Набор реагентов для выявления ДНК вируса гепатита В (HВV) в клиническом материале методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с гибридизационно-флуоресцентной детекцией «АмплиСенс® HBV-FL» — инструкция и характеристики

РУ: ФСР 2007/00585 от 09.08.2007 · класс риска 3

Производитель: ФБУН ЦНИИ ЭПИДЕМИОЛОГИИ РОСПОТРЕБНАДЗОРА (Россия)

Назначение: Набор реагентов «АмплиСенс® HBV-FL» предназначен для качественного определения ДНК вируса гепатита B (HBV) в биологическом материале (плазма венозной крови) методом ПЦР с гибридизационно-флуоресцентной детекцией продуктов амплификации. Материалом для проведения ПЦР служат пробы ДНК, экстрагированной из плазмы венозной крови. Ограничения по применению медицинского изделия в различных популяционных и демографических группах отсутствуют. Набор реагентов используется в клинической лабораторной диагностике для исследования биологического материала с целью выявления ДНК вируса гепатита В. Потенциаль

В госконтрактах 44-ФЗ: 4 контракта, медианная цена за единицу 12 805 ₽.

Автоматически отфильтрованный фрагмент инструкции по применению (страницы, где похоже, что есть таблица технических характеристик) — не полный документ. Карточка РУ на портале Росздравнадзора →

Текст инструкции: технические характеристики

AmpliSens
ФБУН ЦНИИ Эпидемиологии
Роспотребнадзора
ВКЛАДЫШ с настройками
к набору реагентов «АмплиСенс® HBV-FL»
H-0304-1
Форма 4: (ВЕР R-V5-Mod(RG,iQ,Mx,Dt); REF]
15.03.26
Настройки для приборов роторного типа
Rotor-Gene 3000/6000/Q
Примечание — Задать Reaction уоите/Объем реакции — 25 мкл. Установить галочку 15 pl oil
layer volume/15 ul с добав. воска, если такая опция предусмотрена в ПО прибора.
Calibrate/Gain Threshold/ | Dynamic tube/ Slope Correct/ More Settings/Outlier
Канал Optimisation.../ Removal/YcTpaHeHue
Порог Динамич.фон | Коррект. уклона
Опт.уровня сигн. выбросов
FAM/Green | от 5Р! до 10Р! 0,03 включена включена 10%
JOE/Yellow | от 5FI до 10FI 0,03 включена включена 10%
Настройки для приборов планшетного типа
CFX96
Примечание — Для каждого шага этапов циклирования, нажав Ha кнопку Step Options, задать
скорость нагревания/охлаждения Ramp Rate 2,5 °C/sec
Канал Threshold/Mopor
FAM Для каждого канала проверить правильность автоматического выбора пороговой линии.
JOE/M EX Пороговая линия должна пересекать только сигмообразные кривые накопления сигнала
положительных образцов и контролей и не пересекать базовую линию
ДТ-96/«ДТпрайм»
Критерий Нижняя Верхняя
Тип положитель- |граница/Порог| граница/ Норма- |Фитирование
анализа Метод |Каналы ного положитель- Порог лизация (сглаживание)
результата ного нормализац| данных данных
ПЦР результата | ии данных
© (Cn) для Пороговый | Fam, 70 % Не исполь- Не исполь- |Не исполь-| Не исполь-
каналов СЁ Нех 0 зуется зуется зуется зуется
При использовании программного обеспечения прибора
Граничные значения порогового цикла Ct
Прибор роторного типа | Прибор планшетнотгипоа |
Образец Канал для флуорофора
FAM JOE FAM JOE
OK 25 Ct отсутствует 29 Ct отсутствует
MK 25 28 29 32
K+ 30 30 34 34
К- СЕотсутствует Ct отсутствует
Исследуемые образцы 25 35 29 35
Продолжение см. на обороте
При использовании ПО ARTS совместно с ПО AmpliSens® HBV-FL Soft
Граничные значения порогового цикла Ct
Rotor-Gene 3000/6000/Q | CFX96 | AT-96/«[Tnpaiim»
Образец Канал для флуорофора
FAM JOE FAM JOE FAM JOE
OK 27 Ct отсутствует 29 СЕотсутствует | 30 | СЕотсутствует
MK 27 32 29 32 30 33
K+ 34 34 34 34 35 35
K- Ct отсутствует Ct отсутствует Ct отсутствует
as 27 38 29 35 30 37
Действующую версию:
Информационного листа «Приоритеты калибровки для наборов реагентов АмплиСенс на амплификаторах
Rotor-Gene 3000/6000 (Corbett Research, Австралия) и Rotor-Gene Q (QIAGEN, Германия)»
Вы можете получить в формате РОЕ-файла no интернет-адресу http://www.amplisens.ru в разделе
Информационные материалы/Руководства по работе с приборами.
Бумажный вариант документа Вы можете распечатать самостоятельно.
Пожалуйста, пользуйтесь всегда только актуальной версией документа с указанного интернет-сайта.
ФБУН ЦНИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора
ВКЛАДЫШ
для автоматизированной работы
к набору реагентов АмплиСенс® HBV-FL
Форма 4 15.03.26
R-V5-Mod(RG,iQ,Mx,Dt) о 2027-03-15
Информация для запуска амплификации, анализа и интерпретации результатов
автоматизированным способом
ПО AmpliSens® HBV-FL Soft в. 2.0.0
ОК-код для автоматического ввода информации в ПО
AmpliSens
ФБУН ЦНИИ Эпидемиологии
Роспотребнадзора
ВКЛАДЫШ с настройками
к набору реагентов «АмплиСенс® HBV-FL»
R-V5-Mod(RG,iQ,Mx,Dt); [REF] H-0304-1
Форма 4: [REF
A15.03.26
Настройки для приборов роторного типа
Rotor-Gene 3000/6000/Q
Примечание — Задать Reaction уоите/Объем реакции — 25 мкл. Установить галочку 15 ul oil
layer volume/15 uL с добав. воска, если такая опция предусмотрена в ПО прибора.
Calibrate/Gain Threshold/ | Dynamic tube/ Slope Correct/ More Settings/Outfier
Канал Optimisation.../ Removal/YcTpaHeHue
о Порог Динамич.фон | Коррект. уклона
пт.уровня сигн. выбросов
FAM/Green | от 5FI до 10FI 0,03 включена включена 10%
JOE/Yellow | от 5FI до 10Р1 0,03 включена включена 10%
Настройки для приборов планшетного типа
CFX96
Примечание — Для каждого шага этапов циклирования, нажав на кнопку Step Options, задать
скорость нагревания/охлаждения Ramp Rate 2,5 °C/sec
Kanan Threshold/Tlopor
FAM Для каждого канала проверить правильность автоматического выбора пороговой линии.
JOE/HEX Пороговая линия должна пересекать только сигмообразные кривые накопления сигнала
положительных образцов и контролей и не пересекать базовую линию
ДТ-96/«ДТпрайм»
Критерий Нижняя Верхняя
Тип положитель- |граница/Порог| граница/ Норма- |Фитирование
анализа Метод |Каналы ного положитель- Порог лизация (сглаживание)
результата Horo нормализац| данных данных
ПЦР результата | ии данных
© (22) Ana Пороговый | Fam, 70 % Не исполь- He исполь- |Не исполь-| He исполь-
каналов Ct Hex ° зуется зуется зуется зуется
При использовании программного обеспечения прибора
Граничные значения порогового цикла Ct
Прибор роторного типа | Прибор планшетнотгипоа |
Образец Канал для флуорофора
FAM JOE FAM JOE
OK 25 Ct отсутствует 29 Ct отсутствует
MK 25 28 29 32
К+ 30 30 34 34
К- СЕотсутствует Ct отсутствует
Исследуемые образцы 25 35 29 35
Продолжение см. Ha обороте
При использовании ПО ARTS совместно с ПО AmpliSens® HBV-FL Soft
Граничные значения порогового цикла Ct
Rotor-Gene 3000/6000/Q | CFX96 | AT-96/«[Tnpaiim»
Образец Канал для флуорофора
FAM JOE FAM JOE FAM JOE
OK 27 Ct отсутствует 29 СЕотсутствует | 30 | СЕотсутствует
MK 27 32 29 32 30 33
K+ 34 34 34 34 35 35
K- Ct отсутствует Ct отсутствует Ct отсутствует
as 27 38 29 35 30 37
Действующую версию:
Информационного листа «Приоритеты калибровки для наборов реагентов АмплиСенс на амплификаторах
Rotor-Gene 3000/6000 (Corbett Research, Австралия) и Rotor-Gene Q (QIAGEN, Германия)»
Вы можете получить в формате РОЕ-файла no интернет-адресу http://www.amplisens.ru в разделе
Информационные материалы/Руководства по работе с приборами.
Бумажный вариант документа Вы можете распечатать самостоятельно.
Пожалуйста, пользуйтесь всегда только актуальной версией документа с указанного интернет-сайта.
ФБУН ЦНИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора
ВКЛАДЫШ
для автоматизированной работы
к набору реагентов АмплиСенс® HBV-FL
Форма 4 А15.03.26
R-V5-Mod(RG,iQ,Mx, Dt) о 2027-03-15
Информация для запуска амплификации, анализа и интерпретации результатов
автоматизированным способом
ПО AmpliSens® HBV-FL Soft в. 2.0.0
©ОК-код для автоматического ввода информации в ПО
«УТВЕРЖДАЮ»
Директор Федерального бюджетного
учреждения науки «Центральный
научно-исследовательский институт
эпидемиологии» Федеральной
службы по надзору в сфере защиты
прав потребителей и благополучия
человека
________________ В.Г. Акимкин
«____»_______________20__ г.
ИНСТРУКЦИЯ ПО ПРИМЕНЕНИЮ
Набор реагентов для выявления ДНК вируса гепатита B (HBV)
в клиническом материале методом полимеразной цепной
реакции (ПЦР) с гибридизационно-флуоресцентной детекцией
«АмплиСенс® HBV-FL»
АмплиСенс
ФБУН ЦНИИ Эпидемиологии
Роспотребнадзора,
Российская Федерация, 111123,
г. Москва, ул. Новогиреевская, д. 3А
г. Москва, ул. Новогиреевская, д. 3А, стр. 6
тел. (495) 974 9642, е-mail: amplisens@pcr.ru
| ОГЛАВЛЕНИЕ |  |  |  |
| СПИСОК СОКРАЩЕНИ | Й ................... | ........................................................................ | ........ 3 |
| НАЗНАЧЕНИЕ ............... | ..................... | ........................................................................ | ........ 3 |
| ПОКАЗАНИЯ И ПРОТИ | ВОПОКАЗАН | ИЯ К ПРИМЕНЕНИЮ НАБОРА РЕАГЕНТО | В ..... 4 |
| ПРИНЦИП МЕТОДА ...... | ..................... | ........................................................................ | ........ 4 |
| ФОРМЫ КОМПЛЕКТАЦ | ИИ ................ | ........................................................................ | ........ 5 |
| АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАР | АКТЕРИСТИ | КИ ................................................................... | ........ 5 |
| ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ Х | АРАКТЕРИС | ТИКИ .............................................................. | ........ 6 |
| МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖ | НОСТИ ........ | ........................................................................ | ........ 7 |
| СВЕДЕНИЯ ОБ УТИЛИ | ЗАЦИИ ......... | ........................................................................ | ........ 9 |
| ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ М | АТЕРИАЛЫ | И ОБОРУДОВАНИЕ ....................................... | ........ 9 |
| ВЗЯТИЕ, ТРАНСПОРТИ | РОВАНИЕ И | ХРАНЕНИЕ ИССЛЕДУЕМОГО МАТЕРИАЛ | А .. 11 |
| ПОДГОТОВКА ИССЛЕД | УЕМОГО МА | ТЕРИАЛА К ЭКСТРАКЦИИ ДНК .................. | ...... 12 |
| ИНТЕРФЕРИРУЮЩИЕ | ВЕЩЕСТВА | И ОГРАНИЧЕНИЯ ПО ИСПОЛЬЗОВАНИЮ | ПРОБ |
| ИССЛЕДУЕМОГО МАТ | ЕРИАЛА ........ | ........................................................................ | ...... 12 |
| СОСТАВ ......................... | ..................... | ........................................................................ | ...... 14 |
| ПРОВЕДЕНИЕ ПЦР-ИС | СЛЕДОВАН | ИЯ .................................................................... | ...... 15 |
| ЭКСТРАКЦИЯ ДНК ИЗ | ИССЛЕДУЕМ | ЫХ ОБРАЗЦОВ ............................................. | ...... 15 |
| АМПЛИФИКАЦИЯ С ДЕ | ТЕКЦИЕЙ В | РЕЖИМЕ «РЕАЛЬНОГО ВРЕМЕНИ» .......... | ...... 16 |
| А. Подготовка проб д | ля амплифи | кации ............................................................... | ...... 16 |
| Б. Проведение ампл | ификации с | детекцией в режиме «реального времени» | ...... 18 |
| В. Анализ и интерпре | тация резуль | татов ................................................................ | ...... 19 |
| СРОК ГОДНОСТИ. УСЛ | ОВИЯ ТРАН | СПОРТИРОВАНИЯ И ХРАНЕНИЯ ............... | ...... 23 |
| ГАРАНТИЙНЫЕ ОБЯЗА | ТЕЛЬСТВА | ИЗГОТОВИТЕЛЯ ............................................ | ...... 24 |
| СИМВОЛЫ, ИСПОЛЬЗУ | ЕМЫЕ В ПЕ | ЧАТНОЙ ПРОДУКЦИИ .................................. | ...... 25 |
| ПРИЛОЖЕНИЕ А .......... | ..................... | ........................................................................ | ...... 26 |
| ПРИЛОЖЕНИЕ Б .......... | ..................... | ........................................................................ | ...... 29 |
|  |  | VER 16.06.26 / стр. | 2 из 37 |
| «АмплиСенс® HBV-FL» | – Набор реагентов для выявления ДНК вируса гепатита B (HBV) в клиническом материале методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с гибридизационно-флуоресцентной детекцией «АмплиСенс® HBV-FL» |
| ВКО | – внутренний контрольный образец |
| ГЭ | – геномный эквивалент (геном) |
| ДНК | – дезоксирибонуклеиновая кислота |
| К+ | – положительный контроль ПЦР |
| К– | – отрицательный контроль ПЦР |
| МЕ | – международная единица |
| МУ | – методические указания |
| ОК | – отрицательный контроль экстракции |
| ОКО | – отрицательный контрольный образец |
| ПК | – положительный контроль экстракции |
| ПКО | – положительный контрольный образец |
| ПЦР | – полимеразная цепная реакция |
| РУ | – регистрационное удостоверение |
| СанПиН | – санитарные правила и нормы |
| ФБУН ЦНИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора | – Федеральное бюджетное учреждение науки «Центральный научно-исследовательский институт эпидемиологии» Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека |
| Ct | – сycle threshold (пороговый цикл) |
| FL | – ПЦР с гибридизационно-флуоресцентной детекцией |
| FRT | – флуоресцентная детекция в режиме «реального времени» |
| HBV | – вирус гепатита В |
| HCV | – вирус гепатита С |
| HDV | – вирус гепатита D («Дельта») |
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
В настоящей инструкции применяются следующие
сокращения и обозначения:
НАЗНАЧЕНИЕ
Набор реагентов «АмплиСенс® HBV-FL» предназначен для
качественного определения ДНК вируса гепатита B (HBV) в
биологическом материале (плазма венозной крови) методом
ПЦР с гибридизационно-флуоресцентной детекцией продуктов
амплификации. Материалом для проведения ПЦР служат
пробы ДНК, экстрагированной из плазмы венозной крови.
Ограничения по применению медицинского изделия в
различных популяционных и демографических группах
отсутствуют.
Набор реагентов используется в клинической лабораторной
диагностике для исследования биологического материала с
целью выявления ДНК вируса гепатита В.
VER 16.06.26 / стр. 3 из 37
Потенциальные пользователи медицинского изделия: к
работе с набором реагентов допускаются только медицинские
работники, обученные методам молекулярной диагностики и
правилам работы в клинико-диагностической лаборатории в
установленном порядке.
ПОКАЗАНИЯ И ПРОТИВОПОКАЗАНИЯ К ПРИМЕНЕНИЮ
НАБОРА РЕАГЕНТОВ
Набор реагентов используется в клинической лабораторной
диагностике для исследования биологического материала с
целью выявления ДНК вируса гепатита В.
Противопоказания отсутствуют, за исключением случаев,
когда взятие материала не может быть осуществлено по
медицинским показаниям.
ПРИНЦИП МЕТОДА
Принцип тестирования основывается на экстракции ДНК из
образцов исследуемого материала совместно с экзогенным
внутренним контрольным образцом (ВКО) и одновременной
амплификации участков ДНК выявляемого вируса и ДНК ВКО с
гибридизационно-флуоресцентной детекцией. ВКО позволяет
контролировать все этапы ПЦР-исследования для каждого
образца и оценивать влияние ингибиторов на результаты ПЦР-
исследования.
Амплификация участка ДНК проводится при помощи
специфичных к этому участку праймеров и фермента Taq-
полимеразы. В составе реакционной смеси присутствуют
флуоресцентно-меченые олигонуклеотиды, комплементарные
участкам амплифицируемых ДНК-мишеней, что позволяет
регистрировать накопление специфического продукта
амплификации путем измерения интенсивности
флуоресцентного сигнала с помощью амплификатора с
системой детекции в режиме «реального времени».
Набор реагентов содержит систему защиты от контаминации
ампликонами за счет применения фермента урацил-ДНК-
гликозилазы (УДГ) и дезоксиуридинтрифосфата.
На этапе амплификации одновременно в одной пробирке
проводится амплификация двух ДНК-мишеней. Результаты
амплификации регистрируются по каналам флуоресцентной
детекции, указанным в табл. 1:
VER 16.06.26 / стр. 4 из 37
|  | Канал для флуорофора |  |  | FAM |  | JOE |  |
| ДНК-мишень |  |  | ДНК ВКО |  | ДНК HBV |  |  |
| Область амплификации |  |  | искусственная нуклеотидная последовательность |  | gene C |  |  |
Таблица 1
ФОРМЫ КОМПЛЕКТАЦИИ
Форма 4: «ПЦР-комплект» вариант FRT
Примечание – Формы 1, 2, 3 удалены.
Форма 4 рассчитана на проведение 112 реакций
амплификации, включая контроли, и используется для
проведения амплификации ДНК с гибридизационно-
флуоресцентной детекцией в режиме «реального времени».
Для проведения полного ПЦР-исследования необходимо
использовать комплекты реагентов для экстракции ДНК.
АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
Для данного набора реагентов применимы следующие
характеристики:
Таблица 2
Аналитическая чувствительность (предел обнаружения)
Объём Комплект Аналитическая
Вид
образца для Комплект для для чувствительность
исследуемого
экстракции, экстракции ДНК амплифи- (предел
материала
мкл кации обнаружения), ME/мл
«РИБО-сорб» 100
Плазма 100 «ПЦР-
«РИБО-преп» 50
венозной комплект»
200 «МАГНО-сорб» 50
крови вариант FRT
1000 «МАГНО-сорб» 10
Данные значения характеристик достигаются при
соблюдении правил, указанных в разделе «Взятие,
транспортирование и хранение исследуемого материала».
Аналитическая специфичность
Набор реагентов обнаруживает ДНК HBV.
Аналитическая специфичность набора реагентов доказана
при исследовании ДНК/РНК следующих микроорганизмов, а
также геномной ДНК человека:
 HBV (вирус гепатита B) в концентрации не менее
1х103 копий/мл;
 HAV (вирус гепатита А), HCV (вирус гепатита С), HDV (вирус
гепатита D), ВИЧ-1 (вирус иммунодефицита человека
1 типа), CMV (цитомегаловирус), EBV (вирус Эпштейна-
VER 16.06.26 / стр. 5 из 37
Барр), HSV-1,2 (вирус простого герпеса типы 1, 2), VZV
(вирус ветряной оспы), HHV-6 (вирус герпеса человека
6 типа), Parvovirus B19 (парвовирус В19), HAdV-2
(аденовирус 2 типа) в концентрации не менее
1х105 копий/мл;
 Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Streptococcus
pyogenes, Streptococcus agalactiae в концентрации не менее
1х105 ГЭ/мл;
 ДНК человека в концентрации 1 мг/мл.
При тестировании образцов ДНК/РНК вышеперечисленных
микроорганизмов и ДНК человека неспецифических реакций
выявлено не было.
Информация об интерферирующих веществах указана в
разделе «Интерферирующие вещества и ограничения по
использованию проб исследуемого материала».
Повторяемость и воспроизводимость исследования
Повторяемость и воспроизводимость исследования были
определены путем тестирования положительных и
отрицательных модельных образцов. Положительные образцы
представляли собой разведения стандартного образца
предприятия, содержащие ДНК HBV в концентрации выше
предела обнаружения в негативной плазме венозной крови. В
качестве отрицательного образца была использована
негативная плазма венозной крови.
Условия повторяемости включали в себя тестирование в
одной и той же лаборатории, одним и тем же оператором, с
использованием одного и того же оборудования в пределах
короткого промежутка времени. Условия воспроизводимости –
тестирование в двух независимых лабораториях, разными
операторами, в разные дни, на различных приборах разных
серий набора реагентов. Результаты представлены в таблице 3.
Таблица 3
Повторяемость Воспроизводимость
Тип образцов Количество Совпадение Количество Совпадение
образцов результатов, % образцов результатов, %
Положительные 10 100 80 100
Отрицательные 10 100 80 100
ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
Для определения диагностических характеристик набора
VER 16.06.26 / стр. 6 из 37
реагентов были использованы:
 50 образцов плазмы венозной крови от доноров с
отсутствием маркеров вирусных гепатитов (HBsAg, anti-
HCV) и маркеров синдрома цитолиза (АЛТ, АСТ);
 50 образцов плазмы венозной крови пациентов с диагнозом
«хронический вирусный гепатит В». Наличие
ДНК HBV подтверждено при тестировании с помощью
набора реагентов на основе ПЦР, зарегистрированного в
Российской Федерации в установленном порядке.
Таблица 4
Результаты тестирования набора реагентов
«АмплиСенс® HBV-FL» в сравнении с референтным методом
Вид Результаты применения
Результаты применения
исследуемого референтного метода1
«АмплиСенс® HBV-FL»
материала положительных отрицательных
Всего положительных 50 0
Плазма
использовано
венозной крови отрицательных 0 50
100 образцов
Таблица 5
Диагностические характеристики набора реагентов
«АмплиСенс® HBV-FL»
Диагностическая Диагностическая
Вид исследуемого чувствительность2 специфичность3
материала (с доверительной (с доверительной
вероятностью 95 %) вероятностью 95 %)
Плазма венозной крови 100 (92,89 – 100) % 100 (92,89 – 100) %
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
Работа должна проводиться в лаборатории, выполняющей
молекулярно-биологические (ПЦР) исследования
биологического материала на наличие возбудителей
инфекционных болезней, с соблюдением СанПиН 3.3686-21
«Санитарно-эпидемиологические требования по профилактике
инфекционных болезней», СанПиН 2.1.3684-21 «Санитарно-
эпидемиологические требования к содержанию территорий
городских и сельских поселений, к водным объектам, питьевой
воде и питьевому водоснабжению, атмосферному воздуху,
почвам, жилым помещениям, эксплуатации производственных,
1 В качестве референтного метода использовался набор реагентов на основе ПЦР,
зарегистрированный в Российской Федерации в установленном порядке.
2 Относительная чувствительность в сравнении с использованным референтным методом.
3 Относительная специфичность в сравнении с использованным референтным методом.
VER 16.06.26 / стр. 7 из 37
общественных помещений, организации и проведению
санитарно-противоэпидемических (профилактических)
мероприятий» и МУ 1.3.2569-09 «Организация работы
лабораторий, использующих методы амплификации
нуклеиновых кислот при работе с материалом, содержащим
микроорганизмы I–IV групп патогенности».
Набор реагентов предназначен для одноразового
применения для проведения ПЦР-исследования указанного
количества проб (см. раздел «Формы комплектации»).
Набор реагентов готов к применению согласно данной
инструкции. Применять набор реагентов строго по назначению.
При работе необходимо всегда выполнять следующие
требования:
- Температура в помещении лаборатории должна быть от 20
до 28 °С, относительная влажность – от 15 до 75 %.
- Допускать к работе с набором реагентов только персонал,
обученный методам молекулярной диагностики и правилам
работы в клинико-диагностической лаборатории в
установленном порядке.
- Не использовать набор реагентов, если нарушена
внутренняя упаковка или внешний вид реагента не
соответствует описанию.
- Не использовать набор реагентов, если не соблюдались
условия транспортирования и хранения согласно
инструкции.
- Не использовать набор реагентов по истечении срока
годности.
- Использовать одноразовые неопудренные перчатки,
лабораторные халаты, защищать глаза во время работы с
образцами и реагентами. Тщательно вымыть руки по
окончании работы. Все операции проводятся только в
перчатках для исключения контакта с организмом человека.
- Избегать вдыхания паров, контакта с кожей, глазами и
слизистой оболочкой. Вреден при проглатывании. При
контакте немедленно промыть пораженное место водой, при
необходимости обратиться за медицинской помощью.
При использовании по назначению и соблюдении
вышеперечисленных мер предосторожности набор реагентов
безопасен.
VER 16.06.26 / стр. 8 из 37
При соблюдении условий транспортировки, эксплуатации и
хранения риски взрыва и возгорания отсутствуют.
Сведения о безопасности набора реагентов доступны по
запросу.
СВЕДЕНИЯ ОБ УТИЛИЗАЦИИ
Неиспользованные реагенты, реагенты с истекшим сроком
годности, использованные реагенты, упаковку4, биологический
материал, а также материалы, инструменты и предметы,
загрязненные биологическим материалом, следует удалять в
соответствии с требованиями СанПиН 2.1.3684-21 «Санитарно-
эпидемиологические требования к содержанию территорий
городских и сельских поселений, к водным объектам, питьевой
воде и питьевому водоснабжению, атмосферному воздуху,
почвам, жилым помещениям, эксплуатации производственных,
общественных помещений, организации и проведению
санитарно-противоэпидемических (профилактических)
мероприятий».
ВНИМАНИЕ! При удалении отходов после амплификации
(пробирок, содержащих продукты ПЦР) недопустимо
открывание пробирок и разбрызгивание содержимого,
поскольку это может привести к контаминации продуктами ПЦР
лабораторной зоны, оборудования и реагентов.
ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ МАТЕРИАЛЫ И ОБОРУДОВАНИЕ
Перечисленные ниже дополнительные материалы и
оборудование, относящиеся к категории медицинских изделий
и зарегистрированные на территории Российской Федерации
или Евразийского экономического союза, не имеют
ограничений по совместному использованию с данным
набором реагентов, кроме позиций, для которых указаны
конкретные примеры.
Взятие исследуемого материала
1. Вакуумная система забора крови типа Vacuette.
2. Центрифуга медицинская с принадлежностями.
3. Одноразовые полипропиленовые плотно закрывающиеся
или завинчивающиеся пробирки объемом 2 мл.
4 Неиспользованные реагенты, реагенты с истекшим сроком годности, использованные
реагенты, упаковка относятся к классу опасности медицинских отходов Г.
VER 16.06.26 / стр. 9 из 37
Экстракция ДНК из исследуемых образцов
4. Комплект реагентов для экстракции ДНК (например,
«РИБО-сорб» (РУ № ФСР 2008/03993), «РИБО-преп»
(РУ № ФСР 2008/03147), «МАГНО-сорб» вариант 100-200
или вариант 100-1000 (РУ № ФСР 2010/07265)).
5. Дополнительные материалы и оборудование для экстракции
ДНК – согласно инструкции к комплекту реагентов для
экстракции ДНК.
При использовании автоматических станций для экстракции
нуклеиновых кислот:
6. Автоматическая станция для экстракции НК «открытого
типа» – согласно инструкции к комплекту реагентов для
экстракции ДНК/РНК, пипетирующая (например, MicroLab
STARlet (Hamilton Bonaduz AG («Гамильтон Бонадуц AГ»),
Швейцария (РУ № РЗН 2018/6981))) или
магнитоперемешивающая (например, KingFisher Flex
(Thermo Fisher Scientific Oy («Термо Фишер Сайентифик
Ой»), Финляндия (РУ № ФСЗ 2009/05562)), Auto-Pure 96,
Auto-Pure 24 (Hangzhou Allsheng Instruments Co., Ltd. (ООО
«Ханчжоуская компания инструментов Аошен, Лтд.»), Китай
(РУ № РЗН 2022/16430))).
7. Набор необходимых расходных материалов к используемой
автоматической станции в соответствии с рекомендациями
производителя.
Амплификация с гибридизационно-флуоресцентной
детекцией продуктов амплификации
8. Одноразовые наконечники для дозаторов переменного
объема с фильтром до 100, до 200 мкл.
9. Штативы для пробирок объемом 0,2 мл или 0,1 мл.
10. Бокс абактериальной воздушной среды (ПЦР-бокс, УФ-бокс)
или бокс микробиологической безопасности II класса
защиты.
11. Центрифуга-вортекс.
12. Автоматические дозаторы переменного объема.
13. Одноразовые полипропиленовые пробирки:
а) завинчивающиеся или плотно закрывающиеся пробирки
объемом 1,5 мл – для приготовления реакционной смеси;
б) тонкостенные пробирки для ПЦР объемом 0,2 мл с
VER 16.06.26 / стр. 10 из 37
выпуклой или плоской оптически прозрачной крышкой
или пробирки объемом 0,2 мл в стрипах по 8 шт. с
прозрачными крышками – при использовании прибора
планшетного типа;
в) тонкостенные пробирки для ПЦР объемом 0,2 мл с
плоской крышкой или пробирки для ПЦР к Rotor-Gene
объемом 0,1 мл в стрипах по 4 шт. с крышками – при
использовании прибора роторного типа.
14. Программируемый амплификатор с системой детекции
флуоресцентного сигнала в режиме «реального времени»
(например, Rotor-Gene 3000/6000 (Corbett Research,
Австралия), Rotor-Gene Q (QIAGEN GmbH («Киаген ГмбХ»),
Германия (РУ № ФСЗ 2010/07595)), CFX96 (Bio-Rad
Laboratories, Inc. («Био-Рад Лабораториз, Инк.»), США
(РУ № ФСЗ 2008/03399)), ДТ-96 / «ДТпрайм» (ООО «НПО
ДНК-Технология», Россия (РУ № ФСР 2007/01250,
РУ № ФСР 2011/10229)).
15. ПО для запуска амплификации и автоматической обработки
результатов – ПО ARTS (см. руководство оператора ПО
AmpliSens® HBV-FL Soft).
16. Холодильник от 2 до 8 °С с морозильной камерой от
минус 24 до минус 16 °С.
17. Отдельный халат, шапочка, обувь и одноразовые перчатки.
18. Емкость для сброса наконечников.
ВЗЯТИЕ, ТРАНСПОРТИРОВАНИЕ И ХРАНЕНИЕ
ИССЛЕДУЕМОГО МАТЕРИАЛА
Материалом для исследования служит плазма венозной
крови.
Взятие венозной крови проводится утром натощак или через
3 часа после приема пищи из локтевой вены одноразовой
иглой диаметром 0,8–1,1 мм в пробирку с ЭДТА (К ЭДТА или
2
К ЭДТА) (конечная концентрация в крови 1,2-2,0 мг/мл) в
3
качестве антикоагулянта. Закрытую пробирку с кровью
несколько раз переворачивают вверх дном, чтобы кровь в
пробирке тщательно перемешалась с антикоагулянтом (в
противном случае кровь свернется, и экстракция ДНК станет
невозможной), и хранят при температуре от 2 до 8 °С не более
6 ч. Пробирку с цельной кровью центрифугируют 20 мин при
VER 16.06.26 / стр. 11 из 37
800-1600 g при комнатной температуре. Полученную плазму
переносят в количестве не менее 1 мл отдельными
наконечниками с фильтром в стерильные пробирки типа
«Эппендорф» объемом 2 мл.
Допускается хранение образцов плазмы венозной крови до
проведения ПЦР-исследования:
 при температуре от 2 до 8 °С – в течение 3 суток;
 при температуре от минус 24 до минус 16 °С – в течение
года;
 при температуре не выше минус 68 °С – длительно.
Допускается однократное замораживание-оттаивание
материала.
Допускается транспортирование плазмы венозной крови при
температуре от 2 до 8 °С не более 3 суток.
Допускается использование сыворотки крови, однако
диагностическая чувствительность ввиду осаждения вирусных
частиц при ретракции сгустка может быть существенно
снижена. Хранить сыворотку можно не более 3 суток при
температуре от 2 до 8 °С и длительно – при температуре не
выше минус 68 °С.
ПОДГОТОВКА ИССЛЕДУЕМОГО МАТЕРИАЛА К
ЭКСТРАКЦИИ ДНК
Образцы плазмы венозной крови не требуют
предварительной подготовки.
ИНТЕРФЕРИРУЮЩИЕ ВЕЩЕСТВА И ОГРАНИЧЕНИЯ ПО
ИСПОЛЬЗОВАНИЮ ПРОБ ИССЛЕДУЕМОГО МАТЕРИАЛА
Для контроля эффективности экстракции ДНК и реакции
амплификации в наборе реагентов предусмотрено
использование внутреннего контрольного образца (ВКО STI-87),
который добавляется в каждый биологический образец на
этапе экстракции нуклеиновых кислот. По окончании реакции
амплификации наличие сигнала, свидетельствующего о
накоплении фрагментов ДНК ВКО STI-87, говорит о
достаточной эффективности экстракции нуклеиновых кислот и
отсутствии ингибиторов ПЦР.
Ограничения по использованию проб
Непригодными для исследования являются:
VER 16.06.26 / стр. 12 из 37
| п | Вид | о | Потенциальный интерферент | Протестированная концентрация в образце | Наличие интерференции |
|  | отенциальног |  |  |  |  |
|  | интерферента |  |  |  |  |
| Эндогенные вещества |  |  | Гемоглобин | 160 г/л (верхняя граница нормы) | Не обнаружено |
|  |  |  |  | 250 г/л |  |
|  |  |  | Триглицериды | 3,7 ммоль/л (верхняя граница нормы) | Не обнаружено |
|  |  |  |  | 37 ммоль/л |  |
|  |  |  | Билирубин | 21 мкмоль/л (верхняя граница нормы) | Не обнаружено |
|  |  |  |  | 210 мкмоль/л |  |
|  |  |  | Белок | 85 г/л (верхняя граница нормы) | Не обнаружено |
|  |  |  |  | 120 г/л |  |
| Экзогенные вещества |  |  | Лития гепарин5 | 12 МЕ/мл | Обнаружено |
|  |  |  | Калий ЭДТА3 | 2 мг/мл | Не обнаружено |
 образцы плазмы венозной крови с гемолизом;
 образцы плазмы венозной крови, подвергшиеся
многократному замораживанию-оттаиванию;
 образцы венозной крови, взятой в пробирки с гепарином в
качестве антикоагулянта.
Потенциально интерферирующие вещества
Для оценки потенциальной интерференции были выбраны
эндогенные и экзогенные вещества, которые могут
присутствовать в биологическом материале, используемом для
исследования (см. табл. 6).
Были протестированы модельные образцы плазмы венозной
крови без добавления и с добавлением потенциально
интерферирующих веществ. Концентрация каждого
потенциально интерферирующего вещества указана в табл. 6.
Модельные образцы плазмы венозной крови содержали
стандартный образец предприятия с конечной концентрацией
ДНК HBV 500 МЕ/мл.
Таблица 6
5 В соответствии с ГОСТ Р 53079.4-2008 (Технологии лабораторные клинические.
Обеспечение качества клинических лабораторных исследований. Часть 4. Правила ведения
преаналитического этапа) калия ЭДТА используют в концентрации от 1,2 до 2,0 мг/мл, лития
гепарин – в концентрации от 12 до 30 МЕ/мл.
VER 16.06.26 / стр. 13 из 37
| Реагент | Описание |  | Объем, |  | К | оличество | , |
|  |  |  | мл |  |  | шт. |  |
| ПЦР-смесь-1-FL HBV | Прозрачная жидкость от бесцветного до светло-лилового цвета | 0,3 |  |  | 4 |  |  |
| ПЦР-буфер-B | Прозрачная бесцветная жидкость | 0,2 |  |  | 4 |  |  |
| Полимераза (TaqF) | Прозрачная бесцветная жидкость | 0,02 |  |  | 4 |  |  |
| KB2 HBV | Прозрачная бесцветная жидкость | 0,1 |  |  | 4 |  |  |
| – K | Прозрачная бесцветная жидкость | 0,2 |  |  | 4 |  |  |
| ОКО | Прозрачная бесцветная жидкость | 1,2 |  |  | 4 |  |  |
| ПКO-1-HBV | Прозрачная бесцветная жидкость | 0,06 |  |  | 4 |  |  |
| ВКО STI-87 | Прозрачная бесцветная жидкость | 0,28 |  |  | 4 |  |  |
СОСТАВ
СОСТАВ
«ПЦР-комплект» вариант FRT – комплект реагентов для
амплификации участка ДНК вируса гепатита B (HBV) с
гибридизационно-флуоресцентной детекцией в режиме
«реального времени» – включает:
Программное обеспечение на электронном носителе или на
сайте Изготовителя (www.amplisens.ru) – AmpliSens® HBV-FL
Soft (1 шт.), руководство оператора (1 шт.).
Эксплуатационная документация на бумажном носителе и на
сайте Изготовителя (www.amplisens.ru) – инструкция по
применению (1 шт.), паспорт качества (1 шт.), вкладыш (2 шт.),
краткое руководство (1 шт.).
VER 16.06.26 / стр. 14 из 37
ПРОВЕДЕНИЕ ПЦР-ИССЛЕДОВАНИЯ
ПРОВЕДЕНИЕ ПЦР-ИССЛЕДОВАНИЯ
ПЦР-исследование состоит из следующих этапов:
 экстракция ДНК из исследуемых образцов,
 амплификация ДНК c гибридизационно-флуоресцентной
детекцией продуктов амплификации в режиме «реального
времени»,
 анализ и интерпретация результатов.
ЭКСТРАКЦИЯ ДНК ИЗ ИССЛЕДУЕМЫХ ОБРАЗЦОВ
ВНИМАНИЕ! При работе с ДНК необходимо использовать
только одноразовые стерильные пластиковые расходные
материалы, имеющие специальную маркировку RNase-free,
DNase-free.
Для экстракции ДНК используются комплекты реагентов:
 «РИБО-сорб» в соответствии с Приложением А;
 «РИБО-преп» в соответствии с инструкцией к комплекту
реагентов для экстракции;
 «МАГНО-сорб» вариант 100-200 или вариант 100-1000 в
соответствии с Приложением Б.
ВНИМАНИЕ! Протоколы экстракции ДНК комплектами
реагентов «РИБО-сорб» и «МАГНО-сорб» вариант 100-200 /
вариант 100-1000 для набора реагентов «АмплиСенс® HBV-FL»
отличаются от протоколов экстракции ДНК, используемых
совместно с другими наборами реагентов производства ФБУН
ЦНИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора.
Объемы реагентов и образцов при экстракции с помощью
комплекта реагентов «РИБО-преп»:
Экстракция ДНК из каждого исследуемого образца и
контролей проводится в присутствии внутреннего контрольного
образца – ВКО STI-87.
Объем ВКО STI-87 – 10 мкл в каждую пробирку.
Объем исследуемого образца – 100 мкл.
В пробирку отрицательного контроля экстракции (ОК) внести
100 мкл ОКО.
В пробирку положительного контроля экстракции (ПК) внести
90 мкл ОКО и 10 мкл ПКО-1-HBV.
Объем элюции – 50 мкл.
ДНК-пробы могут храниться в течение 1 недели при
температуре от 2 до 8 °С. Для длительного хранения препарата
VER 16.06.26 / стр. 15 из 37
ПРОВЕДЕНИЕ ПЦР-ИССЛЕДОВАНИЯ
необходимо, не захватывая сорбент, перенести надосадочную
жидкость в стерильную пробирку и хранить при от минус 24 до
минус 16 °С в течение года.
АМПЛИФИКАЦИЯ С ДЕТЕКЦИЕЙ В РЕЖИМЕ «РЕАЛЬНОГО
ВРЕМЕНИ»
ВНИМАНИЕ! При работе с ДНК необходимо использовать
только одноразовые стерильные пластиковые расходные
материалы, имеющие специальную маркировку RNase-free,
DNase-free.
Выбор пробирок для амплификации зависит от
используемого амплификатора с системой детекции в
режиме реального времени.
Для внесения в пробирки реагентов, проб ДНК и
контрольных образцов используются одноразовые
наконечники с фильтрами.
А. Подготовка проб для амплификации
Общий объем реакционной смеси – 25 мкл, включая объем
пробы ДНК – 10 мкл.
1. Рассчитать количество каждого реагента, требующееся для
приготовления реакционной смеси. На одну реакцию
требуется 10 мкл ПЦР-смеси-1-FL HBV, 5 мкл ПЦР-
буфера-В и 0,5 мкл Полимеразы (TaqF). Смесь готовить на
общее число исследуемых и контрольных образцов
(количество контрольных образцов см. в п.7) плюс запас на
одну реакцию.
ВНИМАНИЕ! Компоненты реакционной смеси следует
смешивать непосредственно перед проведением ПЦР.
2. Разморозить все реагенты ПЦР-комплекта, тщательно
перемешать на вортексе и осадить капли кратковременным
центрифугированием.
3. В отдельной пробирке подготовить реакционную смесь.
Смешать необходимое количество ПЦР-смеси-1-FL HBV,
ПЦР-буфера-В и Полимеразы (TaqF). Тщательно
перемешать смесь на вортексе и осадить капли с крышки
пробирки кратковременным центрифугированием.
Приготовленная смесь не хранится.
4. Отобрать необходимое количество пробирок для
амплификации с учетом количества исследуемых и
VER 16.06.26 / стр. 16 из 37
ПРОВЕДЕНИЕ ПЦР-ИССЛЕДОВАНИЯ
контрольных образцов (см. табл. 7).
5. Внести в каждую пробирку по 15 мкл приготовленной
реакционной смеси. Неиспользованные остатки
реакционной смеси выбросить.
6. Используя наконечник с фильтром, в подготовленные
пробирки внести по 10 мкл проб ДНК, полученных в
результате экстракции из исследуемых и контрольных
образцов.
ВНИМАНИЕ! Содержимое пробирок необходимо тщательно
перемешать пипетированием, не допуская появления
пузырьков воздуха.
ВНИМАНИЕ! При добавлении проб ДНК, экстрагированных с
помощью комплектов реагентов для проведения экстракции
методом сорбции на силикагеле или магнитной сепарации,
необходимо избегать попадания сорбента в реакционную
смесь.
7. Поставить контрольные реакции:
а) положительный контроль экстракции (ПК) – в
пробирку с реакционной смесью внести 10 мкл пробы
ДНК, экстрагированной из ПКО-1-HBV.
б) отрицательный контроль экстракции (ОК) – в пробирку
с реакционной смесью внести 10 мкл пробы ДНК,
экстрагированной из ОКО.
в) положительный контроль ПЦР (К+) – в пробирку с
реакционной смесью внести 10 мкл KB2 HBV.
ВНИМАНИЕ! При подозрении на возможную контаминацию
также необходима постановка отрицательного контроля ПЦР
(К–). Для этого в пробирку с реакционной смесью внести
10 мкл К–.
VER 16.06.26 / стр. 17 из 37
ПРОВЕДЕНИЕ ПЦР-ИССЛЕДОВАНИЯ
Таблица 7
Схема приготовления реакционных смесей
Объем реагентов на указанное количество
реакций
Объем реагента на одну
10,00 5,00 0,50
реакцию, мкл
Количество
Количество ПЦР-смесь-1-FL Полимераза
исследуемых ПЦР-буфер-В
реакций6 HBV (TaqF)
образцов
4 8 80 40 4,0
6 10 100 50 5,0
8 12 120 60 6,0
107 14 140 70 7,0
12 16 160 80 8,0
14 18 180 90 9,0
16 20 200 100 10,0
18 22 220 110 11,0
20 24 240 120 12,0
228 26 260 130 13,0
34 38 380 190 19,0
46 50 500 250 25,0
Б. Проведение амплификации с детекцией в режиме
«реального времени»
1. Установить пробирки в ячейки реакционного модуля
прибора. Рекомендуется:
а) перед постановкой в амплификатор планшетного типа
осадить капли со стенок пробирок на вортексе;
б) в случае неполной загрузки приборов планшетного типа
дополнительно установить пустые пробирки по краям
реакционного модуля амплификатора
2. Запустить программу амплификации:
а) либо с использованием ПО ARTS совместно с ПО
AmpliSens® HBV-FL Soft, согласно руководству оператора.
Примечание ― Детектирующий амплификатор должен быть
совместим с ПО ARTS.
б) либо в ручном режиме, запрограммировав
детектирующий амплификатор для выполнения
программы, указанной в табл. 8, согласно инструкции по
его применению.
6 Число исследуемых образцов + 2 контроля этапа экстракции ДНК + 1 контроль ПЦР + запас
на один образец (N+2+1+1, N- количество исследуемых образцов).
7 Панель из 12 проб на экстракцию.
8 Панель из 24 проб на экстракцию
VER 16.06.26 / стр. 18 из 37
| Цикл |  | 9 Приборы роторного типа |  |  |  |  |  |  |  | 10 Приборы планшетного типа |  |  |  |  |  |
|  | Темпе- ратура, °С |  | Время |  | Детекция |  | Кол-во циклов |  | Темпе- ратура, °С |  | Время | Детекция флуоресцентного сигнала по канатам для флуорофоров |  | Кол-во циклов |  |
|  |  |  |  |  | флуоресцентного |  |  |  |  |  |  |  |  |  |  |
|  |  |  |  |  | сигнала по канатам |  |  |  |  |  |  |  |  |  |  |
|  |  |  |  |  | для флуорофоров |  |  |  |  |  |  |  |  |  |  |
| 1 | 50 |  | 15 мин | – |  |  | 1 |  | 50 |  | 15 мин | – |  | 1 |  |
| 2 | 95 |  | 15 мин | – |  |  | 1 |  | 95 |  | 15 мин | – |  | 1 |  |
| 2 | 95 |  | 5 с | – |  |  | 5 |  | 95 |  | 5 с | – |  | 5 |  |
|  | 60 |  | 20 с | – |  |  |  |  | 60 |  | 20 с | – |  |  |  |
|  | 72 |  | 15 с | – |  |  |  |  | 72 |  | 15 с | – |  |  |  |
| 3 | 95 |  | 5 с | – |  |  | 40 |  | 95 |  | 5 с | – |  | 40 |  |
|  | 60 |  | 20 с | FAM, JOE |  |  |  |  | 60 |  | 30 с | FAM, JOE |  |  |  |
|  | 72 |  | 15 с | – |  |  |  |  | 72 |  | 15 с | – |  |  |  |
ПРОВЕДЕНИЕ ПЦР-ИССЛЕДОВАНИЯ
Таблица 8
Программа амплификации и детекции
флуоресцентного сигнала «АмплиСенс-2»
ВНИМАНИЕ! С использованием этой программы можно
одновременно проводить в одном приборе любое сочетание
тестов по единой программе (например, совместно с тестами
для HDV, генотипирования HCV и др.). В случае если в одном
приборе одновременно проводятся только тесты для
выявления ДНК HBV, можно удалить из данной программы
первый шаг (50 °С – 15 минут) для экономии времени.
В. Анализ и интерпретация результатов
ВНИМАНИЕ! Установление диагноза и назначение лечения
должны производиться врачом соответствующей
специализации.
Анализ и интерпретацию полученных результатов проводят
вручную с помощью ПО прибора, используемого для
проведения ПЦР c детекцией в режиме «реального времени»,
или в автоматическом режиме с помощью ПО ARTS совместно
с ПО AmpliSens® HBV-FL Soft. Порядок работы с ПО AmpliSens®
HBV-FL Soft описан в руководстве оператора.
Анализируют кривые накопления флуоресцентного сигнала,
свидетельствующего о накоплении продукта амплификации, по
двум каналам:
9 Например, Rotor-Gene 3000/6000 (Corbett Research, Австралия), Rotor-Gene Q (QIAGEN
GmbH, Германия).
10 Например, ДТ-96 / «ДТпрайм» (ООО «НПО ДНК-Технология», Россия), CFX96 (Bio-Rad
Laboratories, Inc., США).
VER 16.06.26 / стр. 19 из 37
|  | Значение порогового цикла по каналу для флуорофора (Сt) |  |  |  | Результат |
|  | FAM |  |  | JOE |  |
| определено меньше граничного |  |  | отсутствует или больше граничного |  | ДНК HBV НЕ обнаружена |
| определено или отсутствует |  |  | определено меньше граничного |  | ДНК HBV обнаружена |
| отсутствует или больше граничного |  |  | отсутствует или больше граничного |  | Невалидный* |
ПРОВЕДЕНИЕ ПЦР-ИССЛЕДОВАНИЯ
Таблица 9
Канал для флуорофора FAM JOE
Продукт амплификации ДНК ВКО ДНК HBV
Результаты интерпретируют на основании наличия (или
отсутствия) пересечения кривой флуоресценции S-образной
(сигмообразной) формы с установленной на соответствующем
уровне пороговой линией, что определяет наличие (или
отсутствие) для данной пробы ДНК значения порогового цикла
(Ct). При использовании ПО ARTS совместно с ПО AmpliSens®
HBV-FL Soft значения Ct определяются автоматически.
Результат для контролей этапов экстракции и ПЦР
должны соответствовать критериям, указанным в
таблице 10 и во вкладыше с настройками, прилагаемом к
набору реагентов.
Таблица 10
Результаты для контролей различных этапов
ПЦР-исследования
Контролируемый Значение порогового цикла по каналу для
Контроль этап ПЦР- флуорофора (Сt)
исследования FAM JOE
определено
ОК Экстракция ДНК отсутствует
меньше граничного
определено определено
ПК Экстракция ДНК
меньше граничного меньше граничного
определено определено
К+ ПЦР
меньше граничного меньше граничного
К– ПЦР отсутствует отсутствует
Принцип интерпретации результатов указан в таблице 11:
Таблица 11
Интерпретация результатов анализа исследуемых образцов
* В случае получения невалидного результата необходимо
провести повторное ПЦР-исследование соответствующего
исследуемого образца, начиная с этапа экстракции ДНК.
VER 16.06.26 / стр. 20 из 37
ПРОВЕДЕНИЕ ПЦР-ИССЛЕДОВАНИЯ
ВНИМАНИЕ! Граничные значения Ct указаны во вкладыше с
настройками, прилагаемом к набору реагентов.
При наличии отклонений результатов для контролей от
указанных выше, интерпретация ряда исследуемых образцов
невозможна (см. «Возможные ошибки»).
Возможные ошибки:
1. Для положительного контроля экстракции (ПК):
а) по каналу для флуорофора JOE значение порогового
цикла (Сt) отсутствует или превышает граничное
значение. Невозможна интерпретация результатов для
исследуемых образцов, в которых не обнаружена ДНК
HBV. Необходимо повторить ПЦР-исследование для
таких образцов, начиная с этапа экстракции ДНК.
б) по каналу для флуорофора FAM значение порогового
цикла (Сt) отсутствует или превышает граничное
значение. Невозможна интерпретация результатов для
исследуемых образцов. Необходимо повторить ПЦР-
исследование для всех образцов, начиная с этапа
экстракции ДНК.
2. Для положительного контроля ПЦР (К+):
а) по каналу для флуорофора JOE значение порогового
цикла (Сt) отсутствует или превышает граничное
значение. Невозможна интерпретация результатов для
исследуемых образцов, в которых не обнаружена ДНК
HBV. Необходимо повторить амплификацию для таких
образцов.
б) по каналу для флуорофора FAM значение порогового
цикла (Сt) отсутствует или превышает граничное
значение. Необходимо повторить ПЦР-исследование для
всех образцов, начиная с этапа экстракции ДНК.
3. Для отрицательного контроля экстракции (ОК):
а) по каналу для флуорофора JOE определено значение
порогового цикла (Ct). Вероятна контаминация
лаборатории продуктами амплификации или
контаминация реагентов / исследуемых образцов на
каком-либо этапе ПЦР-исследования. Невозможна
интерпретация результатов для образцов, в которых
обнаружена ДНК HBV. Необходимо предпринять меры по
выявлению и ликвидации источника контаминации и
VER 16.06.26 / стр. 21 из 37
ПРОВЕДЕНИЕ ПЦР-ИССЛЕДОВАНИЯ
повторить ПЦР-исследование для таких образцов,
начиная с этапа экстракции ДНК.
б) по каналу для флуорофора FAM значение порогового
цикла (Ct) отсутствует или превышает граничное
значение. Невозможна интерпретация результатов для
исследуемых образцов. Необходимо повторить ПЦР-
исследование для всех образцов, начиная с этапа
экстракции ДНК.
4. Для отрицательного контроля ПЦР (К–):
а) по каналу для флуорофора JOE определено значение
порогового цикла (Сt). Вероятна контаминация
лаборатории продуктами амплификации или кросс-
контаминация от пробы к пробе исследуемых образцов /
реагентов на каком-либо этапе ПЦР-исследования.
Невозможна интерпретация результатов для образцов, в
которых обнаружена ДНК HBV. Необходимо предпринять
меры по выявлению и ликвидации источника
контаминации и повторить амплификацию для таких
образцов.
б) по каналу для флуорофора FAM определено значение
порогового цикла (Сt). Вероятна контаминация
лаборатории продуктами амплификации или кросс-
контаминация исследуемых образцов / реагентов на
каком-либо этапе ПЦР-исследования. Необходимо
предпринять меры по выявлению и ликвидации
источника контаминации. Интерпретацию результатов
для исследуемых образцов проводить согласно
таблице 11.
VER 16.06.26 / стр. 22 из 37
СРОК ГОДНОСТИ. УСЛОВИЯ ТРАНСПОРТИРОВАНИЯ И
ХРАНЕНИЯ
Срок годности. 12 мес. Набор реагентов с истекшим сроком
годности применению не подлежит. Срок годности вскрытых
реагентов соответствует сроку годности, указанному на
этикетках для невскрытых реагентов.
Транспортирование.
Транспортирование проводить всеми видами крытых
транспортных средств в термоконтейнерах, содержащих
хладоэлементы, или авторефрижераторах.
Набор реагентов транспортировать при температуре от 2 до
8 °С не более 5 сут.
Хранение.
Реагенты после вскрытия хранить при той же температуре,
что до вскрытия.
Форма 4. «ПЦР-комплект» вариант FRT хранить в морозильной
камере при температуре от минус 24 до минус 16 °С. Не
допускается замораживание/оттаивание KB2 HBV, ПКО-1-HBV и
ВКО STI-87 более двух раз. После размораживания ПКО-1-HBV,
KB2 HBV и ВКО STI-87 хранить при температуре от 2 до 8 °С не
более 6 мес. ПЦР-смесь-1-FL HBV хранить в защищенном от
света месте.
Холодильные и морозильные камеры должны обеспечивать
регламентированный температурный режим.
VER 16.06.26 / стр. 23 из 37
ГАРАНТИЙНЫЕ ОБЯЗАТЕЛЬСТВА ИЗГОТОВИТЕЛЯ
Изготовитель гарантирует соответствие основных
параметров и характеристик набора реагентов, требованиям,
указанным в технической и эксплуатационной документации, в
течение указанного срока годности при соблюдении всех
условий транспортирования, хранения и применения.
Медицинское изделие техническому обслуживанию и
ремонту не подлежит.
Рекламации на качество набора реагентов направлять по
адресу 111123, г. Москва, ул. Новогиреевская, дом 3А,
e-mail: obtk@pcr.ru. Отзывы и предложения о продукции
АмплиСенс® вы можете оставить, заполнив анкету потребителя
на сайте: www.amplisens.ru.
При выявлении побочных действий, не указанных в
инструкции по применению набора реагентов, нежелательных
реакций при его использовании, фактов и обстоятельств,
создающих угрозу жизни и здоровью граждан и медицинских
работников при применении набора реагентов, рекомендуется
направить сообщение по адресу, указанному выше, и в
уполномоченную государственную регулирующую организацию
(в РФ – Федеральная служба по надзору в сфере
здравоохранения) в соответствии с действующим
законодательством.
VER 16.06.26 / стр. 24 из 37
СИМВОЛЫ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ В ПЕЧАТНОЙ ПРОДУКЦИИ
Номер по каталогу Осторожно
Содержимого достаточно для
Код партии
проведения <n> тестов
Медицинское изделие для
Использовать до
диагностики in vitro
Обратитесь к инструкции по
применению или к инструкции
Дата изменения
по применению в электронном
виде
Не допускать воздействия
Температурный диапазон
солнечного света
Верхняя граница
Дата изготовления
температурного диапазона
Изготовитель
VER 16.06.26 / стр. 25 из 37
ПРИЛОЖЕНИЕ А. «РИБО-сорб»
ПРИЛОЖЕНИЕ А
Экстракция ДНК из исследуемых образцов с
использованием комплекта реагентов «РИБО-сорб»
Порядок работы
1. Прогреть Лизирующий раствор и раствор для отмывки 1
(если они хранились при температуре от 2 до 8 °С) при
температуре 60 °С до полного растворения кристаллов.
2. Подготовить необходимое количество одноразовых
пробирок объемом 1,5 мл (включая контроли экстракции).
Промаркировать пробирки.
3. На дно каждой пробирки внести по 10 мкл ВКО STI-87.
4. В пробирки с ВКО внести по 450 мкл лизирующего
раствора.
При большом количестве образцов для облегчения
процедуры экстракции допускается смешивание в
отдельном одноразовом флаконе лизирующего раствора
и ВКО STI-87 (из расчета на один образец 450 мкл
лизирующего раствора и 10 мкл ВКО) с последующим
внесением по 450 мкл смеси в заранее подготовленные
пробирки объемом 1,5 мл.
5. В пробирки внести по 100 мкл исследуемых образцов,
используя для каждого образца отдельный наконечник с
фильтром.
6. В пробирку положительного контроля экстракции (ПК) с
лизирующим раствором и ВКО внести 90 мкл ОКО и
10 мкл ПКО-1-HBV.
7. В пробирку отрицательного контроля экстракции (ОК) с
лизирующим раствором и ВКО внести 100 мкл ОКО.
8. Закрыть крышки и перемешать на вортексе. Осадить капли
жидкости с крышек пробирок кратким центрифугированием.
9. Поместить пробирки с образцами и контролями в термостат
с температурой 60 °С на 10 мин. Осадить капли конденсата
с крышки кратким центрифугированием.
10. Тщательно ресуспендировать сорбент на вортексе. В
каждую пробирку отдельным наконечником добавить по
25 мкл ресуспендированного сорбента. Перемешать на
вортексе, оставить на 10 мин при комнатной температуре,
тщательно перемешивая каждые 2 мин.
11. Центрифугировать пробирки для осаждения сорбента на
VER 16.06.26 / стр. 26 из 37
ПРИЛОЖЕНИЕ А. «РИБО-сорб»
центрифуге при 7 тыс. g (например, 10 тыс. об/мин для
центрифуги MiniSpin, Eppendorf Manufacturing Corporation,
Германия)) в течение 1 мин.
12. Не захватывая осадок, удалить надосадочную жидкость,
используя вакуумный отсасыватель и отдельный наконечник
для каждой пробы.
13. Добавить в пробирки по 400 мкл раствора для отмывки 1.
Плотно закрыть крышки, перемешать на вортексе до
полного ресуспендирования сорбента. Центрифугировать
пробирки на центрифуге при 7 тыс. g в течение 1 мин.
14. Не захватывая осадок, удалить надосадочную жидкость,
используя вакуумный отсасыватель и отдельный наконечник
для каждой пробы.
15. Добавить в пробирки по 500 мкл раствора для отмывки 3.
Плотно закрыть крышки, перемешать на вортексе до
полного ресуспендирования сорбента. Центрифугировать
пробирки на центрифуге при 7 тыс. g в течение 1 мин.
16. Не захватывая осадок, удалить надосадочную жидкость,
используя вакуумный отсасыватель и отдельный наконечник
для каждой пробы.
17. Повторить отмывку раствором для отмывки 3, следуя
п. 15-16.
18. Добавить в пробирки по 400 мкл раствора для отмывки 4.
Плотно закрыть крышки, перемешать на вортексе до
полного ресуспендирования сорбента. Центрифугировать
пробирки на центрифуге при 7 тыс. g в течение 1 мин.
19. Не захватывая осадок, удалить надосадочную жидкость,
используя вакуумный отсасыватель и отдельный наконечник
для каждой пробы.
20. Поместить пробирки с открытыми крышками в термостат при
температуре 60 °С на 12-15 мин для подсушивания
сорбента.
21. Добавить в пробирки по 50 мкл РНК-буфера. Закрыть
пробирки и перемешать на вортексе. Поместить в термостат
при температуре 60 °С на 2-3 мин.
22. Перемешать на вортексе и осадить сорбент на центрифуге
при 12-13 тыс. g (например, 13,4 тыс. об/мин для
центрифуги MiniSpin, Eppendorf Manufacturing Corporation,
Германия)) в течение 1 мин. Надосадочная жидкость
VER 16.06.26 / стр. 27 из 37
ПРИЛОЖЕНИЕ А. «РИБО-сорб»
содержит очищенную ДНК.
Отбор очищенной ДНК для проведения ПЦР проводить
осторожно, не захватывая сорбент. Если сорбент взмутился,
необходимо осадить его на центрифуге при 12-13 тыс. g в
течение 1 мин.
ДНК-пробы могут храниться в течение 1 нед при температуре
от 2 до 8 °С. Для длительного хранения необходимо, не
захватывая сорбент, перенести надосадочную жидкость в
стерильную пробирку. Допускается хранение при температуре
от минус 24 до минус 16 °С в течение года.
VER 16.06.26 / стр. 28 из 37
ПРИЛОЖЕНИЕ Б. «МАГНО-сорб»
ПРИЛОЖЕНИЕ Б
Экстракция ДНК из исследуемых образцов с
использованием комплекта реагентов «МАГНО-сорб»
вариант 100-1000
ВНИМАНИЕ! Лизирующий раствор МАГНО-сорб имеет резкий
запах. Работу проводить в ламинарном боксе.
A. Порядок работы при использовании магнитных
штативов вручную
А1. Экстракция из 1000 мкл образца плазмы венозной крови
1. Лизирующий раствор МАГНО-сорб и раствор для отмывки 5
прогреть при температуре 60 °С до полного растворения
кристаллов.
2. Подготовить необходимое количество одноразовых
пробирок объемом 5 мл и одноразовых крышек (включая
контроли экстракции), промаркировать их.
3. В отдельной пробирке смешать из расчета на один образец:
10 мкл ВКО STI-87, 20 мкл компонента А и 30 мкл
магнетизированной силики. Смесь готовить на общее
число исследуемых и контрольных образцов, учитывая
запас, например:
Количество образцов ВКО STI-87, Компонент А, Магнетизированная
для экстракции ДНК мкл мкл силика, мкл
6 70 140 210
12 130 260 390
18 190 380 570
24 250 500 750
4. Внести в пробирки объемом 5 мл по 60 мкл тщательно
ресуспендированной смеси ВКО STI-87, компонента А и
магнетизированной силики.
5. Внести в пробирки по 2,6 мл лизирующего раствора
МАГНО-сорб.
6. Добавить в пробирки по 1000 мкл исследуемых образцов,
используя для каждого образца отдельный наконечник с
фильтром, перемешать пипетированием.
7. В пробирку положительного контроля экстракции (ПК-1)
внести 90 мкл ОКО и 10 мкл ПКО-1-HBV. Перемешать
пипетированием.
8. В пробирку отрицательного контроля экстракции (ОК)
добавить 100 мкл ОКО, перемешать пипетированием.
9. Поместить пробирки в термостат с температурой 85 °С на
10 мин.
VER 16.06.26 / стр. 29 из 37
ПРИЛОЖЕНИЕ Б. «МАГНО-сорб»
ВНИМАНИЕ! Пробирки не закрывать крышками во избежание
их самопроизвольного открытия в процессе нагревания
содержимого пробирок.
10. Осторожно перенести пробирки в магнитный штатив на
6 мин.
ВНИМАНИЕ! Поверхность пробирок может быть горячей из-за
нагревания содержимого пробирок.
11. Не извлекая пробирки из магнитного штатива, осторожно
удалить надосадочную жидкость по внутренней стенке
пробирки, используя вакуумный отсасыватель и отдельный
наконечник без фильтра на 1000 мкл для каждой пробы.
Перенести пробирки в обычный штатив.
12. Добавить в пробирки по 700 мкл раствора для отмывки 5,
пробирки закрыть крышкой.
13. Отобрать необходимое количество одноразовых пробирок
объемом 1,5 мл (включая контроль экстракции) и
промаркировать их.
14. Смыть магнетизированную силику со стенок осторожным
перемешиванием на вортексе, а затем пипетированием
перенести всю жидкость в приготовленные пробирки
объемом 1,5 мл.
15. Поместить пробирки объемом 1,5 мл в магнитный штатив на
2 мин.
Примечание – Необходимо открыть крышки до постановки в
магнитный штатив, если в магнитном штативе их
неудобно/невозможно открыть без взмучивания сорбента.
16. Осторожно удалить надосадочную жидкость как описано
выше (п. 11).
17. Добавить в пробирки по 700 мкл раствора для отмывки 5,
закрыть крышки.
Примечание – Необходимо поставить пробирки в обычный
штатив, если в магнитном штативе неудобно/невозможно
плотно закрыть крышки.
18. Ресуспендировать магнетизированную силику
перемешиванием на вортексе, затем осадить капли кратким
центрифугированием, повторить пп. 15-16.
19. Аналогично провести одну отмывку, используя 700 мкл
раствора для отмывки 6.
20. Добавить в пробирки по 200 мкл раствора для отмывки 7,
VER 16.06.26 / стр. 30 из 37
ПРИЛОЖЕНИЕ Б. «МАГНО-сорб»
плотно закрыть крышки, ресуспендировать
магнетизированную силику перемешиванием на вортексе, а
затем осадить капли кратким центрифугированием.
21. Поместить пробирки в магнитный штатив на 1 мин, затем
осторожно удалить надосадочную жидкость.
Примечание – Необходимо открыть крышки до постановки в
магнитный штатив, если в магнитном штативе их
неудобно/невозможно открыть без взмучивания сорбента.
22. Высушить магнетизированную силику, оставив пробирки с
открытыми крышками на магнитном штативе в течение 10-
20 мин.
23. Добавить в пробирки по 70 мкл буфера для элюции А,
закрыть крышки, перемешать на вортексе.
24. Поместить пробирки в термостат с температурой 60 °С на
5 мин, через 2 мин перемешать на вортексе.
25. Осадить капли кратким центрифугированием и переставить
пробирки в магнитный штатив на 2 мин. Надосадочная
жидкость содержит очищенные ДНК.
ВНИМАНИЕ! Отбор очищенных ДНК для проведения ПЦР
осуществляется без снятия пробирок с магнитного
штатива.
ДНК-пробы могут храниться в течение 1 нед при температуре
от 2 до 8 °С. Для длительного хранения необходимо, не
захватывая сорбент, перенести надосадочную жидкость в
стерильную пробирку. Допускается хранение при температуре
от минус 24 до минус 16 °С в течение 1 мес, при температуре
не выше минус 68 °С – в течение года.
А2. Экстракция из 200 мкл образца плазмы венозной крови
1. Лизирующий раствор МАГНО-сорб и раствор для
отмывки 5 прогреть при температуре 60 °С до полного
растворения кристаллов.
2. Подготовить необходимое количество одноразовых
пробирок объемом 1,5 мл (включая контроли экстракции),
промаркировать их.
3. В отдельной пробирке смешать из расчета на один образец:
10 мкл ВКО STI-87, 10 мкл компонента А и 20 мкл
магнетизированной силики. Смесь готовить на общее
число исследуемых и контрольных образцов, учитывая
запас, например:
VER 16.06.26 / стр. 31 из 37
ПРИЛОЖЕНИЕ Б. «МАГНО-сорб»
Количество образцов ВКО STI-87, Компонент А, Магнетизированная
для экстракции ДНК мкл мкл силика, мкл
6 70 70 140
12 130 130 260
18 190 190 380
24 250 250 500
4. Внести в пробирки по 40 мкл тщательно
ресуспендированной смеси ВКО STI-87, компонента А и
магнетизированной силики.
5. Внести в пробирки 900 мкл лизирующего раствора
МАГНО-сорб.
6. Добавить в пробирки по 200 мкл исследуемых образцов,
используя для каждого образца отдельный наконечник с
фильтром, и перемешать на вортексе, осадить капли
жидкости с крышек и стенок пробирок кратким
центрифугированием, открыть крышки.
7. В пробирку положительного контроля экстракции (ПК-1)
внести 90 мкл ОКО и 10 мкл ПКО-1-HBV. Перемешать
пробирки на вортексе, осадить капли жидкости с крышек и
стенок пробирок кратким центрифугированием, открыть
крышки.
8. В пробирку отрицательного контроля экстракции (ОК) внести
100 мкл ОКО. Перемешать на вортексе, осадить капли
жидкости с крышек и стенок пробирок кратким
центрифугированием, открыть крышки.
9. Поместить пробирки в термостат с температурой 85 °С на
10 мин.
ВНИМАНИЕ! Пробирки не закрывать крышками во избежание
их самопроизвольного открытия в процессе нагревания
содержимого пробирок.
10. Осторожно перенести пробирки в обычный штатив
(поверхность пробирок может быть горячей из-за
нагревания содержимого пробирок). Дать остыть в течение
2 мин. Закрыть пробирки крышками. Перемешать, осадить
капли жидкости с крышек и стенок пробирок кратким
центрифугированием. Поместить пробирки в магнитный
штатив на 2 мин.
Примечание – Необходимо открыть крышки до постановки в
магнитный штатив, если в магнитном штативе их
неудобно/невозможно открыть без взмучивания сорбента.
VER 16.06.26 / стр. 32 из 37
ПРИЛОЖЕНИЕ Б. «МАГНО-сорб»
11. Не извлекая пробирки из магнитного штатива, осторожно
удалить надосадочную жидкость по внутренней стенке
пробирки, используя вакуумный отсасыватель и отдельный
наконечник без фильтра для каждой пробы.
12. Добавить в пробирки по 700 мкл раствора для отмывки 5,
закрыть крышки.
Примечание – Необходимо поставить пробирки в обычный
штатив, если в магнитном штативе неудобно/невозможно
плотно закрыть крышки.
13. Ресуспендировать магнетизированную силику
перемешиванием на вортексе, а затем осадить капли
кратким центрифугированием.
14. Поместить пробирки в магнитный штатив на 2 мин.
Примечание – Необходимо открыть крышки до постановки в
магнитный штатив, если в магнитном штативе их
неудобно/невозможно открыть без взмучивания сорбента.
15. Осторожно удалить надосадочную жидкость как описано
выше (п. 11).
16. Повторить отмывку 700 мкл раствора для отмывки 5
(пп. 12-15).
17. Аналогично провести одну отмывку 700 мкл раствора для
отмывки 6.
18. Добавить в пробирки по 200 мкл раствора для отмывки 7,
перемешать на вортексе, а затем осадить капли кратким
центрифугированием.
19. Поместить пробирки в магнитный штатив на 1 мин, затем
открыть крышки, осторожно удалить надосадочную
жидкость.
Примечание – Необходимо открыть крышки до постановки в
магнитный штатив, если в магнитном штативе их
неудобно/невозможно открыть без взмучивания сорбента.
20. Высушить магнетизированную силику, оставив пробирки с
открытыми крышками на магнитном штативе в течение 10-
20 мин.
21. Добавить в пробирки по 70 мкл буфера для элюции,
закрыть крышки, перемешать на вортексе.
22. Поместить пробирки в термостат с температурой 60 °С на
5 мин, через 2 мин перемешать на вортексе.
23. Осадить капли кратким центрифугированием и переставить
VER 16.06.26 / стр. 33 из 37
ПРИЛОЖЕНИЕ Б. «МАГНО-сорб»
пробирки в магнитный штатив на 2 мин. Надосадочная
жидкость содержит очищенные ДНК.
ВНИМАНИЕ! Отбор очищенных ДНК для проведения ПЦР
осуществляется без снятия пробирок с магнитного
штатива.
ДНК-пробы могут храниться в течение 1 нед при температуре
от 2 до 8 °С. Для длительного хранения необходимо, не
захватывая сорбент, перенести надосадочную жидкость в
стерильную пробирку и хранить при от минус 24 до минус 16 °С
в течение года.
Б. Экстракция нуклеиновых кислот с помощью
автоматических станций
Экстракция нуклеиновых кислот проводится в соответствии с
инструкцией по эксплуатации автоматических станций и с
использованием соответствующего протокола экстракции.
ВНИМАНИЕ! Протокол экстракции для автоматической станции
содержит специфические параметры, недоступные при
экстракции вручную.
Б1. Экстракция из 200 или 1000 мкл образца плазмы
венозной крови при использовании пипетирующих
станций
ВНИМАНИЕ! Лизирующий раствор МАГНО-сорб имеет резкий
запах. Работу проводить в ламинарном боксе.
Объем образцов, загружаемых на борт пипетирующей
автоматической станции, должен быть увеличен (с учетом
запаса):
– исследуемые образцы – до 1200 мкл (при экстракции из
1000 мкл) и до 300 мкл (при экстракции из 200 мкл);
– положительные контроли экстракции – до 150 мкл (135 мкл
ОКО и 15 мкл ПКО-1-HBV);
– отрицательный контроль экстракции – до 150 мкл ОКО.
Объем ВКО STI-87 на каждый образец – 10 мкл.
Рекомендуемый объем элюции – 100 мкл.
Б2. Экстракция из 1000 мкл образца плазмы венозной
крови при использовании магнитоперемешивающих
станций
Для экстракции следует использовать только протокол,
расположенный на сайте amplisens.ru.
VER 16.06.26 / стр. 34 из 37
ПРИЛОЖЕНИЕ Б. «МАГНО-сорб»
ВНИМАНИЕ! Лизирующий раствор МАГНО-сорб имеет резкий
запах. Работу проводить в ламинарном боксе.
1. Лизирующий раствор МАГНО-сорб и раствор для отмывки 5
при наличии осадка прогреть при температуре 60 °С до
полного растворения кристаллов, магнетизированную
силику ресуспендировать на вортексе.
2. Отобрать необходимое количество 24-луночных планшетов
(см. п. 3), совместимых с прибором, промаркировать в
соответствии с протоколом.
3. Внести в планшеты согласно маркировке и числу
экстрагируемых проб:
– по 2,6 мл лизирующего раствора МАГНО-сорб в планшет
с глубокими лунками,
– по 700 мкл раствора для отмывки 5 в два планшета с
глубокими лунками,
– по 700 мкл раствора для отмывки 6 в планшет с
глубокими лунками,
– по 200 мкл раствора для отмывки 7 в планшет с
глубокими лунками,
– по 100 мкл буфера для элюции А в планшет для элюции.
4. В отдельной пробирке смешать из расчета на один образец:
– 10 мкл ВКО STI-87,
– 20 мкл компонента А,
– 30 мкл магнетизированной силики.
Смесь готовить на общее число исследуемых и контрольных
образцов плюс запас (например, при экстракции из 24
образцов рекомендуется готовить смесь на 26 экстракций,
т.е. с запасом на 2 образца).
5. Внести в лунки с лизирующим раствором МАГНО-сорб по
60 мкл тщательно ресуспендированной смеси.
6. Внести в лунки с лизирующим раствором МАГНО-сорб и
смесью по 1 мл исследуемых образцов, используя для
каждого образца отдельный наконечник с фильтром.
7. В лунки для положительного контроля экстракции (ПК-1)
внести по 90 мкл ОКО и 10 мкл ПКО-1-HBV.
8. В лунку отрицательного контроля экстракции (ОК) внести
100 мкл ОКО.
9. Выбрать протокол экстракции, установить в прибор
подготовленные планшеты и планшет с гребенкой согласно
VER 16.06.26 / стр. 35 из 37
ПРИЛОЖЕНИЕ Б. «МАГНО-сорб»
подсказкам/указателям расстановки.
ВНИМАНИЕ! Объем элюции – 100 мкл.
10. Запустить протокол экстракции НК.
При необходимости по окончании экстракции планшет для
элюции, содержащий очищенные НК, заклеить самоклеящейся
пленкой.
Б3. Экстракция из 200 мкл образца плазмы венозной крови
при использовании магнитоперемешивающих станций
Для экстракции следует использовать только протокол,
расположенный на сайте amplisens.ru.
ВНИМАНИЕ! Лизирующий раствор МАГНО-сорб имеет резкий
запах. Работу проводить в ламинарном боксе.
1. Лизирующий раствор МАГНО-сорб и раствор для отмывки 5
при наличии осадка прогреть при температуре 60 °С до
полного растворения кристаллов, магнетизированную
силику ресуспендировать на вортексе.
2. Отобрать необходимое количество 96-луночных планшетов
(см. п. 3), совместимых с прибором, промаркировать в
соответствии с протоколом.
3. Внести в планшеты согласно маркировке и числу
экстрагируемых проб:
– по 760 мкл лизирующего раствора МАГНО-сорб в
планшет с глубокими лунками,
– по 700 мкл раствора для отмывки 5 в два планшета с
глубокими лунками,
– по 700 мкл раствора для отмывки 6 в планшет с
глубокими лунками,
– по 200 мкл раствора для отмывки 7 в планшет с
глубокими лунками,
– по 100 мкл буфера для элюции А в планшет для элюции.
4. В отдельной пробирке смешать из расчета на один образец:
– 10 мкл ВКО STI-87,
– 10 мкл компонента А,
– 20 мкл магнетизированной силики.
Смесь готовить на общее число исследуемых и контрольных
образцов плюс запас (например, при экстракции из 96 образцов
рекомендуется готовить смесь на 100 экстракций, т.е. с
запасом на 4 образца).
5. Внести в лунки с лизирующим раствором МАГНО-сорб
VER 16.06.26 / стр. 36 из 37
ПРИЛОЖЕНИЕ Б. «МАГНО-сорб»
по 40 мкл тщательно ресуспендированной смеси.
6. Внести в лунки с лизирующим раствором МАГНО-сорб и
смесью по 200 мкл исследуемых образцов, используя для
каждого образца отдельный наконечник с фильтром.
7. В лунки для положительных контролей экстракции (ПК-1)
внести по 90 мкл ОКО и 10 мкл ПКО-1-HBV.
8. В лунку отрицательного контроля экстракции (ОК) внести
100 мкл ОКО.
9. Выбрать протокол экстракции, установить в прибор
подготовленные планшеты и планшет с гребенкой согласно
подсказкам/указателям расстановки.
ВНИМАНИЕ! Объем элюции – 100 мкл.
10. Запустить протокол экстракции НК.
При необходимости по окончании экстракции планшет для
элюции, содержащий очищенные НК, заклеить самоклеящейся
пленкой.
VER 16.06.26 / стр. 37 из 37
Инструкция по применению набора
реагентов расположена на сайте
www.amplisens.ru
Краткое руководство
набор реагентов
«АмплиСенс HBV-FL»
REF R-V5-Mod(RG,iQ,Mx,Dt)
Форма 4
REF H-0304-1
ФБУН ЦНИИ Эпидемиологии
Роспотребнадзора,
Российская Федерация, 111123,
г. Москва, ул. Новогиреевская, д. 3А
г. Москва, ул. Новогиреевская, д. 3А, стр. 6
тел. (495) 974 9642,
е-mail: amplisens@pcr.ru
VER 04.12.25
ВНИМАНИЕ! Краткое руководство предназначено для удобства работы с набором реагентов в
лаборатории и может быть использовано только после детального ознакомления с инструкцией по
применению данного набора реагентов. Анализ и интерпретацию результатов необходимо проводить в
соответствии с инструкцией к набору реагентов.
ЭКСТРАКЦИЯ ДНК ИЗ ИССЛЕДУЕМЫХ ОБРАЗЦОВ
Комплекты для экстракции:
– «РИБО-преп»;
– «МАГНО-сорб»;
– «РИБО-сорб».
Контроли: внутренний контрольный образец (ВКО) – в каждом образце.
Для каждой группы экстрагируемых образцов: 1 положительный (ПК) и 1 отрицательный (ОК) контроли
экстракции.
ЭКСТРАКЦИЯ ДНК С ПОМОЩЬЮ «РИБО-преп»
Объем исследуемого образца, контролей и элюции
ВКО STI-87 10 мкл в каждый образец
Исследуемые образцы 100 мкл в пробирки для исследуемых образцов
ОКО 100 мкл в пробирку для ОК
ОКО + ПКО-1-HBV 90 мкл + 10 мкл в пробирку для ПК
Элюция
все образцы 50 мкл в каждую пробирку
Стр. 1 из 5
ЭКСТРАКЦИЯ ДНК С ПОМОЩЬЮ «МАГНО-сорб» из 200 мкл образца плазмы
В отдельной стерильной пробирке подготовить смесь:
Компонент Объем, мкл Обозначения
ВКО STI-87 10х(N+К+1) N – количество исследуемых образцов;
Компонент А 10х(N+К+1) К – количество контролей экстракции;
Магнетизированная силика 20х(N+К+1) 1 – запас
Внести в пробирки:
Образец/реагент Объем Действие
Смесь: ВКО STI-87, компонент А,
40 мкл добавить в каждую пробирку
магнетизированная силика
Лизирующий раствор МАГНО-сорб 900 мкл добавить в каждую пробирку
Исследуемые образцы 200 мкл добавить в пробирки для исследуемых образцов
ОКО + ПКО-1-HBV 90 мкл + 10 мкл добавить в пробирку для ПК-1
ОКО 100 мкл добавить в пробирку для ОК
Все пробирки с исследуемыми и контрольными образцами:
- закрыть крышки, перемешать на вортексе, осадить капли;
- открыть крышки. Пробирки не закрывать!
- поместить в термостат на 10 мин при 85 °С;
- осторожно перенести пробирки в обычный штатив.
Поверхность пробирок может быть горячей! Дать
остыть в течение 2 мин, закрыть крышки;
- перемешать, осадить капли, поставить в магнитный
штатив на 2 мин;
- осторожно удалить надосадочную жидкость;
- перенести пробирки в обычный штатив
Раствор для отмывки 5 700 мкл добавить в каждую пробирку
- закрыть крышки, ресуспендировать на вортексе, осадить
капли;
- поставить в магнитный штатив на 2 мин;
- осторожно удалить надосадочную жидкость;
- перенести пробирки в обычный штатив
Раствор для отмывки 5 700 мкл добавить в каждую пробирку
- закрыть крышки, ресуспендировать на вортексе, осадить
капли;
- поставить в магнитный штатив на 2 мин;
- осторожно удалить надосадочную жидкость;
- перенести пробирки в обычный штатив
Раствор для отмывки 6 700 мкл добавить в каждую пробирку
- закрыть крышки, ресуспендировать на вортексе, осадить
капли;
- переставить пробирки с открытыми крышками в
магнитный штатив на 2 мин;
- осторожно отобрать надосадочную жидкость;
- перенести пробирки в обычный штатив
Раствор для отмывки 7 200 мкл добавить в каждую пробирку
- закрыть крышки, ресуспендировать на вортексе, осадить
капли;
- поставить в магнитный штатив на 1 мин;
- осторожно удалить надосадочную жидкость;
- высушить с открытыми крышками на магнитном штативе
в течение 10-20 мин
Буфер для элюции 70 мкл добавить в каждую пробирку
- закрыть крышки, перемешать на вортексе;
- поместить в термостат на 5 мин при 60 °С, через 2 мин
перемешать на вортексе,
- осадить капли, поставить в магнитный штатив на 2 мин
Надосадочная жидкость содержит очищенную ДНК
ВНИМАНИЕ! Отбор очищенной ДНК осуществляется, не снимая пробирок с магнитного штатива.
Стр. 2 из 5
ЭКСТРАКЦИЯ ДНК С ПОМОЩЬЮ «МАГНО-сорб» из 1000 мкл образца плазмы
В отдельной стерильной пробирке подготовить смесь:
Компонент Объем, мкл Обозначения
ВКО STI-87 10х(N+К+1) N – количество исследуемых образцов;
Компонент А 20х(N+К+1) К – количество контролей экстракции;
Магнетизированная силика 30х(N+К+1) 1 – запас
Внести в пробирки:
Образец/реагент Объем Действие
Смесь: ВКО STI-87, компонент А,
60 мкл добавить в каждую пробирку
магнетизированная силика
Лизирующий раствор МАГНО-сорб 2,6 мл добавить в каждую пробирку
Исследуемые образцы 1000 мкл добавить в пробирки для исследуемых образцов
ОКО + ПКО-1-HBV 90 мкл + 10 мкл добавить в пробирку для ПК-1
ОКО 100 мкл добавить в пробирку для ОК
Все пробирки с исследуемыми и контрольными образцами:
- перемешать пипетированием;
Пробирки не закрывать!
- поместить в термостат на 10 мин при 85 °С;
- перенести в магнитный штатив на 6 мин. Поверхность
пробирок может быть горячей!
- осторожно удалить надосадочную жидкость;
- перенести пробирки в обычный штатив
Раствор для отмывки 5 700 мкл добавить в каждую пробирку
- закрыть крышки, смыть магнетизированную силику осторожным
перемешиванием на вортексе, а затем пипетированием;
- перенести все содержимое в пробирки на 1,5 мл;
- поставить в магнитный штатив на 2 мин;
- осторожно удалить надосадочную жидкость,
- перенести пробирки в обычный штатив
Раствор для отмывки 5 700 мкл добавить в каждую пробирку
- закрыть крышки, ресуспендировать на вортексе, осадить капли;
- поставить в магнитный штатив на 2 мин;
- осторожно удалить надосадочную жидкость,
- перенести пробирки в обычный штатив
Раствор для отмывки 6 700 мкл добавить в каждую пробирку
- закрыть крышки, ресуспендировать на вортексе, осадить капли;
- поставить в магнитный штатив на 2 мин;
- осторожно удалить надосадочную жидкость,
- перенести пробирки в обычный штатив
Раствор для отмывки 7 200 мкл добавить в каждую пробирку
- закрыть крышки, ресуспендировать на вортексе, осадить капли;
- поставить в магнитный штатив на 1 мин;
- осторожно удалить надосадочную жидкость;
- высушить с открытыми крышками на магнитном штативе в
течение 10-20 мин
Буфер для элюции 70 мкл добавить в каждую пробирку
- закрыть крышки, перемешать на вортексе;
- поместить в термостат на 5 мин при 60 °С, через 2 мин
перемешать на вортексе;
- осадить капли, переставить в магнитный штатив на 2 мин
Надосадочная жидкость содержит очищенную ДНК
ВНИМАНИЕ! Отбор очищенной ДНК осуществляется, не снимая пробирок с магнитного штатива.
ЭКСТРАКЦИЯ ДНК С ПОМОЩЬЮ АВТОМАТИЧЕСКИХ СТАНЦИЙ с использованием комплекта реагентов
«МАГНО-сорб»
Экстракция нуклеиновых кислот проводится в соответствии с инструкцией по эксплуатации автоматической
станции, с использованием соответствующего протокола экстракции. При использовании «пипетирующих
станций» необходимо соблюдение дополнительных условий.
Подробную информацию по работе с автоматическими станциями смотрите в эксплуатационной документации
производителя оборудования и в Приложении Б инструкции по применению набора реагентов.
Стр. 3 из 5
ЭКСТРАКЦИЯ ДНК С ПОМОЩЬЮ «РИБО-сорб»
Образец/реагент Объем Действие
ВКО STI-87 10 мкл добавить в каждую пробирку
Лизирующий раствор 450 мкл добавить в каждую пробирку
Исследуемые образцы 100 мкл добавить в пробирки для исследуемых образцов
ОКО + ПКО-1-HBV 90 мкл + 10 мкл добавить в пробирку для ПК
ОКО 100 мкл добавить в пробирку для ОК
Все пробирки с исследуемыми и контрольными образцами:
- закрыть крышки, перемешать на вортексе, осадить капли;
- поместить в термостат на 10 мин при 60 °С;
- осадить капли
Сорбент 25 мкл ресуспендировать, добавить в каждую пробирку
- закрыть крышки, перемешать на вортексе;
- оставить на 10 мин при комнатной температуре, тщательно
перемешивая каждые 2 мин;
- центрифугировать 1 мин при 7 тыс. g;
- удалить надосадочную жидкость
Раствор для отмывки 1 400 мкл добавить в каждую пробирку
- закрыть крышки, ресуспендировать на вортексе;
- центрифугировать 1 мин при 7 тыс. g;
- удалить надосадочную жидкость
Раствор для отмывки 3 500 мкл добавить в каждую пробирку
- закрыть крышки, ресуспендировать на вортексе;
- центрифугировать 1 мин при 7 тыс. g;
- удалить надосадочную жидкость
Раствор для отмывки 3 500 мкл добавить в каждую пробирку
- закрыть крышки, ресуспендировать на вортексе;
- центрифугировать 1 мин при 7 тыс. g;
- удалить надосадочную жидкость
Раствор для отмывки 4 400 мкл добавить в каждую пробирку
- закрыть крышки, ресуспендировать на вортексе;
- центрифугировать 1 мин при 7 тыс. g;
- удалить надосадочную жидкость;
- открыть крышки, подсушить осадок 12-15 мин при 60 °С
РНК-буфер 50 мкл добавить в каждую пробирку
- закрыть крышки, ресуспендировать на вортексе;
- прогреть 2-3 мин при 60 °С, перемешать на вортексе;
- центрифугировать 1 мин при 12-13 тыс. g
Надосадочная жидкость содержит очищенную ДНК
ВНИМАНИЕ! Отбор очищенной ДНК для проведения ПЦР проводить осторожно, не захватывая сорбент. Если
сорбент взмутился, необходимо осадить его на центрифуге при 12-13 тыс. g в течение 1 мин.
Стр. 4 из 5
|  | Внести по 15 мкл |  |  |  |
| Приготовленной реакционной смеси |  | в каждую пробирку |  |  |
|  | Внести по 10 мкл |  |  |  |
| Проб ДНК, экстрагированных из исследуемых образцов |  | в пробирки для исследуемых образцов | При проведении экстракции с помощью сорбционных методов избегать попадания сорбента в реакционную смесь! |  |
| Пробы ДНК, экстрагированной из ПК |  | в пробирку для ПК |  |  |
| Пробы ДНК, экстрагированной из ОК |  | в пробирку для ОК |  |  |
| KB2 HBV |  | в пробирку для К+ |  |  |
| Цикл |  | Программа амплификации для приборов |  |  |  |  |  |  |  | Программа амплификации для приборов |  |  |  |  |  |  |
|  |  | роторного типа |  |  |  |  |  |  |  | планшетного типа |  |  |  |  |  |  |
|  | Темпе- ратура, °С |  | Время | Д | етекция флуоресцентног | о | Кол-во циклов |  | Темпе- ратура, °С |  | Время | Д | етекция флуоресцентног | о | Кол-во циклов |  |
|  |  |  |  |  | сигнала по каналам для |  |  |  |  |  |  |  | сигнала по каналам для |  |  |  |
|  |  |  |  |  | флуорофоров |  |  |  |  |  |  |  | флуорофоров |  |  |  |
| 1 | 50 |  | 15 мин | – |  |  | 1 |  | 50 |  | 15 мин | – |  |  | 1 |  |
| 2 | 95 |  | 15 мин | – |  |  | 1 |  | 95 |  | 15 мин | – |  |  | 1 |  |
| 2 | 95 |  | 5 с | – |  |  | 5 |  | 95 |  | 5 с | – |  |  | 5 |  |
|  | 60 |  | 20 с | – |  |  |  |  | 60 |  | 20 с | – |  |  |  |  |
|  | 72 |  | 15 с | – |  |  |  |  | 72 |  | 15 с | – |  |  |  |  |
| 3 | 95 |  | 5 с | – |  |  | 40 |  | 95 |  | 5 с | – |  |  | 40 |  |
|  | 60 |  | 20 с | FAM, JOE |  |  |  |  | 60 |  | 30 с | FAM, JOE |  |  |  |  |
|  | 72 |  | 15 с | – |  |  |  |  | 72 |  | 15 с | – |  |  |  |  |
ПОДГОТОВКА ПРОБ ДЛЯ АМПЛИФИКАЦИИ С ДЕТЕКЦИЕЙ В РЕЖИМЕ «РЕАЛЬНОГО ВРЕМЕНИ» при
использовании «ПЦР-комплекта» вариант FRT
Общий объем реакционной смеси: 25 мкл, включая объем пробы ДНК (10 мкл).
Контроли: для каждой группы амплифицируемых образцов 1 положительный контроль ПЦР (К+),
1 положительный (ПК), 1 отрицательный (ОК) контроли экстракции.
1. Рассчитать количество каждого реагента, требующееся для приготовления реакционной смеси.
2. Разморозить пробирку с ПЦР-смесью-1-FL HBV.
3. В отдельной пробирке подготовить реакционную смесь:
Компонент реакционной смеси Объем, мкл Обозначения
ПЦР-смесь-1-FL HBV 10х(N+К+1)
N – количество исследуемых образцов;
ПЦР-буфер-В 5х(N+К+1) К – количество контролей;
1 – запас
Полимераза (TaqF) 0,5х(N+К+1)
ВНИМАНИЕ! Компоненты реакционной смеси следует смешивать непосредственно перед проведением ПЦР.
4. Отобрать необходимое количество пробирок или стрипов для ПЦР исследуемых и контрольных образцов:
ВНИМАНИЕ! Содержимое пробирок перемешать пипетированием, не допуская появления пузырьков воздуха.
ВНИМАНИЕ! При подозрении на возможную контаминацию также необходима постановка отрицательного
контроля ПЦР (К–). Для этого в пробирку с реакционной смесью внести 10 мкл К–.
АМПЛИФИКАЦИЯ С ДЕТЕКЦИЕЙ В РЕЖИМЕ «РЕАЛЬНОГО ВРЕМЕНИ»
- Установить пробирки в ячейки реакционного модуля. Рекомендуется:
а) перед постановкой в амплификатор планшетного типа осадить капли со стенок пробирок на вортексе;
б) в случае неполной загрузки приборов планшетного типа дополнительно установить пустые пробирки по
краям реакционного модуля амплификатора.
- Запустить программу амплификации:
а) либо с использованием ПО ARTS совместно с ПО AmpliSens® HBV-FL Soft, детектирующий амплификатор
должен быть совместим с ПО ARTS;
б) либо в ручном режиме, запрограммировав детектирующий амплификатор для выполнения программы,
указанной ниже, настройки приборов роторного и планшетного типа см. во вкладыше с настройками к
набору реагентов.
ВНИМАНИЕ! В случае если в одном приборе одновременно проводятся только тесты для выявления ДНК HBV,
можно удалить из данной программы первый шаг обратной транскрипции (50 °С – 15 мин) для экономии времени.
АНАЛИЗ И ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ
Анализируют кривые накопления флуоресцентного сигнала по двум каналам с помощью алгоритма, приведенного
в инструкции, или с помощью ПО ARTS совместно с ПО AmpliSens® HBV-FL Soft:
Канал для флуорофора FAM JOE
Мишень для амплификации ДНК ВКО ДНК HBV
ВНИМАНИЕ! К каждому набору реагентов прилагается вкладыш с настройками, в котором указаны настройки для
приборов, граничные значения порогового цикла (Ct), необходимые для проведения анализа и интерпретации
результатов.
Стр. 5 из 5
ФБУН ЦНИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора
111123, Москва, ул. Новогиреевская 3А,
тел. (495) 974-96-42, факс (495) 305-54-23, e-mail: obtk@pcr.ru
ПАСПОРТ КАЧЕСТВА
Набор реагентов для выявления ДНК вируса гепатита B (HBV) в клиническом материале методом
полимеразной цепной реакции (ПЦР) с гибридизационно-флуоресцентной детекцией
«АмплиСенс® HBV-FL»
2026-03-15
Форма 4
15.03.26
2027-03-15
ТУ 20.59.52-030-01897593-2025.
Комплектность, упаковка и маркировка набора указанной серии соответствуют требованиям ТУ.
1. Технические характеристики:
Результаты
Наименование показателя Норма
контроля
Определено значение Ct меньше граничного (для
Набор реагентов должен выявлять ДНК HBV в
исследуемых образцов) по каналам для флуорофоров
концентрации 50 МЕ/мл при экстракции ДНК с
FAM, JOE.
помощью комплекта реагентов «РИБО-преп» соответствует
Допускается отсутствие значения Ct (или значение Ct
из 100 мкл разведения образца контрольной
определено больше граничного) по каналу для
панели «HBV»
флуорофора JOE в одном повторе из трех
Положительный результат для образца
Определено значение Ct меньше граничного (для
контрольной панели «HBV» с концентрацией
исследуемых образцов) по каналам для флуорофоров соответствует
порядка 104 МЕ/мл при экстракции с помощью
FAM, JOE
комплекта реагентов «РИБО-преп»
Определено значение Ct меньше граничного по каналу
Отрицательный результат для образца ОК
для флуорофора FAM. Значение Ct отсутствует по каналу соответствует
(отрицательный контроль экстракции)
для флуорофора JOE
Положительный результат для образца ПК Определено значение Ct меньше граничного по каналам
соответствует
(положительный контроль экстракции) для флуорофоров FAM, JOE
Положительный результат для образца К+ Определено значение Ct меньше граничного по каналам
соответствует
(положительный контроль ПЦР) для флуорофоров FAM, JOE
Отрицательный результат для образца К– Значение Ct отсутствует по каналам для флуорофоров
соответствует
(отрицательный контроль ПЦР) FAM, JOE
2. Состав, внешний вид:
Наименование В составе формы
Характеристика и нормы Результаты контроля
реагента комплектации
ПЦР-смесь-1-FL HBV
Прозрачная жидкость от бесцветного до
соответствует 4
светло-лилового цвета
ПЦР-буфер-В Прозрачная бесцветная жидкость соответствует 4
Полимераза (TaqF) Прозрачная бесцветная жидкость соответствует 4
KB2 HBV Прозрачная бесцветная жидкость соответствует 4
K– Прозрачная бесцветная жидкость соответствует 4
ОКО Прозрачная бесцветная жидкость соответствует 4
ПКO-1-HBV Прозрачная бесцветная жидкость соответствует 4
ВКО STI-87 Прозрачная бесцветная жидкость соответствует 4
3. Условия транспортирования и хранения:
Транспортирование. Транспортирование проводить всеми видами крытых транспортных средств в термоконтейнерах,
содержащих хладоэлементы, или авторефрижераторах. Набор реагентов транспортировать при температуре от 2 до 8 °С
не более 5 сут.
Хранение.
Реагенты после вскрытия хранить при той же температуре, что до вскрытия.
Форма 4. «ПЦР-комплект» вариант FRT хранить в морозильной камере при температуре от минус 24 до минус 16 °С. Не
допускается замораживание/оттаивание KB2 HBV, ПКО-1-HBV и ВКО STI-87 более двух раз. После размораживания ПКО-
1-HBV, KB2 HBV и ВКО STI-87 хранить при температуре от 2 до 8 °С не более 6 мес. ПЦР-смесь-1-FL HBV хранить в
защищенном от света месте.
Холодильные и морозильные камеры должны обеспечивать регламентированный температурный режим.
Дата выдачи 15.03.26
Руководитель ГКК (Кодуа О.И.)
(подпись) (Ф.И.О.)
Форма 4: REF R-V5-Mod(RG,iQ,Mx,Dt); REF H-0304-1
ФБУН ЦНИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора
111123, Москва, ул. Новогиреевская 3А,
тел. (495) 974-96-42, факс (495) 305-54-23, e-mail: obtk@pcr.ru
ПАСПОРТ КАЧЕСТВА
Набор реагентов для выявления ДНК вируса гепатита B (HBV) в клиническом материале методом
полимеразной цепной реакции (ПЦР) с гибридизационно-флуоресцентной детекцией
«АмплиСенс® HBV-FL»
2026-03-15
Форма 4
А15.03.26
2027-03-15
ТУ 20.59.52-030-01897593-2025.
Комплектность, упаковка и маркировка набора указанной серии соответствуют требованиям ТУ.
1. Технические характеристики:
Результаты
Наименование показателя Норма
контроля
Определено значение Ct меньше граничного (для
Набор реагентов должен выявлять ДНК HBV в
исследуемых образцов) по каналам для флуорофоров
концентрации 50 МЕ/мл при экстракции ДНК с
FAM, JOE.
помощью комплекта реагентов «РИБО-преп» соответствует
Допускается отсутствие значения Ct (или значение Ct
из 100 мкл разведения образца контрольной
определено больше граничного) по каналу для
панели «HBV»
флуорофора JOE в одном повторе из трех
Положительный результат для образца
Определено значение Ct меньше граничного (для
контрольной панели «HBV» с концентрацией
исследуемых образцов) по каналам для флуорофоров соответствует
порядка 104 МЕ/мл при экстракции с помощью
FAM, JOE
комплекта реагентов «РИБО-преп»
Определено значение Ct меньше граничного по каналу
Отрицательный результат для образца ОК
для флуорофора FAM. Значение Ct отсутствует по каналу соответствует
(отрицательный контроль экстракции)
для флуорофора JOE
Положительный результат для образца ПК Определено значение Ct меньше граничного по каналам
соответствует
(положительный контроль экстракции) для флуорофоров FAM, JOE
Положительный результат для образца К+ Определено значение Ct меньше граничного по каналам
соответствует
(положительный контроль ПЦР) для флуорофоров FAM, JOE
Отрицательный результат для образца К– Значение Ct отсутствует по каналам для флуорофоров
соответствует
(отрицательный контроль ПЦР) FAM, JOE
2. Состав, внешний вид:
Наименование В составе формы
Характеристика и нормы Результаты контроля
реагента комплектации
ПЦР-смесь-1-FL HBV
Прозрачная жидкость от бесцветного до
соответствует 4
светло-лилового цвета
ПЦР-буфер-В Прозрачная бесцветная жидкость соответствует 4
Полимераза (TaqF) Прозрачная бесцветная жидкость соответствует 4
KB2 HBV Прозрачная бесцветная жидкость соответствует 4
K– Прозрачная бесцветная жидкость соответствует 4
ОКО Прозрачная бесцветная жидкость соответствует 4
ПКO-1-HBV Прозрачная бесцветная жидкость соответствует 4
ВКО STI-87 Прозрачная бесцветная жидкость соответствует 4
3. Условия транспортирования и хранения:
Транспортирование. Транспортирование проводить всеми видами крытых транспортных средств в термоконтейнерах,
содержащих хладоэлементы, или авторефрижераторах. Набор реагентов транспортировать при температуре от 2 до 8 °С
не более 5 сут.
Хранение.
Реагенты после вскрытия хранить при той же температуре, что до вскрытия.
Форма 4. «ПЦР-комплект» вариант FRT хранить в морозильной камере при температуре от минус 24 до минус 16 °С. Не
допускается замораживание/оттаивание KB2 HBV, ПКО-1-HBV и ВКО STI-87 более двух раз. После размораживания ПКО-
1-HBV, KB2 HBV и ВКО STI-87 хранить при температуре от 2 до 8 °С не более 6 мес. ПЦР-смесь-1-FL HBV хранить в
защищенном от света месте.
Холодильные и морозильные камеры должны обеспечивать регламентированный температурный режим.
Дата выдачи 15.03.26
Руководитель ГКК (Кодуа О.И.)
(подпись) (Ф.И.О.)
Форма 4: REF R-V5-Mod(RG,iQ,Mx,Dt); REF H-0304-1
ОГЛАВЛЕНИЕ
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ .................................................................................................. 3
ОБЩИЕ СВЕДЕНИЯ ......................................................................................................... 3
НАЗНАЧЕНИЕ ................................................................................................................... 4
ПРИНЦИП РАБОТЫ .......................................................................................................... 4
УСЛОВИЯ ВЫПОЛНЕНИЯ ПРОГРАММЫ ....................................................................... 4
Требования к техническим средствам оператора ...................................................... 4
Требования к входным данным ................................................................................... 5
Требования к информационной безопасности ........................................................... 5
ВЫПОЛНЕНИЕ ПРОГРАММЫ ......................................................................................... 6
Загрузка ПО в ARTS ..................................................................................................... 6
Формирование и запуск постановки ............................................................................ 6
Анализ и интерпретация результатов ......................................................................... 7
Авторизация результатов исследования .................................................................... 9
Формирование бланка с результатами ....................................................................... 9
СООБЩЕНИЯ ОПЕРАТОРУ ........................................................................................... 10
ТЕХНИЧЕСКАЯ ПОДДЕРЖКА И ИНФОРМАЦИЯ О РАЗРАБОТЧИКЕ ........................ 11
VER 04.12.25 / стр. 2 из 11
| ВКО | – внутренний контрольный образец |
| ДНК | – дезоксирибонуклеиновая кислота |
| Детектирующий амплификатор | – прибор для проведения амплификации c детекцией в режиме «реального времени» |
| ПО | – программное обеспечение AmpliSens® HBV-FL Soft |
| ПЦР | – полимеразная цепная реакция |
| ОК | – отрицательный контроль экстракции |
| ОКО | – отрицательный контрольный образец |
| ПК | – положительный контроль экстракции |
| К- | – отрицательный контроль амплификации |
| К+ | – положительный контроль амплификации |
| ARTS | – программное обеспечение ARTS |
| Ct | – сycle threshold (пороговый цикл) |
| HBV | – вирус гепатита В |
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
В настоящем руководстве применяются следующие сокращения и обозначения:
ОБЩИЕ СВЕДЕНИЯ
Наименование и версия программного обеспечения: AmpliSens® HBV-FL Soft.
Версия ПО отображается для каждой серии набора реагентов во вкладыше для
автоматизированной работы, а также доступна в каталоге методик или в пакете
методик.
В соответствии с разделом «Порядок нумерации версий программного
обеспечения» третье числовое значение версии (изменения, не влияющие на
функционал, безопасность и эффективность медицинского изделия) может
изменяться при выпуске новой серий набора реагентов. Данное изменение не требует
внесения изменений в комплект регистрационной документации на медицинское
изделие.
Способ размещения и доступа к программному обеспечению: входит в состав
набора реагентов «АмплиСенс HBV-FL». ПО и руководство оператора
предоставляются на электронном носителе или сайте Изготовителя
(www.amplisens.ru).
Класс безопасности: Класс А в соответствии с п.4.3 ГОСТ IEC 62304.
Порядок нумерации версий программного обеспечения: Обозначение версии
состоит из трех чисел, разделенных точками, означающих нумерацию мажорных,
минорных и незначимых изменений соответственно. Мажорные изменения означают
изменение функционального назначения, принципа работы, структуры и функций
составных частей программного обеспечения; минорные изменения означают
изменение названий и обозначений в информационном блоке программного
обеспечения; незначимые изменения означают изменения (включая исправление
VER 04.12.25 / стр. 3 из 11
ошибок) и доработки, не изменяющие функции, описанные для мажорных и минорных
изменений.
Программное обеспечение соответствует требованиям ГОСТ IEC 62304.
НАЗНАЧЕНИЕ
ПО предназначено для автоматического программирования детектирующего
амплификатора, совместимого с ARTS, и автоматической обработки и интерпретации
результатов исследования при использовании набора реагентов «АмплиСенс® HBV-
FL» (далее – набор реагентов). ПО представляет собой программу, содержащую
критерии анализа кривых флуоресценции и алгоритм интерпретации результатов, а
также информацию об аналитах, используемом биологическом материале, реагентах
и контрольных образцах, программе амплификации, указанных в инструкции к набору
реагентов.
ПРИНЦИП РАБОТЫ
ПО совместимо с ARTS. В соответствии с информацией об используемом
биологическом материале, реагентах, контрольных образцах и программе
амплификации, указанной в ПО, ARTS осуществляет запуск детектирующих
амплификаторов. После завершения амплификации ARTS визуализирует
полученные флуоресцентные кривые и осуществляет автоматический экспорт
полученных данных для контрольных и исследуемых образцов в ПО.
ПО проводит автоматическую интерпретацию результатов с использованием
полученных значений пороговых циклов (Ct), включая оценку валидности контрольных
образцов и исследования в целом. Полученные в ПО результаты автоматически
передаются в ARTS для их визуализации оператору.
Допускается программирование и запуск детектирующего амплификатора без
использования ПО и ARTS. В этом случае файл с данными, полученный на
детектирующем амплификаторе, можно экспортировать в ПО для дальнейшей
автоматической интерпретации результатов.
Технологии искусственного интеллекта в ПО не используются.
УСЛОВИЯ ВЫПОЛНЕНИЯ ПРОГРАММЫ
Требования к техническим средствам оператора
Требования к персональному компьютеру указаны в таблице 1.
VER 04.12.25 / стр. 4 из 11
Таблица 1
Характеристика Минимальное значение
Оперативная память 4 ГБ
Свободное место на жестком диске, включая
16 ГБ
установку совместимого ПО
- Windows 7 Service pack 1;
- Microsoft Excel 2003;
Совместимое программное обеспечение
- ARTS версии 1.0.9;
- PostgreSQL версии 12
32-разрядный (x86) или 64-разрядный (x64)
Процессор
с тактовой частотой 1,5 ГГц
Графическое устройство DirectX 9 с драйвером WDDM 1.0
Требования к входным данным
Обозначения ячеек исследуемых и контрольных образцов в интерфейсе ARTS
должны строго соответствовать их фактическому расположению в реакционном блоке
детектирующего амплификатора.
Требования к информационной безопасности
Влияние угроз и уязвимостей ПО на пользователей или пациентов отсутствует.
ПО не содержит и не обрабатывает персональные данные пациентов.
Средства криптографической защиты в ПО не используются.
Доступ к ПО осуществляется с помощью авторизации пользователя в ARTS
(учетная запись). Уровень доступа пользователей должен быть обеспечен исходя из
требуемой функциональности.
В рамках инфраструктуры информационных технологий, использующей ПО,
необходимо:
− предпринять меры обеспечения информационной безопасности и
кибербезопасности для непрерывного функционирования ПО и исключения
возможности несанкционированного доступа к информации в ПО;
− предпринять меры, обеспечивающие защиту от нарушения целостности
информации в ПО;
− обеспечить наличие регулярных архивных копий ПО (в т.ч. базы данных) с
возможностью их восстановления;
− использовать средства защиты от вредоносных программ;
− соблюдать требования к информационной безопасности, указанные в руководстве
оператора ARTS.
VER 04.12.25 / стр. 5 из 11
ВЫПОЛНЕНИЕ ПРОГРАММЫ
Загрузка ПО в ARTS
Загрузка ПО в ARTS при наличии подключения персонального компьютера к сети
Интернет производится автоматически при запуске ARTS.
При отсутствии подключения персонального компьютера к сети Интернет загрузка
в ARTS производится вручную с электронного носителя путем выбора файла с
пакетом программного обеспечения, включающим ПО.
После завершения загрузки установленное ПО отображается в списке пакетов
методик и доступно для формирования и расчета постановок.
Формирование и запуск постановки
Формирование постановки производится с использованием интерфейса ARTS. В
соответствии с руководством оператора к ARTS необходимо выполнить следующие
действия:
1. Открыть ARTS.
2. Зарегистрировать серию набора реагентов и ввести переменную информацию (при
наличии), используя информацию из вкладыша для автоматизированной работы к
данной серии набора реагентов.
3. При необходимости сформировать список образцов для исследования с
применением набора реагентов (вручную или загрузить из лабораторных
информационных систем).
4. Выбрать детектирующий амплификатор и необходимый реакционный блок.
5. Сформировать постановку:
5.1. Выбрать из списка доступных программных обеспечений ПО AmpliSens® HBV-
FL Soft и серию набора реагентов.
5.2. На схематическом изображении реакционного блока детектирующего
амплификатора в используемых ячейках разместить образцы из списка,
сформированного в п.3, (или ввести их обозначения вручную) и контрольные
образцы.
5.3. Сохранить постановку.
6. Осуществить запуск амплификации. Ход амплификации отобразится в виде
кривых накопления флуоресценции.
Примечание – Допускается программирование и запуск детектирующего
амплификатора вручную в соответствии с программой амплификации, указанной в
инструкции к набору реагентов.
VER 04.12.25 / стр. 6 из 11
Анализ и интерпретация результатов
После завершения амплификации ARTS автоматически визуализирует кривые
флуоресценции.
Примечание – Если детектирующий амплификатор был запрограммирован и
запущен вручную, необходимо сформировать постановку, как описано выше,
загрузить файл, полученный в детектирующем амплификаторе, и осуществить
виртуальный расчет в соответствии с руководством оператора ARTS.
Соответствие названий флуорофоров и каналов детекции в ARTS указано в
таблице 2.
Таблица 2
Флуорофор FAM JOE
Название канала детекции FAM HEX
В соответствии с критериями анализа кривых флуоресценции, указанными в ПО,
автоматически определяется статус каждой кривой по каждому каналу детекции:
положительный, отрицательный или сомнительный.
Статус присваивается на основании критериев, оценивающих отклонения формы
кривой накопления флуоресценции от нормальной (S-образной) формы, например:
− наличие неспецифических скачков флуоресцентного сигнала;
− низкое соотношение сигнал/шум;
− кинетика накопления флуоресцентного сигнала, отличная от S-образной.
Сомнительные кривые классифицируются на «Сомнительно +» и
«Сомнительно -», что следует интерпретировать как:
«Сомнительно +» – наиболее вероятно, что для кривой получен положительный
результат, требуется подтверждение.
«Сомнительно –» – наиболее вероятно, что для кривой получен отрицательный
результат, требуется подтверждение.
Каждой сомнительной кривой необходимо присвоить статус: «Положительный»,
«Отрицательный» или сделать заключение о необходимости повторного
исследования данного образца. Для этого:
1. Отобразить кривые по всем каналам детекции в режиме отображения «сырых»
данных с прибора (режим «RAW»).
ВНИМАНИЕ! Не следует принимать решение о статусе сомнительной кривой на
основании просмотра нормализованных кривых (режим «Norma»), т.к. в данном
режиме отображаются флуоресцентные кривые после математической обработки.
2. Отфильтровать кривые со статусом «Сомнительный» по каждому каналу. В
VER 04.12.25 / стр. 7 из 11
скобках рядом с названием канала указано количество сомнительных кривых.
3. В списке образцов последовательно присвоить кривым статус «Положительный»,
«Отрицательный» или сделать заключение о необходимости повторного
исследования данного образца («Перестановка» – образцы будут возвращены в
список образцов для возможности повторного исследования).
ВНИМАНИЕ! Присвоение статуса сомнительным кривым производится на основании
экспертного мнения сотрудника лаборатории, осуществляющего анализ результатов.
В случае если для сомнительной флуоресцентной кривой не удается принять
однозначного решения по ее статусу, рекомендуется провести повторное
исследование для данного образца.
После просмотра кривых флуоресценции и присвоения статуса всем
сомнительным флуоресцентным кривым необходимо запустить интерпретацию
результатов.
Будут выведены результаты, автоматически полученные ПО на основании
значений порогового цикла (Ct) для исследуемых образцов, включая оценку
валидности контрольных образцов и исследования в целом.
Результаты для контрольных образцов выводятся с детализацией по каналам
детекции. Если для одного или нескольких контрольных образцов получено
сообщение об ошибке, данный результат дублируется в строке статуса постановки.
Результаты для исследуемых образцов выводятся в качественном формате с
учетом статуса контролей и указанием канала детекции.
Возможные варианты интерпретации результатов исследуемых образцов и
соответствующие им комментарии для лаборатории указаны в таблице 3.
Таблица 3
Качественное определение Комментарии для лаборатории
Обнаружено –
Не обнаружено –
Невалидный Повторить исследование с этапа экстракции
Возможные варианты результатов для контролей и интерпретации результатов
для исследуемых образцов с учетом статуса контролей, а также соответствующие
комментарии для лаборатории указаны в таблице 4.
VER 04.12.25 / стр. 8 из 11
| Статус контроля |  | Интерпретация результатов для |  | Комментарии для лаборатории |
|  |  | исследуемых образцов с учетом статуса |  |  |
|  |  | контроля |  |  |
|  | В соответствии с таблицей 3 |  |  | – |
| Ошибка ПК | Интерпретация невозможна для образцов, в которых не обнаружен определяемый аналит |  |  | Повторить исследование с этапа экстракции |
| Ошибка ПК (по каналу ВКО) | Интерпретация невозможна для всех образцов |  |  | Повторить исследование с этапа экстракции |
| Контаминация ОКО | Интерпретация невозможна для образцов, в которых обнаружен определяемый аналит |  |  | Повторить исследование с этапа экстракции |
| Ошибка ОКО | Интерпретация невозможна для всех образцов |  |  | Повторить исследование с этапа экстракции |
| Ошибка K+ | Интерпретация невозможна для образцов, в которых не обнаружен определяемый аналит |  |  | Повторить исследование с этапа амплификации |
| Ошибка K+ (по каналу ВКО) | Интерпретация невозможна для всех образцов |  |  | Повторить исследование с этапа экстракции |
| Контаминация K– | Интерпретация невозможна для образцов, в которых обнаружен определяемый аналит |  |  | Повторить исследование с этапа амплификации |
| Контаминация K– (по каналу ВКО) | В соответствии с таблицей 3 |  |  | – |
Таблица 4
В случаях, перечисленных в таблице 4, для соответствующих исследуемых
образцов в таблице результатов выводится сообщение «Интерпретация невозможна»
с указанием причины (например, «Интерпретация невозможна (Ошибка ПК)»).
Авторизация результатов исследования
После вывода результатов для исследуемых образцов необходимо авторизовать
(подтвердить) или отвергнуть (отклонить) результаты автоматической интерпретации.
В том числе, возможны следующие действия в соответствии с руководством
оператора к ARTS:
 отправка образца на повторное исследование;
 отмена результата исследования всех образцов в постановке;
 авторизация результата исследования каждого образца;
 авторизация результата исследования всех образцов в постановке;
 выгрузка результатов исследования в формате электронной таблицы;
 выгрузка постановки в отдельный файл для просмотра в ARTS.
Формирование бланка с результатами
ВНИМАНИЕ! Только авторизованные результаты исследования, полученные с
помощью ПО, передаются в ARTS для формирования бланков с результатами для
исследуемых образцов и/или передачи в лабораторную информационную систему.
VER 04.12.25 / стр. 9 из 11
| Сообщение |  | Причина |  | Дальнейшие действия оператора |
|  |  | сообщения |  |  |
| Для AmpliSens® HBV-FL Soft не размещен контроль ПК | В реакционном блоке не размещен ПК |  |  | Указать положение ПК в реакционном блоке, используя кнопку ПК |
| Для AmpliSens® HBV-FL Soft не размещен контроль К+ | В реакционном блоке не размещен К+ |  |  | Указать положение К+ в реакционном блоке, используя кнопку К+ |
| Для AmpliSens® HBV-FL Soft не размещен контроль ОК | В реакционном блоке не размещен ОК |  |  | Указать положение ОК в реакционном блоке, используя кнопку ОК |
| Для AmpliSens® HBV-FL Soft не размещен контроль К– | В реакционном блоке не размещен К– |  |  | Указать положение К– в реакционном блоке, используя кнопку К– |
| Ошибка ПК | Значение Ct отсутствует или превышает граничное значение по каналу для флуорофора JOE |  |  | Краткое описание действий оператора выводится в столбце «Комментарии для лаборатории» в соответствии с таблицей 4. Более подробную информацию см. в инструкции по применению набора реагентов |
| Ошибка ПК (по каналу ВКО) | Значение Ct отсутствует или превышает граничное значение по каналу для флуорофора FAM |  |  | Краткое описание действий оператора выводится в столбце «Комментарии для лаборатории» в соответствии с таблицей 4. Более подробную информацию см. в инструкции по применению набора реагентов |
| Ошибка К+ | Значение Ct отсутствует или превышает граничное значение по каналу для флуорофора JOE |  |  | Краткое описание действий оператора выводится в столбце «Комментарии для лаборатории» в соответствии с таблицей 4. Более подробную информацию см. в инструкции по применению набора реагентов |
| Ошибка К+ (по каналу ВКО) | Значение Ct отсутствует или превышает граничное значение по каналу для флуорофора FAM |  |  | Краткое описание действий оператора выводится в столбце «Комментарии для лаборатории» в соответствии с таблицей 4. Более подробную информацию см. в инструкции по применению набора реагентов |
| Контаминация ОКО | Определено значение Ct по каналу для флуорофора JOE |  |  | Краткое описание действий оператора выводится в столбце «Комментарии для лаборатории» в соответствии с таблицей 4. Более подробную информацию см. в инструкции по применению набора реагентов |
| Контаминация К– | Определено значение Ct по каналу для флуорофора JOE |  |  | Краткое описание действий оператора выводится в столбце «Комментарии для лаборатории» в соответствии с таблицей 4. Более подробную информацию см. в инструкции по применению набора реагентов |
Формирование бланков с результатами производится оператором в ARTS. Поиск,
просмотр и печать бланков осуществляется через интерфейс ARTS в соответствии с
руководством оператора ARTS.
ВНИМАНИЕ! Установление диагноза и назначение лечения должны производиться
врачом соответствующей специализации.
СООБЩЕНИЯ ОПЕРАТОРУ
VER 04.12.25 / стр. 10 из 11
| Сообщение |  | Причина |  | Дальнейшие действия оператора |
|  |  | сообщения |  |  |
| Контаминация K– (по каналу ВКО) | Определено значение Ct по каналу для флуорофора FAM |  |  | Краткое описание действий оператора выводится в столбце «Комментарии для лаборатории» в соответствии с таблицей 4. Более подробную информацию см. в инструкции по применению набора реагентов |
| Ошибка ОКО | Значение Ct отсутствует или превышает граничное по каналу для флуорофора FAM |  |  | Краткое описание действий оператора выводится в столбце «Комментарии для лаборатории» в соответствии с таблицей 4. Более подробную информацию см. в инструкции по применению набора реагентов |
ТЕХНИЧЕСКАЯ ПОДДЕРЖКА И ИНФОРМАЦИЯ О РАЗРАБОТЧИКЕ
При выявлении сбоев в работе ПО рекомендуется обращаться в техническую
поддержку. При обращении в техническую поддержку необходимо предоставить
следующую информацию:
- Наименование ПО и номер версии ПО и ARTS.
- Описание ошибки (текст или изображение).
- Описание действия / последовательности действий, при которых возникла ошибка.
- Контакты для обратной связи.
Сотрудники технической поддержки могут запросить дополнительную
информацию для решения вопроса.
Телефон: +7(495) 304 22 06 в рабочие часы организации.
Почта: lab@amplisens.ru в режиме 24х7.
Разработчик ПО: Федеральное бюджетное учреждение науки «Центральный
научно-исследовательский институт эпидемиологии» Федеральной службы по
надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (ФБУН ЦНИИ
Эпидемиологии Роспотребнадзора).
Руководство оператора и интерфейс программного обеспечения разработаны на
русском языке и могут быть переведены на другие языки без внесения изменений в
программный код ПО.
VER 04.12.25 / стр. 11 из 11
«УТВЕРЖДАЮ»
Директор Федерального бюджетного
учреждения науки «Центральный
научно-исследовательский институт
эпидемиологии» Федеральной службы
по надзору в сфере защиты прав потре-
бителей и благополучия человека
______________ В.Г. Акимкин
«___» ______________20__ г.
ФОТОГРАФИЧЕСКИЕ ИЗОБРАЖЕНИЯ
МЕДИЦИНСКОГО ИЗДЕЛИЯ
Набор реагентов для выявления ДНК вируса гепатита B (HBV) в
клиническом материале методом полимеразной цепной реакции (ПЦР)
с гибридизационно-флуоресцентной детекцией
«АмплиСенс® HBV-FL»
Фотография набора реагентов «АмплиСенс® HBV-FL» Форма 4
до вскрытия внешней упаковки (коробка)
2
Фотография реагентов, входящих в набор реагентов «АмплиСенс® HBV-FL» Форма 4
8
Фотография программного обеспечения AmpliSens® HBV-FL Soft, входящего в состав
набора реагентов «АмплиСенс® HBV-FL» Форма 4, при поставке на электронном носителе
9
AmpliSens
ФБУН ЦНИИ Эпидемиологии
Роспотребнадзора
ВКЛАДЫШ с настройками
к набору реагентов «АмплиСенс® HBV-FL»
H-0304-1
Форма 4: (ВЕР R-V5-Mod(RG,iQ,Mx,Dt); REF]
15.03.26
Настройки для приборов роторного типа
Rotor-Gene 3000/6000/Q
Примечание — Задать Reaction уоите/Объем реакции — 25 мкл. Установить галочку 15 pl oil
layer volume/15 ul с добав. воска, если такая опция предусмотрена в ПО прибора.
Calibrate/Gain Threshold/ | Dynamic tube/ Slope Correct/ More Settings/Outlier
Канал Optimisation.../ Removal/YcTpaHeHue
Порог Динамич.фон | Коррект. уклона
Опт.уровня сигн. выбросов
FAM/Green | от 5Р! до 10Р! 0,03 включена включена 10%
JOE/Yellow | от 5FI до 10FI 0,03 включена включена 10%
Настройки для приборов планшетного типа
CFX96
Примечание — Для каждого шага этапов циклирования, нажав Ha кнопку Step Options, задать
скорость нагревания/охлаждения Ramp Rate 2,5 °C/sec
Канал Threshold/Mopor
FAM Для каждого канала проверить правильность автоматического выбора пороговой линии.
JOE/M EX Пороговая линия должна пересекать только сигмообразные кривые накопления сигнала
положительных образцов и контролей и не пересекать базовую линию
ДТ-96/«ДТпрайм»
Критерий Нижняя Верхняя
Тип положитель- |граница/Порог| граница/ Норма- |Фитирование
анализа Метод |Каналы ного положитель- Порог лизация (сглаживание)
результата ного нормализац| данных данных
ПЦР результата | ии данных
© (Cn) для Пороговый | Fam, 70 % Не исполь- Не исполь- |Не исполь-| Не исполь-
каналов СЁ Нех 0 зуется зуется зуется зуется
При использовании программного обеспечения прибора
Граничные значения порогового цикла Ct
Прибор роторного типа | Прибор планшетнотгипоа |
Образец Канал для флуорофора
FAM JOE FAM JOE
OK 25 Ct отсутствует 29 Ct отсутствует
MK 25 28 29 32
K+ 30 30 34 34
К- СЕотсутствует Ct отсутствует
Исследуемые образцы 25 35 29 35
Продолжение см. на обороте
При использовании ПО ARTS совместно с ПО AmpliSens® HBV-FL Soft
Граничные значения порогового цикла Ct
Rotor-Gene 3000/6000/Q | CFX96 | AT-96/«[Tnpaiim»
Образец Канал для флуорофора
FAM JOE FAM JOE FAM JOE
OK 27 Ct отсутствует 29 СЕотсутствует | 30 | СЕотсутствует
MK 27 32 29 32 30 33
K+ 34 34 34 34 35 35
K- Ct отсутствует Ct отсутствует Ct отсутствует
as 27 38 29 35 30 37
Действующую версию:
Информационного листа «Приоритеты калибровки для наборов реагентов АмплиСенс на амплификаторах
Rotor-Gene 3000/6000 (Corbett Research, Австралия) и Rotor-Gene Q (QIAGEN, Германия)»
Вы можете получить в формате РОЕ-файла no интернет-адресу http://www.amplisens.ru в разделе
Информационные материалы/Руководства по работе с приборами.
Бумажный вариант документа Вы можете распечатать самостоятельно.
Пожалуйста, пользуйтесь всегда только актуальной версией документа с указанного интернет-сайта.
ФБУН ЦНИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора
ВКЛАДЫШ
для автоматизированной работы
к набору реагентов АмплиСенс® HBV-FL
Форма 4 15.03.26
R-V5-Mod(RG,iQ,Mx,Dt) о 2027-03-15
Информация для запуска амплификации, анализа и интерпретации результатов
автоматизированным способом
ПО AmpliSens® HBV-FL Soft в. 2.0.0
ОК-код для автоматического ввода информации в ПО
AmpliSens
ФБУН ЦНИИ Эпидемиологии
Роспотребнадзора
ВКЛАДЫШ с настройками
к набору реагентов «АмплиСенс® HBV-FL»
R-V5-Mod(RG,iQ,Mx,Dt); [REF] H-0304-1
Форма 4: [REF
A15.03.26
Настройки для приборов роторного типа
Rotor-Gene 3000/6000/Q
Примечание — Задать Reaction уоите/Объем реакции — 25 мкл. Установить галочку 15 ul oil
layer volume/15 uL с добав. воска, если такая опция предусмотрена в ПО прибора.
Calibrate/Gain Threshold/ | Dynamic tube/ Slope Correct/ More Settings/Outfier
Канал Optimisation.../ Removal/YcTpaHeHue
о Порог Динамич.фон | Коррект. уклона
пт.уровня сигн. выбросов
FAM/Green | от 5FI до 10FI 0,03 включена включена 10%
JOE/Yellow | от 5FI до 10Р1 0,03 включена включена 10%
Настройки для приборов планшетного типа
CFX96
Примечание — Для каждого шага этапов циклирования, нажав на кнопку Step Options, задать
скорость нагревания/охлаждения Ramp Rate 2,5 °C/sec
Kanan Threshold/Tlopor
FAM Для каждого канала проверить правильность автоматического выбора пороговой линии.
JOE/HEX Пороговая линия должна пересекать только сигмообразные кривые накопления сигнала
положительных образцов и контролей и не пересекать базовую линию
ДТ-96/«ДТпрайм»
Критерий Нижняя Верхняя
Тип положитель- |граница/Порог| граница/ Норма- |Фитирование
анализа Метод |Каналы ного положитель- Порог лизация (сглаживание)
результата Horo нормализац| данных данных
ПЦР результата | ии данных
© (22) Ana Пороговый | Fam, 70 % Не исполь- He исполь- |Не исполь-| He исполь-
каналов Ct Hex ° зуется зуется зуется зуется
При использовании программного обеспечения прибора
Граничные значения порогового цикла Ct
Прибор роторного типа | Прибор планшетнотгипоа |
Образец Канал для флуорофора
FAM JOE FAM JOE
OK 25 Ct отсутствует 29 Ct отсутствует
MK 25 28 29 32
К+ 30 30 34 34
К- СЕотсутствует Ct отсутствует
Исследуемые образцы 25 35 29 35
Продолжение см. Ha обороте
При использовании ПО ARTS совместно с ПО AmpliSens® HBV-FL Soft
Граничные значения порогового цикла Ct
Rotor-Gene 3000/6000/Q | CFX96 | AT-96/«[Tnpaiim»
Образец Канал для флуорофора
FAM JOE FAM JOE FAM JOE
OK 27 Ct отсутствует 29 СЕотсутствует | 30 | СЕотсутствует
MK 27 32 29 32 30 33
K+ 34 34 34 34 35 35
K- Ct отсутствует Ct отсутствует Ct отсутствует
as 27 38 29 35 30 37
Действующую версию:
Информационного листа «Приоритеты калибровки для наборов реагентов АмплиСенс на амплификаторах
Rotor-Gene 3000/6000 (Corbett Research, Австралия) и Rotor-Gene Q (QIAGEN, Германия)»
Вы можете получить в формате РОЕ-файла no интернет-адресу http://www.amplisens.ru в разделе
Информационные материалы/Руководства по работе с приборами.
Бумажный вариант документа Вы можете распечатать самостоятельно.
Пожалуйста, пользуйтесь всегда только актуальной версией документа с указанного интернет-сайта.
ФБУН ЦНИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора
ВКЛАДЫШ
для автоматизированной работы
к набору реагентов АмплиСенс® HBV-FL
Форма 4 А15.03.26
R-V5-Mod(RG,iQ,Mx, Dt) о 2027-03-15
Информация для запуска амплификации, анализа и интерпретации результатов
автоматизированным способом
ПО AmpliSens® HBV-FL Soft в. 2.0.0
©ОК-код для автоматического ввода информации в ПО
«УТВЕРЖДАЮ»
Директор Федерального бюджетного
учреждения науки «Центральный
научно-исследовательский институт
эпидемиологии» Федеральной
службы по надзору в сфере защиты
прав потребителей и благополучия
человека
________________ В.Г. Акимкин
«____»_______________20__ г.
ИНСТРУКЦИЯ ПО ПРИМЕНЕНИЮ
Набор реагентов для выявления ДНК вируса гепатита B (HBV)
в клиническом материале методом полимеразной цепной
реакции (ПЦР) с гибридизационно-флуоресцентной детекцией
«АмплиСенс® HBV-FL»
АмплиСенс
ФБУН ЦНИИ Эпидемиологии
Роспотребнадзора,
Российская Федерация, 111123,
г. Москва, ул. Новогиреевская, д. 3А
г. Москва, ул. Новогиреевская, д. 3А, стр. 6
тел. (495) 974 9642, е-mail: amplisens@pcr.ru
| ОГЛАВЛЕНИЕ |  |  |  |
| СПИСОК СОКРАЩЕНИ | Й ................... | ........................................................................ | ........ 3 |
| НАЗНАЧЕНИЕ ............... | ..................... | ........................................................................ | ........ 3 |
| ПОКАЗАНИЯ И ПРОТИ | ВОПОКАЗАН | ИЯ К ПРИМЕНЕНИЮ НАБОРА РЕАГЕНТО | В ..... 4 |
| ПРИНЦИП МЕТОДА ...... | ..................... | ........................................................................ | ........ 4 |
| ФОРМЫ КОМПЛЕКТАЦ | ИИ ................ | ........................................................................ | ........ 5 |
| АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАР | АКТЕРИСТИ | КИ ................................................................... | ........ 5 |
| ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ Х | АРАКТЕРИС | ТИКИ .............................................................. | ........ 6 |
| МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖ | НОСТИ ........ | ........................................................................ | ........ 7 |
| СВЕДЕНИЯ ОБ УТИЛИ | ЗАЦИИ ......... | ........................................................................ | ........ 9 |
| ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ М | АТЕРИАЛЫ | И ОБОРУДОВАНИЕ ....................................... | ........ 9 |
| ВЗЯТИЕ, ТРАНСПОРТИ | РОВАНИЕ И | ХРАНЕНИЕ ИССЛЕДУЕМОГО МАТЕРИАЛ | А .. 11 |
| ПОДГОТОВКА ИССЛЕД | УЕМОГО МА | ТЕРИАЛА К ЭКСТРАКЦИИ ДНК .................. | ...... 12 |
| ИНТЕРФЕРИРУЮЩИЕ | ВЕЩЕСТВА | И ОГРАНИЧЕНИЯ ПО ИСПОЛЬЗОВАНИЮ | ПРОБ |
| ИССЛЕДУЕМОГО МАТ | ЕРИАЛА ........ | ........................................................................ | ...... 12 |
| СОСТАВ ......................... | ..................... | ........................................................................ | ...... 14 |
| ПРОВЕДЕНИЕ ПЦР-ИС | СЛЕДОВАН | ИЯ .................................................................... | ...... 15 |
| ЭКСТРАКЦИЯ ДНК ИЗ | ИССЛЕДУЕМ | ЫХ ОБРАЗЦОВ ............................................. | ...... 15 |
| АМПЛИФИКАЦИЯ С ДЕ | ТЕКЦИЕЙ В | РЕЖИМЕ «РЕАЛЬНОГО ВРЕМЕНИ» .......... | ...... 16 |
| А. Подготовка проб д | ля амплифи | кации ............................................................... | ...... 16 |
| Б. Проведение ампл | ификации с | детекцией в режиме «реального времени» | ...... 18 |
| В. Анализ и интерпре | тация резуль | татов ................................................................ | ...... 19 |
| СРОК ГОДНОСТИ. УСЛ | ОВИЯ ТРАН | СПОРТИРОВАНИЯ И ХРАНЕНИЯ ............... | ...... 23 |
| ГАРАНТИЙНЫЕ ОБЯЗА | ТЕЛЬСТВА | ИЗГОТОВИТЕЛЯ ............................................ | ...... 24 |
| СИМВОЛЫ, ИСПОЛЬЗУ | ЕМЫЕ В ПЕ | ЧАТНОЙ ПРОДУКЦИИ .................................. | ...... 25 |
| ПРИЛОЖЕНИЕ А .......... | ..................... | ........................................................................ | ...... 26 |
| ПРИЛОЖЕНИЕ Б .......... | ..................... | ........................................................................ | ...... 29 |
|  |  | VER 16.06.26 / стр. | 2 из 37 |
| «АмплиСенс® HBV-FL» | – Набор реагентов для выявления ДНК вируса гепатита B (HBV) в клиническом материале методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с гибридизационно-флуоресцентной детекцией «АмплиСенс® HBV-FL» |
| ВКО | – внутренний контрольный образец |
| ГЭ | – геномный эквивалент (геном) |
| ДНК | – дезоксирибонуклеиновая кислота |
| К+ | – положительный контроль ПЦР |
| К– | – отрицательный контроль ПЦР |
| МЕ | – международная единица |
| МУ | – методические указания |
| ОК | – отрицательный контроль экстракции |
| ОКО | – отрицательный контрольный образец |
| ПК | – положительный контроль экстракции |
| ПКО | – положительный контрольный образец |
| ПЦР | – полимеразная цепная реакция |
| РУ | – регистрационное удостоверение |
| СанПиН | – санитарные правила и нормы |
| ФБУН ЦНИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора | – Федеральное бюджетное учреждение науки «Центральный научно-исследовательский институт эпидемиологии» Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека |
| Ct | – сycle threshold (пороговый цикл) |
| FL | – ПЦР с гибридизационно-флуоресцентной детекцией |
| FRT | – флуоресцентная детекция в режиме «реального времени» |
| HBV | – вирус гепатита В |
| HCV | – вирус гепатита С |
| HDV | – вирус гепатита D («Дельта») |
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
В настоящей инструкции применяются следующие
сокращения и обозначения:
НАЗНАЧЕНИЕ
Набор реагентов «АмплиСенс® HBV-FL» предназначен для
качественного определения ДНК вируса гепатита B (HBV) в
биологическом материале (плазма венозной крови) методом
ПЦР с гибридизационно-флуоресцентной детекцией продуктов
амплификации. Материалом для проведения ПЦР служат
пробы ДНК, экстрагированной из плазмы венозной крови.
Ограничения по применению медицинского изделия в
различных популяционных и демографических группах
отсутствуют.
Набор реагентов используется в клинической лабораторной
диагностике для исследования биологического материала с
целью выявления ДНК вируса гепатита В.
VER 16.06.26 / стр. 3 из 37
Потенциальные пользователи медицинского изделия: к
работе с набором реагентов допускаются только медицинские
работники, обученные методам молекулярной диагностики и
правилам работы в клинико-диагностической лаборатории в
установленном порядке.
ПОКАЗАНИЯ И ПРОТИВОПОКАЗАНИЯ К ПРИМЕНЕНИЮ
НАБОРА РЕАГЕНТОВ
Набор реагентов используется в клинической лабораторной
диагностике для исследования биологического материала с
целью выявления ДНК вируса гепатита В.
Противопоказания отсутствуют, за исключением случаев,
когда взятие материала не может быть осуществлено по
медицинским показаниям.
ПРИНЦИП МЕТОДА
Принцип тестирования основывается на экстракции ДНК из
образцов исследуемого материала совместно с экзогенным
внутренним контрольным образцом (ВКО) и одновременной
амплификации участков ДНК выявляемого вируса и ДНК ВКО с
гибридизационно-флуоресцентной детекцией. ВКО позволяет
контролировать все этапы ПЦР-исследования для каждого
образца и оценивать влияние ингибиторов на результаты ПЦР-
исследования.
Амплификация участка ДНК проводится при помощи
специфичных к этому участку праймеров и фермента Taq-
полимеразы. В составе реакционной смеси присутствуют
флуоресцентно-меченые олигонуклеотиды, комплементарные
участкам амплифицируемых ДНК-мишеней, что позволяет
регистрировать накопление специфического продукта
амплификации путем измерения интенсивности
флуоресцентного сигнала с помощью амплификатора с
системой детекции в режиме «реального времени».
Набор реагентов содержит систему защиты от контаминации
ампликонами за счет применения фермента урацил-ДНК-
гликозилазы (УДГ) и дезоксиуридинтрифосфата.
На этапе амплификации одновременно в одной пробирке
проводится амплификация двух ДНК-мишеней. Результаты
амплификации регистрируются по каналам флуоресцентной
детекции, указанным в табл. 1:
VER 16.06.26 / стр. 4 из 37
|  | Канал для флуорофора |  |  | FAM |  | JOE |  |
| ДНК-мишень |  |  | ДНК ВКО |  | ДНК HBV |  |  |
| Область амплификации |  |  | искусственная нуклеотидная последовательность |  | gene C |  |  |
Таблица 1
ФОРМЫ КОМПЛЕКТАЦИИ
Форма 4: «ПЦР-комплект» вариант FRT
Примечание – Формы 1, 2, 3 удалены.
Форма 4 рассчитана на проведение 112 реакций
амплификации, включая контроли, и используется для
проведения амплификации ДНК с гибридизационно-
флуоресцентной детекцией в режиме «реального времени».
Для проведения полного ПЦР-исследования необходимо
использовать комплекты реагентов для экстракции ДНК.
АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
Для данного набора реагентов применимы следующие
характеристики:
Таблица 2
Аналитическая чувствительность (предел обнаружения)
Объём Комплект Аналитическая
Вид
образца для Комплект для для чувствительность
исследуемого
экстракции, экстракции ДНК амплифи- (предел
материала
мкл кации обнаружения), ME/мл
«РИБО-сорб» 100
Плазма 100 «ПЦР-
«РИБО-преп» 50
венозной комплект»
200 «МАГНО-сорб» 50
крови вариант FRT
1000 «МАГНО-сорб» 10
Данные значения характеристик достигаются при
соблюдении правил, указанных в разделе «Взятие,
транспортирование и хранение исследуемого материала».
Аналитическая специфичность
Набор реагентов обнаруживает ДНК HBV.
Аналитическая специфичность набора реагентов доказана
при исследовании ДНК/РНК следующих микроорганизмов, а
также геномной ДНК человека:
 HBV (вирус гепатита B) в концентрации не менее
1х103 копий/мл;
 HAV (вирус гепатита А), HCV (вирус гепатита С), HDV (вирус
гепатита D), ВИЧ-1 (вирус иммунодефицита человека
1 типа), CMV (цитомегаловирус), EBV (вирус Эпштейна-
VER 16.06.26 / стр. 5 из 37
Барр), HSV-1,2 (вирус простого герпеса типы 1, 2), VZV
(вирус ветряной оспы), HHV-6 (вирус герпеса человека
6 типа), Parvovirus B19 (парвовирус В19), HAdV-2
(аденовирус 2 типа) в концентрации не менее
1х105 копий/мл;
 Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Streptococcus
pyogenes, Streptococcus agalactiae в концентрации не менее
1х105 ГЭ/мл;
 ДНК человека в концентрации 1 мг/мл.
При тестировании образцов ДНК/РНК вышеперечисленных
микроорганизмов и ДНК человека неспецифических реакций
выявлено не было.
Информация об интерферирующих веществах указана в
разделе «Интерферирующие вещества и ограничения по
использованию проб исследуемого материала».
Повторяемость и воспроизводимость исследования
Повторяемость и воспроизводимость исследования были
определены путем тестирования положительных и
отрицательных модельных образцов. Положительные образцы
представляли собой разведения стандартного образца
предприятия, содержащие ДНК HBV в концентрации выше
предела обнаружения в негативной плазме венозной крови. В
качестве отрицательного образца была использована
негативная плазма венозной крови.
Условия повторяемости включали в себя тестирование в
одной и той же лаборатории, одним и тем же оператором, с
использованием одного и того же оборудования в пределах
короткого промежутка времени. Условия воспроизводимости –
тестирование в двух независимых лабораториях, разными
операторами, в разные дни, на различных приборах разных
серий набора реагентов. Результаты представлены в таблице 3.
Таблица 3
Повторяемость Воспроизводимость
Тип образцов Количество Совпадение Количество Совпадение
образцов результатов, % образцов результатов, %
Положительные 10 100 80 100
Отрицательные 10 100 80 100
ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
Для определения диагностических характеристик набора
VER 16.06.26 / стр. 6 из 37
реагентов были использованы:
 50 образцов плазмы венозной крови от доноров с
отсутствием маркеров вирусных гепатитов (HBsAg, anti-
HCV) и маркеров синдрома цитолиза (АЛТ, АСТ);
 50 образцов плазмы венозной крови пациентов с диагнозом
«хронический вирусный гепатит В». Наличие
ДНК HBV подтверждено при тестировании с помощью
набора реагентов на основе ПЦР, зарегистрированного в
Российской Федерации в установленном порядке.
Таблица 4
Результаты тестирования набора реагентов
«АмплиСенс® HBV-FL» в сравнении с референтным методом
Вид Результаты применения
Результаты применения
исследуемого референтного метода1
«АмплиСенс® HBV-FL»
материала положительных отрицательных
Всего положительных 50 0
Плазма
использовано
венозной крови отрицательных 0 50
100 образцов
Таблица 5
Диагностические характеристики набора реагентов
«АмплиСенс® HBV-FL»
Диагностическая Диагностическая
Вид исследуемого чувствительность2 специфичность3
материала (с доверительной (с доверительной
вероятностью 95 %) вероятностью 95 %)
Плазма венозной крови 100 (92,89 – 100) % 100 (92,89 – 100) %
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
Работа должна проводиться в лаборатории, выполняющей
молекулярно-биологические (ПЦР) исследования
биологического материала на наличие возбудителей
инфекционных болезней, с соблюдением СанПиН 3.3686-21
«Санитарно-эпидемиологические требования по профилактике
инфекционных болезней», СанПиН 2.1.3684-21 «Санитарно-
эпидемиологические требования к содержанию территорий
городских и сельских поселений, к водным объектам, питьевой
воде и питьевому водоснабжению, атмосферному воздуху,
почвам, жилым помещениям, эксплуатации производственных,
1 В качестве референтного метода использовался набор реагентов на основе ПЦР,
зарегистрированный в Российской Федерации в установленном порядке.
2 Относительная чувствительность в сравнении с использованным референтным методом.
3 Относительная специфичность в сравнении с использованным референтным методом.
VER 16.06.26 / стр. 7 из 37
общественных помещений, организации и проведению
санитарно-противоэпидемических (профилактических)
мероприятий» и МУ 1.3.2569-09 «Организация работы
лабораторий, использующих методы амплификации
нуклеиновых кислот при работе с материалом, содержащим
микроорганизмы I–IV групп патогенности».
Набор реагентов предназначен для одноразового
применения для проведения ПЦР-исследования указанного
количества проб (см. раздел «Формы комплектации»).
Набор реагентов готов к применению согласно данной
инструкции. Применять набор реагентов строго по назначению.
При работе необходимо всегда выполнять следующие
требования:
- Температура в помещении лаборатории должна быть от 20
до 28 °С, относительная влажность – от 15 до 75 %.
- Допускать к работе с набором реагентов только персонал,
обученный методам молекулярной диагностики и правилам
работы в клинико-диагностической лаборатории в
установленном порядке.
- Не использовать набор реагентов, если нарушена
внутренняя упаковка или внешний вид реагента не
соответствует описанию.
- Не использовать набор реагентов, если не соблюдались
условия транспортирования и хранения согласно
инструкции.
- Не использовать набор реагентов по истечении срока
годности.
- Использовать одноразовые неопудренные перчатки,
лабораторные халаты, защищать глаза во время работы с
образцами и реагентами. Тщательно вымыть руки по
окончании работы. Все операции проводятся только в
перчатках для исключения контакта с организмом человека.
- Избегать вдыхания паров, контакта с кожей, глазами и
слизистой оболочкой. Вреден при проглатывании. При
контакте немедленно промыть пораженное место водой, при
необходимости обратиться за медицинской помощью.
При использовании по назначению и соблюдении
вышеперечисленных мер предосторожности набор реагентов
безопасен.
VER 16.06.26 / стр. 8 из 37
При соблюдении условий транспортировки, эксплуатации и
хранения риски взрыва и возгорания отсутствуют.
Сведения о безопасности набора реагентов доступны по
запросу.
СВЕДЕНИЯ ОБ УТИЛИЗАЦИИ
Неиспользованные реагенты, реагенты с истекшим сроком
годности, использованные реагенты, упаковку4, биологический
материал, а также материалы, инструменты и предметы,
загрязненные биологическим материалом, следует удалять в
соответствии с требованиями СанПиН 2.1.3684-21 «Санитарно-
эпидемиологические требования к содержанию территорий
городских и сельских поселений, к водным объектам, питьевой
воде и питьевому водоснабжению, атмосферному воздуху,
почвам, жилым помещениям, эксплуатации производственных,
общественных помещений, организации и проведению
санитарно-противоэпидемических (профилактических)
мероприятий».
ВНИМАНИЕ! При удалении отходов после амплификации
(пробирок, содержащих продукты ПЦР) недопустимо
открывание пробирок и разбрызгивание содержимого,
поскольку это может привести к контаминации продуктами ПЦР
лабораторной зоны, оборудования и реагентов.
ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ МАТЕРИАЛЫ И ОБОРУДОВАНИЕ
Перечисленные ниже дополнительные материалы и
оборудование, относящиеся к категории медицинских изделий
и зарегистрированные на территории Российской Федерации
или Евразийского экономического союза, не имеют
ограничений по совместному использованию с данным
набором реагентов, кроме позиций, для которых указаны
конкретные примеры.
Взятие исследуемого материала
1. Вакуумная система забора крови типа Vacuette.
2. Центрифуга медицинская с принадлежностями.
3. Одноразовые полипропиленовые плотно закрывающиеся
или завинчивающиеся пробирки объемом 2 мл.
4 Неиспользованные реагенты, реагенты с истекшим сроком годности, использованные
реагенты, упаковка относятся к классу опасности медицинских отходов Г.
VER 16.06.26 / стр. 9 из 37
Экстракция ДНК из исследуемых образцов
4. Комплект реагентов для экстракции ДНК (например,
«РИБО-сорб» (РУ № ФСР 2008/03993), «РИБО-преп»
(РУ № ФСР 2008/03147), «МАГНО-сорб» вариант 100-200
или вариант 100-1000 (РУ № ФСР 2010/07265)).
5. Дополнительные материалы и оборудование для экстракции
ДНК – согласно инструкции к комплекту реагентов для
экстракции ДНК.
При использовании автоматических станций для экстракции
нуклеиновых кислот:
6. Автоматическая станция для экстракции НК «открытого
типа» – согласно инструкции к комплекту реагентов для
экстракции ДНК/РНК, пипетирующая (например, MicroLab
STARlet (Hamilton Bonaduz AG («Гамильтон Бонадуц AГ»),
Швейцария (РУ № РЗН 2018/6981))) или
магнитоперемешивающая (например, KingFisher Flex
(Thermo Fisher Scientific Oy («Термо Фишер Сайентифик
Ой»), Финляндия (РУ № ФСЗ 2009/05562)), Auto-Pure 96,
Auto-Pure 24 (Hangzhou Allsheng Instruments Co., Ltd. (ООО
«Ханчжоуская компания инструментов Аошен, Лтд.»), Китай
(РУ № РЗН 2022/16430))).
7. Набор необходимых расходных материалов к используемой
автоматической станции в соответствии с рекомендациями
производителя.
Амплификация с гибридизационно-флуоресцентной
детекцией продуктов амплификации
8. Одноразовые наконечники для дозаторов переменного
объема с фильтром до 100, до 200 мкл.
9. Штативы для пробирок объемом 0,2 мл или 0,1 мл.
10. Бокс абактериальной воздушной среды (ПЦР-бокс, УФ-бокс)
или бокс микробиологической безопасности II класса
защиты.
11. Центрифуга-вортекс.
12. Автоматические дозаторы переменного объема.
13. Одноразовые полипропиленовые пробирки:
а) завинчивающиеся или плотно закрывающиеся пробирки
объемом 1,5 мл – для приготовления реакционной смеси;
б) тонкостенные пробирки для ПЦР объемом 0,2 мл с
VER 16.06.26 / стр. 10 из 37
выпуклой или плоской оптически прозрачной крышкой
или пробирки объемом 0,2 мл в стрипах по 8 шт. с
прозрачными крышками – при использовании прибора
планшетного типа;
в) тонкостенные пробирки для ПЦР объемом 0,2 мл с
плоской крышкой или пробирки для ПЦР к Rotor-Gene
объемом 0,1 мл в стрипах по 4 шт. с крышками – при
использовании прибора роторного типа.
14. Программируемый амплификатор с системой детекции
флуоресцентного сигнала в режиме «реального времени»
(например, Rotor-Gene 3000/6000 (Corbett Research,
Австралия), Rotor-Gene Q (QIAGEN GmbH («Киаген ГмбХ»),
Германия (РУ № ФСЗ 2010/07595)), CFX96 (Bio-Rad
Laboratories, Inc. («Био-Рад Лабораториз, Инк.»), США
(РУ № ФСЗ 2008/03399)), ДТ-96 / «ДТпрайм» (ООО «НПО
ДНК-Технология», Россия (РУ № ФСР 2007/01250,
РУ № ФСР 2011/10229)).
15. ПО для запуска амплификации и автоматической обработки
результатов – ПО ARTS (см. руководство оператора ПО
AmpliSens® HBV-FL Soft).
16. Холодильник от 2 до 8 °С с морозильной камерой от
минус 24 до минус 16 °С.
17. Отдельный халат, шапочка, обувь и одноразовые перчатки.
18. Емкость для сброса наконечников.
ВЗЯТИЕ, ТРАНСПОРТИРОВАНИЕ И ХРАНЕНИЕ
ИССЛЕДУЕМОГО МАТЕРИАЛА
Материалом для исследования служит плазма венозной
крови.
Взятие венозной крови проводится утром натощак или через
3 часа после приема пищи из локтевой вены одноразовой
иглой диаметром 0,8–1,1 мм в пробирку с ЭДТА (К ЭДТА или
2
К ЭДТА) (конечная концентрация в крови 1,2-2,0 мг/мл) в
3
качестве антикоагулянта. Закрытую пробирку с кровью
несколько раз переворачивают вверх дном, чтобы кровь в
пробирке тщательно перемешалась с антикоагулянтом (в
противном случае кровь свернется, и экстракция ДНК станет
невозможной), и хранят при температуре от 2 до 8 °С не более
6 ч. Пробирку с цельной кровью центрифугируют 20 мин при
VER 16.06.26 / стр. 11 из 37
800-1600 g при комнатной температуре. Полученную плазму
переносят в количестве не менее 1 мл отдельными
наконечниками с фильтром в стерильные пробирки типа
«Эппендорф» объемом 2 мл.
Допускается хранение образцов плазмы венозной крови до
проведения ПЦР-исследования:
 при температуре от 2 до 8 °С – в течение 3 суток;
 при температуре от минус 24 до минус 16 °С – в течение
года;
 при температуре не выше минус 68 °С – длительно.
Допускается однократное замораживание-оттаивание
материала.
Допускается транспортирование плазмы венозной крови при
температуре от 2 до 8 °С не более 3 суток.
Допускается использование сыворотки крови, однако
диагностическая чувствительность ввиду осаждения вирусных
частиц при ретракции сгустка может быть существенно
снижена. Хранить сыворотку можно не более 3 суток при
температуре от 2 до 8 °С и длительно – при температуре не
выше минус 68 °С.
ПОДГОТОВКА ИССЛЕДУЕМОГО МАТЕРИАЛА К
ЭКСТРАКЦИИ ДНК
Образцы плазмы венозной крови не требуют
предварительной подготовки.
ИНТЕРФЕРИРУЮЩИЕ ВЕЩЕСТВА И ОГРАНИЧЕНИЯ ПО
ИСПОЛЬЗОВАНИЮ ПРОБ ИССЛЕДУЕМОГО МАТЕРИАЛА
Для контроля эффективности экстракции ДНК и реакции
амплификации в наборе реагентов предусмотрено
использование внутреннего контрольного образца (ВКО STI-87),
который добавляется в каждый биологический образец на
этапе экстракции нуклеиновых кислот. По окончании реакции
амплификации наличие сигнала, свидетельствующего о
накоплении фрагментов ДНК ВКО STI-87, говорит о
достаточной эффективности экстракции нуклеиновых кислот и
отсутствии ингибиторов ПЦР.
Ограничения по использованию проб
Непригодными для исследования являются:
VER 16.06.26 / стр. 12 из 37
| п | Вид | о | Потенциальный интерферент | Протестированная концентрация в образце | Наличие интерференции |
|  | отенциальног |  |  |  |  |
|  | интерферента |  |  |  |  |
| Эндогенные вещества |  |  | Гемоглобин | 160 г/л (верхняя граница нормы) | Не обнаружено |
|  |  |  |  | 250 г/л |  |
|  |  |  | Триглицериды | 3,7 ммоль/л (верхняя граница нормы) | Не обнаружено |
|  |  |  |  | 37 ммоль/л |  |
|  |  |  | Билирубин | 21 мкмоль/л (верхняя граница нормы) | Не обнаружено |
|  |  |  |  | 210 мкмоль/л |  |
|  |  |  | Белок | 85 г/л (верхняя граница нормы) | Не обнаружено |
|  |  |  |  | 120 г/л |  |
| Экзогенные вещества |  |  | Лития гепарин5 | 12 МЕ/мл | Обнаружено |
|  |  |  | Калий ЭДТА3 | 2 мг/мл | Не обнаружено |
 образцы плазмы венозной крови с гемолизом;
 образцы плазмы венозной крови, подвергшиеся
многократному замораживанию-оттаиванию;
 образцы венозной крови, взятой в пробирки с гепарином в
качестве антикоагулянта.
Потенциально интерферирующие вещества
Для оценки потенциальной интерференции были выбраны
эндогенные и экзогенные вещества, которые могут
присутствовать в биологическом материале, используемом для
исследования (см. табл. 6).
Были протестированы модельные образцы плазмы венозной
крови без добавления и с добавлением потенциально
интерферирующих веществ. Концентрация каждого
потенциально интерферирующего вещества указана в табл. 6.
Модельные образцы плазмы венозной крови содержали
стандартный образец предприятия с конечной концентрацией
ДНК HBV 500 МЕ/мл.
Таблица 6
5 В соответствии с ГОСТ Р 53079.4-2008 (Технологии лабораторные клинические.
Обеспечение качества клинических лабораторных исследований. Часть 4. Правила ведения
преаналитического этапа) калия ЭДТА используют в концентрации от 1,2 до 2,0 мг/мл, лития
гепарин – в концентрации от 12 до 30 МЕ/мл.
VER 16.06.26 / стр. 13 из 37
| Реагент | Описание |  | Объем, |  | К | оличество | , |
|  |  |  | мл |  |  | шт. |  |
| ПЦР-смесь-1-FL HBV | Прозрачная жидкость от бесцветного до светло-лилового цвета | 0,3 |  |  | 4 |  |  |
| ПЦР-буфер-B | Прозрачная бесцветная жидкость | 0,2 |  |  | 4 |  |  |
| Полимераза (TaqF) | Прозрачная бесцветная жидкость | 0,02 |  |  | 4 |  |  |
| KB2 HBV | Прозрачная бесцветная жидкость | 0,1 |  |  | 4 |  |  |
| – K | Прозрачная бесцветная жидкость | 0,2 |  |  | 4 |  |  |
| ОКО | Прозрачная бесцветная жидкость | 1,2 |  |  | 4 |  |  |
| ПКO-1-HBV | Прозрачная бесцветная жидкость | 0,06 |  |  | 4 |  |  |
| ВКО STI-87 | Прозрачная бесцветная жидкость | 0,28 |  |  | 4 |  |  |
СОСТАВ
СОСТАВ
«ПЦР-комплект» вариант FRT – комплект реагентов для
амплификации участка ДНК вируса гепатита B (HBV) с
гибридизационно-флуоресцентной детекцией в режиме
«реального времени» – включает:
Программное обеспечение на электронном носителе или на
сайте Изготовителя (www.amplisens.ru) – AmpliSens® HBV-FL
Soft (1 шт.), руководство оператора (1 шт.).
Эксплуатационная документация на бумажном носителе и на
сайте Изготовителя (www.amplisens.ru) – инструкция по
применению (1 шт.), паспорт качества (1 шт.), вкладыш (2 шт.),
краткое руководство (1 шт.).
VER 16.06.26 / стр. 14 из 37
ПРОВЕДЕНИЕ ПЦР-ИССЛЕДОВАНИЯ
ПРОВЕДЕНИЕ ПЦР-ИССЛЕДОВАНИЯ
ПЦР-исследование состоит из следующих этапов:
 экстракция ДНК из исследуемых образцов,
 амплификация ДНК c гибридизационно-флуоресцентной
детекцией продуктов амплификации в режиме «реального
времени»,
 анализ и интерпретация результатов.
ЭКСТРАКЦИЯ ДНК ИЗ ИССЛЕДУЕМЫХ ОБРАЗЦОВ
ВНИМАНИЕ! При работе с ДНК необходимо использовать
только одноразовые стерильные пластиковые расходные
материалы, имеющие специальную маркировку RNase-free,
DNase-free.
Для экстракции ДНК используются комплекты реагентов:
 «РИБО-сорб» в соответствии с Приложением А;
 «РИБО-преп» в соответствии с инструкцией к комплекту
реагентов для экстракции;
 «МАГНО-сорб» вариант 100-200 или вариант 100-1000 в
соответствии с Приложением Б.
ВНИМАНИЕ! Протоколы экстракции ДНК комплектами
реагентов «РИБО-сорб» и «МАГНО-сорб» вариант 100-200 /
вариант 100-1000 для набора реагентов «АмплиСенс® HBV-FL»
отличаются от протоколов экстракции ДНК, используемых
совместно с другими наборами реагентов производства ФБУН
ЦНИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора.
Объемы реагентов и образцов при экстракции с помощью
комплекта реагентов «РИБО-преп»:
Экстракция ДНК из каждого исследуемого образца и
контролей проводится в присутствии внутреннего контрольного
образца – ВКО STI-87.
Объем ВКО STI-87 – 10 мкл в каждую пробирку.
Объем исследуемого образца – 100 мкл.
В пробирку отрицательного контроля экстракции (ОК) внести
100 мкл ОКО.
В пробирку положительного контроля экстракции (ПК) внести
90 мкл ОКО и 10 мкл ПКО-1-HBV.
Объем элюции – 50 мкл.
ДНК-пробы могут храниться в течение 1 недели при
температуре от 2 до 8 °С. Для длительного хранения препарата
VER 16.06.26 / стр. 15 из 37
ПРОВЕДЕНИЕ ПЦР-ИССЛЕДОВАНИЯ
необходимо, не захватывая сорбент, перенести надосадочную
жидкость в стерильную пробирку и хранить при от минус 24 до
минус 16 °С в течение года.
АМПЛИФИКАЦИЯ С ДЕТЕКЦИЕЙ В РЕЖИМЕ «РЕАЛЬНОГО
ВРЕМЕНИ»
ВНИМАНИЕ! При работе с ДНК необходимо использовать
только одноразовые стерильные пластиковые расходные
материалы, имеющие специальную маркировку RNase-free,
DNase-free.
Выбор пробирок для амплификации зависит от
используемого амплификатора с системой детекции в
режиме реального времени.
Для внесения в пробирки реагентов, проб ДНК и
контрольных образцов используются одноразовые
наконечники с фильтрами.
А. Подготовка проб для амплификации
Общий объем реакционной смеси – 25 мкл, включая объем
пробы ДНК – 10 мкл.
1. Рассчитать количество каждого реагента, требующееся для
приготовления реакционной смеси. На одну реакцию
требуется 10 мкл ПЦР-смеси-1-FL HBV, 5 мкл ПЦР-
буфера-В и 0,5 мкл Полимеразы (TaqF). Смесь готовить на
общее число исследуемых и контрольных образцов
(количество контрольных образцов см. в п.7) плюс запас на
одну реакцию.
ВНИМАНИЕ! Компоненты реакционной смеси следует
смешивать непосредственно перед проведением ПЦР.
2. Разморозить все реагенты ПЦР-комплекта, тщательно
перемешать на вортексе и осадить капли кратковременным
центрифугированием.
3. В отдельной пробирке подготовить реакционную смесь.
Смешать необходимое количество ПЦР-смеси-1-FL HBV,
ПЦР-буфера-В и Полимеразы (TaqF). Тщательно
перемешать смесь на вортексе и осадить капли с крышки
пробирки кратковременным центрифугированием.
Приготовленная смесь не хранится.
4. Отобрать необходимое количество пробирок для
амплификации с учетом количества исследуемых и
VER 16.06.26 / стр. 16 из 37
ПРОВЕДЕНИЕ ПЦР-ИССЛЕДОВАНИЯ
контрольных образцов (см. табл. 7).
5. Внести в каждую пробирку по 15 мкл приготовленной
реакционной смеси. Неиспользованные остатки
реакционной смеси выбросить.
6. Используя наконечник с фильтром, в подготовленные
пробирки внести по 10 мкл проб ДНК, полученных в
результате экстракции из исследуемых и контрольных
образцов.
ВНИМАНИЕ! Содержимое пробирок необходимо тщательно
перемешать пипетированием, не допуская появления
пузырьков воздуха.
ВНИМАНИЕ! При добавлении проб ДНК, экстрагированных с
помощью комплектов реагентов для проведения экстракции
методом сорбции на силикагеле или магнитной сепарации,
необходимо избегать попадания сорбента в реакционную
смесь.
7. Поставить контрольные реакции:
а) положительный контроль экстракции (ПК) – в
пробирку с реакционной смесью внести 10 мкл пробы
ДНК, экстрагированной из ПКО-1-HBV.
б) отрицательный контроль экстракции (ОК) – в пробирку
с реакционной смесью внести 10 мкл пробы ДНК,
экстрагированной из ОКО.
в) положительный контроль ПЦР (К+) – в пробирку с
реакционной смесью внести 10 мкл KB2 HBV.
ВНИМАНИЕ! При подозрении на возможную контаминацию
также необходима постановка отрицательного контроля ПЦР
(К–). Для этого в пробирку с реакционной смесью внести
10 мкл К–.
VER 16.06.26 / стр. 17 из 37
ПРОВЕДЕНИЕ ПЦР-ИССЛЕДОВАНИЯ
Таблица 7
Схема приготовления реакционных смесей
Объем реагентов на указанное количество
реакций
Объем реагента на одну
10,00 5,00 0,50
реакцию, мкл
Количество
Количество ПЦР-смесь-1-FL Полимераза
исследуемых ПЦР-буфер-В
реакций6 HBV (TaqF)
образцов
4 8 80 40 4,0
6 10 100 50 5,0
8 12 120 60 6,0
107 14 140 70 7,0
12 16 160 80 8,0
14 18 180 90 9,0
16 20 200 100 10,0
18 22 220 110 11,0
20 24 240 120 12,0
228 26 260 130 13,0
34 38 380 190 19,0
46 50 500 250 25,0
Б. Проведение амплификации с детекцией в режиме
«реального времени»
1. Установить пробирки в ячейки реакционного модуля
прибора. Рекомендуется:
а) перед постановкой в амплификатор планшетного типа
осадить капли со стенок пробирок на вортексе;
б) в случае неполной загрузки приборов планшетного типа
дополнительно установить пустые пробирки по краям
реакционного модуля амплификатора
2. Запустить программу амплификации:
а) либо с использованием ПО ARTS совместно с ПО
AmpliSens® HBV-FL Soft, согласно руководству оператора.
Примечание ― Детектирующий амплификатор должен быть
совместим с ПО ARTS.
б) либо в ручном режиме, запрограммировав
детектирующий амплификатор для выполнения
программы, указанной в табл. 8, согласно инструкции по
его применению.
6 Число исследуемых образцов + 2 контроля этапа экстракции ДНК + 1 контроль ПЦР + запас
на один образец (N+2+1+1, N- количество исследуемых образцов).
7 Панель из 12 проб на экстракцию.
8 Панель из 24 проб на экстракцию
VER 16.06.26 / стр. 18 из 37
| Цикл |  | 9 Приборы роторного типа |  |  |  |  |  |  |  | 10 Приборы планшетного типа |  |  |  |  |  |
|  | Темпе- ратура, °С |  | Время |  | Детекция |  | Кол-во циклов |  | Темпе- ратура, °С |  | Время | Детекция флуоресцентного сигнала по канатам для флуорофоров |  | Кол-во циклов |  |
|  |  |  |  |  | флуоресцентного |  |  |  |  |  |  |  |  |  |  |
|  |  |  |  |  | сигнала по канатам |  |  |  |  |  |  |  |  |  |  |
|  |  |  |  |  | для флуорофоров |  |  |  |  |  |  |  |  |  |  |
| 1 | 50 |  | 15 мин | – |  |  | 1 |  | 50 |  | 15 мин | – |  | 1 |  |
| 2 | 95 |  | 15 мин | – |  |  | 1 |  | 95 |  | 15 мин | – |  | 1 |  |
| 2 | 95 |  | 5 с | – |  |  | 5 |  | 95 |  | 5 с | – |  | 5 |  |
|  | 60 |  | 20 с | – |  |  |  |  | 60 |  | 20 с | – |  |  |  |
|  | 72 |  | 15 с | – |  |  |  |  | 72 |  | 15 с | – |  |  |  |
| 3 | 95 |  | 5 с | – |  |  | 40 |  | 95 |  | 5 с | – |  | 40 |  |
|  | 60 |  | 20 с | FAM, JOE |  |  |  |  | 60 |  | 30 с | FAM, JOE |  |  |  |
|  | 72 |  | 15 с | – |  |  |  |  | 72 |  | 15 с | – |  |  |  |
ПРОВЕДЕНИЕ ПЦР-ИССЛЕДОВАНИЯ
Таблица 8
Программа амплификации и детекции
флуоресцентного сигнала «АмплиСенс-2»
ВНИМАНИЕ! С использованием этой программы можно
одновременно проводить в одном приборе любое сочетание
тестов по единой программе (например, совместно с тестами
для HDV, генотипирования HCV и др.). В случае если в одном
приборе одновременно проводятся только тесты для
выявления ДНК HBV, можно удалить из данной программы
первый шаг (50 °С – 15 минут) для экономии времени.
В. Анализ и интерпретация результатов
ВНИМАНИЕ! Установление диагноза и назначение лечения
должны производиться врачом соответствующей
специализации.
Анализ и интерпретацию полученных результатов проводят
вручную с помощью ПО прибора, используемого для
проведения ПЦР c детекцией в режиме «реального времени»,
или в автоматическом режиме с помощью ПО ARTS совместно
с ПО AmpliSens® HBV-FL Soft. Порядок работы с ПО AmpliSens®
HBV-FL Soft описан в руководстве оператора.
Анализируют кривые накопления флуоресцентного сигнала,
свидетельствующего о накоплении продукта амплификации, по
двум каналам:
9 Например, Rotor-Gene 3000/6000 (Corbett Research, Австралия), Rotor-Gene Q (QIAGEN
GmbH, Германия).
10 Например, ДТ-96 / «ДТпрайм» (ООО «НПО ДНК-Технология», Россия), CFX96 (Bio-Rad
Laboratories, Inc., США).
VER 16.06.26 / стр. 19 из 37
|  | Значение порогового цикла по каналу для флуорофора (Сt) |  |  |  | Результат |
|  | FAM |  |  | JOE |  |
| определено меньше граничного |  |  | отсутствует или больше граничного |  | ДНК HBV НЕ обнаружена |
| определено или отсутствует |  |  | определено меньше граничного |  | ДНК HBV обнаружена |
| отсутствует или больше граничного |  |  | отсутствует или больше граничного |  | Невалидный* |
ПРОВЕДЕНИЕ ПЦР-ИССЛЕДОВАНИЯ
Таблица 9
Канал для флуорофора FAM JOE
Продукт амплификации ДНК ВКО ДНК HBV
Результаты интерпретируют на основании наличия (или
отсутствия) пересечения кривой флуоресценции S-образной
(сигмообразной) формы с установленной на соответствующем
уровне пороговой линией, что определяет наличие (или
отсутствие) для данной пробы ДНК значения порогового цикла
(Ct). При использовании ПО ARTS совместно с ПО AmpliSens®
HBV-FL Soft значения Ct определяются автоматически.
Результат для контролей этапов экстракции и ПЦР
должны соответствовать критериям, указанным в
таблице 10 и во вкладыше с настройками, прилагаемом к
набору реагентов.
Таблица 10
Результаты для контролей различных этапов
ПЦР-исследования
Контролируемый Значение порогового цикла по каналу для
Контроль этап ПЦР- флуорофора (Сt)
исследования FAM JOE
определено
ОК Экстракция ДНК отсутствует
меньше граничного
определено определено
ПК Экстракция ДНК
меньше граничного меньше граничного
определено определено
К+ ПЦР
меньше граничного меньше граничного
К– ПЦР отсутствует отсутствует
Принцип интерпретации результатов указан в таблице 11:
Таблица 11
Интерпретация результатов анализа исследуемых образцов
* В случае получения невалидного результата необходимо
провести повторное ПЦР-исследование соответствующего
исследуемого образца, начиная с этапа экстракции ДНК.
VER 16.06.26 / стр. 20 из 37
ПРОВЕДЕНИЕ ПЦР-ИССЛЕДОВАНИЯ
ВНИМАНИЕ! Граничные значения Ct указаны во вкладыше с
настройками, прилагаемом к набору реагентов.
При наличии отклонений результатов для контролей от
указанных выше, интерпретация ряда исследуемых образцов
невозможна (см. «Возможные ошибки»).
Возможные ошибки:
1. Для положительного контроля экстракции (ПК):
а) по каналу для флуорофора JOE значение порогового
цикла (Сt) отсутствует или превышает граничное
значение. Невозможна интерпретация результатов для
исследуемых образцов, в которых не обнаружена ДНК
HBV. Необходимо повторить ПЦР-исследование для
таких образцов, начиная с этапа экстракции ДНК.
б) по каналу для флуорофора FAM значение порогового
цикла (Сt) отсутствует или превышает граничное
значение. Невозможна интерпретация результатов для
исследуемых образцов. Необходимо повторить ПЦР-
исследование для всех образцов, начиная с этапа
экстракции ДНК.
2. Для положительного контроля ПЦР (К+):
а) по каналу для флуорофора JOE значение порогового
цикла (Сt) отсутствует или превышает граничное
значение. Невозможна интерпретация результатов для
исследуемых образцов, в которых не обнаружена ДНК
HBV. Необходимо повторить амплификацию для таких
образцов.
б) по каналу для флуорофора FAM значение порогового
цикла (Сt) отсутствует или превышает граничное
значение. Необходимо повторить ПЦР-исследование для
всех образцов, начиная с этапа экстракции ДНК.
3. Для отрицательного контроля экстракции (ОК):
а) по каналу для флуорофора JOE определено значение
порогового цикла (Ct). Вероятна контаминация
лаборатории продуктами амплификации или
контаминация реагентов / исследуемых образцов на
каком-либо этапе ПЦР-исследования. Невозможна
интерпретация результатов для образцов, в которых
обнаружена ДНК HBV. Необходимо предпринять меры по
выявлению и ликвидации источника контаминации и
VER 16.06.26 / стр. 21 из 37
ПРОВЕДЕНИЕ ПЦР-ИССЛЕДОВАНИЯ
повторить ПЦР-исследование для таких образцов,
начиная с этапа экстракции ДНК.
б) по каналу для флуорофора FAM значение порогового
цикла (Ct) отсутствует или превышает граничное
значение. Невозможна интерпретация результатов для
исследуемых образцов. Необходимо повторить ПЦР-
исследование для всех образцов, начиная с этапа
экстракции ДНК.
4. Для отрицательного контроля ПЦР (К–):
а) по каналу для флуорофора JOE определено значение
порогового цикла (Сt). Вероятна контаминация
лаборатории продуктами амплификации или кросс-
контаминация от пробы к пробе исследуемых образцов /
реагентов на каком-либо этапе ПЦР-исследования.
Невозможна интерпретация результатов для образцов, в
которых обнаружена ДНК HBV. Необходимо предпринять
меры по выявлению и ликвидации источника
контаминации и повторить амплификацию для таких
образцов.
б) по каналу для флуорофора FAM определено значение
порогового цикла (Сt). Вероятна контаминация
лаборатории продуктами амплификации или кросс-
контаминация исследуемых образцов / реагентов на
каком-либо этапе ПЦР-исследования. Необходимо
предпринять меры по выявлению и ликвидации
источника контаминации. Интерпретацию результатов
для исследуемых образцов проводить согласно
таблице 11.
VER 16.06.26 / стр. 22 из 37
СРОК ГОДНОСТИ. УСЛОВИЯ ТРАНСПОРТИРОВАНИЯ И
ХРАНЕНИЯ
Срок годности. 12 мес. Набор реагентов с истекшим сроком
годности применению не подлежит. Срок годности вскрытых
реагентов соответствует сроку годности, указанному на
этикетках для невскрытых реагентов.
Транспортирование.
Транспортирование проводить всеми видами крытых
транспортных средств в термоконтейнерах, содержащих
хладоэлементы, или авторефрижераторах.
Набор реагентов транспортировать при температуре от 2 до
8 °С не более 5 сут.
Хранение.
Реагенты после вскрытия хранить при той же температуре,
что до вскрытия.
Форма 4. «ПЦР-комплект» вариант FRT хранить в морозильной
камере при температуре от минус 24 до минус 16 °С. Не
допускается замораживание/оттаивание KB2 HBV, ПКО-1-HBV и
ВКО STI-87 более двух раз. После размораживания ПКО-1-HBV,
KB2 HBV и ВКО STI-87 хранить при температуре от 2 до 8 °С не
более 6 мес. ПЦР-смесь-1-FL HBV хранить в защищенном от
света месте.
Холодильные и морозильные камеры должны обеспечивать
регламентированный температурный режим.
VER 16.06.26 / стр. 23 из 37
ГАРАНТИЙНЫЕ ОБЯЗАТЕЛЬСТВА ИЗГОТОВИТЕЛЯ
Изготовитель гарантирует соответствие основных
параметров и характеристик набора реагентов, требованиям,
указанным в технической и эксплуатационной документации, в
течение указанного срока годности при соблюдении всех
условий транспортирования, хранения и применения.
Медицинское изделие техническому обслуживанию и
ремонту не подлежит.
Рекламации на качество набора реагентов направлять по
адресу 111123, г. Москва, ул. Новогиреевская, дом 3А,
e-mail: obtk@pcr.ru. Отзывы и предложения о продукции
АмплиСенс® вы можете оставить, заполнив анкету потребителя
на сайте: www.amplisens.ru.
При выявлении побочных действий, не указанных в
инструкции по применению набора реагентов, нежелательных
реакций при его использовании, фактов и обстоятельств,
создающих угрозу жизни и здоровью граждан и медицинских
работников при применении набора реагентов, рекомендуется
направить сообщение по адресу, указанному выше, и в
уполномоченную государственную регулирующую организацию
(в РФ – Федеральная служба по надзору в сфере
здравоохранения) в соответствии с действующим
законодательством.
VER 16.06.26 / стр. 24 из 37
СИМВОЛЫ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ В ПЕЧАТНОЙ ПРОДУКЦИИ
Номер по каталогу Осторожно
Содержимого достаточно для
Код партии
проведения <n> тестов
Медицинское изделие для
Использовать до
диагностики in vitro
Обратитесь к инструкции по
применению или к инструкции
Дата изменения
по применению в электронном
виде
Не допускать воздействия
Температурный диапазон
солнечного света
Верхняя граница
Дата изготовления
температурного диапазона
Изготовитель
VER 16.06.26 / стр. 25 из 37
ПРИЛОЖЕНИЕ А. «РИБО-сорб»
ПРИЛОЖЕНИЕ А
Экстракция ДНК из исследуемых образцов с
использованием комплекта реагентов «РИБО-сорб»
Порядок работы
1. Прогреть Лизирующий раствор и раствор для отмывки 1
(если они хранились при температуре от 2 до 8 °С) при
температуре 60 °С до полного растворения кристаллов.
2. Подготовить необходимое количество одноразовых
пробирок объемом 1,5 мл (включая контроли экстракции).
Промаркировать пробирки.
3. На дно каждой пробирки внести по 10 мкл ВКО STI-87.
4. В пробирки с ВКО внести по 450 мкл лизирующего
раствора.
При большом количестве образцов для облегчения
процедуры экстракции допускается смешивание в
отдельном одноразовом флаконе лизирующего раствора
и ВКО STI-87 (из расчета на один образец 450 мкл
лизирующего раствора и 10 мкл ВКО) с последующим
внесением по 450 мкл смеси в заранее подготовленные
пробирки объемом 1,5 мл.
5. В пробирки внести по 100 мкл исследуемых образцов,
используя для каждого образца отдельный наконечник с
фильтром.
6. В пробирку положительного контроля экстракции (ПК) с
лизирующим раствором и ВКО внести 90 мкл ОКО и
10 мкл ПКО-1-HBV.
7. В пробирку отрицательного контроля экстракции (ОК) с
лизирующим раствором и ВКО внести 100 мкл ОКО.
8. Закрыть крышки и перемешать на вортексе. Осадить капли
жидкости с крышек пробирок кратким центрифугированием.
9. Поместить пробирки с образцами и контролями в термостат
с температурой 60 °С на 10 мин. Осадить капли конденсата
с крышки кратким центрифугированием.
10. Тщательно ресуспендировать сорбент на вортексе. В
каждую пробирку отдельным наконечником добавить по
25 мкл ресуспендированного сорбента. Перемешать на
вортексе, оставить на 10 мин при комнатной температуре,
тщательно перемешивая каждые 2 мин.
11. Центрифугировать пробирки для осаждения сорбента на
VER 16.06.26 / стр. 26 из 37
ПРИЛОЖЕНИЕ А. «РИБО-сорб»
центрифуге при 7 тыс. g (например, 10 тыс. об/мин для
центрифуги MiniSpin, Eppendorf Manufacturing Corporation,
Германия)) в течение 1 мин.
12. Не захватывая осадок, удалить надосадочную жидкость,
используя вакуумный отсасыватель и отдельный наконечник
для каждой пробы.
13. Добавить в пробирки по 400 мкл раствора для отмывки 1.
Плотно закрыть крышки, перемешать на вортексе до
полного ресуспендирования сорбента. Центрифугировать
пробирки на центрифуге при 7 тыс. g в течение 1 мин.
14. Не захватывая осадок, удалить надосадочную жидкость,
используя вакуумный отсасыватель и отдельный наконечник
для каждой пробы.
15. Добавить в пробирки по 500 мкл раствора для отмывки 3.
Плотно закрыть крышки, перемешать на вортексе до
полного ресуспендирования сорбента. Центрифугировать
пробирки на центрифуге при 7 тыс. g в течение 1 мин.
16. Не захватывая осадок, удалить надосадочную жидкость,
используя вакуумный отсасыватель и отдельный наконечник
для каждой пробы.
17. Повторить отмывку раствором для отмывки 3, следуя
п. 15-16.
18. Добавить в пробирки по 400 мкл раствора для отмывки 4.
Плотно закрыть крышки, перемешать на вортексе до
полного ресуспендирования сорбента. Центрифугировать
пробирки на центрифуге при 7 тыс. g в течение 1 мин.
19. Не захватывая осадок, удалить надосадочную жидкость,
используя вакуумный отсасыватель и отдельный наконечник
для каждой пробы.
20. Поместить пробирки с открытыми крышками в термостат при
температуре 60 °С на 12-15 мин для подсушивания
сорбента.
21. Добавить в пробирки по 50 мкл РНК-буфера. Закрыть
пробирки и перемешать на вортексе. Поместить в термостат
при температуре 60 °С на 2-3 мин.
22. Перемешать на вортексе и осадить сорбент на центрифуге
при 12-13 тыс. g (например, 13,4 тыс. об/мин для
центрифуги MiniSpin, Eppendorf Manufacturing Corporation,
Германия)) в течение 1 мин. Надосадочная жидкость
VER 16.06.26 / стр. 27 из 37
ПРИЛОЖЕНИЕ А. «РИБО-сорб»
содержит очищенную ДНК.
Отбор очищенной ДНК для проведения ПЦР проводить
осторожно, не захватывая сорбент. Если сорбент взмутился,
необходимо осадить его на центрифуге при 12-13 тыс. g в
течение 1 мин.
ДНК-пробы могут храниться в течение 1 нед при температуре
от 2 до 8 °С. Для длительного хранения необходимо, не
захватывая сорбент, перенести надосадочную жидкость в
стерильную пробирку. Допускается хранение при температуре
от минус 24 до минус 16 °С в течение года.
VER 16.06.26 / стр. 28 из 37
ПРИЛОЖЕНИЕ Б. «МАГНО-сорб»
ПРИЛОЖЕНИЕ Б
Экстракция ДНК из исследуемых образцов с
использованием комплекта реагентов «МАГНО-сорб»
вариант 100-1000
ВНИМАНИЕ! Лизирующий раствор МАГНО-сорб имеет резкий
запах. Работу проводить в ламинарном боксе.
A. Порядок работы при использовании магнитных
штативов вручную
А1. Экстракция из 1000 мкл образца плазмы венозной крови
1. Лизирующий раствор МАГНО-сорб и раствор для отмывки 5
прогреть при температуре 60 °С до полного растворения
кристаллов.
2. Подготовить необходимое количество одноразовых
пробирок объемом 5 мл и одноразовых крышек (включая
контроли экстракции), промаркировать их.
3. В отдельной пробирке смешать из расчета на один образец:
10 мкл ВКО STI-87, 20 мкл компонента А и 30 мкл
магнетизированной силики. Смесь готовить на общее
число исследуемых и контрольных образцов, учитывая
запас, например:
Количество образцов ВКО STI-87, Компонент А, Магнетизированная
для экстракции ДНК мкл мкл силика, мкл
6 70 140 210
12 130 260 390
18 190 380 570
24 250 500 750
4. Внести в пробирки объемом 5 мл по 60 мкл тщательно
ресуспендированной смеси ВКО STI-87, компонента А и
магнетизированной силики.
5. Внести в пробирки по 2,6 мл лизирующего раствора
МАГНО-сорб.
6. Добавить в пробирки по 1000 мкл исследуемых образцов,
используя для каждого образца отдельный наконечник с
фильтром, перемешать пипетированием.
7. В пробирку положительного контроля экстракции (ПК-1)
внести 90 мкл ОКО и 10 мкл ПКО-1-HBV. Перемешать
пипетированием.
8. В пробирку отрицательного контроля экстракции (ОК)
добавить 100 мкл ОКО, перемешать пипетированием.
9. Поместить пробирки в термостат с температурой 85 °С на
10 мин.
VER 16.06.26 / стр. 29 из 37
ПРИЛОЖЕНИЕ Б. «МАГНО-сорб»
ВНИМАНИЕ! Пробирки не закрывать крышками во избежание
их самопроизвольного открытия в процессе нагревания
содержимого пробирок.
10. Осторожно перенести пробирки в магнитный штатив на
6 мин.
ВНИМАНИЕ! Поверхность пробирок может быть горячей из-за
нагревания содержимого пробирок.
11. Не извлекая пробирки из магнитного штатива, осторожно
удалить надосадочную жидкость по внутренней стенке
пробирки, используя вакуумный отсасыватель и отдельный
наконечник без фильтра на 1000 мкл для каждой пробы.
Перенести пробирки в обычный штатив.
12. Добавить в пробирки по 700 мкл раствора для отмывки 5,
пробирки закрыть крышкой.
13. Отобрать необходимое количество одноразовых пробирок
объемом 1,5 мл (включая контроль экстракции) и
промаркировать их.
14. Смыть магнетизированную силику со стенок осторожным
перемешиванием на вортексе, а затем пипетированием
перенести всю жидкость в приготовленные пробирки
объемом 1,5 мл.
15. Поместить пробирки объемом 1,5 мл в магнитный штатив на
2 мин.
Примечание – Необходимо открыть крышки до постановки в
магнитный штатив, если в магнитном штативе их
неудобно/невозможно открыть без взмучивания сорбента.
16. Осторожно удалить надосадочную жидкость как описано
выше (п. 11).
17. Добавить в пробирки по 700 мкл раствора для отмывки 5,
закрыть крышки.
Примечание – Необходимо поставить пробирки в обычный
штатив, если в магнитном штативе неудобно/невозможно
плотно закрыть крышки.
18. Ресуспендировать магнетизированную силику
перемешиванием на вортексе, затем осадить капли кратким
центрифугированием, повторить пп. 15-16.
19. Аналогично провести одну отмывку, используя 700 мкл
раствора для отмывки 6.
20. Добавить в пробирки по 200 мкл раствора для отмывки 7,
VER 16.06.26 / стр. 30 из 37
ПРИЛОЖЕНИЕ Б. «МАГНО-сорб»
плотно закрыть крышки, ресуспендировать
магнетизированную силику перемешиванием на вортексе, а
затем осадить капли кратким центрифугированием.
21. Поместить пробирки в магнитный штатив на 1 мин, затем
осторожно удалить надосадочную жидкость.
Примечание – Необходимо открыть крышки до постановки в
магнитный штатив, если в магнитном штативе их
неудобно/невозможно открыть без взмучивания сорбента.
22. Высушить магнетизированную силику, оставив пробирки с
открытыми крышками на магнитном штативе в течение 10-
20 мин.
23. Добавить в пробирки по 70 мкл буфера для элюции А,
закрыть крышки, перемешать на вортексе.
24. Поместить пробирки в термостат с температурой 60 °С на
5 мин, через 2 мин перемешать на вортексе.
25. Осадить капли кратким центрифугированием и переставить
пробирки в магнитный штатив на 2 мин. Надосадочная
жидкость содержит очищенные ДНК.
ВНИМАНИЕ! Отбор очищенных ДНК для проведения ПЦР
осуществляется без снятия пробирок с магнитного
штатива.
ДНК-пробы могут храниться в течение 1 нед при температуре
от 2 до 8 °С. Для длительного хранения необходимо, не
захватывая сорбент, перенести надосадочную жидкость в
стерильную пробирку. Допускается хранение при температуре
от минус 24 до минус 16 °С в течение 1 мес, при температуре
не выше минус 68 °С – в течение года.
А2. Экстракция из 200 мкл образца плазмы венозной крови
1. Лизирующий раствор МАГНО-сорб и раствор для
отмывки 5 прогреть при температуре 60 °С до полного
растворения кристаллов.
2. Подготовить необходимое количество одноразовых
пробирок объемом 1,5 мл (включая контроли экстракции),
промаркировать их.
3. В отдельной пробирке смешать из расчета на один образец:
10 мкл ВКО STI-87, 10 мкл компонента А и 20 мкл
магнетизированной силики. Смесь готовить на общее
число исследуемых и контрольных образцов, учитывая
запас, например:
VER 16.06.26 / стр. 31 из 37
ПРИЛОЖЕНИЕ Б. «МАГНО-сорб»
Количество образцов ВКО STI-87, Компонент А, Магнетизированная
для экстракции ДНК мкл мкл силика, мкл
6 70 70 140
12 130 130 260
18 190 190 380
24 250 250 500
4. Внести в пробирки по 40 мкл тщательно
ресуспендированной смеси ВКО STI-87, компонента А и
магнетизированной силики.
5. Внести в пробирки 900 мкл лизирующего раствора
МАГНО-сорб.
6. Добавить в пробирки по 200 мкл исследуемых образцов,
используя для каждого образца отдельный наконечник с
фильтром, и перемешать на вортексе, осадить капли
жидкости с крышек и стенок пробирок кратким
центрифугированием, открыть крышки.
7. В пробирку положительного контроля экстракции (ПК-1)
внести 90 мкл ОКО и 10 мкл ПКО-1-HBV. Перемешать
пробирки на вортексе, осадить капли жидкости с крышек и
стенок пробирок кратким центрифугированием, открыть
крышки.
8. В пробирку отрицательного контроля экстракции (ОК) внести
100 мкл ОКО. Перемешать на вортексе, осадить капли
жидкости с крышек и стенок пробирок кратким
центрифугированием, открыть крышки.
9. Поместить пробирки в термостат с температурой 85 °С на
10 мин.
ВНИМАНИЕ! Пробирки не закрывать крышками во избежание
их самопроизвольного открытия в процессе нагревания
содержимого пробирок.
10. Осторожно перенести пробирки в обычный штатив
(поверхность пробирок может быть горячей из-за
нагревания содержимого пробирок). Дать остыть в течение
2 мин. Закрыть пробирки крышками. Перемешать, осадить
капли жидкости с крышек и стенок пробирок кратким
центрифугированием. Поместить пробирки в магнитный
штатив на 2 мин.
Примечание – Необходимо открыть крышки до постановки в
магнитный штатив, если в магнитном штативе их
неудобно/невозможно открыть без взмучивания сорбента.
VER 16.06.26 / стр. 32 из 37
ПРИЛОЖЕНИЕ Б. «МАГНО-сорб»
11. Не извлекая пробирки из магнитного штатива, осторожно
удалить надосадочную жидкость по внутренней стенке
пробирки, используя вакуумный отсасыватель и отдельный
наконечник без фильтра для каждой пробы.
12. Добавить в пробирки по 700 мкл раствора для отмывки 5,
закрыть крышки.
Примечание – Необходимо поставить пробирки в обычный
штатив, если в магнитном штативе неудобно/невозможно
плотно закрыть крышки.
13. Ресуспендировать магнетизированную силику
перемешиванием на вортексе, а затем осадить капли
кратким центрифугированием.
14. Поместить пробирки в магнитный штатив на 2 мин.
Примечание – Необходимо открыть крышки до постановки в
магнитный штатив, если в магнитном штативе их
неудобно/невозможно открыть без взмучивания сорбента.
15. Осторожно удалить надосадочную жидкость как описано
выше (п. 11).
16. Повторить отмывку 700 мкл раствора для отмывки 5
(пп. 12-15).
17. Аналогично провести одну отмывку 700 мкл раствора для
отмывки 6.
18. Добавить в пробирки по 200 мкл раствора для отмывки 7,
перемешать на вортексе, а затем осадить капли кратким
центрифугированием.
19. Поместить пробирки в магнитный штатив на 1 мин, затем
открыть крышки, осторожно удалить надосадочную
жидкость.
Примечание – Необходимо открыть крышки до постановки в
магнитный штатив, если в магнитном штативе их
неудобно/невозможно открыть без взмучивания сорбента.
20. Высушить магнетизированную силику, оставив пробирки с
открытыми крышками на магнитном штативе в течение 10-
20 мин.
21. Добавить в пробирки по 70 мкл буфера для элюции,
закрыть крышки, перемешать на вортексе.
22. Поместить пробирки в термостат с температурой 60 °С на
5 мин, через 2 мин перемешать на вортексе.
23. Осадить капли кратким центрифугированием и переставить
VER 16.06.26 / стр. 33 из 37
ПРИЛОЖЕНИЕ Б. «МАГНО-сорб»
пробирки в магнитный штатив на 2 мин. Надосадочная
жидкость содержит очищенные ДНК.
ВНИМАНИЕ! Отбор очищенных ДНК для проведения ПЦР
осуществляется без снятия пробирок с магнитного
штатива.
ДНК-пробы могут храниться в течение 1 нед при температуре
от 2 до 8 °С. Для длительного хранения необходимо, не
захватывая сорбент, перенести надосадочную жидкость в
стерильную пробирку и хранить при от минус 24 до минус 16 °С
в течение года.
Б. Экстракция нуклеиновых кислот с помощью
автоматических станций
Экстракция нуклеиновых кислот проводится в соответствии с
инструкцией по эксплуатации автоматических станций и с
использованием соответствующего протокола экстракции.
ВНИМАНИЕ! Протокол экстракции для автоматической станции
содержит специфические параметры, недоступные при
экстракции вручную.
Б1. Экстракция из 200 или 1000 мкл образца плазмы
венозной крови при использовании пипетирующих
станций
ВНИМАНИЕ! Лизирующий раствор МАГНО-сорб имеет резкий
запах. Работу проводить в ламинарном боксе.
Объем образцов, загружаемых на борт пипетирующей
автоматической станции, должен быть увеличен (с учетом
запаса):
– исследуемые образцы – до 1200 мкл (при экстракции из
1000 мкл) и до 300 мкл (при экстракции из 200 мкл);
– положительные контроли экстракции – до 150 мкл (135 мкл
ОКО и 15 мкл ПКО-1-HBV);
– отрицательный контроль экстракции – до 150 мкл ОКО.
Объем ВКО STI-87 на каждый образец – 10 мкл.
Рекомендуемый объем элюции – 100 мкл.
Б2. Экстракция из 1000 мкл образца плазмы венозной
крови при использовании магнитоперемешивающих
станций
Для экстракции следует использовать только протокол,
расположенный на сайте amplisens.ru.
VER 16.06.26 / стр. 34 из 37
ПРИЛОЖЕНИЕ Б. «МАГНО-сорб»
ВНИМАНИЕ! Лизирующий раствор МАГНО-сорб имеет резкий
запах. Работу проводить в ламинарном боксе.
1. Лизирующий раствор МАГНО-сорб и раствор для отмывки 5
при наличии осадка прогреть при температуре 60 °С до
полного растворения кристаллов, магнетизированную
силику ресуспендировать на вортексе.
2. Отобрать необходимое количество 24-луночных планшетов
(см. п. 3), совместимых с прибором, промаркировать в
соответствии с протоколом.
3. Внести в планшеты согласно маркировке и числу
экстрагируемых проб:
– по 2,6 мл лизирующего раствора МАГНО-сорб в планшет
с глубокими лунками,
– по 700 мкл раствора для отмывки 5 в два планшета с
глубокими лунками,
– по 700 мкл раствора для отмывки 6 в планшет с
глубокими лунками,
– по 200 мкл раствора для отмывки 7 в планшет с
глубокими лунками,
– по 100 мкл буфера для элюции А в планшет для элюции.
4. В отдельной пробирке смешать из расчета на один образец:
– 10 мкл ВКО STI-87,
– 20 мкл компонента А,
– 30 мкл магнетизированной силики.
Смесь готовить на общее число исследуемых и контрольных
образцов плюс запас (например, при экстракции из 24
образцов рекомендуется готовить смесь на 26 экстракций,
т.е. с запасом на 2 образца).
5. Внести в лунки с лизирующим раствором МАГНО-сорб по
60 мкл тщательно ресуспендированной смеси.
6. Внести в лунки с лизирующим раствором МАГНО-сорб и
смесью по 1 мл исследуемых образцов, используя для
каждого образца отдельный наконечник с фильтром.
7. В лунки для положительного контроля экстракции (ПК-1)
внести по 90 мкл ОКО и 10 мкл ПКО-1-HBV.
8. В лунку отрицательного контроля экстракции (ОК) внести
100 мкл ОКО.
9. Выбрать протокол экстракции, установить в прибор
подготовленные планшеты и планшет с гребенкой согласно
VER 16.06.26 / стр. 35 из 37
ПРИЛОЖЕНИЕ Б. «МАГНО-сорб»
подсказкам/указателям расстановки.
ВНИМАНИЕ! Объем элюции – 100 мкл.
10. Запустить протокол экстракции НК.
При необходимости по окончании экстракции планшет для
элюции, содержащий очищенные НК, заклеить самоклеящейся
пленкой.
Б3. Экстракция из 200 мкл образца плазмы венозной крови
при использовании магнитоперемешивающих станций
Для экстракции следует использовать только протокол,
расположенный на сайте amplisens.ru.
ВНИМАНИЕ! Лизирующий раствор МАГНО-сорб имеет резкий
запах. Работу проводить в ламинарном боксе.
1. Лизирующий раствор МАГНО-сорб и раствор для отмывки 5
при наличии осадка прогреть при температуре 60 °С до
полного растворения кристаллов, магнетизированную
силику ресуспендировать на вортексе.
2. Отобрать необходимое количество 96-луночных планшетов
(см. п. 3), совместимых с прибором, промаркировать в
соответствии с протоколом.
3. Внести в планшеты согласно маркировке и числу
экстрагируемых проб:
– по 760 мкл лизирующего раствора МАГНО-сорб в
планшет с глубокими лунками,
– по 700 мкл раствора для отмывки 5 в два планшета с
глубокими лунками,
– по 700 мкл раствора для отмывки 6 в планшет с
глубокими лунками,
– по 200 мкл раствора для отмывки 7 в планшет с
глубокими лунками,
– по 100 мкл буфера для элюции А в планшет для элюции.
4. В отдельной пробирке смешать из расчета на один образец:
– 10 мкл ВКО STI-87,
– 10 мкл компонента А,
– 20 мкл магнетизированной силики.
Смесь готовить на общее число исследуемых и контрольных
образцов плюс запас (например, при экстракции из 96 образцов
рекомендуется готовить смесь на 100 экстракций, т.е. с
запасом на 4 образца).
5. Внести в лунки с лизирующим раствором МАГНО-сорб
VER 16.06.26 / стр. 36 из 37
ПРИЛОЖЕНИЕ Б. «МАГНО-сорб»
по 40 мкл тщательно ресуспендированной смеси.
6. Внести в лунки с лизирующим раствором МАГНО-сорб и
смесью по 200 мкл исследуемых образцов, используя для
каждого образца отдельный наконечник с фильтром.
7. В лунки для положительных контролей экстракции (ПК-1)
внести по 90 мкл ОКО и 10 мкл ПКО-1-HBV.
8. В лунку отрицательного контроля экстракции (ОК) внести
100 мкл ОКО.
9. Выбрать протокол экстракции, установить в прибор
подготовленные планшеты и планшет с гребенкой согласно
подсказкам/указателям расстановки.
ВНИМАНИЕ! Объем элюции – 100 мкл.
10. Запустить протокол экстракции НК.
При необходимости по окончании экстракции планшет для
элюции, содержащий очищенные НК, заклеить самоклеящейся
пленкой.
VER 16.06.26 / стр. 37 из 37
Инструкция по применению набора
реагентов расположена на сайте
www.amplisens.ru
Краткое руководство
набор реагентов
«АмплиСенс HBV-FL»
REF R-V5-Mod(RG,iQ,Mx,Dt)
Форма 4
REF H-0304-1
ФБУН ЦНИИ Эпидемиологии
Роспотребнадзора,
Российская Федерация, 111123,
г. Москва, ул. Новогиреевская, д. 3А
г. Москва, ул. Новогиреевская, д. 3А, стр. 6
тел. (495) 974 9642,
е-mail: amplisens@pcr.ru
VER 04.12.25
ВНИМАНИЕ! Краткое руководство предназначено для удобства работы с набором реагентов в
лаборатории и может быть использовано только после детального ознакомления с инструкцией по
применению данного набора реагентов. Анализ и интерпретацию результатов необходимо проводить в
соответствии с инструкцией к набору реагентов.
ЭКСТРАКЦИЯ ДНК ИЗ ИССЛЕДУЕМЫХ ОБРАЗЦОВ
Комплекты для экстракции:
– «РИБО-преп»;
– «МАГНО-сорб»;
– «РИБО-сорб».
Контроли: внутренний контрольный образец (ВКО) – в каждом образце.
Для каждой группы экстрагируемых образцов: 1 положительный (ПК) и 1 отрицательный (ОК) контроли
экстракции.
ЭКСТРАКЦИЯ ДНК С ПОМОЩЬЮ «РИБО-преп»
Объем исследуемого образца, контролей и элюции
ВКО STI-87 10 мкл в каждый образец
Исследуемые образцы 100 мкл в пробирки для исследуемых образцов
ОКО 100 мкл в пробирку для ОК
ОКО + ПКО-1-HBV 90 мкл + 10 мкл в пробирку для ПК
Элюция
все образцы 50 мкл в каждую пробирку
Стр. 1 из 5
ЭКСТРАКЦИЯ ДНК С ПОМОЩЬЮ «МАГНО-сорб» из 200 мкл образца плазмы
В отдельной стерильной пробирке подготовить смесь:
Компонент Объем, мкл Обозначения
ВКО STI-87 10х(N+К+1) N – количество исследуемых образцов;
Компонент А 10х(N+К+1) К – количество контролей экстракции;
Магнетизированная силика 20х(N+К+1) 1 – запас
Внести в пробирки:
Образец/реагент Объем Действие
Смесь: ВКО STI-87, компонент А,
40 мкл добавить в каждую пробирку
магнетизированная силика
Лизирующий раствор МАГНО-сорб 900 мкл добавить в каждую пробирку
Исследуемые образцы 200 мкл добавить в пробирки для исследуемых образцов
ОКО + ПКО-1-HBV 90 мкл + 10 мкл добавить в пробирку для ПК-1
ОКО 100 мкл добавить в пробирку для ОК
Все пробирки с исследуемыми и контрольными образцами:
- закрыть крышки, перемешать на вортексе, осадить капли;
- открыть крышки. Пробирки не закрывать!
- поместить в термостат на 10 мин при 85 °С;
- осторожно перенести пробирки в обычный штатив.
Поверхность пробирок может быть горячей! Дать
остыть в течение 2 мин, закрыть крышки;
- перемешать, осадить капли, поставить в магнитный
штатив на 2 мин;
- осторожно удалить надосадочную жидкость;
- перенести пробирки в обычный штатив
Раствор для отмывки 5 700 мкл добавить в каждую пробирку
- закрыть крышки, ресуспендировать на вортексе, осадить
капли;
- поставить в магнитный штатив на 2 мин;
- осторожно удалить надосадочную жидкость;
- перенести пробирки в обычный штатив
Раствор для отмывки 5 700 мкл добавить в каждую пробирку
- закрыть крышки, ресуспендировать на вортексе, осадить
капли;
- поставить в магнитный штатив на 2 мин;
- осторожно удалить надосадочную жидкость;
- перенести пробирки в обычный штатив
Раствор для отмывки 6 700 мкл добавить в каждую пробирку
- закрыть крышки, ресуспендировать на вортексе, осадить
капли;
- переставить пробирки с открытыми крышками в
магнитный штатив на 2 мин;
- осторожно отобрать надосадочную жидкость;
- перенести пробирки в обычный штатив
Раствор для отмывки 7 200 мкл добавить в каждую пробирку
- закрыть крышки, ресуспендировать на вортексе, осадить
капли;
- поставить в магнитный штатив на 1 мин;
- осторожно удалить надосадочную жидкость;
- высушить с открытыми крышками на магнитном штативе
в течение 10-20 мин
Буфер для элюции 70 мкл добавить в каждую пробирку
- закрыть крышки, перемешать на вортексе;
- поместить в термостат на 5 мин при 60 °С, через 2 мин
перемешать на вортексе,
- осадить капли, поставить в магнитный штатив на 2 мин
Надосадочная жидкость содержит очищенную ДНК
ВНИМАНИЕ! Отбор очищенной ДНК осуществляется, не снимая пробирок с магнитного штатива.
Стр. 2 из 5
ЭКСТРАКЦИЯ ДНК С ПОМОЩЬЮ «МАГНО-сорб» из 1000 мкл образца плазмы
В отдельной стерильной пробирке подготовить смесь:
Компонент Объем, мкл Обозначения
ВКО STI-87 10х(N+К+1) N – количество исследуемых образцов;
Компонент А 20х(N+К+1) К – количество контролей экстракции;
Магнетизированная силика 30х(N+К+1) 1 – запас
Внести в пробирки:
Образец/реагент Объем Действие
Смесь: ВКО STI-87, компонент А,
60 мкл добавить в каждую пробирку
магнетизированная силика
Лизирующий раствор МАГНО-сорб 2,6 мл добавить в каждую пробирку
Исследуемые образцы 1000 мкл добавить в пробирки для исследуемых образцов
ОКО + ПКО-1-HBV 90 мкл + 10 мкл добавить в пробирку для ПК-1
ОКО 100 мкл добавить в пробирку для ОК
Все пробирки с исследуемыми и контрольными образцами:
- перемешать пипетированием;
Пробирки не закрывать!
- поместить в термостат на 10 мин при 85 °С;
- перенести в магнитный штатив на 6 мин. Поверхность
пробирок может быть горячей!
- осторожно удалить надосадочную жидкость;
- перенести пробирки в обычный штатив
Раствор для отмывки 5 700 мкл добавить в каждую пробирку
- закрыть крышки, смыть магнетизированную силику осторожным
перемешиванием на вортексе, а затем пипетированием;
- перенести все содержимое в пробирки на 1,5 мл;
- поставить в магнитный штатив на 2 мин;
- осторожно удалить надосадочную жидкость,
- перенести пробирки в обычный штатив
Раствор для отмывки 5 700 мкл добавить в каждую пробирку
- закрыть крышки, ресуспендировать на вортексе, осадить капли;
- поставить в магнитный штатив на 2 мин;
- осторожно удалить надосадочную жидкость,
- перенести пробирки в обычный штатив
Раствор для отмывки 6 700 мкл добавить в каждую пробирку
- закрыть крышки, ресуспендировать на вортексе, осадить капли;
- поставить в магнитный штатив на 2 мин;
- осторожно удалить надосадочную жидкость,
- перенести пробирки в обычный штатив
Раствор для отмывки 7 200 мкл добавить в каждую пробирку
- закрыть крышки, ресуспендировать на вортексе, осадить капли;
- поставить в магнитный штатив на 1 мин;
- осторожно удалить надосадочную жидкость;
- высушить с открытыми крышками на магнитном штативе в
течение 10-20 мин
Буфер для элюции 70 мкл добавить в каждую пробирку
- закрыть крышки, перемешать на вортексе;
- поместить в термостат на 5 мин при 60 °С, через 2 мин
перемешать на вортексе;
- осадить капли, переставить в магнитный штатив на 2 мин
Надосадочная жидкость содержит очищенную ДНК
ВНИМАНИЕ! Отбор очищенной ДНК осуществляется, не снимая пробирок с магнитного штатива.
ЭКСТРАКЦИЯ ДНК С ПОМОЩЬЮ АВТОМАТИЧЕСКИХ СТАНЦИЙ с использованием комплекта реагентов
«МАГНО-сорб»
Экстракция нуклеиновых кислот проводится в соответствии с инструкцией по эксплуатации автоматической
станции, с использованием соответствующего протокола экстракции. При использовании «пипетирующих
станций» необходимо соблюдение дополнительных условий.
Подробную информацию по работе с автоматическими станциями смотрите в эксплуатационной документации
производителя оборудования и в Приложении Б инструкции по применению набора реагентов.
Стр. 3 из 5
ЭКСТРАКЦИЯ ДНК С ПОМОЩЬЮ «РИБО-сорб»
Образец/реагент Объем Действие
ВКО STI-87 10 мкл добавить в каждую пробирку
Лизирующий раствор 450 мкл добавить в каждую пробирку
Исследуемые образцы 100 мкл добавить в пробирки для исследуемых образцов
ОКО + ПКО-1-HBV 90 мкл + 10 мкл добавить в пробирку для ПК
ОКО 100 мкл добавить в пробирку для ОК
Все пробирки с исследуемыми и контрольными образцами:
- закрыть крышки, перемешать на вортексе, осадить капли;
- поместить в термостат на 10 мин при 60 °С;
- осадить капли
Сорбент 25 мкл ресуспендировать, добавить в каждую пробирку
- закрыть крышки, перемешать на вортексе;
- оставить на 10 мин при комнатной температуре, тщательно
перемешивая каждые 2 мин;
- центрифугировать 1 мин при 7 тыс. g;
- удалить надосадочную жидкость
Раствор для отмывки 1 400 мкл добавить в каждую пробирку
- закрыть крышки, ресуспендировать на вортексе;
- центрифугировать 1 мин при 7 тыс. g;
- удалить надосадочную жидкость
Раствор для отмывки 3 500 мкл добавить в каждую пробирку
- закрыть крышки, ресуспендировать на вортексе;
- центрифугировать 1 мин при 7 тыс. g;
- удалить надосадочную жидкость
Раствор для отмывки 3 500 мкл добавить в каждую пробирку
- закрыть крышки, ресуспендировать на вортексе;
- центрифугировать 1 мин при 7 тыс. g;
- удалить надосадочную жидкость
Раствор для отмывки 4 400 мкл добавить в каждую пробирку
- закрыть крышки, ресуспендировать на вортексе;
- центрифугировать 1 мин при 7 тыс. g;
- удалить надосадочную жидкость;
- открыть крышки, подсушить осадок 12-15 мин при 60 °С
РНК-буфер 50 мкл добавить в каждую пробирку
- закрыть крышки, ресуспендировать на вортексе;
- прогреть 2-3 мин при 60 °С, перемешать на вортексе;
- центрифугировать 1 мин при 12-13 тыс. g
Надосадочная жидкость содержит очищенную ДНК
ВНИМАНИЕ! Отбор очищенной ДНК для проведения ПЦР проводить осторожно, не захватывая сорбент. Если
сорбент взмутился, необходимо осадить его на центрифуге при 12-13 тыс. g в течение 1 мин.
Стр. 4 из 5
|  | Внести по 15 мкл |  |  |  |
| Приготовленной реакционной смеси |  | в каждую пробирку |  |  |
|  | Внести по 10 мкл |  |  |  |
| Проб ДНК, экстрагированных из исследуемых образцов |  | в пробирки для исследуемых образцов | При проведении экстракции с помощью сорбционных методов избегать попадания сорбента в реакционную смесь! |  |
| Пробы ДНК, экстрагированной из ПК |  | в пробирку для ПК |  |  |
| Пробы ДНК, экстрагированной из ОК |  | в пробирку для ОК |  |  |
| KB2 HBV |  | в пробирку для К+ |  |  |
| Цикл |  | Программа амплификации для приборов |  |  |  |  |  |  |  | Программа амплификации для приборов |  |  |  |  |  |  |
|  |  | роторного типа |  |  |  |  |  |  |  | планшетного типа |  |  |  |  |  |  |
|  | Темпе- ратура, °С |  | Время | Д | етекция флуоресцентног | о | Кол-во циклов |  | Темпе- ратура, °С |  | Время | Д | етекция флуоресцентног | о | Кол-во циклов |  |
|  |  |  |  |  | сигнала по каналам для |  |  |  |  |  |  |  | сигнала по каналам для |  |  |  |
|  |  |  |  |  | флуорофоров |  |  |  |  |  |  |  | флуорофоров |  |  |  |
| 1 | 50 |  | 15 мин | – |  |  | 1 |  | 50 |  | 15 мин | – |  |  | 1 |  |
| 2 | 95 |  | 15 мин | – |  |  | 1 |  | 95 |  | 15 мин | – |  |  | 1 |  |
| 2 | 95 |  | 5 с | – |  |  | 5 |  | 95 |  | 5 с | – |  |  | 5 |  |
|  | 60 |  | 20 с | – |  |  |  |  | 60 |  | 20 с | – |  |  |  |  |
|  | 72 |  | 15 с | – |  |  |  |  | 72 |  | 15 с | – |  |  |  |  |
| 3 | 95 |  | 5 с | – |  |  | 40 |  | 95 |  | 5 с | – |  |  | 40 |  |
|  | 60 |  | 20 с | FAM, JOE |  |  |  |  | 60 |  | 30 с | FAM, JOE |  |  |  |  |
|  | 72 |  | 15 с | – |  |  |  |  | 72 |  | 15 с | – |  |  |  |  |
ПОДГОТОВКА ПРОБ ДЛЯ АМПЛИФИКАЦИИ С ДЕТЕКЦИЕЙ В РЕЖИМЕ «РЕАЛЬНОГО ВРЕМЕНИ» при
использовании «ПЦР-комплекта» вариант FRT
Общий объем реакционной смеси: 25 мкл, включая объем пробы ДНК (10 мкл).
Контроли: для каждой группы амплифицируемых образцов 1 положительный контроль ПЦР (К+),
1 положительный (ПК), 1 отрицательный (ОК) контроли экстракции.
1. Рассчитать количество каждого реагента, требующееся для приготовления реакционной смеси.
2. Разморозить пробирку с ПЦР-смесью-1-FL HBV.
3. В отдельной пробирке подготовить реакционную смесь:
Компонент реакционной смеси Объем, мкл Обозначения
ПЦР-смесь-1-FL HBV 10х(N+К+1)
N – количество исследуемых образцов;
ПЦР-буфер-В 5х(N+К+1) К – количество контролей;
1 – запас
Полимераза (TaqF) 0,5х(N+К+1)
ВНИМАНИЕ! Компоненты реакционной смеси следует смешивать непосредственно перед проведением ПЦР.
4. Отобрать необходимое количество пробирок или стрипов для ПЦР исследуемых и контрольных образцов:
ВНИМАНИЕ! Содержимое пробирок перемешать пипетированием, не допуская появления пузырьков воздуха.
ВНИМАНИЕ! При подозрении на возможную контаминацию также необходима постановка отрицательного
контроля ПЦР (К–). Для этого в пробирку с реакционной смесью внести 10 мкл К–.
АМПЛИФИКАЦИЯ С ДЕТЕКЦИЕЙ В РЕЖИМЕ «РЕАЛЬНОГО ВРЕМЕНИ»
- Установить пробирки в ячейки реакционного модуля. Рекомендуется:
а) перед постановкой в амплификатор планшетного типа осадить капли со стенок пробирок на вортексе;
б) в случае неполной загрузки приборов планшетного типа дополнительно установить пустые пробирки по
краям реакционного модуля амплификатора.
- Запустить программу амплификации:
а) либо с использованием ПО ARTS совместно с ПО AmpliSens® HBV-FL Soft, детектирующий амплификатор
должен быть совместим с ПО ARTS;
б) либо в ручном режиме, запрограммировав детектирующий амплификатор для выполнения программы,
указанной ниже, настройки приборов роторного и планшетного типа см. во вкладыше с настройками к
набору реагентов.
ВНИМАНИЕ! В случае если в одном приборе одновременно проводятся только тесты для выявления ДНК HBV,
можно удалить из данной программы первый шаг обратной транскрипции (50 °С – 15 мин) для экономии времени.
АНАЛИЗ И ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ
Анализируют кривые накопления флуоресцентного сигнала по двум каналам с помощью алгоритма, приведенного
в инструкции, или с помощью ПО ARTS совместно с ПО AmpliSens® HBV-FL Soft:
Канал для флуорофора FAM JOE
Мишень для амплификации ДНК ВКО ДНК HBV
ВНИМАНИЕ! К каждому набору реагентов прилагается вкладыш с настройками, в котором указаны настройки для
приборов, граничные значения порогового цикла (Ct), необходимые для проведения анализа и интерпретации
результатов.
Стр. 5 из 5
ФБУН ЦНИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора
111123, Москва, ул. Новогиреевская 3А,
тел. (495) 974-96-42, факс (495) 305-54-23, e-mail: obtk@pcr.ru
ПАСПОРТ КАЧЕСТВА
Набор реагентов для выявления ДНК вируса гепатита B (HBV) в клиническом материале методом
полимеразной цепной реакции (ПЦР) с гибридизационно-флуоресцентной детекцией
«АмплиСенс® HBV-FL»
2026-03-15
Форма 4
15.03.26
2027-03-15
ТУ 20.59.52-030-01897593-2025.
Комплектность, упаковка и маркировка набора указанной серии соответствуют требованиям ТУ.
1. Технические характеристики:
Результаты
Наименование показателя Норма
контроля
Определено значение Ct меньше граничного (для
Набор реагентов должен выявлять ДНК HBV в
исследуемых образцов) по каналам для флуорофоров
концентрации 50 МЕ/мл при экстракции ДНК с
FAM, JOE.
помощью комплекта реагентов «РИБО-преп» соответствует
Допускается отсутствие значения Ct (или значение Ct
из 100 мкл разведения образца контрольной
определено больше граничного) по каналу для
панели «HBV»
флуорофора JOE в одном повторе из трех
Положительный результат для образца
Определено значение Ct меньше граничного (для
контрольной панели «HBV» с концентрацией
исследуемых образцов) по каналам для флуорофоров соответствует
порядка 104 МЕ/мл при экстракции с помощью
FAM, JOE
комплекта реагентов «РИБО-преп»
Определено значение Ct меньше граничного по каналу
Отрицательный результат для образца ОК
для флуорофора FAM. Значение Ct отсутствует по каналу соответствует
(отрицательный контроль экстракции)
для флуорофора JOE
Положительный результат для образца ПК Определено значение Ct меньше граничного по каналам
соответствует
(положительный контроль экстракции) для флуорофоров FAM, JOE
Положительный результат для образца К+ Определено значение Ct меньше граничного по каналам
соответствует
(положительный контроль ПЦР) для флуорофоров FAM, JOE
Отрицательный результат для образца К– Значение Ct отсутствует по каналам для флуорофоров
соответствует
(отрицательный контроль ПЦР) FAM, JOE
2. Состав, внешний вид:
Наименование В составе формы
Характеристика и нормы Результаты контроля
реагента комплектации
ПЦР-смесь-1-FL HBV
Прозрачная жидкость от бесцветного до
соответствует 4
светло-лилового цвета
ПЦР-буфер-В Прозрачная бесцветная жидкость соответствует 4
Полимераза (TaqF) Прозрачная бесцветная жидкость соответствует 4
KB2 HBV Прозрачная бесцветная жидкость соответствует 4
K– Прозрачная бесцветная жидкость соответствует 4
ОКО Прозрачная бесцветная жидкость соответствует 4
ПКO-1-HBV Прозрачная бесцветная жидкость соответствует 4
ВКО STI-87 Прозрачная бесцветная жидкость соответствует 4
3. Условия транспортирования и хранения:
Транспортирование. Транспортирование проводить всеми видами крытых транспортных средств в термоконтейнерах,
содержащих хладоэлементы, или авторефрижераторах. Набор реагентов транспортировать при температуре от 2 до 8 °С
не более 5 сут.
Хранение.
Реагенты после вскрытия хранить при той же температуре, что до вскрытия.
Форма 4. «ПЦР-комплект» вариант FRT хранить в морозильной камере при температуре от минус 24 до минус 16 °С. Не
допускается замораживание/оттаивание KB2 HBV, ПКО-1-HBV и ВКО STI-87 более двух раз. После размораживания ПКО-
1-HBV, KB2 HBV и ВКО STI-87 хранить при температуре от 2 до 8 °С не более 6 мес. ПЦР-смесь-1-FL HBV хранить в
защищенном от света месте.
Холодильные и морозильные камеры должны обеспечивать регламентированный температурный режим.
Дата выдачи 15.03.26
Руководитель ГКК (Кодуа О.И.)
(подпись) (Ф.И.О.)
Форма 4: REF R-V5-Mod(RG,iQ,Mx,Dt); REF H-0304-1
ФБУН ЦНИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора
111123, Москва, ул. Новогиреевская 3А,
тел. (495) 974-96-42, факс (495) 305-54-23, e-mail: obtk@pcr.ru
ПАСПОРТ КАЧЕСТВА
Набор реагентов для выявления ДНК вируса гепатита B (HBV) в клиническом материале методом
полимеразной цепной реакции (ПЦР) с гибридизационно-флуоресцентной детекцией
«АмплиСенс® HBV-FL»
2026-03-15
Форма 4
А15.03.26
2027-03-15
ТУ 20.59.52-030-01897593-2025.
Комплектность, упаковка и маркировка набора указанной серии соответствуют требованиям ТУ.
1. Технические характеристики:
Результаты
Наименование показателя Норма
контроля
Определено значение Ct меньше граничного (для
Набор реагентов должен выявлять ДНК HBV в
исследуемых образцов) по каналам для флуорофоров
концентрации 50 МЕ/мл при экстракции ДНК с
FAM, JOE.
помощью комплекта реагентов «РИБО-преп» соответствует
Допускается отсутствие значения Ct (или значение Ct
из 100 мкл разведения образца контрольной
определено больше граничного) по каналу для
панели «HBV»
флуорофора JOE в одном повторе из трех
Положительный результат для образца
Определено значение Ct меньше граничного (для
контрольной панели «HBV» с концентрацией
исследуемых образцов) по каналам для флуорофоров соответствует
порядка 104 МЕ/мл при экстракции с помощью
FAM, JOE
комплекта реагентов «РИБО-преп»
Определено значение Ct меньше граничного по каналу
Отрицательный результат для образца ОК
для флуорофора FAM. Значение Ct отсутствует по каналу соответствует
(отрицательный контроль экстракции)
для флуорофора JOE
Положительный результат для образца ПК Определено значение Ct меньше граничного по каналам
соответствует
(положительный контроль экстракции) для флуорофоров FAM, JOE
Положительный результат для образца К+ Определено значение Ct меньше граничного по каналам
соответствует
(положительный контроль ПЦР) для флуорофоров FAM, JOE
Отрицательный результат для образца К– Значение Ct отсутствует по каналам для флуорофоров
соответствует
(отрицательный контроль ПЦР) FAM, JOE
2. Состав, внешний вид:
Наименование В составе формы
Характеристика и нормы Результаты контроля
реагента комплектации
ПЦР-смесь-1-FL HBV
Прозрачная жидкость от бесцветного до
соответствует 4
светло-лилового цвета
ПЦР-буфер-В Прозрачная бесцветная жидкость соответствует 4
Полимераза (TaqF) Прозрачная бесцветная жидкость соответствует 4
KB2 HBV Прозрачная бесцветная жидкость соответствует 4
K– Прозрачная бесцветная жидкость соответствует 4
ОКО Прозрачная бесцветная жидкость соответствует 4
ПКO-1-HBV Прозрачная бесцветная жидкость соответствует 4
ВКО STI-87 Прозрачная бесцветная жидкость соответствует 4
3. Условия транспортирования и хранения:
Транспортирование. Транспортирование проводить всеми видами крытых транспортных средств в термоконтейнерах,
содержащих хладоэлементы, или авторефрижераторах. Набор реагентов транспортировать при температуре от 2 до 8 °С
не более 5 сут.
Хранение.
Реагенты после вскрытия хранить при той же температуре, что до вскрытия.
Форма 4. «ПЦР-комплект» вариант FRT хранить в морозильной камере при температуре от минус 24 до минус 16 °С. Не
допускается замораживание/оттаивание KB2 HBV, ПКО-1-HBV и ВКО STI-87 более двух раз. После размораживания ПКО-
1-HBV, KB2 HBV и ВКО STI-87 хранить при температуре от 2 до 8 °С не более 6 мес. ПЦР-смесь-1-FL HBV хранить в
защищенном от света месте.
Холодильные и морозильные камеры должны обеспечивать регламентированный температурный режим.
Дата выдачи 15.03.26
Руководитель ГКК (Кодуа О.И.)
(подпись) (Ф.И.О.)
Форма 4: REF R-V5-Mod(RG,iQ,Mx,Dt); REF H-0304-1
ОГЛАВЛЕНИЕ
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ .................................................................................................. 3
ОБЩИЕ СВЕДЕНИЯ ......................................................................................................... 3
НАЗНАЧЕНИЕ ................................................................................................................... 4
ПРИНЦИП РАБОТЫ .......................................................................................................... 4
УСЛОВИЯ ВЫПОЛНЕНИЯ ПРОГРАММЫ ....................................................................... 4
Требования к техническим средствам оператора ...................................................... 4
Требования к входным данным ................................................................................... 5
Требования к информационной безопасности ........................................................... 5
ВЫПОЛНЕНИЕ ПРОГРАММЫ ......................................................................................... 6
Загрузка ПО в ARTS ..................................................................................................... 6
Формирование и запуск постановки ............................................................................ 6
Анализ и интерпретация результатов ......................................................................... 7
Авторизация результатов исследования .................................................................... 9
Формирование бланка с результатами ....................................................................... 9
СООБЩЕНИЯ ОПЕРАТОРУ ........................................................................................... 10
ТЕХНИЧЕСКАЯ ПОДДЕРЖКА И ИНФОРМАЦИЯ О РАЗРАБОТЧИКЕ ........................ 11
VER 04.12.25 / стр. 2 из 11
| ВКО | – внутренний контрольный образец |
| ДНК | – дезоксирибонуклеиновая кислота |
| Детектирующий амплификатор | – прибор для проведения амплификации c детекцией в режиме «реального времени» |
| ПО | – программное обеспечение AmpliSens® HBV-FL Soft |
| ПЦР | – полимеразная цепная реакция |
| ОК | – отрицательный контроль экстракции |
| ОКО | – отрицательный контрольный образец |
| ПК | – положительный контроль экстракции |
| К- | – отрицательный контроль амплификации |
| К+ | – положительный контроль амплификации |
| ARTS | – программное обеспечение ARTS |
| Ct | – сycle threshold (пороговый цикл) |
| HBV | – вирус гепатита В |
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
В настоящем руководстве применяются следующие сокращения и обозначения:
ОБЩИЕ СВЕДЕНИЯ
Наименование и версия программного обеспечения: AmpliSens® HBV-FL Soft.
Версия ПО отображается для каждой серии набора реагентов во вкладыше для
автоматизированной работы, а также доступна в каталоге методик или в пакете
методик.
В соответствии с разделом «Порядок нумерации версий программного
обеспечения» третье числовое значение версии (изменения, не влияющие на
функционал, безопасность и эффективность медицинского изделия) может
изменяться при выпуске новой серий набора реагентов. Данное изменение не требует
внесения изменений в комплект регистрационной документации на медицинское
изделие.
Способ размещения и доступа к программному обеспечению: входит в состав
набора реагентов «АмплиСенс HBV-FL». ПО и руководство оператора
предоставляются на электронном носителе или сайте Изготовителя
(www.amplisens.ru).
Класс безопасности: Класс А в соответствии с п.4.3 ГОСТ IEC 62304.
Порядок нумерации версий программного обеспечения: Обозначение версии
состоит из трех чисел, разделенных точками, означающих нумерацию мажорных,
минорных и незначимых изменений соответственно. Мажорные изменения означают
изменение функционального назначения, принципа работы, структуры и функций
составных частей программного обеспечения; минорные изменения означают
изменение названий и обозначений в информационном блоке программного
обеспечения; незначимые изменения означают изменения (включая исправление
VER 04.12.25 / стр. 3 из 11
ошибок) и доработки, не изменяющие функции, описанные для мажорных и минорных
изменений.
Программное обеспечение соответствует требованиям ГОСТ IEC 62304.
НАЗНАЧЕНИЕ
ПО предназначено для автоматического программирования детектирующего
амплификатора, совместимого с ARTS, и автоматической обработки и интерпретации
результатов исследования при использовании набора реагентов «АмплиСенс® HBV-
FL» (далее – набор реагентов). ПО представляет собой программу, содержащую
критерии анализа кривых флуоресценции и алгоритм интерпретации результатов, а
также информацию об аналитах, используемом биологическом материале, реагентах
и контрольных образцах, программе амплификации, указанных в инструкции к набору
реагентов.
ПРИНЦИП РАБОТЫ
ПО совместимо с ARTS. В соответствии с информацией об используемом
биологическом материале, реагентах, контрольных образцах и программе
амплификации, указанной в ПО, ARTS осуществляет запуск детектирующих
амплификаторов. После завершения амплификации ARTS визуализирует
полученные флуоресцентные кривые и осуществляет автоматический экспорт
полученных данных для контрольных и исследуемых образцов в ПО.
ПО проводит автоматическую интерпретацию результатов с использованием
полученных значений пороговых циклов (Ct), включая оценку валидности контрольных
образцов и исследования в целом. Полученные в ПО результаты автоматически
передаются в ARTS для их визуализации оператору.
Допускается программирование и запуск детектирующего амплификатора без
использования ПО и ARTS. В этом случае файл с данными, полученный на
детектирующем амплификаторе, можно экспортировать в ПО для дальнейшей
автоматической интерпретации результатов.
Технологии искусственного интеллекта в ПО не используются.
УСЛОВИЯ ВЫПОЛНЕНИЯ ПРОГРАММЫ
Требования к техническим средствам оператора
Требования к персональному компьютеру указаны в таблице 1.
VER 04.12.25 / стр. 4 из 11
Таблица 1
Характеристика Минимальное значение
Оперативная память 4 ГБ
Свободное место на жестком диске, включая
16 ГБ
установку совместимого ПО
- Windows 7 Service pack 1;
- Microsoft Excel 2003;
Совместимое программное обеспечение
- ARTS версии 1.0.9;
- PostgreSQL версии 12
32-разрядный (x86) или 64-разрядный (x64)
Процессор
с тактовой частотой 1,5 ГГц
Графическое устройство DirectX 9 с драйвером WDDM 1.0
Требования к входным данным
Обозначения ячеек исследуемых и контрольных образцов в интерфейсе ARTS
должны строго соответствовать их фактическому расположению в реакционном блоке
детектирующего амплификатора.
Требования к информационной безопасности
Влияние угроз и уязвимостей ПО на пользователей или пациентов отсутствует.
ПО не содержит и не обрабатывает персональные данные пациентов.
Средства криптографической защиты в ПО не используются.
Доступ к ПО осуществляется с помощью авторизации пользователя в ARTS
(учетная запись). Уровень доступа пользователей должен быть обеспечен исходя из
требуемой функциональности.
В рамках инфраструктуры информационных технологий, использующей ПО,
необходимо:
− предпринять меры обеспечения информационной безопасности и
кибербезопасности для непрерывного функционирования ПО и исключения
возможности несанкционированного доступа к информации в ПО;
− предпринять меры, обеспечивающие защиту от нарушения целостности
информации в ПО;
− обеспечить наличие регулярных архивных копий ПО (в т.ч. базы данных) с
возможностью их восстановления;
− использовать средства защиты от вредоносных программ;
− соблюдать требования к информационной безопасности, указанные в руководстве
оператора ARTS.
VER 04.12.25 / стр. 5 из 11
ВЫПОЛНЕНИЕ ПРОГРАММЫ
Загрузка ПО в ARTS
Загрузка ПО в ARTS при наличии подключения персонального компьютера к сети
Интернет производится автоматически при запуске ARTS.
При отсутствии подключения персонального компьютера к сети Интернет загрузка
в ARTS производится вручную с электронного носителя путем выбора файла с
пакетом программного обеспечения, включающим ПО.
После завершения загрузки установленное ПО отображается в списке пакетов
методик и доступно для формирования и расчета постановок.
Формирование и запуск постановки
Формирование постановки производится с использованием интерфейса ARTS. В
соответствии с руководством оператора к ARTS необходимо выполнить следующие
действия:
1. Открыть ARTS.
2. Зарегистрировать серию набора реагентов и ввести переменную информацию (при
наличии), используя информацию из вкладыша для автоматизированной работы к
данной серии набора реагентов.
3. При необходимости сформировать список образцов для исследования с
применением набора реагентов (вручную или загрузить из лабораторных
информационных систем).
4. Выбрать детектирующий амплификатор и необходимый реакционный блок.
5. Сформировать постановку:
5.1. Выбрать из списка доступных программных обеспечений ПО AmpliSens® HBV-
FL Soft и серию набора реагентов.
5.2. На схематическом изображении реакционного блока детектирующего
амплификатора в используемых ячейках разместить образцы из списка,
сформированного в п.3, (или ввести их обозначения вручную) и контрольные
образцы.
5.3. Сохранить постановку.
6. Осуществить запуск амплификации. Ход амплификации отобразится в виде
кривых накопления флуоресценции.
Примечание – Допускается программирование и запуск детектирующего
амплификатора вручную в соответствии с программой амплификации, указанной в
инструкции к набору реагентов.
VER 04.12.25 / стр. 6 из 11
Анализ и интерпретация результатов
После завершения амплификации ARTS автоматически визуализирует кривые
флуоресценции.
Примечание – Если детектирующий амплификатор был запрограммирован и
запущен вручную, необходимо сформировать постановку, как описано выше,
загрузить файл, полученный в детектирующем амплификаторе, и осуществить
виртуальный расчет в соответствии с руководством оператора ARTS.
Соответствие названий флуорофоров и каналов детекции в ARTS указано в
таблице 2.
Таблица 2
Флуорофор FAM JOE
Название канала детекции FAM HEX
В соответствии с критериями анализа кривых флуоресценции, указанными в ПО,
автоматически определяется статус каждой кривой по каждому каналу детекции:
положительный, отрицательный или сомнительный.
Статус присваивается на основании критериев, оценивающих отклонения формы
кривой накопления флуоресценции от нормальной (S-образной) формы, например:
− наличие неспецифических скачков флуоресцентного сигнала;
− низкое соотношение сигнал/шум;
− кинетика накопления флуоресцентного сигнала, отличная от S-образной.
Сомнительные кривые классифицируются на «Сомнительно +» и
«Сомнительно -», что следует интерпретировать как:
«Сомнительно +» – наиболее вероятно, что для кривой получен положительный
результат, требуется подтверждение.
«Сомнительно –» – наиболее вероятно, что для кривой получен отрицательный
результат, требуется подтверждение.
Каждой сомнительной кривой необходимо присвоить статус: «Положительный»,
«Отрицательный» или сделать заключение о необходимости повторного
исследования данного образца. Для этого:
1. Отобразить кривые по всем каналам детекции в режиме отображения «сырых»
данных с прибора (режим «RAW»).
ВНИМАНИЕ! Не следует принимать решение о статусе сомнительной кривой на
основании просмотра нормализованных кривых (режим «Norma»), т.к. в данном
режиме отображаются флуоресцентные кривые после математической обработки.
2. Отфильтровать кривые со статусом «Сомнительный» по каждому каналу. В
VER 04.12.25 / стр. 7 из 11
скобках рядом с названием канала указано количество сомнительных кривых.
3. В списке образцов последовательно присвоить кривым статус «Положительный»,
«Отрицательный» или сделать заключение о необходимости повторного
исследования данного образца («Перестановка» – образцы будут возвращены в
список образцов для возможности повторного исследования).
ВНИМАНИЕ! Присвоение статуса сомнительным кривым производится на основании
экспертного мнения сотрудника лаборатории, осуществляющего анализ результатов.
В случае если для сомнительной флуоресцентной кривой не удается принять
однозначного решения по ее статусу, рекомендуется провести повторное
исследование для данного образца.
После просмотра кривых флуоресценции и присвоения статуса всем
сомнительным флуоресцентным кривым необходимо запустить интерпретацию
результатов.
Будут выведены результаты, автоматически полученные ПО на основании
значений порогового цикла (Ct) для исследуемых образцов, включая оценку
валидности контрольных образцов и исследования в целом.
Результаты для контрольных образцов выводятся с детализацией по каналам
детекции. Если для одного или нескольких контрольных образцов получено
сообщение об ошибке, данный результат дублируется в строке статуса постановки.
Результаты для исследуемых образцов выводятся в качественном формате с
учетом статуса контролей и указанием канала детекции.
Возможные варианты интерпретации результатов исследуемых образцов и
соответствующие им комментарии для лаборатории указаны в таблице 3.
Таблица 3
Качественное определение Комментарии для лаборатории
Обнаружено –
Не обнаружено –
Невалидный Повторить исследование с этапа экстракции
Возможные варианты результатов для контролей и интерпретации результатов
для исследуемых образцов с учетом статуса контролей, а также соответствующие
комментарии для лаборатории указаны в таблице 4.
VER 04.12.25 / стр. 8 из 11
| Статус контроля |  | Интерпретация результатов для |  | Комментарии для лаборатории |
|  |  | исследуемых образцов с учетом статуса |  |  |
|  |  | контроля |  |  |
|  | В соответствии с таблицей 3 |  |  | – |
| Ошибка ПК | Интерпретация невозможна для образцов, в которых не обнаружен определяемый аналит |  |  | Повторить исследование с этапа экстракции |
| Ошибка ПК (по каналу ВКО) | Интерпретация невозможна для всех образцов |  |  | Повторить исследование с этапа экстракции |
| Контаминация ОКО | Интерпретация невозможна для образцов, в которых обнаружен определяемый аналит |  |  | Повторить исследование с этапа экстракции |
| Ошибка ОКО | Интерпретация невозможна для всех образцов |  |  | Повторить исследование с этапа экстракции |
| Ошибка K+ | Интерпретация невозможна для образцов, в которых не обнаружен определяемый аналит |  |  | Повторить исследование с этапа амплификации |
| Ошибка K+ (по каналу ВКО) | Интерпретация невозможна для всех образцов |  |  | Повторить исследование с этапа экстракции |
| Контаминация K– | Интерпретация невозможна для образцов, в которых обнаружен определяемый аналит |  |  | Повторить исследование с этапа амплификации |
| Контаминация K– (по каналу ВКО) | В соответствии с таблицей 3 |  |  | – |
Таблица 4
В случаях, перечисленных в таблице 4, для соответствующих исследуемых
образцов в таблице результатов выводится сообщение «Интерпретация невозможна»
с указанием причины (например, «Интерпретация невозможна (Ошибка ПК)»).
Авторизация результатов исследования
После вывода результатов для исследуемых образцов необходимо авторизовать
(подтвердить) или отвергнуть (отклонить) результаты автоматической интерпретации.
В том числе, возможны следующие действия в соответствии с руководством
оператора к ARTS:
 отправка образца на повторное исследование;
 отмена результата исследования всех образцов в постановке;
 авторизация результата исследования каждого образца;
 авторизация результата исследования всех образцов в постановке;
 выгрузка результатов исследования в формате электронной таблицы;
 выгрузка постановки в отдельный файл для просмотра в ARTS.
Формирование бланка с результатами
ВНИМАНИЕ! Только авторизованные результаты исследования, полученные с
помощью ПО, передаются в ARTS для формирования бланков с результатами для
исследуемых образцов и/или передачи в лабораторную информационную систему.
VER 04.12.25 / стр. 9 из 11
| Сообщение |  | Причина |  | Дальнейшие действия оператора |
|  |  | сообщения |  |  |
| Для AmpliSens® HBV-FL Soft не размещен контроль ПК | В реакционном блоке не размещен ПК |  |  | Указать положение ПК в реакционном блоке, используя кнопку ПК |
| Для AmpliSens® HBV-FL Soft не размещен контроль К+ | В реакционном блоке не размещен К+ |  |  | Указать положение К+ в реакционном блоке, используя кнопку К+ |
| Для AmpliSens® HBV-FL Soft не размещен контроль ОК | В реакционном блоке не размещен ОК |  |  | Указать положение ОК в реакционном блоке, используя кнопку ОК |
| Для AmpliSens® HBV-FL Soft не размещен контроль К– | В реакционном блоке не размещен К– |  |  | Указать положение К– в реакционном блоке, используя кнопку К– |
| Ошибка ПК | Значение Ct отсутствует или превышает граничное значение по каналу для флуорофора JOE |  |  | Краткое описание действий оператора выводится в столбце «Комментарии для лаборатории» в соответствии с таблицей 4. Более подробную информацию см. в инструкции по применению набора реагентов |
| Ошибка ПК (по каналу ВКО) | Значение Ct отсутствует или превышает граничное значение по каналу для флуорофора FAM |  |  | Краткое описание действий оператора выводится в столбце «Комментарии для лаборатории» в соответствии с таблицей 4. Более подробную информацию см. в инструкции по применению набора реагентов |
| Ошибка К+ | Значение Ct отсутствует или превышает граничное значение по каналу для флуорофора JOE |  |  | Краткое описание действий оператора выводится в столбце «Комментарии для лаборатории» в соответствии с таблицей 4. Более подробную информацию см. в инструкции по применению набора реагентов |
| Ошибка К+ (по каналу ВКО) | Значение Ct отсутствует или превышает граничное значение по каналу для флуорофора FAM |  |  | Краткое описание действий оператора выводится в столбце «Комментарии для лаборатории» в соответствии с таблицей 4. Более подробную информацию см. в инструкции по применению набора реагентов |
| Контаминация ОКО | Определено значение Ct по каналу для флуорофора JOE |  |  | Краткое описание действий оператора выводится в столбце «Комментарии для лаборатории» в соответствии с таблицей 4. Более подробную информацию см. в инструкции по применению набора реагентов |
| Контаминация К– | Определено значение Ct по каналу для флуорофора JOE |  |  | Краткое описание действий оператора выводится в столбце «Комментарии для лаборатории» в соответствии с таблицей 4. Более подробную информацию см. в инструкции по применению набора реагентов |
Формирование бланков с результатами производится оператором в ARTS. Поиск,
просмотр и печать бланков осуществляется через интерфейс ARTS в соответствии с
руководством оператора ARTS.
ВНИМАНИЕ! Установление диагноза и назначение лечения должны производиться
врачом соответствующей специализации.
СООБЩЕНИЯ ОПЕРАТОРУ
VER 04.12.25 / стр. 10 из 11
| Сообщение |  | Причина |  | Дальнейшие действия оператора |
|  |  | сообщения |  |  |
| Контаминация K– (по каналу ВКО) | Определено значение Ct по каналу для флуорофора FAM |  |  | Краткое описание действий оператора выводится в столбце «Комментарии для лаборатории» в соответствии с таблицей 4. Более подробную информацию см. в инструкции по применению набора реагентов |
| Ошибка ОКО | Значение Ct отсутствует или превышает граничное по каналу для флуорофора FAM |  |  | Краткое описание действий оператора выводится в столбце «Комментарии для лаборатории» в соответствии с таблицей 4. Более подробную информацию см. в инструкции по применению набора реагентов |
ТЕХНИЧЕСКАЯ ПОДДЕРЖКА И ИНФОРМАЦИЯ О РАЗРАБОТЧИКЕ
При выявлении сбоев в работе ПО рекомендуется обращаться в техническую
поддержку. При обращении в техническую поддержку необходимо предоставить
следующую информацию:
- Наименование ПО и номер версии ПО и ARTS.
- Описание ошибки (текст или изображение).
- Описание действия / последовательности действий, при которых возникла ошибка.
- Контакты для обратной связи.
Сотрудники технической поддержки могут запросить дополнительную
информацию для решения вопроса.
Телефон: +7(495) 304 22 06 в рабочие часы организации.
Почта: lab@amplisens.ru в режиме 24х7.
Разработчик ПО: Федеральное бюджетное учреждение науки «Центральный
научно-исследовательский институт эпидемиологии» Федеральной службы по
надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (ФБУН ЦНИИ
Эпидемиологии Роспотребнадзора).
Руководство оператора и интерфейс программного обеспечения разработаны на
русском языке и могут быть переведены на другие языки без внесения изменений в
программный код ПО.
VER 04.12.25 / стр. 11 из 11