=== файл: Инструкция_руководство__o39667_I.pdf ===
--- стр. 1 ---
а-2-М А К Р О ГЛ О Б У Л И Н
Принцип метода Определение а-2-Макроглобулина человека основано на
взаимодействии между а-2-Макроглобулином , как антигеном и специфической
сывороткой, как антителом. Образующийся нерастворимый комплекс изменяет мутность
раствора, которая измеряется спектрофотометрически при 340 нм.
Реагенты
Только для in vitro диагностики.
Реагенты хранятся в холодильнике при температуре 2-8 С и стабильны до сро
ка указанного на этикетке.
Компоненты набора
- Реагент А Трис-буфер, ПЭГ, pH 7.5 2x50 мл
- Реагент В антисыворотка анти-а-2-макроглобулина 2х 1 мл
- Реагент С Трис-буфер, pH 7.5, буфер разведения антисыворотки 1х 10 мл
В Н И М А Н И Е ! В набор не входит Калибратор
Необходимо заказать дополнительно Кат. номер 11.200D
Используется для количественного определения белков плазмы
турбидиметрическим методом. Концентрация указана на
этикетке каждого флакона.
Стабильность: после вскрытия флакона 4 недели при 2-8 С.
Подготовка Рабочего раствора
- Раствор ВС: растворяют 1 объем Реагента В в 3-объемах Реагента С. Хорошо
перемешивают до образования однородного раствора.
Стабильность: 2 месяца при 2-8 С
Не замораживать Раствор ВС
Пробы
Сыворотка. Пробы могут храниться 4 дня при 2-8 С или 4 недели при -20 С.
Подготовка пробы
Развести пробы и контроли 1:21 до исследования физиологическим раствором.
Аналитическая процедура
Длина волны измерения - 340 нм
Кювета (световой путь) - 10 мм
Температура - 37 С
Длина светового пути - 10 мм
Тип реакции - турбидиметрия, против воздуха или дистиллированной воды
Перед исследованием все реагенты нагреть до рабочей температуры.
SENTINEL Diagnostics Кат. номер 11.018D
--- стр. 2 ---
Схема разведения стандарта
Раствор Номера калибраторов
1 2
Физ. Р-р
Калибратор
300 300
100 мкл
300 300
Разведение
последовательно переносим
из Номера 1 в Номер 2
из Номера 2 в Номер 3
из Номера 3 в Номер 4
из Номера 4 в Номер 5
по 300 мкл раствора
1\5 1\10 1\20 1\40 1\80
Концентрация
мг\100 мл
Схема измерения
4.2хС 2,1 X С 1,05 X С 0,525 X С 0,2625x0
С - концентрация в мг\100 мл
указана на этикетке упаковки
Бланк Проба Калибратор
реагента или контроль
Физ. Р-р 50 мкл-
Проба разв.(1:21) - 50 мкл
Калибраторы - 50 мкл
1Д З Л 5
Реагент А 900 мкл 900 мкл 900 мкл
Рабочий раствор ВС 100 мкл 100 мкл 100 мкл
Смешивают, выдерживают 10 минут при комнатной температуре и считывают абсорбцию
при 340 нм Проб, Калибраторов против Бланка реагента.
--- стр. 4 ---
\ ^ 1 ( 7 ^ ^ ^
Т '1/А
--- стр. 5 ---
Ц Е Р У Л О П Л А ЗМ И Н
П ринцип метода Определение ЦЕРУЛОПЛАЗМИНА человека основано на
взаимодействии между ЦЕРУЛОПЛАЗМИНОМ, как антигеном и специфической
сывороткой, как антителом. Образующийся нерастворимый комплекс изменяет мутность
раствора, которая измеряется спектрофотометрически при 340 нм.
Реагенты
Только для in vitro диагностики.
Реагенты хранятся в холодильнике при температуре 2-8 С и стабильны до сро
ка указанного на этикетке.
Компоненты набора
- Реагент А Трис-буфер, ПЭГ, pH 7.5 2x50 мл
-РеагентВ антисывороткаанти-трасферрин 2x1 мл
- Реагент С Трис-буфер, pH 7.5, буфер разведения антисыворотки 1х 10 мл
ВН И М А Н И Е ! В набор не входит Калибратор
Необходимо заказать дополнительно Кат. номер 11.200D
Используется для количественного определения белков плазмы
турбидиметрическим методом. Концентрация указана на
этикетке каждого флакона.
Стабильность: после вскрытия флакона 4 недели при 2-8 С.
Подготовка Рабочего раствора
- Раствор ВС: растворяют 1 объем Реагента В в 3-объемах Реагента С. Хорошо
перемешивают до образования однородного раствора.
Стабильность: 2 месяца при 2-8 С
Не замораживать Раствор ВС
Пробы
Сыворотка. Пробы могут храниться 4 дня при 2-8 С или 4 недели при -20 С.
Аналитическая процедура
Длина волны измерения - 340 нм
Кювета (световой путь) - 10 мм
Температура - комнатная
Длина светового пути - 10 мм
Соотношение проба\реаг.А\реаг.ВС: - 1\100\12,5
Тип реакции - турбидиметрия, против воздуха или дистиллированной воды
Перед исследованием все реагенты нагреть до рабочей температуры.
Схема разведения стандарта
SENTINEL Diagnostics Кат. номер 11.065D
--- стр. 6 ---
Раствор
Физ. Р-р
Калибратор
Номера калибраторов
1 2 3
2 0 0 2 0 0
400 мкл
2 0 0
4
Разведение
Концентрация
мг\100 мл
Схема измерения
последовательно переносим
из Номера 1 в Номер 2
из Номера 2 в Номер 3
из Номера 3 в Номер 4
по 200 мкл раствора
1хС
1\2
0,5 X С
1\4 1\8
0,25 X С 0,125 X С
С - концентрация ЦЕРУЛОПЛАЗМИНА в мг\100 мл
указана на этикетке упаковки
Бланк Проба Калибратор
реагента или контроль
Физ. Р-р 8 мкл -
Проба разв.(1:21) - 8 мкл -
Калибраторы - 8 мкл
1,2,3,4,5
Реагент А 800 мкл 800 мкл 800 мкл
Рабочий раствор ВС 100 мкл 100 мкл 100 мкл
Смешивают, выдерживают 30 минут при комнатной температуре и считывают абсорбцию
при 340 нм Проб, Калибраторов против Бланка реагента.
Вычисление результатов
1. Строим калибровочную кривую на миллиметровке, где по вертикали (Y) - абсорбция
каждого из калибраторов , а по горизонтали (X) - концентрация калибраторов ( мгМОО мл),
2. Используя значения абсорбции каждого калибратора - вычисляет концентрацию по
построенной калибровочной кривой.
Нормальные величины
Здоровые взрослые пациенты:
--- стр. 8 ---
^ C j2 n < 'J -
/О J
О С У ^ y ^ C i
J /(T /f)ifA
/ ^ ^ ■ Л - у A i J ' t ^ , Of
^ Ojf> ^ />
--- стр. 9 ---
КР Е А ТИ Н И Н
Принцип метода Креатинин формирует с пикриновой кислотой в щелочной среде
окрашенный комплекс. Оптическая плотность пропорциональна концентрации
Креатинина в образце.
Реагенты
Только для in vitro диагностики.
Реагенты хранятся при температуре 15-30 С и стабильны до срока, указанного на
этикетке.
Компоненты набора
- Реагент А 2х 120 мл
пикриновая кислота 28,8 ммол\л
-Реагент В жидкий 2x120 мл
NAOH 0.4 ммоль\л
ОСТАРОЖ НО Щ Е Л О Ч Ь !!!!
-Стандарт 1x10 мл
Кретинин 2 мгМОО мл (177 мкмоль\л )
Приготовление реакционных растворов
Раствор АВ: добавить к Реагенту А равный объем Реагента В. Стабилен 1 неделю при
комнатной температуре.
Пробы
Сывортка или моча. Моча перед использованием разводится 1:100 дистиллированной
водой.
Аналитическая процедура
Длина волны измерения - 510 нм (500 - 520 нм)
Кювета (световой путь) - 10 мм
Температура - 30
Считывание - против воды
Реакция - по конечной точке
Реагенты нагреваются до температуры постановки реакции.
4x120 мл SENTINEL Diagnostics Кат. номер 17.191
Фирма ЛАМЕС 125080 Москва ул Панфилова 18 корп. 3 тел 158-02-37, 158-63-96
--- стр. 10 ---
Схема измерения
Проба Стандарт
Проба 100 мкл
Стандарт - 100 мкл
Реагент АВ 1 О О О мкл 1000 мкл
Смешивают и считывают против дистиллированной воды абсорбцию при 510 нм Пробы
(А Is) и Стандарта (A lst) и через 1 минуту производят второе считывание Пробы (A2s) и
Стандарта (A2st).
Вычисление результатов
{(A2s - A ls ) / (A2st - A ls t)} X 2 = мг креатинина/ 100 мл пробы
или
{(A2s ~ A ls ) / (A2st - A ls t)} х 177 = мкг креатинина/л пробы
Нормальные величины
сыворотка: мужчины 0,6-1,2 мг\100 мл ( 53 - 106 мкмоль\л )
женщины 0,5-1,0 мг\100 мл ( 44 - 88 мкмоль\л )
моча: 1-1,5 г\24 часа ( 8,84 - 13,3 ммоль\24 часа)
Линейность
до 2000 мкграммМ 00 мл
П РИ М ЕЧАН И Е
1. Если концентрация Аммиака выше 2000 мкграмм\100 мл - разведите пробу 1:5 и
результат измерений умножить на 5
2. Пропорциональное изменение объемов реакционной смеси не влияет на результат,
3. Используйте пробирки промытые бидистиллированной водой.
4. Реагенты могут абсорбировать Аммиак из воздуха при длительном контакте с воздухом
( не держите открытыми )
5. Для увеличения чувствительности метода на нормальных пробах можно брать не 200
мкл плазмы, а 300 мкл. В этом случае фактор умножения должен быть 3030 ( а не 4400
) ■
Фирма ЛАМЕС 125080 Москва ул Панфилова 18 корп, 3 тел 158-02-37, 158-63-96
--- стр. 11 ---
fjce
/ ; о ^ Cl ^
J ? ^ -{ ■ C^t^ 'l C ^
--- стр. 12 ---
М О Ч Е В И Н А
П ринцип метода Мочевина гидролизируется уарезой до аммиака и углекислого газа и
в присутствии нитропруссида натрия аммиак реагирует с гипохлоридом натрия и
салицилатом образуя окрашенное соединение. Оптическая плотность которого
пропорциональна концентрации мочевины в образце.
Реагенты
Только для in vitro диагностики.
Реагенты хранятся при температуре 15-30 С и стабильны до срока, указанного на
этикетке.
Компоненты набора
-Реагент А лиофилизированный 12x100 мл
Осторожно !!! при попадании в глаза промыть водой !!!
- Реагент В жидкий 1x120 мл
10-ти кратной концентрации
ОСТАРОЖ НО Щ Е Л О Ч Ь !!!!
-Стандарт 1x10 мл
Мочевина 40 мг\100 мл ( 6,64 ммоль\л )
- Флакон для приготовления реактива
12x020 мл SENTINEL Diagnostics Кат. номер 17.151
Приготовление реакционных растворов
Раствор А: перенести Реагент А во флакон и добавить 100 мл дистиллированной воды и
осторожно перемешать несколько минут.
Стабилен 30 дней при 2-8 С в темном стекле.
Раствор В: Развести 1 объем Реагента В 9 объемами дистилированной воды.
Стабилен 3 месяца при 2-8 С в темном стекле.
Пробы
Сывортка или моча. Моча перед использованием разводится 1:100 дистиллированной
водой.
Аналитическая процедура
Длина волны измерения - 510 нм (500 - 520 нм)
Кювета (световой путь) - 10 мм
Температура - 30
Считывание - против воды
--- стр. 13 ---
Реакция > по конечной точке
Реагенты нагреваются до температуры постановки реакции.
Схема измерения
Проба Стандарт
Проба 100 мкл
Стандарт - 100 мкл
Реагент АВ 1 О О О мкл 1 О О О мкл
Смешивают и считывают против дистиллированной воды абсорбцию при 510 нм Пробы
(А Is) и Стандарта (A lst) и через 1 минуту производят второе считывание Пробы (A2s) и
Стандарта (A2st).
Вычисление результатов
{(A2s - A ls ) / (A2st - A ls t)} x 2 = мг креатинина/ 100 мл пробы
или
{(A2s - A ls) / (A2st - A ls t)} X 177 = мкг креатининаУл пробы
Нормальные величины
сыворотка: мужчины 0,6-1,2 мгМОО мл ( 53 - 106 мкмоль\л )
женщины 0,5-1,0 мг\100 мл ( 44 - 88 мкмоль\л )
моча: 1-1,5 г\24 часа ( 8,84 - 13,3 ммоль\24 часа)
клиреанс креатинина: мужчины 98-160 мл/мин
женщины 95-150 мл/мин
Линейность
до 20 мгМОО мл
П РИ М ЕЧАН И Е
1. Если концентрация креатинина выше 20 мгМОО мл - разведите пробу и результат
измерений умножить на фактор разведения.
2. Пропорциональное изменение объемов реакционной смеси не влияет на результат.
3. вычисление клиреанс креатинина:
= мг креатинина/100 мл мочи х Г мл мочи/24 часа")
мг креатинина/100 мл сыворотки х 1440
--- стр. 14 ---
п р о
£ - $■ О ^ / / а Р < / л
--- стр. 15 ---
f
Ф О С Ф О Л И П И Д Ы
П ринцип метода Фосфолипиды гидролизуются в присутствии фосфолипазы D
до холина и фосфатидиловой кислоты. Образующийся холин окисляется холиноксидазой
до бетаина и перекиси водорода, который в присутствии пероксидазы взаимодействует с
4-аминоантипирином и производным фенола с образованием красного хиноинового
комплекса, интенсивность окраски которого прямо пропорциональна количеству
фосфолипидов в пробе.
Реагенты
Только для in vitro диагностики.
Реагенты хранятся в холодильнике при температуре 2-8 С и стабильны до сро
ка указанного на этикетке.
Компоненты набора
- Реагент А
Буфер 50 ммоль, pH 7,6 1x50 мл
Производное фенола 2,1 ммоль\л
-Реагент В 5x10 мл
4-аминопирин 0,24 ммоль\л
Фосфолипаза ^ 310 Ш
Холиноксидаза > 1570 Ш
Пероксидаза > 1420 Ш
- Стандарт 1x5 мл
Стандарт фосфолипидов 300 мг\100 мл (3,87 ммоль\л)
Приготовление рабочих растворов
Раствор Хромогена: Растворяют содержимого одного флакона Реагента В в 10 мл
Реагента А. Перемешивают осторожно несколько минут. Перед использованием нагреть
раствор до комнатной температуры.
Стабильность: 15 дней при 2-8 С.
Пробы
Сыворотка или плазма с гепарином
Аналитическая процедура
Длина волны измерения - 520 нм (510-530 нм)
Кювета (световой путь) - 10 мм
Температура - 37 С
Соотношение проба\реагент - 1\100
Фотометрирование - против Бланка реагента
Тип реакции > конечная точка
Схема измерения
5x10 мл SENTFNEL Diagnostics Кат. номер 17.320
--- стр. 16 ---
Бланк Проба Стандарт
реагента
Дистиллированная
вода 10 мкл- -
Проба 10 мкл-
Стандарт - 10 мкл
Раствор Хромогена 1 О О О мкл 1 О О О мкл 1 О О О мкл
Смешивают, выдерживают 10 минут при 37 С и считывают
абсорбцию при 510 нм Пробы (As) и Стандарта (Ast) против Бланка реагента. Окраска
стабильна не менее 30 минут.
Вычисление результатов
( As\A st) X 300 = мг фосфолипидов на 100 мл сыворотки ( мгМОО мл)
или
( AsVAst ) X 3,87 = м м о л ь ф о с ф о л и п и д о в на 1 л с ы в о р о т к и
Нормальные величины
Взрослые 150- 250 мгМОО мл (1,9 - 3,2 ммоль\л)
Линейность
до 1000 мг\100 мл
ПРИ М ЕЧАН И Е
1 . Если концентрация белка выше 1000 мгМОО мл - разведите пробу в 2 раза и результат
измерений умножить на 2
2. Пропорциональное увеличение объемов реакции не изменяет результатов
измерений
3. Для липемических, гемолизированных и иктерических проб необходимо измерять
Бланк пробы - добавьте к 10 мкл пробы 1000 мкл физ. р-ра.
Абсорбцию Бланка пробы, вычисленную против дистиллированной воды при 510 нм,
необходимо вычесть из абсорбции измеряемой пробы.
--- стр. 17 ---
--- стр. 18 ---
О Б Щ И Й ХО ЛЕС ТЕРИ Н
5x20 мл SENTINEL Diagnostics Кат. номер 17.213
2x100 мл 17.216
10x100 мл 17.216М
4x250 мл 17.218
Принцип метода ТРИН ДЕР МЕТОД. Эфиры холестерина гидролизуются в
присутствии холестеринэстеразы (СНЕ) до холестерина и жирных кислот. Общий
холестерин окисляется холестериноксидазой (CHOD) в 4-холестан-З-он и перекись
водорода, которая в присутствии пероксидазы (POD), взаимодействует с 4-
аминоантипиреном (АР) и с 4-гидроксибензоатом натрия, образуя окрашенный комплекс.
Интенсивность окраски прямопропорциональна количеству холестерина в образце.
Реагенты
Только для in vitro диагностики.
Реагенты хранятся при температуре 2-8 С и стабильны до срока, указанного на этикетке.
Компоненты набора
- Реагент А
Фосфатный буфер pH 7.0 70 ммол\л
Натрия хлорат 10 ммольУл
4-гидроксибензоат натрия 12 ммоль\л
Стабилизаторы
- Реагент В сухой
4-аминоантипирен 0.4 ммольУл
СНЕ > 450 и\1
CHOD > 250 и\1
POD > 900 и\1
Стабилизаторы
- Стандарт 1 х 10 мл
Холестерин 200 M r\dl (5.2 ммоль\л )
Приготовление реакционных растворов
Раствор хромогена:
Добавить содержимое Реагента В к Реагенту А. Осторожно перемешать несколько минут.
Стабильность: 30 дней при температуре 2-8С. Перед использованием нагреть до
комнатной температуры.
Пробы
Сыворотка или плазма с гепарином или ЭДТА.
Аналитическая процедура
Длина волны измерения - 510 нм (500-520 нм)
--- стр. 19 ---
Кювета (световой путь) - 10 мм
Температура - 37 С
Фотометрирование против Бланка реагента
Соотношение нроба\реагент - 1\100
Тип реакции - конечная точка
Схема измерения
Бланк Проба Стандарт
реагента
Дистиллированная
вода 10 мкл- -
Проба Ю мкл-
Стандарт - 10 мкл
Раствор хромогена 1 О О О мкл 1 О О О мкл 1000 мкл
Смешивают, инкубируют при 37 С 3 минуты и считывают
абсорбцию при 510 нм Пробы (As) и Стандарта (Ast) против Бланка реагента. Окраска
стабильна не менее 30 минут.
Вычисление результатов
( AsVAst) X 200 - мг холестерина на 100 мл сыворотки
или
( AsVAst) X 5.2 = ммоль холестерина на 1000 мл сыворотки
Нормальные величины
Взрослые : 150-250 мгМОО мл ( 3.89 - 6.48 ммоль\л )
Линейность
до 600 мгМОО мл
П РИ М ЕЧАН И Е
1. Если концентрация холестерина выше 600 мгМОО мл - разведите пробу в 2 раза и
результат измерений умножте на 2
2. Для очень липемических проб готовят Бланк пробы, добавляя к 10 мкл сыворотки 1000
мл дистиллированной воды. Абсорбцию Бланка пробы читать при 510 нм против Бланка
реагента и результат вычесть из результата абсорбции пробы.
3. Пропорциональное изменение объемов реакции не влияет на результаты измерений.
--- стр. 20 ---
1 3 С£ ) -
iZ f
--- стр. 21 ---
цинк
Принцип метода Цинк, в буферной системе при pH 8,6, формирует со специфическим
комплексоном 5-Br-PAPS стабильный окрашенный комплекс, интенсивность окраски
которого пропорциональна количеству цинка в пробе. Интерференция, благодаря
олигоэлементам присутствующим в пробе, снижается благодаря использованию
специфических условий реакции и специфических маскирующих агентов.
Реагенты
Только для in vitro диагностики.
Реагенты хранятся в холодильнике при температуре 2-8 С и стабильны до сро
ка указанного на этикетке.
Компоненты набора
- Реагент А 5x10 мл
буфер pH 8.6
добавки
- Реагент В 1 х5 мл
комплексон 5-Br-PAPS
- Реагент С 1 флакон
реакционные добавки
ложечка для реагента
- Стандарт 1x5 мл
концентрация 200 цгМОО мл (30.6 цмоль\л) или указана на этикетке флакона
Приготовление рабочих растворов
Раствор АС : добавить 1 маленькую ложечку Реагента С к Реагенту А. Аккуратно
перемешать.
Стабильность: 30 дней 2-8 С.
Раствор Хромогена: смещать 10 объемов Раствора АС с 1 объемом Реагента В
Стабильность: 10 дней при 2-8 С.
Пробы
Сыворотка или плазма только с гепарином. Не использовать гемолизированные пробы.
Моча - суточная
Семенная жидкость:
Центрифугировать пробу 3000 g 10-15 мин
Развести надосадочную жидкость 1:100 физ.раствором
Учитывать фактор разведения при вычислении результатов
5 X 10 м л S E N T IN E L D ia g n o s tic s К а т. н ом е р 17.255
Аналитическая процедура
Длина волны измерения - 560 нм
--- стр. 22 ---
Кювета (световой путь) - 10 мм
Температура - 26-30-37 С
Соотношение проба\реагент - 1\20
Тип реакции - по конечной точке
Фотометрирование - против дистиллированной воды
Перед началом работы все растворы нагреть до рабочей температуры.
Схема измерения
Бланк Проба Стандарт
реагента
Дистиллированная
вода 50 мкл- -
Проба 50 мкл-
Стандарт - 50 мкл
Раствор Хромогена 1000 мкл 1000 мкл 1000 мкл
Смешивают и считывают абсорбцию при 560 нм против дистиллированной воды Пробы
(As) и Стандарта (Ast). Окраска стабильна около 1 часа.
Вычисление результатов
(As/Ast) X 200 (Концетрацию стандарта) = цг Цинка \100 мкл
(As/Ast) X 30,6 (Концетрацию стандарта) = цмоль Цинка \л
Нормальные величины
Сыворотка/плазма
М ужчины/женщины: 68 - 107 цгМОО мл (10.4 - 16.4 цмоль\л)
Моча:
М ужчины/Ж еншины: 150 - 1200 цг\100 мл (2.3 - 18.4 цмоль\л)
Центрифугированная семенная жидкость:
2-10 мг/100 мл (0,3-1,5 ммоль/л)
Каждой лаборатории рекомендуется вычислить свои нормальные величины
Линейность до 2000 цгМОО мл
ПРИМЕЧАНИЕ
1, Если концентрация цинка выше 2000 цгМОО мл - разведите пробу в 2 раза
физиологическим раствором и результат измерений умножить на 2.
2. Пропорциональное увеличение объемов реакции не изменяет результатов
--- стр. 24 ---
C ~ 0 ^ / f ,
--- стр. 25 ---
КРЕАТИНИН
Принцип метода Креатинин формирует с пикриновой кислотой в щелочной среде
окрашенный комплекс. Оптическая плотность пропорциональна концентрации
Креатинина в образце.
Реагенты
Только для in vitro диагностики.
Реагенты хранятся при температуре 15-30 С и стабильны до срока, указанного на
этикетке.
Компоненты набора
- Реагент А 2х 120 мл
пикриновая кислота 28,8 ммол\л
-РеагентВ жидкий 2x120 мл
NAOH 0.4 ммоль\л
ОСТАРОЖНО ЩЕЛОЧЬ !!!!
-Стандарт 1x10 мл
Кретинин 2 мг\100 мл (1 7 7 мкмоль\л )
Приготовление реакционных растворов
Раствор АВ: добавить к Реагенту А равный объем Реагента В. Стабилен 1 неделю при
комнатной температуре.
Пробы
Сывортка или моча. М оча перед использованием разводится 1:100 дистиллированной
водой.
Аналитическая процедура
Длина волны измерения - 510 нм (500 - 520 нм)
Кювета (световой путь) - 10 мм
Температура - 30
Считывание - против воды
Реакция - по конечной точке
Реагенты нагреваются до температуры постановки реакции.
4 x1 2 0 м л S E N T IN E L D ia g n o s tic s К а т . н о м е р 17.191
С х е м а и з м е р е н и я
--- стр. 26 ---
П р о б а С та н д а р т
Проба 100 мкл
Стандарт - 100 мкл
Реагент АВ 1 О О О мкл 1 О О О мкл
Смешивают и считывают против дистиллированной воды абсорбцию при 510 нм Пробы
(А Is) и Стандарта (А 1st) и через 1 минуту производят второе считывание Пробы (A2s) и
Стандарта (A2st).
Вычисление результатов
{(A2s - А1 s) / (A2st - A lst)} х 2 = мг креатининаУ 100 мл пробы
или
{(A2s - A ls) / (A2st - A lst)} x 177 = мкг креатинина/л пробы
Нормальные величины
сыворотка: мужчины 0,6-1,2 мг\100 мл ( 53 - 106 мкмоль\л )
женщины 0,5-1,0 мг\100 мл (4 4 - 88 м км оль\л)
моча: 1-1,5 г\24 часа (8 ,8 4 -1 3 ,3 ммоль\24 ч а с а )
клиреанс креатинина: мужчины 98-160 мл/мин
женщины 95-150 мл/мин
Линейность
до 20 мгМОО мл
ПРИМЕЧАНИЕ
1. Если концентрация креатинина выше 20 мгМОО мл - разведите пробу и результат
измерений умножить на фактор разведения.
2. Пропорциональное изменение объемов реакционной смеси не влияет на результат.
3. вычисление клиреанс креатинина:
= мг креатинина/100 мл мочи х Г мл мочи/24 часа)
мг креатинина/100 мл сыворотки х 1440
--- стр. 27 ---
f l с е i O ^ о
--- стр. 28 ---
МЕДЬ (сыворотка)
Принцип метода М едь, высвобождаемая из церулоплазмина, который связывает этот
метал, при pH 4.7 формирует с комплексантом 3.5-DiBr-PAESA стабильный окрашенный
хелатный комплекс, интенсивность окраски которого пропорциональна количеству меди в
образце.
Реагенты
Только для in vitro диагностики.
Реагенты хранятся в холодильнике при температуре 2-8 С и стабильны до сро
ка указанного на этикетке.
Компоненты набора
- Реагент А 5x10 мл
буфер pH 4.7
комплексант 3.5-DiBr-PAESA
добавки
- Реагент В 8x6 мл
реакционная смесь
небольшая ложечка для дозировки реагента В
-С тандарт 1x10 мл
концентрация 100 цгМОО мл (15.73 цмоль\л) или указана на этикетке флакона
Приготовление рабочих растворов
Рабочий раствор : добавить 1 маленькую ложечку Реагента В к Реагенту А. Аккуратно
перемешать.
Стабильность: 3 недели -20 С.
Пробы
Сыворотка или плазма только с гепарином. Не использовать гемолизированные пробы.
Аналитическая процедура
Длина волны измерения - 570-590 нм
Кювета (световой путь) - 10 мм
Температура - 37 С
Соотношение проба\реагент - 1\20
Тип реакции - по конечной точке
Фотометрирование - против дистиллированной воды
Перед началом работы все растворы нагреть до 37 С.
5 X 10 м л S E N T IN E L D ia g n o s tic s К а т . н о м е р 17.108
--- стр. 29 ---
С х е м а и з м е р е н и я
Бланк
реагента
Проба Калибратор
Дистиллированная
вода 50 мкл - -
Проба - 50 мкл -
Стандарт - - 50 мкл
Рабочий раствор 1000 мкл 1О О О мкл 1О О О мкл
Смешивают, инкубируют 4-5 минут при 37 С и считывают
абсорбцию при 570-590 нм (к макс 582 нм) против дистиллированной воды Пробы (As) и
Стандарта (Ast). Окраска стабильна около 1 часа.
Вычисление результатов
(As/Ast) X 100 (Концетрацию стандарта) = цг Меди \100 мкл
(As/Ast) X 15,73 (Концетрацию стандарта) = |лмоль Меди \л
Нормальные величины
Мужчины: 70 - 140 |лг\100 мл (11.0 - 22.0 цмоль\л)
Женщины: 80 - 155 цгМОО мл (12.6 - 24.4 цмольУл)
Каждой лаборатории рекомендуется вычислить свои нормальные величины
Линейность до 500 цг\100 мл
ПРИМЕЧАНИЕ
1. Если концентрация фруктозамина выше 500 цгМОО мл - разведите пробу в 2 раза
физиологическим раствором и результат измерений умножить на 2,
2. Пропорциональное увеличение объемов реакции не изменяет результатов
измерений
3. Для исследований использовать пробирки и стеклянную посуду промытую 1N соляной
кислотой и дистиллированной водой.
--- стр. 30 ---
--- стр. 31 ---
ЖЕЛЕЗО
П ринцип м етода ФЕРЕНОВЫ Й МЕТОД. Железо высвобождается из трансферрина , с
которым оно связано, в буферной среде pH 4.8. Fe++ формирует с ФЕРРЕНОМ
стабильный окрашенный комплекс, интенсивность окраски которого пропорциональна
концентрации железа в образце.
Реагенты
Только для in vitro диагностики.
Реагенты хранятся при температуре 15-30 С и стабильны до срока, указанного на
этикетке.
Компоненты набора
- Реагент А 2x100 мл
Ацетатный буфер pH 4.8 1.4 мол\л
тиомочевина 65 ммол\л, добавка
-РеагентВ лиофилизированный 10.5м л
Ферен
- Реагент С сухой 1 пузырек
Аскорбиновая кислота
Небольшая ложечка для Реагента С
- Стандарт 1 х 10 мл
Ж елезо 100 мкг\с11 (1 7 .9 мкмоль\л )
Приготовление реакционных растворов
Раствор В: добавить к Реагенту В 10.5 мл дистиллированной воды, размешать до полного
растворения порошка. Стабилен 60 дней в холодильнике 2-8 С,
Раствор С: добавьте две маленькие ложечки ( прилагается к н аб о р у ) Реагента С к 40 мл
Реагента А; перемешайте до получения однородного раствора.
Стабилен 15 дней в холодильнике 2-8С или 4 дня при комнатной температуре.
Раствор хромогена: ( только при определении в сериях )
Добавить 2 мл Раствора В к 40 мл Раствора С и перемешать; готовить непосредственно
перед использованием.
Пробы
Сыворотка или плазма , без гемолиза. В качестве антикоагулянта использовать только
гепарином.
Аналитическая процедура
Длина волны измерения - 593 нм (580-600 нм)
Кювета (световой путь) - 10 мм
Температура - комнатная
Тип реакции - конечная точка
Схема измерения
2 x 1 0 0 м л S E N T IN E L D ia g n o s tic s К а т . н ом е р 17.105
--- стр. 32 ---
А - Для работы в сериях
Бланк Бланк Проба Стандарт
реагента пробы
Дистиллированная
вода 200 мкл - -
Проба 200 мкл 200 мкл -
Стандарт - - 200 мкл
Раствор С - 1О О О мкл -
Раствор хромогена 1 О О О мкл 1 О О О мкл1000 мкл
Смешивают, выдерживают 5 минут при комнатной температуре и считывают
абсорбцию при 580-600 нм Бланка пробы ( Asb ) против дистиллированной воды и
абсорбцию Пробы (As) и Стандарта (Ast) против Бланка реагента. Окраска стабильна не
менее 1 часа..
Вычисление результатов
[( As-Asb)\Ast] X 100 = мкграмм железа на 100 мл сыворотки
или
[ ( As-Asb)\Ast] X 17.9= мкмоль железа на 1000 мл сыворотки
Бланк Проба Стандарт
реагента
Дистиллированная
вода 200 мкл - -
Проба 200 мкл
Стандарт - - 200 мкл
Раствор С 1 О О О мкл1О О О мкл 1О О О мкл
Смешивают и считывают абсорбцию при 593 нм ( 580-600 нм). Устанавливают нулевую
абсорбцию Бланка реагента , добавляю т 50 мкл Раствора В, смеш ивают и считывают
абсорбцию (АЬг). Устанавливают нулевую абсорбцию Стандарта , добавляю т 50 мкл
Раствора В, смеш ивают и считывают абсорбцию (Ast) стандарта.. Устанавливают нулевую
абсорбцию Пробы , добавляю т 50 мкл Раствора В, смешивают, инкубируют 5 мин при
комнатной температуре и считывают абсорбцию (As) пробы. Окраска стабильна не менее
1 часа.
Вычисление результатов
[( As-Abr)\(Ast-Abr)] х 100 = мкграмм железа на 100 мл сыворотки
или
[ ( AS”Abr)\(Ast-Abr)] х 17.9= мкмоль железа на 1000 мл сыворотки
Нормальные величины
--- стр. 34 ---
--- стр. 35 ---
ХОЛИНЭСТЕРАЗА
П ринцип м етода Холинэстераза гидролизует бутирилхолина, образуя бутират и
тиохолин. Тиохолин переводит экзацианожелезо (III) в экзацианожелезо (II) . Снижение
абсорбции при 405 нм пропорционально активности холинэстеразы в пробе.
Реагенты
Только для in vitro диагностики.
Реагенты хранятся при температуре 2-8 С и стабильны до срока, указанного на этикетке.
Компоненты набора
- Реагент А 2x50 мл
Хромогенный буфер
- Реагент В 1x20 мл
субстрат
Концентрация активгых компонентов в конечном реакционном объеме:
пирофосфат 75 ммоль/л, pH 7,6 (37 С), экзацианожелезо (III) 2 ммоль/л, бутирилтиохолин
15 ммоль/л, стабилизаторы.
Приготовление реакционных растворов
Раствор хромогена:
Добавить содержимое Реагента В к Реагенту А. Осторожно перемешать несколько минут.
Стабильность; 30 дней при температуре 2-8С. Перед использованием нагреть до
комнатной температуры.
Пробы
Сыворотка или плазма с гепарином или ЭДТА.
120 мл S E N T IN E L D ia g n o s tic s К а т. н о м е р 17.0 1 9 А
Аналитическая процедура
Длина волны измерения - 510 нм (500-520 нм)
Кювета (световой путь) - 10 мм
Температура - 37 С
Фотометрирование против Бланка реагента
Соотношение проба\реагент - 1\100
Тип реакции - конечная точка
Схема измерения
Бланк Проба Стандарт
реагента
--- стр. 36 ---
Дистиллированная
вода 10 мкл- -
Проба 10 мкл-
Стандарт - 10 мкл
Раствор хромогена 1000 мкл 1000 мкл 1000 мкл
Смешивают, инкубируют при 37 С 3 минуты и считывают
абсорбцию при 510 нм Пробы (As) и Стандарта (Ast) против Бланка реагента. Окраска
стабильна не менее 30 минут.
Вычисление результатов
( As\Ast) X 200 = мг холестерина на 100 мл сыворотки
или
( As\Ast) X 5.2 = ммоль холестерина на 1000 мл сыворотки
Нормальные величины
Взрослые : 150-250 мгМОО мл ( 3.89 - 6.48 ммоль\л )
Линейность
до 600 мгМОО мл
ПРИМЕЧАНИЕ
1. Если концентрация холестерина выше 600 мг\100 мл - разведите пробу в 2 раза и
результат измерений умножте на 2
2. Для очень липемических проб готовят Бланк пробы, добавляя к 10 мкл сыворотки 1 О О О
мл дистиллированной воды. Абсорбцию Бланка пробы читать при 510 нм против Бланка
реагента и результат вычесть из результата абсорбции пробы.
щ 3. Пропорциональное изменение объемов реакции не влияет на результаты измерений.
--- стр. 37 ---
'l)iC :-xV П П -0
--- стр. 38 ---
ФРУКТОЗАМИН
Принцип метода Тест основан на возможности кетоаминных групп гликопротеинов
редуцировать соль тетразолия в щелочных условиях. Формазан, получаемый при
редуцировании соли тетразолия, фотометрируется при 500 нм. Концентрация
фруктозамина в образце пропорциональна абсорбции формазана.
Реагенты
Только для in vitro диагностики.
Реагенты хранятся в холодильнике при температуре 2-8 С и стабильны до сро
ка указанного на этикетке.
Компоненты набора
- Реагент А 8x6 мл
карбонатный буфер 200 ммоль\л pH 10.0
детергент
- Реагент В 8x6 мл
соль тетразолия 0.48 ммоль\л
Уриказа > 2500 Ш
- Калибратор 1x1 мл
концентрация указана на этикетке флакона
Приготовление рабочих растворов
Рабочий раствор : добавить содержимое Реагента А к Реагенту В. Аккуратно перемешать
несколько минут до полного растворения порошка. Раствор можно использовать через 10
минут.
Стабильность: 15 дней 2-8 С или 3 дня при 115-25 С в темноте.
Раствор калибратора: растворить содержимое флакона в 1 мл дистиллированной воды и
выдержать 5-10 минут. Перед использованием хорошо перемешать.
Стабильность: 2 месяца при2-8 С или 6 месяцев при -20 С.
Пробы
Сыворотка или плазма с гепарином или ЭДТА Не использовать гемолизированные пробы.
Стабильность: 2 месяца при -20 С или 15 дней при 2-8 С или 3 дня при 15-25 С.
Аналитическая процедура
Длина волны измерения - 550 нм
Кювета (световой путь) - 10 мм
Температура - 37 С
Соотношение проба\реагент - 1\10
Тип реакции - по двум точкам
Фотометрирование - против дистиллированной воды
Перед началом работы все растворы нагреть до 37 С.
8 X 6 м л S E N T IN E L D ia g n o s tic s К а т. н о м е р 17.350
фирма ЛАМЕС 125080 Москва ул. Панфилова 18, корп 3 тел\факс 158-02-37, 158-63-96
158-11-60
--- стр. 39 ---
С х е м а и з м е р е н и я
Бланк Проба Калибратор
реагента
Дистиллированная
вода
Проба
Калибратор
Рабочий раствор
100 мкл
100 мкл
100 мкл
1 О О О мкл 1 О О О мкл 1 О О О мкл
Смешивают, инкубируют 10 минут при 37 С и считывают
абсорбцию при 550 нм против дистиллированной воды А1 Бланка Реагента (А1-бр),
Пробы (А1-бп) и Калибратора (А1-бк). Инкубируют еще раз 5 минут при 37 С и
считывают абсорбцию при 550 нм против дистиллированной воды А2 Бланка Реагента
(А2-бр), Пробы (А2-бп) и Калибратора (А2-бк).
Вычисление результатов
Вычисляют л А = А2 - А1 для Бланка реагента, Пробы и Калибратора
[(АЛ Пробы - АЛ Бланка реагентов)/(АА Калибратора - ДА Бланка реагента)] х
Концетрацию калибратора = цмоль Фруктозамина \ л
Нормальные величины
Здоровые (не диабетные) пациенты; < 2 8 5 цмоль\л
Ка>1^ой лаборатории рекомендуется вычислить свои нормальные величины
Линейность до 1000 цмоль\л
ПРИМЕЧАНИЕ
1. Если концентрация фруктозамина выше 1 О О О цмоль\л - разведите пробу в 2 раза
физиологическим раствором и результат измерений умножить на 2. (или более).
2. Пропорциональное увеличение объемов реакции не изменяет результатов
измерений
3. Хорошие результаты получаются даже если растворы слегка окрашены.
4. Мочевая кислота и липемия не влияют на измерения.
5. Билирубин до 2 мг\100 мл. Гемоглобин 100 мгМОО мл и Аскорбиновая
кислота до 3 мг\100 мл не влияют на измерения.
фирма ЛАМ ЕС 125080 Москва ул. Панфилова 18, корп 3 тел\факс 158-02-37, 158-63-96
158-11-60
--- стр. 43 ---
--- стр. 44 ---
МОЧЕВИНА
П ринцип м етода М очевина гидролизируется уарезой до аммиака и углекислого газа и
в присутствии нитропруссида натрия аммиак реагирует с гипохлоридом натрия и
салицилатом образуя окрашенное соединение. Оптическая плотность которого
пропорпиональна концентрации мочевины в образце.
Реагенты
Только для in vitro диагностики.
Реагенты хранятся при температуре 15-30 С и стабильны до срока, указанного на
этикетке.
Компоненты набора
- Реагент А лиофилизированпый 12x100 мл
Осторожно !!! при попадании в глаза промыть водой !!!
-Реагент В жидкий 1x120 мл
10-ти кратной концентрации
ОСТАРОЖНО ЩЕЛОЧЬ !!!!
- Стандарт 1 х 10 мл
М очевина 40 мгМОО мл ( 6,64 ммоль\л )
- Флакон для приготовления реактива
Приготовление реакционных растворов
Раствор А: перенести Реагент А во флакон и добавить 100 мл дистиллированной воды и
осторожно перемешать несколько минут.
Стабилен 30 дней при 2-8 С в темном стекле.
Раствор В: Развести 1 объем Реагента В 9 объемами дистилированной воды.
Стабилен 3 месяца при 2-8 С в темном стекле.
Пробы
Сывортка или моча. М оча перед использованием разводится 1:100 дистиллированной
водой.
Аналитическая процедура
Длина волны измерения - 510 нм (500 - 520 нм)
Кювета (световой путь) - 10 мм
Температура - 30
Считывание - против воды
1 2x0 20 м л S E N T IN E L D ia g n o s tic s К а т . н о м е р 17.151
--- стр. 45 ---
Реакция - по конечной точке
Реагенты нагреваются до температуры постановки реакции.
Схема измерения
Проба Стандарт
Проба 100 мкл
Стандарт - 100 мкл
Реагент АВ 1 О О О мкл 1 О О О мкл
Смешивают и считывают против дистиллированной воды абсорбцию при 510 нм Пробы
(A ls) и Стандарта (A lst) и через 1 минуту производят второе считывание Пробы (A2s) и
Стандарта (A2st).
Вычисление результатов
{(A2s - A ls) / (A2st - A lst)} x 2 = мг креатинина/ 100 мл пробы
или
{(A2s - A ls) / (A2st - A lst)} x 177 = мкг креатинина/л пробы
Нормальные величины
сыворотка: мужчины 0,6-1,2 мг\100 мл ( 53 - 106 мкмоль\л )
женщины 0,5-1,0 мг\100 мл ( 44 - 88 мкмоль\л )
моча: 1-1,5 г\24 часа ( 8,84 - 13,3 ммоль\24 часа )
клиреанс креатинина: мужчины 98-160 мл/мин
женщины 95-150 мл/мин
Линейность
до 20 мг\100 мл
ПРИМЕЧАНИЕ
1. Если концентрация креатинина выше 20 мг\100 мл - разведите пробу и результат
измерений умножить на фактор разведения.
2. Пропорциональное изменение объемов реакционной смеси не влияет на результат.
3. вычисление клиреанс креатинина:
= мг креатинина/100 мл мочи х мл мочи/24 часа)
мг креатинина/100 мл сыворотки х 1440
--- стр. 50 ---
В с е г о п р о ш н у р о в а н о ,
п р о н у м е р о в а н о Я / ^ / ^
( л и с т о в ) ^ '
Г е н е р а л ь н ы й ^ и р е к т о
/ ; JA
E f o p V K p ? Н А .
--- стр. 51 ---
ОБЩИЙ БЕЛОК в моче
П ринц ип метода При pH 2.5 белки образуют окрашенный пирогаллол красный-
молибдатный комплекс. Интенсивность окраски пропорциональна концентрации белка в
пробе
Реагенты
Только для in vitro диагностики.
Реагенты хранятся при температуре 15-30 С и стабильны до сро
ка указанного на этикетке.
Компоненты набора
-Р еаген т ! 2x100 мл
Сукцинатпый буфер 0.05 ммоль\л pH 2.5
Пирогаллол красный 0.06 ммоль\л
М олибдат натрия 0.04 ммоль\л
Додецилсульфат натрия 0.07 ммоль\л
- Стандарты 2 уровня 2x1 мл
Стандарт альбумина 2 уровня: низкая и высокая концентрация, значения указаны на
этикетках
Приготовление стандартного раствора
Добавить к содержимому каждого флакона стандартов по 1 мл дистиллированной воды и
выдержать 10-15 минут. Перед использованием осторожно перемешать. Стабильность 2
месяца при 2-8 С.
Концентрация каждого стандарта [ высокого( Н ) около 100 mg\dl и низкого ( L ) около 20
mg\dl ] указана на этикетке каэдого флакона.
ПРИМЕЧАНИЕ: используйте L стандарт в высокочувствительной методике и
стандарт Н в линейной методике
Пробы
Моча или ликвор. Свежие пробы или хранившиеся при 2-8 С не более 3 дней.
Высокочувствительная методика
Длина волны измерения - 600 нм
Кювета (световой путь) - 10 мм
Температура - 25-30-37 С
Соотношение проба\реагент - 1\20
Тип реакции - конечная точка
Чувствительность - 2 mg\dl
Линейность - до 100 mg\dl
Стандарт - низкий ( L )
Линейная методика
2 x10 0 м л S E N T I N E L D ia g n o s tic s К а т . н о м е р 17.275
--- стр. 52 ---
Длина волны измерения - 600 нм
Кювета (световой путь) - 10 мм
Температура - 25-30-37 С
Соотношение проба\реагент - 1\100
Тип реакции - конечная точка
Чувствительность - 10 mg\dl
Линейность - до 500 mg\dl
Стандарт - высокий ( Н )
Схема измерения для высокочувствительной методики
Бланк Проба Стандарт
реагента
Дистиллированная
вода 50 мкл-
Проба 50 мкл-
Стандарт ( L ) 50 мкл
Реагент А 1000 мкл 1000 мкл 1000 мкл
Смешивают, выдерживают 1 минуту при рабочей температуре и считывают
абсорбцию при 600 нм Пробы (As) и Стандарта (Ast) против Бланка реагента. Окраска
стабильна не менее 30 минут.
Схема измерения для линейной методики
Бланк Проба Стандарт
реагента
Дистиллированная
вода Ю м кл-
Проба 10 мкл-
Стандарт ( И ) 10 мкл
Реагент А 1000 мкл 1000 мкл 1000 мкл
Смешивают, выдерживают 1 минуту при рабочей температуре и считывают
абсорбцию при 600 нм Пробы (As) и Стандарта (Ast) против Бланка реагента. Окраска
стабильна не менее 30 минут.
Вычисление результатов
( A s\A st) X [с] = мг белка на 100 мл сыворотки ( mg\dl)
[с] " концентрация стандарта (mg\dl)
Для вычисления концентрации белка в суточной моче, умножте полученную
концентрацию (mg\dl) на объем ( в d l ) 24-часовой мочи.
Нормальные величины
--- стр. 53 ---
М оча Взрослые < 24 mg\dl (0.24 g\dl)
Ликвор Взрослые < 40 mg\dl (0.40 g\dl)
ПРИМЕЧАНИЕ
1. Если концентрация белка выше 100 g\dl (высокочувствительная процедура) или выше
500 g\dl (линейная процедура) - разведите пробу в несколько раз и результат измерений
умножить на фактор разведения.
2. Пропорциональное увеличение объемов реакции не изменяет результатов
измерений
3. Для липемических, гемолизированных и иктерических проб необходимо измерять
Бланк пробы - добавьте к 50 мкл пробы (высокочувствительная методика) или к 10 мкл
(линейная методика) 1000 мкл физ. р-ра.
Абсорбцию Бланка пробы, вычисленную против дистиллированной воды при 600 нм,
необходимо вычесть из абсорбции измеряемой пробы.
--- стр. 54 ---
В с е г о п р о ш н у р о в а т о , |
п р о н у м е р о в а н о " ‘ '
( л и с т о в ) ■ i ^
Г е н е р а л ь н ы й ' ^ ^ е к т о р
Ч- 'х
--- стр. 55 ---
ГАПТОГЛОБИН
П ринцип м етода Определение Гаптоглобина человека основано на взаимодействии
между Гаптоглобином, как антигеном и специфической сывороткой, как антителом.
Образующийся нерастворимый комплекс изменяет мутность раствора, которая измеряется
спектрофотометрически при 340 нм.
Реагенты
Только для in vitro диагностики.
Реагенты хранятся в холодильнике при температуре 2-8 С и стабильны до сро
ка указанного на этикетке.
Компоненты набора
* - Реагент А Трис-буфер, ПЭГ, pH 7.5 2x50 мл
-Р еаген тВ антисывороткаанти-трасферрин 2x1 мл
- Реагент С Трис-буфер, pH 7.5, буфер разведения антисыворотки 1х 10 мл
ВНИМАНИЕ ! В набор не входит Калибратор
Н еобходимо заказать дополнительно Кат. номер 11.200D
Используется для количественного определения белков плазмы
турбидиметрическим методом. Концентрация указана на
этикетке каждого флакона. При построении калибровочной
кривой Калибратор не разводится 1:21.
Стабильность: после вскрытия флакона 4 недели при 2-8 С.
Подготовка Рабочего раствора
^ - Раствор ВС: растворяют 1 объем Реагента В в 3-объемах Реагента С. Хорошо
перемешивают до образования однородного раствора.
Стабильность: 2 месяца при 2-8 С
Не замораживать Раствор ВС
Пробы
Сыворотка, Пробы могут храниться 4 дня при 2-8 С или 4 недели при -20 С.
Подготовка проб
Перед проведением исследований пробы и контроля развести 1:21 ( 1 объем сыворотки + 20
объемов расво р а) физраствором.
S E N T IN E L D ia g n o s tic s К а т . н о м е р 11.0 5 0 D
Аналитическая процедура
Длина волны измерения - 340 нм
Кювета (световой путь) - 10 мм
Температура - 37 С
Длина светового пути - 10 мм
--- стр. 56 ---
Тип реакции - турбидиметрия, против воздуха или дистиллированной воды
Перед исследованием все реагенты нагреть до рабочей температуры.
Схема разведения стандарта
Раствор Номера калибраторов
1 2 3 4 5
Физ. Р-р 400 300 300 300 300 мкл
Калибратор 100 мкл - -
последовательно переносим
из Номера 1 в Номер 2
из Номера 2 в Номер 3
из Номера 3 в Номер 4
из Номера 4 в Номер 5 по 300 мкл раствора
Разведение 1\5 1\10 1\20 1\40 1\80
Концентрация
мгМОО мл
(21:5)С (21:10)С (21:20)С (21:40)С
С - концентрация Гаптоглобина в мгМОО мл
указана на этикетке упаковки
(21:80)С
Схема измерения
Бланк Проба Калибратор
реагента или контроль
Физ. Р-р 50 мкл-
Проба разв.(1:21) - 50 мкл
Калибраторы
1,2,ЗЛ 5
Реагент А 900 мкл 900 мкл
Рабочий раствор В С 1 00 мкл 100 мкл
50 мкл
900 мкл
100 мкл
Смешивают, выдерживаю т 10 минут при 37 С и считывают абсорбцию при 340 нм Проб,
Калибраторов против Бланка реагента.
Вычисление результатов
--- стр. 60 ---
г
ИММУНОГЛОБУЛИНЫ IgA IgG-IgM
IgA SENTFNEL Diagnostics Кат. номер 11.1 OOD
IgG Кат. номер 11.102D
IgM Кат. номер 11.106D
П ринцип м етода Определение иммуноглобулинов человека основана на взаимодействии
между иммуноглобулинами, как антигенами и специфическими сыворотками, как
антителами. Образующийся нерастворимый комплекс изменяет мутность раствора, которая
измеряется спектрофотометрически при 340 нм.
Реагенты
Только для in vitro диагностики.
Реагенты хранятся в холодильнике при температуре 2-8 С и стабильны до сро
ка указанного на этикетке.
Компоненты набора
- Реагент А Трис-буфер, ПЭГ, pH 7.5 2x50 мл
- Реагент В сыворотка anTn-IgA\IgG\IgM 2x1 мл
- Реагент С Трис-буфер, pH 7.5, буфер разведения сыворотки
ВНИМАНИЕ ! В набор не входит Калибратор
Необходимо заказать дополнительно Кат. номер 11.200D
Используется для количественного определения белков плазмы
турбидиметрическим методом. Концентрация указана на
этикетке каждого флакона. При построении калибровочной
кривой Калибратор не разводится 1:21.
Стабильность: после вскрытия флакона 4 недели при 2-8 С.
Подготовка Рабочего раствора
- Раствор ВС: растворяю т 1 объем Реагента В в 3-объемах Реагента С. Хорошо
перемешивают.
Стабильность: 2 месяца при 2-8 С
Не замораживать Раствор ВС
Пробы
Сыворотка. Пробы могут храниться 4 дня при 2^8 С или 4 недели при -20 С.
Подготовка проб
Перед проведением исследований пробы и контроли развести 1:21 (1 объем сыворотки + 20
объемов расво р а) физраствором.
Аналитическая процедура
--- стр. 61 ---
Длина волны измерения - 340 нм
Кювета (световой путь) - 10 мм
Температура - 37 С
Тип реакции - турбидиметрия, против воздуха или дистиллированной воды
Перед исследованием все реагенты нагреть до рабочей температуры.
Схема разведения стандарта
Раствор
Физ. Р-р
Калибратор
Номера калибраторов
1 2
400 300,
100 мкл
3
300
4
300 300 мкл
Разведение
Концентрация
мг\100 мл
Схема измерения
последовательно переносим
из Номера 1 в Номер 2
из Номера 2 в Номер 3
из Номера 3 в Номер 4
из Номера 4 в Номер 5 по 300 м к л р аство р а
1\5 1\10 1\20 1\40
(21:5)С (21:10)0 (21:20)С (21:40)0
О - концентрация иммуноглобулина в мгМОО мл
указана на этикетке упаковки
ig A
1\80
(21:80)0
Бланк Проба Калибратор
реагента
Физ. Р-р 50 мкл- .
Проба разв.(1:21) - 50 мкл-
Калибраторы - 50 мкл
1,23,4,5
Реагент А 900 мкл 900 мкл 900 мкл
Рабочий раствор 100 мкл 100 мкл 100 мкл
IgG
--- стр. 62 ---
Бланк Проба Калибратор
реагента
Физ. Р-р 20 мкл- .
Проба разв.(1:21) - 20 мкл-
Калибраторы - 20 мкл
1,2,3,4,5
Реагент А 900 мкл 900 мкл 900 мкл
Рабочий раствор 100 мкл 100 мкл 100 мкл
IgM
Бланк Проба Калибратор
реагента
Физ. Р-р 200 мкл .
Проба разв.(1:21) - 200 мкл
Калибраторы - 200 мкл
1,2,3,4,5
Реагент А 900 мкл 900 мкл 900 мкл
Рабочий раствор 100 мкл 100 мкл 100 мкл
Смешивают, выдерживают 10 минут при 37 С и считывают абсорбцию при 340 нм Проб,
Калибраторов против Бланка реагента.
Вычисление результатов
1. Строим калибровочную кривую на миллиметровке, где по вертикали (Y) - абсорбция
каждого из калибраторов , а по горизонтали (X) - концентрация калибраторов ( мгМОО мл),
2. Используя значения абсорбции каждого калибратора - вычисляет концентрацию по
построенной калибровочной кривой.
Нормальные величины
Взрослые IgA 70-312 мг\100 мл, IgG 60-1350 мг\100 мл, IgM 56-352 мг\100 мл
На эти значения влияю т различные факторы: пол, географическое место, расса,
аналитическая процедура
Каждая лаборатория должна определить свои нормальные величины
Линейность
IgA 60-1400 мгМОО мл, IgG 400-8000 мгМОО мл, IgM 40-800 мгМОО мл
Если значение выше, пробу следует развести и результат фотометрирования умножить на
фактор разведения.
--- стр. 64 ---
\
В с е г о п р о ш н у р о в а н о - / /
п р о н у м е р о в а н ^
( л и с т о в )
Г ен0ральный^даре1О^
Et^pV^fe^A.
--- стр. 65 ---
с з
Принцип метода О пределение СЗ человека основано на взаимодействии между СЗ, как
антигеном и специфической сывороткой, как антителом. Образующийся нерастворимый
комплекс изменяет мутность раствора, которая измеряется спектрофотометрически при 340
нм.
Реагенты
Только для in vitro диагностики.
Реагенты хранятся в холодильнике при температуре 2-8 С и стабильны до сро
ка указанного на этикетке.
Компоненты набора
- Реагент А Трис-буфер, ПЭГ, pH 7.5 2x50 мл
- Реагент В антисыворотка анти-трасферрин 2x1 мл
- Реагент С Трис-буфер, pH 7.5, буфер разведения антисыворотки 1х 10 мл
ВНИМАНИЕ ! В набор не входит Калибратор
Необходимо заказать дополнительно Кат. номер 11.200D
Используется для количественного определения белков плазмы
турбидиметрическим методом. Концентрация указана на
этикетке каждого флакона. При построении калибровочной
кривой Калибратор не разводится 1:21,
Стабильность: после вскрытия флакона 4 недели при 2-8 С,
Подготовка Рабочего раствора
- Раствор ВС: растворяют 1 объем Реагента В в 3-объемах Реагента С. Хорошо
перемешивают до образования однородного раствора.
Стабильность: 2 месяца при 2-8 С
Не замораживать Раствор ВС
Пробы
Сыворотка. Пробы могут храниться 4 дня при 2-8 С или 4 недели при -20 С.
Подготовка проб
Перед проведением исследований пробы и контроли развести 1:21 ( 1 объем сыворотки + 20
объемов расво р а) физраствором.
S E N T F N E L D ia g n o s tic s К а т. н о м е р 11.060 D
Аналитическая процедура
Длина волны измерения - 340 нм
Кювета (световой путь) - 10 мм
Температура - 37 С
Длина светового пути - 10 мм
--- стр. 66 ---
Тип реакции - турбидиметрия, против воздуха или дистиллированной воды
Перед исследованием все реагенты нагреть до рабочей температуры.
Схема разведения стандарта
Раствор
Физ. Р-р
Калибратор
Номера калибраторов
1 2
900 300
100 мкл
3
300
4
300 300 мкл
5
Разведение
Концентрация
мг\100 мл
Схема измерения
последовательно переносим
из Номера 1 в Номер 2
из Номера 2 в Номер 3
из Номера 3 в Номер 4
из Номера 4 в Номер 5 по 300 мкл раствора
1\10 1\20 1\40 1\80
(21:10)С (21:20)0 (21:40)С (21:80)0
С - концентрация 03 в мгМОО мл
указана на этикетке упаковки
1\160
(21:160)0
Бланк п роба Калибратор
реагента или контроль
Физ. Р-р 100 мкл
проба разв.(1:21) - 100 мкл -
Калибраторы - 100 мкл
1 ,2 3 Л 5
Реагент А 900 мкл 900 мкл 900 мкл
Рабочий раствор ВС 100 мкл 100 мкл 100 мкл
Смешивают, выдерживают 10 минут при 37 О и считывают абсорбцию при 340 нм Проб,
Калибраторов против Бланка реагента.
Вычисление результатов
--- стр. 68 ---
В с е г о п р о ш н у р о в ш о ^
прой^о^еровано
^ ( л и c т o в )^''•1' X
'Генеральнвт^4^ектор
I Егсурь^ов
--- стр. 69 ---
ФРУКТОЗАМИН
П ринцип м етода Тест основан на возможности кетоаминных групп гликопротеинов
редуцировать соль тетразолия в щелочных условиях. Формазан, получаемый при
редуцировании соли тетразолия, фотометрируется при 500 нм. Концентрация
фруктозамина в образце пропорциональна абсорбции формазана.
Реагенты
Только для in vitro диагностики.
Реагенты хранятся в холодильнике при температуре 2>8 С и стабильны до срока
указанного на этикетке.
Компоненты набора
- Реагент А 8x6 мл
карбонатный буфер 200 ммоль\л pH 10.0
детергент
- Реагент В 8x6 мл
соль тетразолия 0.48 ммоль\л
Уриказа > 2500 U\1
-К алибратор 1x1 мл
концентрация указана на этикетке флакона
Приготовление рабочих растворов
Рабочий раствор : добавить содержимое Реагента А к Реагенту В. Аккуратно перемешать
несколько минут до полного растворения порошка. Раствор можно использовать через 10
минут.
Стабильность: 15 дней 2-8 С или 3 дня при 15-25 С в темноте.
Раствор калибратора: растворить содержимое флакона в 1 мл дистиллированной воды и
вьщержать 5-10 минут. Перед использованием хорошо перемешать.
Стабильность: 2 месяца при2-8 С или 6 месяцев при -20 С.
Пробы
Сыворотка или плазма с гепарином или ЭДТА Не использовать гемолизированные пробы.
Стабильность: 2 месяца при -20 С или 15 дней при 2-8 С или 3 дня при 15-25 С.
Аналитическая процедура
Длина волны измерения - 550 нм
Кювета (световой путь) - 10 мм
Температура - 37 С
Соотношение проба\реагент - 1\10
Тип реакции > по двум точкам
Фотометрирование - против дистиллированной воды
Перед началом работы все растворы нагреть до 37 С.
8 X 6 м л S E N T IN E L D ia g n o s tic s К а т. н о м е р 17.350
--- стр. 70 ---
С х е м а и з м е р е н и я
Бланк
реагента
Проба Калибратор
Дистиллированная
вода 100 мкл - -
Проба - 100 мкл -
Калибратор - - 100 мкл
Рабочий раствор 1 О О О мкл 1 О О О мкл 1О О О мкл
Смешивают, инкубируют 10 минут при 37 С и считывают
абсорбцию при 550 нм против дистиллированной воды А1 Бланка Реагента (А1-бр),
Пробы (А1-бп) и Калибратора (А1-бк). Инкубируют еще раз 5 минут при 37 С и
считывают абсорбцию при 550 нм против дистиллированной воды А2 Бланка Реагента
(А2-бр), Пробы (А2-бп) и Калибратора (А2-бк).
Вычисление результатов
Вычисляют Д А = А2 - А1 для Бланка реагента. Пробы и Калибратора
[(ЛА Пробы - АА Бланка реагентов)/(ЛА Калибратора - АА Бланка реагента)] х
Концетрацию калибратора = = цмоль Фруктозамина \ л
Нормальные величины
Здоровые (не диабетные) пациенты: < 2 8 5 цмоль\л
Каждой лаборатории рекомендуется вычислить свои нормальные величины
Линейность до 1 О О О цмоль\л
ПРИМЕЧАНИЕ
1. Если концентрация фруктозамина выше 1000 цмоль\л - разведите пробу в 2 раза
физиологическим раствором и результат измерений умножить на 2. (или более).
2. Пропорциональное увеличение объемов реакции не изменяет результатов
измерений
3. Хорошие результаты получаются даже если растворы слегка окрашены.
4. Мочевая кислота и линемия не влияют на измерения.
5. Билирубин до 2 мгМОО мл, Гемоглобин 100 мгМОО мл и Аскорбиновая
кислота до 3 мгМОО мл не влияют на измерения.
--- стр. 72 ---
J
--- стр. 73 ---
■ »
цинк
Принцип метода Цинк, в буферной системе при pH 8,6, формирует со специфическим
комплексоном 5-Br-PAPS стабильный окрашенный комплекс, интенсивность окраски
которого пропорциональна количеству цинка в пробе. Интерференция, благодаря
олигоэлементам присутствующим в пробе, снижается благодаря использованию
специфических условий реакции и специфических маскирующих агентов.
Реагенты
Только для in vitro диагностики.
Реагенты хранятся в холодильнике при температуре 2-8 С и стабильны до сро
ка указанного на этикетке.
Компоненты набора
- Реагент А 5х 10 мл
буфер pH 8.6
добавки
- Реагент В 1 х5 мл
комплексон 5-Br-PAPS
- Реагент С 1 флакон
реакционные добавки
ложечка для реагента
- Стандарт 1x5 мл
концентрация 200 цгМОО мл (30.6 цмоль\л) или указана на этикетке флакона
Приготовление рабочих растворов
Раствор АС : добавить 1 маленькую ложечку Реагента С к Реагенту А. Аккуратно
перемешать.
Стабильность: 30 дней 2-8 С.
Раствор Хромогена: смешать 10 объемов Раствора АС с 1 объемом Реагента В
Стабильность: 10 дней при 2-8 С.
Пробы
Сыворотка или плазма только с гепарином. Не использовать гемолизированные пробы.
Моча - суточная
Семенная жидкость:
Центрифугировать пробу 3000 g 10-15 мин
Развести надо садочную жидкость 1:100 ф из. раствором
Учитывать фактор разведения при вычислении результатов
Аналитическая процедура
Длина волны измерения - 560 нм
Кювета (световой путь) - 10 мм
Температура - 26-30-37 С
5 X 10 м л S E N T IN E L D ia g n o s tic s К а т. н ом е р 17.255
--- стр. 74 ---
Соотношение проба\реагент - 1\20
Тип реакции - по конечной точке
Фотометрирование - против дистиллированной воды
Перед началом работы все растворы нагреть до рабочей температуры.
Схема измерения
Дистиллированная
Бланк
реагента
Проба Стандарт
вода 50 мкл - -
Проба - 50 мкл -
Стандарт - - 50 мкл
Раствор Хромогена 1000 мкл 1000 мкл 1 О О О мкл
Смешивают и считывают абсорбцию при 560 нм против дистиллированной воды Пробы
(As) и Стандарта (Ast). Окраска стабильна около 1 часа.
Вычисление результатов
(As/Ast) X 200 (Концетрацию стандарта) = цг Цинка \100 мкл
(As/Ast) X 30,6 (Концетрацию стандарта) = цмоль Цинка \л
Нормальные величины
Сыворотка/плазма
М ужчины/женщины: 6 8 - 107 цг\100 мл (10.4 - 16.4 |амоль\л)
Моча:
М ужчины/Ж енщины: 150 - 1200 цг\100 мл (2.3 - 18.4 цмоль\л)
Центрифугированная семенная жидкость:
2-10 мг/100 мл (0,3-1,5 ммоль/л)
Ка>едой лаборатории рекомендуется вычислить свои нормальные величины
Линейность до 2000 цг\100 мл
ПРИМЕЧАНИЕ
1. Если концентрация цинка выше 2000 цгМОО мл - разведите пробу в 2 раза
физиологическим раствором и результат измерений умножить на 2.
2. Пропорциональное увеличение объемов реакции не изменяет результатов
измерений
3. Для исследований использовать пробирки и стеклянную посуду промытую 1N соляной
кислотой и дистиллированной водой.
4. ЭДТА препятствует образованию комплекса
5. Для гемолизированных и липемических проб - к 50 мкл пробы добавляю т 1 мл Раствора
АС и считывают абсорбцию против Раствора АС.
--- стр. 75 ---
V
В с е г о п р о ш н у р о в а н о , /
п р о н у м е р о в а н о ^
( л и с т о в )
Г е н е р а л ь н ь т ^ г ^ ф е к т о р
--- стр. 76 ---
G6P-DH
П ринцип м етода Активность Глюкоза-6-Фосфат Дегидрогеназы (G6P-DH)
определяется измерением кинетики увеличения абсорбции при 340 нм , благодаря
расщеплению N AD P+ в следующей реакции:
G 6 P D H
G-6-P + NADP+ ГЛЮК030-6-Р + NADPH + Н+
Реагенты
Только для in vitro диагностики.
Реагенты хранятся при температуре 15-30 С и стабильны до срока, указанного на
этикетке.
Компоненты набора
- Реагент А 1 х 100 мл
Триэтаноламиновый буфер pH 7.6 37.7 ммол\л
ЭДТА 3,8 ммол\л
- Реагент В лиофилизированный 1x2 мл
NADP 0,37 ммольУл
“ Реагент С лиофилизированный 1 х 2 мл
G6PDH 0,58 ммоль\л
“ Реагент D 1x20 мл
Дигитонин
Приготовление реакционных растворов
Раствор В: растворить содержимое флакона Реагента В в 2 мл бидистиллированной воды.
Стабилен 4 недели в холодильнике 2-8 С.
Раствор С: растворить содержимое флакона Реагента С в 2 мл бидистиллированной воды.
Стабилен 4 недели в холодильнике 2-8 С.
Пробы
Сыворотка или плазма , эритроциты без гемолиза.
ПОЛУЧЕНИЕ ПРОБЫ ЭРИТРОЦИТОВ
Промыть 0,2 мл крови 2 мл 0.9% NaCI (физ. Раствор). Центрифугировать после каждой
промывки 10 минут при 3000 об\мин. Процедуру повторить 3 раза. Последний осадок
суспендировать в 0,5 мл Реагента D и затем поставить на 15 минут при 4С и затем
центрифугировать вновь. Использовать 0,015 мл
супернатанта (надосадочной жидкости) для исследований в течении 2 часов.
Аналитическая процедура сыворотка или плазма
Длина волны измерения - 340-334-365 нм
Кювета (световой путь) - 10 мм
Температура - 25-30-37 С
100 м л S E N T IN E L D ia g n o s tic s К а т . н о м е р 17.005
--- стр. 77 ---
Тип реакции - кинетика, против воздуха
Схема измерения
25 - 30 С 37 С
Реагент А 1000 мкл 1000 мкл
Раствор В 50 мкл 50 мкл
Сыворотка\плазма 500 мкл 250 мкл
Смешивают, выдерживаю т 10 минут - и добавляют:
Реагент С 25 мкл 25 мкл
Смешивают, считывают начальную абсорбцию и немедленно вклю чаю т отсчет времени.
Повторяют считывание абсорбции через 1, 2 и 3 минуты. Вычисляют изменение
АА\минуту
Вычисление результатов
G6P-DH активность (mU\l) в сыворотке и плазме
25 - 30 С 37 С
841 X АА\мин при 340 нм
858 X ДА\мин при 334 нм
1514х ДА\мин при 365 нм
500 X АА\мин при 340 нм
510 X АА\мин при 334 нм
900 X АА\мин при 365 нм
Аналитическая процедура для э р и т р о ц и т о в
Определите число эритроцитов\мл крови
Длина волны измерения - 340-334-365 нм
Кювета (световой путь) - 10 мм
Температура - 25 С
Тип реакции - кинетика, против воздуха
Схема измерения
25 С
Реагент А 1000 мкл
Раствор В 30 мкл
Г емолизат 15 мкл
Смешивают, выдерживают 5 минут - и добавляют:
--- стр. 78 ---
Реагент С ____________________15 мкл___________________________________________________
Смешивают, считывают начальную абсорбцию и немедленно включают отсчет времени.
Повторяют считывание абсорбции через 1, 2 и 3 минуты. Вычисляют изменение
АА\минуту
Вычисление результатов
G6P-DH активность (mU\l) в эритроцитах
m il эритроцитов\мл крови* = 33650 х АА\мин при 340 нм
mU эритроцитов\мл крови* = 34304 х ЛА\мин при 334 нм
mU эритроцитов\мл крови* = 60571 х ДА\мин при 365 нм
9
Вычисление активности G6P-DH на 10 эритроцитов необходимо для сравнения с
нормальными значениями, т.к. количество эритроцитов вычисляется в 1 мл
9
Крови (например, для значения 5.3 х 10 эритроцитов\мл, активность делится на
коэффициент 5.3 ).
Нормальные величины
СывороткаШ лазма 0-0,18 т и \м л
9
Эритроциты : 131 + 13 mU\10 эритроцитов
ПРИМЕЧАНИЕ
1. Если изменение абсорбции в минуту превышает значение 0,030 при 365 нм или 0,060
при 334\340 нм, необходимо развести 0.2 мл сыворотки, плазмы или гемолизата 1.8 мл
физиологического раствора и результат измерений умножить на 10.
2. Если активность фермента очень низкая , измерение изменения абсорбции можно
проводить через 5 минут после первого считывания и полученное значение разделить
на 5.
3. Реагент А содержит азид натрия.Избегать контакта с кожей и слизистыми.
--- стр. 86 ---
--- стр. 87 ---
а-1-АНТИТРИПСИН
П р и н ц и п метода Определение а - 1-А нтитрипсина человека основано на взаимодействии
между а - 1-А нтитрипсином , ка к антигеном и специфической сы вороткой, ка к антителом.
Образующийся нерастворимый комплекс изменяет мутность раствора, которая измеряется
спектрофотометрически при 340 нм.
Реагенты
Только для in vitro диагностики.
Реагенты хранятся в холодильнике при температуре 2-8 С и стабильны до сро
ка указанного на этикетке.
Компоненты набора
- Реагент А Трис-буфер, П Э Г, pH 7.5 2x50 мл
- Реагент В антисыворотка анти-а-1-А нтитрипсина 2x1 мл
t - Реагент С Трис-буфер, pH 7.5, буфер разведения антисыворотки 1х 10 мл
ВНИМАНИЕ ! В набор не входит Калибратор
Необходимо заказать дополнительно Кат. номер 11.200D
Используется для количественного определения белков плазмы
турбидиметрическим методом. Концентрация указана на
этикетке каждого флакона.
Стабильность: после вскрытия флакона 4 недели при 2-8 С.
Подготовка Рабочего раствора
щ
- Раствор ВС: растворяют 1 объем Реагента В в 3-объемах Реагента С. Хорош о
перемешивают до образования однородного раствора.
Стабильность: 2 месяца при 2-8 С
Не замораживать Раствор ВС
Пробы
Сыворотка. П робы м огут храниться 4 дня при 2-8 С или 4 недели при -20 С.
Аналитическая процедура
Длина волны измерения - 340 нм
Кювета (световой путь) - 10 мм
Температура - 37 С
Длина светового пути - 10 мм
Тип реакции - турбидиметрия, против воздуха или дистиллированной воды
Перед исследованием все реагенты нагреть до рабочей температуры.
Схема разведения стандарта
SENTINEL Diagnostics Кат. номер 11.012D
--- стр. 88 ---
Раствор Номера калибраторов
1 2 3
Физ. Р-р
Калибратор
300 300
100 м кл
300 300
Разведение
последовательно переносим
из Номера 1 в Номер 2
из Номера 2 в Номер 3
из Номера 3 в Номер 4
из Номера 4 в Номер 5
по 300 м к л раствора
1\5 1\10 1\20 1\40 1\80
Концентрация
мгМОО мл
Схема измерения
4.2хС 2,1 X С 1,05 X С 0,525 X С 0,2625хС
С - концентрация в мгМОО мл
указана на этикетке упаковки
Бланк Проба Калибратор
реагента или контроль
Физ. Р~р 50 м кл -
Проба разв.(1:21) - 50 мкл -
Калибраторы - 50 мкл
1,2,ЗЛ5
Реагент А 900 мкл 900 мкл 900 мкл
Рабочий раствор ВС 100 м кл 100 мкл 100 мкл
Смешивают, выдерживают 10 м инут при комнатной температуре и считы ваю т абсорбцию
при 340 нм Проб, Калибраторов против Бланка реагента.
Вычисление результатов
--- стр. 94 ---
s .
В с его п р о ш н ур о в ан о
пронумерованного//,
(листов)'
Г е н е р а л ь н й й -д и р ^ е к то р ^
.А .
--- стр. 95 ---
♦
гамма-ГТ
5x50 мл SENTINEL Diagnostics Кат. номер 17.335
Реагенты
Только для in vitro диагностики.
Реагенты хранятся при температуре 15-30 С и стабильны до срока, указанного на
этикетке.
Компоненты набора
- Реагент 1 4x50 мл
трис-буфер
глицин-глицин
- Реагент 2 1x50 мл
ОСТОРОЖНО ВСЕ РЕАГЕНТЫ СОДЕРЖАТ АЗИД НАТРИЯ (0,095%)!!!.
Приготовление реакционных растворов
Метод Субстрат стартер: Реагенты 1и 2 готовы к использованию и стабильны до даты
указанной на этикетке.
Метод Проба стартер: Смешать 4 объема Реагента 1 с 1 объемом реагента 2
Стабилен 5 дней при ком натной температуре и 4 недели при 2-8 С.
Пробы
Сывортка, плазма с Э Д Т А не гемолизированные.
Аналитическая процедура
Длина волны измерения - 405 нм
Кювета (световой путь) - 10 мм
Температура - 25-30-37 С
Считывание - против воздуха или дистиллированной воды
Реакция - кинетика
Реагенты нагреваются до температуры постановки реакции.
Схема измерения Субстрат стартер
--- стр. 96 ---
Добавить в темостатируемую кювету;
Реагент 1 1000 мкл
Проба 100 мкл
Смешивают, инкубирую т 1 м инуту при рабочей температуре Добавляют
Реагент 2 250 мкл
Смешивают, считы ваю т абсорбцию через м инуту и вклю чаю т время и проводят
измерения после 1, 2 и 3 минут. Вы числяю т изменение А бсорбции/м ин
Вычисление результатов
приращение А /м ин х Ф актор = гамма-ГТ активности (U /L ) Ф а кто р - 1421
Схема измерения Проба стартер
Добавить в темостатируемую кювету:
Раабочий раствор 1000 мкл
Проба 100 м кл
Смешивают, считываю т абсорбцию через м инуту и вклю чаю т время и проводят
измерения после 1, 2 и 3 минут. Вычисляю т изменение А бсорбции/м ин
Вычисление результатов
приращение А /м и н х Ф актор = гамма-ГТ активности (U /L ) Ф актор= 1158
Нормальные величины
мужччины: 37 С ЗОС 25 С
10-50 7-35 5-25
женщины: 8-35 6-25 5-18
ПРИМЕЧАНИЕ
1 . Е с л и п р и р а щ е н и е А/мин в ы ш е ч е м 0,200 п о в то р и ть и зм е р е н и е с р а зв е д е н н о й 1 :1 0 ф и з р а с тв о р о м п р о б о й и
р е з у л ь та т ум но ж и ть н а 1 0 .
--- стр. 97 ---
ЖЕЛЕЗОСВЯЗЫВАЮЩАЯ СПОСОБНОСТЬ (ненасыщенная)
2x40 мл S E N TIN E L Diagnostics Кат. номер 17.251
П р и н ц и п метода Ненасыщенная связывающая способность определяется добавлением
в пробу известное количество железа, в условиях оптимальных для насыщения
трансферрина железом и вычислением разницы между добавленным и свободным
количеством (несвязанным белком) железа.
Реагенты
Только для in vitro диагностики.
Реагенты хранятся при температуре 15-30 С и стабильны до срока, указанного на
этикетке.
Компоненты набора
- Реагент А 2x40 мл
Трис-буфер pH 8.6
- Реагент В лиофнлшированный 1x10 мл
Ферен
- Реагент С сухой 1 пузырек
Аскорбиновая кислота
Небольшая ложечка для Реагента С
-Стандарт 1x10 мл
Железо 500 мкг\с11 ( 90 мкмоль\л )
Приготовление реакционных растворов
Раствор В: добавить к Реагенту В 10 мл дистиллированной воды, размешать до полного
растворения порошка. Стабилен 120 дней в холодильнике 2-8 С.
Раствор АС: добавьте 4 маленькие ложечки ( прилагается к набору ) Реагента С к 40 мл
Реагента А ; перемешайте до получения однородного раствора.
Стабилен 60 дней в холодильнике 2-8С.
Пробы
С ы воротка, без гемолиза.
Аналитическая процедура
Длина волны измерения - 593 нм (580-600 нм)
Кювета (световой путь) - 10 мм
Температура - 37 С
Тип реакции - конечная точка
Схема изм ерения
--- стр. 98 ---
Бланк
реагента
Проба Стандарт
Дистиллированная
вода
Проба
200 мкл
100 мкл
100 мкл
Стандарт - 100 мкл 100 м кл
Раствор А С - 1000 мкл 1000 м кл
Смешивают, выдерживают 5 минут при 37 С и считываю т
абсорбцию при 593 нм (580-600 нм) против Бланка реагента абсорбцию Пробы (Abs). И
добавляют:
Раствор В 50 м кл50 м кл50 мкл
Смешивают, выдерживают 5 минут при 37 С и считывают
абсорбцию при 593 нм (580-600 нм ) против Бланка реагента абсорбцию Пробы (As) и
Стандарта (Ast). Окраска стабильна 1 час.
Вычисление результатов
500 - [( A s-A bs)\A st] х 500 = мкграмм на 100 мл сыворотки
или
90 - [ ( As-Abs)VAst] х 90 ^ мкмоль на 1 О О О мл сыворотки
Общая связывающая способность - ненасыщенная + Концентрация
аеаёа9а а nuai6ioea
Нормальные величины
М уж чины : 150-250 мкграммМОО мл ( 27 - 45 мкмоль\л )
Ж енщ ины : 200-300 мкграммМОО мл ( 36 - 54 мкмоль\л )
Каждая лаборатория должна вычислить свои стандартные величины.
ПРИМЕЧАНИЕ
1. Пропорциональное сокращение объемов дозируемых жидкостей не изменяет
результат исследований.
2. Перед исследованием пробирки и стеклянная посуда должны быть промыты 1 N
соляной кислотой и дистиллированной водой