--- стр. 1 ---
«УТВЕРЖДАЮ»
^псральный Директор
«Текан»
а А Л .
^ 2 Ш Т .
организации-заявителя
XПОДПИСЬ.ДАТАЛЕЧАТЬ)
ИНСТРУКЦИЯ
П о п р1ш ененин> Реагентов для in vitro диагностики на иммунохимических анализаторах
серии LIAISON, производства компаний «DiaSorin S.p.A.», Италия, «DiaSorin Inc»,
США, «DiaSorin Deutschland GmbH», Германия.
Реагенты для серологической диагностики гормональных нарушений, опухолевых и
аутоиммунных заболеваний
(Реагент для определения общего Т4 (LIAISON Т4), Реагент для определения свободного Т4 (LIAISON
FT4), Реагент для определения o 6niero ТЗ (LIAISON ТЗ), Реагент для определения свободного ГЗ
(LIAISON FT3), Реагент для определе 1И1я тиреотропиого гормона (LIAISON TSH), Реагент для
определения тиреоглобулина (LIAISON Tg), Реагент для определения антител к тиреоглобулину
(LIAISON Anti-Tg). Реагент для определения антител к тиреопероксидазе (LIAISON Anti-TPO). Реагент
для определения лютеотропного гормона (LIAISON LH). Реагент для определения
фолликулостимулирующего гормона (LIAISON FSH), Реагент для определения пролактина (LIAISON
Prolactin), Реагент для определения хорионического гонадотропного гормона (LIAISON HCG), Реагент
для определения эстрадиола (LIAISON Estradiol). Реагент для определения прогестерона (LIAISON
Progesterone), Реагент для определения тестостерона (LIAISON Testosterone), Реагент для определения
альфафетопротеина (LIAISON AFP), Реагент для определения бета- 2-микрог'лобу]ии1а (LIAISON (32-
Microglobiilin), Реагент для определения ракового антигена 15-3 (LIAISON С А 15-3®), Реагент для
определения ракового агггигена 19-9 (LIAISON СА 19-9^ *^ ), Реагент для определения ракового антигена
125 (LIAISON С А 125 П™), Реагент для определения ракового антигена 72-4 (LIAISON СА 72-4®),
Реагент для определения ракового эмбрионального аггтигена (LIAISON СЕА), Реагент для определения
ферритина (LIAISON Ferritin), Реагент для определения нейрон-специфической енолазы (LIAISON
NSE), Реагент для определения белка S100B (LIAISON SKJO), Реагент для определения тканевого
полипептидного антигена (LIAISON ТРА®-М). Реагент для определения кальцитонина (LIAISON
Calcitonin II-Gen), Реагент для определения 25-ОН витамина D (LIAISON 25 ОН Vitamin D Total Assay),
Реагент для определения остеокальцина (LIAISON Osteocalcin Assay), Реагент для определения
иитактного паратиреоидного гормона (LIAISON N-Tact РТН), Реагент для определения 1-84
паратиреоидного гормона (LIAISON 1-84 РТН), Реагент для определения адренокортикотропного
гормона (LIAISON АСТН), Реагент для определения кортизола (LIAISON Cortisol), Реагент для
определения С-пептида (LIAISON C-peptid), Реагент для определения инсулина (LIAISON Insulin),
Реагент для определения соматогропного гормона (LIAISON liGH), Реагент для прямого определетш
ренина (LIAISON Direct Renin), Реагент для определения креатинкиназы-МВ (LIAISON СКМВ), Реагент
для определения миоглобииа (LIAISON Myoglobin), Реагент для определения тропонииа I (LIAISON
Troponin I), Реагент для определения прокальцитонина (LIAISON BRAHM S РСТ®), Реагент для
определения антиядерных антител (LIAISON A N A Screen), Реагент для определения антител к
экстрагируемым ядерным антигенам (LIAISON EN A Screen), Реагент для определения антител к
двухцепочечиой ДНК (LIAISON dsDNA), Реагент для определения антител IgA к тканевой
трансглутаминазе (LIAISON tTG IgA))
--- стр. 2 ---
фНАЗНАЧЕНИЕ
Реагенты предназначены для серологической диагностики гормон£ 1льных нарушений, опухолевых и
аутоиммунных заболеваний.
2. ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА
2.1 СОСТАВ НАБОРА
1. Реагент для определения общего Т4 (L IA IS O N Т4).
Интегральный картридж на 00 исследований - 1 шт., состоит из нескольких флаконов:
Магнитные частицы (2,3
мл)
Магнитные частицы, покрытые поликлональными антителами к
тироксину
Калибратор 1 (1 мл) Человеческая сыворотка, Т4. 0,09% азид натрия.
Калибратор 2 (1 мл) Человеческая сыворотка, Т4. 0,09% азид натрия.
Конъюгат (23 мл) Тироксин, меченный изолюминолом. фосфатно-солевой буфер; БСА;
азид натрия.
2. Реагент для определения с
Интегральный картридж на
:вободного Т4 (L IA IS O N FT4).
00 исследований - 1 шт., состоит из нескольких флаконов:
Магнитные частицы (2,3
мл)
Магнитные частицы, покрытые молекулами тироксина, 0,09% азид
натрия.
Калибратор 1 (1 мл) Человеческая сыворотка, Т4, 0,09% азид натрия.
Калибратор 2 (1 мл) Человеческая сыворотка, Т4, 0,09% азид натрия.
Конъюгат (23 мл) Тироксин, меченный изолюминолом, Трис-буфер; БСА; азид натрия,
мышиные IgG.
3. Реагент для определения общего ТЗ (L IA IS O N ТЗ).
Магнитные частицы (2,3
мл)
Магнитные частицы, покрытые мышиными мопоклоиальиыми
антителами к трииодтиронину
Калибратор 1 (1,6 мл) Человеческая сыворотка, ТЗ, 0,09% азид натрия.
Калибратор 2 (1,6 мл) Человеческая сыворотка, ТЗ, 0,09% а:5ид натрия.
Конъюгат (22 мл) Трииодтироиин, меченный изолюминолом, фосфатно-солевой буфер;
БСА; азид натрия.
4. Реагент для определения свободного ТЗ (L IA IS O N FT3).
Магнитные частицы (2,3
мл)
Магнитные частицы, покрытые трииодтиронином, 0,09%> азид натрия.
Калибратор 1 (1,0 мл) Человеческая сыворотка, ТЗ, 0,09% азид натрия.
Калибратор 2 (1,0 мл) Человеческая сыворотка, ТЗ, 0,09% азид натрия.
Конъюгат (12 мл) Поликлональные овечьи антитела к трииодтиронину, меченные
изолюминолом. фосфатно-солевой буфер; БСА; азид натрия.
5. Реагент для определения тиреотропного гормона (L IA IS O N TSH ).
Магнитные частицы (2,3
мл)
М агнитные частицы, покрытые мышиными моноклональными
анти телами к тиреотропному гормону, буфер, 0,09% азид натрия
Калибратор 1 (2 мл) Человеческая сыворотка, тиреотропный гормон, 0,09% азид натрия.
Калибратор 2 (2 мл) Человеческая сыворотка, тиреотропный гормон, 0,09% азид натрия.
Конъюгат (14 мл) Мышиные моноююнальные антитела к тиреотропному гормону,
меченные изолюминолом. БСА, буфер. 0,09%> азид натрия.
6. Реагент для определения тиреоглобулина (L IA IS O N Tg).
Интегральный картридж на 100 исследований - 1 шт., состоит из нескольких флаконов:
--- стр. 3 ---
Магнитные частицы (2,3 М агнитные частицы, покрытые поликлональными кроличьими
антителами к человеческому тиреоглобулину; БСА; фосфатно-
солевой буфер; азид натрия.
Калибратор 1 (1 мл) Человеческая сыворотка, тиреоглобулин.
Калибратор 2 (1 мл) Человеческая сыворотка, тиреоглобулин.
Конъюгат (23 мл) Мышиные моноююнальные антитела к человеческому
тиреоглобулину, меченные изолюминолом; БСА; фосфатно-солевой
буфер; азид натрия.
Буфер (15 мл) БСА, фосфатно-солевой буфер.
Раствор для разведения
образцов (25 мл)
БСА, фосфатно-солевой буфер.
7 . 1 ‘еагент для определения антител к тиреоглобулину (L IA IS O N A nti-Tg).
Интегральный картридж на 100 исследований - 1 шт., состоит из нескольких флаконов:
Магнитные частицы (2,3
мл)
Магнитные частицы, покрытые человеческим тиреоглобулином.
Калибратор 1 (1 мл) Человеческая сыворотка, анти-ТГ.
Калибратор 2(1 мл) Человеческая сыворотка. анти-ТГ.
Конъюгат (11,5 мл) Козьи поликлональные антитела к человеческим IgG. меченные
изолюминолом
Буфер (28 мл)
Раствор для разведения
образцов(28 мл)
8. Реагент для определения ан'
Интегральный картридж на 10
гител к тиреопероксидазе (L IA IS O N A nti-TPO ).
0 исследований 1 шт., состоит из нескольких флаконов:
МагнитнЕ>1е частицы (2.3
мл)
Магнитные частицы, покрытые рекомбинантной тиреоидной
пероксидазой
Калибратор 1 (1 мл) Человеческая сыворотка, аитп-ТПО .
Калибратор 2 (1 мл) Человеческая сыворотка, анти-ТПО.
М етка (11,5 мл) Козьи поликлональные антитела к человеческим IgG, меченные
изолюминолом
Буфер (28 мл)
Раствор для разведения
образцов(28 мл)
9. Реагент для определения лютеотропного гормона (L IA IS O N LH ).
Интегральный картридж на 100 исследований - 1 шт., состоит irj нескольких флаконов:
Магнитные частицы (2,3
мл)
Магнитные частицы, покрытые мышиными моноклональными
антителами к Л Г; фосфатно-солевой буфер; БСА; азид натрия.
Калибратор 1 (1,0 мл) Л Г в фосфатно-солевом буфере; БСА; 0,09% азид натрия.
Калибратор 2 (1,0 мл) Л Г в фосфатно-солевом буфере; БСА; 0,09% а:ищ натрия.
Конъюгат (23 мл) Мышиные моноклональные антитела к Л Г , меченные изолюминолом;
фосфатно-солевой буфер; БСА; М А КЗЗ; азид натрия.
10. Реагент для определения фолликулостимулирующего гормона (L IA IS O N FSH).
Магнитные частицы (2,3
мл)
Магнитные частицы, покрытые мышиными моноклональными
антителами к Ф С Г; фосфатно-солевой буфер; БСА; азид натрия.
Калибратор 1 (1,0 мл) Ф С Г в лошадиной сыворотке; азид натрия.
Калибратор 2 (1.0 мл) Ф С Г в лошадиной сыворотке; азид натрия.
Конъюгат (16 мл) Мьициные моноклональьи.) 1е антитела к Ф С Г. меченные
изолюминолом; фосфатно-солевой буфер; БСА; мышиные IgG; азид
нат 1зия.
--- стр. 16 ---
^<алибратор 2 (высокий, черный) (1 шт. по 1,0 мл): лиофилизированный рекомбинантный человеческий
Щ^рокальцитонин; БСА: фосфатный буфер.
Раствор для разведения калибраторов ( I шт. по 2,3 мл): человеческая сыворотка, азид натрия, инертный
краситель (желтый).
Условия хранения всех вышеозначенных кшшбраторов: 2 - 8°С выше нуля.
Растворы для рачведення представляют собой наборы, состояшне из стеклянных флаконов с
жидкими белковыми растворами. Объем флаконов индивидуачен для каждого типа контролей. Флаконы
с растворами для разведения упакованы в картошкую коробку.
80. Раствор для разведения проб на кальцитонин (L IA IS O N Calcitonin 11-Gen Specimen Diluent).
Раствор для разведения (4 шт. по 3 мл): человеческая сыворотка; буфер; П А В ; БСА; стабилизаторы; 0,2%
ProClin® 300.
81. Раствор для разведения проб на 1-84 паратиреоидный гормон (L IA IS O N 1-84 РТН Specimen Diluent).
Раствор для разведения (4 шт. по 3 мл): конская сыворотка; стабилизаторы; 0.2% ProClin® 300.
Условия хранения всех вышеозначенных растворов для разведения: 2 - 8°С выше нуля.
82. Набор реагентов для обслуживания анали:ттора (L IA IS O N Cleaning Kit).
Интегральный картридж L IA IS O N ® C L E A N (1 шт. на 10 процедур обслуживания)_______________
Раствор А (21 мл)
Раствор В (21 мл)
Раствор Контрад 2000 в деионизованной воде (100 мл/л)
Системная/промывочная жидкость L IA IS O N ® (100 мл/л) и азид
иат£ия (_0,9_г/л) в деионизованной воде.
Стеклянные флаконы L IA IS O N ® C L E A N (10 шт. по 3,5 мл): раствор гипохлорита натрия в деионизованной воде
(100 мл/л).
Пластиковые флаконы L IA IS O N ® PU M P (2 шт. по 85 мл): раствор детергента RBS 50 в деионизованной воде
(100 мл/л).
Интегральный картридж, стеклянные и пластиковые флаконы упакованы в единую картонную коробку.
Условия хранения набора для обслуживания: 15-30°С выше нуля.
83. Реагент для ежедневной проверки анализатора (L IA IS O N Light Check).
Стеклянные флаконы L IA IS O N ® Light Check (4 шт. иа 2 мл воды, добавляемой перед использованием):
лиофилизированный порошок, содержащий 0,01 М фосфатно-солевой буфер. pH 7.4; 0,1% БСА; тироксин,
меченный изолюмгшолом, с заданным значением R LU.
Условия хранения реагента для проверки; 2 - 8°С выше нуля.
84. Набор реагентов для запуска реакции (L IA IS O N Starter K it), в составе запускающий реактив 1 - 3 фл,
запускающий реактив 2 - 3 фл.
Пластиковые флаконы с :?апускающим реактивом 1 L IA IS O N ® Starter I (3 шт. по 230 мл): катализатор в 4%
растворе [ идроксида натрия.
Пластиковые флаконы с запускающим реактивом 2 L IA IS O N ® Starter 2 (3 шт. по 230 мл): 0,12% раствор
перекиси водорода.
Условия хранения реагентов для запуска: 15-30°С выше нуля.
85. Набор реагентов для запуска реакции (X L ) (L IA IS O N X L Stailer K it), в составе запускающий реагент 1 - 3 фл,
запускающий реагент 2 - 3 фл.
Пластиковые флаконы с запускающим реактивом I L IA IS O N ® ’ Starter 1 (3 шт, по 230 мл): катализатор в 4%
растворе гидроксида натрия.
Пластиковые флаконы с запускающим реактивом 2 L IA IS O N ® Starter 2 (3 шт. по 230 мл): 0,12% раствор
перекиси водорода.
16
--- стр. 17 ---
86. Промывочная/системная жидкость (L IA IS O N Wash/Systern Liquid).
6 пластиковых флаконов по 1 литру концентрата системной/промывочнон жидкости (10 х): фосфатный буфер,
азид натрия.
Условия хранения промывочной жидкости; 15-30°С выше нуля.
Реагенты обеспечивают требуемые показатели качества и эксплуатационные характеристики
работы в течение установленного срока годности, индивидy^ulьиoгo для каждой серии реагентов.
2.2 ПРИНЦИП МЕТОДА
В основе серологической диагностики инфекционных заболеваний метод прямой
иммунохемнлюминесценции с использованием парамагнитных частиц в качестве твердой фазы.
При определегши специфических аггтител анализируемая проба смешивается с суспензиями
парамагнитных частиц, покрытых антигенами возбудителя (обнаружение IgG к антигенам возбудителя
и оценка их авидности) или мышиными моноклонгшьными агггшелами к человеческим IgM
(обнаружение IgM к антигенам возбудителя), после инкубации несвязавшиеся молекулы удаляются в
цикле промывки. На последнем эгапе инкубации к реакционной смеси добавляется конъюгат антитела к
человеческим IgG (обнаружение IgG и оценка их авидности) или смесь антигенов возбудителя со
специфическими к ним антителами с хемилюмииесцентной меткой (гшинобутилэти;шзолюми1Юл).
При определении антигенов возбудителей анализируемая проба смешивается с суспензиями
парамагнитных частиц, пок])ьггых мышиными, овечьими или козьими антителами к соотвегствующим
антигенам, после инкубации несвязавшиеся молекулы удаляются в цикле промывки. На последнем
этапе инкубации к реакционной смеси добавляется конъюгат других специфических к антигенам
антител с хемилюминесцентной меткой (аминобутилэтилизолюминол). Инициация
хемилюмииесцентной реакции происходит перекисью водорода в шелочной среде, окисляющей
аминобутилэтилизолюминол до изолюминола, что, в свою очередь, приводит к испусканию квантов
света. Интенсивность ;поминесценции при д:шне волны 420 им, измеряемая фотоумножителем в
относительных единицах интенсивности, отражает концентрацию IgG, IgM или антигенов в пробе,
концентрация IgG используется также для последуюшего расчета авидности. Для проверки
достоверности определения каждого параметра используются одноименные контрольные сыворотки с
известным диапазоном значений.
3. АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
3.1. АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ РЕАГЕНТОВ
Измеряемый диапазон
LIAISON ®Т4 (311411)
Общий Г4
1. Назначение
Количественное определение общего тироксина (Т4) в человеческой сыворотке и плазме методом
хемилюминесцентного иммуноанализа (CLIA) с помощью анализатора LIAISON®.
Использовать только для "’in vitro” диагностики.
2. Введение
Щитовидная железа здоровых людей ежедневно секретирует около 80 рг тироксина (Т4) и 5-10 рг
трииодтиронина (ТЗ). В сыворотке более 99,9% гормонов щитовидной железы обратимо связаны с
белками-носителями, биологической активностью обладают только фракции свободных гормонов.
с л о в и я х р а н е н и я реагеитоь? д л я за п у с к а : 1 5 -3 0 ° С в ы ш е н у л я .
17
--- стр. 18 ---
количественное определение общего тироксина обычно проводят в случае наличия подозрений на
Ч|Ьболевания щнтовидной железы. В случае первичного заболевания HOpMajn^HaH или увеличенн^1я
щитовидная железа самостоятельно секретирует повышенное количество тиреоидных гормонов. При
этом могут наблюдаться следующие патологические состояния: г ипертиреоз с или без зоба; автономная
токсическая аденома; гипертиреоз, вызванный аденокарциномой нщтовидной железы, или гипертиреоз,
связанный с тироидитом.
Г'ипотиреозы сопровождаются недостаточным снабжением клеток тиреоидными гормонами.
Гипотиреозы можно разделить на первичные (развивающиеся в результате, например, струм-эктомии,
терапии радиоактивным иодом, приема высоких доз иода, серьезного дефицита иода) и вторичные
(патологии I ипофиза, например, деф1щит Т Т Г при полной или частичной недостаточности передней
доли гипофиза).
Определешю сывороточного тироксина полезно для дифференциации г ипо- и гипертиреоза при
эндокринной офтальмопатии, слабом зобе, автономной аденоме, рецидиве гипертиреоза и общего
мониторинга лечения все.ч типов нарушений функций щитовидной железы.
3. Принцип метода
Метод количесгвенного определения общего Т4 представляет собой конкурентный 1-ступенчатый
хемилюминесцентный иммуноанализ (CIJA). Поликлональные антитела к Т4 связаны с магнитными
микрочастицами, молекулы Т4 мечены производным изолюминола (конъюгат антигена с красителем).
Во время инкубации молекулы Т'4 присутствуюище в калибраторах, контролях и пробах, конкурируют с
Т4, меченным изолюминолом, за взаимодействие с твердой фазой. После инкубации не связавшиеся
молекулы удаляются во время цикла промывки. Затем к реакционной смеси добавляются реактивы для
активации, индуцирующие хемилюминесцентную реакцию. Интенсивность люминесценции,
измеряемая с помощью фотоумножителя в относительных единицах интенсивности, отражает
количество связанною с магнитными частицами коггьюгага Т4 с изолюминолом, которое, в свою
очередь, обратно пропорционально концентрации Т4 в калибраторах, контролях и пробах пациентов.
4. Состав набора
1. Картридж реактивов
Магнитные частицы (2,3 мл)
М а г н и т н ы е ч а с т и ц ы , п о к р ы т ы е п о л и к л о н а л ь н ы м и а н т и т е л а м и к т и ] Х ) к с и н у .
Ка/шбратор 1 (1 мл)
Человеческая сыворотка, 'Г4. 0,09% азид натрия. Концентрация 'Г'4 в калибраторе (цг/дл) определена с
помощью газовой хроматографии с последующей масс-спектрометрией.
Калибратор 2 (1 мл)
Человеческая сыворотка. Т4, 0,09% азид нагрня. Концентрация Т4 в калибраторе (цг/дл) определена с
помогцью газовой хроматографии с последующе!! масс-спектрометрией.
Конъюгат (23 мл)
Тироксин, меченный производным изолюминола (аминобутилэтилизолюминолом); фосфатно-солевой
буфер; БСА; азид натрия.
Количество определений
100
18