Наборы реагентов для лабораторной диагностики in vitro тромбофилии к анализатору автоматическому коагулологическому моделей Ceveron-alpha и Ceveron-alpha TGA — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 1 --- Г енеральный Директор ЗАО «БиоХимМак» «УТВЕРЖДАЮ» ИНСТРУКЦИЯ п о ПРИМЕНЕНИЮ Наборы реагентов для лабораторной диагностики in-vitro тромбофилии к анализатору автоматическому коагулологическому моделей Ceveron-alpha и Ceveron-alpha TGA Производства “Technoclone GmbH”, Австрия Соответствует требованиям национальных стандартов кодОКП: 93 98 ^ ^ 6 ^ --- стр. 2 --- Наборы реагентов для лабораторной диагностики in-vitro тромбофилии к анализатору автоматическому коагулологическому моделей Ceveron- alpha и Ceveron-alpha TGA ОПИСАНИЕ ПРОДУКТА НАЗНАЧЕНИЕ Набор реагентов предназначен для количественного определения функциональной активности белков в человеческой плазме методом флуориметрии. Набор TECHNOTHROMBIN® TGA является системой для определения генерации фермента во времени в обедненной (РРР), или обогащенной (PPR) тромбоцитами плазме при активации клоттингового каскада мицеллами отрицательно заряженных фосфолипидов, содержащих различные количества человеческого клеточного фактора и СаСЬ- Набор может быть использован для мониторинга гемофилий при ингибитор шунтирующей терапии, для мониторинга антикоагулянтной терапии, для расчета величин МНО для пациентов и определения состояний при кровотечениях или тромбофилиях, а также активности циркулирующих микрочастиц. Эта широкая область применения возможно благодаря различной концентрации клеточных факторов и мониторингу всей кинетики генерации в процессе инициации, амплификации и полной регуляции образования. TECHNOTHROMBIN® TGA поэтому является универсальным исследовательским набором для анализа и мониторинга функции гемостатической системы. ПРИНЦИП ТЕСТА TECHNOTHROMBIN® TGA основан на мониторинге флуоресценции, генерируемой расщеплением флуорогенного субстрата за время активации каскада коагуляции различными концентрациями тканевого фактора и отрицательно заряженными фосфолипидами в плазме. Из изменения флуоресценции во времени может быть рассчитана концентрация активного фермента (нМ) в пробе с использованием соответствующей калибровочной кривой. Увеличение концентрации во времени затем позволяет рассчитать генерацию фермента в пробе и построить график таких величин в зависимости от времени для всего процесса свертывания. Это затем приводит к визуализации различных фаз образования сгустка. СОСТАВ Набор реагентов TECHNOTHROMBIN® TGA содержит: 1) TGA-субстрат - Флуорогенный субстрат, 2) TGA-буфер - раствор для разведения реакционной смеси, 3) TGA-калибратор активного фермента (например, тромбина), 4) TGA-реагент (LC) - Реагент с низкой концентрацией фосфолипидных мицелл, 5) TGA-реагент (НС) - Реагент с высокой концентрацией фосфолипидных мицелл, --- стр. 3 --- 5) TGA-реагент (НС) - Реагент с высокой концентрацией фосфолипидных мицелл, 6) TGA- контроль - Контрольная плазма (лиофилизированная), с известной активностью определяемого фермента. ПОТРЕБУЮТСЯ МАТЕРИАЛЫ (не входят в набор) Пипетка Дистиллированная вода Микроплашка, предназначенная для измерения флуоресценции (мы рекомендуем NUNC Мах1зоф REF ''475515) Флуориметр, ридер флуоресценции (формат 96 лунок), --ЗбО нм/~460 нм (возбуждение/эмиссия) с подходящим программным обеспечением для мониторинга изменений флуоресценции во времени. Для неоторых ридеров доступны адаптации, которые можно загрузить из www.technoclone.com. ПРЕДУПРЕЖДЕНИЯ И МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ - только для исследований - Каждая единичная донорская плазма и каждый лот контролей тестируются и являются негативными по HbsAg, HIV 1/2 Ab и HCV Ab. Однако универсальные меры предосторожности (обработка всех материалов человеческого происхождения как потенциально инфицированных) должны соблюдаться. - Ко всем пробам крови и плазмы и продуктам следует относиться как к потенциально инфицированным и обращаться с ними следует с соответствующей осторожностью, полностью соблюдая требования биобезопасности, а утилизировать аналогично больничным отходам. СТАБИЛЬНОСТЬ И ХРАНЕНИЕ Срок годности, напечатанный на наклейках, применим к невскрытым флаконам при +2 - 8^С. Реагент Комн.Темп.* (20...25°C) +2...8°С -20°С TGA substrate (SUB) 1 неделя 1 месяц 6 месяц. TGA buffer (BUF) 8 часов 1 неделя 1 месяц TGA thrombin calibrator (CAL) 8 часов 1 неделя 6 месяц. TGA reagent В (RB), С Low (RCL), High (RCH), reagent D (RD) 8 часов 1 неделя 6 месяц. TGA control 1 (Cl) 4 часа 8 часов 1 и^сяц TGA control 2 (C2) 4 часа 8 часов 1 месяц TGA control 3 (C3) 4 часа 8 часов 1 месяц Избегайте загрязнения микроорганизмами Плазму следует замораживать только 1 раз; при хранении флаконы должны быть плотно закрыты. * Комнатная температура Материал Комн.Темп.* +2...8°С -20°С --- стр. 4 --- пробы РРР, PRP и PFP плазма 2 часа (20...25°С) 4 часа 1 месяц Рекомендуется немедленное центрифугирование после отбора крови. В дальнейшем мы рекомендуем немедленную шоковую заморозку отцентрифутированных проб. Внимание! Замороженные пробы должны храниться при постоянных условиях. Избегайте изменения температуры при хранении проб. Перед транспортировкой мы рекомендуем отцентрифугировать и подготовить пробы. ПРОЦЕДУРА ТЕСТА ПОДГОТОВКА ПРОБ При исследовании плазм, отобранных на цитрат, набором TECHNOTHROMBIN® TGA мы рекомендуем пробирки CTAD, могут быть использованы в зависимости от специфических применений плазма обогащенная тромбоцитами, обедненная тромбоцитами, или без тромбоцитов. Для отделения плазмы смешайте 9 частей венозной крови и 1 часть раствора цитрата натрия (О , И ммоль/л) и центрифугируйте 15 минут при 2500g (соответствует DJN 58905)/ Из специальных требований подготовки других плазм может быть необходимо: Для плазм, обогащенных тромбоцитами (РКР)центрифугировать 5 минут при lOOg и осторожно пипетировать полученные РБ1Р; Для плазм, обедненных тромбоцитами (РРР) центрифугируйте PRP 10 минут при 1500g и осторожно Пипетируйте полученные РРР. Для плазм без тромбоцитов и микрочастиц (PFP) центрифугируйте РРР 30 минут при 15000g и осторожно пипетируйте полученные PFP, или используйте устройство Technoclone для фильтрации микрочастиц. ПОДГОТОВКА РЕАГЕНТОВ Лиофилизованные реагенты должны быть растворены в объеме дистиллированной воды, указанной на флаконе. Все растворенные реагенты должны достичь комнатной температуры перед использованием.___________________________________________________________________________ Через ровно 20 минут от начала растворения и тщательного перемешивания (Вортекс), реагенты готовы к использованию. Для стандартизации тестов рекомендуется контроли вьщерживать 30 минут после начала растворения. УСТАНОВКА РИДЕРА Используйте соответствующую адаптацию (reader application) на сайте www.technoclone.com. Температура при измерении: 37^С Длины волн флуориметра: ~360 нм/~460 нм (возбуждение/эмиссия). Внимание! Чтобы избежать неожиданностей и неточностей при считывании проб, которые могут быть из-за неоднородности или дефектов плашки, рекомендуется вначале считать пустую плашку. ВРЕМЯ СЧИТЫВАНИЯ 1. Калибровочная кривая: 10 минут с 30 секундным интервалом. Калибровочная кривая должна делаться отдельно от измерения проб. 2. Пробы: в зависимости от материала пробы 60 минут (для терапии ингибитора фактора VIII 90 - 120 минут) с интервалом в 1 минуту. ВЫПОЛНЕНИЕ ТЕСТА --- стр. 5 --- Пробы и растворенные реагенты должны быть доведены до комнатной температуры перед использованием. Калибровочная кривая Калибровочная кривая должна делаться отдельно от измерения проб. Концентрация калибратора (CAL) лот-специфична, смотрите наклейку на флаконе. Калибратор разбавляется буфером TGA как указано в таблице ниже: 1-е разведение (1 : '2): (стандарт 1) 200 мкл Thrombi Calibrator (CAL) + 200 мкл TGA buffer (BUF) 2-е разведение (1 : 4): (стандарт 2) 100 мкл 1-го разведения +100 мкл TGA buffer (BUF) 3-е разведение (1 : 20) (стандарт 3) 20 мкл Thrombi Calibrator (CAL) +380 мкл TGA buffer (BUF) 4-е разведение (1 : 200) (стандарт 4) 20 мкл 3-Г0 разведения +180 мкл TGA buffer (BUF) Все калибраторы должны быть измерены в дублях. Добавьте реагенты в следующей последовательности 40 мкл 50 мкл Разведения калибратора (стандарт 1 стандарт 4) TGA substrate (SUB) Измерять 10 минут с 30 секундным интервалом при 37^С Начать считывание плашки/стрипа немедленно после пипетирования субстрата. ДЛЯ КАЖДОГО ЛОТА ДОЛЖНА СТРОИТЬСЯ ТОЛЬКО ОДНА КАЛИБРОВОЧНАЯ КРИВАЯ 2Л Измерение проб Реагенты должны добавляться в следующей последовательности: Измерение с Реагент TGARB TGA RC Low TGA RC High TGA RD * проба RB + RCL RCH TGARD TGA SUB 40 мкл 10 мкл 50 мкл 40 мкл 10 мкл 50 мкл 20 мкл 30 мкл 50 мкл измерение 60 мин (для терапии FVIII ингибитора 90-120 мин) с интервалом измерения 1 минута при 37°С --- стр. 6 --- Начать считывание плашки немедленно после пипетирования субстрата. быть сделана пропорции Смесь субстрат-реагент может быть приготовлена заранее. Приготовление смеси: Смесь реагента и субстрата должна 1+ 5 для RC Low и RC High и 3 + 5 для RD. Смесь следует разделить на аликвоты и заморозить при -20^С. .Когда используется смесь реагент/субстрат, реагенты должны быть добавлены в следующей последовательности: Реагент проба смесь реагент/субстрат Измерения со смесью реагент/субстрат: RB + RC Low 40 мкл 60 мкл RC High 40 мкл 60 мкл TGA RD* 20 мкл 80 мкл измерение 60 мин (для терапии FV111 ингибитора 90- 120 мин) с интервалом измерения 1 минута при 37°С Начать считывание плашки немедленно после пипетирования субстрата. Внимание! Мы рекомендуем измерять каждую пробу в дублях, *ВНИМАНИЕ: Отличие схемы пипетирования для реагента D АНАЛИЗ РЕЗУЛЬТАТОВ Обработка TECHNOTHROMBIN® TGA выполняется автоматически программой (программу для некоторых ридеров можно загрузить с сайта www.technoclone.comy Программа включает калибровочную кривую и обработку проб. РАСЧЕТ КАЛИБРОВОЧНОЙ КРИВОЙ Используя предлагаемую программу, данные по относительным единицам флуоресценции (RFU), полученные флуориметром для разных концентраций, конвертируются в калибровочную кривую. Эта калибровочная кривая затем используется программой для расчета концентрации фермента в нМ в пробе, измеряемой в данный момент. АНАЛИЗ ПРОБ Предлагаемая программа (www.technoclone.com) рассчитывает генерацию активного фермента в пробе в зависимости от времени и результаты выводятся в нМ фермента, генерируемого в пробе, для каждой точки времени в течение всего процесса коагуляции. При инициации коагуляции в пробе добавлением СаСЬ и смеси фосфолипид/тканевой фактор, генерирование фермента начинается после периода задержки: после этого генерация фермента поминутно возрастает, достигает максимума, после чего уменьшается. Рисунок выглядит похожим на показанный ниже: --- стр. 7 --- * у ^ /V ^ C^!~t-^