--- стр. 1 ---
« У Т В Е Р Ж Д А Ю »
Р у к о в о д и1 'е л ь Д в Т ш р т а м е н т а г о с у д а р с т в е н н о г о к о н т р о л я л(
KapcTBCHHbn^,^dpu^T^^^^ м е д и ц и н с к о й т е х н и к и М 3 Р Ф
В .Е , А к и м о ч к и н
■ % ' Ш ' Ч Ч ! О о ‘ ^ ±
и н с ™ | щ %
п о п р и м е н е н и ю н а б о р а р е а г е н т о в д л я о Ь г ^ й с л е н и й с о д е р ж а н и я к р е а т и н и н а в
с ы в о р о т к е к р о в и и м о ч е
( К л и н и Т е с т - К р е а т и н и н )
Р е к о м е н д о в а н а к у т в е р ж д е н и ю к о м и с с и е й п о л а б о р а т о р н ы м р е а г е н т а м К о м и т е т а п о
н о в о й м е д и ц и н с к о й т е х н и к е М 3 Р Ф
(п р о т о к о л № 3 о т 2 2 а п р е л я 2002 г .)
Н А З Н А Ч Е Н И Е
Н а б о р р е а г е н т о в К л и н и Т е с т - К р е а т и н и н п р е д н а з н а ч е н д л я к о л и ч е с т в е н н о г о о п р е д е
л е н и я с о д е р ж а н и я к р е а т и н и н а в с ы в о р о т к е к р о в и и м о ч е ч е л о в е к а в к л и н и к о -
д и а г н о с т и ч е с к и х и б и о х и м и ч е с к и х л а б о р а т о р и я х и в н а у ч н о - и с с л е д о в а т е л ь с к о й п р а к
т и к е .
Н а б о р р а с с ч и т а н н а п р о в е д е н и е 2 5 0 о п р е д е л е н и й п р и с у м м а р н о м р а с х о д е 1,5 м л
р е а г е н т о в н а о д и н а н а л и з .
П Р И Н Ц И П М Е Т О Д А
К р е а т и н и н в щ е л о ч н о й с р е д е р е а г и р у е т с п и к р и н о в о й к и с л о т о й с о б р а з о в а н и е м
к о м п л е к с а ж е л т о - к р а с н о г о ц в е т а , и н т е н с и в н о с т ь о к р а с к и к о т о р о г о п р о п о р ц и о н а л ь н а
с о д е р ж а н и ю к р е а т и н и н а в а н а л и з и р у е м о й п р о б е и о п р е д е л я е т с я ф о т о м е т р и ч е с к и п р и
д л и н е в о л н ы 5 0 0 ( 5 0 0 -5 6 0 ) н м .
С О С Т А В Н А Б О Р А :
- П и к р и н о в а я к и с л о т а , 0 ,0 4 м о л ь ^ - 1 ф л а к о н (1 2 5 м л ) ;
“ г и д р о о к и с ь н а т р и я , 0 ,3 м о л ь ^ - 2 ф л а к о н а ( п о 125 м л );
- т р и х л о р у к с у с н а я к и с л о т а - 1 ф л а к о н (1 2 5 м л );
- к а л и б р о в о ч н ы й р а с т в о р к р е а т и н и н а , 1 5 0 м к м о л ь ^ - 1 ф л а к о н (10 м л ) .
А Н А Л И Т И Ч Е С К И Е Х А Р А К Т Е Р И С Т И К И Н А Б О Р А
Ч у в с т в и т е л ь н о с т ь - н е б о л е е 2 5 м к м о л ь /л .
Л и н е й н о с т ь . Н а б о р о б е с п е ч и в а е т л и н е й н о с т ь п р и о п р е д е л е н и и с о д е р ж а н и я к р е а т и
н и н а в д и а п а з о н е о т 3 0 д о 5 0 0 м к м о л ь /л с о т к л о н е н и е м о т л и н е й н о с т и н е б о л е е 5 % .
К о э ф ф и ц и е н т в а р и а ц и и - н е б о л е е 5 % .
И н с т р у к ц и я с о с т а в л е н а с т а р ш и м н а у ч н ы м с о т р у д н и к о м Н П Ц " Э к о - С е р в и с ” Р О С
С П б О Е С .А .К о н ь к о в ы м и з а в . к а ф . С П б Г М У д .м .н ., п р о ф е с с о р о м В .Л .Э м а н у э л е м
--- стр. 2 ---
К а ч е с т в о н а б о р а м о ж е т п р о в е р я т ь с я п о о т е ч е с т в е н н ы м и л и з а р у б е ж н ы м к о н т р о л ь
н ы м с ы в о р о т к а м , а т т е с т о в а н н ы м д а н н ы м м е т о д о м .
С о д е р ж а н и е к р е а т и н и н а в н о р м е с о с т а в л я е т : в с ы в о р о т к е к р о в и у ж е н щ и н - 4 4 - 88
м к м о л ь /л , у м у ж ч и н - 4 4 - 1 0 0 м к м о л ь /л ; в с у т о ч н о й м о ч е - 4 ,4 - 1 7 , 7 м м о л ь /с у т .
А Н А Л И З И Р У Е М Ы Е ( Ж Р А Щ Ы
Н е г е м о л и з и р о в а н н а я с ы в о р о т к а к р о в и и м о ч а ч е л о в е к а . М о ч у п е р е д о п р е д е л е н и е м
с л е д у е т р а з в е с т и д и с т и л л и р о в а н н о й в о д о й в 5 0 р а з .
М Е Р Ы П Р Е Д О С Т О Р О Ж Н О С Т И П Р И Р А Б О Т Е С Н А Б О Р О М
В с о с т а в н а б о р а в х о д я т п и к р и н о в а я , т р и х л о р у к с у с н а я к и с л о т ы и г и д р о к с и д н а т р и я ,
п о э т о м у с л е д у е т с о б л ю д а т ь п р а в и л а т е х н и к и б е з о п а с н о с т и , о б я з а т е л ь н ы е п р и р а б о т е с
е д к и м и а г р е с с и в н ы м и х и м и ч е с к и м и в е щ е с т в а м и .
М е р ы п р е д о с т о р о ж н о с т и п р и р а б о т е с н а б о р о м - с о б л ю д е н и е « П р а в и л у с т р о й с т в а ,
т е х н и к и б е з о п а с н о с т и , п р о и з в о д с т в е н н о й с а н и т а р и и , п р о т и в о э п и д е м и ч е с к о г о р е ж и м а
и л и ч н о й г и г и е н ы п р и р а б о т е в л а б о р а т о р и я х ( о т д е л е н и я х , о т д е л а х ) с а н и т а р н о - э п и д е
м и о л о г и ч е с к и х у ч р е ж д е н и й с и с т е м ы М и н и с т е р с т в а з д р а в о о х р а н е н и я С С С Р » ( М о с к в а ,
1981 г.).
П р и р а б о т е с н а б о р о м с л е д у е т н а д е в а т ь о д н о р а з о в ы е р е з и н о в ы е и л и п л а с т и к о в ы е
п е р ч а т к и , т а к к а к о б р а з ц ы к р о в и ч е л о в е к а с л е д у е т р а с с м а т р и в а т ь к а к п о т е н ц и а л ь н о
и н ф и ц и р о в а н н ы е , с п о с о б н ы е д л и т е л ь н о е в р е м я с о х р а н я т ь и п е р е д а в а т ь В И Ч , в и р у с
г е п а т и т а и л и л ю б о й д р у г о й в о з б у д и т е л ь в и р у с н о й и н ф е к ц и и .
О Б О Р У Д О В А Н И Е И Р Е А Г Е Н Т Ы :
' С п е к т р о ф о т о м е т р , д л и н а в о л н ы 5 0 0 н м , и л и ф о т о э л е к т р о к о л о р и м е т р , д л и н а в о л н ы
5 0 0 - 5 6 0 н м , и л и б и о х и м и ч е с к и й а н а л и з а т о р о т к р ы т о г о т и п а , к ю в е т а с д л и н о й о п т и ч е
с к о г о п у т и 10 м м ;
- п и п е т к и , п о з в о л я ю щ и е о т б и р а т ь о б ъ е м ы ж и д к о с т е й 0 ,2 5 ; 0 ,5 и 1 ,0 м л ;
- ц е н т р и ф у г а н а 3 0 0 0 о б /м и н ;
- с е к у н д о м е р ;
- п р о б и р к и в м е с т и м о с т ь ю 3 ,5 - 5 ,0 м л ;
- в о д а д и с т и л л и р о в а н н а я ;
- ф и з и о л о г и ч е с к и й р а с т в о р ( 0 ,9 % N a C l) ;
- п е р ч а т к и р е з и н о в ы е и л и п л а с т и к о в ы е .
П О Д Г О Т О В К А К А Н А Л И З У
В с е р е а г е н т ы г о т о в ы к п р и м е н е н и ю .
П Р О В Е Д Е Н И Е А Н А Л И З А
1, О п р е д е л е н и я с о д е р ж а н и я к р е а т и н и н а в с ы в о р о т к е к р о в и *
К о м п о н е н т ы р е а к ц и о н н о й с м е с и о т б и р а т ь в к о л и ч е с т в а х , у к а з а н н ы х в т а б л и ц е 1.
--- стр. 3 ---
Таблица 1
О т м е р и т ь , м л О п ы т н а я п р о б а К а л и б р о в о ч н а я
п р о б а
К о н т р о л ь н а я
( х о л о с т а я ) п р о б а
Т р и х л о р у к с у с н а я
к и с л о т а
0 ,5 0 ,5 0 ,5
В о д а д и с т и л л и р о
в а н н а я
1,0 1,0 1,5
С ы в о р о т к а к р о в и 0 ,5 - -
К а л и б р о в о ч н ы й
р а с т в о р к р е а т и н и н а
- 0 ,5 -
П р о б ы т щ а т е л ь н о п е р е м е ш а т ь , ц е н т р и ф у г и р о в а т ь п р и 3 0 0 0 о б /м и н п р и к о м н а т н о й
т е м п е р а т у р е ( + 1 8 - 2 5 ° С ) в т е ч е н и е 5 м и н у1 , о т о б р а т ь с у п е р н а т а н т .
С у п е р н а т а н т и р е а г е н т ы о т б и р а т ь в к о л и ч е с т в а х , у к а з а н н ы х в т а б л и ц е 2 .
Т а б л и ц а 2
О т м е р и т ь , м л О п ы т н а я п р о б а К а л и б р о в о ч н а я
п р о б а
к о н т р о л ь н а я
( х о л о с т а я ) п р о б а
С у п е р н а т а н т 1,0 1,0 1,0
П и к р и н о в а я к и с л о
т а
0 ,5 0 ,5 0 ,5
Г и д р о о к и с ь н а т р и я 1.0 1,0 1,0
П р о б ы т щ а т е л ь н о п е р е м е ш а т ь и и н к у б и р о в а т ь в т е ч е н и е 2 0 м и н у т п р и к о м н а т н о й
т е м п е р а т у р е , п о с л е ч е г о и з м е р и т ь о п т и ч е с к у ю п л о т н о с т ь о п ы т н о й п р о б ы (Еоп) и к а
л и б р о в о ч н о й п р о б ы (Екал) о т н о с и т е л ь н о к о н т р о л ь н о й ( х о л о с т о й ) п р о б ы п р и д л и н е
в о л н ы 5 0 0 ( 5 0 0 - 5 6 0 ) н м в к ю в е т е с д л и н о й о п т и ч е с к о г о п у г и 10 м м .
2 . О п р е д е л е н и я с о д е р ж а н и я к р е а т н и и н а в м о ч е
К о м п о н е н т ы р е а к ц и о н н о й с м е с и о т б и р а т ь в к о л и ч е с т в а х , у к а з а н н ы х в т а б л и ц е 3.
Т а б л и ц а 3
О т м е р и т ь , м л О п ь г г н а я п р о б а К а л и б р о в о ч н а я
п р о б а
К о н т р о л ь н а я
( х о л о с т а я ) п р о б а
Т р и х л о р у к с у с н а я
к и с л о т а
0 ,2 5 0 ,2 5 0 ,2 5
В о д а д и с т и д л и р о -
в а н н а я
0 ,5 0 ,5 0 ,7 5
М о ч а р а з в е д е н н а я 0 ,2 5 -
К а л и б р о в о ч н ы й
р а с т в о р к р е а т и н и н а
- 0 ,2 5 -
П и к р и н о в а я к и
с л о т а
0 ,5 0 ,5 ^ 0 ,5
Г и д р о о к и с ь н а т р и я 1,0 Г U 0 1,0
П р о б ы т щ а т е л ь н о п е р е м е ш а т ь и и н к у б и р о в а т ь в т е ч е н и е 2 0 м и н у т п р и к о м н а т ^ ю й
т е м п е р а т у р е , п о с л е ч е г о и з м е р и т ь о п т и ч е с к у ю п л о т н о с т ь о п ы т н о й п р о б ы (Еоп) и к а
л и б р о в о ч н о й п р о б ы (Екал) о т н о с и т е л ь н о к о н т р о л ь н о й ( х о л о с т о й ) п р о б ы п р и д л и н е
в о л н ы 5 0 0 ( 5 0 0 - 5 6 0 ) н м в к ю в е т е с д л и н о й о п т и ч е с к о г о п у т и 10 м м .
--- стр. 4 ---
С о д е р ж а н и е к р е а т и н и н а в с ы в о р о т к е к р о в и р а с с ч и т а т ь п о ф о р м у л е :
C = b iL x i5 0 ,
г д е : С - к о н ц е н т р а ц и я к р е а т и н и н а , м к м о л ь /л ;
Еоп ~ о п т и ч е с к а я п л о т н о с т ь о п ы т н о й п р о б ы , е д . о п т , п л о т н .;
Екал ' о п т и ч е с к а я п л о т н о с т ь к а л и б р о в о ч н о й п р о б ы , е д . о п т . п л о т н .;
1 5 0 - к о н ц е н т р а ц и я к р е а т и н и н а в к а л и б р о в о ч н о м р а с т в о р е , м к м о л ь /л .
С о д е р ж а н и е к р е а т и н и н а в м о ч е о п р е д е л и т ь п о ф о р м у л е :
0 = 5 0 .
Е^хЮОО
Р А С Ч Е Т Ы
кал
где: С - к о 1щ е н т р а ц и я к р е а т и н и н а , м м о л ь /л ;
Еоп ” о п т и ч е с к а я п л о т н о с т ь о п ы т н о й п р о б ы , е д . о п т . п л о т н .;
Екал “ о п т и ч е с к а я п л о т н о с т ь к а л и б р о в о ч н о й п р о б ы , е д . о п т . п л о т и .;
5 0 “ к о э ф ф и ц и е н т р а з в е д е н и я ;
V - к о л и ч е с т в о м о ч и , с о б р а н н о й з а с у т к и , л ;
1000 - к о э ф ф и ц и е н т п е р е с ч е т а м к м о л ь /с у т в м м о л ь /с у т ;
1 5 0 - к о н ц е н т р а ц и я к р е а т и н и н а в к а л и б р о в о ч н о м р а с т в о р е , м к м о л ь /л
У С Л О В И Я Х Р А Н Е Н И Я И Э К С П Л У А Т А Ц И И
Н а б о р д о л ж е н х р а н и т ь с я п р и к о м н а т н о й т е м п е р а т у р е ( + 1 8 - 2 5 ° С ) в у п а к о в к е п р е д
п р и я т и я и з г о т о в и т е л я в т е ч е н и е в с е г о с р о к а г о д н о с т и ( 12 м е с я ц е в ) .
П и к р и н о в а я к и с л о т а , г и д р о о к и с ь н а т р и я и т р и х л о р у к с у с н а я к и с л о т а п о с л е в с к р ы т и я
ф л а к о н о в м о г у т х р а н и т ь с я п р и к о м н а т н о й т е м п е р а т у р е в т е м н о м м е с т е в т е ч е н и е в с е г о
с р о к а г о д н о с т и н а б о р о в п р и у с л о в и и д о с т а т о ч н о й г е р м е т и ч н о с т и ф л а к о н о в .
К а л и б р о в о ч н ы й р а с т в о р к р е а т и н и н а п о с л е в с к р ь г г и я ф л а к о н а м о ж н о х р а н и т ь п р и
т е м п е р а т у р е + 2 - 8 ° С н е б о л е е 3 м е с я ц е в п р и у с л о в и и д о с т а т о ч н о й г е р м е т и ч н о с т и ф л а
к о н а .
П р и с о д е р ж а н и и к р е а т и н и н а в с ы в о р о т к е к р о в и в ы ш е 5 0 0 м к м о л ь /л а н а л и з и р у е м у ю
п р о б у с л е д у е т р а з в е с т и ф и з и о л о г и ч е с к и м р а с т в о р о м и п о л у ч е н н ы й р е з у л ь т а т у м н о
ж и т ь н а р а з в е д е н и е .
Д л я п о л у ч е н и я н а д е ж н ы х р е з у л ь т а т о в н е о б х о д и м о с т р о г о е с о б л ю д е н и е и н с т р у к ц и и
п о п р и м е н е н и ю н а б о р а .
П о в о п р о с а м , к а с а ю щ и м с я к а ч е с т в а н а б о р а К л и н и Т е с т - К р е а т и н и н , с л е д у е т о б р а
щ а т ь с я в:
- Н П Ц « Э к о - С е р в и с » Р О О С п б О Е п о а д р е с у : 1 9 9 0 3 4 , г. С а н к г - П е т е р б у р г , У н и в е р
с и т е т с к а я н а б е р е ж н а я , 7 /9 , т е л .: (8 1 2 ) 3 2 8 9 6 6 3 ,4 2 7 9 7 7 9 ; с р > /у „
- И н с т и т у т г о с у д а р с т в е н н о г о к о н т р о л я к а ч е с т в а л е к а р с т в е н н ы х с р е д с т в ^ Н Ц Э С М П
М 3 Р Ф п о а д р е с у : 1 1 7 2 4 6 , г. М о с к в а , Н а у ч н ы й п р о е з д , 14 а , т е л .: ( 0 9 5 ) 1 2 0 - 6 0 -9 5 , 12 0 -
6 0 - 9 6 .
С т а р ш и й н а у ч н ы й с о т р у д н и к
Н П Ц " Э к о - С е р в и с " Р О О С П б О Е С .А .К о н ь к о в
З а в е д у ю щ и й к а ф е д р о й к л и н и ч е с к о й
л а б о р а т о р н о й д и а г н о с т и к и С П б М Г У ,
д о к т о р м е д и ц и н с к и х н а у к , п р о ф е с с о р В . Л .Э м а н у э л ь