Набор реагентов для определения IgM/IgG антител к возбудителям иксодовых клещевых боррелиозов (ИКБ) в сыворотке крови человека методом мультиплексного фосфоресцентного анализа "ИКБ-ФОСФАН" по ТУ 21.20.23-062-49941990-2020 — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
=== файл: Инструкция_руководство__53455_I.pdf === --- стр. 1 --- УТВЕРЖДАЮ Генеральный директор ООО «ИММУНОСКРИН» НАБОР РЕАГЕНТОВ ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ IgM/IgG АНТИТЕЛ К ВОЗБУДИТЕЛЯМ ИКСОДОВЫХ КЛЕЩЕВЫХ БОРРЕЛИОЗОВ (ИКБ) В СЫВОРОТКЕ КРОВИ ЧЕЛОВЕКА МЕТОДОМ МУЛЬТИПЛЕКСНОГО ФОСФОРЕСЦЕНТНОГО АНАЛИЗА ИКБ-ФОСФАН Инструкция по применению 2021 --- стр. 2 --- ^ 1 0 Содержание Стр. 1 Описание назначения ...........................................................................................3 2 Состав набора............................................................................................................5 3 Принцип работы набора .........................................................................................8 4 Аналитические характеристики набора ...........................................................9 5 Меры предосторожности........................................................................................10 6 Оборудование и материалы, необходимые при работе с набором ...............11 7 Анализируемые образцы .....................................................................................12 8 Подготовка реагентов для анализа.......................................................................13 9 Проведение анализа..................................................................................................15 10 Регистрация результатов......................................................................................17 11 Интерпретация результатов..................................................................................18 12 Ограничения метода...............................................................................................20 13 Условия хранения и эксплуатации набора........................................................20 --- стр. 3 --- Настоящая инструкция устанавливает порядок использования Набора реагентов для определения IgM/IgG антител к возбудителям иксодовых клещевых боррелиозов (ИКБ) в сыворотке крови человека методом мультиплексного фосфоресцентного анализа «ИКБ- ФОСФАН» (далее - Набор). 1.1. Описание назначения: а) Набор предназначен для качественного и полуколичественного определения IgM/IgG антител к возбудителям иксодовых клещевых боррелиозов (ИКБ) в сыворотке крови человека методом мультиплексного фосфоресцентного иммуноанализа (ФОСФАН). б) Иксодовые клещевые боррелиозы, или заболевания группы Лайм-боррелиоза,- это группа этиологически самостоятельных спирохетозных природно-очаговых трансмиссивных инфекций. Возбудители ИКБ - спирохеты группы Borrelia burgdorferi sensu lato передаются иксодовыми клещами и обладают способностью поражать различные системы органов (центральную нервную, сердечно-сосудистую, кожу, опорно-двигательный аппарат). Патогенность для человека доказана для В. burgdorferi sensu stricto - возбудителя классической американской болезни Лайма; спирохеты В. garinii и В. qfzelii - основные возбудители ИКБ в России (и Европе). Имеются сведения о возможной роли боррелии В. miyamotoi в возникновении безэритемных форм ИКБ. Люди заражаются при передаче возбудителя со слюной клеща. Основными переносчиками боррелий в природных очагах на территории России являются клещи Ixodes persulcatus (таежный) и I. ricinus (лесной). Заболевания ИКБ регистрируются в 77 из 85 административных регионов России; занимают первое место среди группы инфекций, передающихся клещами, и до 40% от общего числа природно-очаговых и зоонозных болезней, возникающих в период сезонной активности клещей. В 2018 г. число подтвержденных случаев ИКБ в России составило примерно 6500, что соответствовало частоте 4,41 / 100000 населения. У большинства (50-80 %) больных на месте укуса клеща (входные ворота инфекции) развивается мигрирующая эритема - единственный патогномоничный признак ИКБ в России. При безэритемных формах ИКБ, а также в случае атипичных поражений кожи требуется обязательное лабораторное подтверждение. Диагноз ИКБ устанавливают на основе совокупности эпидемиологических данных, клинической картины заболевания и результатов серологического обследования, цель которого - выявить антитела к антигенам боррелий в сыворотке крови пациента. Для повышения эффективности серологической диагностики в составе Набора «ИКБ- ФОСФАН» используется композиция рекомбинантных и пептидных антигенов боррелий комплекса В. burgdorferi sensu lato и рекомбинантный белок GlpQ из В. miyamotoi. --- стр. 8 --- Промывочный раствор, 25-кратный концентрат (ПР) 1 фл. (50 мл) 1 фл. (50 мл) - Содержит натрия хлорид и твин-20 Хранить при температуре от плюс 2 до плюс 8°С в течение всего срока годности Набора. Перед использованием развести в 25 раз дистиллированной водой. Приготовленный промывочный раствор допускается хранить при температуре от плюс 2 до плюс 25°С в течение не более 14 сут. Бумага для заклеивания планшетов 2 шт. 2 шт. Готова к использованию. Хранить в течение всего срока годности Набора Инструкция по применению 1 шт. 1 шт. - Паспорт 1 шт. 1 шт. - Примечания 1 Контрольные положительные сыворотки (IgM*K^) и (IgG*K'^) тестированы на содержание IgM и IgG антител к возбудителям ИКБ тест-системой, сертифицированной и разрешенной к применению на территории РФ 2 Контрольные отрицательные сыворотки (IgM*Ko) и (IgG*Kn) тестированы на отсутствие IgM и IgG антител к возбудителям ИКБ тест-системой, сертифицированной и разрешенной к применению на территории РФ 3 ПРИНЦИП РАБОТЫ НАБОРА Методика основана на принципе иммунофосфоресценции и выполняется в 3-х стадийном варианте. Рекомбинантные и пептидные антигены боррелий, сорбированные в микрозонах иммуносорбента, образуют иммунные сандвич-комплексы с тестируемыми пробами сывороток, содержащих IgM (или IgG) антитела к возбудителям ИКБ (этап 1). На 2 этапе добавляют моноклональные анти-IgM (или анти-IgG) антитела (мышиные), меченые биотином (IgM*KB или IgG*KB). После удаления промьгеанием несвязавшихся компонентов иммунореакции на третьем этапе добавляют конъюгат универсальный (КУ) - стрептавидин, меченный платина-копропорфирином, который связывается с биотином, входящим в состав адсорбированных на планшете иммунньр( комплексов. После завершения реакции избыток КУ удаляют промыванием. Результаты анализа регистрируют с помощью индикатора фотолюминесценции импульсного, позволяющего измерять фосфоресценцию лунок планшета при длине волны 653нм. Интенсивность фосфоресценции (ИФ) платина-копропорфирина прямо пропорциональна содержанию антител в пробе. Для определения IgM и IgG антител используют антигены боррелий комплекса В.burgdorferi sensu lato, в том числе пептидный фрагмент из поверхностного липопротеина VlsE 8 --- стр. 9 --- (АП) и рекомбинантные белки OspC (АГ2) и VlsE (АГЗ), а также рекомбинантный белок GlpQ из В. miyamotoi (АГ4). Эти антигены сорбированы на дне лунки планшета в виде 4-х секторов, по 4 микрозоны (диаметром 0,5 мм) в каждом секторе (рисунок 1). Рисунок 1 - Дизайн иммуносорбента для определения IgM и IgG антител к возбудителям ИКБ: микрозоны 1-4 соответствуют сорбированным на дне лунки антигенам боррелий АП - АГ4 4 АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА 4.1 Набор обеспечивает определение IgM и IgG антител к возбудителям ИКБ в образцах сыворотки крови человека объемом не менее 10 мкл. 4.2 Аналитическая чувствительность (минимальный титр IgM или IgG антител к возбудителям ИКБ, выявляемый с помощью набора) составляет 1:100. 4.3 Диапазон определяемых титров специфических антител варьирует в интервале от 1:100 до 1:25600 (или более). 4.4 Чувствительность Чувствительность набора по образцам сывороток стандартной панели предприятия, содержащим IgM и IgG антитела к возбудителям ИКБ, составляет 100%. 4.5 Специфичность Специфичность набора по образцам сывороток стандартной панели предприятия, не содержащим IgM и IgG антитела к возбудителям ИКБ, составляет 100%. 4.6 Аналитическая специфичность Наличие в образцах ревматоидного фактора, антител к возбудителям «родственных» инфекций (сифилис, лептоспироз) или к вирусу Эпштейна-Барр может оказывать влияние на правильность определения IgM антител (уровень кросс-реактивности до 20%), но практически не влияет на правильность определения IgG антител (уровень кросс-реактивности не более 5%) к возбудителям ИКБ. 9 --- стр. 10 --- 4.7 Интерференция Наличие в образцах потенциально интерферирующих веществ (гемоглобин в концентрации до 2 г/л, билирубин - до 40 мг/дл, холестерин - до 400 мг/дл, триглицериды - до 20 мг/мл. альбумин - до 6 г/дл) не оказывает влияния на правильность определения IgM или IgG антител к возбудителям ИКБ. 4.8 Воспроизводимость Коэффициент вариации интенсивности фосфоресценции контрольных положительных сывороток не более 10%. 4.9 Метрологическая прослеживаемость осуществлялась, согласно ГОСТ ISO 17511 2011 с использованием референтных методик. 4.10 Клиническая проверка Для подтверждения диагностических характеристик было исследовано 200 образцов сыворотки крови. По данным исследования: Антитела IgM Чувствительность: 100% (99,0-100%) с доверительной вероятностью 95 %. Специфичность: 100% (99,1-100%) с доверительной вероятностью 95 %. Антитела IgG Чувствительность: 100% (99,0-100%) с доверительной вероятностью 95 %. Специфичность: 100% (99,1-100%) с доверительной вероятностью 95 %. 5 МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ 5.1 Потенциальный риск применения Набора - класс 26 (приказ М3 РФ от 06.06.2012 № 4н). 5.2 Набор предназначен для профессионального применения в клинической лабораторной диагностике обученным персоналом. Меры предосторожности приведены в ГОСТ Р 52905-2007 «Лаборатории медицинские. Требования безопасности». 5.3 Набор биологически безопасен. Все компоненты набора, содержащие в своем составе материалы человеческого происхождения, инактивированы. 5.4 Сыворотки крови человека, входящие в состав Набора, инактивированы и не содержат антител к вирусу гепатита С, антител к ВИЧ 1, 2, а также антигена р24 ВИЧ-1 и антигена вируса гепатита В (HBsAg). Контроль проводит производитель Набора с использованием зарегистрированных иммуноферментных тест-систем. 5.5 Все компоненты Набора в используемых концентрациях являются нетоксичными. 5.6 При использовании согласно инструкции по применению изделие является безопасным (не несет физических, экологических и иных рисков). 10 --- стр. 11 --- 5.7 Набор не содержит лекарственных средств для медицинского применения. 5.8 При работе с исследуемыми образцами следует соблюдать меры предосторожности в соответствии с требованиями СанПиН 2.1.3684-21 "Санитарно-эпидемиологические требования к содержанию территорий городских и сельских поселений, к водным объектам, питьевой воде и питьевому водоснабжению, атмосферному воздуху, почвам, жилым помещениям, эксплуатации производственных, общественных помещений, организации и проведению санитарно- противоэпидемических (профилактических) мероприятий" и обращаться с ними как с потенциально инфекционным материалом: работать в резиновых перчатках, медицинских масках, пользоваться только автоматическими дозаторами. 5.9 Дезинфекцию проводить в соответствии с МУ 287-113 «Методические указания по дезинфекции, предстерилизационной очистке и стерилизации изделий медицинского назначения». Рекомендуем все использованные материалы и лабораторную посуду подвергать обработке 3% раствором хлорамина Б или 6% раствором перекиси водорода в течение 12-15 ч. Рабочие поверхности столов и оборудования после завершения анализа следует обработать 70% этиловым спиртом или другим дезинфицирующим средством. 5.10 При использовании набора образуются медицинские отходы классов А и Б, которые классифицируются и уничтожаются в соответствии с СанПиН 2.1.3684-21 "Санитарно- эпидемиологические требования к содержанию территорий городских и сельских поселений, к водным объектам, питьевой воде и питьевому водоснабжению, атмосферному воздуху, почвам, жилым помещениям, эксплуатации производственных, общественных помещений, организации и проведению санитарно- противоэпидемических (профилактических) мероприятий", СанПиН 2.1.7.2527-09 (2.1.7.728-99) «Правила сбора, хранения и удаления отходов лечебно профилактических учреждений». 5.11 Показания к применению: применять в соответствии с назначением. 5.12 Противопоказания к применению: противопоказаний в рамках установленного назначения не имеет. Не применять не по назначению. 6 ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ, НЕОБХОДИМЫЕ ПРИ РАБОТЕ С НАБОРОМ - Индикатор фосфоресценции импульсный ИФИ-03 «Диагем», позволяющий измерять фосфоресценцию лунок планшета при длине волны 653 нм (ООО «ИММУНОСКРИН», Россия); - устройство для встряхивания планшетов (шейкер); - промывающее устройство для планшетов (вошер); - холодильник бытовой; - вентилятор; 1 1 --- стр. 25 --- КодОКПД 21.20.23.110 УТВЕРЖДАЮ Генеральный директор [ММУНОСК] Н.С. Осин Набор образцов сывороток, содержащих и не содержащих антитела к возбудителям иксодовых клещевых боррелиозов (ИКБ) (стандартная панель предприятия) СПП 01-30-061 Инструкция по применению 2019 --- стр. 26 --- Настоящая инструкция устанавливает порядок использования Набора образцов сывороток стандартной панели предприятия «СПП 01-30-061» (далее Набор) на предприятии ООО «ИММУНОСКРИН». 1 НАЗНАЧЕНИЕ 1.1 Набор «СПП 01-30-061» предназначен для внутрилабораторного контроля качества (оценка чувствительности и специфичности) фосфоресцентного иммуноанализа на иммуноглобулины IgM и IgG к возбудителям иксодовых клещевых боррелиозов (ИКБ). 1.2 Потенциальный потребитель - специалисты-биотехнологи с высшим и средним профессиональным образованием - сотрудники ООО «ИММУНОСКРИН», участвующие в разработке, производстве и испытаниях набора реагентов для определения IgM/IgG антител к возбудителям иксодовых клещевых боррелиозов методом мультиплексного фосфоресцентного анализа («ИКБ-ФОСФАН»). 2 ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА 2.1 Принцип действия Исследование образцов сывороток стандартной панели предприятия и сравнение полученных значений с аттестованными значениями позволяет осуществлять внутрилабораторный контроль качества фосфоресцентного иммуноанализа на иммуноглобулины IgM и IgG к возбудителям ИКБ по показателям «чувствительность» и «специфичность». 2.2 Состав набора В состав набора входят: - 12 образцов сывороток крови человека, инактивированные, лиофилизированные (образцы с № 1 по № 6 содержат IgM и IgG антитела к возбудителям ИКБ, образцы с № 7 по № 12 не содержат антитела к возбудителям ИКБ), - аморфная масса светло-желтого или светло-коричневого цвета, гигроскопична - по 1 флакону каждого образца, всего 12 флаконов. 2.3 Общие положения - образцы, не содержащие антитела к возбудителям ИКБ, получены от клинически здоровых доноров крови; - образцы, содержащие антитела к возбудителям ИКБ, получены от больных эритемной формой ИКБ (образцы с X® 1 по Х» 5) или от больных с безэритемной формой ИКБ (образец Х° 6); --- стр. 27 --- - образцы инактивированы прогреванием, не содержат HBs-антиген, антитела к ВГС, ВИЧ-1,2 и антиген р24 ВИЧ-1; - образцы аттестованы в ИФА тест-системах «ЛаймБест-IgM» и «ЛаймБест-IgG» производства АО «Вектор-Бест», разрешенных М3 РФ к применению для серодиагностики ИКБ (болезни Лайма); характеристика каждого образца представлена в паспорте; - объем каждого образца после восстановления лиофилизата - 0,5 мл. 3 МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ 3.1 Потенциальный риск применения Набора - класс 26 (ГОСТ Р 51088-2013). 3.2 Меры предосторожности - соблюдение ГОСТ Р 52905-2007 «Лаборатории медицинские. Требования безопасности». 3.3 Для лабораторий, отвечающих требованиям ГОСТ Р ИСО 15189-2006. 3.4 При подготовке и проведении анализа следует соблюдать меры предосторожности, принятые при работе с потенциально инфекционным материалом: - работать в резиновых перчатках и респираторе; - для предотвращения выброса материала при разгерметизации флаконов пробку следует сначала слегка приоткрыть, а лишь затем извлечь полностью; - не пипетировать растворы ртом; - все использованные материалы подвергать дезинфекции в соответствии с требованиями СП 1.3.2322-08 и МУ-287-113. 4 ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ, НЕОБХОДИМЫЕ ПРИ РАБОТЕ С НАБОРОМ Оборудование, необходимое при постановке фосфоресцентного иммуноанализа, в соответствии с инструкцией по применению используемого набора реагентов для фосфоресцентного иммуноанализа, а также: - пипетка полуавтоматическая одноканальная переменного объема со сменными одноразовыми наконечниками, позволяющая отбирать объем жидкости 500 мл, аттестованная по значению средней дозы и сходимости результатов пипетирования (погрешность не более 5%); ■ холодильник бытовой; - перчатки резиновые хирургические; - вода дистиллированная. --- стр. 28 --- 5 УСЛОВИЯ И ПОРЯДОК ПРИМЕНЕНИЯ 5.1 К содержимому флаконов с лиофильно высушенными образцами добавить по 0,5 мл дистиллированной воды пипеточным дозатором с одноразовым наконечником. Содержимое флаконов тщательно перемешать до полного растворения образца. Время растворения - не более 5 мин при температуре от плюс 18 до плюс 25°С. Восстановленный таким образом образец соответствует цельной сыворотке крови человека. Восстановленные образцы хранить при +2-8 ®С в течение не более 2 недель. Допускается однократное замораживание и хранение при температуре минус (18-22) °С в течение не более 1 мес. 5.2 Проведение анализа и учет результатов Анализ образцов стандартной панели и учет результатов проводить в строгом соответствии с инструкцией по применению используемого набора реагентов для иммунофосфоресцентного выявления антител к возбудителям ИКБ. Проведенный анализ считать удовлетворительным по показателю «правильность», если образцы панели, содержащие антитела к возбудителям ИКБ, определены как положительные (чувствительность 100%), а образцы, не содержащие антитела, - как отрицательные (специфичность 100%). Нарушение правильности анализа может быть вызвано несоблюдением условий проведения фосфоресцентного иммуноанализа в лаборатории или низким качеством используемого набора реагентов для иммунофосфоресцентного выявления антител к возбудителям ИКБ. 6 УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ И ЭКСПЛУАТАЦИИ НАБОРА 6.1 Набор должен применяться согласно Инструкции по применению. 6.2 Транспортирование Наборов должно производиться всеми видами крытого транспорта с соблюдением условий и требований, установленных для данного вида транспорта, при температуре от плюс 2 до плюс 8°С Транспортирование изделий при температурах, требующих соблюдения "Холодовой цепи", обеспечивающей сохранность температурного режима, должно осуществляться в термоконтейнерах одноразового пользования, содержащих хладоэлементы, или в термоконтейнерах многократного применения с автоматически поддерживаемой температурой или в авторефрижераторах с использованием термоиндикаторов. 6.3 Изделия, транспортированные с нарушением температурного режима, применению не подлежат. --- стр. 31 --- СОГЛАСОВАНО Генеральный ООО <<ВЬ1МП] арыавичус П.К. 2021г. УТВЕРЖДАЮ Генеральный директор ООО «ИММУНОСКРИН» НАБОР РЕАГЕНТОВ ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ IgM/IgG АНТИТЕЛ К ВОЗБУДИТЕЛЯМ ИКСОДОВЫХ КЛЕЩЕВЫХ БОРРЕЛИОЗОВ (ИКБ) В СЫВОРОТКЕ КРОВИ ЧЕЛОВЕКА МЕТОДОМ МУЛЬТИПЛЕКСНОГО ФОСФОРЕСЦЕНТНОГО АНАЛИЗА ИКБ-ФОСФАН Инструкция по применению 2021 --- стр. 32 --- Содержание Стр. 1 Назначение...................................................................................................................3 2 Состав набора...............................................................................................................5 3 Принцип работы набора .........................................................................................8 4 Аналитические характеристики набора ............................................................9 5 Меры предосторожности ........................................................................................10 6 Оборудование и материалы, необходимые при работе с набором .................11 7 Анализируемые образцы ......................................................................................12 8 Подготовка реагентов для анализа.........................................................................13 9 Проведение анализа..................................................................................................14 I о Регистрация результатов........................................................................................17 II Интерпретация результатов....................................................................................17 12 Ограничения метода.................................................................................................19 13 Условия хранения и эксплуатации набора.........................................................20 --- стр. 33 --- Настоящая инструкция устанавливает порядок использования Набора реагентов для определения IgM/IgG антител к возбудителям иксодовых клещевых боррелиозов (ИКБ) в сыворотке крови человека методом мультиплексного фосфоресцентного анализа «ИКБ- ФОСФАН» (далее - Набор). 1.1 НАЗНАЧЕНИЕ Набор предназначен для качественного и полуколичественного определения IgM/IgG антител к возбудителям иксодовых клещевых боррелиозов (ИКБ) в сыворотке крови человека методом мультиплексного фосфоресцентного иммуноанализа (ФОСФАН). 1.2. Диагностическая значимость определения Иксодовые клещевые боррелиозы, или заболевания группы Лайм-боррелиоза,- это группа этиологически самостоятельных спирохетозных природно-очаговых трансмиссивных инфекций. Возбудители ИКБ - спирохеты группы Borrelia burgdorferi sensu lato передаются иксодовыми клещами и обладают способностью поражать различные системы органов (центральную нервную, сердечно-сосудистую, кожу, опорно-двигательный аппарат). Патогенность для человека доказана для В. burgdorferi sensu stricto - возбудителя классической американской болезни Лайма; спирохеты В. garinii и В. afzelii - основные возбудители ИКБ в России (и Европе). Имеются сведения о возможной роли боррелии В. miyamotoi в возникновении безэритемных форм ИКБ. Люди заражаются при передаче возбудителя со слюной клеща. Основными переносчиками боррелий в природных очагах на территории России являются клещи Ixodes persulcatus (таежный) и I. ricinus (лесной). Заболевания ИКБ регистрируются в 77 из 85 административных регионов России; занимают первое место среди группы инфекций, передающихся клещами, и до 40% от общего числа природно-очаговых и зоонозных болезней, возникающих в период сезонной активности клещей. В 2018 г. число подтвержденных случаев ИКБ в России составило примерно 6500, что соответствовало частоте 4,41 / 100000 населения. У большинства (50-80 %) больных на месте укуса клеща (входные ворота инфекции) развивается мигрирующая эритема единственный патогномоничный признак ИКБ в России. При безэритемных формах ИКБ, а также в случае атипичных поражений кожи требуется обязательное лабораторное подтверждение. Диагноз ИКБ устанавливают на основе совокупности эпидемиологических данных, клинической картины заболевания и результатов серологического обследования, цель которого - выявить антитела к антигенам боррелий в сыворотке крови пациента. --- стр. 37 --- Конъюгат универсальный (КУ) -стрептавидин, меченный платина- копропорфирином 1 фл. (0,5 мл) 1 фл. (0,5 мл) Лиофильно высушенный. Перед использованием растворить в 0,5 мл дистиллированной воды. Приготовленный раствор можно хранить при температуре от плюс 2 до плюс 8°С в течение не более 14 сут. Рабочий раствор готовят путем разбавления исходного раствора конъюгата реакционным буфером в 50 раз. Рабочий раствор должен быть использован в течение 1ч после приготовления, длительному хранению не подлежит._______ Реакционный буфер (РБ) Содержит трис- (гидроксиметил)- аминометан, альбумин бычий сывороточный, натрия хлорид, проклин, феноловый красный_____ 1 фл. (50 мл) 1 фл. (50 мл) Готов к использованию. Хранить при температуре от плюс 2 до плюс 8°С в течение всего срока годности Набора Промывочный раствор, 25-кратный концентрат (ПР) Содержит натрия хлорид и твин-20 1 фл. (50 мл) 1 фл. (50 мл) Хранить при температуре от плюс 2 до плюс 8°С в течение всего срока годности Набора. Перед использованием развести в 25 раз дистиллированной водой. Приготовленный промывочный раствор допускается хранить при температуре от плюс 2 до плюс 25*^С в течение не более 14 сут. Бумага для заклеивания планшетов 2 шт. 2 шт. Готова к использованию. Хранить в течение всего срока годности Набора_____________ Примечания 1 Контрольные положительные сыворотки (IgM^K"^) и (IgG*K^) тестированы на содержание IgM и IgG антител к возбудителям ИКБ тест-системой, сертифицированной и разрешенной к применению на территории РФ 2 Контрольные отрицательные сыворотки (IgM*Ko) и (IgG*Ko) тестированы на отсутствие IgM и IgG антител к возбудителям ИКБ тест-системой, сертифицированной и разрешенной к применению на территории РФ --- стр. 38 --- Методика основана на принципе иммунофосфоресценции и выполняется в 3-х стадийном варианте. Рекомбинантные и пептидные антигены боррелий, сорбированные в микрозонах иммуносорбента, образуют иммунные сандвич-комплексы с тестируемыми пробами сывороток, содержащих IgM (или IgG) антитела к возбудителям ИКБ (этап 1). На 2 этапе добавляют моноклональные анти-IgM (или анти-IgG) антитела (мышиные), меченые биотином (IgM*Kb или IgG*KB). После удаления промыванием несвязавшихся компонентов иммунореакции на третьем этапе добавляют конъюгат универсальный (КУ) - стрептавидин, меченный платина-копропорфирином, который связывается с биотином, входящим в состав адсорбированных на планшете иммунных комплексов. После завершения реакции избыток КУ удаляют промыванием. Результаты анализа регистрируют с помощью индикатора фотолюминесценции импульсного, позволяющего измерять фосфоресценцию лунок планшета при длине волны 653нм. Интенсивность фосфоресценции (ИФ) платина-копропорфирина прямо пропорциональна содержанию антител в пробе. Для определения IgM и IgG антител используют антигены боррелий комплекса В. burgdorferi sensu lato, в том числе пептидный фрагмент из поверхностного липопротеина VlsE (АГ1) и рекомбинантные белки OspC (АГ2) и VIsE (АГЗ), а также рекомбинантный белок GlpQ из В. miyamotoi (АГ4). Эти антигены сорбированы на дне лунки планшета в виде 4-х секторов, по 4 микрозоны (диаметром 0,5 мм) в каждом секторе (рисунок 1). 3 ПРИНЦИП РАБОТЫ НАБОРА Рисунок 1 - Дизайн иммуносорбента для определения IgM и IgG антител к возбудителям ИКБ: микрозоны 1-4 соответствуют сорбированным на дне лунки антигенам боррелий АГ1 - АГ4 --- стр. 39 --- 4 АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА 4.1 Набор обеспечивает определение IgM и IgG антител к возбудителям ИКБ в образцах сыворотки крови человека объемом не менее 10 мкл. 4.2 Аналитическая чувствительность (минимальный титр IgM или IgG антител к возбудителям ИКБ, выявляемый с помощью набора) составляет 1:100. 4.3 Диапазон определяемых титров специфических антител варьирует в интервале от 1:100 до 1:25600 (или более). 4.4 Чувствительность Чувствительность набора по образцам сывороток стандартной панели предприятия, содержащим IgM и IgG антитела к возбудителям ИКБ, составляет 100%. 4.5 Специфичность Специфичность набора по образцам сывороток стандартной панели предприятия, не содержащим IgM и IgG антитела к возбудителям ИКБ, составляет 100%. 4.6 Аналитическая специфичность Наличие в образцах ревматоидного фактора, антител к возбудителям «родственных» инфекций (сифилис, лептоспироз) или к вирусу Эпщтейна-Барр может оказывать влияние на правильность определения IgM антител (уровень кросс-реактивности до 20%), но практически не влияет на правильность определения IgG антител (уровень кросс-реактивности не более 5%) к возбудителям ИКБ. 4.7 Интерференция Наличие в образцах потенциально интерферирующих веществ (гемоглобин в концентрации до 2 г/л, билирубин - до 40 мг/дл, холестерин - до 400 мг/дл, триглицериды - до 20 мг/мл, альбумин - до 6 г/дл) не оказывает влияния на правильность определения IgM или IgG антител к возбудителям ИКБ. 4.8 Воспроизводимость Коэффициент вариации интенсивности фосфоресценции контрольных положительных сывороток не более 10%. 4.9 Метрологическая прослеживаемость осуществлялась, согласно ГОСТ ISO 17511 2011 с использованием референтных методик. 4.10 Клиническая проверка Для подтверждения диагностических характеристик было исследовано 200 образцов сыворотки крови. По данным исследования: Антитела 1еМ Чувствительность: 100% (99,0-100%) с доверительной вероятностью 95 %. --- стр. 40 --- Специфичность: 100% (99,1“Ю0%) с доверительной вероятностью 95 %. Антитела leG Чувствительность: 100% (99,0-100%) с доверительной вероятностью 95 %. Специфичность: 100% (99,1-100%) с доверительной вероятностью 95 %. 5 МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ 5.1 Потенциальный риск применения Набора - класс 26 (приказ М3 РФ от 06.06.2012 № 4н). 5.2 Набор предназначен для профессионального применения в клинической лабораторной диагностике обученным персоналом. Меры предосторожности приведены в ГОСТ Р 52905-2007 «Лаборатории медицинские. Требования безопасности». 5.3 Набор биологически безопасен. Все компоненты набора, содержащие в своем составе материалы человеческого происхождения, инактивированы. 5.4 Сыворотки крови человека, входящие в состав Набора, инактивированы и не содержат антител к вирусу гепатита С, антител к ВИЧ 1, 2, а также антигена р24 ВИЧ-1 и антигена вируса гепатита В (HBsAg). Контроль проводит производитель Набора с использованием зарегистрированных иммуноферментных тест-систем. 5.5 Все компоненты Набора в используемых концентрациях являются нетоксичными. 5.6 При использовании согласно инструкции по применению изделие является безопасным (не несет физических, экологических и иных рисков). 5.7 Набор не содержит лекарственных средств для медицинского применения. 5.8 При работе с исследуемыми образцами следует соблюдать меры предосторожности в соответствии с требованиями СанПиН 2.1.3684-21 "Санитарно-эпидемиологические требования к содержанию территорий городских и сельских поселений, к водным объектам, питьевой воде и питьевому водоснабжению, атмосферному воздуху, почвам, жилым помещениям, эксплуатации производственных, общественных помещений, организации и проведению санитарно- противоэпидемических (профилактических) мероприятий" и обращаться с ними как с потенциально инфекционным материалом: работать в резиновых перчатках, медицинских масках, пользоваться только автоматическими дозаторами. 5.9 Дезинфекцию проводить в соответствии с МУ 287-113 «Методические указания по дезинфекции, предстерилизационной очистке и стерилизации изделий медицинского назначения». Рекомендуем все использованные материалы и лабораторную посуду подвергать обработке 3% раствором хлорамина Б или 6% раствором перекиси водорода в течение 12-15 ч. Рабочие поверхности столов и оборудования после завершения анализа следует обработать 70% 10