--- стр. 1 ---
Д е л ф и я Т р и и о д т и р о н и н ( Т З )
D E L F IA T r i i o d o t h y r o n i n e ( Т З )
Ф л ю р о м е т р и ч е с к и й а н а л и з с р а з р е ш е н и е м п о в р е м е н и д л я к о л и ч е с т в е н н о г о
о п р е д е л е н и я т р и и о д о т и р о н и н а ( Т З ) в с ы в о р о т к е к р о в и ;
Производитель - WALLAC Оу, Финляндия
Для диагностического применения in vitro,
Д Л Я П Р И М Е Н Е Н И Я В IN V IT R O д и л г а о с т и к Е
96 О П РЕ Д Е Л Е Н И Й
Н А ЗН А Ч ЕН И Е:
Н абор предназначен для определения три иодотирон ин а(Т З) в образцах сы воротки крови человека. П ринцип
основан на им м уноф лю оресцентом анализе, в котором определяем ая м олекула антител к ТЗ взаим одействует
по типу реакции антиген антитело с сорбированны м и на поверхности план ш ета антигеном против антител к ТЗ
и вторы ми антителам и, м ечены е ф лю оресцентной меткой. В результате реакции образуется
вы сокоф лю оресцентное соединение, концентрация которого оп ределяется на приборе-ф лю ором етре
Д Е Л Ф И Я /В И К Т О Р. К онцентрация оп ределяем ого ф лю оресцирую щ его соединения прямо пропорциональна
количеству антител к ТЗ в образцах сы воротки крови человека.
С ОСТАВ Н А БО РА :
1 .ТЗ стандарты ; 1.4м л(ф л); К -во 6 шт.
2.T3-EU раствор. В о ф лаконе, лиоф иллизированны й. К -во - 1 шт.
3.А нти-ТЗ раствор(м ы ш ин ы е м оноклональны е) 0.7 мл(фл). К -во - 1 шт.
4. П ром ы вочны й концентрат 40 мл, 1 шт.
5.ТЗ инкубационны й буф ер; 50 мл(ф л). К -во - 1 шт.
6. У силиваю щ ий реагент: 50 мл, 1 шт
7.А нти-мы ш ины е м и кротитрационны е стрипы ; 96 луночны е; К -во - 1 ш т
ПРИНЦИП МЕТОДА:
ДЕЛФИЯ ТЗ определение основано на твердофазном, флюороиммуном определении с
разрешением по времени на основе конкуренции между меченым европием ТЗ и ТЗ в тестируемом
образце за ограниченное количество мест связывания на ТЗ -специфических моноклональных
антителах (мышиные). Стандарты, контроли и образца пациентов, содержащие ТЗ ингибируют
связывание меченого европием ТЗ с антителами. Блокирующие агенты в ТЗ инкубационном буфере
предотвращают выделение ТЗ из связанного с белками состояния. Второе антитело
взаимодействующее с анти-мышиными антителами, которые покрывают поверхность лунок и
представляют твердую фазу, определяя высококачественное разделение антител-связанных и
свободных антигенов ТЗ, В этом определении только одна инкубационная ступень.
Усиливающий раствор диссоциирует ионы европия из меченого ТЗ в раствор, где они
формируют высокофлюоресцентные хелатные комплексы с компонентами усиливающего раствора.
Флюоресценция каждой лунки в последующем измеряется. Флюоресцентный сигнал каждого образца
обратно пропорционален количеству ТЗ в образце.
Каждый ДЕЛФИЯ ТЗ набор содержит реагентов необходимых для 96 определений.
Срок годности набора указан на внешней стороне коробки. Хранение при +2+8 С.
--- стр. 2 ---
МАТЕРИАЛЫ НЕОБХОДИМЫЕ, НО НЕ ПОСТАВЛЯЕМЫЕ
С НАБОРОМ:
Данный набор является частью комплексной системы иммунодиагностических реагентов и
оборудования. ДЕЛФИЯ система требует следующие компоненты, которые могут быть поставлены или
от WALLAC 0Y или от его дистрибьютеров;
1 . Флюорометр с временным разрешением плюс принтер и внешний компьютер.
2. Автоматический вошер - ДЕЛФИЯ плейтвошер (Кат.№1296-024 или1296-026)
3. Автоматический шейкер-ДЕЛФИЯ плейтшейкер(Кат.№1296-001 ил и 1296-003)
4. Пипетка для разливки ДЕЛФИЯ буфера и метки - ЭППЕНДОРФ МУЛЬТИПИПЕТКА (1296-014) с 5 мл
Комби наконечниками (1296-016) или в качестве альтернативы ДЕЛФИЯ плейт диспенсер с ДЕЛФИЯ
диспенсер юнит (1296-041 или 1296-043).
5. Пипетка для разливки Усиливающего раствора - ЭППЕНДОРФ мультипипетка (1296-014) с 5 мл
Комби наконечниками (1296-016) или альтернативно ДЕЛФИЯ плейт диспенсер (1296-041).
6. ДЕЛФИЯ растворитель I (Кат.№ В127-100, В128-100).
В дополнении к ДЕЛФИЯ системе необходимо следующее:
-дозирующая пипетка для разливки микролитровых объемов
- пипетки для разливки миллитровых объемов НЭ буфера требуемого для приготовления
раствора метки и антител
-дистиллированная вода
СБОР ОБРАЗЦОВ И ХРАНЕНИЕ:
Получение крови посредством венопункции, образование сгустка и выделение сыворотки
посредством центрифугирования. Плазма, полученна с использованием ЭДТА и цитрата натрия не
может быть использована, вследствии воздействия на хелатирующий европий. Однако может
применяться плазма крови полученная с гепарином. Гемолитическая (гемоглобин>2г/Л), липемическая
(>2 г/Л) и иктерическая (билирубин>30 мкмоль/Л) сыворотки использовать не рекомендуется. Если
концентрация превышает 50 нмоль/Л следует развести сыворотки или нормальной женской
сывороткой или ДЕЛФИЯ дилюентом 1 .
Образцы могут быть сохранены 12 часов при комнатной температуре или 3 дня при +2+80.
Для более длительного периода неразведенные образцы могут храниться при -20 С. Избегайте
повторного замораживания размораживания.
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ:
Для диагностики ин витро.
Следует соблюдать правила предостороженности США №CDC 88-8395 или местные правила.
Можно считать все образцы крови пациентов как потенциально инфицированные.
Реагенты содержат азид натрия в качестве консерванта. Азид натрия может
взаимодействовать с металлическими поверхностями с образованием азидов металлов. Для
предотвращения образования азидов металлов необходимо промыть большим количеством воды.
Для дезинфекции всех сливных реагентов пользуйтесь правилами местных контроллирующих
организаций.
Флюоресценция измеряется на флюорометре с временным разрешением. Выберите номер
программы 50 для автоматического измерения и подсчета результатов. Сверьте параметры
группы для программы №50 и если необходимо произведите коррекцию в соответствии со следующим
(см. описание к флюрометру для проведения редакции параметров считывания):
ASSAY ТУРЕ FIA
тип определения ФИА
FITTING METHOD SPLINE SMOOTHED
--- стр. 3 ---
метод обработки
X-AXIS
X-OCb
Y-AXIS
у-ось
BLANKS
бланки О
STANDARDS
стандарты
STANDARD REPLICATES
стандарты в дупл и кате 2
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
UNKNOWN REPLICATES
неизвестные образцы в дубле 2
метод "сглаживания”
LOGARITHMIC
логарифмическая
В/В макс
В/Вмакс
О
6
6
2 Убедитесь, чтобы концентрация
стандартов, указанная на флаконах
А совпадала с задаваемой. Если не
А совпадает, введите новые.
В
В
С
С
D
Д
Е
Е
F
Ф
2
ОСОБЕННОСТИ ОПРЕДЕЛЕНИЯ;
1. Отношение к этому набору как к целому необходимо для успешного использования ДЕЛФИЯ
наборов. Реагенты в этом наборе являются комплексными компонентами. Не смешивайте идентичные
реагенты из различных лотов. Не используйте реагенты после срока годности, указанной на флаконе.
2. Реагенты должны быть доведены до комнатной температуры (+20+25С) до приготовления
различных растворов. Замороженные образцы должны быть нагреты до комнатной температуры при
медленном и осторожном перемешивании. Не используйте вортекс или смешанные образцы
пациентов.
3. При промывке стрипов следите, чтобы все стрипы были заполнены полностью и одинаково
до верхнего уровня как показано на картинке. После промывки стрипов, проверьте, что стрипы сухие.
Если что-либо осталось в лунках, то необходимо перевернуть планшету и встряхнуть на
фильтровальную бумагу.
Аспирирующее/промывочное оборудование не должно находиться заполненным с
промывочным раствором длительный период времени, поскольку промывочные иглы могут быть
закупорены и трудно проходимы для жидкости. В конце рабочего дня аспирировать дистиллированную
воду в аспирирующую/промывочную систему. Промывочное устройство должно быть регулярно
промываться раствором NaCL (ЗОг/Л), а затем дистиллированной водой и 50% этанолом и в конце
промыто дистиллированной водой.
4. Для избежания примеси европия и как результат высокого флюресцентного фона высокие
требования предъявляются к процедуре раскапывания и промывки. Поэтому необычайно важно
использовать рекомендуемые и поставляемые вместе с ДЕЛФИЯ пипетки.
Усиливающий раствор должен быть раскапан только с использованием рекомендуемой
ЭППЕНДОРФ мультипипеткой, и при этом первый объем сбрасывается для полного заполнения. Тот
же тип Комбинаконечника не может быть использован для раскапывания любого другого реагента.
После работы ЭППЕНДОРФ мультипипетка помещается на штатив с наконечником.
При использовании ДЕЛФИЯ плейт диспенсера и ДЕЛФИЯ диспенсера юнита ознакомьтесь с
описанием.
ПОДСЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ;
--- стр. 5 ---
А в т о Д Е Л Ф И Я Т р и и о д т и р о н и н ( Т З )
A u to D E L F lA T r i i o d o t h y r o n i n e ( Т З )
Ф л ю р о м е т р и ч е с к и й а н а л и з с р а з р е ш е н и е м п о в р е м е н и д л я к о л и ч е с т в е н н о г о
о п р е д е л е н и я т р и и о д о т и р о н и н а ( Т З ) в с ы в о р о т к е к р о в и ;
Производитель - WALLAC Оу, Финляндия
Для диагностического применения in vitro.
Д ДЯ П Р И М Е Н Е Н И Я В IN V IT R O Д И А Г Н О С Т И К Е
96 О П РЕ Д Е Л Е Н И Й
Н А ЗН А Ч ЕН И Е:
Н абор предназначен для определения три иодотирон ин а(Т З) в образцах сы воротки крови человека. П ринцип
основан на им му иоф лю орес центом анализе, в котором определяем ая м олекула антител к ТЗ взаим одействует
по типу реакции антиген антитело с сорбированны м и на поверхности план ш ета антигеном против антител к ТЗ
и вторы ми антителам и, м ечены е ф лю оресцентной меткой, В результате реакции образуется
вы сокоф лю оресцентное соединение, концентрация которого оп ределяется на приборе-ф лю ором етре
А В Т О Д Е Л Ф И Я /В И К Т О Р , К онцентрация определяем ого ф лю оресц ирую щ его соединения прямо
пропорциональна количеству антител к ТЗ в образцах сы воротки крови человека,
С О С ТА В Н А БО РА ;
1.ТЗ стандарты ; 1.4м л(ф л); К -во 6 шт.
2.T3-EU раствор. В о ф лаконе, лиоф иллизированны й. К -во - 1 шт.
3.А нти-ТЗ раствор(м ы ш ин ы е м оноклональны е) 0.7 мл(фл). К-во - 1 шт.
4. П ром ы вочны й концентрат 40 мл, 1 шт.
5.ТЗ инкубационны й буф ер; 50 мл(ф л). К-во - 1 шт.
6. У силиваю щ ий реагент: 50 мл, 1 шт
7.А нти-мы ш ины е м икротитрационны е стрипы ; 96 луночны е; К -во - 1 ш т
ПРИНЦИП МЕТОДА:
АВТОДЕЛФИЯ ТЗ определение основано на твердофазном, флюороиммуном определении с
разрешением по времени на основе конкуренции между меченым европием ТЗ и ТЗ в тестируемом
образце за ограниченное количество мест связывания на ТЗ -специфических моноклональных
антителах (мышиные). Стандарты, контроли и образца пациентов, содержащие ТЗ ингибируют
связывание меченого европием ТЗ с антителами. Блокирующие агенты в ТЗ инкубационном буфере
предотвращают выделение ТЗ из связанного с белками состояния. Второе антитело
взаимодействующее с анти-мышиными антителами, которые покрывают поверхность лунок и
представляют твердую фазу, определяя высококачественное разделение антител-связанных и
свободных антигенов ТЗ. В этом определении только одна инкубационная ступень.
Усиливающий раствор диссоциирует ионы европия из меченого ТЗ в раствор, где они
формируют высокофлюоресцентные хелатные комплексы с компонентами усиливающего раствора.
Флюоресценция каждой лунки в последующем измеряется. Флюоресцентный сигнал каждого образца
обратно пропорционален количеству ТЗ в образце.
Каждый АВТОДЕЛФИЯ ТЗ набор содержит реагентов необходимых для 96 определений.
Срок годности набора указан на внешней стороне коробки. Хранение при +2+8 С.
--- стр. 6 ---
МАТЕРИАЛЫ НЕОБХОДИМЫЕ. НО НЕ ПОСТАВЛЯЕМЫЕ
С НАБОРОМ;
Данный набор является частью комплексной системы иммунодиагностических реагентов и
оборудования. АВТОДЕЛФИЯ система требует следующие компоненты, которые могут быть
поставлены или от WALLAC 0Y или от его дистрибьютеров;
1 . Флюорометр с временным разрешением плюс принтер и внешний компьютер.
2. Автоматический вошер - АВТОДЕЛФИЯ плейтвошер (Кат.№1296-024 или1296-026)
3. Автоматический шейкер-АВТОДЕЛФИЯ плейтшейкер(Кат.№1296-001или1296-003)
4. Пипетка для разливки АВТОДЕЛФИЯ буфера и метки - ЭППЕНДОРФ МУЛЬТИПИПЕТКА (1296-014) с
5 мл Комби наконечниками (1296-016) или в качестве альтернативы АВТОДЕЛФИЯ плейт диспенсер с
АВТОДЕЛФИЯ диспенсер юнит (1296-041 или 1296-043).
5. Пипетка для разливки Усиливающего раствора - ЭППЕНДОРФ мультипипетка (1296-014) с 5 мл
Комби наконечниками (1296-016) или альтернативно АВТОДЕЛФИЯ плейт диспенсер (1296-041),
6. АВТОДЕЛФИЯ растворитель I (Кат.№ В127-100. В128-100).
В дополнении к АВТОДЕЛФИЯ системе необходимо следующее;
- дозирующая пипетка для разливки микролитровых объемов
- пипетки для разливки миллитровых объемов НЭ буфера требуемого для приготовления
раствора метки и антител
-дистиллированная вода
СБОР ОБРАЗЦОВ И ХРАНЕНИЕ;
Получение крови посредством венопункции, образование сгустка и выделение сыворотки
посредством центрифугирования. Плазма, полученна с использованием ЭДТА и цитрата натрия не
может быть использована, вследствии воздействия на хелатирующий европий. Однако может
применяться плазма крови полученная с гепарином. Гемолитическая (гемоглобин>2г/Л), липемическая
(>2 г/Л) и и 1стерическая (билирубин>30 мкмоль/Л) сыворотки использовать не рекомендуется. Если
концентрация превышает 50 нмоль/Л следует развести сыворотки или нормальной женской
сывороткой или АВТОДЕЛФИЯ дилюентом 1 .
Образцы могут быть сохранены 12 часов при комнатной температуре или 3 дня при +2+8С.
Для более длительного периода неразведенные образцы могут храниться при -20 С. Избегайте
повторного замораживания размораживания.
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ;
Для диагностики ин витро.
Следует соблюдать правила предостороженности США №CDC 88-8395 или местные правила.
Можно считать все образцы крови пациентов как потенциально инфицированные.
Реагенты содержат азид натрия в качестве консерванта. Азид натрия может
взаимодействовать с металлическими поверхностями с образованием азидов металлов. Для
предотвращения образования азидов металлов необходимо промыть большим количеством воды.
Для дезинфекции всех сливных реагентов пользуйтесь правилами местных контроллирующих
организаций.
Флюоресценция измеряется на флюорометре с временным разрешением. Выберите номер
программы 50 для автоматического измерения и подсчета результатов. Сверьте параметры
группы для программы №50 и если необходимо произведите коррекцию в соответствии со следующим
(см. описание к флюрометру для проведения редакции параметров считывания);
ASSAY ТУРЕ F1A
тип определения ФИА
FITTING METHOD SPLINE SMOOTHED
--- стр. 7 ---
метод обработки
X-AXIS
X-OCb
Y-AXIS
у-ось
BLANKS
бланки О
STANDARDS
стандарты
STANDARD REPLICATES
стандарты в дупликате 2
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
UNKNOWN REPLICATES
неизвестные образцы в дубле 2
метод “сглаживания
LOGARITHMIC
логарифмическая
В/В макс
В/Вмакс
О
6
6
2 Убедитесь, чтобы концентрация
стандартов, указанная на флаконах
А совпадала с задаваемой. Если не
А совпадает, введите новые.
В
В
С
С
D
Д
Е
Е
F
Ф
2
ОСОБЕННОСТИ ОПРЕДЕЛЕНИЯ;
1 . Отношение к этому набору как к целому необходимо для успешного использования
АВТОДЕЛФИЯ наборов. Реагенты в этом наборе являются комплексными компонентами. Не
смешивайте идентичные реагенты из различных лотов. Не используйте реагенты после срока
годности, указанной на флаконе.
2. Реагенты должны быть доведены до комнатной температуры (+20+25С) до приготовления
различных растворов. Замороженные образцы должны быть нагреты до комнатной температуры при
медленном и осторожном перемешивании. Не используйте вортекс или смешанные образцы
пациентов.
3. При промывке стрипов следите, чтобы все стрипы были заполнены полностью и одинаково
до верхнего уровня как показано на картинке. После промывки стрипов, проверьте, что стрипы сухие.
Если что-либо осталось в лунках, то необходимо перевернуть планшету и встряхнуть на
фильтровальную бумагу.
Аспирирующее/промывочное оборудование не должно находиться заполненным с
промывочным раствором длительный период времени, поскольку промывочные иглы могут быть
закупорены и трудно проходимы для жидкости. В конце рабочего дня аспирировать дистиллированную
воду в аспирирующую/промывочную систему. Промывочное устройство должно быть регулярно
промываться раствором NaCL (ЗОг/Л), а затем дистиллированной водой и 50% этанолом и в конце
промыто дистиллированной водой.
4. Для избежания примеси европия и как результат высокого флюресцентного фона высокие
требования предъявляются к процедуре раскапывания и промывки. Поэтому необычайно важно
использовать рекомендуемые и поставляемые вместе с АВТОДЕЛФИЯ пипетки.
Усиливающий раствор должен быть раскапан только с использованием рекомендуемой
ЭППЕНДОРФ мультипипеткой, и при этом первый объем сбрасывается для полного заполнения. Тот
же тип Комбинаконечника не может быть использован для раскапывания любого другого реагента.
После работы ЭППЕНДОРФ мультипипетка помещается на штатив с наконечником.
При использовании АВТОДЕЛФИЯ плейт диспенсера и АВТОДЕЛФИЯ диспенсера юнита
ознакомьтесь с описанием.
ПОДСЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ.
--- стр. 9 ---
Д е л ф и я Т и р о к с и н ( 1 4 )
D E L F IA T h y r o x i n e ( Т 4 )
Ф л ю р о м е т р и ч е с к и й а н а л и з с р а з р е ш е н и е м п о в р е м е н и д л я к о л и ч е с т в е н н о г о
о п р е д е л е н и я т и р о к с и н а ( Т 4 ) в с ы в о р о т к е к р о в и ;
Производитель - WALLAC Оу, Финляндия
Для диагностического применения in vitro.
Д Л Я П Р И М Е Н Е Н И Я В 1N V IT R O Д И А Г Н О С Т И К Е
96 О П РЕ Д Е Л Е Н И Й
Н А ЗН А Ч ЕН И Е;
Н абор предназначен для о п р е д е л е н а тироксина (Т 4 ) в образцах сы воротки крови человека. П ринцип основан
на им м уноф лю оресцентом анализе, в котором определяем ая молекула ан тител к Т 4 взаим одействует по типу
реакции антиген ан титело с сорбированны м и на поверхности планш ета антигеном против антител к Т 4 и
вторы ми антителам и, м ечены е ф лю оресцентной м еткой. В результате реакции образуется
вы сокоф лю оресцентное соединение, концентрация которого оп ределяется на приборе-ф лю ором етре
Д Е Л Ф 11Я /В И К Т 0Р. К онцентрация определяем ого ф лю оресцирую щ его соеди н ени я прямо пропорциональна
количеству антител к Т 4 в образцах сы воротки крови человека.
С О С ТА В Н А БО РА :
1.Т4 стандарты ; 1.0мл(ф л); К -во 6 шт.
2.T4-EU раствор. 0.75 м л(1ш т). К -во - 2 шт.
3.А нти-Т4 растБ ор(м ы ш ины е м оноклональны е) 0.75 мл(ф л). К-во - 2 шт.
4.Т4 инкубационны й буф ер; 30 мл (ф л). К -во - 1 шт.
5.А нти-м ы ш ины е м и кротитрационны е стрипы (кроличьи антитела); 96 луночн ы е; К -во - 1 шт
6.Ш трих кодовы е м етки для кассеты с реагентам и. К -во - 3 шт,
ПРИНЦИП МЕТОДА;
ДЕЛФИЯ Т4 определение основано на твердофазном, флюороиммуном определении с
разрешением по времени на основе конкуренции между меченым европием Т4 и Т4 в тестируемом
образце за ограниченное количество мест связывания на Т4 -специфических моноклональных
антителах (мышиные). Стандарты, контроли и образца пациентов, содержащие Т4 ингибируют
связывание меченого европием Т4 с антителами. Блокирующие агенты в Т4 инкубационном буфере
предотвращают выделение Т4 из связанного с белками состояния. Второе антитело
взаимодействующее с анти-мышиными антителами, которые покрывают поверхность лунок и
представляют твердую фазу, определяя высококачественное разделение антител-связанных и
свободных антигенов Т4. В этом определении только одна инкубационная ступень.
Усиливающий раствор диссоциирует ионы европия из меченого Т4 в раствор, где они
формируют высокофлюоресцентные хелатные комплексы с компонентами усиливающего раствора.
Флюоресценция каждой лунки в последующем измеряется. Флюоресцентный сигнал каждого образца
обратно пропорционален количеству Т4 в образце.
Каждый ДЕЛФИЯ Т4 набор содержит реагентов необходимых для 96 определений.
Срок годности набора указан на внешней стороне коробки. Хранение при +2+8 С.
МАТЕРИАЛЫ НЕОБХОДИМЫЕ. НО НЕ ПОСТАВЛЯЕМЫЕ
--- стр. 10 ---
Данный набор является частью комплексной системы иммунодиагностических реагентов и
оборудования. ДЕЛФИЯ система требует следующие компоненты, которые могут быть поставлены или
от WALL АС 0Y или от его дистрибьютеров;
1 . Флюорометр с временным разрешением плюс принтер и внешний компьютер.
2. Автоматический вошер - ДЕЛФИЯ плейтвошер (Кат. №1296-024 или1296-026)
3. Автоматический шейкер-ДЕЛФИЯ плейтшейкер{Кат.№1296-001 или1296-003)
4. Пипетка для разливки ДЕЛФИЯ буфера и метки - ЭППЕНДОРФ МУЛЬТИПИПЕТКА (1296-014) с 5 мл
Комби наконечниками (1296-016) или в качестве альтернативы ДЕЛФИЯ плейт диспенсер с ДЕЛФИЯ
диспенсер юнит (1296-041 или 1296-043).
5. Пипетка для разливки Усиливающего раствора - ЭППЕНДОРФ мультипипетка (1296-014) с 5 мл
Комби наконечниками (1296-016) или альтернативно ДЕЛФИЯ плейт диспенсер (1296-041).
6. ДЕЛФИЯ растворитель I (Кат.№ В127-100, В128-100).
В дополнении к ДЕЛФИЯ системе необходимо следующее;
- дозирующая пипетка для разливки микролитровых объемов
- пипетки для разливки миллитровых объемов НЭ буфера требуемого для приготовления
раствора метки и антител
- дистиллированная вода
СБОР ОБРАЗЦОВ И ХРАНЕНИЕ;
Получение крови посредством венопункции, образование сгустка и выделение сыворотки
посредством центрифугирования. Плазма, полученна с использованием ЭДТА и цитрата натрия не
может быть использована, вследствии воздействия на хелатирующий европий. Однако может
применяться плазма крови полученная с гепарином. Гемолитическая (гемоглобин>2г/Л), липемическая
(>2 г/Л) и иктерическая (билирубин>30 мкмоль/Л) сыворотки использовать не рекомендуется. Если
концентрация превышает 50 нмоль/Л следует развести сыворотки или нормальной женской
сывороткой или ДЕЛФИЯ дилюентом L
Образцы могут быть сохранены 12 часов при комнатной температуре или 3 дня при +2+8С.
Для более длительного периода неразведенные образцы могут храниться при -20 С. Избегайте
повторного замораживания размораживания.
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ:
Для диагностики ин витро.
Следует соблюдать правила предостороженности США №CDC 88-8395 или местные правила.
Можно считать все образцы крови пациентов как потенциально инфицированные.
Реагенты содержат азид натрия в качестве консерванта. Азид натрия может
взаимодействовать с металлическими поверхностями с образованием азидов металлов. Для
предотвращения образования азидов металлов необходимо промыть большим количеством воды.
Для дезинфекции всех сливных реагентов пользуйтесь правилами местных контроллирующих
организаций.
Флюоресценция измеряется на флюорометре с временным разрешением. Выберите номер
программы 50 для автоматического измерения и подсчета результатов. Сверьте параметры
группы для программы №50 и если необходимо произведите коррекцию в соответствии со следующим
(см. описание к флюрометру для проведения редакции параметров считывания):
ASSAY TYPE FIA
тип определения ФИА
FITTING METHOD SPLINE SMOOTHED
метод обработки метод “сглаживания”
с НАБОРОМ;
--- стр. 11 ---
X-AXIS LOGARITHMIC
х-ось логарифмическая
Y-AXIS В/Вмакс
у-ось В/Вмакс
BLANKS О
бланки О
STANDARDS 6
стандарты 6
STANDARD REPLICATES 2 Убедитесь, чтобы концентрация
стандарты в дупл и кате 2 стандартов, указанная на флаконах
STANDARD CONC А совпадала с задаваемой. Если не
стандарты конц. А совпадает, введите новые.
STANDARD CONC В
стандарты конц. В
STANDARD CONC С
стандарты конц. С
STANDARD CONC D
стандарты конц. Д
STANDARD CONC Е
стандарты конц. Е
STANDARD CONC F
стандарты конц. Ф
UNKNOWN REPLICATES 2
неизвестные образцы в дубле 2
ОСОБЕННОСТИ ОПРЕДЕЛЕНИЯ:
1 . Отношение к этому набору как к целому необходимо для успешного использования ДЕЛФИЯ
наборов. Реагенты в этом наборе являются комплексными компонентами. Не смешивайте идентичные
реагенты из различных лотов. Не используйте реагенты после срока годности, указанной на флаконе.
2. Реагенты должны быть доведены до комнатной температуры (+20+25С) до приготовления
различных растворов. Замороженные образцы должны быть нагреты до комнатной температуры при
медленном и осторожном перемешивании. Не используйте вортекс или смешанные образцы
пациентов.
3. При промывке стрипов следите, чтобы все стрипы были заполнены полностью и одинаково
до верхнего уровня как показано на картинке. После промывки стрипов, проверьте, что стрипы сухие.
Если что-либо осталось в лунках, то необходимо перевернуть планшету и встряхнуть на
фильтровальную бумагу.
Аспирирующее/промывочное оборудование не должно находиться заполненным с
промывочным раствором длительный период времени, поскольку промывочные иглы могут быть
закупорены и трудно проходимы для жидкости. В конце рабочего дня аспирировать дистиллированную
воду в аспирирующую/промывочную систему. Промывочное устройство должно быть регулярно
промываться раствором NaCL (ЗОг/Л), а затем дистиллированной водой и 50% этанолом и в конце
промыто дистиллированной водой.
4. Для избежания примеси европия и как результат высокого флюресцентного фона высокие
требования предъявляются к процедуре раскапывания и промывки. Поэтому необычайно важно
использовать рекомендуемые и поставляемые вместе с ДЕЛФИЯ пипетки.
Усиливающий раствор должен быть раскапан только с использованием рекомендуемой
ЭППЕНДОРФ мультипипеткой, и при этом первый объем сбрасывается для полного заполнения. Тот
же тип Комбинаконечника не может быть использован для раскапывания любого другого реагента.
После работы ЭППЕНДОРФ мультипипетка помещается на штатив с наконечником.
При использовании ДЕЛФИЯ плейт диспенсера и ДЕЛФИЯ диспенсера юнита ознакомьтесь с
описанием.
ПОДСЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ;
--- стр. 13 ---
5 ^
А в т о Д Е Л Ф И Я Т и р о к с и н ( Т 4 )
A u to D E L F IA T h y r o x i n e ( Т 4 )
Ф л ю р о м е т р и ч е с к и й а н а л и з с р а з р е ш е н и е м п о в р е м е н и д л я к о л и ч е с т в е н н о г о
о п р е д е л е н и я т и р о к с и н а ( Т 4 ) в с ы в о р о т к е к р о в и ;
Производитель - WALLAC Оу, Финляндия
Для диагностического применения in vitro.
ДЛ Я П РИ М Е Н Е Н И Я В IN V IT R O Д И А Г Н О С Т И К Е
96 О П РЕ Д Е Л Е Н И Й
Н А ЗН А Ч ЕН И Е:
Н абор предназначен для определения тироксина (Т 4) в образцах сы воротки крови человека. П ринцип основан
на им м уноф лю оресцентом анализе, в котором определяем ая молекула антител к Т 4 взаим одействует по типу
реакции антиген ан титело с сорбированны м и на поверхности планш ета ан тигеном против антител к Т 4 и
вторы ми антителам и, м ечены е ф лю оресцентной меткой. В результате реакции образуется
вы сокоф лю оресцентное соединение, концентрация которого определяется на приборе-ф лю ором етре
А В Т О Д Е Л Ф И Я /В И К Т О Р . К онцентрация определяем ого ф лю оресц ирую щ его соединения прямо
п ропорциональна количеству антител к Т4 в образцах сы воротки крови человека.
С О С ТА В Н А БО РА :
1.T4 стандарты ; 1.0мл(ф л); К -во 6 шт.
2.T4-EU раствор. 0.75 м л(1ш т). К -во - 2 шт.
3.А нти-Т4 раствор(м ы ш ин ы е м оноклональны е) 0.75 мл(фл). К -во - 2 шт.
4.Т4 инкубационны й буф ер; 30 мл (ф л). К -во - 1 шт.
5.А нти-мы ш ины е м икротитрационны е стрипы (кроличьи антитела); 96 луночны е; К -во - 1 шт
6.Ш трих кодовы е м етки для кассеты с реагентам и. К -во - 3 шт.
ПРИНЦИП МЕТОДА:
АВТОДЕЛФИЯ Т А определение основано на твердофазном, флюороиммуном определении с
разрешением по времени на основе конкуренции между меченым европием Т4 и Т4 в тестируемом
образце за ограниченное количество мест связывания на Т4 -специфических моноклональных
антителах (мышиные). Стандарты, контрол и и образца пациентов, содержащие Т4 ингибируют
связывание меченого европием Т4 с антителами. Блокирующие агенты в Т4 инкубационном буфере
предотвращают выделение Т4 из связанного с белками состояния. Второе антитело
взаимодействующее с анти-мышиными антителами, которые покрывают поверхность лунок и
представляют твердую фазу, определяя высококачественное разделение антител-связанных и
свободных антигенов Т4. В этом определении только одна инкубационная ступень.
Усиливающий раствор диссоциирует ионы европия из меченого Т4 в раствор, где они
формируют высокофлюоресцентные хелатные комплексы с компонентами усиливающего раствора.
Флюоресценция каждой лунки в последующем измеряется. Флюоресцентный сигнал каждого образца
обратно пропорционален количеству Т4 в образце.
Каждый АВТОДЕЛФИЯ Т4 набор содержит реагентов необходимых для 96 определений.
Срок годности набора указан на внешней стороне коробки. Хранение при +2+8 С.
МАТЕРИАЛЫ НЕОБХОДИМЫЕ, НО НЕ ПОСТАВЛЯЕМЫЕ
--- стр. 14 ---
Данный набор является частью комплексной системы иммунодиагностических реагентов и
оборудования. АВТОДЕЛ ФИ Я система требует следующие компоненты, которые могут быть
поставлены или от WALLAC 0Y или от его дистрибьютеров:
1. Флюорометр с временным разрешением плюс принтер и внешний компьютер.
2. Автоматический вошер - АВТОДЕЛФИЯ плейтвошер (Кат.№1296-024 или1296-026)
3. Автоматический шейкер-АВТОДЕЛФИЯ плейтшейкер(Кат,№1296-001или1296-003)
4. Пипетка для разливки АВТОДЕЛФИЯ буфера и метки - ЭППЕНДОРФ МУЛЬТИПИПЕТКА (1296-014) с
5 мл Комби наконечниками (1296-016) или в качестве альтернативы АВТОДЕЛФИЯ плейт диспенсер с
АВТОДЕЛФИЯ диспенсер юнит (1296-041 или 1296-043).
5. Пипетка для разливки Усиливающего раствора - ЭППЕНДОРФ мультипипетка (1296-014) с 5 мл
Комби наконечниками (1296-016) или альтернативно АВТОДЕЛФИЯ плейт диспенсер (1296-041).
6. АВТОДЕЛФИЯ растворитель I (Кат.№ В127-100, В128-100).
В дополнении к АВТОДЕЛФИЯ системе необходимо следующее:
- дозирующая пипетка для разливки микролитровых объемов
- пипетки для разливки миллитровых объемов НЭ буфера требуемого для приготовления
раствора метки и антител
-дистиллированная вода
СБОР ОБРАЗЦОВ И ХРАНЕНИЕ:
Получение крови посредством венопункции, образование сгустка и выделение сыворотки
посредством центрифугирования. Плазма, полученна с использованием ЭДТА и цитрата натрия не
может быть использована, вследствии воздействия на хелатирующий европий. Однако может
применяться плазма крови полученная с гепарином. Гемолитическая (гемоглобин>2г/Л), липемическая
(>2 г/Л) и иктерическая (билирубин>30 мкмоль/Л) сыворотки использовать не рекомендуется. Если
концентрация превышает 50 нмоль/Л следует развести сыворотки или нормальной женской
сывороткой или АВТОДЕЛФИЯ дилюентом I.
Образцы могут быть сохранены 12 часов при комнатной температуре или 3 дня при +2+8С.
Для более длительного периода неразведенные образцы могут храниться при -20 С. Избегайте
повторного замораживания размораживания.
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ;
Для диагностики ин витро.
Следует соблюдать правила предостороженности США №CDC 88-8395 или местные правила.
Можно считать все образцы крови пациентов как потенциально инфицированные.
Реагенты содержат азид натрия в качестве консерванта. Азид натрия может
взаимодействовать с металлическими поверхностями с образованием азидов металлов. Для
предотвращения образования азидов металлов необходимо промыть большим количеством воды.
Для дезинфекции всех сливных реагентов пользуйтесь правилами местных контроллирующих
организаций.
Флюоресценция измеряется на флюорометре с временным разрешением. Выберите номер
профаммы 50 для автоматического измерения и подсчета результатов. Сверьте параметры
группы для программы №50 и если необходимо произведите коррекцию в соответствии со следующим
(см. описание к флюрометру для проведения редакции параметров считывания):
ASSAY TYPE FIA
тип определения ФИА
FITTING METHOD SPLINE SMOOTHED
метод обработки метод “сглаживания”
с НАБОРОМ:
--- стр. 15 ---
X-AXIS
х-ось
Y-AXIS
y-OCb
BLANKS
бланки 0
STANDARDS
стандарты
STANDARD REPLICATES
стандарты в дупликате 2
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
UNKNOWN REPLICATES
неизвестные образцы в дубле 2
LOGARITHMIC
логарифмическая
В/Вмакс
В/Вмакс
О
6
6
2 Убедитесь, чтобы концентрация
стандартов, указанная на флаконах
А совпадала с задаваемой. Если не
А совпадает, введите новые.
В
В
С
С
D
Д
Е
Е
F
Ф
2
ОСОБЕННОСТИ ОПРЕДЕЛЕНИЯ:
1 . Отношение к этому набору как к целому необходимо для успешного использования
АВТОДЕЛФИЯ наборов. Реагенты в этом наборе являются комплексными компонентами. Не
смешивайте идентичные реагенты из различных лотов. Не используйте реагенты после срока
годности, указанной на флаконе.
2. Реагенты должны быть доведены до комнатной температуры (+20+25С) до приготовления
различных растворов. Замороженные образцы должны быть нагреты до комнатной температуры при
медленном и осторожном перемешивании. Не используйте вортекс или смешанные образцы
пациентов.
3. При промывке стрипов следите, чтобы все стрипы были заполнены полностью и одинаково
до верхнего уровня как показано на картинке. После промывки стрипов, проверьте, что стрипы сухие.
Если что-либо осталось в лунках, то необходимо перевернуть планшету и встряхнуть на
фильтровальную бумагу.
Аспирирующее/промывочное оборудование не должно находиться заполненным с
промывочным раствором длительный период времени, поскольку промывочные иглы могут быть
закупорены и трудно проходимы для жидкости. В конце рабочего дня аспирировать дистиллированную
воду в аспирирующую/промывочную систему. Промывочное устройство должно быть регулярно
промываться раствором NaCL (ЗОг/Л), а затем дистиллированной водой и 50% этанолом и в конце
промыто дистиллированной водой.
4. Для избежания примеси европия и как результат высокого флюресцентного фона высокие
требования предъявляются к процедуре раскапывания и промывки. Поэтому необычайно важно
использовать рекомендуемые и поставляемые вместе с АВТОДЕЛФИЯ пипетки.
Усиливающий раствор должен быть раскапан только с использованием рекомендуемой
ЭППЕНДОРФ мультипипеткой, и при этом первый объем сбрасывается для полного заполнения. Тот
же тип Комбинаконечника не может быть использован для раскапывания любого другого реагента.
После работы ЭППЕНДОРФ мультипипетка помещается на штатив с наконечником.
При использовании АВТОДЕЛФИЯ плейт диспенсера и АВТОДЕЛФИЯ диспенсера юнита
ознакомьтесь с описанием.
ПОДСЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ;
--- стр. 17 ---
Д е л ф и я С в о б о д н ы й Т р и й о д т и р о н и н ( с Т З ) )
D E L F IA F r e e T r i i o d o t h y r o n i n e ( F T 3 )
Ф л ю р о м е т р и ч е с к и й а н а л и з с р а з р е ш е н и е м п о в р е м е н и д л я к о л и ч е с т в е н н о г о
о п р е д е л е н и я С в о б о д н о г о т р и и о д о т и р о н и н а ( С в . Т З ) в с ы в о р о т к е к р о в и ;
Производитель - WALLAC Оу, Финляндия
Для диагностического применения in vitro.
Д Л Я П Р И М Е Н Е Н И Я В IN V IT R O Д И А Г Н О С Т И К Е
96 О П РЕ Д Е Л Е Н И Й
Н А ЗН А Ч Е Н И Е :
Набор предназначен для определения свободного три иодотиронина (С Т З) в образцах сы воротки крови человека.
П ринцип основан на им м уноф лю оресцентом анализе, в котором определяем ая молекула антител к СТЗ
взаим одействует по типу реакции антиген антитело с сорбированны м и на поверхности планш ета антигеном
против антител к С ТЗ и вторы м и антителам и, м ечены е ф лю оресц ентн ой меткой. В результате реакции
образуется вы сокоф лю оресцентное соединение, концентрация которого определяется на приборе-ф лю ором етре
Д Е Л Ф И Я /В И К ТО Р. К онцентрация определяем ого ф лю оресцирую щ его соединения прямо пропорциональна
количеству антител к СТЗ в образцах сы воротки крови человека.
С О С ТА В Н А БО РА :
1.СВ.ТЗ стандарты ; В о ф лаконе, лиоф иллизированны е; К -во - 6 шт.
2.С в.ТЗ-Еи раствор. В о ф лаконе, лиоф иллизированны й. К -во - 2 шт.
3.А нти-С в.ТЗ раствор(м ы ш ин ы е м оноклональны е) 0.8 мл(фл). К -во - 2 шт.
4.СВ.ТЗ инкубационны й буф ер (красны й); 30 мл(фл). К -во - I шт.
5.СВ.ТЗ инкубационны й буф ер (ж елты й); 30 мл(ф л). К -во - 1 шт.
6.А нти-мы ш ины е м и кротитрационны е стрипы (кроличьи антитела); 96 луночн ы е; К -во - 1 шт
7.Ш трих кодовы е м етки для кассеты с реагентами. К -во - 3 шт.
ПРИНЦИП МЕТОДА:
ДЕЛФИЯ СТЗ определение основано на твердофазном, флюороиммуном определении с
разрешением по времени на основе конкуренции между меченым европием СТЗ и СТЗ в тестируемом
образце за ограниченное количество мест связывания на СТЗ -специфических моноклональных
антителах (мышиные). Стандарты, контроли и образца пациентов, содержащие СТЗ ингибируют
связывание меченого европием СТЗ с антителами. Блокирующие агенты в СТЗ инкубационном буфере
предотвращают выделение СТЗ из связанного с белками состояния. Второе антитело
взаимодействующее с анти-мышиными антителами, которые покрывают поверхность лунок и
представляют твердую фазу, определяя высококачественное разделение антител-связаннь1Х и
свободных антигенов СТЗ. В этом определении только одна инкубационная ступень.
Усиливающий раствор диссоциирует ионы европия из меченого СТЗ в раствор, где они
формируют высокофлюоресцентные хелатные комплексы с компонентами усиливающего раствора.
Флюоресценция каждой лунки в последующем измеряется. Флюоресцентный сигнал каждого образца
обратно пропорционален количеству СТЗ в образце.
Каждый ДЕЛФИЯ СТЗ набор содержит реагентов необходимых для 96 определений.
Срок годности набора указан на внешней стороне коробки. Хранение при +2+8 С.
МАТЕРИАЛЫ НЕОБХОДИМЫЕ, НО НЕ ПОСТАВЛЯЕМЫЕ
--- стр. 18 ---
Данный набор является частью комплексной системы иммунодиагностических реагентов и
оборудования. ДЕЛФИЯ система требует следующие компоненты, которые могут быть поставлены или
от WALLAC 0Y или от его дистрибьютеров:
1. Флюорометр с временным разрешением плюс принтер и внешний компьютер.
2. Автоматический вошер - ДЕЛФИЯ плейтвошер (Кат. №1296-024 ил и 1296-026)
3. Автоматический шейкер-ДЕЛФИЯ плейтшейкер(Кат.№1296-001или1296-003)
4. Пипетка для разливки ДЕЛФИЯ буфера и метки - ЭППЕНДОРФ МУЛЬТИПИПЕТКА (1296-014) с 5 мл
Комби наконечниками (1296-016) или в качестве альтернативы ДЕЛФИЯ плейт диспенсер с ДЕЛФИЯ
диспенсер юнит (1296-041 или 1296-043).
5. Пипетка для разливки Усиливающего раствора - ЭППЕНДОРФ мультипипетка (1296-014) с 5 мл
Комби наконечниками (1296-016) или альтернативно ДЕЛФИЯ плейт диспенсер (1296-041).
6. ДЕЛФИЯ растворитель I (Кат.№ В127-100, В128-100).
В дополнении к ДЕЛФИЯ системе необходимо следующее:
-дозирующая пипетка для разливки микролитровых объемов
- пипетки для разливки миллитровых объемов НЭ буфера требуемого для приготовления
раствора метки и антител
-дистиллированная вода
СБОР ОБРАЗЦОВ И ХРАНЕНИЕ:
Получение крови посредством венопункции, образование сгустка и выделение сыворотки
посредством центрифугирования. Плазма, получен на с использованием ЭДТА и цитрата натрия не
может быть использована, вследствии воздействия на хелатирующий европий. Однако может
применяться плазма крови полученная с гепарином. Гемолитическая (гемоглобин>2г/Л), липемическая
(>2 г/Л) и иктерическая (билирубин>30 мкмоль/Л) сыворотки использовать не рекомендуется. Если
концентрация превышает 50 нмоль/Л следует развести сыворотки или нормальной женской
сывороткой или ДЕЛФИЯ дилюентом I.
Образцы могут быть сохранены 12 часов при комнатной температуре или 3 дня при +2+80.
Для более длительного периода неразведенные образцы могут храниться при -20 С. Избегайте
повторного замораживания размораживания.
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ:
Для диагностики ин витро.
Следует соблюдать правила предостороженности США №CDC 88-8395 или местные правила.
Можно считать все образцы крови пациентов как потенциально инфицированные.
Реагенты содержат азид натрия в качестве консерванта. Азид натрия может
взаимодействовать с металлическими поверхностями с образованием азидов металлов. Для
предотвращения образования азидов металлов необходимо промыть большим количеством воды.
Для дезинфекции всех сливных реагентов пользуйтесь правилами местных контроллирующих
организаций.
Флюоресценция измеряется на флюорометре с временным разрешением. Выберите номер
программы 50 для автоматического измерения и подсчета результатов. Сверьте параметры
группы для программы №50 и если необходимо произведите коррекцию в соответствии со следующим
(см. описание к флюрометру для проведения редакции параметров считывания):
ASSAY TYPE FIA
тип определения ФИА
FITTING METHOD SPLINE SMOOTHED
метод обработки метод “сглаживания”
с НАБОРОМ:
--- стр. 19 ---
X-AXIS LOGARITHMIC
х-ось логарифмическая
Y-AXIS В/Вмакс
у-ось в/в макс
BLANKS О
бланки О
STANDARDS 6
стандарты 6
STANDARD REPLICATES 2 Убедитесь, чтобы концентрация
стандарты в дупликате 2 стандартов, указанная на флаконах
STANDARD CONC А совпадала с задаваемой. Если не
стандарты конц. А совпадает, введите новые.
STANDARD CONC В
стандарты конц. В
STANDARD CONC С
стандарты конц. С
STANDARD CONC D
стандарты конц. Д
STANDARD CONC Е
стандарты конц. Е
STANDARD CONC F
стандарты конц. Ф
UNKNOWN REPLICATES 2
неизвестные образцы в дубле 2
ОСОБЕННОСТИ ОПРЕДЕЛЕНИЯ:
1. Отношение к этому набору как к целому необходимо для успешного использования ДЕЛФИЯ
наборов. Реагенты в этом наборе являются комплексными компонентами. Не смешивайте идентичные
реагенты из различных лотов. Не используйте реагенты после срока годности, указанной на флаконе.
2. Реагенты должны быть доведены до комнатной температуры (+20+25С) до приготовления
различных растворов. Замороженные образцы должны быть нагреты до комнатной температуры при
медленном и осторожном перемешивании. Не используйте вортекс или смешанные образцы
пациентов.
3. При промывке стрипов следите, чтобы все стрипы были заполнены полностью и одинаково
до верхнего уровня как показано на картинке. После промывки стрипов, проверьте, что стрипы сухие.
Если что-либо осталось в лунках, то необходимо перевернуть планшету и встряхнуть на
фильтровальную бумагу.
Аспирирующее/промывочное оборудование не должно находиться заполненным с
промывочным раствором длительный период времени, поскольку промывочные иглы могут быть
закупорены и трудно проходимы для жидкости. В конце рабочего дня аспирировать дистиллированную
воду в аспирирующую/промывочную систему. Промывочное устройство должно быть регулярно
промываться раствором NaCL (ЗОг/Л), а затем дистиллированной водой и 50% этанолом и в конце
промыто дистиллированной водой.
4. Для избежания примеси европия и как результат высокого флюресцентного фона высокие
требования предъявляются к процедуре раскапывания и промывки. Поэтому необычайно важно
использовать рекомендуемые и поставляемые вместе с ДЕЛФИЯ пипетки.
Усиливающий раствор должен быть раскапан только с использованием рекомендуемой
ЭППЕНДОРФ мультипипеткой, и при этом первый объем сбрасывается для полного заполнения. Тот
же тип Комбинаконечника не может быть использован для раскапывания любого другого реагента.
После работы ЭППЕНДОРФ мультипипетка помещается на штатив с наконечником.
При использовании ДЕЛФИЯ плейт диспенсера и ДЕЛФИЯ диспенсера юнита ознакомьтесь с
описанием.
ПОДСЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ:
--- стр. 21 ---
3 ^
А в т о Д Е Л Ф И Я С в о б о д н ы й Т р и й о д т и р о н и н ( с Т З ) )
A u to D E L F IA F r e e T r i i ( ^ o t h y r o n i n e (F T 3 )
Ф л ю р о м е т р и ч е с к и й а н а л и з с р а з р е ш е н и е м п о в р е м е н и д л я к о л и ч е с т в е н н о г о
о п р е д е л е н и я С в о б о д н о г о т р и и о д о т и р о н и н а ( С в . Т З ) в с ы в о р о т к е к р о в и ;
Производитель - WALLAC Оу, Финляндия
Для диагностического применения in vitro.
Д Л Я П РИ М Е Н Е Н И Я В IN V IT R O Д И А Г Н О С Т И К Е
96 О П РЕ Д Е Л Е Н И Й
Н А ЗН А Ч ЕН И Е:
Н абор предназначен для определения свободного трииодотиронина (С Т З) в образцах сы воротки крови человека.
П ринцип основан н а им м уноф лю оресцентом анализе, в котором оп ределяем ая молекула антител к СТЗ
взаим одействует по типу реакци и антиген антитело с сорбированны м и на поверхности планш ета антигеном
против антител к С ТЗ и вторы м и антителам и, мечены е ф лю оресц ентн ой меткой. В результате реакции
образуется вы сокоф лю оресц ентн ое соединение, концентрация которого определяется на приборе-ф лю ором етре
А В Т О Д Е Л Ф И Я /В И К Т О Р. К онцентрация определяем ого ф лю оресц ирую щ его соединения прямо
п ропорциональна количеству антител к СТЗ в образцах сы воротки крови человека.
С О СТА В Н А БО РА :
1 .Св.ТЗ стандарты ; Во ф лаконе, лиоф иллизированны е; К-во - 6 шт.
2.С в.ТЗ-Еи раствор. Во ф лаконе, лиоф иллизированны й. К -во - 2 шт.
3.А нти-С в.ТЗ раствор(м ы ш ин ы е м оноклональны е) 0.8 м л(ф л). К -во - 2 шт.
4.СВ.ТЗ инкубационны й буф ер (красны й); 30 мл(ф л). К -во - 1 шт.
5.Св.ТЗ инкубационны й буф ер (ж елты й); 30 мл(ф л). К-во - 1 шт.
6.А нти-мы ш ины е м икротитрационны е стрипы (кроличьи антитела); 96 луночн ы е; К -во - I ш т
7.Ш трих кодовы е м етки для кассеты с реагентам и. К -во - 3 шт,
ПРИНЦИП МЕТОДА:
АВТОДЕЛФИЯ СТЗ определение основано на твердофазном, флюороиммуном определении с
разрешением по времени на основе конкуренции между меченым европием СТЗ и СТЗ в тестируемом
образце за ограниченное количество мест связывания на СТЗ -специфических моноклональных
антителах (мышиные). Стандарты, контроли и образца пациентов, содержащие СТЗ ингибируют
связывание меченого европием СТЗ с антителами. Блокирующие агенты в СТЗ инкубационном буфере
предотвращают выделение СТЗ из связанного с белками состояния. Второе антитело
взаимодействующее с анти-мышиными антителами, которые покрывают поверхность лунок и
представляют твердую фазу, определяя высококачественное разделение антител-связанных и
свободных антигенов СТЗ. В этом определении только одна инкубационная ступень.
Усиливающий раствор диссоциирует ионы европия из меченого СТЗ в раствор, где они
формируют высокофлюоресцентные хелатные комплексы с компонентами усиливающего раствора.
Флюоресценция каждой лунки в последующем измеряется. Флюоресцентный сигнал каждого образца
обратно пропорционален количеству СТЗ в образце.
Каждый АВТОДЕЛФИЯ СТЗ набор содержит реагентов необходимых для 96 определений.
Срок годности набора указан на внешней стороне коробки. Хранение при +2+8 С.
МАТЕРИАЛЫ НЕОБХОДИМЫЕ, НО НЕ ПОСТАВЛЯЕМЫЕ
--- стр. 22 ---
Данный набор является частью комплексной системы иммунодиагностических реагентов и
оборудования. АВТОДЕЛ ФИ Я система требует следующие компоненты, которые могут быть
поставлены или от WALL АС 0Y или от его дистрибьютеров;
1 . Флюорометр с временным разрешением плюс принтер и внешний компьютер.
2. Автоматический вошер - АВТОДЕЛФИЯ плейтвошер (Кат.№1296-024 или 1296-026)
3. Автоматический шейкер-АВТОДЕЛФИЯ плейтшейкер(Кат.№1296-001или1296-003)
4. Пипетка для разливки АВТОДЕЛФИЯ буфера и метки - ЭППЕНДОРФ МУЛЬТИПИПЕТКА (1296-014) с
5 мл Комби наконечниками (1296-016) или в качестве альтернативы АВТОДЕЛФИЯ плейт диспенсер с
АВТОДЕЛФИЯ диспенсер юнит (1296-041 или 1296-043).
5. Пипетка для разливки Усиливающего раствора - ЭППЕНДОРФ мультипипетка (1296-014) с 5 мл
Комби наконечниками (1296-016) или альтернативно АВТОДЕЛФИЯ плейт диспенсер (1296-041).
6. АВТОДЕЛФИЯ растворитель I (Кат.№ В127-100. В128-100).
В дополнении к АВТОДЕЛФИЯ системе необходимо следующее;
- дозирующая пипетка для разливки микролитровых объемов
- пипетки для разливки ми л литровых объемов НЭ буфера требуемого для приготовления
раствора метки и антител
- дистиллированная вода
СБОР ОБРАЗЦОВ И ХРАНЕНИЕ:
Получение крови посредством венопункции, образование сгустка и выделение сыворотки
посредством центрифугирования. Плазма, полученна с использованием ЭДТА и цитрата натрия не
может быть использована, вследствии воздействия на хелатирующий европий. Однако может
применяться плазма крови полученная с гепарином. Гемолитическая (гемоглобин>2г/Л), липемическая
(>2 г/Л) и иктерическая (билирубин>30 мкмоль/Л) сыворотки использовать не рекомендуется. Если
концентрация превышает 50 нмоль/Л следует развести сыворотки или нормальной женской
сывороткой или АВТОДЕЛФИЯ дилюентом L
Образцы могут быть сохранены 12 часов при комнатной температуре или 3 дня при +2+8С.
Для более длительного периода неразведенные образцы могут храниться при -20 С, Избегайте
повторного замораживания размораживания.
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ:
Для диагностики ин витро.
Следует соблюдать правила предостороженности США №CDC 88-8395 или местные правила.
Можно считать все образцы крови пациентов как потенциально инфицированные.
Реагенты содержат азид натрия в качестве консерванта. Азид натрия может
взаимодействовать с металлическими поверхностями с образованием азидов металлов, Для
предотвращения образования азидов металлов необходимо промыть большим количеством воды.
Для дезинфекции всех сливных реагентов пользуйтесь правилами местных контроллирующих
организаций.
Флюоресценция измеряется на флюорометре с временным разрешением. Выберите номер
программы 50 для автоматического измерения и подсчета результатов. Сверьте параметры
группы для программы №50 и если необходимо произведите коррекцию в соответствии со следующим
(см. описание к флюрометру для проведения редакции параметров считывания);
ASSAY TYPE FIA
тип определения ФИА
FITTING METHOD SPLINE SMOOTHED
метод обработки метод “сглаживания”
с НАБОРОМ:
--- стр. 23 ---
X-AXIS
х-ось
Y-AXIS
у-ось
BLANKS
бланки О
STANDARDS
стандарты
STANDARD REPLICATES
стандарты в дупликате 2
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
UNKNOWN REPLICATES
неизвестные образцы в дубле 2
LOGARITHMIC
логарифмическая
В/Вмакс
В/Вмакс
О
6
6
2 Убедитесь, чтобы концентрация
стандартов, указанная на флаконах
А совпадала с задаваемой. Если не
А совпадает, введите новые.
В
В
С
С
D
Д
Е
Е
F
Ф
2
ОСОБЕННОСТИ ОПРЕДЕЛЕНИЯ:
1 . Отношение к этому набору как к целому необходимо для успешного использования
АВТОДЕЛФИЯ наборов. Реагенты в этом наборе являются комплексными компонентами. Не
смешивайте идентичные реагенты из различных лотов. Не используйте реагенты после срока
годности, указанной на флаконе.
2. Реагенты должны быть доведены до комнатной температуры (+20+25С) до приготовления
различных растворов. Замороженные образцы должны быть нагреты до комнатной температурь! при
медленном и осторожном перемешивании. Не используйте вортекс или смешанные образцы
пациентов.
3. При промывке стрипов следите, чтобы все стрипы были заполнены полностью и одинаково
до верхнего уровня как показано на картинке. После промывки стрипов, проверьте, что стрипы сухие.
Если что-либо осталось в лунках, то необходимо перевернуть планшету и встряхнуть на
фильтровальную бумагу.
Аспирирующее/промывочное оборудование не должно находиться заполненным с
промывочным раствором длительный период времени, поскольку промывочные иглы могут быть
закупорены и трудно проходимы для жидкости. В конце рабочего дня аспирировать дистиллированную
воду в аспирирующую/промывочную систему. Промывочное устройство должно быть регулярно
промываться раствором NaCL (ЗОг/Л), а затем дистиллированной водой и 50% этанолом и в конце
промыто дистиллированной водой.
4. Для избежания примеси европия и как результат высокого флюресцентного фона высокие
требования предъявляются к процедуре раскапывания и промывки. Поэтому необычайно важно
использовать рекомендуемые и поставляемые вместе с АВТОДЕЛФИЯ пипетки.
Усиливающий раствор должен быть раскапан только с использованием рекомендуемой
ЭППЕНДОРФ мультипипеткой, и при этом первый объем сбрасывается для полного заполнения. Тот
же тип Комбинаконечника не может быть использован для раскапывания любого другого реагента.
После работы ЭППЕНДОРФ мультипипетка помещается на штатив с наконечником.
При использовании АВТОДЕЛФИЯ плейт диспенсера и АВТОДЕЛФИЯ диспенсера юнита
ознакомьтесь с описанием.
ПОДСЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ:
--- стр. 26 ---
1 . Флюорометр с временным разрешением плюс принтер и внешний компьютер.
2. Автоматический вошер-ДЕЛЬФИЯ плейтвошер {Кат,№1296-024 или1296-026)
3. Автоматический шейкер-ДЕЛЬФИЯ плейтшейкер(Кат.№1296-001или1296-003)
4. Пипетка для разливки ДЕЛЬФИЯ буфера и метки - ЭП ПЕН ДО РФ МУЛЬТИПИПЕТКА (1296-014) с 5 мл Комби
наконечниками (1296-016) или в качестве альтернативы ДЕЛЬФИЯ плейт диспенсер с ДЕЛЬФИЯ диспенсер юнит
(1296-041 или 1296-043).
5. Пипетка для разливки Усиливающего раствора - ЭППЕНДОРФ мультипипетка (1296-014) с 5 мл Комби
наконечниками (1296-016) или альтернативно ДЕЛЬФИЯ плейт диспенсер (1296-041).
В дополнении к ДЕЛЬФИЯ системе необходимо следующее:
-дозирующая пипетка для разливки микролитровых объемов
- пипетки для разливки миллитровых объемов СТ4 буфера требуемого для приготовления раствора метки и
антител
-дистиллированная вода
СБОР ОБРАЗЦОВ И Х РА Н ЕН И Е:
Получение крови посредством веныпункции, образование сгустка и выделение сыворотки посредством
центрифугирования. Плазма с гепарином и ЭДТА может быть использована. Гемолитическая (гемоглобин <5 г/Л) и
иктерическая (билирубин < 30 мг/Дл) сыворотка не оказывают влияние на результаты, однако липемическая (> 5г/Л)
сыворотка может оказывать влияние на концентрацию СТ4.
Образцы могут быть сохранены 2 дня при +2+8С. Для более длительного периода необходимо заморозить
образцы до -20С. Избегать повторного размораживания замораживания для предотвращения денатурации
молекулы СТ4.
М ЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖ НОСТИ:
Для диагностики ин витро.
Этот набор может быть использован только подготовленным персоналом.
Набор содержит реагенты произведенные из компонентов человеческой крови. Источник протестирован на
на наличие поверхностного антигена к гепатиту В, анти-гепатиту С, и анти-ВИЧ I и II. Тем не менее все
рекомендации по мерам предосторожности при работе с производными крови должны быть соблюдены,
Можно считать все образцы крови пациентов как потенциально инфицированные.
Реагенты содержат азид натрия в качестве консерванта. Азид натрия может взаимодействовать с
металлическими поверхностями с образованием азидов металлов. Для предотвращения образования азидов
металлов необходимо промыть большим количеством воды.
Для дезинфекции всех сливных реагентов пользуйтесь правилами местных контроллирующих организаций.
П РО ТО КО Л ОПРЕДЕЛЕНИЯ:
Выполните каждое определение в дубликате как для стандартов, так и для тестируемых образцов.
Стандартная кривая должна быть использована для каждого определения. Образцы и реагенты должны быть
доведены до комнатной температуры (+20+250) до использования, за исключением СТ4 инкубационного
буфера, который должен находиться в холоде, при +4,+7С.
1 . Приготовление реагентов Стабильность после разведения
Стандарты СТ4 4 месяца при +2+8С.
Добавьте отмеренное точно 0.6 мл дистиллированной воды в каждый флакон. Растворите за 30 минут до
использования, перемешать нежно перед раскапыванием.
Промывочный раствор 2 недели +2+25С в закрытом
контейнере
Перенести 40 мл из Промывочного Концентрата в чистый флакон и растворить добавляя 960 мл
дистиллированной воды для приготовления готового буферного раствора рН=7.8
СТ4 антисыворотка Использовать в течение 1 часа
после приготовления
--- стр. 27 ---
приготовить необходимый объем раствора антисыворотки при смешивании 30 мкл концентрата
антисыворотки с 3.0 мл СТ4 эссей буфером для каждого стрипа (см. таблицу), РАСТВОР АНТИТЕЛ КРАСНОГО
ЦВЕТА,
СТ4 раствор метки Использовать в течение 1 часа
после приготовления, для 2-ой
инкубации.
Приготовить необходимый объем раствора метки путем смешивания 30 мкл концентрата метки с 3.0
мл СТ4 инкубационным буфером для каждого стрипа (см. таблицу). РАСТВОР МЕТКИ ЖЕЛТОГО ЦВЕТА.
Холодный (+4+7С) СТ4 инкубационный буфер должен быть использован при приготовлении и
раскапывании раствора СТ метки, это особенно важно, когда внешняя температура выше 21 С.
Важно, чтобы инкубационный буфер не контактировал с раствором метки до использования в
работе.
Мы советуем использовать одноразовый пластиковый флакон для приготовления рабочих растворов
метки и антисыворотки.
2. Перенести необходимое количество микротитровальных стрипов в рамку- держатель для стрипов
(вернуть
оставшиеся стрипы в пластиковую коробку и закрыть).
3. Раскапать по 200 мкл приготовленного раствора антител (красный) в каждую лунку, используя
рекомендованную ДЕЛЬФИЯ ЭППЕНДОРФ МУЛЬТИПИПЕТКУ или ДЕЛЬФИЯ ДИСПЕНСЕР ЮНИТ.
4. Инкубировать планшет не менее 70 минут при комнатной температуре при медленном шейкировании на
ДЕЛЬФИЯ плейтшейкере. Не инкубировать более чем 80 минут. Не удалять раскапанные антитела из планшета.
5. Пипетировать по 25 мкл стандарты и неизвестные образцы в лунки с антителами согласно следующей
схеме:
6. Инкубировать планшет 60 минут при комнатной температуре при медленном шейкировании на ДЕЛЬФИЯ
ПЛЕЙТШЕЙКЕРЕ..
7. После второй инкубации аспирировать и промыть каждый стрип с помощью ДЕЛЬФИЯ плейтвошера,
используя профамму 61 (режим промывка I).
8. Добавить по 200 мкл холодной разведенной метки (желтая) в каждую лунку с использованием
рекомендуемой Эппендорф мультипипетки.
9. Инкубирование 30 минут (+5 минут) без перемешивания при +4С (максимум при +7С). Очень важно
соблюдать во время инкубации температурный режим.
10. После второй инкубации аспирировать и промыть каждый стрип с помощью ДЕЛЬФИЯ плейтвошера,
используя программу 61 (режим промывка II).
11. Добавить 200 мкл Усиливающего раствора прямо из реагентного флакона в каждую лунку, используя
рекомендуемую ЭППЕНДОРФ мультипипетку, после заполнения Комбинаконечника раствором
Усиливающего раствора или используя ДЕЛЬФИЯ плейт диспенсер. Избегайте касания носиком пипетки лунки
или ее содержимого.
12. Встряхивайте в режиме “медленно” 5 минут. Сигнал флюоресценции стабилен в течение нескольких часов,
если нет сильного испарения жидкости. Однако, мы рекомендуем измерять в течение 1 часа, чтобы внешние
факторы не оказали влияния на уровень сигнала.
13. Флюоресценция измеряется на флюорометре с временным разрешением. Выберите номер программы 61
для автоматического измерения и подсчета результатов. Сверьте параметры группы для программы N 961 и
если необходимо произведите коррекцию в соответствии со следующим (см. описание к флюрометру для
проведения редакции параметров считывания):
ASSAY TYPE FIA
тип определения ФИА
FITTING METHOD SPLINE SMOOTHED
метод обработки метод “сглаживания”
X-AXIS LOGARITHMIC
х-ось логарифмическая
--- стр. 28 ---
Y-AXIS В/Вмакс
у-ось В/Вмакс
BLANKS О
бланки О
STANDARDS 6
стандарты 6
STANDARD REPLICATES 2 Убедитесь, чтобы концентрация
стандарты в дупликате 2 стандартов, указанная на флаконах
STANDARD CONC А совпадала с задаваемой. Если не
стандарты конц. А совпадает, введите новые.
STANDARD CONC В
стандарты конц. В
STANDARD CONC С
стандарты конц. С
STANDARD CONC D
стандарты конц. Д
STANDARD CONC Е
стандарты конц. Е
STANDARD CONC F
стандарты конц. Ф
UNKNOWN REPLICATES 2
неизвестные образцы в дубле 2
ОСОБЕННОСТИ ОПРЕДЕЛЕНИЯ:
1 . Отношение к этому набору как к целому необходимо для успешного использования ДЕЛЬФИЯ наборов.
Реагенты в этом наборе являются комплексными компонентами. Не смешивайте идентичные реагенты из
различных лотов. Не используйте реагенты после срока годности, указанной на флаконе.
2. Реагенты должны быть доведены до комнатной температуры (+20+25С) до приготовления различных
растворов. Замороженные образцы должны быть нагреты до комнатной температуры при медленном и осторожном
перемешивании. Не используйте вортекс или смешанные образцы пациентов.
3. При промывке стрипов следите, чтобы все стрипы были заполнены полностью и одинаково до верхнего
уровня как показано на картинке. После промывки стрипов, проверьте, что стрипы сухие. Если что-либо осталось в
лунках, то необходимо перевернуть планшету и встряхнуть на фильтровальную бумагу.
Аспирирующее/промывочное оборудование не должно находиться заполненным с промывочным раствором
длительный период времени, поскольку промывочные иглы могут быть закупорены и трудно проходимы для
жидкости. В конце рабочего дня аспирировать дистиллированную воду в аспирирующую/промывочную систему.
Промывочное устройство должно быть регулярно промываться раствором NaCL (ЗОг/Л), а затем дистиллированной
водой и 50% этанолом и в конце промыто дистиллированной водой.
4. Для избежания примеси европия и как результат высокого флюресцентного фона высокие требования
предъявляются к процедуре раскапывания и промывки. Поэтому необычайно важно использовать рекомендуемые
и поставляемые вместе с ДЕЛЬФИЯ пипетки.
Усиливающий раствор должен быть раскапан только с использованием рекомендуемой ЭППЕНДОРФ
мультипипеткой, и при этом первый объем сбрасывается для полного заполнения. Тот же тип Комбинаконечника
не может быть использован для раскапывания любого другого реагента. После работы ЭППЕНДОРФ
мультипипетка помещается на штатив с наконечником.
При использовании ДЕЛЬФИЯ плейт диспенсера и ДЕЛЬФИЯ диспенсера юнита ознакомьтесь с
описанием.
П О Д СЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ:
ДЕЛЬФИЯ система включает программу для обработки результатов и получения данных в виде
стандартной кривой, концентрации неизвестных пациентов и т.д. (для детали см. описание к флюорометру или к
профамме Мультикалк).
КОНТРОЛЬ К А Ч Е С Т В А :
Использование контрольной сыворотки позволяет оценивать качество ежедневных определений.
Рекомендуется, чтобы каждая лаборатория имела свой сывороточный пул на различных уровнях концентраций, или
альтернативно использовала коммерческие контрол и., например, Липочек. Высокие, средние и низкие контрол и
должны быть использованы в каждом определении; если определения включают более чем один планшет,
контрол и должны быть использованы для каждого планшета.
О ГРА Н И Ч ЕН И Я :
Как и для всех других диагностических тест-систем, клиническое заключение не может быть основано
только на результатах одного теста и необходимо всестороннее клиническое и лабораторное обследование.
И Н ТЕРП РЕТА Ц И Я Д А Н Н Ы Х И ОЖ ИДАЕМ Ы Е РЕЗУЛЬТАТЫ :
--- стр. 33 ---
- дозирую щ ая пипетка для разливки м икролитровы х объем ов
- пипетки для разливки м иллигровы х объем ов С Т4 буф ера требуем ого для приготовления р аство р а метки и антител
- дистиллированная вода
С Б О Р О Б Р А З Ц О В И Х Р А Н Е Н И Е :
П олучение крови посредством вены пункции, образование сгустка и вы деление сы воротки посредством
центрифугирования. П лазм а с гепарином и Э Д Т А м ож ет бы ть использована. Гем олитическая (гем оглобин <5 г/Л) и
иктерическая (билирубин < 30 м г/Д л) сы воротка не оказы ваю т влияние на результаты , однако липем ическая (> 5г/Л)
сы воротка м ож ет оказы вать влияние на концентрацию С Т4.
О бразцы м огут бы ть сохранены 2 дня при +2+8С . Для более длительного п ериода необходим о зам орозить образцы до
-2ОС. И збегать повторного разм ораж и ван ия зам ораж ивания для п редотвращ ения денатурации молекулы С Т4.
М Е Р Ы П Р Е Д О С Т О Р О Ж Н О С Т И :
Для диагностики ин витро.
Э тот набор м ож ет бы ть использован только подготовленны м персоналом.
Н абор содерж ит реагенты произведенны е из ком понентов человеческой крови. И сточн ик протестирован на на
наличие поверхностного антигена к гепатиту В, анти-гепатиту С, и анти-В И Ч I и II. Т ем не м енее все реком ендации по мерам
предосторож ности при работе с п роизводны м и крови долж ны быть соблю дены .
М ож но считать все образцы крови пациентов как потенциально инф ицированны е.
Реагенты содерж ат азид натрия в качестве консерванта. А зид натрия м ож ет взаим одействовать с м еталлическим и
поверхностями с образованием азидов м еталлов. Для п редотвращ ения образования азидов металлов необходимо промы ть
больш им количеством воды.
Для дезинф екции всех сливны х реагентов пользуйтесь правилами м естны х контролли рую щ и х организаций.
П Р О Т О К О Л О П Р Е Д Е Л Е Н И Я :
В ыполните каж дое оп ределение в дубликате как для стандартов, так и для тести руем ы х образцов. С тандартная кривая
долж на быть использована для каж дого определения. О бразцы и реагенты долж ны бы ть доведен ы д о ком натной температуры
(+20+25С ) до использования, за и с к л ю ч е н и е м С Т 4 и н к у б а ц и о н н о г о б у ф ер а, к о т о р ы й д о л ж ен н а х о д и т ь с я в холоде, п ри
+4,+7С .
1. П риготовление реагентов С табильность после разведения
С тандарты С Т 4 4 месяца при +2+8С .
Д обавьте отм еренное точн о 0.6 мл дистиллированной воды в каж ды й ф лакон. Растворите за 30 минут до
использования, перем ещ ать неж но перед раскапы ванием .
П ром ы вочны й раствор 2 недели +2+25С в закры том
контейнере
П еренести 40 мл из П ром ы вочн ого К онцентрата в чисты й ф лакон и растворить добавляя 960 мл дистиллированной
воды для приготовления готового буф ерного раствора рН =7.8
С Т4 ан тисы воротка И с п о л ь з о в а т ь в т е ч е н и е 1 часа
п о сл е п р и г о т о в л е н и я
П риготовить необходим ы й объем раствора антисы воротки при см еш ивании 30 м кл концентрата антисы воротки с 3.0
мл СТ4 эссей буфером для каж дого стри па (см. таблицу). РА С Т В О Р А Н Т И Т Е Л К Р А С Н О Г О Ц В Е Т А .
С Т4 раствор м етки И с п о л ь з о в а т ь в т е ч е н и е 1 ч ас а
п о сл е п р и г о т о в л е н и я , д л я 2-ой
и н к у б а ц и и .
П риготовить необходим ы й объем раствора метки путем см еш ивания 30 м кл концентрата метки с 3.0 мл С Т4
инкубационным буф ером для каж дого стрипа (см. таблицу). РА С Т В О Р М Е Т К И Ж Е Л Т О Г О Ц ВЕТА .
Х олодны й (+4+7С ) С Т4 инкубационны й буф ер долж ен быть использован при п риготовлении и раскапы вании
раствора СТ метки, это особенно важ но, когда внеш няя тем пература вы ш е 2 1C.
В аж н о , ч т о б ы и н к у б а ц и о н н ы й б у ф ер н е к о н т а к т и р о в а л с р а с т в о р о м м е т к и до и с п о л ь зо в а н и я в р аб о те.
М ы советуем использовать одн оразовы й пластиковы й ф лакон для п риготовления рабочих растворов метки и
антисы воротки.
--- стр. 34 ---
2. П еренести необходимое количество м и кротитровальны х стрипов в рамку- держ атель для стрипов (вернуть
оставш иеся стрипы в пластиковую коробку и закры ть).
3. Раскапать по 200 мкл приготовленного раствора антител (красны й) в каж дую лунку, используя рекомендованную
А В ТО Д ЕЛ Ф И Я Э П П Е Н Д О РФ М У Л Ь Т И П И П Е Т К У или А В Т О Д Е Л Ф И Я Д И С П Е Н С Е Р Ю Н И Т.
4. И нкубировать планш ет не м енее 70 м инут при ком натной тем пературе при м едленном ш ейкировании на
А В Т О Д ЕЛ Ф И Я плейтш ейкере. Н е инкубировать более чем 80 минут. Н е удалять раскапан н ы е антитела из планш ета.
5 .______П ипетировать по 25 мкл стандарты и неизвестны е образцы в лунки с антителам и согласно следую щ ей схеме: __________
1
Ст.
А
Ст.
А
Ст.
В
1-й
Обр.
1-й
Обр.
2-й
О бр.
Ст.
В
2-й
О бр.
Ст.
С
3-й
Обр.
Ст.
С
3-й
О бр.
7 8 9 10 11 12
Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст.
д Д Е Е Ф Ф
и т.д.
6. И нкубировать планш ет 60 м инут при ком натной тем пературе при м едленном ш ейкировании на А В Т О Д ЕЛ Ф И Я
П Л ЕЙ ТШ ЕЙ КЕРЕ..
7. П осле второй инкубации аспирировать и пром ы ть каж дый стрип с п ом ощ ью А В Т О Д Е Л Ф И Я плейтвош ера, используя
програм му 61 (режим пром ы вка I).
8. Д обавить по 200 мкл холодн ой разведенной метки (ж елтая) в каж дую лунку с использованием реком ендуем ой
Э ппендорф мультипипетки.
9. И нкубирование 30 м инут (+5 м инут) без перем еш ивания при +4С (м аксим ум при +7С ). О чень важ но соблю дать во
время инкубации тем пературны й реж им .
10. П осле второй инкубации аспирировать и пром ы ть каж дый стрип с п ом ощ ью А В Т О Д Е Л Ф И Я плейтвош ера, используя
программу 61 (режим пром ы вка II).
11. Д обавить 200 мкл У силиваю щ его раствора прям о из реагентного ф лакона в каж дую лунку, используя рекомендуемую
Э П П ЕН Д О РФ мультипипетку, после заполнения К ом бинаконечника раствором У си ливаю щ его раствора или используя
А В ТО Д ЕЛ Ф И Я плейт диспенсер. И збегайте касания носиком пипетки лунки или ее содерж им ого.
12. В стряхивайте в реж им е “м едленн о” 5 минут. С игнал ф лю оресценции стабилен в течен и е нескольких часов, если нет
сильного испарения ж идкости. О днако, мы реком ендуем измерять в течен и е 1 часа, чтобы внеш ние ф акторы не оказали
влияния на уровень сигнала.
13. Ф лю оресценция изм еряется на ф лю ором етре с врем енны м разреш ением . В ы б ерите ном ер програм мы 61 для
автом атического измерения и подсчета результатов. С верьте парам етры группы для програм м ы №61 и если необходимо
произведите коррекцию в соответствии со следую щ им (см. описание к ф лю ром етру для проведения редакции параметров
считы вания):
ASSAY TY PE
тип определения
FITTIN G M ETH O D
метод обработки
X-AXIS
х-ось
Y-AXIS
у-ось
BLANKS
бланки
STA N D A RD S
стандарты
STAN DA RD R EPL IC A TE S
стандарты в дупликате
STAN DA RD CON C
стандарты конц.
STAN DA RD CON C
стандарты конц.
STAN DA RD CON C
стандарты конц.
STA N D A R D CO N C
стандарты конц.
STAN DA RD CON C
стандарты конц.
STAN DA RD CON C
стандарты конц.
U N K N O W N R EPL IC A TE S
FIA
Ф И А
SPL IN E SM O O T H ED
м етод “сглаж ивания”
L O G A R IT H M IC
логариф м ическая
В /В м акс
В /В м акс
О
О
6
6
2
2
А
А
В
В
с
с
D
Д
Е
Е
F
Ф
2
У бедитесь, чтобы концентрация
стандартов, указанная на ф лаконах
совпадала с задаваем ой. Если не
совпадает, введите новые.
--- стр. 35 ---
ОСОБЕННОСТИ ОПРЕДЕЛЕНИЯ:
1. О тнош ение к этом у набору как к целом у необходим о для успеш ного использования А В Т О Д ЕЛ Ф И Я наборов.
Реагенты в этом наборе являю тся ком плексны м и ком понентам и. Не см еш ивайте и дентичны е реагенты из различны х лотов.
Н е используйте реагенты после срока годности, указанной на флаконе.
2. Реагенты долж ны бы ть доведен ы до ком натной тем пературы (+ 20+ 25С ) до приготовления различны х растворов.
Заморож енны е образцы долж ны бы ть нагреты до ком натной тем пературы при м едленном и осторож ном перемеш ивании. Н е
используйте вортекс или см еш анны е образцы пациентов,
3. При промы вке стрипов следите, чтобы все стрипы были заполнены полностью и одинаково до верхнего уровня как
показано на картинке. П осле пром ы вки стрипов, проверьте, что стрипы сухие. Е сли что-либо осталось в лунках, то
необходимо перевернуть планш ету и встряхнуть на ф ильтровальную бумагу.
А спирирую щ ее/пром ы вочное оборудование не долж но находиться заполненны м с пром ы вочны м раствором
длительны й период времени, поскольку пром ы вочны е иглы м огут бы ть закупорены и трудно проходим ы для ж идкости. В
конце рабочего дня аспирировать дистиллированную воду в аспирирую щ ую /пром ы вочную систему. П ром ы вочное устройство
долж но быть регулярно пром ы ваться раствором N aC L (ЗОг/Л), а затем дистиллированной водой и 50% этанолом и в конце
промы то дистиллированной водой.
4. Для избеж ания прим еси европия и как результат вы сокого ф лю ресц ентн ого ф она вы сокие требования
предъявляю тся к процедуре раскапы вания и пром ы вки. П оэтом у н еобы чайно важ но использовать реком ендуем ы е и
поставляемы е вместе с А В Т О Д Е Л Ф И Я пипетки.
У силиваю щ ий раствор долж ен бы ть раскапан только с и спользованием реком ендуем ой Э П П ЕН Д О РФ
мультипипеткой, и при этом первы й объем сбрасы вается для полного заполнения. Т о т ж е ти п К ом бинаконечника не м ож ет
бы ть использован для раскапы вания лю бого другого реагента. П осле работы Э П П Е Н Д О Р Ф мультипипетка помещ ается на
ш татив с наконечником.
При использовании А В Т О Д Е Л Ф И Я плейт ди сп енсера и А В Т О Д Е Л Ф И Я ди сп енсера ю нита ознаком ьтесь с
описанием.
ПОДСЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ:
А В ТО Д ЕЛ Ф И Я систем а вклю чает програм м у для обработки результатов и получения данны х в виде стандартной
кривой, концентрации неизвестны х пациентов и т.д. (для детали см. описание к ф лю ором етру или к програм м е М ультикалк).
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА:
И спользование контрольной сы воротки позволяет оценивать качество еж едневны х определений. Рекомендуется,
чтобы каждая лаборатория им ела свой сы вороточны й пул на различны х уровнях концентраций, или альтернативно
использовала ком м ерческие контроли., наприм ер, Л ипочек. В ы сокие, средние и низкие контроли долж ны бы ть использованы в
каждом определении; если определения вклю чаю т более чем один планш ет, контроли долж ны бы ть использованы для каж дого
планш ета.
ОГРАНИЧЕНИЯ:
Как и для всех других ди агности чески х тест-систем , клиническое заклю чение не м ож ет бы ть основано только на
результатах одного теста и н еобходим о всесторонн ее клиническое и лабораторн ое обследование.
ИНТЕРПРЕТАЦИЯ ДАННЫ Х И ОЖИДАЕМЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ:
Разброс концентраций в образцах сывороток крови 204 здоровых мужчин и женщин составил для
АВТОДЕЛФ ИЯ С Т4 9.8-16.8 пи комол ь/Л, при средней концентрации = 12 .7 пн комол ь/Л.
О днако рекомендуется в каж дой лаборатории устанавливать свой средний уровень для С Т4 с учетом местных
ф акторов, таких как питание, климат, условия ж изни и др.
неизвестные образцы в дубле 2
--- стр. 37 ---
Д е л ф и я Т и р е о с в я з ы в а ю щ и й г л о б у л и н (Т С Г )
D E L F IA T B G
Ф л ю р о м е т р и ч е с к и й а н а л и з с р а з р е ш е н и е м п о в р е м е н и д л я к о л и ч е с т в е н н о г о
о п р е д е л е н и я т и р о и д с в я з ы в а ю щ е г о г л о б у л и н а (Т С Г ) в с ы в о р о т к е к р о в и ;
Производитель - WALLAC Оу, Финляндия
Для диагностического применения in vitro.
Д Я Я П Р И М Е Н Е Н И Я В IN V IT R O Д И А Г Н О С Т И К Е
96 О П РЕ Д Е Л Е Н И Й
Н А ЗН А ЧЕН И Е:
Н абор предназначен для определения тироидсвязы ваю щ его глобулина (Т С Г ) в образцах сы воротки крови
человека. П ринцип основан на им м уноф лю оресцентом анализе, в котором определяем ая молекула антител к
ТСГ взаим одействует по типу реакции антиген антитело с сорби рованн ы м и на поверхности планш ета
антигеном против антител к Т С Г и вторы м и антителами, м ечены е ф лю оресц ентн ой меткой. В результате
реакции образуется вы сокоф лю оресц ентн ое соединение, концентрация которого определяется на приборе-
ф лю ором етре Д Е Л Ф И Я /В И К Т О Р . К онцентрация определяем ого ф лю оресц ирую щ его соединения прямо
пропорциональна количеству антител к Т С Г в образцах сы воротки крови человека.
СО СТА В Н А БО РА :
1 .ТСГ стандарты ; 1.0мл (ф л). К -во - 6 шт.
2.А нти-ТСГ-Еи раствор(м ы ш ин ы е м оноклональны е) 0.5 м л(ф л). К -во - 2 шт.
3.Т С Г инкубационны й буф ер; 50 мл(ф л). К -во - 1 шт.
4.А нти-ТС Г м икротитрационны е стрипы (м ы ш ины е м оноклональны е); 96 луночны е; К -во - 1 шт
5.Ш трих кодовы е м етки для кассеты с реагентами, К -во - 3 шт.
ПРИНЦИП МЕТОДА:
ДЕЛФИЯ ТСГ определение основано на твердофазном, флюороиммуном определении с
разрешением по времени на основе конкуренции между меченым европием ТСГ и ТСГ в тестируемом
образце за ограниченное количество мест связывания на ТСГ -специфических моноклональных
антителах (мышиные). Стандарты, контрол и и образца пациентов, содержащие ТСГ ингибируют
связывание меченого европием ТСГ с антителами. Блокирующие агенты в ТСГ инкубационном буфере
предотвращают выделение ТСГ из связанного с белками состояния. Второе антитело
взаимодействующее с анти-мышиными антителами, которые покрывают поверхность лунок и
представляют твердую фазу, определяя высококачественное разделение антител-связанных и
свободных антигенов ТСГ В этом определении только одна инкубационная ступень.
Усиливающий раствор диссоциирует ионы европия из меченого ТСГ в раствор, где они
формируют высокофлюоресцентные хелатные комплексы с компонентами усиливающего раствора.
Флюоресценция каждой лунки в последующем измеряется. Флюоресцентный сигнал каждого образца
обратно пропорционален количеству ТСГ в образце.
Каждый ДЕЛФИЯ ТСГ набор содержит реагентов необходимых для 96 определений.
Срок годности набора указан на внешней стороне коробки. Хранение при +2+8 С.
МАТЕРИАЛЫ НЕОБХОДИМЫЕ, НО НЕ ПОСТАВЛЯЕМЫЕ
С НАБОРОМ;
--- стр. 38 ---
Данный набор является частью комплексной системы иммунодиагностических реагентов и
оборудования. ДЕЛФИЯ система требует следующие компоненты, которые могут быть поставлены или
от WALLAC 0Y или от его дистрибьютеров;
1 . Флюорометр с временным разрешением плюс принтер и внешний компьютер.
2. Автоматический вошер - ДЕЛФИЯ плейтвошер (Кат.№1296-024 или1296-026)
3. Автоматический шейкер-ДЕЛФИЯ плейтшейкер{Кат.№1296-001 или 1296-003)
4. Пипетка для разливки ДЕЛФИЯ буфера и метки - ЭППЕНДОРФ МУЛЬТИПИПЕТКА (1296-014) с 5 мл
Комби наконечниками (1296-016) или в качестве альтернативы ДЕЛФИЯ плейт диспенсер с ДЕЛФИЯ
диспенсер юнит (1296-041 или 1296-043).
5. Пипетка для разливки Усиливающего раствора - ЭППЕНДОРФ мультипипетка (1296-014) с 5 мл
Комби наконечниками (1296-016) или альтернативно ДЕЛФИЯ плейт диспенсер (1296-041).
6. ДЕЛФИЯ растворитель I (Кат.№ В127-100, В128-100).
В дополнении к ДЕЛФИЯ системе необходимо следующее;
- дозирующая пипетка для разливки микролитровых объемов
- пипетки для разливки миллитровых объемов НЭ буфера требуемого для приготовления
раствора метки и антител
-дистиллированная вода
СБОР ОБРАЗЦОВ И ХРАНЕНИЕ;
Получение крови посредством венопункции, образование сгустка и выделение сыворотки
посредством центрифугирования. Плазма, полученна с использованием ЭДТА и цитрата натрия не
может быть использована, вследствии воздействия на хелатирующий европий. Однако может
применяться плазма крови полученная с гепарином. Гемолитическая (гемоглобин>2г/Л), липемическая
(>2 г/Л) и иктерическая (билирубин>30 мкмоль/Л) сыворотки использовать не рекомендуется. Если
концентрация превышает 50 нмоль/Л следует развести сыворотки или нормальной женской
сывороткой или ДЕЛФИЯ дилюентом I.
Образцы могут быть сохранены 12 часов при комнатной температуре или 3 дня при +2+8С.
Для более длительного периода неразведенные образцы могут храниться при -20 С. Избегайте
повторного замораживания размораживания.
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ;
Для диагностики ин витро.
Следует соблюдать правила предостороженности США №CDC 88-8395 или местные правила.
Можно считать все образцы крови пациентов как потенциально инфицированные.
Реагенты содержат азид натрия в качестве консерванта. Азид натрия может
взаимодействовать с металлическими поверхностями с образованием азидов металлов. Для
предотвращения образования азидов металлов необходимо промыть большим количеством воды.
Для дезинфекции всех сливных реагентов пользуйтесь правилами местных контроллирующих
организаций.
Флюоресценция измеряется на флюорометре с временным разрешением. Выберите номер
программы 50 для автоматического измерения и подсчета результатов. Сверьте параметры
фуппы для программы №50 и если необходимо произведите коррекцию в соответствии со следующим
(см. описание к флюрометру для проведения редакции параметров считывания);
ASSAY TYPE FIA
тип определения ФИА
FITTING METHOD SPLINE SMOOTHED
метод обработки метод “сглаживания"
X-AXIS LOGARITHMIC
х-ось логарифмическая
--- стр. 39 ---
Y-AXIS В/Вмакс
у-ось В/Вмакс
BLANKS О
бланки О
STANDARDS 6
стандарты 6
STANDARD REPLICATES 2 Убедитесь, чтобы концентрация
стандарты в дупликате 2 стандартов, указанная на флаконах
STANDARD CONC А совпадала с задаваемой. Если не
стандарты конц. А совпадает, введите новые.
STANDARD CONC В
стандарты конц. В
STANDARD CONC С
стандарты конц. С
STANDARD CONC D
стандарты конц. Д
STANDARD CONC Е
стандарты конц. Е
STANDARD CONC F
стандарты конц. Ф
UNKNOWN REPLICATES 2
неизвестные образцы в дубле 2
ОСОБЕННОСТИ ОПРЕДЕЛЕНИЯ;
1. Отношение к этому набору как к целому необходимо для успешного использования ДЕЛФИЯ
наборов. Реагенты в этом наборе являются комплексными компонентами. Не смешивайте идентичные
реагенты из различных лотов. Не используйте реагенты после срока годности, указанной на флаконе.
2. Реагенты должны быть доведены до комнатной температуры {+20+25С) до приготовления
различных растворов. Замороженные образцы должны быть нагреты до комнатной температуры при
медленном и осторожном перемешивании. Не используйте вортекс или смешанные образцы
пациентов.
3. При промывке стрипов следите, чтобы все стрипы были заполнены полностью и одинаково
до верхнего уровня как показано на картинке. После промывки стрипов, проверьте, что стрипы сухие.
Если что-либо осталось в лунках, то необходимо перевернуть планшету и встряхнуть на
фильтровальную бумагу.
Аспирирующее/промывочное оборудование не должно находиться заполненным с
промывочным раствором длительный период времени, поскольку промывочные иглы могут быть
закупорены и трудно проходимы для жидкости. В конце рабочего дня аспирировать дистиллированную
воду в аспирирующую/промывочную систему. Промывочное устройство должно быть регулярно
промываться раствором NaCL (ЗОг/Л), а затем дистиллированной водой и 50% этанолом и в конце
промыто дистиллированной водой.
4. Для избежания примеси европия и как результат высокого флюресцентного фона высокие
требования предъявляются к процедуре раскапывания и промывки. Поэтому необычайно важно
использовать рекомендуемые и поставляемые вместе с ДЕЛФИЯ пипетки.
Усиливающий раствор должен быть раскапан только с использованием рекомендуемой
ЭППЕНДОРФ мультипипеткой, и при этом первый объем сбрасывается для полного заполнения. Тот
же тип Комбинаконечника не может быть использован для раскапывания любого другого реагента.
После работы ЭППЕНДОРФ мультипипетка помещается на штатив с наконечником.
При использовании ДЕЛФИЯ плейт диспенсера и ДЕЛФИЯ диспенсера юнита ознакомьтесь с
описанием.
ПОДСЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ:
ДЕЛФИЯ система включает программу для обработки результатов и получения данных в виде
стандартной кривой, концентрации неизвестных пациентов и т.д, (для детали см, описание к
флюорометру или к программе Мультикалк).
--- стр. 41 ---
и
А в т о Д Е Л Ф И Я Т и р е о с в я з ы в а ю щ и й г л о б у л и н (Т С Г )
A u to D E L F IA T B G
Ф л ю р о м е т р и ч е с к и й а н а л и з с р а з р е ш е н и е м п о в р е м е н и д л я к о л и ч е с т в е н н о г о
о п р е д е л е н и я т и р о и д с в я з ы в а ю щ е г о г л о б у л и н а (Т С Г ) в с ы в о р о т к е к р о в и ;
Производитель - WALLAC Оу, Финляндия
Для диагностического применения In vitro.
ДЛЯ П Р И М Е Н Е Н И Я В IN V IT R O Д И А Г Н О С Т И К Е
96 О П РЕ Д Е Л Е Н И Й
Н А ЗН А Ч ЕН И Е:
Н абор предназначен для определения тироидсвязы ваю щ его глобулина (Т С Г ) в образцах сы воротки крови
человека. П ринцип основан н а им м уноф лю оресцентом анализе, в котором оп ределяем ая молекула антител к
Т С Г взаим одействует по типу реакции антиген антитело с сорби рованн ы м и на поверхности планш ета
антигеном против антител к Т С Г и вторы м и антителам и, м ечены е ф лю оресц ентн ой меткой. В результате
реакции образуется вы сокоф лю оресцентное соединение, концентрация которого определяется на приборе-
ф лю ором етре А В Т О Д Е Л Ф И Я /В И К Т О Р . К онцентрация определяем ого ф лю оресцирую щ его соединения прямо
пропорциональна количеству антител к Т С Г в образцах сы воротки крови человека.
С ОСТАВ Н А БО РА :
1 .ТСГ стандарты ; 1.0мл (ф л). К -во - 6 шт.
2.А нти-ТСГ-Еи раствор(м ы ш ин ы е м оноклональны е) 0.5 мл(фл). К -во - 2 шт.
3.Т С Г инкубационны й буф ер; 50 мл(ф л). К -во - 1 шт.
4.АНТИ-ТСГ м и кротитрационны е стрипы (м ы ш ины е м оноклональны е); 96 луночн ы е; К-во - 1 шт
5.Ш трих кодовы е м етки для кассеты с реагентам и. К -во - 3 шт.
ПРИНЦИП МЕТОДА:
АВТОДЕЛФИЯ ТСГ определение основано на твердофазном, флюороиммуном определении с
разрешением по времени на основе конкуренции между меченым европием ТСГ и ТСГ в тестируемом
образце за ограниченное количество мест связывания на ТСГ -специфических моноклональных
антителах (мышиные). Стандарты, контроли и образца пациентов, содержащие ТСГ ингибируют
связывание меченого европием ТСГ с антителами. Блокирующие агенты в ТСГ инкубационном буфере
предотвращают выделение ТСГ из связанного с белками состояния. Второе антитело
взаимодействующее с анти-мышиными антителами, которые покрывают поверхность лунок и
представляют твердую фазу, определяя высококачественное разделение антител-связанных и
свободных антигенов ТСГ. В этом определении только одна инкубационная ступень.
Усиливающий раствор диссоциирует ионы европия из меченого ТСГ в раствор, где они
формируют высокофлюоресцентные хелатные комплексы с компонентами усиливающего раствора.
Флюоресценция каждой лунки в последующем измеряется. Флюоресцентный сигнал каждого образца
обратно пропорционален количеству ТСГ в образце.
Каждый АВТОДЕЛФИЯ ТСГ набор содержит реагентов необходимых для 96 определений.
Срок годности набора указан на внешней стороне коробки. Хранение при +2+8 С.
МАТЕРИАЛЫ НЕОБХОДИМЫЕ, НО НЕ ПОСТАВЛЯЕМЫЕ
С НАБОРОМ:
--- стр. 42 ---
Данный набор является частью комплексной системы иммунодиагностических реагентов и
оборудования. АВТОДЕЛФИЯ система требует следующие компоненты, которые могут быть
поставлены или от WALL АС 0Y или от его дистрибьютеров:
1 . Флюорометр с временным разрешением плюс принтер и внешний компьютер.
2. /Стоматический вошер - АВТОДЕЛФИЯ плейтвошер (Кат. №1296-024 ил и 1296-026)
3. Автоматический шейкер-АВТОДЕЛФИЯ плейтшейкер(Кат. N91296-001 ил и 1296-003)
4. Пипетка для разливки АВТОДЕЛФИЯ буфера и метки - ЭППЕНДОРФ МУЛЬТИПИПЕТКА (1296-014) с
5 мл Комби наконечниками (1296-016) или в качестве альтернативы АВТОДЕЛФИЯ плейт диспенсер с
АВТОДЕЛФИЯ диспенсер юнит (1296-041 или 1296-043).
5. Пипетка для разливки Усиливающего раствора - ЭППЕНДОРФ мультипипетка (1296-014) с 5 мл
Комби наконечниками (1296-016) или альтернативно АВТОДЕЛФИЯ плейт диспенсер (1296-041).
6. АВТОДЕЛФИЯ растворитель I (Кат.№ В127-100. В128-100).
В дополнении к АВТОДЕЛФИЯ системе необходимо следующее:
- дозирующая пипетка для разливки микролитровых объемов
- пипетки для разливки миллитровых объемов НЭ буфера требуемого для приготовления
раствора метки и антител
- дистиллированная вода
СБОР ОБРАЗЦОВ И ХРАНЕНИЕ:
Получение крови посредством венопункции, образование сгустка и выделение сыворотки
посредством центрифугирования. Плазма, полученна с использованием ЭДТА и цитрата натрия не
может быть использована, вследствии воздействия на хелатирующий европий. Однако может
применяться плазма крови полученная с гепарином. Гемолитическая (гемоглобин>2г/Л), липемическая
(>2 г/Л) и иктерическая (билирубин>30 мкмоль/Л) сыворотки использовать не рекомендуется. Если
концентрация превышает 50 нмоль/Л следует развести сыворотки или нормальной женской
сывороткой или АВТОДЕЛФИЯ дилюентом I,
Образцы могут быть сохранены 12 часов при комнатной температуре или 3 дня при +2+8С.
Для более длительного периода неразведенные образцы могут храниться при -20 С. Избегайте
повторного замораживания размораживания.
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ:
Для диагностики ин витро.
Следует соблюдать правила предостороженности США №CDC 88-8395 или местные правила.
Можно считать все образцы крови пациентов как потенциально инфицированные.
Реагенты содержат азид натрия в качестве консерванта. Азид натрия может
взаимодействовать с металлическими поверхностями с образованием азидов металлов. Для
предотвращения образования азидов металлов необходимо промыть большим количеством воды.
Для дезинфекции всех сливных реагентов пользуйтесь правилами местных контроллирующих
организаций.
Флюоресценция измеряется на флюорометре с временным разрешением. Выберите номер
программы 50 для автоматического измерения и подсчета результатов. Сверьте параметры
фуппы для программы №50 и если необходимо произведите коррекцию в соответствии со следующим
(см. описание кфлюрометрудля проведения редакции параметров считывания):
ASSAY TYPE FIA
тип определения ФИА
FITTING METHOD SPLINE SMOOTHED
метод обработки метод "сглаживания"
X-AXIS LOGARITHMIC
х-ось логарифмическая
--- стр. 43 ---
Y-AXIS
у-ось
BLANKS
бланки О
STANDARDS
стандарты
STANDARD REPLICATES
стандарты в дупликате 2
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
UNKNOWN REPLICATES
неизвестные образцы в дубле 2
В/В макс
В/Вмакс
О
6
6
2 Убедитесь, чтобы концентрация
стандартов, указанная на флаконах
А совпадала с задаваемой. Если не
А совпадает, введите новые.
В
В
С
С
D
Д
Е
Е
F
Ф
2
ОСОБЕННОСТИ ОПРЕДЕЛЕНИЯ;
1 . Отношение к этому набору как к целому необходимо для успешного использования
АВТОДЕЛФИЯ наборов. Реагенты в этом наборе являются комплексными компонентами. Не
смешивайте идентичные реагенты из различных лотов. Не используйте реагенты после срока
годности, указанной на флаконе.
2. Реагенты должны быть доведены до комнатной температуры (+20+25С) до приготовления
различных растворов. Замороженные образцы должны быть нагреты до комнатной температуры при
медленном и осторожном перемешивании. Не используйте вортекс или смешанные образцы
пациентов.
3. При промывке стрипов следите, чтобы все стрипы были заполнены полностью и одинаково
до верхнего уровня как показано на картинке. После промывки стрипов, проверьте, что стрипы сухие.
Если что-либо осталось в лунках, то необходимо перевернуть планшету и встряхнуть на
фильтровальную бумагу.
Аспирирующее/промывочное оборудование не должно находиться заполненным с
промывочным раствором длительный период времени, поскольку промывочные иглы могут быть
закупорены и трудно проходимы для жидкости. В конце рабочего дня аспирировать дистиллированную
воду в аспирирующую/промывочную систему. Промывочное устройство должно быть регулярно
промываться раствором NaCL (ЗОг/Л), а затем дистиллированной водой и 50% этанолом и в конце
промыто дистиллированной водой.
4. Для избежания примеси европия и как результат высокого флюресцентного фона высокие
требования предъявляются к процедуре раскапывания и промывки. Поэтому необычайно важно
использовать рекомендуемые и поставляемые вместе с АВТОДЕЛФИЯ пипетки.
Усиливающий раствор должен быть раскапан только с использованием рекомендуемой
ЭППЕНДОРФ мультипипеткой, и при этом первый объем сбрасывается для полного заполнения. Тот
же тип Комбинаконечника не может быть использован для раскапывания любого другого реагента.
После работы ЭППЕНДОРФ мультипипетка помещается на штатив с наконечником.
При использовании АВТОДЕЛФИЯ плейт диспенсера и АВТОДЕЛФИЯ диспенсера юнита
ознакомьтесь с описанием.
ПОДСЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ:
АВТОДЕЛФИЯ система включает программу для обработки результатов и получения данных в
виде стандартной кривой, концентрации неизвестных пациентов и т.д. (для детали см. описание к
флюорометру или к программе Мультикалк).
--- стр. 45 ---
АВТОДЕЛФИЯ Антитела к тиреондной пероксидазе (аТПО)
Производитель - WALLAC Оу, Финляндия
Для диагностического применения in vitro.
AutoDELFlA TPOAb
АВТОДЕЛФИЯ антитела к тиреондной пероксидазе (аТПО) .
ФЛЮОРОМЕТРИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ С РАЗРЕШЕНИЕМ ПО ВРЕМЕНИ ДЛЯ КОЛИЧЕСТВЕННОГО
ОПРЕДЕЛЕНИЯ АНТИТЕЛ К ТИРЕОИДНОЙ ПЕРОКСИДАЗЕ В ОБРАЗЦАХ СЫВОРОТКИ КРОВИ
ЧЕЛОВЕКА.
ДЛЯ ПРИМЕНЕНИЯ В IN VITRO ДИАГНОСТИКЕ
96 ОПРЕДЕЛЕНИЙ
НАЗНАЧЕНИЕ:
Набор предназначен для определения антител к тиреондной пероксидазе в образцах сыворотки крови человека.
Принцип основан на иммунофлюоресцентом анализе, в котором определяемая молекула антител к тиреондной
пероксидазе взаимодействует по типу реакции антиген антитело с сорбированными на поверхности планшета
антигеном против антител к тиреондной пероксидазе и вторыми антителами, меченые флюоресцентной меткой.
В результате реакции образуется высокофлюоресцентное соединение, концентрация которого определяется на
приборе-флюорометре ДЕЛФИЯ/ВИКТОР. Концентрация определяемого флюоресцирующего соединения
прямо пропорциональна количеству антител к тиреондной пероксидазе в образцах сыворотки крови человека.
СОСТАВ НАБОРА:
1. Стандарты: 6 фл., 1,1 мл
2. Анти-ИгГ-Еи раствор, 2 фл., 0,7 мл
3. Контроли: 2 фл., 1 мл.
4. Буфер для анализа: 1 бут., 50 мл.
5. Микропланшета 96-ти луночные, покрытые рекомбинатным антигеном к человеческому ТПО
6. аТПО/аТГ дилюент, 1 бут., 22 мл.
7. Наклейки со штрихкодами для реагентов - 3 шт.
8. Наклейки со штрихкодами для планшет - 3 шт
9. Сертификат контроля качества - 1 шт.
ПРИНЦИП МЕТОДА:
АВТОДЕЛФИЯ аТПО определение основано на твердофазном, флюороиммуно определении с
разрешением по времени на основе конкуренции между меченым европием аИгГ и аТПО в
тестируемом образце за ограниченное количество мест связывания на аТПО -специфических
рекомбинантном антигене. Стандарты, контроли и образца пациентов, содержащие аТПО ингибируют
связывание меченое европием аТПО с антителами. Блокирующие агенты в аТПО инкубационном
буфере предотвращают выделение аТПОа из связанного с белками состояния. Второе антитело
взаимодействующее с рекомбинантным антигеном покрывают поверхность лунок и представляют
твердую фазу, определяя высококачественное разделение антител-связанных и свободных антигенов
аТПО. В этом определении только одна инкубационная ступень.
Усиливающий раствор диссоциирует ионы европия из меченого аТПО в раствор, где они
формируют вьюокофлюоресцентные хелатные комплексы с компонентами усиливающего раствора.
Флюоресценция каждой лунки в последующем измеряется. Флюоресцентный сигнал каждого образца
обратно пропорционален количеству аТПО в образце.
Каждый АВТОДЕЛФИЯ аТПО набор содержит реагентов необходимых для 96 определений.
Срок годности набора указан на внешней стороне коробки. Хранение при +2+8 С.
--- стр. 46 ---
МАТЕРИАЛЫ НЕОБХОДИМЫЕ, НО НЕ ПОСТАВЛЯЕМЫЕ
С НАБОРОМ:
Данный набор является частью комплексной системы иммунодиагностических реагентов и
оборудования. АВТОДЕЛФИЯ система требует следующие компоненты, которые могут быть
поставлены или от WALLAC 0Y или от его дистрибьютеров;
1. Флюорометр с временным разрешением плюс принтер и внешний компьютер.
2. Автоматический вошер - АВТОДЕЛФИЯ плейтвошер (Кат.№1296-024 или1296-026)
3. Автоматический шейкер-АВТОДЕЛФИЯ плейтшейкер(Кат, №1296-001 или 1296-003)
4. Пипетка для разливки АВТОДЕЛФИЯ буфера и метки - ЭППЕНДОРФ МУЛЬТИПИПЕТКА (1296-014) с
5 мл Комби наконечниками (1296-016) или в качестве альтернативы АВТОДЕЛФИЯ плейт диспенсер с
АВТОДЕЛФИЯ диспенсер юнит (1296-041 или 1296-043).
5. Пипетка для разливки Усиливающего раствора - ЭППЕНДОРФ мультипипетка (1296-014) с 5 мл
Комби наконечниками (1296-016) или альтернативно АВТОДЕЛФИЯ плейт диспенсер (1296-041).
6. АВТОДЕЛФИЯ растворитель I (Кат.№ В127-100, В128-100).
В дополнении к АВТОДЕЛФИЯ системе необходимо следующее:
- дозирующая пипетка для разливки микролитровых объемов
- пипетки для разливки миллитровых объемов НЭ буфера требуемого для приготовления
раствора метки и антител
- дистиллированная вода
СБОР ОБРАЗЦОВ И ХРАНЕНИЕ:
Получение крови посредством венопункции, образование сгустка и выделение сыворотки
посредством центрифугирования. Плазма, полученна с использованием ЭДТА и цитрата натрия не
может быть использована, вследствии воздействия на хелатирующий европий. Однако может
применяться плазма крови полученная с гепарином. Гемолитическая (гемоглобин>2г/Л), липемическая
(> 2 г/Л) и иктерическая (билирубин>30 мкмоль/Л) сыворотки использовать не рекомендуется. Если
концентрация превышает 50 нмоль/Л следует развести сыворотки или нормальной женской
сывороткой или АВТОДЕЛФИЯ дилюентом ) .
Образць! могут быть сохранены 12 часов при комнатной температуре или 3 дня при +2+8С.
Для более длительного периода неразведенные образцы могут храниться при -20 С. Избегайте
повторного замораживания размораживания.
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ:
Для диагностики ин витро.
Следует соблюдать правила предостороженности США №CDC 88-8395 или местные правила.
Можно считать все образцы крови пациентов как потенциально инфицированные.
Реагенты содержат азид натрия в качестве консерванта. Азид натрия может
взаимодействовать с металлическими поверхностями с образованием азидов металлов. Для
предотвращения образования азидов металлов необходимо промыть большим количеством воды.
Для дезинфекции всех сливных реагентов пользуйтесь правилами местных контроллирующих
организаций.
Флюоресценция измеряется на флюорометре с временным разрешением. Выберите номер
программы 50 для автоматического измерения и подсчета результатов. Сверьте параметры
группы для программы №50 и если необходимо произведите коррекцию в соответствии со следующим
(см. описание кфлюрометру для проведения редакции параметров считывания):
--- стр. 47 ---
ASSAY TYPE
тип определения
FITTING METHOD
метод обработки
X-AXIS
х-ось
Y-AXIS
у-ось
BLANKS
бланки О
STANDARDS
стандарты
STANDARD REPLICATES
стандарты в дупликате 2
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
UNKNOWN REPLICATES
неизвестные образцы в дубле 2
FIA
ФИА
SPLINE SMOOTHED
метод “сглаживания"
LOGARITHMIC
логарифмическая
В/В макс
В/Вмакс
О
6
6
2 Убедитесь, чтобы концентрация
стандартов, указанная на флаконах
А совпадала с задаваемой. Если не
А совпадает, введите новые.
В
В
С
С
D
Д
Е
Е
F
Ф
2
ОСОБЕННОСТИ ОПРЕДЕЛЕНИЯ;
1. Отношение к этому набору как к целому необходимо для успешного использования
АВТОДЕЛФИЯ наборов. Реагенты в этом наборе являются комплексными компонентами. Не
смешивайте идентичные реагенты из различных лотов. Не используйте реагенты после срока
годности, указанной на флаконе.
2. Реагенты должны быть доведены до комнатной температуры (+20+25С) до приготовления
различных растворов. Замороженные образцы должны быть нагреты до комнатной температуры при
медленном и осторожном перемешивании. Не используйте вортекс или смешанные образцы
пациентов.
3. При промывке стрипов следите, чтобы все стрипы были заполнены полностью и одинаково
до верхнего уровня как показано на картинке. После промывки стрипов, проверьте, что стрипы сухие.
Если что-либо осталось в лунках, то необходимо перевернуть планшету и встряхнуть на
фильтровальную бумагу.
Аспирирующее/промывочное оборудование не должно находиться заполненным с
промывочным раствором длительный период времени, поскольку промывочные иглы могут быть
закупорены и трудно проходимы для жидкости. В конце рабочего дня аспирировать дистиллированную
воду в аспирирующую/промывочную систему. Промывочное устройство должно быть регулярно
промываться раствором NaCL (ЗОг/Л), а затем дистиллированной водой и 50% этанолом и в конце
промыто дистиллированной водой.
4. Для избежания примеси европия и как результат высокого флюресцентного фона высокие
требования предъявляются к процедуре раскапывания и промывки. Поэтому необычайно важно
использовать рекомендуемые и поставляемые вместе с АВТОДЕЛФИЯ пипетки.
Усиливающий раствор должен быть раскапан только с использованием рекомендуемой
ЭППЕНДОРФ мультипипеткой, и при этом первый объем сбрасывается для полного заполнения. Тот
же тип Комбинаконечника не может быть использован для раскапывания любого другого реагента.
После работы ЭППЕНДОРФ мультипипетка помещается на штатив с наконечником.
При использовании АВТОДЕЛФИЯ плейт диспенсера и АВТОДЕЛФИЯ диспенсера юнита
ознакомьтесь с описанием.
--- стр. 49 ---
АВТОДЕЛФИЯ Антитела к тиреоглобулину (аТГ)
AutoDELFIA hTGAb
Производитель - WALLAC Оу, Финляндия
Для диагностического применения in vitro.
ФЛЮОРОМЕТРИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ С РАЗРЕШЕНИЕМ ПО ВРЕМЕНИ ДЛЯ КОЛИЧЕСТВЕННОГО
ОПРЕДЕЛЕНИЯ АНТИТЕЛ К ТИРЕОГЛОБУЛИНУ В ОБРАЗЦАХ СЫВОРОТКИ КРОВИ ЧЕЛОВЕКА.
ДЛЯ ПРИМЕНЕНИЯ В IN VITRO ДИАГНОСТИКЕ
96 ОПРЕДЕЛЕНИЙ
НАЗНАЧЕНИЕ:
Набор предназначен для определения антител к тиреоглобулину в образцах сыворотки крови человека. Принцип
основан на иммунофлюоресцентом анализе, в котором определяемая молекула антитела к тиреоглобулину
взаимодействует по типу реакции антиген антитело с сорбированными на поверхности планшета антигеном
против антител к тиреоглобулину и вторыми антителами, меченые флюоресцентной меткой. В результате
реакции образуется высокофлюоресцентное соединение, концентрация которого определяется на приборе-
флюорометре ДЕЛФИЯ/ВИКТОР. Концентрация определяемого флюоресцирующего соединения прямо
пропорциональна количеству антител к тиреоглобулину в образцах сыворотки крови человека.
1. Стандарты: 6 фл., 1,1 мл
2. Анти-ИгГ-Еи раствор, 2 фл., 0,7 мл
3. Контроли: 2 фл., 1 мл.
4. Буфер для анализа: 1 бут., 50 мл.
5. Микропланшета 96-ти луночные, покрытые рекомбинатным антигеном к человеческому ТПО
6. аТПО/аТГ дилюент, 1 бут., 22 мл.
7. Наклейки со штрихкодами для реагентов - 3 шт.
8. Наклейки со штрихкодами для планшет - 3 шт
9. Сертификат контроля качества - 1 шт.
ПРИНЦИП МЕТОДА:
АВТОДЕЛФИЯ аТГ определение основано на твердофазном, флюороиммуном определении с
разрешением по времени на основе конкуренции между меченым европием ИгГ и аТГ в тестируемом
образце. Стандарты, контроли и образца пациентов, содержащие аТГ ингибируют связывание
меченого европием аТГ с антителами. Блокирующие агенты в аТГ инкубационном буфере
предотвращают выделение аТГа из связанного с белками состояния. Второе антитело
взаимодействующее с рекомбинантным антигеном покрывает поверхность лунок и представляют
твердую фазу, определяя высококачественное разделение антител-связанных и свободных антигенов
аТГ. В этом определении только одна инкубационная ступень.
Усиливающий раствор диссоциирует ионы европия из меченого аТГ в раствор, где они
формируют высокофлюоресцентные хелатные комплексы с компонентами усиливающего раствора.
Флюоресценция каждой лунки в последующем измеряется. Флюоресцентный сигнал каждого образца
обратно пропорционален количеству аТГ в образце.
Каждый АВТОДЕЛФИЯ аТГ набор содержит реагентов необходимых для 96 определений.
Срок годности набора указан на внешней стороне коробки. Хранение при +2+8 С.
МАТЕРИАЛЫ НЕОБХОДИМЫЕ, НО НЕ ПОСТАВЛЯЕМЫЕ
С НАБОРОМ:
--- стр. 50 ---
Данный набор является частью комплексной системы иммунодиагностических реагентов и
оборудования. АВТОДЕЛФИЯ система требует следующие компоненты, которые могут быть
поставлены или от WALLAC 0Y или от его дистрибьютеров:
1. Флюорометр с временным разрешением плюс принтер и внешний компьютер.
2. Автоматический вошер - АВТОДЕЛФИЯ плейтвошер (Кат.№1296-024 или1296-026)
3. Автоматический шейкер-АВТОДЕЛФИЯ плейтшейкер(Кат.№ 1296-001 ил и 1296-003)
4. Пипетка для разливки АВТОДЕЛФИЯ буфера и метки - ЭППЕНДОРФ МУЛЬТИПИПЕТКА (1296-014) с
5 мл Комби наконечниками (1296-016) или в качестве альтернативы АВТОДЕЛФИЯ плейт диспенсер с
АВТОДЕЛФИЯ диспенсер юнит (1296-041 или 1296-043).
5. Пипетка для разливки Усиливающего раствора - ЭППЕНДОРФ мультипипетка (1296-014) с 5 мл
Комби наконечниками (1296-016) или альтернативно АВТОДЕЛФИЯ плейт диспенсер (1296-041).
6. АВТОДЕЛФИЯ растворитель I (Кат.№ В127-100, В128-100).
В дополнении к АВТОДЕЛФИЯ системе необходимо следующее:
- дозирующая пипетка для разливки микролитровых объемов
- пипетки для разливки миллитровых объемов НЭ буфера требуемого для приготовления
раствора метки и антител
- дистиллированная вода
СБОР ОБРАЗЦОВ И ХРАНЕНИЕ;
Получение крови посредством венопункции, образование сгустка и выделение сыворотки
посредством центрифугирования. Плазма, полученна с использованием ЭДТА и цитрата натрия не
может быть использована, вследствии воздействия на хелатирующий европий. Однако может
применяться плазма крови полученная с гепарином. Гемолитическая (гемоглобин>2г/Л), липемическая
(> 2 г/Л) и иктерическая (билирубин>30 мкмоль/Л) сыворотки использовать не рекомендуется. Если
концентрация превышает 50 нмоль/Л следует развести сыворотки или нормальной женской
сывороткой или АВТОДЕЛФИЯ дилюентом I .
Образцы могут быть сохранены 12 часов при комнатной температуре или 3 дня при +2+8С.
Для более длительного периода неразведенные образцы могут храниться при -20 С. Избегайте
повторного замораживания размораживания.
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ:
Для диагностики ин витро.
Следует соблюдать правила предостороженности США №CDC 88-8395 или местные правила.
Можно считать все образцы крови пациентов как потенциально инфицированные.
Реагенты содержат азид натрия в качестве консерванта. Азид натрия может
взаимодействовать с металлическими поверхностями с образованием азидов металлов. Для
предотвращения образования азидов металлов необходимо промыть большим количеством воды.
Для дезинфекции всех сливных реагентов пользуйтесь правилами местных контроллирующих
организаций.
Флюоресценция измеряется на флюорометре с временным разрешением. Выберите номер
программы 50 для автоматического измерения и подсчета результатов. Сверьте параметры
группы для программы №50 и если необходимо произведите коррекцию в соответствии со следующим
(см. описание к флюрометру для проведения редакции параметров считывания);
ASSAY ТУРЕ FIA
тип определения ФИА
FITTING METHOD SPLINE SMOOTHED
метод обработки метод “сглаживания”
X-AXIS LOGARITHMIC
х-ось логарифмическая
--- стр. 51 ---
Y-AXIS
у-ось
BLANKS
бланки О
STANDARDS
стандарты
STANDARD REPLICATES
стандарты в дупликате 2
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
UNKNOWN REPLICATES
неизвестные образцы в дубле 2
В/Вмакс
В/Вмакс
О
6
6
2 Убедитесь, чтобы концентрация
стандартов, указанная на флаконах
А совпадала с задаваемой. Если не
А совпадает, введите новые.
В
В
С
С
D
Д
Е
Е
F
Ф
2
ОСОБЕННОСТИ ОПРЕДЕЛЕНИЯ:
1. Отношение к этому набору как к целому необходимо для успешного использования
АВТОДЕЛФИЯ наборов. Реагенты в этом наборе являются комплексными компонентами. Не
смешивайте идентичные реагенты из различных лотов. Не используйте реагенты после срока
годности, указанной на флаконе.
2. Реагенты должны быть доведены до комнатной температуры (+20+25С) до приготовления
различных растворов. Замороженные образцы должны быть нагреты до комнатной температуры при
медленном и осторожном перемешивании. Не используйте вортекс или смешанные образцы
пациентов.
3. При промывке стрипов следите, чтобы все стрипы были заполнены полностью и одинаково
до верхнего уровня как показано на картинке. После промывки стрипов, проверьте, что стрипы сухие.
Если что-либо осталось в лунках, то необходимо перевернуть планшету и встряхнуть на
фильтровальную бумагу.
Аспирирующее/промывочное оборудование не должно находиться заполненным с
промывочным раствором длительный период времени, поскольку промывочные иглы могут быть
закупорены и трудно проходимы для жидкости. В конце рабочего дня аспирировать дистиллированную
воду в аспирирующую/промывочнуго систему. Промывочное устройство должно быть регулярно
промываться раствором NaCL (ЗОг/Л), а затем дистиллированной водой и 50% этанолом и в конце
промыто дистиллированной водой.
4. Для избежания примеси европия и как результат высокого флюресцентного фона высокие
требования предъявляются к процедуре раскапывания и промывки. Поэтому необычайно важно
использовать рекомендуемые и поставляемые вместе с АВТОДЕЛФИЯ пипетки.
Усиливающий раствор должен быть раскапан только с использованием рекомендуемой
ЭППЕНДОРФ мультипипеткой, и при этом первый объем сбрасывается для полного заполнения. Тот
же тип Комбинаконечника не может быть использован для раскапывания любого другого реагента.
После работы ЭППЕНДОРФ мультипипетка помещается на штатив с наконечником.
При использовании АВТОДЕЛФИЯ плейт диспенсера и АВТОДЕЛФИЯ диспенсера юнита
ознакомьтесь с описанием.
ПОДСЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ:
АВТОДЕЛФИЯ система включает программу для обработки результатов и получения данных в
виде стандартной кривой, концентрации неизвестных пациентов и т.д. (для детали см. описание к
флюорометру или к программе Мультикалк).
--- стр. 55 ---
- пипетки для разливки миллитровых объемов НЭ буфера требуемого для
приготовления раствора метки и антител
- дистиллированная вода
- бланки для взятия крови новорожденных Шляйхер & Шулль №2992
СБОР ОБРАЗЦОВ И ХРАНЕНИЕ:
ДЕЛФИЯ НЕОНАТАЛ ТТГ кит используется для образцов крови, полученных у
новорожденных после прокола пятки и сбора крови на фильтровальный бланк. Не
оказывает влияние на результаты желтуха (билирубин < 20 мг/дл) или присутствие жира
(триглицериды < 5000 мг/л). Кровь собирается на 2-6 день после родов. Пятно крови
покрывает отмеченный круг на фильтровальном бланке при однократном прикладывании к
месту прокола пятки. Убедитесь, что образец полученной крови полностью заполняет круг.
Полученный образец крови высушивается на воздухе в горизонтальном положении в
течении минимум 3 часов при комнатной температуре при избегании попадания прямых
солнечных лучей. Метод работы с кровью на фильтровальных бланках требует
определенных навыков по взятию крови, хранению и транспортировке образцов.
Мы рекомендуем использовать фильтровальную бумагу Шляйхер и Шуль (№2992)
как для сбора крови, так и быть в качестве основы для 0-кровяных пятен.
Образцы крови с ЭДТА или цитратом натрия не могут быть применены из-за
хелатирующего эффекта на европий.
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ:
Для диагностики ин витро.
Набор следует использовать только соответственно подготовленным персоналом.
Набор содержит реагенты произведенные из компонентов человеческой крови.
Источник протестирован на на наличие поверхностного антигена к гепатиту В, анти-гепатиту
С, и анти-ВИЧ I и II. Тем не менее все рекомендации по мерам предосторожности при
работе с производными крови должны быть соблюдены.
Можно считать все образцы крови пациентов как потенциально инфицированные.
Реагенты содержат азид натрия в качестве консерванта. Азид натрия может
взаимодействовать с металлическими поверхностями с образованием азидов металлов.
Для предотвращения образования азидов металлов необходимо промыть большим
количеством воды.
Лиофиллизированные стандарты Нео-ТТГ содержат азид натрия в качестве
консерванта. Порошок опасен при ингаляции и попадании на кожу.
Для дезинфекции всех сливных реагентов пользуйтесь правилами местных
контроллирующих организаций.
ПРОТОКОЛ ОПРЕДЕЛЕНИЯ:
Выполните каждое определение в дубликате как для стандартов, контролен, так и
для тестируемых образцов. Стандартная кривая должна быть использована для каждого
определения. Образцы и реагенты должны быть доведены до комнатной температуры
(+20+250) до использования.
1. Приготовление реагентов Стабильность после разведения
Промывочный раствор 2 недели +2+25С в закрытом
контейнере
--- стр. 56 ---
часа
Перенести 100 мл из Промывочного Концентрата в чистый флакон и растворить
добавляя 2400 мл дистиллированной воды для приготовления готового
буферного раствора pH=7.8
Анти-ТТГ-Еи метка Приготовить и использовать в течение 1
Приготовьте необходимый объем метки посредством смешивания 20 мкл
концентрата метки с 3 мл Нео-ТТГ инкубационного буфера на один стрип
(см. таблицу).
Важно, чтобы раствор метки готовился раздельно и чтобы Нео ТТГ буфер
не контактировал с раствором метки до использования в работе.
Мы советуем использовать одноразовый пластиковый флакон для приготовления
рабочих растворов метки и антисыворотки.
2.
3.
Перенести необходимое количество микротитровальных стрипов в рамку-
держатель для стрипов (вернуть оставшиеся стрипы в пластиковую коробку
и закрыть).
Выбить из бланков крови в дубле фильтровальные диски: стандарты, контроли и
тестируемые образцы. Используются либо автоматический либо ручной панчер.
Выбивание дисков происходит по следующей схеме. Диаметр диска
1 2 3 4 5 6 7 в 9 10 1 1 12
Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст.
А А В В С С Д д Е Е Ф Ф
1-й 1-й 2-й 2-й 3-й 3-й
Кон.1Кон.1 Кон.2 Кон.2 Обр.1 Обр.2 и т.д.
Добавляется по 200 мкл разведенной антисыворотки в каждую лунку используя
Эппендорф микропипетку или ДЕЛФИЯ диспенсер юнит. Избегайте касания
поверхности лунок.
Инкубирование 10 минут в режиме “быстро"(РА5Т), используя ДЕЛФИЯ плейт
шейкер и затем в течение 4 часов при медленном перемешивании. Возможно
также и инкубация в течение ночи в холодильнике {+2- +8С) без
шейкирования. Проверьте правильность температурного режима в холодильнике.
Быстрое перемешивание необходимо, чтобы обеспечить полную экстракцию
компонентов крови из фильтровальных дисков. Планшет следует поместить в
холодильник сразу же после шейкирования.
После инкубации удалите раствор и фильтровальные диски, используя
ДЕЛФИЯ диск ремувер или с помощью пастеровской пипетки,
соединенной с вакуумным насосом.
Аспирируйте и промыть каждый стрип с помощью ДЕЛФИЯ плейт
используя программу №12(промывка).
вошера.
--- стр. 57 ---
8. Добавить 200 мкл Усиливающего растовра прямо из реагентного флакона в
каждую лунку, используя рекомендуемую ЭППЕНДОРФ мультипипетку, после
заполнения Комбинаконечника раствором Усиливающего раствора или используя
ДЕЛФИЯ плейт диспенсер. Избегайте касания носиком пипетки лунки или ее
содержимого.
9. Встряхивайте в режиме “медленно” (з1 оуу1 у) 5 минут. Сигнал флюоресценции
стабилен в течение нескольких часов, если нет сильного испарения
жидкости. Однако, мы рекомендуем измерять в течение 1 часа, чтобы
внешние факторы не оказали влияния на уровень сигнала, хотя это
достаточно редкий фактор.
10. Флюоресценция измеряется на флюорометре с временным разрешением.
Выберите номер программы 12 для автоматического измерения и
подсчета результатов. Сверьте параметры группы для программы №12 и
если необходимо произведите коррекцию в соответствии со следующим
(см. описание к флюрометру для проведения редакции параметров
считывания):
КИТ НОМЕР
ASSAY TYPE
тип определения
FITTING METHOD
метод обработки
X-AXIS
х-ось
Y-AXIS
у-ось
BLANKS
бланки
STANDARDS
стандарты
STANDARD REPLICATES
стандарты в дупликате
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
UNKNOWN REPLICATES
неизвестные образцы в дубле
12 НЕО-ТТГ
IFMA
ИФМА
SPLINE SMOOTHED
метод “сглаживания”
LOGARITHMIC
логарифмическая
MEAS
линейная
О
О
6
6
2
2
А
D
Убедитесь, чтобы концентрация
стандартов, указанная на пакете
совпадала с задаваемой. Если не
А совпадает, введите новые.
В
Д
Ф
ОСОБЕННОСТИ ОПРЕДЕЛЕНИЯ:
к целому необходимо для успешного
в этом наборе являются комплексными
1. Отношение к этому набору как
использования ДЕЛЬФИЯ наборов. Реагенты
компонентами. Не смешивайте идентичные реагенты из различных лотов. Не используйте
реагенты после срока годности, указанной на флаконе.
--- стр. 58 ---
2. Реагенты должны быть доведены до комнатной температуры (+20+25С) до
приготовления различных растворов. Замороженные образцы должны быть нагреты до
комнатной температуры при медленном и осторожном перемешивании. Не используйте
вортекс или смешанные образцы пациентов.
3. При промывке стрипов следите, чтобы все стрипы были заполнены полностью и
одинаково до верхнего уровня как показано на картинке. После промывки стрипов,
проверьте, что стрипы сухие. Если что-либо осталось в лунках, то необходимо перевернуть
планшету и встряхнуть на фильтровальную бумагу.
Аспирирующее/промывочное оборудование не должно находиться заполненным с
промывочным раствором длительный период времени, поскольку промывочные иглы могут
быть закупорены и трудно проходимы для жидкости. В конце рабочего дня аспирировать
дистиллированную воду в аспирирующую/промывочную систему. Промывочное устройство
должно быть регулярно промываться раствором NaCL (ЗОг/Л), а затем дистиллированной
водой и 50% этанолом и в конце промыто дистиллированной водой.
4. Для избежания примеси европия и как результат высокого флюресцентного фона
высокие требования предъявляются к процедуре раскапывания и промывки. Поэтому
необычайно важно использовать рекомендуемые и поставляемые вместе с ДЕЛФИЯ
пипетки.
Усиливающий раствор должен быть раскапан только с использованием
рекомендуемой ЭП ПЕН ДО РФ мульти пипеткой, и при этом первый объем сбрасывается для
полного заполнения. Тот же тип Комбинаконечника не может быть использован для
раскапывания любого другого реагента. После работы ЭППЕНДОРФ мультипипетка
помещается на штатив с наконечником.
При использовании ДЕЛФИЯ плейт диспенсера и ДЕЛФИЯ диспенсера юнита
ознакомьтесь с описанием.
ПОДСЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ:
ДЕЛФИЯ система включает программу для обработки результатов и получения
данных в виде стандартной кривой, концентрации неизвестных пациентов и т.д. (для детали
см. описание к флюорометру или к программе Мультикалк).
КАЛИБРОВКА:
Полную стандартную кривую следует ставить для каждого планшета.
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА:
Контрольные образцы следует использовать в ежедневных постановках для
получения надежных результатов. Контрол и ставятся одновременно с образцами. Два
уровня концентраций контролей поставляется с наборами. Контроли следует использовать
при каждой постановке: если определение включает в себя более чем один планшет,
контроли следует ставить для каждого планшета. Каждая лаборатория устанавливает свои
собственные значения средних концентраций и доверительный интервал. Измеряемая
средняя концентрация должна составлять в пределах 20% отклонений от указанных в
контрольном сертификате. Тем не менее рекомендовано, чтобы каждая лаборатория
устанавливала свои собственные контроли различных уровней в дополнении к контролям,
включенным в набор. Выдача результатов следует производить, если контроли
удовлетворяют установленным в лаборатории критериям.
Рекомендовано также участие во внешнем контроле качества.
ОГРАНИЧЕНИЯ:
1. Как и для любого друго метода ДЕЛФИЯ НЕОНАТАЛ ТТГ не может быть
единственным тестом и должен быть подтвержден клиническим обследованием.
2. Образцы на фильтровальных бланках не должны содержать ЭДТА, вследствии
его воздействия на хелатирующий эффект европия.
3. Случаи при которых могут быть артефакты при определении;
--- стр. 62 ---
Усиливающий раствор диссоциирует ионы европия из меченого антигена в раствор, где
они формируют высокофлюоресцентные хелатные комплексы с компонентами усиливающего
раствора. Флюоресценция каждой лунки в последующем измеряется. Флюоресцентный сигнал
каждого образца прямо пропорционален количеству ТТГ в образце.
СОСТАВ НАБОРА:
Каждый АВТО ДЕЛ ФИЯ НЕОН АТ АЛ ТТГ набор содержит реагентов необходимых для 960
определений.
Срок годности набора указан на внешней стороне коробки. Хранение при +2+8 С. При
однократном открытии или разведении компонентов набора, они должны быть
использованы в течение 2 недель.
РЕАГЕНТЫ:
Компоненты Количество Срок годности и хранение
1 лист фильтр.бумаги
(Шляйхер & Шуль Ха2992)
содержащая 5 различных
концентраций ТТГ
Стандарты ТТГ
(приблизит.величины)
А 1 мкЕд/мл
В 10 мкЕд/мл
С 25 мкЕд/мл
D 50 мкЕд/мл
Е 100 мкЕд/мл
F 250 мкЕд/мл
+2+8С до окончания срока
годности указанного на
пластик, пакете
Контроли (прибл. концентрации)
15 мкЕд/мл 1 лист фильтровальной бумаги
60 мкЕд/мл (Шляйхер и Шуль, №2992), со
держащая по 5 высушенных пятен
крови этих концентраций
+2 , +8 до окончания срока
годности указанного на
упаковке. Убедитесь, что
пластиковый конверт
влажен при вскрытии.
Точна концентрация ТТГ указана на пакете, прилагаемому к каждому набору.
Стандарты и контроли приготовлены из цельной человеческой крови при гематокрите в 50-55% и
калиброваны по стандарту ВОЗ (80/558) для определения человеческого ТТГ.
Анти-ТТГ-Еи метка
концентрированный
раствор (- 20 мкг/мл)
(мышиные, моноклональные)
1 флакон, 1.5мл. +2+8С до окончания срока
годности указанной на флаконе
Метка растворена в ТРИС-HCL буфере (рН=7.8) солевом растворе с БСА, мышиными IgG и азидом
натрия в качестве консерванта.
Концентрат промывочного
буфера
1 флакон 250мл +2+8С до окончания срока
годности указанной на флаконе
--- стр. 63 ---
Концентрированный раствор ТРИС-HCL буфера (рН=7,8) солевом растворе с консервантами Твин
20 и Гермалл II. Разводится в 25 раз.
Нео ТТГ инку бац. буфер 1 флакон 250мл +2 +8 С до окончания срока
годности указанной на флаконе
Готовый для использования ТРИС-HCL буфер (рН=7.8) солевой раствор с БСА, бычьим
глобулином, Твин 40, полиэтиленгликолем 6000, с инертным красным красителем и азидом натрия
как консервантом.
УСИЛИВАЮЩИЙ реагент 1 флакон 250мл +2+8С до окончания срока
годности указанной на
флаконе
(+20+25С, см. на флаконе)
Избегать попадания
прямых солнечных лучей
Готовый для использования с Тритон Х-100, уксусной кислотой и хелаторами.
Анти-ТТГ микротитровальные 10 планшет +2+8 до окончания срока
стрипы. годности указанной на
12 х8х 12 лунок покрытых антителами планшете,
против бетта субъединицы Убедитесь, что пластиковый
молекулы ТТГ тампон влажный
Для каждой партии
Сертификаты контроля качества ________1 лист
М АТЕРИАЛЫ Н ЕО БХ О ДИ М Ы Е, НО НЕ ПОСТАВЛЯЕМ Ы Е
С НАБОРОМ :
АВТОДЕЛФИЯ НЕОНАТАЛ ТТГ набор является частью комплексной системы
иммунодиагностических реагентов и оборудования. АВТОДЕЛФИЯ система требует следуюшие
компоненты, которые могут быть поставлены или от WALLAC 0Y или от его дистрибьютеров;
1 . Флюорометр с временным разрешением плюс принтер и внешний компьютер.
2. Автоматический вошер - АВТОДЕЛФИЯ плейтвошер (Кат.№ 1296-024 или 1296-026)
3. Автоматический шейкер-АВТОДЕЛФИЯ плейтшейкер(Кат.Хо1296-001или1296-003)
4. Автоматический панчер АВТОДЕЛФИЯ ПЛЕЙТ ПАНЧЕР (1296-031) или ВАЛЛАК ДБС
ПАНЧЕР (1296-071) или ручной панчер для выбивки бумажных дисков с диаметром около 3 мм.
5. Пипетка для разливки АВТОДЕЛФИЯ буфера и метки - ЭППЕНДОРФ МУЛЬТРШИПЕТКА
(1296-014) с 5 мл Комби наконечниками (1296-016) или в качестве альтернативы АВТОДЕЛФИЯ
плейт диспенсер с АВТОДЕЛФИЯ диспенсер юнит (1296-041 или 1296-043).
6. Пипетка для разливки Усиливающего раствора - ЭППЕНДОРФ мультипипетка (1296-014) с 5 мл
Комби наконечниками (1296-016) или альтернативно АВТОДЕЛФИЯ плейт диспенсер (1296-041).
7. АВТОДЕЛФИЯ ДИСК РЕМУ ВЕР (1296-061) для автоматического удаления жидкости и
бумажных пятен из микротитровальных лунок.
В дополнении к АВТОДЕЛФИЯ системе необходимо следующее:
- дозирующая пипетка для разливки микролитровых объемов
- пипетки для разливки миллитровых объемов НЭ буфера требуемого для приготовления
раствора метки и антител
--- стр. 64 ---
10. Флюоресценция измеряется на флюорометре с временным разрешением. Выберите номер
программы 12 для автоматического измерения и подсчета результатов. Сверьте параметры
группы для программы №12 и если необходимо произведите коррекцию в соответствии
со следующим (см. описание к флюрометру для проведения редакции параметров
считывания):
КИТ НОМЕР
ASSAY TYPE
тип определения
FITTING METHOD
метод обработки
X-AXIS
х-ось
Y-AXIS
у-ось
BLANKS
бланки
STANDARDS
стандарты
STANDARD REPLICATES
стандарты в дупликате
STANDARD CONG
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
UNKNOWN REPLICATES
неизвестные образцы в дубле
12НЕ0-ТТГ
IFMA
ИФМА
SPLINE SMOOTHED
метод “сглаживания”
LOGARITHMIC
логарифмическая
MEAS
линейная
О
0
6
6
2
2
А
А
В
В
С
с
D
Д
Е
Е
F
Ф
1
1
Убедитесь, чтобы концентрация
стандартов, указанная на пакете
совпадала с задаваемой. Если не
совпадает, введите новые.
О СОБЕННОСТИ ОПРЕДЕЛЕНИЯ:
1. Отношение к этому набору как к целому необходимо для успешного использования
ДЕЛЬФИЯ наборов. Реагенты в этом наборе являются комплексными компонентами. Не
смешивайте идентичные реагенты из различных лотов. Не используйте реагенты после срока
годности, указанной на флаконе.
2. Реагенты должны быть доведены до комнатной температуры (+20+25С) до
приготовления различных растворов. Замороженные образцы должны быть нагреты до комнатной
температуры при медленном и осторожном перемешивании. Не используйте вортекс или
смешанные образцы пациентов.
3. При промывке стрипов следите, чтобы все стрипы были заполнены полностью и
одинаково до верхнего уровня как показано на картинке. После промывки стрипов, проверьте, что
стрипы сухие. Если что-либо осталось в лунках, то необходимо перевернуть планшету и встряхнуть
на фильтровальную бумагу.
Аспирирующее/промывочное оборудование не должно находиться заполненным с
промывочным раствором длительный период времени, поскольку промывочные иглы могут быть
закупорены и трудно проходимы для жидкости. В конце рабочего дня аспирировать
--- стр. 65 ---
дистиллированную воду в аспирирующую/промывочную систему. Промывочное устройство должно
быть регулярно промываться раствором NaCL (ЗОг/Л), а затем дистиллированной водой и 50%
этанолом и в конце промыто дистиллированной водой.
4. Для избежания примеси европия и как результат высокого флюресцентного фона
высокие требования предъявляются к процедуре раскапывания и промывки. Поэтому необычайно
важно использовать рекомендуемые и поставляемые вместе с АВТОДЕЛФИЛ пипетки.
Усиливающий раствор должен быть раскапан только с использованием рекомендуемой
ЭППЕНДОРФ мультипипеткой, и при этом первый объем сбрасывается для полного заполнения.
Тот же тип Комбинаконечника не может быть использован для раскапывания любого другого
реагента. После работы ЭППЕНДОРФ мультипипетка помещается на штатив с наконечником.
При использовании АВТОДЕЛФИЯ плейт диспенсера и АВТОДЕЛФИЯ диспенсера юнита
ознакомьтесь с описанием.
ПОДСЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ;
АВТОДЕЛФИЯ система включает программу для обработки результатов и получения
данных в виде стандартной кривой, концентрации неизвестных пациентов и т.д. (для детали см.
описание к флюорометру или к программе Мультикалк).
КАЛИБРОВКА:
Полную стандартную кривую следует ставить для каждого планшета.
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА:
Контрольные образцы следует использовать в ежедневных постановках для получения
надежных результатов. Контроли ставятся одновременно с образцами. Два уровня концентраций
контролен поставляется с наборами. Контроли следует использовать при каждой постановке: если
определение включает в себя более чем один планшет, контроли следует ставить для каждого
планшета. Каждая лаборатория устанавливает свои собственные значения средних концентраций и
доверительный интервал. Измеряемая средняя концентрация должна составлять в пределах 20%
отклонений от указанных в контрольном сертификате. Тем не менее рекомендовано, чтобы каждая
лаборатория устанавливала свои собственные контроли различных уровней в дополнении к
контролям, включенным в набор. Выдача результатов следует производить, если контроли
удовлетворяют установленным в лаборатории критериям.
Рекомендовано также участие во внешнем контроле качества.
ОГРАНИЧЕНИЯ:
1. Как и для любого друго метода АВТОДЕЛФИЯ НЕОН АТ АЛ ТТГ не может быть
единственным тестом и должен быть подтвержден клиническим обследованием.
2. Образцы на фильтровальных бланках не должны содержать ЭДТА, вследствии его
воздействия на хелатирующий эффект европия.
3. Случаи при которых могут быть артефакты при определении;
пятно крови не полностью пропитало фильтр
диск выбит слишком близко к краю пятна
плохой сбор крови и плохая сушка образца
не происходит элюции из пятна, что вызвано предварительной стерилизацией
образца или фиксацией в спирте,
примеси фекалий в образцах крови
4. Гетерофильные антитела в тестируемом образце могут влиять на результаты.
ОЖ ИДАЕМ Ы Е КОНЦЕНТРАЦИИ И НОРМ Ы :
Следует иметь в виду, что приведенные ниже нормативы являются только ориентиром для
лабораторий и каждая лаборатория устанавливает свои собственные пороговые уровни.
--- стр. 69 ---
Стандарты и контроли производятся из человеческой крови при гематокрите 50-55% и
откалиброваны, используя гравиметрические методы.
АнтИ'ИРТ-Еи метка
концентрированный
раствор (-50мкг/мл)
{мышиные, моноклональные)
2 флакона, 2 .8мл. +2+8С до окончания срока
годности указанной на флаконе
Метка растворена в ТРИС-HCL буфере (рН^7.8) солевом растворе с БСА, мышиными IgG и азидом
натрия в качестве консерванта.
Концентрат промывочного 1 флакон
буфера
250мл +2+8С до окончания срока
годности указанной на флаконе
Концентрированный раствор ТРИС-HCL буфера (рН=7.8) солевом растворе с консервантами Твин
20 и Гермалл II. Разводится в 25 раз.
Нео ИРТ инкубац. Буфер 1 флакон 250мл +2+8С до окончания срока
годности указанной на флаконе
Готовый для использования ТРИС-HCL буфер (рН-7.8) солевой раствор с БСА, бычьим
глобулином, Твин 40, полиэтиленгликолем 6000, с инертным красным красителем и азидом натрия
как консервантом.
УСИЛИВАЮЩИЙ реагент 1 флакон 250мл +2+8С до окончания срока
годности указанной на
флаконе
(+20+25С, см. на флаконе)
Избегать попадания
прямых солнечных лучей
Готовый для использования с Тритон Х-100, уксусной кислотой и хелаторами.
Анти-ИРТ микротитровальные
стрипы.
8x 12 лунок покрытых антителами
против специфических сайтов
на молекуле ИРТ
(мышиные моноклональные)
10 планшет +2+8 до окончания срока
годности указанной на
планшете.
Убедитесь, что пластиковый
тампон влажный
Специфические для каждого лота
Сертификаты контроля качества 1 лист
МАТЕРИАЛЫ Н ЕОБХОДИМ Ы Е, НО НЕ ПОСТАВЛЯЕМ Ы Е
С НАБОРОМ :
ДЕЛЬФИЯ ИРТ набор является частью комплексной системы иммунодиагностических реагентов и
оборудования. ДЕЛЬФИЯ система требует следующие компоненты, которые могут быть поставлены
или от PerkinEImer/Wallac Оу или от его дистрибьютеров:
1. Флюорометр с временным разрешением плюс принтер и внешний компьютер.
2. Автоматический вошер - ДЕЛЬФИЯ плейтвошер (Кат.Хо1296-026)
3. Автоматический шейкер-ДЕЛЬФИЯ плейтшейкер(Кат.№1296-003)
--- стр. 70 ---
4. Автоматический панчер ВАЛЛАК ДБС ПАНЧЕР (1296-071) или ручной панчер для выбивки
бумажных дисков с диаметром около 3 мм.
5. Пипетка для разливки ДЕЛЬФИЯ буфера и метки - ЭППЕНДОРФ МУЛЬТИПИПЕТКА (1296-014)
с 5 мл Комби наконечниками (1296-016) или в качестве альтернативы ДЕЛЬФИЯ плейт диспенсер с
ДЕЛЬФИЯ диспенсер юнит (1296-041 или 1296-043).
6. Пипетка для разливки Усиливающего раствора - ЭППЕНДОРФ мультипипетка (1296-014) с 5 мл
Комби наконечниками (1296-016) или альтернативно ДЕЛЬФИЯ плейт диспенсер (1296-041).
7. ДЕЛЬФИЯ ДИСК РЕМУВЕР (1296-061) для автоматического удаления жидкости и бумажных
пятен из микротитро вал ьных лунок.
В дополнении к ДЕЛЬФИЯ системе необходимо следующее:
- дозирующая пипетка для разливки микролитровых объемов
- пипетки для разливки миллитровых объемов НЭ буфера требуемого для приготовления
раствора метки и антител
- дистиллированная вода
СБОР ОБРАЗЦОВ И ХРАНЕНИЕ:
Образцы крови следует забирать сразу же после прокола пятки на фильтровальный бланк.
Липемические (триглицериды менее 5000 мг/л) и иктеричные (билирубин менее 30 мг/дл) образцы
крови не оказывают влияния на результаты.
Не используйте кровь собранную с ЭДТА или с цитратом натрия в качестве
антикоагулянтных средств, поскольку эти агенты воздействуют на хелаты европиевой метки.
Скрининговые программы различаются в зависимости от того какой тип образца
используется. Кровь при проколе пятки обычно берется на 2-6 дни жизни и эта схема также годится
и для Нео-ИРТ. Мы рекомендуем использовать фильтровальную бумагу производимую компанией
Шляйхер/Шуль (№903) для сбора образцов крови и бумага должна быть та же самая как и для пятен
стандартов. Метод основанный на образцах представленных на бланках предъявляет определенные
требования к сбору образцов крови, хранению и транспортировке. Сбор образцов описан детально(
NCCLS) в документе комитета по взятию крови LA4-A3:
протрите кожу спиртом и высушите
проколоть иглой для прокола кожи ребенка ланцетом или автоматическим ланцетом на
глубину примерно 2.0 мм. Прокол глубже чем на 2.0 мм у маленьких плодов может
вызвать повреждение кости
удалите первую каплю крови. Нежно промокнуть на фильтровальную бумагу большую
каплю крови, позволяя ей промокнуть насквозь, полностью заполняя отмеченный
кружок на фильтровальном бланке. Проверьте с другой стороны бланка, что кровь
пропиталась насквозь. Не накрывайте полученное пятно крови.
Высушите пятна крови на воздухе в горизонтальной позиции по меньшей мере 3 часа
при комнатной температуре, избегайте попадания прямых солнечных лучей.
Проверьте заполненность всех граф нужной информацией, вкл.чая имя, адрес, номер
пациента, пол; название и адрес госпиталя; имя, адрес, телефон врача производящий
заполнение граф. Укажите время и дату родов, а также дату и время забора крови.
Укажите был ли ребенок доношенным и если да ~ то степень недоношенности.Укажите
вес новорожденного, многоплодный или нет.
Поместите каждый образец в свой отдельный бумажный конверт и транспортируйте
или перешлите его в лабораторию в течение 24 часов после взятия.
Образцы хранимые при комнатной температуре показывают снижение уровня Нео-ИРТ на 6-
9% за каждую неделю. Для более длительного хранения образцы помещаются в пластиковые
пакеты и замораживаются. Известно о сезонных колебаниях уровня Нео-ИРТ. Причина вероятно
вызвана сезонной нестабильностью ИРТ во время транспортировки и хранения. Считается, что
необходимо учитывать такую сезонность изменяяя пороговую концентрацию в зависимости от
времени года. Пороговая концентрация может быть недостаточна для предотвращения ложно
--- стр. 71 ---
положительных случаев летом, хотя это может также способствовать увеличению количества
ложно-положительных случаев при скрининге зимой. Использование правильной транспортировки и
измерение ИРТ сразу же после сбора позволяет минимизировать все эти отклонения.
М ЕРЫ П РЕДОСТОРОЖ НОСТИ:
Для диагностики ин витро.
Используется в работе персоналом после предварительного обучения.
Набор содержит реагенты произведенные из компонентов человеческой крови. Источник
протестирован на на наличие поверхностного антигена к гепатиту В, анти-гепатиту С, и анти-ВИЧ I
и II. Тем не менее все рекомендации по мерам предосторожности при работе с производными крови
должны быть соблюдены.
Можно считать все образць[ крови пациентов как потенциально инфицированные.
Реагенты содержат азид натрия в качестве консерванта. Азид натрия может
взаимодействовать с металлическими поверхностями с образованием азидов металлов. Для
предотвращения образования азидов металлов необходимо промыть большим количеством воды.
Лиофиллизированные стандарты ИРТ содержат азид натрия в качестве консерванта.
Порошок опасен при ингалляции и попадании на кожу.
Для дезинфекции всех сливных реагентов пользуйтесь правилами местных
контроллирующих организаций.
ПРОТОКОЛ ОПРЕДЕЛЕНИЯ:
Выполните каждое определение в дубле для стандартов и контролей. Стандартная кривая
должна быть использована для каждого определения. Тестируемые образцы определяются по
одному. Образцы и реагенты должны быть доведены до комнатной температуры (+20+25С) до
использования.
1. Приготовление реагентов Стабильность после разведения
П ромы вочны й раствор 2 недели +2+25С в закрытом
контейнере
Перенести 100 мл из Промывочного Концентрата в чистый флакон и растворить
добавляя 2400 мл дистиллированной воды для приготовления готового буферного
раствора рН=7.8
Анти-ИРТ-Еи метка Приготовить и использовать в течение 1 часа
Приготовьте необходимый объем метки посредством смешивания 60 мкл концентрата
метки с 3 мл Нео-ИРТ инкубационного буфера на один стрип (см. таблицу).
Важно, чтобы растворы антисы воротки и метки готовились раздельно и чтобы Нео
ИРТ буфер не контактировал с раствором метки до использования в работе.
Мы советуем использовать одноразовый пластиковый флакон для приготовления рабочих
растворов метки и антисыворотки.
2. Перенести необходимое количество микротитровальных стрипов в рамку- держатель для
стрипов (вернуть оставшиеся стрипы в пластиковую коробку и закрыть).
--- стр. 72 ---
Выбить в дубле фильтровальные диски, используя автоматические или ручные панчеры в
лунки плашки, согласно таблице Диаметр диска должен быть около 3.2 мм. Только один
диск добавляется в каждую лунку.
Раскапывайте сразу же по 200 мкл растворенной анти-ИРТ метки в каждую лунку,
используя рекомендованную Эппендорф Мультипипетку или ДЕЛЬФИЯ диспенсер
юнит. Избегайте выплескивания из лунки раскапываемой жидкости, не касайтесь
поверхности лунки или поверхности жидкости.
9.
1 0 .
Инкубирование 10 минут в режиме “быстро”(РА5Т), используя ДЕЛЬФИЯ плейт шейкер.
Накрыть планшет пленкой и инкубировать 16-24 часа в холодильнике (+2-+8С) без
шейкирования. Проверьте правильность температурного режима в холодильнике. Быстрое
перемешивание необходимо, чтобы обеспечить полную экстракцию компонентов крови
из фильтровальных дисков. Планшет следует поместить на холод сразу же после
шейкирования.
После инкубации удалите раствор и фильтровальные диски, используя ДЕЛЬФИЯ диск
ремувер или с помощью пастеровской пипетки, соединенной с вакуумным насосом. Не
позволяйте планш ету долго находиться при комнатной температуре и сразу же после
холодильника удалите диски.
Аспирируйте и промыть каждый стрип с помощью ДЕЛЬФИЯ плейт вошера, используя
программу №34 (промывка).
Добавить 200 мкл Усиливающего растовра прямо из реагентного флакона в каждую лунку,
используя рекомендуемую ЭППЕНДОРФ мультипипетку, после заполнения
Комбинаконечника раствором Усиливающего раствора или используя ДЕЛЬФИЯ плейт
диспенсер. Избегайте касания носиком пипетки лунки или ее содержимого.
Встряхивайте в режиме “медленно”(51о\у1у) 5 минут. Сигнал флюоресценции стабилен в
течение нескольких часов, если нет сильного испарения жидкости. Однако, мы
рекомендуем измерять в течение 1 часа, чтобы внешние факторы не оказали влияния на
уровень сигнала, хотя это достаточно редкий фактор.
Вставьте каждый стрип в рамку-держатель и измеряйте флюоресценцию на флюорометре с
временным разрешением.
Когда используется модель флюорометра 1232 или 1234 выберается номер программы 34
для автоматического измерения иподсчета результатов и протокол в Мультикалке «34
N1RT»
Когда используется ВИКТОР Д старт измерения начинается со Start Wizard, затем
выбирается программа NIRT из протоколов/китов в панели «Neonatal Europe» и
определяется количество плашек и образцов.
--- стр. 73 ---
Сверьте параметры группы для программы №34 и если необходимо произведите коррекцию
в соответствии со следующим (см. описание к флюрометру для проведения
редактирования параметров считывания):
КИТ НОМЕР
ASSAY TYPE
тип определения
FITTING METHOD
метод обработки
X-AXIS
х-ось
Y-AXIS
у-ось
BLANKS
бланки
STANDARDS
стандарты
STANDARD REPLICATES
стандарты в дупликате
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
UNKNOWN REPLICATES
неизвестные образцы в дубле
34 НЕО-ИРТ
IFMA
ИФМА
SPLINE SMOOTHED
метод “сглаживания”
LOGARITHMIC
логарифмическая
LOG
логарифмическая
2(A)
2(A)
5
5
2
2
А
А
В
В
С
С
D
д
Е
Е
F
Ф
1
1
Убедитесь, чтобы концентрация
стандартов, указанная на флаконах
совпадала с задаваемой. Если не
совпадает, введите новые.
ОСОБЕННОСТИ ОПРЕДЕЛЕНИЯ:
1. Отношение к этому набору как к целому необходимо для успешного использования
ДЕЛЬФИЯ наборов. Реагенты в этом наборе являются комплексными компонентами. Не
смешивайте идентичные реагенты из различных лотов. Не используйте реагенты после срока
годности, указанной на флаконе.
2. Реагенты должны быть доведены до комнатной температуры (+20+25С) до
приготовления различных растворов. Замороженные образцы должны быть нагреты до комнатной
температуры при медленном и осторожном перемешивании. Не используйте вортекс или
смешанные образцы пациентов.
3. При промывке стрипов следите, чтобы все стрипы были заполнены полностью и
одинаково до верхнего уровня как показано на картинке. После промывки стрипов, проверьте, что
стрипы сухие. Если что-либо осталось в лунках, то необходимо перевернуть планшету и встряхнуть
на фильтровальную бумагу.
Аспирирующее/промывочное оборудование не должно находиться заполненным с
промывочным раствором длительный период времени, поскольку промывочные иглы могут быть
закупорены и трудно проходимы для жидкости. В конце рабочего дня аспирировать
дистиллированную воду в аспирируюшую/промывочную систему. Промывочное устройство должно
быть регулярно промываться раствором NaCL (ЗОг/Л), а затем дистиллированной водой и 50%
этанолом и в конце промыто дистиллированной водой.
--- стр. 74 ---
4. Для избежания примеси европия и как результат высокого флюресцентного фона
высокие требования предъявляются к процедуре раскапывания и промывки. Поэтому необычайно
важно использовать рекомендуемые и поставляемые вместе с ДЕЛЬФИЯ пипетки.
Усиливающий раствор должен быть раскапан только с использованием рекомендуемой
ЭППЕНДОРФ мультипипеткой, и при этом первый объем сбрасывается для полного заполнения.
Тот же тип Комбинаконечника не может быть использован для раскапывания любого другого
реагента. После работы ЭППЕНДОРФ мультипипетка помещается на штатив с наконечником.
При использовании ДЕЛЬФИЯ плейт диспенсера и ДЕЛЬФИЯ диспенсера юнита
ознакомьтесь с описанием.
ПОДСЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ:
ДЕЛЬФИЯ система включает программу для обработки результатов и получения данных в
виде стандартной кривой, концентрации неизвестных пациентов и т.д. (для детали см. описание к
флюорометру или к программе Мультикалк).
КАЛИБРОВКА:
Полная стандартная кривая для каждого определения ставится для каждой плашки.
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА:
Контрольные образцы следует использовать для подтверждения стабильности ежедневных
определений. Контроли определяются также как и неизвестные образцы. Контроли двух различных
уровней используются и включены в наборы. Эти контроли следует ставить в каждом определении,
если количество определений более чем одна планшета, то и в каждой плашке. Каждой лаборатории
следует установить свой собственный концентрационный диапазон. Полученная средняя величина
определяемого контроля должна укладываться в диапазон + 20 % от величин указанных в
сертификате контроля качества. Рекомендуется также использовать свои собственные контроли для
каждой лаборатории в добавлении к контролям включенным в набор. Тестируемые образцы дают
истинную концентрацию, если контрольные значения в пределах установленных норм.
Мы также рекомендуем участие лабораторий во внешнем контроле качества.
ОГРАНИЧЕНИЯ ПРОЦЕДУРЫ :
Как и для любых других скрининговых тестов ин витро, результаты получаемые с помощью
ДЕЛЬФИЯ Нео-ИРТ могут быть использованы только для медицинсикх процедур и данные
интерпретируются только совместно с клиническими исследованиями.
Случаи при которых возможно получение аномальных результатов:
пятна не полностью пропитаны кровью
пятна выбиты панчером в месте, где имеет место плохая пропитка
плохо высушены пятна
нет элюции образца в буферный раствор, что вызвано либо нагреванием, либо
свертыванием.
Примеси в пятне крови фекалий и др.
Образцы на фильтровальных бланках не должны содержать ЭДТА, вследствии его
воздействия на хелатирующий эффект европия.
ОЖ ИДАЕМ Ы Е РЕЗУ ЛЬТА ТЫ И ИХ ИНТЕРПРЕТАЦИЯ :
Измерение ИРТ в пятнах сухой крови используется для идентификации популляции
новорожденных , имеющих высокий риск КФ. Идентификация основана на использовании величины
пороговой концентрации или персентилей, которые позволяют максимально различать между
больными и здоровыми новорожденными при максимуме чувствительности и специфичности.
Имеется несколько различных протоколов скрининга с использованием Нео-ИРТ для
выявления КФ. Наиболее часто используется двух стадийный протокол определения ИРТ/ДНК. На
--- стр. 75 ---
первой стадии измеряется ИРТ в массовом рутинном определении. Затем у тех образцов где уровень
ИРТ превышает пороговый проводится ДНК исследование. Пороговая концентрация варьирует в
зависимости от количества ложно-положительных случаев. Другой протокол использует при
повторном определении повторное измерение ИРТ с последующей оценкой результатов потовой
пробы. В обоих случаях те плоды которые идентифицированы как группа риска должны быть
подтверждены генетически и клинически. Там, где частота мутации локуса F 508 низка
используется вторая скрининговая технология.
Данные представленные ниже были получены при использовании старой версии кита,
Кат.№ 1244-034. Кит был использован в четырех лабораториях для измерения концентрации ИРТ
для массового скрининига кистозоного фиброза. Скрининиговые подходы в различных
лабораториях суммированы ниже:
Параметр Лаб.№1 Лаб.№2 Лаб.№3 Лаб.№4
Метод
Скрининга ДЕЛФИЯ НЕО-ИРТ ДЕЛФИЛ НЕО-ИРТ ДЕЛФИЯ НЕО-ИРТ ДЕЛФИЯ НЕО-ИРТ
Пороговая
Концентрация
(<21 дня)
90 нг/мл
(>21 дня)
70 нг/мл
после
7 мес.
снижается
на 5% в день
(<21 дня)
100 нг/мл
(>21 дня)
80 нг/мл
после
исследования
снижается
на 4% день
Повторное Повторы в Повторно тест на Повторы в F508 ДНК
тестирование дубле. Если ИРТ и F508 и 15 дубле. Если
(1 -й образец) среднее из других мутаций среднее из
трех результатов трех результаттов
выше порогового выше порогового
требуется повторная требуется повторная
проба на ИРТ проба на ИРТ
Повторное ИРТ нет ИРТ нет
Тестирование
(2 -й образец)
Требования Если повторная ИРТ> 124 нг/мл и Если повторная ИРТ>170нг/мл
для проведения проба положительна нет аллелей муко- проба положи и нет F508 ал
потовой пробы висцидоза тельная лели и если
ИРТ>5% от порогового ИРТ>5% и
и имеется хотя бы есть хотя бы
одна аллель одна 1 аллель
Расы:
Белые 91% 86.3% 87.7% 86.4%
Испанцы 22 .2 % 9.6% 2 .8% 4.6%
Черные 4.6% 9.1% 0.3% 9.6%
Америк. 1 .1 % 0.2% 1 1 .0% 1.3%
Индейцы
Азиаты 2 .8% 4.4% 1 .0% 2 .8%
Феномен транзиентной (не КФ) неонатальной гипертрипсинемиии, имеющей место по
преимуществу в первые несколько дней жизни, главная причина ложно положительных
результатов. Ложно-положительные результаты имеют место у детей с низким АПГАР и у плодов
Афро-Американского происхождения. Использование второго тестирования либо ДНК, либо ИРТ
во втором образце снижает количество ложно-положительных результатов. Здоровые носители КФ
также могут иметь ложно-положительные результаты в частоте в три раза выше, чем в общей
популляции. Ложно-отрицательные результаты как известно имеют место у некоторьЕх пациентов с
мекониевым забросом.
ИРТ скрининг в сочетании с ДНК анализом в повторном образце позволяет
идентифицировать носителей КФ. Как считается это имеет преимущество, поскольку позволяет
--- стр. 76 ---
i
А ВТО Д ЕЛ Ф И Я Н ЕО Н А ТА Л
И М М У Н О РЕА К ТИ ВН Ы Й ТРИ П С И Н
(И РТ )
МЕТОД ЛАНТАНИДНОГО ФЛЮОРЕСЦЕНТНОГО ИММУНОГО
АНАЛИЗА С РАЗРЕШЕНИЕМ ПО ВРЕМЕНИ
ИНСТРУКЦИЯ ДЛЯ ПРИМЕНЕНИЯ, НА 960 ОПРЕДЕЛЕНИЙ.
ПРОИЗВОДИТЕЛЬ:
W ALLAC Оу, Turku, FINLAND
ДЛЯ ДИ А ГН О СТИ ЧЕСКО ГО ПРИ М ЕН ЕН И Я ИН ВИТРО.
j
PerklnElmer |
life sciences [
--- стр. 79 ---
Стандарты и контроли производятся из человеческой крови при гематокрите 50-55% и
откалиброваны, используя гравиметрические методы.
Анти-ИРТ-Еи метка
концентрированный
раствор (-5 Ом кг/мл)
(мышиные, моноклональные)
2 флакона, 2 .8мл. +2+8С до окончания срока
годности указанной на флаконе
Метка растворена в ТРИС-HCL буфере (рН=7.8) солевом растворе с БСА, мышиными IgG и азидом
натрия в качестве консерванта.
Концентрат промывочного 1 флакон
буфера
250мл +2+8С до окончания срока
годности указанной на флаконе
Концентрированный раствор ТРИС-HCL буфера (рН^7.8) солевом растворе с консервантами Твин
20 и Гермалл II, Разводится в 25 раз.
Нео ИРТ инкубац. Буфер 1 флакон 250мл +2+8С до окончания срока
годности указанной на флаконе
Готовый для использования ТРИС-HCL буфер (рН=7.8) солевой раствор с БСА, бычьим
глобулином, Твин 40, полиэтиленгликолем 6000, с инертным красным красителем и азидом натрия
как консервантом.
УСИЛИВАЮЩИЙ реагеет 1 флакон 250мл +2+8С до окончания срока
годности указанной на
флаконе
(+20+25С, см. на флаконе)
Избегать попадания
прямых солнечных лучей
Готовый для использования с Тритон Х-100, уксусной кислотой и хелаторами.
Анти-ИРТ микротитровальные
стрипы.
8x 12 лунок покрытых антителами
против специфических сайтов
на молекуле ИРТ
(мышиные моноклональные)
10 планшет +2+8 до окончания срока
годности указанной на
планшете.
Убедитесь, что пластиковый
тампон влажный
Специфические для каждого лота
Сертификаты контроля качества 1 лист
МАТЕРИАЛЫ Н ЕОБХОДИМ Ы Е, НО НЕ ПОСТАВЛЯЕМ Ы Е
С НАБОРОМ :
АВТОДЕЛФИЯ ИРТ набор является частью комплексной системы иммунодиагностических
реагентов и оборудования. АВТОДЕЛФИЯ система требует следующие компоненты, которые могут
быть поставлены или от PerkinElmer/Wallac Оу или от его дистрибьютеров:
1. Флюорометр с временным разрешением плюс принтер и внешний компьютер.
2. Автоматический вошер - АВТОДЕЛФИЯ плейтвошер (Кат.№1296-026)
3. Автоматический шейкер-АВТОДЕЛФИЯ плейтшейкер(Кат.№ 1296-003)
--- стр. 80 ---
4. Автоматический панчер ВАЛЛАК ДБС ПАНЧЕР (1296-071) или ручной панчер для выбивки
бумажных дисков с диаметром около 3 мм.
5. Пипетка для разливки АВТОДЕЛФИЯ буфера и метки - ЭППЕНДОРФ МУЛЬТИПИПЕТКА
(1296-014) с 5 мл Комби наконечниками (1296-016) или в качестве альтернативы АВТОДЕЛФИЯ
плейт диспенсер с АВТОДЕЛФИЯ диспенсер юнит (1296-041 или 1296-043).
6. Пипетка для разливки Усиливающего раствора - ЭППЕНДОРФ мультипипетка (1296-014) с 5 мл
Комби наконечниками (1296-016) или альтернативно АВТОДЕЛФИЯ плейт диспенсер (1296-041).
7. АВТОДЕЛФИЯ ДИСК РЕМУ ВЕР (1296-061) для автоматического удаления жидкости и
бумажных пятен из микротитровальных лунок.
В дополнении к АВТОДЕЛФИЯ системе необходимо следующее;
- дозирующая пипетка для разливки микролитровых объемов
- пипетки для разливки миллитровых объемов НЭ буфера требуемого для приготовления
раствора метки и антител
- дистиллированная вода
СБОР ОБРАЗЦОВ И ХРАНЕНИЕ:
Образцы крови следует забирать сразу же после прокола пятки на фильтровальный бланк.
Липемические (триглицериды менее 5000 мг/л) и иктеричные (билирубин менее 30 мг/дл) образцы
крови не оказывают влияния на результаты.
Не используйте кровь собранную с ЭДТА или с цитратом натрия в качестве
антикоагулянтных средств, поскольку эти агенты воздействуют на хелаты европиевой метки.
Скрининговые программы различаются в зависимости от того какой тип образца
используется. Кровь при проколе пятки обычно берется на 2-6 дни жизни и эта схема также годится
и для Нео-ИРТ. Мы рекомендуем использовать фильтровальную бумагу производимую компанией
Шляйхер/Шуль (№903) для сбора образцов крови и бумага должна быть та же самая как и для пятен
стандартов. Метод основанный на образцах представленных на бланках предъявляет определенные
требования к сбору образцов крови, хранению и транспортировке. Сбор образцов описан детально(
NCCLS) в документе комитета по взятию крови LA4-A3:
протрите кожу спиртом и высушите
проколоть иглой для прокола кожи ребенка ланцетом или автоматическим ланцетом на
глубину примерно 2.0 мм. Прокол глубже чем на 2.0 мм у маленьких плодов может
вызвать повреждение кости
удалите первую каплю крови. Нежно промокнуть на фильтровальную бумагу большую
каплю крови, позволяя ей промокнуть насквозь, полностью заполняя отмеченный
кружок на фильтровальном бланке. Проверьте с другой стороны бланка, что кровь
пропиталась насквозь. Не накрывайте полученное пятно крови.
Высушите пятна крови на воздухе в горизонтальной позиции по меньшей мере 3 часа
при комнатной температуре, избегайте попадания прямых солнечных лучей.
Проверьте заполненность всех граф нужной информацией, вкл.чая имя, адрес, номер
пациента, пол; название и адрес госпиталя; имя, адрес, телефон врача производящий
заполнение граф. Укажите время и дату родов, а также дату и время забора крови.
Укажите был ли ребенок доношенным и если да - то степень недоношенности.У кажите
вес новорожденного, многоплодный или нет.
Поместите каждый образец в свой отдельный бумажный конверт и транспортируйте
или перешлите его в лабораторию в течение 24 часов после взятия.
Образцы хранимые при комнатной температуре показывают снижение уровня Нео-ИРТ на 6-
9% за каждую неделю. Для более длительного хранения образцы помещаются в пластиковые
пакеты и замораживаются. Известно о сезонных колебаниях уровня Нео-ИРТ. Причина вероятно
вызвана сезонной нестабильностью ИРТ во время транспортировки и хранения. Считается, что
необходимо учитывать такую сезонность изменяяя пороговую концентрацию в зависимости от
времени года. Пороговая концентрация может быть недостаточна для предотвращения ложно
--- стр. 81 ---
положительных случаев летом, хотя это может также способствовать увеличению количества
ложно-положительных случаев при скрининге зимой. Использование правильной транспортировки и
измерение ИРТ сразу же после сбора позволяет минимизировать все эти отклонения.
М ЕРЫ П РЕДОСТОРОЖ НОСТИ;
Для диагностики ни витро.
Используется в работе персоналом после предварительного обучения.
Набор содержит реагенты произведенные из компонентов человеческой крови. Источник
протестирован на на наличие поверхностного антигена к гепатиту В, анти-гепатиту С, и анти-ВИЧ I
и II. Тем не менее все рекомендации по мерам предосторожности при работе с производными крови
должны быть соблюдены.
Можно считать все образцы крови пациентов как потенциально инфицированные.
Реагенты содержат азид натрия в качестве консерванта. Азид натрия может
взаимодействовать с металлическими поверхностями с образованием азидов металлов. Для
предотвращения образования азидов металлов необходимо промыть большим количеством воды.
Лиофиллизированные стандарты ИРТ содержат азид натрия в качестве консерванта.
Порошок опасен при ингалляции и попадании на кожу.
Для дезинфекции всех сливных реагентов пользуйтесь правилами местных
контроллирующих организаций.
ПРОТОКОЛ ОПРЕДЕЛЕНИЯ:
Выполните каждое определение в дубле для стандартов и контролей. Стандартная кривая
должна быть использована для каждого определения. Тестируемые образцы определяются по
одному. Образцы и реагенты должны быть доведены до комнатной температуры (+20+25С) до
использования.
I . Приготовление реагентов Стабильность после разведения
Промывочный раствор 2 недели +2+25С в закрытом
контейнере
Перенести 100 мл из Промывочного Концентрата в чистый флакон и растворить
добавляя 2400 мл дистиллированной воды для приготовления готового буферного
раствора рН=7.8
Анти-ИРТ-Еи метка Приготовить и использовать в течение 1 часа
Приготовьте необходимый объем метки посредством смешивания 60 мкл концентрата
метки с 3 мл Нео-ИРТ инкубационного буфера на один стрип (см. таблицу).
Важно, чтобы растворы антисы воротки и метки готовились раздельно и чтобы Нео
ИРТ буфер не контактировал с раствором метки до использования в работе.
Мы советуем использовать одноразовый пластиковый флакон для приготовления рабочих
растворов метки и антисыворотки.
2. Перенести необходимое количество микротитровальных стрипов в рамку- держатель для
стрипов (вернуть оставшиеся стрипы в пластиковую коробку и закрыть).
--- стр. 82 ---
Выбить в дубле фильтровальные диски, используя автоматические или ручные панчеры в
лунки плашки, согласно таблице Диаметр диска должен быть около 3.2 мм. Только один
диск добавляется в каждую лунку.
Раскапывайте сразу же по 200 мкл растворенной анти-ИРТ метки в каждую лунку,
используя рекомендованную Эппендорф Мультипипетку или АВТОДЕЛФИЯ
диспенсер юнит. Избегайте выплескивания из лунки раскапываемой жидкости, не
касайтесь поверхности лунки или поверхности жидкости.
Инкубирование 10 минут в режиме “быстро”(РА5Т), используя АВТОДЕЛФИЯ плейт
шейкер. Накрыть планшет пленкой и инкубировать 16-24 часа в холодильнике (+2-+8С) без
шейкирования. Проверьте правильность температурного режима в холодильнике. Быстрое
перемешивание необходимо, чтобы обеспечить полную экстракцию компонентов крови
из фильтровальных дисков. Планшет следует поместить на холод сразу же после
шейкирования.
После инкубации удалите раствор и фильтровальные диски, используя АВТОДЕЛФИЯ диск
ремувер или с помощью пастеровской пипетки, соединенной с вакуумным насосом. Не
позволяйте планш ету долго находиться при комнатной температуре и сразу же после
холодильника удалите диски.
Аспирируйте и промыть каждый стрип
используя программу №34 (промывка).
с помощью АВТОДЕЛФИЯ плейт вошера,
8. Добавить 200 мкл Усиливающего растовра прямо из реагентного флакона в каждую лунку,
используя рекомендуемую ЭППЕНДОРФ мультипипетку, после заполнения
Комбинаконечника раствором Усиливающего раствора или используя АВТОДЕЛФИЯ
плейт диспенсер. Избегайте касания носиком пипетки лунки или ее содержимого.
9. Встряхивайте в режиме “медленно”(51о\у1у) 5 минут. Сигнал флюоресценции стабилен в
течение нескольких часов, если нет сильного испарения жидкости. Однако, мы
рекомендуем измерять в течение 1 часа, чтобы внешние факторы не оказали влияния на
уровень сигнала, хотя это достаточно редкий фактор.
10. Вставьте каждый стрип в рамку-держатель и измеряйте флюоресценцию на флюорометре с
временным разрешением.
Когда используется модель флюорометра 1232 или 1234 выберается номер программы 34
для автоматического измерения и подсчета результатов и протокол в Мультикалке «34
NIRT»
Когда используется ВИКТОР Д старт измерения начинается со Start Wizard, затем
выбирается программа NIRT из протоколов/китов в панели «Neonatal Europe» и
определяется количество плашек и образцов.
--- стр. 83 ---
Сверьте параметры группы для программы №34 и если необходимо произведите коррекцию
в соответствии со следующим (см. описание к флюрометру для проведения
редактирования параметров считывания):
КИТ НОМЕР
ASSAY TYPE
тип определения
FITTING METHOD
метод обработки
X-AXIS
х-ось
Y-AXIS
у-ось
BLANKS
бланки
STANDARDS
стандарты
STANDARD REPLICATES
стандарты в дупликате
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
UNKNOWN REPLICATES
неизвестные образцы в дубле
34 НЕО-ИРТ
IFMA
ИФМА
SPLINE SMOOTHED
метод “сглаживания”
LOGARITHMIC
логарифмическая
LOG
логарифмическая
2(A)
2(A)
5
5
2
2
А
А
В
В
С
С
D
д
Е
Е
F
Ф
1
1
Убедитесь, чтобы концентрация
стандартов, указанная на флаконах
совпадала с задаваемой. Если не
совпадает, введите новые.
О СОБЕННОСТИ ОПРЕДЕЛЕНИЯ:
1. Отношение к этому набору как к целому необходимо для успешного использования
АВТОДЕЛФИЯ наборов. Реагенты в этом наборе являются комплексными компонентами. Не
смешивайте идентичные реагенты из различных лотов. Не используйте реагенты после срока
годности, указанной на флаконе.
2. Реагенты должны быть доведены до комнатной температуры (+20+25С) до
приготовления различных растворов. Замороженные образцы должны быть нагреты до комнатной
температуры при медленном и осторожном перемешивании. Не используйте вортекс или
смешанные образцы пациентов.
3. При промывке стрипов следите, чтобы все стрипы были заполнены полностью и
одинаково до верхнего уровня как показано на картинке. После промывки стрипов, проверьте, что
стрипы сухие. Если что-либо осталось в лунках, то необходимо перевернуть планшету и встряхнуть
на фильтровальную бумагу,
Аспирирующее/промывочное оборудование не должно находиться заполненным с
промывочным раствором длительный период времени, поскольку промывочные иглы могут быть
закупорены и трудно проходимы для жидкости. В конце рабочего дня аспирировать
дистиллированную воду в аспирируюшую/промывочную систему. Промывочное устройство должно
быть регулярно промываться раствором NaCL (ЗОг/Л), а затем дистиллированной водой и 50%
этанолом и в конце промыто дистиллированной водой.
--- стр. 84 ---
4. Для избежания примеси европия и как результат высокого флюресцентного фона
высокие требования предъявляются к процедуре раскапывания и промывки. Поэтому необычайно
важно использовать рекомендуемые и поставляемые вместе с АВТОДЕЛФИЯ пипетки.
Усиливающий раствор должен быть раскапан только с использованием рекомендуемой
ЭППЕНДОРФ мультипипеткой, и при этом первый объем сбрасывается для полного заполнения.
Тот же тип Комбинаконечника не может быть использован для раскапывания любого другого
реагента. После работы ЭППЕНДОРФ мультипипетка помещается на штатив с наконечником.
При использовании АВТОДЕЛФИЯ плейт диспенсера и АВТОДЕЛФИЯ диспенсера юнита
ознакомьтесь с описанием.
ПОДСЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ:
АВТОДЕЛФИЯ система включает программу для обработки результатов и получения
данных в виде стандартной кривой, концентращ 1и неизвестных пациентов и т.д. (для детали см.
описание к флюорометру или к программе Мультикалк).
КАЛИБРОВКА:
Полная стандартная кривая для каждого определения ставится для каждой плашки.
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА:
Контрольные образцы следует использовать для подтверждения стабильности ежедневных
определений. Контроли определяются также как и неизвестные образцы. Контроли двух различных
уровней используются и включены в наборы. Эти контроли следует ставить в каждом определении,
если количество определений более чем одна планшета, то и в каждой плашке. Каждой лаборатории
следует установить свой собственный концентрационный диапазон. Полученная средняя величина
определяемого контроля должна укладываться в диапазон +20% от величин указанных в
сертификате контроля качества. Рекомендуется также использовать свои собственные контроли для
каждой лаборатории в добавлении к контролям включенным в набор. Тестируемые образцы дают
истинную концентрацию, если контрольные значения в пределах установленных норм.
Мы также рекомендуем участие лабораторий во внешнем контроле качества.
ОГРАНИЧЕНИЯ ПРОЦЕДУРЫ :
Как и для любых других скрининговых тестов ин витро, результаты получаемые с помощью
АВТОДЕЛФИЯ Нео-ИРТ могут быть использованы только для медицинсикх процедур и данные
интерпретируются только совместно с клиническими исследованиями.
Случаи при которых возможно получение аномальных результатов:
пятна не полностью пропитаны кровью
пятна выбиты панчером в месте, где имеет место плохая пропитка
плохо высушены пятна
нет элюции образца в буферный раствор, что вызвано либо нагреванием, либо
свертыванием.
Примеси в пятне крови фекалий и др.
Образцы на фильтровальных бланках не должны содержать ЭДТА, вследствии его
воздействия на хелатирующий эффект европия.
ОЖ ИДАЕМ Ы Е РЕЗУ ЛЬТАТЫ И ИХ ИНТЕРПРЕТАЦИЯ :
Измерение ИРТ в пятнах сухой крови используется для идентификации популляции
новорожденных , имеющих высокий риск КФ. Идентификация основана на использовании величины
пороговой концентрации или персентилей, которые позволяют максимально различать между
больными и здоровыми новорожденными при максимуме чувствительности и специфичности.
Имеется несколько различных протоколов скрининга с использованием Нео-ИРТ для
выявления КФ, Наиболее часто используется двух стадийный протокол определения ИРТ/ДНК. На
--- стр. 85 ---
первой стадии измеряется ИРТ в массовом рутинном определении. Затем у тех образцов где уровень
ИРТ превышает пороговый проводится ДНК исследование. Пороговая концентрация варьирует в
зависимости от количества ложно-положетельных случаев. Другой протокол использует при
повторном определении повторное измерение ИРТ с последующей оценкой результатов потовой
пробы. В обоих случаях те плоды которые идентифицированы как группа риска должны быть
подтверждены генетически и клинически. Там, где частота мутации локуса F 508 низка
используется вторая скрининговая технология.
Данные представленные ниже были получены при использовании старой версии кита,
Кат.Хо 1244-034. Кит был использован в четырех лабораториях для измерения концентрации ИРТ
для массового скрининига кистозоного фиброза. Скрининиговые подходы в различных
лабораториях суммированы ниже:
Параметр Лаб.№1 Лаб.№2 Лаб.№3 Лаб.№4
Метод
Скрининга АВТОДЕЛФИЯ НЕО-ИРТ
АВТОДЕЛФИЯ НЕО-ИРТ
АВТОДЕЛФИЯ НЕО-ИРТ АВТОДЕЛФИЯ НЕО-ИРТ
Пороговая
Концентрация
(<21дня)
90 нг/мл
(>21 дня)
70 нг/мл
после
7 мес.
снижается
на 5% в день
(<21 дня)
100 нг/мл
(>21 дня)
80 нг/мл
после
исследования
снижается
на 4% день
Повторное Повторы в Повторно тест на Повторы в F508 ДНК
тестирование дубле. Если ИРТ и Р508 и 15 дубле. Если
(1-й образец) среднее из других мутаций среднее из
трех результатов трех результаттов
выше порогового выше порогового
требуется повторная требуется повторная
проба на ИРТ проба на ИРТ
Повторное ИРТ нет ИРТ нет
Тестирование
(2-й образец)
Требования Если повторная ИРТ> 124 нг/мл и Если повторная ИРТ>170нг/мл
для проведения проба положительна нет аллелей муко- проба положи и нет F508 ал
потовой пробы висцидоза тельная лели и если
ИРТ>5% от порогового ИРТ>5% и
и имеется хотя бы есть хотя бы
одна аллель одна 1 аллель
Расы:
Белые 91% 86.3% 87.7% 86.4%
Испанцы 22.2% 9.6% 2.8% 4.6%
Черные 4.6% 9.1% 0.3% 9.6%
Америк. 1.1% 0.2% 11.0% 1.3%
Индейцы
Азиаты 2.8% 4.4% 1.0% 2.8%
Феномен транзиентной (не КФ) неонатальной гипертрипсинемиии, имеющей место по
преимуществу в первые несколько дней жизни, главная причина ложно положительных
результатов. Ложно-положительные результаты имеют место у детей с низким АПГАР и у плодов
Афро-Американского происхождения. Использование второго тестирования либо ДНК, либо ИРТ
во втором образце снижает количество ложно-положительных результатов. Здоровые носители КФ
также могут иметь ложно-положительные результаты в частоте в три раза выше, чем в общей
популляции. Ложно-отрицательные результаты как известно имеют место у некоторых пациентов с
мекониевым забросом.
--- стр. 86 ---
ИРТ скрининг в сочетании с ДНК анализом в повторном образце позволяет
идентифицировать носителей КФ. Как считается это имеет преимущество, поскольку позволяет
идентифицировать КФ на доклинических стадиях. Клиническая картина КФ наступает значительно
позднее и не всегда ее легко идентифицировать. Данный скрининг предупреждает наступление
клинической картины заболевания.
--- стр. 87 ---
S7
ДЕЛФ ИЯ 1 7 -о к с и п р о г е с г е р о н 17 -О Н Р
DELFIA N e o n a ta l 1 7 а -О Н -P r o g e s te r o n e
Ф л ю р о м ет р и ч еск и й а н а л и з с р азр еш ен и ем по в р ем ен и д л я к о л и ч е с т в ен н о го оп ред елен и я
н ео н ат ал ь н о го 1 7 -ал ь ф а-О Н -п р о гетстер о н а ( Н Е 0 -1 7 0 Н Р )
Производитель - WALLAC Оу, Финляндия
Для диагностического применения in vitro.
ДЛЯ ПРИМЕНЕНИЯ В IN VITRO ДИАГНОСТИКЕ
960 ОПРЕДЕЛЕНИЙ
НАЗНАЧЕНИЕ:
Данный тест предназначен для количественного определения неонатального 17-альфа-ОН-
прогетотерона (НЕ0-170НР) в образцах крови на фильтровальных бланках для скрининга
новорожденных на адреногенитальный синдром.
СОСТАВ НАБОРА:
1.НЕ0-170НР стандарты - образцы крови человека высушенные на фильтровальной бумаге. К-во -1
шт.
2.НЕ0-170НР контрол и - образцы крови человека высушенные на фильтровальной бумаге. К-во -1
шт.
3.НЕ0-170НР Ей раствор. 1 флакон, лиофилизированные
4.АНТИ-НЕ0-170НР раствор (кроличьи, поликлональные) 1.5 мл (фл). К-во -1 шт.
б.Промывочный концентрат: 250 мл(фл). К-во - 1 шт.
6.НЕ0-170НР инкубационный буфер; 250 мл(фл). К-во -1 шт.
7.Усиливающий реагент; 250 мл(фл). К-во -1 шт.
8.Анти-кроличьи IgG микротитрационные стрипы (мышиные антитела); 96 луночные; К-во -10 шт
ПРИНЦИП МЕТОДА:
ДЕЛФИЯ 17-оксипрогестерон (17-ОНР) определение основано на твердофазном, дву-сайтовом
флюороиммунометрическом определении с разрешением по времени на основе прямого сэндвич методе при
котором два антитела (кроличьи и мышиные) направлены против двух различных антигенных детерминантах на
молекуле 17-ОНР . Стандарты, контроли и тестируемые образцы содержащие 17-ОНР одноврменно реагируют
и с иммобилизированными моноклональными антителами, направленными против специфических антигенных
сайтов на молекуле 17-ОНР и меченными европием вторыми моноклональными антителами (направленными
против разных антигенных детерминантов) в инкубационном 17-ОНР буфере. Буфер элюирует 17-ОНР из
высушенных пятен крови. Для выполнения определения требуется только одна инкубационная ступень.
Усиливаюший раствор диссоциирует ионы европия из меченого антигена в раствор, где они
формируют высокофлюоресцентные хелатные комплексы с компонентами усиливающего раствора.
Флюоресценция каждой лунки в последующем измеряется. Флюоресцентный сигнал каждого образца прямо
пропорционален количеству 17-ОНР в образце.
Каждый ДЕЛФИЯ 17-оксипрогестерон (17-ОНР) набор содержит реагентов необходимых для 960
определений.
Срок годности набора указан на внешней стороне коробки. Хранение при +2+8 С.
МАТЕРИАЛЫ НЕОБХОДИМЫЕ. НО НЕ ПОСТАВЛЯЕМЫЕ
С НАБОРОМ:
--- стр. 88 ---
Данный набор является частью комплексной системы иммунодиагностических реагентов и
оборудования. ДЕЛФИЯ система требует следующие компоненты, которые могут быть поставлены или
от WALL АС 0Y или от его дистрибьютеров:
1. Флюорометр с временным разрешением плюс принтер и внешний компьютер.
2. Автоматический вошер - ДЕЛФИЯ плейтвошер (Кат,№1296-024 или1296-026)
3. Автоматический шейкер-ДЕЛФИЯ плейтшейкер{Кат.№1296-001 ил и1296-003)
4. Пипетка для разливки ДЕЛФИЯ буфера и метки - ЭППЕНДОРФ МУЛЬТИПИПЕТКА (1296-014) с 5 мл
Комби наконечниками (1296-016) или в качестве альтернативы ДЕЛФИЯ плейт диспенсер с ДЕЛФИЯ
диспенсер юнит (1296-041 или 1296-043).
5. Пипетка для разливки Усиливающего раствора - ЭППЕНДОРФ мультипипетка (1296-014) с 5 мл
Комби наконечниками (1296-016) или альтернативно ДЕЛФИЯ плейт диспенсер (1296-041).
6. ДЕЛФИЯ растворитель I (Кат.№ В127-100, В128-100).
В дополнении к ДЕЛФИЯ системе необходимо следующее:
- дозирующая пипетка для разливки микролитровых объемов
- пипетки для разливки миллитровых объемов НЭ буфера требуемого для приготовления
раствора метки и антител
- дистиллированная вода
СБОР ОБРАЗЦОВ И ХРАНЕНИЕ:
Получение крови посредством венопункции, образование сгустка и выделение сыворотки
посредством центрифугирования. Плазма, получен на с использованием ЭДТА и цитрата натрия не
может быть использована, вследствии воздействия на хелатирующий европий. Однако может
применяться плазма крови полученная с гепарином. Гемолитическая (гемоглобин>2г/Л), липемическая
(> 2 г/Л) и иктерическая (билирубин>30 мкмоль/Л) сыворотки использовать не рекомендуется. Если
концентрация превышает 50 нмоль/Л следует развести сыворотки или нормальной женской
сывороткой или ДЕЛФИЯ дилюентом I .
Образцы могут быть сохранены 12 часов при комнатной температуре или 3 дня при +2+8С.
Для более длительного периода неразведенные образцы могут храниться при -20 С. Избегайте
повторного замораживания размораживания.
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ:
Для диагностики ин витро.
Следует соблюдать правила предостороженности США №CDC 88-8395 или местные правила.
Можно считать все образцы крови пациентов как потенциально инфицированные.
Реагенты содержат азид натрия в качестве консерванта. Азид натрия может
взаимодействовать с металлическими поверхностями с образованием азидов металлов. Для
предотвращения образования азидов металлов необходимо промыть большим количеством воды.
Для дезинфекции всех сливных реагентов пользуйтесь правилами местных контроллирующих
организаций.
Флюоресценция измеряется на флюорометре с временным разрешением. Выберите номер
программы 50 для автоматического измерения и подсчета результатов. Сверьте параметры
группы для программы №50 и если необходимо произведите коррекцию в соответствии со следующим
(см. описание к флюрометру для проведения редакции параметров считывания):
ASSAY ТУРЕ F1A
тип определения ФИА
FITTING METHOD SPLINE SMOOTHED
метод обработки метод “сглаживания”
X-AXIS LOGARITHMIC
х-ось логарифмическая
--- стр. 89 ---
Y-AXIS В/Вмакс
у-ось В/Вмакс
BLANKS О
бланки О
STANDARDS 6
стандарты 6
STANDARD REPLICATES 2 Убедитесь, чтобы концентрация
стандарты в дупликате 2 стандартов, указанная на флаконах
STANDARD CONC А совпадала с задаваемой. Если не
стандарты конц. А совпадает, введите новые.
STANDARD CONC В
стандарты конц. В
STANDARD CONC С
стандарты конц. С
STANDARD CONC D
стандарты конц. Д
STANDARD CONC Е
стандарты конц. Е
STANDARD CONC F
стандарты конц. Ф
UNKNOWN REPLICATES 2
неизвестные образцы в дубле 2
ОСОБЕННОСТИ ОПРЕДЕЛЕНИЯ;
1. Отношение к этому набору как к целому необходимо для успешного использования ДЕЛФИЯ
наборов. Реагенты в этом наборе являются комплексными компонентами. Не смешивайте идентичные
реагенты из различных лотов. Не используйте реагенты после срока годности, указанной на флаконе.
2. Реагенты должны быть доведены до комнатной температуры (+20+25С) до приготовления
различных растворов. Замороженные образцы должны быть нагреты до комнатной температуры при
медленном и осторожном перемешивании. Не используйте вортекс или смешанные образцы
пациентов.
3. При промывке стрипов следите, чтобы все стрипы были заполнены полностью и одинаково
до верхнего уровня как показано на картинке. После промывки стрипов, проверьте, что стрипы сухие.
Если что-либо осталось в лунках, то необходимо перевернуть планшету и встряхнуть на
фильтровальную бумагу.
Аспирирующее/промывочное оборудование не должно находиться заполненным с
промывочным раствором длительный период времени, поскольку промывочные иглы могут быть
закупорены и трудно проходимы для жидкости. В конце рабочего дня аспирировать дистиллированную
воду в аспирирующую/промывочную систему. Промывочное устройство должно быть регулярно
промываться раствором NaCL (ЗОг/Л), а затем дистиллированной водой и 50% этанолом и в конце
промыто дистиллированной водой.
4. Для избежания примеси европия и как результат высокого флюресцентного фона высокие
требования предъявляются к процедуре раскапывания и промывки. Поэтому необычайно важно
использовать рекомендуемые и поставляемые вместе с ДЕЛФИЯ пипетки.
Усиливающий раствор должен быть раскапан только с использованием рекомендуемой
ЭППЕНДОРФ мультипипеткой, и при этом первый объем сбрасывается для полного заполнения. Тот
же тип Комби наконечника не может быть использован для раскапывания любого другого реагента.
После работы ЭППЕНДОРФ мультипипетка помещается на штатив с наконечником.
При использовании ДЕЛФИЯ плейт диспенсера и ДЕЛФИЯ диспенсера юнита ознакомьтесь с
описанием.
ПОДСЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ:
ДЕЛФИЯ система включает программу для обработки результатов и получения данных в виде
стандартной кривой, концентрации неизвестных пациентов и т.д. (для детали см. описание к
флюорометру или к программе Мультикалк).
--- стр. 91 ---
s r
АВТОДЕЛФИЯ 1 7 -о к с и п р о г е с т е р о н 17-О Н Р
AutoDELFIA N e o n a ta l 1 7 а ’ 0 Н - P r o g e s te r o n e
Ф л ю р о м ет р и ч еск и й а н а л и з с р азр еш ен и ем по вр ем ен и д л я к о л и ч е с т в ен н о го о п р ед ел ен и я
н ео н ат ал ь н о го 1 7 -ал ь ф а-О Н -п р о гет стер о н а ( Н Е 0 -1 7 0 Н Р )
Производитель - WALLAC Оу, Финляндия
Для диагностического применения in vitro.
ДЛЯ ПРИМЕНЕНИЯ В IN VITRO ДИАГНОСТИКЕ
960 ОПРЕДЕЛЕНИЙ
НАЗНАЧЕНИЕ:
Данный тест предназначен для количественного определения неонатального 17-альфа-ОН-
прогетстерона (НЕ0-170НР) в образцах крови на фильтровальных бланках для скрининга
новорожденных на адреногенитальный синдром.
СОСТАВ НАБОРА:
1.НЕ0-170НР стандарты - образцы крови человека высушенные на фильтровальной бумаге. К-во -1
шт.
2.НЕ0-170НР контрол и - образцы крови человека высушенные на фильтровальной бумаге. К-во -1
шт.
3.НЕ0-170НР Ей раствор. 1 флакон, лиофилизированные
4.АНТИ-НЕ0-170НР раствор {кроличьи, поликлональные) 1.5 мл (фл). К-во -1 шт.
б.Промывочный концентрат: 250 мл(фл). К-во -1 шт.
6.НЕ0-170НР инкубационный буфер; 250 мл{фл). К-во -1 шт.
/.Усиливающий реагент; 250 мл(фл). К-во -1 шт.
8.Анти-кроличьи IgG микротитрационные стрипы (мышиные антитела); 96 луночные; К-во -10 шт
ПРИНЦИП МЕТОДА:
АВТОДЕЛФИЯ 17-оксипрогестерон (17-ОНР) определение основано на твердофазном, дву-сайтовом
флюороиммунометрическом определении с разрешением по времени на основе прямого сэндвич методе при
котором два антитела (кроличьи и мышиные) направлены против двух различных антигенных детерминантах на
молекуле 17-ОНР . Стандарты, контроли и тестируемые образцы содержащие 17-ОНР одноврменно реагируют
и с иммобилизированными моноклональными антителами, направленными против специфических антигенных
сайтов на молекуле 17-ОНР и меченными европием вторыми моноклональными антителами (направленными
против разных антигенных детерминантов) в инкубационном 17-ОНР буфере. Буфер элюирует 17-ОНР из
высушенных пятен крови. Для выполнения определения требуется только одна инкубационная ступень.
Усиливающий раствор диссоциирует ионы европия из меченого антигена в раствор, где они
формируют высокофлюоресцентные хелатные комплексы с компонентами усиливающего раствора.
Флюоресценция каждой лунки в последующем измеряется. Флюоресцентный сигнал каждого образца прямо
пропорционален количеству 17-ОНР в образце.
Каждый АВТОДЕЛФИЯ 17-оксипрогестерон (17-ОНР) набор содержит реагентов необходимых
для 960 определений.
Срок годности набора указан на внешней стороне коробки. Хранение при +2+8 С.
МАТЕРИАЛЫ НЕОБХОДИМЫЕ, НО НЕ ПОСТАВЛЯЕМЫЕ
С НАБОРОМ:
--- стр. 92 ---
Данный набор является частью комплексной системы иммунодиагностических реагентов и
оборудования. АВТОДЕЛ ФИ Я система требует следующие компоненты, которые могут быть
поставлены или от WALLAC 0Y или от его дистрибьютеров;
1 . Флюорометр с временным разрешением плюс принтер и внешний компьютер.
2. Автоматический вошер - АВТОДЕЛФИЯ плейтвошер (Кат.№1296-024 или1296-026)
3. Автоматический шейкер-АВТОДЕЛФИЯ плейтшейкер(Кат,№1296-001или1296-003)
4. Пипетка для разливки АВТОДЕЛФИЯ буфера и метки - ЭППЕНДОРФ МУЛЬТИПИПЕТКА (1296-014) с
5 мл Комби наконечниками (1296-016) или в качестве альтернативы АВТОДЕЛФИЯ плейт диспенсер с
АВТОДЕЛФИЯ диспенсер юнит (1296-041 или 1296-043).
5. Пипетка для разливки Усиливающего раствора - ЭППЕНДОРФ мультипипетка (1296-014) с 5 мл
Комби наконечниками (1296-016) или альтернативно АВТОДЕЛФИЯ плейт диспенсер (1296-041).
6. АВТОДЕЛФИЯ растворитель I (Кат.№ В127-100, В128-100).
В дополнении к АВТОДЕЛФИЯ системе необходимо следующее:
-дозирующая пипетка для разливки микролитровых объемов
- пипетки для разливки миллитровых объемов НЭ буфера требуемого для приготовления
раствора метки и антител
- дистиллированная вода
СБОР ОБРАЗЦОВ И ХРАНЕНИЕ:
Получение крови посредством венопункции, образование сгустка и выделение сыворотки
посредством центрифугирования. Плазма, полученна с использованием ЭДТА и цитрата натрия не
может быть использована, вследствии воздействия на хелатирующий европий. Однако может
применяться плазма крови полученная с гепарином. Гемолитическая (гемоглобин>2г/Л), липемическая
(> 2 г/Л) и иктерическая (билирубин>30 мкмоль/Л) сыворотки использовать не рекомендуется. Если
концентрация превышает 50 нмоль/Л следует развести сыворотки или нормальной женской
сывороткой или АВТОДЕЛФИЯ дилюентом I .
Образцы могут быть сохранены 12 часов при комнатной температуре или 3 дня при +2+8С.
Для более длительного периода неразведенные образцы могут храниться при -20 С. Избегайте
повторного замораживания размораживания.
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ:
Для диагностики ин витро.
Следует соблюдать правила предостороженности США №CDC 88-8395 или местные правила.
Можно считать все образцы крови пациентов как потенциально инфицированные.
Реагенты содержат азид натрия в качестве консерванта. Азид натрия может
взаимодействовать с металлическими поверхностями с образованием азидов металлов. Для
предотвращения образования азидов металлов необходимо промыть большим количеством воды.
Для дезинфекции всех сливных реагентов пользуйтесь правилами местных контроллирующих
организаций.
Флюоресценция измеряется на флюорометре с временным разрешением. Выберите номер
программы 50 для автоматического измерения и подсчета результатов. Сверьте параметры
группы для программы №50 и если необходимо произведите коррекцию в соответствии со следующим
(см. описание к флюрометру для проведения редакции параметров считывания):
ASSAY ТУРЕ FIA
тип определения ФИА
FITTING METHOD SPLINE SMOOTHED
метод обработки метод “сглаживания"
X-AXIS LOGARITHMIC
х-ось логарифмическая
--- стр. 93 ---
Y-AXIS
у-ось
BLANKS
бланки О
STANDARDS
стандарты
STANDARD REPLICATES
стандарты в дупликате 2
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
UNKNOWN REPLICATES
неизвестные образцы в дубле 2
В/В макс
В/В макс
О
2 Убедитесь, чтобы концентрация
стандартов, указанная на флаконах
А совпадала с задаваемой. Если не
А совпадает, введите новые.
В
В
С
С
D
Д
Е
Е
F
Ф
2
ОСОБЕННОСТИ ОПРЕДЕЛЕНИЯ:
1. Отношение к этому набору как к целому необходимо для успешного использования
АВТОДЕЛФИЯ наборов. Реагенты в этом наборе являются комплексными компонентами. Не
смешивайте идентичные реагенты из различных лотов. Не используйте реагенты после срока
годности, указанной на флаконе.
2. Реагенты должны быть доведены до комнатной температуры (+20+25С) до приготовления
различных растворов. Замороженные образцы должны быть нагреты до комнатной температуры при
медленном и осторожном перемешивании. Не используйте вортекс или смешанные образцы
пациентов.
3. При промывке стрипов следите, чтобы все стрипы были заполнены полностью и одинаково
до верхнего уровня как показано на картинке. После промывки стрипов, проверьте, что стрипы сухие.
Если что-либо осталось в лунках, то необходимо перевернуть планшету и встряхнуть на
фильтровальную бумагу.
Аспирирующее/промывочное оборудование не должно находиться заполненным с
промывочным раствором длительный период времени, поскольку промывочные иглы могут быть
закупорены и трудно проходимы для жидкости. В конце рабочего дня аспирировать дистиллированную
воду в аспирирующую/промывочную систему. Промывочное устройство должно быть регулярно
промываться раствором NaCL (ЗОг/Л), а затем дистиллированной водой и 50% этанолом и в конце
промыто дистиллированной водой.
4. Для избежания примеси европия и как результат высокого флюресцентного фона вьюокие
требования предъявляются к процедуре раскапывания и промывки. Поэтому необычайно важно
использовать рекомендуемые и поставляемые вместе с АВТОДЕЛФИЯ пипетки.
Усиливающий раствор должен быть раскапан только с использованием рекомендуемой
ЭППЕНДОРФ мультипипеткой, и при этом первый объем сбрасывается для полного заполнения. Тот
же тип Комбинаконечника не может быть использован для раскапывания любого другого реагента.
После работы ЭППЕНДОРФ мультипипетка помещается на штатив с наконечником.
При использовании АВТОДЕЛФИЯ плейт диспенсера и АВТОДЕЛФИЯ диспенсера юнита
ознакомьтесь с описанием.
ПОДСЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ:
АВТОДЕЛФИЯ система включает программу для обработки результатов и получения данных в
виде стандартной кривой, концентрации неизвестных пациентов и т.д. (для детали см. описание к
флюорометру или к программе Мультикалк).
--- стр. 95 ---
ДЕЛФИЯ Т и р о к с и н (Н е о -Т 4 )
DELFIA N e o n a ta l T h y ro x in e (Т 4 )
Флюрометрический анализ с разрешением по времени для количественного определения
неонатального тироксина (НЕ0-Т4) в образцах высушенной крови человека
Производитель - WALLAC Оу, Финляндия
Для диагностического применения in vitro.
ДЛЯ ПРИМЕНЕНИЯ В IN VITRO ДИАГНОСТИКЕ
960 ОПРЕДЕЛЕНИЙ
НАЗНАЧЕНИЕ;
Набор предназначен для определения тироксина (НЕ0-Т4) в образцах фильтровальных бланках для скрининга
новорожденных на врожденный гипотиреоз (подтверждающая диагностика. Принцип основан на иммунофлю-
оресцентом анализе, в котором определяемая молекула антител к НЕ0-Т4 взаимодействует по типу реакции
антиген антитело с сорбированными на поверхности планшета антигеном против антител к НЕ0-Т4 и вторыми
антителами, меченые флюоресцентной меткой, В результате реакции образуется высокофлюоресцентное
соединение, концентрация которого определяется на приборе-флюорометре ДЕЛФИЯ/ВИКТОР. Концентрация
определяемого флюоресцирующего соединения прямо пропорциональна количеству антител к НЕ0-Т4 в
образцах сыворотки крови человека.
СОСТАВ НАБОРА:
1.НЕ0-Т4 стандарты - образцы крови человека высушенные на фильтровальной бумаге. К-во - 1 шт.
2.НЕО-Т4 контроли - образцы крови человека высушенные на фильтровальной бумаге. К-во - 1 шт.
3.НЕО-Т4 Ей раствор. 1 флакон, лиофилизированные
4.Анти-НЕО-Т4 раствор (мышиные, моноклональные) 1.5 мл (фл). К-во - 1 шт.
5.Промывочный концентрат; 250 мл(фл). К-во - 1 шт.
6.НЕО-Т4 инкубационный буфер; 250 мл(фл). К-во - 1 шт.
7.Усиливающий реагент; 250 мл(фл). К-во - 1 шт.
8.Анти-мышиные IgG микротитрационные стрипы (мышиные антитела); 96 луночные; К-во - 10 шт.
ПРИНЦИП МЕТОДА:
ДЕЛФИЯ Нео-Т4 определение основано на твердофазном, флюороиммуном определении с
разрешением по времени на основе конкуренции между меченым европием Т4 и Т4 в тестируемом
образце за ограниченное количество мест связывания на Т4 -специфических моноклональных
антителах (мышиные). Стандарты, контроли и образца пациентов, содержащие Т4 ингибируют
связывание меченого европием Т4 с антителами. Блокирующие агенты в 14 инкубационном буфере
предотвращают выделение Т4 из связанного с белками состояния. Второе антитело
взаимодействующее с анти-мышиными антителами, которые покрывают поверхность лунок и
представляют твердую фазу, определяя высококачественное разделение антител-связанных и
свободных антигенов 14. В этом определении только одна инкубационная ступень.
Усиливающий раствор диссоциирует ионы европия из меченого Т4 в раствор, где они
формируют высокофлюоресцентные хелатные комплексы с компонентами усиливающего раствора.
Флюоресценция каждой лунки в последующем измеряется. Флюоресцентный сигнал каждого образца
обратно пропорционален количеству Т4 в образце.
Каждый ДЕЛФИЯ Нео-Т4 набор содержит реагентов необходимых для 960 определений.
Срок годности набора указан на внешней стороне коробки. Хранение при +2+8 С.
--- стр. 96 ---
Данный набор является частью комплексной системы иммунодиагностических реагентов и
оборудования. ДЕЛФИЯ система требует следующие компоненты, которые могут быть поставлены или
от WALLAC 0Y или от его дистрибьютеров:
1 . Флюорометр с временным разрешением плюс принтер и внешний компьютер.
2. Автоматический вошер - ДЕЛФИЯ плейтвошер (Кат.№1296-024 или1296-026)
3. Автоматический шейкер-ДЕЛФИЯ плейтшейкер(Кат.М91296-001 ил и 1296-003)
4. Пипетка для разливки ДЕЛФИЯ буфера и метки - ЭППЕНДОРФ МУЛЬТИПИПЕТКА (1296-014) с 5 мл
Комби наконечниками (1296-016) или в качестве альтернативы ДЕЛФИЯ плейт диспенсер с ДЕЛФИЯ
диспенсер юнит (1296-041 или 1296-043).
5. Пипетка для разливки Усиливающего раствора - ЭППЕНДОРФ мультипипетка (1296-014) с 5 мл
Комби наконечниками (1296-016) или альтернативно ДЕЛФИЯ плейт диспенсер (1296-041).
6. ДЕЛФИЯ растворитель I (Кат.№ В127-100, 8128-100).
В дополнении к ДЕЛФИЯ системе необходимо следующее:
- дозирующая пипетка для разливки микролитровых объемов
- пипетки для разливки миллитровых объемов НЭ буфера требуемого для приготовления
раствора метки и антител
-дистиллированная вода
СБОР ОБРАЗЦОВ И ХРАНЕНИЕ:
Получение крови посредством венопункции, образование сгустка и выделение сыворотки
посредством центрифугирования. Плазма, полученна с использованием ЭДТА и цитрата натрия не
может быть использована, вследствии воздействия на хелатирующий европий. Однако может
применяться плазма крови полученная с гепарином. Гемолитическая (гемоглобин>2г/Л), липемическая
(>2 г/Л) и иктерическая (билирубин>30 мкмоль/Л) сыворотки использовать не рекомендуется. Если
концентрация превышает 50 нмоль/Л следует развести сыворотки или нормальной женской
сывороткой или ДЕЛФИЯ дилюентом I .
Образцы могут быть сохранены 12 часов при комнатной температуре или 3 дня при +2+8С.
Для более длительного периода неразведенные образцы могут храниться при -20 С. Избегайте
повторного замораживания размораживания.
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ:
Для диагностики ин витро.
Следует соблюдать правила предостороженности США №CDC 88-8395 или местные правила.
Можно считать все образцы крови пациентов как потенциально инфицированные.
Реагенты содержат азид натрия в качестве консерванта. Азид натрия может
взаимодействовать с металлическими поверхностями с образованием азидов металлов. Для
предотвращения образования азидов металлов необходимо промыть большим количеством воды.
Для дезинфекции всех сливных реагентов пользуйтесь правилами местных контроллирующих
организаций.
Флюоресценция измеряется на флюорометре с временным разрешением. Выберите номер
программы 50 для автоматического измерения и подсчета результатов. Сверьте параметры
группы для программы №50 и если необходимо произведите коррекцию в соответствии со следующим
(см. описание к флюрометру для проведения редакции параметров считывания):
М А Т Е Р И А Л Ы Н ЕО БХ О Д И М Ы Е, Н О Н Е П О С Т А В Л Я Е М Ы Е
С Н А БО РО М :
A SSA Y ТУРЕ F IA
--- стр. 97 ---
тип определения
FITTING METHOD
метод обработки
X-AXIS
х-ось
Y-AXIS
у-ось
BLANKS
бланки О
STANDARDS
стандарты
STANDARD REPLICATES
стандарты вдупликате 2
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
UNKNOWN REPLICATES
неизвестные образцы в дубле 2
ФИА
SPLINE SMOOTHED
метод “сглаживания”
LOGARITHMIC
логарифмическая
В/Вмакс
В/Вмакс
О
6
6
2 Убедитесь, чтобы концентрация
стандартов, указанная на флаконах
А совпадала с задаваемой. Если не
А совпадает, введите новые.
В
В
С
С
D
Д
Е
Е
F
Ф
2
ОСОБЕННОСТИ ОПРЕДЕЛЕНИЯ:
1. Отношение к этому набору как к целому необходимо для успешного использования ДЕЛФИЯ
наборов. Реагенты в этом наборе являются комплексными компонентами. Не смешивайте идентичные
реагенты из различных лотов. Не используйте реагенты после срока годности, указанной на флаконе.
2. Реагенты должны быть доведены до комнатной температуры (+20+25С) до приготовления
различных растворов. Замороженные образцы должны быть нагреты до комнатной температуры при
медленном и осторожном перемешивании. Не используйте вортекс или смешанные образцы
пациентов.
3. При промывке стрипов следите, чтобы все стрипы были заполнены полностью и одинаково
до верхнего уровня как показано на картинке. После промывки стрипов, проверьте, что стрипы сухие.
Если что-либо осталось в лунках, то необходимо перевернуть планшету и встряхнуть на
фильтровальную бумагу.
Аспирирующее/промывочное оборудование не должно находиться заполненным с
промывочным раствором длительный период времени, поскольку промывочные иглы могут быть
закупорены и трудно проходимы для жидкости. В конце рабочего дня аспирировать дистиллированную
воду в аспирирующую/промывочную систему. Промывочное устройство должно быть регулярно
промываться раствором NaCL (ЗОг/Л), а затем дистиллированной водой и 50% этанолом и в конце
промыто дистиллированной водой.
4. Для избежания примеси европия и как результат высокого флюресцентного фона высокие
требования предъявляются к процедуре раскапывания и промывки. Поэтому необычайно важно
использовать рекомендуемые и поставляемые вместе с ДЕЛФИЯ пипетки.
Усиливающий раствор должен быть раскапан только с использованием рекомендуемой
ЭППЕНДОРФ мультипипеткой, и при этом первый объем сбрасывается для полного заполнения. Тот
же тип Ком б и наконечника не может быть использован для раскапывания любого другого реагента.
После работы ЭППЕНДОРФ мультипипетка помещается на штатив с наконечником.
При использовании ДЕЛФИЯ плейт диспенсера и ДЕЛФИЯ диспенсера юнита ознакомьтесь с
описанием.
П О Д С ЧЕТ РЕЗУ Л ЬТА ТО В;
--- стр. 99 ---
. I •
АВТОДЕЛФИЯ Т и р о к с и н (Н е о -Т 4 )
A utoDELFIA N e o n a ta l T h y ro x in e (T 4 )
Флюрометрический анализ с разрешением по времени для количественного определения
неонатального тироксина (НЕ0-Т4) в образцах высушенной крови человека
Производитель - WALLAC Оу, Финляндия
Для диагностического применения in vitro.
ДЛЯ ПРИМЕНЕНИЯ В IN VITRO ДИАГНОСТИКЕ
960 ОПРЕДЕЛЕНИЙ
НАЗНАЧЕНИЕ:
Набор предназначен для определения тироксина (НЕ0-Т4) в образцах фильтровальных бланках для скрининга
новорожденных на врожденный гипотиреоз (подтверждающая диагностика. Принцип основан на иммунофлю-
оресцентом анализе, в котором определяемая молекула антител к НЕ0-Т4 взаимодействует по типу реакции
антиген антитело с сорбированными на поверхности планшета антигеном против антител к НЕ0-Т4 и вторыми
антителами, меченые флюоресцентной меткой. В результате реакции образуется высокофлюоресцентное
соединение, концентрация которого определяется на приборе-флюорометре АВТОДЕЛФИЯ/ВИКТОР.
Концентрация определяемого флюоресцирующего соединения прямо пропорциональна количеству антител к
НЕ0-Т4 в образцах сыворотки крови человека.
СОСТАВ НАБОРА:
1 .НЕ0-Т4 стандарты - образцы крови человека высушенные на фильтровальной бумаге. К-во - 1 шт.
2.НЕО-Т4 контрол и - образцы крови человека высушенные на фильтровальной бумаге. К-во - I шт.
3.НЕО-Т4 Ей раствор. 1 флакон, лиофилизированные
4.Анти-НЕО-Т4 раствор (мышиные, моноклональные) 1.5 мл (фл). К-во - 1 шт.
5.Промывочный концентрат; 250 мл(фл). К-во - I шт.
6.НЕО-Т4 инкубационный буфер; 250 мл(фл). К-во - 1 шт.
7.Усиливающий реагент; 250 мл(фл). К-во - 1 шт.
8.Анти-мышиные IgG микротитрационные стрипы (мышиные антитела); 96 луночные; К-во - 10 шт.
ПРИНЦИП МЕТОДА:
АВТОДЕЛФИЯ Нео-Т4 определение основано на твердофазном, флюороиммуном
определении с разрешением по времени на основе конкуренции между меченым европием Т4 и Т4 в
тестируемом образце за ограниченное количество мест связывания на Т4 -специфических
моноклональных антителах (мышиные). Стандарты, контрол и и образца пациентов, содержащие Т4
ингибируют связывание меченого европием Т4 с антителами. Блокирующие агенты в Т4
инкубационном буфере предотвращают выделение Т4 из связанного с белками состояния. Второе
антитело взаимодействующее с анти-мышиными антителами, которые покрывают поверхность лунок и
представляют твердую фазу, определяя высококачественное разделение антител-связанных и
свободных антигенов Т4. В этом определении только одна инкубационная ступень.
Усиливающий раствор диссоциирует ионы европия из меченого Т4 в раствор, где они
формируют высокофлюоресцентные хелатные комплексы с компонентами усиливающего раствора.
Флюоресценция каждой лунки в последующем измеряется. Флюоресцентный сигнал каждого образца
обратно пропорционален количеству Т4 в образце.
Каждый АВТОДЕЛФИЯ Нео-Т4 набор содержит реагентов необходимых для 960 определений.
Срок годности набора указан на внешней стороне коробки. Хранение при +2+8 С.
--- стр. 100 ---
Данный набор является частью комплексной системы им мун од и агностических реагентов и
оборудования. АВТОДЕЛФИЯ система требует следующие компоненты, которые могут быть
поставлены или от WALLAC 0Y или от его дистрибьютеров:
1. Флюорометр с временным разрешением плюс принтер и внешний компьютер.
2. Автоматический вошер - АВТОДЕЛФИЯ плейтвошер (Кат.№1296-024 или1296-026)
3. Автоматический шейкер-АВТОДЕЛФИЯ плейтшейкер{Кат. №1296-001 ил и 1296-003)
4. Пипетка для разливки АВТОДЕЛФИЯ буфера и метки - ЭППЕНДОРФ МУЛЬТИПИПЕТКА (1296-014) с
5 мл Комби наконечниками (1296-016) или в качестве альтернативы АВТОДЕЛФИЯ плейт диспенсер с
АВТОДЕЛФИЯ диспенсер юнит (1296-041 или 1296-043).
5. Пипетка для разливки Усиливающего раствора - ЭППЕНДОРФ мультипипетка (1296-014) с 5 мл
Комби наконечниками (1296-016) или альтернативно АВТОДЕЛФИЯ плейт диспенсер (1296-041),
6. АВТОДЕЛФИЯ растворитель I (Кат.№ В127-100, В128-100).
В дополнении к АВТОДЕЛФИЯ системе необходимо следующее;
- дозирующая пипетка для разливки микролитровых объемов
- пипетки для разливки миллигровых объемов НЭ буфера требуемого для приготовления
раствора метки и антител
- дистиллированная вода
СБОР ОБРАЗЦОВ И ХРАНЕНИЕ:
Получение крови посредством венопункции, образование сгустка и выделение сыворотки
посредством центрифугирования. Плазма, полученна с использованием ЭДТА и цитрата натрия не
может быть использована, вследствии воздействия на хелатирующий европий. Однако может
применяться плазма крови полученная с гепарином. Гемолитическая (гемоглобин>2г/Л), липемическая
(>2 г/Л) и иктерическая (билирубин>30 мкмоль/Л) сыворотки использовать не рекомендуется. Если
концентрация превышает 50 нмоль/Л следует развести сыворотки или нормальной женской
сывороткой или АВТОДЕЛФИЯ дилюентом I .
Образцы могут быть сохранены 12 часов при комнатной температуре или 3 дня при +2+8С.
Для более длительного периода неразведенные образцы могут храниться при -20 С. Избегайте
повторного замораживания размораживания.
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ;
Для диагностики ин витро.
Следует соблюдать правила предостороженности США №CDC 88-8395 или местные правила.
Можно считать все образцы крови пациентов как потенциально инфицированные.
Реагенты содержат азид натрия в качестве консерванта. Азид натрия может
взаимодействовать с металлическими поверхностями с образованием азидов металлов. Для
предотвращения образования азидов металлов необходимо промыть большим количеством воды.
Для дезинфекции всех сливных реагентов пользуйтесь правилами местных контроллирующих
организаций.
Флюоресценция измеряется на флюорометре с временным разрешением. Выберите номер
программы 50 для автоматического измерения и подсчета результатов. Сверьте параметры
группы для программы №50 и если необходимо произведите коррекцию в соответствии со следующим
(см. описание к флюрометру для проведения редакции параметров считывания):
М А Т Е Р И А Л Ы Н ЕО БХ О Д И М Ы Е, Н О Н Е П О С Т А В Л Я Е М Ы Е
С Н А БО РО М :
A SSA Y ТУРЕ F IA
--- стр. 101 ---
тип определения
FITTING METHOD
метод обработки
X-AXIS
х-ось
Y-AXIS
у-ось
BLANKS
бланки О
STANDARDS
стандарты
STANDARD REPLICATES
стандарты в дупликате 2
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
UNKNOWN REPLICATES
неизвестные образцы в дубле 2
ФИА
SPLINE SMOOTHED
метод "сглаживания"
LOGARITHMIC
логарифмическая
В/Вмакс
В/Вмакс
О
6
6
2 Убедитесь, чтобы концентрация
стандартов, указанная на флаконах
А совпадала с задаваемой. Если не
А совпадает, введите новые.
В
В
С
С
D
Д
Е
Е
F
Ф
2
ОСОБЕННОСТИ ОПРЕДЕЛЕНИЯ:
1. Отношение к этому набору как к целому необходимо для успешного использования
АВТОДЕЛФИЯ наборов. Реагенты в этом наборе являются комплексными компонентами. Не
смешивайте идентичные реагенты из различных лотов. Не используйте реагенты после срока
годности, указанной на флаконе.
2. Реагенты должны быть доведены до комнатной температуры (+20+25С) до приготовления
различных растворов. Замороженные образцы должны быть нагреты до комнатной температуры при
медленном и осторожном перемешивании. Не используйте вортекс или смешанные образцы
пациентов.
3. При промывке стрипов следите, чтобы все стрипы были заполнены полностью и одинаково
до верхнего уровня как показано на картинке. После промывки стрипов, проверьте, что стрипы сухие.
Если что-либо осталось в лунках, то необходимо перевернуть планшету и встряхнуть на
фильтровальную бумагу.
Аспирирующее/промывочное оборудование не должно находиться заполненным с
промывочным раствором длительный период времени, поскольку промывочные иглы могут быть
закупорены и трудно проходимы для жидкости. В конце рабочего дня аспирировать дистиллированную
воду в аспирирующую/промывочную систему. Промывочное устройство должно быть регулярно
промываться раствором NaCL (ЗОг/Л), а затем дистиллированной водой и 50% этанолом и в конце
промыто дистиллированной водой.
4. Для избежания примеси европия и как результат высокого флюресцентного фона высокие
требования предъявляются к процедуре раскапывания и промывки. Поэтому необычайно важно
использовать рекомендуемые и поставляемые вместе с АВТОДЕЛФИЯ пипетки.
Усиливающий раствор должен быть раскапан только с использованием рекомендуемой
ЭППЕНДОРФ мультипипеткой, и при этом первый объем сбрасывается для полного заполнения. Тот
же тип Комбинаконечника не может быть использован для раскапывания любого другого реагента.
После работы ЭППЕНДОРФ мультипипетка помещается на штатив с наконечником.
При использовании АВТОДЕЛФИЯ плейт диспенсера и АВТОДЕЛФИЯ диспенсера юнита
ознакомьтесь с описанием.
--- стр. 103 ---
1 13905201-2
M S - 8 9 7 0 E Y 5 3 ^
N e o G r a m ® Н а б о р д л я о п р е д е л е н и я а м и н о к и с л о т и
а ц и л к а р н и т и н о в м е т о д о м т а н д е м н о й м а с с -
с п е к т р о м е т р и и .
И н с т р у к ц и я п о и с п о л ь з о в а н и ю . Р е а г е н т ы д л я 1 9 2 0 а н а л и з о в .
Произведено:
Wallac Оу, Турку, Финляндия.
Для диагностики in vitro.
--- стр. 104 ---
N e o G r a m ® Н а б о р д л я о п р е д е л е н и я а м и н о к и с л о т и
а ц и л к а р н и т и н о в м е т о д о м т а н д е м н о й м а с с -
с л е к т р о м е т р и и .
П р е д н а з н а ч е н и е
Набор предназначен для измерения и оценки концентрации аминокислот, свободного
карнитина и ацилкарнитина в высушенном на фильтровальной бумаге образце крови
полученном из прокола пятки новорожденного.
Измерение концентрации аминокислот, свободного карнитина и ацилкарнитина а также
соотношения их концентраций помогает при скрининге нарушений метаболизма
аминокислот и нарушениях при окислении жирных и органических кислот.
К р а т к и й о б з о р и о б ъ я с н е н и е п р и н ц и п а а н а л и з а .
Повышенный уровень аминокислот, свободного карнитина и ацилкарнитина в крови
новорожденных указывает на одно или несколько отдельньгх нарушений метаболизма.
Свободный карнитин и ацилкарнитин являются индикаторами нарушений метаболизма,
которые обычно классифицируются как нарушения в окислении жирных кислот (ОЖК) и
нарушения органичиеской ацидурии (ОА) (1-5). Подобно карнитинам, аминокислоты
используются как индикаторы группы из нескольких метаболических нарушений
известных под общим названием Ацидопатий. Эти расстройства являются врожденными
нарушениями метаболизма (или генетическими недостатками метаболизма) ( 1-6),
Представленный набор позволяет измерить более 40 веществ, хотя он поставляется с 24
внутренними стандартами и 23 контролями. Это возможно потому что разные
ацилкарнитины с одинаковой длиной углеродной цепочки имеют одинаковые
характеристики при анализе данным методом. Таким образом принимается допущение что
например С18, С 18:1, С 18:2 и С18:0Н имеют похожие рабочие характеристики, и для
измерения их концентраций можно использовать один внутренний стандарт С18.
Предполагается что может меняться правильность, но не точность измерений. Таким
образом пока внутренний стандарт, выбраный что бы подсчитать концентрацию
определенного вещества, остается постоянным при анализах образцов пациентов,можно
отличить образцы с предположительно нормальной и предположительно повышенной
концентрацией исследуемого вещества. Похожий аргумент может быть применен для
обоснования использования внутренних стандартов аминокислот при измерении
концентрации аминокислот не представленных в наборе внутренних стандартов.
Н а р у ш е н и я м е т а б о л и з м а а м и н о к и с л о т .
При аминоацидопатиях ферменты, ответственные за метаболизм определенных
аминокислот, недоступны или имеют пониженную активность. Как результат этого
концентрация соответствующих аминокислот и альтернативных метаболитов в теле
новорожденного повышается, что может привести к тяжелым вредным воздействиям на
здоровье новорожденного включая смерть. Вот некоторые обычно изучаемые ацидопатии:
Фенилкетонурия (ФКН) - нарушение метаболизма ароматических аминокислот, при
котором фенилаланин не может быть превращен в тирозин. Если ФКН не лечить, то она
ведет к задержкам умственного развития различной степени тяжести.
3 13905201-2
--- стр. 105 ---
Гиперфенилаланинемия - ведет к задержке умственного развития и мышечной ригидности.
Гомоцистеинурия - ведет к заболеваним связанным с окклюзией сосудов, остеопорозу,
накоплению гомоцистеина и метионина, и различим задержкам в развитии.
Заболевание «Моча как кленовый сироп» (лейциноз)Вызвано нарушениями метаболизма
альфа кетокислот: аминокислот с разветвленной цепью, в результате которых в крови
накапливаются лейцин, изолейцин и валин. Нелеченное заболевание приводит к задержке
развития, конвульсиям, развивается летаргия переходящая в кому.
Тирозинемия тип 1 ( наследственная тирозинемия) ведет к отказу печени или
хроническому циррозу и гепатоцеллюлярной карциноме.
Цитрулиннемия ведет к конвульсиям, анорексии, рвоте и летаргии с быстроследующей,
потенциально летальной, комой.
Н а р у ш е н и я о к и с л е н и я ж и р н ы х к и с л о т ( О Ж К )
При нарушеняж ОЖК, необходимые ферменты недоступны или их активность снижена.
Деградация или окисление жирных кислот необходимы для обеспечения энергией в
случаях пониженного уровня глюкозы в крови. Без этого источника энергии некоторые
люди могут быть подверженны влияниям низкого уровня сахара в крови. В случаях
голодания, часто вызываемого такими заболеваниями как инфекция уха или грипп, может
случится метаболический кризис. Он вызывает рвоту, диарею, летаргию, припадки или
кому. Непродиогностированные нарушения ОЖК могут привести к черезмерному
накоплению жира в печени, сердце и почках. Ожирение этих органов может вызвать
различные симптомы начиная от отказа печени, энцефалопатии, нарушения работы сердца
и глаз, общих проблемах с мышечным развитием. Многие из этих клинических симптомов
приводят к смерти. Смерти связанные с нарушениями ОЖК могут быть неправильно
продиагностированы как синдром внезапной смерти младенцев, синдром Рейе (Reye’s
Syndrome). (1-6)
Н а р у ш е н и я о р г а н и ч е с к о й а ц и д у р и т ( О А )
При нарушениях ОА прерываются метаболические пути деградации органических кислот
что ведет к их накоплению в крови и моче и изменению кислотно-основного баланса тела.
Модификации и адаптации промежуточных метаболических путей, вызванные этими
нарушением, могут вызвать различные клинические синдромы такие как метаболический
ацидоз, кетоз, гипераммонемия, остановка роста, сепсис или кома.
П р и н ц и п ы а н а л и з а
Измерения количества аминокислот, свободного карнитина, и ацилкарнитинов
начинаются с экстракции, высушенных на фильтровальной бумаге, капель крови взятых у
новорожденных пациентов, раствором, содержащим внутренние стандарты, меченные
стабильными изотопами. Далее производится анализ системой тандемной масс-
спектрометрии (MS/MS).
Ответ каждого из анализируемых веществ относительно соответствующего внутреннего
стандарта пропорционален его концентрации.
В наборе NeoGram® для определения аминокислот и ацилкарнитинов методом тандемной
масс-спектрометрии, экспериментальные данные получают в режимах «средней потери
102», «йона предшественника 85» и режиме мониторинга многократных реакций «MMR».
При сканировании, йоны, полученные в результате столкновения каждого из
анализируемых веществ с атомами азота, измеряются в течении установленного времени.
4 13905201-2
--- стр. 109 ---
13905201-2
С18)
Стандарты аминокислот
*^Н,2-*^С-Глицин 91795-59-42 2.5
^Н4-Аланин 56-41-7 0.5
^Hg-Валин 72-18-4 0.5
^Нз-Лейцин 87828-86-2 0.5
^Нз-Метионин 13010-53-2 0.5
^Нз-Фенилаланин 63-91-2 0.5
*^Сб-Тирозин 60-18-4 0.5
^Нз-Аспартат 56-84-8 0.5
^Нз-Г лютамат 96927-56-9 0.5
^Нг-Орнитин 2НС1 3184-13-2 0.5
^Нг-Цитруллин 372-75-8 0.5
‘ ^Н4г'^С-Аргинин НС1 1119-34-2 0.5
Компонент Количество Срок и условия хранения
Контроли: Высущеннные
пятна крови
Низкий уровень АК, К, АцК
Высокий уровень
2 карточки из
фильтровальной бумаги
(Shleicher & Schuell, по.903)
содержащие по 5 пятен
каждого уровня на карточку
Хранить охлажденными,
защищенным от влаги и
света в оригинальных
упаковках с диссикантом.
Стабилен при +2 - +8 ^С,
дата окончания срока
хранения указана на
упаковке. Убедитесь что
пластиковый коверт
остается запечатанным все
время хранения.
Вещества включенные в контроля и их приблизительная средняя концентрация
Вещество Контроль, низкий уровень Контроль, высокий уровень
Свободный карнитин (СО) 163.3 394.6
Ацетилкарнитин (С2) 41.2 82.9
Пропионилкарнитин (СЗ) 5.5 14.3
Бутирилкарнитин (С4) 4.2 11.3
Гексаноилкарнитин (С 6) 0.8 2.2
Октаноилкарнитин (С 8) 1.2 3.1
Деканоилкарнитин (С 1 0) 0.6 1.5
Лаурилокарнитин (С 12) 2.7 8.0
Миристоилкарнитин (С 14) 1.7 4.8
Пальмитоилкарнитин (С 16) 10.7 30.5
Октадеканоилкарнитин (С 18) 1.9 4.5
Аланин 580 1336
Аспартат 336 836
Цитруллин 189 572
Глютамат 417 903
Глицин 578 1468
Лейцин 578 1466
Метионин 120 369
Фенилаланин 283 827
Тирозин 329 1033
--- стр. 110 ---
13905201-2
Валин 329 770
Номинальные концентрации (среднее и стандартное отклонение) для каждого вещества
даны в приложенном к каждому набору сертификате контроля качества. Конроли
приготовлены из цельной человеческой крови. Перед распылением на бумагу Schleicher &
Schuell HO.903, концентрация гемоглобина около 179гр/л, гематокрит 50-55% , что
примерно соответствует крови новорожденного.
NeoGram АААС 3 бутылки по 473мл
растворитель
+2 - +30 оС до окончания
срока хранения указанного
на упаковке. Защищать от
света и нагревания.
_______
Реагент готов к использованию; содержит ацетонитрил (чистоты HPLC) и воду.
Примечание: Обращаться с особой осторожностью! Использовать под колпаком
защищающим от химических паров. При работе необходимо носить подходящую
защитную одежду, перчатки и защиту для глаз. Легко воспламеним. Вреден при
вдыхании, контакте с кожей и проглатывании. Раздражает глаза. При случайном
попадании в глаза немедленно сполосните больщим количеством воды и обратитесь
к врачу. Не выливать в водопровод.
Неограм АААС раствор для экстракции 1 бут. 237 мл.
Неограм АААС раствор для реконституции 1 бут. 180 мл.
3-х нормальная соляная кислота в н-бутаноле 2 бут. по 100 мл.
Микропланщеты непокрытые, 96-ти
луночные
40 шт.
Алюминиевая фольга для покрытия планщет 20 листов
Адгезивное покрытие для планшет 20 листов
Запаивающая пленка 20 шт.
Требуемые материалы не включенные в набор.
Набор NeoGram АААС является частью полного набора реагентов и инструментов для
неонатального скрининга. Он включает в себя следующие компоненты, доступные через
PerkinElmer Life andAnalytical Sciences или его дистрибьютеров;
1. Масс спетрометр Wallac MS^ (н.п. 1445-001)
2. Компьютерная программа NeoGram
3. Ваккумный дегазатор PerkinElmer серия 200 (н.п.MS-1110)
4. Автосемплер PerkinElmer серия 200 (n.n.MS-1050) или Gilson 215 (н.п.М8-1250)
5. Микронасос PerkinElmer серия 200 (н.п. MS-1030)
6. Концентратор для плашек с образцами.
7. Автоматический пробойник Wallac DBS (н.п. 1296-071) или Wallac MultiPuncher'^^ ^
(н.п. 1296-081) или ручной пробойник для вырезания дисков диаметром 3.2мм (1/8 дюйма)
из фильтровальной бумаги.
8. Thermo iEMS инкубатор шейкер (н.п. 1296-008 или н.п. 1296-009)
9. Abgene заклеиватель плашек (110 вольт н.п. MS-2500 или 240 вольт MS-2501)
Дополнительно для работы системы необходимы:
^ MultiPuncher - торговая марка PerkinElmer, inc.
--- стр. 111 ---
- Ручной или автоматический 8 канальный дозатор, но объемы ЗО-ЗООмкл, или
автосемплер Apricot Sample Processor (н.п. MS-550XD)
- Наконечники для пипеток
- Пипетки или градуированные циллиндры для измерения милилитровых объемов
реагентов.
- Емкости для реагентов (например емкости для растворов фирмы Labcor Products, inc.)
- Колпак защищающий от химических испарений.
- Источник сжатого воздуха для высушивания плашек (в отсутствии сжатого воздуха
могут быть использованы циллиндры сосжатым азотом)
- Бумажные карточки для образцов (использовать бумагу одобренную FDA).
Отбор и манипуляции с образцами.
Капли крови из прокола в пятке новорожденного должны быть перемещены
непосредственно на фильтровальную бумагу.
Программы неонатального скрининга отличаются одна от другой по типам требуемых
образцов. В США реккомендуется капля крови диаметром 12.7мм (1/2 дюйма), собранная
через прокол в пятке и перенесенная на фильтровальную бумагу. Мы реккомендуем
использовать фильировальную бумагу одобренную FDA для сбора образцов.
Анализы основанные на использовании в качестве образцов высушенных капель крови,
требуют опытного отбора, манипуляции и транспортировки образцов (7).
Техника отбора образцов детально описана в документе NCCLS (Национальный Комитет
по Клиническим Лабораторным Стандартам) под номером LA4-A3 ( 8).
- Очистить кожу на пятке новорожденного тампоном смоченном в спирте и дать ей
подсохнуть.
- Проколоть кожу стерильным ланцетом (или автоматическим устройством). Прокол
глубже 2х миллиметров может вызвать повреждение кости новорожденного.
- Стереть первую каплю крови. Аккуратно коснуться фильтровальной бумагой большой
капли крови и дать крови промочить фильтровальную бумагу насквозь в один прием.
Пятна крови должен быть больше диаметра круга напечатанного на бумаге.
Проверьте обе стороны бумаги чтобы убедиться что кровь промочила её насквозь.
«Доение» или сжимание прокола может вызвать гемолиз образца или подмешивание
тканевой жидкости к образцу. Не наслаивайте последовательно капли крови на бумагу,
так как это вызывает спекание.
- Высушивайте образцы на воздухе в течении как минимум Зх часов при комнатной
температуре. Не помещайте под прямой свет.
- Убедитесь что в карточку приложенную к образцу занесена необходимая информация
которая включает имя, адресе, идентификационный номер новорожденного; название и
адрес больницы; имя, адрес и телефон врача который должен быть извещен.
Запишите время и дату рождения ребенка, а также время и дату сборки образца. Запишите
был ли новорожденный недоношенным или родился позднее срока; Запишите вес ребенка
при рождении и отметьте был ли он одним из близнецов.
10 13905201-2
--- стр. 112 ---
-Поместите каждый образец в отдельный бумажный конверт и доставте его в лабораторию
в течении 24 часов после сбора.
Образцы можно хранить при комнатной температуре (+20 - +25°С) или охлажденными (+2
- +8°С) в течении 21 дня.
Предупреждения и предосторожности.
Использовать только для диагностики in vitro.
Анализы должны проводится адекватно обученным персоналом
Все оборудование должно обслуживаться квалифицированными специалистами
Настоящий набор содержит реагенты, изготовленные из компонентов человеческой крови.
Исходные материалы давали отрицательный результат на наличие поверхностных
антигенов гепатита Б, антител 1 и 2 анти-гепатита С и анти-ВИЧ и в иммуноанализе. Тем
не менее, при обращении с производными крови следует соблюдать все рекомендуемые
меры предосторожности. Вы можете ознакомиться с ними в публикации Департамента
Здоровья и Сферы Услуг США «Биобезопасность в микробиологических и
биомедицинских лабораториях» или в любых иных местных или национальных
документах, определяющих такие меры.
Обращайтесь со всеми образцами как с потенциально инфекционными.
Ацетонитрил содержащийся в растворителе (NeoGram АААС Flow Solvent), растворе для
реконституции (NeoGram reconstitution solution) легко воспламеним. Вреден при
вдыхании, при контакте с кожей и при проглатывании. В случае контакта с кожей
немедленно промойте больщ количеством воды и обратитесь к врачу. Не выливайте в
канализацию.
Метанол содержащийся в растворе для экстракции (NeoGram АААС Extraction Solution)
легко воспламеним. Токсичен: имеется опастность очень тяжелых необратимых
поражений при вдыхании, контакте с кожей и проглатывании. Обратитесь к доктору
немедленно в случае контакта, аварии или если вы плохо себя чувствуете после работы с
данным реактивом. Обратитесь к доктору немедленно (покажите этикетку если
возможно). Не выливайте в канализацию.
- Зх нормальная НС1 в п-бутаноле едкая жидкость, вызывает тяжелые ожоги. Раствор
легко воспламеним; испаряясь может вызвать сонливость, слабость. При работе носите
специальную защитную одежду, перчатки, защиту глаз/лица. В случае контакта с глазами
немедленно промойте их больщим количеством воды и обратитесь к врачу. В случае
аварии или если вы чувствуете нездоровье - немедленно обратитесь к врачу (возьмите
этикетку если можно)
Следуйте местным инструкциям по обращению и утилизации опастных отходов.
Процедура анализа
1. Подготовка внутренних стандартов.
а) Добавьте 1 мл экстракционного раствора NeoGram (NeoGram АААС extraction
solution) в пробирку с лиофилизованными стандартами аминокислот. Добейтесь их
полного растворения (это может занять до 2х часов). Раствор стабилен в течении 30
дней при температуре +2 - + 8°С.
1 1 13905201-2
--- стр. 113 ---
12 13905201-2
б) Добавьте 1 мл экстракционного раствора NeoGram (NeoGram АААС extraction
solution) в пробирку с высушенными стандартами ацилкарнитинов. Этот раствор
стабилен в течении 30 дней при температуре +2 - + 8^С.
в) Смешайте одинаковое количество растворов внутренних стандартов
(полученных в пунктах а и б), затем разведите их экстракционным раствором
NeoGram 1:200 (NeoGram АААС extraction solution) В таблице ниже даны
несколько примеров такого разведения. Этот раствор будет экстракционным
раствором для ежедневной работы. Он содержит внутренние стандарты
аминокислот и ацилкарнитинов. Срок хранения раствора 24часа. Его
необходимо готовить ежедневно. Хранить предпочтительно при температуре
+2 - +8” С в защищенном от света месте.
Количество
плашек
АК внутренний
стандарт (мкл)
АцК внутренний
стандарт (мкл)
Экстракционный
раствор (мл)
Конечный
объем (мл)
1 50 50 9.9 10
100 100 19.8 20
150 150 29.7 30
200 200 39.6 40
250 250 49.5 50
10 500 500 99.0 100
20 1000 1000 198 200
2. Вырежте диск из фильтровальной бумаги содержащий высушенные образцы крови.
Используя автоматический или ручной вырезатель. в ячейки с V-образным дном
предоставленных обрезанных чистых микроплашек. Диаметр дисков должен быть
приблизительно 3.2мм (1/8 дюйма). В одну ячейку можно добавить только один диск,
Реккомендуется использовать первые 2-4 ячейки каждой плашки как бланковые
(добавлять только ежедневным рабочий экстракционный раствор, содержащий
внутренние стандарты аминокислот и ацилкарнитинов).
3. Используя мультиканальный пиппетор и обратное пиппетирование добавьте 90 мкл
дневным рабочим экстракционный раствор к каждой ячейке содержащей диск из
фильтровальной бумаги. Закройте плашку липучим покрытием для микроплашек убедясь
что хорошо закрыто чтобы минимизировать испарение.
4. Немедленно после закрытия поместите плашку в инкубатор/шейкер при +30“С на 30
минут. (Плашки можно встряхивать на скоростях от 650 до 750 об/мин.
5. Уберите плашку из инкубатора/шейкера и удалите покрытие с плашки. Переместите по
бОмкл раствора в жароустойчивую микроплашку фирмы Nunc с дном V-образной формы.
6. Дайте жидкости в образцах полностью испарится.
7. Используя технику обратного пиппетирования налейте 50мкл 3 нормальной соляной
кислоты в п-бутакноле в каждую ячейку (жароустойчивой микроплашки фирмы Nunc с
дном V-образной формы).
8. Закройте плашку пленкой, которая запаяет ее при разогреве; инкубируйте ЗОмин при
+60Т.
9. Снимите защитную пленку и дайте жидкости в образцах полностью испарится.
10. Используя технику обратного пиппетирования добавте 75мкл раствора для
реконституции (NeoGram reconstitution solution) в каждую ячейку в микроплашке.
Закройте плашку алюминиевой фольгой, встряхивайте ее в течении 10 минут при +2ТС
(плашки можно встряхивать на скоростях от 400 до 750 об/мин)
11. Поместите плашку с образцамив автосемплер.
12. Чтобы приступить к анализу запустите программу NeoGram, создайте рабочие листы,
и выберите подходящий метод получения данных. За подробной информацией
обращайтесь к инструкции по использованию программы.
--- стр. 114 ---
Примечание:
- Во время установки прибора, квалифицированный персонал высоту спрея для вашего
отдельного инструмента. Эта оптимальная позиция будет обозначена местоположение
посещение отчете. Убедитесь что вы настроили высоту до оптимальной позиции перед
тем как начать анализ.
- Используйте только те концентрации внутренних стандартов (радиоактивно меченных
аминокислот, свободного карнитина и ацилкарнитинов) которые указаны в сертификате
контроля качества приложенном к каждому из наборов.
- Служебные файлы сбора данных должны изменяться только квалифицированным
персоналом.
Использование штрихкодовых наклеек
Наклейки со штрихкодами прилагаемые к этому набору предназначены для того чтобы
плашки могли быть распознаны прибором, и связаны с соответствующим рабочим листом
в программе. Этикетка со штрихкодом может быть помещена на любую боковую
поверхность плашки.
Примечания по процедуре.
1. Полное понимание того что написано в этой инструкции необходимо для успешного
использования набора NeoGram АААС. Реагенты поставляемые с набором предназначены
для использования как единое целое. Не смешивайте идентичные реагенты из наборов с
разными номерами партий. Не используйте реагенты после окончания срока хранения
указанного на этикетке набора.
2. Адгезивное покрытие микроплашки используемое на этапе экстракции и пленка
используемая на этапе получения производных должны покрывать все ячейки с
реагентами целиком, что бы снизить до минимума испарение.
3. Алюминивая фольга используемая для закрытия микроплашки должна плотно
прилегать к поверхности плашки и обернута вокруг всех сторон чтобы минимизировать
испарение.
4. Используйте обратное пиппетирование для добавления растворов реагентов в ячейки
для анализа (соляной кислоты в бутаноле и раствор для реконституции ). Обратное
пиппетирование в целом более точно при работе с малыми объемами.
5. Использование растворов, однажды вылитых, не реккомендуется.
6. Проверте выдавился ли диск в ячейку.
Подсчет результатов
Система анализа NeoGram АААС включает в себя программу для подсчета концентрации
аминокислот, карнитина и всех видов ацилкарнитинов (насыщенных, ненасыщенных,
гидроксилированных и дикарбоксилированных), а также соотношений концентраций этих
веществ. Эти значения вычисляются путем сравнения измеренных интенсивностей
анализируемых веществ с интенсивностями внутренных стандартов (находящиехс в
экстракционном растворе для ежедневной работы). Результаты измерений выдаются ввиде
распечаток этих значений (см. Инструкцию по использованию программы NeoGram).
Контроль качества
Контрольные образцы крови содержащие верхний и нижний уровень концентраций
исследуемых веществ должны присутсвовать в двух экземплярах на каждой плашке.
Средние значение и стандартное отклонение анализируемых веществ в каждом из
1 3 13905201-2
--- стр. 115 ---
контролей, указаны в прилагаемом сертификате контроля качества. В добавок ко
включенным внутренним контролям, хорошо использовать измерять образцы внешнего
контроля - они помогут объединить результаты измерений полученные с использованием
наборов разных номеров партий. Мы также реккомендуем использование внешних схемах
оценки качества.
Примечание: Средние значения контролей получены путем многократного их измерения
с использованием набора NeoGram АААС. Эти значения являются средним от всех
измерений.
Ограничения процедуры
Как и любой другой тест in-vitro, информация, полученная при использовании набора
NeoGram АААС должна интерпретироваться совместно с данными, полученными в
других медицинских исследованиях. Результаты должны быть интерпретироваться
совместно с другой клинической информацией доступной врачу. Данная диагностическая
процедура должна быть использована для подтверждения предположительно
повышенных профилей концентрации аминокислот и ацилкарнитинов.
Условия, вызывающие получение аномальных результатов анализа:
- Анализируемое пятно не равномерно насыщено кровью
- Анализируемые пятна вырезаны слишком близко к кровяным пятнам.
- Неправильно собранные или высушенные образцы
- Неэлюированные кровяные пятна, это связано с порчей образца вызванной
нагреванием и влажностью.
- Загрязнение фильтровальной бумаги или образца фекальными массами.
Такие переменные как гематокрит, недоношенность, или возраст новорожденного могут
повлиять на интерпретацию результатов.
Неполное бутилирование ацилкарнитинов с соотношением mJz в пределах от 260 (С 6) до
428.2 (С 18) может интерферировать с определением бутилированных ацилкарнитинов с
меньшим размером цепей (С2-С14).Избыток Зх нормальной соляной кислоты в бутаноле
используемый в этом методе минимизирует этот эффект.
Дибутилированный глютамат и бутилированный С2 имеют одно и тоже соотношение m/z
(260). Во время активации столкновением, оба дают йон фрагмент с m/z 85. Таким
образом а режиме «предшественника йона 85», используемом при анализе
ацилкарнитинов имеется потенциальная возможность интерференции с глютамином при
подсчете С2. Однако эффект глютамата на результаты измерений С2 более всего значим
(снаружи диапазона 2 СД) при концентрациях глютамата более чем 204 мкмоль/литр (3
мг/дл) в крови. Таким образом в нормальной ситуации уровень глютамата в крови не
превышает 204 мкмоль/литр и следовательно не ожидается значительной
интерференции.Сообщалось что пивалиевая кислота (Pivalic Acid, антибиотик, который
мог приниматься во время беременности матерью или назначаться младенцу) является
предшественником пивалилкарнитина. Пивалилкарнитин является изомером
изовалерилкарнитина (диагностического маркера Isovaleric academia IVА) и
следовательно присутствие повышенного пивалилкарнитина у новорожденного который
принимал пивалиевую кислоту может вызвать ложноположительный результат на IVА.
Далее см. Секцию «Примечания по процедуре анализа»
Ожидаемые значения и интерпретация результатов.
Каждая лаборатория должна провести предварительные исследования чтобы определить
распределение концентраций каждого из веществ в их собственной субпопуляции. Из этих
14 13905201-2
--- стр. 116 ---
распределений должны быть определены значения средних и отсечек . Значения отсечек
должны быть сравнены с опубликованными данными, и в тоже время детально
определены исходя из используемой методологии и популяции пациентов. Значения
отсечек для определения ненормальных концентраций каждого вещества должны быть
установлены с использованием статистических измерений (например распределений,
средних и стандартных отклонений) при консультации со специалистами по
метаболическим нарушениям. Подтверждение предполагаемых ненормальных
концентрационных профилей аминокислот и ацилкарнитинов должны быть основаны на
предопределенных значениях отсечек, полученных из предварительных исследований в
которых измерено не менее 5000 образцов с помощью набора NeoGram АААС. С
увеличением числа образцов и подтверждений предположительно позитивных
результатов, полученных в данной лаборатории, реккомендуется чтобы эти данный были
использованы для пересмотра значений отсечек на регулярной основе.
Лаборатории могут установить два значения отсечек для определения ненормальных
результатов. Одно значение - будет концентраций при которой подтверждаются
необходимо немедленное отправление результатов в клинику, для принятия соот
немедленное направление команды клинической управления чтобы следовать.
Второе значение будет пограничной концентрацией при которой требуется взятие новых
образцов и проведение повторных тестов (3).
В дополнении к определению концентраций исследуемых веществ, лаборатории должны
также анализировать соотношения между их концентрациями, чтобы лучше отображать
аминокислотные и ацилкарнитиновые профили для каждого образца.
Результаты анализов на ацилкарнитины могут варьировать в зависимости от возраста
младенца и времени взятия анализов; это связано с тем что концентрация ацилкарнитинов
существенно уменьшается со временем.
Примечания:
- Эта информация предоставлена в качестве реккомендации. Настоятельно
реккомендуется каждой лаборатории провести предварительные исследования чтобы
определить частоту распределений концентраций и значения отсечек для своих
пациентов,
- Подтверждение диагностической тестовой процедурой может быть выполнено для
образцов с предполагаемыми ненормальными значение профилей концентраций.
- Следуйте местным требованиям по слежению за тестированием.
Предположительно отрицательные:
Каждая лаборатория должна также установить нижнее значение отсечки.
Аналитические рабочие характеристики^
Линейность
Линейность анализа была определена тестированием образцов (высушенные пятна крови)
содержащих различные концентрации аминокислот и ацилкарнитинов. Были
приготовлены образцы (высушенные на фильтровальной бумаге пятна крови) с высокими
концентрациями аминокислот и ацилкарнитинов. Эти пятна были вырезанны из бумаги и
15 13905201-2
‘‘ Исследования проведены PerkinElm er L ife and Analytical Sciences, Нортон О Н С Ш А , использовалась
бумага S& S №903
--- стр. 117 ---
16 13905201-2
экстрагированы с помощью раствора для экстракции. Были сделаны последовательные 2х
кратные разведения этих экстрактов с помощью нулевого экстракционного раствора.
Чистый экстракционный раствор был использован в качестве нулевой концентрациии. Для
каждого анализируемого вещества средняя измеренная концентрация была отложена на
графике напротив теоретически рассчитанного количеством добавленного вещества.
Затем был выполнен анализ линейной регрессии. Результаты этих построений
представлены в таблицах 1 и 2.
Пределы СО С2 с з С4 C 5 D C С6 С8 СЮ С12 С14 С16 С18
Верхний 1062.5 127.5 57.18 27.03 2.50 10.03 8.22 5.4 15.97 24.5 61.4 10.25
Нижний 2.13 0.13 0.09 0.02 0.16 0.01 0.02 0.01 0.04 0.01 0.04 0.01
0.9986 0.9954 0,9990 0.9985 0.9964 0,9971 0.9984 0.9971 0,9988 0.9989 0.9969 0.9982
Таблица 2. Верхние и нижние пределы линейности (мкмоль/литр) Аминокислоты
Пределы Ала A pr А сп Цит Глю Гли Лей Мет Орн Фен Тир Вал
Верхний 2397.5 404.3 595.0 1527.5 1907.5 3805.0 1950.0 913.3 978.0 1665.5 2787.5 1840.0
Нижний 4.92 0.31 1.54 0.53 1.11 9.81 9.06 8.03 1.60 0.75 1.42 114.8
0.9980 0.9992 0.9994 0.9954 0.9985 0.9962 0.9929 0.9988 0.9996 0.9974 0.9986 0.9957
Функциональная чувствительность
Нижние пределы линейности из таблиц 1 и 2 представляют собой функциональную
чувствительность анализа для каждого из анализируемых веществ.
Для того чтобы определить являются ли полученные значения функциональной
чувствительности подходящими для использования при скрининге новорожденнных,
представленные значения были сравнены с средними эндогенными уровнями веществ
определенными при обследовании 5000 нормальных новорожденных (Таблицы 3 и 4). Все
уровни функциональной чувствительности находятся ниже нормальных эндогенных
концентраций исследуемых веществ, что означает что эти пределы адекватны для
использования при скрининге уровня аминокислот и ацилкарнитинов в крови
новорожденных.
Таблица 3 Сравнение функциональной чувствительности и нормальной эндогенной
Пределы СО С2 СЗ С4 C5DC С 6 С8 СЮ С12 С14 С16 С18
Функциональная
чувствительность 2.13 0.13 0.09 0.02 0.16 0.01 0.02 0.01 0.04 0.01 0.04 0.01
Эндогенная
концентрация 38.66 21.0 2.46 0.50 0.10 0.19 0.19 0.14 0.31 0.32 3.59 0.97
--- стр. 124 ---
G O
Глюкоза-6 фосфатдегидрогеназа (Г6ФД) -Неонатал
Neonatal G6PD
Флюорометрический анализ с разрешением по времени для количественного
определения Глюкозо-6 фосфодиэстераза в сухом пятне крови
Производитель - W A L L A C О у, Ф инляндия
Для диагностического применения in vitro.
ДЛЯ П РИ М ЕН ЕН И Я В IN V IT R O Д И А ГН О С Т И К Е
960 О П РЕД ЕЛ ЕН И Й
Н А ЗН А Ч ЕН И Е:
Набор диагностических реактивов для скрининга новорожденных на наследственные
болезни обмена. Используется для количественного измерения концентрации Г6ФД в сухих
пятнах крови на фильтровальной бумаге.
С О С Т А В НАБО РА:
1.Калибраторы; 1 карточка фильтровальной бумаги с пятнами высушенной крови .
2. К онтрол и ; 1 карточка фильтровальной бумаги с пятнами высушенной крови
3.Субстрат: 10 фл., лиофил.
4.Восстанавливающий буфер: 1 бут,, 118 м л
б.М едный реагент: 1 бут., 240 м л
б.М икропланш еты непокрытые, 96-ти луночные: 10 ш т.
П РИ Н Ц И П М Е Т О Д А :
Глюкоза-6 фосфатдегидрогеназа (Г6Ф Д ) -Неонатал определение основано на твердофазном, дву-сайтовом
флюороиммунометрическом определении с разрешением по времени на основе прямого сэндвич методе при
котором два антитела (кроличьи и мышиные) направлены против двух различных антигенных детерминантах на
молекуле Г6Ф Д . Стандарты, контроли и тестируемые образцы содержащие Г6Ф Д одноврменно реагируют и с
иммобилизированными моноклональными антителами, направленными против специфических антигенных
сайтов на молекуле Г6Ф Д и меченными европием вторыми моноклональными антителами (направленными
против разных антигенных детерминантов) в инкубационном ГбФ Д буфере. Буфер элюирует ГбФД из
высушенных пятен крови. Для выполнения определения требуется только одна инкубационная ступень.
Усиливающий раствор диссоциирует ионы европия из меченого антигена в раствор, где они
формируют высокофлюоресцентные хелатные комплексы с компонентами усиливающего раствора.
Флюоресценция каждой лунки в последующем измеряется. Флюоресцентный сигнал каждого образца прямо
пропорционален количеству ГбФ Д в образце.
К аж ды й Глюкоза-6 фосфатдегидрогеназа (ГбФ Д ) -Неонатал набор содержит реагентов
необходимых для 960 определений.
Срок годности набора указан на внешней стороне коробки. Хранение при +2+8 С .
М А Т Е Р И А Л Ы Н ЕО БХО ДИ М Ы Е, Н О Н Е П О С ТА В Л Я ЕМ Ы Е
С Н А Б О РО М :
--- стр. 125 ---
Данный набор является частью комплексной системы иммунодиагностических реагентов и
оборудования. ДЕЛ Ф И Я система требует следующие компоненты, которые могут быть поставлены или
от W A L L A C 0Y или от его дистрибьютеров:
1 . Флюорометр с временным разрешением плюс принтер и внешний компьютер.
2. Автоматический вошер - Д ЕЛ Ф И Я плейтвошер (Кат.№1296-024 или1296-026)
3. Автоматический ш ейкер-ДЕЛФ И Я плейтшейкер(Кат.№1296-001 или 1296-003)
4. П ипетка для разливки Д ЕЛ Ф И Я буфера и м етки - ЭППЕНДОРФ М У Л Ь Т И П И П Е Т К А (1296-014) с 5 мл
Комби наконечниками (1296-016) или в качестве альтернативы Д ЕЛ Ф И Я плейт диспенсер с Д Е Л Ф И Я
диспенсер ю нит (1296-041 или 1296-043).
5. П ипетка для разливки Усиливающего раствора - ЭППЕНДОРФ мультипипетка (1296-014) с 5 м л
К омби наконечниками (1296-016) или альтернативно Д Е Л Ф И Я плейт диспенсер (1296-041).
6. Д Е Л Ф И Я растворитель I (Кат.№ В127-100, В128-100).
В дополнении к ДЕЛ Ф И Я системе необходимо следующее:
-дозирующая пипетка для разливки микролитровых объемов
- пипетки для разливки миллитровых объемов Н Э буфера требуемого для приготовления
раствора метки и антител
-дистиллированная вода
СБОР ОБРАЗЦОВ И Х РА Н ЕН И Е:
Получение крови посредством венопункции, образование сгустка и выделение сы воротки
посредством центрифугирования. Плазма, полученна с использованием ЭДТА и цитрата натрия не
может быть использована, вследствии воздействия на хелатирующий европий. Однако может
применяться плазма крови полученная с гепарином. Гемолитическая (гемоглобин>2г/Л), липемическая
(>2 г /Л ) и иктерическая (билирубин>30 мкмоль/Л ) сыворотки использовать не рекомендуется. Если
концентрация превышает 50 нмоль/Л следует развести сыворотки или нормальной женской
сы вороткой или Д ЕЛ Ф И Я дилюентом I .
Образцы могут быть сохранены 12 часов п р и комнатной температуре или 3 дня при +2+8С.
Для более длительного периода неразведенные образцы могут храниться при -20 С . Избегайте
повторного замораживания размораживания.
М Е Р Ы ПРЕДОСТОРОЖ НОСТИ:
Для диагностики и н витро.
Следует соблюдать правила предостороженности С Ш А №CDC 88-8395 или местные правила.
М ожно считать все образцы крови пациентов к а к потенциально инфицированные.
Реагенты содержат азид натрия в качестве консерванта. Азид натрия может
взаимодействовать с металлическими поверхностями с образованием азидов металлов. Для
предотвращения образования азидов металлов необходимо промыть большим количеством воды.
Для дезинфекции всех сливных реагентов пользуйтесь правилами местных контроллирующ их
организаций.
Флюоресценция измеряется на флюорометре с временным разрешением. Выберите номер
программы 50 для автоматического измерения и подсчета результатов. Сверьте параметры
гр уп п ы для программы N 950 и если необходимо произведите коррекцию в соответствии со следующим
(см. описание к флюрометру для проведения редакции параметров считы вания):
ASSAY ТУРЕ F IA
тип определения Ф И А
F IT T IN G M ETH O D SPLINE SM OOTHED
метод обработки метод “ сглаживания”
X-A X IS L O G A R IT H M IC
х-ось логарифмическая
--- стр. 126 ---
Y -A X IS В/Вмакс
у-ось в/в макс
B L A N K S О
бланки О
STANDARDS 6
стандарты 6
STANDARD REPLICATES 2 Убедитесь, чтобы концентрация
стандарты в дупликате 2 стандартов, указанная на флаконах
STANDARD CONC А совпадала с задаваемой. Если не
стандарты конц. А совпадает, введите новые.
STANDARD CONC В
стандарты конц. В
STANDARD CONC С
стандарты конц. С
STANDARD CONC D
стандарты конц. Д
STANDARD CONC Е
стандарты конц. Е
STANDARD CONC F
стандарты конц. Ф
UNK NO W N REPLICATES 2
неизвестные образцы в дубле 2
О СО БЕН Н О СТИ О П РЕДЕЛЕН И Я:
1 . Отношение к этому набору к а к к целому необходимо для успешного использования Д Е Л Ф И Я
наборов. Реагенты в этом наборе являются комплексны ми компонентами. Не смешивайте идентичные
реагенты из различных лотов. Не используйте реагенты после срока годности, указанной на флаконе.
2. Реагенты должны быть доведены до комнатной температуры (+20+25С) до приготовления
различных растворов. Замороженные образцы должны быть нагреты до комнатной температуры п р и
медленном и осторожном перемешивании. Не используйте вортекс или смешанные образцы
пациентов.
3. П ри промывке стрипов следите, чтобы все стрипы были заполнены полностью и одинаково
до верхнего уровня к а к показано на картинке. После промы вки стрипов, проверьте, что стрипы сухие.
Если что-либо осталось в лунках, то необходимо перевернуть планшету и встряхнуть на
фильтровальную бумагу.
Аспирирующее/промывочное оборудование не должно находиться заполненным с
промы вочны м раствором длительный период времени, поскольку промывочные и гл ы могут быть
закупорены и трудно проходимы для жидкости. В конце рабочего дня аспирировать дистиллированную
воду в аспирирующую/промывочную систему. Промывочное устройство должно быть регулярно
промываться раствором NaCL (ЗО г/Л ), а затем дистиллированной водой и 50% этанолом и в конце
промы то дистиллированной водой.
4. Для избежания примеси европия и к а к результат высокого флюресцентного фона высокие
требования предъявляются к процедуре раскапывания и промы вки. Поэтому необычайно важно
использовать рекомендуемые и поставляемые вместе с Д Е Л Ф И Я пипетки.
Усиливающий раствор должен бы ть раскапан только с использованием рекомендуемой
ЭП П ЕН ДО РФ мультипипеткой, и при этом первый объем сбрасывается для полного заполнения. Тот
же тип Комбинаконечника не может быть использован для раскапывания любого другого реагента.
После работы ЭППЕНДОРФ мультипипетка помещается на ш татив с наконечником.
П р и использовании ДЕЛ Ф И Я плейт диспенсера и ДЕЛ Ф И Я диспенсера ю нита ознакомьтесь с
описанием.
П О ДС Ч ЕТ РЕЗУЛ ЬТАТО В:
Д Е Л Ф И Я система включает программу для обработки результатов и получения данных в виде
стандартной кривой, концентрации неизвестных пациентов и т.д. (для детали см. описание к
флюорометру или к программе М ультикалк).
--- стр. 130 ---
70 мкмоль/л крови (1.3 мг/дл)
380 мкмоль/л крови (6.8 мг/дл)
670 мкмоль/л крови (12 мг/дл)
1220 мкмоль/л крови (22 мг/дл)
А
В
С
D
лота и
Е 1720 мкмоль/л крови (31 мг/дл)
прилагаемом к
F 2220 мкмоль/л крови (40 мг/дл) набору.
стабилен в пределах
указанного срока годности.
Точные концентрации ОГ зависят от номера
указаны в контрольном сертификате
О Г контроля
(приблизит, значения)
Норма
190 мкмоль/л (3.5 мг/дл)
Патология
690 мкмоль/л (12.5 мг/дл)
Фильтровальный Хранить в морозильнике,
лист (Шляйхер&Шуль 903) Защищать от влаги и света,
с 5 пятнами высушенной крови Убедиться. что
пластиковый
конверт закрыт и содержит
осушитель. При +2+8С
стабилен в пределах
указанного срока годности.
Точные концентрации ОГ зависят от номера лота и
указаны в контрольном сертификате прилагаемом к
набору.
Коффициент пересчета; 1 мг/дл = 55.5 мкмоль/л.
Калибраторы и контроли приготовлены из человеческой крови с добавлением ProClin 300 в
качестве консервантов. Концентрация гемоглобина составляет около 170 г/л до нанесения на бумагу
Шляйхер&Шуль №903. Гематокрит в пределах 50-55%, что эквивалентно таковому у
новорожденного.
_________________________________________________________________
Цинк сульфатный реагент
срока
флаконе
1 флакон, 30 мл
лучей
'*’2'|'8С до окончания
годности указанной на
Избегать нагревания и
прямых солнечных
Готовый для использования реагент содержащий < 25% сульфат цннжж.
Внимание: Реагент токсичен к водным организмам и может вызывать длительные
обратимые эффекты на водное окружение. Не высушивать до конца емкость с
реагентом. _______ ____________ _________________________________
Галактозе оксидазный
реагент
флаконе
10 флаковов, ляофиллизнроваавые+2+SC до окончания срока
годности указанной на
Защищать от света и тепла.
Реагент содержит < 0.05 сульфата меди, сахарозу, фосфат натрия, 47 Ед/ыл галастоэо оксндазу от
Dactylium dendroides, 375 Ед/мл пероксидазу хрена, 6.2 Ел/мл щелочной фосфатазы от быка и 213
Ед/мл супероксид дисмугазы из эритрошпов быка. _________ _______________
6 Г буфер для разведения 1 флакон, 240 мл
флаконе
-•‘2+8С до окончания срока
годности указанной на
--- стр. 131 ---
Готовый для использования ТРИС (гидроксиметил) аминометан, 3-(р‘Гидроксифенил)
Стоп смесъ 1 флакон, 240 мл +2+8С до окончания срока
годности указанной на флаконе
Готовая для использования смесь содержит глицин и <0.01% ОхаЬап А.
Микропланшеты белые
(открытые, 96 лунок) 10 планшет +2+25 С
Штрихкодовые метки для планшет 30 шт Штрих коды одинаковые в
пределах одного и того же
лота
Специфические для каждого лота
сертификаты контроля качества 1 лист
МАТЕРИАЛЫ НЕОБХОДИМЫЕ. НО НЕ ПОСТАВЛЯЕМЫЕ
С НАБОРОМ:
Неонатальный ОГ набор является частью комплексной системы иммунодиагностических
реагентов и оборудования для неонатального скрининга. ДЕЛФИЯ система требует
следующие компоненты, которые могут быть поставлены или от PerkinElmer/Wallac Gy или
от его дистрибьютеров:
1. Флюорометр с временным разрешением плюс (ДЕЛФИЯ/ВИКГОР), принтер и внешний
компьютер.
2.. Автоматический шейкер-ДЕЛЬФИЯ плейтшейкер(Кат.№1296-003/004)
3. Автоматический панчер ВАЛЛАК ДБС ПАНЧЕР (1296-071) или ручной панчер для
выбивки бумажных дисков с диаметром около 3 мм.
В дополнении к ДЕЛФИЯ системе необходимо следующее:
- 50 мл из прозрачного стекла или полиэтилена бутыль с завинчивающейся крышкой
- 50 мл коричневая бутыль
- пипетха или градуированный цилиндр для измерения объемов реагентов в мл
- 8 канальная прециссионная пипетка для разливки 30-300 мкл жидкостей или Apricot
Sample Processor модель MS-550XD.
- наконечники к пипетке
* миксер дм перемешивания субстратного реагента
- резервуары для реагентов
- тестируемые образцы крови на фильтровальных бланках
- абсолютный спирт
- деионизированная вода
- одноразовые, чистые, с формой дна лунок U микропланшеты типа NC-2400 или подобное.
СБОР ОБРАЗЦОВ И их ХРАНЕНИЕ:
KjpoBb может быть получена от новоро)кденного при прямом проколе пятки. Уровень
гемоглобина < 200 г/л не оказывает влияние на результат. Статистически значимое влияние
оказывалось, если уровень гемоглобина превышал 250 г/л.
--- стр. 132 ---
Скрининговые профаммы в различных странах различаются в зависимости от того
какой тип образца используется. Кровь при проколе пятки в идеале необходимо забирать
не ранее 24 часов после ро)1здения после первого кормления ребенка, если роды в срок.
Мы рекомендуем использовать фильтровальную бумагу производимую компанией
Шляйхер/Шуль (№903) для сбора образцов крови и бумага должна бьлъ та же самая как и
для пятен стандарта. Метод основанный на образцах представленных на бланках
предъявляет определенные требования к сбору образцов крови, хранению и
транспортировке. Сбор образцов описан детально( NCCLS) в документе комитета по
взятию крови LA4-A3:
протрите кожу спиртом и высушите
проколоть иглой для прокола кожи ребенка ланцетом или автоматическим ланцетом на
глубину примерно 2.0 мм. Прокол глубже чем на 2.0 мм у мх-теньких плодов может
вызвать повреждение кости
удалите первую каплю крови. Нежно промокнуть на ф и.1ьтрова.1ьную бумагу большую
каплю крови, позволяя ей промокнуть насквозь, полностью заполняя отмеченный
кружок на фильтровальном бланке. Проверьте с другой стороны бланка, что кровь
пропиталась насквозь. Не накрывайте полученное пятно крови.
Высушите пятна крови на воздухе в горизонтальной позиш1и по меньшей мере 3 часа
при комнатной температуре, избегайте попадания прямых сатнечных лучей.
Проверьте заполненность всех фаф нужной информацией^ включая имя, адрес, номер
пациента, пол; название и адрес госпиталя; имя, адрес, телефон врача производящий
заполнение граф. Укажите время и дату родов, а также дату и время забора крови.
Укажите был ли ребенок доношенным и если да - то степень недоношенности.Укажите
вес новорожденного, многоплодный или нет.
Помеспгте каждый образец в свой отдельный бумажный конверт и транспортируйте
или перешлнге его в лабораторию в течение 24 часов после взятия.
Галактоза стабильна в течение 1 недели при хранении при +20+25С. Галактозо-1 фосфат стабилен
при +20«25С в течение 4 недель. Если образцы крови будут протестированы через 7 дней и более
после взятия, то рекомендуется хранить их в морозильнике до тестирования. Хранится таким
образом бланки должны в герметичных пакетах с откаченным воздухом.
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ:
Для диагностики ин витро.
Используется в работе персоналом после предварительного обучения.
Набор содержит реагенты произведенные из компонентов человеческой крови.
Источник протестирован на на наличие поверхностного антигена к гепатиту В, анти>
гепатиту С, и анти-ВИЧ I и И. Тем не менее все рекомендации по мерам предосторожности
при работе с производными крови должны быть соблюдены.
Можно считать все образцы крови пациентов как потенциально инфицированные.
Реагенты содержат азид натрия в качестве консерванта. Азид натрия может
взаимодействоваггь с металлическими поверхностями с образованием азидов металлов.
Для предотвращения образования азидов металлов необходимо промыть большим
количеством воды.
Для дезинфекции всех сливных реагентов пользуйтесь правилами местных
контроллирующих организаций.
ПРОТОКОЛ ОПРЕДЕЛЕНИЯ:
Выполните каждое определение в дубле для стандартов и контролей. Стандартная
кривая должна быть использована для каз 1^10й плашки. Тестируемые образцы
определяются по одному. Образцы и реагенты должны быть доведены до комнатной
температуры (-ь20*ь25С) перед использованием.
1. Приготовление реагентов Стабильность после разведения
--- стр. 133 ---
го буфер для разведения 7 дней при
(в коричневом флаконе)
Смешать 1 часть деионизированной воды и одну часть ГО буфера для разведения.
На 1 планшет требуется около 10 мл этой смеси.
Раствор для экстракции 7 дней при '•'20+25С
Держать плотно закрытым
Приготовить Раствор для экстракции смешивая три часта Цинк сульфатного
реагента с двумя частями абсолютного этанола , например 24 мл Цинк
сульфатного реагента смешать с 16 мл абсолютного этанола.
Галактозо оксидазный реагент 60 минут при +20+25С
Растворить Галактозо оксидазный реагент добавляя 9 мл ГО буфера для
разведения в 1 флакон с лиофиллизированным галактозо оксидазным реагентом и
смешать.
Галактозо оксидазный реагент следует растворять не менее чем за 5 минут до
начала использования и использовать в течение 60 минут.
2. Выбить фильтровальные диски, используя автоматические или ручные панчеры в
лунки б^ы х микротитровальных плашек в соответствии с таблицей. Диаметр
выбиваемого диска должен быть около 3.2 мм. Калибраторы и контроли
выбиваются в д ^ л е на каждую плашку.
3. Добавить по 15 мкл раствора для экслрапши в казкдую лунку с фильтровальным
диском. Убедитесь, что диски погружены в раствор для экстракции, с этой целью
можно легко перемешать плашку.
4. Инкубировать при комнатной температуре 30 минут без шейкирования. Не
накрывать
5.
б.
планшет.
Добавить по 80 мкл ГО буфера для разведения в каждую лунку, содержащую
фильтровальный диск. Нежно потрясти плашку. Перенос следует выполнять в течение 5
минут после смешивания.
Перенести 60 мкл содержимого каждой лунки в соответствующую лунку белой плашки.
Следует заменять ияконечннкя для кажлой лунки с целью язбехания ковтаминацвя.
--- стр. 134 ---
7. Добавить по 75 мкл разведенного Гала1сгозного оксидазного реагента в каждую лунку белой
плашки. Избегайте коктакга наконечником поверхносга плашки. Нежно перемешать
содержимое лунок.
8.
Инкубировать при комнатой температуре в течение 60+15 минут без шейкирования. Не
накрывать планшет.
9.
Перенести около 11 мл Стоп Смеси из расчета на 1 планшет в резервуар. Переносимый
объем следует обязательно предварительно замерить во избежании нехватки. Добавить по
100 мкл этой Смеси в каждую лунку. Нежно перемешать содержимое лунок.
10. Измерять флюоресценш 1Ю на анализаторе ВИКТОР модели Д. Начало измерения с
помощью нажатия клавиши START WIZARD, затем выбирается «87 ОАО» из протоколов
на панели <(Neonatal» и задается количество плашек и образцов. Планшеты должны быть
просчитаны в течение 1 часа после добавления Стоп Смеси.
Проверяете протокол в программе Multicalc «87 GAO» или корректируете
необходимо (см. описание к программе Multicalc раздел редакция параметров):
если
ASSAY TYPE IS IFMA
01 DUAL ASSAY
03 MEASURING PARAMETERS
20 X-AXIS (CONCENTRATION)
21 Y-AXIS (RESPONSE)
22 FITTING ALGORITHM
25 STANDARD CURVE
26 STANDARDS ON 2.PLATES
= N0
= Eu
= Lin
= MEAS
= REGR UNWEIGHT LINEAR
= NEW
= NEW
CO Dl N G/стацдарты
2 STD
2 STD
2 STD
2 STD
2 STD
2 STD
1 UNKN/образцы
END
В
= c
D
E
F
(Убедитесь, что коацеягграция
стандартов пишстозы соответствует
указанной в еергтжфвш те качества
к набору. Если вег - введите новые
значения концеятрацвй)
ОСОБЕННОСТИ ОПРЕДЕЛЕНИЯ:
1. Следует понимать что состав набора ГО полностью достаточен для проведения
неонатального скрининга. Все компоненты набора являются составными частями
набора. Не смешивайте идентичные реагенты от наборов различных лотов. Не
используйте реагенты после истечения их срока годности, которая указана на
этикетке.
2. Величина флюоресцентного сигнала меняется в течение времени; однако при
использовании калибраторов в ка)едой плашке, рассчитываемая концентрация
остается постоянной.
--- стр. 135 ---
3. Все реагенты и образцы должны быть доведены до комнстеой температуры до
использования.
4. ИспользутЬф по возможности реверсированное пилетированне на всех стадиях постановки.
Реверсированное пипетирование в общем более точное, когда раскапываются малые
объемы.
5. Проверьте, чтобы все лунки имели диски после процедуры выбивки панчером дисков.
ПОДСЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ:
Компьютерная система включает профамму для обработки результатов и
получения данных в вцде стандартной кривой, концентрации неизвестных пациентов и т.д.
(для подробной информации см. описание к анализатору ВИКТОР или к профамме
Мультикапк). Концентрация галактозо-1-фосфата определяется в величинах галактозных
эквивалентов: 1 ммоль/л галактозо!-фосфата = 1 ммоль/л галактозы = 18.0 мг/дл общей
галактозы.
КАЛИБРОВКА:
Полная стандартная кривая для ка>«^10г0 определения ставится для каждой плашки.
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА:
Контрольные образцы следует использовать для подтверх^^ения стабильности
ежедневных определений. Контрол и определяются также как и неизвестные образцы.
Контроли двух различных уровней используются и включены в наборы. Эти хонтроли
следует ставить в ка;|^;ом определении, если количество определений более чем одна
планшета, то и в каз^дой плашке. Ка)едой лаборатории следует установить свой
собственный концентрационный диапазон. Полученная средняя величина определяемого
контроля должна укладываться в диапазон +2 SD от величин указанных в сертификате
контроля качества. Рекомендуется также использовать свои собственные контроли для
ка)|адой лаборатории в добавлении к контроляи включенным в набор. Тестируемые
образцы дают истинную концентрацию, если контрольные значения в пределах
установленных норм.
Мы также рекомендуем участие лабораторий во внешнем кокфоле качества.
ОГРАНИЧЕНИЯ ПРОЦЕДУРЫ:
Как и для любых других скрининговых тестов ин витро. результаты получаемые с
помощью НЕОНАТАЛ ГАЛАКТОЗА могут быть использованы толыоо для медицинсию(
процедур и данные интерпретируются только совместно с клиничесюши исследованиями.
Диагностические процедуры следует проводить только в качестве подтвер}|эдения
подозреваемого диагноза высокого уровня НЕОНАТАЛ ГАЛАКТОЗА.
Случаи при которых возможно получение аномальных результатов:
- пятна не полностью пропитаны кровью
< пятна выбиты панчером в месте, где имеет место плохая пропитка
- плохо собраны и высушены пятна
- нет злюции образца в буферный раствор, что вызвано либо нагреванием, либо
свертыванием.
- примеси в пятне крови фекалий и др.
--- стр. 136 ---
Образцы крови новорожденных, которые не получают достаточного количества
фудного молока или питательных элементов с лактозой могут дать низкие уровни
галактозы.
Уровень гемоглобина < 200 г/л не оказывает влияние на результат. Имело место только
влияние при повышении уровня гемоглобина выше 250 г/л.
Эндогенная флюоресценция не должна оказывать сильное влияние на основной
источник флюоресценции, потому что в этом случае лунки без бланков могут быть с
либо нормальными либо выше нормы уровнем ГАЛАКТОЗЬЬ
ОЖИДАЕМЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ИНТЕРПРЕТАЦИЯ ;
Определение положительных по уровню ГАЛАКТОЗЫ проб проводится на
основании сравнения получаемых результатов с пороговым уровнем. Результаты могут
зависеть от возраста новорожденного, времени взятия образца крови и от др. условий.
Следует иметь в виду, что значения уровня ГАЛАКТОЗЫ данные в этом разделе носят
рекомендательный характер и каждая лаборатория должна установить свой собственный
рабочий диапазон и пороговый уровень.
Положительные результаты
В качестве примера, уровень в 540 мкмоль/л (9.7 мг/дл) ГАЛАКТОЗЫ или выше
следует считать как положительный для диагностики галактоземии. Этот образец требует
проведения подтверждающей диагностической процедуры. Если в лаборатории возможно
определить уровень галактозо-1-фосфат-ур1адил-трансферазы, то это следует провести. И
в этом случае, если выявляется положительный результат (т.е. дефицит галактозо-1-
фосфат-уридил-трансферазы), то образец считается положительным на галактоземию.
Все последующие процедуры проводятся в соответствии с местными правилами.
ВНИМАНИЕ: Величина порогового уровня была оценена исходя из тестирования 1040
образцов новорожденных в США и 909 - вне США. Величина порогового уровня
рассчитывалась на основании расчета для каэ^дой из фупп обследуемых величин ^ и 95
персентилей. Был установлен пороговый уровень в 470 мкмоль/л (8.4 мг/дп) и это был
наименьший ю пороговых значений для каждой из групп. Величина порога определялась в данном
случае на основании расчета 99 персентилей при использовании непараметрических
статистических методов.
Сомнительная зона
Для снижения количества ложно огтрицзтельных или ложно положительных значений
устанавливается (рассчитывается) сомнительная зона в диапазоне 400-500 мкколь/л или 12-9.1
мг/дл. Этот диапазон рассчитывался как на основании среднего значения в 470 мкмоль/л (8.4 мг/дл)
плюс/минус величина раз^мжа для набора NG-IOOO НЕОНАТАЛ ГАЛАКТОЗА, он составляет от 9
до 14.5%.
Образцы со значением галактозы в диапазоне от 400 до 540 мкмоль/л считаются
сомнительными, т.е. не оггрищтельными и не положительными. Они должны быть повторены как
можно быстрее с помощью ретеста этим же методом либо другим методом например оаенхи
активности галактозо-1-фосфат-урид№1-трансферазы.
При этом, если активность галактозо-1-фосфат-уркаил-трансферазы дает полоткительиый
результат, то этот образец считается положительным на галактоземию. Однако если результат
активности фермента отрицательный и нет проблем с качеством забора о^хазца, то он считается как
отрицательным на галактоземию.
Определение сомнительной зоны
Для расчета границ сомнительной зоны были взяты образщ»! с увеличивающимся уровнем
галактозы от 280 до 560 мкмоль/л. Средняя концентрация была определена при измерении каждого
ю {7 образцов (из этого концентрационного диапазона) в дубле, дважды в день в течение 5 дней.
Затем результаты были представлены в виде диаграммы распределения в зависимости от уровня
галактозы.(представлено на диаграмме).
--- стр. 137 ---
; Сомнительная зона определялась как концентрационный диапазон вблизи порогового
I значения в 470 мкмоль/л. Сомнительная зона позволяла снизить количество ложно'отрихшельных
I или ложно-положительных результатгов.
I
I Отрицательные результаты
Любой образец до начала скрининга с уровнем галактозы ниже, чем 400 мкмоль/л (7.2
мг/дл) следует считать как отрицательный.
Результаты ниже или выше калибровочного диапазона концентрации
Уровни ниже, чем первый калибратор компьютер обозначит как <STD (меньше стандарта).
Такой образец рекомендуется переставить и если и при этом он остается таким же низким, то
содержание галактозы в этом образце следует обозначить как < 70 мкмоль/л(<1.3 мг/дл) и он
считается отрицательным.
Уровни выше верхнего значения калибровки компьютер напечатает как >STD. При этом
истинная концентрация в этих образцах не может быть определена точно, но совершенно
определенно можно сказать, что эти результаты положительны. Точное количественное определение
уровня галактозы в таких образцах следует определить другим методом.
--- стр. 138 ---
Галактозная трансфераза (ГАЛТ)
GAL-Transferase (GALT)
Флюорометрический анализ с разрешением по времени для количественного измерения ГАЛТ в
сухом пятне крови
Производитель - W A L L A C О у, Ф инляндия
Для диагностического применения in vitro.
ДЛЯ П РИ М ЕН ЕН И Я В I» V IT R O Д И А ГН О С Т И К Е
960 О П РЕД ЕЛ ЕН И Й
Н А ЗН А Ч ЕН И Е;
Набор диагностических реактивов для скрининга новорожденных на наследственные болезни
обмена. Используется для количественного измерения концентрации Галактоза-1-фосфат трансферазы
(ГА Л Т ) в сухих пятнах крови на фильтровальной бумаге.
С О С Т А В Н АБО РА:
1. Калибраторы: 1 карточка фильтровальной бумаги с пятнами высушенной крови
2.Контроли; 1 карточка фильтровальной бумаги с пятнами высушенной крови
3. Субстрат: 10 фл., лиофил.
4.Восстанавливающий буфер: 1 бут., 240 мл
5.М икропланш еты непокрытые, 96-ти луночные: 10 ш т.
П РИ Н Ц И П М Е Т О Д А :
Галактозная трансфераза (Г А Л Т ) определение основано на твердофазном, дву-сайтовом
флюороиммунометрическом определении с разрешением по времени на основе прямого сэндвич методе при
котором два антитела (кроличьи и мышиные) направлены против двух различных антигенных детерминантах на
молекуле Г А Л Т . Стандарты, контроли и тестируемые образцы содержащие Г А Л Т одноврменно реагируют и с
иммобилизированными моноклональными антителами, направленными против специфических антигенных
сайтов на молекуле Г А Л Т и меченными европием вторыми моноклональными антителами (направленными
против разных антигенных детерминантов) в инкубационном Г А Л Т буфере. Буфер элюирует Г А Л Т из
высушенных пятен крови. Для выполнения определения требуется только одна инкубационная ступень.
Усиливающий раствор диссоциирует ионы европия из меченого антигена в раствор, где они
формируют высокофлюоресцентные хелатные комплексы с компонентами усиливающего раствора.
Флюоресценция каждой лунки в последующем измеряется. Флюоресцентный сигнал каждого образца прямо
пропорционален количеству Г А Л Т в образце.
К аж ды й Галактозная трансфераза (Г А Л Т ) набор содержит реагентов необходимых для 960
определений.
Срок годности набора указан на внешней стороне коробки. Хранение при +2+8 С .
М А Т Е Р И А Л Ы Н ЕО БХО ДИ М Ы Е, Н О Н Е П О С ТА В Л Я ЕМ Ы Е
С Н А Б О РО М :
Данны й набор является частью комплексной системы иммунодиагностических реагентов и
оборудования. Д ЕЛ Ф И Я система требует следующие компоненты, которые могут быть поставлены или
от W A L L A C 0Y или от его дистрибьютеров:
1. Флюорометр с временным разрешением плюс принтер и внешний компьютер.
2. Автоматический вошер - ДЕЛ Ф И Я плейтвошер (Кат.№1296-024 или1296-026)
--- стр. 139 ---
3. Автоматический ш ейкер-ДЕЛФ ИЯ плейтшейкер(Кат.№1296-001или1296-003)
4. П ипетка для разливки Д ЕЛ Ф И Я буфера и метки - ЭППЕНДОРФ М У Л Ь Т И П И П Е Т К А (1296-014) с 5 м л
Ком би наконечниками (1296-016) или в качестве альтернативы ДЕЛ Ф И Я плейт диспенсер с Д Е Л Ф И Я
диспенсер ю нит (1296-041 или 1296-043).
5. П ипетка для разливки Усиливающего раствора - ЭППЕНДОРФ мультипипетка (1296-014) с 5 м л
Ком би наконечниками (1296-016) или альтернативно Д Е Л Ф И Я плейт диспенсер (1296-041).
6. Д Е Л Ф И Я растворитель I (Кат.№ В127-100, В128-100).
В дополнении к ДЕЛ Ф И Я системе необходимо следующее:
- дозирующая пипетка для разливки микролитровых объемов
- пипетки для разливки миллитровых объемов Н Э буфера требуемого для приготовления
раствора метки и антител
- дистиллированная вода
СБОР ОБРАЗЦОВ И Х РА Н ЕН И Е:
Получение крови посредством венопункции, образование сгустка и выделение сы воротки
посредством центрифугирования. Плазма, получен на с использованием ЭДТА и цитрата натрия не
может быть использована, вследствии воздействия на хелатирующий европий. Однако может
применяться плазма крови полученная с гепарином. Гемолитическая (гемоглобин>2г/Л). липемическая
(>2 г/Л ) и иктерическая (билирубин>30 мкмоль/Л ) сыворотки использовать не рекомендуется. Если
концентрация превышает 50 нмоль/Л следует развести сыворотки или нормальной женской
сывороткой или Д ЕЛ Ф И Я дилюентом 1 .
Образцы могут быть сохранены 12 часов п ри комнатной температуре или 3 дня п р и +2+8С.
Для более длительного периода неразведенные образцы могут храниться при -20 С . Избегайте
повторного замораживания размораживания.
М Е Р Ы ПРЕДОСТОРОЖ НОСТИ:
Для диагностики и н витро.
Следует соблюдать правила предостороженности С Ш А № CDC 88-8395 или местные правила.
М ож но считать все образцы крови пациентов к а к потенциально инфицированные.
Реагенты содержат азид натрия в качестве консерванта. Азид натрия может
взаимодействовать с металлическими поверхностями с образованием азидов металлов. Для
предотвращения образования азидов металлов необходимо промыть большим количеством воды.
Для дезинфекции всех сливных реагентов пользуйтесь правилами местных контроллирующ их
организаций.
Флюоресценция измеряется на флюорометре с временным разрешением. Выберите номер
программы 50 для автоматического измерения и подсчета результатов. Сверьте параметры
гр уп п ы для программы №50 и если необходимо произведите коррекцию в соответствии со следующим
(см. описание к флюрометру для проведения редакции параметров считы вания):
ASSAY TYPE F IA
тип определения Ф И А
F IT T IN G M ETH O D SPLINE SM OOTHED
метод обработки метод "сглаж ивания"
X -A X IS L O G A R IT H M IC
х-ось логарифмическая
Y -A X IS В/Вмакс
у-ось В/Вмакс
BL A N K S О
бланки О
STANDARDS 6
стандарты 6
--- стр. 140 ---
STANDARD REPLICATES 2 Убедитесь, чтобы концентрация
стандарты в дупликате 2 стандартов, указанная на флаконах
STANDARD CONC А совпадала с задаваемой. Если не
стандарты конц. А совпадает, введите новые.
STANDARD CONC В
стандарты конц. В
STANDARD CONC С
стандарты конц. С
STANDARD CONC D
стандарты конц. Д
STANDARD CONC Е
стандарты конц. Е
STANDARD CONC F
стандарты конц. Ф
UNK NOW N REPLICATES 2
неизвестные образцы в дубле 2
О СО БЕН Н О СТИ О П РЕДЕЛЕН И Я:
1 . Отношение к этому набору к а к к целому необходимо для успешного использования Д Е Л Ф И Я
наборов. Реагенты в этом наборе являются комплексными компонентами. Не смешивайте идентичные
реагенты из различных лотов. Не используйте реагенты после срока годности, указанной на флаконе.
2. Реагенты должны быть доведены до комнатной температуры (+20+25С) до приготовления
различных растворов. Замороженные образцы должны быть нагреты до комнатной температуры п р и
медленном и осторожном перемешивании. Не используйте вортекс или смешанные образцы
пациентов.
3. П р и промывке стрипов следите, чтобы все стрипы были заполнены полностью и одинаково
до верхнего уровня к а к показано на картинке. После промы вки стрипов, проверьте, что стрипы сухие.
Если что-либо осталось в лунках, то необходимо перевернуть планшету и встряхнуть на
фильтровальную бумагу.
Аспирирующее/промывочное оборудование не должно находиться заполненным с
промывочным раствором длительный период времени, поскольку промывочные и гл ы могут быть
закупорены и трудно проходимы для жидкости. В конце рабочего дня аспирировать дистиллированную
воду в аспирирующую/промывочную систему. Промывочное устройство должно быть регулярно
промываться раствором NaC L (З О г/Л ), а затем дистиллированной водой и 50% этанолом и в конце
промыто дистиллированной водой.
4. Для избежания примеси европия и к а к результат высокого флюресцентного фона высокие
требования предъявляются к процедуре раскапывания и промы вки. Поэтому необычайно важно
использовать рекомендуемые и поставляемые вместе с Д ЕЛ Ф И Я пипетки.
Усиливающий раствор должен быть раскапан только с использованием рекомендуемой
ЭП П ЕН ДО РФ мультипипеткой, и при этом первый объем сбрасывается для полного заполнения. Тот
же ти п Комбинаконечника не может быть использован для раскапывания любого другого реагента.
После работы ЭППЕНДОРФ мультипипетка помещается на ш татив с наконечником.
П ри использовании Д Е Л Ф И Я плейт диспенсера и Д Е Л Ф И Я диспенсера ю нита ознакомьтесь с
описанием.
П О ДС Ч ЕТ РЕЗУЛ ЬТАТО В:
Д Е Л Ф И Я система включает программу для обработки результатов и получения данных в виде
стандартной кривой, концентрации неизвестных пациентов и т.д. (для детали см. описание к
флюорометру или к программе М ультикалк).
К О Н ТРО Л Ь К А Ч Е С Т В А :
Использование контрольной сы воротки позволяет оценивать качество ежедневных
определений. Рекомендуется, чтобы каждая лаборатория имела свой сывороточный п ул на различных
уровнях концентраций, или альтернативно использовала коммерческие контроли., например,
Л И П О Ч Е К . Высокие и низкие контроли должны быть использованы в каждом определении; если
--- стр. 143 ---
Делфия Гормон роста (Соматотропный гормон СТГ)
DELFIA hGH
Флюрометрический анализ с разрешением по времени для количественного
определения гормона роста (ГР) в сыворотке крови
Производитель - W A L L A C О у, Ф инляндия
Для диагностического применения in vitro.
ДЛЯ П РИ М ЕН ЕН И Я В IN V IT R O Д И А ГН О С Т И К Е
96 О П РЕД ЕЛ ЕН И Й
Н А ЗН А Ч ЕН И Е;
Набор предназначен для определения гормона роста (Г Р ) в образцах сыворотки крови человека. Принцип
основан на иммунофлюоресцентом анализе, в котором определяемая молекула антител к ГР взаимодействует
по типу реакции антиген антитело с сорбированными на поверхности планшета антигеном против антител к ГР
и вторыми антителами, меченые флюоресцентной меткой. В результате реакции образуется
высокофлюоресцентное соединение, концентрация которого определяется на приборе-флюорометре
ДЕЛ Ф И Я/ВИ КТО Р. Концентрация определяемого флюоресцирующего соединения прямо пропорциональна
количеству антител к Г Р в образцах сыворотки крови человека.
С О С Т А В Н АБО РА:
! .ГР стандарты; Во флаконе, лиофиллизированный. К-во - 6 шт.
2.Анти-ГР-Еи раствор (мышиные моноклональные) 0.75 мл(фл). К-во - 1 шт.
3.Промывочный концентрат; 40 мл(фл). К-во - 1 шт.
4.ГР инкубационный буфер; 50 мл(фл). К-во - 1 шт.
5.Усиливающий реагент; 50 мл(фл). К-во - 1 шт.
6.Анти-ТГ микротитрационные стрипы (мышиные моноклональные); 96 луночные; К-во - 1 шт
П РИ Н Ц И П М Е Т О Д А ;
Д Е Л Ф И Я Г Р определение основано на твердофазном, флюороиммуно определении с
разрешением по времени на основе конкуренции между меченым европием Г Р и Г Р в тестируемом
образце за ограниченное количество мест связывания на ГР -специфических моноклональных
антителах (мыш иные). Стандарты, контроли и образца пациентов, содержащие Г Р ингибирую т
связывание меченое европием ГР с антителами. Блокирующие агенты в ГР инкубационном буфере
предотвращают выделение ГРа из связанного с белками состояния. Второе антитело
взаимодействующее с мы ш ины ми моноклональными антителами покрывают поверхность лунок и
представляют твердую фазу, определяя высококачественное разделение антител-связанных и
свободных антигенов Г Р . В этом определении только одна инкубационная ступень.
Усиливающий раствор диссоциирует ионы европия из меченого Г Р в раствор, где они
формируют вьюокофлюоресцентные хелатные комплексы с компонентами усиливающего раствора.
Флюоресценция каждой лунки в последующем измеряется. Флюоресцентный сигнал каждого образца
обратно пропорционален количеству Г Р в образце.
К аж ды й ДЕЛ Ф И Я Г Р набор содержит реагентов необходимых для 96 определений.
Срок годности набора указан на внешней стороне коробки. Хранение при +2+8 С .
МАТЕРИАЛЫ НЕОБХОДИМЫЕ, НО НЕ ПОСТАВЛЯЕМЫЕ
С НАБОРОМ;
--- стр. 144 ---
I 1 . Флюорометр с временным разрешением плюс принтер и внешний компьютер.
I 2. Автоматический вошер - Д ЕЛ Ф И Я плейтвошер (Кат.№1296-024 или1296-026)
I 3. Автоматический ш ейкер-ДЕЛФ ИЯ плейтшейкер(Кат.№1296-001 ил и 1296-003)
I 4. П ипетка для разливки ДЕЛ Ф И Я буфера и метки - ЭППЕНДОРФ М У Л Ь Т И П И П Е Т К А (1296-014) с 5 м л
I К омби наконечниками (1296-016) или в качестве альтернативы Д ЕЛ Ф И Я плейт диспенсер с Д Е Л Ф И Я
J диспенсер ю нит (1296-041 или 1296-043),
I 5. П ипетка для разливки Усиливающего раствора - ЭППЕНДОРФ мультипипетка (1296-014) с 5 м л
! К омби наконечниками (1296-016) или альтернативно Д ЕЛ Ф И Я плейт диспенсер (1296-041).
6. Д Е Л Ф И Я растворитель I (Кат.№ В127-100, В128-100).
] В дополнении к Д ЕЛ Ф И Я системе необходимо следующее:
I - дозирующая пипетка для разливки микролитровых объемов
I - пипетки для разливки миллитровых объемов Н Э буфера требуемого для приготовления
I раствора метки и антител
^ - дистиллированная вода
I
5 СБОР ОБРАЗЦОВ И Х РАН ЕН И Е:
I
I Получение крови посредством венопункции, образование сгустка и выделение сы воротки
j посредством центрифугирования. Плазма, полученна с использованием ЭДТА и цитрата натрия не
I может быть использована, вследствии воздействия на хелатирующий европий. Однако может
i применяться плазма крови полученная с гепарином. Гемолитическая (гемоглобин>2г/Л), липемическая
I (>2 г/Л ) и иктерическая (билирубин>30 мкмоль/Л ) сыворотки использовать не рекомендуется. Если
j концентрация превышает 50 нмоль/Л следует развести сыворотки или нормальной женской
I сывороткой или Д ЕЛ Ф И Я дилюентом I .
J Образцы могут быть сохранены 12 часов при комнатной температуре или 3 дня при +2+8С.
I Для более длительного периода неразведенные образцы могут храниться при -20 С . Избегайте
I повторного замораживания размораживания.
1 М Е Р Ы ПРЕДОСТОРОЖ НОСТИ:
1
I Для диагностики и н витро.
I Следует соблюдать правила предостороженности С Ш А № CDC 88-8395 или местные правила,
j М ож но считать все образцы крови пациентов к а к потенциально инфицированные.
} Реагенты содержат азид натрия в качестве консерванта. Азид натрия может
взаимодействовать с металлическими поверхностями с образованием азидов металлов. Для
предотвращения образования азидов металлов необходимо промыть большим количеством воды.
I Для дезинфекции всех сливных реагентов пользуйтесь правилами местных контроллирующ их
j организаций.
I Флюоресценция измеряется на флюорометре с временным разрешением. Выберите номер
программы 50 для автоматического измерения и подсчета результатов. Сверьте параметры
I гр уп п ы для программы №50 и если необходимо произведите коррекцию в соответствии со следующим
j (см. описание к флюрометру для проведения редакции параметров считы вания):
! ASSAY TYPE F IA
тип определения Ф И А
j F IT T IN G M ETH O D SPLINE SM OOTHED
i метод обработки метод “ сглаживания"
I X-AXIS L O G A R IT H M IC
x-ocb логарифмическая
1 Данный набор является частью комплексной системы иммунодиагностических реагентов и
i оборудования. ДЕЛФИЯ система требует следующие компоненты, которые могут быть поставлены или
I от WALLAC 0Y или от его дистрибьютеров;
--- стр. 145 ---
Y -A X IS
у-ось
B L A N K S
бланки О
STANDARDS
стандарты
STANDARD REPLICATES
стандарты в дупликате 2
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
UNK NO W N REPLICATES
неизвестные образцы в дубле 2
В/Вмакс
В/В макс
О
6
6
2 Убедитесь, чтобы концентрация
стандартов, указанная на флаконах
А совпадала с задаваемой. Если не
А совпадает, введите новые.
В
В
С
С
D
Д
Е
Е
F
Ф
2
О СО БЕН Н О СТИ О П РЕДЕЛЕН И Я:
1. Отношение к этому набору к а к к целому необходимо для успешного использования Д Е Л Ф И Я
наборов. Реагенты в этом наборе являются комплексны ми компонентами. Не смешивайте идентичные
реагенты из различных лотов. Не используйте реагенты после срока годности, указанной на флаконе.
2. Реагенты должны быть доведены до комнатной температуры (+20+25С) до приготовления
различных растворов. Замороженные образцы должны бы ть нагреты до комнатной температуры п р и
медленном и осторожном перемешивании. Не используйте вортекс или смешанные образцы
пациентов.
3. П р и промывке стрипов следите, чтобы все стрипы были заполнены полностью и одинаково
до верхнего уровня к а к показано на картинке. После промы вки стрипов, проверьте, что стрипы сухие.
Если что-либо осталось в лунках, то необходимо перевернуть планшету и встряхнуть на
фильтровальную бумагу.
Аспирирующее/промывочное оборудование не должно находиться заполненным с
промы вочны м раствором длительный период времени, поскольку промывочные и гл ы могут бы ть
закупорены и трудно проходимы для жидкости. В конце рабочего дня аспирировать дистиллированную
воду в аспирирующую/промывочную систему. Промывочное устройство должно бы ть регулярно
промываться раствором NaCL (ЗО г/Л ), а затем дистиллированной водой и 50% этанолом и в конце
промыто дистиллированной водой.
4. Для избежания примеси европия и к а к результат высокого флюресцентного фона высокие
требования предъявляются к процедуре раскапывания и промы вки. Поэтому необычайно важно
использовать рекомендуемые и поставляемые вместе с Д ЕЛ Ф И Я пипетки.
Усиливающий раствор должен быть раскапан только с использованием рекомендуемой
ЭП П ЕН ДО РФ мультипипеткой, и при этом первы й объем сбрасывается для полного заполнения. Тот
же тип Комбинаконечника не может быть использован для раскапывания любого другого реагента.
После работы ЭППЕНДОРФ мультипипетка помещается на ш татив с наконечником.
П ри использовании Д ЕЛ Ф И Я плейт диспенсера и ДЕЛ Ф И Я диспенсера ю нита ознакомьтесь с
описанием.
П О ДС Ч ЕТ РЕЗУЛ ЬТАТО В:
Д Е Л Ф И Я система включает программу для обработки результатов и получения данных в виде
стандартной кривой, концентрации неизвестных пациентов и т.д. (для детали см. описание к
флюорометру или к программе М ультикалк).
--- стр. 147 ---
АвтоДЕЛФИЯ Гормон роста (Соматотропный гормон СТГ)
AutoDELFIA hGH
Флюрометрический анализ с разрешением по времени для количественного
определения гормона роста (ГР) в сыворотке крови
Производитель - W A L L A C О у, Ф инляндия
Для диагностического применения i n v i t r o .
ДЛЯ П РИ М ЕН ЕН И Я В IN V IT R O Д И А ГН О С Т И К Е
96 О П РЕД ЕЛ ЕН И Й
Н А ЗН А Ч ЕН И Е;
Набор предназначен для определения гормона роста (ГР) в образцах сыворотки крови человека. Принцип
основан на иммунофлюоресцентом анализе, в котором определяемая молекула антител к ГР взаимодействует
по типу реакции антиген антитело с сорбированными на поверхности планшета антигеном против антител к ГР
и вторыми антителами, меченые флюоресцентной меткой. В результате реакции образуется
высокофлюоресцентное соединение, концентрация которого определяется на приборе-флюорометре
А ВТО Д ЕЛ Ф И Я /ВИ КТО Р. Концентрация определяемого флюоресцирующего соединения прямо
пропорциональна количеству антител к ГР в образцах сыворотки крови человека.
С О С Т А В Н АБО РА:
1.ГР стандарты; Во флаконе, лиофиллизированный. К-во - 6 шт.
2.Анти-ГР-Еи раствор (мышиные моноклональные) 0.75 мл(фл). К-во - 1 шт.
3.Промывочный концентрат; 40 мл(фл). К-во - 1 шт.
4.ГР инкубационный буфер; 50 мл(фл). К-во - 1 шт.
5.Усиливающий реагент; 50 мл(фл). К-во - 1 шт.
6.Анти-ТГ микротитрационные стрипы (мышиные моноклональные); 96 луночные; К-во - 1 шт
П РИ Н Ц И П М Е Т О Д А :
А ВТО ДЕЛ Ф И Я ГР определение основано на твердофазном, флюороиммуно определении с
разрешением по времени на основе конкуренции между меченым европием ГР и ГР в тестируемом
образце за ограниченное количество мест связывания на ГР -специфических моноклональных
антителах (мышиные). Стандарты, контроли и образца пациентов, содержащие Г Р ингибирую т
связывание меченое европием ГР с антителами. Блокирующие агенты в Г Р инкубационном буфере
предотвращают выделение ГРа из связанного с белками состояния. Второе антитело
взаимодействующее с мы ш ины ми моноклональными антителами покрывают поверхность лунок и
представляют твердую фазу, определяя высококачественное разделение антител-связанных и
свободных антигенов Г Р . В этом определении только одна инкубационная ступень.
Усиливающий раствор диссоциирует ионы европия из меченого Г Р в раствор, где они
формируют высокофлюоресцентные хелатные комплексы с компонентами усиливающего раствора.
Флюоресценция каждой лунки в последующем измеряется. Флюоресцентный сигнал каждого образца
обратно пропорционален количеству Г Р в образце.
К аж ды й АВТО ДЕЛ Ф И Я ГР набор содержит реагентов необходимых для 96 определений.
С рок годности набора указан на внешней стороне коробки. Хранение при +2+8 С .
МАТЕРИАЛЫ НЕОБХОДИМЫЕ, НО НЕ ПОСТАВЛЯЕМЫЕ
С НАБОРОМ:
--- стр. 148 ---
1 . Флюорометр с временным разрешением плюс принтер и внешний компьютер.
2. Автоматический вошер - А ВТО ДЕЛ Ф И Я плейтвошер (Кат,№1296-024 или 1296-026)
3. Автоматический ш ейкер-АВТОДЕЛФ ИЯ плейтшейкер(Кат.№1296-001 или1296-003)
4. П ипетка для разливки АВТО ДЕЛ Ф И Я буфера и метки - ЭППЕНДОРФ М У Л Ь Т И П И П Е Т К А (1296-014) с
5 м л Комби наконечниками (1296-016) или в качестве альтернативы АВТО ДЕЛ Ф И Я плейт диспенсер с
А ВТО Д ЕЛ Ф И Я диспенсер ю нит (1296-041 или 1296-043).
5. П ипетка для разливки Усиливающего раствора - ЭППЕНДОРФ мультипипетка (1296-014) с 5 мл
Комби наконечниками (1296-016) или альтернативно А ВТО ДЕЛ Ф И Я плейт диспенсер (1296-041).
6. А ВТО Д ЕЛ Ф И Я растворитель I (Кат.№ В127-100, В128-100).
В дополнении к АВТО ДЕЛ Ф И Я системе необходимо следующее:
- дозирующая пипетка для разливки микролитровых объемов
- пипетки для разливки миллитровых объемов Н Э буфера требуемого для приготовления
раствора метки и антител
- дистиллированная вода
СБОР ОБРАЗЦОВ И ХРА Н ЕН И Е;
Получение крови посредством венопункции, образование сгустка и выделение сы воротки
посредством центрифугирования. Плазма, полученна с использованием ЭДТА и цитрата натрия не
может быть использована, вследствии воздействия на хелатирующий европий. Однако может
применяться плазма крови полученная с гепарином. Гемолитическая (гемоглобин>2г/Л), липемическая
(>2 г/Л ) и иктерическая (билирубин>30 мкмоль/Л ) сыворотки использовать не рекомендуется. Если
концентрация превышает 50 нмоль/Л следует развести сыворотки или нормальной женской
сывороткой или АВТО ДЕЛ Ф И Я дилюентом I .
Образцы могут быть сохранены 12 часов п ри комнатной температуре или 3 дня п р и +2+8С.
Для более длительного периода неразведенные образцы могут храниться при -20 С . Избегайте
повторного замораживания размораживания.
М Е Р Ы ПРЕДОСТОРОЖ НОСТИ;
Для диагностики ин витро.
Следует соблюдать правила предостороженности С Ш А №CDC 86-8395 или местные правила.
М ож но считать все образцы крови пациентов к а к потенциально инфицированные.
Реагенты содержат азид натрия в качестве консерванта. Азид натрия может
взаимодействовать с металлическими поверхностями с образованием азидов металлов. Для
предотвращения образования азидов металлов необходимо промыть большим количеством воды.
Для дезинфекции всех сливных реагентов пользуйтесь правилами местных контроллирующ их
организаций.
Флюоресценция измеряется на флюорометре с временным разрешением. Выберите номер
программы 50 для автоматического измерения и подсчета результатов. Сверьте параметры
гр уп п ы для программы №50 и если необходимо произведите коррекцию в соответствии со следующим
(см. описание к флюрометру для проведения редакции параметров считы вания);
ASSAY ТУРЕ F IA
тип определения Ф И А
F IT T IN G M ETH O D SPLINE SM OOTHED
метод обработки метод “ сглаживания”
X -A X 1S L O G A R IT H M IC
х-ось логарифмическая
Данный набор является частью комплексной системы иммунодиагностических реагентов и
оборудования. АВТОДЕЛФИЯ система требует следующие компоненты, которые могут быть
поставлены или от WALLAC 0Y или от его дистрибьютеров:
--- стр. 149 ---
Y -A X IS
y -O C b
BL A N K S
бланки 0
STANDARDS
стандарты
STANDARD REPLICATES
стандарты в дупл и кате 2
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
UNK NO W N REPLICATES
неизвестные образцы в дубле 2
В/Вмакс
В/Вмакс
О
6
6
2 Убедитесь, чтобы концентрация
стандартов, указанная на флаконах
А совпадала с задаваемой. Если не
А совпадает, введите новые.
В
В
С
С
D
Д
Е
Е
F
Ф
2
О СО БЕН Н О СТИ О ПРЕДЕЛЕН И Я:
1. Отношение к этому набору к а к к целому необходимо для успешного использования
А ВТ О Д ЕЛ Ф И Я наборов. Реагенты в этом наборе являются комплексными компонентами. Не
смешивайте идентичные реагенты из различных лотов. Не используйте реагенты после срока
годности, указанной на флаконе.
2. Реагенты должны быть доведены до комнатной температуры (+20+25С) до приготовления
различных растворов. Замороженные образцы должны быть нагреты до комнатной температуры п ри
медленном и осторожном перемешивании. Не используйте вортекс или смешанные образцы
пациентов.
3. П ри промывке стрипов следите, чтобы все стрипы были заполнены полностью и одинаково
до верхнего уровня к а к показано на картинке. После промы вки стрипов, проверьте, что стрипы сухие.
Если что-либо осталось в лунках, то необходимо перевернуть планшету и встряхнуть на
фильтровальную бумагу.
Аспирирующее/промывочное оборудование не должно находиться заполненным с
промывочным раствором длительный период времени, поскольку промывочные и гл ы могут быть
закупорены и трудно проходимы для жидкости. В конце рабочего дня аспирировать дистиллированную
воду в аспирирующую/промывочную систему. Промывочное устройство должно бы ть регулярно
промываться раствором NaC L (З О г/Л ), а затем дистиллированной водой и 50% этанолом и в конце
промыто дистиллированной водой.
4. Для избежания примеси европия и к а к результат высокого флюресцентного фона высокие
требования предъявляются к процедуре раскапывания и промы вки. Поэтому необычайно важно
использовать рекомендуемые и поставляемые вместе с А ВТО ДЕЛ Ф И Я пипетки.
Усиливающий раствор должен быть раскапан только с использованием рекомендуемой
ЭП П ЕН ДО РФ мультипипеткой, и при этом первый объем сбрасывается для полного заполнения. Тот
же тип Комбинаконечника не может быть использован для раскапывания любого другого реагента.
После работы ЭППЕНДОРФ мультипипетка помещается на штатив с наконечником.
П ри использовании А ВТО ДЕЛ Ф И Я плейт диспенсера и АВТО ДЕЛ Ф И Я диспенсера ю нита
ознакомьтесь с описанием.
П О ДС ЧЕТ РЕЗУЛЬТАТО В:
А ВТО ДЕЛ Ф И Я система включает программу для обработки результатов и получения данных в
виде стандартной кривой, концентрации неизвестных пациентов и т.д. (для детали см. описание к
флюорометру или к программе М ультикалк).
--- стр. 151 ---
^ 7
Делфия Ферритин
DELFIA Ferritine
Флюрометрический анализ с разрешением по времени для количественного определения ферритина в
сыворотке крови;
Производитель - W A L L A C О у, Ф инляндия
Для диагностического применения in vitro.
ДЛЯ П РИ М ЕН ЕН И Я В IN V IT R O Д И А ГН О С Т И К Е
96 О П РЕД ЕЛ ЕН И Й
Н А ЗН А Ч ЕН И Е:
Набор предназначен для количественного определения ферритина в образцах сыворотки крови человека.
Принцип основан на иммунофлюоресцентом анализе, в котором определяемая молекула антител к ферритину
взаимодействует по типу реакции антиген антитело с сорбированными на поверхности планшета антигеном
против антител к ферритину и вторыми антителами, меченые флюоресцентной меткой. В результате реакции
образуется высокофлюоресцентное соединение, концентрация которого определяется на приборе-флюорометре
Д ЕЛ Ф И Я/ВИ КТО Р. Концентрация определяемого флюоресцирующего соединения прямо пропорциональна
количеству антител к ферритину в образцах сыворотки крови человека.
С О С Т А В НАБО РА:
1 .Ферритина стандарты; 1.0мл (фл). К-во - 6 шт.
2.Анти-ферритин-Еи раствор (мышиные моноклональные) 0.75 мл(фл). К-во - 1 шт.
3.Промывочный концентрат; 40 мл(фл). К-во - 1 шт.
4.ДЕЛФ ИЯ инкубационный буфер; 50 мл{фл). К-во - 1 шт,
5.Усиливающий реагент; 50 мл(фл). К-во - I шт.
6.Анти-ферритин микротитрационные стрипы (мышиные моноклональные); 96 луночные; К-во - 1 шт
П РИ Н Ц И П М Е Т О Д А :
Д ЕЛ Ф И Я Ф ЕРРИ ТИ Н определение основано на твердофазном, флюороиммуном определении
с разрешением по времени на основе конкуренции между меченым европием Ф ЕРРИТИ Ном и
Ф ЕРРИ ТИ Н ом в тестируемом образце за ограниченное количество мест связывания на Ф ЕРРИ ТИ Н -
специфических моноклональных антителах (мыш иные). Стандарты, контроли и образца пациентов,
содержащие ферритина ингибируют связывание меченого европием ферритина с антителами.
Блокирующ ие агенты в Ф ЕРРИТИ Н инкубационном буфере предотвращают выделение ферритина из
связанного с белками состояния. Второе антитело взаимодействующее с анти-мыш иными антителами,
которые покры вают поверхность лунок и представляют твердую фазу, определяя высококачественное
разделение антител-связанных и свободных антигенов ферритина. В этом определении только одна
инкубационная ступень.
Усиливающий раствор диссоциирует ионы европия из меченного ферритина в раствор, где они
формируют высокофлюоресцентные хелатные комплексы с компонентами усиливающего раствора.
Флюоресценция каждой лунки в последующем измеряется. Флюоресцентный сигнал каждого образца
обратно пропорционален количеству ферритина в образце.
К аж ды й Д ЕЛ Ф И Я Ф ЕРРИ ТИ Н набор содержит реагентов необходимых для 96 определений.
Срок годности набора указан на внешней стороне коробки. Хранение при +2+8 С .
МАТЕРИАЛЫ НЕОБХОДИМЫЕ, НО НЕ ПОСТАВЛЯЕМЫЕ
С НАБОРОМ;
--- стр. 152 ---
1 . Флюорометр с временным разрешением плюс принтер и внешний компьютер.
2. Автоматический вошер - Д ЕЛ Ф И Я плейтвошер (К ат. №1296-024 или1296-026)
3. Автоматический ш ейкер-ДЕЛФ ИЯ плейтшейкер(Кат.№1296-001 ил и1296-003)
4. П ипетка для разливки ДЕЛ Ф И Я буфера и метки - ЭППЕНДОРФ М У Л Ь Т И П И П Е Т К А (1296-014) с 5 м л
К ом би наконечниками (1296-016) или в качестве альтернативы Д ЕЛ Ф И Я плейт диспенсер с Д ЕЛ Ф И Я
диспенсер ю нит (1296-041 или 1296-043).
5. П ипетка для разливки Усиливающего раствора - ЭППЕНДОРФ мультипипетка (1296-014) с 5 мл
К омби наконечниками (1296-016) или альтернативно Д ЕЛ Ф И Я плейт диспенсер (1296-041).
6. Д Е Л Ф И Я растворитель I (Кат.№ В127-100, В128-100).
В дополнении к ДЕЛ Ф И Я системе необходимо следующее:
- дозирующая пипетка для разливки микролитровых объемов
- пипетки для разливки миллитровых объемов буфера требуемого для приготовления
раствора метки и антител
- дистиллированная вода
СБОР ОБРАЗЦОВ И ХРА Н ЕН И Е:
Получение крови посредством венопункции, образование сгустка и выделение сы воротки
посредством центрифугирования. Плазма, полученна с использованием ЭДТА и цитрата натрия не
может быть использована, вследствии воздействия на хелатирующий европий. Однако может
применяться плазма крови полученная с гепарином. Гемолитическая (гемоглобин>2г/Л). липемическая
(>2 г/Л ) и иктерическая (билирубин>30 мкмоль/Л ) сыворотки использовать не рекомендуется. Если
концентрация превышает 50 нмоль/Л следует развести сыворотки или нормальной женской
сывороткой или Д ЕЛ Ф И Я дилюентом I .
Образцы могут быть сохранены 12 часов при комнатной температуре или 3 дня при +2+8С.
Для более длительного периода неразведенные образцы могут храниться при -20 С . Избегайте
повторного замораживания размораживания.
М Е Р Ы ПРЕДОСТОРОЖ НОСТИ:
Для диагностики и н витро.
Следует соблюдать правила предостороженности С Ш А №CDC 88-8395 или местные правила.
М ож но считать все образцы крови пациентов к а к потенциально инфицированные.
Реагенты содержат азид натрия в качестве консерванта. Азид натрия может
взаимодействовать с металлическими поверхностями с образованием азидов металлов. Для
предотвращения образования азидов металлов необходимо промыть большим количеством воды.
Для дезинфекции всех сливных реагентов пользуйтесь правилами местных контроллирующ их
организаций.
Флюоресценция измеряется на флюорометре с временным разрешением. Выберите номер
программы 50 для автоматического измерения и подсчета результатов. Сверьте параметры
гр уп п ы для программы №50 и если необходимо произведите коррекцию в соответствии со следующим
(см. описание к флюрометру для проведения редакции параметров считы вания):
ASSAY TYPE F IA
тип определения Ф И А
F IT T IN G M ETH O D SPLINE SM OOTHED
метод обработки метод “ сглаживания”
X-A X IS L O G A R IT H M IC
х-ось логарифмическая
Данный набор является частью комплексной системы иммунодиагностических реагентов и
оборудования. ДЕЛФИЯ система требует следующие компоненты, которые могут быть поставлены или
от WALLAC 0Y или от его дистрибьютеров:
--- стр. 153 ---
Y -A X IS В/Вмакс
y-ocb В/Вмакс
BL A N K S О
бланки О
STANDARDS 6
стандарты 6
STANDARD REPLICATES 2 Убедитесь, чтобы концентрация
стандарты в дупликате 2 стандартов, указанная на флаконах
STANDARD CONC А совпадала с задаваемой. Если не
стандарты конц. А совпадает, введите новые.
STANDARD CONC В
стандарты конц. В
STANDARD CONC С
стандарты конц. С
STANDARD CONC D
стандарты конц. Д
STANDARD CONC Е
стандарты конц. Е
STANDARD CONC F
стандарты конц. Ф
UNK NO W N REPLICATES 2
неизвестные образцы в дубле 2
ОСО БЕН Н О СТИ О П РЕДЕЛЕН И Я;
1 . Отношение к этому набору к а к к целому необходимо для успешного использования Д Е Л Ф И Я
наборов. Реагенты в этом наборе являются комплексны ми компонентами. Не смешивайте идентичные
реагенты из различных лотов. Не используйте реагенты после срока годности, указанной на флаконе.
2. Реагенты должны быть доведены до комнатной температуры (+20+25С) до приготовления
различных растворов. Замороженные образцы должны быть нагреты до комнатной температуры п р и
медленном и осторожном перемешивании. Не используйте вортекс или смешанные образцы
пациентов.
3. П ри промывке стрипов следите, чтобы все стрипы были заполнены полностью и одинаково
до верхнего уровня к а к показано на картинке. После промы вки стрипов, проверьте, что стрипы сухие.
Если что-либо осталось в лунках, то необходимо перевернуть планшету и встряхнуть на
фильтровальную бумагу.
Аспирирующее/промывочное оборудование не должно находиться заполненным с
промывочным раствором длительный период времени, поскольку промывочные и гл ы могут быть
закупорены и трудно проходимы для жидкости. В конце рабочего дня аспирировать дистиллированную
воду в аспирирующую/промывочную систему. Промывочное устройство должно бы ть регулярно
промываться раствором NaCL (З О г/Л ), а затем дистиллированной водой и 50% этанолом и в конце
промыто дистиллированной водой.
4. Для избежания примеси европия и к а к результат высокого флюресцентного фона высокие
требования предъявляются к процедуре раскапывания и промы вки. Поэтому необычайно важно
использовать рекомендуемые и поставляемые вместе с Д ЕЛ Ф И Я пипетки.
Усиливающий раствор должен быть раскапан только с использованием рекомендуемой
ЭП П ЕН ДО РФ мультипипеткой, и при этом первый объем сбрасывается для полного заполнения. Тот
же тип Комбинаконечника не может быть использован для раскапывания любого другого реагента.
После работы ЭППЕНДОРФ мультипипетка помещается на ш татив с наконечником.
П ри использовании Д ЕЛ Ф И Я плейт диспенсера и Д ЕЛ Ф И Я диспенсера ю нита ознакомьтесь с
описанием.
П О ДС Ч ЕТ РЕЗУЛЬТАТО В;
Д Е Л Ф И Я система включает программу для обработки результатов и получения данных в виде
стандартной кривой, концентрации неизвестных пациентов и т.д. (для детали см. описание к
флюорометру или к программе М ультикалк).
--- стр. 155 ---
г
АвтоДЕЛФИЯ Ферритин
AutoDELFIA Ferritine
Флюрометрический анализ с разрешением по времени для количественного определения ферритина в
сыворотке кр ови ;
Производитель - W A L L A C О у, Ф инляндия
Для диагностического применения in vitro.
Д ЛЯ П Р И М Е Н Е Н И Я В IN V I T R O д и л г а о с т и к Е
96 О П Р Е Д Е Л Е Н И Й
Н А ЗН А Ч ЕН И Е:
Набор предназначен для количественного определения ферритина в образцах сыворотки крови человека.
Принцип основан на иммунофлюоресцентом анализе, в котором определяемая молекула антител к ферритину
взаимодействует по типу реакции антиген антитело с сорбированными на поверхности планшета антигеном
против антител к ферритину и вторыми антителами, меченые флюоресцентной меткой. В результате реакции
образуется высокофлюоресцентное соединение, концентрация которого определяется на приборе-флюорометре
А ВТО Д ЕЛ Ф И Я /ВИ КТО Р. Концентрация определяемого флюоресцирующего соединения прямо
пропорциональна количеству антител к ферритину в образцах сыворотки крови человека.
С О С Т А В Н АБО РА:
1 .Ферритина стандарты; 1.0мл (фл). К-во - 6 шт.
2.Анти-ферритин-Еи раствор (мышиные моноклональные) 0.75 мл(фл). К-во - 1 шт.
3.Промывочный концентрат; 40 мл(фл). К-во - I шт.
4.А В Т О Д Е Л Ф И Я инкубационный буфер; 50 мл(фл). К-во - 1 шт.
5.Усиливающий реагент; 50 мл(фл). К-во - 1 шт.
6.Анти-ферритин микротитрационные стрипы (мышиные моноклональные); 96 луночные; К-во - 1 шт
П РИ Н Ц И П М Е Т О Д А ;
АВТО ДЕЛ Ф И Я Ф ЕРРИ ТИ Н определение основано на твердофазном, флюороиммуном
определении с разрешением по времени на основе конкуренции между меченым европием
Ф ЕРРИ ТИН ом и ФЕРРИТИНом в тестируемом образце за ограниченное количество мест связывания
на Ф ЕРРИ ТИ Н -специфических моноклональных антителах (мышиные). Стандарты, контрол и и
образца пациентов, содержащие ферритина ингибируют связывание меченого европием ферритина с
антителами. Блокирующие агенты в Ф ЕРРИ ТИ Н инкубационном буфере предотвращают выделение
ферритина И З связанного с белками состояния. Второе антитело взаимодействующее с анти-мы ш ины ми
антителами, которые покрывают поверхность лунок и представляют твердую фазу, определяя
высококачественное разделение антител-связанных и свободных антигенов ферритина. В этом
определении только одна инкубационная ступень.
Усиливающий раствор диссоциирует ионы европия из меченного ферритина в раствор, где они
формируют высокофлюоресцентные хелатные комплексы с компонентами усиливающего раствора.
Флюоресценция каждой лунки в последующем измеряется. Флюоресцентный сигнал каждого образца
обратно пропорционален количеству ферритина в образце.
К аж ды й АВТО ДЕЛ Ф И Я Ф ЕРРИ ТИ Н набор содержит реагентов необходимых для 96
определений.
Срок годности набора указан на внешней стороне коробки. Хранение при +2+8 С .
МАТЕРИАЛЫ НЕОБХОДИМЫЕ, НО НЕ ПОСТАВЛЯЕМЫЕ
С НАБОРОМ:
--- стр. 156 ---
1. Флюорометр с временным разрешением плюс принтер и внешний компьютер.
2. Автоматический вошер - А ВТО ДЕЛ Ф И Я плейтвошер (Кат.№1296-024 или1296-026)
3. Автоматический шей кер-АВТО ДЕЛ Ф И Я плейтшейкер(Кат.№ 1296-001 ил и 1296-003)
4. П ипетка для разливки А ВТО ДЕЛ Ф И Я буфера и метки - ЭППЕНДОРФ М У Л Ь Т И П И П Е Т К А (1296-014) с
5 мл Комби наконечниками (1296-016) или в качестве альтернативы АВТО ДЕЛ Ф И Я плейт диспенсер с
А ВТ О Д ЕЛ Ф И Я диспенсер ю нит (1296-041 или 1296-043).
5. П ипетка для разливки Усиливающего раствора - ЭППЕНДОРФ мультипипетка (1296-014) с 5 м л
К омби наконечниками (1296-016) или альтернативно А ВТО ДЕЛ Ф И Я плейт диспенсер (1296-041).
6. А ВТО ДЕЛ Ф И Я растворитель I (Кат.№ В127-100, В128-100),
В дополнении к АВТО ДЕЛ Ф И Я системе необходимо следующее:
-дозирующая пипетка для разливки микролитровых объемов
- пипетки для разливки миллитровых объемов буфера требуемого для приготовления
раствора метки и антител
- дистиллированная вода
СБОР ОБРАЗЦОВ И Х РА Н ЕН И Е:
Получение крови посредством венопункции, образование сгустка и выделение сы воротки
посредством центрифугирования. Плазма, полученна с использованием ЭДТА и цитрата натрия не
может быть использована, вследствии воздействия на хелатирующий европий. Однако может
применяться плазма крови полученная с гепарином. Гемолитическая (гемоглобин>2г/Л), липемическая
(>2 г/Л ) и иктерическая (билирубин>30 мкмоль/Л ) сыворотки использовать не рекомендуется. Если
концентрация превышает 50 нмоль/Л следует развести сыворотки или нормальной женской
сывороткой или А ВТО ДЕЛ Ф И Я дилюентом 1 .
Образцы могут быть сохранены 12 часов при комнатной температуре или 3 дня п р и +2+8С.
Для более длительного периода неразведенные образцы могут храниться при -20 С . Избегайте
повторного замораживания размораживания.
М Е Р Ы ПРЕДОСТОРОЖ НОСТИ:
Для диагностики ин витро.
Следует соблюдать правила предостороженности С Ш А №CDC 88-8395 или местные правила.
М ож но считать все образцы крови пациентов к а к потенциально инфицированные.
Реагенты содержат азид натрия в качестве консерванта. Азид натрия может
взаимодействовать с металлическими поверхностями с образованием азидов металлов. Для
предотвращения образования азидов металлов необходимо промыть большим количеством воды.
Для дезинфекции всех сливных реагентов пользуйтесь правилами местных контроллирующ их
организаций.
Флюоресценция измеряется на флюорометре с временным разрешением. Выберите номер
программы 50 для автоматического измерения и подсчета результатов. Сверьте параметры
гр уп п ы для программы №50 и если необходимо произведите коррекцию в соответствии со следующим
(см. описание к флюрометру для проведения редакции параметров считы вания);
ASSAY ТУРЕ F IA
тип определения Ф И А
F IT T IN G M ETH O D SPLINE SM OOTHED
метод обработки метод "сглаж ивания"
X-A X IS L O G A R IT H M IC
Данный набор является частью комплексной системы иммунодиагностических реагентов и
оборудования, АВТОДЕЛФИЯ система требует следующие компоненты, которые могут быть
поставлены или от WALLAC 0Y или от его дистрибьютеров;
--- стр. 157 ---
X -O C b
Y -A X IS
y-ocb
B L A N K S
бланки 0
STANDARDS
стандарты
STANDARD REPLICATES
стандарты в дупликате 2
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
UNK NO W N REPLICATES
неизвестные образцы в дубле 2
логарифмическая
В/Вмакс
В/Вмакс
О
6
6
2 Убедитесь, чтобы концентрация
стандартов, указанная на флаконах
А совпадала с задаваемой. Если не
А совпадает, введите новые.
В
В
С
С
D
Д
Е
Е
F
Ф
2
О СО БЕН Н О СТИ О П РЕДЕЛЕН И Я;
1. Отношение к этому набору к а к к целому необходимо для успешного использования
А ВТ О Д ЕЛ Ф И Я наборов. Реагенты в этом наборе являются комплексными компонентами. Не
смешивайте идентичные реагенты из различных лотов. Не используйте реагенты после срока
годности, указанной на флаконе.
2. Реагенты должны быть доведены до комнатной температуры (+20+25С) до приготовления
различных растворов. Замороженные образцы должны быть нагреты до комнатной температуры при
медленном и осторожном перемешивании. Не используйте вортекс или смешанные образцы
пациентов.
3. П ри промывке стрипов следите, чтобы все стрипы были заполнены полностью и одинаково
до верхнего уровня к а к показано на картинке. После промы вки стрипов, проверьте, что стрипы сухие.
Если что-либо осталось в лунках, то необходимо перевернуть планшету и встряхнуть на
фильтровальную бумагу.
Аспирирующее/промывочное оборудование не должно находиться заполненным с
промы вочны м раствором длительный период времени, поскольку промывочные и гл ы могут бы ть
закупорены и трудно проходимы для жидкости. В конце рабочего дня аспирировать дистиллированную
воду в аспирирующую/промывочную систему. Промывочное устройство должно бы ть регулярно
промываться раствором NaCL (З О г/Л ), а затем дистиллированной водой и 50% этанолом и в конце
промыто дистиллированной водой.
4. Для избежания примеси европия и к а к результат высокого флюресцентного фона высокие
требования предъявляются к процедуре раскапывания и промы вки. Поэтому необычайно важно
использовать рекомендуемые и поставляемые вместе с АВТО ДЕЛ Ф И Я пипетки.
Усиливающий раствор должен быть раскапан только с использованием рекомендуемой
Э П П ЕН ДО РФ мультипипеткой, и при этом первый объем сбрасывается для полного заполнения. Тот
же тип Комби наконечника не может быть использован для раскапывания любого другого реагента.
После работы ЭППЕНДОРФ мультипипетка помещается на ш татив с наконечником.
П ри использовании А ВТО ДЕЛ Ф И Я плейт диспенсера и АВТО ДЕЛ Ф И Я диспенсера ю нита
ознакомьтесь с описанием.
ПОДСЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ:
--- стр. 159 ---
АВТОДЕЛФИЯ Фолиевая кислота
AutoDELFlA Folate
Флюрометрический анализ с разрешением по времени для количественного определения
фолиевой кислоты в сыворотке крови
Производитель - W A L L A C О у, Ф инляндия
Для диагностического применения in vitro.
ДЛЯ П РИ М ЕН ЕН И Я В IN V IT R O Д И А Ш О С Т И К Е
96 О П РЕД ЕЛ ЕН И Й
Н А ЗН А Ч ЕН И Е:
Набор предназначен для количественног определения фолиевой кислоты в образцах сыворотки крови человека.
Принцип основан на иммунофлюоресцентом анализе, в котором определяемая молекула антител к Ф О ЛИ ЕВО Й
К И С Л О ТЕ взаимодействует по типу реакции антиген антитело с сорбированными на поверхности планшета
антигеном против антител к Ф О Л И ЕВО Й К И С Л О Т Е и вторыми антителами, меченые флюоресцентной меткой.
В результате реакции образуется высокофлюоресцентное соединение, концентрация которого определяется на
приборе-флюорометре А ВТО Д ЕЛ Ф И Я /ВИ КТО Р, Концентрация определяемого флюоресцирующего соединения
прямо пропорциональна количеству антител к Ф О Л И ЕВО Й К И С Л О Т Е в образцах сыворотки крови человека.
С О С Т А В Н АБО РА:
1 .Фолиевая к-та стандарты; Во флаконе, лиофиллизированные; К-во - 6 шт.
2.Фолиевая к-та-Еи раствор. Во флаконе, лиофиллизированный. К-во - 1 шт.
3.Анти-Фолиевая к-та раствор 25.0 мл(фл). К-во -1 шт.
4.В 12/Фолиевая к-та инкубационный буфер; 40 мл(фл). К-во - 1 шт.
5.Связывающий реагент фолиевой к-ты. 1.0мл (фл). К-во - 1 шт.
6.Усиливающий реагент; 50 мл(фл), К-во - 1 шт.
7.Анти-мышиные IgG микротитрационные стрипы (кроличьи антитела); 96 луночные; К-во - 1 шт
П РИ Н Ц И П М Е Т О Д А :
А ВТО ДЕЛ Ф И Я Ф О Л И ЕВА Я К И С Л О Т А определение основано на твердофазном,
флюороиммуном определении с разрешением по времени на основе конкуренции между меченым
европием Ф О Л И ЕВА Я К И С Л О Т А и Ф О Л И Е В А Я К И С Л О Т А в тестируемом образце за ограниченное
количество мест связывания на Ф О Л И Е В А Я К И С Л О Т А -специфических моноклональных антителах
(мы ш ины е). Стандарты, контрол и и образца пациентов, содержащие Ф О Л И Е В У Ю К И С Л О Т У
ингибирую т связывание меченого европием Ф О Л И ЕВО Й К И С Л О Т Ы с антителами. Блокирующ ие
агенты в Ф О Л И ЕВА Я К И С Л О Т А инк^ационном буфере предотвращают выделение Ф О Л И Е В О Й
К И С Л О Т Ы из связанного с белками состояния. Второе антитело взаимодействующее с анти-
м ы ш ины м и антителами, которые покры вают поверхность лунок и представляют твердую фазу,
определяя высококачественное разделение антител-связанных и свободных антигенов Ф О Л И Е В О Й
К И С Л О Т Ы . В этом определении только одна инкубационная ступень.
Усиливающий раствор диссоциирует ионы европия из меченой Ф О Л И ЕВО Й К И С Л О Т Ы в
раствор, где они формируют высокофлюоресцентные хелатные комплексы с компонентами
усиливающего раствора. Флюоресценция каждой лунки в последующем измеряется. Флюоресцентный
сигнал каждого образца обратно пропорционален количеству Ф О ЛИ ЕВО Й К И С Л О Т Ы в образце.
К аж ды й АВТО ДЕЛ Ф И Я Ф О Л И ЕВА Я К И С Л О Т А набор содержит реагентов необходимых для 96
определений.
Срок годности набора указан на внешней стороне коробки. Хранение п ри +2+8 С .
МАТЕРИАЛЫ НЕОБХОДИМЫЕ, НО НЕ ПОСТАВЛЯЕМЫЕ
--- стр. 160 ---
1 . Флюорометр с временным разрешением плюс принтер и внешний компьютер.
2. Автоматический вошер - А ВТО ДЕЛ Ф И Я плейтвошер (Кат.№1296-024 или 1296-026)
3. Автоматический ш ейкер-АВТО ДЕЛФ И Я плейтшейкер(Кат.№1296-001или1296-003)
4. П ипетка для разливки А ВТО ДЕЛ Ф И Я буфера и метки - ЭППЕНДОРФ М У Л Ь Т И П И П Е Т К А (1296-014) с
5 м л Комби наконечниками (1296-016) или в качестве альтернативы АВТО ДЕЛ Ф И Я плейт диспенсер с
А ВТО Д ЕЛ Ф И Я диспенсер ю нит (1296-041 или 1296-043).
5. П ипетка для разливки Усиливающего раствора - ЭП П ЕН ДО РФ мультипипетка (1296-014) с 5 м л
К омби наконечниками (1296-016) или альтернативно А ВТО ДЕЛ Ф И Я плейт диспенсер (1296-041).
6. А ВТ О Д ЕЛ Ф И Я растворитель I (Кат.№ В127-100, В128-100).
В дополнении к АВТО ДЕЛ Ф И Я системе необходимо следующее;
- дозирующая пипетка для разливки микролитровых объемов
- пипетки для разливки миллитровых объемов буфера требуемого для приготовления
раствора м етки и антител
- дистиллированная вода
СБОР ОБРАЗЦОВ И Х РА Н ЕН И Е;
Получение крови посредством венопункции, образование сгустка и выделение сы воротки
посредством центрифугирования. Плазма, полученна с использованием ЭДТА и цитрата натрия не
может бы ть использована, вследствии воздействия на хелатирующий европий. Однако может
применяться плазма крови полученная с гепарином. Гемолитическая (гемоглобин>2г/Л), липемическая
(>2 г/Л ) и иктерическая (билирубин>30 мкмоль/Л ) сыворотки использовать не рекомендуется. Если
концентрация превышает 50 нмоль/Л следует развести сыворотки или нормальной женской
сывороткой или АВТО ДЕЛ Ф И Я дилюентом I .
Образцы могут быть сохранены 12 часов при комнатной температуре или 3 дня при +2+8С.
Для более длительного периода неразведенные образцы могут храниться при -20 С . Избегайте
повторного замораживания размораживания.
М Е Р Ы ПРЕДОСТОРОЖ НОСТИ;
Для диагностики и н витро.
Следует соблюдать правила предостороженности С Ш А № CDC 88-8395 или местные правила.
М ожно считать все образцы крови пациентов к а к потенциально инфицированные.
Реагенты содержат азид натрия в качестве консерванта. Азид натрия может
взаимодействовать с металлическими поверхностями с образованием азидов металлов. Для
предотвращения образования азидов металлов необходимо промыть большим количеством воды.
Для дезинфекции всех сливных реагентов пользуйтесь правилами местных контроллирующ их
организаций.
Флюоресценция измеряется на флюорометре с временным разрешением. Выберите номер
программы 50 для автоматического измерения и подсчета результатов. Сверьте параметры
гр уп п ы для программы №50 и если необходимо произведите коррекцию в соответствии со следующим
(см. описание к флюрометру для проведения редакции параметров считы вания):
с НАБОРОМ;
Данный набор является частью комплексной системы иммунодиагностических реагентов и
оборудования. АВТОДЕЛФИЯ система требует следующие компоненты, которые могут быть
поставлены или от WALLAC 0Y или от его дистрибьютеров;
I ASSAY ТУРЕ F IA
I тип определения Ф И А
I F IT T IN G M ETH O D SPLINE SM OOTHED
) метод обработки метод “ сглаживания”
--- стр. 161 ---
X -A X IS
х-ось
Y -A X IS
y -O C b
B L A N K S
бланки 0
STANDARDS
стандарты
STANDARD REPLICATES
стандарты в дупликате 2
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
UNK NO W N REPLICATES
неизвестные образцы в дубле 2
L O G A R IT H M IC
логарифмическая
В/Вмакс
В/В макс
О
6
6
2 Убедитесь, чтобы концентрация
стандартов, указанная на флаконах
А совпадала с задаваемой. Если не
А совпадает, введите новые.
В
В
С
С
D
Д
Е
Е
F
Ф
2
ОСО БЕН Н О СТИ О П РЕДЕЛЕН И Я;
1. Отношение к этому набору к а к к целому необходимо для успешного использования
А ВТ О Д ЕЛ Ф И Я наборов. Реагенты в этом наборе являются комплексными компонентами. Не
смешивайте идентичные реагенты из различных лотов. Не используйте реагенты после срока
годности, указанной на флаконе.
2. Реагенты должны быть доведены до комнатной температуры (+20+25С) до приготовления
различных растворов. Замороженные образцы должны быть нагреты до комнатной температуры п р и
медленном и осторожном перемешивании. Не используйте вортекс или смешанные образцы
пациентов.
3. П р и промывке стрипов следите, чтобы все стрипы были заполнены полностью и одинаково
до верхнего уровня к а к показано на картинке. После промы вки стрипов, проверьте, что стрипы сухие.
Если что-либо осталось в лунках, то необходимо перевернуть планшету и встряхнуть на
фильтровальную бумагу.
Аспирирующее/промывочное оборудование не должно находиться заполненным с
промы вочны м раствором длительный период времени, поскольку промывочные и гл ы могут бы ть
закупорены и трудно проходимы для жидкости. В конце рабочего дня аспирировать дистиллированную
воду в аспирирующую/промывочную систему. Промывочное устройство должно быть регулярно
промываться раствором NaCL (З О г/Л ), а затем дистиллированной водой и 50% этанолом и в конце
промыто дистиллированной водой.
4. Для избежания примеси европия и к а к результат высокого флюресцентного фона высокие
требования предъявляются к процедуре раскапывания и промы вки. Поэтому необычайно важно
использовать рекомендуемые и поставляемые вместе с А ВТО ДЕЛ Ф И Я пипетки.
Усиливающий раствор должен быть раскапан только с использованием рекомендуемой
ЭП П ЕН ДО РФ мультипипеткой, и при этом первый объем сбрасывается для полного заполнения. Тот
же тип Комбинаконечника не может быть использован для раскапывания любого другого реагента.
После работы ЭППЕНДОРФ мультипипетка помещается на ш татив с наконечником.
П р и использовании АВТО ДЕЛ Ф И Я плейт диспенсера и АВТО ДЕЛ Ф И Я диспенсера ю нита
ознакомьтесь с описанием.
ПОДСЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ;
--- стр. 163 ---
Делфия Витамин В12
DELFIA В 12
Флюрометрический анализ с разрешением по времени для количественного определения
витамина В12 в сыворотке крови
Производитель - W A L L A C О у, Ф инляндия
Для диагностического применения i n v i t r o .
ДЛЯ П РИ М ЕН ЕН И Я В IN V IT R O Д И А ГН О С Т И К Е
96 О П РЕД ЕЛ ЕН И Й
Н А ЗН А Ч ЕН И Е:
Набор предназначен для определения витамина В12 в образцах сыворотки крови человека. Принцип основан на
иммунофлюоресцентом анализе, в котором определяемая молекула антител к В12 взаимодействует по типу
реакции антиген антитело с сорбированными на поверхности планшета антигеном против антител к В12 и
вторыми антителами, меченые флюоресцентной меткой. В результате реакции образуется
высокофлюоресцентное соединение, концентрация которого определяется на приборе-флюорометре
Д ЕЛ Ф И Я/ВИ КТО Р. Концентрация определяемого флюоресцирующего соединения прямо пропорциональна
количеству антител к В12 в образцах сыворотки крови человека.
С О С Т А В НАБО РА:
1. В 12 стандарты; 1.1 мл (фл). К-во - 6 шт.
2.В 12 - Ей раствор. Во флаконе, лиофиллизированный. К-во - 1 шт.
3.Анти-В12 раствор. 25.0 мл (фл). К-во - 1 шт.
4.В 12/Фолиевая к-та инкубационный буфер; 40 мл(фл). К-во - 1 шт.
5.Связывающий реагент В12. 1.0мл (фл). К-во - 1 шт,
6.Усиливающий реагент; 50 мл(фл). К-во - 1 шт.
7.Промывочный концентрат; 40 мл(фл). К-во - 1 шт.
8.Анти-мышиные IgG микротитрационные стрипы (кроличьи антитела); 96 луночные; К-во - 1 шт
П РИ Н Ц И П М Е Т О Д А ;
Д Е Л Ф И Я В12 определение основано на твердофазном, флюороиммуно определении с
разрешением по времени на основе конкуренции между меченым европием В12 и В12 в тестируемом
образце за ограниченное количество мест связывания на В12 -специфических моноклональных
антителах (мышиные). Стандарты, контроли и образца пациентов, содержащие В12 ингибирую т
связывание меченое европием 812 с антителами. Блокирующие агенты в В12 инкубационном буфере
предотвращают выделение В12а из связанного с белками состояния. Второе антитело
взаимодействующее с кроличьими IgG антителами покры вают поверхность лунок и представляют
твердую фазу, определяя высококачественное разделение антител-связанных и свободных антигенов
В12. В этом определении только одна инкубационная ступень.
Усиливающ ий раствор диссоциирует ионы европия из меченого 812 в раствор, где они
формируют высокофлюоресцентные хелатные комплексы с компонентами усиливающего раствора.
Флюоресценция каждой лунки в последующем измеряется. Флюоресцентный сигнал каждого образца
обратно пропорционален количеству 812 в образце.
К аж ды й ДЕЛ Ф И Я 812 набор содержит реагентов необходимых для 96 определений.
Срок годности набора указан на внешней стороне коробки. Хранение при +2+8 С .
--- стр. 164 ---
Данны й набор является частью комплексной системы иммунодиагностических реагентов и
оборудования. ДЕЛ Ф И Я система требует следующие компоненты, которые могут быть поставлены или
от W A L L A C 0Y или от его дистрибьютеров;
1. Флюорометр с временным разрешением плюс принтер и внешний компьютер.
2. Автоматический вошер - Д ЕЛ Ф И Я плейтвошер (К ат. №1296-024 ил и 1296-026)
3. Автоматический ш ейкер-ДЕЛФ И Я плейтш ейкер(Кат, №1296-001 или 1296-003)
4. П ипетка для разливки ДЕЛ Ф И Я буфера и метки - ЭППЕНДОРФ М У Л Ь Т И П И П Е Т К А (1296-014) с 5 м л
К омби наконечниками (1296-016) или в качестве альтернативы Д ЕЛ Ф И Я плейт диспенсер с Д Е Л Ф И Я
диспенсер ю нит (1296-041 или 1296-043).
5. П ипетка для разливки Усиливающего раствора - ЭППЕНДОРФ мультипипетка (1296-014) с 5 м л
К омби наконечниками (1296-016) или альтернативно Д Е Л Ф И Я плейт диспенсер (1296-041).
6. Д Е Л Ф И Я растворитель I (Кат.№ В127-100, В128-100).
В дополнении к Д ЕЛ Ф И Я системе необходимо следующее:
- дозирующая пипетка для разливки микролитровых объемов
- пипетки для разливки миллитровых объемов Н Э буфера требуемого для приготовления
раствора метки и антител
- дистиллированная вода
СБОР ОБРАЗЦОВ И ХРА Н ЕН И Е:
Получение крови посредством венопункции, образование сгустка и выделение сы воротки
посредством центрифугирования. Плазма, полученна с использованием ЭДТА и цитрата натрия не
может бы ть использована, вследствии воздействия на хелатирующий европий. Однако может
применяться плазма крови полученная с гепарином, Гемолитическая (гемоглобин>2г/Л), липемическая
(>2 г/Л ) и иктерическая (билирубин>30 мкмоль/Л ) сыворотки использовать не рекомендуется. Если
концентрация превышает 50 нмоль/Л следует развести сыворотки или нормальной женской
сывороткой или ДЕЛ Ф И Я дилюентом I .
Образцы могут быть сохранены 12 часов п ри комнатной температуре или 3 дня при +2+8С.
Для более длительного периода неразведенные образцы могут храниться при -20 С . Избегайте
повторного замораживания размораживания.
М Е Р Ы П РЕДОСТОРОЖ НОСТИ:
Для диагностики и н витро.
Следует соблюдать правила предостороженности С Ш А № CDC 88-8395 или местные правила.
М ож но считать все образцы крови пациентов к а к потенциально инфицированные.
Реагенты содержат азид натрия в качестве консерванта. Азид натрия может
взаимодействовать с металлическими поверхностями с образованием азидов металлов. Для
предотвращения образования азидов металлов необходимо промыть большим количеством воды.
Для дезинфекции всех сливных реагентов пользуйтесь правилами местных контроляирующ их
организаций.
Флюоресценция измеряется на флюорометре с временным разрешением. Выберите номер
профаммы 50 для автоматического измерения и подсчета результатов. Сверьте параметры
гр уп п ы для программы №50 и если необходимо произведите коррекцию в соответствии со следующим
(см. описание к флюрометру для проведения редакции параметров считы вания):
ASSAY TYPE F IA
тип определения Ф И А
F IT T IN G M ETH O D SPLINE SM OOTHED
МАТЕРИАЛЫ НЕОБХОДИМЫЕ, НО НЕ ПОСТАВЛЯЕМЫЕ
С НАБОРОМ:
--- стр. 165 ---
метод обработки метод “ сглаживания” ^
X -AXIS L O G A R IT H M IC |
х-ось логарифмическая [
Y -A X IS В/Вмакс !
у-ось В/Вмакс [
B L A N K S О I
бланки О
STANDARDS 6 j
стандарты 6 1
STANDARD REPLICATES 2 Убедитесь, чтобы концентрация
стандарты в дупликате 2 стандартов, указанная на флаконах |
STANDARD CONC А совпадала с задаваемой. Если не I
стандарты конц. А совпадает, введите новые. I
STANDARD CONC В i
стандарты конц. В \
STANDARD CONC С {
стандарты конц. С |
STANDARD CONC D [
стандарты конц. Д |
STANDARD CONC Е [
стандарты конц. Е
STANDARD CONC F (
стандарты конц. Ф I
UNK NO W N REPLICATES 2 I
неизвестные образцы в дубле 2 j
Ii
О СО БЕН Н О СТИ О П РЕДЕЛЕН И Я: 1
1 . Отношение к этому набору к а к к целому необходимо для успешного использования Д ЕЛ Ф И Я I
наборов. Реагенты в этом наборе являются комплексны ми компонентами. Не смешивайте идентичные 1
реагенты из различных лотов. Не используйте реагенты после срока годности, указанной на флаконе. j
2. Реагенты должны быть доведены до комнатной температуры (+20+25С) до приготовления
различных растворов. Замороженные образцы должны быть нагреты до комнатной температуры при
медленном и осторожном перемешивании. Не используйте вортекс или смешанные образцы
пациентов.
3. П ри промывке стрипов следите, чтобы все стрипы были заполнены полностью и одинаково
до верхнего уровня к ак показано на картинке. После промы вки стрипов, проверьте, что стрипы сухие.
Если что-либо осталось в лунках, то необходимо перевернуть планшету и встряхнуть на
фильтровальную бумагу.
Аспирирующее/промывочное оборудование не должно находиться заполненным с
промывочным раствором длительный период времени, поскольку промывочные и гл ы м огут быть
закупорены и трудно проходимы для жидкости. В конце рабочего дня аспирировать дистиллированную
воду в аспирирующую/промывочную систему. Промывочное устройство должно бы ть регулярно
промываться раствором NaCL (З О г/Л ), а затем дистиллированной водой и 50% этанолом и в конце
промыто дистиллированной водой.
4. Для избежания примеси европия и к а к результат высокого флюресцентного фона высокие
требования предъявляются к процедуре раскапывания и промы вки. Поэтому необычайно важно
использовать рекомендуемые и поставляемые вместе с Д ЕЛ Ф И Я пипетки.
Усиливающий раствор должен быть раскапан только с использованием рекомендуемой
ЭП П ЕН ДО РФ мультипипеткой, и п ри этом первый объем сбрасывается для полного заполнения. Тот
же тип Комбинаконечника не может быть использован для раскапывания любого другого реагента.
После работы ЭППЕНДОРФ мультипипетка помещается на ш татив с наконечником.
П ри использовании Д ЕЛ Ф И Я плейт диспенсера и Д ЕЛ Ф И Я диспенсера ю нита ознакомьтесь с
описанием.
ПОДСЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ;
--- стр. 167 ---
АвтоДЕЛФИЯ Витамин В12
AutoDELFIA В 12
Флюрометрический анализ с разрешением по времени для количественного определения
витамина В12 в сыворотке крови
Производитель - WALLAC О у, Ф инляндия
Для диагностического применения in vitro.
ДЛЯ П РИ М ЕН ЕН И Я В IN V IT R O Д И А ГН О С Т И К Е
96 О П РЕД ЕЛ ЕН И Й
Н А ЗН А Ч ЕН И Е:
Набор предназначен для определения витамина В12 в образцах сыворотки крови человека. Принцип основан на
иммунофлюоресцентом анализе, в котором определяемая молекула антител к 812 взаимодействует по типу
реакции антиген антитело с сорбированными на поверхности планшета антигеном против антител к 812 и
вторыми антителами, меченые флюоресцентной меткой. В результате реакции образуется
высокофлюоресцентное соединение, концентрация которого определяется на приборе-флюорометре
А ВТО Д ЕЛ Ф И Я/ВИ КТО Р. Концентрация определяемого флюоресцирующего соединения прямо
пропорциональна количеству антител к В12 в образцах сыворотки крови человека.
С О С Т А В Н АБО РА:
1. В 12 стандарты; 1.1 мл (фл). К-во - 6 шт.
2.В12 - Ей раствор. Во флаконе, лиофиллизированный. К-во - 1 шт.
3.АНТИ-В12 раствор. 25.0 мл (фл). К-во - 1 шт.
4.В 12/Фолиевая к-та инкубационный буфер; 40 мл(фл). К-во - 1 шт.
5.Связывающий реагент В12. 1.0мл (фл). К-во - 1 шт.
6.Усиливающий реагент; 50 мл(фл). К-во - 1 шт.
7.Промывочный концентрат; 40 мл(фл). К-во - 1 шт.
8.Анти-мышиные IgG микротитрационные стрипы (кроличьи антитела); 96 луночные; К-во - 1 шт
П РИ Н Ц И П М Е Т О Д А ;
А ВТО ДЕЛ Ф И Я 812 определение основано на твердофазном, флюороиммуно определении с
разрешением по времени на основе конкуренции между меченым европием В12 и В12 в тестируемом
образце за ограниченное количество мест связывания на В12 -специфических моноклональных
антителах (мышиные). Стандарты, контроли и образца пациентов, содержащие 812 ингибирую т
связывание меченое европием 812 с антителами. Блокирующие агенты в В12 инкубационном буфере
предотвращают выделение 812а из связанного с белками состояния. Второе антитело
взаимодействующее с кроличьими IgG антителами покрывают поверхность лунок и представляют
твердую фазу, определяя высококачественное разделение антител-связанных и свободных антигенов
812. В этом определении только одна инкубационная ступень.
Усиливающий раствор диссоциирует ионы европия из меченого В12 в раствор, где они
формируют высокофлюоресцентные хелатные комплексы с компонентами усиливающего раствора.
Флюоресценция каждой лунки в последующем измеряется. Флюоресцентный сигнал каждого образца
обратно пропорционален количеству 812 в образце.
К аж ды й АВТО ДЕЛ Ф И Я 812 набор содержит реагентов необходимых для 96 определений.
Срок годности набора указан на внешней стороне коробки. Хранение при +2+8 С .
--- стр. 168 ---
Д анны й набор является частью комплексной системы иммунодиагностических реагентов и
оборудования. АВТО ДЕЛ Ф И Я система требует следующие компоненты, которые могут бы ть
поставлены или от W A L L A C 0Y или от его дистрибьютеров:
1. Флюорометр с временным разрешением плюс принтер и внешний компьютер.
2. Автоматический вошер - А ВТО ДЕЛ Ф И Я плейтвошер (Кат.№1296-024 или1296-026)
3. Автоматический ш ейкер-АВТО ДЕЛФ И Я плейтшейкер(Кат.№129б-001или1296-003)
4. П ипетка для разливки А ВТО ДЕЛ Ф И Я буфера и метки - ЭППЕНДОРФ М У Л Ь Т И П И П Е Т К А (1296-014) с
5 м л Комби наконечниками (1296-016) или в качестве альтернативы АВТО ДЕЛ Ф И Я плейт диспенсер с
А ВТ О Д ЕЛ Ф И Я диспенсер ю нит (1296-041 или 1296-043).
5. П ипетка для разливки Усиливающего раствора - ЭППЕНДОРФ мультипипетка (1296-014) с 5 м л
К омби наконечниками (1296-016) или альтернативно А ВТО ДЕЛ Ф И Я плейт диспенсер (1296-041).
6. А ВТО Д ЕЛ Ф И Я растворитель 1 (Кат.№ В127-100, В128-100).
В дополнении к АВТО ДЕЛ Ф И Я системе необходимо следующее:
- дозирующая пипетка для разливки микролитровых объемов
• • пипетки для разливки миллитровых объемов Н Э буфера требуемого для приготовления
раствора метки и антител
- дистиллированная вода
СБОР ОБРАЗЦОВ И ХРА Н ЕН И Е;
Получение крови посредством венопункции, образование сгустка и выделение сы воротки
посредством центрифугирования. Плазма, полученна с использованием ЭДТА и цитрата натрия не
может быть использована, вследствии воздействия на хелатирующий европий. Однако может
применяться плазма крови полученная с гепарином. Гемолитическая (гемоглобин>2г/Л), липемическая
(>2 г/Л ) и иктерическая (билирубин>30 мкм оль/Л ) сыворотки использовать не рекомендуется. Если
концентрация превышает 50 нмоль/Л следует развести сыворотки или нормальной женской
сывороткой или АВТО ДЕЛ Ф И Я дилюентом I .
Образцы могут быть сохранены 12 часов при комнатной температуре или 3 дня при +2+8С.
Для более длительного периода неразведенные образцы могут храниться при -20 С . Избегайте
повторного замораживания размораживания.
М Е Р Ы ПРЕДОСТОРОЖ НОСТИ:
Для диагностики и н витро.
Следует соблюдать правила предостороженности С Ш А №CDC 88-8395 или местные правила.
М ожно считать все образцы крови пациентов к а к потенциально инфицированные.
Реагенты содержат азид натрия в качестве консерванта. Азид натрия может
взаимодействовать с металлическими поверхностями с образованием азидов металлов. Для
предотвращения образования азидов металлов необходимо промыть большим количеством воды.
Для дезинфекции всех сливных реагентов пользуйтесь правилами местных контроллирующ их
организаций.
Флюоресценция измеряется на флюорометре с временным разрешением. Выберите номер
программы 50 для автоматического измерения и подсчета результатов. Сверьте параметры
гр уп п ы для программы №50 и если необходимо произведите коррекцию в соответствии со следующим
(см. описание к флюрометру для проведения редакции параметров считы вания):
ASSAY ТУРЕ F IA
тип определения Ф И А
F IT T IN G M ETH O D SPLINE SM OOTHED
МАТЕРИАЛЫ НЕОБХОДИМЫЕ, НО НЕ ПОСТАВЛЯЕМЫЕ
С НАБОРОМ:
--- стр. 169 ---
метод обработки
X-AXIS
х-ось
Y-AXIS
у-ось
BLANKS
бланки О
STANDARDS
стандарты
STANDARD REPLICATES
стандарты в дупликате 2
STANDARD CONC
стандарты коиц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
UNKNOWN REPLICATES
неизвестные образцы в дубле 2
метод "сглаживания
LOGARITHMIC
логарифмическая
В/Вмакс
В/В макс
О
6
6
2 Убедитесь, чтобы концентрация
стандартов, указанная на флаконах
А совпадала с задаваемой. Если не
А совпадает, введите новые.
В
В
С
С
D
Д
Е
Е
F
Ф
2
ОСОБЕННОСТИ ОПРЕДЕЛЕНИЯ;
1. Отношение к этому набору как к целому необходимо для успешного использования
АВТОДЕЛФИЯ наборов. Реагенты в этом наборе являются комплексными компонентами. Не
смешивайте идентичные реагенты из различных лотов. Не используйте реагенты после срока
годности, указанной на флаконе.
2. Реагенты должны быть доведены до комнатной температуры (+20+25С) до приготовления
различных растворов. Замороженные образцы должны быть нагреты до комнатной температуры при
медленном и осторожном перемешивании. Не используйте вортекс или смешанные образцы
пациентов.
3. При промывке стрипов следите, чтобы все стрипы были заполнены полностью и одинаково
до верхнего уровня как показано на картинке. После промывки стрипов, проверьте, что стрипы сухие.
Если что-либо осталось в лунках, то необходимо перевернуть планшету и встряхнуть на
фильтровальную бумагу.
Аспирирующее/промывочное оборудование не должно находиться заполненным с
промывочным раствором длительный период времени, поскольку промывочные иглы могут быть
закупорены и трудно проходимы для жидкости. В конце рабочего дня аспирировать дистиллированную
воду в аспирирующую/промывочную систему. Промывочное устройство должно быть регулярно
промываться раствором NaCL (ЗОг/Л), а затем дистиллированной водой и 50% этанолом и в конце
промыто дистиллированной водой.
4. Для избежания примеси европия и как результат высокого флюресцентного фона высокие
требования предъявляются к процедуре раскапывания и промывки. Поэтому необычайно важно
использовать рекомендуемые и поставляемые вместе с АВТОДЕЛФИЯ пипетки.
Усиливающий раствор должен быть раскапан только с использованием рекомендуемой
ЭППЕНДОРФ мультипипеткой, и при этом первый объем сбрасывается для полного заполнения. Тот
же тип Комбинаконечника не может быть использован для раскапывания любого другого реагента.
После работы ЭППЕНДОРФ мультипипетка помещается на штатив с наконечником.
При использовании АВТОДЕЛФИЯ плейт диспенсера и АВТОДЕЛФИЯ диспенсера юнита
ознакомьтесь с описанием.
ПОДСЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ;
--- стр. 171 ---
\
I
I
ценного o''P®'^
. л . и . о о у . ^ - : - Г о .
д ^ Г Н О С Г И ®
й человека.
н а з н а ч е н и е: в образцах ^ „«суЛЙНУ
принцип о с н о ^ н а ^ у ' “ ^ф „„„р есцентн о й меткой. В р«^«ьтате реаКИИИ
к инсулину и вторыми которого определяется на прибореч^люорометр<
образуется высокофлюоресцентое соединение, флюоресцирующего соединения прЯ М '
ab^ oW ™ k t o p.
пропорциональна количеству антител к инсулину в оин
СОСТАВ НАБОРА;
I.Инсулин стандарты; Во флаконе, лиофиллизированные^С-во - 5 шт.
2 Л нти-инсулиН 'Е и раствор. 1.0 м л (фл). К-во - I шт.
3.Инсулин инкубационный буфер; 30 мл(фл). К-во - 1 йт.
4 .У силиваю щ ий реагент; 50 м л(ф л), К-во — I шт.
5.Промывочный концентрат; 40 мл(фл). К-во - 1 шт.
6.Акти-инсулин микротиграционные сгрипы (мышиные aire^a); 96 луночные- К [
ПРИНЦИП МЕТОДА:
АВТОДЕЛФИ;
определении с раз
ИНСУЛИНОМ и ИНС^..г.
ИНСУЛИН -специфических моноклональных антител! кояичес еволп
пациентов, содержащие инсулина ингибируют связыв^^*^^ь/е). Станлд связкш
Блокирующие агенты в ИНСУЛИН инкубационном ^®^ого евр о р ^а ^^^'^Роли ^
связанного с белками состояния. Второе антитело с ^
которые покрывают поверхность лунок и представляюг^ву/Ci/^eg ^
разделение антител-связанных и свободных ант игене^ Ф ази п .
инкубационная ступень. W fa . g ' в ^Wrifr
Усиливающий раствор диссоциирует ионы еврог
формируют высокофлюоресцентные хелатные кош пехН енна
Флюоресценция каждой лунки в последующем измеряет(7о,увГ° ^^<^Улиг,
обратно пропорционален количеству инсулина в образце.
Каждый АВТОДЕЛФИЯ ИНСУЛИН набор сод
определений.
Срок годности набора указан на внешней стороне
I НО НЕ ПОСТАВЛЯЕМЫЕ "»в
) ^'^8 С ^
--- стр. 172 ---
1. Флюорометр с временным разрешением плюс принтер и внешний компьютер.
2. Автоматический вошер - АВТОДЕЛФИЯ плейтвошер (Кат.№1296-024 или 1296-026)
3. Автоматический шейкер-АВТОДЕЛФИЯ плейтшейкер{Кат.№1296-001или129б-003)
4. Пипетка для разливки АВТОДЕЛФИЯ буфера и метки - ЭППЕНДОРФ МУЛЬТИПИПЕТКА (1296-014) с
5 мл Комби наконечниками (1296-016) или в качестве альтернативы АВТОДЕЛФИЯ плейт диспенсер с
АВТОДЕЛФИЯ диспенсер юнит (1296-041 или 1296-043).
5. Пипетка для разливки Усиливающего раствора - ЭППЕНДОРФ мультипипетка (1296-014) с 5 мл
Комби наконечниками (1296-016) или альтернативно АВТОДЕЛФИЯ плейт диспенсер (1296-041).
6. АВТОДЕЛФИЯ растворитель I (Кат.№ В127-100, В128-100).
В дополнении к АВТОДЕЛФИЯ системе необходимо следующее:
- дозирующая пипетка для разливки микролитровых объемов
- пипетки для разливки миллитровых объемов буфера требуемого для приготовления
раствора метки и антител
- дистиллированная вода
СБОР ОБРАЗЦОВ И ХРАНЕНИЕ:
Получение крови посредством венопункции, образование сгустка и выделение сыворотки
посредством центрифугирования. Плазма, полученна с использованием ЭДТА и цитрата натрия не
может быть использована, вследствии воздействия на хелатирующий европий. Однако может
применяться плазма крови полученная с гепарином. Гемолитическая (гемоглобин>2г/Л), липемическая
(>2 г/Л) и иктерическая (билирубин>30 мкмоль/Л) сыворотки использовать не рекомендуется. Если
концентрация превышает 50 нмоль/Л следует развести сыворотки или нормальной женской
сывороткой или АВТОДЕЛФИЯ дилюентом 1 .
Образцы могут быть сохранены 12 часов при комнатной температуре или 3 дня при +2+8С.
Для более длительного периода неразведенные образцы могут храниться при -20 С. Избегайте
повторного замораживания размораживания.
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ:
Для диагностики ин витро.
Следует соблюдать правила предостороженности США №CDC 88-8395 или местные правила.
Можно считать все образцы крови пациентов как потенциально инфицированные.
Реагенты содержат азид натрия в качестве консерванта. Азид натрия может
взаимодействовать с металлическими поверхностями с образованием азидов металлов. Для
предотвращения образования азидов металлов необходимо промыть большим количеством воды.
Для дезинфекции всех сливных реагентов пользуйтесь правилами местных контроллирующих
организаций.
Флюоресценция измеряется на флюорометре с временным разрешением. Выберите номер
программы 50 для автоматического измерения и подсчета результатов. Сверьте параметры
Фуппы для программы №50 и если необходимо произведите коррекцию в соответствии со следующим
(см. описание к флюрометру для проведения редакции параметров считывания):
ASSAY TYPE FI А
тип определения ФИА
FITTING METHOD SPLINE SMOOTHED
метод обработки метод “сглаживания”
X-AXIS LOGARITHMIC
х-ось логарифмическая
Данный набор является частью комплексной системы иммунодиагностических реагентов и
оборудования. АВТОДЕЛФИЯ система требует следующие компоненты, которые могут быть
поставлены или от WALLAC 0Y или от его дистрибьютеров:
--- стр. 173 ---
Y-AXIS
у-ось
BLANKS
бланки О
STANDARDS
стандарты
STANDARD REPLICATES
стандарты в дупликате 2
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
UNKNOWN REPLICATES
неизвестные образцы в дубле 2
В/Вмакс
В/В макс
О
2 Убедитесь, чтобы концентрация
стандартов, указанная на флаконах
А совпадала с задаваемой. Если не
А совпадает, введите новые.
В
В
С
С
D
Д
Е
Е
F
Ф
2
ОСОБЕННОСТИ ОПРЕДЕЛЕНИЯ;
1. Отношение к этому набору как к целому необходимо для успешного использования
АВТОДЕЛФИЯ наборов. Реагенты в этом наборе являются комплексными компонентами. Не
смешивайте идентичные реагенты из различных лотов. Не используйте реагенты после срока
годности, указанной на флаконе.
2. Реагенты должны быть доведены до комнатной температуры (+20+25С) до приготовления
различных растворов. Замороженные образцы должны быть нагреты до комнатной температуры при
медленном и осторожном перемешивании. Не используйте вортекс или смешанные образцы
пациентов.
3. При промывке стрипов следите, чтобы все стрипы были заполнены полностью и одинаково
до верхнего уровня как показано на картинке. После промывки стрипов, проверьте, что стрипы сухие.
Если что-либо осталось в лунках, то необходимо перевернуть планшету и встряхнуть на
фильтровальную бумагу.
Аспирирующее/промывочное оборудование не должно находиться заполненным с
промывочным раствором длительный период времени, поскольку промывочные иглы могут быть
закупорены и трудно проходимы для жидкости. В конце рабочего дня аспирировать дистиллированную
воду в аспирирующую/промывочную систему. Промывочное устройство должно быть регулярно
промываться раствором NaCL (ЗОг/Л), а затем дистиллированной водой и 50% этанолом и в конце
промыто дистиллированной водой.
4. Для избежания примеси европия и как результат вьюокого флюресцентного фона высокие
требования предъявляются к процедуре раскапывания и промывки. Поэтому необычайно важно
использовать рекомендуемые и поставляемые вместе с АВТОДЕЛФИЯ пипетки.
Усиливающий раствор должен быть раскапан только с использованием рекомендуемой
ЭППЕНДОРФ мультипипеткой, и при этом первый объем сбрасывается для полного заполнения. Тот
же тип Комбинаконечника не может быть использован для раскапывания любого другого реагента.
После работы ЭППЕНДОРФ мультипипетка помещается на штатив с наконечником.
При использовании АВТОДЕЛФИЯ плейт диспенсера и АВТОДЕЛФИЯ диспенсера юнита
ознакомьтесь с описанием.
ПОДСЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ:
АВТОДЕЛФИЯ система включает программу для обработки результатов и получения данных в
виде стандартной кривой, концентрации неизвестных пациентов и т.д. (для детали см. описание к
флюорометру или к программе Мультикалк).
--- стр. 175 ---
АвтоДЕЛФИЯ С-пептид
AutoDELFIA C<peptide
Флюрометрический анализ с разрешением по времени для количественного определения С пептида в
сыворотке крови;
Производитель - WALLAC Оу, Финляндия
Для диагностического применения in vitro.
ДЛЛ П РИ М Е Н Е Н И Я В IN V IT R O Д И А Г Н О С Т И К Е
96 О П РЕ Д Е Л Е Н И Й
Н А ЗН А Ч ЕН И Е;
Н абор предназначен для количественного определения С -пептида в образцах сы воротки крови человека.
П ринцип основан на им м уноф лю оресцентом анализе, в котором оп ределяем ая молекула антител к с-пептиду
взаим одействует по типу реакции антиген антитело с сорбированны м и на поверхности планш ета антигеном
против антител к с-пептиду и вторы м и антителами, м ечены е ф лю оресц ентн ой меткой. В результате реакции
образуется вы сокоф лю оресцентное соединение, концентрация которого оп ределяется на приборе-ф лю ором етре
А В Т О Д Е Л Ф И Я /В И К Т О Р . К онцентрация определяем ого ф лю оресц ирую щ его соединения прямо
пропорциональна количеству антител к с-пептиду в образцах сы воротки крови человека.
СО СТА В Н А БО РА :
1 .С-пептид стандарты ; Во ф лаконе, лиоф иллизированны е; К -во - 5 шт.
2.А нти-С -пептид-Еи раствор. 1.0 мл (ф л). К -во - 1 шт.
3.С -пептид инкубационны й буф ер; 30 м л(ф л). К -во - 1 шт.
4.У силиваю щ ий реагент; 50 мл(фл). К -во - 1 шт.
5.П ром ы вочны й концентрат; 40 мл(ф л). К -во - 1 шт.
6.А нти-С -пептид м и кротитрац ион н ы е стрипы (м ы ш ины е антитела); 96 луночны е; К -во - 1 ш т |
I
ПРИНЦИП МЕТОДА; I
АВТОДЕЛФИЯ С-ПЕПТИД определение основано на твердофазном, флюороиммуном |
определении с разрешением по времени на основе конкуренции между меченым европием С- I
ПЕПТИДОМ и С-ПЕПТИДом в тестируемом образце за ограниченное количество мест связывания на С- f
ПЕПТИД -специфических моноклональных антителах (мышиные). Стандарты, контроли и образца |
пациентов, содержащие с-пептида ингибируют связывание меченого европием с-пептида с антителами. I
Блокирующие агенты в С-ПЕПТИД инкубационном буфере предотвращают выделение с-пептида из |
связанного с белками состояния. Второе антитело взаимодействующее с анти-мышиными антителами, j
которые покрывают поверхность лунок и представляют твердую фазу, определяя высококачественное |
разделение антител-связанных и свободных антигенов с-пептида. В этом определении только одна |
инкубационная ступень. I
Усиливающий раствор диссоциирует ионы европия из меченного с-пептида в раствор, где они j
формируют высокофлюоресцентные хелатные комплексы с компонентами усиливающего раствора. I
Флюоресценция каждой лунки в последующем измеряется. Флюоресцентный сигнал каждого образца j
обратно пропорционален количеству с-пептида в образце. (
Каждый АВТОДЕЛФИЯ С-ПЕПТИД набор содержит реагентов необходимых для 96 J
определений. f
Срок годности набора указан на внешней стороне коробки. Хранение при +2+8 С, J
I
МАТЕРИАЛЫ НЕОБХОДИМЫЕ, НО НЕ ПОСТАВЛЯЕМЫЕ !
С НАБОРОМ: ■
--- стр. 176 ---
1. Флюорометр с временным разрешением плюс принтер и внешний компьютер.
2. Автоматический вошер - АВТОДЕЛФИЯ плейтвошер (Кат.№1296-024 или 1296-026)
3. Автоматический шейкер-АВТОДЕЛФИЯ плейтшейкер(Кат.№ 1296-001 ил и 1296-003)
4. Пипетка для разливки АВТОДЕЛФИЯ буфера и метки - ЭППЕНДОРФ МУЛЬТИПИПЕТКА (1296-014) с
5 мл Комби наконечниками (1296-016) или в качестве альтернативы АВТОДЕЛФИЯ плейт диспенсер с
АВТОДЕЛФИЯ диспенсер юнит (1296-041 или 1296-043).
5. Пипетка для разливки Усиливающего раствора - ЭППЕНДОРФ мультипипетка (1296-014) с 5 мл
Комби наконечниками (1296-016) или альтернативно АВТОДЕЛФИЯ плейт диспенсер (1296-041).
6. АВТОДЕЛФИЯ растворитель I (Кат.№ В127-100, В128-100).
В дополнении к АВТОДЕЛФИЯ системе необходимо следующее:
- дозирующая пипетка для разливки микролитровых объемов
- пипетки для разливки миллитровых объемов буфера требуемого для приготовления
раствора метки и антител
- дистиллированная вода
СБОР ОБРАЗЦОВ И ХРАНЕНИЕ;
Получение крови посредством венопункции, образование сгустка и выделение сыворотки
посредством центрифугирования. Плазма, полученна с использованием ЭДТА и цитрата натрия не
может быть использована, вследствии воздействия на хелатирующий европий. Однако может
применяться плазма крови полученная с гепарином. Гемолитическая (гемоглобин>2г/Л), липемическая
(>2 г/Л) и иктерическая (билирубин>30 мкмоль/Л) сыворотки использовать не рекомендуется. Если
концентрация превышает 50 нмоль/Л следует развести сыворотки или нормальной женской
сывороткой или АВТОДЕЛФИЯ дилюентом I.
Образцы могут быть сохранены 12 часов при комнатной температуре или 3 дня при +2+8С.
Для более длительного периода неразведенные образцы могут храниться при -20 С. Избегайте
повторного замораживания размораживания.
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ;
Для диагностики ин витро.
Следует соблюдать правила предостороженности США №CDC 88-8395 или местные правила.
Можно считать все образцы крови пациентов как потенциально инфицированные.
Реагенты содержат азид натрия в качестве консерванта. Азид натрия может
взаимодействовать с металлическими поверхностями с образованием азидов металлов. Для
предотвращения образования азидов металлов необходимо промыть большим количеством воды.
Для дезинфекции всех сливных реагентов пользуйтесь правилами местных контроллирующих
организаций.
Флюоресценция измеряется на флюорометре с временным разрешением. Выберите номер
программы 50 для автоматического измерения и подсчета результатов. Сверьте параметры
группы для программы №50 и если необходимо произведите коррекцию в соответствии со следующим
(см. описание к флюрометру для проведения редакции параметров считывания);
ASSAY TYPE FIA
тип определения ФИА
FITTING METHOD SPLINE SMOOTHED
метод обработки метод “сглаживания”
X-AXIS LOGARITHMIC
Данный набор является частью комплексной системы иммунодиагностических реагентов и
оборудования. АВТОДЕЛФИЯ система требует следующие компоненты, которые могут быть
поставлены или от WALLAC 0Y или от его дистрибьютеров;
--- стр. 177 ---
х-ось
Y-AXIS
у-ось
BLANKS
бланки О
STANDARDS
стандарты
STANDARD REPLICATES
стандарты в дупликате 2
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
UNKNOWN REPLICATES
неизвестные образцы в дубле 2
логарифмическая
В/Вмакс
В/В макс
О
6
6
2 Убедитесь, чтобы концентрация
стандартов, указанная на флаконах
А совпадала с задаваемой. Если не
А совпадает, введите новые.
В
В
С
С
D
Д
Е
Е
F
Ф
2
ОСОБЕННОСТИ ОПРЕДЕЛЕНИЯ:
1. Отношение к этому набору как к целому необходимо для успешного использования
АВТОДЕЛФИЯ наборов. Реагенты в этом наборе являются комплексными компонентами. Не
смешивайте идентичные реагенты из различных лотов. Не используйте реагенты после срока
годности, указанной на флаконе.
2. Реагенты должны быть доведены до комнатной температуры (+20+25С) до приготовления
различных растворов. Замороженные образцы должны быть нагреты до комнатной температуры при
медленном и осторожном перемешивании. Не используйте вортекс или смешанные образцы
пациентов.
3. При промывке стрипов следите, чтобы все стрипы были заполнены полностью и одинаково
до верхнего уровня как показано на картинке. После промывки стрипов, проверьте, что стрипы сухие.
Если что-либо осталось в лунках, то необходимо перевернуть планшету и встряхнуть на
фильтровальную бумагу.
Аспирирующее/промывочное оборудование не должно находиться заполненным с
промывочным раствором длительный период времени, поскольку промывочные иглы могут быть
закупорены и трудно проходимы для жидкости. В конце рабочего дня аслирировать дистиллированную
воду в аспирирующую/промывочную систему. Промывочное устройство должно быть регулярно
промываться раствором NaCL (ЗОг/Л), а затем дистиллированной водой и 50% этанолом и в конце
промыто дистиллированной водой.
4. Для избежания примеси европия и как результат высокого флюресцентного фона высокие
требования предъявляются к процедуре раскапывания и промывки. Поэтому необычайно важно
использовать рекомендуемые и поставляемые вместе с АВТОДЕЛФИЯ пипетки.
Усиливающий раствор должен быть раскапан только с использованием рекомендуемой
ЭППЕНДОРФ мультипипеткой, и при этом первый объем сбрасывается для полного заполнения. Тот
же тип Комбинаконечника не может быть использован для раскапывания любого другого реагента.
После работы ЭППЕНДОРФ мультипипетка помещается на штатив с наконечником.
При использовании АВТОДЕЛФИЯ плейт диспенсера и АВТОДЕЛФИЯ диспенсера юнита
ознакомьтесь с описанием.
ПОДСЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ:
--- стр. 179 ---
( /
ДЕЛФИЯ ИгА- антитела к трансглютаминазе
DELFIA Anti-tissue Transgiutaminase IgA
ФЛЮОРОМЕТРИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ С РАЗРЕШ ЕНИЕМ ПО ВРЕМЕНИ ДЛЯ КОЛИЧЕСТВЕННОГО
ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЧЕЛОВЕЧЕСКИХ АНТИ-ТРАНСГЛЮТАМИНАЗНЫХ АНТИТЕЛ ИММУНО
ГЛОБУЛИНА А В ОБРАЗЦАХ СЫВОРОТКИ КРОВИ ЧЕЛОВЕКА
Производитель - WALLAC Оу, Финляндия
Для диагностического применения jn vitro.
Д Л Я П РИ М Е Н Е Н И Я В IN V IT R O Д И А Г Н О С ТИ К Е
96 О П РЕ Д Е Л Е Н И Й
Н А ЗН А Ч ЕН И Е:
Н абор предназначен для определения человеческих анти-трансглю там иназны х антител им м уноглобулина А в
образцах сы воротки крови человека. П ринцип основан на им му ноф лю орес центом анализе, в котором
определяемая молекула взаим одей ствует по типу реакции антиген ан титело с сорбированны м и на поверхности
планш ета антителам и и вторы м и антителами, м ечены м и ф лю оресц ентн ой меткой. В результате реакции
образуется вы сокоф лю оресцентное соединение, концентрация которого определяется на приборе-ф лю ором етре
Д Е Л Ф И Я /В И К Т О Р. К онцентрация определяем ого ф лю оресцирую щ его соединения обратно пропорциональна
количеству оп ределяем ого аналита в образцах сы воротки крови человека.
СО СТА В Н А БО РА :
1 .Стандарты: 6 фл., 1,5 мл
2.А ГА /тТГ И гА /И гГ негативны й контроль: 1 ф л., 1,5 мл
3.Анти И гА - Ей: 1 фл., О , 7 м л (К озьи поликлональны е антитела)
4.А ГА /тТ Г И гА /И гГ Д илю ент: 2 бут., 50 мл
5.Буфер для анализа: 1 бут., 50 мл
6 . М икропланш ета, 96и луночная, покры тая реком бинантны м человеческим антигеном к трансглю там иназе
ПРИНЦИП МЕТОДА:
Д Е Л Ф И Я анти-трансглю там иназны е антитела о п р е д е л е н и е о с н о в а н о н а т в е р д о ф азн о м ,
ф л ю о р о и м м у н о м о п р е д е л е н и и с р а зр еш е н и е м п о в р ем е н и н а о с н о в е к о н к у р е н ц и и м еж д у м еч ен ы м
евро п и ем И гА анти-трансглю там иназны х антителом в т е с т и р у е м о м о б р а зц е з а о г р ан и ч е н н о е к о л и ч ество
м ест св язы в ан и я н а анти-трансглю там иназны х антител - с п е ц и ф и ч е с к и х п о л и к л о н а л ь н ы х ан ти тел ах (к о зьи ).
С тан д ар ты , к о н т р о л и и о б р а з ц а п а ц и ен то в , с о д е р ж а щ и е анти-тран сглю там и назны х антитела и н ги б и р у ю т
с в язы в ан и е м еч ен ы х е в р о п и е м и м м у н о гл о б у л и н о в с а н т и т ел ам и . Б л о к и р у ю щ и е аген ты в и н к у б ац и о н н о м
бу ф ер е п р е д о т в р а щ а ю т в ь щ е л е н и е а н т и -гл и ад и н о в ы х ан ти те л из с в я за н н о го с б е л к а м и со сто ян и я. В то р о е
ан ти тел о в за и м о д е й с т в у ю щ е е с ч е л о в еч ес к и м а н ти ген о м к тран сглю там ин азе, к о то р ы е п о к р ы в а ю т
п о вер х н о сть л у н о к и п р е д с т а в л я ю т т в е р д у ю ф азу , о п р ед ел я я в ы с о к о к а ч е с т в е н н о е р азд е л е н и е ан ти тел -
св язан н ы х и св о б о д н ы х а н т и ге н о в анти-трансглю там иназны х антител. В э т о м о п р ед е л ен и и то л ь к о о д н а
и н к у б ац и о н н ая сту п ен ь.
У с и л и в а ю щ и й р а с т в о р д и с с о ц и и р у е т и о н ы ев р о п и я и з м е ч е н н о г о ан т и -гл и а д и н о в ы е ан т и т ел а в
р аств о р , где о н и ф о р м и р у ю т в ы с о к о ф л ю о р е с ц е н т н ы е х е л а т н ы е к о м п л е к с ы с к о м п о н ен та м и
у с и л и в а ю щ его р а ст в о р а. Ф л ю о р е с ц е н ц и я к аж д о й л у н к и в п о с л е д у ю щ ем и зм ер я е т ся. Ф л ю о р е сц ен тн ы й
си гн ал к а ж д о го о б р а з ц а о б р а т н о п р о п о р ц и о н а л е н к о л и ч е с т в у ан ти-трансглю там иназны х антител в обр азц е.
Каждый ДЕЛФИЯ АНТИ-ТРАНСГЛЮТАМИНАЗНЫЕ ИгА АНТИТЕЛА набор содержит реагентов
необходимых для 96 определений.
Срок годности набора указан на внешней стороне коробки. Хранение при +2+8 С.
--- стр. 180 ---
МАТЕРИАЛЫ НЕОБХОДИМЫЕ, НО НЕ ПОСТАВЛЯЕМЫЕ
С НАБОРОМ;
Данный набор является частью комплексной системы иммунодиагностических реагентов и
оборудования. ДЕЛФИЯ система требует следующие компоненты, которые могут быть поставлены или
от WALLAC 0Y или от его дистрибьютеров;
1. Флюорометр с временным разрешением плюс принтер и внешний компьютер.
2. Автоматический вошер - ДЕЛФИЯ плейтвошер (Кат.№1296-024 или1296-026)
3. Автоматический шейкер-ДЕЛФИЯ плейтшейкер(Кат.№ 1296-001 или 1296-003)
4. Пипетка для разливки ДЕЛФИЯ буфера и метки - ЭППЕНДОРФ МУЛЬТИПИПЕТКА (1296-014) с 5 мл
Комби наконечниками (1296-016) или в качестве альтернативы ДЕЛФИЯ плейт диспенсер с ДЕЛФИЯ
диспенсер юнит (1296-041 или 1296-043).
5. Пипетка для разливки Усиливающего раствора - ЭППЕНДОРФ мультипипетка (1296-014) с 5 мл
Комби наконечниками (1296-016) или альтернативно ДЕЛФИЯ плейт диспенсер (1296-041).
6. ДЕЛФИЯ растворитель ) (Кат.№ В127-100, В128-100).
В дополнении к ДЕЛФИЯ системе необходимо следующее;
- дозирующая пипетка для разливки микролитровых объемов
- пипетки для разливки миллигровых объемов буфера требуемого для приготовления
раствора метки и антител
- дистиллированная вода
СБОР ОБРАЗЦОВ И ХРАНЕНИЕ;
Получение крови посредством венопункции, образование сгустка и выделение сыворотки
посредством центрифугирования. Плазма, полученна с использованием ЭДТА и цитрата натрия не
может быть использована, вследствии воздействия на хелатирующий европий. Однако может
применяться плазма крови полученная с гепарином. Гемолитическая (гемоглобин>2г/Л), липемическая
(>2 г/Л) и иктерическая {билирубин>30 мкмоль/Л) сыворотки использовать не рекомендуется. Если
концентрация превышает 50 нмоль/Л следует развести сыворотки или нормальной женской
сывороткой или ДЕЛФИЯ дилюентом I.
Образцы могут быть сохранены 12 часов при комнатной температуре или 3 дня при +2+8С.
Для более длительного периода неразведенные образцы могут храниться при -20 С. Избегайте
повторного замораживания размораживания.
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ;
Для диагностики ин витро.
Следует соблюдать правила предостороженности США №CDC 88-8395 или местные правила.
Можно считать все образцы крови пациентов как потенциально инфицированные.
Реагенты содержат азид натрия в качестве консерванта. Азид натрия может
взаимодействовать с металлическими поверхностями с образованием азидов металлов. Для
предотвращения образования азидов металлов необходимо промыть большим количеством воды.
Для дезинфекции всех сливных реагентов пользуйтесь правилами местных контроллирующих
организаций.
Флюоресценция измеряется на флюорометре с временным разрешением. Выберите номер
профаммы 50 для автоматического измерения и подсчета результатов. Сверьте параметры
группы для программы №50 и если необходимо произведите коррекцию в соответствии со следующим
(см. описание к флюрометру для проведения редакции параметров считывания):
ASSAY TYPE FIA
тип определения ФИА
--- стр. 181 ---
FITTING METHOD SPLINE SMOOTHED
метод обработки метод ‘‘сглаживания”
X-AXIS LOGARITHMIC
x-ocb логарифмическая
Y-AXIS В/Вмакс
у-ось В/Вмакс
BLANKS О
бланки О
STANDARDS 6
стандарты 6
STANDARD REPLICATES 2 Убедитесь, чтобы концентрация
стандарты в дупликате 2 стандартов, указанная на флаконах
STANDARD CONC А совпадала с задаваемой. Если не
стандарты конц. А совпадает, введите новые.
STANDARD CONC В
стандарты конц. В
STANDARD CONC С
стандарты конц. С
STANDARD CONC D
стандарты конц. Д
STANDARD CONC Е
стандарты конц. Е
STANDARD CONC F
стандарты конц. Ф
UNKNOWN REPLICATES 2
неизвестные образцы в дубле 2
ОСОБЕННОСТИ ОПРЕДЕЛЕНИЯ:
1. Отношение к этому набору как к целому необходимо для успешного использования ДЕЛФИЯ
наборов. Реагенты в этом наборе являются комплексными компонентами. Не смешивайте идентичные
реагенты из различных лотов. Не используйте реагенты после срока годности, указанной на флаконе.
2. Реагенты должны быть доведены до комнатной температуры (+20+25С) до приготовления
различных растворов. Замороженные образцы должны быть нагреты до комнатной температуры при
медленном и осторожном перемешивании. Не используйте вортекс или смешанные образцы
пациентов.
3. При промывке стрипов следите, чтобы все стрипы были заполнены полностью и одинаково
до верхнего уровня как показано на картинке. После промывки стрипов, проверьте, что стрипы сухие.
Если что-либо осталось в лунках, то необходимо перевернуть планшету и встряхнуть на
фильтровальную бумагу.
Аспирирующее/промывочное оборудование не должно находиться заполненным с
промывочным раствором длительный период времени, поскольку промывочные иглы могут быть
закупорены и трудно проходимы для жидкости. В конце рабочего дня аспирировать дистиллированную
воду в аспирирующую/промывочную систему. Промывочное устройство должно быть регулярно
промываться раствором NaCL (ЗОг/Л), а затем дистиллированной водой и 50% этанолом и в конце
промыто дистиллированной водой.
4. Для избежания примеси европия и как результат высокого флюресцентного фона высокие
требования предъявляются к процедуре раскапы вания и промывки. Поэтому необычайно важно
использовать рекомендуемые и поставляемые вместе с ДЕЛФИЯ пипетки.
Усиливающий раствор должен быть раскапан только с использованием рекомендуемой
ЭППЕНДОРФ мультипипеткой, и при этом первый объем сбрасывается для полного заполнения. Тот
же тип Комбинаконечника не может быть использован для раскапывания любого другого реагента.
После работы ЭППЕНДОРФ мультипипетка помешается на штатив с наконечником.
При использовании ДЕЛФИЯ плейт диспенсера и ДЕЛФИЯ диспенсера юнита ознакомьтесь с
описанием.
ПОДСЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ;
--- стр. 183 ---
7 г
АВТОДЕЛФИЯ ИгА> антитела к трансглютаминазе
AutoDELFIA Anti-tissue Transglutaminase IgA
ФЛЮОРОМЕТРИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ С РАЗРЕШЕНИЕМ ПО ВРЕМЕНИ ДЛЯ КОЛИЧЕСТВЕННОГО
ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЧЕЛОВЕЧЕСКИХ АНТИ-ТРАНСГЛЮТАМИНАЗНЫХ АНТИТЕЛ ИММУНО
ГЛОБУЛИНА А В ОБРАЗЦАХ СЫВОРОТКИ КРОВИ ЧЕЛОВЕКА
Производитель - WALLAC Су, Финляндия
Для диагностического применения in vitro,
ДЛЯ П Р И М Е Н Е Н И Я В IN V IT R O Д И А Г Н О С Т И К Е
96 О П РЕ Д Е Л Е Н И Й
Н А ЗН А ЧЕН И Е:
Н абор предназначен для определения человеческих ан ти-трансглю там иназны х антител им м уноглобулина А в
образцах сы воротки крови человека. П ринцип основан на им м уноф лю оресцентом анализе, в котором
определяемая м олекула взаим одей ствует по типу реакции антиген ан титело с сорбированны м и на поверхности
планш ета антителам и и вторы м и антителам и, м ечены м и ф лю оресц ентн ой м еткой. В результате реакции
образуется вы сокоф лю оресцентное соединение, концентрация которого оп ределяется на приборе-ф лю ором етре
А В Т О Д Е Л Ф И Я /В И К Т О Р. К онцентрация оп ределяем ого ф лю оресц ирую щ его соединения обратно
пропорциональна количеству определяем ого аналита в образцах сы воротки крови человека.
СО СТА В Н А БО РА :
1.С тандарты: 6 ф л., 1,5 мл
2.А ГА /тТ Г И гА /И гГ негативны й контроль: 1 фл., 1,5 мл
3.А нти Иг А- Ей: 1 ф л., О, 7 мл (К озьи поликлональны е антитела)
4.АГАУтТГ И гА /И гГ Д илю ент: 2 бут., 50 мл
5.Буфер для анализа: 1 бут., 50 мл
6. М икропланш ета, 96и луночная, покры тая реком бинантны м человеческим антигеном к трансглю там иназе
ПРИНЦИП МЕТОДА:
А В Т О Д Е Л Ф И Я анти-трансглю там иназны е антитела о п р е д е л е н и е о с н о в а н о на т в ер д о ф а зн о м ,
ф л ю о р о и м м у н о м о п р е д е л е н и и с р азр е ш е н и е м по в р ем ен и н а о с н о в е к о н к у р ен ц и и м еж д у м еч ен ы м
е в р о п и ем И гА анти-трансглю там иназны х антителом в т е ст и р у ем о м о б р а з ц е з а о г р ан и ч е н н о е к о л и ч ество
м ест св язы в ан и я н а анти-трансглю там иназны х антител - с п е ц и ф и ч е с к и х п о л и к л о н а л ь н ы х ан ти тел ах (к о зьи ).
С тан д ар ты , к о н т р о л и и о б р а зц а п а ц и е н то в , со д е р ж а щ и е ан ти-тран сглю там и назны х антитела и н ги б и р у ю т
св язы в ан и е м еч ен ы х е в р о п и е м и м м у н о гл о б у л и н о в с а н т и т е л а м и . Б л о к и р у ю щ и е а ге н ты в и н к у б ац и о н н о м
бу ф ере п р е д о т в р а щ а ю т в ь щ ел ен и е ан т и -гл и ад и н о в ы х а н ти тел и з с в я за н н о го с б е л к а м и со сто ян и я. В тор о е
ан ти тел о в за и м о д е й с т в у ю щ е е с ч ел о в е ч е ск и м ан т и ге н о м к тран сглю там ин азе, к о то р ы е п о к р ы в аю т
п о вер х н о сть л у н о к и п р е д с т а в л я ю т тв е р д у ю ф азу, о п р е д е л я я в ы с о к о к а ч е с т в е н н о е р а зд ел е н и е ан ти тел -
св язан н ы х и с в о б о д н ы х а н т и г е н о в анти-трансглю там иназны х антител. В это м о п р е д е л е н и и т о л ь к о о д н а
и н к у б ац и о н н ая сту п ен ь.
У с и л и в а ю щ и й р а с т в о р д и с с о ц и и р у е т и он ы ев р о п и я и з м е ч е н н о г о а н т и -гл и а д и н о в ы е а н т и т е л а в
р аств о р , где о н и ф о р м и р у ю т в ы с о к о ф л ю о р е с ц е н т н ы е х е л а т н ы е к о м п л е к с ы с к о м п о н ен там и
у с и л и в а ю щ его р а ст в о р а. Ф л ю о р е с ц е н ц и я к аж д о й л у н к и в п о с л е д у ю щ е м и зм ер я е т ся. Ф л ю о р е сц ен тн ы й
си гн ал к а ж д о го о б р а з ц а о б р а т н о п р о п о р ц и о н а л е н к о л и ч е с т в у ан ти-трансглю там иназны х антител в о бр азц е.
Каждый АВТОДЕЛФИЯ АНТИ-ТРАНСГЛЮТАМИНАЗНЫЕ ИгА АНТИТЕЛА набор содержит
реагентов необходимых для 96 определений.
Срок годности набора указан на внешней стороне коробки. Хранение при +2+8 С.
--- стр. 184 ---
Данный набор является частью комплексной системы иммунодиагностических реагентов и
оборудования. АВТОДЕЛФИЯ система требует следующие компоненты, которые могут быть
поставлены или от WALLAC 0Y или от его дистрибьютеров:
1. Флюорометр с временным разрешением плюс принтер и внешний компьютер.
2. Автоматический вошер - АВТОДЕЛФИЯ плейтвошер (Кат.№1296-024 или1296-026)
3. Автоматический шейкер-АВТОДЕЛФИЯ плейтшейкер(Кат.№1296-001 ил и 1296-003)
4. Пипетка для разливки АВТОДЕЛФИЯ буфера и метки - ЭППЕНДОРФ МУЛЬТИПИПЕТКА (1296-014) с
5 мл Комби наконечниками (1296-016) или в качестве альтернативы АВТОДЕЛФИЯ плейт диспенсер с
АВТОДЕЛФИЯ диспенсер юнит (1296-041 или 1296-043).
5. Пипетка для разливки Усиливающего раствора - ЭППЕНДОРФ мультипипетка (1296-014) с 5 мл
Комби наконечниками (1296-016) или альтернативно АВТОДЕЛФИЯ плейт диспенсер (1296-041).
6. АВТОДЕЛФИЯ растворитель I (Кат.№ В127-100, В128-100).
В дополнении к АВТОДЕЛФИЯ системе необходимо следующее:
- дозирующая пипетка для разливки микролитровых объемов
- пипетки для разливки миллитровых объемов буфера требуемого для приготовления
раствора метки и антител
- дистиллированная вода
СБОР ОБРАЗЦОВ И ХРАНЕНИЕ:
Получение крови посредством венопункции, образование сгустка и выделение сыворотки
посредством центрифугирования. Плазма, полученна с использованием ЭДТА и цитрата натрия не
может быть использована, вследствии воздействия на хелатирующий европий. Однако может
применяться плазма крови полученная с гепарином. Гемолитическая (гемоглобин>2г/Л), липемическая
(>2 г/Л) и иктерическая (билирубин>30 мкмоль/Л) сыворотки использовать не рекомендуется. Если
концентрация превышает 50 нмоль/Л следует развести сыворотки или нормальной женской
сывороткой или АВТОДЕЛФИЯ дилюентом I.
Образцы могут быть сохранены 12 часов при комнатной температуре или 3 дня при +2+8С.
Для более длительного периода неразведенные образцы могут храниться при -20 С. Избегайте
повторного замораживания размораживания.
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ:
Для диагностики ин витро.
Следует соблюдать правила предостороженности США №CDC 88-8395 или местные правила.
Можно считать все образцы крови пациентов как потенциально инфицированные.
Реагенты содержат азид натрия в качестве консерванта. Азид натрия может
взаимодействовать с металлическими поверхностями с образованием азидов металлов. Для
предотвращения образования азидов металлов необходимо промыть большим количеством воды.
Для дезинфекции всех сливных реагентов пользуйтесь правилами местных контроляирующих
организаций.
Флюоресценция измеряется на флюорометре с временным разрешением. Выберите номер
программы 50 для автоматического измерения и подсчета результатов. Сверьте параметры
группы для программы №50 и если необходимо произведите коррекцию в соответствии со следующим
(см. описание кфлюрометрудля проведения редакции параметров считывания);
ASSAY ТУРЕ FIA
тип определения ФИА
МАТЕРИАЛЫ НЕОБХОДИМЫЕ, НО НЕ ПОСТАВЛЯЕМЫЕ
С НАБОРОМ;
--- стр. 185 ---
FITTING METHOD
метод обработки
X-AXIS
X-O Cb
Y-AXIS
y-OCb
BLANKS
бланки 0
STANDARDS
стандарты
STANDARD REPLICATES
стандарты в дупликате 2
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
UNKNOWN REPLICATES
неизвестные образцы в дубле 2
SPLINE SMOOTHED
метод “сглаживания"
LOGARITHMIC
логарифмическая
В/Вмакс
В/В макс
О
6
6
2 Убедитесь, чтобы концентрация
стандартов, указанная на флаконах
А совпадала с задаваемой. Если не
А совпадает, введите новые.
В
В
С
С
D
Д
Е
Е
F
Ф
2
ОСОБЕННОСТИ ОПРЕДЕЛЕНИЯ:
1. Отношение к этому набору как к целому необходимо для успешного использования
АВТОДЕЛФИЯ наборов. Реагенты в этом наборе являются комплексными компонентами. Не
смешивайте идентичные реагенты из различных лотов. Не используйте реагенты после срока
годности, указанной на флаконе.
2. Реагенты должны быть доведены до комнатной температуры (+20+25С) до приготовления
различных растворов. Замороженные образцы должны быть нагреты до комнатной температуры при
медленном и осторожном перемешивании. Не используйте вортекс или смешанные образцы
пациентов.
3. При промывке стрипов следите, чтобы все стрипы были заполнены полностью и одинаково
до верхнего уровня как показано на картинке. После промывки стрипов, проверьте, что стрипы сухие.
Если что-либо осталось в лунках, то необходимо перевернуть планшету и встряхнуть на
фильтровальную бумагу.
Аспирирующее/промывочное оборудование не должно находиться заполненным с
промывочным раствором длительный период времени, поскольку промывочные иглы могут быть
закупорены и трудно проходимы для жидкости. В конце рабочего дня аспирировать дистиллированную
воду в аспирирующую/промывочную систему. Промывочное устройство должно быть регулярно
промываться раствором NaCL (ЗОг/Л), а затем дистиллированной водой и 50% этанолом и в конце
промыто дистиллированной водой.
4. Для избежания примеси европия и как результат высокого флюресцентного фона высокие
требования предъявляются к процедуре раскапывания и промывки. Поэтому необычайно важно
использовать рекомендуемые и поставляемые вместе с АВТОДЕЛФИЯ пипетки.
Усиливающий раствор должен быть раскапан только с использованием рекомендуемой
ЭППЕНДОРФ мультипипеткой, и при этом первый объем сбрасывается для полного заполнения. Тот
же тип Комби наконечника не может быть использован для раскапывания любого другого реагента.
После работы ЭППЕНДОРФ мультипипетка помещается на штатив с наконечником.
При использовании АВТОДЕЛФИЯ плейт диспенсера и АВТОДЕЛФИЯ диспенсера юнита
ознакомьтесь с описанием.
ПОДСЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ;
--- стр. 186 ---
КОНТРОЛЬКАЧЕСТВА:
Использование контрольной сыворотки позволяет оценивать качество ежедневных
определений. Рекомендуется, чтобы каждая лаборатория имела свой сывороточный пул на различных
уровнях концентраций, или альтернативно использовала коммерческие контроли., например,
ЛИПОЧЕК. Высокие и низкие контроли должны быть использованы в каждом определении; если
определения включают более чем один планшет, контроли должны быть использованы для каждого
планшета.
ОГРАНИЧЕНИЯ.
Как и для всех других диагностических тест-систем, клиническое заключение не может быть
основано только на результатах одного теста и необходимо всестороннее клиническое и лабораторное
обследование.
Использование липемических, гемолитических и иктерических сывороток не рекомендуется.
АВТОДЕЛФИЯ система включает программу для обработки результатов и получения данных в
виде стандартной кривой, концентрации неизвестных пациентов и т.д, (для детали см. описание к
флюорометру или к программе Мультикалк).
--- стр. 187 ---
•7^
Анемия реагент > ДЕЛФИЯ
DELFIA Anemia pretreatment Reagent
Производитель - WALLAC Оу, Финляндия
Для диагностического применения in vitro.
Р Е А ГЕ Н Т Д О Я П О Д Г О Т О В К И О Б Р А ЗЦ А С Ы В О РО Т К И К Р О В И П А Ц И Е Н Т А , К О Н Т Р О Л Е Й И
К А Л И БРА ТО РО В К П Р О В Е Д Е Н И Ю А Н А Л И ЗА Д Е Л Ф И Я Ф О Л И Е В А Я К И С Л О Т А И Д Е Л Ф И Я В И Т А М И Н
В12.
Д Л Я П Р И М Е Н Е Н И Я В IN V IT R O Д И А Г Н О С Т И К Е
С ОСТАВ:
1. Разделяю щ ий реагент: 3 бут,, 35 мл.
2. Н ейтрализирую щ ий реагент; 6 бут., 35 мл.
3. Д Д Т (D ithiotheitol): 3 ф л.,лиоф ил.
Разделяю щ ий реагент содерж и т Sodium H ydroxide, N aO H (2% )
Д Т Т , лиоф илизированны й содерж ит D ithiotheitol (25% )
Н ейтрализирую щ ий реагент содерж и т Sodium A zide < 0 ,1 %
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ:
Для диагностики ин витро.
Следует соблюдать правила предостороженности США №CDC 88-8395 или местные правила.
Можно считать все образцы крови пациентов как потенциально инфицированные.
Реагенты содержат азид натрия в качестве консерванта. Азид натрия может
взаимодействовать с металлическими поверхностями с образованием азидов металлов. Для
предотвращения образования азидов металлов необходимо промыть большим количеством воды.
Для дезинфекции всех сливных реагентов пользуйтесь правилами местных контроллирующих
организаций.
Флюоресценция измеряется на флюорометре с временным разрешением. Выберите номер
программы 50 для автоматического измерения и подсчета результатов. Сверьте параметры
группы для программы №50 и если необходимо произведите коррекцию в соответствии со следующим
(см. описание к флюрометру для проведения редакции параметров считывания);
ASSAY TYPE FIA
тип определения ФИА
FITTING METHOD SPLINE SMOOTHED
метод обработки метод “сглаживания”
X-AXIS LOGARITHMIC
х-ось логарифмическая
Y-AXIS В/Вмакс
у-ось В/Вмакс
BLANKS О
бланки О
STANDARDS 6
стандарты 6
STANDARD REPLICATES 2 Убедитесь, чтобы концентрация
стандарты в дупликате 2 стандартов, указанная на флаконах
STANDARD CONC А совпадала с задаваемой. Если не
стандарты конц. А совпадает, введите новые.
STANDARD CONC В
стандарты конц. В
STANDARD CONC С
стандарты конц. С
STANDARD CONC D
--- стр. 188 ---
стандарты конц. Д
STANDARD CONC Е
стандарты конц. Е
STANDARD CONC F
стандарты конц. Ф
UNKNOWN REPLICATES 2
неизвестные образцы в дубле 2
I ^I I
I I
i i
I
If}
5 С
I !I {
I fI i'5 t
--- стр. 189 ---
ДЕЛФИЯ Лютеинизирующий гормон специфический (ЛГ спец.)
D E L F IA h L H -S p ec.
Производитель - WALLAC Оу, Финляндия
Для диагностического применения in vitro.
Ф Л Ю О Р О М Е Т Р И Ч Е С К И Й А Н А Л И З С РА ЗР Е Ш Е Н И Е М П О В Р Е М Е Н И Д Л Я К О Л И Ч Е С Т В Е Н Н О ГО
О П РЕ Д Е Л Е Н И Я Л Ю Т Е И Н И ЗИ Р У Ю Щ Е Г О Г О Р М О Н А В О БР А ЗЦ А Х С Ь Ш О Р О Т К И К РО В И Ч ЕЛО В ЕК А .
Д Л Я П РИ М Е Н Е Н И Я В IN V IT R O Д И А Г Н О С Т И К Е
96 О П РЕ Д Е Л Е Н И Й
Н А ЗН А Ч ЕН И Е:
Н абор предназначен для определения лю теинизирую щ его горм он а в образцах сы воротки крови человека.
П ринцип основан на им м уноф лю оресцентом анализе, в котором оп ределяем ая м олекула антител к Л Г
взаим одействует по типу реакции антиген антитело с сорби рованн ы м и на поверхности планш ета антигеном
против антител к Л Г и вторы м и антителам и, мечены е ф лю оресцентной м еткой. В результате реакции образуется
вы сокоф лю оресцентное соединение, концентрация которого определяется на приборе-ф лю ором етре
Д Е Л Ф И Я /В И К ТО Р. К онцентрация оп ределяем ого ф лю оресцирую щ его соединения прямо пропорциональна
количеству антител к Л Г в образцах сы воротки крови человека.
СО СТА В Н А БО РА ;
1.ЛГ стандарть[; 1 .Омл(фл); К-во 6 шт.
2.Анти-ЛГ-Еи раствор (мышиные моноклональные антитела); 0.65 мл (фл). К-во - 2 шт.
3.ЛГ спец. инкубационный буфер; 50 мл(фл). К-во - 1 шт.
4.АНТИ-ЛГ м икротитрационны е стрипы (мы ш ины е антитела); 96 луночны е; К-во - 1 шт
5.Штрих кодовые метки для кассеты с реагентами. К-во - 3 шт,
ПРИНЦИП МЕТОДА:
ДЕЛФИЯ ЛГ определение основано на твердофазном, флюороиммуно определении с
разрешением по времени на основе конкуренции между меченым европием ЛГ и ЛГ в тестируемом
образце за ограниченное количество мест связывания на ЛГ -специфических моноклональных
антителах (мышиные). Стандарты, контроли и образца пациентов, содержащие ЛГ ингибируют
связывание меченое европием ЛГ с антителами. Блокирующие агенты в ЛГ инкубационном буфере
предотвращают выделение Л Г из связанного с белками состояния. Второе антитело
взаимодействующее с мышиными IgG антителами, которые покрывают поверхность лунок и
представляют твердую фазу, определяя высококачественное разделение антител-связанных и
свободных антигенов ЛГ. В этом определении только одна инкубационная ступень.
Усиливающий раствор диссоциирует ионы европия из меченого ЛГ в раствор, где они
формируют высокофлюоресцентные хелатные комплексы с компонентами усиливающего раствора.
Флюоресценция каждой лунки в последующем измеряется. Флюоресцентный сигнал каждого образца
обратно пропорционален количеству ЛГ в образце.
Каждый ДЕЛФИЯ ЛГ набор содержит реагентов необходимых для 96 определений.
Срок годности набора указан на внешней стороне коробки. Хранение при +2+8 С.
МАТЕРИАЛЫ НЕОБХОДИМЫЕ, НО НЕ ПОСТАВЛЯЕМЫЕ
С НАБОРОМ;
--- стр. 190 ---
1. Флюорометр с временным разрешением плюс принтер и внешний компьютер.
2. Автоматический вошер - ДЕЛФИЯ плейтвошер (Кат.№1296-024 или1296-026)
3. Автоматический шейкер-ДЕЛФИЯ плейтшейкер(Кат.№1296-001 ил и 1296-003)
4. Пипетка для разливки ДЕЛФИЯ буфера и метки - ЭППЕНДОРФ МУЛЬТИПИПЕТКА (1296-014) с 5 мл
Комби наконечниками (1296-016) или в качестве альтернативы ДЕЛФИЯ плейт диспенсер с ДЕЛФИЯ
диспенсер юнит (1296-041 или 1296-043),
5. Пипетка для разливки Усиливающего раствора - ЭППЕНДОРФ мультипипетка (1296-014) с 5 мл
Комби наконечниками (1296-016) или альтернативно ДЕЛФИЯ плейт диспенсер (1296-041).
6. ДЕЛФИЯ растворитель I (Кат.№ В127-100, В128-100).
В дополнении к ДЕЛФИЯ системе необходимо следующее:
- дозирующая пипетка для разливки микролитровых объемов
- пипетки для разливки миллитровых объемов НЭ буфера требуемого для приготовления
раствора метки и антител
-дистиллированная вода
СБОР ОБРАЗЦОВ И ХРАНЕНИЕ:
Получение крови посредством венопункции, образование сгустка и выделение сыворотки
посредством центрифугирования. Плазма, полученна с использованием ЭДТА и цитрата натрия не
может быть использована, вследствии воздействия на хелатирующий европий. Однако может
применяться плазма крови полученная с гепарином. Гемолитическая (гемоглобин>2г/Л), липемическая
(>2 г/Л) и иктерическая (билирубин>30 мкмоль/Л) сыворотки использовать не рекомендуется. Если
концентрация превышает 50 нмоль/Л следует развести сыворотки или нормальной женской
сывороткой или ДЕЛФИЯ дилюентом I.
Образцы могут быть сохранены 12 часов при комнатной температуре или 3 дня при +2+8С,
Для более длительного периода неразведенные образцы могут храниться при -20 С, Избегайте
повторного замораживания размораживания.
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ:
Для диагностики ин витро.
Следует соблюдать правила предостороженности США №СОС 88-8395 или местные правила.
Можно считать все образцы крови пациентов как потенциально инфицированные.
Реагенты содержат азид натрия в качестве консерванта. Азид натрия может
взаимодействовать с металлическими поверхностями с образованием азидов металлов. Для
предотвращения образования азидов металлов необходимо промыть большим количеством воды.
Для дезинфекции всех сливных реагентов пользуйтесь правилами местных контроллирующих
организаций.
Флюоресценция измеряется на флюорометре с временным разрешением. Выберите номер
программы 50 для автоматического измерения и подсчета результатов. Сверьте параметры
группы для программы №50 и если необходимо произведите коррекцию в соответствии со следующим
(см. описание к флюрометру для проведения редакции параметров считывания):
ASSAY TYPE FI А
тип определения ФИА
FITTING METHOD SPLINE SMOOTHED
метод обработки метод “сглаживания”
X-AXIS LOGARITHMIC
Данный набор является частью комплексной системы иммунодиагностических реагентов и
оборудования. ДЕЛФИЯ система требует следующие компоненты, которые могут быть поставлены или
от WALLAC 0Y или от его дистрибьютеров;
--- стр. 191 ---
х-ось логарифмическая
Y-AXIS В/Вмакс
у-ось В/Вмакс
BLANKS О
бланки О
STANDARDS 6
стандарты 6
STANDARD REPLICATES 2 Убедитесь, чтобы концентрация
стандарты в дупликате 2 стандартов, указанная на флаконах
STANDARD CONC А совпадала с задаваемой. Если не
стандарты конц. А совпадает, введите новые.
STANDARD CONC В
стандарты конц. В
STANDARD CONC С
стандарты конц. С
STANDARD CONC D
стандарты конц. Д
STANDARD CONC Е
стандарты конц. Е
STANDARD CONC F
стандарты конц. Ф
UNKNOWN REPLICATES 2
неизвестные образцы в дубле 2
ОСОБЕННОСТИ ОПРЕДЕЛЕНИЯ:
1. Отношение к этому набору как к целому необходимо для успешного использования ДЕЛФИЯ
наборов. Реагенты в этом наборе являются комплексными компонентами. Не смешивайте идентичные
реагенты из различных лотов. Не используйте реагенты после срока годности, указанной на флаконе.
2. Реагенты должны быть доведены до комнатной температуры (+20+25С) до приготовления
различных растворов. Замороженные образцы должны быть нагреты до комнатной температуры при
медленном и осторожном перемешивании. Не используйте вортекс или смешанные образцы
пациентов.
3. При промывке стрипов следите, чтобы все стрипы были заполнены полностью и одинаково
до верхнего уровня как показано на картинке. После промывки стрипов, проверьте, что стрипы сухие.
Если что-либо осталось в лунках, то необходимо перевернуть планшету и встряхнуть на
фильтровальную бумагу.
Аспирирующее/промывочное оборудование не должно находиться заполненным с
промывочным раствором длительный период времени, поскольку промывочные иглы могут быть
закупорены и трудно проходимы для жидкости. В конце рабочего дня аспирировать дистиллированную
воду в аспирирующую/промывочную систему. Промывочное устройство должно быть регулярно
промываться раствором NaCL (ЗОг/Л), а затем дистиллированной водой и 50% этанолом и в конце
промыто дистиллированной водой.
4. Для избежания примеси европия и как результат высокого флюресцентного фона высокие
требования предъявляются к процедуре раскапывания и промывки. Поэтому необычайно важно
использовать рекомендуемые и поставляемые вместе с ДЕЛФИЯ пипетки.
Усиливающий раствор должен быть раскапан только с использованием рекомендуемой
ЭППЕНДОРФ мультипипеткой, и при этом первый объем сбрасывается для полного заполнения. Тот
же тип Комбинаконечника не может быть использован для раскапывания любого другого реагента.
После работы ЭППЕНДОРФ мультипипетка помещается на штатив с наконечником.
При использовании ДЕЛФИЯ плейт диспенсера и ДЕЛФИЯ диспенсера юнита ознакомьтесь с
описанием.
ПОДСЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ;
ДЕЛФИЯ система включает программу для обработки результатов и получения данных в виде
стандартной кривой, концентрации неизвестных пациентов и т.д. (для детали см. описание к
флюорометру или к программе Мультикалк).
--- стр. 193 ---
АВТОДЕЛФИЯ Лютеинизирующий гормон специфический (ЛГ спец.)
A u to D E L F IA h L H -S p ec.
Производитель - WALLAC Оу, Финляндия
Для диагностического применения in vitro.
Ф Л Ю О Р О М Е Т Р И Ч Е С К И Й А Н А Л И З С РА ЗР Е Ш Е Н И Е М П О В Р Е М Е Н И Д Л Я К О Л И Ч Е С Т В Е Н Н О ГО
О П РЕ Д Е Л Е Н И Я Л Ю Т Е И Н И ЗИ Р У Ю Щ Е Г О ГО РМ О Н А В О Б Р А ЗЦ А Х С Ы В О Р О Т К И К РО В И Ч ЕЛ О В ЕК А .
ДЛЯ П Р И М Е Н Е Н И Я В IN V IT R O Д И А Г Н О С Т И К Е
96 О П РЕ Д Е Л Е Н И Й
Н А ЗН А Ч ЕН И Е:
Н абор предназначен для определения лю теинизирую щ его горм он а в образцах сы воротки крови человека.
П ринцип основан на им м уноф лю оресцентом анализе, в котором оп ределяем ая молекула антител к ЛГ
взаим одействует по типу реакции антиген антитело с сорбированны м и на поверхности планш ета антигеном
против антител к Л Г и вторы м и антителам и, м ечены е ф лю оресцентной м еткой. В результате реакции образуется
вы сокоф лю оресцентное соединение, концентрация которого оп ределяется на приборе-ф лю ором етре
А В Т О Д Е Л Ф И Я /В И К Т О Р. К онцентрация определяем ого ф лю оресцирую щ его соединения прямо
пропорциональна количеству антител к Л Г в образцах сы воротки крови человека.
С О С ТА В Н А БО РА :
1 .ЛГ стандарты; ] .Омл(фл); К-во 6 шт.
2.Анти-ЛГ-Еи раствор (мышиные моноклональные антитела); 0.65 мл (фл). К-во - 2 шт.
3.ЛГ спец. инкубационный буфер; 50 мл(фл). К-во -1 шт.
4.АНТИ-ЛГ микротитрационные стрипы (мышиные антитела); 96 луночные; К-во - 1 шт
5.Штрих кодовые метки для кассеты с реагентами. К-во - 3 шт.
ПРИНЦИП МЕТОДА;
АВТОДЕЛФИЯ ЛГ определение основано на твердофазном, флюороиммуно определении с
разрешением по времени на основе конкуренции между меченым европием ЛГ и ЛГ в тестируемом
образце за ограниченное количество мест связывания на ЛГ -специфических моноклональных
антителах (мышиные). Стандарты, контроли и образца пациентов, содержащие ЛГ ингибируют
связывание меченое европием ЛГ с антителами. Блокирующие агенты в ЛГ инкубационном буфере
предотвращают выделение ЛГ из связанного с белками состояния. Второе антитело
взаимодействующее с мышиными IgG антителами, которые покрывают поверхность лунок и
представляют твердую фазу, определяя высококачественное разделение антител-связанных и
свободных антигенов ЛГ. В этом определении только одна инкубационная ступень.
Усиливающий раствор диссоциирует ионы европия из меченого ЛГ в раствор, где они
формируют высокофлюоресцентные хелатные комплексы с компонентами усиливающего раствора.
Флюоресценция каждой лунки в последующем измеряется. Флюоресцентный сигнал каждого образца
обратно пропорционален количеству ЛГ в образце.
Каждый АВТОДЕЛФИЯ Л Г набор содержит реагентов необходимых для 96 определений.
Срок годности набора указан на внешней стороне коробки. Хранение при +2+8 С.
МАТЕРИАЛЫ НЕОБХОДИМЫЕ, НО НЕ ПОСТАВЛЯЕМЫЕ
С НАБОРОМ:
--- стр. 194 ---
1. Флюорометр с временным разрешением плюс принтер и внешний компьютер.
2. Автоматический вошер - АВТОДЕЛФИЯ плейтвошер (Кат.№1296-024 или1296-026)
3. Автоматический шейкер-АВТОДЕЛФИЯ плейтшейкер(Кат.№1296-001 ил и 1296-003)
4. Пипетка для разливки АВТОДЕЛФИЯ буфера и метки - ЭППЕНДОРФ МУЛЬТИПИПЕТКА (1296-014) с
5 мл Комби наконечниками (1296-016) или в качестве альтернативы АВТОДЕЛФИЯ плейт диспенсер с
АВТОДЕЛФИЯ диспенсер юнит (1296-041 или 1296-043).
5. Пипетка для разливки Усиливающего раствора - ЭППЕНДОРФ мультипипетка (1296-014) с 5 мл
Комби наконечниками (1296-016) или альтернативно АВТОДЕЛФИЯ плейт диспенсер (1296-041).
6. АВТОДЕЛФИЯ растворитель I (Кат.№ В127-100, В128-100).
В дополнении к АВТОДЕЛФИЯ системе необходимо следующее:
- дозирующая пипетка для разливки микролитровых объемов
- пипетки для разливки миллитровых объемов НЭ буфера требуемого для приготовления
раствора метки и антител
- дистиллированная вода
СБОР ОБРАЗЦОВ И ХРАНЕНИЕ:
Получение крови посредством венопункции, образование сгустка и выделение сыворотки
посредством центрифугирования. Плазма, получен на с использованием ЭДТА и цитрата натрия не
может быть использована, вследствии воздействия на хелатирующий европий. Однако может
применяться плазма крови полученная с гепарином. Гемолитическая (гемоглобин>2г/Л), липемическая
(>2 г/Л) и икгерическая (билирубин>30 мкмоль/Л) сыворотки использовать не рекомендуется. Если
концентрация превышает 50 нмоль/Л следует развести сыворотки или нормальной женской
сывороткой или АВТОДЕЛФИЯ дилюентом I.
Образцы могут быть сохранены 12 часов при комнатной температуре или 3 дня при +2+8С.
Для более длительного периода неразведенные образцы могут храниться при -20 С. Избегайте
повторного замораживания размораживания.
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ:
Для диагностики ин витро.
Следует соблюдать правила предостороженности США №CDC 88-8395 или местные правила.
Можно считать все образцы крови пациентов как потенциально инфицированные.
Реагенты содержат азид натрия в качестве консерванта. Азид натрия может
взаимодействовать с металлическими поверхностями с образованием азидов металлов. Для
предотвращения образования азидов металлов необходимо промыть большим количеством воды.
Для дезинфекции всех сливных реагентов пользуйтесь правилами местных контроллирующих
организаций.
Флюоресценция измеряется на флюорометре с временным разрешением. Выберите номер
программы 50 для автоматического измерения и подсчета результатов. Сверьте параметры
группы для программы №50 и если необходимо произведите коррекцию в соответствии со следующим
(см. описание к флюрометру для проведения редакции параметров считывания):
ASSAY TYPE FIA
тип определения ФИА
FITTING METHOD SPLINE SMOOTHED
метод обработки метод “сглаживания”
X-AXIS LOGARITHMIC
Данный набор является частью комплексной системы иммунодиагностических реагентов и
оборудования. АВТОДЕЛФИЯ система требует следующие компоненты, которые могут бь(ть
поставлены или от WALLAC 0Y или от его дистрибьютеров:
--- стр. 195 ---
х-ось
Y-AXIS
у-ось
BLANKS
бланки О
STANDARDS
стандарты
STANDARD REPLICATES
стандарты в дупликате 2
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц,
UNKNOWN REPLICATES
неизвестные образцы в дубле 2
логарифмическая
В/Вмакс
В/Вмакс
О
2 Убедитесь, чтобы концентрация
стандартов, указанная на флаконах
А совпадала с задаваемой. Если не
А совпадает, введите новые.
В
В
С
С
D
Д
Е
Е
F
Ф
2
ОСОБЕННОСТИ ОПРЕДЕЛЕНИЯ;
1. Отношение к этому набору как к целому необходимо для успешного использования
АВТОДЕЛФИЯ наборов. Реагенты в этом наборе являются комплексными компонентами. Не
смешивайте идентичные реагенты из различных лотов. Не используйте реагенты после срока
годности, указанной на флаконе.
2. Реагенты должны быть доведены до комнатной температуры (+20+25С) до приготовления
различных растворов. Замороженные образцы должны быть нагреты до комнатной температуры при
медленном и осторожном перемешивании. Не используйте вортекс или смешанные образцы
пациентов.
3. При промывке стрипов следите, чтобы все стрипы были заполнены полностью и одинаково
до верхнего уровня как показано на картинке. После промывки стрипов, проверьте, что стрипы сухие.
Если что-либо осталось в лунках, то необходимо перевернуть планшету и встряхнуть на
фильтровальную бумагу.
Аспирирующее/промывочное оборудование не должно находиться заполненным с
промывочным раствором длительный период времени, поскольку промывочные иглы могут быть
закупорены и трудно проходимы для жидкости. В конце рабочего дня аспирировать дистиллированную
воду в аспирирующую/промывочную систему. Промывочное устройство должно быть регулярно
промываться раствором NaCL (ЗОг/Л), а затем дистиллированной водой и 50% этанолом и в конце
промыто дистиллированной водой.
4. Для избежания примеси европия и как результат высокого флюресцентного фона высокие
требования предъявляются к процедуре раскапывания и промывки. Поэтому необычайно важно
использовать рекомендуемые и поставляемые вместе с АВТОДЕЛФИЯ пипетки.
Усиливающий раствор должен быть раскапан только с использованием рекомендуемой
ЭППЕНДОРФ мультипипеткой, и при этом первый объем сбрасывается для полного заполнения. Тот
же тип Комбинаконечника не может быть использован для раскапывания любого другого реагента.
После работы ЭППЕНДОРФ мультипипетка помещается на штатив с наконечником.
При использовании АВТОДЕЛФИЯ плейт диспенсера и АВТОДЕЛФИЯ диспенсера юнита
ознакомьтесь с описанием.
ПОДСЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ;
--- стр. 236 ---
Выполните каждое определение в дубликате как для стандартов, так и для тестируемых образцов.
Стандартная кривая должна быть использована для каждого определения. Образцы и реагенты должны быть
доведены до комнатной температуры (+20+25С) до использования.
1. Приготовление реагентов Стабильность после разведения
Промывочный раствор
контейнере
2 недели при +2+25С в закрытом
Перенести 40 мл из Промывочного Концентрата в чистый флакон и растворить добавляя 960 мл
дистиллированной воды для приготовления готового буферного раствора рН^7.8
Анти-ФСГ-Ей метка И спользовать в течение 1 часа
после приготовления
работе.
метки.
Приготовить необходимый объем раствора метки при смешивании 60 мкл
метки с 3.0 мл МУЛЬТИ буфера для каждого стрипа (см. таблицу).
Важно, чтобы М У Л ЬТИ буфер не контактировал с раствором метки до использования в
Мы советуем использовать одноразовый пластиковый флакон для приготовления рабочего раствора
2. Перенести необходимое количество микротитровальных стрипов в рамку- держатель для стрипов
(вернуть оставшиеся стрипы в пластиковую коробку и закрыть). Не использовать больше стрипов, чем вы
можете использовать в течение 30 минут.
3. Раскапать 25 мкл в параллелях ФСГ стандарты(Ст.), контроли и образцы пациентов(Обр.) в лунки стрипов
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст.
0 0 1 1 4 4 16 16 64 64 256 256
1 -й 1 -й
Обр. Обр.
2-й
Обр.
2 -й
Обр.
3-й
Обр.
3-й
Обр. и т.д.
4. Добавить 200 мкл МУЛЬТИ буфера в каждую лунку используя рекомендуемую ЭППЕНДОРФ
мультипипетку, после сброса первой порции жидкости или использовать ДЕЛФИЛ диспенсер юнит.
Избегайте выплескивания жидкости из лунки и избегайте касания стрипа или поверхности жидкости
носиком пипетки.
5. Инкубировать в течение 3 часов (+10мин) при комнатной температуре при медленном перемешивании,
используя Плейт шейкер.
6. После инкубации аспирировать и промыть каждый стрип с помощью ДЕЛФИЯ Плейт вошера, используя
программу Х«17 (промывка № 1 ).
7. Добавить 200 мкл разведенной Анти-ФСГ-Еи метки в каждую лунку. Раскапывать также как ДЕЛФИЯ буффер
по 4-му ступени.
--- стр. 237 ---
8. Инкубировать 30 минут (+10мин) с медленным встряхиванием при комнатной температуре.
9. После второй инкубации, аспирировать и промыть каждую лунку с ДЕЛФИЯ Плейт вошером, используя
программу №17 (промывка № 2).
10. Добавить 200 мкл Усиливающего растовра прямо из реагентного флакона в каждую лунку, используя
рекомендуемую ЭППЕНДОРФ мультипипетку, после заполнения Комбинаконечника раствором Усиливающего
раствора или используя ДЕЛФИЯ плейт диспенсер. Избегайте касания носиком пипетки лунки или ее
содержимого.
11. Встряхивайте медленно 5 минут. Сигнал флюоресценции стабилен в течение нескольких часов, если нет
сильного испарения жидкости. Однако, мы рекомендуем измерять в течение 1 часа, чтобы внешние факторы не
оказали влияния на уровень сигнала.
12. Флюоресценция измеряется на флюорометре с временным разрещением. Выберите номер программы 17 для
автоматического измерения и подсчета результатов. Сверьте параметры группы для программы №17 и если
необходимо произведите коррекцию в соответствии со следующим (см. описание к флюрометру для проведения
редакции параметров считывания):
ASSAY TYPE
тип определения
FITTING METHOD
метод обработки
X-AX1S
х-ось
Y-AXIS
у-ось
BLANKS
бланки
STANDARDS
стандарты
STANDARD REPLICATES
стандарты в дупликате
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
UNKNOWN REPLICATES
неизвестные образцы в дубле
IFMA
ИФМА(иммунофлюорометрическое)
SPLINE SMOOTHED
метод “сглаживания”
LOGARITHMIC
логарифмическая
LOGARITHMIC
логарифмическая
2
2
1
4
16
64
256
2
1
4
16
64
256
2
ОСОБЕННОСТИ ОПРЕДЕЛЕНИЯ:
1. Отношение к этому набору как к целому необходимо для успешного использования ДЕЛФИЯ
наборов. Реагенты в этом наборе являются комплексными компонентами. Не смешивайте идентичные реагенты
из различных лотов. Не используйте реагенты после срока годности, указанной на флаконе.
2. Реагенты должны быть доведены до комнатной температуры (+20+25С) до приготовления различных
растворов. Замороженные образцы должны быть нагреты до комнатной температуры при медленном и
осторожном перемешивании. Не используйте вортекс или смешанные образцы пациентов.
--- стр. 238 ---
3. При промывке стрипов следите, чтобы все стрипы были заполнены полностью и одинаково до
верхнего уровня как показано на картинке. После промывки стрипов, проверьте, что стрипы сухие. Если что-
либо осталось в лунках, то необходимо перевернуть планшету и встряхнуть на фильтровальную бумагу.
Аспирирующее/промывочное оборудование не должно находиться заполненным с промывочным
раствором длительный период времени, поскольку промывочные иглы могут быть закупорены и трудно
проходимы для жидкости. В конце рабочего дня аспирировать дистиллированную воду в
аспирирующую/промывочную систему. Промывочное устройство должно быть регулярно промываться
раствором NaCL (ЗОг/Л), а затем дистиллированной водой и 50% этанолом и в конце промыто
дистиллированной водой.
4. Для избежания примеси европия и как результат высокого флюресцентного фона высокие
требования предъявляются к процедуре раскапывания и промывки. Поэтому необычайно важно использовать
рекомендуемые и поставляемые вместе с ДЕЛФИЯ пипетки.
Усиливающий раствор должен быть раскапан только с использованием рекомендуемой ЭППЕНДОРФ
мультипипеткой, и при этом первый объем сбрасывается для полного заполнения. Тот же тип
Комбинаконечника не может быть использован для раскапывания любого другого реагента. После работы
ЭППЕНДОРФ мультипипетка помещается на штатив с наконечником.
При использовании ДЕЛФИЯ плейт диспенсера и ДЕЛФИЯ диспенсера юнита ознакомьтесь с
описанием.
ПОДСЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ:
ДЕЛФИЯ система включает программу для обработки результатов и получения данных в виде
стандартной кривой, концентрации неизвестных пациентов и т.д. (для детали см. описание к флюорометру или к
программе Мультикалк).
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА:
Использование контрольной сыворотки позволяет оценивать качество ежедневных определений.
Рекомендуется, чтобы каждая лаборатория имела свой сывороточный пул на различных уровнях, или
альтернативно использовала коммерческие контроли., например, ЛИПОЧЕК. Высокие и низкие контроли
должны быть использованы в каждом определении; если определения включают более чем один планшет,
контроли должны быть использованы для каждого планшета.
ОГРАНИЧЕНИЯ
Как и для всех диагностических тест-систем, клиническое заключение не может быть основано только
на результатах одного теста и необходимо всестороннее клиническое и лабораторное обследование.
ИНТЕРПРЕТАЦИЯ ДАННЫХ И ОЖИДАЕМЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ:
Значения сывороточной концентрации ФСГ определенные с помощью 1244-017 ДЕЛФИЯ ФСГ
показано в таблице:
Однако в каждой лаборатории необходимо установить свои собственные контроли.
ЖЕНЩИНЫ.
Нормальный менструальный цикл.
ФСГ значения измеренные с помощью ДЕЛФИЯ ФСГ показаны на графике.
Аменоррея. Менопауза: Выское цифры ФСГ в большинстве случаев является индикатором нарушения
менструальной функции у женщин, что в основном вызвано менопаузой. Во время менструлаьного цикла
уровни ФСГ никогда не достигают уровня в менопаузе.
Высокие цифры ФСГ практически всегда свидетельствуют о нарушении овариальной функции, за
исключением случаев гипофизарной аденомы, продуцирующей ФСГ. Обычно ЛГ и другие субъединицы ФСГ
также секретируются. У этих пациентов нормальный уровень эстрогенов сочетается с высоким уровнем
гонадотропинов. Эти условия могут иметь место в короткий период перименопаузы.
Первичная аменорея: Эта ситуация может вызываться нарушением функции яичников, что имеет место
до начала менструации. В этих условиях уровни ФСГ првышают 28 Ед./Л. Первичная амноррея может быть
--- стр. 243 ---
Выполните каждое определение в дубликате как для стандартов, так и для тестируемых образцов.
Стандартная кривая должна быть использована для каждого определения. Образцы и реагенты должны бьгть
доведены до комнатной температуры (+20+25С) до использования.
1. Приготовление реагентов Стабильность после разведения
Промывочный раствор 2 недели при +2+25С в закрытом
контейнере
Перенести 40 мл из Промывочного Концентрата в чистый флакон и растворить добавляя 960 мл
дистиллированной воды для приготовления готового буферного раствора рН==7.8
Анти-ФСГ-Еи метка И спользовать в течение 1 часа
после приготовления
Приготовить необходимый объем раствора метки при смешивании 60 мкл
метки с 3.0 мл МУЛЬТИ буфера для каждого стрипа (см. таблицу).
Важно, чтобы М У Л ЬТИ буфер не контактировал с раствором метки до использования в
работе.
Мы советуем использовать одноразовый пластиковый флакон для приготовления рабочего раствора
метки.
2. Перенести необходимое количество микротитровальных стрипов в рамку- держатель для стрипов
(вернуть оставшиеся стрипы в пластиковую коробку и закрыть). Не использовать больше стрипов, чем вы
можете использовать в течение 30 минут.
3. Раскапать 25 мкл в параллелях ФСГ стандарты (Ст.), контроли и образцы пациентов(Обр.) в лунки стрипов
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст.
0 0 1 1 4 4 16 16 64 64 256 256
1 -й
Обр.
1 -й
Обр.
2 -й
Обр.
2 -й
Обр.
3-й
Обр.
3-й
Обр. и т.д.
4. Добавить 200 мкл МУЛЬТИ буфера в каждую лунку используя рекомендуемую ЭППЕНДОРФ
мультипипетку, после сброса первой порции жидкости или использовать АВТОДЕЛФИЯ диспенсер юнит.
Избегайте выплескивания жидкости из лунки и избегайте касания стрипа или поверхности жидкости
носиком пипетки.
5. Инкубировать в течение 3 часов (+10мин) при комнатной температуре при медленном перемешивании,
используя Плейт шейкер.
6. После инкубации аспирировать и промыть каждый стрип с помощью АВТОДЕЛФИЯ Плейт вошера,
используя программу №17 (промывка № 1 ).
7. Добавить 200 мкл разведенной Анти-ФСГ-Еи метки в каждую лунку. Раскапывать также как АВТОДЕЛФИЯ
буффер по 4-му ступени.
--- стр. 244 ---
8. Инкубировать 30 минут (+10мин) с медленным встряхиванием при комнатной температуре.
9. После второй инкубации, аспирировать и промыть каждую лунку с АВТОДЕЛФИЯ Плейт вошером,
используя программу № 17 (промывка № 2 ).
10. Добавить 200 мкл Усиливающего растовра прямо из реагентного флакона в каждую лунку, используя
рекомендуемую ЭППЕНДОРФ мультипипетку, после заполнения Комбинаконечника раствором Усиливающего
раствора или используя АВТОДЕЛФИЯ плейт диспенсер. Избегайте касания носиком пипетки лунки или ее
содержимого.
11. Встряхивайте медленно 5 минут. Сигнал флюоресценции стабилен в течение нескольких часов, если нет
сильного испарения жидкости. Однако, мы рекомендуем измерять в течение 1 часа, чтобы внешние факторы не
оказали влияния на уровень сигнала.
12. Флюоресценция измеряется на флюорометре с временным разрешением. Выберите номер программы 17 для
автоматического измерения и подсчета результатов. Сверьте параметры группы для программы №17 и если
необходимо произведите коррекцию в соответствии со следующим (см. описание к флюрометру для проведения
редакции параметров считывания):
] ASSAY TYPE IFMA
] тип определения ИФМА(иммунофлюорометрическое)
FITTING METHOD SPLINE SMOOTHED
метод обработки метод' ■ ‘сглаживания”
1 X-AXIS LOGARITHMIC
i Х 'О С Ь логарифмическая
Y-AXIS LOGARITHMIC
j у-ось логарифмическая
BLANKS 2
бланки 2
I STANDARDS 5
1 стандарты 5
1 ■ STANDARD REPLICATES 2
стандарты в дупликате 2
1 STANDARD CONC I
стандарты конц. 1
1 STANDARD CONC 4
1 стандарты конц. 4
1 STANDARD CONC 165■ s стандарты конц. 16
1 STANDARD CONC 64
стандарты конц. 64
11 STANDARD CONC 256
i стандарты конц. 256
1 UNKNOWN REPLICATES 2
неизвестные образцы в дубле 2
ОСОБЕННОСТИ ОПРЕДЕЛЕНИЯ:
1. Отношение к этому набору как к целому необходимо для успешного использования АВТОДЕЛФИЯ
наборов. Реагенты в этом наборе являются комплексными компонентами. Не смешивайте идентичные реагенты
из различных лотов. Не используйте реагенты после срока годности, указанной на флаконе.
2. Реагенты должны быть доведены до комнатной температуры (+20+25С) до приготовления различных
растворов. Замороженные образцы должны быть нагреты до комнатной температуры при медленном и
осторожном перемешивании. Не используйте вортекс или смешанные образцы пациентов.
--- стр. 245 ---
3 . при промывке стрипов следите, чтобы все стрипы были заполнены полностью и одинаково до
верхнего уровня как показано на картинке. После промывки стрипов, проверьте, что стрипы сухие. Если что-
либо осталось в лунках, то необходимо перевернуть планшету и встряхнуть на фильтровальную бумагу.
Аспирирующее/промывочное оборудование не должно находиться заполненным с промывочным
раствором длительный период времени, поскольку промывочные иглы могут быть закупорены и трудно
проходимы для жидкости. В конце рабочего дня аспирировать дистиллированную воду в
аспирирующую/промывочную систему. Промывочное устройство должно быть регулярно промьгваться
раствором NaCL (30г/Л), а затем дистиллированной водой и 50% этанолом и в конце промыто
дистиллированной водой.
4. Для избежания примеси европия и как результат высокого флюресцентного фона высокие
требования предъявляются к процедуре раскапывания и промывки. Поэтому необычайно важно использовать
рекомендуемые и поставляемые вместе с АВТОДЕЛФИЛ пипетки.
Усиливающий раствор должен быть раскапан только с использованием рекомендуемой ЭППЕНДОРФ
мультипипеткой, и при этом первый объем сбрасывается для полного заполнения. Тот же тип
Комбинаконечника не может быть использован для раскапывания любого другого реагента. После работы
ЭППЕНДОРФ мультипипетка помещается на штатив с наконечником.
При использовании АВТОДЕЛФИЛ плейт диспенсера и АВТОДЕЛФИЛ диспенсера юнита
ознакомьтесь с описанием.
ПОДСЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ:
АВТОДЕЛФИЛ система включает программу для обработки результатов и получения данных в виде
стандартной кривой, концентрации неизвестных пациентов и т.д. (для детали см. описание к флюорометру или к
программе Мультикалк).
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА:
Использование контрольной сыворотки позволяет оценивать качество ежедневных определений.
Рекомендуется, чтобы каждая лаборатория имела свой сывороточный пул на различных уровнях, или
альтернативно использовала коммерческие контроли., например, ЛИПОЧЕК. Высокие и низкие контроли
должны быть использованы в каждом определении; если определения включают более чем один планшет,
контроли должны быть использованы для каждого планшета.
ОГРАНИЧЕНИЯ
Как и для всех диагностических тест-систем, клиническое заключение не может быть основано только
на результатах одного теста и необходимо всестороннее клиническое и лабораторное обследование.
ИНТЕРПРЕТАЦИЯ ДАННЫХ И ОЖИДАЕМЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ:
Значения сывороточной концентрации ФСГ определенные с помощью 1244-017 АВТОДЕЛФИЛ ФСГ
показано в таблице:
Однако в каждой лаборатории необходимо установить свои собственные контроли.
ЖЕНЩИНЫ.
Нормальный менструальный цикл.
ФСГ значения измеренные с помощью АВТОДЕЛФИЛ ФСГ показаны на графике.
Аменоррея. Менопауза: Выское цифры ФСГ в большинстве случаев является индикатором нарушения
менструальной функции у женщин, что в основном вызвано менопаузой. Во время менструлаьного цикла
уровни ФСГ никогда не достигают уровня в менопаузе.
Высокие цифры ФСГ практически всегда свидетельствуют о нарушении овариальной функции, за
исключением случаев гипофизарной аденомы, продуцирующей ФСГ. Обычно ЛГ и другие субъединицы ФСГ
также секретируются. У этих пациентов нормальный уровень эстрогенов сочетается с высоким уровнем
гонадотропинов. Эти условия могут иметь место в короткий период перименопаузы.
Первичная аменорея: Эта ситуация может вызываться нарушением функции яичников, что имеет место
до начала менструации. В этих условиях уровни ФСГ првышают 28 Ед./Л. Первичная амноррея может быть
--- стр. 250 ---
для сыворотки или плазмы с гепарином
Выполните каждое определение в дубликате как для стандартов, так и для тестируемых образцов.
Стандартная кривая должна быть использована для каждого определения. Образцы и реагенты должны быть
доведены до комнатной температуры (+20+25С) до использования.
1. Приготовление реагентов Стабильность после разведения
Промывочный раствор 2 недели при +2+25С в закрытом
контейнере
Перенести 40 мл из Промывочного Концентрата в чистый флакон и растворить добавляя 960 мл
дистиллированной воды для приготовления готового буферного раствора рН=7.8
Анти-ПРОЛАКТИН-Еи метка И спользовать в течение 1 часа
после приготовления
Приготовить необходимый объем раствора метки при смешивании 40 мкл
метки с 3.0 мл МУЛЬТИ буфера для каждого стрипа (см. таблицу).
Важно, чтобы М У Л ЬТИ буфер не контактировал с раствором метки до использования в
работе.
Мы советуем использовать одноразовый пластиковый флакон для приготовления рабочего раствора
метки.
2. Перенести необходимое количество микротитровальных стрипов в рамку- держатель для стрипов
(вернуть оставшиеся стрипы в пластиковую коробку и закрыть). Сделайте процедуру превош по
программе 18(1 инкубация). Не использовать больше стрипов, чем вы можете использовать в
течение 30 минут.
3. Раскапать 25 мкл в параллелях ПРОЛАКТИН стандарты(Ст.), контроли и образцы пациентов(Обр.) в
лунки стрипов согласно следующей таблицы: __________________________________________________________
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 И 12
Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст.
0 0 0.25 0.25 2.5 2.5 25 25 125 125 250 250
1 -й
Обр.
1 -й
Обр.
2 -й
Обр.
2-й
Обр.
3-й
Обр.
3-й
Обр. и т.д.
4. Добавить 200 мкл разведенной метки в каждую лунку используя рекомендуемую ЭППЕНДОРФ
мультипипетку, после сброса первой порции жидкости или использовать ДЕЛФИЛ диспенсер юнит.
Избегайте выплескивания жидкости из лунки и избегайте касания стрипа или поверхности жидкости
носиком пипетки.
5. Инкубировать на шейкере в режиме fast в течение 2 минут. Затем инкубировать в течение 90 минут
(+10мин) при комнатной температуре при медленном перемешивании, используя Плейт шейкер.
6. После инкубации аспирировать и промыть каждый стрип с помощью ДЕЛФИЯ Плейт вошера,
используя программу Х“18 (промывка № 1 ).
--- стр. 251 ---
7. Добавить 200 мкл Усиливающего растовра прямо из реагентного флакона в каждую лунку, используя
рекомендуемую ЭППЕНДОРФ мультипипетку, после заполнения Комбинаконечника раствором
Усиливающего раствора или используя ДЕЛФИЯ плейт диспенсер. Избегайте касания носиком пипетки
лунки или ее содержимого.
8. Встряхивайте медленно 5 минут. Сигнал флюоресценции стабилен в течение нескольких часов,
если нет сильного испарения жидкости. Однако, мы рекомендуем измерять в течение 1 часа, чтобы внещние
факторы не оказали влияния на уровень сигнала.
9. Флюоресценция измеряется на флюорометре с временным разрешением. Выберите номер программы
18 для автоматического измерения и подсчета результатов. Сверьте параметры группы для программы №18
и если необходимо произведите коррекцию в соответствии со следующим (см. описание к флюрометру
для проведения редакции параметров считывания);
ASSAY TYPE
тип определения
FITTING METHOD
метод обработки
X-AXIS
х-ось
Y-AXIS
у-ось
BLANKS
бланки
STANDARDS
стандарты
STANDARD REPLICATES
стандарты в дупликате
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
UNKNOWN REPLICATES
неизвестные образцы в дубле
1FMA
ИФМА(иммунофлюорометрическое)
SPLINE SMOOTHED
метод “сглаживания”
LOGARITHMIC
логарифмическая
LOGARITHMIC
логарифмическая
2
2
0.25
2.5
125
250
2
0.25
2.5
125
250
2
ПРОТОКОЛ для ДВУХ ИНКУБАЦИЙ:
для сыворотки или плазмы с любым ант и коагулянтом
Приготовление реагентов также как для процедуры в случае одной инкубации.
2. Перенести необходимое количество микротитровальных стрипов в рамку- держатель для стрипов
(вернуть оставшиеся стрипы в пластиковую коробку и закрыть). Произвести процедуру превош используя
программу №18(2 инкубации). Не использовать больше стрипов, чем вы можете использовать в
течение 30 минут.
3. Раскапать 25 мкл в параллелях ПРОЛАКТИН стандарты(Ст.), контрол и и
лунки стрипов согласно следующей таблицы:
образцы пациентов(Обр.) в
1 8 10 И 12
--- стр. 252 ---
Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст.
0 0 0.25 0.25 2.5 2.5 25 25 125 125 250 250
1-й 1-й
Обр. Обр.
2-й
Обр.
2-й
Обр.
3-й
Обр.
3-й
Обр. и т.д.
4. Добавить 200 мкл инкубационного буфера в каждую лунку используя рекомендуемую
ЭППЕНДОРФ мультипипетку, после сброса первой порции жидкости или использовать ДЕЛФИЯ
диспенсер юнит. Избегайте выплескивания жидкости из лунки и избегайте касания стрипа или
поверхности жидкости носиком пипетки.
5. Инкубировать на шейкере в режиме fast в течение 2 минут. Затем инкубировать в течение 90
(+15мин) при комнатной температуре при медленном перемешивании, используя Плейт шейкер.
минут
ДЕЛФИЯ Плейт вошера,
раскапывания как для
6. После инкубации аспирировать и промыть каждый стрип с помощью
используя программу №18 (промывка N 2! для инкубации №2).
7. Раскапать по 200 мкл разведенной метки, используя тот же принцип
процедуры 4.
8. Инкубировать 90 минут при комнатной температуре без встряхивания.
9. Промыть по программе 18 (№2, промывка №2).
10. Добавить 200 мкл Усиливающего растовра прямо из реагентного флакона в каждую лунку, используя
рекомендуемую ЭППЕНДОРФ мультипипетку, после заполнения Комбинаконечника раствором
Усиливающего раствора или используя ДЕЛФИЯ плейт диспенсер. Избегайте касания носиком пипетки
лунки или ее содержимого.
11. Встряхивайте медленно 5 минут. Сигнал флюоресценции стабилен в течение нескольких часов,
если нет сильного испарения жидкости. Однако, мы рекомендуем измерять в течение 1 часа, чтобы внешние
факторы не оказали влияния на уровень сигнала.
12. Флюоресценция измеряется на флюорометре с временным разрешением. Выберите номер программы
18 для автоматического измерения и подсчета результатов. Сверьте параметры группы для программы №18
и если необходимо произведите коррекцию в соответствии со следующим (см. описание к флюрометру
для проведения редакции параметров считывания):
ASSAY TYPE
тип определения
FITTING METHOD
метод обработки
X-AXIS
Х 'О С Ь
Y-AXIS
у-ось
BLANKS
бланки
STANDARDS
стандарты
STANDARD REPLICATES
стандарты в дупликате
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
IFMA
ИФМА(иммунофлюорометрическое)
SPLINE SMOOTHED
метод “сглаживания”
LOGARITHMIC
логарифм ическая
LOGARITHMIC
логарифмическая
2
0.25
0.25
2 .5
--- стр. 253 ---
2.5
125
125
250
250
2
2
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
UNKNOWN REPLICATES
неизвестные образцы в дубле
ОСОБЕННОСТИ ОПРЕДЕЛЕНИЯ;
1. Отношение к этому набору как к целому необходимо для успешного использования ДЕЛФИЯ
наборов. Реагенты в этом наборе являются комплексными компонентами. Не смешивайте идентичные реагенты
из различных лотов. Не используйте реагенты после срока годности, указанной на флаконе.
2. Реагенты должны быть доведены до комнатной температуры (+20+25С) до приготовления различных
растворов. Замороженные образцы должны быть нагреты до комнатной температуры при медленном и
осторожном перемешивании. Не используйте вортекс или смешанные образцы пациентов.
3. При промывке стрипов следите, чтобы все стрипы были заполнены полностью и одинаково до
верхнего уровня как показано на картинке. После промывки стрипов, проверьте, что стрипы сухие. Если что-
либо осталось в лунках, то необходимо перевернуть планшету и встряхнуть на фильтровальную бумагу.
Аспирирующее/промывочное оборудование не должно находиться заполненным с промьшочным
раствором длительный период времени, поскольку промывочные иглы могут быть закупорены и трудно
проходимы для жидкости. В конце рабочего дня аспирировать дистиллированную воду в
аспирирующую/промывочную систему. Промывочное устройство должно быть регулярно промываться
раствором NaCL (ЗОг/Л), а затем дистиллированной водой и 50% этанолом и в конце промыто
дистиллированной водой.
4. Для избежания примеси европия и как результат высокого флюресцентного фона высокие
требования предъявляются к процедуре раскапывания и промывки. Поэтому необычайно важно использовать
рекомендуемые и поставляемые вместе с ДЕЛФИЯ пипетки.
Усиливающий раствор должен быть раскапан только с использованием рекомендуемой ЭППЕНДОРФ
мультипипеткой, и при этом первый объем сбрасывается для полного заполнения. Тот же тип
Комбинаконечника не может быть использован для раскапывания любого другого реагента. После работы
ЭППЕНДОРФ мультипипетка помеш^ается на штатив с наконечником.
При использовании ДЕЛФИЯ плейт диспенсера и ДЕЛФИЯ диспенсера юнита ознакомьтесь с
описанием.
ПОДСЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ:
ДЕЛФИЯ система включает программу для обработки результатов и получения данных в виде
стандартной кривой, концентрации неизвестных пациентов и т.д. (для детали см. описание к флюорометру или к
программе Мультикалк).
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА;
Использование контрольной сыворотки позволяет оценивать качество ежедневных определений.
Рекомендуется, чтобы каждая лаборатория имела свой сывороточный пул на различных уровнях, или
альтернативно использовала коммерческие контроли., например, ЛИПОЧЕК. Высокие и низкие контроли
должны быть использованы в каждом определении; если определения включают более чем один планшет,
контроли должны быть использованы для каждого планшета.
ОГРАНИЧЕНИЯ
Как и для всех диагностических тест-систем, клиническое заключение не может быть основано только
на результатах одного теста и необходимо всестороннее клиническое и лабораторное обследование.
И Н Т ЕРП РЕТ А Ц И Я Д А Н Н Ы Х И О Ж И Д А Е М Ы Е РЕ ЗУ Л ЬТ А Т Ы :
--- стр. 258 ---
для сыворотки или плазм ы с гепарином
Выполните каждое определение в дубликате как для стандартов, так и для тестируемых образцов.
Стандартная кривая должна быть использована для каждого определения. Образцы и реагенты должны быть
доведены до комнатной температуры (+20+25С) до использования.
1. Приготовление реагентов Стабильность после разведения
Промывочный раствор 2 недели при +2+25С в закрытом
контейнере
Перенести 40 мл из Промывочного Концентрата в чистый флакон и растворить добавляя 960 мл
дистиллированной воды для приготовления готового буферного раствора рН=^7.8
Анти-ПРОЛАКТИН-Еи метка И спользовать в течение 1 часа
после приготовления
Приготовить необходимый объем раствора метки при смешивании 40 мкл
метки с 3.0 мл МУЛЬТИ буфера для каждого стрипа (см. таблицу).
Важно, чтобы М У Л ЬТИ буфер не контактировал с раствором метки до использования в
работе.
Мы советуем использовать одноразовый пластиковый флакон для приготовления рабочего раствора
метки.
2. Перенести необходимое количество микротитровальных стрипов в рамку- держатель для стрипов
(вернуть оставшиеся стрипы в пластиковую коробку и закрыть). Сделайте процедуру превош по
программе 18 (1 инкубация). Не использовать больше стрипов, чем вы можете использовать в
течение 30 минут.
3. Раскапать 25 мкл в параллелях ПРОЛАКТИН стандарты(Ст-), контроли и образцы пациентов(Обр.) в
1
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
i '3 Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст.
1
1
0 0 0.25 0.25 2.5 2.5 25 25 125 125 250 250
■ i
1-й
Обр.
1-й
Обр.
2-й
Обр.
2-й
Обр.
3-й
Обр.
3-й
Обр. и т.д.
4. Добавить 200 мкл разведенной метки в каждую лунку используя рекомендуемую ЭППЕНДОРФ
мультипипетку, после сброса первой порции жидкости или использовать АВТОДЕЛФИЯ диспенсер юнит.
Избегайте выплескивания жидкости из лунки и избегайте касания стрипа или поверхности жидкости
носиком пипетки.
5. Инкубировать на шейкере в режиме fast в течение 2 минут. Затем инкубировать в течение 90 минут
(+10мин) при комнатной температуре при медленном перемешивании, используя Плейт шейкер.
6. После инкубации аспирировать и промыть каждый стрип с помощью АВТОДЕЛФИЯ Плейт
вошера, используя программу №18 (промывка №1).
--- стр. 259 ---
7. Добавить 200 мкл Усиливающего растовра прямо из реагентного флакона в каждую лунку, используя
рекомендуемую ЭППЕНДОРФ мультипипетку, после заполнения Ком бинаконечника раствором
Усиливающего раствора или используя АВТОДЕЛФИЯ плейт диспенсер. Избегайте касания носиком
пипетки лунки или ее содержимого,
8. Встряхивайте медленно 5 минут. Сигнал флюоресценции стабилен в течение нескольких часов,
если нет сильного испарения жидкости. Однако, мы рекомендуем измерять в течение 1 часа, чтобы внешние
факторы не оказали влияния на уровень сигнала.
9. Флюоресценция измеряется на флюорометре с временным разрешением. Выберите номер программы
18 для автоматического измерения и подсчета результатов. Сверьте параметры группы для программы №18
и если необходимо произведите коррекцию в соответствии со следующим (см. описание к флюрометру
для проведения редакции параметров считывания):
ASSAY TYPE IFMA
тип определения ИФМА(иммунофлюорометрическое)
FITTING METHOD SPLINE SMOOTHED
метод обработки метод “сглаживания”
X-AX1S LOGARITHMIC
х-ось логарифмическая
Y-AXIS LOGARITHMIC
у-ось логарифмическая
BLANKS 2
бланки 2
STANDARDS 5
стандарты 5
STANDARD REPLICATES 2
стандарты в дупликате 2
STANDARD CONC 0.25
стандарты конц. 0.25
STANDARD CONC 2.5
стандарты конц. 2.5
STANDARD CONC 125
стандарты конц. 125 f
STANDARD CONC 250 ;
стандарты конц. 250
UNKNOWN REPLICATES 2 !
неизвестные образцы в дубле 2
ПРОТОКОЛ для ДВУХ ИНКУБАЦИЙ:
для сыворотки или плазмы с любым антикоагулянтом
Приготовление реагентов также как для процедуры в случае одной инкубации.
2. Перенести необходимое количество микротитровальных стрипов в рамку- держатель для стрипов
(вернуть оставшиеся стрипы в пластиковую коробку и закрыть). Произвести процедуру превош используя
программу №18(2 инкубации). Не использовать больше стрипов, чем вы можете использовать в
течение 30 минут.
3. Раскапать 25 мкл в параллелях ПРОЛАКТИН стандарты(Ст.), контроли и
лунки стрипов согласно следующей таблицы;
образцы пациентов(Обр.) в
1 8 10 11 12
--- стр. 260 ---
4. Добавить 200 мкл инкубационного буфера в каждую лунку используя рекомендуемую
ЭППЕНДОРФ мультипипетку, после сброса первой порции жидкости или использовать АВТОДЕЛФКЯ
диспенсер юнит. Избегайте выплескивания жидкости из лунки и избегайте касания стрипа или
поверхности жидкости носиком пипетки.
5. Инкубировать на шейкере в режиме fast в течение 2 минут. Затем инкубировать в течение 90
(+15мин) при комнатной температуре при медленном перемешивании, используя Плейт шейкер.
минут
6. После инкубации аспирировать и промыть каждый стрип с помощью
вошера, используя программу №18 (промывка №1 для инкубации №2).
АВТОДЕЛФИЯ Плейт
7. Раскапать по 200 мкл разведенной метки, используя тот же принцип раскапывания как для
процедуры 4.
8. Инкубировать 90 минут при комнатной температуре без встряхивания.
9. Промыть по программе 18 (№2, промывка №2).
10. Добавить 200 мкл Усиливающего растовра прямо из реагентного флакона в каждую лунку, используя
рекомендуемую ЭППЕНДОРФ мультипипетку, после заполнения Комбинаконечника раствором
Усиливающего раствора или используя АВТОДЕЛФИЯ плейт диспенсер. Избегайте касания носиком
пипетки лунки или ее содержимого.
11. Встряхивайте медленно 5 минут. Сигнал флюоресценции стабилен в течение нескольких часов,
если нет сильного испарения жидкости. Однако, мы рекомендуем измерять в течение 1 часа, чтобы внешние
факторы не оказали влияния на уровень сигнала.
12. Флюоресценция измеряется на флюорометре с временным разрешением. Выберите номер программы
18 для автоматического измерения и подсчета результатов. Сверьте параметры группы для программы №18
и если необходимо произведите коррекцию в соответствии со следующим (см. описание к флюрометру
для проведения редакции параметров считывания):
ASSAY TYPE
тип определения
FITTING METHOD
метод обработки
X-AXIS
х-ось
Y-AX1S
у-ось
BLANKS
бланки
STANDARDS
стандарты
STANDARD REPLICATES
стандарты в дупликате
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
IFMA
ИФМА(иммунофлюорометрическое)
SPLINE SMOOTHED
метод “сглаживания”
LOGARITHMIC
логарифм ическая
LOGARITHMIC
логарифм ическая
2
0.25
0.25
2 .5
--- стр. 261 ---
стандарты конц. 2.5
STANDARD CONC 125
стандарты конц. 125
STANDARD CONC 250
стандарты конц. 250
UNKNOWN REPLICATES 2
неизвестные образцы в дубле 2
ОСОБЕННОСТИ ОПРЕДЕЛЕНИЯ:
1. Отношение к этому набору как к целому необходимо для успешного использования АВТОДЕЛФИЯ
наборов. Реагенты в этом наборе являются комплексными компонентами. Не смешивайте идентичные реагенты
из различных лотов. Не используйте реагенты после срока годности, указанной на флаконе.
2. Реагенты должны быть доведены до комнатной температуры (+20+25С) до приготовления различных
растворов. Замороженные образцы должны быть нагреты до комнатной температуры при медленном и
осторожном перемешивании. Не используйте вортекс или смешанные образцы пациентов.
3. При промывке стрипов следите, чтобы все стрипы были заполнены полностью и одинаково до
верхнего уровня как показано на картинке. После промывки стрипов, проверьте, что стрипы сухие. Если что-
либо осталось в лунках, то необходимо перевернуть планшету и встряхнуть на фильтровальную бумагу.
Аспирирующее/промывочное оборудование не должно находиться заполненным с промывочным
раствором длительный период времени, поскольку промывочные иглы могут быть закупорены и трудно
проходимы для жидкости. В конце рабочего дня аспирировать дистиллированную воду в
аспирирующую/промывочную систему. Промывочное устройство должно быть регулярно промываться
раствором NaCL (ЗОг/Л), а затем дистиллированной водой и 50% этанолом и в конце промыто
дистиллированной водой.
4. Для избежания примеси европия и как результат высокого флюресцентного фона высокие
требования предъявляются к процедуре раскапывания и промывки. Поэтому необычайно важно использовать
рекомендуемые и поставляемые вместе с АВТОДЕЛФИЯ пипетки.
Усиливающий раствор должен быть раскапан только с использованием рекомендуемой ЭППЕНДОРФ
мультипипеткой, и при этом первый объем сбрасывается для полного заполнения. Тот же тип
Комбинаконечника не может быть использован для раскапывания любого другого реагента. После работы
ЭППЕНДОРФ мультипипетка помешается на штатив с наконечником.
При использовании АВТОДЕЛФИЯ плейт диспенсера и АВТОДЕЛФИЯ диспенсера юнита
ознакомьтесь с описанием.
ПОДСЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ:
АВТОДЕЛФИЯ система включает программу для обработки результатов и получения данных в виде
стандартной кривой, концентрации неизвестных пациентов и т.д. (для детали см. описание к флюорометру или к
программе Мультикалк).
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА:
Использование контрольной сыворотки позволяет оценивать качество ежедневных определений.
Рекомендуется, чтобы каждая лаборатория имела свой сывороточный пул на различных уровнях, или
альтернативно использовала коммерческие контроли., например, ЛИПОЧЕК. Высокие и низкие контроли
должны быть использованы в каждом определении; если определения включают более чем один планшет,
контроли должны быть использованы для каждого планшета.
ОГРАНИЧЕНИЯ
Как и для всех диагностических тест-систем, клиническое заключение не может быть основано только
на результатах одного теста и необходимо всестороннее клиническое и лабораторное обследование.
И Н Т ЕРП РЕТ А Ц И Я Д А Н Н Ы Х И О Ж И Д А Е М Ы Е РЕ ЗУ Л ЬТ А Т Ы :
--- стр. 266 ---
Образцы могут быть сохранены 12 часов при комнатной температуре или 3 дня при +2+8С.
Для более длительного периода неразведенные образцы могут храниться при -20 С. Избегайте
повторного замораживания размораживания.
МЕРЫ П РЕД О С ТО РО Ж Н О С ТИ :
Для диагностики ин витро.
Следует соблюдать правила предостороженности СШ А № CDC 88-8395 или местные правила.
Можно считать все образцы крови пациентов как потенциально инфицированные.
Реагенты содержат азид натрия в качестве консерванта. Азид натрия может
взаимодействовать с металлическими поверхностями с образованием азидов металлов. Для
предотвращения образования азидов металлов необходимо промыть большим количеством воды.
Для дезинфекции всех сливных реагентов пользуйтесь правилами местных контроллирующих
организаций.
ПРОТОКОЛ О ПРЕДЕЛЕНИЯ:
Выполните каждое определение в дубликате как для стандартов, так и для тестируемых
образцов. Стандартная кривая должна быть использована для каждого определения. Образцы и
реагенты должны быть доведены до комнатной температуры (+20+25С ) до использования.
1. Приготовление реагентов Стабильность после разведения
Стандарты 5 недель при +2-+8С
Добавьте 1.0 мл дистиллированной воды в каждый флакон Т стандартов и перемешать
нежно. Приготовьте минимум за 30 минут до раскапывания.
T-Eu метка 5 недель при +2+8 С
(концентрат)
Добавьте 0.3 мл дистиллированной воды во флакон с меткой и перемешать нежно.
Приготовьте минимум за 30 минут до раскапывания.
Т антисыворотка 5 недель при +2+8С
Растворяется по такой ж е схеме как и для метки.
Промывочный раствор 2 недели +2+25С в закрытом
контейнере
Перенести 40 мл из Промывочного Концентрата в чистый флакон и растворить добавляя 960
мл дистиллированной воды для приготовления готового буферного раствора pH=7.8
T-Eu метка Приготовить и исполь зовать в течен ие 1 часа
Приготовить по схеме смешивая 30 мкл концентрата метки с 1.5 мл Т инкубационного
буфера на один стрип (см. таблицу)
В ажно, чтобы ин кубационны й буф ер не контактировал с раствором метки до
использования в работе.
Мы советуем использовать одноразовый пластиковый флакон для приготовления рабочих
растворов метки и антисыворотки.
Т антисыворотка П риготовить и исполь зовать в течен ие 1 часа
--- стр. 267 ---
Приготовить по схеме смешивая 30 мкл концентрата метки с 1.5 мл Т
буфера на один стрип (см. таблицу)
В ажно, чтобы инкубационны й буф ер не ко нтактировал с р аствором
использования в работе.
инкубационного
метки до
Мы советуем использовать одноразовый пластиковый флакон для приготовления рабочих
растворов метки и антисыворотки.
2. Перенести необходимое количество микротитровальных стрипов в рамку- держатель для
стрипов (вернуть оставшиеся стрипы в пластиковую коробку и закрыть). Промыть кажды стрип с
помощью ДЕЛФ ИЯ плейт вошера, используя программу 50 (превош). Не промывайте больше
стрипов, чем вы можете использовать в течение 30 минут.
3.______Раскапать по 25 мкл Т стакдарты(Ст.) и образцы (Обр.) тестируемых
______пациентов согласно нижеприведенной схемы: _________________________
сывороток
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст.
А А В В С С Д Д Е Е Ф Ф
1-й 1-й 2-й 2-й
Обр. Обр. Обр. Обр. и т.д.
4. Добавить по 100 мкл разведенной Т метки в каждую лунку с использованием Э ппендорф
мультипипетты . Избегайте касания поверхности лунки.
5. Добавить по 100 мкл раствора Т антисыворотки в каждую лунку с
Эппендорф мультипипетты.
использование
6. Инкубирование 2 часа (+10 минут) при
перемешивании, используя ДЕЛФИЯ
комнатной температуре
плейтшейкер.
при медленном
7. Аспирация и отмывка с использованием ДЕЛФ ИЯ плейт вошера по
(промывка).
программе №50
8. Добавить 200 мкл Усиливающего растовра прямо из реагентного флакона
используя рекомендуемую Э ППЕНДО РФ мультипипетку, после заполнения
раствором Усиливающего раствора или используя ДЕЛФ ИЯ плейт диспенсер,
носиком пипетки лунки или ее содержимого.
9. Встряхивайте в режиме “медленно” 5 минут. Сигнал флюоресценции
течение нескольких часов, если нет сильного испарения жидкости. Однако,
измерять в течение 1 часа, чтобы внешние факторы не оказали влияния на уровень сигнала.
10. Флюоресценция измеряется на флюорометре с временным разрешением. Выберите номер
программы 50 для автоматического измерения и подсчета результатов. Сверьте параметры
группы для программы № 50 и если необходимо произведите коррекцию в соответствии со следующим
(см. описание к флюрометру для проведения редакции параметров считывания);
в каждую лунку,
Комбинаконечника
Избегайте касания
стабилен в
мы рекомендуем
ASSAY TYPE
тип определения
FITTIN G M E TH O D
метод обработки
X-AXIS
х-ось
FIA
ФИА
SPLINE S M O O TH E D
метод "сглаживания"
LO G AR ITHM IC
логарифмическая
--- стр. 268 ---
Y-AXIS
у-ось
BLANKS
бланки О
STANDARDS
стандарты
STANDARD R EPLIC ATES
стандарты в дупликате 2
STANDARD C O N C
стандарты конц.
STANDARD C O NC
стандарты конц.
STANDARD C O N C
стандарты конц.
STANDARD C O N C
стандарты конц.
STANDARD C O N C
стандарты конц.
STANDARD C O N C
стандарты конц.
U N K NO W N REPLICATES
неизвестные образцы в дубле 2
В/В макс
В/Вмакс
О
6
6
2 Убедитесь, чтобы концентрация
стандартов, указанная на флаконах
А совпадала с задаваемой. Если не
А совпадает, введите новые.
В
В
С
С
D
Д
Е
Е
F
Ф
2
О С О БЕН НО СТИ О ПРЕДЕЛЕНИЯ:
1. Отношение к этому набору как к целому необходимо для успешного использования ДЕЛФИЯ
наборов. Реагенты в этом наборе являются комплексными компонентами. Не смешивайте идентичные
реагенты из различных лотов. Не используйте реагенты после срока годности, указанной на флаконе.
2. Реагенты должны быть доведены до комнатной температуры (+20+25С ) до приготовления
различных растворов. Замороженные образцы должны быть нагреты до комнатной температуры при
медленном и осторожном перемешивании. Не используйте вортекс или смешанные образцы
пациентов.
3. При промывке стрипов следите, чтобы все стрипы были заполнены полностью и одинаково
до верхнего уровня как показано на картинке. После промывки стрипов, проверьте, что стрипы сухие.
Если что-либо осталось в лунках, то необходимо перевернуть планшету и встряхнуть на
фильтровальную бумагу.
Аспирирующее/промывочное оборудование не должно находиться заполненным с
промывочным раствором длительный период времени, поскольку промывочные иглы могут быть
закупорены и трудно проходимы для жидкости. В конце рабочего дня аспирировать дистиллированную
воду в аспирирующую/промывочную систему. Промывочное устройство должно быть регулярно
промываться раствором NaCL (ЗОг/Л), а затем дистиллированной водой и 50% этанолом и в конце
промыто дистиллированной водой.
4. Для избежания примеси европия и как результат высокого флюресцентного фона вьюокие
требования предъявляются к процедуре раскапывания и промывки. Поэтому необычайно важно
использовать рекомендуемые и поставляемые вместе с ДЕЛФ ИЯ пипетки.
Усиливающий раствор должен быть раскапан только с использованием рекомендуемой
ЭППЕНДО РФ мультипипеткой, и при этом первый объем сбрасывается для полного заполнения. Тот
же тип Ком б и наконечника не может быть использован для раскапывания любого другого реагента.
После работы Э ППЕНДО РФ мультипипетка помещается на штатив с наконечником.
При использовании ДЕЛФ ИЯ плейт диспенсера и ДЕЛФ ИЯ диспенсера юнита ознакомьтесь с
описанием.
ПО ДС ЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ:
ДЕЛФИЯ система включает программу для обработки результатов и получения данных в виде
стандартной кривой, концентрации неизвестных пациентов и т.д. (для детали см. описание к
флюорометру или к программе Мультикалк).
--- стр. 273 ---
Образцы могут быть сохранены 12 часов при комнатной температуре или 3 дня при +2+8С.
Для более длительного периода неразведенные образцы могут храниться при -20 С. Избегайте
повторного замораживания размораживания.
МЕРЫ П РЕД О С ТО РО Ж Н О С ТИ :
Для диагностики ин витро.
Следует соблюдать правила предостороженности США № C DC 88-8395 или местные правила.
Можно считать все образцы крови пациентов как потенциально инфицированные.
Реагенты содержат азид натрия в качестве консерванта. Азид натрия может
взаимодействовать с металлическими поверхностями с образованием азидов металлов. Для
предотвращения образования азидов металлов необходимо промыть большим количеством воды.
Для дезинфекции всех сливных реагентов пользуйтесь правилами местных контроллирующих
организаций.
ПРОТОКОЛ О ПРЕДЕЛЕНИЯ:
Выполните каждое определение в дубликате как для стандартов, так и для тестируемых
образцов. Стандартная кривая должна быть использована для каждого определения. Образцы и
реагенты должны быть доведены до комнатной температуры (+20+25С ) до использования.
1. Приготовление реагентов Стабильность после разведения
Стандарты 5 недель при +2-+8С
Добавьте 1.0 мл дистиллированной воды в каждый флакон Т стандартов и перемешать
нежно. Приготовьте минимум за 30 минут до раскапывания.
T-Eu метка 5 недель при +2+8 С
(концентрат)
Добавьте 0.3 мл дистиллированной воды во флакон с меткой и перемешать нежно.
Приготовьте минимум за 30 минут до раскапывания.
Т антисыворотка 5 недель при +2+8С
Растворяется по такой ж е схеме как и для метки.
Промывочный раствор 2 недели +2+25С в закрытом
контейнере
Перенести 40 мл из Промывочного Концентрата в чистый флакон и растворить добавляя 960
мл дистиллированной воды для приготовления готового буферного раствора рН=7.8
T-Eu метка П риготовить и исполь зовать в течен ие 1 часа
Приготовить по схеме смешивая 30 мкл концентрата метки с 1.5 мл Т инкубационного
буфера на один стрип (см. таблицу)
В ажно, чтобы инкубационны й буф ер не контактировал с раствором метки до
использования в работе.
Мы советуем использовать одноразовый пластиковый флакон для приготовления рабочих
растворов метки и антисыворотки.
Т антисыворотка П риготовить и исполь зовать в течен и е 1 часа
--- стр. 274 ---
Приготовить по схеме смешивая 30 мкл концентрата метки с 1.5 мл Т
буфера на один стрип (см. таблицу)
Важно, чтобы инкубационны й буф ер не контактировал с раствором
использования в работе.
инкубационного
метки до
Мы советуем использовать одноразовый пластиковый флакон для приготовления рабочих
растворов метки и антисыворотки.
2. Перенести необходимое количество микротитровальных стрипов в рамку- держатель для
Стрипов (вернуть оставшиеся стрипы в пластиковую коробку и закрыть). Промыть кажды стрип с
помощью АВТОДЕЛФ ИЯ плейт вошера, используя программу 50 (превош). Не промывайте
больше стрипов, чем вы можете использовать в течение 30 минут.
3. Раскапать по 25 мкл Т стандарты (Ст.) и образцы (Об р.) тестируемых сывороток
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст.
А А В В С С Д Д Е Е Ф Ф
1-й 1-й 2-й 2-й
Обр. Обр. Обр. Обр. и т.д.
4. Добавить по 100 мкл разведенной Т метки в каждую лунку с использованием Эппендорф
мультипипетты . Избегайте касания поверхности лунки.
5. Добавить по 100 мкл раствора Т антисыворотки в каждую лунку с
Эппендорф мультипипетты.
использование
6. Инкубирование 2 часа (+10 минут) при комнатной температуре при медленном
перемешивании, используя АВТОДЕЛФ ИЯ плейтшейкер.
7. Аспирация и отмывка с использованием АВТОДЕЛФ ИЯ плейт вошера по
(промывка).
программе № 50
8. Добавить 200 мкл Усиливающего растовра прямо из реагентного флакона
используя рекомендуемую ЭППЕНДО РФ мультипипетку, после заполнения
раствором Усиливающего раствора или используя А ВТОДЕЛФ ИЯ плейт диспенсер
касания носиком пипетки лунки или ее содержимого.
в каждую лунку,
Комбинаконечника
Избегайте
9. Встряхивайте в режиме “медленно” 5 минут. Сигнал флюоресценции стабилен в
течение нескольких часов, если нет сильного испарения жидкости. Однако, мы рекомендуем
измерять в течение 1 часа, чтобы внешние факторы не оказали влияния на уровень сигнала.
10. Флюоресценция измеряется на флюорометре с временным разрешением. Выберите номер
программы 50 для автоматического измерения и подсчета результатов. Сверьте параметры
группы для программы № 50 и если необходимо произведите коррекцию в соответствии со следующим
(см. описание кф лю рометрудля проведения редакции параметров считывания);
ASSAY ТУР Е
тип определения
FITTIN G M E TH O D
метод обработки
X-AXIS
х-ось
FIA
ФИА
SPLINE S M O O TH E D
метод “сглаживания”
LO G AR ITHM IC
логарифмическая
--- стр. 275 ---
Y-AXIS
у-ось
BLANKS
бланки О
STANDARDS
стандарты
STANDARD R EPLIC ATES
стандарты в дупликате 2
STA N DA RD C O N C
стандарты конц.
STANDARD C O N C
стандарты конц.
STANDARD C O N C
стандарты конц.
STANDARD CO NC
стандарты конц.
STANDARD C O N C
стандарты конц.
STANDARD C O N C
стандарты конц.
U NKNO W N R EPLIC ATES
неизвестные образцы в дубле 2
О С О БЕН НО СТИ О ПРЕДЕЛЕНИЯ:
В/В макс
В/Вмакс
О
6
6
2 Убедитесь, чтобы концентрация
стандартов, указанная на флаконах
А совпадала с задаваемой. Если не
А совпадает, введите новые.
В
В
С
С
D
Д
Е
Е
F
Ф
2
1. Отношение к этому набору как к целому необходимо для успешного использования
АВТОДЕЛФИЯ наборов. Реагенты в этом наборе являются комплексными компонентами. Не
смешивайте идентичные реагенты из различных лотов. Не используйте реагенты после срока
годности, указанной на флаконе.
2. Реагенты должны быть доведены до комнатной температуры (+20+25С ) до приготовления
различных растворов. Замороженные образцы должны быть нагреты до комнатной температуры при
медленном и осторожном перемешивании. Не используйте вортекс или смешанные образцы
пациентов.
3. При промывке стрипов следите, чтобы все стрипы были заполнены полностью и одинаково
до верхнего уровня как показано на картинке. После промывки стрипов, проверьте, что стрипы сухие.
Если что-либо осталось в лунках, то необходимо перевернуть планшету и встряхнуть на
фильтровальную бумагу.
Аспирирующее/промывочное оборудование не должно находиться заполненным с
промывочным раствором длительный период времени, поскольку промывочные иглы могут быть
закупорены и трудно проходимы для жидкости. В конце рабочего дня аспирировать дистиллированную
воду в аспирирующую/промывочную систему. Промывочное устройство должно быть регулярно
промываться раствором NaCL (ЗОг/Л), а затем дистиллированной водой и 50% этанолом и в конце
промыто дистиллированной водой.
4. Для избежания примеси европия и как результат высокого флюресцентного фона высокие
требования предъявляются к процедуре раскапывания и промывки. Поэтому необычайно важно
использовать рекомендуемые и поставляемые вместе с АВТОДЕЛФ ИЯ пипетки.
Усиливающий раствор должен быть раскапан только с использованием рекомендуемой
ЭППЕНДО РФ мультипипеткой, и при этом первый объем сбрасывается для полного заполнения. Тот
же тип Комбинаконечника не может быть использован для раскапывания любого другого реагента.
После работы Э ППЕНДО РФ мультипипетка помещается на штатив с наконечником.
При использовании АВТОДЕЛФ ИЯ плейт диспенсера и АВТОДЕЛФ ИЯ диспенсера юнита
ознакомьтесь с описанием.
ПО ДС ЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ:
АВТОДЕЛФ ИЯ система включает программу для обработки результатов и получения данных в
виде стандартной кривой, концентрации неизвестных пациентов и т.д. (для детали см, описание к
флюорометру или к программе Мультикалк).
--- стр. 277 ---
в
ДЕЛФ ИЯ П р о г е с т е р о н
OELFIA P r o g e s te r o n e
Производитель - W ALLAC Оу, Финляндия
Для диагностического применения in vitro.
ФЛЮОРОМЕТРИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ С РАЗРЕШЕНИЕМ ПО ВРЕМЕНИ ДЛЯ КОЛИЧЕСТВЕННОГО
ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПРОГЕСТЕРОНА В ОБРАЗЦАХ СЫВОРОТКИ КРОВИ ЧЕЛОВЕКА.
ДЛЯ ПРИМЕНЕНИЯ В 1Ы VITRO ДИАГНОСТИКЕ
96 ОПРЕДЕЛЕНИЙ
НАЗНАЧЕНИЕ-.
Набор предназначен для определения Прогестерона в образцах сыворотки крови человека. Принцип основан на
иммунофлюоресцентом анализе, в котором определяемая молекула антител к ПРОГЕСТЕРОНу
взаимодействует по типу реакции антиген антитело с сорбированными на поверхности планшета антигеном
против антител к ПРОГЕСТЕРОНу и вторыми антителами, меченые флюоресцентной меткой. В результате
реакции образуется высокофлюоресцентное соединение, концентрация которого определяется на приборе-
флюорометре ДЕЛФИЯ/ВИКТОР. Концентрация определяемого флюоресцирующего соединения прямо
пропорциональна количеству антител к ПРОГЕСТЕРОНу в образцах сыворотки крови человека.
СОСТАВ НАБОРА;
1 .Прогестерон стандарты; Во флаконах, лиофиллизированные. К-во - 6 шт.
2.Прогестерон-Еи раствор. Во флаконе, лиофиллизированный К-во - 2 шт.
3 .Анти-прогестерон раствор (кроличьи) Во флаконе, лиофиллизированныые. К-во - 2 шт.
4.Прогестерон инкубационный буфер; 30 мл(фл). К-во - 1 шт.
5.Анти-кроличьи IgG микротитрационные стрипы 96 луночные; К-во - 1 шт
6.Штрих кодовые метки для кассеты с реагентами. К-во - 3 шт.
ПРИНЦ ИП МЕТОДА:
ДЕЛФ ИЯ П Р О ГЕ С ТЕ РО Н определение основано на твердофазном, флюороиммуном
определении с разрешением по времени на основе конкуренции между меченым европием
ПРОГЕСТЕРОНОМ и ПРОГЕСТЕРОНОМ в тестируемом образце за ограниченное количество мест
связывания на П Р О ГЕ С ТЕ РО Н -специфических моноклональных антителах (кроличьи). Стандарты,
контроли и образца пациентов, содержащие П Р О ГЕ С ТЕ РО Н ингибируют связывание меченого
европием П Р О ГЕ С ТЕ Р О Н а с антителами. Блокирующие агенты в П Р О ГЕ С ТЕ РО Н инкубационном
буфере предотвращают выделение П Р О ГЕ С ТЕ РО Н а из связанного с белками состояния. Второе
антитело взаимодействующее с анти-кроличьими антителами, которые покрывают поверхность лунок и
представляют твердую фазу, определяя высококачественное разделение антител-связанных и
свободных антигенов П Р О ГЕ С ТЕ РО Н а. В этом определении только одна инкубационная ступень.
Усиливающий раствор диссоциирует ионы европия из меченого П Р О ГЕ С ТЕ РО Н а в раствор,
где они формируют высокофлюоресцентные хелатные комплексы с компонентами усиливающего
раствора. Флюоресценция каждой лунки в последующем измеряется. Флюоресцентный сигнал каждого
образца обратно пропорционален количеству П Р О ГЕ С ТЕ РО Н а в образце.
Каждый ДЕЛФ ИЯ П Р О ГЕС ТЕРО Н набор содержит реагентов необходимых для 96
определений.
Срок годности набора указан на внешней стороне коробки. Хранение при +2+8 С.
--- стр. 278 ---
Данный набор является частью комплексной системы иммунодиагностических реагентов и
оборудования. ДЕЛФ ИЯ система требует следующие компоненты, которые могут быть поставлены или
от WALLAC 0 Y или от его дистрибьютеров:
1. Флюорометр с временным разрешением плюс принтер и внешний компьютер.
2. Автоматический вошер - ДЕЛФ ИЯ плейтвошер (Кат.№ 1296-024 или1296-026)
3. Автоматический шейкер-ДЕЛФИЯ плейтш ейкер(Кат.№ 1296-001или1296-003)
4. Пипетка для разливки ДЕЛФ ИЯ буфера и метки - Э ППЕНДО РФ М УЛ Ь ТИ П И П Е ТКА (1296-014) с 5 мл
Комби наконечниками (1296-016) или в качестве альтернативы ДЕЛФ ИЯ плейт диспенсер с ДЕЛФИЯ
диспенсер юнит (1296-041 или 1296-043).
5. Пипетка для разливки Усиливающего раствора - Э ППЕНДО РФ мультипипетка (1296-014) с 5 мл
Комби наконечниками (1296-016) или альтернативно ДЕЛФИЯ плейт диспенсер (1296-041).
6. ДЕЛФИЯ растворитель I (Кат.№ В127-100, В128-100).
В дополнении к ДЕЛФ ИЯ системе необходимо следующее;
-дозирующая пипетка для разливки микролитровых объемов
- пипетки для разливки миллитровых объемов НЭ буфера требуемого для приготовления
раствора метки и антител
- дистиллированная вода
СБОР ОБРАЗЦОВ И ХРАНЕНИЕ:
Получение крови посредством венопункции, образование сгустка и выделение сыворотки
посредством центрифугирования. Плазма, полученна с использованием ЭДТА и цитрата натрия не
может быть использована, вследствии воздействия на хелатирующий европий. Однако может
применяться плазма крови полученная с гепарином. Гемолитическая (гемоглобин>2г/Л), липемическая
(>2 г/Л) и иктерическая (билирубин>30 мкмоль/Л) сыворотки использовать не рекомендуется. Если
концентрация превышает 50 нмоль/Л следует развести сыворотки или нормальной женской
сывороткой или ДЕЛФ ИЯ дилюентом I.
Образцы могут быть сохранены 12 часов при комнатной температуре или 3 дня при +2+8С,
Для более длительного периода неразведенные образцы могут храниться при -20 С. Избегайте
повторного замораживания размораживания.
МЕРЫ П Р ЕД О С ТО РО Ж Н О С ТИ ;
Для диагностики ин витро.
Следует соблюдать правила предостороженности СШ А № CDC 88-8395 или местные правила.
Можно считать все образцы крови пациентов как потенциально инфицированные.
Реагенты содержат азид натрия в качестве консерванта. Азид натрия может
взаимодействовать с металлическими поверхностями с образованием азидов металлов. Для
предотвращения образования азидов металлов необходимо промыть большим количеством воды.
Для дезинфекции всех сливных реагентов пользуйтесь правилами местных контроллирующих
организаций.
Флюоресценция измеряется на флюорометре с временным разрешением. Выберите номер
программы 50 для автоматического измерения и подсчета результатов. Сверьте параметры
группы для программы № 50 и если необходимо произведите коррекцию в соответствии со следующим
(см. описание к флюрометру для проведения редакции параметров считывания):
ASSAY TYP E FIA
тип определения ФИ А
FITTIN G M E TH O D SPLINE S M O O TH E D
М А Т Е Р И А Л Ы Н ЕО БХ О Д И М Ы Е, Н О Н Е П О С Т А В Л Я Е М Ы Е
С Н А Б О РО М :
--- стр. 279 ---
метод обработки метод “сглаживания"
X-A XIS LO G AR ITHM IC
х-ось логарифмическая
Y-A XIS В/Вмакс
у-ось В/Вмакс
BLANKS О
бланки О
STA N DA RD S 6
стандарты 6
STANDARD REPLIC ATES 2 Убедитесь, чтобы концентрация
стандарты в дупликате 2 стандартов, указанная на флаконах
STANDARD C O N C А совпадала с задаваемой. Если не
стандарты конц. А совпадает, введите новые.
STANDARD C O N C В
стандарты конц. В
STANDARD C O N C С
стандарты конц. С
STANDARD C O N C D
стандарты конц. Д
STANDARD C O N C Е
стандарты конц. Е
STANDARD C O N C F
стандарты конц. Ф
UNK NO W N REPLIC ATES 2
неизвестные образцы в дубле 2
О С О БЕН НО СТИ О ПРЕДЕЛЕНИЯ:
1. Отношение к этому набору как к целому необходимо для успешного использования ДЕЛФИЯ
наборов. Реагенты в этом наборе являются комплексными компонентами. Не смешивайте идентичные
реагенты из различных лотов. Не используйте реагенты после срока годности, указанной на флаконе.
2. Реагенты должны быть доведены до комнатной температуры (+20+25С ) до приготовления
различных растворов. Замороженные образцы должны быть нагреты до комнатной температуры при
медленном и осторожном перемешивании. Не используйте вортекс или смешанные образцы
пациентов.
3. При промывке стрипов следите, чтобы все стрипы были заполнены полностью и одинаково
до верхнего уровня как показано на картинке. После промывки стрипов, проверьте, что стрипы сухие.
Если что-либо осталось в лунках, то необходимо перевернуть планшету и встряхнуть на
фильтровальную бумагу.
Аспирирующее/промывочное оборудование не должно находиться заполненным с
промывочным раствором длительный период времени, поскольку промывочные иглы могут быть
закупорены и трудно проходимы для жидкости. В конце рабочего дня аспирировать дистиллированную
воду в аспирирующую/промывочную систему. Промывочное устройство должно быть регулярно
промываться раствором NaCL (ЗОг/Л), а затем дистиллированной водой и 50% этанолом и в конце
промыто дистиллированной водой.
4. Для избежания примеси европия и как результат высокого флюресцентного фона высокие
требования предъявляются к процедуре раскапывания и промывки. Поэтому необычайно важно
использовать рекомендуемые и поставляемые вместе с ДЕЛФ ИЯ пипетки.
Усиливающий раствор должен быть раскапан только с использованием рекомендуемой
ЭППЕНДО РФ мультипипеткой, и при этом первый объем сбрасывается для полного заполнения. Тот
же тип Комбинаконечника не может быть использован для раскапывания любого другого реагента.
После работы Э ППЕНДО РФ мультипипетка помещается на штатив с наконечником.
При использовании ДЕЛФ ИЯ плейт диспенсера и ДЕЛФ ИЯ диспенсера юнита ознакомьтесь с
описанием.
П О Д СЧЕТ РЕЗУ ЛЬТА ТО В.
--- стр. 281 ---
АВТОДЕЛФИЯ П р о г е с т е р о н
AutoD ELFIA P i4 3 g e ste ro n e
Производитель - W ALLAC Оу, Финляндия
Для диагностического применения in vitro.
ФЛЮОРОМЕТРИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ С РАЗРЕШЕНИЕМ ПО ВРЕМЕНИ ДЛЯ КОЛИЧЕСТВЕННОГО
ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПРОГЕСТЕРОНА В ОБРАЗЦАХ СЫВОРОТКИ КРОВИ ЧЕЛОВЕКА.
ДЛЯ ПРИМЕНЕНИЯ В IN VITRO ДИАГНОСТИКЕ
96 ОПРЕДЕЛЕНИЙ
НАЗНАЧЕНИЕ:
Набор предназначен для определения Прогестерона в образцах сыворотки крови человека. Принцип основан на
иммунофлюоресцентом анализе, в котором определяемая молекула антител к ПРОГЕСТЕРОНу
взаимодействует по типу реакции антиген антитело с сорбированными на поверхности планшета антигеном
против антител к ПРОГЕСТЕРОНу и вторыми антителами, меченые флюоресцентной меткой. В результате
реакции образуется высокофлюоресцентное соединение, концентрация которого определяется на приборе-
флюорометре АВТОДЕЛФИЯ/ВИКТОР. Концентрация определяемого флюоресцирующего соединения прямо
пропорциональна количеству антител к ПРОГЕСТЕРОНу в образцах сыворотки крови человека.
СОСТАВ НАБОРА:
1.Прогестерон стандарты; Во флаконах, лиофиллизированные. К-во - 6 шт.
2.Прогестерон-Еи раствор. Во флаконе, лиофиллизированный К-во - 2 шт.
3.Анти-прогестерон раствор (кроличьи) Во флаконе, лиофиллизированныые. К-во - 2 шт.
4.Прогестерон инкубационный буфер; 30 мл(фл). К-во - 1 шт.
5.Анти-кроличьи IgG микротитрационные стрипы 96 луночные; К-во - 1 шт
6.Штрих кодовые метки для кассеты с реагентами. К-во - 3 шт.
ПРИНЦИП МЕТОДА:
АВТОДЕЛФ ИЯ П Р О ГЕ С ТЕ РО Н определение основано на твердофазном, флюороиммуном
определении с разрешением по времени на основе конкуренции между меченым европием
ПРОГЕСТЕРОНОМ и ПРОГЕСТЕРОНОМ в тестируемом образце за ограниченное количество мест
связывания на П Р О ГЕ С ТЕ РО Н -специфических моноклональных антителах (кроличьи). Стандарты,
контроли и образца пациентов, содержащие П Р О ГЕ С ТЕ РО Н ингибируют связывание меченого
европием П Р О ГЕ С ТЕ Р О Н а с антителами. Блокирующие агенты в П Р О ГЕ С ТЕ РО Н инкубационном
буфере предотвращают выделение П Р О ГЕ С ТЕ РО Н а из связанного с белками состояния. Второе
антитело взаимодействующее с анти-кроличьими антителами, которые покрывают поверхность лунок и
представляют твердую фазу, определяя высококачественное разделение антител-связанных и
свободных антигенов ПРОГЕСЗтЕРОНа. В этом определении только одна инкубационная ступень.
Усиливающий раствор диссоциирует ионы европия из меченого П Р О ГЕ С ТЕ РО Н а в раствор,
где они формируют высокофлюоресцентные хелатные комплексы с компонентами усиливающего
раствора. Флюоресценция каждой лунки в последующем измеряется. Флюоресцентный сигнал каждого
образца обратно пропорционален количеству П Р О ГЕ С ТЕ РО Н а в образце.
Каждый АВТОДЕЛФ ИЯ П РО ГЕС ТЕРО Н набор содержит реагентов необходимых для 96
определений.
Срок годности набора указан на внешней стороне коробки. Хранение при +2+8 С.
--- стр. 282 ---
Данный набор является частью комплексной системы иммунодиагностических реагентов и
оборудования, АВТОДЕЛФ ИЯ система требует следующие компоненты, которые могут быть
поставлены или от W ALLAC O Y или от его дистрибьютеров;
1. Флюорометр с временным разрешением плюс принтер и внешний компьютер.
2. Автоматический вошер - АВТОДЕЛФ ИЯ плейтвошер (Кат.№ 1296-024 или1296-026)
3. Автоматический шейкер-АВТОДЕЛФ ИЯ плейтш ейкер(Кат.№ 1296-001или1296-003)
4. Пипетка для разливки АВТОДЕЛФ ИЯ буфера и метки - Э ПП ЕН Д О РФ М УЛ Ь ТИ П И П Е ТКА (1296-014) с
5 мл Комби наконечниками (1296-016) или в качестве альтернативы АВТОДЕЛФ ИЯ плейт диспенсер с
АВТОДЕЛФИЯ диспенсер юнит (1296-041 или 1296-043).
5. Пипетка для разливки Усиливающего раствора - Э П П ЕН ДО РФ мультипипетка (1296-014) с 5 мл
Комби наконечниками (1296-016) или альтернативно АВТОДЕЛФ ИЯ плейт диспенсер (1296-041).
6. АВТОДЕЛФ ИЯ растворитель I (Кат.№ В127-100, 8128-100).
В дополнении к АВТОДЕЛФ ИЯ системе необходимо следующее;
-дозирующая пипетка для разливки микролитровых объемов
- пипетки для разливки миллитровых объемов НЭ буфера требуемого для приготовления раствора
метки и антител
- дистиллированная вода
СБОР ОБРАЗЦОВ И ХРА Н ЕН ИЕ;
Получение крови посредством венопункции, образование сгустка и выделение сыворотки
посредством центрифугирования. Плазма, полученна с использованием ЭДТА и цитрата натрия не
может быть использована, вследствии воздействия на хелатирующий европий. Однако может
применяться плазма крови полученная с гепарином. Гемолитическая (гемоглобин>2г/Л), липемическая
(>2 г/Л) и иктерическая (билирубин>30 мкмоль/Л) сыворотки использовать не рекомендуется. Если
концентрация превышает 50 нмоль/Л следует развести сыворотки или нормальной женской
сывороткой или АВТОДЕЛФ ИЯ дилюентом I.
Образцы могут быть сохранены 12 часов при комнатной температуре или 3 дня при +2+8С.
Для более длительного периода неразведенные образцы могут храниться при -20 С. Избегайте
повторного замораживания размораживания.
МЕРЫ П РЕД О С ТО РО Ж Н О С ТИ ;
Для диагностики ин витро.
Следует соблюдать правила предостороженности США № CDC 88-8395 или местные правила.
Можно считать все образцы крови пациентов как потенциально инфицированные.
Реагенты содержат азид натрия в качестве консерванта. Азид натрия может
взаимодействовать с металлическими поверхностями с образованием азидов металлов. Для
предотвращения образования азидов металлов необходимо промыть большим количеством воды.
Для дезинфекции всех сливных реагентов пользуйтесь правилами местных контроллирующих
организаций.
Флюоресценция измеряется на флюорометре с временным разрешением. Выберите номер
программы 50 для автоматического измерения и подсчета результатов. Сверьте параметры
группы для программы № 50 и если необходимо произведите коррекцию в соответствии со следующим
(см. описание к флюрометру для проведения редакции параметров считывания):
ASSAY Т У Р Е FIA
тип определения ФИА
FITTIN G M E TH O D SPLINE S M O O TH E D
М А Т Е Р И А Л Ы Н ЕО БХ О Д И М Ы Е, Н О Н Е П О С ТА В Л Я ЕМ Ы Е
С Н А БО РО М ;
--- стр. 283 ---
метод обработки
X-AXIS
х-ось
Y-AXIS
у-ось
BLANKS
бланки О
STANDARDS
стандарты
STANDARD REPLICATES
стандарты в дупликате 2
STA N DA RD C O N C
стандарты конц.
S TANDARD C O N C
стандарты конц.
S TANDARD C O N C
стандарты конц.
S TANDARD C O N C
стандарты конц.
S TANDARD C O N C
стандарты конц.
S TANDARD C O N C
стандарты конц.
UNK NO W N R EPLIC ATES
неизвестные образцы в дубле 2
метод сглаживания
LO G ARITHM IC
логарифмическая
В/Вмакс
В/Вмакс
О
6
6
2 Убедитесь, чтобы концентрация
стандартов, указанная на флаконах
А совпадала с задаваемой. Если не
А совпадает, введите новые.
В
В
С
С
D
Д
Е
Е
F
Ф
2
О С О БЕН НО СТИ О ПРЕДЕЛЕНИЯ:
1. Отношение к этому набору как к целому необходимо для успешного использования
АВТОДЕЛФИЯ наборов. Реагенты в этом наборе являются комплексными компонентами. Не
смешивайте идентичные реагенты из различных лотов. Не используйте реагенты после срока
годности, указанной на флаконе.
2. Реагенты должны быть доведены до комнатной температуры (+20+25С ) до приготовления
различных растворов. Замороженные образцы должны быть нагреты до комнатной температуры при
медленном и осторожном перемешивании. Не используйте вортекс или смешанные образцы
пациентов.
3. При промывке стрипов следите, чтобы все стрипы были заполнены полностью и одинаково
до верхнего уровня как показано на картинке. После промывки стрипов, проверьте, что стрипы сухие.
Если что-либо осталось в лунках, то необходимо перевернуть планшету и встряхнуть на
фильтровальную бумагу.
Аспирирующее/промывочное оборудование не должно находиться заполненным с
промывочным раствором длительный период времени, поскольку промывочные иглы могут быть
закупорены и трудно проходимы для жидкости. В конце рабочего дня аспирировать дистиллированную
воду в аспирирующую/промывочную систему. Промывочное устройство должно быть регулярно
промываться раствором NaCL (ЗОг/Л), а затем дистиллированной водой и 50% этанолом и в конце
промыто дистиллированной водой.
4. Для избежания примеси европия и как результат высокого флюресцентного фона высокие
требования предъявляются к процедуре раскапывания и промывки. Поэтому необычайно важно
использовать рекомендуемые и поставляемые вместе с АВТОДЕЛФ ИЯ пипетки.
Усиливающий раствор должен быть раскапан только с использованием рекомендуемой
ЭППЕНДО РФ мультипипеткой, и при этом первый объем сбрасывается для полного заполнения. Тот
же тип Комбинаконечника не может быть использован для раскапывания любого другого реагента.
После работы ЭПП ЕН Д О РФ мультипипетка помещается на штатив с наконечником.
При использовании АВТОДЕЛФ ИЯ плейт диспенсера и АВТОДЕЛФ ИЯ диспенсера юнита
ознакомьтесь с описанием.
П О Д СЧЕТ РЕЗУ ЛЬТА ТО В;
--- стр. 288 ---
Э-Eu метка И спользовать в течен и е 1-го часа
после приготовления
Готовится путем смешивания концентрата метки 30 мкл с 1.5 мл С
буфера на 1 стрип (см. таблицу).
В аж но чтобы растворы метки и антитела готовились р азд ельно.
инкубационного
Избегайте контакта Э И нкубационного буф ера с раствором метки вне использования
для определения.
Рекомендуется использовать одноразовые пластиковые флаконы для приготовления
раствора метки.
Э антисыворотка И спользовать в течен и е 1-го часа
после приготовления
Растворяется по такой же схеме как и для метки (см. таблицу)
2. Перенести необходимое количество микротитро вал ьных стрипов в рамку- держатель для
стрипов (вернуть оставшиеся стрипы в пластиковую коробку и закрыть). Промыть кажды стрип с
помощью ДЕЛЬФИЯ плейт вошера, используя программу 56 (превош). Не промывайте больше
стрипов, чем вы можете использовать в течение 30 минут.
3. Раскапать по 25 мкл Э стандарты (Ст.) и образцы (Обр.) тестируемых сывороток
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст.
А А В 6 С С Д Д Е Е Ф Ф
Ст. Ст. 1-й 1-й 2-й 2-й
G G Обр. Обр. Обр. Обр. и т.д.
4. Добавить по 100 мкл разведенной Э антисыворотки в каждую лунку с
Э ппендорф м ультипипетты . Избегайте касания поверхности лунки.
использованием
5. Инкубирование 30 минут (+ 5 мин.) при комнатной температуре при медленном
перемешивании с использованием ДЕЛЬФИЯ плейт шейкера. Для ЭКО образцов
необходимости проводить эту преинкубацию.
нет
6. Добавляется по 100 мкл раствора Э метки в каждую лунку с использование
мультипипетты.
7.
Эппендорф
Инкубирование 2 часа (+10 минут) при комнатной температуре при медленном
перемешивании, используя ДЕЛЬФИЯ плейтшейкер. Если концентрация Э выше, чем
0.5 нмоль/Л (ЭКО образцы) вполне достаточно инкубировать в течение 1 часа при комнатной
температуре и медленном перемешивании без стадии преинкубации.
8. Аспирация и отмывка с использованием ДЕЛЬФИЯ плейт вошера по программе
(промывка).
№56
в каждую лунку,
Комбинаконечника
9. Добавить 200 мкл Усиливающего растовра прямо из реагентного флакона
используя рекомендуемую Э ППЕНДО РФ мультипипетку, после заполнения
раствором Усиливающего раствора или используя ДЕЛЬФИЯ плейт диспенсер. Избегайте касания
носиком пипетки лунки или ее содержимого.
--- стр. 289 ---
10. Встряхивайте в режиме “медленно” 5 минут. Сигнал флюоресценции стабилен в
течение нескольких часов, если нет сильного испарения жидкости. Однако, мы рекомендуем
измерять в течение 1 часа, чтобы внешние факторы не оказали влияния на уровень сигнала,
11. Флюоресценция измеряется на флюорометре с временным разрешением. Выберите номер
профаммы 56 для автоматического измерения и подсчета результатов. Сверьте параметры
группы для программы № 56 и если необходимо произведите коррекцию в соответствии со следующим
(см. описание к флюрометру для проведения редакции параметров считывания);
ASSAY TYPE
тип определения
FITTING M E TH O D
метод обработки
X-AXIS
х-ось
Y-AXIS
у-ось
BLANKS
бланки О
STANDARDS
стандарты
STANDARD REPLICATES
стандарты в дупликате 2
STANDARD C O N C
стандарты конц.
STANDARD C O N C
стандарты конц.
STANDARD C O N C
стандарты конц.
STANDARD C O N C
стандарты конц.
STANDARD C O N C
стандарты конц.
STANDARD C O N C
стандарты конц.
STA N DA RD C O N C
стандарты конц.
U NKNO W N REPLIC ATES
неизвестные образцы в дубле 2
FIA
ФИА
SPLINE S M O O TH E D
метод “сглаживания”
LO G ARITHM IC
логарифмическая
В/В макс
В/В макс
О
7
7
2 Убедитесь, чтобы концентрация
стандартов, указанная на флаконах
А совпадала с задаваемой. Если не
А совпадает, введите новые.
В
В
С
С
D
Д
Е
Е
F
Ф
G
Г
2
О С О БЕН НО СТИ О ПРЕДЕЛЕНИЯ:
1. Отношение к этому набору как к целому необходимо для успешного использования
ДЕЛЬФИЯ наборов. Реагенты в этом наборе являются комплексными компонентами. Не смешивайте
идентичные реагенты из различных лотов. Не используйте реагенты после срока годности, указанной
на флаконе.
2. Реагенты должны быть доведены до комнатной температуры (+20+25С ) до приготовления
различных растворов. Замороженные образцы должны быть нафеты до комнатной температуры при
медленном и осторожном перемешивании. Не используйте вортекс или смешанные образцы
пациентов.
3. При промывке стрипов следите, чтобы все стрипы были заполнены полностью и одинаково
до верхнего уровня как показано на картинке. После промывки стрипов, проверьте, что стрипы сухие.
Если что-либо осталось в лунках, то необходимо перевернуть планшету и встряхнуть на
фильтровальную бумагу.
Аспирирующее/промывочное оборудование не должно находиться заполненным с
промывочным раствором длительный период времени, поскольку промывочные иглы могут быть
закупорены и трудно проходимы для жидкости. В конце рабочего дня аспирировать дистиллированную
воду в аспирирующую/промывочную систему. Промывочное устройство должно быть регулярно
--- стр. 290 ---
промываться раствором NaCL (ЗОг/Л), а затем дистиллированной водой и 50% этанолом и в конце
промыто дистиллированной водой.
4. Для избежания примеси европия и как результат высокого флюресцентного фона высокие
требования предъявляются к процедуре раскапывания и промывки. Поэтому необычайно важно
использовать рекомендуемые и поставляемые вместе с ДЕЛЬФ ИЯ пипетки.
Усиливающий раствор должен быть раскапан только с использованием рекомендуемой
ЭППЕНДО РФ мультипипеткой, и при этом первый объем сбрасывается для полного заполнения. Тот
же тип Комбииаконечника не может быть использован для раскапывания любого другого реагента.
После работы Э П П Е Н Д О РФ мультипипетка помещается на штатив с наконечником.
При использовании ДЕЛЬФИЯ плейт диспенсера и ДЕЛЬФ ИЯ диспенсера юнита ознакомьтесь
с описанием.
ПОДСЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ:
ДЕЛЬФИЯ система включает программу для обработки результатов и получения данных в
виде стандартной кривой, концентрации неизвестных пациентов и т.д. (для детали см. описание к
флюорометру или к программе Мультикалк).
КОНТРО ЛЬ КАЧЕСТВА:
Использование контрольной сыворотки позволяет оценивать качество ежедневных
определений. Рекомендуется, чтобы каждая лаборатория имела свой сывороточный пул на различных
уровнях концентраций, или альтернативно использовала коммерческие контрол и., например,
ЛИПОЧЕК. Высокие и низкие контроли должны быть использованы в каждом определении; если
определения включают более чем один планшет, контроли должны быть использованы для каждого
планшета.
ОГРАН ИЧЕН ИЯ.
Как и для всех других диагностических тест-систем, клиническое заключение не может быть
основано только на результатах одного теста и необходимо всестороннее клиническое и лабораторное
обследование.
И Н ТЕ Р П РЕ ТА Ц И Я ДАННЫ Х И ОЖ ИДАЕМ Ы Е РЕЗУЛЬТАТЫ :
1.М УЖ ЧИНЫ 0-0.13 нмоль/Л, ср.уровень = 0.09 нмоль/Л
2.Ж ЕНШ ИН Ы
- фолликулярная фаза 0.08-0.79нмоль/Л, ср.уровень = 0.21 нмоль/Л
- середина цикла 0.7-2,1 нмоль/Л, ср.уровень = 1.0 нмоль/Л
- лютеиновая фаза 0.08-0.85 нмоль/Л, ср.уровень = 0.39 нмоль/Л
- постменопауза 0-0.09нмоль/Л, ср.уровень = 0.05 нмоль/Л
- беременые, 3-й триместр 20-130нмоль/Л
--- стр. 294 ---
Перенести 40 мл из Промывочного Концентрата в чистый флакон и растворить добавляя 960 мл
дистиллированной воды для приготовления готового буферного раствора рН=7.8
Э-Еи метка Использовать в течение )-го часа
после приготовления
Готовится путем смешивания концентрата метки 30 мкл с 1.5 мл Э
стрил (см. таблицу).
Важно чтобы растворы метки и антитела готовились раздельно.
инкубационного буфера на 1
Избегайте контакта Э Инкубационного буфера с раствором метки вне использования для
определения.
Рекомендуется использовать одноразовые пластиковые флаконы для приготовления раствора
метки.
Э антисыворотка Использовать в течение 1-го часа
после приготовления
Растворяется по такой же схеме как и для метки (см. таблицу)
2. Перенести необходимое количество микротитровальных стрипов в рамку- держатель для стрипов
(вернуть оставшиеся стрипы в пластиковую коробку и закрыть). Промыть кажды стрип с помощью
АВТОАВТОДЕЛФИЛ плейт вошера, используя программу 56 (превош). Не промывайте больше
стрипов, чем вы можете использовать в течение 30 минут.
3. Раскапать по 25 мкл Э стандарты(Ст.) и образцы (Обр.) тестируемых сывороток пациентов
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст.
А А В В С С Д Д Е Е Ф Ф
Ст. Ст. 1-й 1-й 2-й 2-й
G G Обр. Обр. Обр. Обр. и т.д.
4. Добавить по 100 мкл разведенной Э антисыворотки в каждую лунку с
мультипипетты. Избегайте касания поверхности лунки.
использованием Эппендорф
5. Инкубирование 30 минут (+ 5 мин.) при комнатной температуре при медленном перемешивании
с использованием АВТОАВТОДЕЛФИЛ плейт шейкера. Для ЭКО образцов нет необходимости проводить эту
преинкубацию.
6. Добавляется по 100 мкл раствора Э метки в каждую лунку с
мультипипетты.
использование Эппендорф
7. Инкубирование 2 часа (+ 10 минут) при комнатной температуре при медленном
перемешивании, используя АВТОАВТОДЕЛФИЛ плейтшейкер. Если концентрация Э выше,
чем 0.5 нмоль/Л (ЭКО образцы) вполне достаточно инкубировать в течение 1 часа при комнатной
температуре и медленном перемешивании без стадии преинкубации.
8. Аспирация и отмывка с использованием АВТОАВТОДЕЛФИЛ плейт вошера по программе
(промывка).
№56
9. Добавить 200 мкл Усиливающего растовра прямо из реагентного флакона в каждую лунку, используя
рекомендуемую ЭППЕНДОРФ мультипипетку, после заполнения Комбинаконечника раствором
--- стр. 295 ---
Усиливающего раствора или используя АВТОАВТОДЕЛФИЯ плейт диспенсер. Избегайте касания носиком
пипетки лунки или ее содержимого.
10. Встряхивайте в режиме “медленно” 5 минут. Сигнал флюоресценции стабилен в течение
нескольких часов, если нет сильного испарения жидкости. Однако, мы рекомендуем измерять в течение 1
часа, чтобы внешние факторы не оказали влияния на уровень сигнала.
11. Флюоресценция измеряется на флюорометре с временным разрешением. Выберите номер программы
56 для автоматического измерения и подсчета результатов. Сверьте параметры группы для программы №56
и если необходимо произведите коррекцию в соответствии со следующим (см. описание к флюрометру
для проведения редакции параметров считывания):
ASSAY TYPE
тип определения
FITTING METHOD
метод обработки
X-AXIS
х-ось
Y-AXIS
у-ось
BLANKS
бланки
STANDARDS
стандарты
STANDARD REPLICATES
стандарты в дупликате
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
UNKNOWN REPLICATES
неизвестные образцы в дубле
FIA
ФИА
SPLINE SMOOTHED
метод “сглаживания”
LOGARITHMIC
логарифмическая
В/Вмакс
В/Вмакс
О
О
2 Убедитесь, чтобы концентрация
2 стандартов, указанная на флаконах
А совпадала с задаваемой. Если не
А совпадает, введите новые.
В
В
С
Д
Е
Ф
Г
2
С
D
Е
F
G
2
ОСОБЕННОСТИ ОПРЕДЕЛЕНИЯ:
1. Отношение к этому набору как к целому необходимо для успешного использования
АВТОАВТОДЕЛФИЯ наборов. Реагенты в этом наборе являются комплексными компонентами. Не смешивайте
идентичные реагенты из различных лотов. Не используйте реагенты после срока годности, указанной на
флаконе.
2. Реагенты должны быть доведены до комнатной температуры (+20+25С) до приготовления различных
растворов. Замороженные образцы должны быть нагреты до комнатной температуры при медленном и
осторожном перемешивании. Не используйте вортекс или смешанные образцы пациентов.
3. При промывке стрипов следите, чтобы все стрипы были заполнены полностью и одинаково до
верхнего уровня как показано на картинке. После промывки стрипов, проверьте, что стрипы сухие. Если что-
либо осталось в лунках, то необходимо перевернуть планшету и встряхнуть на фильтровальную бумагу.
--- стр. 296 ---
Аспирирующее/промывочное оборудование не должно находиться заполненным с промывочным ;
раствором длительный период времени, поскольку промывочные иглы могут быть закупорены и трудно ;
проходимы для жидкости. В конце рабочего дня аспирировать дистиллированную воду в |
аспирирующую/промывочную систему. Промывочное устройство должно быть регулярно промываться |
раствором NaCL (ЗОг/Л), а затем дистиллированной водой и 50% этанолом и в конце промыто i
дистиллированной водой. |
4. Для избежания примеси европия и как результат высокого флюресцентного фона высокие |
требования предъявляются к процедуре раскапывания и промывки. Поэтому необычайно важно использовать |
рекомендуемые и поставляемые вместе с АВТОАВТОДЕЛФИЯ пипетки. {
Усиливающий раствор должен быть раскапан только с использованием рекомендуемой ЭППЕНДОРФ ^
мультипипеткой, и при этом первый объем сбрасывается для полного заполнения. Тот же тип |
Комбинаконечника не может быть использован для раскапывания любого другого реагента. После работы
ЭППЕНДОРФ мультипипетка помещается на щтатив с наконечником. i
При использовании АВТОАВТОДЕЛФИЯ плейт диспенсера и АВТОАВТОДЕЛФИЯ диспенсера f
юнита ознакомьтесь с описанием. [
ПОДСЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ: j
АВТОАВТОДЕЛФИЯ система включает программу для обработки результатов и получения данных в |
виде стандартной кривой, концентрации неизвестных пациентов и т.д. (для детали см. описание к флюорометру |
или к программе Мультикалк). \
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА: (
Использование контрольной сыворотки позволяет оценивать качество ежедневных определений. [
Рекомендуется, чтобы каждая лаборатория имела свой сывороточный пул на различных уровнях концентраций, |
или альтернативно использовала коммерческие контроли., например, ЛИПОЧЕК. Высокие и низкие контроли 1
должны быть использованы в каждом определении; если определения включают более чем один планшет, ■
контроли должны быть использованы для каждого планщета. {
ОГРАНИЧЕНИЯ. I
I
Как и для всех других диагностических тест-систем, клиническое заключение не может быть основано I
только на результатах одного теста и необходимо всестороннее клиническое и лабораторное обследование. >
f
ИНТЕРПРЕТАЦИЯ ДАННЫХ И ОЖИДАЕМЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ: 1
1 .МУЖЧИНЫ 0-0.13 нмоль/Л, ср.уровень = 0.09 нмоль/Л j
2.ЖЕНШИНЫ [
- фолликулярная фаза 0.08-0.79нмоль/Л, ср.уровень = 0.21 нмоль/Л ?
- середина цикла 0.7-2.1 нмоль/Л, ср.уровень ^ 1.0 нмоль/Л
- лютеиновая фаза 0.08-0.85 нмоль/Л, ср.уровень = 0.39 нмоль/Л [
- постменопауза 0-0.09нмоль/Л, ср.уровень ^ 0.05 нмоль/Л f
- беременые, 3-й триместр 20-1 ЗОнмоль/Л
--- стр. 297 ---
I h
ДЕЛФИЯ Г л о б у л и н , связывающий половые гормоны ( Г С П Г )
DELFIA SHBG
Производитель > WALLAC Оу, Финляндия
Для диагностического применения in vitro.
ФЛЮОРОМЕТРИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ С РАЗРЕШЕНИЕМ ПО ВРЕМЕНИ ДЛЯ КОЛИЧЕСТВЕННОГО
ОПРЕДЕЛЕНИЯ ГЛОБУЛИНА,СВЯЗЫВАЮЩЕГО ПОЛОВЫЕ ГОРМОНЫ (ГСПГ) В ОБРАЗЦАХ
сьгаоротки КРОВИ ч е л о в е к а .
для ПРИМЕНЕНИЯ В IN VITRO ДИАГНОСТИКЕ
96 ОПРЕДЕЛЕНИЙ
НАЗНАЧЕНИЕ;
Набор предназначен для определения Глобулина, связывающего половые гормоны (ГСПГ), в образцах
сыворотки крови человека. Принцип основан на иммунофлюоресцентом анализе, в котором определяемая
молекула антител к ГСПГ взаимодействует по типу реакции антиген антитело с сорбированными на
поверхности планшета антигеном против антител к ГСПГ и вторыми антителами, меченые флюоресцентной
меткой. В результате реакции образуется высокофлюоресцентное соединение, концентрация которого
определяется на приборе-флюорометре ДЕЛФИЯУВИКТОР. Концентрация определяемого флюоресцирующего
соединения прямо пропорциональна количеству антител к ГСПГ в образцах сыворотки крови человека.
СОСТАВ НАБОРА:
1.ГСП стандарты; Во флаконах, лиофиллизированные.К-во - 7 шт.
2.Анти-кортизол раствор (мышиные моноклональные) 0.3 мл (фл). К-во -1 шт.
3.Промывочный концентрат; 40 мл(фл). К-во -1 шт.
4.ГСП инкубационный буфер; 30 мл(фл). К-во - 1 шт.
5.Усиливающий реагент; 50 мл(фл), К-во -1 шт.
6.Анти-ГСП микротитрационные стрипы 96 луночные; К-во - 1 шт
ПРИНЦИП МЕТОДА;
ДЕЛФИЯ ГСПГ определение основано на твердофазном, флюороиммуно определении с
разрешением по времени на основе конкуренции между меченым европием ГСПГ и ГСПГ в
тестируемом образце за ограниченное количество мест связывания на ГСПГ -специфических
моноклональных антителах (мышиные). Стандарты, контроли и образца пациентов, содержащие ГСПГ
ингибируют связывание меченое европием ГСПГ с антителами. Блокирующие агенты в ГСПГ
инкубационном буфере предотвращают выделение ГСПГа из связанного с белками состояния. Второе
антитело взаимодействующее с кроличьими IgG антителами покрывают поверхность лунок и
представляют твердую фазу, определяя высококачественное разделение антител-связанных и
свободных антигенов ГСПГ. В этом определении только одна инкубационная ступень.
Усиливающий раствор диссоциирует ионы европия из меченого ГСПГ в раствор, где они
формируют высокофлюоресцентные хелатные комплексы с компонентами усиливающего раствора.
Флюоресценция каждо 11 лунки в последующем измеряется. Флюоресцентный сигнал каждого образца
обратно пропорционален количеству ГСПГ в образце.
Каждый ДЕЛФИЯ ГСПГ набор содержит реагентов необходимых для 96 определений.
Срок годности набора указан на внешней стороне коробки. Хранение при +2+8 С.
М АТЕРИАЛЫ НЕОБХОДИМ Ы Е, Н О Н Е ПО СТАВЛЯЕМ Ы Е
--- стр. 298 ---
1. Флюорометр с временным разрешением плюс принтер и внешний компьютер.
2. Автоматический вошер - ДЕЛФИЯ плейтвошер (Кат.№1296-024 или1296-026)
3. Автоматический шейкер-ДЕЛФИЯ плейтшейкер(Кат.№1296-001 или 1296-003)
4. Пипетка для разливки ДЕЛФИЯ буфера и метки - ЭППЕНДОРФ МУЛЬТИПИПЕТКА (1296-014) с 5 мл
Комби наконечниками (1296-016) или в качестве альтернативы ДЕЛФИЯ плейт диспенсер с ДЕЛФИЯ
диспенсер юнит (1296-041 или 1296-043).
5. Пипетка для разливки Усиливающего раствора - ЭППЕНДОРФ мультипипетка (1296-014) с 5 мл
Комби наконечниками (1296-016) или альтернативно ДЕЛФИЯ плейт диспенсер (1296-041).
6. ДЕЛФИЯ растворитель I (Кат.№ В127-100, В128-100).
В дополнении к ДЕЛФИЯ системе необходимо следующее;
- дозирующая пипетка для разливки микролитровых объемов
- пипетки для разливки миллитровых объемов НЭ буфера требуемого для приготовления
раствора метки и антител
- дистиллированная вода
СБОР ОБРАЗЦОВ И ХРАНЕНИЕ;
Получение крови посредством венопункции, образование сгустка и выделение сыворотки
посредством центрифугирования. Плазма, полученна с использованием ЭДТА и цитрата натрия не
может быть использована, вследствии воздействия на хелатирующий европий. Однако может
применяться плазма крови полученная с гепарином. Гемолитическая (гемоглобин>2г/Л), липемическая
(>2 г/Л) и иктерическая (билирубин>30 мкмоль/Л) сыворотки использовать не рекомендуется. Если
концентрация превышает 50 нмоль/Л следует развести сыворотки или нормальной женской
сывороткой или ДЕЛФИЯ дилюентом I.
Образцы могут быть сохранены 12 часов при комнатной температуре или 3 дня при +2+8С.
Для более длительного периода неразведенные образцы могут храниться при -20 С. Избегайте
повторного замораживания размораживания.
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ;
Для диагностики ин витро.
Следует соблюдать правила предостороженности США №CDC 88-8395 или местные правила.
Можно считать все образцы крови пациентов как потенциально инфицированные.
Реагенты содержат азид натрия в качестве консерванта. Азид натрия может
взаимодействовать с металлическими поверхностями с образованием азидов металлов. Для
предотвращения образования азидов металлов необходимо промыть большим количеством воды.
Для дезинфекции всех сливных реагентов пользуйтесь правилами местных контроллирующих
организаций.
Флюоресценция измеряется на флюорометре с временным разрешением. Выберите номер
программы 50 для автоматического измерения и подсчета результатов. Сверьте параметры
группы для программы №50 и если необходимо произведите коррекцию в соответствии со следующим
(см. описание к флюрометру для проведения редакции параметров считывания):
ASSAY TYPE FIA
тип определения ФИА
FITTING METHOD SPLINE SMOOTHED
метод обработки метод “сглаживания”
с Н АБО РО М :
Данный набор является частью комплексной системы иммунодиагностических реагентов и
оборудования. ДЕЛФИЯ система требует следующ ие компоненты, которые могут быть поставлены или
от W ALLAC 0Y или от его дистрибьютеров;
--- стр. 299 ---
X-AXIS
х-ось
Y-AXIS
у-ось
BLANKS
бланки О
STANDARDS
стандарты
STANDARD REPLICATES
стандарты вдупликате 2
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
UNKNOWN REPLICATES
неизвестные образцы в дубле 2
LOGARITHMIC
логарифмическая
В/Вмакс
В/Вмакс
О
6
6
2 Убедитесь, чтобы концентрация
стандартов, указанная на флаконах
А совпадала с задаваемой. Если не
А совпадает, введите новые.
В
В
С
С
D
Д
Е
Е
F
Ф
2
ОСОБЕННОСТИ ОПРЕДЕЛЕНИЯ:
1. Отношение к этому набору как к целому необходимо для успешного использования ДЕЛФИЯ
наборов. Реагенты в этом наборе являются комплексными компонентами. Не смешивайте идентичные
реагенты из различных лотов. Не используйте реагенты после срока годности, указанной на флаконе.
2. Реагенты должны быть доведены до комнатной температуры (+20+25С) до приготовления
различных растворов. Замороженные образцы должны быть нагреты до комнатной температуры при
медленном и осторожном перемешивании. Не используйте вортекс или смешанные образцы
пациентов,
3. При промывке стрипов следите, чтобы все стрипы были заполнены полностью и одинаково
до верхнего уровня как показано на картинке. После промывки стрипов, проверьте, что стрипы сухие.
Если что-либо осталось в лунках, то необходимо перевернуть планшету и встряхнуть на
фильтровальную бумагу.
Аспирирующее/промывочное оборудование не должно находиться заполненным с
промывочным раствором длительный период времени, поскольку промывочные иглы могут быть
закупорены и трудно проходимы для жидкости. В конце рабочего дня аспирировать дистиллированную
воду в аспирирующую/промывочную систему. Промывочное устройство должно быть регулярно
промываться раствором NaCL (ЗОг/Л), а затем дистиллированной водой и 50% этанолом и в конце
промыто дистиллированной водой.
4. Для избежания примеси европия и как результат высокого флюресцентного фона высокие
требования предъявляются к процедуре раскапывания и промывки. Поэтому необычайно важно
использовать рекомендуемые и поставляемые вместе с ДЕЛФИЯ пипетки.
Усиливающий раствор должен быть раскапан только с использованием рекомендуемой
ЭППЕНДОРФ мультипипеткой, и при этом первый объем сбрасывается для полного заполнения. Тот
же тип Комбинаконечника не может быть использован для раскапывания любого другого реагента.
После работы ЭППЕНДОРФ мультипипетка помещается на штатив с наконечником.
При использовании ДЕЛФИЯ плейт диспенсера и ДЕЛФИЯ диспенсера юнита ознакомьтесь с
описанием.
ПО ДСЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ:
--- стр. 301 ---
/<?
АВТОДЕЛФИЯ Г л о б у л и н , связывающий половые гормоны ( Г С П Г )
AutoDELFIA SHBG
Производитель - WALLAC Оу, Финляндия
Для диагностического применения in vitro.
ФЛЮОРОМЕТРИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ С РАЗРЕШЕНИЕМ ПО ВРЕМЕНИ ДЛЯ КОЛИЧЕСТВЕННОГО
ОПРЕДЕЛЕНИЯ ГЛОБУЛИНА,СВЯЗЫВАЮЩЕГО ПОЛОВЫЕ ГОРМОНЫ (ГСПГ) В ОБРАЗЦАХ
СЬГООРОТКИ КРОВИ ЧЕЛОВЕКА.
ДЛЯ ПРИМЕНЕНИЯ В IN VITRO ДИАГНОСТИКЕ
96 ОПРЕДЕЛЕНИЙ
НАЗНАЧЕНИЕ:
Набор предназначен для определения Глобулина, связывающего половые гормоны (ГСПГ), в образцах
сыворотки крови человека. Принцип основан на иммунофлюоресцентом анализе, в котором определяемая
молекула антител к ГСПГ взаимодействует по типу реакции антиген антитело с сорбированными на
поверхности планшета антигеном против антител к ГСПГ и вторыми антителами, меченые флюоресцентной
меткой. В результате реакции образуется высокофлюоресцентное соединение, концентрация которого
определяется на приборе-флюорометре АВТОДЕЛФИЯ/ВИКТОР. Концентрация определяемого
флюоресцирующего соединения прямо пропорциональна количеству антител к ГСПГ в образцах сыворотки
крови человека.
СОСТАВ НАБОРА:
1.ГСП стандарты; Во флаконах, лиофиллизированные.К-во - 7 шт.
2.Анти-кортизол раствор (мышиные моноклональные) 0.3 мл (фл). К-во - 1 шт.
3.Промывочный концентрат; 40 мл(фл). К-во - I шт.
4.ГСП инкубационный буфер; 30 мл(фл). К-во - 1 шт.
5.Усиливающий реагент; 50 мл(фл). К-во -1 шт.
6.Анти-ГСП микротитрационные стрипы 96 луночные; К-во -1 шт
ПРИНЦИП МЕТОДА:
АВТОДЕЛФИЯ ГСПГ определение основано на твердофазном, флюороиммуно определении с
разрешением по времени на основе конкуренции между меченым европием ГСПГ и ГСПГ в
тестируемом образце за ограниченное количество мест связывания на ГСПГ -специфических
моноклональных антителах (мышиные). Стандарты, контроли и образца пациентов, содержащие ГСПГ
ингибируют связывание меченое европием ГСПГ с антителами. Блокирующие агенты в ГСПГ
инкубационном буфере предотвращают выделение ГСПГа из связанного с белками состояния. Второе
антитело взаимодействующее с кроличьими IgG антителами покрывают поверхность лунок и
представляют твердую фазу, определяя высококачественное разделение антител-связанных и
свободных антигенов ГСПГ. В этом определении только одна инкубационная ступень.
Усиливающий раствор диссоциирует ионы европия из меченого ГСПГ в раствор, где они
формируют вьюокофлюоресцентные хелатные комплексы с компонентами усиливающего раствора.
Флюоресценция каждой лунки в последующем измеряется. Флюоресцентный сигнал каждого образца
обратно пропорционален количеству ГСПГ в образце.
Каждый АВТОДЕЛФИЯ ГСПГ набор содержит реагентов необходимых для 96 определений.
Срок годности набора указан на внешней стороне коробки. Хранение при +2+8 С.
--- стр. 302 ---
Данный набор является частью комплексной системы иммунодиагностических реагентов и
оборудования. АВТОДЕЛФИЯ система требует следующие компоненты, которые могут быть
поставлены или от WALLAC 0 Y или от его дистрибьютеров;
1. Флюорометр с временным разрешением плюс принтер и внешний компьютер.
2. Автоматический вошер - АВТОДЕЛФИЯ плейтвошер (Кат.№ 1296-024 или1296-026)
3. Автоматический шейкер-АВТОДЕЛФИЯ плейтшейкер(Кат.№1296-001 или 1296-003)
4. Пипетка для разливки АВТОДЕЛФИЯ буфера и метки - ЭППЕНДОРФ МУЛЬТИПИПЕТКА (1296-014) с
5 мл Комби наконечниками (1296-016) или в качестве альтернативы АВТОДЕЛФИЯ плейт диспенсер с
АВТОДЕЛФИЯ диспенсер юнит (1296-041 или 1296-043).
5. Пипетка для разливки Усиливающего раствора - ЭППЕНДОРФ мультипипетка (1296-014) с 5 мл
Комби наконечниками (1296-016) или альтернативно АВТОДЕЛФИЯ плейт диспенсер (1296-041).
6. АВТОДЕЛФИЯ растворитель I (Кат.№ В127-100, В128-100).
В дополнении к АВТОДЕЛФИЯ системе необходимо следующее;
- дозирующая пипетка для разливки микролитровых объемов
- пипетки для разливки миллитровых объемов НЭ буфера требуемого для приготовления
раствора метки и антител
- дистиллированная вода
СБОР ОБРАЗЦОВ И ХРАНЕНИЕ;
Получение крови посредством венопункции, образование сгустка и выделение сыворотки
посредством центрифугирования. Плазма, полученна с использованием ЭДТА и цитрата натрия не
может быть использована, вследствии воздействия на хелатирующий европий. Однако может
применяться плазма крови полученная с гепарином. Гемолитическая (гемоглобин>2г/Л), липемическая
(>2 г/Л) и иктерическая (билирубин>30 мкмоль/Л) сыворотки использовать не рекомендуется. Если
концентрация превышает 50 нмоль/Л следует развести сыворотки или нормальной женской
сывороткой или АВТОДЕЛФИЯ дилюентом I.
Образцы могут быть сохранены 12 часов при комнатной температуре или 3 дня при +2+8С.
Для более длительного периода неразведенные образцы могут храниться при -20 С. Избегайте
повторного замораживания размораживания.
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ;
Для диагностики ин витро.
Следует соблюдать правила предостороженности США №CDC 88-8395 или местные правила.
Можно считать все образцы крови пациентов как потенциально инфицированные.
Реагенты содержат азид натрия в качестве консерванта. Азид натрия может
взаимодействовать с металлическими поверхностями с образованием азидов металлов. Для
предотвращения образования азидов металлов необходимо промыть большим количеством воды.
Для дезинфекции всех сливных реагентов пользуйтесь правилами местных контроллирующих
организаций.
Флюоресценция измеряется на флюорометре с временным разрешением. Выберите номер
программы 50 для автоматического измерения и подсчета результатов. Сверьте параметры
группы для программы №50 и если необходимо произведите коррекцию в соответствии со следующим
(см. описание к флюрометру для проведения редакции параметров считывания);
ASSAY ТУРЕ F1A
тип определения ФИ А
FITTING METHOD SPLINE SMOOTHED
М АТЕРИАЛЫ НЕО БХОДИМ Ы Е, Н О Н Е ПОСТАВЛЯЕМ Ы Е
С Н АБО РО М :
--- стр. 303 ---
метод обработки
X-AXIS
X-O Cb
Y-AXIS
у-ось
BLANKS
бланки О
STANDARDS
стандарты
STANDARD REPLICATES
стандарты в дупликате 2
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
UNKNOWN REPLICATES
неизвестные образцы в дубле 2
метод "сглаживания
LOGARITHMIC
логарифмическая
В/В макс
В/Вмакс
О
6
6
2 Убедитесь, чтобы концентрация
стандартов, указанная на флаконах
А совпадала с задаваемой. Если не
А совпадает, введите новые.
В
В
С
С
D
Д
Е
Е
F
Ф
2
ОСОБЕННОСТИ ОПРЕДЕЛЕНИЯ:
1. Отношение к этому набору как к целому необходимо для успешного использования
АВТОДЕЛФИЯ наборов. Реагенты в этом наборе являются комплексными компонентами. Не
смешивайте идентичные реагенты из различных лотов. Не используйте реагенты после срока
годности, указанной на флаконе.
2. Реагенты должны быть доведены до комнатной температуры (+20+25С) до приготовления
различных растворов. Замороженные образцы должны быть нагреты до комнатной температуры при
медленном и осторожном перемешивании. Не используйте вортекс или смешанные образцы
пациентов.
3. При промывке стрипов следите, чтобы все стрипы были заполнены полностью и одинаково
до верхнего уровня как показано на картинке. После промывки стрипов, проверьте, что стрипы сухие.
Если что-либо осталось в лунках, то необходимо перевернуть планшету и встряхнуть на
фильтровальную бумагу.
Аспирирующее/промывочное оборудование не должно находиться заполненным с
промывочным раствором длительный период времени, поскольку промывочные иглы могут быть
закупорены и трудно проходимы для жидкости. В конце рабочего дня аспирировать дистиллированную
воду в аспирирующую/промывочную систему. Промывочное устройство должно быть регулярно
промываться раствором NaCL (ЗОг/Л), а затем дистиллированной водой и 50% этанолом и в конце
промыто дистиллированной водой.
4. Для избежания примеси европия и как результат высокого флюресцентного фона высокие
требования предъявляются к процедуре раскапывания и промывки. Поэтому необычайно важно
использовать рекомендуемые и поставляемые вместе с АВТОДЕЛФИЯ пипетки.
Усиливающий раствор должен быть раскапан только с использованием рекомендуемой
ЭППЕНДОРФ мультипипеткой, и при этом первый объем сбрасывается для полного заполнения. Тот
же тип Ком б и наконечника не может быть использован для раскапывания любого другого реагента.
После работы ЭППЕНДОРФ мультипипетка помещается на штатив с наконечником.
При использовании АВТОДЕЛФИЯ плейт диспенсера и АВТОДЕЛФИЯ диспенсера юнита
ознакомьтесь с описанием.
ПОДСЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ:
--- стр. 309 ---
Для диагностики ин витро.
Этот набор может быть использован после соответствующей подготовки персонала.
Набор содержит реагенты произведенные из компонентов человеческой крови. Источник
протестирован на на наличие поверхностного антигена к гепатиту В, анти-гепатиту С, и анти-ВИЧ 1
и П. Тем не менее все рекомендации по мерам предосторожности при работе с производными крови
должны быть соблюдены.
Можно считать все образцы крови пациентов как потенциально инфицированные.
Реагенты содержат азид натрия в качестве консерванта. Азид натрия может
взаимодействовать с металлическими поверхностями с образованием азидов металлов. Для
предотвращения образования азидов металлов необходимо промыть большим количеством воды.
Для дезинфекции всех сливных реагентов пользуйтесь правилами местных
контроллирующих организаций.
ПРОТОКОЛ ОПРЕДЕЛЕНИЯ:
ПРОТОКОЛ ОПРЕДЕЛЕНИЯ:
Процедура с одной инкубацией.
Для сыворотки или плазмы только с гепарином.
Выполните каждое определение в дубликате как для стандартов, так и для тестируемых
образцов. Стандартная кривая должна быть использована для каждого определения. Образцы и
реагенты должны быть доведены до комнатной температуры (+20+25С) до использования.
1. Приготовление реагентов Стабильность после разведения
Промывочный раствор 2 недели при +2+25С в закрытом
контейнере
Перенести 40 мл из Промывочного Концентрата в чистый флакон и растворить
добавляя 960 мл дистиллированной воды для приготовления готового буферного раствора
рН-7.8
Анти-АФП-Еи метка И спользовать в течение 1 часа
после приготовления
Приготовить необходимый объем раствора метки при смешивании 40 мкл
метки с 3.0 мл МУЛЬТИ буфера для каждого стрипа (см. таблицу).
Важно, чтобы М УЛЬТИ буфер не контактировал с раствором метки до
использования в работе.
Мы советуем использовать одноразовый пластиковый флакон для приготовления рабочего
раствора метки.
2. Перенести необходимое количество микротитровальных стрипов в рамку- держатель для
стрипов (вернуть оставшиеся стрипы в пластиковую коробку и закрыть). Не использовать
больше стрипов, чем вы можете использовать в течение 30 минут.
--- стр. 310 ---
3. Раскапать 25 мкл в параллелях АФП стандарты(Ст.) и образцы пациентов(Обр.) в лунки стрипов
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 1 1 12
Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст.
0 0 1 1 10 10 100 100 500 500 1000 1000
1-й 1-й 2-й 2-й 3-й 3-й
Обр. Обр. Обр. Обр. Обр. Обр. и т.д.
4. Добавить по 200 мкл растверенной Анти-АФП-Еи метки в каждую лунку используя
рекомендуемую ЭППЕНДОРФ мультипипетку, после сброса первой порции жидкости или
использовать АВТОДЕЛФИЯ диспенсер юнит. Избегайте выплескивания жидкости из лунки и
избегайте касания стрипа или поверхности жидкости носиком пипетки.
5. Инкубировать в течение 1 часа (+10мин) при комнатной температуре при
перемешивании, используя Плейт шейкер.
медленном
6. После инкубации аспирировать и промыть каждый стрип с помощью АВТОДЕЛФИЯ Плейт
вошера, используя программу №4 (промывка).
7. Добавить 200 мкл Усиливающего растовра прямо из реагентного флакона в каждую лунку,
используя рекомендуемую ЭППЕНДОРФ мультипипетку, после заполнения Комбинаконечника
раствором Усиливающего раствора или используя АВТОДЕЛФИЯ плейт диспенсер. Избегайте
касания носиком пипетки лунки или ее содержимого.
8. Встряхивайте медленно 5 минут. Сигнал флюоресценции стабилен в течение нескольких часов,
если нет сильного испарения жидкости. Однако, мы рекомендуем измерять в течение 1 часа, чтобы
внешние факторы не оказали влияния на уровень сигнала.
9. Флюоресценция измеряется на флюорометре с временным разрешением. Выберите номер
программы 4 для автоматического измерения и подсчета результатов. Сверьте параметры группы
для программы N°4 и если необходимо произведите коррекцию в соответствии со следующим (см.
описание к флюрометру для проведения редакции параметров считывания);
ASSAY TYPE
тип определения
FITTING METHOD
метод обработки
X-AXIS
х-ось
Y-AXIS
у-ось
BLANKS
бланки
STANDARDS
стандарты
STANDARD REPLICATES
стандарты в дупликате
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
IFMA
ИФМА(иммунофлюорометрическое)
SPLINE SMOOTHED
метод “сглаживания”
LOGARITHMIC
логарифмическая
LOGARITHMIC
логарифмическая
2
2
5
5
2
2
1
1
10
10
100
--- стр. 311 ---
стандарты конц. 100
STANDARD CONC 500
стандарты конц. 500
STANDARD CONC 1000
стандарты конц. 1000
UNKNOWN REPLICATES 2
неизвестные образцы в дубле 2
процедура с двумя инкубациями.
Для сыворотки, плазмы и амниотической жидкости.
1. Приготовление реагентов Стабильность после разведения
Промывочный раствор 2 недели при +2+25С в закрытом
контейнере
Перенести 40 мл из Промывочного Концентрата в чистый флакон и растворить
добавляя 960 мл дистиллированной воды для приготовления готового буферного раствора
рН=7.8
Анти-АФП-Еи метка Использовать в течение 1 часа
после приготовления
Приготовить необходимый объем раствора метки при смешивании 40 мкл
метки с 3.0 мл МУЛЬТИ буфера для каждого стрипа (см. таблицу).
Важно, чтобы М У Л Ь Т И буфер не контактировал с раствором метки до
использования в работе.
Мы советуем использовать одноразовый пластиковый флакон для приготовления рабочего
раствора метки.
2. Перенести необходимое количество микротитровальных стрипов в рамку- держатель для
стрипов (вернуть оставшиеся стрипы в пластиковую коробку и закрыть). Не использовать
больше стрипов, чем вы можете использовать в течение 30 минут.
3. Раскапать 25 мкл в параллелях АФП стандарты(Ст.) и образцы пациентов(Обр.) в лунки стрипов
согласно следующей таблицы:________________________________________________________________
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст.
0 0 1 1 10 10 100 100 500 500 1000 1000
1-й
Обр.
1-й
Обр.
2-й
Обр.
2-й
Обр.
3-й
Обр.
3-й
Обр. и т.д.
4.Добавить по 200 мкл Мультибуффера в каждую лунку используя рекомендуемую ЭППЕНДОРФ
мультипипетку, после сброса первой порции жидкости или использовать АВТОДЕЛФИЯ диспенсер
--- стр. 312 ---
юнит. Избегайте выплескивания жидкости из лунки и избегайте касания стрипа или поверхности
жидкости носиком пипетки.
5. Инкубировать в течение 1 часа (+10мин) при комнатной температуре при медленном
перемешивании, используя Плейт шейкер.
6. После первой инкубации аспирировать и промыть каждый стрип с помощью АВТОДЕЛФИЯ
Плейт вошера, используя программу №4 (2-х, промывка 1).
У.Добавить по 200 мкл растверенной Анти-АФП-Еи метки в каждую лунку используя
рекомендуемую ЭППЕНДОРФ мультипипетку, после сброса первой порции жидкости или
использовать АВТОДЕЛФИЯ диспенсер юнит. Избегайте выплескивания жидкости из лунки и
избегайте касания стрипа или поверхности жидкости носиком пипетки.
8. Инкубировать в течение 1 часа (+10мин) при комнатной температуре без перемешивания.
9. После второй инкубации аспирировать и промыть каждый стрип с помощью АВТОДЕЛФИЯ
Плейт вошера, используя программу №4 (2-х, промывка 2),
10. Добавить 200 мкл Усиливающего растовра прямо из реагентного флакона в каждую лунку,
используя рекомендуемую ЭППЕНДОРФ мультипипетку, после заполнения Комбинаконечника
раствором Усиливающего раствора или используя АВТОДЕЛФИЯ плейт диспенсер. Избегайте
касания носиком пипетки лунки или ее содержимого.
11. Встряхивайте медленно 5 минут. Сигнал флюоресценции стабилен в течение нескольких часов,
если нет сильного испарения жидкости. Однако, мы рекомендуем измерять в течение 1 часа, чтобы
внешние факторы не оказали влияния на уровень сигнала.
12. Флюоресценция измеряется на флюорометре с временным разрешением. Выберите номер
программы 4 для автоматического измерения и подсчета результатов. Сверьте параметры группы
для программы №4 и если необходимо произведите коррекцию в соответствии со следующим (см.
описание к флюрометру для проведения редакции параметров считывания):
ASSAY TYPE IFMA
тип определения ИФМА(иммунофлюорометрическое)
FITTING METHOD SPLINE SMOOTHED
метод обработки метод “сглаживания”
X-AXIS LOGARITHMIC
х-ось логарифмическая
Y-AXIS LOGARITHMIC
у-ось логарифмическая
BLANKS 2
Бланки 2
STANDARDS 5
стандарты 5
STANDARD REPLICATES 2
стандарты в дупликате 2
STANDARD CONC 1
стандарты конц. 1
STANDARD CONC 10
стандарты конц. 10
STANDARD CONC 100
стандарты конц. 100
STANDARD CONC 500
стандарты конц. 500
--- стр. 313 ---
STANDARD CONC 1000
стандарты конц, 1000
UNKNOWN REPLICATES 2
неизвестные образцы в дубле 2
ОСОБЕННОСТИ ОПРЕДЕЛЕНИЯ:
1. Отношение к этому набору как к целому необходимо для успешного использования
АВТОДЕЛФИЯ наборов. Реагенты в этом наборе являются комплексными компонентами. Не
смешивайте идентичные реагенты из различных лотов. Не используйте реагенты после срока
годности, указанной на флаконе.
2. Реагенты должны быть доведены до комнатной температуры (+20+25С) до
приготовления различных растворов. Замороженные образцы должны быть нагреты до комнатной
температуры при медленном и осторожном перемешивании. Не используйте вортекс или
смешанные образцы пациентов.
3. При промывке стрипов следите, чтобы все стрипы были заполнены полностью и
одинаково до верхнего уровня как показано на картинке. После промывки стрипов, проверьте, что
стрипы сухие. Если что-либо осталось в лунках, то необходимо перевернуть планшету и встряхнуть
на фильтровальную бумагу.
Аспирируюшее/промывочное оборудование не должно находиться заполненным с
промывочным раствором длительный период времени, поскольку промывочные иглы могут быть
закупорены и трудно проходимы для жидкости. В конце рабочего дня аспирировать
дистиллированную воду в аспирирующую/промывочную систему. Промывочное устройство должно
быть регулярно промываться раствором NaCL (ЗОг/Л), а затем дистиллированной водой и 50%
этанолом и в конце промыто дистиллированной водой.
4. Для избежания примеси европия и как результат высокого флюресцентного фона
высокие требования предъявляются к процедуре раскапывания и промывки. Поэтому необычайно
важно использовать рекомендуемые и поставляемые вместе с АВТОДЕЛФИЯ пипетки.
Усиливающий раствор должен быть раскапан только с использованием рекомендуемой
ЭППЕНДОРФ мультипипеткой, и при этом первый объем сбрасывается для полного заполнения.
Тот же тип Комбинаконечника не может быть использован для раскапывания любого другого
реагента. После работы ЭППЕНДОРФ мультипипетка помещается на штатив с наконечником.
При использовании АВТОДЕЛФИЯ плейт диспенсера и АВТОДЕЛФИЯ диспенсера юнита
ознакомьтесь с описанием.
ПОДСЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ:
АВТОДЕЛФИЯ система включает программу для обработки результатов и получения
данных в виде стандартной кривой, концентрации неизвестных пациентов и т.д. (для детали см.
описание к флюорометру или к программе Мультикалк).
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА:
Использование контрольной сыворотки позволяет оценивать качество ежедневных
определений. Рекомендуется, чтобы каждая лаборатория имела свой сывороточный пул на
различных уровнях, или альтернативно использовала коммерческие контроли., например,
ЛИПОЧЕК. Высокие и низкие контроли должны быть использованы в каждом определении; если
определения включают более чем один планшет, контроли должны быть использованы для каждого
планшета.
ОГРАНИЧЕНИЯ:
--- стр. 319 ---
Для диагностики ин витро.
Этот набор может быть использован после соответствующей подготовки персонала.
Набор содержит реагенты произведенные из компонентов человеческой крови. Источник
протестирован на на наличие поверхностного антигена к гепатиту В, анти-гепатиту С, и анти-ВИЧ I
и П. Тем не менее все рекомендации по мерам предосторожности при работе с производными крови
должны быть соблюдены.
Можно считать все образцы крови пациентов как потенциально инфицированные.
Реагенты содержат азид натрия в качестве консерванта. Азид натрия может
взаимодействовать с металлическими поверхностями с образованием азидов металлов. Для
предотвращения образования азидов металлов необходимо промыть большим количеством воды.
Для дезинфекции всех сливных реагентов пользуйтесь правилами местных
контроллирующих организаций.
ПРОТОКОЛ ОПРЕДЕЛЕНИЯ:
ПРОТОКОЛ ОПРЕДЕЛЕНИЯ:
Процедура с одной инкубацией.
Для сыворотки или плазмы только с гепарином.
Выполните каждое определение в дубликате как для стандартов, так и для тестируемых
образцов. Стандартная кривая должна быть использована для каждого определения. Образцы и
реагенты должны быть доведены до комнатной температуры (+20+25С) до использования.
1. Приготовление реагентов Стабильность после разведения
Промывочный раствор 2 недели при +2+25С в закрытом
контейнере
Перенести 40 мл из Промывочного Концентрата в чистый флакон и растворить
добавляя 960 мл дистиллированной воды для приготовления готового буферного раствора
рН-7.8
Анти-АФП-Еи метка И спользовать в течение I часа
после приготовления
Приготовить необходимый объем раствора метки при смешивании 40 мкл
метки с 3.0 мл МУЛЬТИ буфера для каждого стрипа (см. таблицу).
Важно, чтобы М УЛЬТИ буфер не контактировал с раствором метки до
использования в работе.
Мы советуем использовать одноразовый пластиковый флакон для приготовления рабочего
раствора метки.
2. Перенести необходимое количество микротитровальных стрипов в рамку- держатель для
стрипов (вернуть оставшиеся стрипы в пластиковую коробку и закрыть). Не использовать
больше стрипов, чем вы можете использовать в течение 30 минут.
--- стр. 320 ---
3. Раскапать 25 мкл в параллелях АФП стандарты(Ст.) и образцы пациентов(Обр.) в лунки стрипов
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст.
0 0 I 1 10 10 100 100 500 500 1000 1000
1-й 1-й 2-й 2-й 3-й 3-й
Обр. Обр. Обр. Обр. Обр. Обр. и т.д.
4. Добавить по 200 мкл растверенной Анти-АФП-Еи метки в каждую лунку используя
рекомендуемую ЭППЕНДОРФ мультипипетку, после сброса первой порции жидкости или
использовать АВТОДЕЛФИЯ диспенсер юнит. Избегайте выплескивания жидкости из лунки и
избегайте касания стрипа или поверхности жидкости носиком пипетки.
5. Инкубировать в течение I часа (+10мин) при комнатной температуре при
перемешивании, используя Плейт шейкер.
медленном
6. После инкубации аспирировать и промыть каждый стрип с помощью АВТОДЕЛФИЯ Плейт
вошера, используя программу №4 (промывка).
7. Добавить 200 мкл Усиливающего растовра прямо из реагентного флакона в каждую лунку,
используя рекомендуемую ЭППЕНДОРФ мультипипетку, после заполнения Комбинаконечника
раствором Усиливающего раствора или используя АВТОДЕЛФИЯ плейт диспенсер. Избегайте
касания носиком пипетки лунки или ее содержимого.
8. Встряхивайте медленно 5 минут. Сигнал флюоресценции стабилен в течение нескольких часов,
если нет сильного испарения жидкости. Однако, мы рекомендуем измерять в течение 1 часа, чтобы
внешние факторы не оказали влияния на уровень сигнала.
9. Флюоресценция измеряется на флюорометре с временным разрешением. Выберите номер
программы 4 для автоматического измерения и подсчета результатов. Сверьте параметры группы
для программы №4 и если необходимо произведите коррекцию в соответствии со следующим (см.
описание к флюрометру для проведения редакции параметров считывания);
ASSAY TYPE
тип определения
FITTING METHOD
метод обработки
X-AXIS
х-ось
Y-AXIS
у-ось
BLANKS
бланки
STANDARDS
стандарты
STANDARD REPLICATES
стандарты в дупликате
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
IFMA
ИФМА(иммунофлюорометрическое)
SPLINE SMOOTHED
метод “сглаживания”
LOGARITHMIC
логарифмическая
LOGARITHMIC
логарифм ическая
2
2
5
5
2
2
1
I
10
10
100
--- стр. 321 ---
стандарты конц. 100
i STANDARD CONC 500
1 стандарты конц. 500
1 STANDARD CONC 1000
стандарты конц. 1000
1 UNKNOWN REPLICATES 2
1 неизвестные образцы в дубле 2
Процедура с двумя инкубациями.
Для сыворотки, плазмы и амниотической жидкости.
1. Приготовление реагентов Стабильность после разведения
Промывочный раствор 2 недели при +2+25С в закрытом
контейнере
Перенести 40 мл из Промывочного Концентрата в чистый флакон и растворить
добавляя 960 мл дистиллированной воды для приготовления готового буферного раствора
рП-7.8
Анти-АФП-Еи метка Использовать в течение 1 часа
после приготовления
Приготовить необходимый объем раствора метки при смешивании 40 мкл
метки с 3.0 мл МУЛЬТИ буфера для каждого стрипа (см. таблицу).
Важно, чтобы М У Л Ь Т И буфер не контактировал с раствором метки до
использования в работе.
Мы советуем использовать одноразовый пластиковый флакон для приготовления рабочего
раствора метки.
2. Перенести необходимое количество микротитровальных стрипов в рамку- держатель для
стрипов (вернуть оставшиеся стрипы в пластиковую коробку и закрыть). Не использовать
больше стрипов, чем вы можете использовать в течение 30 минут.
3. Раскапать 25 мкл в параллелях АФП стандарты(Ст.) и образцы пациентов(Обр.) в лунки стрипов
согласно следующей таблицы:________________________________________________________________
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст.
0 0 1 1 10 10 100 100 500 500 1000 1000
1-й 1-й 2-й 2-й 3-й 3-й
Обр. Обр. Обр. Обр. Обр. Обр. и т.д.
4.Добавить по 200 мкл Мультибуффера в каждую лунку используя рекомендуемую ЭППЕНДОРФ
мультипипетку, после сброса первой порции жидкости или использовать АВТОДЕЛФИЯ диспенсер
--- стр. 322 ---
юнит. Избегайте выплескивания жидкости из лунки и избегайте касания стрипа или поверхности
жидкости носиком пипетки.
5. Инкубировать в течение 1 часа (+10мин) при комнатной температуре при медленном
перемешивании, используя Плейт шейкер.
6. После первой инкубации аспирировать и промыть каждый стрип с помощью АВТО ДЕЛ ФИЯ
Плейт вошера, используя программу №4 (2-х, промывка 1).
7.Добавить по 200 мкл растверенной Анти-АФП-Еи метки в каждую лунку используя
рекомендуемую ЭППЕНДОРФ мультипипетку, после сброса первой порции жидкости или
использовать АВТОДЕЛФИЯ диспенсер юнит. Избегайте выплескивания жидкости из лунки и
избегайте касания стрипа или поверхности жидкости носиком пипетки.
8. Инкубировать в течение 1 часа (+10мин) при комнатной температуре без перемешивания.
9. После второй инкубации аспирировать и промыть каждый стрип с помощью АВТОДЕЛФИЯ
Плейт вошера, используя программу №4 (2-х, промывка 2).
10. Добавить 200 мкл Усиливающего растовра прямо из реагентного флакона в каждую лунку,
используя рекомендуемую ЭППЕНДОРФ мультипипетку, после заполнения Комбинаконечника
раствором Усиливающего раствора или используя АВТОДЕЛФИЯ плейт диспенсер. Избегайте
касания носиком пипетки лунки или ее содержимого.
11. Встряхивайте медленно 5 минут. Сигнал флюоресценции стабилен в течение нескольких часов,
если нет сильного испарения жидкости. Однако, мы рекомендуем измерять в течение 1 часа, чтобы
внещние факторы не оказали влияния на уровень сигнала.
12. Флюоресценция измеряется на флюорометре с временным разрешением. Выберите номер
программы 4 для автоматического измерения и подсчета результатов. Сверьте параметры группы
для программы №4 и если необходимо произведите коррекцию в соответствии со следующим (см.
описание к флюрометру для проведения редакции параметров считывания):
ASSAY TYPE IFMA
тип определения ИФМА(иммунофлюорометрическое)
FITTING METHOD SPLINE SMOOTHED
метод обработки метод “сглаживания”
X-AXIS LOGARITHMIC
х-ось логарифмическая
Y-AXIS LOGARITHMIC
у-ось логарифмическая
BLANKS 2
Бланки 2
STANDARDS 5
стандарты 5
STANDARD REPLICATES 2
стандарты в дупликате 2
STANDARD CONC 1
стандарты конц. 1
STANDARD CONC 10
стандарты конц. 10
STANDARD CONC 100
стандарты конц. 100
STANDARD CONC 5 00
стандарты конц. 500
--- стр. 323 ---
STANDARD CONC 1000
стандарты конц. 1 О О О
UNKNOWN REPLICATES 2
неизвестные образцы в дубле 2
ОСОБЕННОСТИ ОПРЕДЕЛЕНИЯ:
1. Отношение к этому набору как к целому необходимо для успешного использования
АВТОДЕЛФИЯ наборов. Реагенты в этом наборе являются комплексными компонентами. Не
смешивайте идентичные реагенты из различных лотов. Не используйте реагенты после срока
годности, указанной на флаконе.
2. Реагенты должны быть доведены до комнатной температуры (+20+25С) до
приготовления различных растворов. Замороженные образцы должны быть нагреты до комнатной
температуры при медленном и осторожном перемешивании. Не используйте вортекс или
смешанные образцы пациентов.
3. При промывке стрипов следите, чтобы все стрипы были заполнены полностью и
одинаково до верхнего уровня как показано на картинке. После промывки стрипов, проверьте, что
стрипы сухие. Если что-либо осталось в лунках, то необходимо перевернуть планшету и встряхнуть
на фильтровальную бумагу.
Аспирирующее/промывочное оборудование не должно находиться заполненным с
промывочным раствором длительный период времени, поскольку промывочные иглы могут быть
закупорены и трудно проходимы для жидкости. В конце рабочего дня аспирировать
дистиллированную воду в аспирирующую/промывочную систему. Промывочное устройство должно
быть регулярно промываться раствором NaCL (ЗОг/Л), а затем дистиллированной водой и 50%
этанолом и в конце промыто дистиллированной водой.
4. Для избежания примеси европия и как результат высокого флюресцентного фона
высокие требования предъявляются к процедуре раскапывания и промывки. Поэтому необычайно
важно использовать рекомендуемые и поставляемые вместе с АВТОДЕЛФИЯ пипетки.
Усиливающий раствор должен быть раскапан только с использованием рекомендуемой
ЭППЕНДОРФ мультипипеткой, и при этом первый объем сбрасывается для полного заполнения.
Тот же тип Комбинаконечника не может быть использован для раскапывания любого другого
реагента. После работы ЭППЕНДОРФ мультипипетка помещается на штатив с наконечником.
При использовании АВТОДЕЛФИЯ плейт диспенсера и АВТОДЕЛФИЯ диспенсера юнита
ознакомьтесь с описанием.
ПОДСЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ:
АВТОДЕЛФИЯ система включает программу для обработки результатов и получения
данных в виде стандартной кривой, концентрации неизвестных пациентов и т.д. (для детали см.
описание к флюорометру или к программе Мультикалк).
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА:
Использование контрольной сыворотки позволяет оценивать качество ежедневных
определений. Рекомендуется, чтобы каждая лаборатория имела свой сывороточный пул на
различных уровнях, или альтернативно использовала коммерческие контроли., например,
ЛИПОЧЕК. Высокие и низкие контроли должны быть использованы в каждом определении; если
определения включают более чем один планшет, контроли должны быть использованы для каждого
планшета.
ОГРАНИЧЕНИЯ:
--- стр. 325 ---
2 (
Делфия Эстриол (неконъюгированный)
DELFIA Unconjugated Estiol (uE3)
Флюрометрический анализ с разрешением по времени для количественного определения
неконьюгированного эстриола в сыворотке крови человека
Производитель - WALLAC Оу, Финляндия
Для диагностического применения in vitro.
ДЛЯ ПРИМЕНЕНИЯ В IN VITRO ДИАГНОСТИКЕ
96 ОПРЕДЕЛЕНИЙ
НАЗНАЧЕНИЕ;
Набор предназначен для определения неконьюгированного эстриола (НЭ) в образцах сыворотки крови
человека. Принцип основан на иммунофлюоресцентом анализе, в котором определяемая молекула антител к НЭ
взаимодействует по типу реакции антиген антитело с сорбированными на поверхности планшета антигеном
против антител к НЭ и вторыми антителами, меченые флюоресцентной меткой. В результате реакции
образуется высокофлюоресцентное соединение, концентрация которого определяется на приборе-флюорометре
ДЕЛФИЯ/ВИКТОР. Концентрация определяемого флюоресцирующего соединения прямо пропорциональна
количеству антител к НЭ в образцах сыворотки крови человека.
СОСТАВ НАБОРА:
1.НЭ стандарты; Во флаконах, лиофиллизированные. К-во - 6 шт.
2.НЭ-Еи раствор. Во флаконе, лиофиллизированный. К-во - 2 шт.
3.Анти-НЭ раствор (кроличьи) 0.95 мл (фл). К-во - 2 шт.
4.НЭ инкубационный буфер; 30 мл(фл), К-во -1 шт.
5.Анти-кроличьи IgG микротитрационные стрипы 96 луночные; К-во - I шт
6.Штрих кодовые метки для кассеты с реагентами. К-во - 3 шт.
ПРИНЦИП МЕТОДА:
ДЕЛФИЯ НЭ определение основано на твердофазном, флюороиммуном определении с
разрешением по времени на основе конкуренции между меченым европием НЭ и НЭ в тестируемом
образце за ограниченное количество мест связывания на НЭ -специфических моноклональных
антителах (кроличьи). Стандарты, контроли и образца пациентов, содержащие НЭ ингибируют
связывание меченое европием НЭ с антителами. Блокирующие агенты в НЭ инкубационном буфере
предотвращают выделение НЭа из связанного с белками состояния. Второе антитело
взаимодействующее с кроличьими IgG антителами покрывают поверхность лунок и представляют
твердую фазу, определяя высококачественное разделение антител-связанных и свободных антигенов
НЭ. В этом определении только одна инкубационная ступень.
Усиливающий раствор диссоциирует ионы европия из меченого НЭ в раствор, где они
формируют высокофлюоресцентные хелатные комплексы с компонентами усиливающего раствора.
Флюоресценция каждой лунки в последующем измеряется. Флюоресцентный сигнал каждого образца
обратно пропорционален количеству НЭ в образце.
Каждый ДЕЛФИЯ НЭ набор содержит реагентов необходимых для 96 определений.
Срок годности набора указан на внешней стороне коробки. Хранение при +2+8 С.
М АТЕРИАЛЫ НЕО БХОДИМ Ы Е. Н О Н Е ПОСТАВЛЯЕМ Ы Е
С Н АБО РО М :
--- стр. 326 ---
1. Флюорометр с временным разрешением плюс принтер и внешний компьютер.
2. Автоматический вошер - ДЕЛФИЯ плейтвошер (Кат.№1296-024 или1296-026)
3. Автоматический шейкер-ДЕЛФИЯ плейтшейкер(Кат,№1296-001 или 1296-003)
4. Пипетка для разливки ДЕЛФИЯ буфера и метки - ЭППЕНДОРФ МУЛЬТИПИПЕТКА (1296-014) с 5 мл
Комби наконечниками (1296-016) или в качестве альтернативы ДЕЛФИЯ плейт диспенсер с ДЕЛФИЯ
диспенсер юнит (1296-041 или 1296-043).
5. Пипетка для разливки Усиливающего раствора - ЭППЕНДОРФ мультипипетка (1296-014) с 5 мл
Комби наконечниками (1296-016) или альтернативно ДЕЛФИЯ плейт диспенсер (1296-041).
6. ДЕЛФИЯ растворитель I (Кат.№ В127-100, В128-100).
В дополнении к ДЕЛФИЯ системе необходимо следующее:
- дозирующая пипетка для разливки микролитровых объемов
- пипетки для разливки миллитровых объемов НЭ буфера требуемого для приготовления
раствора метки и антител
- дистиллированная вода
СБОР ОБРАЗЦОВ И ХРАНЕНИЕ:
Получение крови посредством венопункции, образование сгустка и выделение сыворотки
посредством центрифугирования. Плазма, полученна с использованием ЭДТА и цитрата натрия не
может быть использована, вследствии воздействия на хелатирующий европий. Однако может
применяться плазма крови полученная с гепарином. Гемолитическая (гемоглобин>2г/Л), липемическая
(>2 г/Л) и истерическая (билирубин>30 мкмоль/Л) сыворотки использовать не рекомендуется. Если
концентрация превышает 50 нмоль/Л следует развести сыворотки или нормальной женской
сывороткой или ДЕЛФИЯ дилюентом I.
Образцы могут быть сохранены 12 часов при комнатной температуре или 3 дня при +2+8С.
Для более длительного периода неразведенные образцы могут храниться при -20 С. Избегайте
повторного замораживания размораживания.
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ;
Для диагностики ин витро.
Следует соблюдать правила предостороженности США №CDC 88-8395 или местные правила.
Можно считать все образцы крови пациентов как потенциально инфицированные.
Реагенты содержат азид натрия в качестве консерванта. Азид натрия может
взаимодействовать с металлическими поверхностями с образованием азидов металлов. Для
предотвращения образования азидов металлов необходимо промыть большим количеством воды.
Для дезинфекции всех сливных реагентов пользуйтесь правилами местных контроллирующих
организаций.
Флюоресценция измеряется на флюорометре с временным разрешением. Выберите номер
программы 50 для автоматического измерения и подсчета результатов. Сверьте параметры
группы для программы №50 и если необходимо произведите коррекцию в соответствии со следующим
(см. описание к флюрометру для проведения редакции параметров считывания):
ASSAY TYPE FIA
тип определения ФИ А
FITTING METHOD SPLINE SMOOTHED
метод обработки метод “сглаживания”
X-AXIS LOGARITHMIC
Данный набор является частью комплексной системы иммунодиагностических реагентов и
оборудования. ДЕЛФИЯ система требует следующ ие компоненты, которые могут быть поставлены или
от W ALLAC 0Y или от его дистрибьютеров:
--- стр. 327 ---
х-ось
Y-AXIS
y-OCb
BLANKS
бланки О
STANDARDS
стандарты
STANDARD REPLICATES
стандарты в дупликате 2
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
UNKNOWN REPLICATES
неизвестные образцы в дубле 2
логарифмическая
В/Вмакс
В/В макс
О
2 Убедитесь, чтобы концентрация
стандартов, указанная на флаконах
А совпадала с задаваемой. Если не
А совпадает, введите новые.
В
В
С
С
D
Д
Е
Е
F
Ф
2
ОСОБЕННОСТИ ОПРЕДЕЛЕНИЯ;
1. Отношение к этому набору как к целому необходимо для успешного использования ДЕЛФИЯ
наборов. Реагенты в этом наборе являются комплексными компонентами. Не смешивайте идентичные
реагенты из различных лотов. Не используйте реагенты после срока годности, указанной на флаконе.
2. Реагенты должны быть доведены до комнатной температуры (+20+25С) до приготовления
различных растворов. Замороженные образцы должны быть нагреты до комнатной температуры при
медленном и осторожном перемешивании. Не используйте вортекс или смешанные образцы
пациентов.
3. При промывке стрипов следите, чтобы все стрипы были заполнены полностью и одинаково
до верхнего уровня как показано на картинке. После промывки стрипов, проверьте, что стрипы сухие.
Если что-либо осталось в лунках, то необходимо перевернуть планшету и встряхнуть на
фильтровальную бумагу.
Аспирирующее/промывочное оборудование не должно находиться заполненным с
промывочным раствором длительный период времени, поскольку промывочные иглы могут быть
закупорены и трудно проходимы для жидкости. В конце рабочего дня аспирировать дистиллированную
воду в аспирирующую/промывочную систему. Промывочное устройство должно быть регулярно
промываться раствором NaCL (ЗОг/Л), а затем дистиллированной водой и 50% этанолом и в конце
промыто дистиллированной водой.
4. Для избежания примеси европия и как результат вьюокого флюресцентного фона высокие
требования предъявляются к процедуре раскапывания и промывки. Поэтому необычайно важно
использовать рекомендуемые и поставляемые вместе с ДЕЛФИЯ пипетки.
Усиливающий раствор должен быть раскапан только с использованием рекомендуемой
ЭППЕНДОРФ мультипипеткой, и при этом первый объем сбрасывается для полного заполнения. Тот
же тип Комбинаконечника не может быть использован для раскапывания любого другого реагента.
После работы ЭППЕНДОРФ мультипипетка помещается на штатив с наконечником.
При использовании ДЕЛФИЯ плейт диспенсера и ДЕЛФИЯ диспенсера юнита ознакомьтесь с
описанием.
ПОДСЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ;
ДЕЛФИЯ система включает программу для обработки результатов и получения данных в виде
стандартной кривой, концентрации неизвестных пациентов и т.д. (для детали см. описание к
флюорометру или к программе Мультикалк).
--- стр. 329 ---
АвтоДЕЛФИЯ Эстриол (неконъюгированный)
AutoDELFIA Unconjugated Estiol (uE3)
Флюрометрический анализ с разрешением по времени для количественного определения
неконьюгированного эстриола в сыворотке крови человека
Производитель - WALLAC Оу, Финляндия
Для диагностического применения in vitro.
ДЛЯ ПРИМЕНЕНИЯ В IN VITRO ДИАГНОСТИКЕ
96 ОПРЕДЕЛЕНИЙ
НАЗНАЧЕНИЕ:
Набор предназначен для определения неконьюгированного ЭСтриола (НЭ) в образцах сыворотки крови
человека. Принцип основан на иммунофлюоресцентом анализе, в котором определяемая молекула антител к НЭ
взаимодействует по типу реакции антиген антитело с сорбированными на поверхности планшета антигеном
против антител к НЭ и вторыми антителами, меченые флюоресцентной меткой. В результате реакции
образуется высокофлюоресцентное соединение, концентрация которого определяется на приборе-флюорометре
АВТОДЕЛФИЯ/ВИКТОР. Концентрация определяемого флюоресцирующего соединения прямо
пропорциональна количеству антител к НЭ в образцах сыворотки крови человека.
СОСТАВ НАБОРА:
1.НЭ стандарты; Во флаконах, лиофиллизированные. К-во - 6 шт.
2.НЭ-Еи раствор. Во флаконе, лиофиллизированный. К-во - 2 шт.
3.Анти-НЭ раствор (кроличьи) 0.95 мл (фл). К-во - 2 шт.
4.НЭ инкубационный буфер; 30 мл{фл). К-во -1 шт.
5.Анти-кроличьи IgG микротитрационные стрипы 96 луночные; К-во - 1 шт
6.Штрих кодовые метки для кассеты с реагентами. К-во - 3 шт.
ПРИНЦИП МЕТОДА;
АВТОДЕЛФИЯ НЭ определение основано на твердофазном, флюороиммуном определении с
разрешением по времени на основе конкуренции между меченым европием НЭ и НЭ в тестируемом
образце за ограниченное количество мест связывания на НЭ -специфических моноклональных
антителах (кроличьи). Стандарты, контроли и образца пациентов, содержащие НЭ ингибируют
связывание меченое европием НЭ с антителами. Блокирующие агенты в НЭ инкубационном буфере
предотвращают выделение НЭа из связанного с белками состояния. Второе антитело
взаимодействующее с кроличьими IgG антителами покрывают поверхность лунок и представляют
твердую фазу, определяя высококачественное разделение антител-связанных и свободных антигенов
НЭ. В этом определении только одна инкубационная ступень.
Усиливающий раствор диссоциирует ионы европия из меченого НЭ в раствор, где они
формируют высокофлюоресцентные хелатные комплексы с компонентами усиливающего раствора.
Флюоресценция каждой лунки в последующем измеряется. Флюоресцентный сигнал каждого образца
обратно пропорционален количеству НЭ в образце.
Каждый АВТОДЕЛФИЯ НЭ набор содержит реагентов необходимых для 96 определений.
Срок годности набора указан на внешней стороне коробки. Хранение при +2+8 С.
М АТЕРИАЛЫ НЕОБХОДИМ Ы Е, Н О Н Е ПО СТАВЛЯЕМ Ы Е
С Н АБО РО М ;
--- стр. 330 ---
1. Флюорометр с временным разрешением плюс принтер и внешний компьютер.
2. Автоматический вошер - АВТОДЕЛФИЯ плейтвошер (Кат.№ 1296-024 или1296-026)
3. Автоматический шейкер-АВТОДЕЛФИЯ плейтшейкер(Кат.№1296-001или1296-003)
4. Пипетка для разливки АВТОДЕЛФИЯ буфера и метки - ЭППЕНДОРФ МУЛЬТИПИПЕТКА (1296-014) с
5 мл Комби наконечниками (1296-016) или в качестве альтернативы АВТОДЕЛФИЯ плейт диспенсер с
АВТОДЕЛФИЯ диспенсер юнит (1296-041 или 1296-043).
5. Пипетка для разливки Усиливающего раствора - ЭППЕНДОРФ мультипипетка (1296-014) с 5 мл
Комби наконечниками (1296-016) или альтернативно АВТОДЕЛФИЯ плейт диспенсер (1296-041).
6. АВТОДЕЛФИЯ растворитель 1 (Кат.№ В127-100. В128-100).
В дополнении к АВТОДЕЛФИЯ системе необходимо следующее:
-дозирующая пипетка для разливки микролитровых объемов
' пипетки для разливки миллитровых объемов НЭ буфера требуемого для приготовления
раствора метки и антител
- дистиллированная вода
СБОР ОБРАЗЦОВ И ХРАНЕНИЕ:
Получение крови посредством венопункции, образование сгустка и выделение сыворотки
посредством центрифугирования. Плазма, полученна с использованием ЭДТА и цитрата натрия не
может быть использована, вследствии воздействия на хелатирующий европий. Однако может
применяться плазма крови полученная с гепарином. Гемолитическая (гемоглобин>2г/Л), липемическая
(>2 г/Л) и иктерическая (билирубин>30 мкмоль/Л) сыворотки использовать не рекомендуется. Если
концентрация превышает 50 нмоль/Л следует развести сыворотки или нормальной женской
сывороткой или АВТОДЕЛФИЯ дилюентом I.
Образцы могут быть сохранены 12 часов при комнатной температуре или 3 дня при +2+8С.
Для более длительного периода неразведенные образцы могут храниться при -20 С. Избегайте
повторного замораживания размораживания.
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ:
Для диагностики ин витро.
Следует соблюдать правила предостороженности США №CDC 88-8395 или местные правила.
Можно считать все образцы крови пациентов как потенциально инфицированные.
Реагенты содержат азид натрия в качестве консерванта. Азид натрия может
взаимодействовать с металлическими поверхностями с образованием азидов металлов. Для
предотвращения образования азидов металлов необходимо промыть большим количеством воды.
Для дезинфекции всех сливных реагентов пользуйтесь правилами местных контроллирующих
организаций.
Флюоресценция измеряется на флюорометре с временным разрешением. Выберите номер
программы 50 для автоматического измерения и подсчета результатов. Сверьте параметры
группы для программы №50 и если необходимо произведите коррекцию в соответствии со следующим
(см. описание к флюрометру для проведения редакции параметров считывания):
ASSAY ТУРЕ FIA
тип определения ФИА
FITTING METHOD SPLINE SMOOTHED
метод обработки метод “сглаживания”
X-AXIS LOGARITHMIC
Данный набор является частью комплексной системы иммунодиагностических реагентов и
оборудования. АВТОДЕЛФИЯ система требует следующ ие компоненты, которые м огут быть
поставлены или от W ALLAC 0Y или от его дистрибьютеров:
--- стр. 331 ---
х-ось
Y-AXIS
у-ось
BLANKS
бланки О
STANDARDS
стандарты
STANDARD REPLICATES
стандарты в дупликате 2
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
UNKNOWN REPLICATES
неизвестные образцы в дубле 2
логарифмическая
В/В макс
В/Вмакс
О
2 Убедитесь, чтобы концентрация
стандартов, указанная на флаконах
А совпадала с задаваемой. Если не
А совпадает, введите новые.
В
В
С
С
D
Д
Е
Е
F
Ф
2
ОСОБЕННОСТИ ОПРЕДЕЛЕНИЯ:
1. Отношение к этому набору как к целому необходимо для успешного использования
АВТОДЕЛФИЯ наборов. Реагенты в этом наборе являются комплексными компонентами. Не
смешивайте идентичные реагенты из различных лотов. Не используйте реагенты после срока
годности, указанной на флаконе.
2. Реагенты должны быть доведены до комнатной температуры (+20+25С) до приготовления
различных растворов. Замороженные образцы должны быть нагреты до комнатной температуры при
медленном и осторожном перемешивании. Не используйте вортекс или смешанные образцы
пациентов.
3. При промывке стрипов следите, чтобы все стрипы были заполнены полностью и одинаково
до верхнего уровня как показано на картинке. После промывки стрипов, проверьте, что стрипы сухие.
Если что-либо осталось в лунках, то необходимо перевернуть планшету и встряхнуть на
фильтровальную бумагу.
Аспирирующее/промывочное оборудование не должно находиться заполненным с
промывочным раствором длительный период времени, поскольку промывочные иглы могут быть
закупорены и трудно проходимы для жидкости. В конце рабочего дня аспирировать дистиллированную
воду в аспирирующую/промывочную систему. Промывочное устройство должно быть регулярно
промываться раствором NaCL (ЗОг/Л), а затем дистиллированной водой и 50% этанолом и в конце
промыто дистиллированной водой.
4. Для избежания примеси европия и как результат высокого флюресцентного фона высокие
требования предъявляются к процедуре раскапывания и промывки. Поэтому необычайно важно
использовать рекомендуемые и поставляемые вместе с АВТОДЕЛФИЯ пипетки.
Усиливающий раствор должен быть раскапан только с использованием рекомендуемой
ЭППЕНДОРФ мультипипеткой, и при этом первый объем сбрасывается для полного заполнения. Тот
же тип Комбинаконечника не может быть использован для раскапывания любого другого реагента.
После работы ЭППЕНДОРФ мультипипетка помещается на штатив с наконечником.
При использовании АВТОДЕЛФИЯ плейт диспенсера и АВТОДЕЛФИЯ диспенсера юнита
ознакомьтесь с описанием.
ПО ДСЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ;
--- стр. 337 ---
Гемолитическая (гемоглобин меньше 5 г/Л), липемическая(<5г/Л) или иктерическая (билирубин
< 500мкмоль/Л) сыворотка не оказыввает влияния на результаты.
Важно разделить фракцию сыворотки от цельной крови до переноса в лабораторию.
Кроме того, высокая температура должна быть исключена вследствии нестабильности молекулы
ХГЧ. (см фигура А и В).
Образцы могут быть сохранены 6 дней при +2+8С. Для более длительного периода
необходимо заморозить образцы до -20С. Избегать повторного размораживания замораживания
для предотвращения денатурации молекулы ХГЧ.
В случае, если концентрация ХГЧ в образцах пациентов превышает (или ожидается)
5000 Ед/Л, необходимо развести в 100 раз с помощью ДЕЛФИЯдилюента I для снижения
концентрации ниже 5000 Ед/Л.
М ЕРЫ П РЕ Д О С ТО РО Ж Н О С ТИ ;
Для ин витро диагностики.
Набор содержит реагенты произведенные из компонентов человеческой крови.
Источник протестирован на на наличие поверхностного антигена к гепатиту В, анти-гепатиту С,
и анти-ВИЧ I и П. Тем не менее все рекомендации по мерам предосторожности при работе с
производными крови должны быть соблюдены.
Можно считать все образцы крови пациентов как потенциально инфицированные.
Реагенты содержат азид натрия в качестве консерванта. Азид натрия может
взаимодействовать с металлическими поверхностями с образованием азидов металлов. Для
предотвращения образования азидов металлов необходимо промыть большим количеством
воды.
Для удаления всех сливных реагентов пользуйтесь правилами местных
контрол л ирующих организаций.
П РО ТО К О Л О П РЕД ЕЛ ЕН И Я :
Выполните каждое определение в дубликате как для стандартов, так и для тестируемых
образцов. Стандартная кривая должна быть использована для каждого определения. Образцы и
реагенты должны быть доведены до комнатной температуры (+20+25С) до использования.
1. Приготовление реагентов Стабильность после разведения
Промывочный раствор 2 недели при +2+25С в закрытом
контейнере
Перенести 40 мл из Промывочного Концентрата в чистый флакон и растворить
добавляя 960 мл дистиллированной воды для приготовления готового буферного
раствора рН^7.8
Анти-АФП-Еи/Анти-ХГЧ-Sm метка И спользовать в течение 1 часа
после приготовления
Приготовить необходимый объем раствора метки при смешивании 30 мкл
метки с 3.0 мл ДЕЛФИЯ>2 буфера для каждого стрипа (см. таблицу).
Важно, чтобы Д ЕЛ Ф И Я -2 буфер не кон такти ровал с раствором м етки до
использования в работе.
Мы советуем использовать одноразовый пластиковый флакон для приготовления
рабочего раствора метки.
--- стр. 338 ---
2. Перенести необходимое количество микротитровальных стрипов в рамку- держатель
для стрипов (вернуть оставшиеся стрипы в пластиковую коробку и закрыть). Не
использовать больше стрипов, чем вы можете использовать в течение 30 минут.
3. Раскапать 200 мкл метки(М) и либо 25 мкл стандартов(Ст.), или 25 мкл образцов
пациентов(Обр.) одновременно в лунки стрипов согласно следующей таблицы:
4.
5.
Можно и наоборот, вначале добавить образцы и стандарты, а затем метку
в первый стрип и двигаться после этого к следующему стрипу.
Инкубировать в течение 2.5 часа {+10мин) при комнатной температуре
медленном перемешивании на шейкере. Инкубационная температура
превышать +30С.
при
не должна
После инкубации аспирировать и промыть каждый стрип с помощью
ДЕЛФИЯплейт вошера, используя программу 67(промывка).
6. Добавить 200 мкл Усиливающего раствора прямо из реагентного флакона в каждую
лунку, используя рекомендуемую ЭППЕНДОРФ мультипипетку, после заполнения
Комбинаконечника раствором Усиливающего раствора или используя ДЕЛФИЯплейт
диспенсер. Избегайте касания носиком пипетки лунки или ее содержимого.
7. Встряхивайте медленно 5 минут. Сигнал флюоресценции стабилен в течение
нескольких часов, если нет сильного испарения жидкости. Однако, мы рекомендуем измерять в
течение 1 часа, чтобы внешние факторы не оказали влияния на уровень сигнала.
8. Создайте следующий протокл для двойной метки в программе МУЛЬТИКАЛК и
измеряйте флюресценцию с использованием 1234 ДЕЛФИЯФДЮРОМЕТРА.
ASSAY TYPE
тип определения
01 DUAL ASSAY
двойная метка
01.1 CHANNEL
1 -й канал
01.1.1 CHANNEL-B LABEL
канал В
03 MEASURING PARAMETERS
измеряемые параметры
20 X-AXIS(CONCENTRATION)
х-ось(концентрация)
21 Y-AX1S (RESPONSE)
У'ось(ответ)
22 FITTING ALGORITHM
метод обработки
23 STD OUTLIER REJECTION
“плохие” стандарты удаляются
1FMA
ИФМА(иммунофлюорометрическое)
YES
да
А
название протокола А
(п ате of protocol В)
название протокола В
EuSm
LOG
ЛОГАРИФМ
LOG_B
ЛОГАРИФМ В
SPLINE
“спрямление”
N 0
нет
--- стр. 339 ---
24 HALT FOR CURVE EDIT NO
остановка для исправления
стандартной кривой нет
60 CONTROLS N 0
контроли нет
61 HISTOGRAM N 0
гистограмма нет
62 QC-ACCEPTANCE RULES N 0
контроль качества нет
80 STORED FILES INPUT
хранимые файлы вход
81 DISPLAY = SEQ PAT COUNTS CONC UNIT %CV ID CURVE COUNTSB
CONC_B UNIT_B %CV_B
данные показываемые на дисплее
82 PRINTER - SEQ PAT COUNTS CONC UNIT %CV ID CURVE COUNTSB
CONC_B UNITES %CV_B CODE
данные на печати
83 OUTPUT
выход
84 RESULTS = PAT CONC CONC В
результаты
CODING
кодирование ;
2 BLANK I
бланки в дубле J
2 STD - В
стандарты В в дубле i
2 STD = С
стандарты С в дубле
2 S T D - D !
и т.д. ;
2 UNKN }
неизвестные в дубле j
FACTORS j
факторы ;
UNIT - U/ml j
единицы измерения, могут быть отредактированы ;
OUTPUT
выходные данные !
DEFINE UNIT В
и т.д.(см. описание к руководству по двойной метке)
ОСОБЕННОСТИ ОПРЕДЕЛЕНИЯ:
1. Отношение к этому набору как к целому необходимо для успешного использования
ДЕЛФИЯнаборов. Реагенты в этом наборе являются комплексными компонентами. Не
смешивайте идентичные реагенты из различных лотов. Не используйте реагенты после срока
годности, указанной на флаконе.
2. Реагенты должны быть доведены до комнатной температуры (+20+25С) до
приготовления различных растворов. Замороженные образцы должны быть нагреты до
комнатной температуры при медленном и осторожном перемешивании. Не используйте вортекс
или смешанные образцы пациентов,
3. При промывке стрипов следите, чтобы все стрипы были заполнены полностью и
одинаково до верхнего уровня как показано на картинке. После промывки стрипов, проверьте,
что стрипы сухие. Если что-либо осталось в лунках, то необходимо перевернуть планшету и
встряхнуть на фильтровальную бумагу.
--- стр. 340 ---
Аспирирующее/промывочное оборудование не должно находиться заполненным с
промывочным раствором длительный период времени, поскольку промывочные иглы могут
быть закупорены и трудно проходимы для жидкости. В конце рабочего дня аспирировать
дистиллированную воду в аспирирующую/промывочную систему. Промывочное устройство
должно быть регулярно промываться раствором NaCL (ЗОг/Л), а затем дистиллированной водой
и 50% этанолом и в конце промыто дистиллированной водой.
4. Для избежания примеси европия и как результат высокого флюресцентного фона
высокие требования предъявляются к процедуре раскапывания и промывки. Поэтому
необычайно важно использовать рекомендуемые и поставляемые вместе с ДЕЛФИЯпипетки.
Усиливающий раствор должен быть раскапан только с использованием рекомендуемой
ЭППЕНДОРФ мультипипеткой, и при этом первый объем сбрасывается для полного заполнения.
Тот же тип Комбинаконечника не может быть использован для раскапывания любого другого
реагента. После работы ЭППЕНДОРФ мультипипетка помещается на штатив с наконечником.
При использовании ДЕЛФИЛплейт диспенсера и ДЕЛФИЛ диспенсера юнита
ознакомьтесь с описанием.
ПОДСЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ:
АВТОДЕЛФИЛсистема включает программу для обработки результатов и получения
данных в виде стандартной кривой, концентрации неизвестных пациентов и т.д. (для детали см.
описание к флюорометру или к программе Мультикалк).
Для Даун синдрома и дефекта нервной трубки подсчета риска существует специальное
дополнение к программе “МУЛЬТИКАЛК” - кат.номер. 1224-405. Риск рассчитываемый по этой
программе основывается на подсчете статистических параметров распределения рисков,
описанных SPENCER et al.
Риск может быть также подсчитан с использованием и других программ. При
необходимости можно обратиться к руководству для МУЛЬТИКАЛКА, чтобы правильно
перенести полученные данные в новую программу.
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА:
Использование контрольной сыворотки советуют использоывать при каждой постановке
для получения надежных результатов. Рекомендуется, чтобы каждая лаборатория приготовила
свойи пул сывороток на различных концентрационных диапазонах. Высокий, средний и низкий
уровни должны быть использованы в каждом определении.
ОГРАНИЧЕНИЯ:
Как и для всех диагностических тест-систем, клиническое заключение не может быть
основано только на результатах одного теста и необходимо всестороннее клиническое и
лабораторное обследование. WALLAC ОУ не отвечает за клиническое заключение по данным
исследованиям.
Факторы риска оцениваемые с помощью МУЛЬТИКАЛК и других программ являются
руководством для врачей в оценке нарушений у плода. Интерпретация результатов должна быть
проведена врачом с учетом всех представленных данных. WALLAC 0 Y не отвечает за
индивидуальные риски, подсчитанные по любой другой программе.
Различия в популляции могут приводить к изменению средних значений. Частота
выявлений также поэтому может варьировать.
Оптимальные условия для получения нормальных результатов уточнение гестационного
срока.
Важно, что все реагенты и образцы должны быть использованы при комнатной
температуре, но при этом температура инкубации не должна превышать ЗОС.
ИНТРЕПРЕТАЦИЯ ДАННЫХ И ОЖИДАЕМЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ:
Предварительные результаты для сывороточного уровня АФП и свободного бетта ХГЧ
во время течения беременности с помощью двойного теста АФП/Св. в ХГЧ двойной набор
показано в таблице. Эта данные основаны на нормальной, одноплодной беременности как это
было показано при мультицентровом исследовании. Поэтому, они не могут быть использованы
--- стр. 341 ---
% * ’
А ВТО Д ЕЛ Ф И Я А Ф П /Х ГЧ бетта,
двойная м етка
МЕТОД ЛАНТАНИДНОГО ФЛЮОРЕСЦЕНТНОГО ИММУНОГО
АНАЛИЗА С РАЗРЕШЕНИЕМ ПО ВРЕМЕНИ
ИНСТРУКЦИЯ ДЛЯ ПРИМЕНЕНИЯ. НА 96 ОПРЕДЕЛЕНИЙ.
ПРОИЗВОДИТЕЛЬ:
WALLAC Оу, Turku, FINLAND
ДЛЯ ДИАГНОСТИЧЕСКОГО ПРИМЕНЕНИЯ ИН ВИТРО.
PerkinElmer
life sciences
гу
--- стр. 345 ---
Гемолитическая (гемоглобин меньше 5 г/Л), липемическая(<5г/Л) или иктерическая (билирубин
< 500мкмоль/Л) сыворотка не оказыввает влияния на результаты.
Важно разделить фракцию сыворотки от цельной крови до переноса в лабораторию.
Кроме того, высокая температура должна быть исключена вследствии нестабильности молекулы
ХГЧ. (см фигура А и В).
Образцы могут быть сохранены 6 дней при +2+8С. Для более длительного периода
необходимо заморозить образцы до -20С. Избегать повторного размораживания замораживания
для предотвращения денатурации молекулы ХГЧ.
В случае, если концентрация ХГЧ в образцах пациентов превышает (или ожидается)
5000 Ед/Л, необходимо развести в 100 раз с помощью АВТОДЕЛФИЯдилюента I для снижения
концентрации ниже 5000 Ед/Л.
М ЕРЫ П РЕ Д О С Т О РО Ж Н О С Т И :
Для И И витро диагностики.
Набор содержит реагенты произведенные из компонентов человеческой крови.
Источник протестирован на на наличие поверхностного антигена к гепатиту В, анти-гепатиту С,
и анти-ВИЧ I и II. Тем не менее все рекомендации по мерам предосторожности при работе с
производными крови должны быть соблюдены.
Можно считать все образцы крови пациентов как потенциально инфицированные.
Реагенты содержат азид натрия в качестве консерванта. Азид натрия может
взаимодействовать с металлическими поверхностями с образованием азидов металлов. Для
предотвращения образования азидов металлов необходимо промыть большим количеством
воды.
Для удаления всех сливных реагентов пользуйтесь правилами местных
контроллирующих организаций.
П РО ТО К О Л О П РЕД ЕЛ ЕН И Я :
Выполните каждое определение в дубликате как для стандартов, так и для тестируемых
образцов. Стандартная кривая должна быть использована для каждого определения. Образцы и
реагенты должны быть доведены до комнатной температуры (+20+25С) до использования.
1. Приготовление реагентов Стабильность после разведения
Промывочный раствор 2 недели при +2+25С в закрытом
контейнере
Перенести 40 мл из Промывочного Концентрата в чистый флакон и растворить
добавляя 960 мл дистиллированной воды для приготовления готового буферного
раствора рН^7.8
Анти-АФП-Еи/Анти-ХГЧ-Sm метка И спользовать в течение 1 часа
после приготовления
Приготовить необходимый объем раствора метки при смешивании 30 мкл
метки с 3.0 мл АВТОДЕЛФИЯ-2 буфера для каждого стрипа (см. таблицу).
Важно, чтобы А ВТО ДЕЛФ И Я-2 буфер не кон такти ровал с раствором метки до
использования в работе.
Мы советуем использовать одноразовый пластиковый флакон для приготовления
рабочего раствора метки.
--- стр. 346 ---
2, Перенести необходимое количество микротитровальных стрипов в рамку- держатель
для стрипов (вернуть оставшиеся стрипы в пластиковую коробку и закрыть). Не
использовать больше стрипов, чем вы можете использовать в течение 30 минут.
3. Раскапать 200 мкл метки(М) и либо 25 мкл стандартов(Ст.), или 25 мкл образцов
пациентов(Обр.) одновременно в лунки стрипов согласно следующей таблицы:
4.
5.
Можно и наоборот, вначале добавить образцы и стандарты, а затем метку
в первый стрип и двигаться после этого к следующему стрипу.
Инкубировать в течение 2.5 часа (+10мин) при комнатной температуре
медленном перемешивании на шейкере. Инкубационная температура
превышать +30С.
при
не должна
После инкубации аспирировать и промыть каждый стрип с помощью
АВТОДЕЛФИЯплейт вошера, используя программу 67(промывка).
6. Добавить 200 мкл Усиливающего раствора прямо из реагентного флакона в каждую
лунку, используя рекомендуемую ЭППЕНДОРФ мультипипетку, после заполнения
Комбинаконечника раствором Усиливающего раствора или используя АВТОДЕЛФИЯплейт
диспенсер. Избегайте касания носиком пипетки лунки или ее содержимого.
7. Встряхивайте медленно 5 минут. Сигнал флюоресценции стабилен в течение
нескольких часов, если нет сильного испарения жидкости. Однако, мы рекомендуем измерять в
течение 1 часа, чтобы внешние факторы не оказали влияния на уровень сигнала.
8. Создайте следующий протокл для двойной метки в программе МУЛЬТИКАЛК и
измеряйте флюресценцию с использованием 1234 АВТОДЕЛФКЯФЛЮРОМЕТРА.
ASSAY TYPE
тип определения
01 DUAL ASSAY
двойная метка
01.1 CHANNEL
1 -й канал
01.1.1 CHANNEL-B LABEL
канал В
03 MEASURING PARAMETERS EuSm
измеряемые параметры
20 X-AXIS(CONCENTRATION) LOG
х-ось(концентрация) ЛОГАРИФМ
21 Y-AXIS (RESPONSE) LOG^B
у-ось(ответ) ЛОГАРИФМ В
22 FITTING ALGORITHM SPLINE
метод обработки “спрямление”
23 STD OUTLIER REJECTION NO
“плохие” стандарты удаляются нет
IFMA
ИФМА(иммунофлюорометрическое)
YES
да
А
название протокола А
(name of protocol В)
название протокола В
--- стр. 347 ---
24 HALT FOR CURVE EDIT NO
остановка для исправления
стандартной кривой нет
60 CONTROLS N 0
контроли нет
61 HISTOGRAM N 0
гистограмма нет
62 QC-ACCEPTANCE RULES N 0
контроль качества нет
80 STORED FILES INPUT
хранимые файлы вход
81 DISPLAY = SEQ PAT COUNTS CONC UNIT %CV ID CURVE COUNTSB
CONC_B UNIT_B %CV_B
данные показываемые на дисплее
82 PRINTER - SEQ PAT COUNTS CONC UNIT %CV ID CURVE COUNTSB
CONC_B UNIT_B %CV_B CODE
данные на печати
83 OUTPUT
выход
84 RESULTS = PAT CONC CONC В
результаты
CODING
кодирование
2 BLANK
бланки в дубле
2 STD - В
стандарты В в дубле
2 S T D = С
стандарты С в дубле
2 S T D = D
и т.д.
2U N K N
неизвестные в дубле
FACTORS
факторы
UNIT = U/ml
единицы измерения, могут быть отредактированы
OUTPUT
выходные данные
DEFINE UNITB
и т.д.(см. описание к руководству по двойной метке)
ОСОБЕННОСТИ ОПРЕДЕЛЕНИЯ:
\. Отношение к этому набору как к целому необходимо для успешного использования
АВТО ДЕЛ ФИЯнаборов. Реагенты в этом наборе являются комплексными компонентами. Не
смешивайте идентичные реагенты из различных лотов. Не используйте реагенты после срока
годности, указанной на флаконе.
2. Реагенты должны быть доведены до комнатной температуры (+20+25С) до
приготовления различных растворов. Замороженные образцы должны быть нагреты до
комнатной температуры при медленном и осторожном перемешивании. Не используйте вортекс
или смешанные образцы пациентов.
3. При промывке стрипов следите, чтобы все стрипы были заполнены полностью и
одинаково до верхнего уровня как показано на картинке. После промывки стрипов, проверьте,
что стрипы сухие. Если что-либо осталось в лунках, то необходимо перевернуть планшету и
встряхнуть на фильтровальную бумагу.
--- стр. 348 ---
Аспирирующее/промывочное оборудование не должно находиться заполненным с
промывочным раствором длительный период времени, поскольку промывочные иглы могут
быть закупорены и трудно проходимы для жидкости. В конце рабочего дня аспирировать
дистиллированную воду в аспирирующую/промывочную систему. Промывочное устройство
должно быть регулярно промываться раствором NaCL (ЗОг/Л), а затем дистиллированной водой
и 50% этанолом и в конце промыто дистиллированной водой.
4. Для избежания примеси европия и как результат высокого флюресцентного фона
высокие требования предъявляются к процедуре раскапывания и промывки. Поэтому
необычайно важно использовать рекомендуемые и поставляемые вместе с
АВТОДЕЛФИЯпипетки.
Усиливающий раствор должен быть раскапан только с использованием рекомендуемой
ЭППЕНДОРФ мультипипеткой, и при этом первый объем сбрасывается для полного заполнения.
Тот же тип Комбинаконечника не может быть использован для раскапывания любого другого
реагента. После работы ЭППЕНДОРФ мультипипетка помещается на штатив с наконечником.
При использовании АВТОДЕЛФИЯплейт диспенсера и АВТОДЕЛФИЯ диспенсера
юнита ознакомьтесь с описанием.
ПОДСЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ:
АВТОАВТОДЕЛФЯЯсистема включает программу для обработки результатов и
получения данных в виде стандартной кривой, концентрации неизвестных пациентов и т.д. (для
детали см. описание к флюорометру или к программе Мультикалк).
Для Даун синдрома и дефекта нервной трубки подсчета риска существует специальное
дополнение к программе “МУЛЬТИКАЛК” - кат.номер. 1224-405. Риск рассчитываемый по этой
программе основывается на подсчете статистических параметров распределения рисков,
описанных SPENCER et al.
Риск может быть также подсчитан с использованием и других профамм. При
необходимости можно обратиться к руководству для МУЛЬТИКАЛКА, чтобы правильно
перенести полученные данные в новую программу.
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА:
Использование контрольной сыворотки советуют использоывать при каждой постановке
для получения надежных результатов. Рекомендуется, чтобы каждая лаборатория приготовила
свойи пул сывороток на различных концентрационных диапазонах. Высокий, средний и низкий
уровни должны быть использованы в каждом определении.
ОГРАНИЧЕНИЯ:
Как и для всех диагностических тест-систем, клиническое заключение не может быть
основано только на результатах одного теста и необходимо всестороннее клиническое и
лабораторное обследование. WALLAC 0 Y не отвечает за клиническое заключение по данным
исследованиям.
Факторы риска оцениваемые с помощью МУЛЬТИКАЛК и других программ являются
руководством для врачей в оценке нарушений у плода. Интерпретация результатов должна быть
проведена врачом с учетом всех представленных данных. WALLAC OY не отвечает за
индивидуальные риски, подсчитанные по любой другой программе.
Различия в популляции могут приводить к изменению средних значений. Частота
выявлений также поэтому может варьировать.
Оптимальные условия для получения нормальных результатов уточнение гестационного
срока.
Важно, что все реагенты и образцы должны быть использованы при комнатной
температуре, но при этом температура инкубации не должна превышать ЗОС.
ИНТРЕПРЕТАЦИЯ ДАННЫХ И ОЖИДАЕМЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ:
Предварительные результаты для сывороточного уровня АФП и свободного бетта ХГЧ
во время течения беременности с помощью двойного теста АФП/Св. в ХГЧ двойной набор
показано в таблице. Эта данные основаны на нормальной, одноплодной беременности как это
--- стр. 349 ---
г
было показано при мультицентровом исследовании. Поэтому, они не могут быть использованы
] для рутинных скрининговых программ. Необходимо, чтобы каждая лаборатория установила
i свой собственный референсный ряд из-за различий в популляции, условиях течении
I беременности и состоянии плода.
--- стр. 355 ---
Промывочный раствор 2 недели +2+25С в закрытом
контейнере
Перенести 40 мл из Промывочного Концентрата в чистый флакон и растворить
добавляя 960 мл дистиллированной воды для приготовления готового буферного
раствора рН=7.8
Анти-ПАПП-А-Биотин антительный раствор И спользовать в течение 1 часа после
приготовления
Приготовить необходимый объем раствора антител смешиванием 120 мкл антительного
концентрированного раствора с 1.5 мл Мультибуфера на один стрил (см.таблицу)
Анти-ПАПП-А-Еи раствор метки И спользовать в течение 1 часа
после приготовления
Приготовить необходимый объем раствора метки смешиванием 120 мкл
концентрированного раствора метки с 1.5 мл Мультибуфера на один стрип (см.таблицу)
Важно, чтобы М ультибуффер не контактировал с раствором метки до
использования в работе.
Мы советуем использовать одноразовый пластиковый флакон для приготовления рабочих
растворов метки и антисыворотки.
Растворить образцы (и контроли) в соотношении 1:5 ДЕЛФИЯ II дилюентом (50 мкл
образца смешивается с 200 мкл дилюента) до начала постановки.
Перенести необходимое количество микротитровальных стрипов в рамку-держатель для
стрипов (вернуть оставшиеся стрипы в пластиковую коробку и закрыть).
Раскапать по 100 мкл разведенного раствора антител, используя Эппендорф микропипетку
(после сброса первой аликвоты) или используя ДЕЛФИЯ диспенсер юнит. Избегайте
выплескивания из лунки раскапываемой жидкости, не касайтесь поверхности лунки или
поверхности жидкости.
Инкубирование 30 (+10) минут при комнатной температуре при медленном перемешивании,
используя ДЕЛФИЯ плейтшейкер.
После инкубации - аспирировать и промыть каждый стрип используя ДЕЛФИЯ ПЛЕЙТ
вошер, программа 98 (промывка №1).
Раскапать по 100 мкл разведенной метки в каждую лунку, используя рекомендованную
Мультипипетку Эппендорф после сбрасывания первой аликвоты или ДЕЛФИЯ диспенсер
юнит.
Раскапать по 50 мкл стандарты (Ст.) ПАПП-А и тестируемые разведенныеобразцы
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
--- стр. 356 ---
Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст.
А А В В С С Д Д Е Е Ф Ф
1-й
Обр.
1-й
Обр.
2-й
Обр.
2-й
Обр.
3-й
Обр.
3-й
Обр. и т.д.
9. Инкубирование стрипов 2 часа ( +10 минут) при комнатной температуре при медленном
перемешивании, используя ДЕЛФИЛ плейтшейкер.
10. После инкубации - аспирировать и промыть каждый стрип с помощью ДЕЛФИЯ Плейт
вошера, используя программу Х°98 (промывка 2),
11. Добавить по 200 мкл Усиливающего раствора прямо из реагентного флакона в каждую
лунку, используя рекомендуемую ЭППЕНДОРФ мультипипетку, после заполнения
Комбинаконечника раствором Усиливающего раствора или используя ДЕЛФИЯ плейт
диспенсер. Избегайте касания носиком пипетки лунки или ее содержимого.
12 Встряхивайте в режиме “медленно” 5 минут. Сигнал флюоресценции стабилен в течение
нескольких часов, если нет сильного испарения жидкости. Однако, мы рекомендуем
измерять в течение 1 часа, чтобы внешние факторы не оказали влияния на уровень сигнала.
13. Флюоресценция измеряется на флюорометре с временным разрешением.
Когда используется 1232 или 1234 флюорометр выбирается программа №98 или протокол в
программе Мультикалк «98 ПАПП-А» для автоматического измерения и подсчета
результатов.
При использовании ВИКТОР Д старт измерения начинается со старта WIZARD, выбрав
«ПАПП-А» из папки протоколов/китов «Пренатал» и задается количество планшетов и
образцов.
Проверьте параметры группы для программы №98 или для протокола Мультикалка «98
ПАПП-А» и скорректируйте их при необходимости (см. описание к флюорометру или
описание к программе Мультикалк).
ASSAY TYPE 1FMA
тип определения ИФМА
01 DUAL ASSAY NO
01 Двойная метка нет
03 MEASURING PARAMETERS Ей
03 Измеряемые параметры Ей
20 X-AXIS (CONCENTARION) LOG
20 Х-ось (концентрация) ЛОГ
21 Y-AXIS (RESPONSE) LOG^B
21 У-ось (счет) Лог В
22 FITTING METHOD SPLINE SMOOTHED
22 метод обработки кривой метод “сглаживания”
25 STANDART CURVE NEW
25 Стандартная кривая новая
26 STANDARDS ON 2.. PLATES NEW
26 Стандарты на 2-ом планшете новые
81 DISPLAY = SEQ PAT CODE COUNTS CONC %CV FLAG ID CURVE DILF
81 Дисплей = какие данные следует отображать на экране
82 PRINTER = SEQ PAT CODE COUNTS CONC %CV FLAG ID CURVE DILF
82 Принтер = какие данные следует давать в распечатку
CODING
Кодировка стандартов
--- стр. 357 ---
2 BLANK
2 бланка
2 STANDARDS
2 стандарты
2 STANDARDS
2 стандарты
2 STANDARDS
2 стандарты
2 STANDARDS
2 стандарты
2 STANDARDS
2 стандарты
2 UNKNOWN
2 неизвестные образцы
OPTIONS
Дополнения
DILUT.
Разведение
END
Конец
В
В
С
С
D
д
Е
Е
F
Ф
Убедитесь, чтобы концентрация
стандартов, указанная на флаконах
совпадала с задаваемой. Если не
совпадает, введите новые.
ОСОБЕННОСТИ ОПРЕДЕЛЕНИЯ;
1. Отношение к этому набору как к целому необходимо для успешного использования
ДЕЛФИЯ наборов. Реагенты в этом наборе являются комплексными компонентами. Не смешивайте
идентичные реагенты из различных лотов. Не используйте реагенты после срока годности,
указанной на флаконе.
2. Реагенты должны быть доведены до комнатной температуры (+20+25С) до
приготовления различных растворов. Замороженные образцы должны быть нагреты до комнатной
температуры при медленном и осторожном перемешивании. Не используйте вортекс или
смешанные образцы пациентов.
3. При промывке стрипов следите, чтобы все стрипы были заполнены полностью и
одинаково до верхнего уровня как показано на картинке. После промывки стрипов, проверьте, что
стрипы сухие. Если что-либо осталось в лунках, то необходимо перевернуть планшету и встряхнуть
на фильтровальную бумагу.
Аспирирующее/промывочное оборудование не должно находиться заполненным с
промывочным раствором длительный период времени, поскольку промывочные иглы могут быть
закупорены и трудно проходимы для жидкости. В конце рабочего дня аспирировать
дистиллированную воду в аспирирующую/промывочную систему. Промывочное устройство должно
быть регулярно промываться раствором NaCL (ЗОг/Л), а затем дистиллированной водой и 50%
этанолом и в конце промыто дистиллированной водой.
4. Для избежания примеси европия и как результат высокого флюресцентного фона
высокие требования предъявляются к процедуре раскапывания и промывки. Поэтому необычайно
важно использовать рекомендуемые и поставляемые вместе с ДЕЛФИЯ пипетки.
Усиливающий раствор должен быть раскапан только с использованием рекомендуемой
ЭППЕНДОРФ мультипипеткой, и при этом первый объем сбрасывается для полного заполнения.
Тот же тип Комбинаконечника не может быть использован для раскапывания любого другого
реагента. После работы ЭППЕНДОРФ мультипипетка помещается на штатив с наконечником.
При использовании ДЕЛФИЯ плейт диспенсера и ДЕЛФИЯ диспенсера юнита
ознакомьтесь с описанием.
ПОСТАНАЛИТИЧЕСКЛЯ ФАЗА.
ПОДСЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ:
--- стр. 365 ---
Промывочный раствор 2 недели +2+25С в закрытом
контейнере
Перенести 40 мл из Промывочного Концентрата в чистый флакон и растворить
добавляя 960 мл дистиллированной воды для приготовления готового буферного
раствора рН=7,8
Анти-ПАПП-А-Биотин антительный раствор И спользовать в течение 1 часа после
приготовления
Приготовить необходимый объем раствора антител смешиванием 120 мкл антительного
концентрированного раствора с 1.5 мл Мультибуфера на один стрип (см.таблицу)
Анти-ПАПП-А-Еи раствор метки И спользовать в течение 1 часа
после приготовления
Приготовить необходимый объем раствора метки смешиванием 120 мкл
концентрированного раствора метки с 1.5 мл Мультибуфера на один стрип (см.таблицу)
Важно, чтобы М ультибуффер не контактировал с раствором метки до
использования в работе.
Мы советуем использовать одноразовый пластиковый флакон для приготовления рабочих
растворов метки и антисыворотки.
2. Растворить образцы (и контроли) в соотношении 1:5 АВТОДЕЛФИЯ II дилюентом (50 мкл
образца смешивается с 200 мкл дилюента) до начала постановки.
3. Перенести необходимое количество микротитровальных стрипов в рамку-держатель для
стрипов (вернуть оставшиеся стрипы в пластиковую коробку и закрыть).
4. Раскапать по 100 мкл разведенного раствора антител, используя Эппендорф микропипетку
(после сброса первой аликвоты) или используя АВТОДЕЛФИЯ диспенсер юнит. Избегайте
выплескивания из лунки раскапываемой жидкости, не касайтесь поверхности лунки или
поверхности жидкости.
5. Инкубирование 30 (+10) минут при комнатной температуре при медленном перемешивании,
используя АВТОДЕЛФИЯ плейтшейкер.
6. После инкубации - аспирировать и промыть каждый стрип используя АВТОДЕЛФИЯ
ПЛЕЙТ
вошер, программа 98 (промывка №1).
7. Раскапать по 100 мкл разведенной метки в каждую лунку, используя рекомендованную
Мультипипетку Эппендорф после сбрасывания первой аликвоты или АВТОДЕЛФИЯ
диспенсер юнит.
8. Раскапать по 50 мкл стандарты (Ст.) ПАПП-А и тестируемые раз веденные образцы
сыворотки пациентов(Обр.) в лунки стрипов согласно следующей схемы: _______________
8 9 10 1 1 12
--- стр. 366 ---
1 Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст.
1 А А В В С С Д Д Е Е Ф Ф
1 1-й 1-й 2-й 2-й 3-й 3-й
3 Обр. Обр. Обр. Обр. Обр. Обр. и т.д.
9.
10.
Плейт
Инкубирование стрипов 2 часа ( +10 минут) при комнатной температуре при медленном
перемешивании, используя АВТОДЕЛФИЯ плейтшейкер.
После инкубации - аспирировать и промыть каждый стрип с помощью АВТОДЕЛФИЯ
вошера, используя программу №98 (промывка 2).
11. Добавить по 200 мкл Усиливающего раствора прямо из реагентного флакона в каждую
лунку, используя рекомендуемую ЭППЕНДОРФ мультипипетку, после заполнения
Комбинаконечника раствором Усиливающего раствора или используя АВТОДЕЛФИЯ
плейт
диспенсер. Избегайте касания носиком пипетки лунки или ее содержимого,
12 Встряхивайте в режиме “медленно” 5 минут. Сигнал флюоресценции стабилен в течение
нескольких часов, если нет сильного испарения жидкости. Однако, мы рекомендуем
измерять в течение 1 часа, чтобы внешние факторы не оказали влияния на уровень сигнала.
13. Флюоресценция измеряется на флюорометре с временным разрешением.
Когда используется 1232 или 1234 флюорометр выбирается программа №98 или протокол в
1 программе Мультикалк «98 ПАПП-А» для автоматического измерения и подсчета
j результатов.
1 При использовании ВИКТОР Д старт измерения начинается со старта WIZARD, выбрав
1 «ПАПП-А» из папки протоколов/китов «Пренатал» и задается количество планшетов и
i образцов.
11 Проверьте параметры группы для программы №98 или для протокола Мультикалка «98
i ПАПП-А» и скорректируйте их при необходимости (см. описание к флюорометру или
описание к программе Мультикалк).
1 ASSAY TYPE IFMA
тип определения ИФМА
01 DUAL ASSAY NO
01 Двойная метка нет
03 MEASURING PARAMETERS Ей
03 Измеряемые параметры Ей
20 X-AXIS (CONCENTARION) LOGi 20 Х-ось (концентрация) ЛОГ
j 21 Y-AXIS (RESPONSE) LOG_B
i 21 У-ось (счет) Лог В
22 FITTING METHOD SPLINE SMOOTHED
i 22 метод обработки кривой метод “сглаживания”
■ j 25 STANDART CURVE NEW
25 Стандартная кривая новая
26 STANDARDS ON 2.. PLATES NEW
26 Стандарты на 2-ом планшете новые
81 DISPLAY = SEQ PAT CODE COUNTS CONC %CV FLAG ID CURVE DILF
81 Дисплей = какие данные следует отображать на экране
82 PRINTER = SEQ PAT CODE COUNTS CONC %CV FLAG ID CURVE DILF
--- стр. 367 ---
82 Принтер = какие данные следует давать в распечатку I
CODING j
Кодировка стандартов |
2 BLANK [
2 бланка f
2 STANDARDS В j
2 стандарты В !
2 STANDARDS С Убедитесь, чтобы концентрация I
2 стандарты С стандартов, указанная на флаконах i
2 STANDARDS D совпадала с задаваемой. Если не ?
2 стандарты . Д совпадает, введите новые. [
2 STANDARDS Е |
2 стандарты Е 1
2 STANDARDS F |
2 стандарты Ф \
2 UNKNOWN [
2 неизвестные образцы f
OPTIONS
Дополнения ^
DILUT. I
Разведение ^
END j
Конец I
ОСОБЕННОСТИ ОПРЕДЕЛЕНИЯ:
1. Отношение к этому набору как к целому необходимо для успешного использования
АВТОДЕЛФИЯ наборов. Реагенты в этом наборе являются комплексными компонентами. Не j
смешивайте идентичные реагенты из различных лотов. Не используйте реагенты после срока |
годности, указанной на флаконе.
2. Реагенты должны быть доведены до комнатной температуры (+20+25С) до .
приготовления различных растворов. Замороженные образцы должны быть нагреты до комнатной I
температуры при медленном и осторожном перемешивании. Не используйте вортекс или
смешанные образцы пациентов.
3. При промывке стрипов следите, чтобы все стрипы были заполнены полностью и
одинаково до верхнего уровня как показано на картинке. После промывки стрипов, проверьте, что
стрипы сухие. Если что-либо осталось в лунках, то необходимо перевернуть планшету и встряхнуть
на фильтровальную бумагу.
Аспирируюш,ее/промывочное оборудование не должно находиться заполненным с
промывочным раствором длительный период времени, поскольку промывочные иглы могут быть
закупорены и трудно проходимы для жидкости. В конце рабочего дня аспирировать
дистиллированную воду в аспирирующую/промывочную систему. Промывочное устройство должно
быть регулярно промываться раствором NaCL (ЗОг/Л), а затем дистиллированной водой и 50%
этанолом и в конце промыто дистиллированной водой.
4. Для избежания примеси европия и как результат высокого флюресцентного фона
высокие требования предъявляются к процедуре раскалывания и промывки. Поэтому необычайно
важно использовать рекомендуемые и поставляемые вместе с АВТОДЕЛФИЯ пипетки.
Усиливающий раствор должен быть раскапан только с использованием рекомендуемой
ЭППЕНДОРФ мультипипеткой, и при этом первый объем сбрасывается для полного заполнения.
Тот же тип Комбинаконечника не может быть использован для раскапывания любого другого
реагента. После работы ЭППЕНДОРФ мультипипетка помещается на штатив с наконечником.
При использовании АВТОДЕЛФИЯ плейт диспенсера и АВТОДЕЛФИЯ диспенсера юнита
ознакомьтесь с описанием.
ПОСТАНАЛИТИЧЕСКАЯ ФАЗА.
--- стр. 379 ---
ОЧИСТИТЕ ПОДДОН д л я о т х о д о в .
ЗАГРУЗКА ПЕРА: Вставьте перо в держатель, при этом штрих-код должен быть обращен
внутрь прибора.
ЗАГРУЗКА ТРЕЙСЕРА: Поместите пробирку с трейсером (чистый наконечник должен
быть вставлен) в штатив для растворов. Убедитесь, что пробирка прочно встала на место,
и что штрих-код обращен наружу.
ЗАГРУЗКА БУФЕРА: Поместите бутылку с буфером в штатив для бутылок с буферами,
убедитесь, что штрих-код на пробирке виден в вертикальную прорезь.
ЗАГРУЗКА ОБРАЗЦА: Поместите пробирку с образцом в штатив для пробирок с
образцами (в соответствии с типом пробирки). При работе штрих-код должен быть
обращен вовне. Вставьте штатив для пробирок с образцами в карусель для образцов.
Запустите сканирование штрих-кода, щелкнув иконку «Scan».
НАЖМИТЕ КНОПКУ «START/PAUSE» на приборе или щелкните мышкой иконку
«Start» на экране персонального компьютера в программе управления прибором.
ПОЛУЧЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ: Смотрите результаты на экране и/или получите
распечатку результатов операции с образцом, щелкнув иконку «Print».
После измерений:
Если после завершения измерений остался раствора (для других образцов), удалите
штатив для реактивов и штатив для бутылок с буфером и поместите их для хранения на
ночь при температуре +4^С.
Примечание: Индикатор и буфер устойчивы в течение 5 дней при хранении ночью при
температуре +4°С.
П ри м ечан и я к п р о ц е д у р е.
1. Для успешного применения набора DELFIA Xpress необходимо полное понимание
содержания вкладыша комплекта, инструкций к прибору 6000 DELFIA Xpress и
программ рабочей станции DELFIA Xpress. Реактивы, поставляемые с набором,
предназначены для использования в качестве интегральной части набора. Не
следует перемешивать одинаковые реактивы от наборов, имеющих разные номера
партий. Не используйте реактивы набора после истечения срока годности,
указанного на этикетке набора.
2. Замороженные образцы материала пациентов следует прогреть до комнатной
температуры, медленно и осторожно помешивая их вручную. Не следует
перемешивать образцы энергичными вращательными движениями. Пена в
образцах приведет к ошибочному определению уровня жидкости в образце.
3. Важно избегать загрязнения европием и высокого флуоресцентного фона как
результата такого загрязнения. Замену бутылки индуктора DELFIA следует
производить осторожно, не прикасаясь к трубкам.
13904999-4 (ru) S
--- стр. 380 ---
Ф а з а п о с л е а н а л и з а
П одсчет р е з у л ь т а т о в
Клиническая скрининговая платформа произвольной выборки 6000 DELFIA Xpress
содержит программы обработки данных и выдает результаты в виде распечаток значений
концентраций для образцов материала пациента или контрольных образцов.
Оценку риска можно высчитать с помощью программ «Wallc LifeCycle» со скрининговым
механизмом «Эдипе».
К он троль к а ч е с т в а
Рекомендуем использовать контрольные сыворотки для постоянного обеспечения
достоверности результатов. Измерения контрольных образцов следует проводить по той
же процедуре, что и операции с образцами материала пациента. Желательно, чтобы
лаборатория приготовила свои собственные пулы сыворотки с различными
концентрациями исследуемых компонентов, либо, как вариант, использовала коммерчески
доступные контрольные образцы, например. Сыворотку беременной женщины(8его
Maternal Health Control - Early; каталожный номер 3015-0010). Каждый анализ должен
включать измерения контрольных образцов с высокой, средней и низкой концентрациями.
Мы также рекомендуем принимать участие во внешних программах контроля качества.
Результаты анализа образцов материала пациентов следует сообщать только в том случае,
если контрольные результаты для анализа соответствуют установленным в лаборатории
критериям приемлемости (19). Если контрольные результаты выходят за пределы
приемлемости, мы рекомендуем произвести регулирующую градуировку и повторное
измерение образцов пациентов.
П р о ц ед у р н ы е о гр ан и ч ен и я
Как и во всех диагностических тестах, точное клиническое заключение не должно
основываться на результатах какого-либо одного теста. Такое заключение врач должен
давать после оценки всех клинических и лабораторных данных. «PerkinElmer Life and
Analytical Sciences», «Wallac Oy» не несут ответственности за принимаемые клинические
решения.
Факторы риска, выявляемые программами «Уоллак ЛайфСайкл» с скрининговым
механизмом «Элипс», являются ориентирами для врачей для оценки риска нарушений у
плода. Интерпретация результатов должна анализироваться врачом в совокупности со
всеми другими факторами, которые, по его мнению, должны быть учтены. «PerkinElmer
Life and Analytical Sciences», «Wallac Oy» не несут ответственность за частные риски,
подсчитанные какими-либо другими программами.
Различия в характеристиках населения могут приводить к измененным средним
значениям. Коэффициенты выявления могут варьировать в зависимости от данных для
населения.
Оптимальные результаты скрининга могут быть получены только при условии
использования точных данных о сроках беременности.
Настоящие реактивы оптимизированы для применения в образцах, взятых в первый
триместр беременности. При применении их с образцами, взятыми в конце второго или в
третьем триместре, может проявляться
13904999-4 (ru) 10
--- стр. 381 ---
Важно, чтобы перед использованием все калибраторы и образцы были прогреты до
комнатной температуры.
Нельзя применять образцы плазмы, поскольку молекула АФП легко связывается с
гепарином, хелатные агенты, такие как EDTA и цитрат, разрушают молекулу АФП.
Присутствие гетерофилических антител в образце материала пациента может приводить к
завышенным результатам, даже при том, что буфер анализа АФП содержит
специфические блокирующие агенты.
Активация системы комплемента может в редких случаях давать ошибочно низкие
результаты.
Если концентрации АФП в образцах пациента превышают (или предположительно могут
превысить) 10,000 мг/Л, их следует разбавить 1:10 моющим раствором (см. также раздел
«Подготовка реактивов»).
Также смотрите разделы «Фаза до анализа» и «Примечания к процедуре».
О ж и д аем ы е зн а ч е н и я и и н тер п р и та ц и я р е зу л ь т а т о в .
Обратите внимание на то, что значения, указанные в данном разделе, следует
использовать лишь как общую норму; каждая лаборатория должна устанавливать свою
собственную нормированную область значений концентраций.
Ниже в таблице указаны значения, полученные с помощью DELFIA Xpress АФП, для
сывороточного АФП в различные недели беременности. Эти значения приводятся лишь в
качестве примера и не должны использоваться для рутинных скрининговых процедур.
Необходимо, чтобы каждая лаборатория устанавливала свои собственные эталонные
значения из-за существующих различий в характеристиках населения, условиях
материнства и состоянии плода (смотрите также раздел «Процедурные ограничения»).
13904999-4 (ru) И
Неделя
беременности
Количество
образцов
Концентрация АФП (mlJ/L)
5% Среднее 95%
9 77 112 299 957
10 101 259 685 1994
1 1 107 333 896 2889
12 150 661 1495 5896
13 103 692 2586 8363
А н ал и ти ч ески е р а б о ч и е х ар ак тер и сти к и .
Точность: Отклонение результатов измерений анализа DELFIA Xpress АФП было
определено после 32 рабочих операций с двойным их дублированием. Измрения
проводились на 2х приборах DELFIA Xpress. Градуировочная кривая первого измерения
использовалась как эталонная кривая для всех измерений в течение 12-дневного периода.
Для вычисления следующих значений был применен метод вариантного приближения:
Образцы
сыворотки
Среднее
значение
(mU/L)
Отклонения
внутри анализа
(% CV)
Отклонения вне
анализа (% CV)
Полное
отклонение (%
CV)
1 548.2 4.43 4.80 6.54
2 2299 3.64 4.82 6.04
3 5487 3.12 3.46 4.66
--- стр. 382 ---
Аналитическая чувствительность: Аналитическая чувствительность DELFIA Xpress
АФП анализа обычно выше 5 мг/л, если она определяется как величина, равная двум
стандартным отклонениям выше среднего нулевых стандартных значений измерений
(среднее значение + 2 SD) (п=24).
Функциональная чувствительность: Функциональная чувствительность DELFIA Xpress
АФП анализа обычно выше 15 мг/л, если она определяется как концентрация, при которой
полное отклонение < 20%.
Регенерация; Образцы сыворотки были приготовлены путем добавления
концентрированного раствора АФП к сыворотке, содержащей известное количество АФП.
Регенерация происходила в диапазоне 79-96% со средним значением 88% (п^5).
Разбавление: Три различных образца сыворотки беременных разбавлялись моющим
раствором, после чего были определены зависимости «наблюдаемые - ожидаемые»
концентрации АФП. Средние результаты каждой серии разбавления находились в
пределах 89-111% с общим средним значением 99%.
Соотношение: Набор DELFIA Xpress АФП (у) сравнивался с набором AutoDELFIA АФП
(х) с использованием образцов материала пациентов в пределах 51,87-9304 мг/л АФП.
Найденное соотношение равнялось:
у- 1,03х - 178; г= 0,987 (п=93)
|: Для концентраций до 60,000 мг/л АФП крюковой эффект не
обнаружен.
Интерферирующие вещества: Лекарственные препараты, такие как салициловая кислота
и парацетамол, не оказывали существенного влияния на измерение АФП.
Г а р а н т и я
Приведенные показатели были получены путем применения вышеописанной процедуры
анализа. Любое изменение или модификация процедуры, не рекомендованное
изготовителем, может повлиять на результаты, и если таковое произошло, «PerkinElmer
Life and Analytical Sciences», «Wallac Oy» и их отделения отказываются от всех гарантий,
заявленных, подразумеваемых или установленных законом, включая подразумеваемую
гарантию товарного состояния и пригодности к использованию.
«PerkinElmer Life and Analytical Sciences», «Wallac Oy», их отделения и уполномоченные
дистрибьютеры в этом случае не будут обязанными возмещать ущерб, косвенный или
возникший как следствие.
С с ы л к и
1. Oxvig, С., Sand, О., Kristensen, Т., Gleich G.J. and Sottrup-Jensen, L. (1993):
Circulating human pregnancy-associated plasma protein A is disulfide-bridged to the
proform of eosinophil major basic protein. J. Biol. Chem. 268, 12243-12246.
2. Oxvig, C., Sand, O., Kristensen, Т., Gleich GJ. and Sottrup-Jensen, L. (1994): Isolation
and characterization of circulating complex between human pregnancy-associated plasma
protein A and proform of eosinophil major basic protein. Biochim. Biophys. Acta. 71,
560-566.
13904999-4 (ш) 12
--- стр. 394 ---
После процедур операций:
Если после операции присутствует остаток раствора (для других образцов), удалите
штатив для реагентов и штатив для бутылок с буфером и поместите их для хранения на
ночь при температуре +4°С, закрыв лабораторной пленкой.
Примечание: Индикатор и буфер устойчивы в течение 2-х дней при хранении ночью при
температуре +4°С.
П р и м е ч а н и я к п р о ц е д у р е
1 . Для успешного применения набора DELFIA Xpress необходимо полное понимание
содержания этого вкладыша, комплекта инструкций к прибору 6000 DELFIA
Xpress и программ рабочей станции DELFIA Xpress. Реагенты, поставляемые
вместе с набором, предназначены для использования как составная часть набора.
Не следует перемешивать одинаковые реагенты с наборов, имеющих разные
номера партий. Не используйте реагенты из наборов после истечения срока
годности, указанного на этикетке набора.
2. Осторожно перемешивая, разморозьте образцы крови пациентов при комнатной
температуре. Не следует перемешивать образцы материала пациента энергичными
вращательными движениями. Пена в образцах приведет к ошибочному
определению уровня жидкости.
3. Важно избежать загрязнения европием и высокого флуоресцентного фона как
результата такого загрязнения. Замену бутылки с индуктором DELFIA следует
производить осторожно, не прикасаясь к пробиркам.
4. Избегайте испарения жидкости в растворе трейсера uE3 и буфера анализа uE3
после снятия крышек с пробирок. Не держите пробирки открытыми без
необходимости и герметизируйте штативы лабораторной пленкой при хранении
при температуре + 4*^С .
С т а д и я п о с л е а н а л и з а
П од счет р е зу л ь т а т о в
Клиническая скрининговая платформа произвольной выборки 6000 DELFIA Xpress
включает программы обработки данных, и полученные результаты выражаются как
концентрации для образцов и контрольных образцов.
Оценку риска можно подсчитать с помощью программ «Уоллак ЛайфСайкл» с
скрининговым механизмом «Элипс».
К он троль к а ч е с т в а
Советуем использовать контрольные сыворотки для постоянной валидации результатов.
Операции с контрольными образцами следует проводить по той же процедуре, что и для
образцов материала пациентов. Желательно, чтобы лаборатория приготовила свои
собственные пулы сыворотки различных уровней, либо, как вариант, использовала
коммерческие контрольные образцы, например, Lyphochek'^. Для каждого анализа должна
проводиться операция с контрольными образцами высокого, среднего и низкого уровня.
Мы также рекомендуем принимать участие во внешних программах контроля качества.
Результаты анализа образцов материала пациентов следует принимать только в том
случае, если контрольные результаты анализа соответствуют установленным в
лаборатории критериям приемлемости (20). Если контрольные результаты выходят за
пределы приемлемости, мы рекомендуем произвести регулирующую градуировку.
13905554-1 10
* Lyphocheck - зарегестрированная торговая марка Bio-Rad Laboratories Inc.
--- стр. 395 ---
П р о ц е д у р н ы е о г р а н и ч е н и я
Как И В О всех диагностических тестах, точное клиническое заключение должно
основываться не только на результатах какого-либо одного теста. Такое заключение врач
должен давать после оценки всех клинических и лабораторных данных. «ПеркинЭлмер
Лайф энд Аналитикл Сайенсиз», «Уоллак Ои» не несут ответственность за принимаемые
клинические решения.
Факторы риска, выявляемые программой «Уоллак ЛайфСайкл» с механизмом скрининга
«Элипс», являются ориентирами для врачей для оценки риска нарушений у плода.
Интерпретация результатов должна проводиться врачом в совокупности со всеми другими
факторами, которые, по его мнению, должны быть учтены. «ПеркинЭлмер Лайф энд
Аналитикл Сайенсиз», «Уоллак Ои» не несут ответственность за частные риски,
подсчитанные какими-либо другими программами.
Различия в характеристиках населения могут приводить к измененным средним
значениям. Коэффициенты обнаружения могут варьироваться в зависимости от данных
для населения.
Оптимальные результаты скрининга могут бьггь достигнуты только с использованием
точных данных о сроках беременности.
Важно, чтобы все калибраторы и образцы перед использованием были доведены до
комнатной температуры.
Гетерофилические антитела в образце материала пациента могут давать ошибочно
заниженные или завышенные результаты, даже несмотря на то что буффер анализа
содержит блокирующие агенты.Соответствующая активация может в редких случаях
давать ошибочно высокие результаты.
Если ожидаются высокие значения эстриола, образцы следует разбавить калибратором А
или свободной от uE3 сывороткой.
Также смотрите разделы ФАЗА ДО АНАЛИЗА и Примечания к .
13905554-1 11
О ж и д а е м ы е з н а ч е н и я и и н т е р п р е т а ц и я р е з у л ь т а т о в
Обратите внимание, что указанные ниже значения могут использоваться только как обшая
норма, и каждая лаборатория должна устанавливать собственную область значений.
В таблице указаны значения, полученные с помощью DELFIA Xpress uE3, для сыворотки
uE3 в различные недели беременности. Эти значения приводятся лишь в качестве примера
и не должны использоваться для стандартных скрининговых процедур. Необходимо,
чтобы каждая лаборатория устанавливала собственные нормативные значения из-за
существующих различий в характеристиках населения, условиях материнства и состоянии
плода (смотрите также раздел «Процедурные ограничения»).
Неделя
беременности
Количество
образцов
Концентрация uE3 (нмоль/литр)
5% Среднее^ 95%
15 113 1.4 2.2 3.4
16 230 1.9 2.8 4.3
17 163 2.4 3.7 6.4
^ Исследования проведены в BirminghamWomen’s Hospital, UK. Образцы сыворотки были отобраны во
время рутинных исследований
^ Срок беременности был определен путем ультразвуковых исследований. Средние даны для полных недель,
т.е. например для средних значений 15й недели были использованы результаты от 4дня 14й недели до Зго
дня 15й недели
--- стр. 396 ---
13905554-1 12
j 18 58 3.1 4.8 7.4
1 19 36 3.4 6.3 8.7
А н а л и т и ч е с к и е р а б о ч и е х а р а к т е р и с т и к и ^
Ниже показана стандартная градуирующая кривая, полученная прибором 6005-0010
DELFIA Xpress uE3.
Точность: Отклонение анализа DELFIA Xpress uE3 было определено после 36 рабочих
операций с двойным их дублированием с использованием трех лотов реагентов и трех
систем DELFIA Xpress. Градуирующая кривая первой рабочей операции использовалась
как референсная кривая в течение 11 -дневного периода. Анализ вариантного приближения
был применен для вычисления следующих результатов:
33
3
j
Образцы uE3 Итоговое
среднее
значение
(нмоль/литр)
Вариации внутри
анализа (% CV)
Вариации вне
анализа (%CV)
Итоговые
вариации
(%CV)
J Сыворотка 1 3.2 2.9 9.3 9.8
j Сыворотка 2 9.9 3.1 6.5 7.2
i Контроль 38 3.5 6.5 7.4
Аналитическая чувствительность: Аналитическая чувствительность DELFIA Xpress
анализа обычно выще 0.13 нмоль/л, если она определяется как величина, равная двум
квадратичным отклонениям ниже средних нулевых стандартных величин измерений
(среднее значение - 2 SD) (п=24).
Функциональная чувствительность: Функциональная чувствительность DELFIA Xpress
анализа обычно выше 0.7 нмоль/л, если она определяется как концентрация измеряемого
вещества, при которой средняя вариация измерений менее 20%.
Регенерация: Образцы сыворотки были приготовлены путем добавления
концентрированного раствора uE3 к образцам, содержащим известное количество uE3.
Регенерации происходили в диапазоне 100-165% со средним значением 123% (п=15).
Разбавление: Пять различных образцов сыворотки беременных женщин были разбавлены
мужской сывороткой, и была определена концентрация uE3. Средние результаты
измерений для каждого разведения находились в пределах 91.5-105.4% от ожидаемого
значения, с общим средним значением 97%.
Корреляция: Результаты измерений полученный с помощью набора DELFIA Xpress uE3
(у) сравнивались с результатами полученными в AutoDELFIA uE3 (х). Использовались
образцы пациентов в пределах 0.3-52 нмоль/л. Найденное соотношение равнялось:
у=0.88х+0.57; г=0.993 (п=137)
В клинически значимом диапазоне (1.5-8 нмоль/л) среднее различие измеренных
концентраций составило 5,4%.
Интерферирующие вещества: Было показано, что лекарственные препараты, такие как
салициловая кислота и парацетамол, существенно не влияли на измерение uE3.
Кросс реакция: Суммарная способность вступать в реакцию с другими веществами (при
уровне вытеснения 50%) представлена в следующей таблице:
Вещество Кросс реакция %
Эстриол 100
15-Г идроксиэстриол 24.3
’ Исследования проведены PerkinElmer Life and Analytical Sciences, Wallak Oy, Турку, Финляндия.
--- стр. 408 ---
П ри м ечан и я к п р о ц ед у р е.
1 . Для успешного применения набора DELFIA Xpress необходимо полное понимание
содержания вкладыша комплекта, инструкций к прибору 6000 DELFIA Xpress и
программ рабочей станции DELFIA Xpress. Реактивы, поставляемые с набором,
предназначены для использования в качестве интегральной части набора. Не
следует перемешивать одинаковые реактивы от наборов, имеющих разные номера
партий. Не используйте реактивы набора после истечения срока годности,
указанного на этикетке набора.
2. Замороженные образцы материала пациентов следует прогреть до комнатной
температуры, медленно и осторожно помешивая их вручную. Не следует
перемешивать образцы энергичными вращательными движениями. Пена в
образцах приведет к ошибочному определению уровня жидкости в образце.
3. Важно избегать загрязнения европием и высокого флуоресцентного фона как
результата такого загрязнения. Замену бутылки индуктора DELFIA следует
производить осторожно, не прикасаясь к трубкам.
Ф а з а п о с л е а н а л и з а
П од счет р е з у л ь т а т о в
Клиническая скрининговая платформа произвольной выборки 6000 DELFIA Xpress
содержит программы обработки данных и выдает результаты в виде распечаток значений
концентраций для образцов материала пациента или контрольных образцов.
Оценку риска можно высчитать с помощью программ «Wallc LifeCycle» со скрининговым
механизмом «Элипс».
К он троль к а ч е с т в а
Рекомендуем использовать контрольные сыворотки для постоянного обеспечения
достоверности результатов. Измерения контрольных образцов следует проводить по той
же процедуре, что и операции с образцами материала пациента. Желательно, чтобы
лаборатория приготовила свои собственные пулы сыворотки с различными
концентрациями исследуемых компонентов, либо, как вариант, использовала коммерчески
доступные контрольные образцы, например, Сыворотку беременной женщины(8его
Maternal Health Control - Early; каталожный номер 3015-0010). Каждый анализ должен
включать измерения контрольных образцов с высокой, средней и низкой концентрациями.
Мы также рекомендуем принимать участие во внешних программах контроля качества.
Результаты анализа образцов материала пациентов следует сообщать только в том случае,
если контрольные результаты для анализа соответствуют установленным в лаборатории
критериям приемлемости (19). Если контрольные результаты выходят за пределы
приемлемости, мы рекомендуем произвести регулирующую градуировку и повторное
измерение образцов пациентов.
П р о ц ед у р н ы е о гр ан и ч ен и я
Как и во всех диагностических тестах, точное клиническое заключение не должно
основываться на результатах какого-либо одного теста. Такое заключение врач должен
давать после оценки всех клинических и лабораторных данных. «PerkinEImer Life and
Analytical Sciences», «Wallac Oy» не несут ответственности за принимаемые клинические
решения.
Факторы риска, вьывляемые программами «Уоллак ЛайфСайкл» с скрининговым
механизмом «Элипс», являются ориентирами для врачей для оценки риска нарушений у
13904999-4 (ru) 10
--- стр. 409 ---
плода. Интерпретация результатов должна анализироваться врачом в совокупности со
всеми другими факторами, которые, по его мнению, должны быть учтены. «PerkinElmer
Life and Analytical Sciences», «Wallac Oy» не несут ответственность за частные риски,
подсчитанные какими-либо другими программами.
Различия в характеристиках населения могут приводить к измененным средним
значениям. Коэффициенты выявления могут варьировать в зависимости от данных для
населения.
Оптимальные результаты скрининга могут быть получены только при условии
использования точных данных о сроках беременности.
Настоящие реактивы оптимизированы для применения в образцах, взятых в первый
триместр беременности. При применении их с образцами, взятыми в конце второго или в
третьем триместре, может проявляться
Важно, чтобы перед использованием все калибраторы и образцы были прогреты до
комнатной температуры.
Нельзя применять образцы плазмы, поскольку молекула ХГЧ легко связывается с
гепарином, хелатные агенты, такие как EDTA и цитрат, разрушают молекулу ХГЧ.
Присутствие гетерофилических антител в образце материала пациента может приводить к
завышенным результатам, даже при том, что буфер анализа ХГЧ содержит специфические
блокирующие агенты.
Активация системы комплемента может в редких случаях давать ошибочно низкие
результаты.
Если концентрации ХГЧ в образцах пациента превышают (или предположительно могут
превысить) 10,000 мг/Л, их следует разбавить 1:10 моющим раствором (см. также раздел
«Подготовка реактивов»).
Также смотрите разделы «Фаза до анализа» и «Примечания к процедуре».
О ж и д аем ы е зн а ч е н и я и и н тер п р и та ц и я р е зу л ь т а т о в .
Обратите внимание на то, что значения, указанные в данном разделе, следует
использовать лишь как общую норму; каждая лаборатория должна устанавливать свою
собственную нормированную область значений концентраций.
Ниже в таблице указаны значения, полученные с помощью DELFIA Xpress ХГЧ, для
сывороточного ХГЧ в различные недели беременности. Эти значения приводятся лишь в
качестве примера и не должны использоваться для рутинных скрининговых процедур.
Необходимо, чтобы каждая лаборатория устанавливала свои собственные эталонные
значения из-за существующих различий в характеристиках населения, условиях
материнства и состоянии плода (смотрите также раздел «Процедурные ограничения»).
13904999-4 (ш) U
Неделя
беременности
Количество
образцов
Концентрация ХГЧ (mlШЬ)
5% Среднее 95%
9 77 112 299 957
10 101 259 685 1994
И 107 333 896 2889
12 150 661 1495 5896
--- стр. 410 ---
13904999-4 (ш) 12
13 103 692 2586 8363
А н ал и ти ч ески е р а б о ч и е х ар ак тер и сти к и .
Точность: Отклонение результатов измерений анализа DELFIA Xpress ХГЧ было
определено после 32 рабочих операций с двойным их дублированием. Измрения
проводились на 2х приборах DELFIA Xpress. Градуировочная кривая первого измерения
использовалась как эталонная кривая для всех измерений в течение 12-дневного периода.
Для вычисления следующих значений был применен метод вариантного приближения:
Образцы
сыворотки
Среднее
значение
(mU/L)
Отклонения
внутри анализа
(% CV)
Отклонения вне
анализа (% CV)
Полное
отклонение (%
CV)
1 548.2 4.43 4.80 6.54
2 2299 3.64 4.82 6.04
3 5487 3.12 3.46 4.66
Аналитическая чувствительность: Аналитическая чувствительность DELFIA Xpress
ХГЧ анализа обычно выше 5 мг/л, если она определяется как величина, равная двум
стандартным отклонениям выше среднего нулевых стандартных значений измерений
(среднее значение + 2 SD) (п^24).
Функциональная чувствительность: Функциональная чувствительность DELFIA Xpress
ХГЧ анализа обычно выше 15 мг/л, если она определяется как концентрация, при которой
полное отклонение < 20%.
Регенерация: Образцы сыворотки были приготовлены путем добавления
концентрированного раствора ХГЧ к сыворотке, содержащей известное количество ХГЧ.
Регенерация происходила в диапазоне 79-96% со средним значением 88% (п^5).
Разбавление: Три различных образца сыворотки беременных разбавлялись моющим
раствором, после чего были определены зависимости «наблюдаемые - ожидаемые»
концентрации ХГЧ. Средние результаты каждой серии разбавления находились в
пределах 89-111 % с общим средним значением 99%.
Соотношение: Набор DELFIA Xpress ХГЧ (у) сравнивался с набором AutoDELFIA ХГЧ
(х) с использованием образцов материала пациентов в пределах 51,87-9304 мг/л ХГЧ.
Найденное соотношение равнялось:
у- 1,03х-178;
обнаружен.
г- 0,987 (п=93)
|: Для концентраций до 60,000 мг/л ХГЧ крюковой эффект не
Интерферирующие вещества: Лекарственные препараты, такие как салициловая кислота
и парацетамол, не оказывали существенного влияния на измерение ХГЧ.
Г а р а н т и я
приведенные показатели были получены путем применения вышеописанной процедуры
анализа. Любое изменение или модификация процедуры, не рекомендованное
изготовителем, может повлиять на результаты, и если таковое произошло, «PerkinElmer
Life and Analytical Sciences», «Wallac Oy» и их отделения отказываются от всех гарантий,
--- стр. 422 ---
Примечания к процедуре.
1. Для успешного применения набора DELFIA Xpress необходимо полное понимание
содержания вкладыша комплекта, инструкций к прибору 6000 DELFIA Xpress и
программ рабочей станции DELFIA Xpress. Реактивы, поставляемые с набором,
предназначены для использования в качестве интегральной части набора. Не
следует перемешивать одинаковые реактивы от наборов, имеющих разные номера
партий. Не используйте реактивы набора после истечения срока годности,
указанного на этикетке набора.
2. Замороженные образцы материала пациентов следует прогреть до комнатной
температуры, медленно и осторожно помешивая их вручную. Не следует
перемешивать образцы энергичными врашательными движениями. Пена в
образцах приведет к ошибочному определению уровня жидкости в образце.
3. Важно избегать загрязнения европием и высокого флуоресцентного фона как
результата такого загрязнения. Замену бутылки индуктора DELFIA следует
производить осторожно, не прикасаясь к трубкам.
Фаза после анализа
Подсчет результатов
Клиническая скрининговая платформа произвольной выборки 6000 DELFIA Xpress
содержит программы обработки данных и выдает результаты в виде распечаток значений
концентраций для образцов материала пациента или контрольных образцов.
Оценку риска можно высчитать с помощью программ «Walk LifeCycle» со скрининговым
механизмом «Элипс».
Контроль качества
Рекомендуем использовать контрольные сыворотки для постоянного обеспечения
достоверности результатов. Измерения контрольных образцов следует проводить по той
же процедуре, что и операции с образцами материала пациента. Желательно, чтобы
лаборатория приготовила свои собственные пулы сыворотки с различными
концентрациями исследуемых компонентов, либо, как вариант, использовала коммерчески
доступные контрольные образцы, например, Сыворотку беременной женщины(8его
Maternal Health Control - Early; каталожный номер 3015-0010). Каждый анализ должен
включать измерения контрольных образцов с высокой, средней и низкой концентрациями.
Мы также рекомендуем принимать участие во внешних программах контроля качества.
Результаты анализа образцов материала пациентов следует сообщать только в том случае,
если контрольные результаты для анализа соответствуют установленным в лаборатории
критериям приемлемости (19). Если контрольные результаты выходят за пределы
приемлемости, мы рекомендуем произвести регулирующую градуировку и повторное
измерение образцов пациентов.
Процедурные ограничения
Как и во всех диагностических тестах, точное клиническое заключение не должно
основываться на результатах какого-либо одного теста. Такое заключение врач должен
давать после оценки всех клинических и лабораторных данных. «PerkinElmer Life and
Analytical Sciences», «Wallac Oy» не несут ответственности за принимаемые клинические
решения.
Факторы риска, выявляемые программами «Уоллак ЛайфСайкл» с скрининговым
механизмом «Элипс», являются ориентирами для врачей для оценки риска нарушений у
13904999-4 (ru) Ю
--- стр. 423 ---
плода. Интерпретация результатов должна анализироваться врачом в совокупности со
всеми другими факторами, которые, по его мнению, должны быть учтены. «PerkinElmer
Life and Analytical Sciences», «Wallac Oy» не несут ответственность за частные риски,
подсчитанные какими-либо другими программами.
Различия в характеристиках населения могут приводить к измененным средним
значениям. Коэффициенты выявления могут варьировать в зависимости от данных для
населения.
Оптимальные результаты скрининга могут быть получены только при условии
использования точных данных о сроках беременности.
Настоящие реактивы оптимизированы для применения в образцах, взятых в первый
триместр беременности. При применении их с образцами, взятыми в конце второго или в
третьем триместре, может проявляться ХУК-эффект.
Важно, чтобы перед использованием все калибраторы и образцы были прогреты до
комнатной температуры.
Нельзя применять образцы плазмы, поскольку молекула РРАР-А легко связывается с
гепарином, хелатные агенты, такие как EDTA и цитрат, разрушают молекулу РРАР-А.
Присутствие гетерофилических антител в образце материала пациента может приводить к
завышенным результатам, даже при том, что буфер анализа РРАР-А содержит
специфические блокирующие агенты.
Активация системы комплемента может в редких случаях давать ошибочно низкие
результаты.
Если концентрации РРАР-А в образцах пациента превышают (или предположительно
могут превысить) 10,000 мг/Л, их следует разбавить 1:10 моющим раствором (см. также
раздел «Подготовка реактивов»).
Также смотрите разделы «Фаза до анализа» и «Примечания к процедуре».
Ожидаемые значения и интерпритация результатов.
Обратите внимание на то, что значения, указанные в данном разделе, следует
использовать лишь как общую норму; каждая лаборатория должна устанавливать свою
собственную нормированную область значений концентраций.
Ниже в таблице указаны значения, полученные с помощью DELFIA Xpress РРАР-А, для
сывороточного РРАР-А в различные недели беременности. Эти значения приводятся лишь
в качестве примера и не должны использоваться для рутинных скрининговых процедур.
Необходимо, чтобы каждая лаборатория устанавливала свои собственные эталонные
значения из-за существующих различий в характеристиках населения, условиях
материнства и состоянии плода (смотрите также раздел «Процедурные ограничения»).
13904999-4 (ru) И
Неделя
беременности
Количество
образцов
Концентрация РАРР-А (mU/L)
5% Среднее 95%
9 77 112 299 957
10 101 259 685 1994
1 1 107 333 896 2889
12 150 661 1495 5896
--- стр. 424 ---
13904999-4 (ш) 12
13 103 692 2586 8363
Аналитические рабочие характеристики.
Точность: Отклонение результатов измерений анализа DELFIA Xpress РРАР-А было
определено после 32 рабочих операций с двойным их дублированием. Измрения
проводились на 2х приборах DELFIA Xpress. Градуировочная кривая первого измерения
использовалась как эталонная кривая для всех измерений в течение 12-дневного периода.
Для вычисления следующих значений был применен метод вариантного приближения:
Образцы
сыворотки
Среднее
значение
(mU/L)
Отклонения
внутри анализа
(% CV)
Отклонения вне
анализа (% CV)
Полное
отклонение(%
CV)
1 548.2 4.43 4.80 6.54
2 2299 3.64 4.82 6.04
3 5487 3.12 3.46 4.66
Аналитическая чувствительность: Аналитическая чувствительность DELFIA Xpress
РРАР-А анализа обычно выше 5 мг/л, если она определяется как величина, равная двум
стандартным отклонениям выше среднего нулевых стандартных значений измерений
(среднее значение + 2 SD) (п=24).
Функциональная чувствительность: Функциональная чувствительность DELFIA Xpress
РРАР-А анализа обычно выше 15 мг/л, если она определяется как концентрация, при
которой полное отклонение < 20%.
Регенерация: Образцы сыворотки были приготовлены путем добавления
концентрированного раствора РРАР-А к сыворотке, содержащей известное количество
РРАР-А. Регенерация происходила в диапазоне 79-96% со средним значением 88% (п=5).
Разбавление: Три различных образца сыворотки беременных разбавлялись моющим
раствором, после чего были определены зависимости «наблюдаемые - ожидаемые»
концентрации РРАР-А. Средние результаты каждой серии разбавления находились в
пределах 89-111% с общим средним значением 99%.
Соотношение: Набор DELFIA Xpress РРАР-А (у) сравнивался с набором AutoDELFIA
РРАР-А (х) с использованием образцов материала пациентов в пределах 51,87-9304 мг/л
РРАР-А. Найденное соотношение равнялось:
у=1,03х-178;
обнаружен.
0,987 (п=93)
|: Для концентраций до 60,000 мг/л РРАР-А крюковой эффект не
Интерферирующие вещества: Лекарственные препараты, такие как салициловая кислота
и парацетамол, не оказывали существенного влияния на измерение РРАР-А.
Гарантия
приведенные показатели были получены путем применения вышеописанной процедуры
анализа. Любое изменение или модификация процедуры, не рекомендованное
изготовителем, может повлиять на результаты, и если таковое произошло, «PerkinElmer
Life and Analytical Sciences», «Wallac Oy» и их отделения отказываются от всех гарантий.
--- стр. 425 ---
з а я в л енных, подразумеваемых или установленных законом, включая подразумеваемую
гарантию товарного состояния и пригодности к использованию.
«PerkinEImer Life and Analytical Sciences», «Wallac Oy», их отделения и уполномоченные
дистрибьютеры в этом случае не будут обязанными возмещать ущерб, косвенный или
возникший как следствие.
Ссылки
1 . Oxvig, С., Sand, О., Kristensen, Т., Gleich G.J. and Sottrup-Jensen, L. (1993):
Circulating human pregnancy-associated plasma protein A is disulfide-bridged to the
proform of eosinophil major basic protein. J. Biol. Chem. 268, 12243-12246.
2. Oxvig, C., Sand, O., Kristensen, Т., Gleich G.J. and Sottrup-Jensen, L. (1994): Isolation
and characterization of circulating complex between human pregnancy-associated plasma
protein A and proform of eosinophil major basic protein. Biochim. Biophys. Acta. 71,
560-566.
3. Silahtroglu, A.N., Tumer, Z., Kristensen, Т., Sottrup-Jensen, L. and Tommerup, N.
(1993): Assignment of the human gene for pregnancy assoiciated plasma protein A
(PAPP-A) to 9q33.1 by fluorescence in situ hybridization to mitotic and meiotic
chromosomes. Cytogenet. Cell Genet., 62, 214-216.
4. Hamann, K.J., Baker, R.L., Ten, R.M. and Gleich, G.L. (1991): The molecular biology of
eosinophil granule proteins. Int. Arch. Allergy Appl. Immunol., 94, 202-209.
5. Cuckle, H.S., and van Lith, J.M.M. (1999): Appropriate biochemical parametres in firs
trimester screening for Dovra’s syndrome. Prenat. Diagn., 19, 505-512.
6. Wald, N.J., George, L., Smith, D., Densem, J.W. and Petterson, K. (1996): Serum
screening for Down’s syndrome between 8 and 14 weeks of pregnancy. Br. J. Obstet.
Gynaecol., 103,407-412.
7. Cuckle, H. (1994): Screening at 11-14 weeks of gestation: the role of established markers
and PAPP-A. In Screening for Down’s Syndrome, ed. Gudzinkas. Chard, Chapman &
Cuckle, Cambridge University Press.
8. Krantz, D.A., Hallahan, T.W., Omaldo, F., Buchanan, P., Larsen, J.W., and Macri, J.N.
(2000): First-trimester Down syndrome screening using dried blood biochemistry and
nuchal translucency. Obstet, Gynecol., 96,207-213.
9. Spencer, K., Spencer, C.E., Power, М., Moakes, A. and Nikolaides, K.H. (2000): One
stop clinic for assessment of risk for fetal anomalies in the first trimester. Brit. J. Obstet.
Gynaecol., 107, 1271-1275.
10. Schuchter, K., Hafner, E., Strangl, G., Metzenbauer, М., Hofmger, D., and Philipp, K.
(2002): The first trimester ‘combined test’ for the detection of Down syndrome
pregnancies in 4939 unselected pregnancies. Prenat. Diagn., 22, 211-215.
11. Bindra, R., Heath, V., Liao, A., Spencer, K., Nikolaides, K.H. (2002): One-stop clinic for
assessment of risk for trisomy 21 at 11-14 weeks: a prospective screening study of 15030
pregnancies. Ultrasound Obstet. Gynecol., 20, 219-225.
12. Biagiotti, R., Cariati, E., Brizzi, L., CapelH, G., and D’Agata, A. (1998): Maternal serum
screening for trisomy 18 in the first trimester of pregnancy. Prenat. Diagn., 18(9), 907-
913.
13. Aitken, D.A., Ireland, М., Berry, E., Crossley, J.A., Macri, J.N., Bum, J., and Connor
J.M. (1999): Second-trimester pregnancy associated plasma protein-A levels are reduced
in Cornelia de Lange syndrome pregnancies. Prenat. Diaagn., 19(8), 706-710.
14. Qin, Q-P-, Christiansen, М., Oxvig, C., Pettersson, K., Sottrup-Jensen, L., Koch, C. and
Norgaard-Pedersen, B. (1997): Double monoclonal immunofiuorometric assays for
pregnancy-associated plasma protein A/proeosinophil major basic protein (PAPP-
A/proMBP) complex in first-trimester maternal screening for Down syndrome. Clin.
Chem. 43, 2323-2332.
13904999-4 (ru) 1 3
--- стр. 431 ---
Забор крови посредством веныпункции, добиться образования сгустка и отделить
сыворотку посредством центрифугирования. Плазма с ЭДТА или цитратом не может быть
использована, что обусловлено хелатирующим действием на европий. Плазма с гепарином
может быть использована. Гемолитическая (уровень гемоглобина менее 5 г/Л),
липемическая (менее 5 г/Л) и иктерическая (билирубин менее 500 мкмоль/Л) сыворотка
может быть использована без какого-либо влияния на результаты анализа.
В случае если уровень ТТГ в образце превышает уровень максимального стандарта
(100 мкЕд/мл), образец следует развести ДЕЛФИЯ дилюент II и полученную концентрацию
пересчитать с учетом разведения.
Образцы могут храниться в течение 2 дней при +2, +8С. Для хранения на больший период
образцы следует заморозить при -20С. Повторное замораживание-размораживание следует
избегать.
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ:
Для диагностики ин витро.
Набор следует использовать только подготовленным персоналом.
Набор содержит реагенты произведенные из компонентов человеческой крови.
Источник протестирован на на наличие поверхностного антигена к гепатиту В, анти-гепатиту
С, и анти-ВИЧ I и М . Тем не менее все рекомендации по мерам предосторожности при
работе с производными крови должны быть соблюдены.
Можно считать все образцы крови пациентов как потенциально инфицированные.
Реагенты содержат азид натрия в качестве консерванта. Азид натрия может
взаимодействовать с металлическими поверхностями с образованием азидов металлов.
Для предотвращения образования азидов металлов необходимо промыть большим
количеством воды.
Для дезинфекции всех сливных реагентов пользуйтесь правилами местных
контроллирующих организаций.
ПРОТОКОЛ ОПРЕДЕЛЕНИЯ:
Выполните каждое определение в дубликате как для стандартов так и для
тестируемых образцов. Стандартная кривая должна быть использована для каждого
определения. Образцы и реагенты должны быть доведены до комнатной температуры
(+20+25С) перед использованием.
1. Приготовление реагентов Стабильность после разведения
Промывочный раствор 2 недели +2+25С в закрытом
контейнере
Перенести 40 мл из Промывочного Концентрата в чистый флакон и развести в 25
раз добавляя 960 мл дистиллированной воды для приготовления готового
буферного раствора рН=7.8
часа
Анти-ТТГ-Еи метка Приготовить и использовать в течение 1
Приготовьте необходимый объем метки посредством смешивания 75 мкл
концентрата метки с 1.5 мл ТТГ Ультра инкубационного буфера из расчета
на один стрип (см. таблицу).
--- стр. 432 ---
Важно, чтобы ТТГ Ультра буфер не контактировал с раствором метки до
использования в работе.
Мы советуем использовать одноразовый пластиковый флакон для приготовления
рабочих растворов метки.
2. Перенести необходимое количество микротитровальных стрипов в рамку-держатель
для стрипов (вернуть оставшиеся стрипы в пластиковую коробку и закрыть). Не
брать больше стрипов, чем вы можете использовать для работы в течение 30
минут.
3. Раскапать по 100 мкл ТТГ стандартов и тестируемые образцы в стрипы согласно
i 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
i Ст. Ct. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст,
i A A В В С С Д Д Е Е Ф Ф
I
1-Й
06p.1
1-Й
06p.1
2-й
Обр.2
2-й 3-й 3-й
Обр.2 Обр.З Обр.З и т.д.
Iiг 4. Добавляется по 100 мкл разведенной метки в каждую лунку используя
рекомендуемую Эппендорф микропипетку после сбрасывания первой аликвоты или
с использованием ДЕЛФИЯ диспенсер юнит. Избегайте касания пипеткой
поверхности лунок или поверхности жидкости.
5. Инкубирование 2 часа (+10 минут) при комнатной температуре в режиме
медленного шейкирования , используя ДЕЛФИЯ плейт шейкер.
6. После инкубации аспирировать и промыть каждый стрип с помощью ДЕЛФИЯ плейт
вошера, программа 42 (промывка)
7. Добавить 200 мкл Усиливающего растовра прямо из реагентного флакона в
каждую лунку, используя рекомендуемую ЭППЕНДОРФ мультипипетку, после
заполнения Комбинаконечника раствором Усиливающего раствора или используя
ДЕЛЬФИЯ плейт диспенсер. Избегайте касания носиком пипетки лунки или ее
содержимого.
8. Встряхивайте в режиме “медленно”(з1о\^1у) 5 минут. Сигнал флюоресценции
стабилен в течение нескольких часов, если нет сильного испарения жидкости.
Однако, мы рекомендуем измерять в течение 1 часа, чтобы внешние факторы не
оказали влияния на уровень сигнала, хотя это достаточно редкий фактор.
9. Флюоресценция измеряется на флюорометре с временным разрешением.
Когда используется 1234 ДЕЛФИЯ флюорометр выберите программу 42 или
Мульти кал к протокол 42TSHU для автоматического измерения и расчета результатов.
При использовании ВИКТОР Д старт измерения начинается со START WIZARD, выберите
TSHU из Protocols/Kits панель Thyroid и задайте количество планшет и количество
образцов.
Проверьте параметры группы для программы 42 или Мультикалк протокол 42TSHU и
скорректируйте их, если параметры отличаются от нижеприведенных;
КИТ НОМЕР 42 ТТГ Ультра
ASSAY TYPE IFMA
--- стр. 433 ---
не
тип определения
FITTING METHOD
метод обработки
X-AXIS
х-ось
Y-AXIS
у-ось
BLANKS
бланки
STANDARDS
стандарты
STANDARD REPLICATES
стандарты в дупликате
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
UNKNOWN REPLICATES
неизвестные образцы в дубле
ИФМА
SPLINE SMOOTHED
метод “сглаживания"
LOGARITHMIC
логарифмическая
LOG
логарифмическая
2
2
5
5
2
2
В
Убедитесь, чтобы концентрация
стандартов, указанная на пакете
совпадала с задаваемой в сертификате
В контроля качества к набору. Если
С совпадает - сделайте коррекцию.
С
D
Д
Е
F
Е
Ф
ОСОБЕННОСТИ ОПРЕДЕЛЕНИЯ:
1. Отношение к этому набору как к целому необходимо для успешного
использования ДЕЛЬФИЯ наборов. Реагенты в этом наборе являются комплексными
компонентами. Не смешивайте идентичные реагенты из различных лотов. Не используйте
реагенты после срока годности, указанной на флаконе.
2. Реагенты должны быть доведены до комнатной температуры (+20+25С) до
приготовления различных растворов. Замороженные образцы должны быть нагреты до
комнатной температуры при медленном и осторожном перемешивании. Не используйте
вортекс или смешанные образцы пациентов.
3. При промывке стрипов следите, чтобы все стрипы были заполнены полностью и
одинаково до верхнего уровня как показано на картинке. После промывки стрипов,
проверьте, что стрипы сухие. Если что-либо осталось в лунках, то необходимо перевернуть
планшету и встряхнуть на фильтровальную бумагу.
Аспирирующее/промывочное оборудование не должно находиться заполненным с
промывочным раствором длительный период времени, поскольку промывочные иглы могут
быть закупорены и трудно проходимы для жидкости. В конце рабочего дня аспирировать
дистиллированную воду в аспирирующую/промывочную систему. Промывочное устройство
должно быть регулярно промываться раствором NaCL (ЗОг/Л), а затем дистиллированной
водой и 50% этанолом и в конце промыто дистиллированной водой.
4. Для избежания примеси европия и как результат высокого флюресцентного фона
высокие требования предъявляются к процедуре раскапывания и промывки. Поэтому
необычайно важно использовать рекомендуемые и поставляемые вместе с ДЕЛЬФИЯ
пипетки.
Усиливающий раствор должен быть раскапан только с использованием
рекомендуемой ЭППЕНДОРФ мультипипеткой, и при этом первый объем сбрасывается для
полного заполнения. Тот же тип Комбинаконечника не может быть использован для
--- стр. 439 ---
Образцы Moiyr храниться в течение 2 дней при +2, +8С. Для хранения на больший период
образцы следует заморозить при -20С. Повторное замораживание-размораживание следует
избегать.
М ЕРЫ П РЕДОСТОРОЖ НОСТИ:
Для диагностики ин витро.
Набор следует использовать только подготовленным персоналом.
Набор содержит реагенты произведенные из компонентов человеческой крови. Источник
протестирован на на наличие поверхностного антигена к гепатиту В, анти-гепатиту С, и анти-ВИЧ I
и П. Тем не менее все рекомендации по мерам предосторожности при работе с производными крови
должны быть соблюдены.
Можно считать все образць[ крови пациентов как потенциально инфицированные.
Реагенты содержат азид натрия в качестве консерванта. Азид натрия может
взаимодействовать с металлическими поверхностями с образованием азидов металлов. Для
предотвращения образования азидов металлов необходимо промыть большим количеством воды.
Для дезинфекции всех сливных реагентов пользуйтесь правилами местных
контроллирующих организаций.
ПРОТОКОЛ ОПРЕДЕЛЕНИЯ:
Выполните каждое определение в дубликате как для стандартов так и для тестируемых
образцов. Стандартная кривая должна быть использована для каждого определения. Образцы и
реагенты должны быть доведены до комнатной температуры (+20+25С) перед использованием.
Приготовление реагентов Стабильность после разведения
Промывочный раствор 2 недели +2+25С в закрытом
контейнере
Перенести 40 мл из Промывочного Концентрата в чистый флакон и развести в 25
раз добавляя 960 мл дистиллированной воды для приготовления готового буферного
раствора рН=7.8
Анти-ТТГ-Еи метка П риготовить и использовать в течение 1 часа
Приготовьте необходимый объем метки посредством смешивания 75 мкл концентрата
метки с 1.5 мл ТТГ Ультра инкубационного буфера из расчета на один стрип (см. таблицу).
Важно, чтобы ТТГ У льтра буфер не контактировал с раствором метки до
использования в работе.
Мы советуем использовать одноразовый пластиковый флакон для приготовления рабочих
растворов метки.
2. Перенести необходимое количество микротитровальных стрипов в рамку-держатель для
стрипов (вернуть оставшиеся стрипы в пластиковую коробку и закрыть). Не брать больше
стрипов, чем вы можете использовать для работы в течение 30 минут.
3. Раскапать по 100 мкл ТТГ стандартов и тестируемые образцы в стрипы согласно
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
--- стр. 440 ---
Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст. Ст.
А А В В С С Д Д Е Е Ф Ф
1-й 1-й 2-й 2-й 3-й 3-й
Обр.1 Обр.1 Обр.2 Обр.2 Обр.З Обр.З и т.д.
Добавляется по 100 мкл разведенной метки в каждую лунку используя рекомендуемую
Эппендорф микропипетку после сбрасывания первой аликвоты или с использованием
АВТОДЕЛФИЯ диспенсер юнит. Избегайте касания пипеткой поверхности лунок или
поверхности жидкости.
Инкубирование 2 часа (+10 минут) при комнатной температуре в режиме медленного
шейкирования , используя АВТОДЕЛФИЯ плейт шейкер.
После инкубации аспирировать и промыть каждый стрип с помощью АВТОДЕЛФИЯ плейт
вошера, программа 42 (промывка)
Добавить 200 мкл Усиливающего растовра прямо из реагентного флакона в каждую лунку,
используя рекомендуемую ЭППЕНДОРФ мультипипетку, после заполнения
Комбинаконечника раствором Усиливающего раствора или используя АВТОДЕЛФИЯ
плейт диспенсер. Избегайте касания носиком пипетки лунки или ее содержимого.
Встряхивайте в режиме “медленно”(81олу1у) 5 минут. Сигнал флюоресценции стабилен в
течение нескольких часов, если нет сильного испарения жидкости. Однако, мы рекомендуем
измерять в течение 1 часа, чтобы внешние факторы не оказали влияния на уровень сигнала,
хотя это достаточно редкий фактор.
Флюоресценция измеряется на флюорометре с временным разрещением.
Когда используется 1234 АВТОДЕЛФИЯ флюорометр выберите программу 42 или
Мультикалк протокол 42TSHU для автоматического измерения и расчета результатов.
При использовании ВИКТОР Д старт измерения начинается со START WIZARD, выберите
TSHU из Protocols/Kits панель Thyroid и задайте количество планшет и количество
образцов.
Проверьте параметры группы для программы 42 или Мультикалк протокол 42TSHLI и
скорректируйте их, если параметры отличаются от нижеприведенных;
КИТ НОМЕР
ASSAY TYPE
тип определения
FITTING METHOD
метод обработки
X-AXIS
х-ось
Y-AXIS
у-ось
BLANKS
бланки
STANDARDS
стандарты
STANDARD REPLICATES
стандарты в дупликате
STANDARD CONC
стандарты конц.
STANDARD CONC
стандарты конц.
42 ТТГ Ультра
IFMA
ИФМА
SPLINE SMOOTHED
метод “сглаживания”
LOGARITHMIC
логарифмическая
LOG
логарифмическая
2
2
5
5
2
2
В
В
С
с
Убедитесь, чтобы концентрация
стандартов, указанная на пакете
совпадала с задаваемой в сертификате
контроля качества к набору. Если не
совпадает - сделайте коррекцию.
--- стр. 441 ---
STANDARD CONC D
стандарты конц. Д
STANDARD CONC E
стандарты конц. E
STANDARD CONC F
стандарты конц. Ф
UNKNOWN REPLICATES 2
неизвестные образцы в дубле 2
ОСОБЕННОСТИ ОПРЕДЕЛЕНИЯ:
1. Отношение к этому набору как к целому необходимо для успешного использования
АВТО ДЕЛ ФИЯ наборов. Реагенты в этом наборе являются комплексными компонентами. Не
смешивайте идентичные реагенты из различных лотов. Не используйте реагенты после срока
годности, указанной на флаконе.
2. Реагенты должны быть доведены до комнатной температуры (+20+25С) до
приготовления различных растворов. Замороженные образцы должны быть нагреты до комнатной
температуры при медленном и осторожном перемешивании. Не используйте вортекс или
смешанные образцы пациентов.
3. При промывке стрипов следите, чтобы все стрипы были заполнены полностью и
одинаково до верхнего уровня как показано на картинке. После промывки стрипов, проверьте, что
стрипы сухие. Если что-либо осталось в лунках, то необходимо перевернуть планшету и встряхнуть
на фильтровальную бумагу.
Аспирирующее/промывочное оборудование не должно находиться заполненным с
промывочным раствором длительный период времени, поскольку промывочные иглы могут быть
закупорены и трудно проходимы для жидкости. В конце рабочего дня аспирировать
дистиллированную воду в аспирирующую/промывочную систему. Промывочное устройство должно
быть регулярно промываться раствором NaCL (ЗОг/Л), а затем дистиллированной водой и 50%
этанолом и в конце промыто дистиллированной водой.
4. Для избежания примеси европия и как результат высокого флюресцентного фона
высокие требования предъявляются к процедуре раскапывания и промывки. Поэтому необычайно
важно использовать рекомендуемые и поставляемые вместе с АВТОДЕЛФИЛ пипетки.
Усиливающий раствор должен быть раскапан только с использованием рекомендуемой
ЭППЕНДОРФ мультипипеткой, и при этом первый объем сбрасывается для полного заполнения.
Тот же тип Комбинаконечника не может быть использован для раскапывания любого другого
реагента. После работы ЭППЕНДОРФ мультипипетка помещается на штатив с наконечником.
При использовании АВТОДЕЛФИЯ плейт диспенсера и АВТОДЕЛФИЯ диспенсера юнита
ознакомьтесь с описанием.
ПОДСЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ:
АВТОДЕЛФИЯ система включает программу для обработки результатов и получения
данных в виде стандартной кривой, концентрации неизвестных пациентов и т.д. (для детали см.
описание к флюорометру или к программе Мультикалк).
КАЛИБРОВКА:
ТТГ стандарты в концентрационном диапазоне от О до 100 мкЕд/мл входят в состав
каждого набора. Стандарты откалиброваны по стандарту ВОЗ 2-й IRP (80/558) ТТГ для
иммуноопределений. Стандарты должны быть определены в дубле и в каждом определении.
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА: