--- стр. 1 ---
И н с т р у к ц и я
по применению наборов реагентов для определения биохимических
показателей в крови, моче и других биологических жидкостях произ
водства компании «Analyticon® Biotechnologies AG», Германия;
в том числе:
1. НАЗНАЧЕНИЕ
2. ОСНОВНЫЕ ТЕХНИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ (ПРАВИЛА ХРАНЕНИЯ И
ИСПОЛЬЗОВАНИЯ)
3. ПРОТИВОПОКАЗАНИЯ К ПРИМЕНЕНИЮ
4. ПОДГОТОВКА И ПОРЯДОК РАБОТЫ ИЗДЕЛИЯ
Москва 2009 г.
--- стр. 2 ---
1. НАЗНАЧЕНИЕ:
Наборы реагентов для определения биохимических показателей в крови, мо
че и других биологических жидкостях производства компании «Analyticon®
Biotechnologies AG», Германия (далее - «наборы»), предназначены для качест
венного и количественного лабораторного («in vitro») определения биохимиче
ских показателей в крови, ее компонентах, моче, спинномозговой жидкости и
других образцах жидких сред организма человека.
Под «определением биохимических показателей» подразумевается измере
ние концентраций (или качественная оценка «норма-патология») исследуемых
веществ в образцах с использованием фотометрических, турбидиметрических
и визуальных методов.
В основе наборов, лежат биохимические ферментативные реакции, специ
фичные для каждого определяемого вещества (аналита). Для ряда аналитов:
гликозилированный гемоглобин, MB-фракция креатинфосфокиназы, фракции
холестерина, антистрептолизина О, С-реактивного белка, ревматоидного фак
тора - применяются иммунологические реакции типа «антиген-антитело».
В ходе реакции изменяется концентрация одного из компонентов набора. По
изменению оптической плотности раствора в кювете анализатора вычисляется
концентрация исследуемого вещества или активность исследуемого фермента.
2. ОСНОВНЫЕ ТЕХНИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ (ПРАВИЛА
ХРАНЕНИЯ И ИСПОЛЬЗОВАНИЯ)
Компоненты, входящие в состав набора
Обязательные компоненты наборов:
• Флаконы с реагентами, готовыми к использованию или требующими
предварительной подготовки (для наборов с лиофилизированными
компонентами - флаконы с сухим реагентом и флаконы с буфером-
растворителем). Обозначение на этикетке - Р 1 -...-Р З , в том числе - с
буквенным индексом типа РЗЬ.
Необязательные компоненты наборов:
• Стандарты - один или несколько флаконов с раствором вещества,
определяемого данным набором. Концентрация аналита точно изме
рена и указана на этикетке флакона. Обозначение на этикетке - 1*4.
Стандарт может использоваться для калибровки и/или контроля каче
ства методики определения аналита.
• В наборах слайд-тестов - слайды с нанесенными черными матовыми
тестовыми полями и контрольные сыворотки - «отрицательная», не
содержащая определяемый аналит и «положительная», содержащая
определяемый аналит в концентрации, заведомо большей, чем ниж
ний предел чувствительности набора.
Необходимые материалы и средства, не входящие в комплект набора:
• Деионизированная или дистиллированная вода;
• Автоматические пипетки (дозаторы) различных объемов;
• Расходные материалы к анализатору, на котором проводится измере
ние - вторичные пробирки для образцов, реагентные флаконы и пр.
--- стр. 3 ---
3.ПРОТИВОПОКАЗАНИЯ К ПРИМЕНЕНИЮ
Предупреждения и М еры предосторожности
• Наборы применяются только для диагностики in vitro. Попадание каких-либо
компонентов наборов на открытые участки кожи, слизистые оболочки или в
организм недопустимы.
• Реагенты, образцы и другие компоненты наборов должны храниться при тем
пературе, указанной на упаковке (большинство наборов 2-8 С, для некоторых
наборов допустимо хранение при Т до +15°С). Все манипуляции с наборами
проводите в соответствии с прилагаемой инструкцией.
• При тестировании использованных для создания наборов материалов чело
веческого происхождения не обнаружено антител к вирусу иммунодефицита
человека (ВИЧ) 1 и 2, поверхностному антигену гепатита В и антител к гепа
титу С, а также не выявлено активности на сифилис. Тем не менее, никакие
тестирующие методики не дают абсолютной уверенности в том, что лабора
торные образцы не содержат ВИЧ, вируса гепатита или других инфекцион
ных агентов. Поэтому с данными реагентами необходимо обращаться как с
потенциально инфекционно-опасным материалом, согласно национальным
руководствам по биологической безопасности.
• Азид натрия в концентрации менее 0,1 г/дл добавлен в качестве консерван
та. Чтобы избежать возникновения взрывоопасных азидов в свинцовых и
медных водопроводах, реагенты можно сливать в канализацию только после
значительного разведения, при этом смывать большим количеством воды.
Периодически промывайте трубы 10% раствором гидроокиси натрия.
• Компоненты наборов не должны попадать под воздействие прямых солнеч
ных лучей, загрязняться образцом, контрольными материалами или другими
реагентами.
• Для разведения лиофилизированных компонентов наборов используйте
только входящий в комплект буфер-растворитель. Для разведения образцов
используйте 0,9% (0,14 Моль/л) стерильный раствор NaCI (рекомендуется)
или дистиллированную (деионизированную) воду.
• Лиофилизированные материалы, входящие в состав набора, необходимо
полностью растворить перед проведением анализа, не менее чем за 20 ми
нут до начала работ.
4.ПОДГОТОВКА И ПОРЯДОК РАБОТЫ ИЗДЕЛИЯ
Образцы
В качестве образца может быть использована сыворотка крови, плазма кро
ви с антикоагулянтами, моча, спинномозговая жидкость или иные жидкости и
среды (в том числе ~ патологического происхождения, получаемые, например,
при диагностических и лечебных манипуляциях), если определение аналита в
материале имеет диагностическую ценность.
В общем случае проба должна быть прозрачна, не иметь признаков загряз
нений продуктами распада клеток (липемия, гемолиз), включений механических
частиц, сгустков и нитей фибрина и т.п.
Внимание!
• Наличие гемолиза в пробе показывает, что преаналитический этап был
проведен с нарушением регламента, результаты должны интерпретировать
ся с осторожностью.
• Для очистки липемичных (загрязненных включениями жира) проб рекомен
дуется ультрацентрифугирование.
--- стр. 4 ---
• Мутные образцы необходимо очистить с помощью низкоскоростного цен
трифугирования.
• Для предотвращения ошибок, возникающих из-за присутствия в образцах
фибрина, необходимо центрифугировать образцы только после окончатель
ного формирования фибринового сгустка. Для образцов, взятых от получаю
щих антикоагулянтную терапию пациентов, время формирования фибрино
вого сгустка увеличивается. В подобных случаях часто целесообразно ис
пользовать для взятия крови пробирки с антикоагулянтом, например, литий-
гепарином, для предотвращения образования фибринового сгустка, если по
добное допускается принципом метода.
• На результаты анализа может влиять использование для сбора образца
пробирок некоторых производителей, причиной этому могут быть: материал,
из которого изготовлены пробирки, используемые в них гелевые или другие
барьеры, активаторы формирования фибринового сгустка, антикоагулянты.
Наборы производства компании «Analyticon® Biotechnologies AG», Германия,
не тестированы с пробирками всех возможных типов, но результаты некото
рых исследований представлены в разделе «Альтернативные типы образ
ца».
Требуемый объём: для проведения одного теста используется от 3 до 500 мкл
сыворотки или плазмы.
Хранение: образцы (сыворотка или плазма) могут храниться при температуре 2-
8 С - до 3-х дней, при -20 С в аликвотах - до 6 месяцев.1 0
4 .2 . Процедура анализа
В общем случае концентрация аналита измеряется по изменению оптиче
ской плотности (OD) реакционной смеси в кювете. Для наборов, не требующих
многоточечной калибровки и многократного измерения OD (или через проме
жутки времени менее 30 сек) в видимом диапазоне длин волн, допустимо при
менение неавтоматизированных спектрофотометров или фотоэлектроколори
метров - «ручной» способ измерения. Во всех других случаях рекомендуется
применять полу- или автоматизированные системы измерения, как специали
зированные (биохимические анализаторы различных систем и производитель
ности), так и универсальные (спектрофотометры и аналогичные измерительные
системы) приборы.
В соответствии с принципом метода и последовательностью операций, при
веденной в приложении 1, для данного аналита и/или типа набора проводится:
• Приготовление рабочих растворов;
• Подготовка образца крови, сыворотки, плазмы и. т.п.;
• Смешивание в определенной методикой последовательности реакти
вов и образца;
• Измерение оптической плотности реакционной смеси;
• Вычисление концентрации аналита (для ручного определения).
4 .3 . Характеристики теста:
Представление данных
Результаты представляются в размерностях, характерных для типов анали-
тов: субстраты - в размерностях концентрации (г/л, Моль/л и кратных или
дробных); ферменты - в размерностях каталитической активности (Катал/л,
Ед/л и кратных или дробных).
--- стр. 5 ---
Воспроизводимость:
Гемолиз: содержание в пробе гемоглобина в концентрациях до 1000 мг/дл не
оказывает клинически значимого влияния на результаты анализа.
Липемические образцы: присутствие в пробе триглицеридов в концентрациях
до 1000 мг/дл не оказывает клинически значимого влияния на результаты ана
лиза.
Иктеричные образцы индекс иктеричности до 90, что примерно соответствует
концентрации конъюгированного и неконъюгированного билирубина 90 мг/дл не
оказывает существенного влияния на результаты анализа.
Альтернативные типы образца: компания Siemens провела ряд исследова
ний, позволивших оценить степень влияния на результаты анализов некоторых
веществ и материалов, обычно используемых на стадии пробоподготовки. Бы
ло проанализировано 28 образцов сыворотки крови здоровых доноров. Для по
лучения сыворотки использовали различные типы пробирок - стандартные, об
работанные гепарином или ЭДТА.
Медицинская компания ОМБ
РФ, Москва, 125047, ул. 4-ая Тверская-Я м ская, д. 16
стр.З
Тел/ факс: (495) 925-81-50
E-mail: om b@ om b.ru