"ИММУНО-БИТ МУЛЬТИ" Набор реагентов для выделения и количественного определения ДНК TREC и KREC методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени по ТУ 21.20.23-003-17608775-2021 — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
комбинированный иммунодефицит (ТКИН) и другие состояния, ассоциированные с
изменением уровня ДНК TREC и/или KREC
Область применения: клиническая лабораторная диагностика.
Показания к применению: необходимость количественного определения ДНК TREC
и КRЕС в крови человека для выявления состояний, связанных с дефектом лимфопоэза Т - и
В- клеток, в том числе при подозрении на первичные и вторичные иммунодефициты.
Противопоказания к применению: не применимо.
Сокращенное наименование медицинского изделия для диагностики in vitro
«ИММУНО-БИТ МУЛЬТИ».
Общие сведения и пояснения
Набор реагентов предназначен для выделения и количественного определения ДНК
TREC и KREC в цельной венозной крови и в сухих пятнах венозной/капиллярной крови с
целью оценки функционального состояния иммунной системы пациентов и скрининга
иммунодефицитных состояний (ИДС).
Молекулы TREC и KREC - стабильные кольцевые фрагменты ДНК, образующиеся в
ходе перестройки генов рецепторов Т- и В- клеток, соответственно. У здоровых
новорожденных TREC и КRЕС образуются в больших количествах, в то время как у детей с
тяжелой комбинированной иммунной недостаточностью (ТКИН) и агаммаглобулинемией
количество TREC и КRЕС значительно снижено или находится на недетектируемом уровне.
С возрастом у детей и взрослых количество TREC и КRЕС падает. Количество TREC и
КRЕС ниже нормы может указывать на клеточный или гуморальный иммунодефицит.
Анализ может быть проведен как с использованием цельной венозной крови, так и
сухих пятен крови, изготовленных на основе венозной или капиллярной крови.
2 ПРЕДНАЗНАЧЕННЫЙ ПОЛЬЗОВАТЕЛЬ НАБОРА РЕАГЕНТОВ
Только для профессионального использования.
Сотрудники медицинских учреждений и клинико-диагностических лабораторий
(врач клинической лабораторной диагностики, биолог, медицинский лабораторный техник
(фельдшер-лаборант), медицинский технолог и лаборант, старший лаборант (старший
медицинский лабораторный техник (старший фельдшер-лаборант), старший медицинский
технолог).
2
3 ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА РЕАГЕНТОВ
3.1 Состав набора реагентов
Набор реагентов выпускают в виде комплекта на 96 реакций, включающего
1»
следующие компоненты: «Компоненты для выделения. Упаковка и «Компоненты для
2».
IП.{Р- РВ. Упаковка
Комплект предназначен для ручной постановки анализа и с помощью автоматических
станций для выделения нуклеиновых кислот (далее по тексту - автоматические станции).
Состав комплекта представлен в таблице 1.
Таблица 1. Состав набора реагентов
Наименование Количество
1 шт.
Компоненты для выделения. Упаковка 1
в составе:
«ПЛ)) - предлизирующий раствор - прозрачная бесцветная или от светло-жел-
того до желтого цвета жидкость, допускается выпадение кристаллов и хлопьев 1 фл.
белого цвета.
(22,0 мл)
Опасные вещества: гуанидин тиоцианат
Консервант: не более О, 15% проклин 300
«ЛБ)) - лизирующий раствор - прозрачная от бесцветного до коричневого цвета
жидкость с взвесью магнитных частиц коричневого или черного цвета. Допус-
кается расслоение на надосадочную жидкость и осадок магнитных частиц. До-
пускается выпадение кристаллов и хлопьев белого цвета. После встряхивания 1 фл.
образуется однородный раствор со взвесью магнитных частиц коричневого или (27,0 мл)
черного цвета.
Опасные вещества: гуанидин тиоцианат
Консервант: не более О, 15% проклин 300
«Pll))-раствор для преципитации - прозрачная бесцветная жидкость. 1 фл.
Опасные вещества: изопропанол (50,0 мл)
«ПР)) - раствор для отмывки - прозрачная бесцветная жидкость.
3 фл.
Опасньте вещества: изопропанол
(по 80,0 мл)
Консервант: не более О, 15% проклин 300
«ЭР)) - раствор для элюции - прозрачная бесцветная жидкость. 1 фл.
Консервант: не более О, 15% проклин 300 (12,0 мл)
Компоненты для ПЦР-РВ. Упаковка 2
«5хПЦР-буфер))- буфер для полимеразной цепной реакции- прозрачная
1 пр.
бесцветная жидкость.
(0,6 мл)
Консервант: не более О, 1% проклин 300
«ПЦР-смесы) -смесь для полимеразной цепной реакции - прозрачная светло-
1 пр.
фиолетового цвета жидкость.
(1,0 мл)
Консервант: не более О, 1% проклин 300
1 пр.
«Таq-полимеразю) -Taq полимераза - прозрачный бесцветный вязкий раствор.
(О, 12 мл)
1 пр.
«Kl)) - калибратор 1-прозрачная бесцветная жидкость.
(О, 15 мл)
1 пр.
«К2)) - калибратор 2 - прозрачная бесцветная жидкость.
(О, 15 мл)
«К3)) - калибратор 3 - прозрачная бесцветная жидкость. 1 пр.
3
Наименование Количество
(О, 15 мл)
1 пр.
«К4» - калибратор 4 - прозрачная бесцветная жидкость.
(О, 15 мл)
1 пр.
«К->> - отрицательный контроль - прозрачная бесцветная жидкость.
(О, 15 мл)
Эксплуатационная документация
Инструкция по применению набора реагентов 1 шт.
Паспорт качества (поставляется отдельно) 1 шт.
Примечание
Число экземпляров паспорта качества каждой серии медицинского изделия определено в договоре на
поставку продукции.
3.2 Число анализируемых образцов биологического материала
Набор реагентов предназначен для ручных и автоматических постановок анализа и
рассчитан на выполнение 96 определений (тестов), вкmочая калибраторы и отрицательный
контроль.
3.3 Принцип метода
Принцип метода основан на количественном определении содержания копий ДНК
TREC и КRЕС с использованием процесса амплификации участков ДНК TREC и КRЕС с
помощью специфичных к этим участкам праймеров и гибридизационных зондов
(флуоресцентно меченные зонды) и Taq ДНК-полимеразы с последующим определением
накопления специфичного флуоресцентного сигнала на амплификаторе с системой
детекции флуоресцентного сигнала в режиме реального времени.
Выявление наличия или отсутствия ДНК TREC и КRЕС и их количественное
определение в анализируемых образцах вкmочает в себя две стадии:
1) выделение ДНК из анализируемых образцов, включающее лизис образцов,
сорбцию ДНК на магнитные частицы, отмывки и элюцию;
2) амплификация методом IЩР-РВ, с использованием специфичных праймеров и
гибридизационных зондов.
Для контроля анализа в составе ШД>-смеси предусмотрены праймеры и
гибридизационный зонд, специфичные для участка гена ALB3 человека (эндогенный
внутренний контроль). Эндогенный внутренний контроль позволяет контролировать этапы
выделения нуклеиновых кислот и проведения ШД>, отсутствие в образце ингибиторов ШД>,
оценивать адекватность взятия и количество материала. С учетом эндогенного контроля
происходит пересчет количества копий ДНК TREC и KREC в анализируемом образце.
3
ALB-Albumin-сывороточный а:1ьбу,1ин
4
ВНИМАНИЕ! Результаты ПЦР-исследования учитываются в комплексной
диагностике заболевания.
4 АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА
РЕАГЕНТОВ
4.1 Диагностическая чувствительность
В ходе клинических испытаний при анализе 84 образцов клинического материала
значение диагностической чувствительности составило 97,0% (интервал 91,0% - 99,0% с
доверительной вероятностью 95,0 %).
4.2 Диагностическая специфичность
В ходе клинических испытаний при анализе 278 образцов клинического материала
значение диагностической специфичности (ДС) составило 98,9% (интервал 97,4% - 99,6% с
доверительной вероятностью 95,0 %).
4.3 Аналитическая специфичность
Набор основан на технологии TaqMan с гибридизационными зондами для определе
ния трех типов мишеней: одной контрольной мишени, которая представляет собой фрагмент
гена альбумина (ген ALB), и двух искомых аналитов -участков ДНК TREC и КRЕС. Прай
меры и зонды были разработаны таким образом, чтобы избежать любой неспецифичной ам
плификации ДНК, выделенной из цельной венозной крови или сухих пятен венозной/капил
лярной крови. Анализ специфичности был проведен с использованием базы данных BLAST,
чтобы убедиться, что при использовании праймеров и зондов, входящих в состав набора
реагентов, амплифицируются только последовательности ALB, TREC и КRЕС человека. Су
щественной гомологии с другими мишенями не найдено.
4.4 Воспроизводимость
Внутрисерийная воспроизводимость анализа была протестирована в ходе клинико
лабораторных испытаний с использованием 21 отрицательного анализируемого образца
(цельная венозная кровь с К2ЭДТ А и сухое пятно венозной крови) от клинически здоровых
пробандов в 6-и повторах на наборах реагентов двух серии (для каждой серии набора
реагента коэффициент рассчитывался по отдельности).
Средний внутрисерийный коэффициент вариации при детекции ДНК КRЕС
17,3%.
независимо от типа использованного биоматериала составил
Средний внутрисерийный коэффициент вариации при детекции ДНК TREC
21,2%.
независимо от типа использованного биоматериала составил
5
Межсерийная воспроизводимость анализа была протестирована в ходе клинико
лабораторных испытаний с использованием 21 отрицательного анализируемого образца
(цельная венозная кровь с К2ЭДТА и сухое пятно венозной крови) на 2 сериях набора
реагентов.
Средний межсерийный коэффициент вариации при детекции ДНК КRЕС независимо
от типа использованного биоматериала составил 11,0%.
Средний межсерийный коэффициент вариации при детекции ДНК TREC независимо
от типа использованного биоматериала составил 10,5%.
Коэффициент вариации результатов измерения содержания ДНК TREC и КRЕС
в образцах №№ 2-4 панели стандартных контрольных образцов
«СКО ДНК(+/-)TREC/KREC/ALB/SМNl» (при содержании аналита свыше 1000 копий/
100000 ядросодержащих клеток), аттестованной ОКК предприятия, не превышает 35%.
4.5 Точность измерения
Погрешность измерения (Л) калибратора «КЗ» в десяти повторах, рассчитанная по
формуле Л = х - q, где х - результат измерения ( среднее по десяти повторам), а q - истинное
(приписанное) значение измеряемой величины, не превышает 1О ОО копий/мл.
4.6 Предел обнаружения
Предел обнаружения (LoD) набора реагентов с использованием СКО №1 панели стан
дартных контрольных образцов «СКО ДНК(+/-)TREC/КREC/ALB/SМNl», аттестованной
ОКК предприятия, составляет:
- равно или менее 100 копий ДНК TREC на 100 ООО ядро содержащих клеток ( лейко
цитов);
- 100 KREC 100
равно или менее копий ДНК на ООО ядросодержащих клеток (лейко
цитов).
4. 7 Правильность измерения
Значения содержания ДНК TREC (копий/105 ядросодержащих клеток (лейкоцитов)),
КRЕС (копий/105 ядросодержащих клеток (лейкоцитов)), ALB (копий/мл) в СКО №№ 2-4
панели стандартных контрольных образцов «СКО ДНК(+/-)TRECIКREC/ALB/SМNl»,
аттестованной ОКК предприятия, соответствуют приписанным диапазонам для данных
образцов (приписанные диапазоны значений содержания целевых аналитов в СКО №№ 2-4
указываются в паспорте на контрольную панель).
4.8 Линейный диапазон
6
Линейный диапазон количественного определения копийности ДНК TREC, KREC и
ALB, определенный с помощью калибраторов «Kl», «К2», «К3» и «К4», составляет от
1,Ох103 до 1,3х107 копий/мл.
4.9 Интерферирующие вещества
В ходе анализа рисков, учитывающего особенности состава тест-системы и
конфигурации анализа (использование специфичных олигонуклеотидных праймеров и
флуоресцентно-меченых олигонуклеотидных зондов, комплементарных участкам
выявляемых ДНК-мишеней; использование эндогенного внутреннего контроля (ALB) в
качестве критерия валидности теста), исключено влияние большинства потенциально
интерферирующих веществ на результат анализа, полученный методом полимеразной
цепной реакции.
Критерием отсутствия влияния потенциально интерферирующих веществ является
валидный результат ПЦР исследования.
С учетом состава тест-системы и конфигурации анализа в качестве потенциальных
интерферирующих веществ оценены гемоглобин, триглицериды, общий билирубин
(компоненты анализируемой биологической матрицы), изопропиловый спирт (компонент
«ПР») и гуанидин тиоцианат (компонент «ПЛ»).
При выделении НК из цельной венозной крови и сухих пятен венозной/капиллярной
крови гемоглобин (200 мг/мл), триглицериды (4 00 мг/дл), общий билирубин (до 60 мг/дл)
не влияют на резу ль тат анализа.
50 5%) -
Гуанидин тиоцианат (до мМ), изопропиловый спирт (до вещества, которые
могут попадать в образец при выделении НК из образца цельной венозной крови или сухого
пятна венозной/капиллярной крови, не влияют на результат анализа.
5 МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ И РИСКИ ПРИМЕНЕНИЯ НАБОРА
РЕАГЕНТОВ
Потенциальный риск применения набора реагентов - класс 26 (Приказ МЗ РФ №4 н
от 06.06.2012 г.).
При работе с набором реагентов соблюдать требования ГОСТ Р ИСО 15190-2023.
«Лаборатории медицинские. Требования безопасности», СанПиН 3.3686-21 «Санитарно
эпидемиологические требования по профилактике инфекционных болезней», методических
указаний МУ 1.3 .2569-09 «Организация работы лабораторий, использующих методы ампли
фикации нуклеиновых кислот при работе с материалом, содержащим микроорганизмы I-IV
7
групп патогенности» и СП 2.1.3678-20 «Санитарно-эпидемиологические требования к экс
плуатации помещений, зданий, сооружений, оборудования и транспорта, а также условиям
деятельности хозяйствующих субъектов, осуществляющих продажу товаров, выполнение
работ или оказание услуг».
К работе с набором реагентов допускают специально обученный персонал, прошед
ший дополнительное профессиональное обучение правилам безопасной работы с микроор
ганизмами III-IV групп патогенности и молекулярно-генетическим методам.
Компоненты набора реагентов «ПЛ», «ЛБ», «ПР», «ЭР» содержат в качестве консер
ванта нс более О, 15 % проклина 300. Компоненты набора реагентов «5xlll.xP буфер», «ГПЩ
смесь» содержат в качестве консерванта не более О, 1 % проклина 300.
Изо пропанол, входящий в состав компонентов «РП» и «ПР», обладает раздражающим
действием. Следует избегать разбрызгивания и попадания на кожу и слизистые. Использо
вать только в хорошо вентилируемом помещении! Избегать разбрызгивания, вдыхания, про
глатывания и попадания компонента на кожу, слизистые и в глаза! Беречь от источников
воспламенения / нагревания / искр / открытого огня! При пожаре тушить огнетушителями
на основе диоксида углерода, порошковым средством для тушения или водяной струей мел
кого разбрызгивания. При борьбе с крупными пожарами применять водяную струю мелкого
разбрызгивания или спиртоустойчивую пену. Полноструйная вода НЕ пригодна для туше
ния!
Гуанидин тиоцианат, входящий с состав компонентов «ПЛ» и «ЛБ», обладает раздра
жающим действием. Следует избегать разбрызгивания и попадания их на кожу и слизистые.
При проглатывании компонентов набора реагентов прополоскать полость рта, обра
титься за медицинской помощью при плохом самочувствии. НЕ вызывать рвоту! При вды
хании компонентов набора реагентов выйти на свежий воздух, обратиться за медицинской
помощью при плохом самочувствии. При попадании компонентов набора реагентов на кожу
и/или одежду немедленно снять всю загрязненную одежду, промыть кожу проточной водой,
обратиться за медицинской помощью при плохом самочувствии. При попадании компонен
тов набора реагентов в глаза осторожно промыть глаза проточной водой в течение несколь
ких минут. Снять контактные линзы (при наличии), если это легко сделать. Продолжить
промывание глаз. Немедленно обратиться за медицинской помощью!
Все реактивы, входящие в состав компонентов набора реагентов в используемых
концентрациях, являются нетоксичными.
Все использованные материалы, инструменты и оборудование, рабочее место дезин
фицировать в соответствии с требованиями СанПиН 3.3686-21 и МУ 287-113.
8
Обеззараживание и/или обезвреживание и утилизацию всех анализируемых образцов,
компонентов и отходов набора реагентов, несущих потенциальную биологическую
опасность, производить в соответствии с разделом «Утилизация набора реагентов»
настоящей инструкции по применению. При удалении отходов после амплификации
(пробирок, содержащих продукты ПЦР) недопустимо открывание пробирок и
разбрызгивание содержимого, поскольку это может привести к контаминации продуктами
ПЦР лабораторной зоны, оборудования и реагентов.
6 ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ, ПРЕДУСМОТРЕННЫЕ ДЛЯ
ИСПОЛЬЗОВАНИЯ В КОМБИНАЦИИ С НАБОРОМ РЕАГЕНТОВ
6.1 При ручной постановке анализа необходимо нижеперечисленное
оборудование и материалы:
- специальный автоматический или ручной перфоратор для выбивания дисков из су
6 3 ,2
хих пятен диаметром мм или мм;
- амплификатор с флуоресцентной детекцией в режиме реального времени (далее по
тексту - амплификатор): «CFX96» («Bio-Rad», США, РУ ФСЗ 2008/03399) или «ДТпрайм»
(ООО «IШО ДНК-Технология», Россия, РУ ФСР 2011/10229);
- бокс биологической безопасности 2-го класса (тип А, оснащение НЕР А фильтрами,
степень рециркуляции воздуха -;:::::,70% или с аналогичными характеристиками);
- бокс абактериальной воздушной среды (ПЦР-бокс, производительность рециркуля
тора не менее 50 м3/ч, мощность бактерицидного УФ-рециркулятора-;:::::, 30 Вт или с анало
гичными характеристиками);
- морозильная камера, поддерживающая температуру от минус 24 до минус 16 °С,
или холодильник с морозильной камерой, поддерживающий температуру от минус 24 до
16
минус °С.
-микроцентрифуга (максимальное ускорение -до 12 100 g);
-
термостат или термостатирующий шейкер, поддерживающие температуру
(80 ± 1) 0С, с максимальной скоростью перемешивания до 1500 об/мин (по применимости);
- встряхиватель для пробирок, типа вортекс (далее по тексту - вортекс) с циркуляци
онно-вибрационным типом движения, частота колебаний 250 - 3000 мин-1 или с аналогич
ными характеристиками;
-
вакуумный аспиратор для удаления над осадочной жидкости с уровнем вакуума
16,4 -81,4 20
кПа и расходом по воздуху-;:::::, л/мин или с аналогичными характеристиками;
- одноканальные полуавтоматические дозаторы пипеточные с переменным объемом,
')
позволяющие отбирать объемы жидкостей от 1 до 1О ОО мкл (0,5-1 О мкл (шаг О, 1 мкл), 10-
100 мкл (шаг 0,5 мкл), 20-200 мкл (шаг 1 мкл) мкл, 100-1000 мкл (шаг 5 мкл)), аттестованные
по значению средней дозы и сходимости результатов, погрешность измерения которых
должна быть не более 3 %;
-многоканальные (8-ми или 12-ти канальные) полуавтоматические дозаторы пипе
точные с переменным объемом, позволяющие отбирать объемы жидкостей от 1 до 1О ОО мкл
( 10-100 мкл (шаг 0,5 мкл), 20-200 мкл (шаг 1 мкл), 50-300 мкл (шаг 5 мкл), 100-1 ООО мкл
(шаг 10 мкл)), аттестованные по значению средней дозы и сходимости результатов, погреш
ность измерения которых должна быть не более 3 %;
- штативы для микропробирок вместимостью 0,2 и 2,0 мл;
- контейнер для сбора и обеззараживания наконечников;
-
одноразовые наконечники для полуавтоматических одно канальных дозаторов пипе-
точных без аэрозольного барьера ( объем до 200 мкл или до 300 мкл);
-
одноразовые наконечники для полуавтоматических одно канальных дозаторов пипе
точных с аэрозольным барьером ( объем до 20, 100, 200, 300 и 1О ОО мкл);
-пробирки одноразовые полипропиленовые вместимостью 1,5 - 2,0 мл, сертифици
рованные на отсутствие РНКаз и ДНКаз;
- тонкостенные бесцветные оптически прозрачные микропробирки объемом 0,2 мл,
стрипы бесцветные оптически прозрачные объемом 0,2 мл или планшеты оптически про
зрачные для ШЩ с рабочим объемом лунки О, 1-0,2 мл, пленка для ШЩ-планшетов оптиче
ски прозрачная клейкая термостойкая, рекомендуемые производителем амплификатора для
ШЩ-РВ, сертифицированные на отсутствие РНКаз и ДНКаз;
- магнитный штатив на 24 пробирки объемом 1,5 мл или 2 мл химически стойкий или
с аналогичными характеристиками;
- халат, шапочки, обувь и одноразовые нестерильные неопудренные медицинские
перчатки.
6.2 При постановке анализа на автоматической станции необходимо:
-специальный автоматический или ручной перфоратор для выбивания дисков (пан
чей) из сухих пятен диаметром 6 мм или 3,2 мм;
-
автоматическая станция для выделения нуклеиновых кислот с принадлежностями
для ШЩ исследований: процессор магнитных частиц для очистки нуклеиновых кислот, кле
ток и белков KingFisher Flex, производства «Терма Фишер Сайентифик Ой», Финляндия
(РУ ФСЗ 2009/05562) или система для автоматического выделения и очистки нуклеиновых
10
кислот из биологического материала AнtoPure 96, производства ООО «Ханьчжоуская ком
2022/16430);
пания инструментов» Китай, (РУ РЗН
-амплификатор: «CFX96» («Bio-Rad», США, РУ ФСЗ 2008/03399) или «ДТпрайм»
(ООО «НПО ДI-П{-Технология», Россия, РУ ФСР 2011/10229);
-бокс биологической безопасности 2-го класса (тип А, оснащение НЕРА фильтрами,
::::::70%
степень рециркуляции воздуха или с аналогичными характеристиками);
-бокс абактериальной воздушной среды (IЩР-бокс, производительность рециркуля
тора не менее 50 м3/ч, мощность бактерицидного УФ-рециркулятора:::::: 30 Вт или с анало
гичными характеристиками);
- 24 16
морозильная камера, поддерживающая температуру от минус до минус °С,
24
или холодильник с морозильной камерой, поддерживающей температуру от минус до
минус 16 °С.
-микроцентрифуга (максимальное ускорение -до 12 100 g);
-
термостат или термостатирующий шейкер, поддерживающие температуру
(80 ± 1) 0С, с максимальной скоростью перемешивания до 1500 об/мин (по применимости);
- вортекс с циркуляционно-вибрационным типом движения, частота колебаний 250 -
3000 мин-1 или с аналогичными характеристиками;
-
одноканальные полуавтоматические дозаторы пипеточные с переменным или фик
сированным объемом, позволяющие отбирать объемы жидкостей от 1 до 1О ОО мкл (0,5-1 О
мкл (шаг 0,1 мкл), 10-100 мкл (шаг 0,5 мкл), 20-200 мкл (шаг 1 мкл) мкл, 100-1000 мкл (шаг
5 мкл)), аттестованные по значению средней дозы и сходимости результатов, погрешность
измерения которых должна быть не более 3 %~
-многоканальные (8-ми или 12-ти канальные) полуавтоматические дозаторы пипе
точные с переменным объемом, позволяющие отбирать объемы жидкостей от 1 до 1О ОО мкл
(10-100 мкл (шаг 0,5 мкл), 20-200 мкл (шаг 1 мкл), 50-300 мкл (шаг 5 мкл), 100-1 ООО мкл
(шаг 1О мкл)), аттестованные по значению средней дозы и сходимости результатов, погреш
ность измерения которых должна быть не более 3 %;
-штативы для микропробирок вместимостью 0,2 и 2,0 мл;
- магнитная подставка для глубоколуночных планшетов (при наличии);
- контейнер для сбора и обеззараживания наконечников;
-
одноразовые наконечники для полуавтоматических одноканальных дозаторов пипе-
точных с аэрозольным барьером ( объем до 20, 100, 200, 300 и 1О ОО мкл);
11
- пробирки одноразовые полипропиленовые вместимостью 1,5 - 2,0 мл, сертифици
рованные на отсутствие РНКаз и ДНКаз;
-тонкостенные бесцветные оптически прозрачные микропробирки объемом 0,2 мл,
стрипы бесцветные оптически прозрачные объемом 0,2 мл или планшеты оптически про
зрачные для ПЦР с рабочим объемом лунки О, 1-0,2 мл, пленка для ПЦР-планшетов оптиче
ски прозрачная клейкая термостойкая, рекомендуемые производителем амплификатора для
ПЦР-РВ, сертифицированные на отсутствие РНКаз и ДНКаз;
- планшеты полипропиленовые глубоколуночные 2,2 мл на 96 лунок и планшеты по
0,5 96
Jtинрuнин~нuвые мл на лунок, совместимые с системой выделения нуклеиновых кис
лот;
-
насадка на магнитные стержни, совместимая с 96-луночными планшетами с макси
мальным рабочим объёмом 2,2 мл;
- ванночки для реагентов из полиэтилентерефталата или полистирола объем до
100 мл стерильные;
-халат, шапочки, обувь и одноразовые нестерильные неопудренные медицинские
перчатки.
7 АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ
Идентификацию и прослеживаемость анализируемых образцов проводить в
соответствии с системой менеджмента качества лаборатории.
ВНИМАНИЕ! Выделять НК из образцов цельной венозной крови или сухих пятен
венозной/капиллярной крови человека необходимо с помощью «Компоненты для выделе
ния. Упаковка 1», входящих в состав набора реагентов.
Забор цельной венозной крови производить одноразовой иглой в специальную
вакуумную систему ( с К2ЭДТ А, КЗЭДТ А или натрия цитратом). Пробирку аккуратно
перевернуть несколько раз вверх дном, чтобы кровь в пробирке тщательно перемешалась с
антикоагулянтом.
ВНИМАНИЕ! Образцы цельной венозной крови НЕ ЗАМОРАЖИВАТЬ!
Антикоагулянты: К2ЭДТА, КЗЭДТА и цитрат натрия не влияют на результаты
анализа.
ВНИМАНИЕ! НЕЛЬЗЯ использовать для забора венозной крови вакуумные
системы, содержащие в качестве антикоагулянта соли гепарина!
Образцы цельной венозной крови могут храниться и транспортироваться:
- в течение 72 часов при температуре от 2 до 8 °С
12
- 8 20 25
в течение часов при температуре от до °С.
После хранения образцов нужно их доводить до комнатной температуры и
3-6
перемешивать кратным переворачиванием пробирки.
Сухие пятна на основе венозной/капиллярной крови человека (далее по тексту - СПК)
могут транспортироваться в условиях температуры окружающей среды, избегая попадания
влаги и храниться в сухом месте при комнатной температуре в течение 24 месяцев.
Для приготовления СПК используют капли крови, взятые обычным образом из
пальца или пункцией вены у детей и взрослых, которые наносят на тест-бланк. Пятна
цельной венозной и юшиш~ярной крови высушивают на воздухе согласно инструкции
производителя тест-бланков.
ВНИМАНИЕ! Эффективность и достоверность результатов анализа зависят от
правильности изготовления СПК. Правильно изготовленные пятна крови не должны
соприкасаться друг с другом, не иметь колец с разным насыщением (неправильное
перемешивание крови перед нанесением) и не содержать посторонних включений. СПК от
различных пациентов (субъектов) во избежание кросс контаминации не должны
соприкасаться между собой. Хранение СПК осуществляют в условиях комнатной
температуры (15-25 °С) и относительной влажности воздуха не более 65%.
ВНИМАНИЕ! На эффективность экстракции ДНК из СПК может оказывать влияние
тип ДНК-карты, использованной для изготовления СПК, в частности, марка
фильтровальной бумаги и наличие лизирующего буфера в зоне нанесения крови.
Для выделения НК из цельной венозной крови необходимо 50 мкл биологического
образца.
Для выделения НК из СПК необходимо выбить 1 панч диаметром 6 мм или 3 панча
3 ,2
диаметром по мм.
Для пациентов старше 50 лет, а также пациентов из групп риска рекомендуется брать
для выделения образцы венозной крови и сухих пятен венозной/капиллярной крови в двух
повторах и усреднять полученные значения.
Выделенные образцы НК из образцов цельной венозной крови или СПК человека
допускается хранить при температуре от 2 до 8 °С в течение 48 часов, при температуре от
минус 24 до минус 16 °С в течение 6 месяцев и при температуре не выше минус 70 °С в
течение года. Для хранения НК необходимо, не захватывая магнетизированную силику,
перенести над осадочную жидкость после выделения НК в новую чистую пробирку,
имеющую специальную маркировку RNase-free, DNase-free.
13
Объем образцов НК, выделенных из цельной венозной крови или СПК на основе
венозной/капиллярной крови, необходимый для проведения анализа ПЦР-РВ, составляет 1О
мкл.
8 ОЖИДАЕМЫЕ И ПРЕДСКАЗУЕМЫЕ ПОБОЧНЫЕ ЭФФЕКТЫ,
СВЯЗАННЫЕ С ПРИМЕНЕНИЕМ НАБОРА РЕАГЕНТОВ
Побочные эффекты, связанные с применением набора реагентов, такие как получение
ложноположительных и ложноотрицательных результатов, могут наблюдаться в
следующих случаях:
Использование компонентов с истекшим сроком годности.
Использование «Компоненты для выделения. Упаковка 1» и «Компоненты для ПЦР
РВ. Упаковка 2» из наборов реагентов разных серий или смешивание их в процессе приго
товления растворов.
Использование компонентов из наборов реагентов других производителей.
Несоблюдение условий и сроков хранения вскрытых компонентов в случае частичной
постановки.
Использование для приготовления реакционной смеси нестерильных пробирок.
Несоблюдение условий хранения анализируемых образцов, которое может привести
к разрушению аналита или появлению в анализируемом образце веществ, искажающих ре
зультат анализа.
Неправильное дозирование растворов, которое приводит как к росту, так и к сниже
нию регистрируемой флуоресценции.
Изменение концентрации раствора за счет испарения жидкости из открытого флакона
с компонентом.
Использование оборудования, не прошедшего регламентированного периодического
технического обслуживания и/или поверки/аттестации и/или эксплуатирующегося не в со
ответствии с инструкцией по применению на данное оборудование.
Использование для работы с компонентами, анализируемыми и контрольными образ
цами нестерильных наконечников.
Внесение анализируемых образцов одним наконечником.
Использование для дезинфекции посуды, оборудования, материалов и рабочих по
верхностей неразрешенных и/или оказывающих влияние на результат ПЦР-РВ дезинфици
рующих средств. Рекомендуется использовать, например, дезсредства: хлорамин и другие
хлорсодержащие средства.
14
Рекомендуется использовать неопудренные перчатки и одноразовые нарукавники.
9 ПОДГОТОВКА «КОМПОНЕНТЫ ДЛЯ ВЫДЕЛЕНИЯ. УПАКОВКА 1»
НАБОРА РЕАГЕНТОВ
Для выделения НК из цельной венозной крови человека или СПК на основе
венозной/капиллярной крови использовать «Компоненты для выделения. Упаковка 1»,
входящие в состав набора реагентов.
Извлечь из коробки набора реагентов «ПЛ», «ЛБ», «РП», «ПР», и «ЭР», проверить
целостность упаковки и срок годности каждого компонента набора реагентов. При
обнаружении повреждения или при истечении срока годности компоненты набора реагентов
следует обработать в соответствии с разделом «Утилизация набора реагентов» настоящей
инструкции по применению.
Непосредственно перед применением «ПЛ» и «ЛБ» в обязательном порядке
инкубировать при 65 °С в течение 30 мин. Компоненты «РП», «ПР», и «ЭР» инкубировать
( 15 25 15
при комнатной температуре от до °С) в течение мин и перемешать содержимое
флаконов.
Хранение: неиспользованные и вскрытые компоненты «ПЛ», «ЛБ», «ПР», «РП» и
«ЭР» хранить при температуре от 2 до 25 °С в течение срока годности набора реагентов.
ВНИМАНИЕ! Для предотвращения рисков приобретения компонентами для
выделения свойств ингибиторов, изменения ими функциональных характеристик
(окисление и пр.) запрещается их облучение УФЛ.
10 ВЫДЕЛЕНИЕ ИК ИЗ ОБРАЗЦОВ ЦЕЛЬНОЙ ВЕНОЗНОЙ КРОВИ
ЧЕЛОВЕКА ИЛИ СУХИХ ПЯТЕН ВЕНОЗНОЙ/КАПИЛЛЯРНОЙ КРОВИ
ЧЕЛОВЕКА
ВНИМАНИЕ! При работе с биоматериШlшни необходиwо использовать только
одноразовые стерwzьные пластиковые расходные материШlы, имеющие специальную
маркировку RNase-free, DNase-free. Для проведения всех манипуляций (за исключение"l/l
отбора супернатанта с помощью вакуумного аспиратора) использовать одноразовые
наконечники с фwzьтршни.
10.1
Ручная методика выделения НК
10.1.1 Предварительная подготовка образцов цельной венозной крови человека
10.1.1.1 Промаркировать по одной одноразовой пластиковой пробирке объёмом
1,5 мл для каждого образца цельной венозной крови человека.
15
10.1.1.2 Перемешать образцы цельной венозной крови человека вручную,
переворачивая пробирку 8-1 О раз.
10.1.1.3 Перемешать «ПЛ» вручную, вращая флакон между ладонями в течение
20
сек.
10.1.1.4 В промаркированные пробирки добавить по 150 мкл «ПЛ».
10.1.1.5 Добавить по 50 мкл образцов венозной крови человека в пробирки,
3-5
ресуспендировав содержимое раз для полного удаления венозной крови с внутренних
3
стенок наконечника, и перемешать содержимое на вортексе в течение сек. Осадить капли
с крышек пробирок кратковременным центрифугированием.
10.1.2 Предварительная подготовка образцов СПК
10.1.2.1 Промаркировать по одной одноразовой пластиковой пробирке объёмом
1,5 мл для каждого образца СПК.
10.1.2.2 Из центральной части сухого пятна с образцом венозной/капиллярной крови
человека выбить с помощью специального пробойника 1 панч диаметром 6 мм или 3 панча
диаметром по 3,2 мм и поместить его (их) в промаркированную пробирку. Рекомендуется
проводить данную процедуру непосредственно перед процедурой выделения Н:К из СПК.
ВНИМАНИЕ! Перед выбиванием каждого нового образца сухого пятна
рекомендуется сделать 2-3 высечки на чистом участке фильтровальной бумаги, что позволит
снизить риск контаминации нового образца.
10.1.2.3 В пробирки с выбитыми дисками добавить по 200 мкл предварительно
перемешанного «ПЛ».
ВНИМАНИЕ! При добавлении реагента «ПЛ» в пробирку, содержащую
биологический материал, следует аккуратно вносить раствор, не касаясь стенок пробирок.
При касании стенки пробирки сменить наконечник.
10.1.2.4 Инкубировать пробирки в твердотельном термостате при температуре 75 °С
в течение 20 минут, перемешивая содержимое на вортексе в течение 3 сек каждые 5 минут.
ВНИМАНИЕ! Избегать интенсивного перемешивания для предотвращения
разрушения бумажной основы диска. При перемешивании на микроцентрифуге-вортексе
необходимо придерживать крышки пробирок во избежание их непроизвольного открытия.
ВНИМАНИЕ! Следует контролировать, чтобы диск сухого пятна
венозной/капиллярной крови постоянно находился в «ПЛ» и максимально отсутствовали
пузыри воздуха между диском и раствором, препятствующие его смачиванию.
После инкубации центрифугировать пробирки на микроцентрифуге в течение 5 сек
на максимальном количестве оборотов.
16
10.1.2.5 Отобрать полностью надосадочную жидкость в чистые промаркированные
пробирки, не упираясь наконечником в диски и не захватывая бумажную основу.
10.1.3
Процедура экстракции ИК
ВНИМАНИЕ! Необходимо периодически встряхивать «ЛБ» для перемешивания
магнитных частиц во время разнесения его по пробиркам.
ВНИМАНИЕ! При выполнении процедуры по пп. 10.1.3.1-10.1.3.7 рекомендуется
открывать крышку только той пробирки, с которой идет работа, и сразу закрывать её после
проведения манипуляции. НЕ открывать сразу несколько пробирок для исключения
контаминации!
10.1.3.1 В пробирку с предварительно подготовленным образцом (цельной веноз
ной крови человека (п. 10.1.1.5) или сухим пятном венозной/капиллярной крови человека (п.
10.1.2.5)) внести 250 мкл предварительно перемешанного «ЛБ», перемешать вручную, ре
суспендируя жидкость с помощью дозатора. Добавить 450 мкл предварительно перемешан
ного «РП», перемешать содержимое пробирок на вортексе в течение 3 сек.
ВНИМАНИЕ! Нельзя использовать цельную венозную кровь и сухое пятно веноз
ной/капиллярной крови без предварительной подготовки.
ВНИМАНИЕ! Обязательно использовать отдельный одноразовый наконечник для
каждой манипуляции, чтобы исключить контаминацию компонентов «ЛБ» и «РП».
10.1.3.2 Инкубировать пробирки в твердотельном термостате при температуре 75 °С
в течение 10 минут. Перемешивать содержимое на вортексе в течение 3 сек каждые 3 ми
нуты.
10.1.3.3 После инкубации перемешать образцы на вортексе в течение 5 сек и осадить
капли на микроцентрифуге на максимальном количестве оборотов.
10.1.3.4 Поместить пробирки в магнитный штатив, выдержать 1-2 минуты, затем
отобрать надосадочную жидкость из пробирок с помощью вакуумного аспиратора или пи
петочного дозатора, не задевая магнитных частиц.
ВНИМАНИЕ! Держать пробирки в магнитном штативе при удалении надосадочной
жидкости. Использовать отдельный одноразовый наконечник с аэрозольным барьером (при
использовании пипеточного дозатора) или без такового (при использовании вакуумного
аспиратора) для каждого анализируемого образца.
ВНИМАНИЕ! При добавлении раствора, пробирки не вынимать из магнитного
штатива! На каждом этапе необходимо убедиться, что магнитные частицы все время
остаются смоченными раствором.
17
НЕ ДОПУСКАТЬ высыхания магнитных частиц!
10.1.3.5 750
Внести по мкл предварительно перемешанного «ПР» в каждую про
бирку.
10.1.3.6 Закрыть пробирки, перемешать содержимое пробирок переворачиванием
магнитного штатива 8-10 раз. НЕ ВЫНИМАТЬ ПРОБИРКИ ИЗ МАГНИТНОГО ШТА
ТИВА! Отобрать над осадочную жидкость из пробирок и с крышек пробирок с помощью
пипеточного дозатора или вакуумного аспиратора, не задевая при этом магнитных частиц и
держа пробирки в магнитном штативе.
10.1.3.7 Повторить процедуру отмывки магнитных частиц по пп. 10.1.3.5-10.1.3.6
еще два раза.
- 3.
Общее количество отмывок
ВНИМАНИЕ! После последней отмывки убедиться, что «ПР» максимально удален
из пробирок. На дне пробирки могут остаться только следовые количества раствора. В
-
противном случае дополнительно удалить остатки «ПР», иначе в процессе дальнейшей
сушки не произойдет полное испарение остатков «ПР», что может привести к
ингибированию ШЩ-РВ и получению сниженных значений концентраций целевых
аналитов или невалидности теста по эндогенному контролю.
10.1.3.8 Открыть пробирки и подсушить осадок магнитных частиц в твердотельном
75 5
термостате при температуре °С в течение минут.
10.1.3.9 Не вынимая пробирки из твердотельного термостата добавить на дно проби
рок по 60 мкл «ЭР». Закрыть крышки пробирок.
10.1.3.10 Проверить, что «ЭР» полностью покрывает магнитные частицы, иначе ак
куратно перемешать в течение 1-3 секунд на вортексе или центрифугировать пробирки для
осаждения сорбента на микроцентрифуге при максимальных оборотах в течение 5-1О сек
(требуется при использовании Мll1 с боковым расположением магнита).
10.1.3.11 Инкубировать пробирки в твердотельном термостате при температуре 75 °С
в течение 10 минут. Перемешивать содержимое на вортексе в течение 3 сек каждые 3 ми
нуты.
10.1.3.12 После инкубации перемешать образцы на вортексе в течение 5 сек и осадить
капли на микроцентрифуге на максимальном количестве оборотов в течение 1 мин.
10.1.3.13 Образцы выделенных НК готовы для постановки ШЩ анализа.
10.1.3.14 Перед внесением в реакционную смесь пробирки с образцами выделенных
НК необходимо поставить на магнитный штатив.
18
ВНИМАНИЕ! Отбирать образец выделенной НК для постановки IП.:(Р анализа необ
ходимо аккуратно, избегая попадания магнитных частиц в наконечник пипеточного доза
тора.
Образцы выделенных НК могут храниться при температуре от 2 до 8 °С в течение
48 часов, при температуре от минус 24 до минус 16 °С в течение 6 месяцев, при температуре
ниже минус 70 °С в течение года. Для хранения НК необходимо, не захватывая магнитные
частицы, перенести надосадочную жидкость после выделения НК в новую чистую про
бирку, имеющую специальную маркировку RNase-free, DNase-free.
10.2
Методика выделения НК с использованием автоматических станций с
магнитной головкой
ВНИМАНИЕ! При использовании автоматической станции для выделения НК
необходимо ознакомиться с инструкцией·по эксплуатации данной автоматической станции.
При смене производителя пластика в обязательном порядке обратиться в компанию,
обслуживающую станцию, и произвести калибровку прибора.
Программы предварительной подготовки (инкубации) образцов СПК и выделения НК
для автоматической станции (установочные файлы) предоставляются производителем
набора реагентов.
При запуске каждой программы проводить визуальный контроль корректности
(
выполнения протокола оценить равномерность перемешивания во всех лунках планшета,
корректность погружения насадки в лунки планшета).
В случае, если запуск программы осуществляется после обеззараживания
автоматической станции УФ-облучением, в обязательном порядке провести проветривание
рабочей камеры в течение не менее 15 мин.
10.2.1 Предварительная подготовка образцов цельной венозной крови человека
10.2.1.1 Предварительную подготовку образцов цельной венозной крови человека
10.1.1
проводить в соответствии с п. данной Инструкции по применению.
10.2.2 Предварительная подготовка образцов СПК
10.2.2.1 Из центральной части сухого пятна с образцом венозной/капиллярной крови
человека выбить с помощью специального пробойника 1 панч диаметром 6 мм или 3 панча
диаметром 3,2 мм в «Планшет глубоколуночный 0,5 мл на 96 лунок».
10.2.2.2 В лунки планшета с выбитыми дисками добавить по 200 мкл предварительно
перемешанного «ПЛ».
19
10.2.2.3 В автоматическую станцию с магнитной головкой в слот 1 поставить планшет
с гребенкой, в слот 8 поставить планшет с выбитыми пятнами в растворе «ПЛ».
10.2.2.4 Запустить программу инкубации при температуре 75 °С в течение 20 минут и
небольшом перемешивании ( скорость перемешивания 1 из 1О , амплитуда 10% ).
ВНИМАНИЕ! Избегать интенсивного перемешивания для предотвращения
разрушения бумажной основы диска.
ВНИМАНИЕ! Диск сухого пятна венозной/капиллярной крови должен постоянно
находиться в «ПЛ».
10.2.3 Подготовка к проведению процедуры выделения НК
10.2.3.1 Приготовить и промаркировать пять глубоколуночных планшетов:
«Образец», «ПР 1», «ПР 2», «ПР 3» и «ЭР».
10.2.3.2 При помощи многоканальных/однокональных дозаторов внести в каждую
лунку соответствующих глубоколуночных планшетов:
•в планшеты «ПР 1», «ПР 2», «ПР 3» - по 750 мкл предварительно перемешанного
«ПР»;
•в планшет «ЭР» - по 80 мкл предварительно перемешанного «ЭР»;
•в планшет «Образец» - по 250 мкл предварительно перемешанного «ЛБ»; потом по
150 мкл или весь объем предварительно подготовленных анализируемых образцов (по
п. 10.2.1.1 или п. 10.2.2.4), перемешать вручную, ресуспедируя жидкость с помощью
дозатора.
ВНИМАНИЕ! При заборе образца для переноса избегать попадания волокон или
фрагментов фильтровальной бумаги в наконечник.
ВНИМАНИЕ! Необходимо периодически встряхивать «ЛБ» для перемешивания
магнитных частиц во время разнесения его по лункам планшета.
• Добавить по 450 мкл предварительно перемешанного «РП».
Глубоколуночные планшеты с «ПРl», «ПР2», «ПР3» и «ЭР» необходимо заклеивать
клейкой пленкой, по типу пленок для ИФА, с целью предотвращения испарения растворов.
10.2.3.3 Поместить новую гребенку на магнитную головку (далее по тексту - МГ) в
планшет для хранения насадки. Поместить все планшеты в автоматическую станцию
согласно протоколу, предварительно сняв клейкие пленки.
10.2.4 Процедура экстракции ИК из образца цельной венозной крови
10.2.4.1 Инкубировать планшет «Образец» по следующей программе при температуре
95 °С:
20
а). 9 мин. при постоянном перемешивании (скорость 2 из 10, амплитуда 30%);
6). 2,5 мин. ожидания;
в). 3 мин. при постоянном перемешивании (скорость 2 из 10, амплитуда 30%);
2,5
г). мин. ожидания;
д). 3 мин. при постоянном перемешивании (скорость 2 из 10, амплитуда 30%);
е ). 2,5 мин. Ожидания.
10.2.4.2 Собрать МГ в планшете «Образец» при настройках - сегмент 1, 3 цикла,
5, 15
скорость магнитов время первого сегмента сек.
10.2.4.3 Переместить МГ с магнитными частицами в планшет «ПР 1», перемешать
содержимое в течении 0,3 мин (скорость 2 из 10, амплитуда 30%), 0,1 мин ожидания. Затем
собрать МГ при настройках - сегмент 1, 2 цикла, скорость магнитов 5, время первого
1
сегмента О сек.
10.2.4.4 Переместить МГ с магнитными частицами в планшет «ПР 2», перемешать
0,3 2 10, 30%), 0,1
содержимое в течении мин (скорость из амплитуда мин ожидания. Затем
собрать МГ при настройках - сегмент 1, 2 цикла, скорость магнитов 5, время первого
1
сегмента О сек.
10.2.4.5 Переместить МГ с магнитными частицами в планшет «ПР 3», перемешать
содержимое в течении 0,3 мин (скорость 2 из 10, амплитуда 30%), 0,1 мин ожидания. Затем
собрать МГ при настройках - сегмент 1, 2 цикла, скорость магнитов 5, время первого
1
сегмента О сек.
10.2.4.6 Переместить МГ с магнитными частицами в планшет «ЭР».
10.2.4.7 Инкубировать планшет по следующей программе при температуре 75 °С:
а). 1,5 мин. при постоянном перемешивании (скорость 2 из 10, амплитуда 40%);
б). 1,0 мин. при постоянном перемешивании ( скорость 1 из 1О , амплитуда 5% );
в). 0,5 мин. при постоянном перемешивании (скорость 2 из 10, амплитуда 40%);
г). 2,0 мин. при постоянном перемешивании (скорость 1 из 10, амплитуда 5%);
д). 0,5 мин. при постоянном перемешивании (скорость 2 из 10, амплитуда 40%);
е). 1,0 мин. при постоянном перемешивании (скорость 1 из 10, амплитуда 5%);
1,0
ж). мин. ожидания.
10.2.4.8 Собрать МГ в планшете при настройках - сегмент 2, 5 циклов, скорость
магнитов 9, время первого сегмента 15 сек, время второго сегмента 5 сек.
10.2.4.9 Удалить МГ с магнитными частицами.
10.2.4.1 О Содержимое лунок планшета «ЭР» содержит выделенные образцы НК.
21
10.2.4.11
По окончании процедуры выделения провести визуальный контроль
выделенных образцов НК (раствор в лунках планшета должен быть прозрачным, без
окрашивания в коричневый цвет и наличия магнитных частиц на стенках лунок). В
противном случае использовать магнитную подставку для глубоколуночных планшетов или
перенести содержимое лунок в предварительно промаркированные пробирки, имеющие
специальную маркировку RN ase-free, DNase-free и осадить магнитные частицы на
1-2
магнитном штативе в течение мин.
10.2.4.12 Образцы выделенных НК готовы для постановки ГЩР-анализа.
10.2.4.13 Образцы выделенных НК могут храниться при температуре от 2 до 8 °С в
течение 48 часов, при температуре от минус 24 до минус 16 °С в течение 6 месяцев, при
температуре ниже минус 70°С в течение года. Для хранения НК необходимо, не захватывая
магнитные частицы, перенести надосадочную жидкость после выделения НК в новую
чистую пробирку, имеющую специальную маркировку RNase-free, DNase-free.
10.2.5 Процедура экстракции НК из образца сухого пятна венозной/капиллярной
крови
10.2.5.1 Инкубировать планшет «Образец» на следующей программе при температуре
75 °С:
а). 1,5 мин. при постоянном перемешивании (скорость 2 из 10, амплитуда 30%);
6). 2,5 мин. ожидания;
в). 0,5 мин. при постоянном перемешивании (скорость 2 из 10, амплитуда 30%);
г). 2,5 мин. ожидания;
д). 0,5 мин. при постоянном перемешивании (скорость 2 из 10, амплитуда 30%);
е). 2,5 мин. Ожидания.
10.2.5.2 Собрать МГ в планшете «Образец» при настройках - сегмент 1, 3 цикла,
скорость магнитов 5, время первого сегмента 15 сек.
10.2.5.3 Переместить МГ с магнитными частицами в планшет «ПР 1)), перемешать
содержимое в течении 0,3 мин ( скорость 2 из 1О , амплитуда 30% ), О, 1 мин ожидания. Затем
собрать МГ при настройках - сегмент 1, 2 цикла, скорость магнитов 5, время первого
сегмента 1 О сек.
10.2.5.4 Переместить МГ с магнитными частицами в планшет «ПР 2)), перемешать
содержимое в течении 0,3 мин (скорость 2 из 10, амплитуда 30%), 0,1 мин ожидания. Затем
собрать МГ при настройках - сегмент 1, 2 цикла, скорость магнитов 5, время первого
сегмента 1 О сек.
22
10.2.5.5 Переместить МГ с магнитными частицами в планшет «ПР 3», перемешать
0,3 2 10, 30%), 0,1
содержимое в течении мин (скорость из амплитуда мин ожидания. Затем
собрать МГ при настройках - сегмент 1, 2 цикла, скорость магнитов 5, время первого
1
сегмента О сек.
10.2.5.6 Переместить МГ с магнитными частицами в планшет «ЭР».
10.2.5.7 Инкубировать планшет на следующей программе при температуре 75 °С:
а). 1,5 мин. при постоянном перемешивании (скорость 2 из 10, амплитуда 40%);
6). 1,0 мин. при постоянном перемешивании (скорость 1 из 10, амплитуда 5%);
в). 0,5 мин. при постоянном нерt;мешивании (скорость 2 из 10, амплитуда 40%);
г). 2,0 мин. при постоянном перемешивании (скорость 1 из 10, амплитуда 5%);
д). 0,5 мин. при постоянном перемешивании ( скорость 2 из 1О , амплитуда 40% );
е). 1,0 мин. при постоянном перемешивании (скорость 1 из 10, амплитуда 5%);
ж). 1,0 мин. ожидания.
10.2.5.8 Собрать МГ в планшете при настройках - сегмент 2, 5 циклов, скорость
магнитов 9, время первого сегмента 15 сек, время второго сегмента 5 сек.
10.2.5.9 Удалить МГ с магнитными частицами.
10.2.5.10 Содержимое лунок планшета «ЭР» содержит выделенные образцы НК.
10.2.5.11 По окончании процедуры выделения провести визуальный контроль
выделенных образцов НК (раствор в лунках планшета должен быть прозрачным, без
окрашивания в коричневый цвет и наличия магнитных частиц на стенках лунок). В
противном случае использовать магнитную подставку для глубоколуночных планшетов или
перенести содержимое лунок в предварительно промаркированные пробирки, имеющие
специальную маркировку RN ase-free, DNase-free и осадить магнитные частицы на
1-2
магнитном штативе в течение мин.
10.2.5.12 Образцы выделенных НК готовы для постановки ПЦР-анализа.
10.2.5.13 Образцы выделенных НК могут храниться при температуре от 2 до 8 °С в
течение 48 часов, при температуре от минус 24 до минус 16 °С в течение 6 месяцев, при
температуре ниже минус 70 °С в течение года. Для хранения НК необходимо, не захватывая
магнитные частицы, перенести надосадочную жидкость после выделения НК в новую
чистую пробирку, имеющую специальную маркировку RNase-free, DNase-free.
23
11 ПОДГОТОВКА ОБОРУДОВАНИЯ ДЛЯ ПЦР-РВ
Для проведения ШЩ-РВ с помощью «Компоненты для ШЩ-РВ. Упаковка 2» с
использованием амплификатора, необходимо его подготовить заранее в соответствии с
руководством по эксплуатации.
12 ПОДГОТОВКА «КОМПОНЕНТЫ ДЛЯ ПЦР-РВ. УПАКОВКА 2)) НАБОРА
РЕАГЕНТОВ
12.1 Подготовка «ПЦР-смесы), «SхПЦР-буфер)), «Kl)>, «К2», «КЗ», «К4» и «К-»
«5хШЩ-буфер», «ШЩ-смесь», «Kl», «К2», «КЗ», «К4» и «К-» готовы к
использованию.
Перед применением все растворы необходимо полностью разморозить при комнатной
температуре. Компоненты «5хШЩ-буфер» и «ШЩ-смесь» после полного размораживания
аккуратно перемешать и осадить капли с крышки пробирки кратковременным
центрифугированием в течение 1-3 с.
Хранение: неиспользованные и вскрытые компоненты «5хШЩ-буфер», «ШЩ
смесь», «Kl», «К2», «КЗ», «К4» и «К-» хранить при температуре от минус 24 до минус 16 °С
в течение срока годности набора реагентов.
ВНИМАНИЕ! В течение установленного срока годности компонентов для ШЩ
8
допускается их замораживание-оттаивание не более раз.
12.2
Подготовка «Таq-полимеразю)
«Таq-полимераза» готова к использованию.
ВНИМАНИЕ! «Taq-noлu.:i,tepaзa» не требует раз.люраживания, пробирку хранить в
K(lj\ltepe 24 16
морозильной при температуре от минус до ,wинус °С. При приготовлении
реакционной смеси добавлять «Таq-поли.меразу» в последнюю очередь. Длительное
хранение при комнатной температуре критически влияет на активность ферл1ента.
Хранение: неиспользованные и вскрытые компоненты «Таq-полимераза» хранить при
температуре от минус 24 до минус 16 °С в течение срока годности набора реагентов.
13 ПРОВЕДЕНИЕ ПЦР-РВ
13.1 Подготовка микропробирок или планшетов для амплификации
ВНИМАНИЕ! При работе с НК необходилю использовать только одноразовые стерwzьные пла
стиковые расходные материШLы, имеющие специШLьную маркировку RNase-free, DNase-free. Для
внесения в пробирки/лунки планшета реагентов, проб НК, кШLибраторов и отрицательного кон
троля использовать одноразовые наконечники с фильтрами.
ВНИМАНИЕ! Запрещено повторное использование лабораторного пластика.
24
ВНИМАНИЕ! Компоненты реакционной смеси следует сwешивать непосредственно перед про
ведение1vt ПЦР-исследованuя
Подготовка Расчет количества микропробирок (N) или лунок планшета производится по
микропробирок/ формуле:
N= n + 5, где n - количество выделенных анализируемых образцов,
планшета ПЦР
5 - калибраторы и отрицательный контроль (5 шт.) - «К 1» , «К2», «КЗ», «К4»
и «К-».
Рекомендуется использовать калибраторы и отрицательный контроль в двух
повторах, тогда расчеты производятся по формуле:
N = n + 1О , где n - количество выделенных анализируемых образцов,
1О - калибраторы и отрицательный контроль в двух повторах каждый -
2 х «К 1» , 2 х «К2», 2 х «КЗ», 2 х «К4» и 2 х «К-».
В случае использования микропробирок отобрать необходимое для проведе
ния анализа число пробирок или стрипованньrх пробирок, промаркировать и
расположить в штативе.
ВНИМАНИЕ! В зависи.,1,юсти от используемого оборудования для проведения ПЦР-РВ надписи на
пробирк.а--с следует располагать таки.\11 образом, чтобы они не мешатzи детектированию ф.rzуорес
центного сигнатю. Си. руководство по использованию аvrплификатора для проведения ПЦР-РВ.
Приготовление «5хПЦР-буфер», «ПЦР-смесь», «Таq-полимеразу» перемешать на вортексе в
реакционной течение l О секунд и осадить капли в течение 1О секунд, непосредственно пе
смеси ред приготовлением реакционной смеси.
В пробирке объемом 1,5 - 2 мл смешать реагенты для приготовления реак
ционной смеси из расчета на необходимое количество микропробирок/лунок
планшета N, согласно приведенной ниже таблице 2.
Таблица 2. Расчеты для приготовления реакционной смеси
Название реагента Объем реагента на Объем реагента для аншlИза
одну реакцию (мик N микропробирок/лунок
ропробирку/лунку) (с учётом 10% запаса объ
ема)
« 5 хПЦР-буфер» 5мюz 5xNxJ,l мкл
«ПЦР-смесь» 9мкл 9xNxJ,l мкл
« Та q-поли.,wераза» 1 мкл 1 xNxJ,l мкл
Перемешать приготовленную реакционную смесь на вортексе в течение 1О се
кунд и осадить капли с крышки пробирки кратковременным центрифугирова
нием в течение 1О секунд.
Внесение реакци- В каждую микропробирку/лунку внести по 15 мкл реакционной смеси на дно
онной смеси микропробирки/лунки планшета.
Внесение образ Внесение образцов в пробирки/лунки с реакционной смесью необходимо
осуществлять в следующей последовательности (для исключения
цов в про
контаминации):
бирки/лунки с
1. 10 мкл «К-»;
реакционной
2. по l О мкл выделенных образцов НК;
смесью 3. 1О мкл «К4»;
4. 1О мкл «КЗ»;
5. 1О мкл «К2»;
6. 10мкл«Кl».
Калибраторы перемешивать на вортексе в течение 1О секунд
непосредственно перед внесением в пробирки/лунки с реакционной смесью
с последующим осаждением капель с крышек пробирок кратковременным
центрифугированием в течение 1О секунд. Перед внесением отрицательного
25
контроля и ДНК анализируемых образцов, перемешивать содержимое
пробирок пипетированием 2-3 раза.
При внесении матрицы (образцы выделенной ДНК, калибраторы) в лунки
планшета/микропробирки с реакционной смесью в обязательном порядке
перемешать смесь и матрицу и удалить остатки ДНК с внутренних стенок
наконечника, ресуспендировав рабочую смесь 3-5 раз.
Проводить смену наконечников при внесении 2-го повтора (дубля)
исследуемого образца (включая «К-», калибраторы).
Планшет заклеить пленкой для ПЦР.
В случае использования микропробирок закрыть крышки. Перед постановкой
в амплификатор необходимо осадить капли со стенок пробирок/планшета
кратковременным центрифугированием (1-3 сек). После центрифугирования
нровеt;ти контроль на отсутствие капель на стенках пробирок/нунок 11ш1.ншета
и на отсутствие в рабочей смеси пузырьков воздуха, т.к. их наличие может
привести к искажению флуоресцентного сигнала и получению
недостоверного результата.
При постановке калибраторов и отрицательного контроля в двух повторах
п.п. 1, 3-6 выполнить в двух повторах без внесения изменения
последовательности внесения образцов в плашки.
Регистрация Выполнить в соответствии с «Процедурой измерения и оценки результата».
резу ль татов
анализа
*Внесение реакционной смеси и образцов в лунки планшета можно производить на
автоматической дозирующей станции. Для этого необходимо запрограммировать внесение
реакционной смеси и образцов (при необходимости обратиться в компанию, обслуживающую
автоматическую дозирующую станцию).
13.2 Процедура измерения и оценка резу ль тата
Программа амплификации (установочный файл) предоставляется производителем
набора реагентов.
Провести ПЦР-РВ в соответствии с программой проведения амплификации и
детекции флуоресцентных сигналов:
Количество Температура Измерение флуоресценции
Время
циклов (ОС) в каналах
1 95 15 мин -
95 10 с -
5* 60 30 с -
72 15 с -
95 10 с -
FAМ/Green,
40* 60 30 с
НЕХ/У ellow и ROX/Orange
72 15 с -
Примечание: При программировании амплификатора CFX96 введенные температурно
временные параметры засчитываются прибором как один цикл (повтор). Поэтому количество
повторов в программе для CFX96 составляет 4 вместо 5 и 39 вместо 40.
26
Для детектирования сигнала при амплификации ДНК TREC и КRЕС в наборе реаген
тов используются гибридизационные зонды, меченные, соответственно, флюорофорами
ROX и НЕХ. Для детектирования сигнала при амплификации ALB (э ндогенный внугренний
контроль) в системе используется гибридизационный зонд, меченный флюорофором F АМ.
Для детекции следует выбирать три канала детекции F AM/Green, НЕХ/У ellow и
ROX/Orange.
Канал детекции FAM/Green HEX/Yellow ROX/Orange
ALB KREC TREC
Мишень
Запрограммировать положение пробирок с калибраторами, отрицательным контро
лем, анализируемыми образцами согласно инструкции по эксплуатации к соответствую
щему амплификатору для ПЦР-РВ. Проверить соответствие значений концентраций калиб
раторов в программе значениям, указанным в Паспорте на набор реагентов. В случае несо
TREC, KREC ALB
ответствия, ввести значения из Паспорта. Концентрации и для анализи
руемых образцов будут вь1считаны автоматически прибором.
Поместить подготовленные пробирки/планшет в амплификатор.
Запустить программу и провести ПЦР-РВ с флуоресцентной регистрацией в режиме
реального·времени. Создание протокола при запуске программы амплификации на приборе
ДТпрайм проводить, используя опцию «Тест». Для этого нажать кнопку «Добавить тест» во
вкладке «Протокол» и выбрать необходимый тест из списка сохраненных шаблонов тестов.
Затем ввести информацию о количестве пробирок с исследуемыми образцами (включая
«К-» и калибраторы) и задать их расположение в матрице термоблока.
ВНИМАНИЕ! Перед каждым запуском программы на амплификаторе ДТпрайм про
водить измерение высоты пробирки согласно инструкции к прибору.
14РАСЧЕТЫ
Полученные данные - кривые накопления флуоресцентного сигнала - анализируют с
помощью программного обеспечения используемого прибора для проведения ПЦР-РВ в
соответствии с инструкцией к прибору.
14.1 Условия правильности работы набора реагентов
В калибраторах прибор должен фиксировать:
- нарастание сигнала флуоресценции в канале ROX (Orange) и определять значение
Ct ROX;
порогового цикла в канале
- нарастание сигнала флуоресценции в канале НЕХ (Yellow) и определять значение
Ct
порогового цикла в канале НЕХ;
27
допускается исключение одного дубля, (при условии, что кривая для повтора имеет
классическую сигмовидную форму).
14.3.2 Анализ обработанных данных:
14.3.2.1. Для отрицательного контроля:
- значение Ct в каналах FAM (Green), НЕХ (Yellow) и ROX (Orange) должно быть
более 39 циклов или не определяться;
- если значение Ct в каналах FAM (Green) и/или НЕХ (Yellow) и/или ROX (Orange)
меньше или равно 39, то это свидетельствует о наличии контаминации в системе. В этом
снучс1е результаты по данной индивидуальной постановке ПЦР-РВ считаются
недостоверными. Требуется предпринять меры по выявлению и ликвидации источника
контаминации и повторить анализ.
14.3.2.2. Для калибраторов «Kl», «К2», «К3» и «К4»:
- полученные значения Ct, должны укладываться в диапазон значений, приведенный
в приложении к паспорту набора реагентов;
- эффективность амплификации (Е) должна находиться в пределах от 95 до 105%, а
2
коэффициент корреляции (R ) - не меньше 0,97;
- Ct
в случае если значения не укладываются в диапазон значений, приведенный в
приложении к паспорту на набор реагентов, результаты по данной индивидуальной
постановке ПЦР-РВ считаются недостоверными. Требуется перестановка ПЦР для всех
проб;
- если коэффициент корреляции R 2 при построении калибровочной кривой меньше
0,97 и/или эффективность амплификации не укладывается в установленный диапазон,
требуется перестановка ПЦР для всех проб.
14.3.2.3. Концентрация ДНК ALB должна быть более 105 копии/мл в анализируемых
образцах. В случае, если концентрация ДНК ALB менее 105 копии/мл в анализируемых
образцах, требуется повторить анализ, начиная с этапа выделения ДНК из цельной венозной
крови/СПК на основе венозной/капиллярной крови человека.
14.4 Интерпретация результатов анализа
Необходимо рассчитать количество копий TREC (КRЕС) на 105 ядросодержащих
клеток (лейкоцитов) с учетом внутреннего контроля ALB по формуле 1:
Кол-во TREC (КRЕС) = кол-во копий TREC (KREC) на мл *l00 ООО (l)
кол-во копий ALB
29
Референсные значения для разных возрастных групп и типов биоматериалов
приведены в таблицах 3-4.
Таблица 3. Биологические референтные интервалы содержания ДНК TREC и KREC в
цельной периферической венозной крови, установленные в ходе исследований условно
здоровой популяции.
ДНК TREC, копий ДНК KREC, копий
Возрастная Границы референтных на 105 ядросодержа- на 105 ядросодержа-
группа интервалов
щих клеток щих клеток
Верхняя граница (97,5% перцентиль) 6838 9874
1-3 месяца
Нижняя граница (2,5% перцентиль) 674 824
Верхняя граница (97,5% перцентиль) 6890 10390
4-11 месяцев
Нижняя граница (2,5% перцентиль) 967 1325
Верхняя граница (97 ,5% перцентиль) 5878 7309
1-3 лет
Нижняя граница (2,5% перцентиль) 575 709
Верхняя граница (97 ,5% перцентиль) 4011 3454
3-5 лет
Нижняя граница (2,5% перцентиль) 387 280
Верхняя граница (97,5% перцентиль) 2470 2382
5-1 О лет
Нижняя граница (2,5% перцентиль) 202 184
Верхняя граница (97,5% перцентиль) 2861 2561
11-17 лет
Нижняя граница (2,5% перцентиль) 158 88
Верхняя граница (97,5% перцентиль) 541 566
18-30 лет
Нижняя граница (2,5% перцентиль) 30 34
Верхняя граница (97 ,5% перцентиль) 441 839
31-41 лет
Нижняя граница (2,5% перцентиль) 16 34
Верхняя граница (97 ,5% перцентиль) 389 832
40-50 лет
Нижняя граница (2,5% перuентиль) 8 8
Верхняя граница (97 ,5% перцентиль) 326 711
51-60 лет
Нижняя граница (2,5% перцентиль) 1 8
Верхняя граница (97 ,5% перцентиль) 134 661
61-70 лет
Нижняя граница (2,5% перцентиль) 2 10
30
| | Верхняя граница (97 ,5% перцентиль) | 479 | 754 |
| -98лет | | | |
| | Нижняя граница (2,5% перцентиль) | 2 | 12 |
| Таблица | 4. Биологические референтные интервалы | содержания ДНК T | REC и |
| х пятнах | венозной/капиллярной периферической кр | ови, установленные | в ход |
| й условн | о-здоровой популяции. | | |
| | ДНК | TREC, копий ДНК | KREC, |
| растная | Границы референтных на 105 | ядросодержа- на 105 | ядросо |
| руппа | интервалов | | |
| | щ | их клеток щ | их кле |
| | Верхняя граница (97,5% перцентилъ) | 7120 | 9496 |
| месяца | | | |
| | Нижняя граница (2,5% перцентиль) | 610 | 854 |
| | Верхняя граница (97 ,5% перцентиль) | 6977 | 10482 |
| месяцев | | | |
| | Нижняя граница (2,5% перцентиль) | 965 | 2086 |
| | Верхняя граница (97,5% перцентиль) | 7182 | 7630 |
| 3 лет | | | |
| | Нижняя граница (2,5% перцентиль) | 572 | 873 |
| | Верхняя граница (97,5% перцентиль) | 3905 | 3495 |
| 5 лет | | | |
| | Нижняя граница (2,5% перцентиль) | 472 | 427 |
| | Верхняя граница (97,5% перцентиль) | 3005 | 2602 |
| О лет | | | |
| | Нижняя граница (2,5% перцентиль) | 168 | 244 |
| | Верхняя граница (97,5% перцентиль) | 2941 | 2500 |
| 17 лет | | | |
| | Нижняя граница (2,5% перцентиль) | 174 | 132 |
| | Верхняя граница (97,5% перцентиль) | 635 | 1460 |
| 30 лет | | | |
| | Нижняя граница (2,5% перцентиль) | 47 | 80 |
| | Верхняя граница (97,5% перцентиль) | 379 | 1209 |
| 1 лет | | | |
| | Нижняя граница (2,5% перцентиль) | 13 | 47 |
| | Верхняя граница (97 ,5% перцентиль) | 366 | 1145 |
| 0 лет | | | |
| | Нижняя граница (2,5% перцентиль) | 11 | 27 |
| | Верхняя граница (97 ,5% перцентиль) | 355 | 1525 |
| 0 лет | | | |
| | Нижняя граница (2,5% перцентиль) | 7 | 25 |
| | Верхняя граница (97,5% перцентиль) | 484 | 1408 |
| 0 лет | | | |
| | Нижняя граница (2,5% перцентиль) | 6 | 49 |
(97 ,5% 754
71-
Т KREC
в сухих е иссле
довани
КОПИЙ
Возр
одержа-
гр
ток
1-3
4-11
1-
3-
5-1
11-1
18-3
31-4
40-5
51-6
61-7
31
Верхняя граница (97 ,5% перцентиль) 307 1508
71-98 лет
Нижняя граница (2,5% перuентиль) 4 27
ОТКЛОНЕНИЯ ОТ ПОПУЛЯЦИОННОЙ НОРМЫ ОТСУТСТВУЮТ
(ОТРИЦАТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗИРУЕМЫЙ ОБРАЗЕЦ), ЕСЛИ:
- значение TREC (KREC), рассчитанное по формуле 1, равно или более нижнего
граничного референсного значения возрастной группы, внутри которой находится пациент
(с убъект), сдавший цельную венозную кровь/СПК на основе венозной/капиллярной крови.
ПОВЫШЕННЫЙ РИСК НАРУШЕНИЙ ЛИМФОПОЭЗА Т- И В- КЛЕТОК
(ПОЛОЖИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗИРУЕМЫЙ ОБРАЗЕЦ), ЕСЛИ:
- Ct по каналам Yellow/Orange для анализируемого образца не определяется;
- значение TREC (КRЕС), рассчитанное по формуле, менее нижнего граничного
референсного значения возрастной группы, внутри которой находится пациент ( субьект),
сдавший цельную венозную кровь/СПК на основе венозной/капиллярной крови человека.
ВНИМАНИЕ! Результаты тестирования данным набором реагентов нельзя
использовать для постановки диагноза.
При получении положительного результата (наличие повышенного риска нарушений
лимфопоэза Т- и В- клеток) при анализе цельной венозной крови или СПК на основе
венозной/капиллярной крови, провести повторную процедуру выделения и амплификации
из анализируемого образца. Повторную постановку теста осуществлять не менее чем в двух
повторах. В случае СПК, если при повторном анализе получен положительный результат,
дополнительно рекомендуется по возможности провести исследование для данного
пациента из цельной венозной крови.
При получении положительного результата (наличие повышенного риска нарушений
лимфопоэза Т- и В- клеток) дальнейшие действия по формированию окончательного
заключения о наличии конкретных патологических состояний, связанных с изменением
количества Т- и В-клеток, осуществляются на усмотрение лечащего врача путем
комплексной оценки клинической картины, данных анамнеза и резу ль татов
дополнительных лабораторных и инструментальных исследований.
14.5 Ограничения теста
На резу ль таты теста может оказать влияние прием препаратов на основе крови ( в
течение последних трех месяцев), моноклональных антител, иммуносупрессивных
32
(
препаратов, кортикостероидов, цитостатиков, а также недавно проведенные за два месяца
до анализа) процедуры переливания крови и нарушение технологии изготовления сухих
пятен венозной/капиллярной крови.
У некоторых лиц возрастом старше 70 лет возможно получение
ложноположительных результатов (выявление патологии в Т- и В-клеточном звеньях
иммунитета), данные результаты необходимо оценивать лечащим врачом в совокупности с
другими анализами.
15 ВНУТРИЛАБОРАТОРНЫЙ КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА ИССЛЕДОВАНИЙ
Для проведения входного контроля качества изделия и периодического
внутрилабораторного контроля качества исследований лаборатория может использовать
образцы сухих пятен венозной/капиллярной крови от людей, с установленным в анамнезе и
подтвержденным другими методами иммунодефицитным состоянием, сопровождающимся
снижением количества КRЕС/ТRЕС, и людей с содержанием в венозной/капиллярной крови
КREC/TREC в пределах установленных норм.
При выявлении в ходе проведения входного контроля качества изделия и/или
периодического внутрилабораторного контроля качества исследований снижения
функциональных характеристик изделия (неадекватная работа калибраторов, не
подтверждение для внутрилабораторных контрольных образцов ранее установленных
характеристик, значения R2 и эффективности амплификации, выходящие за рамки
установленных диапазонов) необходимо проверить следующее: наличие поверки и
калибровки дозаторов пипеточных, исправность и наличие поверки (или технического
освидетельствования) амплификаторов, правильность выставленных параметров на
оборудовании, в т.ч. и под используемый для выделения ДНК пластик, условия проведения
анализа, сроки годности и условия хранения всех реагентов, качество смачивания дисков
раствором лизирующего буфера, качество отмывки магнитных частиц, наличие отклонений
от методики (неполное размораживание компонентов для IЩР, плохое перемешивание
калибраторов, нарушение последовательности внесения калибраторов в плашку/пробирки и
пр.). В случае, если в результате проверки не выявлено несоответствий ни по одному из
вышеперечисленных пунктов, то следует обратиться к производителю изделия.
16 УТИЛИЗАЦИЯ НАБОРА РЕАГЕНТОВ
В процессе использования набора реагентов и утилизации наборов реагентов с истек
шим сроком годности токсичные отходы не образуются.
33
Отходы, образующиеся в процессе использования набора реагентов, относить к
классу Б, наборы реагентов с истекшим сроком годности - к классу Г.
Обращение ( сбор, временное хранение, обеззараживание и/или обезвреживание и
транспортирование) отходов, образующихся в процессе использования и угилизации набора
реагентов с истекшим сроком годности, проводить согласно СанПиН 2.1.3684-21 «Сани
тарно-эпидемиологические требования к содержанию территорий городских и сельских
поселений, к водным объектам, питьевой воде и питьевому водоснабжению, атмосфер
ному воздуху, почвам, жилым помещениям, эксплуатации производственных, обществен
ных помещений, организации и проведению санитарно-противоэпидемических (профи
лактических) мероприятий».
Для обеззараживания и/или обезвреживания отходов в соответствии с МУ 287-113
«Методические указания по дезинфекции, предстерилизационной очистке и стерилизации
изделий медицинского назначения» использовать зарегистрированные в РФ дезсредства и
оборудование в соответствии с инструкциями по их применению.
Отходы угилизировать через организации, имеющие лицензию на этот вид
деятельности.
17 УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ, ТРАНСПОРТИРОВАНИЯ И ЭКСПЛУАТАЦИИ
НАБОРА РЕАГЕНТОВ
Срок годности набора реагентов не более 18 месяцев с даты упаковки, но не более
срока годности входящих в состав набора реагентов компонентов. Если срок годности
18
компонентов менее месяцев, срок годности устанавливается по наименьшему сроку
годности компонента.
Срок годности вскрытых компонентов набора реагентов составляет 18 месяцев с даты
их изготовления, но не более срока годности, указанного на этикетке каждого компонента.
Вскрытые компоненты следует хранить только в течение срока годности набора реагентов.
Набор реагентов с истекшим сроком годности применению не подлежит.
«Компоненты для выделения. Упаковка 1» набора реагентов необходимо хранить и
транспортировать в оригинальной упаковке в соответствии с СанПиН 3.3686-21
«Санитарно-эпидемиологические требования по профилактике инфекционных болезней»
(раздел XL VIII «Условия транспортирования и хранения иммунобиологических
препаратов») при температуре от 2 до 25 °С в течение срока годности. Замораживание не
допускается!
34
«Компоненты для ПЦР-РВ. Упаковка 2» набора реагентов необходимо хранить и
транспортировать в оригинальной упаковке в соответствии с СанПиН 3.3686-21
«Санитарно-эпидемиологические требования по профилактике инфекционных болезней»
XL VIII
(раздел «Условия транспортирования и хранения иммунобиологических
препаратов») при температуре от минус 24 до минус 16 °С в течение срока годности.
Допускается однократное транспортирование «Компоненты для ПЦР-РВ.
Упаковка 2» набора реагентов при температуре от 2 до 8 °С не более 7 суток.
Набор реагентов эксплуатировать при следующих условиях:
температура окружающей среды (17 -27) 0С;
относительная влажность воздуха (не более 70) %;
атмосферное давление (84,0 - 106,7) кПа / (630- 800) мм. рт. ст.
18 ГАРАНТИИ ПРОИЗВОДИТЕЛЯ
Производитель: Общество с ограниченно ответственностью «АБВ-ТЕСТ»
(ООО «АБВ-ТЕСТ»), расположенное по адресу: 121205, г. Москва, тер. Инновационного
Центра Сколково, ул. Нобеля, дом № 7, этаж 2, Часть Помещ. 51.
Производитель гарантирует соответствие выпускаемых наборов реагентов
требованиям нормативной и технической документации.
Безопасность и качество набора реагентов гарантируются в течение всего срока
годности.
Производитель отвечает за недостатки набора реагентов, за исключением дефектов,
возникших вследствие нарушения правил применения, условий транспортирования и
хранения, либо действия третьих лиц, либо непреодолимой силы.
Производитель обязуется за свой счет заменить набор реагентов, технические и
функциональные характеристики (потребительские свойства) которого не соответствуют
нормативной и технической документации, если указанные недостатки явились следствием
скрытого дефекта материалов или некачественного изготовления набора реагентов
производителем.
По вопросам, касающимся качества набора реагентов, обращаться в
ООО «АБВ-ТЕСТ», г. Москва, ул. Тестовская, д. 10, 2-й подъезд, 123112, e-mail:
QAМD@generium.ru, по тел.: +7 (49243) 72-5-20, +7 (49243) 72-5-14. Рекламации
принимаются в письменном виде на бумажном носителе (или в виде скан-копии,
направленной на электронную почту организации), заверенном подписью уполномоченного
лица и печатью организации.
35
19 СИМВОЛЫ, ПРИМЕНЯЕМЫЕ ДЛЯ МАРКИРОВКИ НАБОРА РЕАГЕНТОВ
Символ Наименование символа Символ Наименование символа
гост Р исо 15223-1
Обратитесь к инструкции по при-
~ О!]
Использовать до менению или к инструкции по при-
менению в электронном виде
d &
Дата изготовления Осторожно
ILoтf l1vDI Медицинское изделие для диагно-
Код партии
стики in vitro
, ~ .- ~ .. у Не допускать воздействия сол- Содержимого достаточно для про-
-11~
нечного света w96 ведения n (96) тестов
+ t
Не допускать воздействия влаги Температурный диапазон
! -tt
Хрупкое, обращаться
Верх (ГОСТ 14192)
осторожно
36
Краткая схема анализа
набора реагентов «ИММУНО-БИТ МУЛЬТИ»
1 ПОДГОТОВКА К ПРЕДВАРИТЕЛЬНОЙ ОБРАБОТКЕ ОБРАЗЦОВ ЦЕЛЬНОЙ ВЕНОЗНОЙ КРОВИ
И СУХИХ ПЯТЕН ВЕНОЗНОЙ/КАПИЛЛЯРНОЙ КРОВИ
Перед применением «ПЛ» в обязательном порядке инкубировать при 65 °С в течение 30 мин.
2 ВЫДЕЛЕНИЕ НУКЛЕИНОВЫХ КИСЛОТ С ПОМОЩЬЮ РУЧНОЙ МЕТОДИКИ
ВНИМАНИЕ! При выделении НК с помощью автоматических станuий необходимо следовать алгоритму
инструкции, описанному в соответствующих разделах.
3 ПРЕДВАРИТЕЛЬНАЯ ПОДГОТОВКА ОБРАЗЦОВ ЦЕЛЬНОЙ ВЕНОЗНОЙ КРОВИ ЧЕЛОВЕКА
К ЭТАПУ ВЫДЕЛЕНИЯ НК
3.1 Промаркировать по одной одноразовой пластиковой пробирке объёмом 1,5 мл для каждого образuа uельной
венозной крови человека.
3 .2 Перемешать образцы цельной венозной крови человека вручную переворачивая пробирку 8-1 О раз.
3.3 Перемешать «ПЛ» вручную, вращая флакон между ладонями в течение 20 сек.
3.4 В промаркированные пробирки добавить по 150 мкл «ПЛ».
3.5 Добавить по 50 мкл образцов венозной крови человека в пробирки, ресуспендировав содержимое 3-5 раз для
полного удаления венозной крови с внутренних стенок наконечника, и перемешать содержимое на вортексе в течение
3 сек. Осадить капли с крышек пробирок кратковременным центрифугированием.
4 ПРЕДВАРИТЕЛЬНАЯ ПОДГОТОВКА ОБРАЗЦОВ СУХИХ ПЯТЕН ВЕНОЗНОЙ/КАПИЛЛЯРНОЙ
КРОВИ К ЭТАПУ ВЫДЕЛЕНИЯ НК
4.1 Промаркировать по одной одноразовой пластиковой пробирке объёмом 1,5 мл для каждого образца СПК.
4.2 Из uентральной части сухого пятна с образцом венозной/капиллярной крови человека выбить с помощью
специального пробойника l панч диаметром 6 мм или 3 панча диаметром по 3,2 мм и поместить в промаркированную
пробирку. Рекомендуется проводить данную процедуру непосредственно перед выделением НК из СПК.
ВНИМАНИЕ! Перед выбиванием каждого нового образца сухого пятна рекомендуется сделать 2-3 высечки на чи
стом участке фильтровальной бумаги, что позволит снизить риск контаминации нового образца.
4.3 В пробирки с выбитыми дисками добавить по 200 мкл «ПЛ».
4.4 Инкубировать пробирки в твердотельном термостате при температуре 75 °С в течение 20 минут. Перемешать
содержимое на вортексе 3 сек каждые 5 минут.
ВНИМАНИЕ! Избегать интенсивного перемешивания для предотвращения разрушения бумажной основы диска.
При перемешивании на микроцентрифуге-вортексе необходимо придерживать крышки пробирок во избежание их
непроизвольного открытия.
ВНИМАНИЕ! Следует контролировать, чтобы диск сухого пятна венозной/капиллярной крови должен постоянно
находился в «ПЛ» и максимально отсутствовали пузыри воздуха между диском и раствором, препятствующие его
смачиванию.
После инкубации uентрифугировать пробирки на микроuентрифуге-вортексе в течение 5 сек на максимальном коли
честве оборотов.
4.5 Отобрать полностью надосадочную жидкость в чистые промаркированные пробирки, не упираясь наконеч-
ником в диски и не захватывая бумажную основу.
5 ПОДГОТОВКА К ВЫДЕЛЕНИЮ НУКЛЕИНОВЫХ КИСЛОТ
5.1 Перед применением «ЛБ» в обязательном порядке инкубировать при 65 °С в течение 30 мин. Компоненты «РП»,
«ПР», и «ЭР» инкубировать при комнатной температуре (от 15 до 25 °С) в течение 15 мин
6 ВЫДЕЛЕНИЕ НУКЛЕИНОВЫХ КИСЛОТ ИЗ ПРЕДВАРИТЕЛЬНО ПОДГОТОВЛЕННЫХ ОБРАЗЦОВ
ЦЕЛЬНОЙ ВЕНОЗНОЙ КРОВИ И ОБРАЗЦОВ СУХИХ ПЯТЕН ВЕНОЗНОЙ/КАПИЛЛЯРНОЙ КРОВИ
РУЧНЫМ СПОСОБОМ
6.1 В пробирку с предварительно подготовленным образцом (цельной венозной крови человека (п. 3) или сухим
пятном венозной/капиллярной крови человека (п. 4)) внести 250 мкл предварительно перемешанного «ЛБ», переме
шать вручную, ресуспендируя жидкость с помощью дозатора. Затем добавить 450 мкл предварительно перемешан
ного «РП», перемешать содержимое пробирок на вортексе в течение 3 сек.
ВНИМАНИЕ! Нельзя использовать цельную венозную кровь и сухое пятно венозной/капиллярной крови без пред
варительной подготовки.
ВНИМАНИЕ! Обязательно использовать отдельный одноразовый наконечник для каждой манипуляции, чтобы ис
ключить контаминацию компонентов «ЛБ» и «РП».
6.2 Инкубировать пробирки в твердотельном термостате при температуре 75 °С в течение l О минут. Перемеши-
вать содержимое на вортексе в течение 3 сек каждые 3 минуты.
6.3 После инкубации перемешать образцы на вортексе в течение 5 сек и осадить капли на микроцентрифуге на
максимальном количестве оборотов.
6.4 Поместить пробирки в магнитный штатив, выдержать 1-2 минуты, затем отобрать надосадочную жидкость
из пробирок с помощью вакуумного аспиратора или пипеточного дозатора, не задевая магнитных частиц.
ВНИМАНИЕ! Держать пробирки в магнитном штативе при удалении надосадочной жидкости. Использовать отдель
ный одноразовый наконечник с аэрозольным барьером (при использовании пипеточного дозатора) или без такового
(при использовании вакуумного аспиратора) для каждого анализируемого образца.
37
ВНИМАНИЕ! При добавлении раствора, пробирки не вынимать из магнитного штатива! На каждом этапе необхо
димо убедиться, что магнитные частиuы все время остаются смоченными растворами.
НЕ ДОПУСКАТЬ высыхания магнитных частиu!
6.5 Внести по 750 мкл предварительно перемешанного «ПР» в каждую пробирку.
6.6 Закрыть пробирки, пере 1ешать содержимое пробирок переворачиванием магнитного штатива 8-1 О раз.
НЕ ВЫНИМАТЬ ПРОБИРКИ ИЗ МАГНИТНОГО ШТАТИВА! Отобрать надосадочную жидкость из пробирок и с
крышек пробирок с помощью пипеточного дозатора или вакуумного аспиратора, не задевая при этом магнитных
частиu и держа пробирки в магнитном штативе.
6.7 Повторить процедуру отмывки магнитных частиц по пп. 6.5-6.6 еще два раза. Общее количество
отмывок-3.
ВНИМАНИЕ! После последней отмывки убедиться, что «ПР» максимально удален из пробирок. На дне пробирки
могут остаться только следовые количества раствора. В противном случае - дополнительно удалить остатки «ПР»,
иначе в процессе дальнейшей сушки не произойдет полное испарение остатков «ПР», что приведет к ингибированию
ПЦР-РВ и получению сниженных значений концентраций.
6.8 Открыть пробирки и подсушить осадок магнитных частиц в твердотельном термостате при температуре
75 °С в течение 5 минут.
6.9 Не вынимая пробирки из твердотельного термостата добавить на дно пробирок по 60 мкл «ЭР». Закрыть
крышки пробирок.
6.1 О Проверить, что «ЭР» полностью покрывает магнитные частицы, иначе аккуратно перемешать в течение 1-3
секунд на вортексе или центрифугировать пробирки для осаждения сорбента на микроuентрифуге при максимальных
оборотах в течение 5-1 О сек (требуется при использовании МШ с боковым расположением магнита).
6.11 Инкубировать пробирки в твердотельном термостате при температуре 75 °С в течение 1О минут. Перемеши-
вать содержимое на вортексе в течение 3 сек каждые 3 минуты.
6.12 После инкубации перемешать образцы на вортексе в течение 5 сек и осадить капли на микроuентрифуге на
максимальном количестве оборотов в течение I мин.
6.13 Образцы выделенных НК готовы для постановки ПЦР-анализа.
6.14 Перед внесением в реакционную смесь пробирки с образцами выделенных НК необходимо поставить на маг-
нитный штатив.
ВНИМАНИЕ! Отбирать образец выделенной НК для постановки ПЦР-анализа необходимо аккуратно, избегая по
падания магнитных частиu в наконечник пипеточного дозатора.
ПОДГОТОВКА К ПЦР-АНАЛИЗУ
1. Подготовить амплификатор заранее в соответствии с руководством по эксплуатации.
2. Разморозить «5хПЦР-буфер», «ПЦР-смесь», «К1 », «К2», «КЗ», «К4» и «К-» при комнатной температуре. Компо
ненты «5хПЦР-буфер» и «ПЦР-смесь» перемешать и осадить капли с крышки пробирки.
3. Внимание! «Таq-полимераза» не требует размораживания. При приготовлении реакuионной смеси добавлять
«Таq-полимеразу» в последнюю очередь. Перед применением аккуратно перемешать и осадить капли с крышки.
ПОДГОТОВКА МИКРОПРОБИРОКЛIЛАНШЕТ А
Кш,ибраторы и отрицательный контроль в одном Кш,ибраторы и отрицательный контроль в двух по-
повторе: вторах:
Рассчитать количество микропробирок/лунок (N) по фор- Рассчитать количество микропробирок/лунок (N) по фор-
муле: N= n + 5 муле: N= n + 10
где n - количество анализируемых образцов, где n - количество анализируемых образцов,
5- «Kl», «К2», «КЗ», «К4» и «К-» 10-2х «К1», «К2», «КЗ», «К4» и «К-»
Внимание! Надписи на пробирках следует располагать таким образом, чтобы они не мешали детектированию флу
оресцентного сигнала
ПРИГОТОВЛЕНИЕ РЕАКЦИОННОЙ СМЕСИ
Внимание! Компоненты реакuионной смеси следует смешивать непосредственно перед проведением ПЦР
1. В пробирке объемом 1 5-2 мл смешать реагенты из расчета на необходимое количество N проб:
'
Название реагента Объем реагента на одну реакцию Объем реагента для анализа
N проб
( с учётом 10% запаса объема)
«5 х ПЦР-буфер» 5 мкл 5xNx 1,1 МКЛ
«ПЦР-смесь» 9мкл 9xNx 1,1 МКЛ
«Т аq-полимераза» 1 мкл IxNxl,l мкл
2. Перемешать приготовленную реакционную смесь на вортексе и осадить капли с крышки
ВНЕСЕНИЕ РЕАКЦИОННОЙ СМЕСИ, КАЛИБРАТОРОВ, ОТРИЦАТЕЛЬНОГО КОНТРОЛЯ
И АНАЛИЗИРУЕМЫХ ОБРАЗЦОВ
Кш,ибраторы и отрицательный контроль в одном Кш,ибраторы и отрицательный контроль в двух по
повторе: вторах:
1. В каждую микропробирку/лунку внести по 15 мкл ре 1. В каждую микропробирку/лунку внести по 15 мкл ре
акционной смеси. акционной смеси.
38
2. Внесение образuов в пробирки/лунки с реакционной 2. Внесение образцов в пробирки/лунки с реакционной
смесью необходимо осуществлять в следующей смесью необходимо осуществлять в следующей
последовательности (для исключения контаминации): последовательности (для исключения контаминации):
1. 10 мкл «К-» 1. IОмкл «К-»
2. по l О мкл выделенных образцов НК 2. l О мкл «К-»
3. 1О мкл «К4» 3. по 1О мкл выделенных образцов НК
4. 1О мкл «К3» 4. 1О мкл «К4»
5. 10 мкл «К2» 5. 1О мкл «К4»
6. 10мкл«К1» 6. l О мкл «К3»
7. 10 мкл «К3»
8. 10 мкл «К2»
9. 10 мкл «К2»
10. 10 мкл «Kl»
1 1. 1О мкл « К1 »
ВНИМАНИЕ! Калибраторы перемешивать на вортексе в ВНИМАНИЕ! Калибраторы перемешивать на вортексе в
течение 10 секунд непосредственно перед внесением в течение 10 секунд непосредственно перед внесением в
пробирки/лунки с реакционной смесью с последующим пробирки/лунки с реакционной смесью с последующим
осаждением капель с крышек пробирок осаждением капель с крышек пробирок
кратковременным центрифугированием в течение 1О кратковременным центрифугированием в течение 1О
секунд. Перед внесением отрицательного контроля и секунд. Перед внесением отрицательного контроля и
ДНК анализируемых образцов, перемешивать ДНК анализируемых образцов, перемешивать
содержимое пробирок пипетированием 2-3 раза. содержимое пробирок пипетированием 2-3 раза.
При внесении матрицы (образцы выделенной ДНК, При внесении матрицы (образцы выделенной ДНК,
калибраторы) в лунки планшета/микропробирки с калибраторы) в лунки планшета/микропробирки с
реакционной смесью в обязательном порядке реакционной смесью в обязательном порядке
перемешать смесь и матрицу и удалить остатки ДНК с перемешать смесь и матрицу и удалить остатки ДНК с
внутренних стенок наконечника, ресуспендировав внутренних стенок наконечника, ресуспендировав
рабочую смесь 3-5 раз. рабочую смесь 3-5 раз.
Проводить смену наконечников при внесении 2-го Проводить смену наконечников при внесении 2-го
повтора (дубля) исследуемого образца (включая «К-», повтора (дубля) исследуемого образца (включая «К-»,
калибраторы). калибраторы).
Планшет заклеить пленкой для ПЦР. Планшет заклеить пленкой для ПЦР.
В случае использования микропробирок закрыть В случае использования микропробирок закрыть
крышки. Перед постановкой в амплификатор крышки. Перед постановкой в амплификатор
необходимо осадить капли со стенок пробирок/планшета необходимо осадить капли со стенок пробирок/планшета
кратковременным центрифугирование 1 ( 1-3 сек). После кратковременным центрифугированием ( 1-3 сек). После
центрифугирования провести контроль на отсутствие центрифугирования провести контроль на отсутствие
капель на стенках пробирок/лунок планшета и на капель на стенках пробирок/лунок планшета и на
отсутствие в рабочей смеси пузырьков воздуха, т.к. их отсутствие в рабочей смеси пузырьков воздуха, т.к. их
наличие может привести к искажению флуоресцентного наличие может привести к искажению флуоресцентного
сигнала и получению недостоверного результата. сигнала и получению недостоверного результата.
При постановке калибраторов и отрицательного кон- При постановке калибраторов и отрицательного кон
троля в двух повторах п.п. 1, 3-6 выполнить в двух повто- траля в двух повторах п.п. 1, 3-6 выполнить в двух повто
рах без внесения изменения последовательности внесе- рах без внесения изменения последовательности внесе-
ния об азuов в плашки. ния об азuов в плашки.
ПРОВЕДЕНИЕ АМПЛИФИКАЦИИ С ДЕТЕКЦИЕЙ В РЕЖИМЕ «РЕАЛЬНОГО ВРЕМЕНИ))
1. Провести ПЦР-РВ на амплификаторе («CFX96», «ДТпрайм»») в соответствии с программой, предоставляемой
производителем изделия (установочный файл):
Количество Измерение флуоресценции в ка-
Температура (0С) Время
ЦИКЛОВ пал-ах
1 95 15 мин
-
95 10 с
-
5 60 30 с
-
72 15 с
-
95 10 с
F AM/Green, HEXNe llow и
40 60 30 с ROX/Orange
-
72 15 с
Примечание: При программировании амплификатора CFX96 введенные температурно-временные параметры засчитываются
прибором как один цикл (повтор). Поэтому количество повторов в программе для CFX96 составляет 4 вместо 5 и 39 вместо 40.
2. Детекuию л о есuенuии ос ществлять пот ем каналам детекuии:
FAM/Green HEXNellow ROX/Orange
ALB KREC TREC
3. Запрограммировать положение пробирок с контрольными и анализируемыми образцами согласно рекомендациям,
к соответствующему амплификатору.
4. Проверить соответствие значений концентраций калибраторов в программе значениям, указанным в Паспорте на
39
набор реагентов. В случае несоответствия, ввести значения из Паспорта.
5. Поместить пробирки/планшет в амплификатор, запустить программу и провести ПЦР-РВ.
ВНИМАНИЕ! Перед каждым запуском программы на амплификаторе ДТпрайм проводить измерение высоты про
бирки согласно инструкции к прибору.
ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ
При анализе исходных (необработанных данных):
Кривые флуоресценции для каждого образца/калибратора должны иметь S-образную форму.
При анализе обработанных данных:
Для «К-» Ct в каналах F АМ, НЕХ и ROX должно быть более 39 циклов или не определяться.
Для «KI », «К2», «КЗ» и «К4» Ct должны укладываться в диапазон значений, приведенный в приложении к паспорту,
эффективность амплификации от 95 до 105%, R 2 - не меньше 0,97.
Для анализируемых образцов концентрация ДНК ALB должна быть более 105 копии/мл.
Количество копий TREC (KREC) рассчитывается по формуле:
Кол-во TREC (KREC) = кол-во копий TREC (KREC) на мл *l00 ООО
кол-во копий ALB
Референсные значения для разных возрастных групп приведены в Инструкции по применению данного медицин-
ского изделия.
ОТКЛОНЕНИЯ ОТ ПОПУЛЯЦИОННОЙ НОРМЫ ОТСУТСТВУЮТ, ЕСЛИ:
-значение TREC (KREC), рассчитанное по формуле, равно или более граничного референсного значения возрастной
группы, внутри которой находится пациент, сдавший цельную венозную кровь/сухое пятно венозной/капиллярной
крови человека.
ПОВЫШЕННЫЙ РИСК НАРУШЕНИЙ ЛИМФОПОЭЗА Т- И В- КЛЕТОК, ЕСЛИ:
-Ct по каналам У ellow/Orange для анализируемого образца не определяется;
-значение TREC (KREC), рассчитанное по формуле, менее граничного референсного значения возрастной группы,
внутри которой находится пациент, сдавший цельную венозную кровь/сухое пятно венозной/капиллярной крови
человека.
При получении положительного результата (наличие патологического состояния, вызванного недостатком
лимфопоэза Т-и В-клеток) при анализе СПК на основе венозной/капиллярной крови, провести повторную процедуру
выделения и амплификации из образца СПК на основе венозной/капиллярной крови, в случае, если при повторном
анализе будет получен положительный результат, необходимо по возможности провести исследование для данного
пациента из цельной венозной крови.
Внимание! При получении положительного результата (наличие патологического состояния, вызванного недостатком
Т-и В- клеток) дальнейшие действия выполнять на усмотрение лечащего врача.
Данный набор реагентов нельзя использовать для постановки диагноза.
Дата создания: 16.04.2026 r.
40
АБВ
Название документа: Паспорт качества ««ИММУНО-БИТ МУЛ Ь ТИ» Набор реагентов для
выделения и количественного определения ДНК TREC и KREC методом полимеразной
емени по ТУ 21.20.23-003-17608775-2021»
№ Ве сия№
ОКК-СП-01-Ф-96 01
ТЕСТ
Штамп вида документа: Оригинал, неко"4mролируемоR копия или контролируемая копия №_
«ИММУНО-БИТ МУЛ ЬТ И»
ПАСПОРТ КАЧЕСТВА
«IMMUNO-BIT MUL TI»
CERTIFICAТ Е OF ANALYSIS
ФИО Должность Ответственность Дата Подпись
Старший специалист по « ctJl»
Зайцева Т.Г. контролю качества разработал -- М20 � � г w
« D�» 1
Шеверда Д.В. Генеральный директор утвердил ()\-, 2фs г
�\._ �
Документ вступает в силу на 10-й день после его утверждения.
Документ действителен 5 лет и пересматривается в течение 3-х месяцев до этой дать .
This document is effective 1 О days after its approval.
This document is valid for 5 years and must Ье revised within 3 months before this date.
Контроль изменений/Сhаngе control
Версия № Причина изменения
01 Новый документ
Неко11тролируе,ное ко11ирова11ие II рас11ростра11е1111е этого доку,11е11та за11реще110 Страница 1 из 4
АБВ Тип документа: Форма
Название документа: Паспорт качества ««ИММУНО-БИТ МУЛ Ь ТИ» Набор реагентов для
выделения и количественного определения ДНК TREC и КRЕС методом полимеразной
цепной реакции в режиме реального времени по ТУ 21.20.23-003-17608775-2021»
Структурное подразделение 1 № 1 Версия №
окк JОКК-СП-01-Ф-96 1 01
ТЕСТ
Шmомп вида документа: Оригинал, неконmролируемоR нопия или нонmролируемоR копия №_
АБВ Общество с ограниченной ответственностью «АБВ-ТЕСТ»
ИНН 7751522275, КПП 773101001, ОГРН 1147746699682,
Р/с 40702810740000071095 в ПАО Сбербанк г. Москва
к/с 301О 1 81 О 4 ООО ООО 00 225 БИК 044525225
ТЕСТ 121205, г. Москва тер. Инновационного Центра Сколково,
�л. Нобеля л., дом № 7, этаж 2 Часть Помещ. 51
ПАСПОРТ №
Наименование по ТУ: «ИММУНО-БИТ МУЛЬТИ» Набор реагентов для выделения и количественного опреде-
ления ДНК TREC и KREC методом полимеразной цепной реакции в режиме реального
времени по ТУ 21.20.23-003-17608775-2021
Номер серии: ххххх
Дата производства: ДД.ММ.ГГГГ
Срок годности до: ДД.ММ.ГГГГ
Количество в серии: ХХ наборов
Анализ выполнен по ТУ 21.20.23-003-17608775-2021 с изм. № ХХ
Номер РУ РЗН 2022/17423 от ХХ.ХХ.ХХХХ
Номер Дата Срок Объем х Результат
Наименование показателя Характеристика и нормы
серии изготовления годности кол-во в наборе
КОНТРОЛЯ
Внеш11нй вид
прозрачная бесцветная или
от светло-желтого до жел-
«ПЛ» -nредлизирую- того цвета жидкость, до- 1 фл.
щий раствор пускается выпадение кри- (22,0 мл)
сталлов и хлопьев белого
цвета
прозрачная от бесцветного
до коричневого цвета жид-
кость с взвесью магнИ111ых
частиц коричневого или
черного цвета. Допускается
расслоение на надосадоч-
ную жидкость и осадок
«ЛБ» -лизирующий 1 фл.
магнитных частиц. Доnус-
раствор (27,0 мл)
кается выпадение кристал-
лов и хлопьев белого цвета.
После встряхивания обра-
зуется однородный раствор
со взвесью магнитных ча-
стиц коричневого или чер-
ного цвета
«РП» -раствор для npe- прозрачная бесцветная 1 фл.
циnитации жидкость (50,0 мл)
«ПР» -раствор для от- прозрачная бесцветная 3 фл.
мывки жидкость (по 80,0 мл)
«ЭР» -раствор для Jлю- прозрачная бесцветная 1 фл.
ЦИИ жидкость (12,0 мл)
«5хПЦР-буфер» - буфеr
прозрачная бесцветная 1 пр.
для полимеразной цешюi
жидкость (0,6 мл)
реакции
«ПЦР-смесь» -смесь для
прозрачная жидкость 1 пр.
полимеразной цепной ре
светло-фиолетового цвета (1,0 мл)
акции
«Таq-nолимераза» - Тае прозрачный бесцветный 1 пр.
rюлимераза вязкий раствор (О, 12 мл)
прозрачная бесцветная 1 пр.
«К1 » -калибратор 1
жидкость (0,15 мл)
прозрачная бесцветная 1 пр.
«К2» калftбратор 2
жидкость (0,15 мл)
прозрачная бесцветная 1 пр.
«КЗ» калибратор 3
жидкость (0,15 мл)
прозрачная бесцветная 1 пр.
«К4» калибратор 4
жидкость (0,15 мл)
Некоитпоштvе.мое коттова1111е II пас11постпа11е1111е этого докv.111е11та за11пе111е110 Стnаниuа 2 из 4
| Канал ROX (Orange) | | Канал НЕХ( Yellow) | | |
| CFX96 | Полученное значение | CFX96 | Полученное значение | CFX96 |
| 10-21 | | 10-20 | | 10-21 |
| | [Результат КО//- траля/ | | [Результат контроля] | |
| 15-27 | | 14-26 | | 15-26 |
| | [Результат кон- тооляl | | [Результат ко//mроля] | |
| 21-33 | | 21-32 | | 20-33 |
| | [Результат ко//- траля/ | | [Результат контроля] | |
| 24-35 | | 24-35 | | 23-35 |
| | [Результат кон- тооля/ | | [Результат КО//mроля] | |
| | | НЕХ( Yellow) | | | |
| | Получешюе значение | ДТпрайм | Полученное значение | ДТпрайм | |
| | | 11-16 | | 11-16 | |
| | [Результат КО//- тооляl | | [Результат ко//mроля] | | |
| 16-21 21-27 | | 16-21 21-27 | | 16-21 21-27 | |
| | [Результат кон- траля/ | | [Результат КО//mроля} | | |
| | [Результат кон- тооля/ | | [Результат КО//mроля] | | |
| 25-31 | | 25-31 | | 25-31 | |
| | [Результат кои- траля] | | [Результат КО//mроля] | | |
| должна находиться в пределах от 95 до 105%, а коэффициент корреляции R2 не меньше 0,97 | | | | | |
АБВ
Название документа: Паспорт качества ««ИММУНО-БИТ МУЛЬТИ» Набор реагентов для
выделения и количественного определения ДНК TREC и KREC методом полимеразной
еального в емени по ТУ 21.20.23-003-17608775-2021»
№ Ве сия №
окк ОКК-СП-01-Ф-96 01
ТЕСТ
Штамп аида донуменmо: Оригинал, ненонmролируемоя ноnиR или нонmролируемаR ноnиR №_
1 1 1
«К-» -отрицательный прозрачная бесцветная 1 пр.
контроль жидкость (0,15 мл)
Наименование показа-
Характеристика и нормы Результат контроля
теля
Технические харак.ер11стики
{УказатьC FX96 илиДТnJХJйм/
Канал Полученное значение
FАМ [Результат КО//-
Значение Ct в каналах траля/
FА М, ROX и НЕХ для должно быть более 39 циклов или не определяться
«К-» ROX [Результат ко//-
тrюляl
НЕХ [Результат ко//-
траля/
{указывается в паспорте только в случае использова//uя амплификатора «CFX96»!J
Значение Ct в канале: ал FА М (Green)
должно попадать в еле-
Полученное значение
дующие диапазоны
KI [Результат ко//-
траля}
К2 [Результат ко//-
тооля/
К3 [Результат кон-
тооля!
К4 [Результат кон-
траля]
{указывается в паспорте только в случае использова//uя амплификатооа «ДТп юй.лт!l
Значение Ct в канале:
должно попадать в еле-
дующие диапазоны
KI
К2
К3
К4
)ффсктив1-юсть ампли-
фикации
По�..-азател11 прав11льност11 определе1111я
Предел обнаружения набора реагентов при контроле на СКО №1 панели стан-
Полученное Результат
дартных коfrrролы1ых образцов «СКОД НК(+/-) TREC/KREC/ALB/SM 1»1 дол-
значение контроля
Предел обнаружения жен быть оавен или менее:
-100 копий ДНК TREC на 105 ядросодержащих клеток (лейкоцитов);
-100 копий ДНК KREC на 105 ядросодержащих клеток( лейкоцитов).
Значения целевых аналитов СКО №№ 2-4 панели контрольных образцов «СКО
Полученное Результат
ДНК (+/-)TREC/KREC/ ALB/SM 1»' должны соответствовать приписа1шым
з11ачеш1е контроля
диапазонам для данных образцов в Паспорте на панель СКО .
ДНК TREC (копий/105 ядоосодеожащих клеток (лейкоцитов))
СКО№2 ДНК KREC (копий/105 ядоосодержащих клеток (лейкоцитов))
Правилыюсть измерения
ALB (копий/мл)
ДI IK TREC (копий/105 ядоосодеожащих клеток (лейкоцитов))
CKONo3 ДНК KREC (копнй/105 ядросодсржащих клеток (лейкоцитов))
ALB (копий/мл)
СКО№4 ДНК TREC (копнй/105 ядросодержащнх клеток (лейкоцитов))
Неко11т ол11 е11ше коп11 оваи11е и ас11 ост аие1111е этого док 'ftteuma за11 е11 еио С ани а 3 из 4
АБВ Тип документа: Форма
Название документа: Паспорт качества ««ИММУНО-БИТ МУЛЬТИ» Набор реагентов для
выделения и количественного определения ДНК TREC и КRЕС методом полимеразной
цепной реакции в режиме реального времени по ТУ 21.20.23-003-17608775-2021»
Структурное подразделение 1 № 1 Версия №
окк
IОКК-СП-01-Ф-96 01
1
ТЕСТ
Штамп вида докумl!'нmо: Ориzинол, неконтролируемая нопия или конmролируемо11 коnиR №_
1 ДНК KREC (копий/! О' ядросодержащих клеток (лейкоцитов))
1 ALB (копий/мл)
Наимевование показа-
Характеристика и нормы Результат контроля
теля
Коэффициент вариации результатов измерения содержания ДНК TREC и КRЕС
Полученное Результат
в образцах СКО №№ 2-4 (при содержании аt1алита свыше 1000 копий/ 100 ООО
значение контроля
ядросодержащих клеток) не должен превышать 35%.
Коэффициент вариации результатов измерения содержания
TREC
ДНК TREC в образце СКО № 2 (%СУ)
Воспроизводимость Коэффициент вариации результатов измерения содержания
КRЕС
ДНК KREC в образце СКО № 3 (%СУ)
TREC
Коэффициент вариации результатов измерения содержания
ДНК ТRЕС и КRЕС в образце СКО № 4 (%СУ)
КRЕС
Упаковка В соответствии с ТУ 21.20.23-003-17608775-2021 с изм. № ХХ
Маркировка В соответствии сТ У 21.20.23-003-17608775-2021 с изм. № ХХ
Комnлекп1ость В соответствии с ТУ 21.20.23-003-17608775-2021 с изм. № ХХ
Примеча11ие
1 -панель стандартных контрольных образцов «СКО ДНК(+/-) TREC/KREC/ALB/SMNI» также предназначена для кон-
троля качества других медицинских изделий производства ООО «АБВ-ТЕСТ», поэтому кроме СКО №№ 1-4, она включает кон-
трольные образцы с другими приписанными значениями.
Условия хра11е11ия
«Компоненты для выделения. Упаковка 1 » хранить в соответствии с СанПин 3.3686 при температуре от 2 до 25 °С в течение
срока годности. Замораживание не допускается!
«Компоненты для ПЦР-РВ. Упаковка 2» хранить в соответствии с СанПин 3.3686 при температуре от минус 24 до минус 16
0С в течение срока годности.
Условия тра11спортирова11ия
Транспортирование «Компоненты для выделения. Упаковка 1» набора реагентов производить в соответствии
с СанПин 3.3686 при температуре от 2 до 25 °С в течение срока годности. Замораживание не допускается.
Транспортирование «Компоненты для ПЦР-РВ. Упаковка 2» набора реагентов производить в соответствии
с СанПин 3.3686 при температуре от минус 24 до минус 16 °С в течение срока годности. Допускается однократное транспорти-
рование «Компоненты для ПЦР-РВ. Упаковка 2» набора реагентов при температуре от 2 до 8 °С не более 7 суток.
Набор с истекшим сроком годности применению не подлежит.
Допол11ительиая ииформация
Концентрация калибраторов
Концентрация копий на мл
Калибратор Серия
ДНК TREC/KREC/ALB
KI
К2
К3
К4
«СКО ДНК (+/-) TREC/KREC/ALB/SMN1 » Панель стандартных контрольных образцов, содержащих и не содержащих
ДНК TREC, KREC. ALB. SM 1, на основе сухих пятен крови человека, серия , срок годности до
Заключение: серия . соответствует требованиям ТУ 21.20.23-003-1 7608775-2021 с изм. оХХ.
[Упол11омочешюе лицо] {Ф.И.О уполио.мочеююго лица]
ООО «АБВ-ТЕСТ»
дата подпись Ф.И.О
Неко11тпо1111пvе.;11ое ко1111повш111е II пас11постпа11ет1е этого докvл,еита заппе111е110 Стоаниuа 4 из 4
| ПАСПОРТ БЕЗОПАСНОСТИ «ИММУНО-БИТ МУЛЬТИ» Набор реагентов для выделения и количественного определения ДНК TREC и KREC методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени по ТУ 21.20.23-003-17608775-2021 | |
| Контроль изменений/Change control | |
| Версия № | Причина изменения |
| 03 | Внесение изменений в состав набора реагентов в соответствии с извещением №03-2026 об изменении ТУ 21.20.23-003-17608775-2021 |
| Наименование элемента | Содержание | |
| 1 Идентификация продукции | 1.1 Идентификация продукции | |
| | Наименование | «ИММУНО-БИТ МУЛЬТИ» Набор реагентов для выделения и коли- чественного определения ДНК TREC и KREC методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени по ТУ 21.20.23-003- 17608775-2021 |
| | Краткое описание/ назначе- ние | Набор реагентов предназначен для выделения и количественного определения ДНК TREC и KREC из образцов цельной крови или сухих пятен крови человека методом полимеразной цепной реакции с гибри- дизационно-флуоресцентной детекцией продуктов реакции в режиме реального времени. |
| | Область применения и реко- мендации по применению | Область применения: клиническая лабораторная диагностика. Показания к применению: необходимость количественного определе- ния ДНК TREC и KREC в крови человека для выявления состояний, связанных с дефектом лимфопоэза Т- и B- клеток, в том числе при по- дозрении на первичные и вторичные иммунодефициты. |
| | Ограничения по применению | Только для профессионального использования. Допускать к работе с изделием только специально обученный персо- нал, прошедший дополнительную профессиональную подготовку на курсах повышения квалификации по правилам безопасной работы с микроорганизмами III – IV групп патогенности и методам серологиче- ской диагностики. Не использовать изделие по истечении срока годности. |
| | 1.2 Сведения о производителе (об ответственном лице) | |
| | Полное наименование | Общество с ограниченной ответственностью «АБВ-ТЕСТ» |
| | Сокращенное наименование | ООО «АБВ-ТЕСТ» |
| | Адрес места нахождения | 121205, г. Москва, тер. Инновационного Центра Сколково, ул. Нобеля, дом № 7, этаж 2, Часть Помещ. 51. |
| | Номер телефона | +7 (49243) 72-5-20, +7 (49243) 72-5-14 |
| | Адрес электронной почты | e-mail: QAMD@generium.ru |
| 2 Идентификация опасности(ей) | 2.1 Степень опасности продукции в целом | |
| | Сведения об опасностях для здоровья человека* | Потенциальный риск применения набора реагентов – класс 2б. В условиях применения жидкие компоненты набора реагентов не оказывают вредного действия на организм человека. Сведения о составе жидких компонентов набора реагентов см. 3.2. В рамках применения набор реагентов «ИММУНО-БИТ МУЛЬТИ» не оказывает вредного воздействия на организм человека. При использо- вании по назначению и соблюдении мер предосторожности набор ре- агентов безопасен и контакт с организмом человека не предполагается. Сведения об опасностях веществ в чистом виде, включенных в состав компонента, приведены в п. 11-12. |
| | Сведения об опасностях для окружающей среды* | При соблюдении правил утилизации отходы, образующиеся в про- цессе использования набора реагентов «ИММУНО-БИТ МУЛЬТИ» |
Общество с ограниченной ответственностью «АБВ-ТЕСТ»
ИНН 7751522275, КПП 773101001, ОГРН 1147746699682,
Р/с 40702810740000071095 в ПАО Сбербанк г. Москва
к/с 30101 810 4 000 000 00 225 БИК 044525225
121205, г. Москва тер. Инновационного Центра Сколково,
ул. Нобеля л., дом № 7, этаж 2 Часть Помещ. 51
1 из 9
Общество с ограниченной ответственностью «АБВ-ТЕСТ»
ИНН 7751522275, КПП 773101001, ОГРН 1147746699682,
Р/с 40702810740000071095 в ПАО Сбербанк г. Москва
к/с 30101 810 4 000 000 00 225 БИК 044525225
121205, г. Москва тер. Инновационного Центра Сколково,
ул. Нобеля л., дом № 7, этаж 2 Часть Помещ. 51
компонент относят к классу Б, компонент с истекшим сроком годности
– к классу Г и утилизируют согласно СанПиНу 2.1.3684. Обращение
(сбор, временное хранение, обеззараживание и/или обезвреживание и
транспортирование) отходов, образующихся в процессе использова-
ния и утилизации набора реагентов с истекшим сроком годности, про-
водят согласно СанПиН 2.1.3684-21. Для обеззараживания и/или обез-
вреживания отходов в соответствии с МУ 287-113 используют зареги-
стрированные в РФ дезсредства и оборудование в соответствии с ин-
струкциями по их применению.
Все реактивы, входящие в состав компонента, в используемых концен-
Сведения о физических опас-трациях, являются нетоксичными при использовании по назначению и
ностях* соблюдении мер предосторожности, так как контакт с организмом че-
ловека не предполагается.
Все реактивы, входящие в состав компонента, в используемых концен-
трациях, не создают рисков возникновения инфекционных и микроб-
Сведения об инфекционной,
ных опасностей. При соблюдении правил использования и утилизации
микробной, экологической
набора реагентов рисков возникновения экологических опасностей не
опасностях*
возникает, при этом следует избегать попадания компонентов набора
реагентов в окружающую среду.
2 Идентификация
опасности(ей) 2.2 Сведения о предупредительной маркировке (при наличии)
Медицинское изделие для диагностики in vitro
Осторожно
Предупредительная марки-
ровка ГОСТ Р ИСО 15223-1 Не использовать при повреждении упаковки и обратиться
к инструкции по применению
Обратитесь к инструкции по применению или к инструк-
ции по применению в электронном виде
3.1 Сведения о продукции в целом
Набор реагентов с эксплуатационной документацией, в составе:
Компоненты для выделения. Упаковка 1 – 1 шт., в составе:
«ПЛ» – предлизирующий раствор – 1 фл. (22,0 мл);
«ЛБ» – лизирующий раствор – 1 фл. (27,0 мл);
«РП» – раствор для преципитации – 1 фл. (50,0 мл);
«ПР» – раствор для отмывки – 3 фл. (по 80,0 мл);
«ЭР» – раствор для элюции – 1 фл. (12,0 мл).
Компоненты для ПЦР-РВ. Упаковка 2 – 1 шт., в составе:
Блистер – 1 шт.:
«5×ПЦР-буфер» – буфер для полимеразной цепной реакции – 1 пр. (0,6 мл);
Состав набора реагентов
«ПЦР-смесь» – смесь для полимеразной цепной реакции – 1 пр. (1,0 мл);
«Taq-полимераза» – Taq полимераза – 1 пр. (0,12 мл);
«K1» – калибратор 1 – 1 пр. (0,15 мл);
«K2» – калибратор 2 – 1 пр. (0,15 мл);
3 Состав (инфор-
«K3» – калибратор 3 – 1 пр. (0,15 мл);
мация о компонен-
«K4» – калибратор 4 – 1 пр. (0,15 мл);
тах) «K-» – отрицательный контроль – 1 пр. (0,15 мл).
Эксплуатационная документация, в составе:
Инструкция по применению набора реагентов – 1 шт.;
Паспорт качества (поставляется отдельно) – 1 шт.
3.2 Компоненты
Гигиенические норма-
тивы в воздухе рабочей
Наименование компонента зоны Концентрация в компоненте, %
ПДК р.з., Класс опас-
мг/м3 ности
«ПЛ»
Трис (гидроксиметил) аминометан - 4 Не более 0,5
Гуанидин тиоционат - - Не более 80,0
ЭДТА динатриевая соль 2,0 3 Не более 1,0
2 из 9
| | Мочевина | | 10,0 | 3 | Не более 7,5 |
| | Натрий хлористый | | 2,0 | 3 | Не более 7,5 |
| | β-меркаптоэтанол | | 1,0 | 2 | Не более 3,0 |
| | Проклин 300 | | - | - | Не более 0,15 |
| | «ЛБ» | | | | |
| | Трис (гидроксиметил) аминометан | | - | 4 | Не более 0,5 |
| | Гуанидин тиоционат | | - | - | Не более 80,0 |
| | ЭДТА динатриевая соль | | 2,0 | 3 | Не более 1,0 |
| | Мочевина | | 10,0 | 3 | Не более 7,5 |
| | Натрий хлористый | | 2,0 | 3 | Не более 7,5 |
| | β-меркаптоэтанол | | 1,0 | 2 | Не более 3,0 |
| | Проклин 300 | | - | - | Не более 0,15 |
| | «РП» | | | | |
| | Изопропанол | | 10,0 | 3 | 99,0 |
| | «ПР» | | | | |
| | Трис (гидроксиметил) аминометан | | - | 4 | Не более 0,3 |
| | Натрий хлористый | | 2,0 | 3 | Не более 1,0 |
| | Изопропанол | | 10,0 | 3 | Не более 75,0 |
| | Проклин 300 | | - | - | Не более 0,15 |
| | «ЭР» | | | | |
| | Трис (гидроксиметил) аминометан | | - | 4 | Не более 0,3 |
| | Проклин 300 | | - | - | Не более 0,15 |
| | «5×ПЦР-буфер» | | | | |
| | Аммоний сернокислый | | 10,0 | 3 | Не более 1,1 |
| | Трис(гидроксиметил) аминометан | | - | 4 | Не более 3,9 |
| | Проклин 300 | | - | - | Не более 0,1 |
| | «ПЦР-смесь» | | | | |
| | Магний хлористый 6-ти водный | | 2,0 | 3 | Не более 0,12 |
| | dATP | | нет информации | | |
| | dGTP | | нет информации | | |
| | dCTP | | нет информации | | |
| | TTP | | нет информации | | |
| | Проклин 300 | | - | - | Не более 0,1 |
| | «Taq-полимераза» | | нет информации | | |
| | «К1» | | нет информации | | |
| | «К2» | | нет информации | | |
| | «К3» | | нет информации | | |
| | «К4» | | нет информации | | |
| | «К-» | | нет информации | | |
| | П р и м е ч а н и е - Компоненты1 – водные растворы, в состав которых входят вещества, перечисленные выше; вещества информации об опасности, которых нет; вещества не опасные. Воздействие компонентов на организм определяется входящими в их состав опасными веществами, характеристика которых приведена выше. Жидкие компоненты набора реагентов не представляют опасности, т.к. все опасные вещества содержатся в компонен- тах в очень низких концентрациях2, а объемы компонентов, входящих в состав набора реагентов, малы | | | | |
| 4 Меры первой помощи | 4.1 Наблюдаемые симптомы | | | | |
| | При отравлении ингаляцион- ным путем (при вдыхании) | Острого ингаляционного отравления компонентами «Taq-полиме- раза», «К1», «К2», «К3», «К4», «К-» набора реагентов невозможно. Острое ингаляционное отравление консервантом (проклином 300), входящим в состав компонентов «ПЛ», «ЛБ», «ПР», «ЭР», «5×ПЦР- буфер», «ПЦР-смесь» невозможно, т.к. объем и концентрация консер- ванта очень малы (не более 0,15 %). В случае ингаляционного отравления «ПЛ», «ЛБ» (содержат гуанидин тиоцианат, β-меркаптоэтанол) наблюдается кашель, раздражение ды- хательных путей, удушье. В случае ингаляционного отравления «РП», «ПР» (содержат изопро- панол) наблюдается кашель, раздражение дыхательных путей, уду- шье, головокружение, сонливость. | | | |
| | При воздействии на кожу | Воздействия на кожу компонентов «Taq-полимераза», «К1», «К2», «К3», «К4», «К-» набора реагентов невозможно. В условиях применения «5×ПЦР-буфер» и «ПЦР-смесь» оказывают | | | |
Общество с ограниченной ответственностью «АБВ-ТЕСТ»
ИНН 7751522275, КПП 773101001, ОГРН 1147746699682,
Р/с 40702810740000071095 в ПАО Сбербанк г. Москва
к/с 30101 810 4 000 000 00 225 БИК 044525225
121205, г. Москва тер. Инновационного Центра Сколково,
ул. Нобеля л., дом № 7, этаж 2 Часть Помещ. 51
-
3 из 9
| | | раздражающее действие на кожу. Раздражающее воздействие на кожу консервантом (проклин 300), вхо- дящим в состав компонентов «ПЛ», «ЛБ», «ПР», «ЭР», «5×ПЦР-бу- фер», «ПЦР-смесь» невозможно, т.к. объем и концентрация консер- ванта очень малы (не более 0,15 %). В случае попадания на кожу «ПЛ», «ЛБ» (содержат гуанидин тиоциа- нат, β-меркаптоэтанол) наблюдается раздражение, высушивание и растрескивание кожи. В случае попадания на кожу «РП», «ПР» (содержат изопропанол) наблюдается раздражение, высушивание и растрескивание кожи. |
| | При попадании в глаза | Воздействия на слизистую глаз компонентов «Taq-полимераза», «К1», «К2», «К3», «К4», «ОКО», «К-» набора реагентов невозможно. В условиях применения «5×ПЦР-буфер» и «ПЦР-смесь» оказывают раздражающее действие на слизистую глаз. Раздражающее воздействие на слизистую глаз консервантом (проклин 300), входящим в состав компонентов «ПЛ», «ЛБ», «ПР», «ЭР», «5×ПЦР-буфер», «ПЦР-смесь» невозможно, т.к. объем и концентра- ция консерванта очень малы (не более 0,15 %). В случае попадания в глаза «ПЛ», «ЛБ» (содержат гуанидин тиоцио- нат, β-меркаптоэтанол) наблюдается серьезное повреждение слизи- стой глаз, ожог слизистой, риск слепоты. В случае попадания в глаза «РП», «ПР» (содержат изопропанол) наблюдается раздражение слизистой глаз, риск помутнения роговицы. |
| | При отравлении перораль- ным путем (при проглатыва- нии). | Отравление пероральным путем (при проглатывании) компонентами «Taq-полимераза», «К1», «К2», «К3», «К4», «К-», набора реагентов не- возможно. В условиях применения «5×ПЦР-буфер» и «ПЦР-смесь» оказывают раздражающее действие на слизистые оболочки дыхательных путей. Острое пероральное отравление консервантом (проклин 300), входя- щим в состав компонентов «ПЛ», «ЛБ», «ПР», «ЭР», «5×ПЦР-буфер», «ПЦР-смесь» невозможно, т.к. объем и концентрация консерванта очень малы (не более 0,15 %). В случае перорального отравления «ПЛ», «ЛБ» (содержат гуанидин тиоционат, β-меркаптоэтанол) наблюдается рвота, тошнота, судороги, перфорация желудка. В случае перорального отравления «РП», «ПР» (содержат изопропа- нол) наблюдается сонливость, головная боль, головокружение, тош- нота, рвота, расстройства ЖКТ. |
| | 4.2 Меры по оказанию первой помощи пострадавшим | |
| | При отравлении ингаляционным путем | Свежий воздух, тепло, покой, чистая одежда. При раздражении слизи- стых оболочек - промыть 2 % раствором соды, содовые и масляные ингаляции, теплое молоко с содой. При необходимости обратиться за медицинской помощью |
| | При воздействии на кожу | Снять всю загрязненную одежду, промыть кожу обильно водой. При необходимости обратиться за медицинской помощью. |
| | При попадании в глаза | Обильно промыть глаза и лицо водой в течение нескольких минут, предварительно сняв, контактные линзы (при наличии). Немедленно обратиться за медицинской помощью. |
| | При отравлении пероральным путем | Прополоскать полость рта, обратиться за медицинской помощью при плохом самочувствии. НЕ вызывать рвоту! |
| | Противопоказания | Противопоказаний в рамках применения набора реагентов «ИМ- МУНО-БИТ МУЛЬТИ» по назначению не имеет. |
Общество с ограниченной ответственностью «АБВ-ТЕСТ»
ИНН 7751522275, КПП 773101001, ОГРН 1147746699682,
Р/с 40702810740000071095 в ПАО Сбербанк г. Москва
к/с 30101 810 4 000 000 00 225 БИК 044525225
121205, г. Москва тер. Инновационного Центра Сколково,
ул. Нобеля л., дом № 7, этаж 2 Часть Помещ. 51
4 из 9
| 5 Меры и средства обеспечения пожа- ровзрывобезопас- ности | 5.1 Общая характеристика пожаровзрывоопасности | Компоненты набора реагентов «ПЛ», «ЛБ», «ЭР», «5×ПЦР-буфер», «ПЦР-смесь», «Taq-полимераза», «К1», «К2», «К3», «К4», «К-», упа- ковка набора реагентов пожаровзрыво-безопасны. Компоненты набора реагентов «РП», «ПР» содержат изопропанол, от- носящийся к пожаровзрыво-опасным веществам. При наличии внешнего источника горения: – возможно возгорание инструкции с выделением дыма; – пробирки, флаконы при температуре от 150 °С до 250 °С подверга- ются деструкции с выделением вредных веществ; – возможно возгорание пачки с выделением диоксида углерода (СО ), 2 монооксида углерода (CO - угарный газ), сажи. |
| | 5.2 Показатели пожаровзры- воопасности химической продукции | |
| | 5.3 Продукты горения и/или термодеструкции и вызывае- мая ими опасность. | |
| | 5.4 Рекомендуемые средства тушения пожаров | Набор реагентов не требует использования специальных средств ту- шения пожара. При возгорании тушить углекислотными и порошко- выми огнетушителями или водой. При небольшом возгорании использовать порошковый огнетушитель. При сильном возгорании использовать распыленную водяную струю, водяной туман или огнетушащую пену |
| | 5.5 Запрещенные средства ту- шения пожаров | Полноструйная вода не пригодна для тушения |
| | 5.6 Действия при пожаре | В первую очередь следует руководствоваться общими правилами по- жарной безопасности при возникновении возгорания в помещении. При сильном возгорании большого количества упаковок с набором ре- агентов рекомендуется использовать полное защитное снаряжение (автономный дыхательный аппарат, с полнолицевой маской с подачей воздуха по потребности или с поддержанием положительного избы- точного давления под маской и т.п.). |
| | 5.7 Специфика при тушении | Специфики при тушении нет |
| 6 Меры по предот- вращению нежела- тельных ситуаций и их последствий | 6.1 Меры по предотвращению вредного воздействия на людей, окружающую среду, здания, соору- жения и др. при аварийных и чрезвычайных ситуациях | |
| | Меры индивидуальной за- щиты при работе с изделием | Удалить посторонних. В опасную зону входить в защитных средствах. Пострадавшим оказать первую помощь. При работе с изделием ис- пользовать средства индивидуальной защиты в соответствии с п. 8.3. |
| | Меры по защите окружаю- щей среды | Предотвратить дальнейшую утечку или разлив, если это безопасно. |
| | 6.2 Порядок действий при ликвидации аварийных и чрезвычайных ситуаций | |
| | Действия при утечке, раз- ливе, россыпи | Не прикасаться к пролитым компонентам. Надеть СИЗ: халат, та- почки, перчатки одноразовые, шапочка (при необходимости), защит- ные очки (при необходимости). В случае розлива «ПЛ», «ЛБ», «РП», «ПР», «ЭР», «5×ПЦР-буфер», «ПЦР-смесь», «Taq-полимераза», «К1», «К2», «К3», «К4», «К-» со- брать пролитый компонент с помощью салфетки или использовать инертный сорбент (при наличии). Поместить в емкость для отходов. Утилизировать как отход в соответствии с рекомендациями в инструк- ции по применению набора реагентов. |
| 7 Правила хранения набора реагентов и обра- щения с ним при погрузочно-разгру- зочных работах | 7.1 Меры безопасности при обращении с набором реагентов | |
| | Системы инженерных мер безопасности | Обращаться в соответствии с установившейся практикой техники без- опасности и гигиены. |
| | Меры по защите окружаю- щей среды | Избегать попадания компонентов набора реагентов в окружающую среду (почву, водоемы и т.п.). Утилизировать набор реагентов в стро- гом соответствии с инструкцией по применению. |
| | Рекомендации по безопас- ному перемещению и транс- портированию | Транспортирование «Компоненты для выделения. Упаковка 1» набора реагентов производить в соответствии с СанПиН 3.3686 при темпера- туре от 2 до 25 °С в течение срока годности. Замораживание не допус- кается. Транспортирование «Компоненты для ПЦР-РВ. Упаковка 2» набора реагентов производить в соответствии с СанПиН 3.3686 при температуре от минус 24 до минус 16 °С в течение срока годности. Допускается однократное транспортирование «Компоненты для ПЦР- |
Общество с ограниченной ответственностью «АБВ-ТЕСТ»
ИНН 7751522275, КПП 773101001, ОГРН 1147746699682,
Р/с 40702810740000071095 в ПАО Сбербанк г. Москва
к/с 30101 810 4 000 000 00 225 БИК 044525225
121205, г. Москва тер. Инновационного Центра Сколково,
ул. Нобеля л., дом № 7, этаж 2 Часть Помещ. 51
5 из 9
| | | РВ. Упаковка 2» набора реагентов при температуре от 2 до 8 °С не бо- лее 7 суток. При транспортировании разрешено использовать любой крытый вид транспорта (воздушный, железнодорожный, морской, автомобиль- ный). |
| | 7.2 Правила хранения набора реагентов | |
| | Условия и сроки хранения | Срок годности набора реагентов составляет 18 месяцев. Срок годности вскрытых компонентов набора реагентов составляет 18 месяцев с даты их изготовления, но не более срока годности, ука- занного на этикетке каждого компонента. Вскрытые компоненты сле- дует хранить только в течение срока годности набора реагентов. «Компоненты для выделения. Упаковка 1» хранить в соответствии с СанПиН 3.3686 в оригинальной упаковке при температуре от 2 до 25 °С в течение срока годности. Замораживание не допуска- ется! «Компоненты для ПЦР-РВ. Упаковка 2» хранить в соответствии с Сан- ПиН 3.3686 в оригинальной упаковке при температуре от минус 24 до минус 16 °С в течение срока годности. |
| | Упаковка | Компоненты «5×ПЦР-буфер», «ПЦР-смесь», «Taq-полимераза», «К1», «К2», «К3», «К4» и «К-» дозированы в пробирки с винтовой горлови- ной. Пробирки с компонентами упакованы в пачку пластиковую (бли- стер). Пачка пластиковая (блистер) дополнительно упакована в пачку картонную (ГОСТ 33781). Компоненты «ПЛ», «ЛБ», «РП», «ПР» и «ЭР» должны быть дозиро- ваны во флаконы пластмассовые для упаковки и укупорки лекарствен- ных средств в комплекте с колпачками. Флаконы с компонентами упа- кованы в пачку картонную (ГОСТ 33781) с вкладышем поролоновым или пластиковым, или пакет полиэтиленовый с замком или сварным швом. Групповая и транспортная тары выполнены из гофрированного кар- тона или полимерных материалов. |
| | Меры безопасности и пра- вила хранения в быту | Не применимо. Набор реагентов предназначен только для профессио- нального применения в соответствии с инструкцией по применению. |
| 8 Средства кон- троля над опасным воздействием и средства индиви- дуальной защиты (продолжение) | 8.1 Параметры рабочей зоны, подлежащие обязательному контролю, в соответствии с требованиями страны (стран), на рынке которой об- ращается продукция | Не применимо. Компоненты не содержат никакого существенного ко- личества веществ с предельными значениями, которые необходимо контролировать на рабочем месте. |
| | 8.2 Меры обеспечения содер- жания вредных веществ в до- пустимых концентрациях | |
| | 8.3 Средства индивидуальной защиты персонала | |
| | Защита органов дыхания | Избегать вдыхания. В случае недостаточной вентиляции использовать средства защиты органов дыхания (при необходимости) |
| | Одежда специальная защит- ная | Блузон, брюки, халат, шапочка |
| | Обувь специальная защитная | Тапочки или сабо |
| | Средства защиты рук. | Одноразовые перчатки и нарукавники (при необходимости) |
| | Средства защиты глаз | Очки защитные, полумаска (при необходимости) |
| | Защитные средства при ис- пользовании в быту | Не применимо. Набор реагентов предназначен только для профессио- нального применения в соответствии с инструкцией по применению. |
| 9 Физико-химиче- ские свойства | 1.1 «ПЛ» – предлизирующий раствор | прозрачная бесцветная или от светло-желтого до желтого цвета жид- кость, допускается выпадение кристаллов и хлопьев белого цвета |
| | 1.2 «ЛБ» – лизирующий рас- твор | прозрачная от бесцветного до коричневого цвета жидкость с взвесью магнитных частиц коричневого или черного цвета. Допускается рас- |
Общество с ограниченной ответственностью «АБВ-ТЕСТ»
ИНН 7751522275, КПП 773101001, ОГРН 1147746699682,
Р/с 40702810740000071095 в ПАО Сбербанк г. Москва
к/с 30101 810 4 000 000 00 225 БИК 044525225
121205, г. Москва тер. Инновационного Центра Сколково,
ул. Нобеля л., дом № 7, этаж 2 Часть Помещ. 51
6 из 9
Общество с ограниченной ответственностью «АБВ-ТЕСТ»
ИНН 7751522275, КПП 773101001, ОГРН 1147746699682,
Р/с 40702810740000071095 в ПАО Сбербанк г. Москва
к/с 30101 810 4 000 000 00 225 БИК 044525225
121205, г. Москва тер. Инновационного Центра Сколково,
ул. Нобеля л., дом № 7, этаж 2 Часть Помещ. 51
слоение на надосадочную жидкость и осадок магнитных частиц. До-
пускается выпадение кристаллов и хлопьев белого цвета. После встря-
хивания образуется однородный раствор со взвесью магнитных частиц
коричневого или черного цвета
1.3 «РП» – раствор для преци-
прозрачная бесцветная жидкость
питации
1.4 «ПР» – раствор для от-
прозрачная бесцветная жидкость
мывки
1.5 «ЭР» – раствор для элю-
прозрачная бесцветная жидкость
ции
1.6 «5×ПЦР-буфер» – буфер
для полимеразной цепной ре-прозрачная бесцветная жидкость
акции
1.7 «ПЦР-смесь» – смесь для
полимеразной цепной реак-прозрачная жидкость светло-фиолетового цвета
ции
1.8 «Taq-полимераза» - Taq
прозрачный бесцветный вязкий раствор
полимераза
1.9 «K1» - калибратор 1 прозрачная бесцветная жидкость
1.10 «K2» – калибратор 2 прозрачная бесцветная жидкость
1.11 «K3» – калибратор 3 прозрачная бесцветная жидкость
1.12 «K4» – калибратор 4 прозрачная бесцветная жидкость
1.13 «K-» – отрицательный
прозрачная бесцветная жидкость
контроль
Стабилен в рамках применения набора реагентов ««ИММУНО-БИТ
10.1 Химическая стабиль-
МУЛЬТИ» по назначению при соблюдении рекомендуемых условий
ность
использования и хранения.
10 Стабильность 10.2 Реакционная способ-
Не применимо
продукта ность
Нарушение допустимых сроков и температуры хранения
10.3 Условия, которых сле-
Не использовать после окончания срока годности
дует избегать
Не использовать, если упаковка повреждена
Информация отсутствует.
Все реактивы, входящие в состав компонента изделия в используемых
11.1 Общая характеристика концентрациях, не оказывают токсичного действия при применении
воздействия компонента по назначению в составе набора реагентов. При использо-
вании по назначению и соблюдении мер предосторожности компонент
безопасен и контакт с организмом человека исключен.
11.2 Пути воздействия (инга-
См. п. 4.1. При использовании по назначению и соблюдении мер
ляционный, пероральный,
предосторожности компонент безопасен и контакт с организмом чело-
при попадании на кожу и в
века не предполагается.
глаза)
11 Информация о При использовании по назначению и соблюдении мер предосторожно-
11.3 Поражаемые органы,
токсичности сти компонент безопасен и контакт с организмом человека не предпо-
ткани и системы человека
лагается.
11.4 Сведения об опасных
для здоровья воздействиях См. п. 4.1. При использовании по назначению и соблюдении мер
при непосредственном кон-предосторожности компонент безопасен и контакт с организмом чело-
такте, а также последствия века не предполагается.
этих воздействий
Об опасных для здоровья человека воздействиях при непосредствен-
11.5 Сведения об опасных от-
ном контакте с набором реагентов см. 4.1. Последствия этих воздей-
даленных последствиях воз-
ствий и сведения об опасных отдаленных последствиях воздействия
действия на организм
на организм не изучались.
7 из 9
| | 11.6 Показатели острой ток- сичности [LD (ЛД ), LK 50 50 50 (ЛK ), путь поступления, вид 50 животного] | Информация отсутствует, т.к. данные показатели, как правило, указы- ваются для чистых веществ в паспортах безопасности на реактивы. При использовании по назначению и соблюдении мер предосторожно- сти набор реагентов безопасен и контакт с организмом человека не предполагается. |
| 12 Информация о воздействии на окружающую среду | 12.1 Общая характеристика воздействия на объекты окру- жающей среды | Избегать попадания в окружающую среду. Применение набора реаген- тов по назначению и при соблюдении мер предосторожности при экс- плуатации, хранении, транспортировании и утилизации не оказывает пагубного воздействия на окружающую среду. |
| | 12.2 Пути воздействия на окружающую среду | |
| | 12.3 Наиболее важные харак- теристики воздействия на окружающую среду | |
| 13 Рекомендации по удалению отхо- дов (остатков) | 13.1 Меры безопасности при обращении с отходами, обра- зующимися при применении, хранении, транспортирова- нии | При соблюдении правил утилизации отходы, образующиеся в про- цессе использования набора реагентов «ИММУНО-БИТ МУЛЬТИ» компонент относят к классу Б, компонент с истекшим сроком годности – к классу Г и утилизируют согласно СанПиНу 2.1.3684. Обращение (сбор, временное хранение, обеззараживание и/или обезвреживание и транспортирование) отходов, образующихся в процессе использова- ния и утилизации набора реагентов с истекшим сроком годности, про- водят согласно СанПиН 2.1.3684-21. Для обеззараживания и/или обез- вреживания отходов в соответствии с МУ 287-113 используют зареги- стрированные в РФ дезсредства и оборудование в соответствии с ин- струкциями по их применению. |
| | 13.2 Сведения о местах и спо- собах обезвреживания, ути- лизации, захоронения или уничтожения отходов про- дукции, включая упаковку. | Отходы утилизировать через организации, имеющие лицензию на этот вид деятельности. |
| | 13.3 Рекомендации по удале- нию отходов, образующихся при применении продукции в быту | Не применимо. Набор реагентов предназначен только для профессио- нального применения в соответствии с инструкцией по применению. |
| 14 Информация при перевозках (транспортирова- нии) | 14.1 Номер ООН (UN) | Не применимо |
| | 14.2 Надлежащее отгрузоч- ное и транспортное наимено- вания | Не применимо |
| | 14.3 Применяемые виды транспорта | При транспортировании разрешено использовать любой крытый вид транспорта (воздушный, железнодорожный, морской, автомобиль- ный). |
| | 14.4 Классификация опасно- сти груза по ГОСТ 19433 | Не применимо |
| | 14.5 Классификация опасно- сти груза в соответствии с Ре- комендациями ООН (в том числе группа упаковки) | Не применимо |
| 15 Информация о национальном и международном за- конодательствах | 15.1 Национальное законодательство | |
| | 1 Инструкция по применению набора реагентов «ИММУНО-БИТ МУЛЬТИ», проект; 2 Технические условия 21.20.23-003-17608775-2021 на набор реагентов «ИММУНО-БИТ МУЛЬТИ» с изм. 1-3, проект; 3 Приказ МЗ РФ №4н от 06.06.2012 г. «Об утверждении номенклатурной классификации меди- цинских изделий»; 4 ГОСТ Р ИСО 15223-1. Изделия медицинские. Символы, применяемые при маркировании ме- дицинских изделий, на этикетках и в сопроводительной документации. Часть 1. Основные тре- бования.; 5 СанПиН 1.2.3685-21 «Гигиенические нормативы и требования к обеспечению безопасности и (или) безвредности для человека факторов среды обитания». Введен в действие 01.03.2021 г.; | |
Общество с ограниченной ответственностью «АБВ-ТЕСТ»
ИНН 7751522275, КПП 773101001, ОГРН 1147746699682,
Р/с 40702810740000071095 в ПАО Сбербанк г. Москва
к/с 30101 810 4 000 000 00 225 БИК 044525225
121205, г. Москва тер. Инновационного Центра Сколково,
ул. Нобеля л., дом № 7, этаж 2 Часть Помещ. 51
8 из 9
| | 6 ГОСТ 12.1.005. ССБТ. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны; 7 Паспорт безопасности «Tris» в соответствии с ГОСТ 30333-2007 версия №14.02, дата редакти- рования 04.02.2021, дата печати 04.02.2021; 8 Паспорт безопасности «Guanidine thiocyanate» в соответствии с Постановлением (EU) No. 453/2010; 9 Паспорт безопасности в соответствии с 91/155/ЕЭС. ЭДТА tetrasodium salt dihydrate p. A. Дата печати: 03.02.2015, дата редактирования: 19.07.2014 г., номер версии: 3; 10 Паспорт безопасности химической продукции. Карбамид (мочевина). ПБ № 00206492.21.28429 от 20.07.2012 г., действителен до 12.07.2017 г. ОАО «Тольяттиазот», г. Тольятти; 11 ГОСТ 4233-77 «Реактивы. Натрий хлористый. Технические условия (с Изменениями N 1, 2)»; 12 Паспорт безопасности «β-меркаптоэтанол» в соответствии с ГОСТ 30333-2007; 13 «Проклин» в соответствии с регламентом (ЕС) № 1907/2006 версия 5.6, дата ревизии 05.12.2017, дата печати 02.03.2018; 14 Паспорт безопасности «Изопропиловый спирт» в соответствии с ГОСТ 9805-84; 15 ГОСТ 3769. Реактивы. Аммоний сернокислый. Технические условия. Введен в действие 30.06.1979 г.; 16 Паспорт безопасности химической продукции. Магний хлористый 6-водный. РПБ № 93524115.91.28864. Введен в действие 03.09.2012 г.; 17 ГОСТ Р ИСО 15190. Национальный стандарт Российской Федерации. Лаборатории медицин- ские. Требования безопасности; 18 МУ 1.3.2569-09. 1.3. Эпидемиология. Организация работы лабораторий, использующих ме- тоды амплификации нуклеиновых кислот при работе с материалом, содержащим микроорга- низмы I - IV групп патогенности. Методические указания" (утв. Роспотребнадзором 22.12.2009); 19 ГОСТ 12.1.044. Межгосударственный стандарт. Система стандартов безопасности труда. По- жаровзрывоопасность веществ и материалов. Номенклатура показателей и методы их опреде- ления; 20 ГОСТ Р 33756. Упаковка потребительская полимерная. Общие технические условия. Введен в действие 17.10.2016 г.; 21 Демидов П.Г., Шандыба В.А., Щеглов П.П. «Горение и свойства горючих веществ». М., Строй- издат 1992 г., с. 111; 22 Щеглов П.П., Иванников В.Л. «Пожароопасность полимерных материалов». М., Стройиздат 1992 г., с. 110; 23 МУ 287-113 «Методические указания по дезинфекции, предстерилизационной очистке и сте- рилизации изделий медицинского назначения». | |
| | 15.2 Международные кон- венции и соглашения | Не применимо. |
| 16 Дополнитель- ная информация | 16.1 Сведения об издании (переиздании) ПБ | Версия 03. Переиздание |
| | 16.2 Перечень источников данных, использованных при составлении паспорта безопасности | Другой информации, кроме приведенной выше, нет, но эта информация не претендует быть всеобъемлющей и должна использоваться только в ознакомительных целях. Информация в Паспорте безопасности основана на нынешнем состоянии знаний о продукции и применима к компонентам набора реагентов «ИММУНО-БИТ МУЛЬТИ» с учетом соответствую- щих мер предосторожности. Данные опираются на актуальные знания, однако, они не являются гарантией каких-либо конкретных свойств набора реагентов и не устанавливают никаких, действующих с юридиче- ской точки зрения норм и требований. |
Общество с ограниченной ответственностью «АБВ-ТЕСТ»
ИНН 7751522275, КПП 773101001, ОГРН 1147746699682,
Р/с 40702810740000071095 в ПАО Сбербанк г. Москва
к/с 30101 810 4 000 000 00 225 БИК 044525225
121205, г. Москва тер. Инновационного Центра Сколково,
ул. Нобеля л., дом № 7, этаж 2 Часть Помещ. 51
Введен в действие: 16.04.2026
Срок действия до: бессрочно
Согласовано: Устинов А.С, представитель
ООО «АБВ-ТЕСТ» по доверенности №07/25 от
02.09.2025 г.
9 из 9
Общество с ограниченной ответственностью «АБВ-ТЕСТ»
АБВ ИНН 7751522275, КПП 773101001, ОГРН 1147746699682,
Р/с 40702810740000071095 в ПАО Сбербанк r. Москва
к/с 301О 1 81О 4 ООО ООО 00 225 БИК 044525225
121205, r. Москва тер. Инновационного Центра Сколково,
ТЕСТ
ул. Нобеля л., дом № 7, этаж 2 Часть Помещ. 51
и
Устинов
.С.
((
ФОТОГРАФИЧЕСКИЕ ИЗОБРАЖЕНИЯ ОБЩЕГО ВИДА
МЕДИЦИНСКОГО ИЗДЕЛИЯ ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ IN VITRO
«ИММУНО-БИТ МУ ЛЬТИ»
Набор реагентов для выделения и количественного определения
ДНК TREC и КRЕС методом полимеразной цепной реакции в режиме
реального времени по ТУ 21.20.23-003-17608775-2021
г. Москва
2025
1. Первичная упаковка «Компоненты для выделения. Упаковка 1»
2
«ПЛ» – предлизирующий раствор
3
«ЛБ» – лизирующий раствор
4
«РП» – раствор для преципитации
5
«ПР» – раствор для отмывки
6
«ЭР» – раствор для элюции
7
2. Первичная упаковка «Компоненты для ПЦР-РВ. Упаковка 2»
8
«5×ПЦР-буфер» – буфер для полимеразной цепной реакции
9
«ПЦР-смесь» – смесь для полимеразной цепной реакции
10
«Taq-полимераза» - Taq полимераза
11
«K1» - калибратор 1
12
«K2» – калибратор 2
13
«K3» – калибратор 3
14
«K4» – калибратор 4
15
«K-» – отрицательный контроль
16
3. Блистерная упаковка «Компоненты для ПЦР-РВ. Упаковка 2»
17
18
19
20
4. Потребительская упаковка «Компоненты для выделения. Упаковка 1»
21
22
23
24
25
26
27
28
29
30
31
32
33
34
35
36
5. Потребительская упаковка «Компоненты для ПЦР-РВ. Упаковка 2»
37
38
39
40
41
42
43
44
45
46
47
48
6. Транспортная упаковка «Компоненты для выделения. Упаковка 1»
49
50
7. Транспортная упаковка «Компоненты для ПЦР-РВ. Упаковка 2»
51
52