"Набор реагентов для выявления ДНК Corynebacterium diphtheriae с дифференциацией токсигенных и нетоксигенных штаммов методом ПЦР в режиме реального времени (C. diphtheriae Tox)" по ТУ 21.20.23-064-46482062-2021 — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 1 ---
t:
7ДКК-ТЕХН0Л0П1Я
МАКЕТ ПАСПОРТА!!!
ООО «ДНК-Технология ТС»
Паспорт качества № ХХХХХ
Набор реагентов для выявления ДНК Corynebacterium diphtheriae
с дифференциацией токсигенных и нетоксигенных штаммов
методом ПЦР в режиме реального времен
(С. diphtheriae Тох)
Фасовка:
Серия:
Дата изготовления:
Годен до:
S, стрипы
XXXXXS-2M
хххх-хх-хх
до ХХХХ-ХХ-ХХ’
Результат контроля
I. Проверка комплектности, упаковки и маркировки - соответствует
требованиям ТУ 21.20.23-064-46482062-2021.
Компонент Ко.1ичество Характеристика и
норма
Условия
хоанения Результат
Смесь для
амплификации,
запечатанная
парафином
6 стринов
по 8 пробирок
Прозрачная бесцветная
жидкость под
воскообразным белым
слоем
от 2 °С до 8 ®С Соответствует
Раствор
Таа-полимеоазы I пробирка Прозрачная бесцветная
жидкость от 2 “С до 8 “С Соответствует
Минеральное масло I пробирка
Прозрачная бесцветная
вязкая маатянистая
жидкость
от 2 ®С до 8 ®С Соответствует
Положительный
контрольный образец I пробирка Прозрачная бесцветная
жидкость от 2 ®С до 8 ®С Соответствует
Крышки для стринов 6 шт. - от 2 °С до 8 ®С Соответствует
3. Проверка функциональных показателей
Наименование показателя Характеристика и норма Результат
Предел обнаружения:
5 копий ДНК на амплификационную
пробирку
Для лабораторною контрольного
образца - Положительный результат
амплификации специфичных
продуктов по каналам детекции Fam,
Су5
Соответствует
Специфичность
Дня лабораторншх) контрольною
образца - Положительный результат
амплификации специфичных
продуктов по каналам детекции Fam,
Су5
Соответствует
Для отрицательного контрольного
образца - Отрицательный результат
амплификации специфичных продуктов
по каналам детекции Fam, Су5 и
положительный результат
амплификации внутреннего контроля по
каналу детекции Hex
Ус-ювия трянспортировяния:
Транспортирование набора реагентов осуществляют в тсрмоконтейнер|0£ всеми
вилами крытого транспорта при температуре, соответсгвуюшей ytyipw ^ хранения шакп^ентов
набора, в течение всего срока юаности или в термоконгсйнерах с хлморл'ементщ^ im&
внутри термоконтейнера от 2®С до 25 ®С не более 5 суток. | •-! |
Заключение ОТК: соответствует тр^ваниям ТУ 21.20.23-064-4648206^^021 у 'У /
Дата выдачи паспорта: ХХХХ-ХХ-ХХ
*Срок годности В соответствии с требованиями ТУ 21.20.23-064-46482062-2021
копия ВЕРНА
ГЕНЕРАЛЬНЫЙ ДИРЕКТОР
Оооанк-ТЕХНОЛЯ)
САМАРИН с
подпись
--- стр. 2 ---
4НК-ТЕХН0Л0ГИЯ
МАКЕТ ПАСПОРТА!!!
ООО «ДНК-Технология ТС»
Паспорт качества № ХХХХХ
Набор реагентов для выявления ДНК Corynebacterium diphtheriae
с дифференциацией токсигенных и нетоксигенных штаммов
методом ПЦР в режиме реального времен
(С. diphtheriae Тох)
Фасовка:
Серия:
Дата изготовления:
Годен до:
S, пробирки
XXXXXS-2M
хххх-хх-хх
до хххх-хх-хх’
Результат контроля
1. Проверка комплектности, упаковки и маркировки - соответствует
требованиям ТУ 21.20.23-064-46482062-2021.
Компонент Количество Характеристика и
норма
УС.10ВИЯ
ховнення Результат
Смесь для
ам1и1ификаини,
запечатанная
парафином
48 пробирок
Прозрачная бесцветная
жидкость под
воскообразным белым
слоем
от 2 X до 8 “С Соответствует
Раствор
Таа-полимеоаэы 1 пробирка Прозрачная бесцветная
жидкость от 2 до 8 ®С Соответствует
Минеральное масло 1 пробирка
Прозрачная бесцветная
вязкая маслянистая
жидкость
от 2 °С до 8 ®С Соответствует
Положительный
контрольный образец 1 пробирка Прозрачная бесцветная
жидкость от 2 ®С до 8 ®С Соответствует
3. Проверка функциональных показателей
Наименование показателя Характеристика и норма Результат
Предел обнаружения:
5 копий ДНК па амплификациопную
пробирку
Для лабораторною контрольною
образца • Положительный результат
амплификации специфичных продуктов
по каналам детекции Fam. Cv5
Соогвстсгвует
Специфичность
Для лабораторною контрольного
образца - Положительный результат
амшшфикацни специфичных продуктов
по каналам детекции Fam. Cv5
Соответствует
Дня отрицательного контрольною
образца - 0|рицательный результат
амплификации специфичных продуктов
по каналам детекции Fam, Су5 и
положительный результат амплификации
внутреннего контроля по каналу детекции
Hex
УС.1 0ВИЯ транспортирования:
Транспортирование набора реагентов осуществляют в термоконтейнерах с хладоэлементами всеми
видами крытою транспорта при темнерапуре, соотвсгствуюшсй усдйвЯям xBBmi^ компонентов
набора, в течение всею срока годности или в тер.чоконтейиерах c^Ht^VlbuemiCp температуре
внутри термоконтейнера от 2°С до 25 *С нс более 5 суток. ' - - - "
Зак. 1н>чение ОТК: соответствует требовання.ч ТУ 21.20.23-064Йб4^|
Дата выдачи паспорта: ХХХХ-ХХ-ХХ j ^
*Срок ГОДНОСТИ В соответствии с требованиями ТУ 21.20.23-064-46482062-2021
КОПИЯ ВЕРНА
подпись
«ДНК-Т«нол№
Jl)^J\?rechnologv rS»
LLC
с
--- стр. 3 ---
МАКЕТ ПАСПОРТА!!!
^ДИКТЕХНОЛОГИЯ ООО «ДНК-Технология ТС»
Паспорт качества ХХХХХ
Набор реагентов для выявления ДНК Corynebacterium diphtheriae
с дифференциацией токсигенных и нетоксигенных штаммов
методом ПЦР в режиме реального времен
(С. diphtheriae Тох)
Фасовка:
Серия:
Дата изготовления:
Годен до:
и
XXXXXS-2M
хххх-хх-хх
до хххх-хх-хх’
Результат контроля
1. проверка комплектности, упаковки и маркировки - соответствует
требованиям ТУ 21.20.23-064-46482062-2021.
Компонент Количество Характеристика и
ноома
Ус-ловия
хранения Результат
Смесь для
амплификации I пробирка
Прозрачная жидкость
от бесцветного до
розового цвета
от 2 ®С до 8 °С Соответствует
Полимераза
ТехноТао МАХ 1 пробирка Прозрачная бесцветная
вязкая жидкость
от минус 18°С
до минус 22°С Соответствует
ПЦР-буфер 1 пробирка Прозрачная бесцветная
жидкость от 2 ®С до 8 °С Соответствует
Положительный
контрольный образец 1 пробирка Прозрачная бесцветная
жидкость от 2 “С до 8 ®С Соответствует
3. Проверка функциональных показателей
Наименование показателя Характеристика и норма Результат
Предел обнаружения:
5 копий ДНК на амплнфнкационную
пробирку
Для лабораторного контрольного
образца • Положительный результат
амплификации специфичных
продуктов по каналам детекции Fam,
Cv5
Соответствует
Специфичность
Для лабораторного контрольного
образца - Положительный результат
амплификации специфичных
продуктов по каналам детекции Fam,
Су5
Соответствует
Для отрицательного ко>ггрольного
образца - Отрицательный результат
амплификации специфичных
продуктов по каналам детекции Fam,
Су5 и положительный результат
амплификации внутреннего контроля
по каналу детекции Hex
Условия транспортирования:
Транспортирование набора реагентов осуществляют в термоконтейнер||^ сг
вилами крытого транспорта при температуре, соответствующей yi^osii^'' хранения
набора, в течение всего срока годности или в термоконтейнерах с х;^о^ементам:
внутри термоконтейнера от 2“С до 25 °С не более 5 суток. { '
Зак. 1ючение ОТК: соответствует требованиям ТУ 21.20.23-064-4648206>202
Дата выдачи naciiopia: ХХХХ-ХХ-ХХ s' л
*Срок ГОДНОСТИ В соответствии с требованиями ТУ 21.20.23-064-46482062-2021
копия ВЕРНА
ГЕНЕРАЛЬНЫЙ ДИРЕКТОР
000* ДНК-Т ехнолог
САМАРИН C.^^EjoBE,
подпись
--- стр. 4 ---
Прошито, пронумеровано и
скреплено печатью ^
( ) листа (ев)
специалист по документации
В.Н.
г XViWAA Д .
--- стр. 5 ---
МАКЕТ ПАСПОРТА!!!
НК-ТЕХНОЛОГИЯ ООО «НПО ДНК-Технология»
Паспорт качества № ХХХХХ
Набор реагентов для выявления ДНК Corynebacterium diphtheriae
с дифференциацией токсигенных и нетоксигенных штаммов
методом ПЦР в режиме реального времен
(С. diphtheriae Тох)
Фасовка:
Серия:
Дата изготовления:
Годен до:
S, стрипы
XXXXXS-1M
хххх-хх-хх
хххх-хх-хх*
Результат контроля
1. Проверка комплектности, упаковки и маркировки - соответствует
требованиям ТУ 21.20.23-064-46482062-2021.
Компонент Количество Характеристика и
норма
Условия
хранения Результат
Смесь для
амплификации,
запечатанная
парафином
6 стринов
по 8 пробирок
Прозрачная бесцветная
жидкость под
воскообразным белым
слоем
от 2 ®С до 8 ®С Соответствует
Раствор
Таа-полимеразы 1 пробирка Прозрачная бесцветная
жидкость от 2 °С до 8 ®С Соответствует
Минеральное масло 1 пробирка
Прозрачная бесцветная
вязкая маслянистая
жидкость
от 2 ®С до 8 '’С Соответствует
Положительный
контрольный образец 1 пробирка Прозрачная бесцветная
жидкость от 2 ®С до 8 °С Соответствует
Крыщки для стринов 6 шт. - от 2 ®С до 8 °С Соответствует
3. Проверка функциональных показателей
Наименование показателя Харакгсристика и корма Результат
Предел обнаружения;
5 копий ДНК на амплификационную
пробирку
Для лабораторного контрольного
образца - Положительный результат
амплификации специфичных
продуктов по каналам детекции Fam,
Су5
Соответствует
Специфичность
Для лабораторного контрольного
образца - Положительный результат
амплификации специфичных
продуктов по каналам детекции Fam,
Су5
СоответствуетДля отрицательного контрольного
образца - Отрштательный результат
амплификации специфичных
продуктов по каналам детекции Fam,
Су5 и положительный результат
амплификации внутреннего контроля
по каналу детекции Hex
Ус-ювия транспортирования:
Транспортирование набора реагентов осуществляют в термоконтейнерах
вида.ми крытого транспорта при температуре, соответствующей уело,
)«абора, в течение всего срока годности или в термоконтейнерах с хла,
внутри термоконтейнера от 2°С до 25 °С не более 5 суток.
Зак. 1юченне ОТК: соответствует требованиям ТУ 21.20.23-064-464820i
Дата выдачи паспорта: ХХХХ-ХХ-ХХ
•Срок годности в соответствии с требованиями ТУ 21.20.23-064-46482062-2021
КОПИЯ ВЕРИЛ
S s ' S "
--- стр. 6 ---
МАКЕТ ПАСПОРТА!!!
•ТЕХНОЛОГИЯ ООО «НПО ДНК-Технология»
Паспорт качества № ХХХХХ
Табор реагентов для выявления ДНК Corynebacterium diphtheriae
с дифференциацией токсигенных и нетоксигенных штаммов
методом ПЦР в режиме реального времен
(С. diphtheriae Тох)
Фасовка:
Серия:
Дата изготовления:
Годен до:
S, пробирки
XXXXXS-1M
хххх-хх-хх
хххх-хх-хх*
Результат контроля
1. Проверка комплектности, упаковки и маркировки -
требованиям ТУ 21.20.23-064^6482062-2021.
соответствует
Компонент Количество Характеристика и
норма
Условия
хранения Результат
Смесь для
амплификации,
запечатанная
парафином
48 пробирок
Прозрачная бесцветная
жидкость пол
воскообразным белым
слоем
от 2 °С до 8 °С Соответствует
Раствор
Тао-нолимеразы 1 пробирка Прозрачная бесцветная
жидкость от 2 ®С до 8 °С Соответствует
Минеральное масло I пробирка
Прозрачная бесцветная
вязкая маслянистая
жидкость
от 2 ®С до 8 °С Соответствует
Положительный
контрольный образец I пробирка Прозрачная бесцветная
жидкость от 2 ®С до 8 ®С Соответствует
3. Проверка функциональных показателей
Наименование показателя Характеристика и норма Результат
Предел обнаружения:
5 копий ДНК на амилификациокную
пробирку
Для лабораторного контрольного
образца - Положительный результат
амплификации специфичных
продуктов по каналам детекции Fam,
Су5
Соответствует
Специфичность
Для лабораторного контрольного
образца - Положительный результат
амплификации специфичных
продуктов по каналам детекции Fam,
Су5
СоответствуетДля отрицательного контрольного
образца - Отрицательный результат
амплификации специфичных
продуктов по каналам детекции Fam,
Су5 и положительный результат
амплификации внутреннего
конпроля по каналу детекции Hex
Условия транспортирования:
Транспортирование набора реагентов осуществляют в термоконтейнерах
видами крыюго транспорта при температуре, соответствующей условк
набора, в течение всего срока годноста или в термоконтейнерах с хладоэ.
внутри термоконтейнера от 2®С до 25 ®С не более 5 суток.
Зак. 1ючение ОТК: соответствует требованиям ТУ 21.20.23-064-46482062-20
Дата выдачи паспорта: ХХХХ-ХХ-ХХ
•Срок годности в соотвегсгвии с 1ребованиями ТУ 21.20.23-064-46482062-2021
КОПИЯ ВЕРН.4
ГЕНЕРДЛЬНЫЙ ДИРЕКТОР
ООС<<НПО ЛНК П т Т о гт
в.ю.
--- стр. 7 ---
МАКЕТ ПАСПОРТА!!!
/ТЕХНОЛОПМ ООО «НПО ДНК-Технология»
/ Паспорт качества № ХХХХХ
набор реагентов для выявления ДНК Corynebacterium diphtheriae
с дифференциацией токсигенных и нетоксигенных штаммов
методом ПЦР в режиме реального времен
(С. diphtheriae Тох)
Фасовка:
Серия:
Дата изготовления:
Годен до:
и
XXXXXS-1M
хххх-хх-хх
хххх-хх-хх
Результат контроля
1. Проверка комплектности, упаковки и маркировки - соответствует
требованиям ТУ 21.20.23-064-46482062-2021.
Компонент Количество Характеристика и
норма
УС.10ВИЯ
хранения Результат
Смесь для
амплификации 1 пробирка
Прозрачная жидкость
от бесцветного до
розового цвета
от 2 ®С до 8 ®С Соответствуег
Полимераза
ТехноТаа МАХ 1 пробирка Прозрачная бесцветная
вязкая жидкость
от минус 18°С
до МИНУС 22“С Соответствует
ПЦР-буфср 1 пробирка Прозрачная бесцветная
жидкость от 2 °С до 8 °С Соответствует
Положительный
контрольный образец 1 пробирка Прозрачная бесцветная
жидкость от 2 ®С до 8 ®С Соответствует
3. Проверка функциональных показателей
Наименование показателя Характеристика и норма Результат
Предел обнаружения:
5 копий ДНК на амплификационную
пробирку
Для лабораторною контрольного
образца • Положительный результат
амплификации специфичных продуктов
по каналам детекции Fam. Cv5
Соответствует
Специфичность
Для лабораторного контрольного
образца - Положительный результат
амплификации специфичных продуктов
по каналам детекции Fam. Cv5
Соответствует
Для отрицательного контрольного
образца - Отрицательный результат
амплификации специфичных продуктов
по каналам дстскиии Fam, Су5 и
положительный результат
а.чплификации внутреннего контроля
по каналу детекции Hex
Условия транспортирования:
Транспортирование набора peai-ентов осуществляют в термоконтсйН'
видами крытого гранспорта при температуре, соотвегствующей
набора, в течение всего срока годности или в термоконтейнерах с
внутри термоконтейнера от 2°С до 25 °С нс более 5 суток.
Заключение ОТК: соответствуег требованиям ТУ 21.20.23-064-
Дата выдачи паспорта: ХХХХ-ХХ-ХХ
ементами всеми
компонентов
мпературе
•Срок годности в соответствии с требованиями ТУ 21.20.23-064-46482062-2021
--- стр. 8 ---
Прошито, пронумеровано и
скреплено печатью ^
( /Уг^'г-сс^ _J листа (ой)-
--- стр. 9 ---
^ ДНК-ТЕХНОЛОГИЯ ООО «ДНК-Технология ТС»
Паспорт качества
Лабораторный контрольный образец для набора реагентов для выявления ДНК
Corynebacterium diphtheriae с дифференциацией токсигенных и нетоксигенных
штаммов методом ПЦР в режиме реального времен
(С. diphtheriae Тох)
Серия:
Дата изготовления:
Срок годности:
Условия хранения:
G1907
2021-07-19
до 2022-07-19
от 2 до 8
Результат контроля
Наименование ЛКО Концентрация
ДНК, копий/мл
Характеристика и
_____норма_____
Фактические
значения Результат
С. diphtheriae Тох 10^
Положительный
результат
амплификации
специфичных
продуктов по
каналам детекции
Fam, Су5
Положительный
результат
амплификации
специфичных
продуктов по
каналам
детекции Fam,
Су5
Соответствует
Заключение: соответствует требованиям регламента №16
Дата выдачи паспорта: 2021-07-19
Начальник ОТК: Скоркина Ю.А.
КОГ'Г: B2FEA
ГЕНЕРАЛЬНЫЙ ДИРЕКТОР
000" ДНК-ТЕХКОЛОШ^ТС»
САМ АРИН_.С.А.
--- стр. 10 ---
Условия транспортирования, хранения и эксплуатации
Транспортирование набора реагентов осуществляют в термоконтейнерах с хладоэлементами всеми видами
крытого транспорта при температуре внутри контейнеров, соответствующей условиям хранения компонентов,
входящих в состав набора реагентов.
Допускается транспортирование в термоконтейнерах с хладоэлементами всеми видами крытого транспорта
при температуре от 2 *С до 25 °С внутри контейнера не более 5 суток.
Все компоненты набора реагентов, за исключением полимеразы ТехноТад МАХ, следует хранить в
холодильнике или холодильной камере при температуре от 2 ®С до 8 ®С в течение всего срока годности.
Полимеразу ТехноТад МАХ следует хранить в морозильной камере при температуре от минус 18 ®С до минус
22 в течение всего срока годности набора реагентов.
Смесь для амплификации, запечатанную парафином, следует хранить в холодильнике или холодильной
камере при температуре от 2 до 8 в защищённом от света месте в течение всего срока годности набора
реагентов.
Срок годности набора реагентов - 12 месяцев при соблюдении всех условий транспортирования, хранения и
эксплуатации.
По вопросам, касающимся качества набора реагентов С. diphtheriae Тох, следует обращаться в службу
клиентской поддержки.
Служба клиентской поддержки;
8-800-200-75-15 (для России, звонок бесплатный),
+7 (495) 640-16-93 (для стран СНГ и зарубежья, звонок платный).
E-mail: hotline@dna-technology.ru, www.dna-technology.ru
Символы, используемые при маркировке набора реагентов
А
REF
Медицинское изделие
для диагностики in
vitro
IhI f] Номер по каталогу [lo t]
Код партии
(серии)
1 Предел температуры Дата изготовления Нестерильно
Использовать до т
Обратитесь к
инструкции по
применению
Содержимого
достаточно для
проведения п
тестов
Не допускать
воздействия
солнечного света
еЛ Изготовитель
КОПИЯ ВЕРНА
ГЕНЕРАЛЬНЫЙ
000«ДНК-ТЕХ
САМАРИН
подпись
ДНК-ТЕХНОЛОГИЯ
Служба клиентской поддержки:
8-800-200-75-15 (для России, звонок бесплатный),
+7 (495) 640-16-93 (для стран СНГ и зарубежья, звонок
платный)
E-mail; hotllne@dna-technology.ru,
www.dna-technology.ru
Регистрационное удостоверение
№ РЗН
В данном вкладыше приведена информация для набора реагентов С. diphtheriae Тох в фасовке S.
Перед началом работы изучите инструкцию.
Набор реагентов
для выявления ДНК Corynebacterium diphtheriae
с дифференциацией токсигенных и нетоксигенных
штаммов методом ПЦР в режиме реального времени
С- diphtheriae Тох
R1-P445-23/4 (Фасовка S, пробирки)
R1-P445-S3/4 (Фасовка S, стрипы)
Информация о наборе реагентов
Назначение:
Набор реагентов предназначен для выявления ДНК и дифференциации токсигенных и нетоксигенных штаммов
С. diphtheriae в биологическом материале человека (мазки/соскобы со слизистой оболочки носо- и ротоглотки,
мазки с пораженных участков кожи) и бактериальных культурах из этого биоматериала методом полимеразной
цепной реакции в режиме реального времени.
Выделение ДНК:
Рекомендуются наборы/комплекты реагентов для выделения НК ПРОБА-НК, ПРОБА-ГС, ПРОБА-МЧ-РАПИД,
ПРОБА-ОПТИМА
Специализированное оборудование:
Амплификаторы детектирующие «ДTлaйт^», «ДТпрайм»^ или ДТ-96 (ООО «НПО ДНК-Технология»).
Время проведения анализа (не включая пробоподготовку): от 1,5 часов.
Количество исследуемых образцов: Набор реагентов предназначен для однократного применения и
рассчитан на 48 определений, что соответствует при одновременном исследовании 46 неизвестным образцам,
отрицательному контрольному образцу и положительному контрольному образцу.
Состав набора реагентов:
Наименование
компонентов Внешний вид Количество
пробирок
Номинальный
объём компонента
Смесь для
амплификации,
запечатанная парафином
Прозрачная бесцветная
жидкость под воскообразным
белым слоем
6 стрипов
по 8 пробирок или
48 пробирок
по 20 мкл
Раствор Тад-полимеразы Прозрачная бесцветная
жидкость 1 пробирка 500 мкл
Минеральное масло Прозрачная бесцветная
вязкая маслянистая жидкость 1 пробирка 1,0 мл
Положительный
контрольный образец*
Прозрачная бесцветная
жидкость 1 пробирка 130 мкл
Крышки для стрипов^ 6 шт.
Fam Hex Rox Су5 Су5.5
С. diphtheriae (tox+) ВК С diphtheriae -
‘ - только модели 4S1; 4S2; 5S1; 5S2; 6S1; 6S2.
2 - только модели 4М1; 4МЗ; 4М6; 5М1; 5МЗ; 5М6; 6М1; 6МЗ; 6М6.
^ - входят в состав набора реагентов при расфасовке смеси для амплификации в стрипы.
--- стр. 11 ---
Проведение анализа
1 Выделение ДНК
Выделение ДНК из исследуемого материала проводят в соответствии с инструкцией по применению
используемого набора/комплекта реагентов.
Для выделения ДНК рекомендуется использовать «Комплект реагентов для выделения нуклеиновых кислот
(ПРОБА-НК/ПРОБА-НК-ПЛЮС) по ТУ 9398-035-46482062-2009» в форме комплектации: комплект ПРОБА-НК
(ООО «НПО ДНК-Технология», Россия, РУ № ФСР 2010/08867); Комплект реагентов для выделения ДНК по ТУ
9398-037-46482062-2009 в следующих формах комплектации: ПРОБА-ГС (ООО «НПО ДНК-Технология»,
Россия, РУ N? ФСР 2010/08696), Набор реагентов для выделения нуклеиновых кислот (ПРОБА-МЧ) в
следующей комплектации: ПРОБА-МЧ-РАПИД (ООО «ДНК-Технология ТС», Россия, РУ № РЗН 2017/5753),
Набор реагентов для выделения ДНК человека, бактерий, вирусов и грибов из биологического материала
человека и культур микроорганизмов (ПРОБА-ОПТИМА) (ООО «ДНК-Технология ТС», Россия, РУ № РЗН
2022/17496).
ВНИМАНИЕ! Одновременно с выделением ДНК из биологического материала необходимо подготовить
отрицательный контрольный образец и провести его через все этапы пробоподготовки. В качестве
отрицательного контрольного образца рекомендуется использовать физиологический раствор или
отрицательный контрольный образец, входящий в состав набора/комплекта реагентов для выделения
нуклеиновых кислот в объёме, указанном в инструкции по применению соответствующего набора/комплекта
реагентов.
2 Подготовка и проведение полимеразной цепной реакции
ВНИМАНИЕ! При проведении всех последующих действий следует избегать воздействия пряных солнечных
лучей на пробирки со смесью для амплификации.
ВНИМАНИЕ! При использовании набора реагентов в варианте исполнения «Фасовка S, стрипы», следует
строго соблюдать комплектность стрипов и крышек к ним. Не использовать крышки к стрипам из других
наборов реагентов!
2.1 Промаркируйте необходимое количество пробирок со смесью для амплификации, запечатанной парафином,
для исследуемых образцов, для отрицательного контрольного образца «К-» и положительного контрольного
образца «К+».
Пример: необходимо проанализировать 4 образца. Для этого следует промаркировать 4 пробирки для
исследуемых образцов, одну пробирку для «К-» и одну пробирку для «К-1-». Общее количество пробирок - 6.
2.2 Встряхните пробирку с раствором Taq-полимеразы в течение 3-5 с на микроцентрифуге-вортексе и
центрифугируйте в течение 1-3 с на микроцентрифуге-вортексе.
2.3 Добавьте во все промаркированные пробирки, не повреждая слой парафина, по 10 мкл раствора Taq-
полимеразы.
2.4 Добавьте в каждую пробирку по одной капле минерального масла (около 20 мкл). Закройте пробирки.
2.5 Встряхните пробирки с препаратом ДНК, отрицательным контрольным образцом и положительным
контрольным образцом в течение 3-5 с на микроцентрифуге-вортексе и центрифугируйте в течение1-3 с на
микроцентрифуге-вортексе.
ВНИМАНИЕ!
1. При использовании для выделения ДНК комплекта реагентов ПРОБА-ГС необходимо после
встряхивания центрифугировать пробирки с препаратом ДНК при RCF(g) 16000 в течение одной минуты
для осаждения сорбента. В случае если после выделения надосадочная жидкость, содержащая
выделенную ДНК, была перенесена в новые пробирки, центрифугирование после встряхивания
производится в течение 3-5 с на микроцентрифуге-вортексе.
Относительное ускорение центрифуги (RCF или д) зависит от частоты вращения и радиуса ротора. Для
определения соответствия центрифуги заданным параметрам центрифугирования обратитесь к
руководству по эксплуатации.
2. При использовании для выделения ДНК набора реагентов ПРОБА-МЧ-РАПИД необходимо после
встряхивания поместить пробирки с препаратом ДНК в магнитный штатив. В случае если после
выделения надосадочная жидкость, содержащая выделенную ДНК, была перенесена в новые пробирки,
центрифугирование производится в течение 3-5 с на микроцентрифуге-вортексе.
3. Для предотвращения контаминации следует перед внесением ДНК открывать крышки только тех
пробирок, в KOTopbfe будет вноситься данный образец, и закрывать их, перед внесением следующего.
В случае использования стрипов следует закрывать крышку стрипа после внесения в него образцов
перед началом работы со следующим. Закрывайте пробирки/стрипы плотно. Препараты ДНК и
контрольные образцы следует вносить наконечниками с фильтром.
2.6 Внесите в соответствующие промаркированные пробирки, не повреждая слой парафина, 5,0 мкл выделенного
из образца препарата ДНК. в пробирки, промаркированные «К-» и «К+», ДНК не вносится.
2.7 Внесите в пробирку, промаркированную «К-», не повреждая слой парафина, 5,0 мкл отрицательного
контрольного образца, прошедшего этап выделения ДНК.
2.8 Внесите в пробирку, промаркированную «К-*-», не повреждая слой парафина, 5,0 мкл положительного
контрольного образца.
2.9 Центрифугируйте все пробирки/стрипы в течение 3-5 с на микроцентрифуге-вортексе.
2.10 Установите все пробирки/стрипы в блок амплификатора.
2.11 Запустите программное обеспечение детектирующего амплификатора в режиме «Работа с прибором» и
проведите ПЦР с учетом объема реакционной смеси, равного 35 мкл.
Параметры, которые вводят при создании нового теста (программа амплификации, используемые каналы
детекции, объём реакционной смеси и т.п.) можно сохранить в виде готового файла. Для удобства работы при
первом проведении ПЦР загрузите готовый файл с параметрами теста «С. diphtheriae Tox_S».
При последующих постановках добавьте в протокол соответствующий тест, укажите количество и
идентификаторы образцов, в том числе положительного и отрицательного контрольных образцов, отметьте
расположение пробирок на матрице термоблока в соответствии с их установкой и проведите ПЦР.
Регистрация и учёт результатов ПЦР проводится автоматически программным обеспечением для
детектирующих амплификаторов.
Интерпретация результатов проводится в соответствии с таблицей 2. Результаты постановки валидны, если
вь1полняются условия интерпретации результатов, полученных для контрольных образцов.
2
Канал детекции
Результат Интерпретация
результатаFam Hex Су5
Анализируемые образцы
Ср указан Не
учитывается Ср указан +
Обнаружен ген tox
С. diphtheriae,
обнаружена ДНК С.
diphtheriae
Обнаружена ДНК
С. diphtheriae
токсигенных штаммов
(ген tox-b) *
Ср не указан Не
учитывается Ср < 35 +
Ген tox С. diphtheriae не
обнаружен,
обнаружена ДНК С.
diphtheriae
Обнаружена ДНК
С. diphtheriae
нетоксигенных
штаммов (ген tox-)
Ср не указан Не
учитывается Ср > 35 +
Обнаружена ДНК С.
diphtheriae.
Количество ДНК недостаточно
для определения наличия или
отсутствия гена tox С.
diphtheriae
П олуч ен н ы й резул ьтат
может быть связан с
низким содержанием
С. diphtheriae в
клиническом образце,
с перекрёстной
контаминацией
высококопийными
образцами или с
ингибированием
ПЦР.**
Ср не указан Ср указан Ср не указан -
Ген tox С. diphtheriae не
обнаружен,
ДНК С. diphtheriae не
обнаружена
Не обнаружена
ДНК С. diphtheriae
Ср указан Не
учитывается Ср не указан нд
Обнаружен ген tox С.
diphtheriae,
ДНК С. diphtheriae не
обнаружена
Недостоверный
результат
Ср не указан Ср не указан Ср не указан нд Недостоверный результат Недостоверный
результат
Отрицательный контрольный образец
Ср не указан Ср указан Ср не
указан -
Не обнаружен ген tox С.
diphtheriae,
не обнаружена ДНК С.
diphtheriae
Отрицательный
результат
Результаты постановки
валидны
Положительный контрольный образец
Ср указан Не
учитывается Ср указан +
Обнаружен ген tox
С. diphtheriae, обнаружена
ДНК С. diphtheriae
Положительный
результат
Результаты постановки
валиднь!
• истинная токсигенность во всех случаях должна быть подтверждена фенотипическими тестами
Следует однократно провести повторное взятие биоматериала и/или повторное выделение ДНК и
проведение ПЦР. В случае повторения результата, следует выдать итоговый результат «Обнаружена ДНК С.
diphtheriae. Количество ДНК недостаточно для определения наличия или отсутствия гена tox С. diphtheriae».
--- стр. 12 ---
Канал детекции
Результат Интерпретация
результатаFam Hex Су5
Анализиоуемые обоазиы
Ср указан Не
учитывается Ср указан +
Обнаружен ген tox
С. diphtheriae,
обнаружена ДНК С. diphtheriae
Обнаружена ДНК
С. diphtheriae
токсигенных штаммов
(ген tox+) *
Ср не указан Не
учитывается Ср < 35 +
Ген tox С. diphtheriae не
обнаружен,
обнаружена ДНК С. diphtheriae
Обнаружена ДНК
С. diphtheriae
нетоксигенных штаммов
(ген tox-)
Ср не указан Не
учитывается Ср > 35 +
Обнаружена ДНК С. diphtheriae.
Количество ДНК недостаточно
для определения наличия или
отсутствия гена tox С.
diphtheriae
Полученный результат
может быть связан с
низким содержанием
С. diphtheriae в
клиническом образце, с
перекрёстной
контаминацией
высококопийными
образцами или с
ингибированием ПЦР.**
Ср не указан Ср указан Ср не указан
Ген tox С. diphtheriae не
обнаружен,
ДНК С. diphtheriae не
обнаружена
Не обнаружена
ДНК с. diphtheriae
Ср указан Не
учитывается Ср не указан нд
Обнаружен ген tox С.
diphtheriae,
ДНК С. diphtheriae не
обнаружена
Недостоверный
результат
Ср не указан Ср не указан Ср не указан нд Недостоверный результат Недостоверный
результат
Отрицательный контрольный образец
Ср не указан Ср указан Ср не указан
Не обнаружен ген tox С.
diphtheriae,
не обнаружена ДНК С.
diphtheriae
Отрицательный
результат
Результаты постановки
валидны
Положительный контрольный образец
Ср указан Не учитывается Ср указан +
Обнаружен ген tox
С. diphtheriae, обнаружена ДНК
С. diphtheriae
Положительный
результат
Результаты постановки
валидны
• истинная токсигенность во всех случаях должна быть подтверждена фенотипическими тестами Г
л ДНК-ТЕХНОЛОГНЯ
Служба клиентской поддержки;
8-800-200-75-15 (для России, звонок бесплатный),
+7 (495) 640-16-93 (для стран СНГ и зарубежья, звонок
платный)
E-mail: hotline@dna-technology.ru,
www.dna-technology.nj
Регистрационное удостоверение
№ РЗН
В данном вкладыше приведена информация для набора реагентов С. diphtheriae Тох в фасовке U.
Перед началом работы изучите инструкцию.
Набор реагентов
для выявления ДНК Corynebacterium diphtheriae
с дифференциацией токсигенных и нетоксигенных
штаммов методом ПЦР в режиме реального времени
С diphtheriae Тох
R1-P445-UA/9 (Фасовка U)
Информация о наборе реагентов
Назначение:
Набор реагентов предназначен для выявления ДНК и дифференциации токсигенных и нетоксигенных штаммов
С. diphtheriae в биологическом материале человека (мазки/соскобы со слизистой оболочки носо- и ротоглотки,
мазки с пораженных участков кожи) и бактериальных культурах из этого биоматериала методом полимеразной
цепной реакции в режиме реального времени.
Выделение ДНК:
Рекомендуются наборы/комплекты реагентов для выделения НК ПРОБА-НК, ПРОБА-ГС, ПРОБА-МЧ-РАПИД,
ПРОБА-ОПТИМА.
Специализированное оборудование:
Амплификаторы детектирующие «ДТлайт», «ДТпрайм» или ДТ-96 (ООО «НПО ДНК-Технология»).
Дополнительно, в случае автоматизированного дозирования:
• Устройство дозирующее ДТстрим 12М1 или ДТстрим 15М1 (ООО «НПО ДНК-Технология»);
• Центрифуга с RCF(g) не ниже 500, с адаптером для микропланшетов; .
• Устройство для запечатывания планшет ДТпак (ООО «НПО ДНК-Технология»);
Амплификатор детектирующий ДТпрайм *Х* (ООО «НПО ДНК-Технология»)
Время проведения анализа (не включая пробоподготовку): от 1,5 часов.
Количество исследуемых образцов:
Набор реагентов предназначен для однократного применения и рассчитан на 96 определений, что
соответствует при одновременном исследовании 94 неизвестным образцам, отрицательному контрольному
образцу и положительному контрольному образцу.
Состав набора реагентов:
** Следует однократно провести повторное взятие биоматериала и/или повторное выделение ДМК и проведение П1
В случае повторения результата, следует выдать итоговый результат «Обнаружена ДНК С. diphtheriae. Количество Д^
недостаточно для определения наличия или отсутствия гена tox С. diphtheriae».
Символы, использ /емые пои маокиоовке набора реагентов
и
Медицинское изделие
для диагностики
in vitro
[м ?1 Номер по каталогу
Код партии
(серии)
i Предел температуры d Дата изготовления Нестерильно
Использовать до С В
Обратитесь к инструкции
по применению
V
Содержимого
достаточно для
проведения п
тестов
Не допускать
воздействия
солнечного света
n J Изготовитель
Наименование
м п 0 н е н то в Внешний вид Количество пробирок Номинальный объём
компонента
О
ос
сл Смеск
амплжЛ^ции
Прозрачная жидкость
от бесцветного до
РОЗОВОГО цвета
1 пробирка 600 мкл
U.оГ-;
О
оts
-S
'ОрлимеЬаЭа ТехноТад
44fO(. Oj- Л '
Прозрачная
бесцветная вязкая
жидкость
1 пробирка 30 мкл
\5u
ПЦР-бJS.L Прозрачная
бесцветная жидкость 1 пробирка 600 мкл
3
ПолржР^ельный
гльный образец*
Прозрачная
бесцветная жидкость 1 пробирка 130 мкл
Гб о
Fam Hex Rox Су5 Су 5.5
С. diphtheriae (tox+) ВК - С. diphtheriae -
проведение анализа
Выделение ДНК
Выделение ДНК из исследуемого материала проводят в соответствии с инструкцией по применению
используемого набора/комплекта реагентов.
Для выделения ДНК рекомендуется использовать «Комплект реагентов для выделения нуклеиновых кислот
(ПРОБА-НК/ПРОБА-НК-ПЛЮС) по ТУ 9398-035-46482062-2009» в форме комплектации: комплект ПРОБА-НК
--- стр. 13 ---
(ООО «НПО ДНК-Технология», Россия, РУ № ФСР 2010/08867); Комплект реагентов для выделения ДНК по ТУ
9398-037-46482062-2009 в следующих формах комплектации: ПРОБА-ГС (ООО «НПО ДНК-Технология»,
Россия, РУ № ФСР 2010/08696), Набор реагентов для выделения нуклеиновых кислот (ПРОБА-МЧ) в
следующей комплектации: ПРОБА-МЧ-РАПИД (ООО «ДНК-Технология ТС», Россия, РУ № РЗН 2017/5753),
Набор реагентов для выделения ДНК человека, бактерий, вирусов и грибов из биологического материала
человека и культур микроорганизмов (ПРОБА-ОПТИМА) (ООО «ДНК-Технология ТС», Россия, РУ № РЗН
2022/17496).
ВНИМАНИЕ! Одновременно с выделением ДНК из биологического материала необходимо подготовить
отрицательный контрольный образец и провести его через все этапы пробоподготовки. В качестве
отрицательного контрольного образца рекомендуется использовать физиологический раствор или
отрицательный контрольный образец, входящий в состав набора/комплекта реагентов для выделения
нуклеиновых кислот в объёме, указанном в инструкции по применению соответствующего набора/комплекта
реагентов.
2 Подготовка и проведение полимеразной цепной реакции
ВНИМАНИЕ! При проведении всех последующих действий следует избегать воздействия прямых солнечных
лучей на пробирки со смесью для амплификации.
2.1 Ручное дозирование
2.1.1 Промаркируйте необходимое количество одноразовых амплификационных пробирок объёмом 0,2 мл для
исследуемых образцов, отрицательного контрольного образца «К-» и для положительного контрольного
образца «К+».
Пример: необходимо проанализировать 4 образца. Для этого необходимо промаркировать 4 пробирки для
исследуемых образцов, одну пробирку для «К-» и одну пробирку для «К+». Общее количество пробирок - 6.
2.1.2 Встряхните пробирку со смесью для амплификации в течение 3-5 с на микроцентрифуге-вортексе и
центрифугируйте в течение 1-3 с на микроцентрифуге-вортексе.
2.1.3 Внесите в каждую промаркированную пробирку по 6,0 мкл смеси для амплификации.
2.1.4 Встряхните пробирки с ПЦР-буфером и полимеразой ТехноТац МАХ в течение 3-5 с на микроцентрифуге-
вортексе и центрифугируйте в течение 1-3 с на микроцентрифуге-вортексе.
Примечание - Полимеразу ТехноТац МАХ следует доставать из морозильной камеры непосредственно
перед использованием.
2.1.5 Приготовьте смесь ПЦР-буфера с полимеразой ТехноТац МАХ. Для этого смешайте в отдельной пробирке:
• 6,0 X (N+1) мкл ПЦР-буфера,
• 0,3 X (N+1) мкл полимеразы TexHoTaq МАХ,
где N - количество промаркированных пробирок с учётом «К-», «К+».
Пример: необходимо проанализировать 4 образца, «К-», «К+». Промаркированных пробирок - 6.
Необходимо приготовить смесь ПЦР-буфера и полимеразы TexHoTaq МАХ для 7 (6+1) пробирок, т.е. 42 мкл
ПЦР-буфера + 2,1 мкл полимеразы TexHoTaq МАХ.
2.1.6 Встряхните пробирку в течение 3-5 с на микроцентрифуге-вортексе и центрифугируйте в течение 1-3 с на
микроцентрифуге-вортексе.
Примечание - Смесь ПЦР-буфера и полимеразы TexHoTaq МАХ необходимо готовить непосредственно
перед использованием.
2.1.7 Добавьте в пробирки со смесью для амплификации по 6,0 мкл смеси ПЦР-буфера и полимеразы TexHoTaq МАХ.
Закройте пробирки.
Примечание - После добавления смеси ПЦР-буфера и полимеразы TexHoTaq МАХ в пробирки со смесью
для амплификации необходимо в течение двух часов выполнить постановку ПЦР.
2.1.8 Встряхните пробирки с препаратом ДНК, отрицательным контрольным образцом и положительным
контрольным образцом в течение 3-5 с на микроцентрифуге-вортексе и центрифугируйте в течение 1-3 с на
микроцентрифуге-вортексе.
ВНИМАНИЕ!
1. При использовании для выделения ДНК комплекта реагентов ПРОБА-ГС необходимо после встряхивания
центрифугировать пробирки с препаратом ДНК при RCF(g) 16000 в течение одной минуты для осаждения
сорбента, в случае если после выделения надосадочная жидкость, содержащая выделенную ДНК, была
перенесена в новые пробирки, центрифугирование после встряхивания производится в течение 3-5 с на
микроцентрифуге-вортексе.
2. При использовании для выделения ДНК набора реагентов ПРОБА-МЧ-РАПИД необходимо после
встряхивания поместить пробирки с препаратом ДНК в магнитный штатив на дозирующем устройстве. В
случае если после выделения надосадочная жидкость, содержащая выделенную ДНК, была перенесена в
новые пробирки, центрифугирование после встряхивания производится в течение 3-5 с на
микроцентрифуге-вортексе.
3. Для предотвращения контаминации следует перед внесением ДНК открывать крышки только тех пробирок,
в которые будет вноситься данный образец, и закрывать их перед внесением следующего. Закрывайте
пробирки плотно. Препараты ДНК и контрольные образцы следует вносить наконечниками с фильтром.
2.1.9 Внесите в соответствующие промаркированные пробирки 6,0 мкл выделенного из образца препарата ДНК. В
пробирки, промаркированные «К-» и «К+», ДНК не вносится.
2.1.10 Внесите в пробирку, промаркированную «К-» 6,0 мкл отрицательного контрольного образца, прошедшего этап
выделения ДНК.
2.1.11 Внесите в пробирку, промаркированную «К+» 6,0 мкл положительного контрольного образца.
2.1.12 Центрифугируйте все пробирки в течение 3-5 с на микроцентрифуге-вортексе.
2.1.13 Установите все пробирки в блок амплификатора.
2.1.14 Запустите программное обеспечение детектирующего амплификатора в режиме «Работа с прибором» и
проведите ПЦР с учетом объема реакционной смеси, равного 18 мкл.
Параметры, которые вводят при создании нового теста (программа амплификации, используемые каналы детекции,
объём реакционной смеси и т.п.) можно сохранить в виде готового файла. Для удобства работы при первом проведении
ПЦР загрузите готовый файл с параметрами теста «С. diphtheriae Тох_и». При последующих постановках добавьте в
протокол соответствующий тест, укажите количество и идентификаторы образцов, в том числе отрицательного и
положительного контрольных образцов, отметьте расположение пробирок на матрице термоблока в соответствии с их
установкой и проведите ПЦР.
2.2 Дозирование с использованием дозирующего устройства ДТстрим
2.2.1 Встряхните пробирку со смесью для амплификации в течение 3-5 с на микроцентрифуге-вортексе и
центрифугируйте в течение 1-3 с на микроцентрифуге-вортексе.
2.2.2 Встряхните пробирки с ПЦР-буфером и полимеразой TexHoTaq МАХ в течение 3-5 с на микроцентрифуге-
вортексе и центрифугируйте в течение 1-3 с на микроцентрифуге-вортексе.
Примечание - Полимеразу TexHoTaq МАХ следует доставать из морозильной камеры непосредственно
перед использованием.
2.2.3 Следуя указаниям ПО дозирующего устройства ДТстрим, в отдельной пробирке приготовьте смесь ПЦР-буфера
с полимеразой TexHoTaq МАХ.
2.2.4 Встряхните пробирку в течение 3-5 с на микроцентрифуге-вортексе и центрифугируйте в течение 1-3 с на
микроцентрифуге-вортексе.
2.2.5 Встряхните пробирки с препаратом ДНК, отрицательным контрольным образцом и положительным
контрольным образцом в течение 3-5 с на микроцентрифуге-вортексе и центрифугируйте в течение 1-3 с на
микроцентрифуге-вортексе.
ВНИМАНИЕ!
1. При использовании для выделения ДНК комплекта реагентов ПРОБА-ГС необходимо после встряхивания
центрифугировать пробирки с препаратом ДНК при RCF(g) 16000 в течение одной минуты для осаждения
сорбента. В случае если после выделения надосадочная жидкость, содержащая выделенную ДНК, была
перенесена в новые пробирки, центрифугирование производится в течение 3-5 с на микроцентрифуге-
вортексе.
2. При использовании для выделения ДНК набора реагентов ПРОБА-МЧ-РАПИД необходимо после
встряхивания поместить пробирки с препаратом ДНК в магнитный штатив на дозирующем устройстве. В
случае если после выделения надосадочная жидкость, содержащая выделенную ДНК, была перенесена в
новые пробирки, центрифугирование производится в течение 3-5 с на микроцентрифуге-вортексе.
2.2.6 Установите пробирки: со смесью для амплификации, со смесью ПЦР-буфера и полимеразы TexHoTaq МАХ, с
препаратами ДНК, отрицательным контрольным образцом и положительным контрольным образцом, а также
микропланшет ПЦР на рабочий стол ДТстрим и проведите дозирование компонентов согласно руководству по
эксплуатации.
2.2.7 Поместите аккуратно, не встряхивая микропланшет ПЦР в подложку устройства для запечатывания планшет
ДТпак после завершения программы на дозирующем устройстве ДТстрим.
2.2.8 Проведите запечатывание микроплакшет ПЦР полимерной термопленкой согласно инструкции к прибору
ДТпак.
2.2.9 Центрифугируйте микропланшет ПЦР при RCF(g) 500 в течение 30 с.
2.2.10 Установите микропланшет ПЦР в блок амплификатора. Запустите программное обеспечение детектирующего
амплификатора в режиме «Работа с прибором» и проведите ПЦР с учетом объема реакционной смеси, равного
18 мкл.
Параметры, которые вводят при создании нового теста (программа амплификации, используемые каналы
детекции, объём реакционной смеси и т.п.) можно сохранить в виде готового файла. Для удобства работы при
первом проведении ПЦР загрузите готовый файл с параметрами теста «С. diphtheriae Tox_U».
При последующих постановках добавьте в протокол соответствующий тест, укажите количество и
идентификаторы образцов, в том числе отрицательного и положительного контрольных образцов, отметьте
расположение образцов на матрице термоблока в соответствии с их установкой и проведите ПЦР.
3 Регистрация и учёт результатов ПЦР проводится автоматически программным обеспечением для
детектирующих амплификаторов.
Интерпретация результатов проводится в соответствии с таблицей 2. Результаты постановки валидны, если
выполняются условия интерпретации результатов, полученных для контрольных образцов.
Условия транспортирования, хранения и эксплуатации
Транспортирование набора реагентов осуществляют в термоконтейнерах с хладоэлементами всеми видами
крытого транспорта при температуре внутри контейнеров, соответствующей условиям хранения компонентов,
входящих в состав набора реагентов.
Допускается транспортирование в термоконтейнерах с хладоэлементами всеми видами крытого транспорта
при температуре от 2 ®С до 25 °С внутри контейнера не более 5 суток.
Все компоненты набора реагентов, за исключением полимеразы TexHoTaq МАХ, следует хранить в
холодильнике или холодильной камере при температуре от 2 до 8 в течение всего срока годности.
Полимеразу TexHoTaq МАХ следует хранить в морозильной камере при температуре от минус 18 ®С до минус
22 ®С в течение всего срока годности набора реагентов.
Смесь для амплификации следует хранить в холодильнике или холодильной камере при температуре от 2
до 8 в защищённом от света месте в течение всего срока годности набора реагентов.
Срок годности набора реагентов - 12 месяцев при соблюдении всех условий транспортирования, хранения и
эксплуатации.
По вопросам, касающимся качества набора реагентов С. diphtheriae Тох, следует обращаться в службу
клиентской поддержки.
Служба клиентской поддержки:
8-800-200-75-15 (для России, звонок бесплатный),
+7 (495) 640-16-93 (для стран СНГ и зарубежья, звонок платный).
E-mail: hotline@dna-technology.ru, www.dna-technology.ru
--- стр. 14 ---
^ ДНК-ТЕХНОЛОГИЯ Инструкция ПО применению
с, diphtheriae Тох
J
t
S
Организация-производитель
СОГЛАСОВАНО
ООО
« 2 ^ »
Организация-разработчик
УТВЕРЖДАЮ
^директор
щогия»
4 ЫI *Clg
евичев
2022 г.
ИНСТРУКЦИЯ по ПРИМЕНЕНИЮ
Набор реагентов
для выявления ДНК Corynebacterium diphtheriae с дифференциацией токсигенных и
нетоксигенных штаммов методом ПЦР в режиме реального времени
(С. diphtheriae Тох)
СОГЛАСОВАН^,
Г енеральнь!^!^
ооо«
2022
--- стр. 16 ---
^ ДНК-ТЕХНОЛОГИЯ
f
Инструкция по применению Лист 3
С. diphtheriae Тох Листов 27
1 ПРЕДНАЗНАЧЕННОЕ ПРИМЕНЕНИЕ
1.1 Полное наименование набора реагентов: Набор реагентов для выявления ДНК
Corynebacterium diphtheriae с дифференциацией токсигенных и нетоксигенных штаммов
методом ПЦР в режиме реального времени (С. diphtheriae Тох), далее по тексту - набор
реагентов.
1.2 Назначение: набор реагентов предназначен для выявления ДНК и
дифференциации токсигенных и нетоксигенных штаммов С. diphtheriae в биологическом
материале человека (мазки/соскобы со слизистой оболочки носо- и ротоглотки, мазки с
пораженных участков кожи) и бактериальных культурах из этого биоматериала методом
полимеразной цепной реакции в режиме реального времени.
1.3 Функциональное назначение: диагностика in vitro, скрининг.
1.4 Показания к проведению исследований; симптомы инфекционного заболевания,
вызванного С. diphtheriae, и эпидемиологически связанные случаи; скрининг бессимптомного
носительства.
1.5 Противопоказания к применению: противопоказаний к применению нет.
1.6 Популяционные и демографические аспекты: применение набора реагентов не
зависит от популяционных и демографических аспектов.
1.7 Область применения: набор реагентов может быть использован в клинико-
диагностических лабораториях медицинских учреждений.
1.8 Потенциальные пользователи: квалифицированный персонал, обученный
методам молекулярной диагностики и правилам работы в клинико-диагностической лаборатории.
1.9 Применять набор реагентов строго по назначению согласно данной инструкции по
применению.
--- стр. 17 ---
^ ДНК-ТЕХНОЛОГИЯ
Инструкция ПО применению
С. diphtheriae Тох
Лист 4
Листов 27
2 ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА РЕАГЕНТОВ
2.1 Состав набора реагентов
1?^ R1-P445-S3/4, фасовка 8,стрипы
Наименование компонентов Внешний вид Количество
пробирок
Номинальный
объём компонента
Смесь для амплификации,
запечатанная парафином
Прозрачная бесцветная жидкость
под воскообразным белым слоем
6 стрипов
по 8 пробирок по 20 мкл
Раствор Taq-полимеразы Прозрачная бесцветная жидкость 1 пробирка 500 мкл
Минеральное масло Прозрачная бесцветная вязкая
маслянистая жидкость 1 пробирка 1,0 мл
Положительный контрольный
образец Прозрачная бесцветная жидкость 1 пробирка 130 мкл
Крышки для стрипов 6 шт.
R1-P445-23/4, фасовка S, пробирки
Наименование компонентов Внешний вид Количество
пробирок
Номинальный
объём компонента
Смесь для амплификации,
запечатанная парафином
Прозрачная бесцветная жидкость
под воскообразным белым слоем 48 пробирок по 20 мкл
Раствор Taq-полимеразы Прозрачная бесцветная жидкость 1 пробирка 500 мкл
Минеральное масло Прозрачная бесцветная вязкая
маслянистая жидкость 1 пробирка 1,0 мл
Положительный контрольный
образец Прозрачная бесцветная жидкость 1 пробирка 130 мкл
l?I5l R1-P445-UA/9, фасовка и
Наименование компонентов Внешний вид Количество
пробирок
Номинальный
объём компонента
Смесь для амплификации Прозрачная жидкость от
бесцветного до розового цвета 1 пробирка 600 мкл
Полимераза TexHoTaq МАХ Прозрачная бесцветная вязкая
жидкость 1 пробирка 30 мкл
ПЦР-буфер Прозрачная бесцветная жидкость 1 пробирка 600 мкл
Положительный контрольный
образец Прозрачная бесцветная жидкость 1 пробирка 130 мкл
Все компоненты набора реагентов готовы к применению и не требуют дополнительной
подготовки к работе.
--- стр. 18 ---
^ ДНК-ТЕХНОЛОГИЯ
Инструкция по применению Лист 5
С. diphtheriae Тох Листов 27
2.2 Количество анализируемых образцов
Набор реагентов предназначен для однократного применения и рассчитан на 48
определений в фасовке S (что соответствует при одновременном исследовании 46 неизвестным
образцам, отрицательному контрольному образцу и положительному контрольному образцу); на
96 определений в фасовке U (что соответствует при одновременном исследовании 94
неизвестным образцам, отрицательному контрольному образцу и положительному
контрольному образцу)
2.3 Принцип метода
Метод: Полимеразная цепная реакция с детекцией результатов в режиме реального
времени; мультиплексный качественный анализ.
Принцип метода основан на использовании процесса амплификации ДНК,
заключающегося в повторяющихся циклах температурной денатурации ДНК, отжига праймеров
с комплементарными последовательностями и последующей достройки полинуклеотидных
цепей с этих праймеров Taq-полимеразой.
Для повышения чувствительности и специфичности реакции предусмотрено применение
«горячего» старта. Для фасовки S «горячий» старт обеспечивается методикой приготовления
реакционной смеси, состоящей из двух слоёв, разделённых прослойкой из парафина. Смешение
слоёв и превращение их в амплификационную смесь происходит только после плавления
парафина. «Горячий» старт для фасовки U обеспечивается использованием полимеразы,
активность которой блокирована антителами, активация фермента происходит только после
предварительного прогрева реакционной смеси при 94 °С в течение 5 минут. Это исключает
неспецифический отжиг праймеров на ДНК-мишени при начальном прогреве пробирки.
В смесь для амплификации введены ДНК-зонды, каждый из которых содержит
флуоресцентную метку и гаситель флуоресценции. При образовании специфического продукта
ДНК-зонд разрушается, действие гасителя на флуоресцентную метку прекращается, что ведёт к
возрастанию уровня флуоресценции, который фиксируется специальными приборами.
Количество разрушенных зондов (а, следовательно, и уровень флуоресценции) увеличивается
пропорционально количеству образовавшихся специфических ампликонов. Уровень
флуоресценции измеряется на каждом цикле амплификации в режиме реального времени.
В состав смеси для амплификации включен внутренний контроль (ВК), который
предназначен для оценки качества прохождения полимеразной цепной реакции. В состав ДНК-
зондов, использующихся для детекции продукта амплификации специфической ДНК, включены
флуоресцентные метки Fam и Су5. В состав ДНК-зонда, использующегося для детекции
продукта амплификации внутреннего контроля, входит флуоресцентный краситель Hex.
--- стр. 19 ---
л7ДНК-ТЕХН 0Л0ГИЯ
Инструкция по применению Лист 6
С. diphtheriae Тох Листов 27
Использование нескольких флуоресцентных красителей позволяет сократить количество
пробирок, поскольку появляется возможность одновременно регистрировать результаты разных
реакций амплификации, проходящих в одной пробирке.
В таблице 1 приведены каналы детекции продуктов амплификации.
Таблица 1 -Каналы детекции продуктов амплификации
Fam Hex Rox Су5 Су5.5
С. diphtheriae (tox+) ВК - С. diphtheriae -
Исследование состоит из следующих этапов: выделение ДНК (пробоподготовка), ПЦР-
амплификация ДНК с детекцией результатов в режиме реального времени с использованием
набора реагентов С diphtheriae Тох.
2.4 Время проведения анализа (не включая пробоподготовку): от 1,5 часов.
--- стр. 20 ---
л;^днк-тЕХНология
Инструкция по применению Лист 7
С. diphtheriae Tox Листов 27
3 АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА РЕАГЕНТОВ
3.1 Специфичность анализа
В образцах биологического материала человека, содержащих ДНК С. diphtheriae, во
время проведения амплификации программное обеспечение детектирующего амплификатора
фиксирует положительные результаты амплификации специфического продукта (фрагмента
ДНК С diphtheriae).
В образцах биологического материала человека, содержащих ДНК токсигенных
С. diphtheriae, во время проведения амплификации программное обеспечение детектирующего
амплификатора фиксирует положительные результаты амплификации специфических продуктов
I (фрагментов ДНК С diphtheriae и гена токсина - С. diphtheriae tox gene).
В образцах биологического материала, не содержащих ДНК С. diphtheriae, при
проведении амплификации программное обеспечение детектирующего амплификатора
фиксирует отрицательные результаты амплификации специфического продукта и
положительный результат амплификации внутреннего контроля (ВК).
Показано отсутствие неспецифических положительных результатов амплификации при
исследовании в высокой концентрации ДНК микроорганизмов, вызывающих инфекционные
заболевания, и\или в норме присутствующих в локусах взятия биоматериала: Streptococcus bovis,
Streptococcus sanguinis, Escherichia coli, Streptococcus pyogenes, Streptococcus pneumoniae,
Streptococcus anginosus, Staphylococcus aureus, Burkholderia spp., Klebsiella pneumoniae,
Proteus spp., Morganella morganii, Pseudomonas aeruginosa, Enterobacter cloacae, Acinetobacter
spp., Enterococcus spp. и ДНК человека в концентрации более 750 нг на образец.
При исследовании аналитической специфичности показано наличие специфических и
отсутствие неспецифических положительных результатов амплификации при исследовании
препаратов ДНК в высокой концентрации, выделенных из 33 культур: семи Corynebacterium
ulcerans (tox+), четырех Corynebacterium ulcerans (NTTB, tox^), четырех Corynebacterium
ulcerans (tox-), пяти Corynebacterium pseudodiphtheriticum (tox-), пяти Corynebacterium diphtheriae
(биотип mitis, tox-), пяти Corynebacterium diphtheriae (биотип gravis, tox-), трех Corynebacterium
diphtheriae (NTTB, tox+).
3.2 Интерферирующие вещества
Наличие ингибиторов ПЦР в образце биологического материала может быть причиной
сомнительных (недостоверных) результатов. Признаком полного ингибирования ПЦР является
одновременное отсутствие амплификации внутреннего контроля и специфического продукта
(см. 2.3, 9.3).
--- стр. 21 ---
л7ДНКТЕХН 0Л0ГИЯ
Инструкция по применению Лист 8
С. diphtheriae Тох Листов 27
к ингибиторам ПЦР, которые* могут присутствовать в образце ДНК, отнесены
следующие эндогенные и экзогенные интерферирующие вещества: гемоглобин, слизь (муцин) и
лекарственные препараты (пиносол, хлоргексидина биглюконат, ринофлуимуцил, октенисепт),
находящиеся в образце ДНК в результате неполного удаления в ходе выделения ДНК из образца
биоматериала, а также изопропиловый спирт и метилацетат, остающиеся в образце ДНК в
результате неполного удаления промывочных растворов в ходе пробоподготовки.
Максимальные концентрации интерферирующих веществ, при которых не наблюдалось
ингибирование ПЦР, представлены в таблице ниже.
Вид биоматериала Интерферирующее вещество Концентрация ИВ
Эндогенные вещества
мазки/соскобы со слизистой оболочки
носо- и ротоглотки, мазки с пораженных
участков кожи
Гемоглобин 0,35 мг/мл
мазки/соскобы со слизистой оболочки
носо-и ротоглотки Слизь (муцин) 20%
Экзогенные вещества
мазки/соскобы со слизистой оболочки
носо- и ротоглотки Пиносол 2%
мазки/соскобы со слизистой оболочки
носо- и ротоглотки, мазки с пораженных
участков кожи
Хлоргексидин биглюконат 5%
мазки/соскобы со слизистой оболочки
носо-и ротоглотки Ринофлуимуцил 5%
мазки/соскобы со слизистой оболочки
носо- и ротоглотки, мазки с пораженных
участков кожи
Октенисепт 2%
мазки/соскобы со слизистой оболочки
носо- и ротоглотки, мазки с пораженных
участков кожи, бактериальные культуры
Изопропиловый спирт 10%
мазки/соскобы со слизистой оболочки
носо- и ротоглотки, мазки с пораженных
участков кожи, бактериальные культуры
Метилацетат 10%
--- стр. 22 ---
^ ДНКТЕХНОЛОГИЯ
3.3
Инструкция по применению Лист 9
С. diphtheriae Тох Листов 27
Предел обнаружения:
Предел обнаружения составляет 5 копий ДНК на амплификационную пробирку что
соответствует 10^ копий ДНК/мл. Предел обнаружения установлен путём анализа серийных
разведений лабораторного контрольного образца (ЛКО).
3.4 Диагностические характеристики
Оценка диагностических характеристик (диагностической чувствительности и
диагностической специфичности) проводилась при подсчете количества правильно
определенных Corynebacterium diphtheriae с дифференциацией токсигенных и нетоксигенных
штаммов, выявляемых с использованием испытываемого набора реагентов «С diphtheriae Тох».
Вид биоматериала
С. diphtheriae нетоксигенных штаммов
(ген tox-)
С. diphtheriae токсигенных штаммов
(ген tox+)
Диагностическая
чувствительность
Диагностическая
специфичность
Диагностическая
чувствительность
Диагностическая
специфичность
Мазки/соскобы со
слизистой
оболочки носо- и
ротоглотки
100% (92,9- 100) 100% (97,6- 100) 100% (92,9- 100) 100% (97,6- 100)
Мазки с
пораженных
участков кожи
100% (92,9- 100) 100% (97,6- 100) 100% (92,9- 100) 100% (97,6- 100)
Эффективность медицинского изделия при исследовании бактериальных культур
составила 100% (Рист=95,5%).
--- стр. 23 ---
л7ДНК-ТЕХН 0Л0ГИЯ
Инструкция по применению Лист 10
С. diphtheriae Тох Листов 27
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
Организация работы ПЦР-лаборатории, оборудование и материалы должны
соответствовать требованиям ГОСТ Р 52905-2007, методических указаний МУ 1.3.2569-09
«Организация работы лабораторий, использующих методы амплификации нуклеиновых кислот,
при работе с материалом, содержащим микроорганизмы I-IV групп патогенности»,
с соблюдением санитарных правил и норм СанПиН 3.3686-21 «Санитарно-эпидемиологические
требования по профилактике инфекционных болезней».
Исследуемые образцы рассматриваются как потенциально-опасные. При работе с
набором реагентов следует надевать одноразовые перчатки без талька.
При работе с микроорганизмами 1-IV групп патогенности выбор типа защитного
костюма (рабочей одежды и средств индивидуальной защиты) проводится в строгом
соответствии с санитарными правилами и нормами СанПиН 3.3686-21 и определяется видом
возбудителя, диагностическим методом, рабочей зоной, оснащением ее боксами биологической
безопасности.
Следует использовать только одноразовые наконечники и пробирки.
Не допускается использование одних и тех же наконечников при обработке различных
образцов биологического материала.
К работе с набором реагентов допускается персонал, обученный методам молекулярной
диагностики и правилам работы в клинико-диагностической лаборатории.
Выделение ДНК следует проводить в боксах биологической безопасности II класса.
Подготовку к ПЦР с использованием набора реагентов возможно проводить в ПЦР-боксах.
Запрещается перемещение лабораторного оборудования, в том числе дозаторов,
штативов, лабораторной посуды, халатов, головных уборов и пр., а также растворов реагентов из
одного помещения в другое.
Дозаторы должны быть соответствующим образом поверены (в аккредитованных
лабораториях) и промаркированы.
Использованные одноразовые принадлежности (пробирки, наконечники и др.) должны
сбрасываться в контейнер для медицинских отходов, содержащий дезинфицирующий раствор
(при необходимости).
Поверхности рабочих столов, а также помещения, в которых проводится ПЦР, следует
обязательно, до и после проведения работ, облучать с помощью бактерицидных установок в
течение 30 минут.
Все поверхности в лаборатории (рабочие столы, штативы, оборудование и др.)
ежедневно подвергают влажной уборке с применением дезинфицирующих/моющих средств,
регламентированных санитарными правилами и нормами СанПиН 3.3686-21.
--- стр. 29 ---
^ ДНК-ТЕХНОЛОГИЯ
Инструкция по применению Лист 16
С. diphtheriae Тох Листов 27
12. 1.2 Встряхните пробирку с раствором Taq-полимеразы в течение 3-5 с на микроцентрифуге-
вортексе и центрифугируйте в течение 1-3 с на микроцентрифуге-вортексе.
7.2.1.3 Добавьте во все промаркированные пробирки, не повреждая слой парафина, по 10 мкл
раствора Taq-полимеразы.
7.2.1.4 Добавьте в каждую пробирку по одной капле минерального масла (около 20 мкл).
Закройте пробирки.
7.2.1.5 Встряхните пробирки с препаратом ДНК, отрицательным контрольным образцом и
положительным контрольным образцом в течение 3-5 с на микроцентрифуге-вортексе и
центрифугируйте в течение 1-3 с на микроцентрифуге-вортексе.
ВНИМАНИЕ!
1. При использовании для выделения ДНК комплекта реагентов ПРОБА-ГС
необходимо после встряхивания центрифугировать пробирки с препаратом ДНК при
RCF(g) 16000 в течение одной минуты для осаждения сорбента. В случае если после
выделения надосадочная жидкость, содержащая выделенную ДНК, была перенесена в
новые пробирки, центрифугирование после встряхивания производится в течение 3-5 с
на микроцентрифуге-вортексе.
2. При использовании для выделения ДНК набора реагентов ПРОБА-МЧ-РАПИД
необходимо после встряхивания поместить пробирки с препаратом ДНК в магнитный
штатив. В случае если после выделения надосадочная жидкость, содержащая
выделенную ДНК, была перенесена в новые пробирки, центрифугирование после
встряхивания производится в течение 3-5 с на микроцентрифуге-вортексе.
3. Для предотвращения контаминации следует перед внесением ДНК открывать
крышки только тех пробирок, в которые будет вноситься данный образец, и закрывать
их, перед внесением следующего. В случае использования стрипов следует закрывать
крышку стрипа после внесения в него образцов перед началом работы со следующим.
Закрывайте пробирки/стрипы плотно. Препараты ДНК и контрольные образцы следует
вносить наконечниками с фильтром.
7.2.1.6 Внесите в соответствующие промаркированные пробирки, не повреждая слой
парафина, 5,0 мкл выделенного из образца препарата ДНК. В пробирки, промаркированные «К-
» и «К+», ДНК не вносится.
7.2.1.7 Внесите в пробирку, промаркированную «К-», не повреждая слой парафина, 5,0 мкл
отрицательного контрольного образца, прошедшего этап выделения ДНК (см. 7.1).
7.2.1.8 Внесите в пробирку, промаркированную «К+», не повреждая слой парафина, 5,0 мкл
положительного контрольного образца.
7.2.1.9 Центрифугируйте все пробирки/стрипы в течение 3-5 с на микроцентрифуге-вортексе.
--- стр. 30 ---
л7ДНКТЕХН 0Л0ГИЯ
Инструкция по применению Лист 17
С. diphtheriae Тох Листов 27
7.2.1.10 Установите все пробирки/стрипы в блок амплификатора.
7.2.1.11 Запустите программное обеспечение детектирующего амплификатора в режиме
«Работа с прибором» и проведите ПЦР с учетом объема реакционной смеси, равного 35 мкл, по
программе амплификации, приведенной в таблице А.1 (Приложение А).
Примечания:
1. Параметры, которые вводят при создании нового теста (программа амплификации,
используемые каналы детекции, объём реакционной смеси и т.п.) можно сохранить в виде
готового файла.
Для удобства работы при первом проведении ПЦР загрузите готовый файл с параметрами
теста «С. diphtheriae 1ох».При последующих постановках добавьте в протокол
соответствующий тест, укажите количество и идентификаторы образцов, в том числе
отрицательного и положительного контрольных образцов, отметьте расположение
пробирок на матрице термоблока в соответствии с их установкой и проведите ПЦР.
7.2.2 Фасовка U, ручное дозирование.
7.2.2.1 Промаркируйте необходимое количество одноразовых амплификационных пробирок
объёмом 0,2 мл для исследуемых образцов, для отрицательного контрольного образца «К-» и
положительного контрольного образца «К+».
Пример: необходимо проанализировать 4 образца. Для этого необходимо промаркировать 4 пробирки
для исследуемых образцов, одну пробирку для «К-» и одну пробирку для «К+». Общее количество
пробирок - 6.
1222 Встряхните пробирку со смесью для амплификации в течение 3-5 с на
микроцентрифуге-вортексе и центрифугируйте в течение 1-3 с на микроцентрифуге-вортексе.
1223 Внесите в каждую промаркированную пробирку по 6,0 мкл смеси для амплификации.
7.2.2.4 Встряхните пробирки с ПЦР-буфером и полимеразой TexHoTaq МАХ в течение 3-5 с
на микроцентрифуге-вортексе и центрифугируйте в течение 1-3 с на микроцентрифуге-
вортексе.
Примечание - Полимеразу TexHoTaq МАХ следует доставать из морозильной камеры
непосредственно перед использованием.
1223 Приготовьте смесь ПЦР-буфера с полимеразой TexHoTaq МАХ. Для этого смешайте в
отдельной пробирке:
- 6,0 X (N+1) мкл ПЦР-буфера,
- 0,3 X (N+1) мкл полимеразы TexHoTaq МАХ,
где N - количество промаркированных пробирок с учётом «К-», «К+».
Пример: необходимо проанализировать 4 образца, «К-», «К+». Промаркированных пробирок - 6.
--- стр. 31 ---
л7ДНКТЕХН 0Л0ГИЯ
Инструкция по применению Лист 18
С. diphtheriae Тох Листов 27
Необходимо приготовить смесь ПЦР-буфера и полимеразы TexHoTaq МАХ для 7 (6+1) пробирок, т.е.
42 мкл ПЦР-буфера + 2,1 мкл полимеразы TexHoTaq МАХ.
7.2.2.6 Встряхните пробирку в течение 3-5 с на микроцентрифуге-вортексе и центрифугируйте
в течение 1-3 с на микроцентрифуге-вортексе.
Примечание - Смесь ПЦР-буфера и полимеразы TexHoTaq МАХ необходимо готовить
непосредственно перед использованием.
1.2.21 Добавьте в пробирки со смесью для амплификации по 6,0 мкл смеси ПЦР-буфера и
полимеразы TexHoTaq МАХ. Закройте пробирки.
Примечание - После добавления смеси ПЦР-буфера и полимеразы TexHoTaq МАХ в пробирки со
смесью для амплификации необходимо в течение двух часов выполнить 7.2.2.8 - 7.2.2.13.
7.2.2.8 Встряхните пробирки с препаратом ДНК, положительным контрольным образцом и
отрицательным контрольным образцом в течение 3-5 с на микроцентрифуге-вортексе и
центрифугируйте в течение 1-3 с на микроцентрифуге-вортексе.
ВНИМАНИЕ!
1. При использовании для выделения ДНК комплекта реагентов ПРОБА-ГС
необходимо после встряхивания центрифугировать пробирки с препаратом ДНК при
RCF(g) 16000 в течение одной минуты для осаждения сорбента. В случае если после
выделения надосадочная жидкость, содержащая выделенную ДНК, была перенесена в
новые пробирки, центрифугирование после встряхивания производится в течение 3-5 с на
микроцентрифуге-вортексе.
2. При использовании для выделения ДНК набора реагентов ПРОБА-МЧ-РАПИД
необходимо после встряхивания поместить пробирки с препаратом ДНК в магнитный
штатив. В случае если после выделения надосадочная жидкость, содержащая выделенную
ДНК, была перенесена в новые пробирки, центрифугирование после встряхивания
производится в течение 3-5 с на микроцентрифуге-вортексе.
3. Для предотвращения контаминации следует перед внесением ДНК открывать
крышки только тех пробирок, в которые будет вноситься данный образец, и закрывать их
перед внесением следующего. Закрывайте пробирки плотно. Препараты ДНК и
контрольные образцы следует вносить наконечниками с фильтром.
7.2.2.9 Внесите в соответствующие промаркированные пробирки 6,0 мкл выделенного из
образца препарата ДНК. В пробирки, промаркированные «К-» и «К+», ДНК не вносится.
7.2.2.10 Внесите в пробирку, промаркированную «К-» 6,0 мкл отрицательного контрольного
образца, прошедшего этап выделения ДНК (см. 7.1).
--- стр. 32 ---
л7ДНК-ТЕХН 0Л0ГИЯ
1 Инструкция по применению Лист 19
С. diphtheriae Тох Листов 27
7.2.2.11 Внесите в пробирку, промаркированную «К+» 6,0 мкл положительного контрольного
образца.
7.2.2.12 Центрифугируйте все пробирки в течение 3-5 с на микроцентрифуге-вортексе.
7.2.2.13 Установите все пробирки в блок амплификатора.
7.2.2.14 Запустите программное обеспечение детектирующего амплификатора в режиме
«Работа с прибором» и проведите ПЦР с учетом объема реакционной смеси, равного 18 мкл, по
программе амплификации, приведенной в таблице А.2 (Приложение А).
Примечания:
1. Параметры, которые вводят при создании нового теста (программа амплификации,
используемые каналы детекции, объём реакционной смеси и т.п.) можно сохранить в виде
готового файла.
2. Для удобства работы при первом проведении ПЦР загрузите готовый файл с параметрами
теста «С. diphtheriae tox_U».
При последующих постановках добавьте в протокол соответствующий тест, укажите
количество и идентификаторы образцов, в том числе положительного и отрицательного
контрольных образцов, отметьте расположение пробирок на матрице термоблока в
соответствии с их установкой и проведите ПЦР.
7.2.3 Фасовка U, с использованием дозирующего устройства ДТстрим
7.2.3.1 Встряхните пробирку со смесью для амплификации в течение 3-5 с на микроцентрифуге-
вортексе и центрифугируйте в течение 1-3 с на микроцентрифуге-вортексе.
7.2.3.2 Встряхните пробирки с ПЦР-буфером и полимеразой TexHoTaq МАХ в течение 3-5 с на
микроцентрифуге-вортексе и центрифугируйте в течение 1-3 с на микроцентрифуге-вортексе.
Примечание - Полимеразу TexHoTaq МАХ следует доставать из морозильной камеры
непосредственно перед использованием.
7.2.3.3 Следуя указаниям ПО дозирующего устройства ДТстрим, в отдельной пробирке
приготовьте смесь ПЦР-буфера с полимеразой TexHoTaq МАХ.
7.2.3.4 Встряхните пробирку в течение 3-5 с на микроцентрифуге-вортексе и центрифугируйте
в течение 1-3 с на микроцентрифуге-вортексе.
7.2.3.5 Встряхните пробирки с препаратом ДНК, отрицательным контрольным образцом и
положительным контрольным образцом в течение 3-5 с на микроцентрифуге-вортексе и
центрифугируйте в течение 1-3 с на микроцентрифуге-вортексе.
ВНИМАНИЕ!
1. При использовании для выделения ДНК комплекта реагентов ПРОБА-ГС
необходимо после встряхивания центрифугировать пробирки с препаратом ДНК при
--- стр. 33 ---
^ ДНК-ТЕХНОЛОГИЯ
Инструкция по применению Лист 20
С. diphtheriae Тох Листов 27
RCF(g) 16000 в течение одной минуты для осаждения сорбента. В случае если после
выделения надосадочная жидкость, содержащая выделенную ДНК, была перенесена в
новые пробирки, центрифугирование производится в течение 3-5 с на микроцентрифуге-
вортексе.
2. При использовании для выделения ДНК набора реагентов ПРОБА-МЧ-РАПИД
пробирки с препаратом ДНК после встряхивания помещаются в магнитный штатив на
дозирующем устройстве. В случае если после выделения надосадочная жидкость,
содержащая выделенную ДНК, была перенесена в новые пробирки, центрифугирование
производится в течение 3-5 с на микроцентрифуге-вортексе.
123.6 Установите пробирки: со смесью для амплификации, со смесью ПЦР-буфера и
полимеразы TexHoTaq МАХ, с препаратами ДНК, отрицательным контрольным образцом и
положительным контрольным образцом, а также микропланшет ПЦР на рабочий стол ДТстрим
и проведите дозирование компонентов согласно руководству по эксплуатации.
123.1 Поместите аккуратно, не встряхивая, микропланшет ПЦР в подложку устройства для
запечатывания планшет ДТпак после завершения программы на дозирующем устройстве
ДТстрим.
7.2.3.8 Проведите запечатывание микропланшет ПЦР полимерной термопленкой согласно
инструкции к прибору ДТпак.
7.2.3.9 Центрифугируйте микропланшет ПЦР при RCF(g) 500 в течение 30 с.
7.2.3.10 Установите микропланшет ПЦР в блок амплификатора.
7.2.3.11 Запустите программное обеспечение детектирующего амплификатора в режиме «Работа
с прибором» и проведите ПЦР с учетом объема реакционной смеси, равного 18 мкл, по
программе амплификации, приведенной в таблице А.2 (Приложение А).
Примечания:
3. Параметры, которые вводят при создании нового теста (программа амплификации,
используемые каналы детекции, объём реакционной смеси и т.п.) можно сохранить в виде
готового файла.
4. Для удобства работы при первом проведении ПЦР загрузите готовый файл с параметрами
теста «С. diphtheriae tox_U».
При последующих постановках добавьте в протокол соответствующий тест, укажите
количество и идентификаторы образцов, в том числе положительного и отрицательного
контрольных образцов, отметьте расположение пробирок на матрице термоблока в
соответствии с их установкой и проведите ПЦР.
--- стр. 34 ---
^ ЛНК-ТЕХНОЛОГИЯ
«)
Инструкция по применению Лист 21
С. diphtheriae Тох Листов 27
8 РЕГИСТРАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ АМПЛИФИКАЦИИ
8 Л Регистрация сигнала флуоресценции проводится прибором автоматически во время
амплификации.
8.2 Детекция и учёт результатов осуществляются детектирующим амплификатором
автоматически.
8.3 После окончания программы амплификации на экране появится соответствующее
информационное сообщение и будет предложено перейти к анализу результатов. На графике
будет отображена зависимость флуоресценции от номера цикла по всем используемым каналам
для каждой пробирки в термоблоке.
9 УЧЕТ И ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ РЕАКЦИИ
9.1 Учёт результатов реакции осуществляется автоматически с помощью программного
обеспечения, поставляемого с детектирующим амплификатором.
9.2 Интерпретация результатов проводится в соответствии с таблицей 2. Результаты
постановки валидны, если выполняются условия интерпретации результатов, полученных для
контрольных образцов.
9.3 Для образцов, для которых получены отрицательные результаты по трем каналам
детекции, в графе «Результат» будет указано «нд» (недостоверный результат). Недостоверный
результат может быть связан с присутствием ингибиторов в препарате ДНК, полученном из
биологического материала; неверным выполнением протокола анализа; несоблюдением
температурного режима амплификации и др. В этом случае требуется повторное проведение ПЦР
с имеющимся препаратом ДНК, либо повторное выделение ДНК и постановка ПЦР, либо
повторное взятие биологического материала (выполняется последовательно).
9.4 При получении для положительного контрольного образца результатов, отличающихся от
указанных в таблице 2, требуется повторная постановка амплификации всей партии образцов.
9.5 При получении для отрицательного контрольного образца результатов, отличающихся от
указанных в таблице 2, результаты всей постановочной серии считают недостоверными. В этом
случае необходимо проведение специальных мероприятий для выявления и устранения
возможной контаминации.
--- стр. 36 ---
^Д НК-ТЕХНОЛОГИЯ
Инструкция по применению Лист 23
С. diphtheriae Тох Листов 27
1 о ТРАНСПОРТИРО&АНИЕ, ХРАНЕНИЕ И ЭКСПЛУАТАЦИЯ
10.1 Транспортирование
10.1.1 Транспортирование набора реагентов осуществляют в термоконтейнерах с
хладоэлементами всеми видами крытого транспорта при температуре внутри термоконтейнеров,
соответствующей условиям хранения компонентов, входящих в состав набора реагентов.
10.1.2 Допускается транспортирование в термоконтейнерах с хладоэлементами всеми
видами крытого транспорта при температуре от 2 °С до 25 °С внутри контейнера не более 5суток.
10.1.3 Наборы реагентов, транспортированные с нарушением температурного режима,
применению не подлежат.
10.2 Хранение
10.2.1 Все компоненты набора реагентов, за исключением полимеразы TexHoTaq МАХ,
следует хранить в холодильнике или холодильной камере при температуре от 2 °С до 8 °С в
течение всего срока годности.
10.2.2 Полимеразу TexHoTaq МАХ следует хранить в морозильной камере при температуре
от минус 18 °С до минус 22 °С в течение всего срока годности набора реагентов.
10.2.3 Смесь для амплификации и смесь для амплификации, запечатанную парафином,
следует хранить в холодильнике или холодильной камере при температуре от 2 °С до 8 °С в
защищённом от света месте в течение всего срока годности набора реагентов.
10.2.4 Наборы реагентов, хранившиеся с нарушением регламентированного режима,
применению не подлежат.
10.3 Указания по эксплуатации
10.3.1 Набор реагентов должен применяться согласно действующей версии утвержденной
инструкции по применению.
10.3.2 Для получения достоверных результатов необходимо строгое соблюдение
инструкции по применению набора реагентов.
10.3.3 После вскрытия упаковки компоненты набора реагентов следует хранить при
следующих условиях:
компоненты набора реагентов, за исключением полимеразы TexHoTaq МАХ, следует
хранить в холодильнике или холодильной камере при температуре от 2 °С до 8 °С в течение всего
срока годности набора реагентов;
смесь для амплификации и смесь для амплификации, запечатанную парафином, следует
хранить в холодильнике или холодильной камере при температуре от 2 °С до 8 °С в защищенном
от света месте в течение всего срока годности набора реагентов;
--- стр. 37 ---
^^ДНКТЕХНОЛОГИЯ
Инструкция по применению Лист 24
С. diphtheriae Тох Листов 27
полимеразу TexnoTaq MAX следует хранить в морозильной камере при температуре от
минус 18 °С до минус 22 °С в течение всего срока годности набора реагентов.
10.3.4 Наборы реагентов с истекшим сроком годности применению не подлежат.
11 УКАЗАНИЯ ПО УТИЛИЗАЦИИ
11.1 При использовании набора реагентов в клинико-диагностической лаборатории
образуются отходы класса В, которые утилизируются в соответствии с требованиями
СанПиН 2.1.3684-21 и МУ 1.3.2569-09.
11.2 Наборы реагентов, пришедшие в непригодность, в том числе в связи с истечением
срока годности, повреждением упаковки, подлежат утилизации в соответствии с требованиями
СанПиН 2.1.3684-21.
12 ГАРАНТИИ ИЗГОТОВИТЕЛЯ
12.1 Предприятие-изготовитель гарантирует соответствие набора реагентов требованиям
технических условий при соблюдении условий транспортирования, хранения и
эксплуатации, установленных техническими условиями.
12.2 Срок годности набора реагентов - 12 месяцев при соблюдении всех условий
транспортирования, хранения и эксплуатации.
13 РЕМОНТ И ТЕХНИЧЕСКОЕ ОБСЛУЖИВАНИЕ
Набор реагентов предназначен для однократного применения и не подлежит техническому
обслуживанию и текущему ремонту.
14 СИМВОЛЫ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ ПРИ МАРКИРОВКЕ НАБОРА РЕАГЕНТОВ
И
Медицинское изделие для
диагностики in vitro □ 5 Обратитесь к инструкции по
применению
1 Предел температуры IREfI Номер по каталогу
У
Содержимого достаточно
для проведения п тестов mJ Изготовитель
Использовать до Не допускать воздействия солнечного
света
|lot | Код партии (серии)
А Нестерильно
Дата изготовления
--- стр. 38 ---
л7ДНКТЕХН0Л0ГИЯ
Инструкция по применению Лист 25
С. diphtheriae Тох Листов 27
15 ПЕРЕЧЕНЬ ПРИМЕНЯЕМЫХ НАЦИОНАЛЬНЫХ СТАНДАРТОВ
го ст ISO 14971-2021 Изделия медицинские. Применение менеджмента риска к медицинским
изделиям
ГОСТ 15.309-98 Система разработки и постановки продукции на производство. Испытания
и приёмка выпускаемой продукции. Основные положения
ГОСТ Р 2.105-2019 Единая система конструкторской документации. Общие требования
к текстовым документам
ГОСТ Р 15.013-2016 Система разработки и постановки продукции на производство.
Медицинские изделия
ГОСТ Р 51088-2013 Медицинские изделия для диагностики ин витро. Реагенты, наборы
реагентов, тест-системы, контрольные материалы, питательные среды. Требования к изделиям и
поддерживающей документации
ГОСТ Р 51352-2013 Медицинские изделия для диагностики ин витро. Методы испытаний
ГОСТ Р 52905-2007 (ИСО 15190:2003) Лаборатории медицинские. Требования безопасности
ГОСТ Р ИСО 15223-1-2020 Изделия медицинские. Символы, применяемые при маркировании
медицинских изделий, на этикетках и в сопроводительной документации. Часть 1. Основные
требования
ГОСТ Р ИСО 18113-1-2015 Медицинские изделия для диагностики in vitro. Информация,
предоставляемая изготовителем (маркировка). Часть 1. Термины, определения и общие
требования
ГОСТ Р ИСО 18113-2-2015 Медицинские изделия для диагностики in vitro. Информация,
предоставляемая изготовителем (маркировка). Часть 2. Реагенты для диагностики in vitro для
профессионального применения
ГОСТ Р ИСО 23640-2015 Изделия медицинские для диагностики in vitro. Оценка стабильности
реагентов для диагностики in vitro
Примечание - Указанные выше стандарты были действующими на момент утверждения инструкции
по применению. В дальнейшем при пользовании документом целесообразно проверить действие
ссылочных нормативных документов на текущий момент. Если ссылочный документ заменён или
изменён, то при применении настоящего документа следует пользоваться заменённым (изменённым)
документом.
--- стр. 39 ---
л7ДНК-ТЕХН0Л0ГИЯ
Инструкция по применению Лист 26
С. diphtheriae Тох Листов 27
16 АДРЕС для ОБРАЩЕНИЯ
производство наборов реагентов имеет сертифицированную систему менеджмента
качества и соответствует требованиям стандарта систем менеджмента качества ISO 9001
в области разработки, производства и продажи IVD реагентов и приборов для молекулярно
генетической диагностики, и другого лабораторного применения и EN ISO 13485 в области
разработки, производства и продажи IVD реагентов и приборов для медицинской молекулярно
генетической диагностики.
Производитель: Общество с ограниченной ответственностью «ДНК-Технология ТС» (ООО «ДНК-
Технология ТС»), Россия.
Адрес производителя: 117246, Россия, г. Москва, проезд Научный, д. 20, строение 4.
Место производства:
1) ООО «ДНК-Технология ТС»
117246, Россия, г. Москва, Научный проезд, д. 20, стр.4
2) ООО «НПО ДНК-Технология»
142281, Россия, Московская обл. г. Протвино, ул. Железнодорожная, д. 3.
По вопросам, касающимся качества набора реагентов С. diphthehae Тох, следует обращаться
в службу клиентской поддержки.
V
Служба клиентской поддержки:
8-800-200-75-15 (для России, звонок бесплатный),
+7 (495) 640-16-93 (для стран СНГ и зарубежья, звонок платный).
E-mail: hotline@dna-technology.ru , www.dna-technology.ru
Заместитель генерального директора по
науке ООО «НПФ ДНК-Технология»
к.б.н. J Д.Д. Абрамов
« ? ^ » V 2 2022г.
СОГЛАСОВАНО
Главный врач ГКБ №67
им. Л.А. Ворохобова ДЗМ,
д.м.н, профессор А.С. Шкода
«2?» У2 2022 г.