=== файл: Инструкция_руководство__dc111242_I.pdf ===
--- стр. 1 ---
О К П 93 9816
« У Т В Е Р Ж Д А Ю »
/ководитель компании>заявителя:
Генеральный директор
Бекмен Культер
Ян Поспишил
ИНСТРУКЦИЯ по ПРИМЕНЕНИЮ
«Реагенты in vitro диагностические для калибровки и проверки настроек
проточных цитометров»
Соответствуют требованиям национальных и международных стандартов
ГОСТ Р 51088-97, ГОСТ Р 51352-99
2010 г.
--- стр. 2 ---
/
L
4. П ри работе с этим реагентом ф »держ ивайтесь
принципов надпеж ацей лабсщгорной практики
(Н Л П ).
5 . Н е аспи(ж руйте ф луоросф еры непосредственно
и з ф лакона. Астрируйте флуоросф^ из
тестовую проби рку.
4. Добшьте в тестовую п р о б и р н су 15-20 капель (около
0.5 m L) FkJwCheck Pro nuorospheres.
ВАЖ НО: ЧТОБЫ ИЗБЕЖАТЬ ЗАГРЯЗНЕНИЯ И
ПОРЧИ. НЕ АСПИРИРУЙТЕ НЕПОСРЕДСТВЕННО ИЗ
Ф ЛАКО НА.
PN A 70450-A A
Проверка юстировки проточного ц 1стометра
ш
П Р Е Д П О Л А Г А Е М О Е И С П О Л Ь З О В А Н И Е
Ftow ^ Check Pro Fkjorospheres ^то суспензия
ф луоресцирую щ их микросф ер, используемая для
окедневной проверки оптической ю стировки
проточного цитометра Navios™ или FC 500 и струйной
системы.
К Р А Т К О Е И З Л О Ж Е Н И Е И О Б Ъ Я С Н Е Н И Е
При проведении проточного цитометрического
анализа выполняется ю стировка оптической
и струйной систем с целью максимальной детекции
ф луоресцентного и рассеянного сигналов.
Применение стандартизированных ф луоросфер для
проверки оптической ю стировки хорош о обосновано.’* ^
Flow^heck Pro представляет собой смесь различны х
типов ф луоросф ер. кая^м из которы х имеет
униф ицированные стабилыше размеры
и ф луоресцентную мтгенсивность. Единство
параметров позволяет проводить настройку и/или
проверку ю стировки оптической и струйной систем
проточны х 1^ пометров.
Р Е А Г Е Н Т Ы
Ftow ^ ^ ieck Pro Fkjorospheres
®A63493 - 3x10mL
С О С Т А В Р Е А Г Е Н Т О В
Flm ^Check Pro Fiuorospheies представляю т собой
смесь ф луоросфер размером 10 мт с диапазоном
ф луоресценции от 515 пт до 800 лт при возбуждшш
волной 488 П Л1, размером б рл1 с диапазоном
ф луоресценции от 640 ran до 800 П П1 возбуящ ении
волной 635 Л Л 1 . и размером 3 |jm с диапазоном
ф луоресценции от 400 ran до 500 пт лри возбуж дении
волной 405 пт. Эта смесь взвеш ена в водаом
растворе, содерж ащ ем сурфактанты и консерванты ,
гри обцей концентрации 2 х 1 0 ^ ф пуоросф ер/til
(номинальная гонцеифация).
п р е д у п р е ж д е н и я
1 . Этот продукт необходимо ислога> зовэть тогало
в форме орипмалыюй суспензии. Добавление
органических растворителей и т растворов
с высокой ионной силой может прюести
к необратимому увеличемю разм^ (} »1уоросф ер
или их аф ега^ рт.
г Фпуоросферы за догаш период хранения могут
осесть. Перед ислс№ зоватем убедапесь. что
фпуоросферы полностыо вомращены в cocTotw ne
суспензии.
3. Не испотзуйтефлуоросферы после истечомя
срока годности, ухгоанного на эпмвтне флакона
У С Л О В И Я Х Р А Н Е Н И Я И С Т А Б И Л Ь Н О С Т Ь
Этот реагент стабилен до истечения срока годности,
указанного на этжетке. лри хр^юти при 2-8*С. Н е
замораю геайте. М иним изируйте воздействие света.
8скр(лый ф лакон стабилен в течение 65 дней.
Вофытые ф лаконы после использования следует
хра«пъ в хоподилыше.
П Р И З Н А К И Р А З Р У Ш Е Н И Я
Н евозм ож ность получения ож идаемы х результатов
м ож ет свидетельствовать о нестабильное™ игж
разруш ении. П рисутствие двухверш инного гмка не
является обяэате;ьным признаком порчи продукта.
О братитесь к соответствую щ ем руковсдстван по
использованию гф ибора, чтобы получить информш^
о рабочих характеристиках и определении ож идаемы х
резуп> татов.
П О Д Г О Т О В К А Р Е А Г Е Н Т О В
По/^ товли не требуется. Ftow -Check Pro
Fkjorosphefes использую т прямо из ф лакона без
разведения. Перед прим енением необходимо
тщ ательно перем еш ать.
П Р О Ц Е Д У Р А
ПОСТАВЛЯЕМЫЕ МАТЕРИАЛЫ
Fkjw < :heck Pro Fluorospheres
l^A63493 - 3x10mL
МАТЕРИАЛЫ НЕОБХОДИМЫЕ. НО НЕ
ПОСТАВЛЯЕМЫЕ
Тестовые п р о б > ф к и соответствую щ его размера
П роточ№1й ф пометр
Вихревой смеситель
Процедура для ежедневной проверки
юстировки и струйной системы
1 . Д ля реплстрац ии соответствую1ф « х пгчиметров
ф луоресценции прим еняйте набор ф ильтров.
реком ендован№1Й производителем (см отрите
[^ ^ к о в о д ств о п о испопьзю анню прибора).
2. Использ]^ гротокоп тестировдаия
Floi»Check Pro Ркю гозрЬегез, содерж ащ ий
сднопараметричесхие тстограшы для гцвмого
рассеяния (FS) и каж до го необходимого линейного
параметра флуоресцек^и. Созд^ FCtAie
область сел№^, вклю чаоиогю частицы размером
1 0 pm . П одбер> ое сепасгор и линейны е
(^ рю параю тричесю е тстофаи1ш
флуорш^ем^, соответствуюи^ стим (488 ru n )
лазерным кталам. Создайте FCied область
селеп^. 8 к т> « ю щ у ю ч а с п щ ы раэи^хш 6 iJ n L
Подберите сел екттч) и линейны е
однопараметр1неаме пстофашш
ф луоресценции, соотмтствующие фасным
(635 пт) лазерны м канапам . Создайте FCviotet
обпасть cenext^ вклю чаю щ ую часп«^ разм^юм
3 pm . П одберите селапор и гамейные
однопараметричеоме пстофаммы
ф луоресцемф м, соответствуюи^ фиопетокли
(405 ran) пазимым каналам. Создайте /мнейную
обл асп> в к а зкд о й о^ ^ кш раметричесю й
пстопишю. Устаноопе цветовую ю мленсацию
на ноль (0) процентов
рря всех юмюнсафм
ф луоресценции. Устаномтеостамжку на 5 О О О
гейтироватых событт (см. рис. 1 ).
3. Энерп«но перем еш айте ф лакон с RowCheck Pro
Fbofospheres.
5. Перемеш айте на вихревом смесителе и
аслирируйте г^ ю б у с флуоросф ерами из тестовой
проб*ф ки,
6. О трегулируйте настройки соответствую щ его
детектора долж ны м образом, чтобы помесшть
каж ды й пик в утверж денном /^ (апаэоне
полож ения пика.
7. ЗалишпеНРСУигюпожениепикадпякахдога
требуемого параиетра
ПРИМЕЧАНИЕ: Для к»«ала прямого рассеяния
запиш ите только полупиковые коэф ф ициенты
вариации (HPCV) РсЫ ие областа (10 pm ).
8. Запиш ите еж еднев»л1е значения HPCV для
каж дого требуемого параметра на
соответствую щ ем ф аф име Levey-xJennings
(Л еви-Д ж едаингса).
ПРИМЕЧАНИЕ: При запуске протоколов BCI
Auto Setup Rov^ Check Pro, критерий PA SSrt= A IL.
наблюдатцийся в конце регистрации, представляет
показатеш HPCV. превы ш аю щ ие обозначеш ый в
названж (^асти протокола верхний предеп.
Проверьте данные контроля качества (ОС) по
Levey Jennings (Л еви-Д ж еннинп:).
9. Поспе запуска гф ибора повторите ш аги 1-8 .
10. Когда результаты «воодят за рамки ож1щ ае1№1х
ограничений, обратитесь к разделу Устранение
неисправностей.
О Г Р А Н И Ч Е Н И Я
1. Анализируемые гф и повы ш еш ю й скоросте потока
Fkjw-Check Rd Fkerospheres могут показывать
более иирокое распределение совокугш ости
и бопее высокие показатели HPCV.
2. Еж едневный анализ Ftow -Check Pro Fluorospheres
должен гроводиться, используя полож ения п ика,
полученные в разделе Процедура для еж едневной
проверки ю стировки и сфуйной системы.
У С Т Р А Н Е Н И Е Н Е И С П Р А В Н О С Т Е Й
1. Убедитесь, чго образец ф луоросф ер не бы л
раэбшпен мм загрязнен. Разбавление Flow-Check
Рта FluorospheiBS мож ет п|ж вести
к повы ш еню о показателей HPCV.
2. Убедитесь, что Fk)w < ;heck Pro Fkioro^)hefBs
хорош о лераиеш аны.
3. Проверьте отсутствие пузы рьков в оболочке
ф мльтра. Проверьте иэобрамения гистограмм
на нал»те сцм онаков засорения. Еспи вы
подозреваете нали^ зас(^ )ен ня ипи пузьф ька,
громойте или заправьте линию проб.
4. Подаобнее о действиях по устраненмо
неисгфавносг^ см. в руяоводстве п о
испольэ(жа«1ю п|М бора.
О Ж И Д А Е М Ы Е Р Е З У Л Ь Т А Т Ы
Каж дая лабфатория долж на утвердалъ собственные
ожидаемое диапзэшы на основамм гф именяемого
прибора, его настройки и условий энсллуатации.
Обратитесь к соответствую щ »» рукош здствам по
использованию прибора, чтобы получить инф ормаф яо
о рабма хграстеристиках. Для лсдочета и
(М1редел№ ия размера частиц используется
анатштор размеров частиц COULTER*.
1of3
--- стр. 3 ---
i результаты могут варьироваться
> ranu отличий приборов, как: цветовы е
, мощ ность лазера, длина вмшы лазерного
^ , — л, реж им лазера, тип прото^ ж ой ооветы,
'скорость доставш про^ и программа статистичеоЕой
обработки данны х.
С П Р А В О Ч Н Ы Е М А Т Е Р И А Л Ы
Еп1ялвгаЬоп of invnunotogicaey Defined Cel
Popuialkins by How Cytornelnr; A f^ M oved Guideine-
Second Edition. 2007. CLSi dociment H 42-A2.
Guxleiine for FkM Cytometx Invnunophenctyping:
A Report From № e Nalionai Insttute of Aiei^y and
In fB c fio u s Diseases. Divisioo of AIDS. 1993.
Cytom etry 14:702715.
3 1994 Revised Guidefnes for ttiePeilixmance of C04>
тч:е1 Detorrninalions in Persons w № H um an
Im m unodeficiency Virus (H IV) lnfedion.1994. M ortality
and Mortidity W eeW y Report (M M W R). 43:7-8.
Д О С Т У П Н О С Т Ь П Р О Д У К Т А
Fk)w < ^ heck Pro Fluorospheres
® A63493 - 3 X10 m L ф лаионы
Т О В А Р Н Ы Е З Н А К И
Л оготипы Beckm an CouM er, C01H.TER. Fk»^ied( и
Navios являю тся торговыми змаками Bedunan Coulter,
За допогмпельной инф ормацией или гцм полученм
поврехдеиной лродуяфм обращ айтесь в сервисный
центр компамм Bedunan Coufter по телефону
8(XV526-7694 (в СШ А W W Канаде) или саямпесь с
ваш им местным представителем юмлании
BeduDanCoUter.
I Bedunan Соийвг. In c.
М М 4300 N.Hartxx Blvd.
FtJerton.CA 92835
Hww.bedbnaocou«Br.com
E C I R E P I
Beckm an Couter Ireland № c .
Mervue Business Pa1(,
M ervue, GaiM ay,
1(353 91 774068)
Printed in USA
tin USA
e 2009 BedunmCouter. Inc
Boe права з а щ » « М № И ы .
2о13
--- стр. 4 ---
[Селеюдия FCblue@2.0]
[Селекция FCblue@2.0]
fL zm u H
[Селекция FCred]
0 1023
FL6 ШТ UH
[Селекция FCblue@2.0]
П.4ЖГиМ
[Селекция FCred]
8 1G23
¥иШ Ш
[Селекция FCblue@2.0]
FLSemW
[Селекция FCred]
СЛ
FL6@ 3.0 ^
'■ I ■ ' > '
FL7@ 3.0 ^
.. L
F L S ^ .O ^
___,...
a 1<ш
F L S iV T U H
[Селекция FCvioiet] [Селекция FCviolet]
3Gf3
--- стр. 5 ---
С€ ^^BBCKMANCDU7ER,
Флурросферы для стандартизации
проточного цитометра
Н А З Н А Ч Е Н И Е
Ф пуоросф еры Fbw-Set Pro —это q^cnewwi
ф луоресцирую иф м ммкросф ер, используемая
в процессе стандартизации п р о тт}> « о п } цкгометра
Navios™winFC500.
К Р А Т К О Е О П И С А Н И Е И О Б Ъ Я С Н Е Н И Е
В проточном цитометричесхом анашэе размер клеток
определяется в результате анализа характершик
рассеяния света, а иммуноф енотипирование клеток
выполняето! с помощ ыо специф ических антител,
связаншхс ф луоресценгаьш м красителем. Поэтому,
для обеспечения оллш1а га > н о й еж едневной работы
прибора важ но, чтобы п^ > ам етры рассеяния света
и ф луоресценции, получаемые прото> «ш м ф пометром,
были стандартизованы. Ф луоросферы имрою
применяю тся дпя стандартизации интенсивности
рассеяния саета, интенсивности ф луоресценции
и получения олтималыю й г> м и > од инам ичесю й
ф окусировки.’'®
Стандартизацию прибора следует выполнять с теми
ж е настройками детектора, что и при исследовами
проб.' В ка зц д о й лаборатории следует опредеттъ
оптималым для нее настрот* приборов и установил»
«кеднееные зн ач ен и я.^ Флуоросферы м ож но
использовать для стандартизации трех типов
п^ )аметров лроточнол) цитометра: интенсюности
рассеяния света, интенсивности ф луоресценции
и пуфодинамическои ф окусировки. Эти параметры
прибора мож но стандартизировать,
(ящ р/зтю (ф ямое
рассеяние (FS). боковое рапеянне (SS). интенсивность
ф луоресценции, а такж е полупиковы й коэф ф ициент
вариацт (HPCV) во время тестирова«п ф луоросф ер
с испопяэоватем настроек 1р4бора, спе(9вгк]»|х]вгн«х
дпя лаборатории и прилож ения. И зм ере» « « е настроек
прибора, необходимы х для получения значений
каязд ого из требуемых параметров ф луоросф ер.
м ож но использовать при еж^ф««юм мониторинге
характеристик прибора.
П Р И Н Ц И П Ы Т Е С Т А
Характеристиш данного реагента зшсят от
возм оокности проточюго цитометра 0фе!депяп1
размеры частиц и ф л уо р есц е н т> « >1е сишалы
разны х длинах волны . Ф луоросферы Flow-Set
представляю т собой cycnetmw часткщ с одинаювым
стаби1№ № т размерам и одинакокж инт»сишлстыо
(|»1уоресценфм. Стабнгаьм остъ даншх параметров
продукта позволяет выполмпь станд^гтизацио
настроек прибора (расоеяме света и интенсивность
ф луоресценции), используемых при ютнествшюм
анализе человечеспа лейкоцитов.
Р Е А Г Е Н Т Ы
Ф луоросф еры Row-Set Pro
1^А63492-Зх10п1флаконы
С О С Т А В Р Е А Г Е Н Т О В
Реагент Ф луоросф еры Flow-Sel Pro состоит из
попистиропьны х ф луоросф ер номиналыьм
/и « ам етро м 3 pm во взвеш енной водной среде,
содерж ащ ей поверхностн о^ акти вн ы е ве1цества и
ю нсерванты , с концентраф ю й
1X
W ф луоросф ер^ тС (номинальная концентрация).
Д иапазон ф лу(^ )есц внгаого излучения содертгащ ихся
в ф лус^ ю сф ерах красителей нахо/^ пся в пределах
515-800 пт, 640-600 пт и 400^ пт гри возб^ |дании
лазером с длиной воты 488 пт, 633-638 пт и 405 ш
соответственно,
П Р Е Д У П Р Е Ж Д Е Н И Я
1 . Этот гродуетдолж ен быть использован только
в его взвеш енной среда. /^ )бавление органических
растворителей или растворов с вы сокой
концентрацией ионов м ож ет вы звал > необрэгтюе
разбухатю или арегацию ф луоросф ер.
2. Ф луоросф еры оседаю т при хранении в течение
длительного периода Перед использованием
убедитесь, что ф луоросф еры полностью
ресуспендированы .
3 . Во время хранеюп не подв^>г£^ ф луоросф еры
воздействию света
4. Не йою пьзуйте ф луоросф еры после истечения
срока годаос™ , указанного на этикетке флакона
5 . Н е используйте ф луоросф еры , разттые по
тестовым пробиркам более чем 3 часа
6. П ри работе с этшреа1ентомф1 4держ ивайтесь
ф инципов надпеж ацей лаборапрюй практм си
(GLP).
У С Л О В И Я Х Р А Н Е Н И Я
Этот реагент стабилен до истечения срока годности,
указанного на этж епсе, гф и хранении при 2-8*С. Не
зам ораж ивать. Свести к минимуму воздействие света
Содерж имое откры ты х ф лаконов стабшшю в течение
65 дней. О ткры ты е ф лаконы после испопьзов»жя
должш храмт>ся охлажде»тши. Ф луоросф еры ,
разлиты е по тестовы м пробиркам , необходимо
вы бросить после 3 часов.
П Р И З Н А К И Р А З Р У Ш Е Н И Я
П о явл е^ вю вторичны х ф луоресценш ых лопуляцум ,
ащвржаащ более 2 0 % от общ ей популяции, мож ет
указьаатъ на разруш ение; в этом случае гф одукт
испот> эоватъ нельзя.
П О Д Г О Т О В К А Р Е А Г Е Н Т О В
Перед использоваием ф луоросф еры Fkw-Set Рта
необходам о пцатш ъно пероую ш ать. Г^ ю б ы в тестовы х
пробирках необходимо перемеш ать на вихревом
смесителе. Не используйте ф луоросф еры , разлиты е
по тестмым п р о б » ф кам более чем 3 часа Д ругие
действия п о подготовке гф об не нуж № .
П Р О Ц Е Д У Р А
ПОСТАВЛЯЕМЫЕ МАТЕРИАЛЫ
Ф пуоросф еры Flow -Set Pro
^ А63492 - 3 X10 m L ф лаконы
НЕОБХОДИМЫЕ, НО НЕ ПОСТАВЛЯЕМЫЕ
МАТЕРИАЛЫ
Тестотые про^ ф ки соответствую щ его рашера
П роточны й цитом етр,
коревой смеситель.
Процедура установки целевых диапазонов,
высокого напряжения (ВН) и усиления
ПРИМЕЧАНИЕ Используйте эту процедуру дпя
установки целевых № < а п а эо н о в , ВН и/или усиления
параметров ф луоресценции и/или рассеяния света
г ч > и стандартиза4ии припозкения реагента Если
испотыуется автомалю ированная система проточной
цитометрш IVD Весклтап Со(Д ег. то целевые диапазоны
устанавливать не нуж но. п о ск о /а > к у их значения дпя
кахщ р й n^ m m вкпючеш в бламс анализа этого набора
1 . Убедитесь, что проведена оптимальная ю стировка
проточного цитометра.
2 Д ля по1^ чения параметров ф п уо р есц е» « {и и , которы е
требуется анализировал!, испагьзуйтв ф ильтры ,
рвюмендованные изготовителем (см . в инструкции
по ислогъзоваш ю прибора или вклады ш в упаковке
реашта).
3.
a. Для диапазонов флуоресцен(и1ии/или
расж1ния света:
Используя соответствую щ ий протокол теста,
обработайте окраш енную пробу, которая
отдерж ит отрицательную ф луоресцентную
популяцию (популяции), напр., кзотипические
контропьны е кпетхи, и отрегулируйте параметры
вы сокого напряж ения и усиления для прю ю га
рассеяния (FS) и бсш ю ого рассеяния (SS),
чтобы оптимизировать разреш ение всех
кластеров лейкоцитов. Установите высокое
напряж ение (ВН) соответствую щ ей
ф луоресценции в полож ение отрицательной
ф луоресценции в конце первого десятка
Запиш ите настройки гф ибора дпя параметров
FS, S3 и флуоресцюции.
b. Для селекции CD45;
Используя соответствую щ ий протокол теста,
обработайте гф обу, окрашемую реагентом
моноклональных антител, содерж ащ им С045.
О трегулируйте параметры вы сокого напряж ения
и усиления бокового раосежия (SS)
и ф луоресценции CD45, чтобы оптимизировать
рззршение всех кластеров лейю цитов.
Запиш ите настройки n p t^ 5 o p a для параметров
53 и 0045. Таю ке необходимо записать
показатели лаборагорм!, установленные на
этапе За дпя высокого напряхсения
ф луоресценции.
4. Создайте для ф луоросфер протокал в вида
однопараметричесш х пстофамм для Kaxwro
требуемого п г|> ам етра рассеяния саета и логариф ма
ф луоресценции. Назначьте область пктофаммы
FS в к»естве селектора дпя гистограмм SS
и л»а(тфма ф луоресценции. Создайте линейную
область (курсор) в каж дой пстофамме (см. рис. 1 ).
5. Введите настройки прибора, огч}« дю1енные выш е
на этапе 3. Установите цветовуп компенсаф но ка
0 % дпя всех парам етров ф г^ оресцем ф м . Устаювиге
для параметра ф луоресценции значение остановки
на to О О О собы тий.
6. Энертично перемеиайте фгшон с ф пуоросф ерами
Flow-Set 1^. Добавьте в тестовую n p o i6 H p K y
15^ ка п е п > (ою ло 0,5 п1) ф луоросф ер FkiwSet Па
ВАЖ НО: ЧТОБЫ ИЗБЕЖАТЬ ЗАГРЯЗНЕНИЯ И
ПОРЧИ. НЕ ИСПОЛЬЗУЙТЕ ФПУОРОСФЕРЫ,
РАЗЛИТЫЕ ПО ТЕСТОВЫМ ГР06ИРКАМ БОЛЕЕ
ЧЕМ 3 ЧАСА НАЗАД
7. Перемаиайте на вихрюом смеогтепе
и проа№ № пш руйте г^ ю б у с < { » т у < ^ )о с ф е р а м и .
8. Еспи необходима, отретушруйте область FS таким
образом, чтобы внутри области оказалась основная
полуля1ф б1 ф луоросф ер. Еом необходимо,
отрегулируйте диоЕрммнагор FS тапм образом,
чтобы внутри области оказалась основная
питуля^ в» FS. Убедитесь, что курсх^ располоявн
to»3
--- стр. 6 ---
г
напротив пиков популяций дня всех необходимых
параметров.
i Запиш ите значения X-Wate (интенсивности пикш )
/ всех требуемых параметров.
1 0 . П овторите действия от этапа 3 до этапа 9. пропустив
этап 4, и sapem cTpifXw aB 20 точек данны х. rbnyW
данные в разные промеж утки времени после
нагревания и ю стировки прибора на протяж ении,
как минимум, 5 дней (убедитесь, что настройки
записаны , как указано в ш аге 9 ). После регисграф м
20 точек данных подсчитайте среднее зн»вние
X-Mode для необходимых параметров, которы е
будут целевы ми диапазонами. Для пш1уч е1§п
инф орм ации о введении установленных целевы х
диапазонов в мастер опредепения 1ф илож ения для
статартиза!^ смотрите соответствую щ ие
инструкции по использованию гф ибора. Указания
по установке ш ирины области пр1® едены
в соответствую1цей инструкции по использованию
прибора Рассчитайте и заташ мте д иапазон среднее
±2SD или ± 1% (в зависимости от того, что больш е)
для ВН/и/или усиления хаяздого параметра.
11. Используйте диапазон среднее i2S0 или ± 1 % для
создания граф ика Л еви-Д ж еннингса для ка я зд о го
требуемого параметра.
12. Для казедого параметра девяносто пять процентов
(95% ) значений должны попасть в диапазон ±280
ипи ± 1 % (в зависимости от того, что болы ие)
диапазонов ВН и/или усиления.
1 3 . Повторите этапы 1-12 для каж дого нового
гф илож ения. трвбую1цвго различных установок
прибора, а такж е каяады й раз. когда значитвлы ю
меняю тся сишалы рассеяния или ф луоресценции
(напрм иер, г^ смене ф огоолекф онного ум ноим теля,
ю стировке лазера, и тд.).
14. После установки целевых даапазонов параметров
саегорассеяшя и ф луоресценции, а такж е
диапазонов ВН и/или усиления прибора, перейдите
к Прочвдуре ежедневной ста> «артизации прибора.
Процедура ежедневной стандартизации
прибора
1 . Убедитесь, что проведена оптимапыая ю стировка
проточного цитометра.
г Дня получения параметров ф пуоресче«ф «.1соторы е
т|зебуе7ся анапизировэть. иотвпьзуйте тошю
рекомендуемые фитьтры (см. инструкции по
использованию прибора или вкпадыш в упаковке
реагента).
3 . Выберите гчхлокоп анализа ф пуоросф ер
Flov^ Pro (см. этап 4 Процедура установки
целевых диапазонов, выооюго напряж ения и
усиления).
4. Энергично перемеш айте фпаюн с ф пуоросф ерами
Fkw^SetPro-
5. Добавьте в тестовую пробирву 15-20 капепь
(около 0,5 m L) флуоросфер Flow-Set Pro.
ВАЖ НО; ЧТОБЫ ИЗБЕЖАТЬ ЗАГРЯЗНЕНИЯ
И ПОРЧИ, НЕ ИСПОЛЬЗУЙТЕ ФЛУОРОСФЕРЫ,
РАЗЛИТЫЕ ПО ТЕСТОВЫМ ПРОБИРКАМ БОЛЕЕ
ЧЕМ 3 ЧАСА НАЗАД.
6. Перемеш айте на вихревом смесителе
и проанализируйте п(»6у с ф пуоросф ерами.
7. П ри ислолловами Auto следуйте укамниям
инструкций по использованию прибора, чтобы
проверить ооответствую и9< й автоматтеские
настройки. П ри использовании протокола ручю й
стандартизации, настройте установки при^
так1м образом, чтобы кая ад ы м гик флуоросфер
находился в целеаомд иапазоне. определенном
■ лабораторт
(СИ. П роцедуру установки целевых диапазонов,
высокого напряж ения усиления).
8 . Запиш ите знаме»в|Х-М о(*е (интенсивности пию е).
высокого налршеммя м Ги п и усиления всех
требуемых параметров 8 ежедиевшй ж урнал.
9 . О тметьте значения ВНиАим усиления для к а )1зд о го
требуем ого парам етра на соответствую щ ем граф ике
Л ев(^ Д ж ен н и кгса.
1 0 . Д ля каящ о го параметра дев»юсго пять процентов
(9 5 % ) значений долж ны попасть в диапазон ± 2SD
или ± 1 % (в зависим ости оттого, что больш е)
диапазонов № и/и л и усиления. Есгм значения
вы ходят за границ ы диапазона, см. раздел
УСТРАНЕНИЕ НВ1СПРАВН0СТЕЙ.
1 1 . Ежеф «вно повторите действия этапов 1-10.
Процедура проверки при изменении партии
ПРИИЕЧАНИЕ: И спользуйте эту процедуру при
изм енении партий ф луоросф ер Fbw-Set Pro. Чтобы
определить средние целевы е диапазоны , ВН и/кпи
усиление для новой п артии, параллельно обработ^
старую и новую пг^тм в соответствии с гф иняты м и
в лаборатории процедурам и. Если используется
автом атизированная система проточной цигом етрии
IV D Beckm an Соийег, то нет необходимости проводить
(ф оверку при изм енении партии. См. таб л м ^ у настроек
целевы х значений пр)< пож етя для отделыю й п^тм.
I. Убедитесь, что проведена отималы1ая ю стировка
проточного цитометра
г Д ля получения параметров ф луоресценции
и свегараосеяния, ю гары е требуется анагизировагь,
используйте только рекомендуемы е ф ильтры
(см . инструкции по использованию грибора ипи
вклады ш в упаковке реагента).
3 . Вы берите текущ ий протокол стандартизации,
используем ы й в лаборатории. И спользуя текущ ую
партию ф луоросф ер Fkw ^ Set Pro, проводите
еж едневную процедуру стандартизации. Загмш ите
значения X-M ode (интенсивности пиков), высоито
напряж ения иЫ* усиления всех требуемых
парам етров в ежедневшй ж урнал.
4. Энергтно перем еш айте ф лакон новой партии
ф луоросф ер Ftaw ^ S et Pro.
5. Д обавьте fi тестовую гф обирку 15-20 ка п е хть (около
0,5 ml) ф луоросф ер Flow-5^ Pro из новой п^тии.
ВАЖНа ЧТОБЫ ИЗБЕЖ АТЬ ЗАГРЯЗНЕНИЯ
И ПО РЧИ. НЕ ИСПОЛЬЗУЙТЕ ФЛУОРОСФЕРЫ,
РАЗЛИТЫЕ ПО ТЕСТОВЫМ ПРОБИРКАМ БОЛЕЕ
ЧЕМ 3 ЧАСА Н АЗАД .
6. Перемеш айте на вихревом смесителе
и проанализируйте пробу с ф луоросф ерами.
7. О бработайте ф луоросф еры Flow-Set Pro из новой
партии с тем и яе настроташ, ка и на этапе 3,
вы ш е. Убедтесь, что облает располож ены вокруг
п и ко в попул яц ий дпя всех необходтьа парам етров.
8. Замшите эначти X-M ode (интйсивности пики)
всех требуемы х парам етров.
9. После повторны х регистраций необходимы х
значемм, подсчкт^ и запиш ите средаее
значение X-M ode и опредегж те цепюые
диапазоны для кахщ ого параметра согласно
инст1^ гщ иян п о исло№ зова«ио прибора.
1 0 . П еренесите новы е целевы е каналы в n poT tM on
ф луоросф ер Fkiw-Set Pro. Если необходааю ,
отр«улируйте полож ение области, чтобы оно
соответствовало новый целевым каналам. Для
получеш и тформафм о модафжафм
устаняленм>1х целевы х диапазонов в мастере
определении прилож ения для стандартизации
смотрите соответствую щ ие инструкции по
ислогъзованию г^ мбора Указания по установке
Ш1фит обпасти сфиведет в соответствую щ ей
инструкции п о иаю льэованию фибора
II. И спользуйте но»1Ю целевые/^(апазты гцт
вы полнении 1^ ю цедуры еж едневно*
стандартизации прибора
О Г Р А Н И Ч Е Н И Я
1 . Установки [ф ибора варыф ую тся в зависимосш от
метода подготовки пробы и долж ны выставляться
соответственно. В каедой лаборатории следует
олредетть свои собственные диапазоны для
1О1Ц Д С К0 используемого прибора, метода
no/vvroBKH г^ ю б ы и флуорео^нтного красителя.
У С Т Р А Н Е Н И Е Н Е И С П Р А В Н О С Т Е Й
1 . Убедапесь, Ч Т О образец не был разбавлен или
загряж ю н.
2. Убедитесь, Ч Т О флуоросферы Fto w ^ S et Pro хорош о
перемеш аны .
3. Приерьтеотсутстдаепотышенного количества
пузырьюв в оболочке ф ильтра. Если вы
подозреваете наличие засорения ипи пузы рька,
промойте или заправьте ганию проб.
4. Дпя допол»1тепьных гчю цвдур по поиску
и устранению неисправностей обраттесь
к инструкциям по использованию приборов.
5. Убедитесь, что дискриминатор FS настроен таким
образом, чтобы полностью отображ ать основную
популяцию 3 ит фпуоросфер.
6. Есгм более 5 % показателей находятся вне
установпенного диапазона, ваш а лаборатория,
возмож но, долж на установить свои собственные
диапазоны. См. Процедуру установки целевых
диапазонов, высокого нагф яж ения и/или усиления.
С П Р А В О Ч Н Ы Е М А Т Е Р И А Л Ы
1. Enuroeration of inminologicaay Defined Ceil
Populations by Fk)w Cytom etry; Approved Gudefrie-
Second EdH ion. 2007. CISI docunent H42-A2.
2. Gi^efine for flow cytom etric im m unoptienotyping:
A report from the Natianalkistitute of ABergy and
tnfec6ous Diseases. Division of AIDS. 1993.
Cytonretry, 14:702-715.
3. Guidelines for Perform ing Single-PSalfonn Absolide
CD4+T-Cei Oetem vn^ions w № C045 Gating for
Persons Infected w itfi H um an Im m unodeficiency Vim s.
January 31,2003. MMW R 2003; 52 (N o. RR-2):1-15.
Ф О Р М А П О С Т А В К И П Р О Д У К Т А
Ф луоросф еры Fk}w -Set Pro
® A63492-3X lO n lф лаконы
Т О В А Р Н Ы Е З Н А К И
Л оготипы Becknian СоиЙ ег. Fk)w-Sd и Navios
торговыми знасами Bectunan Coulter, (n c.
За дополнительной информаций игт при получении
гю врезедённой гродукции обращ айтесь в сервисный
центр юмпэми Beckm an Coufter п о тепеф ону
800-526-7694 (в СШ А ипи Канаде) или <
с ваиш местным гф едставителем компании
Beckm an С оиК ег.
* *. laeckman Codter, he.
М М 4300 N. Harbor Blvd.
FtjBerton,CA 32835
w ivK bedbm ancoutterairn
иш R E P
Beckm an Coutter Ireland Inc.
Mervue Business Park,
Mennje.Ga)way,
Iretaid (353 91774068)
Pri^inUSA
Made in USA
О 2009 Beckm an Couter, k)c.
Bee права защ мцены.
2of3
--- стр. 7 ---
Д ' «сунок 1: Пример протокола прибора при использовании флуоросфер F lo w ^ Pro во время стандартизации проточного цитометра для
/есятицветного анализа.
[ Б Е З С Е Л Е К Т О Р А ]
О 1 9 2 3
f s m i M
[ С С Е Л Е К Т О Р О М Н А F S P R O ]
§
FUmtLOG
[ С С Е Л Е К Т О Р О М Н А F S P R O ]
F 1 5 W T L 0 G
{ С С Е Л Е К Т О Р О М Н А F S P R O ]
I
[С СЕЛЕКТОРОМ НА FS PRO]
1623
SSITTIJN
[С СЕЛЕКТОРОМ НА FS PRO]
FUM TtOG
(CCEIffiKTOPOMHAFSPRO]
aeWTLOG
[С СЕЛЕКТОРОМ HA FS PRO]
[C СЕЛЕКТОРОМ HA FS PRO]
i 1 fid 1> G
s s j F t1
FSPro
■ J------------------ . . ,
1
F L 1 W T L 0 G
[C СЕЛЕКТОРОМ HA FS PRO]
1
FL2 . FL3 , FL4
n .4 lir r L 0 G
[C СЕЛЕКТОРОМ HA FS PRO]
g b.
X
“ i
FL8 ^ R -7.
.....W “
П 7 MT tOG
[C СЕЛЕКТОРОМ HA FS PRO]
4 “
F t e , F L 9
■
R L 1 0
....W .... " ‘’■W' ” 1 #
F U llV T L O G F U M T L O G FLIdMTLOG
3of3