--- стр. 1 ---
«УТВЕРЖДАЮ»
ектор НПЦ «Эко-Сервис»
«Санкт-Петербургское Общество
твоис п yrarej/e й »
А.II. Стрелков
февраля 2019 г.
ИНСТРУКЦИЯ
по применению набора реагентов для определения содержания
холестерина в сыворотке и плазме крови
(КлнннТест-Холестерин)
ТУ 21.20.23.110-032-27511906-2017
Назначение
Набор реагентов ЮтиниТест-Холестерин предназначен для количественного определения содер
жания холестерина ферментативным фотометрическим методом в сыворотке и плазме крови человека
без ограничения по популяционным и демографическим группам при нарушениях липидного обмена в
клинико-диагностических и биохимических лабораториях и научно-исследовательской практике.
Область применения - клиническая лабораторная диагностика, научные исследования.
Показания к применению: нарушения липидного обмена. Противопоказаний к применению нет.
Потенциальные потребители: специалисты клинико-диагностических лабораторий ЛПУ; научные
сотрудники медицинских НИИ и вузов. Набор должен использоваться квалифицированным персоналом
в области клинической лабораторной диагностики.
Изделие не подлежит ремонту и техническому обслуживанию.
Принцип метода
Метод основан на гидролизе эфиров холестерина холестеринэстеразой до свободного холестерина.
Образовавшийся и имеющийся в пробе холестерин окисляется кислородом воздуха в присутствии холе-
стериноксидазы с образованием эквимолярного количества перекиси водорода. Под действием перокси-
дазы перекись водорода окисляет 4-аминоантипирин и натриевую соль п-фенолсульфокислоты с обра
зованием окрашенного соединения, интенсивность окраски которого пропорциональна содержанию хо
лестерина и определяется фотометрически при длине волны 500 (490-540) нм.
Состав набора
Реагент 1 (Р1): калий фосфорнокислый однозамещенный (ГОСТ 4198-75). 0.1 моль/л (1,37%) ; хо-
лестеринэстераза, 400 ед/л (Sorachim, Code СОЕ-311); холестериноксидаза, 250 ед/л, (Sorachim. Code
COO-311); пероксидаза, 1250 ед/л (Sorachim, Франция, Code РЕО-312); 4-амииоантипирин, 0.001 моль/л
(0.2%) (ТУ 6-09-3948-75), натриевая соль п-фенолсульфокислоты, 0,008 моль/л (0.16%) (TCI, Япония,
кат.№ S 0824); натрия холат, 0,002 моль/л (0,09%), (Sorachim, Франция, Code CHL-510C): натрия азид, 1
г/л (0,1%), (Sorachim, Франция, Code № SAZ-167C); Тритон Х-100, 2 г/л (0,2%) (Рапгеас Quimica SA,
cat.№l42314/1116), глицерин, 100 г/л (10%) (ГОСТ 6259-75).
Калибратор: холестерин 5,17 ммоль/л (0,2%) (Рапгеас Quimica SA, cal.№371274). Тритон Х-100,
100 г/л (10%) (Рапгеас Quimica SA, cat.№1423 14/1116), натрия азид, 1 г/л (0.1%), (Sorachim, Франция,
Code№SAZ-167C).
Метрологическая прослеживаемость концентрации холестерина в калибраторе обеспечивается
применением Стандартного образца молярной концентрации холестерина в крови ГСО 9913-2011.
Не предусмотрено использование набора в комбинации с принадлежностями, другими медицин
скими изделиями или изделиями, не являющимися медицинскими.
Набор рассчитан на проведение от 50 до 1000 определений содержания холестерина при расходе
1 мл реагента 1 на одно определение.
Набор реагентов выпускается в следующих вариантах исполнения:
Фасовка 1. Р1 1x50 мл + калибратор 1x3 мл
Фасовка 2. Р1 1 х 100 мл + кал ибратор 1 хЗ мл
Фасовка 3. Р1 2x100 мл + калибратор 1x3 мл
Фасовка 4. Р1 2x200 мл + калибратор 1x3 мл
Фасовка 5. Р1 4x100 мл + калибратор 1x3 мл
Фасовка 6. Р1 5x100 мл + калибратор 1x3 мл
Фасовка 7. Р1 6x100 мл + калибратор 2x3 мл
--- стр. 2 ---
Фасовка 8. PI 1x250 мл + калибратор 1x3 мл
Фасовка 9. Р1 2x250 мл + калибратор 1x3 мл
Фасовка 10. Р1 4x250 мл + калибратор 1x3 мл
Фасовка 11. Р1 1x1000 мл + калибратор 1x3 мл
Аналитическ'ие характеристики набора
Чувствительность - не более 0,5 ммоль/л.
Линейность. Набор обеспечивает линейность при определении содержания холестерина в диапа
зоне от 1 ммоль/л до 25,8 ммоль/л с отклонением от «линейности» не более 5%.
Коэффициент вариации - не более 5%.
Контроль качества
Качество набора может проверяться по отечественным или зарубежным контрольным сыворот
кам. аттестованным данным методом.
Нормальные значения
Содержание холестерина в норме составляет; в сыворотке и плазме крови - 3,3-5,2 ммоль/л. Реко
мендуется в каждой лаборатории уточнить диапазон значений нормальных величин для обследуемого
контингента.
Интерференция
Аскорбиновая кислота до 0,005 г/л, билирубин до 0,02 г/л, гемоглобин до 0,2 г/л не влияют на точ
ность анализа.
Меры предосторожности при работе с набором
Потенциальный риск применения набора - класс 2а (Приказ Минздрава РФ от 06.06.2012 X» 4н).
В реагенте 1 и калибраторе содержится токсичный компонент - азид натрия. При работе с ними следует со
блюдать осторожность и не допускать попадания на кожу и слизистые; при попадании немедленно промыть пора
женное место большим количеством проточной воды. При проглатывании следует выпить 0,5 л теплой воды и вы
звать рвоту.
Меры предосторожности при работе с набором - соблюдение «Правил устройства, техники безопасности,
производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отде
лениях, отделах) санитарно-эпидемиологических учреждений системы Министерства здравоохранения СССР»
(Москва, 1981 г.). Во избежание возможного инфицирования при работе с образцами крови необходимо надевать
одноразовые резиновые или пластиковые перчатки, так как образцы крови человека следует рассматривать как по
тенциально инфицированные, способные длительное время сохранять и передавать ВИЧ, вирус гепатита или лю
бой другой возбудитель инфекции.
Оборудование и материалы
Биохимический анализатор (фотометр) с наливной или проточной кюветой, длина волны 500 (490-
540) нм; ручной, полуавтоматический или автоматический;
дозаторы, позволяющие отбирать объемы жидкостей от 0,01 мл до 1 мл;
пробирки вместимостью 5-10 мл;
термостат;
секундомер;
перчатки резиновые или пластиковые.
Анализируемые образцы
Негемолизированная сыворотка или плазма крови. В качестве антикоагулянтов для получения
плазмы следует использовать ЭДТУК или гепарин; не использовать оксалат, фторид, цитрат.
Сыворотку или плазму крови следует отделить от форменных элементов крови не позднее, чем
через 2 часа после забора крови. Стабильна 5-7 дней при 4“С, 3 мес. при -20‘’С. .много лет при -70"С. (Тиц
Н.У. / Энциклопедия клинических лабораторных тестов - М.: Издательство «Лабинформ», 1997.)
Подготовка реагентов для анализа
Реагент 1 и калибратор готовы к использованию.
Проведение анализа
Компоненты реакционной смеси отбирать в количествах, указанных в таблице.
Внести Опытная проба Калибровочная проба Холостая проба
Образец 0,01 мл - -
Калнбратор - 0,01 мл -
Вода дистиллированная - - 0,01
Реагент 1 1,0 мл 1.0 мл 1.0 мл
--- стр. 3 ---
Осторожно перемешать и инкубировать при комнатной температуре (18-25°С) в течение 20 минут
или при температуре 37°С в течение 10 минут. Измерить оптическую плотность опытной пробы
(Бобр) и калибровочной пробы (Екал.) против ХОЛОСТОЙ пробы в кювете с длиной оптического пути
1 о мм при длине волны 500 (490-540) нм. Окраска стабильна в течение 30 минут.________________
Объёмы компонентов реакционной смеси могут быть изменены пропорционально, с сохранением
соотношения объёмов Реагента 1 и образца 100 : 1.
Расчёт
Содержание холестерина в исследуемой пробе сыворотки или плазмы крови рассчитать по форму
ле:
Еобр.
5,17,
где: С - концентрация холестерина в исследуемой пробе, ммоль/л,
5,17 - концентрация холестерина в калибраторе, ммОль/л.
Условия хранения, транспортирования и эксплуатации набора
Набор следует хранить при температуре 2-8°С в холодильнике или холодильной камере, обеспечи
вающих указанную температуру, в упаковке предприятия-изготовителя в течение всего срока годности.
Допускается хранение наборов при температуре до +25°С не более 5 суток.
Транспортирование должно производиться с использованием крытого грузового автомобильного,
авиационного, железнодорожного, водного транспорта в соответствии с требованиями и правилами,
принятыми на данном виде транспорта, при температуре от -30 до +8°С. Допускается транспортирова
ние наборов при температуре до +25°С не более 5 суток. Допускается однократное замораживание.
Реагент 1 после вскрытия флакона может храниться при температуре 2-8°С в темном месте в холо
дильнике или холодильной камере, обеспечиваюших указанную температуру, в течение всего срока год
ности набора в герметично закрытом флаконе.
Калибратор после вскрытия флакона может храниться при температуре 2-8°С в холодильнике или
холодильной камере, обеспечивающих указанную температуру, в течение 3 месяцев в герметично за
крытом флаконе.
Для получения надежных результатов необходимо строгое соблюдение инструкции по примене
нию набора.
Уничтожение и утилизация
Уничтожение и утилизацию наборов с истекшим сроком годности, а также использованных набо
ров производить по СанПиН 2.1.7.2790-10, класс отходов А.
Утилизацию реагентов и рабочих растворов производить стократным разбавлением проточной во
допроводной водой и сливом через промышленную канализацию.
Остаток упаковок вывозится как производственный или бытовой мусор.
Гарантии изготовителя
Предприятие-изготовитель гарантирует соответствие набора требованиям технических условий
при соблюдении условий хранения, транспортирования и применения.
Срок годности набора 12 месяцев со дня приемки ОТК предприятия-изготовителя.
Предприятие-изготовитель гарантирует безопасность медицинского изделия, отсутствие недопу
стимого риска причинения вреда жизни, здоровью человека и окружающей среде при использовании
набора реагентов по назначению в условиях, предусмотренных производителем.
По вопросам, касающимся качества набора КлиниТест-Холестерин следует обращаться в РОО
«Санкт-Петербургское Общество Естествоиспытателей» по адресу: 194156 Санкт-Петербург,
пр.Энгельса, 27, лит Т, а/я 2, тел. (812) 702-10-43. Юр. адрес: 199(Ц34 Санкт-Петербург, Университетская
наб., 7/9; тел./факс (812) 702-10-44, тел. моб. (921) 77-525-88.
И.о. начальника производственного отдела
НПЦ «Эко-Сервис» РОО «СПбОЕ»
«СОГЛАСОВАНО»
Генеральный директор
ООО «ВЫМПЕЛ-МЕДЦЕНТР»
.М.Крылова