Набор реагентов для определения соматических мутаций в гене BRAF (V600, V600E и V600K) методом ПЦР в режиме реального времени (BRAF 3) — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
=== файл: unknown__BRAF 3_Маркировка.pdf ===
--- стр. 1 ---
ВКАЕ 3
+ ДНК-ТЕХНОЛОГИЯ Маркировка наборареагентов
< С.А.Самарин
«2» ожстее ор 2025г.
МАРКИРОВКАМЕДИЦИНСКОГОИЗДЕЛИЯ
ДЛЯДИАГНОСТИКИ/1\У ИТКО
Наборреагентов
для определениясоматических мутацийв генеВКАЕ(У600,Уб00ЕиУ600К)
методомПЦРврежимереального времени
(ВКАЕ3)
2025 г.
ВКАЕ3
с ДНК-ТЕХНОЛОГИЯ Маркировканабора реагентов
гея к директор
иаееЬ С.А.Самарин
«2» ожстее ор 2025г.
МАРКИРОВКАМЕДИЦИНСКОГОИЗДЕЛИЯ
ДЛЯДИАГНОСТИКИ1\УИТКО
Наборреагентов
дляопределениясоматическихмутацийв генеВКАЕ(У600,Уб00ЕиУ600К)
методомПЦРврежимереального времени
(ВКАЕ3)
2025 г.
--- стр. 2 ---
^^
3
Маркировка наборареагентов№ ДНК ТЕХНОЛОГИЯ яАЕ
Маркировка изделия
Маркировка медицинского изделия для диагностики 71 уЙто «Набор реагентов для определения
соматических мутаций в гене ВКАЕ (У600, Уб600Е и У600К) методом ПЦР в режиме реального
времени(ВКАЕ3)»соответствуеттребованиям:
- п.6.2 ГОСТ Р 51088-2013 «Медицинские изделия для диагностики ин витро. Реагенты,
наборы реагентов, тест-системы, контрольные материалы, питательные среды. Требования к
изделиямиподдерживающейдокументации»;
-ГОСТ Р ИСО 18113-2-2024«Медицинские изделия для диагностики 70 уйто. Информация,
предоставленная изготовителем (маркировка).Часть2. Реагенты для диагностики 71 УЙтО ДЛЯ
профессиональногоиспользования»;
-ГОСТ Р ИСО 15223-1-2023«Изделия медицинские. Символы, применяемые для передачи
информации,предоставляемойизготовителем.Часть 1.Основныетребования»;
-требованиямп. 1.5поТУ20.59.52-032-89545560-2025.
Маркировка медицинского изделия для диагностики #1 УИго «Набор реагентов для
определениясоматическихмутацийвгенеВКАЕ (У600,Уб00Е иУ600К)методомПЦРврежиме
реальноговремени(ВКАЕ3)»выполненапечатнымспособомивключает:
>» — информацию непосредственно на коробке, нанесенную типографским способом,
содержащую(образцысм.лист _7 ):
— логотип;
— — адресизготовителяиегоконтактныеданные.
» — этикетку накоробкунаборареагентов, содержащуюинформацию
(образцысм.лист 57 );
— наименованиеизготовителя,илитоварныйзнакизготовителя,илилоготип;
— — адресизготовителя;
— — полноеисокращенноенаименованиенаборареагентов;
— — каталожныйномер;
— — вариантисполнения;
— — составизделия;
— — номерсерии;
— — датаизготовления;
— — срокгодности;
— — условияхранения;
— — указаниенаналичие«холодовойчасти»наборареагентов;
— — символ«Содержимогодостаточнодляпроведения<п>тестов»;
— — символ «Обратитесь к инструкции по применению или к инструкции по применению в
электронном виде»;
- символ«Нестерильно»;
— символ «Медицинское изделие для диагностики 110уйГО»;
— штрих-код(Оаа Мах);
— надпись«Предназначенодляпрофессиональногоприменения»;
— номертехническихусловий;
— регистрационныйномермедицинскогоизделия.
с ДНК-ТЕХНОЛОГИЯ маркировка наборареагентов
Маркировка изделия
Маркировка медицинского изделия для диагностики 71 уЙто «Набор реагентов для определения
соматических мутаций в гене ВКАЕ (У600, Уб600Е и У600К) методом ПЦР в режиме реального
времени(ВКАЕ3)»соответствуеттребованиям:
- п.6.2 ГОСТ Р 51088-2013 «Медицинские изделия для диагностики ин витро. Реагенты,
наборы реагентов, тест-системы, контрольные материалы, питательные среды. Требования к
изделиямиподдерживающейдокументации»;
-ГОСТ Р ИСО 18113-2-2024«Медицинскиеизделиядлядиагностики 70 уйто. Информация,
предоставленная изготовителем (маркировка).Часть2. Реагенты для диагностики 71 УЙтО ДЛЯ
профессиональногоиспользования»;
-ГОСТ Р ИСО 15223-1-2023«Изделия медицинские. Символы, применяемые для передачи
информации,предоставляемойизготовителем.Часть 1.Основныетребования»;
-требованиямп. 1.5поТУ20.59.52-032-89545560-2025.
Маркировка медицинского изделия для диагностики #1 УЙто «Набор реагентов для
определениясоматическихмутацийвгенеВКАЕ (У600,Уб00ЕиУ600К)методомПЦРврежиме
реальноговремени(ВКАЕ3)»выполненапечатнымспособомивключает:
>» — информацию непосредственно на коробке, нанесенную типографским способом,
содержащую(образцысм.лист 9 у:
— логотип;
— — адресизготовителяиегоконтактныеданные.
» — этикетку накоробкунаборареагентов,содержащуюинформацию
(образцысм.лист 57 ):
— наименованиеизготовителя,илитоварныйзнакизготовителя,илилоготип;
— — адресизготовителя;
— — полноеисокращенноенаименованиенаборареагентов;
— — каталожныйномер;
— — вариантисполнения;
— — составизделия;
— — номерсерии;
— — датаизготовления;
— — срокгодности;
— — условияхранения;
— — указаниенаналичие«холодовойчасти»наборареагентов;
— — символ«Содержимогодостаточнодляпроведения<п>тестов»;
— — символ «Обратитесь к инструкции по применению или к инструкции по применению в
электронном виде»;
— символ«Нестерильно»;
— символ «Медицинское изделие для диагностики 110уйГО»;
— штрих-код(Оаа Мах);
— надпись«Предназначенодляпрофессиональногоприменения»;
Ш
номертехническихусловий;
— регистрационныйномермедицинскогоизделия.
--- стр. 3 ---
РД Маркировка набора реагентов
» этикетку на блок компонентов (полиэтиленовый пакет (гриппер)) или каждый
компонент, входящий в состав набора реагентов, содержащую следующую информацию
(образцы см.лист И 6 7й Ф ):
Ш
наименованиеизготовителя,илитоварныйзнакизготовителя,илилоготип;
— сокращенноенаименованиеизделия;
— наименованиекомпонента;
— объём/количествокомпонента;
— —— номерсерии;
— срокгодности;
— —— условияхранения;
- символ«Недопускатьвоздействиясолнечногосвета»(принеобходимости);
Ы
символ«Медицинскоеизделиедлядиагностики77 УЙГО».
Примечания:
1. Информация об изготовителе, службе клиентской поддержке, сайте нанесена
непосредственнонакоробкунаборареагентов.
2. Размер внутренней упаковки не достаточен для размещения указанного содержания
информации на этикетках компонентов, в связи с чем, надпись или символ «Медицинское
изделиедлядиагностики/пуйто»нанекоторыхкомпонентахопущены.
3. — Требованиеобуказании «сокращенногонаименования изделия»распространяетсятолькона
специфичные компоненты для данного набора реагентов: смесь для амплификации
ВКАЕ 3.1, смесь для амплификации ВКАЕ 3.2, смеси для амплификации, запечатанные
парафиномиположительныйконтрольныйобразец.
4. Требование об указании знака токсичности, агрессивности или другой опасности не
применимо,таккакнаборреагентовнесодержитвеществвопасныхконцентрациях.
5. Надписи при маркировке изделия частично заменены символами, соответствующими
требованиямГОСТРИСО 15223-1.
6. — Допускается«Положительныйконтрольныйобразец»маркироватькак«К-+».
7. — Примаркировкенаборареагентовдопускаетсянанесениенадписи«Веа!-Нте».
8. При маркировке набора реагентов наносят штрих-код (Оа!а Майх), который включает
уникальный код внутренней системы учета для идентификации и прослеживаемости серии
припроизводственаборареагентовнапредприятии.
9. — Примаркировкекомпонентовнаборареагентовдопускаетсянанесениевариантаисполнения.
10. При маркировке компонентов набора реагентов допускается нанесение штрих-кода (Оа!а
Машх),который включает уникальный кодвнутренней системыучетадля идентификации и
прослеживаемостисерииприпроизводственаборареагентовнапредприятии.
11. Требованияобуказании «каталожногономера»нераспространяетсянаупаковку«холодовой
части»наборареагентов.
12. Маркировка и информация должна быть изложена (представлена) на русском языке.
Допускается на коробке информацию о производителе (изготовителе), иных специальных
сведенийилоготипприводитьнарусскомианглийскомязыках.
13. Допускается нанесение на внешнюю упаковку (потребительскую тару) иных специальных
сведений, не имеющих рекламного характера, а также пиктограмм и голограмм
(ГОСТР 51088, подпункт 6.2.10). Например, надписи: «Сделано в России»; информации о
службеклиентскойподдержке,атакжеиныхсредствидентификации.
14. Изменениекомплектности,маркировки(включаядизайн),первичнойупаковкидолжныбыть
отражены в извещении об изменении ТУ и подтверждены результатами экспертизы качества,
эффективности и безопасности медицинского изделия при внесении изменений в
регистрационное досье.
ВКАЕ3
+ ДНК-ТЕХНОЛОГИЯ Маркировканаборареагентов
» этикетку на блок компонентов (полиэтиленовый пакет (гриппер)) или каждый
компонент, входящий в состав набора реагентов, содержащую следующую информацию
(образцы см.лист к: 6 7и Ф ):
— наименованиеизготовителя,илитоварныйзнакизготовителя,илилоготип;
— сокращенноенаименованиеизделия;
— наименованиекомпонента;
— объём/количествокомпонента;
— —— номерсерии;
— срокгодности;
— —— условияхранения;
- символ«Недопускатьвоздействиясолнечногосвета»(принеобходимости);
Ы
символ«Медицинскоеизделиедлядиагностики77 УЙГО».
Примечания:
1. Информация об изготовителе, службе клиентской поддержке, сайте нанесена
непосредственнонакоробкунаборареагентов.
2. Размер внутренней упаковки не достаточен для размещения указанного содержания
информации на этикетках компонентов, в связи с чем, надпись или символ «Медицинское
изделиедлядиагностики/пуйто»нанекоторыхкомпонентахопущены.
3. — Требованиеобуказании «сокращенногонаименованияизделия»распространяетсятолькона
специфичные компоненты для данного набора реагентов: смесь для амплификации
ВКАЕ 3.1, смесь для амплификации ВКАЕ 3.2, смеси для амплификации, запечатанные
парафиномиположительныйконтрольныйобразец.
4. Требование об указании знака токсичности, агрессивности или другой опасности не
применимо,таккакнаборреагентовнесодержитвеществвопасныхконцентрациях.
5. Надписи при маркировке изделия частично заменены символами, соответствующими
требованиямГОСТРИСО 15223-1.
6. — Допускается«Положительныйконтрольныйобразец»маркироватькак«К-+».
7. — Примаркировкенаборареагентовдопускаетсянанесениенадписи«Веа!-Нте».
8. При маркировке набора реагентов наносят штрих-код (Оа!а Майтх), который включает
уникальный код внутренней системы учета для идентификации и прослеживаемости серии
припроизводственаборареагентовнапредприятии.
9. — Примаркировкекомпонентовнаборареагентовдопускаетсянанесениевариантаисполнения.
10. При маркировке компонентов набора реагентов допускается нанесение штрих-кода (Оа!а
Машх),которыйвключаетуникальныйкодвнутреннейсистемыучетадляидентификациии
прослеживаемостисерииприпроизводственаборареагентовнапредприятии.
11. Требованияобуказании «каталожногономера»нераспространяетсянаупаковку«холодовой
части»наборареагентов.
12. Маркировка и информация должна быть изложена (представлена) на русском языке.
Допускается на коробке информацию о производителе (изготовителе), иных специальных
сведенийилоготипприводитьнарусскомианглийскомязыках.
13. Допускается нанесение на внешнюю упаковку (потребительскую тару) иных специальных
сведений, не имеющих рекламного характера, а также пиктограмм и голограмм
(ГОСТР 51088, подпункт 6.2.10). Например, надписи: «Сделано в России»; информации о
службеклиентскойподдержке,атакжеиныхсредствидентификации.
14. Изменениекомплектности,маркировки(включаядизайн),первичнойупаковкидолжныбыть
отражены в извещении об изменении ТУ и подтверждены результатами экспертизы качества,
эффективности и безопасности медицинского изделия при внесении изменений в
регистрационное досье.
--- стр. 4 ---
ВКАЕ 3
2 ДНК-ТЕХНОЛОГИЯ Маркировка набора реагентов
этикетку на групповую упаковку (транспортную тару), содержащую информацию
(образцысм.лист 70, 7. ):
торговое(приналичии)иполноенаименованиенаборареагентов;
наименованиеиадресизготовителя;
срокгодностинаборареагентов(год,месяцвключительно);
датуизготовления(год,месяц);
требованиякусловиямхраненияитранспортированиянаборареагентов (принеобходимости
— особыеусловияобращенияснабором);
номерсерии;
особыеинструкцииизготовителявотношенииизделия;
числоединицпотребительскойупаковкиизделийвгрупповойупаковке;
массанеттоимассабруттонагрупповойупаковкеизделий;
массанеттопотребительскойупаковки;
предупреждения и меры предосторожности в отношении изделия, которые необходимо
исполнять,манипуляционныенадписи(принеобходимости);
символ«Медицинскоеизделиедлядиагностики 77УЙГО».
Примечание - Надписи на транспортной таре, содержащие данные о числе изделий, дате
изготовления и сроке годности, номера серии допускается выполнять от руки или с помощью
клише(ГОСТР51088,подпункт6.2.4).
Символы,используемыепримаркировкенаборареагентов
Медицинское изделие
№ для диагностики 77 УЙРО Температурныйдиапазон
ВЕР Номерпокаталогу
Обратитесь к инструкции по
применению или к инструкции по
применениювэлектронномвиде
Же Кодпартии(серии) Содержимого — достаточно — для
проведения <п>>тестов
Датаизготовления Нестерильно
Использовать до
Недопускатьвоздействия
солнечногосвета
се®ж Изготовитель
Примечание -— Вданномдокументеприведеныобразцыдизайнаэтикеток.
ВКАЕ3
МуДНК-ТЕХНОЛОГИЯ Маркировка наборареагентов
этикетку на групповую упаковку (транспортную тару), содержащую информацию
(образцысм.лист 70, 7. ):
торговое(приналичии)иполноенаименованиенаборареагентов;
наименованиеиадресизготовителя;
срокгодностинаборареагентов(год,месяцвключительно);
датуизготовления(год,месяц);
требованиякусловиямхраненияитранспортированиянаборареагентов(принеобходимости
— особыеусловияобращенияснабором);
номерсерии;
особыеинструкцииизготовителявотношенииизделия;
числоединицпотребительскойупаковкиизделийвгрупповойупаковке;
массанеттоимассабруттонагрупповойупаковкеизделий;
массанеттопотребительскойупаковки;
предупреждения и меры предосторожности в отношении изделия, которые необходимо
исполнять,манипуляционныенадписи(принеобходимости);
символ«Медицинскоеизделиедлядиагностики77УЙГО».
Примечание - Надписи на транспортной таре, содержащие данные о числе изделий, дате
изготовления и сроке годности, номера серии допускается выполнять от руки или с помощью
клише(ГОСТР51088,подпункт6.2.4).
Символы,используемыепримаркировкенаборареагентов
Медицинское изделие
№ для диагностики 70 УЙРО Температурныйдиапазон
ВЕР Номерпокаталогу
Обратитесь к инструкции по
применению или к инструкции по
применениювэлектронномвиде
НОТ Кодпартии(серии) Содержимого — достаточно — для
проведения <п>>тестов
Датаизготовления Нестерильно
Использовать до
Недопускатьвоздействия
солнечногосвета
се
.а Изготовитель
Примечание -— Вданномдокументеприведеныобразцыдизайнаэтикеток.
--- стр. 5 ---
Маркировка набора реагентов«\днктЕХНОЛОГИЯ
набор
Наборреагентовдля определениясоматическихмутацийв генеВКАЕ(У600,Уб00ЕиУ600К)
методомПЦРврежимереального времени
(ВКАЕ3)
Фасовка$,стрипы
Этикеткана коробку
ы„` ДНК-ТЕХНОЛОГИЯ — Наборреагентов для определения
соматических мутаций в гене ВВАЕ
(600, У600Е и\У600К) методом ПЦР
в режимереального времени (ВБАЕ3)
мо] Веа!-Нте
ВЕР| к1-Н486-53/4 — ВВАЕ3
Т) ХХХХХХ-ХХ
ХХХХ-ХХ-хх — Состав:
Смеси для амплификации, 12стрипов
запечатанные парафином по 8 пробирок по 20 мкл
-Хх-
ПЦР-буфер 1пробирка 1,0 млся ХХХХ-ХХ-ХХ Минеральное масло 2 пробирки — по 1,0 мл
с Положительный
контрольный образец 1пробирка 130 мкл
48 2°С. Крышкидля стрипов 12 шт
(15 Компоненты для хранения от минус 22 °Сдо минус 18 °СФасовка $, стрипы упакованы отдельно. Упаковка "1х50" Полимераза
зетр ТехноТадМАХ - 1пробирка50мклУпаковка "1х50"
Полимераза
ра
ТехноТадМАХ —— Ту705952-032-89545560-2025
ХХХ Предназначенодляпрофессиональногоприменения
от
Условияхранения:от2°Сдо8°С
Этикетканаполиэтиленовыйпакет(гриппер)_
°
Смеси для амплификации, запечатанные парафином
12стриповпо& пробирокпо20мкл
ВКАЕ 3
Смесидля амплификации,
запечатанные парафином
12 стрипов по 8 пробирок по 20 мкл
Фасовка $, стрипы
ххх ис в
ое ХХХХ-ХХ-ХХ АХ а:„Г Ве
Маркировка наборареагентов
с ДИКТЕХНОЛОГИЯ ВВАЕ 3
Наборреагентовдля определениясоматическихмутацийв генеВКАЕ(У600,Уб00ЕиУ600К)
методомПЦРврежимереального времени
(ВКАЕ3)
Фасовка$,стрипы
Этикеткана коробку
ы„` ДНК-ТЕХНОЛОГИЯ — Наборреагентов для определения
соматических мутаций в гене ВВАЕ
(600, У600Е и\У600К) методом ПЦР
врежимереального времени (ВБАЕ3)
мо] Веа!-Нте
ВЕР| к1-Н486-53/4 — ВВАЕ3
Т) ХХХХХХ-ХХ
ХХХХ-ХХ-хх = Состав:
Смеси для амплификации, 12стрипов
запечатанные парафином по 8 пробирок по 20 мкл
хх.
ПЦР-буфер 1пробирка 1,0 млся ХХХХ-ХХ-ХХ Минеральное масло 2 пробирки — по 1,0 мл
вс Положительный
контрольный образец 1пробирка 130 мкл
48 2°С Крышкидля стрипов 12шт
(15 Компоненты для хранения от минус 22 °Сдо минус 18°СФасовка $, стрипы упакованы отдельно. Упаковка "1х50" Полимераза
зетр ТехноТад МАХ-
1пробирка 50 мкл
Упаковка "1х50"
Полимераза
ра
ТехноТадМАХ —— Ту705952-032-89545560-2025
ХХХ Предназначенодляпрофессиональногоприменения
от
Условияхранения:от2°Сдо8°С
Этикетканаполиэтиленовыйпакет(гриппер)
°
Смесидляамплификации, запечатанные парафином
12стриповпо& пробирокпо20мкл
ВКАЕ3
ААА
ААА
Смесидляамплификации,
запечатанные парафином
12 стрипов по 8 пробирок по 20 мкл
и,
Фасовка 5$, стрипы
ххх ис в [у]
ое ХХХХ-ХХ-ХХ АХ а:„Г Ве
--- стр. 6 ---
^^ . Маркировка набора реагентов№ ДНК-ТЕХНОЛОГИЯ КАР З
Этикетки накомпоненты (пробирки)
сры дизайнаэтикеток
ПЦР-буфер
1пробирка 1,0мл
Вннннвеленнл
^
^ м =
: ПЦР-буфер ПЦР-буфер
1,0 мл 8
1,0 мл [ВЯ ххх /[° (ет)ххх ‚|`ва ХХХКХХ-хх & я хххх-хх-хх°°
°
Минеральноемасло
2пробирки по 1,0мл
3 Минеральное
маслоМинеральное масло
1,0 млххх ‚ |° ия
а ххх О ккосонкх ®1,0 мл
Положительный контрольный образец
1пробирка 130мкл
о]
$ ВЕКАЕ 3 к, ВРАЕ5
хххы я Ё вомко К°
130 мкл
©5
Г м ххх
а хххххкхх &
8
© в
В хххх-хх-хх Й Ё
Условияхранения:отминус22°Сдоминус 18°С
‚Этикетканакоробку
и
ОдНК:
кННКСТЕХНОЛОГИЯ 1х50
[кет]ххх [*° ны.
т
3 иххххоххохх -22°С М а
Полимераза ТехноТад МАХ
1 пробирка 50 мкл
Этикетки накомпоненты (пробирки)
УЛЕЙ
Полимераза ТехноТад МАХ ито,
1пробирка 50мкл
^
` Полимераза ТехноТад МАХ м Полимераза
8 ТехноТад МАХ
ххх Д* о
80мкл оо хухххкох ххх ‚|
ххххоскх 28
^^ . Маркировка наборареагентов№ ДНК-ТЕХНОЛОГИЯ КАР а
Этикетки накомпоненты (пробирки)
(9
меры дизайнаэтикеток
ПЦР-буфер
1пробирка 1,0мл
РН)
Е.
3 опцг-б2 ПцР-буфер ЦР-буфер
1,0 мл 8
1,0мл т ххх /[° (ет) ххх й;
в хххххххх 2 9 оосжеки
Минеральное масло
2пробирки по 1,0мл
р)
к 3 Минеральное
\ Минеральное масло масло
ххх Т' 1,0 мл 8
0 мл а ххх и ххх
Положительный контрольный образец
1пробирка 130мкл
о
$ ВЕКАЕ 3 Ко ВРАЕ5
хххы я Ё вомко К°
130 мкл
©5
Г м ххх
а хххххххх &
8
© в
Вхххх-хх-хх Я Ё
ПИН
Условияхранения:отминус22°Сдоминус 18°С
‚Этикетканакоробку
«\днктехнолоГия
—
1х50
[кет]ххх [*° НЕ
Й э мххххххх 22°С м а
Полимераза ТехноТадМАХ
1 пробирка 50 мкл
Этикетки накомпоненты (пробирки)
ОЛЕНИ НОНО
Полимераза 'ТехноТад МАХ
й
1пробирка 50мкл
^
` Полимераза ТехноТад МАХ 2 Полимераза
738 ТехноТад МАХу ххх Д*
"т
МКЛ 9ххххнхх ххх ‚|
М ххх сё
--- стр. 7 ---
^\
я Маркировка наборареагентов№ ДНК-ТЕХНОЛОГИЯ вАР З
Фасовка О
Этикетканакоробку
К ДН К-ТЕХНОЛОГИЯ Набор реагентов для определения
соматических мутаций в гене ВЕАЕ (\/б00, Уб0О0Е и Уб0оК)
. методом ПЦР в режиме реального времени (ВЕАЕ 3) И
Кеа!-Нте /
В1-Н486-ЦА/4 ВКАЕ 3
кот] хххххх-хх обе:
Смесьдляамплификации
ХХХХ-ХХ-ХХ ВВАЕ 3.1 1пробирка 300мкл
Смесьдляамплификации
ВЕАЕ 3.2 1 пробирка 300 мкл
я ХХХХ-ХХ-ХХ ПЦР-буфер 1пробирка600мкл
8 °С Положительный
У конт!
й образец
Ш рка 130 мкл
48 2°с
(00 Компоненты для хранения от минус 22 °С
до минус 18 °С упакованы отдельно. Упаковка "1х30"
Фасовка Ш) Полимераза ТехноТад МАХ
-
1 пробирка 30 мкл
ны Упаковка "1х30”
Гая Полимераза от
ль; ТехноТадМАХ ТУ20.59.52-032-89545560-2025
ХХХ п для
Условияхранения:от2°Сдо8°С
Этикетканаполиэтиленовыйпакет(гриппер)УНР
ВКАЕ 3
Смесь для амплификации
ВКАЕ 3.1 1пробирка 300 мкл
Смесь для амплификации
ВКАЕ 3.2 1пробирка 300 мкл
ПЦР-буфер 1пробирка 600 мкл
Положительный
контрольный образец 1пробирка 130 мкл
Фасовка Ц
зе а.
еа хххх-хх-хх АХ ооо[Г В
«УДнК-ТЕХНОЛОГИЯ Маркировканабора реагентов
ВКАЕ3
; <днктЕхНОЛОГИЯ
Кеа!-Чте
К1-Н486-ЦА/4
НОТ ххХХХХ-ХХ
ХХХХ-ХХ-ХХ
® ХХХХ-ХХ-ХХ
№ «Д
05
Фасовка Ц
к Упаковка "1х30”
14"Ё
— Полимераза
ал ТехноТад МАХ
ХХХ
Этикетка на коробку
ВЕ
Фасовка О
Набор реагентов для определения
соматических мутаций в гене ВКАЕ (\У/б00,Уб00Е и \/б00К)
методом ПЦР в режиме реального времени (ВЕАЕ 3)
ВКАЕ3
Состав:
Смесь для амплификации
ВКАЕ 3.1
Смесь для амплификации
ВЕАЕ 3.2
ПЦР-буфер
Положительный
конт! разец рка 130 мкл
1пробирка 300 мкл
1пробирка 300 мкл
1пробирка 600 мкл
Компоненты для хранения от минус 22 °С
до минус 18 °С упакованы отдельно. Упаковка "1х30"
Полимераза ТехноТад МАХ
-
1 пробирка 30 мкл
от
ТУ20.59.52-032-89545560-2025
п, для
Условияхранения:от2°Сдо8°С
ВКАЕ 3.1
ВВАЕ 3.2
ПЦР-буфер
ххх
Смесь для амплификации
Положительный
контрольный образец
Зе 8°С не:
еа хххх-хх-хх А „ХТ В
Этикетканаполиэтиленовыйпакет(гриппер)ПРО
ВКАЕ3
Смесь для амплификации
1пробирка 300 мкл
1пробирка 300 мкл
1пробирка 600 мкл
1пробирка 130 мкл
Фасовка Ц
--- стр. 8 ---
«УднкТЕХНОЛОГИЯ Маркировка наборареагентов
ВКАЕ 3
Этикетки накомпоненты (пробирки)
Примерыдизайнаэт
; Смесь для амплификации
1пробирка 300мкл
ЕЗл
^р
№ Смесьдля амплификации Штрих
ВКАЕ 3.1
300 мкл эуе ас
(от) ххх &^ |8
хххх-хх-хх & Код
СмесьдляамплификацииВКАЕ 3.
1пробирка300мкл
/
ВААЕ 3 ФасовкаШ
^ ВВАЕ 3 ФасовкаШ
№ Смесьдля амплификации Штрих,
ВКАЕ3.2
300 мкл сме. Гао
хх
& хоох-хх & Код
НН
ска
1пробирка 600мкл
р,
/
Фасовка Ц
ПЦР-буфер
600 мкл 8
ххх [°
Х-ХхХ-хх 2= ХХХ
о
Положительный контрольный
бразец
1пробирка 130мкл
2
130 мкл
ххх
Г= ххххосхх Код
ФасовкаШ
ВЕКАЕ 3 Штрихк+ =
Условияхранения:отминус22°Сдоминус 18°С
п
2 ДНК-ТЕХ
Этикетка на коробку
НОЛОГИЯ
[нот]ххх
Е: = ХХХХ-ХХ-ХХ
Полимераза ТехноТад МАХ
1 пробирка 30 мкл
1х30
-18 °с
8
т
„ГйЙ
„Этикеткина компоненты(пробирки)
Полимераза ТехноТад МАХ
1пробирка 30мкл
^
У Полимераза ТехноТад МАХ
30 мкл
ххх
ва ххххххх 22
18
°С
2.
па Полимераза
ТехноТад МАХ
30 мкл
ххх „у
Вкоосхк-хх28
«УднкТЕХНОЛОГИЯ Маркировканаборареагентов
ВКАЕ3
Этикетки накомпоненты (пробирки)
Примерыдизайнаэт
;`Смесь для амплификации
1пробирка 300мкл
^4
№ Смесьдля амплификации Штрих
300 мкл =ххх 8
хххх-хх-хх & Код
я
‚ СмесьдляамплификацииВКАЕ3.2_
1пробирка 300мкл
/
ВААЕ 3 ФасовкаШ
ВКАЕ 3.1
са
^ ВВАЕ 3 ФасовкаШ
№ Смесьдля амплификации Штрих,
ВКАЕ3.2
300мкл >. же
хх
& хоох-хх & Код
НЙ
ска
1пробирка 600мкл
р. Фасовка Ц
ПЦР-буфер ‚600 мкл 8
ххх
и ххх ГХ-ХХ-хх 2
образец
1пробирка 130мкл
2
130 мкл
ххх
1= ххххосхх Код
ФасовкаШ
ВЕКАЕ 3 Штрихк+
г
Условияхранения:отминус22°Сдоминус 18°С
у ДНК-ТЕХ
Этикеткана коробку
НОЛОГИЯ
[нот]ххх
Е: = ХХХХ-ХХ-ХХ
Полимераза ТехноТад МАХ
1пробирка 30 мкл
1х30
-18 °с
8
т
„ГйЙ
„Этикеткина компоненты (пробирки)
Полимераза ТехноТад МАХ
1пробирка 30мкл
с Е
\ Полимераза ТехноТад МАХ <* — Полимераза
ххх зо„технотад МАХ
30 мкл ва ххххххх 22
18
°С
2. ххх „РТ
Вкоосхк-хх28
--- стр. 9 ---
Маркировка набора реагентов
BRAF 3
9
Информация о производителе,
нанесенная типографским способом на коробку набора реагентов. Фасовка S
Информация на коробке
компонента Полимераза ТехноTaq МАХ
Информация о производителе,
нанесенная типографским способом на коробку набора реагентов. Фасовка U
Информация на коробке
компонента Полимераза ТехноTaq МАХ
^\№ ДНК-ТЕХНОЛОГИЯ
\днктЕХНОЛОГИЯ
ы
000«ДНК-ТехнологияТС»,
Россия,117246,г.Москва,проездНаучный,д.20,стр.4
Службаклиентскойподдержки:
8(800)200-75-15(дляРоссии,звонокбесплатный)
+7(495)640-16-93(длястранСНГизарубежья,звонокплатный)
поте @ па-1есЪпо1одути
\ммлмиата-‘еспо!оду.ги
СделановРоссии
Служба клиентскойподдержки:
8(800)200-75-15
(для России,звонок бесплатный)
+7(495)640-16-93
(для стран СНГ и зарубежья, звонок платный)
по!!пе @ йпа-!есйпо!оду.ти
м/млу.па-1есПпо!оду.ги
Сделанов России
——
"\ДНК-ТЕХНОЛОГИЯ
000 «ДНК-ТехнологияТС»
Россия,117246,г.Москва,
проездНаучный,д.20,стр.4
Службаклиентскойподдержки:
8(800)200-75-15
(дляРоссии,звонокбесплатный)
+7(495)640-16-93
(длястранСНГи зарубежья,
звонокплатный)
попе @ апа-1есппо!оду.ги
млуу.апа-1есппо!оду.ги
СделановРоссии
Служба клиентскойподдержки:
8(800)200-75-15
(для России,звонок бесплатный)
+7(495)640-16-93
(для стран СНГ и зарубежья, звонок платный)
по!!пе @ йпа-!есйпо!оду.ти
м/млу.па-1есПпо!оду.ги
Сделанов России
——
^\№ ДНК-ТЕХНОЛОГИЯ
\днктЕХНОЛОГИЯ
р
000«ДНК-ТехнологияТС»,
Россия,117246,г.Москва,проездНаучный,д.20,стр.4
Службаклиентскойподдержки:
8(800)200-75-15(дляРоссии,звонокбесплатный)
+7(495)640-16-93(длястранСНГизарубежья,звонокплатный)
поте @ па-1есЪпо1одути
\мм/миата-‘есйпо!оду.ги
СделановРоссии
Служба клиентскойподдержки:
8(800)200-75-15
(для России,звонок бесплатный)
+7(495)640-16-93
(для стран СНГи зарубежья, звонок платный)
по!!пе @ йпа-!есйпо!оду.ти
м/млу.па-1есПпо!оду.ги
Сделанов России
——
"\ДНК-ТЕХНОЛОГИЯ
000 «ДНК-ТехнологияТС»
Россия,117246,г.Москва,
проездНаучный,д.20,стр.4
Службаклиентскойподдержки:
8(800)200-75-15
(дляРоссии,звонокбесплатный)
+7(495)640-16-93
(длястранСНГизарубежья,
звонокплатный)
пой!пе @ апа-!есппо!оду.ги
млуу.апа-+есппо!оду.ги
СделановРоссии
Служба клиентскойподдержки:
8(800)200-75-15
(для России,звонок бесплатный)
+7(495)640-16-93
(для стран СНГи зарубежья, звонок платный)
по!!пе @ йпа-!есйпо!оду.ти
м/млу.па-1есПпо!оду.ги
Сделанов России
——
--- стр. 10 ---
ОБРАЗЕЦ! МАКЕТ!
Макет этикетки на транспортную тару
Набор реагентов для определения соматических мутаций в гене BRAF
(V600, V600E и V600K) методом ПЦР в режиме реального времени
(BRAF 3)
Фасовка S
_________
_________
_________
Количество наборов:
_______ шт.
Условия транспортирования
В термоконтейнерах с хладоэлементами
не более 5 суток
Условия хранения
Масса нетто потребительской упаковки: _____
Масса нетто: _____
Масса брутто: ____
ВНИМАНИЕ! Полимераза ТехноТаq МАХ упакована отдельно!
Производитель: ООО «ДНК-Технология ТС»
адрес: Россия, 117246, г. Москва, проезд Научный, д. 20, стр.4
Адрес для обращения: По вопросам качества набора реагентов, следует обращаться в службу
клиентской поддержки.
Служба клиентской поддержки:
8 (800) 200-75-15 (для России, звонок бесплатный),
+7(495) 640-16-93 (для стран СНГ и зарубежья, звонок платный),
E-mail: hotline@dna-technology.ru
Макет этикетки на транспортную тару
Набор реагентов для определения соматических мутаций в гене BRAF
(V600, V600E и V600K) методом ПЦР в режиме реального времени
(BRAF 3)
Фасовка S
Полимераза ТехноTaq MAX
_________
_________
_________
Количество наборов:
_______ шт.
Условия транспортирования
В термоконтейнерах с хладоэлементами
не более 5 суток
Условия хранения
Масса нетто потребительской упаковки: _____
Масса нетто: _____
Масса брутто: ____
Производитель: ООО «ДНК-Технология ТС»
адрес: Россия, 117246, г. Москва, проезд Научный, д. 20, стр.4
Адрес для обращения: По вопросам качества набора реагентов, следует обращаться в службу
клиентской поддержки.
Служба клиентской поддержки:
8 (800) 200-75-15 (для России, звонок бесплатный),
+7(495) 640-16-93 (для стран СНГ и зарубежья, звонок платный),
E-mail: hotline@dna-technology.ru
10
2 °С
25 °С
2 °С
8 °С
25 °С
-22 °С
-18 °С
Мо
нот
Мо
нот
д ДНК-ТЕХНОЛОГИЯ д ДНК-ТЕХНОЛОГИЯ
Мо
нот
Мо
нот
мДНК-ТЕХНОЛОГИЯ мДНК-ТЕХНОЛОГИЯ
=== файл: unknown__BRAF 3_Фото.pdf ===
--- стр. 6 ---
Набор реагентов для определения соматических мутаций в гене BRAF (V600, V600E и V600K) методом ПЦР в режиме реального времени (BRAF 3)
Смесь для амплификации BRAF 3.1
1 пробирка
Полимераза ТехноTaq МАХ
1 пробирка
Фасовка U
Общий вид
ПЦР-буфер
1 пробирка
Положительный
контрольный образец
1 пробирка
Паспорт качества
Инструкция по
применению
Вкладыш
Смесь для амплификации BRAF 3.2
1 пробирка
д ДНК-ТЕХНОЛОГИЯ
[№9] Кеа!-бте.
"\
днк-
Ро,Ф) ДНК:ТЕХНОЛОГИЯ. Тора Нара ещениет,ОНА ети,
_анетехнолотия ‚000 «ДНК-Технология ТС».
Е:
о
Имени качества
№ ХХХ
СениНьорремонтов дя ооревежения омичи мумий в гене ВНАР` ест,
У УСООС‚
УСОО метан О в сны ремня эроавий 2, Млееттищуенн де лыНабор реагеинстРУКНИЯ п о нтов для определены .
«ееовка у
Я ПО ПРИ!
неона ВАА 1 оеадеских мутомий
сх
'етодом ПЦР в режиме реальнысоо мены
м ХОА, ето м Ма-наве-ол/а
(осо, (ВАР В)ХОлк Набор реагентов 2% * (осовкь 0)
Резульних контрол для
Й
кк. Ди ник аз \нс нация ©
носделения сематических муаший в гене Йен, (УбО0 УСООЕ и =) ЕТ уеду отоам онворе рексонметодом ПЦР в режиме реальнй Воснсни ыхнЕРЕлнЕ
Еттооло
селидеспеабора: це, рот МИЗкомолекупарныны БЕАЯ и М нь оиои анны ——.
нь,
ВЕЩЕ Ио аее кереет нате ее‚МАМ оделения МК ПРОБА НКО СООО "Технология Тя). мана:
ВоОреренрнлнияЧресеположительные кодестеввокЬ, иконам амоля,мекзвестых оеримат, отряциельных ментромьныя:
Состав набора реагентов:
ая,Каан
ет м одесеАо МНЕ
пооенок
[еее
Зил
==они аа нены
Ида,
[ [ ® ® зе [ен нии)
В
зе а
В ххюскох ДУ, №
‘рокгодности 12месиеа от даты изготовления: РА гэт пе-бубь" поооежеени гой
® 60 нано САООЕ УЕ ЧЕК, ЧО, ЧО ЧЕК, У БОН енЛ ВОНИый охубикссенаиодкомныныь
Тода наи ее.
рии
2025 г.
--- стр. 7 ---
Набор реагентов для определения соматических мутаций в гене BRAF (V600, V600E и V600K) методом ПЦР в режиме реального времени (BRAF 3)
Фасовка U
Общий вид
д ДНК-ТЕХНОЛОГИЯ
В.
Полимераза Технотаа МАХ.
1провирка20 мел.
^` ФитХУ АНЕТЕХНОЛОГИЯ ФЕЕЕНЫЕоыоиьЕЕЕНИе
уудиит ‚ООО «НПО ДНК-Технология».
тв к
т
ны
лед
ет
И
ато ееенет ее щас” = топот ееесинее отт инствукиия по пеимй ню
ке: тие
в
= сык
енДевин:
Ретоася
Я
Набор реагентов {эн [5Денин Вновь
н соматических мутаций в гене ДЕР
00, Убоов
Иаметодом ПЦР в режиме реально = времени
(ВВАЕ 3)
‘ноговремени
ВА-Ма86-0А/4 (Фасовка!ГО] (Вкае 3),
Результат контроля Информация онаборе реагентов.
1 Проверка комалеканося‘требованиямТУ 20.9 2. нькосо НООНОАОН АОИ
ОНО ст еее пит ито оелетнееЗЕНЕООИЕСИенннн ное
Состав набора реагентов:
ВРАЕ 3
Ренне ЕЕвечен воинов алое зонеотекстучи-Ви песн зом
ета поскетывнн‚ПЦР-буфер 1 пробирка 600 мкл ЗАодиааа) = Перечень
‘МУтеный гена ВАЛ, цветовая маркировка и каналы детекции продуктоват
Ноаое не оужне сн
<азиз
ххх
В коскох АГ ВВ 7 ШВ
Е
оеаонстлыми Да
= 5 нее БЕ ЕЕ УЕ, Че:и Кс ты пр-оуды лифоеренаноцикх к ЧоК,Эеректодвост
2
месияот ты изо РЕ *к 3: ВАТ
иомой час и молесоа один
; 3Же
ВИ А
иен
кокса: онце
Нк
"т
2025 г.—
--- стр. 8 ---
Набор реагентов для определения соматических мутаций в гене BRAF (V600, V600E и V600K) методом ПЦР в режиме реального времени (BRAF 3)
Фасовка U. Коробка (вид со всех сторон)
д ДНК-ТЕХНОЛОГИЯ
№ ДНК-ТЕХНОЛОГИЯ
Кеа!-Нте
К1-Н486-ЦА/А
ХХХХХХ-ХХ
Набор реагентов для определения
‘соматических мутаций в гене ВЕАЕ (/б00, МБООЕ и Уб0ОК)
методом ПЦР в режиме реального времени (ВЯАЕ 3)
ВКАЕ 3
Состав:
Смесь для амплификации
ВЕАЕ 3.1
Смесь для амплификации
ВВАЕ 32 1 пробирка 300 мкл
ПЦР-буфер 1 пробирка 600 мкл
Положительный
контрольный образец 1 пробирка 130мкл
1 пробирка 300 мкл.
Компоненты для хранения от минус 22 °С
‚доминус 18 *С упакованы отдельно. Упаковка "1х30".
Полимераза ТехноТад МАХ - 1пробирка 30 мкл
Полимераза
ТехноТад МАХ
ххх
от
ТУ 20 59.52-032-89545560-2025
Предназначено для профессионального применения
>:ДНК-ТЕХНОЛОГИЯ
000 «ДНК-Технология ТС»
Россия, 117246, г. Москва,
проезд Научный, д. 20, стр. 4
Служба клиентской поддержки:
8 (800) 200-75-15
(для России, звонок бесплатный)
+7 (495) 640-16-93
(для стран СНГ и зарубежья,
звонок платный)
по!пе @ апа-1есппо!одуги
млуми.йпа-1есппо!оду.ги!
Сделано в России
“У днк-ТЕХНОЛОГИЯ
визомонхЭ1-яНЫ2
=== файл: unknown__BRAF 3 Вкладыши.pdf ===
--- стр. 1 ---
ВКЛАДЫШ
72 ДНК-ТЕХНОЛОГИЯ ВВАЕ3
РА
СОГЛАСОВАНО
енеральный
\дНктехвосогВА
[4 7
ВКЛАДЫШ
К МЕДИЦИНСКОМУИЗДЕЛИЮДЛЯДИАГНОСТИКИIN VITRO
Наборреагентов
для определениясоматических мутацийв генеBRAF(V600,Уб00Е иV600K)
методомПЦР врежимереального времени
(BRAF3)
2025 г.
--- стр. 2 ---
Т а б л и ц а 4 – Интерпретация результатов ПЦР для контрольных образцов
Отрицательный контрольный образец
Мутации не должны быть обнаружены (для мутантных
аллелей значения Ср не указаны или Ср > 45;
для КВМ значения Cp не указаны или Ср > 38)
Отрицательный результат
Результаты постановки валидны
Для мутантных аллелей значения Ср ≤ 45
или для КВМ значения Ср ≤38
Результаты всей постановочной серии считают
недостоверными. Необходимо проведение
специальных мероприятий для выявления и
устранения возможной контаминации.
Положительный контрольный образец
Все мутации должны быть обнаружены (значения Ср для
мутантных аллелей и КВМ указаны);
доля мутантных аллелей должна составлять 10-100%
Положительный результат
Результаты постановки валидны
Значения Ср для мутантных аллелей и КВМ не указаны;
доли мутантных аллелей не соответствуют заданному
диапазону
Результаты постановки считают
недостоверными. Требуется повторная
постановка амплификации всей партии образцов
Условия транспортирования, хранения и эксплуатации
Транспортирование набора реагентов осуществляют в термоконтейнерах с хладоэлементами всеми видами крытого
транспорта при температуре внутри термоконтейнера, соответствующей условиям хранения компонентов,
входящих в состав набора реагентов.
Допускается транспортирование набора реагентов, за исключением полимеразы ТехноTaq MAX, в
термоконтейнерах с хладоэлементами всеми видами крытого транспорта при температуре внутри термоконтейнера
от 2 °С до 25 °С не более 5 суток.
Допускается транспортирование полимеразы ТехноTaq MAX в термоконтейнерах с хладоэлементами всеми видами
крытого транспорта при температуре внутри термоконтейнера до 25 °С не более 5 суток
Все компоненты набора реагентов, за исключением полимеразы ТехноTaq MAX, следует хранить в холодильнике
или холодильной камере при температуре от 2 °С до 8 °С в течение всего срока годности набора реагентов.
Смеси для амплификации, запечатанные парафином, следует хранить в защищённом от света месте.
Полимеразу ТехноTaq MAX следует хранить в морозильной камере при температуре от минус 22 °С до минус 18 °С
в течение всего срока годности набора реагентов.
Срок годности набора реагентов - 12 месяцев при соблюдении всех условий транспортирования, хранения и
эксплуатации.
По вопросам, касающимся качества набора реагентов, следует обращаться в службу клиентской поддержки.
Символы, используемые при маркировке набора реагентов
Медицинское изделие
для диагностики in vitro
Обратитесь к инструкции
по применению или к инструкции по
применению в электронном виде
Температурный диапазон Номер по каталогу
Содержимого достаточно
для проведения ˂n˃ тестов Изготовитель
Использовать до
Не допускать
воздействия солнечного света
Код партии (серии)
Нестерильно
Дата изготовления
В данном вкладыше приведена информация для набора реагентов BRAF 3 в фасовке S.
Перед началом работы изучите инструкцию.
Набор реагентов для определения соматических мутаций в гене
BRAF (V600, V600E и V600K)
методом ПЦР в режиме реального времени
(BRAF 3)
R1-H486-S3/4 (Фасовка S, стрипы)
Информация о наборе реагентов
Назначение:
Набор реагентов предназначен для определения соматических мутаций V600 в гене BRAF с дифференциацией
мутаций V600E и V600K в препаратах ДНК, полученных из фиксированных в формалине парафинизированных
образцов солидных опухолей, методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени с целью
подбора таргетной терапии низкомолекулярными BRAF и MEK-ингибиторами.
Выделение ДНК:
Рекомендуются: набор реагентов для предварительной обработки биоматериала ПРОБА-ПК и комплект реагентов
для выделения НК ПРОБА-НК-ПЛЮС (ООО «ДНК-Технология ТС»).
Специализированное оборудование:
Детектирующие амплификаторы планшетного типа с системой детекции флуоресцентного сигнала в режиме
реального времени, зарегистрированные в установленном порядке в РФ, например, детектирующие амплификаторы
«ДTпрайм»1, «ДTпрайм II»1 и «ДТлайт»2 (ООО «НПО ДНК-Технология»).
Количество анализируемых образцов:
48 определений (не более 12 постановок), включая анализ неизвестных образцов, отрицательных контрольных
образцов и положительных контрольных образцов.
Состав набора реагентов:
Наименование компонента Внешний вид Количество пробирок
Номинальный
объём
компонента
Смеси для амплификации,
запечатанные парафином
Прозрачная бесцветная,
розовая или голубая жидкость
под воскообразным белым
слоем
12 стрипов по 8 пробирок по 20 мкл
ПЦР-буфер Прозрачная бесцветная
жидкость
1 пробирка 1,0 мл
Полимераза ТехноTaq MAX Прозрачная бесцветная
вязкая жидкость 1 пробирка 50 мкл
Минеральное масло Прозрачная бесцветная
вязкая маслянистая жидкость 2 пробирки по 1,0 мл
Положительный контрольный
образец3
Прозрачная бесцветная
жидкость 1 пробирка 130 мкл
Крышки для стрипов 12 шт.
1 – модификация *M*
2 – модификация *S*
3 – на этикетке компонента для всех фасовок «Положительный контрольный образец» указывается как «К+»
Служба клиентской поддержки:
8-800-200-75-15 (для России, звонок бесплатный),
+7 (495) 640-16- 93 (для стран СНГ и зарубежья,
звонок платный).
E-mail: hotline@dna-technology.ru,
www.dna-technology.ru
--- стр. 3 ---
Т а б л и ц а 1 - Перечень выявляемых мутаций в гене BRAF, цветовая маркировка и каналы детекции
продуктов амплификации
№ пробирки в стрипе
Каналы детекции Цветовая маркировка смеси для
амплификации
Fam Hex Rox Cy5
1, 3, 5, 7 V600* - Маркер КВМ Голубая
2, 4, 6, 8 V600E** V600К - КВМ Бесцветная или розовая
*- определение мутаций в 600 кодоне (V600E, V600Ec, V600K, V600D, V600Dc, V600R, V600G, V600M без
дифференциации)
** - определение мутаций V600E и V600Ec без дифференциации
Проведение анализа
1 Выделение ДНК
Для образцов фиксированных в формалине парафинизированных тканей обязательна депарафинизация
образцов и обработка протеиназой К.
Для предварительной обработки биоматериала рекомендуется набор реагентов ПРОБА-ПК.
Предварительную обработку материала проводят в соответствии с инструкцией по применению
используемого набора/комплекта реагентов.
Для выделения ДНК рекомендуется использовать наборы/комплекты реагентов, имеющие
регистрационные удостоверения на медицинское изделие и предназначенные для соответствующих видов
биоматериала с целью последующего исследования ДНК методом ПЦР, например, ПРОБА-НК-ПЛЮС.
Выделение ДНК проводят в соответствии с инструкцией по применению используемого набора/комплекта
реагентов.
ВНИМАНИЕ! Одновременно с выделением ДНК из биологического материала необходимо подготовить
отрицательный контрольный образец и провести его через все этапы пробоподготовки. Для этого
рекомендуется использовать физиологический раствор или отрицательный контрольный образец,
входящий в состав набора/комплекта реагентов для выделения нуклеиновых кислот в объёме, указанном
в инструкции по применению соответствующего набора/комплекта реагентов.
2 Подготовка и проведение полимеразной цепной реакции
ВНИМАНИЕ!
1. При проведении всех последующих действий следует избегать воздействия прямых солнечных лучей
на пробирки со смесью для амплификации!
2. Следует строго соблюдать комплектность стрипов и крышек к ним. Не использовать крышки к стрипам
из других наборов реагентов!
2.1 Промаркируйте по 2 стрипованные пробирки со смесями для амплификации, запечатанными парафином,
для каждого неизвестного образца, для отрицательного контрольного образца (K–) и для положительного
контрольного образца (К+) (таблица 2).
П р и м е ч а н и е – Один стрип рассчитан на исследование 4 образцов.
ВНИМАНИЕ! Количество реагентов рассчитано не более чем на 12 постановок при условии вариабельного
количества неизвестных образцов, 1 отрицательного контрольного образца и 1 положительного
контрольного образца в каждой постановке.
Табли ца 2 – Пример маркировки пробирок для исследования 2 неизвестных образцов
Анализируемые образцы Маркировка пробирок в стрипе
Неизвестный образец №1 Пробирки 1, 2
Неизвестный образец №2 Пробирки 3, 4
«К-» Пробирки 5, 6
«К+» Пробирки 7, 8
2.2 Встряхните пробирки с ПЦР-буфером и полимеразой ТехноTaq MAX на микроцентрифуге-вортексе в
течение 3-5 с и центрифугируйте на микроцентрифуге-вортексе в течение 1-3 с.
ВНИМАНИЕ! Полимеразу ТехноTaq MAX необходимо доставать из морозильной камеры непосредственно
перед использованием.
2.3 Приготовьте смесь ПЦР-буфера с полимеразой ТехноTaq MAX. Для этого смешайте в отдельной
одноразовой пробирке:
• 10 х (N+1) мкл ПЦР-буфера,
• 0,5 х (N+1) мкл полимеразы ТехноTaq MAX,
где N – количество промаркированных пробирок с учётом «К-» и «К+».
2.4 Встряхните пробирку с приготовленной смесью ПЦР-буфера и полимеразы ТехноTaq MAX на
микроцентрифуге-вортексе в течение 3-5 с и центрифугируйте на микроцентрифуге-вортексе в течение
1-3 с.
ВНИМАНИЕ! Смесь ПЦР-буфера и полимеразы ТехноTaq MAX необходимо готовить непосредственно
перед использованием, хранение смеси не допускается.
2.5 Добавьте во все промаркированные пробирки, не повреждая слой парафина, по 10 мкл смеси ПЦР-буфера
и полимеразы ТехноTaq МАХ.
ВНИМАНИЕ! После добавления смеси ПЦР-буфера и полимеразы ТехноTaq MAX в пробирки со смесью для
амплификации необходимо сразу же выполнить 2.6 – 2.13.
2.6 Добавьте в каждую пробирку по одной капле (около 20 мкл) минерального масла. Неплотно прикройте
стрипы крышками.
2.7 Встряхните пробирку с положительным контрольным образцом на микроцентрифуге-вортексе в течение
3-5 с и центрифугируйте на микроцентрифуге-вортексе в течение 1-3 с.
ВНИМАНИЕ!
1. Для препарата ДНК и отрицательного контрольного образца перед внесением в пробирки с
реакционной смесью необходимо выполнить рекомендации по использованию препарата ДНК,
приведённые в инструкции по применению набора/комплекта реагентов для выделения НК.
2. При использовании для выделения ДНК комплекта реагентов ПРОБА-НК-ПЛЮС необходимо
встряхнуть пробирки с препаратом ДНК и отрицательным контрольным образцом на
микроцентрифуге-вортексе в течение 3-5 с и центрифугировать на микроцентрифуге-вортексе в
течение 1-3 с
3. Для предотвращения контаминации следует перед внесением ДНК открывать крышку только того
стрипа, в который будет вноситься данный образец, и закрывать его перед внесением следующего.
Необходимо закрывать стрипы плотно. Препараты ДНК и контрольные образцы следует вносить
наконечниками с фильтром.
2.8 Внесите в соответствующие промаркированные стрипованные пробирки, не повреждая слой парафина,
по 5,0 мкл выделенного из образцов препарата ДНК. В пробирки, промаркированные «К-», «К+», ДНК не
вносится.
2.9 Внесите в стрипованные пробирки, промаркированные «K-», не повреждая слой парафина, по 5,0 мкл
отрицательного контрольного образца, прошедшего этап выделения ДНК.
2.10 Внесите в стрипованные пробирки, промаркированные «K+», не повреждая слой парафина, по 5,0 мкл
положительного контрольного образца.
2.11 Центрифугируйте все стрипы на микроцентрифуге-вортексе в течение 1-3 с.
2.12 Установите все стрипы в детектирующий амплификатор.
2.13 Запустите программное обеспечение детектирующего амплификатора. При первом проведении ПЦР
загрузите соответствующий тест 1. Далее и при последующих постановках создайте соответствующий
протокол исследования: укажите количество и идентификаторы образцов, в том числе отрицательного и
положительного контрольных образцов, отметьте расположение стрипов на матрице термоблока в
соответствии с их установкой (см.2.12) и проведите ПЦР. При выборе теста должна отображаться
программа, приведённая в таблице 3.
Т а б л и ц а 3 – Программа амплификации для детектирующих амплификаторов «ДТпрайм», «ДТпрайм II» и
«ДТлайт»
№
блока Температура, °С мин с Число циклов
Режим
оптических
измерений
Тип блока
1 80 0 30 1 Цикл 94 5 00
2
94 0 30
10
Цикл
68,1
инкремент по
температуре
∆t -0,3
0 20 √
3 94 0 10 40 Цикл 65 0 20 √
4 80 0 01 1 Цикл
5 25 2 … … Хранение Хранение
√- режим оптических измерений
3 Регистрация и учёт результатов ПЦР проводятся автоматически программным обеспечением для
детектирующих амплификаторов.
Рекомендуется пройти обучение по проведению анализа и интерпретации результатов, обратившись в
службу клиентской поддержки.
Результаты постановки валидны, если выполняются условия интерпретации результатов, полученных для
контрольных образцов (таблица 4).
1 - тест для детектирующих амплификаторов серии ДТ создаётся путём ввода параметров (параметры теста
указаны в Приложении А инструкции по применению) или предоставляется производителем набора реагентов.
2 - допускается хранение при температуре 10 °С
--- стр. 4 ---
2.9 Центрифугируйте микропланшет ПЦР при RCF(g) 100 в течение 30 с.
2.10 Установите микропланшет ПЦР в блок детектирующего амплификатора.
2.11 Запустите программное обеспечение детектирующего амплификатора. При первом проведении ПЦР
загрузите соответствующий тест 1. Далее и при последующих постановках создайте соответствующий
протокол исследования: укажите количество и идентификаторы образцов, в том числе отрицательного и
положительного контрольных образцов, отметьте расположение образцов на матрице термоблока в
соответствии с их установкой (см. 2.10) и проведите ПЦР. При выборе теста должна отображаться
программа, приведённая таблице 2.
3 Регистрация и учёт результатов ПЦР проводятся автоматически программным обеспечением для
детектирующих амплификаторов.
Рекомендуется пройти обучение по проведению анализа и интерпретации результатов, обратившись в
службу клиентской поддержки.
Результаты постановки валидны, если выполняются условия интерпретации результатов, полученных для
контрольных образцов (таблица 3).
Т а б л и ц а 3 – Интерпретация результатов ПЦР для контрольных образцов
Отрицательный контрольный образец
Мутации не должны быть обнаружены (для мутантных
аллелей значения Ср не указаны или Ср > 44;
для КВМ значения Cp не указаны или Ср > 37
Отрицательный результат
Результаты постановки валидны
Для мутантных аллелей значения Ср ≤ 44;
или для КВМ значения Ср ≤ 37
Результаты всей постановочной серии считают
недостоверными. Необходимо проведение
специальных мероприятий для выявления и
устранения возможной контаминации.
Положительный контрольный образец
Все мутации должны быть обнаружены (указаны
значения Ср для мутантных аллелей и КВМ);
доля мутантных аллелей должна составлять 10-100%
Положительный результат
Результаты постановки валидны
Значения Ср для мутантных аллелей и КВМ не
указаны;
доли мутантных аллелей не соответствуют заданному
диапазону
Результаты постановки считают недостоверными.
Требуется повторная постановка амплификации всей
партии образцов
Условия транспортирования, хранения и эксплуатации
Транспортирование набора реагентов осуществляют в термоконтейнерах с хладоэлементами всеми видами крытого
транспорта при температуре внутри термоконтейнера, соответствующей условиям хранения компонентов,
входящих в состав набора реагентов. Допускается транспортирование набора реагентов, за исключением
полимеразы ТехноTaq МАХ, в термоконтейнерах с хладоэлементами всеми видами крытого транспорта при
температуре внутри термоконтейнера от 2 °С до 25 °С не более 5 суток. Допускается транспортирование
полимеразы ТехноTaq МАХ в термоконтейнерах с хладоэлементами всеми видами крытого транспорта при
температуре внутри термоконтейнера до 25 °С не более 5 суток.
Все компоненты набора реагентов, за исключением полимеразы ТехноTaq МАХ, следует хранить в холодильнике
или холодильной камере при температуре от 2 °С до 8 °С в течение всего срока годности набора реагентов. Смесь
для амплификации BRAF 3.1, смесь для амплификации BRAF 3.2 следует хранить в защищённом от света месте.
Полимеразу ТехноTaq МАХ следует хранить в морозильной камере при температуре от минус 22 °С до минус 18 °С
в течение всего срока годности набора реагентов.
Срок годности набора реагентов - 12 месяцев при соблюдении всех условий транспортирования, хранения и
эксплуатации.
По вопросам, касающимся качества набора реагентов, следует обращаться в службу клиентской поддержки.
Символы, используемые при маркировке набора реагентов
Медицинское изделие
для диагностики in vitro
Обратитесь к инструкции
по применению или к инструкции по
применению в электронном виде
Температурный диапазон Номер по каталогу
Содержимого достаточно
для проведения ˂n˃ тестов Изготовитель
Использовать до
Не допускать
воздействия солнечного света
Код партии (серии)
Нестерильно
Дата изготовления
1 - тест для детектирующих амплификаторов серии ДТ создаётся путём ввода параметров (параметры теста указаны
в Приложении А инструкции по применению) или предоставляется производителем набора реагентов.
В данном вкладыше приведена информация для набора реагентов BRAF 3 в фасовке U. Перед
началом работы изучите инструкцию.
Набор реагентов для определения соматических мутаций в
гене BRAF (V600, V600E и V600K)
методом ПЦР в режиме реального времени
(BRAF 3)
R1-H486-UA/4 (Фасовка U)
Информация о наборе реагентов
Назначение:
Набор реагентов предназначен для определения соматических мутаций V600 в гене BRAF с дифференциацией
мутаций V600E и V600K в препаратах ДНК, полученных из фиксированных в формалине парафинизированных
образцов солидных опухолей, методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени с целью
подбора таргетной терапии низкомолекулярными BRAF и MEK-ингибиторами.
Выделение ДНК:
Рекомендуются: набор реагентов для предварительной обработки биоматериала ПРОБА-ПК и комплект реагентов
для выделения НК ПРОБА-НК-ПЛЮС (ООО «ДНК-Технология ТС»).
Количество анализируемых образцов:
48 определений (не более 10 постановок), включая анализ неизвестных образцов, отрицательных контрольных
образцов и положительных контрольных образцов.
Состав набора реагентов:
Наименование компонента Внешний вид Количество
пробирок
Номинальный
объём компонента
Смесь для амплификации
BRAF 3.1 Прозрачная голубая жидкость 1 пробирка 300 мкл
Смесь для амплификации
BRAF 3.2 Прозрачная бесцветная или розовая жидкость 1 пробирка 300 мкл
ПЦР-буфер Прозрачная бесцветная жидкость 1 пробирка 600 мкл
Полимераза ТехноTaq МАХ Прозрачная бесцветная вязкая жидкость 1 пробирка 30 мкл
Положительный
контрольный образец1 Прозрачная бесцветная жидкость 1 пробирка 130 мкл
Т а б л и ц а 1 - Перечень выявляемых мутаций гена BRAF, цветовая маркировка и каналы детекции продуктов
амплификации
Смесь для
амплификации
Каналы детекции Цветовая маркировка смеси для
амплификации Fam Hex Rox Cy5
BRAF 3.1 V600* - Маркер КВМ Голубая
BRAF 3.2 V600E** V600К - КВМ Бесцветная или розовая
*- определение мутаций в 600 кодоне (V600E, V600Ec, V600K, V600D, V600Dc, V600R, V600G, V600M без
дифференциации)
** - определение мутаций V600E и V600Ec без дифференциации
1 - на этикетке компонента для всех фасовок «Положительный контрольный образец» указывается как «К+»
Служба клиентской поддержки:
8-800-200-75-15 (для России, звонок бесплатный),
+7 (495) 640-16- 93 (для стран СНГ и зарубежья,
звонок платный).
E-mail: hotline@dna-technology.ru,
www.dna-technology.ru
--- стр. 5 ---
Проведение анализа
1 Подготовка и проведение полимеразной цепной реакции, ручное дозирование
ВНИМАНИЕ!
1. Для амплификации следует использовать одноразовые амплификационные пробирки объёмом 0,2 мл
или микропланшеты ПЦР 96 лунок 1, герметизируемые термоплёнкой. Не рекомендуется использовать
стрипованные пробирки в связи с опасностью постамплификационной контаминации.
2. При проведении всех последующих действий следует избегать воздействия прямых солнечных лучей на
пробирки со смесью для амплификации!
1.1 Промаркируйте для смесей BRAF 3.1 и BRAF 3.2 по 2 пробирки или зарезервируйте по 2 лунки
микропланшета ПЦР 96 лунок для каждого неизвестного образца, для отрицательного контрольного
образца (K–) и для положительного контрольного образца (К+).
ВНИМАНИЕ! Количество реагентов рассчитано не более чем на 10 постановок при условии вариабельного
количества неизвестных образцов, 1 отрицательного контрольного образца и 1 положительного
контрольного образца в каждой постановке.
П риме р: необходимо проанализировать 4 неизвестных образца. Для этого нужно промаркировать 8
пробирок/зарезервировать 8 лунок микропланшета для неизвестных образцов, 2 пробирки/лунки для «K–
» и 2 пробирки/лунки для «K+». Общее количество пробирок/лунок – 12.
1.2 Встряхните пробирки со смесями для амплификации на микроцентрифуге-вортексе в течение 3-5 с и
центрифугируйте на микроцентрифуге-вортексе в течение 1-3 с.
1.3 Внесите во все промаркированные пробирки/необходимые лунки микропланшета (включая «K–» и «К+»)
по 6,0 мкл соответствующей смеси для амплификации (отдельным наконечником для каждой смеси).
1.4 Встряхните пробирки с ПЦР-буфером и полимеразой ТехноTaq МАХ на микроцентрифуге-вортексе в
течение 3-5 с и центрифугируйте на микроцентрифуге-вортексе в течение 1-3 с.
ВНИМАНИЕ! Полимеразу ТехноTaq МАХ необходимо доставать из морозильной камеры непосредственно
перед использованием.
1.5 Приготовьте смесь ПЦР-буфера с полимеразой ТехноTaq MAX. Для этого смешайте в отдельной
одноразовой пробирке:
6,0 х (N+1) мкл ПЦР-буфера,
0,3 х (N+1) мкл полимеразы ТехноTaq MAX,
где N – количество промаркированных пробирок/количество необходимых лунок микропланшета с учётом
«К-», «К+».
П р и м е р : необходимо проанализировать 4 неизвестных образца, «К-», «К+». Промаркированных
пробирок/необходимых лунок микропланшета – 12.
Нужно приготовить смесь ПЦР-буфера и полимеразы ТехноTaq MAX для 13 (12+1) пробирок/лунок, т.е.
78 мкл ПЦР-буфера + 3,9 мкл полимеразы ТехноTaq MAX.
1.6 Встряхните пробирку с приготовленной смесью ПЦР-буфера и полимеразы ТехноTaq MAX на
микроцентрифуге-вортексе в течение 3-5 с и центрифугируйте на микроцентрифуге-вортексе в течение
1-3 с.
ВНИМАНИЕ! Смесь ПЦР-буфера и полимеразы ТехноTaq MAX необходимо готовить непосредственно перед
использованием, хранение смеси не допускается.
1.7 Добавьте во все промаркированные пробирки/необходимые лунки микропланшета со смесью для
амплификации по 6,0 мкл смеси ПЦР-буфера и полимеразы ТехноTaq МАХ. Неплотно закройте пробирки.
ВНИМАНИЕ! После добавления смеси ПЦР-буфера и полимеразы ТехноTaq MAX в пробирки/лунки со
смесью для амплификации необходимо сразу же выполнить 1.8 – 1.15.
1.8 Встряхните пробирку с положительным контрольным образцом на микроцентрифуге-вортексе в течение
3-5 с и центрифугируйте на микроцентрифуге-вортексе в течение 1-3 с.
ВНИМАНИЕ!
1. Для препарата ДНК и отрицательного контрольного образца перед внесением в пробирки/лунки с
реакционной смесью необходимо выполнить рекомендации по использованию препарата ДНК,
приведённые в инструкции по применению набора/комплекта реагентов для выделения НК.
2. При использовании для выделения ДНК комплекта реагентов ПРОБА-НК-ПЛЮС необходимо встряхнуть
пробирки с препаратом ДНК и отрицательным контрольным образцом на микроцентрифуге-вортексе в
течение 3-5 с и центрифугировать на микроцентрифуге-вортексе в течение 1-3 с.
3. Для предотвращения контаминации следует перед внесением ДНК открывать крышки только тех
пробирок, в которые будет вноситься данный образец, и закрывать их перед внесением следующего.
Необходимо закрывать пробирки плотно. Препараты ДНК и контрольные образцы следует вносить
наконечниками с фильтром.
1.9 Внесите в соответствующие промаркированные пробирки/необходимые лунки микропланшета по 6,0 мкл
выделенного из образцов препарата ДНК. В пробирки/лунки, промаркированные «К-» и «К+», ДНК не
вносится.
1.10 Внесите в пробирку/лунку, промаркированную «K-», 6,0 мкл отрицательного контрольного образца,
прошедшего этап выделения ДНК.
1.11 Внесите в пробирку/лунку, промаркированную «K+», 6,0 мкл положительного контрольного образца.
1.12 В случае использования микропланшетов ПЦР 96 лунок:
1.12.1. Поместите аккуратно, не встряхивая, микропланшет ПЦР в подложку устройства для запечатывания
планшетов ДТпак.
1.12.2. Проведите запечатывание микропланшета ПЦР полимерной термоплёнкой согласно руководству по
эксплуатации прибора ДТпак.
1.12.3. Центрифугируйте микропланшет ПЦР при RCF(g) 100 в течение 30 с.
1 - для детектирующего амплификатора «ДТлайт» микропланшеты 96 лунок не используются
1.13 В случае использования пробирок:
Центрифугируйте все пробирки на микроцентрифуге-вортексе в течение 3-5 с.
1.14 Установите все пробирки/микропланшет ПЦР в блок детектирующего амплификатора.
1.15 Запустите программное обеспечение детектирующего амплификатора. При первом проведении ПЦР
загрузите соответствующий тест 1. Далее и при последующих постановках создайте соответствующий
протокол исследования: укажите количество и идентификаторы образцов, в том числе отрицательного и
положительного контрольных образцов, отметьте расположение образцов на матрице термоблока в
соответствии с их установкой (см. 1.14) и проведите ПЦР. При выборе теста должна отображаться
программа, приведённая в таблице 2.
Т а б л и ц а 2 – Программа амплификации для детектирующих амплификаторов «ДТпрайм», «ДТпрайм II» и
«ДТлайт»
№
блока Температура, °С мин с Число циклов
Режим
оптических
измерений
Тип блока
1 80 0 30 1 Цикл 94 5 00
2
94 0 30
10
Цикл
68,1
инкремент по
температуре
∆t -0,3
0 20 √
3 94 0 10 40 Цикл 65 0 20 √
4 80 0 01 1 Цикл
5 25 2 … … Хранение Хранение
√- режим оптических измерений
2 Подготовка и проведение полимеразной цепной реакции, с использованием дозирующего
устройства ДТстрим (только для детектирующих амплификаторов «ДТпрайм», «ДТпрайм II»)
ВНИМАНИЕ!
1. Для амплификации следует использовать микропланшеты ПЦР 96 лунок или 384 лунки 3,
герметизируемые термоплёнкой.
2. При проведении всех последующих действий следует избегать воздействия прямых солнечных лучей на
пробирки со смесью для амплификации!
П риме чан ие - Рекомендуется постановка не менее 5 образцов в одном исследовании (3 неизвестных
образца, отрицательный и положительный контрольные образцы).
2.1 Встряхните пробирки со смесями для амплификации на микроцентрифуге-вортексе в течение 3-5 с и
центрифугируйте на микроцентрифуге-вортексе в течение 1-3 с.
2.2 Встряхните пробирки с ПЦР-буфером и полимеразой ТехноTaq МАХ на микроцентрифуге-вортексе в
течение 3-5 с и центрифугируйте на микроцентрифуге-вортексе в течение 1-3 с.
ВНИМАНИЕ! Полимеразу ТехноTaq МАХ необходимо доставать из морозильной камеры непосредственно
перед использованием.
2.3 Следуя указаниям ПО дозирующего устройства ДТстрим, приготовьте в отдельной одноразовой пробирке
смесь ПЦР-буфера с полимеразой ТехноTaq MAX.
2.4 Встряхните пробирку с приготовленной смесью ПЦР-буфера и полимеразы ТехноTaq MAX на
микроцентрифуге-вортексе в течение 3-5 с и центрифугируйте на микроцентрифуге-вортексе в течение
1-3 с.
2.5 Встряхните пробирку с положительным контрольным образцом на микроцентрифуге-вортексе в течение 3-
5 с и центрифугируйте на микроцентрифуге-вортексе в течение 1-3 с.
ВНИМАНИЕ!
1. Перед проведением дозирования для препарата ДНК и отрицательного контрольного образца
необходимо выполнить рекомендации по использованию препарата ДНК, приведённые в инструкции по
применению набора/комплекта реагентов для выделения НК.
2. При использовании для выделения ДНК комплекта реагентов ПРОБА-НК-ПЛЮС необходимо встряхнуть
пробирки с препаратом ДНК и отрицательным контрольным образцом на микроцентрифуге-вортексе в
течение 3-5 с и центрифугировать на микроцентрифуге-вортексе в течение 1-3 с.
2.6 Установите пробирки со смесью для амплификации, со смесью ПЦР-буфера и полимеразы ТехноTaq МАХ,
с препаратами ДНК, отрицательным контрольным образцом и положительным контрольным образцом, а
также микропланшет ПЦР на рабочий стол ДТстрим и проведите дозирование компонентов согласно
руководству по эксплуатации.
2.7 Поместите аккуратно, не встряхивая, микропланшет ПЦР в подложку устройства для запечатывания
планшетов ДТпак после завершения программы на дозирующем устройстве ДТстрим.
2.8 Проведите запечатывание микропланшета ПЦР полимерной термоплёнкой согласно руководству по
эксплуатации прибора ДТпак.
1 - тест для детектирующих амплификаторов серии ДТ создаётся путём ввода параметров (параметры теста указаны
в Приложении А инструкции по применению) или предоставляется производителем набора реагентов.
2 - допускается хранение при температуре 10 °С
3 - только для детектирующих амплификаторов «ДТпрайм», «ДТпрайм II» в модификациях «ДТпрайм *X*»,
«ДТпрайм II *X*»
=== файл: unknown__BRAF 3_Макеты паспорта ОТК_F.pdf ===
--- стр. 1 ---
Ме„`ДНК-ТЕХНОЛОГИЯ Макеты паспортов качества
СОГЛАСОВЛНО УТВЕРЖДАЮ
‘21
О
-Те\вно1осуТб»А
ол митровский ы „СеА.Самарин
еее
||| С° "Труа
« 3/» 2025г. ВОЙ 2025г.
МАКЕТЫПАСПОРТОВКАЧЕСТВА
НАМЕДИЦИНСКОЕИЗДЕЛИЕДЛЯДИАГНОСТИКИ/\ ИТКО
Наборреагентов
дляопределениясоматическихмутацийв генеВКАЕ(У600,У6б00ЕиУб00К)
методомПЦРврежимереальноговремени
(ВКАЕ3)
2025г.
--- стр. 2 ---
ООО «ДНК-Технология ТС»
Паспорт качества № ХХХХХХ
Набор реагентов для определения соматических мутаций в гене BRAF (V600, V600E и V600K)
методом ПЦР в режиме реального времени
(BRAF 3)
Фасовка S, стрипы
Серия:
Дата изготовления:
ХХХХХХ-ХХ
ХХХХ-ХХ-ХХ
Срок годности: до ХХХХ-ХХ-ХХ
Результат контроля
1. Проверка комплектности, упаковки и маркировки – соответствует
требованиям ТУ 20.59.52-032-89545560-2025.
2. Проверка состава набора и внешнего вида компонентов
Компонент Серия
компонента Количество Характеристика и норма Условия
хранения Результат
Смеси для амплификации,
запечатанные парафином ХХХ
12 стрипов
по 8 пробирок
по 20 мкл
Прозрачная бесцветная, розовая
или голубая жидкость под
воскообразным белым слоем
от 2 °С до 8 °С Соответствует
ПЦР-буфер ХХХ 1 пробирка
1,0 мл Прозрачная бесцветная жидкость от 2 °С до 8 °С Соответствует
Полимераза ТехноТаq
МАХ ХХХ 1 пробирка
50 мкл
Прозрачная бесцветная вязкая
жидкость
от минус 22 °С
до минус 18 °С Соответствует
Минеральное масло ХХХ 2 пробирки
по 1,0 мл
Прозрачная бесцветная вязкая
маслянистая жидкость от 2 °С до 8 °С Соответствует
Положительный
контрольный образец ХХХ 1 пробирка
130 мкл Прозрачная бесцветная жидкость от 2 °С до 8 °С Соответствует
Крышки для стрипов - 12 шт. - - Соответствует
3. Проверка функциональных показателей
Наименование показателя Характеристика и норма Результат
Предел обнаружения доли мутантного
аллеля
Для лабораторных контрольных образцов все мутации должны быть
обнаружены (указаны значения Ср для мутантных аллелей и КВМ). Доля
мутантных аллелей 1-10 % или 5-20 %
Соответствует
Специфичность
Для лабораторных контрольных образцов все мутации должны быть
обнаружены (указаны значения Ср для мутантных аллелей и КВМ) Соответствует
Для отрицательного контрольного образца мутации не должны быть
обнаружены (не указаны значения Ср для мутантных аллелей или Ср > 45,
не указаны значения Cp для КВМ или Ср > 38)
Соответствует
Условия транспортирования:
Транспортирование набора реагентов осуществляют в термоконтейнерах с хладоэлементами всеми видами крытого транспорта при
температуре внутри термоконтейнера, соответствующей условиям хранения компонентов, входящих в состав набора реагентов.
Допускается транспортирование набора реагентов, за исключением полимеразы ТехноTaq MAX, в термоконтейнерах с хладоэлементами
всеми видами крытого транспорта при температуре внутри термоконтейнера от 2 °С до 25 °С не более 5 суток.
Допускается транспортирование полимеразы ТехноTaq MAX в термоконтейнерах с хладоэлементами всеми видами крытого транспорта
при температуре внутри термоконтейнера до 25°С не более 5 суток.
Заключение ОТК: соответствует требованиям ТУ 20.59.52-032-89545560-2025
Дата выдачи паспорта: ХХХХ-ХХ-ХХ
^^ДНК-ТЕХНОЛОГИЯ
--- стр. 3 ---
ООО «ДНК-Технология ТС»
Паспорт качества № ХХХХХХ
Набор реагентов для определения соматических мутаций в гене BRAF (V600, V600E и V600K)
методом ПЦР в режиме реального времени
(BRAF 3)
Фасовка U
Серия:
Дата изготовления:
ХХХХХХ-ХХ
ХХХХ-ХХ-ХХ
Срок годности: до ХХХХ-ХХ-ХХ
Результат контроля
1. Проверка комплектности, упаковки и маркировки – соответствует
требованиям ТУ 20.59.52-032-89545560-2025.
2. Проверка состава набора и внешнего вида компонентов
Компонент Серия
компонента Количество Характеристика и норма Условия
хранения Результат
Смесь для амплификации
BRAF 3.1 ХХХ 1 пробирка
300 мкл Прозрачная голубая жидкость от 2 °С до 8 °С Соответствует
Смесь для амплификации
BRAF 3.2 ХХХ 1 пробирка
300 мкл
Прозрачная бесцветная или розовая
жидкость от 2 °С до 8 °С Соответствует
ПЦР-буфер ХХХ 1 пробирка
600 мкл Прозрачная бесцветная жидкость от 2 °С до 8 °С Соответствует
Полимераза
ТехноTaq MAX ХХХ 1 пробирка
30 мкл
Прозрачная бесцветная вязкая
жидкость
от минус 22 °С
до минус 18 °С Соответствует
Положительный
контрольный образец ХХХ 1 пробирка
130 мкл Прозрачная бесцветная жидкость от 2 °С до 8 °С Соответствует
3. Проверка функциональных показателей
Наименование показателя Характеристика и норма Результат
Предел обнаружения доли мутантного
аллеля
Для лабораторных контрольных образцов все мутации должны быть
обнаружены (указаны значения Ср для мутантных аллелей и КВМ). Доля
мутантных аллелей 1-10 % или 5-20 %
Соответствует
Специфичность
Для лабораторных контрольных образцов все мутации должны быть
обнаружены (указаны значения Ср для мутантных аллелей и КВМ) Соответствует
Для отрицательного контрольного образца мутации не должны быть
обнаружены (не указаны значения Ср для мутантных аллелей или Ср > 44,
не указаны значения Cp для КВМ или Ср > 37)
Соответствует
Условия транспортирования:
Транспортирование набора реагентов осуществляют в термоконтейнерах с хладоэлементами всеми видами крытого транспорта при
температуре внутри термоконтейнера, соответствующей условиям хранения компонентов, входящих в состав набора реагентов.
Допускается транспортирование набора реагентов, за исключением полимеразы ТехноTaq MAX, в термоконтейнерах с хладоэлементами
всеми видами крытого транспорта при температуре внутри термоконтейнера от 2 °С до 25 °С не более 5 суток.
Допускается транспортирование полимеразы ТехноTaq MAX в термоконтейнерах с хладоэлементами всеми видами крытого транспорта
при температуре внутри термоконтейнера до 25°С не более 5 суток.
Заключение ОТК: соответствует требованиям ТУ 20.59.52-032-89545560-2025
Дата выдачи паспорта: ХХХХ-ХХ-ХХ
^^ДНК-ТЕХНОЛОГИЯ
--- стр. 4 ---
ООО «НПО ДНК-Технология»
Паспорт качества № ХХХХХХ
Набор реагентов для определения соматических мутаций в гене BRAF (V600, V600E и V600K)
методом ПЦР в режиме реального времени
(BRAF 3)
Фасовка S, стрипы
Серия:
Дата изготовления:
ХХХХХХ-ХХ
ХХХХ-ХХ-ХХ
Срок годности: до ХХХХ-ХХ-ХХ
Результат контроля
1. Проверка комплектности, упаковки и маркировки – соответствует
требованиям ТУ 20.59.52-032-89545560-2025.
2. Проверка состава набора и внешнего вида компонентов
Компонент Серия
компонента Количество Характеристика и норма Условия
хранения Результат
Смеси для амплификации,
запечатанные парафином ХХХ
12 стрипов
по 8 пробирок
по 20 мкл
Прозрачная бесцветная, розовая
или голубая жидкость под
воскообразным белым слоем
от 2 °С до 8 °С Соответствует
ПЦР-буфер ХХХ 1 пробирка
1,0 мл Прозрачная бесцветная жидкость от 2 °С до 8 °С Соответствует
Полимераза ТехноТаq
МАХ ХХХ 1 пробирка
50 мкл
Прозрачная бесцветная вязкая
жидкость
от минус 22 °С
до минус 18 °С Соответствует
Минеральное масло ХХХ 2 пробирки
по 1,0 мл
Прозрачная бесцветная вязкая
маслянистая жидкость от 2 °С до 8 °С Соответствует
Положительный
контрольный образец ХХХ 1 пробирка
130 мкл Прозрачная бесцветная жидкость от 2 °С до 8 °С Соответствует
Крышки для стрипов - 12 шт. - - Соответствует
3. Проверка функциональных показателей
Наименование показателя Характеристика и норма Результат
Предел обнаружения доли мутантного
аллеля
Для лабораторных контрольных образцов все мутации должны быть
обнаружены (указаны значения Ср для мутантных аллелей и КВМ). Доля
мутантных аллелей 1-10 % или 5-20 %
Соответствует
Специфичность
Для лабораторных контрольных образцов все мутации должны быть
обнаружены (указаны значения Ср для мутантных аллелей и КВМ) Соответствует
Для отрицательного контрольного образца мутации не должны быть
обнаружены (не указаны значения Ср для мутантных аллелей или Ср > 45,
не указаны значения Cp для КВМ или Ср > 38)
Соответствует
Условия транспортирования:
Транспортирование набора реагентов осуществляют в термоконтейнерах с хладоэлементами всеми видами крытого транспорта при
температуре внутри термоконтейнера, соответствующей условиям хранения компонентов, входящих в состав набора реагентов.
Допускается транспортирование набора реагентов, за исключением полимеразы ТехноTaq MAX, в термоконтейнерах с хладоэлементами
всеми видами крытого транспорта при температуре внутри термоконтейнера от 2 °С до 25 °С не более 5 суток.
Допускается транспортирование полимеразы ТехноTaq MAX в термоконтейнерах с хладоэлементами всеми видами кры того транспорта
при температуре внутри термоконтейнера до 25°С не более 5 суток.
Заключение ОТК: соответствует требованиям ТУ 20.59.52-032-89545560-2025
Дата выдачи паспорта: ХХХХ-ХХ-ХХ
^^ДНК-ТЕХНОЛОГИЯ
--- стр. 5 ---
ООО «НПО ДНК-Технология»
Паспорт качества № ХХХХХХ
Набор реагентов для определения соматических мутаций в гене BRAF (V600, V600E и V600K)
методом ПЦР в режиме реального времени
(BRAF 3)
Фасовка U
Серия:
Дата изготовления:
ХХХХХХ-ХХ
ХХХХ-ХХ-ХХ
Срок годности: до ХХХХ-ХХ-ХХ
Результат контроля
1. Проверка комплектности, упаковки и маркировки – соответствует
требованиям ТУ 20.59.52-032-89545560-2025.
2. Проверка состава набора и внешнего вида компонентов
Компонент Серия
компонента Количество Характеристика и норма Условия
хранения Результат
Смесь для амплификации
BRAF 3.1 ХХХ 1 пробирка
300 мкл Прозрачная голубая жидкость от 2 °С до 8 °С Соответствует
Смесь для амплификации
BRAF 3.2 ХХХ 1 пробирка
300 мкл
Прозрачная бесцветная или розовая
жидкость от 2 °С до 8 °С Соответствует
ПЦР-буфер ХХХ 1 пробирка
600 мкл Прозрачная бесцветная жидкость от 2 °С до 8 °С Соответствует
Полимераза
ТехноTaq MAX ХХХ 1 пробирка
30 мкл
Прозрачная бесцветная вязкая
жидкость
от минус 22 °С
до минус 18 °С Соответствует
Положительный
контрольный образец ХХХ 1 пробирка
130 мкл Прозрачная бесцветная жидкость от 2 °С до 8 °С Соответствует
3. Проверка функциональных показателей
Наименование показателя Характеристика и норма Результат
Предел обнаружения доли мутантного
аллеля
Для лабораторных контрольных образцов все мутации должны быть
обнаружены (указаны значения Ср для мутантных аллелей и КВМ). Доля
мутантных аллелей 1-10 % или 5-20 %
Соответствует
Специфичность
Для лабораторных контрольных образцов все мутации должны быть
обнаружены (указаны значения Ср для мутантных аллелей и КВМ) Соответствует
Для отрицательного контрольного образца мутации не должны быть
обнаружены (не указаны значения Ср для мутантных аллелей или Ср > 44,
не указаны значения Cp для КВМ или Ср > 37)
Соответствует
Условия транспортирования:
Транспортирование набора реагентов осуществляют в термоконтейнерах с хладоэлементами всеми видами крытого транспорта при
температуре внутри термоконтейнера, соответствующей условиям хранения компонентов, входящих в состав набора реагентов.
Допускается транспортирование набора реагентов, за исключением полимеразы ТехноTaq MAX, в термоконтейнерах с хладоэлементами
всеми видами крытого транспорта при температуре внутри термоконтейнера от 2 °С до 25 °С не более 5 суток.
Допускается транспортирование полимеразы ТехноTaq MAX в термоконтейнерах с хладоэлементами всеми видами крытого транспорта
при температуре внутри термоконтейнера до 25°С не более 5 суток.
Заключение ОТК: соответствует требованиям ТУ 20.59.52-032-89545560-2025
Дата выдачи паспорта: ХХХХ-ХХ-ХХ
^^ДНК-ТЕХНОЛОГИЯ
=== файл: unknown__BRAF 3 Интрукция.pdf ===
--- стр. 4 ---
Инструкция по применению
BRAF 3
Лист 4
Листов 44
1. ПРЕДНАЗНАЧЕННОЕ ПРИМЕНЕНИЕ
1.1. Полное наименование набора реагентов: Набор реагентов для определения
соматических мутаций в гене BRAF (V600, V600E и V600К) методом ПЦР в режиме
реального времени (BRAF 3), далее по тексту - набор реагентов.
1.2. Назначение: Набор реагентов предназначен для определения соматических мутаций
V600 в гене BRAF с дифференциацией мутаций V600E и V600K в препаратах ДНК,
полученных из фиксированных в формалине парафинизированных образцов
солидных опухолей, методом полимеразной цепной реакции в режиме реального
времени с целью подбора таргетной терапии низкомолекулярными BRAF и MEK-
ингибиторами.
1.3. Функциональное назначение: сопутствующая диагностика.
1.4. Показания к проведению исследования: подбор препаратов для таргетной терапии
низкомолекулярными ингибиторами мутированного белка BRAF (вемурафениб,
дабрафениб, энкорафениб) и MEK-ингибиторами (кобиметиниб, траметиниб,
биниметиниб).
Диагностика мутаций в гене BRAF должна осуществляться строго в соответствии с
рекомендациями Минздрава РФ. Тестирование мутаций в гене BRAF направлено на
определение показаний для назначения таргетной терапии BRAF- и MEK-
ингибиторами и предусмотрено при метастатической меланоме кожи III/IV стадии
(КР 546_3), колоректальном раке (КР 396_3 и КР 554_3), немелкоклеточном раке
легкого (НМРЛ) IV стадии (КР 30_4), анапластическом раке щитовидной железы (КР
329_2), метастатических гастроинтестинальных стромальных опухолях (ГИСО)
дикого типа по KIT/PDGFRA/SDH для назначения дополнительной терапии
(дабрафениб) или при планировании неоадъювантной терапии иматинибом пациентов
с местно-распространенными ГИСО (опухоли в пищеводе, кардии, 12-перстной или
прямой кишке с BRAF мутацией резистентны к иматинибу) (КР 551_3), при
аденокарциномах невыявленной первичной локализации (КР 893_1). При рецидивных
неоперабельных или метастатических опухолях слюнных желез, рефрактерных к
стандартным режимам химиотерапии, при наличии подтверждённой мутации в гене
BRAF рекомендована таргетная терапия ингибиторами BRAF до прогрессирования
или непереносимой токсичности (КР 116_2). При плеоморфной ксантоастроцитоме
при наличии мутации V600 BRAF вопрос о проведении таргетной терапии решается
индивидуально консилиумом (КР 578_1). При метастатическом поражении головного
мозга при ЗНО первичных локализаций с BRAF-мутацией (меланома, рак легкого и
--- стр. 5 ---
Инструкция по применению
BRAF 3
Лист 5
Листов 44
пр.) системная противоопухолевая лекарственная терапия проводится на основании
гистологической и молекулярной характеристик первичной опухоли и с учетом
предшествующего лечения (КР 534_3). При карциноме поджелудочной железы при
отсутствии мутации в гене KRAS и выявлении мутации BRAF возможно применение
анти-BRAF терапии во второй и более линии лечения (КР 355_5). При
холангиокарциноме применение молекулярно-направленной терапии в настоящее
время не носит обязательного характера, но может быть рекомендовано по
исчерпании стандартных терапевтических опций по решению консилиума, в случае
HER2-позитивuой внутрипеченочной холангиокарциноме и раке желчного пузыря
при ко-мутации BRAF/RAS отмечено значимое снижение эффективности анти-HER2
терапии (КР495_2).
Противопоказаний к применению нет.
1.5. Популяционные и демографические аспекты: применение набора реагентов не
зависит от популяционных и демографических аспектов.
1.6. Область применения: набор реагентов может быть использован в клинико-
диагностических лабораториях медицинских учреждений.
1.7. Потенциальные пользователи: квалифицированный персонал, обученный методам
молекулярной диагностики и правилам работы в клинико-диагностической
лаборатории: врач клинико-диагностической лаборатории, фельдшер-лаборант
(медицинский лабораторный техник).
1.8. Применять набор реагентов строго по назначению согласно данной инструкции по
применению.
--- стр. 6 ---
Инструкция по применению
BRAF 3
Лист 6
Листов 44
2. ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА РЕАГЕНТОВ
2.1. Состав набора реагентов
R1-H486-S3/4, фасовка S, стрипы
Наименование компонента Внешний вид Количество
пробирок
Номинальный
объём компонента
Смеси для амплификации,
запечатанные парафином
Прозрачная бесцветная,
розовая или голубая
жидкость под
воскообразным белым слоем
12 стрипов
по 8 пробирок по 20 мкл
ПЦР-буфер Прозрачная бесцветная
жидкость 1 пробирка 1,0 мл
Полимераза ТехноTaq MAX Прозрачная бесцветная
вязкая жидкость 1 пробирка 50 мкл
Минеральное масло Прозрачная бесцветная
вязкая маслянистая жидкость 2 пробирки по 1,0 мл
Положительный контрольный
образец1
Прозрачная бесцветная
жидкость 1 пробирка 130 мкл
Крышки для стрипов 12 шт.
R1-H486-UA/4, фасовка U
Наименование компонента Внешний вид Количество
пробирок
Номинальный
объём компонента
Смесь для амплификации
BRAF 3.1
Прозрачная голубая
жидкость 1 пробирка 300 мкл
Смесь для амплификации
BRAF 3.2
Прозрачная бесцветная или
розовая жидкость 1 пробирка 300 мкл
ПЦР-буфер Прозрачная бесцветная
жидкость 1 пробирка 600 мкл
Полимераза ТехноTaq MAX Прозрачная бесцветная
вязкая жидкость 1 пробирка 30 мкл
Положительный контрольный
образец1
Прозрачная бесцветная
жидкость 1 пробирка 130 мкл
Все компоненты набора реагентов готовы к применению и не требуют
дополнительной подготовки к работе.
Комплектность:
Набор реагентов в одном из вариантов исполнения – 1 шт.;
Инструкция по применению – 1 экз.;
Вкладыш – 1 экз.;
Паспорт – 1 экз.
1 - на этикетке компонента для всех фасовок «Положительный контрольный образец» указывается как
«К+»
--- стр. 7 ---
Инструкция по применению
BRAF 3
Лист 7
Листов 44
2.2. Количество анализируемых образцов
Набор реагентов в фасовке S рассчитан на проведение 48 определений (не более
12 постановок), включая анализ неизвестных образцов, отрицательных контрольных образцов
и положительных контрольных образцов.
Набор реагентов в фасовке U рассчитан на проведение 48 определений (не более
10 постановок), включая анализ неизвестных образцов, отрицательных контрольных образцов
и положительных контрольных образцов.
2.3. Принцип метода
Метод: полимеразная цепная реакция (ПЦР) с детекцией результатов в режиме
реального времени. Качественный анализ.
Принцип метода основан на использовании технологии аллель-специфичной
амплификации ДНК, заключающейся в повторяющихся циклах температурной денатурации
ДНК, отжига праймеров с комплементарными последовательностями и последующей
достройки полинуклеотидных цепей Taq-полимеразой.
Для повышения чувствительности и специфичности реакции предусмотрено
применение «горячего» старта. «Горячий» старт обеспечивается использованием полимеразы,
активность которой блокирована антителами. Активация фермента происходит только после
предварительного прогрева реакционной смеси при 94 °С. Это исключает неспецифическое
связывание праймеров с ДНК-мишенью при более низких температурах.
В реакционную смесь для проведения ПЦР введены отдельные или ковалентно
связанные с праймером ДНК-зонды, каждый из которых содержит флуоресцентную метку и
гаситель флуоресценции. При образовании специфического продукта ДНК-зонд разрушается,
действие гасителя на флуоресцентную метку прекращается, что ведёт к возрастанию уровня
флуоресценции, который фиксируется детектирующим амплификатором. Количество
разрушенных зондов (а, следовательно, и уровень флуоресценции) возрастает
пропорционально количеству образовавшихся специфических продуктов амплификации.
Уровень флуоресценции измеряется на каждом цикле амплификации в режиме реального
времени.
Условия реакции и используемые олигонуклеотиды подобраны таким образом, чтобы
наиболее эффективно обеспечить амплификацию на матрице мутантного аллеля. Значение
порогового цикла Ср на матрице мутантного аллеля значительно опережает фоновую
амплификацию на матрице нормального аллеля дикого типа – от 8,5 циклов в зависимости от
аналита.
--- стр. 8 ---
Инструкция по применению
BRAF 3
Лист 8
Листов 44
Помимо аллель-специфичных к мутантным аллелям гена BRAF олигонуклеотидов в
реакционную смесь добавлены праймеры и ДНК-зонды для определения консервативного
фрагмента ДНК гена BRAF (КВМ), который используется для контроля прохождения
полимеразной цепной реакции. Для определения мутации используется показатель разницы
индикаторных циклов мутантного аллеля (МА) и КВМ (dСр=Ср МА – Ср КВМ): значение dCp
менее порогового значения фоновой амплификации свидетельствует о наличии мутации.
В состав ДНК-зондов, использующихся для детекции продуктов амплификации
мутантных аллелей гена BRAF, включены флуоресцентные метки Fam и Hex.
В состав ДНК-зондов, использующихся для детекции продукта амплификации
фрагмента ДНК гена BRAF (КВМ), входит флуоресцентный краситель Cy5.
Использование нескольких флуоресцентных красителей позволяет сократить
количество пробирок и биоматериала, необходимого для проведения исследования, поскольку
появляется возможность одновременно регистрировать результаты разных реакций
амплификации, проходящих в одной пробирке.
Для контроля расположения стрипов в термоблоке детектирующего амплификатора в
определенную пробирку набора реагентов добавлен олигонуклеотид с флуоресцентной
меткой Rox – «Маркер».
Он используется детектирующим амплификатором для определения положения
стрипа в термоблоке. После прохождения амплификации программное обеспечение
детектирующего амплификатора сравнивает заданное оператором расположение пробирок с
реальным положением маркера, и, если находит несовпадение (при неправильном
расположении стрипа), то предупреждает оператора о несоответствии.
Для оценки валидности полученных результатов учитывают показатель контроля
взятия материала (КВМ).
В таблице 1 представлены перечень выявляемых мутаций в гене BRAF, каналы
детекции продуктов амплификации и цветовая маркировка.
--- стр. 9 ---
Инструкция по применению
BRAF 3
Лист 9
Листов 44
Т а б л и ц а 1 – Перечень выявляемых мутаций в гене BRAF, каналы детекции продуктов
амплификации и цветовая маркировка
Фасовка S Фасовка U Канал детекции Цветовая
маркировка
смеси для
амплификации
№ пробирки
в стрипе
Смесь для
амплификации Fam Hex Rox Cy5
1, 3, 5, 7 BRAF 3.1 V600* - Маркер КВМ Голубая
2, 4, 6, 8 BRAF 3.2 V600E** V600К - КВМ Бесцветная или
розовая
* - определение мутаций в 600 кодоне (V600E, V600Ec, V600K, V600D, V600Dc, V600R, V600G,
V600M без дифференциации)
** - определение мутаций V600E и V600Ec без дифференциации
Исследование состоит из следующих этапов: выделение ДНК (пробоподготовка) и
ПЦР-амплификация ДНК с детекцией результатов в режиме реального времени
с использованием набора реагентов BRAF 3.
--- стр. 10 ---
Инструкция по применению
BRAF 3
Лист 10
Листов 44
3. АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАР АКТЕРИСТИКИ
3.1. Аналитическая специфичность
В таблице 2 приведен перечень мутаций в гене BRAF, выявляемых с помощью набора
реагентов BRAF 3.
Т а б л и ц а 2 – Перечень мутаций в гене BRAF, выявляемых с помощью набора реагентов
BRAF 3
Тривиальное
название мутации Экзон Наименование мутации
(номенклатура HGVS)* Cosmic ID NIH ID
V600 (без дифференциации)
V600E
15 NM_004333.6 (BRAF): c.1799T>A
(p.Val600Glu) COSM476 rs113488022
15 NM_004333.6 (BRAF):
c.1799_1800delinsAA (p.Val600Glu)** COSM475 rs121913377
V600K 15 NM_004333.6 (BRAF):
c.1798_1799delinsAA (p.Val600Lys) COSM473 rs121913227
V600D
15 NM_004333.6 (BRAF):
c.1799_1800delinsAT (p.Val600Asp) COSM477 rs121913377
15 NM_004333.6 (BRAF):
c.1799_1800delinsAС (p.Val600Asp)*** COSM308550 rs121913377
V600G 15 NM_004333.6 (BRAF): c.1799T>G
(p.Val600Gly) COSM6137 rs113488022
V600R 15 NM_004333.6 (BRAF):
c.1798_1799delinsAG (p.Val600Arg) COSM474 rs121913227
V600M 15 NM_004333.6 (BRAF): c.1798G>A
(p.Val600Met) COSM1130 rs121913378
V600E
V600E
15 NM_004333.6 (BRAF): c.1799T>A
(p.Val600Glu) COSM476 rs113488022
15 NM_004333.6 (BRAF):
c.1799_1800delinsAA (p.Val600Glu)** COSM475 rs121913377
V600K
V600K 15 NM_004333.6 (BRAF):
c.1798_1799delinsAA (p.Val600Lys) COSM473 rs121913227
Примечание к таблице:
* - https://hgvs-nomenclature.org/
**- Данную мутацию также обозначают как V600E(complex) или V600Ec
*** - Данную мутацию также обозначают как V600D(complex) или V600Dc
3.1.1. Перекрестная реактивность (неспецифическая или фоновая амплификация)
Ввиду высокой гомологии нуклеотидных последовательностей аналитов, выявляемых
набором реагентом, возможна фоновая амплификация неспецифических аналитов, т.е.
получение экспоненциального роста флуоресценции для неспецифической матрицы.
Фоновая амплификация возможна на матрице как нормальных (3.1.1.1), так и
мутантных (3.1.1.2) аллелей.
Фоновая амплификация учитывается при анализе результатов исследования.
--- стр. 13 ---
Инструкция по применению
BRAF 3
Лист 13
Листов 44
мутантного и дикого типа, не повлияло на результаты исследования с использованием набора
реагентов.
3.2. Интерферирующие вещества
Наличие ингибиторов ПЦР в образце биологического материала может быть
причиной сомнительных (недостоверных) результатов. Признаком ингибирования ПЦР
является отсутствие амплификации КВМ по каналу детекции Cy5
(Ср для КВМ не указан).
К ингибиторам ПЦР, источником которых может являться образец ДНК, по
результатам анализа рисков и проведения НИОКР отнесены следующие вещества: гемоглобин
и меланин, присутствующий в образце ДНК в результате неполного удаления в ходе
выделения ДНК из образца биоматериала, содержащего примесь крови и пигмент кожи
соответственно, а также изопропиловый спирт и метилацетат, присутствующие в образце ДНК
в результате неполного удаления промывочных растворов в ходе пробоподготовки.
Максимальные концентрации интерферирующих веществ, при которых не
наблюдалось влияние на амплификацию лабораторного контрольного образца и КВМ
составляют: гемоглобин – 0,35 мг/мл образца ДНК, меланин - 0,20 мкг/мл образца ДНК,
изопропиловый спирт – 100 мкл/мл образца ДНК, метилацетат – 100 мкл/мл образца ДНК.
Интерферирующие вещества, содержащиеся в образце биоматериала, практически
полностью удаляются в ходе выделения ДНК. Для снижения количества ингибиторов ПЦР
необходимо соблюдать правила взятия биологического материала. При подозрении на
наличие в образце большого количества ингибиторов ПЦР рекомендуется выбирать методы
выделения ДНК, позволяющие максимально удалить ингибиторы ПЦР из образца, не
рекомендуется использовать экспресс-методы выделения ДНК.
На результат исследования может оказать влияние наличие в образце большого
количества здоровой и некротизированной ткани. Оптимальное содержание ядер опухолевых
клеток должно составлять не менее 35 %, допустимое - не менее 20 %. При меньшем
содержании рекомендуется макро- или минидиссекция.
3 . 3 . Предел обнаружения
Предел обнаружения доли мутантного аллеля определяется, как минимальное
количество мутантного аллеля в пуле аллелей (дикий тип и мутация), определение которого
возможно с воспроизводимостью 95% с трактовкой результата «мутация».
Предел обнаружения доли мутантного аллеля лимитирован количеством ДНК и
составляет 1,0 % в образце при значении Ср≤31 (фасовка S) или Ср≤30 (фасовка U) по каналу
--- стр. 14 ---
Инструкция по применению
BRAF 3
Лист 14
Листов 44
детекции КВМ (Cy5), 5,0% - при значении 31 < Ср≤34 (фасовка S) или 30 < Ср≤33 (фасовка U)
(таблица 5).
Т а б л и ц а 5 – Предел обнаружения доли мутантного аллеля в образце
Чувствительность
Значение Ср КВМ
Ср≤31 (фасовка S)
Ср≤30 (фасовка U)
31 < Ср≤34 (фасовка S)
30 < Ср≤33 (фасовка U)
Предел обнаружения доли
мутантного аллеля в образце 1,0% 5,0%
При значении Ср КВМ >33 (фасовка U) или Ср КВМ >34 (фасовка S) количество
материала расценивается как недостаточное для корректного заключения, результат
регистрируется как не валидный. При использовании меньшего количества ДНК (Ср КВМ >33
(фасовка U) или Ср КВМ >34 (фасовка S)) производитель не гарантирует корректную работу
набора реагентов.
Набор реагентов обеспечивает выявление мутаций при доле мутантного аллеля не
менее 1,0 % в смеси с нормальным аллелем при общей концентрации ДНК не менее 2,0 нг/мкл
(10 нг на реакцию, Ср КВМ ≤31 (фасовка S), Ср КВМ ≤30 (фасовка U)) и не менее 5,0 % в
смеси с нормальным аллелем при общей концентрации ДНК не менее 0,25 нг/мкл (1,5 нг на
реакцию, 31 < Ср КВМ ≤34 (фасовка S), 30 < Ср КВМ ≤33 (фасовка U)).
3 . 4 . Диагностические характеристики
При проведении клинико-лабораторных испытаний набора реагентов получены
следующие диагностические характеристики:
Мутация/
норма
Диагностическая чувствительность Диагностическая специфичность
Исследовано
образцов Значение Исследовано
образцов Значение
V600E 42 100 %
(95 % ДИ: 91,59 % – 100 %) 72 100 %
(95 % ДИ: 95,01 % – 100 %)
V600K 11 100 %
(95 % ДИ: 71,51 % – 100 %) 72 100 %
(95 % ДИ: 95,01 % – 100 %)
V600 54 100 %
(95 % ДИ: 93,40 % – 100 %) 72 100 %
(95 % ДИ: 95,01 % – 100 %)
--- стр. 15 ---
Инструкция по применению
BRAF 3
Лист 15
Листов 44
3.5. Воспроизводимость
Воспроизводимость исследования определялась путем двукратных повторов внутри
одной постановки, а также для фасовок S и U набора реагентов, в экспериментах,
выполненных в одной лаборатории разными операторами на разных приборах в различные
дни путем тестирования положительных и отрицательных биологических образцов ДНК.
Результаты представлены в таблице 6.
Т а б л и ц а 6 – Воспроизводимость исследования
Тип образца
Повторяемость внутри постановки Внутрилабораторная повторяемость
между вариантами фасовки S и U
Количество Совпадение
результатов Количество Совпадение
результатов
V600 12 12 из 12 12 12 из 12
V600E 8 8 из 8 8 8 из 8
V600K 4 4 из 4 4 4 из 4
Нет мутаций 8 8 из 8 8 8 из 8
Итого: 32 32 из 32 (100%) 32 32 из 32 (100%)
--- стр. 18 ---
Инструкция по применению
BRAF 3
Лист 18
Листов 44
5. ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ
При работе с набором реагентов требуются следующие оборудование, реагенты и
расходные материалы:
Оборудование, реагенты и расходные материалы Фасовка S,
стрипы
Фасовка U, дозирование
ручное автоматизи-
рованное
ПЦР-бокс ● ● ●
амплификатор с детекцией в режиме реального времени1 ● ● ● 2
микроцентрифуга-вортекс3 ● ● ●
ротор для микроцентрифуги-вортекса для стрипованных
пробирок объёмом 0,2 мл ● - -
холодильник с морозильной камерой ● ● ●
штатив «рабочее место» для пробирок объёмом 0,2 мл - ●4 -
штатив «рабочее место» для стрипованных пробирок
объёмом 0,2 мл ● - -
штатив «рабочее место» для пробирок объёмом 1,5 мл ● ● ●
дозаторы механические или электронные переменного
объема одноканальные, позволяющие отбирать объём
жидкости от 2,0 до 20 мкл, от 20 до 200 мкл, от 200 до
1000 мкл
● ● ●
одноразовые наконечники с фильтром для
полуавтоматических дозаторов, свободные от РНКаз и
ДНКаз, объёмом 20 мкл, 200 мкл, 1000 мкл
● ● ●
штатив для дозаторов ● ● ●
пробирки микроцентрифужные объёмом 1,5 мл с
крышками, свободные от РНКаз и ДНКаз ● ● ●
пробирки амплификационные объёмом 0,2 мл с
крышками, свободные от РНКаз и ДНКаз
или микропланшет ПЦР 96 лунок5
- ● ● 6
одноразовые перчатки медицинские, без талька,
текстурированные ● ● ●
ёмкость для сброса использованных наконечников,
пробирок и других расходных материалов ● ● ●
Устройство дозирующее ДТстрим по ТУ 9443-005-
96301278-2012 в варианте исполнения 12M1 или 15M1,
ООО «НПО ДНК-Технология», Россия, РУ № РЗН
2015/2982, далее по тексту - ДТстрим
- - ●
одноразовые наконечники с фильтром для дозирующего
устройства ДТстрим в комплектации *М1, свободные от
РНКаз и ДНКаз, объёмом 200 мкл или рекомендованные
для аналогичного используемого дозирующего
устройства
- - ●
Устройство для запечатывания планшетов ДТпак, ООО
«НПО ДНК-Технология», Россия - ● 6 ●
центрифуга, обеспечивающая RCF (g) 100, с адаптером
для микропланшетов ПЦР - ● 6 ●
полимерная термоплёнка для запечатывания
микропланшетов ПЦР - ● 6 ●
микропланшет ПЦР 384 лунки - - ●
физиологический раствор (0,9% NaCl) стерильный (при необходимости)
набор/комплект реагентов для выделения ДНК из образцов фиксированных в формалине
парафинизированных тканей, рекомендуются:
--- стр. 19 ---
Инструкция по применению
BRAF 3
Лист 19
Листов 44
Оборудование, реагенты и расходные материалы Фасовка S,
стрипы
Фасовка U, дозирование
ручное автоматизи-
рованное
- Набор реагентов для предобработки биоматериала при выделении нуклеиновых кислот (ПРОБА-
ПК) по ТУ 21.20.23-107-46482962-2020, ООО «ДНК-Технология ТС», Россия, РУ №РЗН 2021/14384
и Комплект реагентов для выделения нуклеиновых кислот ПРОБА-НК/ПРОБА-НК-ПЛЮС по
ТУ 9398-035-46482062-2009 в форме комплектации: комплект ПРОБА-НК-ПЛЮС, ООО «ДНК-
Технология ТС», Россия, РУ № ФСР 2010/08867
Примечания к таблице:
1 - далее по тексту – детектирующий амплификатор; требуемые параметры детектирующих
амплификаторов указаны ниже
2 - для работы с микропланшетами ПЦР 384 лунки валидированы детектирующие амплификаторы
«ДТпрайм» (модификация «ДТпрайм *X*»), ООО «НПО ДНК-Технология», Россия, РУ № ФСР
2011/10229; «ДТпрайм II» (модификация «ДТпрайм II *X*»), ООО «НПО ДНК-Технология»,
Россия, РУ № РЗН 2024/24179
3 - рекомендуется Встряхиватель лабораторный медицинский «ДТспин» по ТУ 32.50.50-003-
96301278-2024, ООО «НПО ДНК-Технология», Россия, РУ № РЗН 2024/24070; ротор для
стрипованных пробирок объёмом 0,2 мл входит в комплектацию
4 - только при использовании пробирок
5 - не используется для детектирующих амплификаторов «ДТлайт»
6 - только при использовании микропланшетов ПЦР
Расшифровка обозначений:
«●» - требуется
«-» - не требуется
Набор реагентов применяется с детектирующими амплификаторами планшетного
типа с системой детекции флуоресцентного сигнала в режиме реального времени,
зарегистрированными в установленном порядке в РФ и соответствующими следующим
требованиям:
- обеспечивается работа с объемом реакционной смеси 35 мкл (фасовка S) или 18 мкл
(фасовка U);
- обеспечивается работа с флуорофорами: Fam, Hex, Rox, Cy5;
- подогреваемая крышка с температурой более 100 °С;
- скорость нагрева не менее 2 °С/с;
- скорость охлаждения не менее 1 °С/с;
- точность поддержания и однородность температуры не более ± 0,4 °С.
Для работы с набором реагентов валидированы следующие детектирующие
амплификаторы:
- Амплификатор детектирующий «ДТпрайм» по ТУ 9443-004-96301278-2010 (модификация
«ДТпрайм *M*»), ООО «НПО ДНК-Технология», Россия, РУ № ФСР 2011/10229, далее по
тексту - «ДТпрайм»;
--- стр. 20 ---
Инструкция по применению
BRAF 3
Лист 20
Листов 44
- Амплификатор детектирующий «ДТпрайм II» по ТУ 26.51.53-001-96301278-2022
(модификация «ДТпрайм II *M*»), ООО «НПО ДНК-Технология», Россия, РУ № РЗН
2024/24179, далее по тексту - «ДТпрайм II»;
- Амплификатор детектирующий «ДТпрайм» по ТУ 9443-004-96301278-2010 (модификация
«ДТпрайм *X*») ООО «НПО ДНК-Технология», Россия, РУ № ФСР 2011/10229 (только для
набора реагентов в фасовке U для автоматизированного дозирования при использовании
микропланшетов ПЦР 384 лунки), далее по тексту - «ДТпрайм» в модификации «ДТпрайм
*X*»;
- Амплификатор детектирующий «ДТпрайм II» по ТУ 26.51.53-001-96301278-2022
(модификация «ДТпрайм II *X*») ООО «НПО ДНК-Технология», Россия, РУ № РЗН
2024/24179 (только для набора реагентов в фасовке U для автоматизированного дозирования
при использовании микропланшетов ПЦР 384 лунки), далее по тексту - «ДТпрайм II» в
модификации «ДТпрайм II *X*»;
- Амплификатор детектирующий «ДТлайт» по ТУ 9443-003-96301278-2010 (модификация
«ДТлайт *S*»), ООО «НПО ДНК-Технология», Россия, РУ № ФСР 2011/10228 (только для
набора реагентов в фасовке S; в фасовке U для ручного дозирования при использовании
пробирок), далее по тексту – «ДТлайт».
По вопросам применения детектирующих амплификаторов, не указанных выше,
требуется согласование с производителем набора реагентов.
--- стр. 23 ---
Инструкция по применению
BRAF 3
Лист 23
Листов 44
7. ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА
7.1. Выделение ДНК
Для выделения ДНК рекомендуется использовать наборы/комплекты реагентов,
имеющие регистрационные удостоверения на медицинское изделие и предназначенные для
соответствующих видов биоматериала с целью последующего исследования ДНК методом
ПЦР, например, ПРОБА-НК-ПЛЮС.
Выделение ДНК из биологического материала проводят в соответствии с инструкцией
по применению используемого набора/комплекта реагентов.
Рекомендуемый объём элюции ДНК - 100 мкл. Увеличение объёма элюции может
снизить концентрацию ДНК и чувствительность исследования. Для постановки реакции
требуется не менее ≥ 1,5 нг ДНК на реакцию (5 мкл х ≥ 0,25 нг/мкл или 6 мкл х ≥ 0,25 нг/мкл).
В Н И М А Н И Е ! Одновременно с выделением ДНК из биологического материала
необходимо подготовить отрицательный контрольный образец и провести его через все этапы
пробоподготовки. Для этого рекомендуется использовать физиологический раствор или
отрицательный контрольный образец, входящий в состав набора/комплекта реагентов для
выделения нуклеиновых кислот, в объёме, указанном в инструкции по применению
соответствующего набора/комплекта реагентов.
7.2. Подготовка и проведение ПЦР. Фасовка S
В Н И М А Н И Е !
1. При проведении всех последующих действий следует избегать воздействия прямых
солнечных лучей на пробирки со смесью для амплификации.
2. Следует строго соблюдать комплектность стрипов и крышек к ним. Не использовать
крышки к стрипам из других наборов реагентов!
7.2.1. Промаркируйте по 2 стрипованные пробирки со смесями для амплификации,
запечатанными парафином, для каждого неизвестного образца, для отрицательного
контрольного образца (К-) и для положительного контрольного образца (K+)
(таблица 7).
П р и м е ч а н и е – Один стрип рассчитан на исследование 4 образцов.
В Н И М А Н И Е ! Количество реагентов рассчитано не более чем на 12 постановок
при условии вариабельного количества неизвестных образцов, 1 отрицательного контрольного
образца и 1 положительного контрольного образца в каждой постановке.
--- стр. 24 ---
Инструкция по применению
BRAF 3
Лист 24
Листов 44
Т а б л и ц а 7 – Пример маркировки пробирок для исследования 2 неизвестных образцов
Анализируемые образцы Маркировка пробирок в стрипе
Неизвестный образец №1 Пробирки 1, 2
Неизвестный образец №2 Пробирки 3, 4
«К-» Пробирки 5, 6
«К+» Пробирки 7, 8
7.2.2. Встряхните пробирки с ПЦР-буфером и полимеразой ТехноTaq MAX на
микроцентрифуге-вортексе в течение 3-5 с и центрифугируйте на микроцентрифуге-
вортексе в течение 1-3 с.
В Н И М А Н И Е ! Полимеразу ТехноTaq МАХ необходимо доставать из морозильной
камеры непосредственно перед использованием.
7.2.3. Приготовьте смесь ПЦР-буфера с полимеразой ТехноTaq MAX. Для этого смешайте
в отдельной одноразовой пробирке:
10 х (N+1) мкл ПЦР-буфера,
0,5 х (N+1) мкл полимеразы ТехноTaq MAX,
где N – количество промаркированных пробирок с учётом «К-» и «К+».
7.2.4. Встряхните пробирку с приготовленной смесью ПЦР-буфера и полимеразы
ТехноTaq MAX на микроцентрифуге-вортексе в течение 3-5 с и центрифугируйте на
микроцентрифуге-вортексе в течение 1-3 с.
В Н И М А Н И Е ! Смесь ПЦР-буфера и полимеразы ТехноTaq МАХ необходимо готовить
непосредственно перед использованием, хранение смеси не допускается.
7.2.5. Добавьте во все промаркированные пробирки, не повреждая слой парафина, по 10 мкл
смеси ПЦР-буфера и полимеразы ТехноTaq MAX.
В Н И М А Н И Е ! После добавления смеси ПЦР-буфера и полимеразы ТехноTaq MAX в
пробирки со смесью для амплификации необходимо сразу же выполнить 7.2.6 – 7.2.13.
7.2.6. Добавьте в каждую пробирку по одной капле (около 20 мкл) минерального масла.
Неплотно прикройте стрипы крышками.
7.2.7. Встряхните пробирку с положительным контрольным образцом на микроцентрифуге-
вортексе в течение 3-5 с и центрифугируйте на микроцентрифуге-вортексе в течение
1-3 с.
В Н И М А Н И Е !
1. Для препарата ДНК и отрицательного контрольного образца перед внесением в пробирки
с реакционной смесью необходимо выполнить рекомендации по использованию препарата
ДНК, приведённые в инструкции по применению набора/комплекта реагентов для
выделения НК.
--- стр. 25 ---
Инструкция по применению
BRAF 3
Лист 25
Листов 44
2. При использовании для выделения ДНК комплекта реагентов ПРОБА-НК-ПЛЮС
необходимо встряхнуть пробирки с препаратом ДНК и отрицательным контрольным
образцом на микроцентрифуге-вортексе в течение 3-5 с и центрифугировать на
микроцентрифуге-вортексе в течение 1-3 с.
3. Для предотвращения контаминации следует перед внесением ДНК открывать крышку
только того стрипа, в который будут вноситься образцы, и закрывать его перед внесением
следующих. Необходимо закрывать стрипы плотно. Препараты ДНК и контрольные
образцы следует вносить наконечниками с фильтром.
7.2.8. Внесите в соответствующие промаркированные стрипованные пробирки, не
повреждая слой парафина, по 5,0 мкл выделенного из образцов препарата ДНК.
В пробирки, промаркированные «K-», «K+», ДНК не вносится.
7.2.9. Внесите в стрипованные пробирки, промаркированные «K-», не повреждая слой
парафина, по 5,0 мкл отрицательного контрольного образца, прошедшего этап
выделения ДНК (см.7.1).
7.2.10. Внесите в стрипованные пробирки, промаркированные «K+», не повреждая слой
парафина, по 5,0 мкл положительного контрольного образца.
7.2.11. Центрифугируйте стрипы на микроцентрифуге-вортексе в течение 1-3 с.
7.2.12. Установите все стрипы в детектирующий амплификатор.
7.2.13. Запустите программное обеспечение детектирующего амплификатора. При первом
проведении ПЦР загрузите соответствующий тест1. Далее и при последующих
постановках создайте соответствующий протокол исследования: укажите количество
и идентификаторы образцов, в том числе отрицательного и положительного
контрольных образцов, отметьте расположение стрипов на матрице термоблока в
соответствии с их установкой (см.7.2.12) и проведите ПЦР. При выборе теста должна
отображаться программа, приведённая в таблице 8.
1 - тест для детектирующих амплификаторов серии ДТ создаётся путём ввода параметров (параметры
теста указаны в Приложении А) или предоставляется производителем набора реагентов.
--- стр. 26 ---
Инструкция по применению
BRAF 3
Лист 26
Листов 44
Т а б л и ц а 8 – Программа амплификации для детектирующих амплификаторов «ДТпрайм»,
«ДТпрайм II» и «ДТлайт»
№ блока Температура, °С мин с Число циклов
Режим
оптических
измерений
Тип блока
1 80 0 30 1 Цикл 94 5 00
2
94 0 30
10
Цикл 68,1
инкремент по
температуре
∆t - 0,3
0 20 √
3 94 0 10 40 Цикл 65 0 20 √
4 80 0 01 1 Цикл
5 251 … … Хранение Хранение
√- режим оптических измерений
7.3. Подготовка и проведение ПЦР. Фасовка U, ручное дозирование
В Н И М А Н И Е !
1. Для амплификации следует использовать одноразовые амплификационные пробирки
объёмом 0,2 мл или микропланшеты ПЦР 96 лунок2, герметизируемые термоплёнкой. Не
рекомендуется использовать стрипованные пробирки в связи с опасностью
постамплификационной контаминации.
2. При проведении всех последующих действий следует избегать воздействия прямых
солнечных лучей на пробирки со смесью для амплификации.
7.3.1. Промаркируйте по 2 пробирки (одну для смеси BRAF 3.1, одну для смеси BRAF 3.2)
или зарезервируйте по 2 лунки микропланшета ПЦР 96 лунок для каждого
неизвестного образца, для отрицательного контрольного образца (К-) и для
положительного контрольного образца (K+).
В Н И М А Н И Е ! Количество реагентов рассчитано не более чем на 10 постановок
при условии вариабельного количества неизвестных образцов, 1 отрицательного контрольного
образца и 1 положительного контрольного образца в каждой постановке.
Пример:
1 - допускается хранение при температуре 10 °С
2 - для детектирующего амплификатора «ДТлайт» микропланшеты ПЦР 96 лунок не используются
--- стр. 28 ---
Инструкция по применению
BRAF 3
Лист 28
Листов 44
В Н И М А Н И Е ! После добавления смеси ПЦР-буфера и полимеразы ТехноTaq MAX
в пробирки/лунки со смесями для амплификации необходимо сразу же выполнить
7.3.8 – 7.3.15.
7.3.8. Встряхните пробирку с положительным контрольным образцом на микроцентрифуге-
вортексе в течение 3-5 с и центрифугируйте на микроцентрифуге-вортексе в течение
1-3 с.
В Н И М А Н И Е !
1. Для препарата ДНК и отрицательного контрольного образца перед внесением в
пробирки/лунки с реакционной смесью необходимо выполнить рекомендации по
использованию препарата ДНК, приведённые в инструкции по применению
набора/комплекта реагентов для выделения НК.
2. При использовании для выделения ДНК комплекта реагентов ПРОБА-НК-ПЛЮС
необходимо встряхнуть пробирки с препаратом ДНК и отрицательным контрольным
образцом на микроцентрифуге-вортексе в течение 3-5 с и центрифугировать на
микроцентрифуге-вортексе в течение 1-3 с.
3. Для предотвращения контаминации следует перед внесением ДНК открывать крышки
только тех пробирок, в которые будет вноситься данный образец, и закрывать их перед
внесением следующего. Необходимо закрывать пробирки плотно. Препараты ДНК и
контрольные образцы следует вносить наконечниками с фильтром.
7.3.9. Внесите в соответствующие промаркированные пробирки/необходимые лунки
микропланшета по 6,0 мкл выделенного из образцов препарата ДНК. В
пробирки/лунки, промаркированные «K-», «K+», ДНК не вносится.
7.3.10. Внесите в пробирку/лунку, промаркированную «K-», 6,0 мкл отрицательного
контрольного образца, прошедшего этап выделения ДНК (см.7.1).
7.3.11. Внесите в пробирку/лунку, промаркированную «К+» 6,0 мкл положительного
контрольного образца.
7.3.12. В случае использования микропланшетов ПЦР 96 лунок:
7.3.12.1. Поместите аккуратно, не встряхивая, микропланшет ПЦР в подложку
устройства для запечатывания планшетов ДТпак.
7.3.12.2. Проведите запечатывание микропланшета ПЦР полимерной термоплёнкой
согласно руководству по эксплуатации прибора ДТпак.
7.3.12.3. Центрифугируйте микропланшет ПЦР при RCF(g) 100 в течение 30 с.
7.3.13. В случае использования пробирок:
Центрифугируйте все пробирки на микроцентрифуге-вортексе в течение 3–5 с.
--- стр. 29 ---
Инструкция по применению
BRAF 3
Лист 29
Листов 44
7.3.14. Установите все пробирки/микропланшет ПЦР в блок детектирующего
амплификатора.
7.3.15. Запустите программное обеспечение детектирующего амплификатора. При первом
проведении ПЦР загрузите соответствующий тест1. Далее и при последующих
постановках создайте соответствующий протокол исследования: укажите количество
и идентификаторы образцов, в том числе отрицательного и положительного
контрольных образцов, отметьте расположение образцов на матрице термоблока в
соответствии с их установкой (см. 7.3.14) и проведите ПЦР. При выборе теста должна
отображаться программа, приведённая в таблице 8.
7.4. Подготовка и проведение ПЦР. Фасовка U, с использованием дозирующего
устройства ДТстрим (только для детектирующих амплификаторов «ДТпрайм»,
«ДТпрайм II»)
В Н И М А Н И Е !
1. Для амплификации следует использовать микропланшеты ПЦР 96 лунок или 384 лунки2,
герметизируемые термоплёнкой.
2. При проведении всех последующих действий следует избегать воздействия прямых
солнечных лучей на пробирки со смесью для амплификации.
7.4.1. Встряхните пробирки со смесями для амплификации на микроцентрифуге-вортексе в
течение 3-5 с и центрифугируйте на микроцентрифуге-вортексе в течение 1-3 с.
7.4.2. Встряхните пробирки с ПЦР-буфером и полимеразой ТехноTaq MAX на
микроцентрифуге-вортексе в течение 3-5 с и центрифугируйте на микроцентрифуге-
вортексе в течение 1-3 с.
В Н И М А Н И Е ! Полимеразу ТехноTaq МАХ необходимо доставать из морозильной
камеры непосредственно перед использованием.
7.4.3. Следуя указаниям ПО дозирующего устройства ДТстрим, приготовьте в отдельной
одноразовой пробирке смесь ПЦР-буфера с полимеразой ТехноTaq MAX.
7.4.4. Встряхните пробирку с приготовленной смесью ПЦР-буфера и полимеразы
ТехноTaq MAX на микроцентрифуге-вортексе в течение 3-5 с и центрифугируйте на
микроцентрифуге-вортексе в течение 1-3 с.
7.4.5. Встряхните пробирку с положительным контрольным образцом на микроцентрифуге-
1 - тест для детектирующих амплификаторов серии ДТ создаётся путём ввода параметров (параметры
теста указаны в Приложении А) или предоставляется производителем набора реагентов.
2 - только для детектирующих амплификаторов «ДТпрайм», «ДТпрайм II» в модификациях «ДТпрайм
*X*», «ДТпрайм II *X*»
--- стр. 30 ---
Инструкция по применению
BRAF 3
Лист 30
Листов 44
вортексе в течение 3-5 с и центрифугируйте на микроцентрифуге-вортексе в течение 1-3 с.
В Н И М А Н И Е !
1. Перед проведением дозирования для препарата ДНК и отрицательного контрольного
образца необходимо выполнить рекомендации по использованию препарата ДНК,
приведённые в инструкции по применению набора/комплекта реагентов для выделения НК.
2. При использовании для выделения ДНК комплекта реагентов ПРОБА-НК-ПЛЮС
необходимо встряхнуть пробирки с препаратом ДНК и отрицательным контрольным
образцом на микроцентрифуге-вортексе в течение 3-5 с и центрифугировать на
микроцентрифуге-вортексе в течение 1-3 с.
7.4.6. Установите пробирки со смесями для амплификации, со смесью ПЦР-буфера и
полимеразы ТехноTaq МАХ, с препаратами ДНК, отрицательным контрольным
образцом и положительным контрольным образцом, а также микропланшет ПЦР на
рабочий стол ДТстрим и проведите дозирование компонентов согласно руководству
по эксплуатации дозирующего устройства.
7.4.7. Поместите аккуратно, не встряхивая, микропланшет ПЦР в подложку устройства для
запечатывания планшетов ДТпак после завершения программы на дозирующем
устройстве ДТстрим.
7.4.8. Проведите запечатывание микропланшета ПЦР полимерной термоплёнкой согласно
руководству по эксплуатации прибора ДТпак.
7.4.9. Центрифугируйте микропланшет ПЦР при RCF(g) 100 в течение 30 с.
7.4.10. Установите микропланшет ПЦР в блок детектирующего амплификатора.
7.4.11. Запустите программное обеспечение детектирующего амплификатора. При первом
проведении ПЦР загрузите соответствующий тест1. Далее и при последующих
постановках создайте соответствующий протокол исследования: укажите количество
и идентификаторы образцов, в том числе отрицательного и положительного
контрольных образцов, отметьте расположение образцов на матрице термоблока в
соответствии с их установкой (см. 7.4.10) и проведите ПЦР. При выборе теста должна
отображаться программа, приведённая таблице 8.
1 - тест для детектирующих амплификаторов серии ДТ создаётся путём ввода параметров (параметры
теста указаны в Приложении А) или предоставляется производителем набора реагентов.
--- стр. 31 ---
Инструкция по применению
BRAF 3
Лист 31
Листов 44
8. РЕГИСТРАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ АМПЛИФИКАЦИИ
Регистрация сигнала флуоресценции проводится детектирующим амплификатором
автоматически во время амплификации.
9. УЧЁТ И ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ
9.1. Учёт результатов амплификации осуществляется автоматически с помощью
программного обеспечения, поставляемого с детектирующим амплификатором.
9.2. После прохождения амплификации программное обеспечение сравнивает заданное
оператором расположение образцов с реальным положением маркера
(флуоресцентной метки Rox), и, если находит несовпадение, то предупреждает
оператора об этом. В этом случае необходимо проверить расположение
пробирок/микропланшета ПЦР в термоблоке (стрипованные пробирки №№1, 3, 5, 7
или смесь BRAF 3.1 отмечены голубым буфером) и скорректировать идентификаторы
пробирок/лунок в протоколе.
9.3. Анализ и интерпретацию результатов проводят в соответствии с Приложением Б:
определяют наличие или отсутствие мутации в анализируемых образцах.
П р и м е ч а н и е – Рекомендуется пройти обучение по проведению анализа и интерпретации
результатов. Контактные данные службы клиентской поддержки представлены в разделе 16
данной инструкции.
9.4. Результаты постановки валидны, если выполняются условия интерпретации
результатов, полученных для контрольных образцов (таблица 9).
--- стр. 34 ---
Инструкция по применению
BRAF 3
Лист 34
Листов 44
все компоненты набора реагентов, за исключением полимеразы ТехноTaq MAX,
следует хранить в холодильнике или холодильной камере при температуре от 2 °С до
8 °С, в течение всего срока годности набора реагентов;
смесь для амплификации BRAF 3.1, смесь для амплификации BRAF 3.2 и смеси для
амплификации, запечатанные парафином, следует хранить в холодильнике или
холодильной камере при температуре от 2 °С до 8 °С в защищенном от света месте в
течение всего срока годности набора реагентов;
полимеразу ТехноTaq MAX следует хранить в морозильной камере при температуре
от минус 22 °С до минус 18 °С в течение всего срока годности набора реагентов.
10.3.4. Наборы реагентов с истекшим сроком годности применению не подлежат.
11. УКАЗАНИЯ ПО УТИЛИЗАЦИИ
11.1. При использовании набора реагентов в клинико-диагностической лаборатории
образуются отходы класса В, которые утилизируются в соответствии с требованиями
СанПиН 2.1.3684-21 и МУ 1.3.2569-09.
11.2. Наборы реагентов, пришедшие в непригодность, в том числе, в связи с истечением
срока годности, повреждением упаковки подлежат утилизации в соответствии с
требованиями СанПиН 2.1.3684-21.
12. ГАРАНТИИ ИЗГОТОВИТЕЛЯ
12.1. Предприятие-изготовитель гарантирует соответствие набора реагентов требованиям
технических условий при соблюдении условий транспортирования, хранения и
эксплуатации, установленных настоящими техническими условиями.
12.2. Срок годности набора реагентов – 12 месяцев при соблюдении всех условий
транспортирования, хранения и эксплуатации.
13. РЕМОНТ И ТЕХНИЧЕСКОЕ ОБСЛУЖИВАНИЕ
Набор реагентов предназначен для однократного применения и не подлежит техническому
обслуживанию и текущему ремонту.
--- стр. 35 ---
Инструкция по применению
BRAF 3
Лист 35
Листов 44
14. СИМВОЛЫ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ ПРИ МАРКИРОВКЕ НАБОРА РЕАГЕНТОВ
Медицинское изделие
для диагностики in vitro
Обратитесь к инструкции
по применению или к инструкции
по применению в электронном виде
Температурный диапазон Номер по каталогу
Содержимого достаточно для
проведения ˂n˃ тестов Изготовитель
Использовать до
Не допускать
воздействия солнечного света
Код партии (серии)
Нестерильно
Дата изготовления
--- стр. 36 ---
Инструкция по применению
BRAF 3
Лист 36
Листов 44
15. ПЕРЕЧЕНЬ ПРИМЕНЯЕМЫХ НОРМАТИВНЫХ ДОКУМЕНТОВ
И НАЦИОНАЛЬНЫХ СТАНДАРТОВ
ТУ 20.59.52-032-89545560-2025 Набор реагентов для определения соматических мутаций в
гене BRAF (V600, V600E и V600K) методом ПЦР в режиме реального времени (BRAF 3)
ГОСТ ISO 14971-2021 Изделия медицинские. Применение менеджмента риска к медицинским
изделиям
ГОСТ 15.309-98 Система разработки и постановки продукции на производство. Испытания и
приёмка выпускаемой продукции. Основные положения
ГОСТ Р 2.105-2019 Единая система конструкторской документации. Общие требования к
текстовым документам
ГОСТ Р 15.013-2016 Система разработки и постановки продукции на производство.
Медицинские изделия
ГОСТ Р 51088-2013 Медицинские изделия для диагностики ин витро. Реагенты, наборы
реагентов, тест-системы, контрольные материалы, питательные среды. Требования к изделиям
и поддерживающей документации
ГОСТ Р 51352-2013 Медицинские изделия для диагностики ин витро. Методы испытаний
ГОСТ Р 53022.3-2008 Требования к качеству клинических лабораторных исследований, Ч.3.
Правила оценки клинической информативности лабораторных тестов.
ГОСТ Р ИСО 15190-2023 Лаборатории медицинские. Требования безопасности
ГОСТ Р ИСО 15223-1-2023 Изделия медицинские. Символы, применяемые для передачи
информации, предоставляемой изготовителем. Ч.1. Основные требования
ГОСТ Р ИСО 18113-1-2024 Медицинские изделия для диагностики in vitro. Информация,
предоставленная изготовителем (маркировка). Часть 1. Термины, определения и общие
требования
ГОСТ Р ИСО 18113-2-2024 Медицинские изделия для диагностики in vitro. Информация,
предоставленная изготовителем (маркировка). Часть 2. Реагенты для диагностики in vitro для
профессионального использования
ГОСТ Р ИСО 23640-2015 Изделия медицинские для диагностики in vitro. Оценка стабильности
реагентов для диагностики in vitro
П р и м е ч а н и е – Указанные выше стандарты были действующими на момент утверждения
инструкции по применению. В дальнейшем при пользовании документом целесообразно проверить
действие ссылочных нормативных документов на текущий момент. Если ссылочный документ заменён
или изменён, то при применении настоящего документа следует пользоваться заменённым
(изменённым) документом.
--- стр. 37 ---
Инструкция по применению
BRAF 3
Лист 37
Листов 44
16. АДРЕС ДЛЯ ОБРАЩЕНИЯ
Производство наборов реагентов имеет сертифицированную систему менеджмента
качества и соответствует требованиям стандарта систем менеджмента качества ISO 9001 в
области разработки, производства и продажи IVD реагентов и приборов для молекулярно-
генетической диагностики, и другого лабораторного применения, и ISO 13485 в области
разработки, производства и продажи IVD реагентов и приборов для медицинской
молекулярно-генетической диагностики.
Производитель: Общество с ограниченной ответственностью «ДНК-Технология ТС»
(ООО «ДНК-Технология ТС»), Россия.
Адрес производителя: 117246, Россия, г. Москва, проезд Научный, д. 20, строение 4.
Место производства:
ООО «ДНК-Технология ТС», 117246, Россия, г. Москва, проезд Научный, д. 20,
строение 4;
ООО «НПО ДНК-Технология»,142281, Россия, Московская область, г.о. Серпухов,
г. Протвино, ул. Железнодорожная, д. 3.
По вопросам, касающимся качества набора реагентов, следует обращаться в службу
клиентской поддержки.
Служба клиентской поддержки:
8-800-200-75-15 (для России, звонок бесплатный),
+7 (495) 640-16-93 (для стран СНГ и зарубежья, звонок платный).
E-mail: hotline@dna-technology.ru,
www.dna-technology.ru
--- стр. 38 ---
Инструкция по применению
BRAF 3
Лист 38
Листов 44
ПРИЛОЖЕНИЕ А
Параметры теста, которые необходимо внести в программное обеспечение
детектирующих амплификаторов «ДТпрайм», «ДТпрайм II» и «ДТлайт»
при использовании набора реагентов BRAF 3 в фасовках S, U
1) Количество пробирок в тесте – 2;
2) Объём реакционной смеси – 35 мкл (фасовка S) или 18 мкл (фасовка U);
3) В окне «Программа амплификации» ввести следующие параметры:
№ блока Температура, °С мин с Число циклов
Режим
оптических
измерений
Тип блока
1 80 0 30 1 Цикл 94 5 00
2
94 0 30
10
Цикл 68,1
инкремент по
температуре
∆t - 0,3
0 20 √
3 94 0 10 40 Цикл 65 0 20 √
4 80 0 01 1 Цикл
5 251 … … Хранение Хранение
√- режим оптических измерений
4) Внести следующие параметры каналов детекции:
Фасовка S Фасовка U Канал детекции
№
пробирки в
стрипе
Смесь для
амплификации Fam Hex Rox Cy5
1, 3, 5, 7 BRAF 3.1 V600 - Маркер КВМ
2, 4, 6, 8 BRAF 3.2 V600E V600К - КВМ
1 - допускается хранение при температуре 10 °С
--- стр. 39 ---
Инструкция по применению
BRAF 3
Лист 39
Листов 44
ПРИЛОЖЕНИЕ Б
Алгоритм анализа и интерпретации результатов
полученных с использованием набора реагентов BRAF 3
В Н И М А Н И Е ! Перед проведением анализа результатов необходимо оценить результаты
ПЦР, полученные для отрицательного и положительного контрольных образцов (см. таблицу
9).
ШАГ 1. Оценка КВМ
1. Оценка значений Cp КВМ.
2. Оценка разницы значений Cp КВМ в разных пробирках для одного образца (dCp КВМ).
3. Дополнительно для положительного контрольного образца:
Расчёт значения lg для КВМ по формуле: Х =(48,5-Cp)/3,34 (фасовка S) или Х=(47,5-
Cp)/3,34 (фасовка U), где Х – значение lg концентрации КВМ в образце, Cp – среднее
значение Ср КВМ.
4. Интерпретация результата согласно таблице Б.1.
Т а б л и ц а Б . 1 – Интерпретация результата ПЦР для КВМ
Результат исследования Интерпретация
Cp КВМ ≤ 33 (фас. U)
Cp КВМ ≤ 34 (фас. S),
dCp КВМ ≤ 2,0
Результат валиден
Cp КВМ > 33(фас. U)
Cp КВМ > 34(фас. S)
Недостоверный
результат
Вероятна низкая концентрация ДНК.
Требуется повторная подготовка образцов:
меньшее разведение образца (в случае если
исходный образец ДНК был высокой
концентрации и разведён перед
постановкой);
повторное выделение ДНК с целью
повышения концентрации.
Для этого количество используемых срезов
может быть увеличено,
и/или объём буфера для протеиназы К может
быть сокращён до 100 мкл, а далее весь лизат
использован для выделения ДНК,
и/или объём буфера для элюирования ДНК
на этапе выделения может быть уменьшен
до 100 мкл и менее.
dCp КВМ > 2,0
Недостоверный
результат
Значение КВМ не определено.
Требуется повторная постановка ПЦР или
повторное выделение ДНК (выполняется
последовательно).
ШАГ 2. Определение статуса аллелей гена BRAF (НОРМА или МУТАЦИЯ)
Для каждого аналита учитывают наличие амплификации.
- В случае отсутствия амплификации (отсутствие Cp), статус аллеля определяют как «норма».
--- стр. 41 ---
Инструкция по применению
BRAF 3
Лист 41
Листов 44
Сp квм, Cp ма – значения пороговых циклов КВМ и мутантного аллеля соответственно.
Т а б л и ц а Б . 3 – Формулы расчёта доли мутантного аллеля
Показатель Расчёт доли мутантного аллеля
V600 = ଵ,ଽଽ КВМ
ଵ,ଽହ ೇలబబ х 100%
V600E = ଵ,ଽଽ КВМ
ଵ,ଽହ ೇలబబಶ * 100%
V600K = ଵ,ଽଽ КВМ
ଵ,ଽହ ೇలబబೖ * 100%
ШАГ 4. Оценка доли мутантного аллеля (проводят для каждого показателя)
Результат, полученный на шаге 4
Расчетная доля мутантного аллеля
Интерпретация результата:
Диапазон полуколичественной оценки
< 0,7% < 1,0%
≥ 0,7% и < 6,0% 1,0-10%
≥ 6,0% и < 16% 5,0-20%
≥ 16% 10-100%
--- стр. 42 ---
Инструкция по применению
BRAF 3
Лист 42
Листов 44
ПРИЛОЖЕНИЕ В
ПРИМЕР АНАЛИЗА И ИНТЕРПРЕТАЦИИ РЕЗУЛЬТАТОВ
Исследования выполнены при использовании набора реагентов в фасовке S
ОБРАЗЕЦ №1 – Определена мутация V600 и V600E
Данные ПЦР для ОБРАЗЦА №1 АНАЛИЗ РЕЗУЛЬТАТОВ
Показатель Cp Показатель Анализ Cp
КВМ Расчёт dCp Анализ dCp
Интерпретация
V600 31,9 V600X - dCp КВМ 31,9-
29,9=2,0
dCp КВМ 2,0 <
9,5
МУТАЦИЯ
КВМ 29,9 КВМ Менее 34, ОК - -
V600E 31,9 V600E -
dCp КВМ 31,9-
30,0=1,9
dCp V600 31,9-31,9=0
dCp КВМ 1,9 <
11,5
dCp V600 0≤3,5
МУТАЦИЯ
V600K - V600K - - Норма
КВМ 30,0 КВМ Менее 34, ОК - -
dCp КВМ=0,1
менее 2,0; ОК
РЕЗУЛЬТАТ ДЛЯ ОБРАЗЦА №1
Контрольный параметр для биоматериала Результат
Контроль взятия биоматериала Валиден
Мутация BRAF Результат
V600
Мутация в 600 кодоне гена BRAF, любая из V600E, V600Eс,
V600K, V600D, V600Dc, V600R, V600G, V600M
ОБНАРУЖЕНО
V600E
NM_004333.6 (BRAF): c.1799T>A (p. Val600Glu)
или c.1799_1800delinsAA (p. Val600Glu)* ОБНАРУЖЕНО
V600К
NM_004333.6 (BRAF): c.1798_1799delinsAA
(p. Val600Lys)* Не обнаружено
Примечание к таблице:
*- наименование мутации по номенклатуре HGVS
Пример заключения:
ОБНАРУЖЕНА мутация V600E (NM_004333.6 (BRAF): c.1799T>A или
c.1799_1800delinsAA (p. Val600Glu)) в гене BRAF.
--- стр. 43 ---
Инструкция по применению
BRAF 3
Лист 43
Листов 44
ОБРАЗЕЦ №2 –Определена мутация V600, отличная от V600E и V600K
Данные ПЦР для
ОБРАЗЦА №1 АНАЛИЗ РЕЗУЛЬТАТОВ
Показатель Cp Показатель Анализ Cp
КВМ Расчёт dCp Анализ dCp
Интерпретация
V600 28,8 V600X - 28,8-26,1=2,7 2,7 < 9,5
МУТАЦИЯ
КВМ 26,1 КВМ Менее 34, ОК - -
V600E 34,9 V600E - dCp КВМ 34,9-26,0=8,9
dCp V600 34,9-28,8=6,1
dCp КВМ 8,9 < 11,5
dCp V600 6,1>3,5
норма
V600K 33,0 V600K - dCp КВМ 33-26,0=7
dCp V600 33-28,8=4,2
dCp КВМ 7 < 11,5
dCp V600 4,2>3,5
норма
КВМ 26,0 КВМ Менее 34, ОК - -
dCp КВМ=0,1
менее 2,0; ОК
РЕЗУЛЬТАТ ДЛЯ ОБРАЗЦА №2
Контрольный параметр для биоматериала Результат
Контроль взятия биоматериала Валиден
Мутация BRAF Результат
V600
Мутация в 600 кодоне гена BRAF, любая из V600E, V600Eс,
V600K, V600D, V600Dc, V600R, V600G, V600M
ОБНАРУЖЕНО
V600E
NM_004333.6 (BRAF): c.1799T>A или c.1799_1800delinsAA (p. Val600Glu)* Не обнаружено
V600К
NM_004333.6 (BRAF): c.1798_1799delinsAA
(p. Val600Lys)* Не обнаружено
Примечание к таблице:
*- наименование мутации по номенклатуре HGVS
Пример заключения: ОБНАРУЖЕНА мутация V600 в гене BRAF, отличная от V600E
и V600К.
--- стр. 44 ---
Инструкция по применению
BRAF 3
Лист 44
Листов 44
ПОЛОЖИТЕЛЬНЫЙ КОНТРОЛЬНЫЙ ОБРАЗЕЦ (К+)
Данные ПЦР для
ОБРАЗЦА №1 АНАЛИЗ РЕЗУЛЬТАТОВ
Показатель Cp Показатель Анализ Cp
КВМ Расчёт dCp Анализ dCp
Интерпретация
V600 29,5 V600X - dCp КВМ 29,5-30=-0,5 -0,3 < 9,5
МУТАЦИЯ
КВМ 30 КВМ Менее 34, ОК - -
V600E 29,6 V600E - dCp КВМ 29,6-29,9=-0,3 -0,3 < 11,5
МУТАЦИЯ
V600K 29,4 V600K - dCp КВМ 29,4-29,9=-0,5 -0,5 < 11,5
МУТАЦИЯ
КВМ 29,9 КВМ Менее 34, ОК - -
dCp КВМ=0,1
менее 2,0; ОК
Расчёты (для положительного контрольного образца):
Среднее значение Cp КВМ = 30
Значение lg для КВМ = 48,5−30
3,34 = 5,5
Доля мутантного аллеля 𝐕𝟔𝟎𝟎= ଵ,ଽଽయబ
ଵ,ଽହమవ,ఱ∗ 100% = 257 (диапазон 10-100%)
Доля мутантного аллеля 𝐕𝟔𝟎𝟎𝑬= ଵ,ଽଽమవ,వ
ଵ,ଽହమవ,ల ∗ 100% = 224 (диапазон 10-100%)
Доля мутантного аллеля 𝐕𝟔𝟎𝟎𝐊= ଵ,ଽଽమవ,వ
ଵ,ଽହమవ,ర ∗ 100% = 256 (диапазон 10-100%)
РЕЗУЛЬТАТ ДЛЯ К+
Контрольный параметр для биоматериала Результат
Контроль взятия биоматериала Валиден
Мутация BRAF Результат
V600
Мутация в 600 кодоне гена BRAF, любая из V600E, V600Eс,
V600K, V600D, V600Dc, V600R, V600G, V600M
ОБНАРУЖЕНО
(10-100%)
V600E
NM_004333.6 (BRAF): c.1799T>A или c.1799_1800delinsAA (p. Val600Glu)*
ОБНАРУЖЕНО
(10-100%)
V600К
NM_004333.6 (BRAF): c.1798_1799delinsAA (p. Val600Lys)*
ОБНАРУЖЕНО
(10-100%)
Прим ечание к т аблице:
*- наименование мутации по номенклатуре HGVS
Пример заключения: Положительный контрольный образец валиден