Комплект реагентов для получения кДНК на матрице РНК "АмплиПрайм РЕВЕРТА-L" по ТУ 9398-007-09286667-2012 в составе (см. приложение на 1 листе): — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
«УТВЕРЖДАЮ»
Генеральный директор
Общества с ограниченной
ответственностью «НекстБио»
Щ^Е.А. Агафонов^
Щ
______2012 п
ИНСТРУКЦИЯ
по применению комплекта реагентов
для получения кДНК на матрице РНК
«АмплиПрайм PEBEPTA-L»
I
IVDI
ОГЛАВЛЕНИЕ С
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ..............................................................................
Е
НАЗНАЧЕНИЕ....................................................................................................
ПРИНЦИП МЕТОДА.............................................................................................................
ФОРМЫ ВЫПУСКА КОМПЛЕКТА РЕАГЕНТОВ.............................................................
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ.........................................................................................
ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ МАТЕРИАЛЫ И ОБОРУДОВАНИЕ...........................................
ВЗЯТИЕ, ТРАНСПОРТИРОВАНИЕ И ХРАНЕНИЕ ИССЛЕДУЕМОГО МАТЕРИАЛА
СОСТАВ.........................................................................................................
ПРОВЕДЕНИЕ РЕАКЦИИ ОБРАТНОЙ ТРАНСКРИПЦИИ........................
СРОК ГОДНОСТИ. УСЛОВИЯ ТРАНСПОРТИРОВАНИЯ И ХРАНЕНИЯ.
СИМВОЛЫ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ В ПЕЧАТНОЙ ПРОДУКЦИИ...................
Ч
1 9
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
в
3 настоящей инструкции применяются следующие сокращения и обозначения:
.3
- нуклеиновые кислоты
НК
3 - полимеразная цепная реакция
ПЦР
3 — рибонуклеиновая кислота
РНК
3 - дезоксирибонуклеиновая кислота--------------------------^
ДНК
- Федеральное государственное учреждение науки
5
научно-исследовательский институт эпидемиологии» Федеральной
цнииэ
5 ФГУН
службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия
Роспотребнадзора
человека__________________ _— ----------------------—----------— ^
НАЗНАЧЕНИЕ
Комплект реагентов «АмплиПрайм PEBEPTA-L.. предназначен для получения кДНК
„а матрице РНК для последующего анализа методом полимеразной цепной
реакции.
ПРИНЦИП МЕТОДА
принцип действия основан на использовании гексамеров случайной
последовательности (рэндом-праймеров) как праймеров для полимеризации. С
помощью реакции обратной транскрипции получается кДНК из всех различных
молекул РНК, присутствующих в растворе, полученном после выделения РНК из
клинического образца.
ФОРМЫ ВЫПУСКА КОМПЛЕКТА РЕАГЕНТОВ
Комплект реагентов выпускается в 4 формах комплектации.
Форма 1 включает комплект реагентов «АмплиПрайм PEBEPTA-L» вариант 50,
Форма 2 включает комплект реагентов «АмплиПрайм PEBEPTA-L» вариант 100.
Форма 3 включает комплект реагентов «АмплиПрайм PEBEPTA-L» вариант 2-50,
Форма 4 включает комплект реагентов «АмплиПрайм PEBEPTA-L» вариант 2-100.
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
Работа должна проводиться в лаборатории, выполняющей молекулярно
биологические (ПЦР) исследования клинического материала на наличие
возбудителей инфекционных болезней, с соблюдением санитарно-эпидемических
правил СП 1.3.2322-08 «Безопасность работы с микроорганизмами lll-IV групп
патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней»,
СанПиН 2 1 7 2790-10 «Санитарно-зпидемиологические требования к обращению, с
медицинскими отходами» и методических указаний МУ 1.3.2569-09 «Организация
работы лабораторий, использующих методы амплификации нуклеиновых кислот при
работе с материалом, содержащим микроорганизмы HV групп патогенности».
3
При работе всегда следует выполнять следующие требования;
- Следует рассматривать исследуемые образцы как инфекционно-опасны$,
организовывать работу и хранение в соответствии с СП 1.3.2322-0|8
«Безопасность работы с микроорганизмами III-IV групп патогенносп^и
(опасности) и возбудителями паразитарных болезней».
- Убирать и дезинфицировать разлитые образцы или реактивы, использ1у|я
дезинфицирующие средства в соответствии с СП 1.3.2322-08 «БезопасноС1]ь
работы с микроорганизмами III-IV групп патогенности (опасности) ^
возбудителями паразитарных болезней».
j
- Лабораторный процесс должен быть однонаправленным. Анализ проводится jB
отдельных помещениях (зонах). Работу следует начинать в Зоне ВыделенИ5|1, ^ *
продолжать в Зоне Амплификации и Детекции. Не возвращать образЦь||,
оборудование и реактивы в зону, в которой была проведена предыдущая стадия
процесса. |
- Неиспользованные реактивы, реактивы с истекшим сроком годности, а таюф
использованные реактивы следует удалять в соответствии с требованиями
СанПиН 2.1.7.2790-10 «Санитарно-эпидемиологические требования к
обращению с медицинскими отходами».
- Использовать и менять при каждой операции одноразовые наконечники дл|я
автоматических дозаторов с фильтром. Одноразовую пластиковую nocyfljy
необходимо сбрасывать в специальный контейнер, содержащи|й
дезинфицирующее средство, которое может быть использовано дл|я
обеззараживания медицинских отходов.
- Поверхности столов, а также помещения, в которых проводится постанов|ф
ПЦР, до начала и после завершения работ необходимо подвергагф
ультрафиолетовому облучению в течение 30 мин.
- Применять набор строго по назначению, согласно данной инструкции.
- Допускать к работе с набором только специально обученный персонал. |
- Не использовать набор по истечении срока годности.
Использовать одноразовые перчатки, лабораторные халаты, защищать глаза рЬ
время работы с образцами и реактивами. Тщательно вымыть руки по окончании
( щ
работы.
. избегать контакта с кожей, тазами и слизистой оболочкой. При контакте
немедленно лромыть пораженное место водой и обратиться за медицинской
ПОМОЩЬЮ.
nrL
. Листы безопасности материалов (MSDS - material safety data sheet) доступны ло
запросу.
уя
ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ МАТЕРИАЛЫ И ОБОРУДОВАНИЕ
1. Ламинарный бокс (например, «БАВп-01-«Ламинар-С»-1,2», «Ламинарные
системы», Россия, класс биологической безопасности II тип А).
в 2. Термостат для пробирок типа «Эплендорф» от 25 до 100 "С (например, «ТЕРМ
к ^ 24-15», «Биоком», Россия).
3 Вортекс (например, «ТЭТА-2», «Биоком», Россия).
4' Микроцентрифута для пробирок типа «Эплендорф» до 16 тыс g (например,
к'
MiniSpin, Eppendorf, Германия). ;
6. набор злектроннык или механических дозаторов переменного объема (наприме!?,
«Ленпипет», Россия).
6. Одноразовые полипропиленовые пробирки объемом 0,2 (0,5) мл (например,
Axygen, США).
7. Одноразовые наконечники для дозаторов переменного объема с фильтром др
200 мкл (например, Axygen, США).
8. штативы для наконечников (например, Axygen, США) и пробирок объемом
0,2 (0,5) мл (например, «ИнтерЛабСервис», Россия).
9. Холодильник с морозильной камерой не выше минус 16 °С.
«.Отдельный халат, шапочки, обувь и одноразовые перчатки ло МУ 1.3.2569-09.
11. Емкость для сброса наконечников.
ВЗЯТИЕ, ТРАНСПОРТИРОВАНИЕ И ХРАНЕНИЕ ИССЛЕДУЕМОГО МАТЕРИАЛА
Перед началом работы следует ознакомиться с методическими рекомендациями
«Взятие, транспортировка, хранение клинического материала для ПЦ
диагностики», разработанными ФГУН ЦНИИЭ Роспотребнадзора, Москва, 2008 г.
СОСТАВ
Комплект реагентов «АмплиПрайм PEBEPTA-L» вариант 50 или вариант 100 ^
комплект реагентов для получения кДНК на матрице РНК включает:
мс
пр
Вариант 50 Вариант lOQ
Р€
Реактив Описание Объем, Объем,
Кол-во Кол-^^о
мл мл
П<
Прозрачная
RT-G-mix-1
бесцветная жидкость
0,01 5 пробирок 0,01 10 пробйро 1.
i
Прозрачная 2
RT-mix 0,125 5 пробирок 0,125 10 пробйрс
бесцветная жидкость
Прозрачная
Ревертаза (MMIv) 0,03 1 пробирка 0,06 1 пробирка
бесцветная жидкость
Прозрачная
ДНК-буфер 1,2 1 пробирка 1,2 2 пробирки
бесцветная жидкость
Комплект реагентов вариант 50 рассчитан на проведение 60 реакций обратной
транскрипции, включая контроли.
Комплект реагентов вариант 100 рассчитан на проведение 120 реакций обратной
транскрипции, включая контроли.
Комплект реагентов «АмплиПрайм PEBEPTA-L» вариант 2-50 или вариант 2-100
- комплект реагентов для получения кДНК на матрице РНК включает:
Вариант 2-50 Вариант 2-1Q0
Реактив Описание Объем, Объем,
Кол-во Кол-$^
мл мл _______U—
Прозрачная бесцветная
RT-G-mix-2 0,01 5 пробирок 0,01 10 пробирок
жидкость
Прозрачная бесцветная
RT-mix 0,125 5 пробирок 0,125 10 пробирок
жидкость
Прозрачная бесцветная
Ревертаза (MMIv) 0,03 1 пробирка 0,06 1 пробирка
жидкость
Прозрачная бесцветная
ДНК-буфер 1,2 1 пробирка 1,2 2 пробирки
жидкость
Комплект реагентов вариант 2-50 рассчитан на проведение 60 реакций обратной
транскрипции, включая контроли.
Комплект реагентов вариант 2-100 рассчитан на проведение 120 реакций обратней
транскрипции, включая контроли.
ПРОВЕДЕНИЕ РЕАКЦИИ ОБРАТНОЙ ТРАНСКРИПЦИИ.
Проводится в ЗОНЕ 2 - помещении для проведения ПЦР-амплификации.
Общий объем реакции - 20 мкл, объем РНК-пробы - 10 мкл.
ВНИМАНИЕ! При работе с РНК необходимо использовать только одноразовь1|е
пластиковые расходные материалы, имеющие специальную маркировку
«RNase-free», «DNase-free».
ВНИМАНИЕ! Объем добавляемых реагентов и порядок проведения реакцй|и
f •
могут быть различными. Необходимо руководствоваться описанием
проведения реакции обратной транскрипции, указанным в инструкции к набору
с
реагентов для выявления РНК анализируемого возбудителя.
Порядок работы:
1 Отобрать необходимое количество пробирок объемом 0.2 (0,5) мл.
ijipo
2 Приготовить реакционную смесь на 12 реакций. Для зтого в пробирку с КТ-лнх
•Иро
внести 5 мкл RT-G-mix-1 {RT-G.mix-2), тщательно перемешать на вортекое,
1—'
^рка осадить капли с крышки пробирки кратковременным центрифугированием.
i----■
3 К полученному раствору добавить 6 мкл ревертазы (MMIv), пипетировать 5 раз,
<рки
' перемешать на вортексе. Осадить капли с крышки пробирки кратковременным
•й
центрифугированием.
4 Внести в пробирки по 10 мкл готовой реакционной смеси.
й ^
5, используя наконечники с фильтром, добавить по 10 мкл РНК-пробы в пробирки
с реакционной смесью. Осторожно перемешать пипетированием. ^ ^
6. Поставить пробирки в амплификатор (термостат) с температурой 37 на
о
7 Поученную в реакции обратной транскрипции ^НК для последующей
' постановки ПЦР развести в 2 раза ДНК-буфером (к 20 мкл кДНК отдельным
наконечником с аэрозольным барьером добавить 20 мкл ДНК-буфера, аккуратнр
юк
перемешать пипетированием 10 раз).
готовый препарат кДНК можно хранить при температуре не выше мннур
)ОК
16 X в течение 1 нед или при температуре ие выше минус 68 X в течение годд.
ка
ки
А
С1
годности. и
СРОК УСЛОВИЯ ТРАНСПОРТИРОВАНИЯ ХРАНЕНИЯ
Срок годности. 12 мес. Комплект реагентов с истекшим сроком годнос|и
применению не подлежит. Срок годности вскрытых реагентов соответствует срО|(у
годности, указанному на этикетках для невскрытых реагентов, если в инструкции tje
указано иное.
Транспортирование. Комплект реагентов транспортировать при температуре от 2 До
8 °С не более 5 сут. При получении разукомплектовать в соответствии с указанными
температурами хранения.
Хранение. Комплект реагентов хранить при температуре от минус 24°С до мин^^с
16 °С.
i
Рекламации на качество комплекта реагентов «АмплиПрайм PEBEPTA-il|»
' I
направлять на адрес предприятия-изготовителя ООО «НекстБио» (111394 г. МосквЬ,
ул. Полимерная, 8 стр.2) в отдел по работе с рекламациями (тел. (495) 768-71-81,10-
mail; info@nextbio.ru).
Старший технолог производства В. В. Петров
пись)
Главный врач ФГБУ «Поликлиника №1»
Управления делами Президента Е. Л. Никонов
Российской Федерации (подпись, печать)
<к