): 0,5 -150 мг/л.
анализируемые пробы. Результаты контроля качества рекомендуется 11. ОГРАНИЧЕНИЯ МЕТОДА
обрабатывать с помощью специальных статистических методов. Нарушение методики проведения анализа может привести к искажению
В случае серьезного повреждения упаковки, или в случае несоответствия результатов исследования.
полученных результатов аналитическим характеристикам (см.л.Ю) обратитесь, Результаты определения должны быть интерпретированы в свете общей
пожалуйста, к вашему дистрибьютору или к нашим специалистам: клинической картины пациента, включая анамнез, данные других тестов и
Тел.: -*420 272 017 391; Факс: -*420 272 017 385; подходящую иную информацию
E-mail: imunochenn@beckman com Тел.: +7 495 9371664; Для проведения анализа нельзя использовать образцы мочи пациентов с
Факс: *7 495 254 64 07; E-mail: beckman.ru@beckman.com воспалением мочевыводящих путей, а также после физической нагрузки,
9 ОЖИДАЕМЫЕ ЗНАЧЕНИЯ включая продолжительное пребывание на ногах.
При выполнении анализов с использованием антител возможна интерференция
Значения до 17 мкг выделенного альбумина в минуту (25 мг/ 24 часа) считаются
гетерофильными антителами в пробе пациента. У пациентов, имеющих
нормальными. Приведенные значения, соответствующие нормальным, могут
постоянный контакт с животными или проходивших иммунотерапию или
быть использованы как ориентировочные.
диагностические процедуры с использованием иммуноглобулинов или их
В каждой лаборатории рекомендуется установить собственные референсные
фрагментов, могут вырабатываться антитела (т.е. НАМА), которые влияют на
уровни.
результаты иммунного анализа.
В таблице в качестве примера приведены уровни, определенные у 18 здоровых
Влияние этих антител может привести к получению ошибочных результатов.
человек в образцах первой утренней мочи, в образцах суточной мочи и в
Тщательно проверяйте результаты анализов пациентов с подозрением на
образцах ночной мочи.
наличие этих антител.
6.2 Процедура АНАЛИЗА
Стадия 1 Стадия 2 Стадия 3
Внесение реагентов * Инкубация Измерение результатов
В покрытые антителами
пробирки последовательно
внести:
Тщательно удалить
Инкубировать 1 час
содержимое пробирок
- 50 мкл калибровочных, при 18-25 °С
(кроме проб «Т»).
контрольных и и постоянном встряхивании
анализируемых проб (> 280 осц./мин.).
Измерить активность
и
(имп./мин.) в течение 1 минуты.
- 500 мкл метки.
Перемешать.
* В две дополнительные пробирки для определения общего счета (Т) внести по 500 мкл метки.
IMMUNOTECH s.r.o. - RadiovS 1 -102 27 Prague 10 - Czech Republic - Phone, -«(20-272017444 - Fax: -420-272017385
ш1
PI-3251-2012-01-26
И н с т р у к ц и я no
и с п о л ь з о в а н и ю
BECKMAN
COULTER.
RUSSIAN
IVD
C - P E P T I D E I R M A K I T e^^,vlM3639
НАБОР ДЛЯ ИММУНОРАДИОМЕТРИЧЕСКОГО IN VITRO ОПРЕДЕЛЕНИЯ
В СЫВОРОТКЕ, ПЛАЗМЕ И МОЧЕ ЧЕЛОВЕКА
- Получение, использование и транспортировка радиоактивных материалов должны
1. ПРИНЦИП МЕТОДА происходить в соответствии с принятыми в данной стране нормами радиационной
Иммунорадиометрическое определение С-пептида относится к анализам типа безопасности и санитарными правилами работы с радиоактивными вещеавами.
«сэндвич», С помощью данного набора можно проводить пряное определение - В лабораториях запрещается принимать пищу, курить, пользоваться косметикой.
- Не пипетировать растворы радиоактивных веществ ртом.
С-пептида в образцах сыворотки, плазмы и разведенных пробах мочи. В наборе
- Для офаничения контакта с радиоактивными материалами рекомендуется
используется два вида мышиных моноклональных антител к различным эпитопам использовать разовые перчатки и лабораторную спецодежду.
С-пептида. - Все манипуляции с радиоактивными веществами следует проводить в специально
Исследуемые образцы, контрольные и калибровочные пробы инкубируют в оборудованных для этого помещениях, удаленных от мест постоянного пребывания
пробирках, покрытых одним видом моноклональных антител, совместно с людей.
раствором других моноклональных антител, меченных '®1. После окончания инку­ - Необходимо регистрировать поступление и расход радиоактивных материалов.
бации удаляют жидкое содержимое, промывают пробирки и измеряют связанную - Лабораторное оборудование и посуду следует хранить 0тделы(0, чтобы
предотвратить их зафязнение радиоактивными изотопами.
активность ’“I. Концентрацию С-пептида, прямо пропорциональную связанной
- Любой случай радиоактивного эафязнения или исчезновения радиоактивного
активности, определяют методом интерполяции по калибровочной кривой. материала должен рассматриваться в соответствии с законодательством.
- Утилизация радиоактивных отходов должна осуществляться в соответствии с
2. РЕАГЕНТЫ, ВХОДЯЩИЕ В СОСТАВ НАБОРА
законодательством.
Все реагенты стабильны при 2-8*С до окончания срока годности набора, указанного на
этикетке. Сроки годности, указанные на этикетках флаконов с реагентами, относятся только к 4.3 Азид натрия
их хранению в производственных условиях вплоть до монент<| комплектации набора и не Некоторые компоненты набора содержат азид натрия в качестве консерванта. Вступая
распространяются наполученную заказчиком продукцию. в реакцию со свинцом, медью и латунью, азид натрия образует взрывоопасные азиды
Условия хранения компонентов набора после их растворения или разбавления указаны в металлов. Отработанные реагенты следует разбавлять большим количеством
разделе 1Процедура анализа». водопроводной воды, после чего их можно сливать в канализацию.
2.1 Пробирки, покрытые моноклонапьиыми антителами к С-пептиду: 2 х 4.4 Сыворотка крови человека
50 шт. (готовы к использованию). С исследуемыми образцами сыворотки крови следует обращаться как с потенциально
инфекционным материалом, могущим содержать вирусы СПИД и гепатита. Утилизация
2..2 Метка, раствор моноклональных антител к С-пептиду, меченных ’”1: отходов должна осуществляться в соответствии с законодательством.
один флакон, 17 мл (готова к использованию).
На дату изготовления флакон содержит 640 кБк '^(.иммуноглобулинов в 5. ПОЛУЧЕНИЕ, ОБРАБОТКА, ХРАНЕНИЕ И РАЗВЕДЕНИЕ ОБРАЗЦОВ
буфере с бычьим сывороточным альбумином, фасителем и азидом натрия 5.1 Получение образцов плазмы и сыворотки крови
(< 0.1 %, см. п. Меры предосторожности). - Собрать кровь в чистые сухие пробирки, или пробирки, содержащие ЭДТА
2.3. Буфер для разведения образцов (C-peptide - Buffer): один флакон, или цитрат натрия.
25 мл (готов к использованию). - Отделить сыворотку/плазму крови центрифугированием.
Буферный раствор содержит бычий сывороточный альбумин и азид натрия - Образцы сыворотки и плазмы можно хранить при 2-8"С в течение 24
{< 0.1 %, см. п. Меры предосторожности). часов. Для более длительного хранения их необходимо разделить на
аликвоты и заморозить при температуре <-18*С. Избегать повторного
2.4 Калибровочные пробы: 6 флаконов (лиофилизованные препараты).
замораживанияч)паивания проб.
Калибрювочные пробы содержат С-пептид в диапазоне концентраций от О
С-пептид человека в составе сыворотки или плазмы крови является
до 6400 пмоль/л в буфере с бычьим сывороточным альбумином и азидом
достаточно лабильной молекулой (значительная степень его деградации
натрия (< 0.1 %, см. п. Меры предосторожности). Точные концентрации
наблюдается уже через несколько дней). Поэтому необходимо строго
С-пептида, калиброванные по международному стандарту WHO IRR
соблюдать рекомендации по хранению анализируемых образцов.
C-Peplide 84/510, указаны на этикетках флаконов.
- Если концентрация С-пептида в исследуемом о^азце выходит за
2.5 Контрольная сыворотка: два флакона (лиофилизованные препараты). пределы калибровочной кривой, его необходимо разбавить специальным
Флаконы содержат лиофилизованную бычыо сыворотку с известным буфером и провести анализ повторно.
количеством С-пептида и азидом натрия (< 0.1 %, см. п. Меры
5.2 Получение и обработка образцов мочи
предосторожности). Ожидаемый диапазон концентраций указан на
- Собрать суточную мочу.
отдельном листке-вкладыше.
- Измерить ее объем.
2.6 Промывочный раствор (20х): один флакон, 50 мл. - Перед проведением анализа мочу следует отцентрифугировать или
Концентрированный раствор должен быть перед использованием разведен. профильтровать.
- Для хранения образцов их следует разделить на аликвоты и заморозить
3. ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ МАТЕРИАЛЫ И ОБОРУДОВАНИЕ
при температуре <-18'С.
Помимо стандартного лабораторного оборудования необходимо иметь - Так как концентрация С-пептида в пробах мочи часто выходит за пределы
следующее:
калибровочной кривой, их рекомендуется разводить специальным
- микропипетки (50 мкл; 25 мкл)
буфером в соотношении 1:21, например, смешать 25 мкл мочи и 500 мкл
- полуавтоматическая пипетка (150 мкл)
буфера для разведения.
- вихревой смеситель типа vortex
- горизонтальный или орбитальный встряхиватель (не менее 280 осц./мин.). 6. ПРОЦЕДУРА АНАЛИЗА
- водоструйный насос
6.1 Подготовка и хранение реагентов
- гамма-счетчик для измерения активности ”5|
Довести все реагенты до комнатной температуры.
4. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ 6.1.1 Растворение калибровочных проб
4.1 Общие замечания: Растворить лиофилизованные препараты в указанном на этикетке объеме
- Перед использованием довести реагенты до комнатной температуры. дистиллированной воды. Через 10 минут аккуратно перемешать
- Не смешивать реагенты из наборов разных серий. содержимое флаконов, избегая образования пены. Подготовленные к
- Анализ калибровочных и исследуемых проб должен проводиться работе растворы можно хранить в течение 1 недели при 2-8 ‘С, или
одновременно. разделенными на аликвоты при <-18’С до окончания срока годности
- Для получения воспроизводимых результатов очень важно соблюдать набора.
рекомендуемые условия встряхивания пробирок. 6.1.2 Растворение контрольных сывороток
- Анализ рекомендуется проводить в дубликатах. Растворить лиофилизованные препараты в указанном на этикетке объеме
- Пробирки предназначены для однократного использования. дистиллированной воды. Через 10 минут аккуратно перемешать
4.2 Основные правила обращения с радиоактивными веществами. содержимое флаконов, избегая образования пены. Подготовленные к
работе контрольные сыворотки можно хранить в течение 1 дня при 2-8 “С
PI-3639-2012-01-26
или разделенными на аликвоты при <-18*С до окончания срока годности
набора. Среднее Медиана Стандартное Минимум-
Значение отклонение Максимум
6.1.3 Приготовление промывочного раствора пмоль/л 519 471 265 32,6- 1458
Смешать содержимое флакона с концентратом промывочного раствора и нг/мл 1,56 1,41 0,766 0,098-4,380
950 мл дистиллированной воды. Подготовленный к работе промывочный Пограничные концентрации для 95% популяции составили
раствор можно хранить при 2-8 “С до окончания срока годности набора. 160-1100 пмопь/л (0,48-3,3 нг/мл).
6.2 Схема анализа
В таблице в качестве примера приведена средняя концентрация С-пептида
Стадия 1 Стадия 2 Стадия 3
у двенадцати молодых здоровых людей в ходе теста на толерантность к
Внесение р«агентов * Инкубация Измерение результатов
глюкозе.
В покрытые антителами
пробирки последо­ Тщательно удалить Время Средняя концентрация Средняя концентрация
вательно внести: Инкубировать соде (к р р ж о и м м е о п е р п о р б о Т б ) и . рок (мин.) С-пепти ± д S а . ( D п . моль/л) С-пепт 1 и S д . а D ( . нг/мл)
- 50 мкл калибровочных, 2 часа 0 520 ± 169 1,56 ±0,507
контрольных и анализи­ при 18-25 *С Промыть пробирки 2 раза 35 2274 ±1116 6,82 ± 3,348
руемых проб (сыворотка, и постоянном по 2 мл промывочного 65 3067 ± 987 9,20 ±2,961
плазма,разведенная встряхивании раствора. 95 3488 ± 1038 10,46 ±3,114
моча)и (> 280 осц./мин.). 125 3008± 593 9,02 ±1,779
-150 мкл метки. Измерить активность '=*1 9.2 Экскреция с мочой:
Перемешать. (имп./мин.). В таблице приведены результаты анализа 48 образцов первой порции
Среднее Стандартное Минимум-
' Для определения общей активности ”5| (имп./мин.) в две дополнительные значение отклонение Максимум
пробирки внести по 150 мкл раствора метки. Первая порция утренней мочи
20,12 16,7 1,22 - 66,39
(нмоль/л)
7. РЕЗУЛЬТАТЫ
Суточная моча (нмоль/24 чка) 23,13 12,77 7,76-49,38
Результаты рассчитывают методой интерлоляции по калибровочной кривой, лолученной
одновременно с анализом неизвестных образцов. 10. АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
7.1 Калибровочная кривая (более подробная информзция приведена в разделе “APPENDIX")
Результаты, приведенные в этой инструкции, получены при построении калибровочной 10.1 Чувствительность
кривой в логарифмических координатах («сплайн» функция) со связанной активностью
<^| (В - Во, ИМП./МИН.] по вертикальной оси и концентрацией С-лелтида (лмоль/л) по 10.1.1 Аналитическая чувствительность: 5 пмоль/л (0,015 нг/мл)
горизонтальной оси калибровочного фафика. Другие методы обсчета могут давать 10.1.2 Функциональная чувствительность: 13,9 пмоль/л (0,042 нг/мл)
несколько отличающиеся результаты.
10.2 Специфичность
Эбщий счет: 227129 имл./мин. Антитела, используемые в данном наборе, не имеют перекрестной реакции
С-пептид
Кал. пробы Имп./мин. (п°3) В/Т(%) В-Во(имп./мин.) с инсулином, панкреатическим полипептидом, соматостатином и
(пмоль/л)
глкжагоном. Перекрестная реакция с проинсулином составляет всего лишь
0 0 53 0,02
1 32 985 0,43 932 3% (по весу, что соответствует 10% по молярному соотношению).
2 103 2 935 1,29 2882 10.3 Воспроизводимость
3 375 10 863 4,78 10810
4 1530 42 652 18,78 42 599 10.3.1 Внутри анализа
5 6100 118 237 52,06 118184 Анализ образцов проводили в 25 репликатах в пределах одной серии
(Прииер типичной калибровочной кривой. Не использовать для обсчета результатов.) определений. Коэффициент вариации измеренных уровней С-пептида в
сыворотке крови не превышал 3,1 %, а в пробах мочи - 3,2 %.
7.2 Образцы
Для каждого образца найти на вертикальной оси калибровочного фафика 10.3.2 Между анализами
значение В-Во (имп./мин.), а на горизонтальной оси соответствующую Анализ образцов в дубликатах проводили в 10 различных сериях
концентрацию С-пептида. Результаты, полученные для разбавленных проб, определений. Коэффициент вариации измеренных уровней С-пептида в
следует умножить на фактор разведения. Для перевода концентраций из сыворотке крови не превышал 5,2 %, а в пробах мочи -4,8%.
пмоль/л в нг/мл нужно умножить полученный результат на 0.003. 10.4 Точность
7.3 Образцы мочи 10.4.1 Тест на разведение
Расчет концентраций С-лептида в разведенных образцах мочи (1:21) Образцы сыворотки крови и мочи с высокой концентрацией С-пептида
проводится согласно п. 7.2. Суточную экскрецию С-пептида с мочой разводили специальным буфером для разведения проб. Процент
(нмоль/24часа) можно рассчитать по формуле: «открытия» составил 96-114% для образцов сыворотки крови и 86-105% для
проб мочи.
С-пептид (нмопь/24часа) = изм^р^ннэя крнц^нтрэция (пмоль/л) х 21 х V
1000 10.4.2 Тест на «открытие» стандартной добавки
Известные количества С-пептида добавляли к образцам сыворотки крови и
где V = объем суточной мочи в литрах,
мочи. Измеренная величина «открытия» составляла от 83 до 105% для
8. КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА образцов сыворотки крови и 80-104% для проб мочи.
В соответствии с требованиями Good laboratory practices для контроля качества проводимых
10.5 Диапазон определений (от аналитической чувствительности до значения
исследований следует регулярно использовать контрольмые образцы, которые должны
наивысшей калибровочной пробы): : 5 - 6400 пмоль/л.
проходить те же стадии анализа, что и анализируемые пробы. Результаты контроля качества
рекомендуется обрабатывать с помощью специальных статистических методов.
11. ОГРАНИЧЕНИЯ МЕТОДА
В случае серьезного повреждения упаковки, или в случае несоответствия полученных
Нарушение методики проведения анализа может привести к искажению результатов
результатов аналитическим характеристикам (см.п.Ю) обратитесь, пожалуйста, к вашему
исследования. Результаты определения должны быть интерпретированы в сеете общей
дистрибьютору или к нашим специалистам:
клинической картины пациента, включая анамнез, данные других тестов и подходящую иную
Тел.:-*420 272 017 391: Факс: ■►420 272 017 385: E-mail: imunoctiemiabecl4iian.com
информацию
Тел.:+7 495 9371664; Факс: +7 495 254 64 07: Ечпай: becltman.rulSibeckman.com
Для проведения анализа нельзя использовать образцы сыворотки крови с
9. ОЖИДАЕМЫЕ ЗНАЧЕНИЯ гемолизом, а также плазму, полученную с добавлением гепарина.
В каждой лаборатории рекомендуется установить собственные уровни С-пептида, «Хук-эффект» в данном наборе может наблюдаться при анализе проб с
концентрацией С-пептида, превышающей 50 ООО пмоль/л. Образцы с
соответствующие нормальным. Приведенные ниже значения являются
ориентировочными. предполагаемой высокой концентрацией С-пептида следует разбавить
специальным буфером для разведения проб, а полученный результат умножить
9.1. Сыворотка и плазма крови:
на фактор разведения.
• Результаты анализа образцов сыворотки крови, получежых натощак у 156 При выполнении анализов с использованием антител возможна интерференция
здоровых людей, приведены в таблице. гетерофильными антителами в пробе пациента. У пациентов, имеющих постоянный контакт с
животными или проходивших иммунотерапию или диагностические процедуры с
использованием иммуноглобулинов или их фрашентов, могут вырабатываться антитела (те.
НАМА), которые влияют на результаты иммунного анализа.
Влияние зтих антител может привести к получению ошибочных результатов. Тщательно
проверяйте результаты анализов пациентов с подозрением на наличие этих антител.
■I IMMUNOTECH s.r.o. - RadiovS 1 -102 27 Prague 10 - Czech Republic - Phone. -Ц20-272017444 - Fax: +420-272017385
PI-3639-2012-01-26
Инструкция no
IMMUNOTECH
A BECKMAN COULTER COMPANY использованию
RUSSIAN
IVD R M A C A 1 2 5 a n tig e n ^ : IM 2233
Г Ш Ш 1 НАБОР ДЛЯ ИММУНОРАДИОМЕТРИЧЕСКОГО IN VITRO ОПРЕДЕЛЕНИЯ АНТИГЕНА
J с е
CA125 В СЫВОРОТКЕ И ПЛАЗМЕ КРОВИ ЧЕЛОВЕКА
certified
- Анализ калибровочных и исследуемых проб должен проводиться
1. ПРИНЦИП МЕТОДА
одновременно.
Иммунорадиомертическое определение антигена СА 125 относится к анализам
типа ’сэндвич', в котором используется два вида мышиных монокпональных - Для получения воспроизводимых результатов очень важно соблкадать
антитеп к различным эпитопам его молекулы. рекомендуемые условия встряхивания пробирок.
Исследуемые образцы, контрольные и калибровочные пробы инкубируют в - Анализ рекомендуется проводить в дубликатах.
пробирках, покрытых одним видом моноклональных антител совместно с - Пробирки только для одноразового применения.
раствором других антител, меченных после окончания инкубации 4.2 Основные правила обращения с радиоактивными веществами.
содержимое пробирок удаляют, отмывают несвязанные меченые антитела и Получение, использование и транспортировка радиоактивных материалов
измеряют связанную активность ’»1. Концентрацию СА 125, прямо должны происходить в соответствии с принятыми в данной стране
пропорциональную связанной активности, определяют методом интерполяции нормами радиационной безопасности и санитарными правилами работы с
по калибровочной кривой. радиоактивными веществами.
- В лабораториях запрещается принимать пищу, курить, пользоваться
2. РЕАГЕНТЫ, ВХОДЯЩИЕ В СОСТАВ НАБОРА
косметикой.
Все реагенты стабильны при 2-8'С до окончания срока годности набора, - Не пипетировать растворы радиоактивных веществ ртом.
указанного на упаковке. - Для ограничения контакта с радиоактивными материалами
2.1 Пробирки, покрытые моноклональными антителами к антигену рекомендуется использовать разовые перчатки и лабораторную
СА 125:2 X 50 шт (готовы к использованию). спецодежду.
- Все манипуляции с радиоактивными веществами следует проводить в
2.2 Метка, моноклональные антитела к антигену СА 125, меченные ’’^1:
1 флакон 33 мл (готова к использованию). специально оборудованных для этого помещениях, удаленных от мест
На дату изготовления флакон содержит 480 кБк I меченных постоянного пребывания людей.
иммуноглобулинов в буфере с бычьим сывороточным альбумином, - Радиоактивные вещества следует хранить с использованием
красителем и азидом натрия (< 0,1 %, см. п. Меры предосторожности). контейнеров в специально отведенных для этого местах.
Вскрытый препарат метки можно хранить при 2-8°С до окончания срока - Необходимо регистрировать поступление и расход радиоактивных
материалов.
годности на&ра.
- Лабораторное оборудование и посуду следует хранить отдельно, чтобы
2.3 Калибровочные пробы: 4 флакона по 1 мл -f 2 флакона с 5 мл предотвратить их загрязнение радиоактивными изотопами.
“нулевой” калибровочной пробы (готовы к использованию). - Любой случай радиоактивного зафязнения или исчезновения
Калибровочные пробы содержат антиген СА 125 человека в диапазоне радиоактивного материала должен рассматриваться в соответствии с
концентраций от О до 400 Е/мл в буфере с бычьим сывороточным законодательством.
альбумином и азидом натрия (< 0,1 %, см. п. Меры предосторожности). - Утилизация радиоактивных отходов должна осуществляться в
Точные концентрации указаны на этикетках флаконов. Вскрытые флаконы соответствии с законодательством.
с калибровочными пробами можно хранить при 2-8°С в течение двух
4.3 Азид натрия
недель. Для более длительного хранения калибровочные пробы нужно
Некоторые компоненты набора содержат азид натрия в качестве
разделить на несколько аликвот и заморозить при температуре <-18°С.
консерванта. Вступая в реакцию со свинцом, медью и латунью, азид
Значения капибровочных проб были получены с помощью внутреннего
натрия образует взрывоопасные азцды металлов. Отработанные
стандарта.
реагенты следует разбавлять большим количеством водопроводной воды,
2.4 Контрольная сыворотка: 1 флакон 1 мл (готова к использованию) после чего их можно сливать в канализацию.
Флакон содержит сыворотку крови человека с известной концентрацией
4.4 Сыворотка крови человека
антигена СА 125 и азидом натрия (<0,1%, см. п. Меры предосторожности).
Ожидаемый диапазон концентраций указан на этикетке флакона. Материал человеческого происхождения, входящий в состав компонентов
набора, не содержит антител к HIV 1, HIV 2, HCV и к поверхностному
Вскрытый флакон с контрольной сывороткой можно хранить при 2-8’С в
антигену вируса гепатита В (HBsAg). Тем не менее, ни один из
течение двух недель. Для более длительного хранения ее нужно
существующих методов анализа не может гарантировать полного
разделить на несколько аликвот и заморозить при температуре <-18'С.
отсутствия инфекционных агентов в исследуемом материале. Поэтому
2.5 Промывочный раствор (20х): 1 флакон 50 мл (готов к использованию) при работе с компонентами набора следует соблюдать необходимые
Содержимое флакона с концентрированным промывочным раствором меры предосторожности.
должно быть разведено в 950 мл дистиллированной воды. С исследуемыми образцами сыворотки крови следует обращаться как с
Подготовленный к работе промывочный раствор можно хранить при 2-8”С потенциально инфекционным материалом, могущим содержать вирусы
до окончания срока годности набора. СПИД и гепатита. Весь использованный материал должен быть уничтожен
Внимание: Температура и ерш годности, указанные на этикетках флаконов по действующим государственным правилам и инструкциям.
с реагентами, относятся только к их хранению в производственных условиях
вплоть до момента комплектации набора и не распространяются на 5. ПОЛУЧЕНИЕ, ОБРАБОТКА, ХРАНЕНИЕ И РАЗВЕДЕНИЕ ОБРАЗЦОВ
полученную пользователем продукцию. - Собрать кровь в чистые сухие пробирки, или пробирки, содержащие
гепарин.
3. ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ МАТЕРИАЛЫ И ОБОРУДОВАНИЕ - Отделить сыворотку или плазму крови центрифугированием.
Помимо стандартного лабораторного оборудования, необходимо иметь - Образцы сыворотки и плазмы можно хранить при 2-8”С в течение
следующее; 24 часов. Для &лее длительного хранения их необходимо разделить на
-микропипетки (100 мкл) аликвоты и заморозить при температуре <-18'С. Избегать повторного
- полуавтоматические пипетки (300 мкл, 2 мл) замораживания-оттаивания проб.
■ вихревой смеситель типа "vortex" - Если концентрация СА 125 в исследуемом образце выходит за пределы
- горизонтальный или орбитальный встряхиватель калибровочной фивой, его необходимо развести нулевой
- водоструйный насос калибровочной про&й.
- гамма-счетчик для измерения активности '“I.
6. ПРОЦЕДУРА АНАЛИЗА
4. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
6.1 Подготовка реагентов
4.1 Общие замечания: - Довести все реагенты до комнатной температуры.
- Перед использованием довести реагенты до комнатной температуры. - Развести 50 мл концентрата промывочного раствора (20 X) в 950 мл
- Не смешивать реагенты из наборов разных серий. дистиллированной воды.
17/24
PI-2233-2008-07-18
6.2 Процедура анализа
10. АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
Иммунологическая Промывка Измерение (более подробная информация приведена в разделе “APPENDIX")
_______стадия_______ результатов 10.1 Аналитическая чувствительность: 1 Е/мл
В пофытые антителами
пробирки 10.2 Специфичность: данное определение специфично к СА 125.
последовательно 10.3 Воспроизводимость
внести: Удалить содержимое Внутри анализа:
100 мкл калибровочных пробирок Анализ образцов проводили в 25 репликатах в пределах одной серии
проб или разведенных (кроме проб «Т») определений. Коэффициент вариации измеренных уровней СА 125 в
образцов и контрольных сыворотке крови не превышал 3,4 %.
сывороток Промыть их Измерить связанную (В)
Между анализами:
300 мкл метки* 3 раза по 2 мл и общукз (Т) активность
промывочного раствора. 1!5| в течение 1 минуты Анализ образцов в дубликатах проводили в 25 различных сериях
Перемешать Удалить жидкость. определений. Коэффициент вариации измеренных уровней СА 125 в
сыворотке крови не превышал 11,1 %.
Инкубировать 10.4 Точность
4 часа при18-25°С Тест на разведение
и постоянном Образцы с высокой концентрацией СА 125 серийно разводили "нулевой'
встряхивании калибровочной пробой. Процент 'открытия' составил от 102% до 124%.
(400 хц./мин.)
Тест на “открытие” стандартной добавки
* 8 две дополнитепьные пробирки внести по 300 мкл метки для измерения Известные количества СА 125 добавляли к образцам сыворотки крови с
общей активности низким его содержанием. Измеренная величина «открытия» составляла от
89% до 105%.
7. РЕЗУЛЬТАТЫ
Результаты рассчитывают методом интерполяции по калибровочной фивой, 10.5 Диапазон определений (от аналитической чувствительности до значения
полученной одновременно с анализом неизвестных образцов. наивысшей калибровочной пробы): 1 - 400 U/mL.
7.1 Калибровочная кривая 11. ОГРАНИЧЕНИЯ МЕТОДА
Результаты, приведенные в этой инструкции, получены при построении Нарушение методики проведения анализа может привести к искажению
калибровочной кривой в полулогарифмических координатах («сплайн» результатов исследования. Результаты определения должны быть
функция) с соотношением В/Т (%) или В/Вмакс. (%) по вертикальной оси и интерпретированы в свете общей клинической картины пациента, включая
концентрацией СА 125 антигена (Е/мл) по горизонтальной оси анамнез, данные других тестов и подходящую иную информацию.
калибровочного графика. Другие методы обс^та могут давать несколько При выполнении анализов с использованием антител возможна интерференция
отличающиеся результаты. гетерофильными антителами в пробе пациента. У пациентов, имеющих
Общий счет: 166 853 имп./мин. постоянный контакт с животными или проходивших иммунотерапию или
Кал. пробы СА 125 (Е/мл) ИМП./МИН. В/Т(%) диагностические процедуры с использованием иммуноглобулинов или их
0 0 157 0,09 фрагментов, могут вырабатываться антитела (т.е. НАМА), которые влияют на
1 12 1076 0,64 результаты иммунного анализа.
2 40 3314 1,99 Влияние этих антител может привести к получению ошибочных результатов.
3 160 12412 7,44 Тщательно проверяйте результаты анализов пациентов с подозрением на
4 400 28904 17,3 наличие этих антител.
(Пример типичной калибровочной кривой. Не использовать для обсчета результатов.) Интерференция
7.2 Образцы Присутствие триглицеридов (до 7 нмоль/л) в образцах не влияет на
Для каждого образца найти на вертикальной оси калибровочного графика результаты анализа. Высокие уровни гемоглобина (>0,5, г/л) и билирубина
значение ВЯ(%) или В/Вмакс.(%), а на горизонтальной оси (>100 мкмоль/л) в образце могут оказать влияние на результаты анализа.
соответствующую концентрацию СА 125 в Е/мл. При необходимости нужно “Хук-эффект"
провести коррекцию результатов с учетом фактора разведения. При концентрациях СА 125 до 20 ООО Е/мл 'хук-эффект' не наблюдается.
8. КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
В соответствии с требованиями Good laboratory practices для контроля качества
проводимых исследований следует регулярно использовать контрольные
образцы, которые должны проходить те же стадии анализа, что и
анализируемые пробы. Результаты контроля качества рекомендуется
обрабатывать с помощью специальных статистических методов.
В случае серьезного повреждения упаковки, или в случае несоответствия
полученных результатов аналитическим характеристикам (см.п.10) обратитесь,
пожалуйста, к нашим специалистам: Тел.:+420 272 017 391;
Факс: +420 272 017 385; e-mail: irrunoctienn(5)beckmancoulter.com
Тел.:+7 495 9371664; Факс: +7 495 254 64 07; e-mail:
b^(;J<m?n.rug)t^kmpnp9^jHer.TOm
9. ОЖИДАЕМЫЕ ЗНАЧЕНИЯ
В каждой лаборатории рекомендуется установить собственные референсные
уровни антигена СА 125. Приведенные ниже значения, полученнью при анализе
образцов здоровых людей, являются ориентировочными.
Количество Среднее значение 95% персентиль 99% персентиль
обследованных (к)
181 11 Е/мл 31,2 Е/мл 55,3 Е/мл
Mfl IMMUNOTECH SAS -130 av. de Lattre de Tassigny - B.P.177 - 13276 Marseille Cedex 9 France - Тёк (33) 4 91 17 27 00 - Fax: (33) 4 91 41 43 58
PI-2233-2008-07-18 18/24
И н с т р у к ц и я no
IMMUNOTECH
A BECKMAN COULTER COMPANY и с п о л ь з о в а н и ю
RUSSIAN
3;: IM 2397
К Я Ш Ш дТ! НАБОР для ИММУНОРАДИОМЕТРИЧЕСКОГО IN VITRO ОПРЕДЕЛЕНИЯ АНТИГЕНА, ^ ^
§ g iJ lj3 4 8 ^ АССОЦИИРОВАННОГО С ГЕНОМ MUC-1 (СА 15-3), В СЫВОРОТКЕ И ПЛАЗМЕ КРОВИ ЧЕЛОВЕКА ^ V
certified
1. ПРИНЦИП МЕТОДА - Не смешивать реагенты из наборов разных серий.
Иммунорадиомертическое определение антигена, ассоциированного с геном - Анализ калибровочных и исследуемых проб должен проводиться
МиС-1 (СА 15-3), относится к анализам типа "сэндвич" в котором одновременно.
используется два вида мышиных моноклональных антител к различным - Дпя получения воспроизводимых результатов очень важно соблюдать
эпитопам его молекулы. рекомендуемые условия встряхивания пробирок.
Исследуемые образцы, контрольные и калибровочные пробы инкубируют в - Анализ рекомендуется проводить в дубликатах.
пробирках, пофытых одним видом моноклональных антител. Затем удаляют - Пробирки предназначены для однократного использования
содержимое пробирок, промывают, и для выявления наличия антигена СА 15-3 в 4.2 Основные правила обращения с радиоактивными веществами.
исследуемом образце проводят еще одну инкубацию с раствором других Получение, использование и транспортировка радиоактивных материалов
антител, меченных '“I, После окончания инкубации содержимое пробирок должны происходить в соответствии с принятыми в данной стране
удаляют, отмывают несвязанные меченые антитела и измеряют связанную нормами радиационной безопасности и санитарными правилами работы с
активность '“I. Концентрацию СА 15-3, прямо пропорциональную связанной радиоактивными веществами.
активности, определяют методом интерполяции по калибровочной кривой. - В лабораториях запрещается принимать пищу, курить, пользоваться
Определение уровня антигена СА 15-3 показано для наблюдения в динамике и косметикой.
контроля эффективности лечения больных раком молочной железы. Повышение - Не пипетировать растворы радиоактивных веществ ртом.
концентрации СА 15-3 в сыворотке или плазме крови может определяться как - Для ограничения контакта с радиоактивными материалами
при раке молочной железы и других онкологических заболеваниях, так и при рекомендуется использовать разовые перчатки и лабораторную
доброкачественных опухолях и различных неонкологических заболеваниях. спецодежду.
- Все манипуляции с радиоактивными веществами следует проводить в
2. РЕАГЕНТЫ, ВХОДЯЩИЕ В СОСТАВ НАБОРА
специально оборудованных дпя этого помещениях, удаленных от мест
Все реагенты стабильны при 2-8°С до окончания срока годности набора,
постоянного пребывания людей.
указанного на упаковке.
- Радиоактивные вещества следует хранить с использованием
2.1 Пробирки, покрытые антителами к СА 15-3:2 х 50 шт. (готовы к контейнеров в специально отведенных для этого местах.
использованию). - Необходимо регистрировать поступление и расход радиоактивных
2.2 Метка, раствор антител к СА 15-3, меченных ’“I: один флакон, 22 мл материалов.
(готова к использованию). - Лабораторное оборудование и посуду следует хранить отдельно, чтобы
На дату изготовления флакон содержит 600 кБк1-иммуноглобулинов в предотвратить их загрязнение радиоактивными изотопами.
буфере с бычьим сывороточным альбумином, красителем и азидом - Любой случай радиоактивного загрязнения или исчезновения
натрия (< 0,1 %, см. п. Меры предосторожности). Вскрытый препарат метки радиоактивного материала должен рассматриваться в соответствии с
можно хранить при 2-8°С до окончания срока годности набора. законодательством.
- Утилизация радиоактивных отходов должна осуществляться в
2.3 Калибровочные пробы: 4 флакона по 2 мл 'f 1 флакон с 4 мл
соответствии с законодательством.
“нупевой" калибровочной пробы (готовы к использованию).
Капибровочнью пробы содержат СА 15-3 человека в диапазоне 4.3 Азид натрия
концентраций от О до 250 Е/л в буфере с бычьим сывороточным Некоторые компоненты набора содержат азид натрия в качестве
альбумином и азидом натрия (< 0,1 %, см. п. Меры предосторожности). консерванта. Вступая в реакцию со свинцом, медью и латунью, азид
Точные концентрации указаны на этикетках флаконов. Всфытые флаконы натрия образует взрывоопасные азиды металлов. Отработанные
с калибровочными пробами можно хранить при 2-8*С до окончания срока реагенты следует разбавлять большим количеством водопроводной воды,
годности набора. Значения калибровочных проб были получены с после чего их можно сливать в канализацию.
помощью внутреннего стандарта. 4.4 Сыворотка крови человека
2.4 Контрольная сыворотка: 1 флакон, 1 мл (готова к использованию) Материал человеческого происхождения, входящий в состав компонентов
Флакон содержит сыворотку крови человека с известной концентрацией набора, не содержит антител к HIV 1, HIV 2, HCV и к поверхностному
СА 15-3 и азидом натрия (<0,1%, см, п. Меры предосторожности). антигену вируса гепатита В (HBsAg). Тем не менее, ни один из
Ожидаемый диапазон концентраций указан на этикетке флакона. существующих методов анализа не может гарантировать полного
Всфытый флакон с контрольной сывороткой можно хранить при 2-8°С в отсутствия инфекционных агентов в исследуемом материале. Поэтому
течение 2 недель или при <-18°С до окончания срока годности набора. при работе с компонентами набора следует соблюдать необходимые
меры предосторожности.
2.5 Разбавитель: 1 флакон, 50 мл (готов к использованию)
С исследуемыми образцами сыворотки крови следует обращаться как с
Флакон содержит буферный раствор с бычьим сывороточным
потенциально инфекционным материалом, могущим содержать вирусы
альбумином. Вскрытый флакон можно хранить при 2-8°С до окончания
СПИД и гепатита. Утилизация отходов должна проводиться в
срока годности набора.
соответствии с действующими государственными нормами.
Внимание: Температура и сроки годности, указанные на этикетках флаконов
5. ПОЛУЧЕНИЕ, ОБРАБОТКА, ХРАНЕНИЕ И РАЗВЕДЕНИЕ ОБРАЗЦОВ
с реагентами, относятся только к их хранению в производственных условиях
вплоть до момента комплектации набора и не распространяются на - Собрать кровь в чистые сухие пробирки, или пробирки, содержащие
полученную пользователем продукцию. ЭДТА или гепарин.
- Отделить сыворотку/плазму крови центрифугированием.
3. ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ МАТЕРИАЛЫ И ОБОРУДОВАНИЕ - Образцы сыворотки и плазмы можно хранить при 2-8”С в течение
Помимо стандартного лабораторного оборудования, необходимо иметь 24 часов. Для &лее длительного хранения их необходимо разделить на
следующее: аликвоты и заморозить при температуре < -18°С. Избегать повторного
- микропипетки (10 мкл, 200 мкл, 500 мкл) замораживания-оттаивания проб.
- полуавтоматические пипетки (200 мкл, 2 мл) - Если концентрация СА 15-3 в исследуемом образце выходит за пределы
- вихревой смеситель типа "vortex" калибровочной кривой, его необходимо развести разбавителем,
- горизонтальный или орбитальный встряхиватель входящим в состав набора, и провести анализ повторно.
- водоструйный насос
6. ПРОЦЕДУРА АНАЛИЗА
- гамма-счетчик для измерения активности '“I.
6.1 Подготовка реагентов
4. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
Довести все реагенты до комнатной температуры.
4.1 Общие замечания:
- Перед использованием довести реагенты до комнатной температуры.
17/26
PI-2397-2008-07-21
6.2 Разведение анализируемых образцов и контрольной сыворотки
Среднее
Развести анализируемые образцы и контрольную сыворотку Количество
значение 95% персенгиль 99% персенгиль
разбавителем в 51 раз, например, смешать в пластмассовой или обследованных
стеклянной пробирке 10 мкл образца и 500 мкл разбавителя. Перемешать (х)
содержимое пробирок. 160 20,3 Е/мл 36 Е/мл 43 Е/мл
НЕ РАЗВОДИТЬ КАЛИБРОВОЧНЫЕ ПРОБЫ Клиническая чувствительность
В ходе клинических испытаний было исследовано 170 образцов
пациенток, у которых был диагностирован рак молочной железы без
6.3. Процедура анализа метастазов, до назначения лечения. У 49 пациенток этой фуппы был
Иммунологическая Иммунологическая Измерение определен уровень маркера выше 35 Ед/мл, что соответствует 28,8%
стадия 1 стадия 2 резупьтатов клинической чувствительности.
В покрытые антителами Удалить содержимое Удалить содержимое
пробирки пробирок и промыть их пробирок и промыть их 10. АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
последовательно 2 раза по 2 мл 2 раза по 2 мл (более подробная информация приведена в разделе “APPENDIX")
внести; дистиллированной воды дистиллированной воды 10.1. Аналитическая чувствительность: 0,15 Е/мл
200 мкл калибровочных (кроме проб «Т»)
10.2 Специфичность: данное определение специфично к СА 15-3.
проб или разведенных Тщательно удалить
образцов и контрольных жидкость и внести в Тщательно удалить 10.3 Воспроизводимость
сывороток пробирки по 200 мкл жидкость Внутри анализа:
метки* Анализ образцов проводили в 25 репликатах в пределах одной серии
Инкубировать Измерить связанную (В) определений. Коэффициент вариации измеренных уровней СА 15-3 в
2часапри18-25”С Инкубировать 1 час и общую (Т) активность сыворотке крови не превышал 6,1%.
и постоянном при 18-25”С и '**1 в течение 1 минуты
Между анализами:
встряхивании постоянном
Анализ образцов в дубликатах проводили в 25 различных сериях
(400 осц./мин.) встряхивании
определений. Коэффициент вариации измеренных уровней СА 15-3 в
(400 осц./мин.)
сыворотке крови не превышал 8,4 %.
* В две дополнительные пробирки внести по 200 мкл метки для измерения
общей активности '»1. 10.4 Точность
Тест на разведение
7. РЕЗУЛЬТАТЫ
Образцы с высокой концентрацией СА 15-3 серийно разводили "нулевым'
Результаты рассчитывают методом интерполяции по калибровочной кривой, станцартом. Процент "открытия" составил от 71% до 117%.
полученной одновременно с анализом неизвестных образцов.
Тест на “открытие" стандартной добавки
7.1 Калибровочная кривая Известные количества СА 15-3 добавляли к образцам сыворотки крови с
Результаты, приведенные в этой инструкции, получены при построении низким его содержанием. Измеренная величина «открытия» составляла от
калибровочной кривой в полулогарифмических координатах («сплайн» 86% до 108%.
функция) с соотношением ВЯ (%) или В/Вмакс. (%) по вертикальной оси и
10.5 Диапазон определений (от аналитической чувствительности до значения
концентрацией СА 15-3 (Е/мл) по горизонтальной оси калибровочного
наивысшей калибровочной пробы): 0,15 - 250 U/mL.
графика. Другие методы обсчета могут давать несколько отличающиеся
результаты. 11. ОГРАНИЧЕНИЯ МЕТОДА
Общий счет: 192 983 имп./мин. Нарушение методики проведения анализа может привести к искажению
Кал. пробы СА15-3 (Е/мл) Имп^мин. (п=3) ВЯ(%) результатов исследования. Результаты определения должны быть
интерпретированы в свете общей клинической картины пациента, включая
0 0 554 0,29
1 15 10752 5,57 анамнез, данные других тестов и подходящую иную информацию.
2 50 29026 15,0 При выполнении анализов с использованием антител возможна интерференция
3 125 52778 27,3 гетерофильными антителами в пробе пациента. У пациентов, имеющих
4 250 70953 36,8 постоянный контакт с животными или проходивших иммунотерапию или
(Прииер типичной калибровочной кривой. Не использовать дпя обсчета результатов.) диатостические процедуры с использованием иммуноглобулинов или их
7.2 Образцы фрагментов, могут вырабатываться антитела (т.е. НАМА), которые влияют на
результаты иммунного анализа.
Дпя каждого образца найти на вертикальной оси калибровочного графика
значение В/Т(%) или В/Вмакс.(%), а на горизонтальной оси Влияние этих антител может привести к получению ошибочных результатов.
Тщательно проверяйте результаты анализов пациентов с подозрением на
соответствующую концентрацию СА 15-3 в Е/мл. При необходимости
нужно провести коррекцию результатов с учетом фактора разведения. наличие этих антител.
Примечание: На этикетках флаконов с калибровочными пробами, указаны Интерференция
концентрации с учетом разведения в 51 раз, поэтому никакой коррекции На результаты анализа не оказывают влияния повышенные концентрации
результатов для образцов, разбавленных в том же соотношении, не требуется. гемоглобина и триглицеридов. Билирубин в концентрации свыше
343 мкмоль/л может искажать полученнью результаты.
8. КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
“Хук-эффект"
В соответствии с требованиями Good laboratory practices для контроля качества
В двухстадийном методе "хук-эффект" отсутствует.
проводимых исследований следует регулярно использовать контрольные
образцы, которые должны проходить те же стадии анализа, что и
анализируемые пробы. Результаты контроля качества рекомендуется
обрабатывать с помощью специальных статистических методов.
В случае серьезного повреждения упаковки, или в случае несоответствия
полученных результатов аналитическим характеристикам (см.п.Ю) обратитесь,
пожалуйста, к нашим специалистам: Тел.:+420 272 017 391;
Факс: +420 272 017 385; e-mail: imunochem@beckmancoulter.com
Тел.:+7 495 9371664; Факс: +7 495 254 84 07; e-mail:
beckman .rmSbeckmancouller.com
9. ОЖИДАЕМЫЕ ЗНАЧЕНИЯ
В каждой лаборатории рекомендуется установить собственные референсные
уровни СА 15-3. Приведенные ниже значения являются ориентировочными.
Ш IMMUNOTECH SAS -130 av. de Lattre de Tassigny - B.P.177 -13276 Marseille Cedex 9 France - Тё1. (33) 4 91 17 27 00 - Fax : (33) 4 91 41 43 58
PI-2397-2008-07-21 18/26
10'Т£СК
А BECKMAN СО JLTER COMPANY
Immunotecfi s.r.o.
Вас1ю¥й 1, И;’ 27 РпЬя ю Czech RepubSr
IC: 60197994 DiC: CZ60197994
И н с т р у к ц и я no
BECKMAN и с п о л ь з о в а н и ю
COULTER.
RUSSIAN
IVD
3 2 - m ic r o g lo b u lin R I A K I T IM1113
НАБОР для РАДИОИММУНОЛОГИЧЕСКОГО IN VITRO ОПРЕДЕЛЕНИЯ С€
Рг-МИКРОГЛОБУЛИНА В СЫВОРОТКЕ КРОВИ, ПЛАЗМЕ И МОЧЕ ЧЕЛОВЕКА
- Радиоактивные вещества следует хранить с испопьзованиеы контейнеров в
1. ПРИНЦИП МЕТОДА специально отведенных для этого местах.
Радиоиммунопогическое определение Рг.микрогпо6улина относится к - Необходимо регистрировать поступпение и расход радиоактивных материалов.
- Лабораторное оборудование и посуду следует хранить отдельно, чтобы
конкурентным видам анализа. Анализируемые образцы, контролы^ые и
предотвратить их загрязнение радиоаггивными изотопами.
калибровочные пробы инкубируют с меткой - «*1-ргмикроглобулином, в - Любой случай радиоактивного загрязнения или исчезновения радиоактивного
пробирках, пофытых моноклональными антителами. После инкубации удаляют материала должен рассматриваться е соответствии с законодательством.
содержимое пробирок и измеряют связанную активность '“I. Концентрацию Рг- - Утилизация радиоактивных отходов должна осуществляться в соответствии с
микрогпобулина, обратно пропорциональную связанной активности, определяют законодательством.
методом интерполяции по калибровочной кривой. 4.3 Азид натрия
Некоторые компоненты набора содержат азид натрия в качестве
2. РЕАГЕНТЫ, ВХОДЯЩИЕ В СОСТАВ НАБОРА
консерванта. Вступая в реакцию со свинцом, медью и латунью, азид
Все реагенты аабильны при 2-8*С до окончания срока годности набора, натрия образует взрывоопасные азиды металлов. Отработанные
указанного на его этикетке. Сроки годности, указанные на этикетках флаконов с реагенты следует разбавлять большим количеством водопроводной воды,
реагентами, относятся толыю к их хранению в производственных условиях после чего их можно сливать в канализацию.
вплоть до момента комплектации набора и не распространяются наполученную 4.4 Сыворотка крови человека
заказчиком продукцию. Материал человеческого происхождения, входящий в состав компонентов
Условия хранения реагентов после их растворения или разбавления указаны в набора, не содержит антител к HIV 1, HIV 2, HCV и к поверхностному
разделе "Процедура анализа'. антигену вируса гепатита В (HBsAg). Тем не менее, ни один из
2.1 Пробирки, покрытые моноклональными антителами к существующих методов анализа не может гарантировать полного
р2-микрогпобулину: 2 х 50 шт. (готовы к ислользованию) отсутствия инфекционных агентов в исследуемом материале. Поэтому при
работе с компонентами набора следует соблюдать необходимые меры
2.2 Метка, ’’М-Рг-микроглобулии: 1 флакон, 55 мл (готова к использованию)
предосторожности.
На дату изготовления флакон содержит 148 кБк 1-рг микроглобулина в С исследуемыми образцами сыворотки крови следует обращаться как с
буфере с бычьим сывороточным альбумином, красителем и азидом потенциально инфекционным материалом, могущим содержать вирусы
натрия (< 0,1 %, см. п. Меры предосторожности). СПИД и гепатита. Утилизация отходов должна осуществляться в
2.3 Калибровочные пробы: 5 флаконов по 0,5 мл 1 флакон с 2 мл соответствии с законодательством.
“нулевой” калибровочной пробы (готовы к ислользованию)
5. ПОЛУЧЕНИЕ, ОБРАБОТКА, ХРАНЕНИЕ И РАЗВЕДЕНИЕ ОБРАЗЦОВ
Калибровочные пробы содержат Рг-микроглобулин в диапазоне
концентраций от О до 30 мг/л в буфере с бычьим сывороточным 5.1 Сыворотка и плазма крови
альбумином и азидом натрия (<0,1 %; см. п. Меры предосторожности). - Собрать образцы крови в чистые сухие пробирки, или пробирки с
Точные значения, калиброванные по международному станщарту WHO, 1* антикоагулянтом (гепарином или ЭДТА).
IS 1985, указаны на этикетках флаконов. 1 ME соответствует 14 нг. - Не позднее, чем через 3 часа после взятия проб, отделить сыворотку
или плазму крови центрифугированием.
2.4 Контрольная сыворотка: 1 флакон (лиофилизованный препарат)
- Образцы сыворотки и плазмы крови можно хранить при 2-8*С в течение
Контрольная проба содержит известное количество Рг-микроглобулина в
24 часов. Для более длительного хранения их следует разделить на
сыворотке крови человека (см. п. Меры предосторожности). Ожидаемый
аликвоты и заморозить при температуре <-18*С. Избегать повторного
диапазон концентраций указан на дополнительном листке-вкладыше.
замораживания и опаивания образцов. Перед проведением анализа
3. ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ МАТЕРИАЛЫ И ОБОРУДОВАНИЕ образцы следует полностью разморозить и тщательно перемешать.
Помимо стае^)артного лабораторного оборудования, необходимо иметь ■ Если концентрация Рг-микроглобулина в образце выходит за верхний
следующее: предел калибровочной фивой, его следует разбавить «нулевой»
- микропипетка (50 мкп) калибровочной пробой и провести анализ повторно. Можно также
- полуавтоматическая пипетка (500 мкп) снизить объем анализируемого образца, например, до 10 мкп.
- вихревой смеситель типа "Vortex" 5.2 Моча
- горизонтальный или орбитальный встряхиватель - Собрать образцы мочи в стеклянные или пластмассовые емкости. При
- водоструйный насос необходимости хранения проб добавить борат (10-20 мМ).
- гамма-счетчик для измерения активности ’”1. - Образцы мочи можно хранить при 2-8*С в течение 24 часов. Для более
длительного хранения их следует разделить на аликвоты и заморозить
4. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
при температуре <-18"С. Избегать повторного замораживания и
4.1 Общие замечания: оттаивания проб. Перед проведением анализа образцы нужно
- Перед использованием довести реагенты до комнатной температуры. полностью разморозить и тщательно перемешать.
- Не смешивать реагенты из наборов разных серий. - Если концентрация Ргмикроглобулина в образце выходит за верхний
- Анализ калибровочных и исследуемых проб должен проводиться предел калибровочной фивой, его следует разбавить «нулевой»
одновременно. калибровочной пробой и провести анализ повторно.
- Для получения воспроизводимых результатов очень важно соблюдать
- Если концентрация рг-микроглобулина в моче не превышает 0,25 мг/л,
рекомендуемые условия встряхивания пробирок.
объем пробы для анализа должен быть увеличен до 100 или 200 мкп.
- Анализ рекомендуется проводить в дубликатах.
- Пробирки предназначены для однофатного использования. Примечание: При низких значениях pH (менее 5), Рг-микроглобулин
денатурирует и его определение становится невозможным,
4.2 Основные правила обращения с радиоактивными веществами.
Получение, использование и транспортировка радиоактивных материалов 6. ПРОЦЕДУРА АНАЛИЗА
должны происходить в соответствии с принятыми в данной стране
нормами радиационной безопасности и санитарными правилами работы с 6.1 Подготовка реагентов
Довести все реагенты до комнатной температуры.
радиоактивными веществами.
- В лабораториях запрецавтся принимать пищу, курить, пользоваться косметикой. 6.1.1 Растворение контрольной сыворотки
- Не пилетировать растворы радиоактивных веществ ртом. Растворить лиофилизованную контрольную сыворотку в указанном на
- Для ограничения контакта с радиоактивными материалами рекомендуется этикетке флакона количестве дистиллированной воды. Через 10 минут
использовать разовые перчагга и лабораторную спецодежду.
аккуратно перемешать содержимое, избегая образования пены.
■ Все манипуляции с радиоактивными веществами следует проводить в специально
оборудованных для этого помещениях, удапенных от мест постоянного Подготовленную к работе контрольную сыворотку можно хранить при 2-
пребывания людей. 8"С в течение Эдней, или раздепенной на аликвоты при <-18“С до
окончания срока годности набора.
PI-1113-2012-01-26
10. АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
6.2 Процедура анализа (см. таблицу, приведенную ниже)
(болев подробная информация приведена в разделе “APPENDIX')
7. РЕЗУЛЬТАТЫ 10.1 Чувствительность
Результаты рассчитывают методом интерполяции по калибровочной фивой,
10.1.1 Аналитическая чувствительность: 0,10 мг/л
полученной одновременно с анализом неизвестных образцов. 10.1.2 Функциональная чувствительность: 0,185 mgl
7.1 Калибровочная кривая 10.2 Специфичность
Результаты, приведенные в данной инструкции, получены при построении Перекрестная реакция с IgG человека отсутствует.
калибровочной кривой в 1од1Ыод координатах (взвешенная кубическая 10.3 Воспроизводимость
регрессия) с соотношением ВЛ" (%) или В/Во (%) по вертикальной оси и 10.3.1 Внутри анализа
концентрацией p^микpoглoбyлинa (мг/л) по горизонтальной оси Анализ образцов проводили в 10 репликатах в пределах одной серии
калибровочного фафика. Другие методы о^ета могут давать несколько определений. Коэффициент вариации измеренных уровней Рг-микро-
отличающиеся результаты глобулина не превышал 8,0 %.
10.3.2 Между анализами
Общий счет: 51 67 имп./мин.
Анализ образцов в дубликатах проводили в 11 различных сериях
Калибровочные Рг-микроглобулин Имп^мин.
ВЛ-(%) В/Во(%) определений. Коэффициент вариации измеренных уровней
пробы (мг/п)
о 42192 81,6 100 Рг-микроглобулина не превышал 7,5 %.
0,29 34 240 66,3 81,2 10.4 Точность
0,76 20614 39,9 48,9 10.4.1 Тест на разведение
1,90 10463 20,2 24,8 Три образца сыворол<и крови с высоким уровнем рг-микрогло6улина
7,60 3520 6,81 8,34 серийно разводили ‘нулевой' калибровочной пробой. Измеренная
28,5 1384 2,68 3,28 величина 'открытия' составляла:
(Прииер типичной калибровочной кривой. Не использовать для обсчета результатов.) у(теоретичеаая концентрация) = 0,998х(измеренная концентрация) - 0,062;
7.2 Образцы г = 0,999; (п = 18)
Для каждого анализируемого образца сыворотки крови найти на
10.4.2 Тест на “открытие” стандартной добавки
вертикальной оси калибровочного фафика значение ВЛ' (%) или В/Во (%),
В шесть образцов сыворотки крови вносили известные количества
а на горизонтальной оси - соответствунзщую концентрацию
Рг-микроглобулина в пяти концентрациях. Измеренная величина
Рг-микроглобулина в мг/л. Результаты, полученные в разбавленных
■открытия" составляла:
пробах, следует умножить на фактор разведения. Необходимо также
у (теоретическая концентрация)» 1,058х (измеренная концентрация) - 0,0906;
провести коррекцию результатов, если объем анализируемого образца
составлял меньше, или больше 50 мкл. г = 0,998; (п = 30)
10.5 Диапазон определений (от аналитической чувствительности до значения
8. КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
наивысшей калибровочной пробы): 0,1-30 мг/л.
В соответствии с требованиями Good laboratory practices для контроля качества проводимых
исследований следует регулярно использовать контрольные образцы, которые должны
11. ОГРАНИЧЕНИЯ МЕТОДА
проходить те же стадии анализа, что и анализируемые пробы. Результаты контроля
Нарушение методики проведения анализа может привести к искажению
качества рекомендуется обрабатывать с помощью специальных статистических методов.
результатов исследования.
В случае серьезного повреждения упаковки, или в случае несоответствия
Результаты определения должны быть интерпретированы в свете общей
полученных результатов аналитическим характеристикам (см.п.Ю) обратитесь,
клинической картины пациента, включая анамнез, данные других тестов и
пожалуйста, к вашему дистрибьютору или к нашим специалистам:
Твп.:*420 272 017391; Факс: *420 272 017385; E-mail: imunochem(abeckmancom Тел.:+7 подходящую иную информацию
495 937 1664; Факс: *7 495 254 64 07;E.mail: beckman.ru@beckman.com При выполнении анализов с использованием антител возможна интерференция
гетерофильными антителами в пробе пациента. У пациентов, имеющих
9. ОЖИДАЕМЫЕ ЗНАЧЕНИЯ постоянный контакт с животными или проходивших иммунотерапию ипи
В каждой лаборатории рекомендуется установить собственные значения диагностические процедуры с использованием иммуноглобулинов или их
уровней Рг-микроглобулина, соответствующие нормальным. Приведенные ниже фрагментов, могут вырабатываться антитела (т.е. НАМА), которые влияют на
результаты являются ориентировочными. результаты иммунного анализа.
Сыворотка и плазма крови: Влияние этих антител может привести к получению ошибочных результатов.
От 1,0 до 2,4 мг/л (95% здоровой популяции); среднее значение - Тщательно проверяйте результаты анализов пациентов с подозрением на
1,20 мг/л. Уровень Рг-микроглобулина в сыворол<е крови несколько наличие этих антител.
повышается с возрастом и не зависит от пола человека.
Моча:
До 0,37 мг/л
6.2 Процедура АНАЛИЗА
Стадия 1 Стадия 2 Стадия 3
Внесение реагентов * Инкубация Измерение результатов
В покрытые антителами
пробирки последовательно
внести:
Тщательно удалить
Инкубировать 90 мин
содержимое пробирок
- 50 мкл калибровочных, при 18-25 °С
(кроме проб «Т»).
контрольных и и постоянном встряхивании
анализируемых проб (> 280 осц./мин.).
Измерить активность
и
(имп./мин.) в течение 1 минуты.
- 500 мкл метки.
Перемешать.
* В две дополнительные пробирки внести по 500 мкл метки для оценки общей активности (имп./мин.).
IMMUNOTECH s.r.o. - Radiov^ 1 -102 27 Prague 10 - Czech Republic - Phone. -b420-272017444 - Fax : +420-272017385
PI-1113-2012-01-26
И н с т р у к ц и я no
BECKMAN и с п о л ь з о в а н и ю
COULTER.
RUSSIAN
IVD
T h y m i d i n e K i n a s e R E A K IT ? H [ IM 1948
НАБОР для РАДИОЭНЗИМАТИЧЕСКОГО IN VITRO ОПРЕДЕЛЕНИЯ С€
ФЕРМЕНТАТИВНОЙ АКТИВНОСТИ ТИМИДИНКИНАЗЫ
В СЫВОРОТКЕ И ПЛАЗМЕ КРОВИ ЧЕЛОВЕКА
1.ПРИНЦИП МЕТОДА Необходимо использовать ацетон марки «о.с.ч.» или «ч.д.а.». Использование
В клетках эукариот существуют два изоэнзима тимидинкиназы (ТК), ТК 1 и ТК 2, реагента с более низкой степенью очистки (например, марки т) может
которые различаются по своим биохимическим и электрофоретическим снижать эффективность промывки сорбента, что приводит к возрастанию
свойствам. Данный набор предназначен дня определения ТК 1, известной также фона до нескольких тысяч имп./мин. и делает невозможным построение
как фетальная ТК, dTK-F, или цитозольная ТК. калибровочной кривой
Определение ТК основано на энзиматическом фосфорилировании 5-['“1]-дезо- - гамма-счетчик для измерения активности '»1
ксиуридина, которое катализируется тимидинкиназой, присутствующей в 4. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
анализируемых образцах. 5-['^®1]-дезоксиуридин превращается в монофосфат
5-иоддезоксиуридина ('“1д-УМФ), который отделяют от реакционной смеси с 4.1 Общие замечания:
- Перед использованием довести реагенты до комнатной температуры.
помощью ионообменной смолы. Затем сорбент промывают и измеряют
- Не смешивать реагенты из наборов разных серий.
связанную активность '“I на гамма счетчике. Активность ТК в образцах, прямо - Анализ калибровочных и исследуемых проб должен проводиться одновременно.
пропорциональную связанной активности, определяют методом интерполяции ■ Анализ рекомендуется проводить в дубликатах.
по калибровочной кривой.
4.2 Основные правила обращения с радиоактивными веществами.
2. РЕАГЕНТЫ, ВХОДЯЩИЕ В СОСТАВ НАБОРА Получение, использование и транспортировка радиоактивных материалов должны
происходить в соответствии с принятыми в данной стране нормами радиационной
Реагенты поаавляются в количестве, достаточном для проведения 50 определений. Все
безопасности и санитарными правилами работы с радиоактивными веществами.
компоненты набора стабильны при 2-8‘С в течение срока годности, указанного на этикетке.
- В лабораториях запрещается принимать пищу, курить, пользоваться косметикой.
Сроки годности, указанные на этикетках флаконов с реагентами, относятся толы<о к их
- Не пипетировать растворы радиоактивных веществ ртом.
хранению в производственных условиях вплоть до момента комплектации набора и не
- Для офаничения контакта с радиоактивными материалами рекомендуется
распространяются налолученную заказчиком продукцию.
использовать разовые перчатки и лабораторную спецодеязду.
Нельзя хранить подготовленные к работе реагенты. Они должны быть сразу же
- Все манипуляции с радиоактивными веществами следует проводить в специально
израсходованы для проведения анализа.
оборудованных для этого помещениях, удаленных от мест постоянного
2.1 5-['‘’1]-дезоксиуридин: 1 флакон (лиофилизованный препарат) пребывания людей.
На дату изготовления флакон содержит 190кЬ< '“1-дезоксиуридина в - Радиоактивные вещества следует хранить с использованием контейнеров в
буфере с бычьим сывороточным альбумином и азидом натрия (<0,1 %, специально отведенных для этого местах.
- Необходимо регистрировать поступление и расход радиоактивных материалов.
см. п. Меры предосторожности).
- Лабораторное оборудование и посуду следует хранить отдельно, чтобы
2.2 Калибровочная проба: 1 флакон (лиофилизованный препарат) предотвратить их зафязнение радиоактивными изотопами.
Флакон содержит пробирку Eppendorf с тимидинкиназой, - Любой случай радиоактивного зафязнения или исчезновения радиоактивного
лиофилизованной в буфере с бычьим сывороточным альбумином и материала должен рассматриваться в соответствии с законодательством.
• Утилизация радиоактивных отходов должна осуществляться в соответствии с
азидом натрия (<0,1 %, см. п. Меры предосторожности). Ферментативная
законодательством.
активность препарата равна 80 Е/л. Точный объем буфера для
растворения калибровочной пробы указан на этикетке флакона. Значения 4.3 Азид натрия
калибртвочной пробы были получены с помощью внутреннего стандарта. Некоторые компоненты набора содержат азид натрия в качестве консерванта.
Вступая в реакцию со свинцом, медью и латунью, азид натрия образует
2.3 Буфер: 1 флакон (лиофилизованный препарат) взрывоопасные азиды металлов. Отработанные реагенты сладует разбавлять
Флакон содержит лиофилизованный буфер с кофакторами и азидом большим количеством водопроводной воды, после чего их можно сливать в
натрия (<0,1 %, см. п. Меры предосторожности). канализацию.
2.4 БСА: 1 флакон (лиофилизованный препарат) 4.4 Сыворотка крови человека
Флакон содержит лиофилизованный бычий сывороточный альбумин с Материал человеческого происхождения, входящий в состав компонентов набора, не
содержит антител к HIV1, HIV 2, HCV и к поверхностному антигену вируса гепатита В
азидом натрия (<0,1 %, см. п. Меры предхторожности).
(HBsAg). Тем не менее, ни один из существующих методов анализа не может
2.5 Сорбент: 1 флакон (порошок) гарантировать полного отсутствия инфекционных агентов в исследуемом материале.
Перед анализом необходимо приготовить суспензию сорбента в Поэтому при работе с компонентами набора сладует соблюдать необходимые меры
дистиллированной воде. предосторожности.
С исследуемыми образцами сыворотки крови следует обращаться как с потен­
2.6 Контрольная сыворотка: 1 флакон (лиофилизованный препарат) циально инфекционным материалом, могущим содержать вирусы СПИД и гепатита.
Флакон содержит тимидинкиназу, лиофилизованную в сыворотке крови Утилизация отходов должна осуществляться в соответствии с законодательством.
человека с азидом натрия (<0,1 %, см. п. Меры предосторожности).
Ожидаемое значение ферментативной активности указано в 5. ПОЛУЧЕНИЕ, ОБРАБОТКА И ХРАНЕНИЕ ОБРАЗЦОВ
дополнительном листке-вкладыше. - Собрать кровь в чистые сухие пробирки, или пробирки с
антикоагулянгом.
3. ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ МАТЕРИАЛЫ И ОБОРУДОВАНИЕ - Отделить сыворотку или плазму крови центрифугированием.
Помимо стандартного лабораторного оборудования необходимо иметь - Анализ можно также проводить в спиномозговой жидкости, плевральном
следующее: экссудате или асците. Собрать образцы этих биологических жидкостей в
- полипропиленовые пробирки чистые сухие пробирки.
Необходимо использовать только новые полипропиленовые пробирки. Нельзя - Анализируемые образцы можно хранить при 2-8°С в течение 24 часов.
использовать пробирки из полистирола, т.к. высокая концентрация ацетона Для более дпительного хранения их следует разделить на аликвоты и
приводит к их структурный повреждениям и негативно отражается на заморозить при <-18"С. Избегать повторного замораживания и
результатах анализа. оттаивания проб.
■ микропипетка(25 мкл) - Перед проведением анализа нужно довести пробы до комнатной
- полуавтоматическая пипетка (300 мкл) температуры. Аккуратно перемешать содержимое пробирок, вращая или
- диспенсеры (500 мкл и 2 мл) переворачивая их. Избегать размножения бактерий в анализируемых
- пробирки типа Eppendorf о6|эазцах.
- вихревой смеситель типа Vortex
- водоструйный насос 6. ПРОЦЕДУРА АНАЛИЗА
- термостат на 37 "С 6.1 Подготовка реагентов
- магнитная мешалка
Довести все реагенты до комнатной температуры.
- ацетон, ч.д.а. 250 мл.
PI-1948-2012-01-26
7. РЕЗУЛЬТАТЫ
6.1.1 Растворение БСА
Растворить содержимое флакона с лиофилизованным препаратом БСА в Результаты рассчитывают методом интерполяции по калибровочной кривой,
2 мл дистиллированной воды. Через 10 минут аккуратно перемешать, полученной одновременно с анализом неизвестных образцов.
избегая образования пены. 7.1 Калибровочная кривая
6.1.2 Приготовление рабочего буферного раствора Результаты, приведенные в данной инструкции, получены при построении
Растворить содержимое флакона с лиофилизованным препаратом калибровочной кривой в логарифмических координатах ("сплайн'-
буфера в 5 мл дистиллированной воды. Через 10 минут аккуратно пере­ функция) с измеренными значениями В - Во (имп./мин) по вертикальной
мешать, избегая образования пены. В мерном цилинде смешать 25 мл оси и активностью ТК в Е/л по горизонтальной оси калибровочного
дистиллированной воды и содержимое флаконов с растворенными графика. Другие методы обсчета могуг давать несколько отличающиеся
препаратами буфера и БСА. О^ий объем полученной смеси должен результаты.
составлять 32 мл. Общий счет: 118 187 имп./мин.
6.1.3 Растворение и приготовление калибровочных проб Калибровочные ТК (Е/л) Имп^мин. В/Г(%) В-Во,
пробы (п-3) имп^мин.
Растворить содержимое флакона с лиофилизованной калибровочной
0 0 220 0,19
пробой ТК в объеме рабочего буферного раствора, указанного на 1 2,5 1 501 1,27 1281
этикетке. Через 10 минут аккуратно перемешать, избегая образования 2 5 2 426 2,05 2 206
пены {см. примечание к данному пункту). Ферментативная активность 3 10 4 081 3,45 3861
полученного раствора ТК составляет 80 ЕУл. Калибровочные пробы 4 20 7 399 6,26 7179
готовят серийным разбавлением исходного раствора ТК в пробирках 5 40 13 840 11,71 13620
Eppendorf Для построения калибровочной кривой рекомендуется 6 80 25105 21,24 24 885
использовать пробы со следующими значениями ферментативной (Притр типичной капибрмачтй кривой. Не испопьзовать для обсчета резупьтатм.)
активности: 80,40,20,10,5 и 2,5 Е/л. 7.2. Образцы
Внимание: Избегать образования пены в растворах ТК, т.к. это может Для каждого контрольного и анализируемого образца найти на
привести к денатурации фермента. Калибровочные пробы рекомен­ вертикальной оси калибровочного графика значение В - Во (имп./мин.), а
дуется перемешивать пипетированием, набирая жидкость в наконечник на горизоньальной оси - соответствующую акгивность ТК в Е/л.
пипетки и выливая ее обратно в пробирку Не использовать вихревой Результаты, полученные в разбавленных пробах, следует умножигь на
смеситель. фактор разведения.
6.1.4 Приготовление реакционной смеси Ферменгативная активность выражается в единицах (Е) на литр образца.
Растворить содержимое флакона с лиофилизованным препаратом 1 Е = 1,2x10-4 мопЛек.
'И|-дезоксиуридина в 30 мл рабочего буферного раствора. Через 10 минут
аккуратно перемешать, избегая образования пены. 8. КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
В соответствии с требованиями Good laborato^ practices для контроля качества проводимых
6.1.5 Приготовление суспензии сорбента
исследований следует регулярно использовать контрольные образцы, которые должны
Добавить в порошок сорбента 20 мл дистиллированной воды. Суспензию проходить те же стадии анализа, что и анализируемые пробы. Результаты контроля
сорбента нужно приготовить не позже, чем за 1 час до проведения качества рекомендуется обрабатывать с помощью специальных статистичесних методов.
анализа. В случае серьезного повреждения упаковки, или в случае несоответствия полученных
результатов аналитическим характеристикам (см.п.Ю) обратитесь, пожалуйста, к вашему
6.1.6 Растворение контрольной сыворотки
дистрибыотору или к нашим слециалистам: Тел.:+420 272 017 391; Факс: «420 272 017 385:
Растворить содержимое флакона с контрольной сывороткой в 100 мкл E-mail: irriunQcheni@b8Cfcman.com Тел.:+7 495 937 1664:
рабочего буферного раствора. Через 10 минуг аккуратно перемешать, Факс: +7 495 254 64 07; E-mail: beckmaiviuObecKman.com
избегая образования пены
9. ОЖИДАЕМЫЕ ЗНАЧЕНИЯ
6.1.7 Приготовление 50% раствора ацетона
Тщательно смешать 250 мл дистиллированной воды и 250 мл ацетона. В каждой лаборатории рекомендуется установить собственные референсные
значения активности ТК, соответствующие нормальным. Приведенные ниже
6.2
значения являются лишь ориентировочными.
Стадия 1 Стадия 2
Внесение реагентов Инкубация Норма 0-5Е/Л
В новые полипропиленовые пробирки Пограничные значения 5-9Е/Л
последовательно внести: Патология 9 Е/л и более
- 25 мкл рабочего буферного раствора (для Инкубировать 3,5 часа 10. АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
определения фона), калибровочных, контрольных и при 37 ’С (Более подробная информация приведена в разделе “APPENDIX")
анализируемых образцов и в термостате.
10.1 Функциональная чувствительность: 1,34 Е/л
- 500 мкл реакционной смеси*.
10.2 Воспроизводимость
Быстро перемешать.
10.2.1 Внутри анализа
Анализ образцов проводили в 10 реппикатах в пределах одной серии
Стадия 3 Стадия 4 определений. Коэффициент вариации не превышал 5,6 %.
Адсорбция Промывка и измерение
10.2.2 Между анализами
результатов
Анализ образцов в дубликатах проводили в 10 различных сериях
Во все пробирки (кроме проб «Т»)
Во все пробирки (кроме проб «Т») внести определений. Коэффициент вариации не превышал 8,6 %.
внести по 2 мл 50% раствора
по 300 мкл суспензии сорбента" ацетона. 10.3 Точность
и перемешать.
Быстро перемешать. 10.3.1 Тест на разведение
Инкубировать 30 минут при 18-25 "С. Оставить пробирки на 5 минут, Образцы с высокой активностью ТК серийно разводили буфером и
проводили анализ полученных проб. Измеренное значение «открытия»
С помощью водоструйного насоса удапить чтобы сорбент успел осесть на дно,
супернатанг, не затрагивая осадка и а затем удалить супернатант. составляло от 110 % до 119 %.
оставляя над ним 2-3 мм жидкости. 10.4 Диапазон определений (от функциональной чувствительности до
Повторите промывание сорбента на
значения наивысшей калибровочной пробы): 1,34 - 80 Е/л.
На данной стадии выполнение анализа 50% ацетона еще три раза.
может быть приостановлено. Закрытые После последней промывки измерить 11. ОГРАНИЧЕНИЯ МЕТОДА
пробками пробирки можно хранить при активность (имп./мин.) в течение Нарушение методики проведения анализа может привести к искажению результатов
<-18 "С до следующего дня 1 минуты. исследования.
Результаты определения должны быть интерпретированы в сеете общей клинической
■ В две дополнительные пробирки внести по 500 мкп метки для оценки общей картины пациента, включая анамнез, данные других тестов и подходящую иную
активности '“I (пробы «Т»). информацию
"Твердые частицы суспензии быстро оседают на дно. Поэтому во время Для проведения анализа нельзя ислользовать образцы с гемолизом, липемией и
пипетирования ее нужно поместить на магнитную мешалку, чтобы обеспечить бактериальным лророаом.
постоянную концентрацию сорбента.
^ IMMUNOTECH s.ro. - Radiovi 1 -102 27 Prague 10 - Czech Republic - Phone. ■•420-272017444 - Fax: -^420-272017385
PI-1948-2012-01-26
Инструкция по
использованию
BECKMAN
COULTER.
RUSSIAN
IVD
F E R R I T I N I R M A K I T IM 3492
С€
НАБОР ДЛЯ ИММУНОРАДИОМЕТРИЧЕСКОГО IN VITRO ОПРЕДЕЛЕНИЯ
ФЕРРИТИНА В СЫВОРОТКЕ И ПЛА31МЕ КРОВИ ЧЕЛОВЕКА
- Все манипуляции с радиоактивными веществами следует проводить в специально
1. ПРИНЦИП МЕТОДА оборудованных для этого помещениях, удаленных от мест постоянного
Иммунорадиометрическое определение феррк^гина относится к анализам типа пребывания пюдей.
- Радиоактивные вещества следует хранить о использованием контейнеров е
■сэндвич", в котором используется два вида мышиных моноклональных антител
специально отведенных для этого местах.
к различным эпитопам его молекулы. Исследуемые образцы, контрольные и
- Необходимо решстрировать поступление и расход радиоактивных материалов,
калибровочные пробы инкубируют в пробирках, покрытых одним видом - Лабораторное оборудование и посуду следует хранить отделыно, чтобы
моноклональных антител в присутствии вторых антител, меченных '“I, После предотвратить их зафязнение радиоактивными изотопами.
окончания инкубации содержимое пробирок удаляют, отмывают несвязанные - Любой случай радиоактивного зафязнения или исчезновения радиоактивного
меченые антитела и измеряют связанную активность '“I. Концентрацию материала должен рассматриваться в соответствии с законодательством.
ферритина, прямо пропорциональную связанной активности, определяют - Утилизация радиоактивных отходов должна осуществляться в соответствии с
законодательством.
методом интерполяции по калибровочной кривой.
4.3 Сыворотка крови человека
2. РЕАГЕНТЫ, ВХОДЯЩИЕ В СОСТАВ НАБОРА Материал человеческого проиаохадения, входящий в состав компонентов набора, не
Все реагенты стабильны при 2-8*С до окончания срока годности набора, указанного на содержит антитеп к HIV1, HIV 2, HCV и к поверхностному антигену вируса гепатита В
этикетке. Сроки годноаи, указанные на этикетках флаконов с реагентами, относятся толысо (HBsAg). Тем не менее, ни один из существующих методов анализа не может
к их хранению • произаодстеенных условиях вплоть до момента комплектации набора и не гарантировать полного отсутствия инфекционных агентов в исследуемом материале.
распространяются налопучвнную заказчиком продукцию. Поэтому при работе с компонентами набора следует соблюдать необходимые меры
Условия хранения реагентов после их растворения или разбавления указаны в разделе предосторожности.
'Процедура анализа'. С исследуемыми образцами сыворотки крови следует обращаться как с
потенциально инфекционным материалом, могущим содержать вирусы СПИД и
2.1 Пробирки, покрытые моноклональными антителами к ферритину:
гепатита. Утилизация отходов должна осуществляться в соответствии с
In 50 шт. (готовы к использованию) законодательством.
2.2 Метка, раствор моноклональных антител к ферритину, меченных '^’1:
5. ПОЛУЧЕНИЕ, ОБРАБОТКА, ХРАНЕНИЕ И РАЗВЕДЕНИЕ ОБРАЗЦОВ
1 флакон, 55 МП (готова к использованию)
На дату изготовления флакон содержит 325 кБк 1-иммуноглобулинов в - Собрать кровь в чистые сухие пробирки, или пробирки с
бу(^ре с бычьим сывороточным альбумином) и красителем. антикоагулянтом.
- Отделить сыворотку или плазму крови центрифугированием.
2.3 Калибровочные пробы: 5 флаконов по 0,5 мл и 1 флакон с 5 мл
- Образцы сыворотки и плазмы можно хранить при 2-8*С в течение
“нулевой" калибровочной пробы (готовы к использованию)
24 часов. Для более длительного хранения их необходимо заморозить
Калибровочные пробы содержат ферритин в диапазоне концентраций от О
при температуре <-18’С, Допускается несколько повторных циклов
до 1000 нг/мл в буфере с бычьим сывороточным альбумином. Точные
замораживания и оттаивания проб.
концентрации, калиб(хзванные по международному стандарту 3" 18 NIBSC
- Если концентрация ферритина в исследуемом образце превышает
(рекомбинантный ферритин) 94/572 указаны на этикетках флаконов.
максимальный стандарт, его необходимо развести «нулевой»
(Нулевую» калибровочную пробу можно также заказать отдельно (кат. №
калибровочной пробой и провести анализ повторно.
А62362).
2.5 Контрольная сыворотка: 2 флакона по 0,5 мл (готова к использованию) 6. ПРОЦЕДУРА АНАЛИЗА
Флаконы содержат сыворотку крови человека (см. п. Меры 6.1 Подготовка и хранение реагентов
предосторожности) с известным содержанием ферритина. Ожидаемые Довести все реагенты до комнатной температуры.
диапазоны концентраций указаны на дополнительном листке-вкладыше.
6.1.1 Приготовление промывочного раствора
2.5 Промывочный раствор (20х):1 флакон, 50 мл Тщательно смешать содержимое флакона с концентратом промывочного
Перед использованием концентрат должен быть разведен раствора и 950 мл дистиллированной воды. Подготовленный к работе
дистиллированной водой. промывочный раствор можно хранить при 2-8’С до окончания срока
годности набора.
3. ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ МАТЕРИАЛЫ И ОБОРУДОВАНИЕ
6.2 Процедура анализа (см. таблицу на следующей странице)
Помимо стандартного лабораторного оборудования, необходимо иметь
следующее: 7. РЕЗУЛЬТАТЫ
- микропилетка (20 мкл)
Результаты рассчитывают методом интерпопяции по калибровочной кривой, полученной
- полуавтоматическая пилетка (500 мкл, 2 мл)
- вихревой смеситель типа 'Vortex' одновременно с анализом неизвестных образцов.
- горизонтальный или орбитальный встряхиватель 7.1 Калибровочная кривая
- водоструйный насос Результаты, приведенные в этой инструкции, попучены при построении
- гамма-счетчик для измерения активности '*1. калибровочной кривой в логарифмических координатах (сплайн-функция) с
измеренной активностью '*1 (В-Во, имп./мин.) по вертикальной оси и концентрацией
4. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ ферритина (нг/мл) по горизонтальной оси калибровочного графика. Другие методы
обсчета могут давать несколько отличающиеся результаты.
4.1 Общие замечания:
- Перед использованием довести реагенты до комнатной температуры. Общий счет: 113 448 имп./мин.
- Не смешивать реагенты из наборов разных серий. Калибровочные Ферритин Имп^мин. В/Т В-Во,
- Анализ калиб(Х)вочных и исследуемых проб должен проводиться пробы (нг/мл) (п=3) (%) имл^мин.
одновременно. 0 0 23 0,02 -
- Анализ рекомендуется проводить в дубликатах. 1 4,4 689 0,61 666
- Пробирки предназначены для однократного использования. 2 17,7 2 545 2,24 2 522
4.2 Основные правила обращения с радиоактивными веществами. 3 88,4 13213 11,6 13190
Получение, использование и транспортировка радиоактивных материапов 4 442 58612 51,7 58 589
должны проиаодить в соответствии с принятыми в данной стране 5 884 83672 73,8 83 649
нормами радиационной безопасности и санитарными правилами работы с (Прииер типичной калибровочной кривой. Не использовать Зля обсчета результатов.)
радиоактивными веществами.
■ В лабораториях запрещается принимать пищу, курить, пользоваться косметикой.
- Не пипетировать растворы радиоактивных веществ ртом.
- Для ограничения контакта с радиоактивными материалами рекомендуется
использовать разовые перчатки и лабораторную спецодежду.
PI-3492-2012-01-26
Ферритин печени...........................................35%
12. Образцы
Ферритин сердца............................................2,2 %
Для каждого анализируемого и контрольного образца найти на
Ферритин плаценты.......................................227 %
вертикальной оси калибровочного графика значение В-Во (имп./мин), а на
горизонтальной оси - соответствующую концентрацию ферритина в нг/мл. 10.3. Воспроизводимость
Результаты, полученные в разбавленных пробах, следует умножить на 10.3.1 Внутри анализа
фактор разведения. Анализ образцов проводили в 21 репликатах в пределах одной серии
определений. Коэффициент вариации измеренных уровней ферритина в
8. КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
сыворотке крови не превышал 6,3%.
В соответствии с требованиями Good laboratory pracUces для контроля качества проводимых
исследований следует регулярно ислолыовать контрольные образцы, которые должны 10.3.2 Между анализами
проходить те же стадии анализа, что и анализируемые пробы. Результаты контроля Анализ образцов в дубликатах проводили в 10 различных сериях
качества рекомендуется обрабатывать с помощью специальных статистичеаих методов. определений. Коэффициент вариации измеренных уровней ферритина в
В случае серьезного повреждения упаковки, или в случае несоответствия сыворотке крови не превышал 5,8 %.
полученных результатов аналитическим характеристикам (см.п.Ю) обратитесь, 10.4 Точность
пожалуйста, к вашему дистрибьютору или к нашим специалистам;
10.4.1 Тест на разведение
Тел.:+420 272 017 391; Факс; +420 272 017 385; E-mail; imunochemlSbeckman.com
Образцы с высоким уровнем ферритина серийно разводили 'нулевой'
Тел.;+7 495 937 1664; Факс; +7 495 254 64 07;
калибровочной пробой. Измеренная величина 'открытия' составляла от
E-mail; beckman nj@beckman .com
89,6% до 120%.
9. ОЖИДАЕМЫЕ ЗНАЧЕНИЯ 10.4.2 Тест на “открытие” стандартной добавки
В каждой лаборатории рекомендуется установить собственные референсные Равные объемы образцов сывороток крови смешивали между собой и
уровни ферритина, соответствующие нормальным. Приведенные ниже проводили анализ полученных проб. Измеренная величина "открытия"
результаты анализа 693 образцов сыворотки крови здоровых людей являются составляла от 102 % до 124 %.
ориентировочными. 10.5 Диапазон определений (от аналитической чувствительности до значения
наивысшей калибровочной пробы): 1,0-1000 нг/мл.
N Диапазон концентраций Медиана
при 95% доверительном 11. ОГРАНИЧЕНИЯ МЕТОДА
интервале Нарушение методики проведения анализа может привести к искажению
Мужчины 343 от 38 до 457 нг/мл 128 нг/мл результатов исследования. Результаты определения должны быть
Ж*ищ||ны (пременопауэа) 211 от 7,4 до 73 нг/мл 23,1 нг/мл интерпретированы в свете общей клинической картины пациента, включая
Женщины (менопауза) 139 от 14 до 165 нг/мл 62,1 нг/мл анамнез, данные других тестов и подходящую иную информацию.
С помощью данного набора можно проводить анализ образцов с гемолизом и
Дети
Приведенные ниже результаты анализа 426 образцов сыворотки крови здоровых липемией.
“Хук-эффекг" в данном наборе отсутствует вплоть до концентрации
N Диапазон концентраций Медиана 25000 нг/мл. Образцы с более высокими уровнями ферритина нужно разводить
при 95% доверительном "нулевой" калибровочной пробой.
интервале
Дети 0-6 месяцев 45 1,0 - 434 нг/мл 91 нг/мл При выполнении анализов с использованием антител возможна интерференция
гетерофмльными антителами а пробе пациента. У пациентов, имеющих постоянный контакг
Дети 0,5-15 лет 340 2,0-135 нг/мл 17,5 нг/мл
с животными или проходивших иммунотерапию или диатостические процедуры с
Мальчики 15-18 пет 28 16-90 нг/мл 36 нг/мл использованием иммуноглобулинов или их фрагментов, могут вырабатываться антитела
Девочки 15 *18 лет 13 5,0-127 нг/мл 15 нг/мл (т.е. НАМА), которые влияют на результаты иммунного анализа.
Концентрация ферритина зависит от возраста. На нее также оказывает влияние потеря Влияние этих антител может привести к получению ошибочных результатов. Тщателыго
железа во время месячных кровотечений у женщин. Поэтому в лабораториях нужно проверяйте результаты анализов пациентов с подозрением ка наличие этих антител.
установить собственные референсные значения для достаточного количества клинически
охарактеризованных образцов. 12. РЕАГЕНТЫ, ПОСТАВЛЯЕМЫЕ ДОПОЛНИТЕЛЬНО ПО ЗАКАЗУ
10. АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ «Нулевая» калибровочная проба (лиофилизованный препарат).
Поставляется дополнительно по заказу; кат.№ А62362 - 5 мл.
(Болев подробная информация приведена в разделе “APPENDIX")
- Применение см. §; 5.1.
10.1 Чувствительность -Данный реагент можно использовать при работе с набором Fenitin (кат.№
10.1.1 Аналитическая чувствительность: 1,0 нг/мл IM3492) любой серии.
Хранение;
10.1.2 Функциональная чувствительность: 3,2 нг/мл
Неиспользованный реагент стабилен 7 недель при температуре 2-8*0. Раствор
10.2. Специфичность можно хранить до окончания срока годности, указанного на этикетке флакона,
Перекрестная реакция с ферритином из различных тканей разделив на аликвоты при температуре <-18'С.
Ферритин селезенки...........................................100 %
6.2 Процедура АНАЛИЗА
Стадия 1 Стадия 2 Стадия 3
Внесение реагентов * Инкубация Измерение результатов
Тщательно удалить содержимое всех
в покрытые антителами
пробирок
пробирки последовательно
Инкубировать 1 час (кроме проб «Т»).
внести:
при is-asx
-20 мкл калибровочных, и постоянном встряхивании Промыть пробирки
2 мл промывочного раствора, удалить
контрольных и (> 280 осц./мин.).
жидкость в два раза.
анализируемых проб
и
Измерить связанную (В) и
- 500 мкл метки.
общую (Т) активность ’^^l
Перемешать. в течение 1 мин.
' в две дополнительные пробирки внести по 500 мкл метки для оценки общей активности (пробы «Т»).
IIVIMUNOTECH s.r.o. - RadiovS 1 -102 27 Prague 10 - Czech Republic - Phone. +420-272017444 - Fax; +420-272017385
PI-3492-2012-01-26
Инструкция по
IMMUNOTECH
А BECKMAN COULTER COMPANV использованию
IVD I R M A to ta l Ig E
НАБОР ДЛЯ ИММУНОРАДИОМЕТРИЧЕСКОГО IN VITRO ОПРЕДЕЛЕНИЯ С€
ОБЩЕГО IgE В СЫВОРОТКЕ И ПЛАЗМЕ КРОВИ ЧЕЛОВЕКА
certified
1. ПРИНЦИП МЕТОДА - Для получения воспроизводимых результатов очень важно соблюдать
Иммунорадиомертичеше определение общего IgE относится к двухстадийным рекомендуемые условия встряхивания пробирок.
анализам типа ‘сэндвич’, в котором используется два вида мышиных - Анализ рекомендуется проводить в дубликатах.
моноклональных антител к различным эпитопам его молекулы. - Пробирки только для однорамвого применения.
Исследуемые образцы, контрольные и калибровочные пробы инкубируют в
4.2 Основные правила обращения с радиоактивными веществами.
пробирках, покрытых одним видом моноклональных антител. Затем удаляют
Получение, использование и транспортировка радиоактивных материалов
содержимое, промывают пробирки и для выявления наличия IgE в исследуемом
должны происходить в соответствии с принятыми в данной стране
образце проводят вторую инкубацию с раствором других антител, меченных '»1.
нормами радиационной безопасности и санитарными правилами работы с
После окончания инкубации содержимое пробирок удаляют, отмывают
радиоактивными веществами.
несвязанные меченые антитела и измеряют связанную активность '”!.
- В лабораториях запрещается принимать пищу, курить, пользоваться
Концентрацию IgE, прямо пропорциональную связанной активности, определяют
косметикой.
методом интерполяции по кали^вочной кривой.
- Не пипетировать растворы радиоактивных веществ ртом.
2. РЕАГЕНТЫ, ВХОДЯЩИЕ В СОСТАВ НАБОРА - Для ограничения контакта с радиоактивными материалами
рекомендуется использовать разовые перчатки и лабораторную
Все реагенты стабильны при 2-8°С до окончания срока годности набора,
спецодежду.
указанного на упаковке.
- Все манипуляции с радиоактивными веществами следует проводить в
2.1 Пробирки, покрытые антителами к IgE: 2х 50 шт. (готовы к специально оборудованных для этого помещениях, удаленных от мест
использованию). постоянного пребывания людей.
2.2 Метка, моноклональные антитела к IgE, меченные '^’1:1 флакон, - Радиоактивные вещества следует хранить с использованием
11 МП (готова к использованию). контейнеров в специально отведенных для этого местах.
На дату изготовления флакон содержит 111 кБк '25|-меченных - Необходимо регистрировать поступление и расход радиоактивных
иммуноглобулинов в буфере с бычьим сывороточным альбумином, материалов.
красителем и азидом натрия (<0,1 %, см. л. Меры предосторожности). - Лабораторное оборудование и посуду следует хранить отдельно, чтобы
Вскрытый препарат метки можно хранить при 2-8”С до окончания срока предотвратить их зафязнение радиоактивными изотопами.
годнхти на&ра. - Любой случай радиоактивного зафязнения или исчезновения
радиоактивного материала должен рассматриваться в соответствии с
2.3 Калибровочные пробы: 5 флаконов по 1 мл +1 флакон с 30 мп
законодательством.
«нулевой» калибровочной пробы (готовы к использованию).
- Утилизация радиоактивных отходов должна осуществляться в
Калибровочные пробы содержат IgE человека в диапазоне концентраций
соответствии с законодательством.
от О до 100 кМЕ/л в буфере с бычьим сывороточным альбумином и
азидом натрия (<0,1 %, см. л. Меры предосторожности). Точные 4.3 Азид натрия
концентрации, калиброванные по международному стандарту WHO IRP Некоторые компоненты набора содержат азид натрия в качестве
75/502, (1 ME = 2,4 нг) указаны на этикетках флаконов. Вскрытые флаконы консерванта. Вступая в реакцию со свинцом, медью и латунью, азид
с калибровочными пробами можно хранить при 2-8°С до окончания срока натрия образует взрывоопасные азиды металлов. Отработанные
годности набора. реагенты следует разбавлять большим количеством водопроводной воды,
после чего их можно сливать в канализацию.
2.4 Контрольная сыворотка: 1 флакон, 1 мл (готова к использованию).
Флакон содержит известное количество IgE человека в буфере с бычьим 4.4 Сыворотка крови человека
сывороточным альбумином и азидом натрия (<0,1%, см. п. Меры Материал человеческого происхождения, входящий в состав компонентов
предосторожности). Ожидаемый диапазон концентраций указан на набора, не содержит антител к HIV 1, HIV 2, HCV и к поверхностному
этикетке флакона. Вскрытый флакон с контрольной сывороткой можно антигену вируса гепатита В (HBsAg). Тем не менее, ни один из
хранить при 2-8°С до окончания срока годности набора. существующих методов анализа не может гарантировать полного
отсутствия инфекционных агентов в исследуемом материале. Поэтому
2.5 Промывочный раствор (20 X): 1 флакон, 50 мп
при работе с компонентами набора следует соблюдать необходимые
Содержимое флакона с концентрированным промывочным раствором
меры предосторожности.
должно быть разведено в 950 мл дистиллированной воды.
С исследуемыми образцами сыворотки крови следует обращаться как с
Подготовленный к работе промывочный раствор можно хранить при 2-8°С
потенциально инфекционным материалом, могущим содержать вирусы
до окончания срока годности набора.
СПИД и гепатита. Весь использованный материал должен быть уничтожен
Внимание: Температура и сроки годности, указанные на этикетках флаконов по действующим государственным правилам и инструкциям.
с реагентами, относятся только к их хранению в производственных условиях
вплоть до момента комплектации набора и не распространяются на 5. ПОЛУЧЕНИЕ, ОБРАБОТКА, ХРАНЕНИЕ И РАЗВЕДЕНИЕ ОБРАЗЦОВ
полученную пользователем продукцию. - Все образцы сыворотки или плазмы должны быть разведены перед
анализом в 10 раз «нулевой» калибровочной пробой (см. п. 11).
3. ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ МАТЕРИАЛЫ И ОБОРУДОВАНИЕ - Собрать кровь в чистые сухие пробирки, или пробирки с
Помимо стандартного лабораторного оборудования, необходимо иметь антикоагулянтом.
следующее: - Отделить сыворотку или плазму крови центрифугированием.
- микропипетка (100 мкп) - Образцы сыворотки или плазмы можно хранить при 2-8°С в течение 24
- полуавтоматические пипетки (100 мкл, 2 мл) часов. Для более длительного хранения их необходимо разделить на
- горизонтальный или орбитальный встряхиватель аликвоты и заморозить при температуре < -18°С. Избегать повторного
- водоструйный насос замораживания-опаивания проб.
- гамма-счетчик для измерения активности '»1. - Если концентрация IgE в исследуемом образце превышает
концентрацию в максимальной калибровочной npofe, его необходимо
4. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ развести «нулевой» калибровочной пробой и провести анализ повторно.
4.1 Общие замечания:
- Перед использованием довести реагенты до комнатной температуры. 6. ПРОЦЕДУРА АНАЛИЗА
- Не смешивать реагенты из наборов разных серий. 6.1 Подготовка реагентов
- Анализ калибровочных и исследуемых проб должен проводиться - Довести все реагенты до комнатной температуры.
одновременно. - Развести 50 мл концентрата промывочного раствора (20 X) в 950 мл
дистиллированной воды.
PI-2122-2011-03-25_RU 1/4
6.2 Подготовка образцов 10.3 Воспроизводимость
Развести образцы сыворотки или плазмы в 10 раз «нулевой»
Внутри анализа:
калибровочной пробой. Не разводить контрольную сыворотку и
Анализ образцов проводили в 10 репликатах в пределах одной серии
калибровочные пробы. определений. Коэффициент вариации измеренных уровней IgE не
6.3 Процедура анализа превышал 4,3%.
Иммунологическая Иммунологическая Измерение Между анализами:
стадия 1 стадия 2 результатов Анализ образцов в дубликатах проводили в 10 различных сериях
В покрытые антителами Удалить содержимое Тщательно удалить определений. Коэффициент вариации измеренных уровней IgE не
пробирки пробирок и содержимое пробирок превышал 6,1%.
последовательно внести в них по 2 мл (кроме проб «Т»). 10.4 Точность
внести: промывочного
Тест на разведение
100 мкл раствора. Удалить
Образцы с высокой концентрацией IgE серийно разводили «нулевой»
калибровочных, жидкость.
калибровочной пробой. Измеренная величина «открытия» составляла от
контрольных или Внести в пробирки
83% до 115%.
разведенных по 2 мл промывочного
анализируемых проб. Внести во все пробирки раствора и удалить Тест на «открытие» стандартной добавки
по 100 мкл метки*. жидкость. В образцы с низким содержанием IgE вносили известные его количества.
Измеренная величина «открытия» составляла от 88% до 118%.
Инкубировать 30 минут Инкубировать 1 час Измерить связанную (В) 10.5 Диапазон определений (от аналитической чувствительности до значения
при 18-25° С и при18-25'Си и общую (Т) активность наивысшей калибровочной пробы): 0.05 -100 klU/L.
постоянном постоянном '«I в течение 2 минут
встряхивании встряхивании (имп./мин.). 11. ОГРАНИЧЕНИЯ МЕТОДА
(ЗбОосц./мин.). (350 0С14./МИН.). Нарушение методики проведения анализа может привести к искажению
* S flee дополнительные пробирки внести по 100 мкл метки для измерения результатов исследования. Результаты определения должны быть
общей активности'"/ (пробы « Т»}. интерпретированы в свете общей клинической картины пациента, включая
анамнез, данные других тестов и подходящую иную информацию.
7. РЕЗУЛЬТАТЫ Для образцов с предполагаемым нормальным или слегка повышенным уровнем
Результаты рассчитывают методом интерполяции по калибровочной кривой, IgE рекомендуется использовать стандартное разведение в 10 раз.
полученной одновременно с анализом неизвестных образцов. Образцы можно не разводить, если предполагаемая концентрация IgE не
превышает 10 кМЕ/л.
7.1 Калибровочная кривая
Образцы с очень высокой концентрацией IgE следует дополнительно разводить
Результаты приведенные в данной инструкции, получены при построении
в большее количество раз «нулевой» калибровочной пробой.
калибровочной кривой в полулогарифмических координатах («сплайн»
функция) с соотношением В/Т (%) или В/Вмакс. (%) по вертикальной оси и При выполнении анализов с использованием антител возможна интерференция
концентрацией IgE (кМЕ/л) по горизонтальной оси калибровочного гетерофильными антителами в пробе пациента. У пациентов, имеющих
графика. Другие методы обсчета могут давать несколько отличающиеся постоянный контакт с животными или проходивших иммунотерапию или
результаты. диагностические процедуры с использованием иммуноглобулинов или их
фрагментов, могут вырабатываться антитела (т.е. НАМА), которые влияют на
Общий счет: 43 583 имп./мин.
результаты иммунного анализа.
Кал. Пробы 1яЕ(кме;л) Имп./мин. В/Т (%)
Влияние этих антител может привести к получению ошибочных результатов.
0 0 38 0,09 Тщательно проверяйте результаты анализов пациентов с подозрением на
1 0,5 418 0,96 наличие этих антител.
2 2,0 1257 2,88
3 20 9 848 22,6
4 50 19028 43,7
5 100 28236 64,8
(Пример типичной калибровочной кривой. Не использовать для обсчета результатов.)
7.2 Образцы
Для каждого образца найти на вертикальной оси калибровочного графика
значение В/Т(%) или В/Вмакс.(%), а на горизонтальной оси
соответствующую концентрацию IgE (кМЕ/л). Результаты, полученные для
разбавленных проб, необходимо умножить на фактор разведения.
8. КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
В соответствии с требованиями Good laboratory practices для контроля качества
проводимых исследований следует регулярно использовать контрольные
образцы, которые должны проходить те же стадии анализа, что и
анализируемые пробы. Результаты контроля качества рекомендуется
обрабатывать с помощью специальных статистических методов.
В случае серьезного повреждения упаковки, или в случае несоответствия
полученных результатов аналитическим характеристикам (см.п.Ю) обратитесь,
пожалуйста, к нашим специалистам: Тел.:+420 267 008 391;
Факс: +420 267 008 385; e-mail: lmunochem(5)beckman.com
Тел.:+7 095 9371664; Факс: +7 095 254 64 07; e-mall: beckman.ru@l3eckman.com
9. ОЖИДАЕМЫЕ ЗНАЧЕНИЯ
В каждой лаборатории рекомендуется установить собственные референсные
уровни IgE. Примерные концентрации IgE у здоровых людей без атопии
составляют на момент рождения 0,2 кМЕ/л, к 15-20 годам они повышаются до
20 кМЕ/л с большой индивидуальной вариацией уровней (от 2 до 200 кМЕ/л).
10. АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
(более подробная информация приведена в разделе “APPENDIX”)
10.1 Аналитическая чувствительность: 0,05 кМЕ/л (0,12 нг/мл)
10.2 Специфичность: данный набор позволяет проводить
высокоспецифичное определение IgE человека.
Hi IMMUNOTECH SAS -130 av. de Lattre de Tassigny - B.P.177 -13276 Marseille Cedex 9 France -161. (33) 4 91 17 27 00 - Fax : (33) 4 91 41 43 58
PI-2122-2011-03-25_RU 2/4
И н с т р у к ц и я no
IMMUNOTECH
A BECKMAN COULTER COMPANY и с п о л ь з о в а н и ю
IVD R IA H is ta m in e IM 1659
iw o i НАБОР для РАДИОИММУНОЛОГИЧЕСКОГО IN VITRO ОПРЕДЕЛЕНИЯ С€
} 13485 ГИСТАМИНА В БИОЛОГИЧЕСКИХ ОБРАЗЦАХ
certified
- водяная баня или инкубатор на 37*0
1. ПРИНЦИП МЕТОДА
- центрифуга с охлаждением для планшетов (или пробирок)
Радиоиммунологическое определение гистамина относится к конкурентным - Для обработки плотных образцов ткани:
видам анализа. На первой стадии анализа гистамин, содержащийся в -хлорная кислота (НСЮО
исследуемых образцах, контрольных и калибровочных пробах, подвергают - борат калия (KjBiO?)
химической модификации - ацилированию. Затем ацилированные пробы
инкубируют в пробирках, покрытых моноклональными антителами, в присутствии 4. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
метки, ацилированного '«1<истамина, После окончания инкубации удаляют 4.1 Общие замечания:
содержимое пробирок и измеряют связанную активность '»1. Концентрацию, Перед использованием довести реагенты до комнатной температуры.
гистамина в исследуемых образцах определяют методом интерполяции по - Не смешивать реагенты из наборов разных серий.
калибровочной кривой. - Анализ калибровочных и исследуемых проб должен проводиться одновременно.
- Для получения воспроизводимых результатов очень важно соблюдать
2. РЕАГЕНТЫ, ВХОДЯЩИЕ В СОСТАВ НАБОРА рекомендуемые условия встряхивания пробирок.
Все реагенты, входящие в состав невскрытого набора, стабильны при 2-8°С до - Анализ рекомендуется проводить в дубликатах.
окончания срока годности, указанного на его этикетке. - Пробирки толы(о для одноразового применения.
2.1 Пробирки, покрытые антителами к гистамину: 2 х 50 шт. (готовы к 4.2 Основные правила обращения с радиоактивными веществами
использованию) Получение, использование и транспортировка радиоактивных материалов должны
происходить в соответствии с принятыми в данной стране нормами радиационной
2.2 Метка, 1-гистамин: 1 флакон, 55 мл (готова к использованию) безопасности и санитарными правилами работы с радиоактивными веществами.
На дату изготовления флакон содержит 148 кБк '»1-гистамина буфере с - В лабораториях запрещается принимать пищу, курить, пользоваться косметикой.
красителем и азидом натрия (<0,1 %; см. п. Меры предосторожности). - Не пипетироеать растворы радиоактивных веществ ртом.
Вскрытый флакон с меткой можно хранить при 2-8°С до окончания срока - Для ограничения контакта с радиоактивными материалами рекомендуется
годности набора. использовать разовые перчатки и лабораторную спецодежду.
- Все манипуляции с радиоактивными веществами следует проводить в специально
2.3 Калибровочные пробы: 6 флаконов по 1 мл (готовы к использованию) оборудованных для этого помещениях, удаленных от мест постоянного
Калибровочные пробы содержат неацилированный пистамин в диапазоне пребывания людей.
концентраций от О до 100 нмоль/л, в буфере с бычьим сывороточным - Радиоактивные вещества следует хранить с использованием контейнеров в
альбумином и азидом натрия (<0,1%, см. п. Меры предосторожности). специально отведенных для этого местах.
Точные концентрации указаны на этикетках флаконов. Вскрытые флаконы - Необходимо регистрировать поступление и расход радиоактивных материалов.
с калибровочными пробами можно хранить при 2-8“С до окончания срока - Лабораторное оборудование и посуду следует хранить отдельно, чтобы
предотвратить их зафяэнение радиоактивными изотопами.
годности набора. Знания калибровочных проб были получены с помощью
- Любой случай радиоактивного загрязнения или исчезновения радиоактивного
внутреннего стандарта. материала должен рассматриваться в соответствии с законодательством.
2.4 Контрольная проба: 1 флакон, 1 мл (готова к использованию) - Утилизация радиоактивных отходов должна осуществляться в соответствии с
Контрольная проба содержит известное количество неацилированного законодательством.
гистамина в буфере с бычьим сывороточным альбумином и азидом 4.3 Азид натрия
Некоторые компоненты набора содержат азид натрия в качестве консерванта.
натрия (<0,1%, см. п. Меры предосторожности). Ожидаемый диапазон
Вступая в реакцию со свинцом, медью и латунью, азид натрия образует
концентраций указан на этикетке флакона. Вскрытый флакон с взрывоопасные азиды металлов. Отработанные реагенты следует разбавлять
контрольной пробой можно хранить при 2-8”С до окончания срока годности большим количеством водопроводной воды, после чего их можно сливать в
набора. канализацию.
2.5 Ацилирующий реагент: 1 флакон (лиофилизованный препарат) 4.4 ДМСО
Перед использованием нужно развести содержимое флакона в указанном ДМСО, диметилсульфоксид, может вызывать раздражение и аллергические реакции
на его этикетке количестве ДМСО. Подготовленный к работе реагент при попадании на кожу, при вдыхании его паров и приеме внутрь. В случае контакта с
можно хранить при <-18°С в течение срока годности набора. Избегать кожей или глазами тщательно промыть их холодной водой.
повторного замораживания и оттаивания реагента. б. ПОЛУЧЕНИЕ, ОБРАБОТКА И ХРАНЕНИЕ ОБРАЗЦОВ
2.6 Ацилирующий буфер: 1 флакон, 5 мл (готов к использованию) Весь использованный материал должен быть уничтожен по действующим
Вскрытый флакон с буфером можно хранить при 2-8°С до окончания срока государственным правилам и инструкциям.
годности набора.
5.1 Плазма
2.7 Буфер для высвобождения гистамина: 1 флакон (лиофилизованный - собрать кровь в охлажденные пробирки, содержащие ЭДТА, и
препарат) немедленно поместить их на лед
Растворить содержимое флакона в 25 мл дистиллированной воды. - не позднее, чем через 20 минуг после взятия крови, центрифугировать
Подготовленный к работе препарат можно хранить при 2-8°С до окончания пробы 10 минут при900ди4“С
срока годности набора. - собрать верхние 2IZ слоя отделившейся плазмы
2.8 ДМСО: 1 флакон, 3 мл (готов к использованию) - плазму можно разводить фосфатным буфером.
Перед использованием нагреть флакон до 18^25'С. Его содержимое 5.2 Моча
должно полностью стать жидким. - собрать образцы мочи в пластмассовые контейнеры. Пробы можно
Внимание: Температура и сроки годности, указанные на этикетках флаконов заморозить или добавить бакгериостатический агент.
с реагентами, относятся только к их хранению в производственных условиях - развести пробы в 25 раз фосфатным буфером
вплоть до момента комплектации набора и не распространяются на
5.3 Высвобождение гистамина в пробах цельной крови
полученную заказчиком продукцию.
Не перемешивать клеточную суспензию на вихревом смесителе.
3. ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ МАТЕРИАЛЫ И ОБОРУДОВАНИЕ Взятие пдоб крови. собрать 1-2 мл крови в пробирки с гепарином. Не
Помиио стандартного лабораторного оборудования необходимо иметь следующее: использовать ЭДТА. Если анализ не будет проводиться немедленно,
- Для иммуноанализа: образцы крови можно хранить при 18-24*С не более 24 часов.
- лластмассоеые лробирки (3 - 5 мл) Определение общего гистамина после лизиса клеток: К 50 мкл цельной
- ми1ролилетки (50,100 и 500 мкл) крови добавить 950 мкл дистиллированной воды (разведение 1:20).
■ лолуавтоматические пипетки (25, 500 мкл) Дважды заморозить и разморозить пробы.
- вихревой смеситель типа Vortex
Про90К9Чия Kj]?m:
- горизонтальный или орбитальный встряхиватель
провокация с помощью агента, вызывающего секрецию гистамина:
- водоструйный насос
• гамма-счетчик для измерения активности 125 йода. развести цельную кровь в 4 раза буфером для высвобождения
- Для высвобождения гистамина: гистамина (например, смешать 500 мкл крови и 1,5 мл буфера), В лунки
- микролланшет с коническими или полукруглыми лунками (или пластмассовые микропланшета внести по 50 мкл растворов агентов, вызывающих
пробирки)
РИ 15/18
659-2006-10-13
»
секрецию гистамина, в исследуемых концентрациях, а затем по 100 мкл 72 Образцы
разведенных в 4 раза образцов цельной крови. Накрыть планшет - Концентрацию гистамина в образцах плазмы определяют
крышкой и инкубировать пробы 30 минут при 37“С. Объемы всех непосредственно по калибровочной кривой.
реагентов можно увеличить в 2 раза, если провокацию клеток проводят - Результаты, полученные для проб с высвобождением гистамина, нужно
в пробирках. умножить на 6.
- спонтанная секреция гистамина: в лунки микропланшета внести по - Результаты определения общего гистамина нужно умножить на 20.
50 мкл буфера для высвобождения гистамина, а затем по 100 мкл - Результаты, полученные для других типов образцов, следует умножить
разведенных в 4 раза образцов цельной крови. Накрыть планшет на фактор разведения.
крышкой и инкубировать 30 минут при 37°С.
8. КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
- отбор проб после секреции гистамина: центрифугировать пробы 5 минут
В соответствии с требованиями Good laboratory practices для контроля качества проводимых
при 900 g и 4"С. Поместить планшет на колотый лед и аккуратно
исследований следует регулярно использовать контрольные образцы, которые должмы
отобрать по 100 мкл супернатантов, не затрагивая осадка. проходить те же стадии анализа, что и анализируемые пробы. Результаты контроля
5.4 Жидкие образцы качества должны обрабатываться с помощью специальных статистических методов.
Собрать образцы в пластмассовые пробирки. В случав серьезного повреждения упаковки, или в случае несоответствия полученных
5.5 Образцы плотных тканей результатов аналитическим характеристикам (см.л.Ю) обратитесь, пожалуйста, к нашим
Для экстракции гистамина добавить по 10 мкл раствора 0,2 N НСЮд на специалистам: Тел.:+420 267 008 391;
каждый миллиграмм ткани, гомогенизировать пробы с помощью Факс: +420 267 008 385; e-niail: imunoctiemebeckman com
ультразвука или в гомогенизаторе и центрифугировать пробы при Тел.:+7 095 937 1664; Факс: *7 095 254 64 07; e-mail: beckman.njiS)t)eckman com
10 ООО g в течение 5 минут при <4"С. Собрать супернатант и при
9. ОЖИДАЕМЫЕ ЗНАЧЕНИЯ
необходимости осветлить его фильтрацией. Нейтрализовать пробы
(pH 6-8) равным объемом 1М раствора бората калия и центрифугировать В каждой лаборатории необходимо установить собственные референсные
при 10 ООО g в течение 1 минуты при <4"С. Собрать супернатант в уровни гистамина. Приведенные ниже значения, соответствующие нормальным,
пластмассовые пробирки. могут быть использованы как ориентировочные.
5.6 Хранение исследуемых образцов Плазма: < 10 нмоль/л (1 нг/мл)
Все типы исследуемых образцов, кроме проб цельной крови, нужно Цельная кровь: 200-2000 нмоль/л (20-200 нг/мл)
хранить в пластмассовых пробирках при <-18*С, если анализ не будет Положительный результат провокации клеток: >10% от общего количества
проводиться немедленно. гистамина
6. ПРОЦЕДУРА АНАЛИЗА Спонтанная секреция гистамина: <5 %от общего количества гистамина
6.1 Подготовка реагентов Моча: 10-35 мкг/г креатинина.
- Довести все реагенты до комнатной температуры.
10. ОЖИДАЕМЫЕ ЗНАЧЕНИЯ
- Ацилирующий раствор: растворить ацилирующий реагент в объеме
ДМСО, указанном на этикетке флакона. Если планируется использовать (болев подробная информация приведена в разделе “APPENDIX")
несколько флаконов ацилирующего реагента, после растворения их 10.1 Аналитическая чувствитепьность: 0,2 нмоль/л
содержимое нужно объединить. 10.2 Специфичность: данный вид анализа позволяет проводить
6.2 Подготовка анализируемых проб: ацилирование высокоспецифичное определение гистамина.
Первой стадией анализа является ацилирование исследуемых,
контрольных и калибровочных проб. Ацилированные образцы обладают 10.3 Воспроизводимость
достаточной стабильностью и могут храниться в течение 5 дней при 2-8'С. Внутри анализа:
6.3 Процедура анализа Анализ образцов проводили в 10 репликатах в пределах одной серии
определений. Коэффициент вариации измеренных уровней гистамина не
Стадия ацилирования Иммунологаческая Измерение превышал 8,9 %.
стадия результатов
Между анализами:
В чистые В покрытые антителами На холоду (2-8'С)
Анализ образцов в дубликатах проводили в 14 различных сериях
пластмассовые пробирки внести по тщательно удалить
определений. Коэффициент вариации измеренных уровней гистамина не
пробирки внести по 50 мкл калибровочных. содержимое всех
превышал 10,8 %.
25мклац^«1ирующего контрольных и пробирок
буфера. анализируемых (кроме проб 'Т"). 10.4 Точность
образцов Тест на разведение
100 мкл калибровочных. и Измерить Образцы с высоким уровнем гистамина серийно разводили 'нулевой'
контрольных и 500 мкл метки.' связанную(В)и калибровочной пробой. Измеренная величина 'открытия' составляла от
анализируемых проб общую (Т) активность '”1 91% до 126%.
и Инкубировать 2 часа (имп./мин.)
Тест на «открытие» стандартной добавки
25 мкл ацилирующего при2-8“С в течение 1 минуты.
В образцы с низким содержанием тстамина вносили известные его
раствора. и постоянном
количества. Измеренная величина «открытия» составила от 82% до 100%.
Немедленно встряхивании
перемешать на (350осц./мин.) 10.5 Диапазон определений (от аналитической чувствительности до значения
вихревом смесителе наивысшей калибровочной пробы): 0,2 -100 пМ.
* В две дополнительные пробирки внести по 500 мкл метки для оценки общей 11. ОГРАНИЧЕНИЯ МЕТОДА
активности ’“I (пробы Т’). Нарушние методики проведения анализа может привести к искажению результатов
исследования. Результаты определения должны быть интерпретированы в свете общей
7. РЕЗУЛЬТАТЫ клинической картины пациента, включая анамнез, данные других тестов и подходящую иную
Результаты рассчитывают методом интерполяции по калибровочной кривой, информацию.
полученной одновременно с анализом неизвестных образцов. Интерференция
7.1 Калибровочная кривая • Для анализа нельзя использовать образцы плазмы с гемолизом.
- Для анализа нельзя использовать образцы плазмы крови беременных женщин из-
Результаты контроля качества, приведенные в данной инструкции,
за высокого содержания в них диаминоксидазы.
получены при построении калибровочной кривой в полулогарифмических - Присутствие в исследуемом материале других видов аминов в концентрациях
координатах («сплайн»-функция) с соотношением В/Т (%) или В/ВО (%)по свыше 10 мноль/л может оказать влияние на процесс ацилирования гастамина.
вертикальной оси и концентрацией гистамина (нмоль/л) по горизонтальной - Фенол ингибирует секрецию гистамина.
оси калибровочного графика. Другие методы обс^та могут давать - Гистамин может являться составной частью некоторых аллергенов, например, яда
несколько отличающиеся результаты. перепончатокрылых.
- Так как шстамин адсорбируется стеклом, необходимо использовать только
Общая активность:48171 имп./мин. пластмассовые пипетки, пробирки и др.
Калибровочные Гистамин - Так как гистамин присутствует в ряде биологических материалов, необходимо
Имп./мин. BfT(%)
пробы (нмольУл) использовать резиновые перчатки, чтобы предотвратить зафязнение реагентов
0 0 26811 55,8 экзогенным гистамином, например, с потом.
1 1 23818 49,6 При выполнении анализов с использованием антител возможна интерференция
2 3 20052 41,8 гетерофильными антителами в пробе пациента. У пациентов, имеющих постоянный контакт
3 10 12571 26,2 с животными или проходивших иммунотерапию или диагностические процедуры с
использованием иммуноглобулинов или их фрагментов, могут вырабатываться антитела
4 30 6379 13,3
(т е. НАМА), которые влияют на результаты иммунного анализа.
5 100 2 741 5,7 Влияние этих антител может привести к получению ошибочных результатов. Тщательно
(Пример типичной Kaiu6poeo4noii кривой. Не испо льзовать для обсчета проверяйте результаты анализов пациентов с подозрением на наличие этих антител.
результатов.)
ml IMMUNOTECH SAS -130 av. de Lattre de Tassigny - B.P.177 - 13276 Marseille Cedex 9 France - Тё1. (33) 4 91 17 27 00 - Fax : (33) 4 91 41 43 58
PI-1659-2006-10-13 16/18