Набор реагентов для качественного и количественного определения ДНК НВV методом ПЦР с детекцией в режиме "реального времени" (Amplitech HBV) по ТУ 21.20.23-023-19926214-2023 — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 2 --- оАМПЛИТЕК Amplitech HBV Набор реагентов для качественного и количественного определения ДНК HBV методом ПЦР с детекцией в режиме «реального времени» (Amplitech HBV) по ТУ 21.20.23-023-19926214-2023 ИНСТРУКЦИЯ по ПРИМЕНЕНИЮ № IVD REF Р016-0 96 --- стр. 3 --- ВВЕДЕНИЕ....................................................................................................................................3 1 НАЗНАЧЕНИЕ........................................................................................................................4 2 ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ ................ 4 3 ПРОТИВОПОКАЗАНИЯ К ПРИМЕНЕНИЮ .....................................................................4 4 РИСКИ ПРИМЕНЕНИЯ, ПОБОЧНЫЕ ЭФФЕКТЫ...........................................................4 5 СОСТАВ...................................................................................................................................4 6 ПРИНЦИП МЕТОДА.............................................................................................................5 6.1 Прослеживаемость значения положительного контроля ПК1 HBV...................5 6.2 Характеристика положительного контроля ПК2 HBV ..........................................6 7 НЕОБХОДИМОЕ ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ ....................................................6 8 МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ........................................................................................6 9 ИССЛЕДУЕМЫЙ МАТЕРИАЛ..............................................................................................8 10 ПРОВЕДЕНИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ...................................................................................8 10.1 Экстракция ДНК..........................................................................................................8 10.2 Подготовка к проведению ПЦР................................................................................9 10.3 Проведение ПЦР и детекции...................................................................................9 11 УЧЁТ И ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ ..............................................................10 12 ВОЗМОЖНЫЕ ОШИБКИ................................................................................................11 13 КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА...............................- ...............................................................12 13.1 Контроли, используемые в процессе исследования..........................................12 13.2 Мониторинг лаборатории на наличие контаминации .......................................13 13.3 Внутренний контроль качества лабораторных исследований........................13 14 ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА................................................13 14.1 Предел обнаружения...............................................................................................13 14.2 Диапазон измерения и предел измерения..........................................................13 14.3 Аналитическая специфичность..............................................................................14 14.4 Прецизионность измерения...................................................................................15 14.5 Правильность измерения........................................................................................15 14.6 Диагностические характеристики .........................................................................15 14.7 Корреляция.................................................................................................................15 15 УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ, ТРАНСПОРТИРОВАНИЯ И ЭКСПЛУАТАЦИИ НАБОРА ............................................................................................................................................16 15.1 Срок годности............................................................................................................16 15.2 Хранение....................................................................................................................^б 15.3 Транспортирование..................................................................................................16 15.4 Эксплуатация............................................................................................................16 16 ПЕРЕЧЕНЬ СОКРАЩЕНИЙ...........................................................................................16 17 ПЕРЕЧЕНЬ ПРИМЕНЯЕМЫХ НАЦИОНАЛЬНЫХ СТАНДАРТОВ.........................16 18 ГАРАНТИИ ПРОИЗВОДИТЕЛЯ......................................................................................17 19 ТЕХНИЧЕСКАЯ ПОДДЕРЖКА.......................................................................................17 20 СИМВОЛЫ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ В ДОКУМЕНТАЦИИ ПРОИЗВОДИТЕЛЯ ..........17 СОДЕРЖАНИЕ Amplitech HBV Инструкция в.14.03.23 --- стр. 4 --- 1. Настоящая инструкция по применению версии 14.03.23 распространяется на медицинское изделие «Набор реагентов для качественного и количественного определения ДНК HBV методом ПЦР с детекцией в режиме «реального времени» (Amplitech HBV) по ТУ 21.20.23-023-19926214-2023» (далее - набор). Краткое наименование набора: Amplitech HBV. Набор следует применять в соответствии с действующей версией инструкции по применению. Для удобства работы в лаборатории допускается использовать действующую версию краткого руководства по применению набора. 2. Вирус гепатита В (HBV) - ДНК-содержащий вирус из семейства Hepadnaviridae, который поражает печень. Метод ПЦР позволяет выявлять ДНК HBV в плазме крови в среднем через 30 дней после инфицирования, когда специфические антитела отсутствуют, что позволяет диагностировать заболевание на максимально ранних сроках. В некоторых случаях ДНК HBV является единственным маркером скрытой HBV-инфекции. Набор реагентов «Amplitech HBV» позволяет выявлять и количественно измерять ДНК HBV. ВВЕДЕНИЕ € » Amplitech HBV Инструкция в. 14.03.23 --- стр. 5 --- т 1 НАЗНАЧЕНИЕ Набор предназначен для качественного и количественного определения ДНК HBV в биологическом материале методом ПЦР с гибридизационно-флуоресцентной детекцией в режиме «реального времени». Материалом для проведения ПЦР- исследования служат образцы ДНК, экстрагированной из плазмы крови человека. Набор предназначен для лабораторной диагностики in vitro (выявление и количественное определение вируса гепатита В). Применение набора не зависит от популяционных и демографических аспектов. 2 ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ Набор предназначен для применения в клинической лабораторной диагностике для выявления и количественного определения вируса гепатита В. Отрицательные результаты исследования с помощью набора не исключают возможность инфицирования HBV и не должны использоваться в качестве единственной основы для принятия решения о лечении пациента. Отрицательные результаты исследования должны сочетаться с клиническими наблюдениями, историей болезни и эпидемиологической информацией. Набор может применяться в клинико-диагностических лабораториях. 3 ПРОТИВОПОКАЗАНИЯ К ПРИМЕНЕНИЮ Противопоказания к применению набора отсутствуют. 4 РИСКИ ПРИМЕНЕНИЯ, ПОБОЧНЫЕ ЭФФЕКТЫ При применении набора по назначению, в соответствии с данной инструкцией риски и побочные эффекты отсутствуют. 5 СОСТАВ Состав набора^ указан в таблице 1. Таблица 1 Состав набора Компонент Номинальный объём, мл Кол-во Внешний вид Смесь-1 HBV (Буферный раствор со специфическими праймерами, флуоресцентно-мечеными зондами и дНТФ) 0,96 1 пробирка Прозрачная жидкость от бесцветного до светло-лилового цвета Смесь-2 G (Буферный раствор с сульфатом магния, термостабильной ДНК-полимеразой) 0,96 1 пробирка Прозрачная бесцветная жидкость вко (Раствор, содержащий генно-инженерную конструкцию с ДНК внутреннего контроля) 0,96 1 пробирка Прозрачная бесцветная жидкость ОК (Буферный раствор) 4,8 2 пробирки Прозрачная бесцветная жидкость ПК1 HBV (Раствор, содержащий генно-инженерную конструкцию с фрагментом ДНК HBV) 4,8 2 пробирки Прозрачная бесцветная жидкость ' Набор упакован в коробку из картона. Amplitech HBV Инструкция в. 14.03.23 --- стр. 6 --- Компонент Номинальный объём, мл Кол-во Внешний вид ПК2 HBV (Раствор, содержащий генно-инженерную конструкцию с фрагментом ДНК HBV) 4,8 2 пробирки Прозрачная бесцветная жидкость Инструкция по применению В бумажном виде и электронном 1 шт. виде по адресу: http://www. amplitech. ru/resources/ Краткое руководство - 1 шт. В бумажном виде Паспорт - 1 шт. В электронном виде^ по адресу: http://www.amplitech.ru/quality/ Набор рассчитан на проведение исследования 96 образцов, включая контроли. 6 ПРИНЦИП МЕТОДА Исследование с помощью набора проводится методом ПЦР с гибридизационно- флуоресцентной детекцией продуктов амплификации в режиме «реального времени». Детекция продуктов ПЦР и раздельное выявление ДНК HBV и внутреннего контроля (ВК) обеспечивается применением в реакционной смеси для ПЦР флуоресцентно-меченых олигонуклеотидов, с^тгналы от которых регистрируются по различным каналам флуоресцентной детекции (см. таблицу 2). Таблица 2 Каналы детекции мишеней Канал детекции сигнала от флуорофора Мишень Область амплификации R6G^ ДНК HBV Core protein Су5 днквк Искусственно синтезированная последовательность Линейная зависимость между исходной концентрацией ДНК-мишени в исследуемом образце и циклом начала экспоненциального увеличения флуоресцентного сигнала (порогового цикла, Ct) позволяет определять концентрацию ДНК HBV в образце относительно положительного контроля ПК1 HBV (образца с известной концентрацией ДНК-мишени), который проходит этап экстракции ДНК и ПЦР одновременно с исследуемыми образцами. Определение концентрации ДНК производится в соответствии с заданным значением концентрации ПК1 HBV и полученными значениями Ct для ПК1 HBV и исследуемых образцов. 6.1 Прослеживаемость значения положительного контроля ПК1 HBV Концентрация клонированного фрагмента ДНК HBV в ПК1 составляет HBV 5 1д ± 0,3 1д МЕ/мл. Концентрация ПК1 HBV определяется с помощью установленной производителем методики выполнения измерений относительно стандартного образца предприятия (СОП) с аттестованным значением концентрации. Для определения концентрации СОП применяют набор реагентов для количественного 2 в случае отсутствия доступа к Интернету обратитесь в службу технической поддержки по телефону (495) 374-13-46 для запроса о предоставлении бумажной версии паспорта. 3 Сигнал от флуорофора R6G регистрируется по каналу детекции сигнала от аналогичных флуорофоров Hex и Joe. Amplitech HBV Инструкция в.14.03.23 --- стр. 7 --- определения ДНК вируса гепатита В методом ПЦР в режиме «реального времени», зарегистрированный на территории РФ. 6.2 Характеристика положительного контроля ПК2 HBV Концентрация клонированного фрагмента ДНК HBV в ПК2 HBV составляет 4 1д ± 0,3 1д МЕ/мл. Концентрация ПК2 HBV определяется с помощью установленной производителем методики выполнения измерений относительно ПК1 HBV с аттестованным значением концентрации. 7 НЕОБХОДИМОЕ ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ Для работы с набором требуются следующие оборудование и материалы; • ПЦР-бокс; • центрифуга-вортекс (РУ № ФС № 2005/518); • дозаторы переменного объёма, механические или электронные, с возможностью дозирования от 10 до 200 мкл (РУ № ФСР 2009/05681); • программируемый амплификатор с системой детекции флуоресцентного сигнала в режиме «реального времени» (ДТпрайм (ООО «НПО ДНК-Технология»; РУ № ФСЗ 2011/10229), CFX96 (Bio-Rad Laboratories, Inc.; РУ № ФСЗ 2008/03399), Applied Biosystems QuantStudio 5 (Life Technologies Holdings Pte. Ltd.; РУ № P3H 2019/8446), Rotor-Gene Q (QIAGEN GmbH; РУ № ФСЗ 2010/07595)); • штатив для пробирок объёмом 0,2 и 1,5 мл; • холодильник с камерой, поддерживающей температуру от 2 °С до 8 °С; • пробирки для ПЦР объёмом 0,2 мл с оптически прозрачной крышкой, одноразовые, свободные от ДНКаз, при использовании амплификаторов планшетного типа; • пробирки для ПЦР объёмом 0,2 мл с плоской крышкой, одноразовые, свободные от ДНКаз, при использовании амплификаторов роторного типа; • пробирки объёмом 1,5 мл, одноразовые, свободные от ДНКаз, для приготовления реакционной смеси; • наконечники для дозаторов переменного объёма, с фильтром, объёмом до 100 и 200 мкл, одноразовые, свободные от ДНКаз; • ёмкость для сброса использованных материалов; • перчатки медицинские, одноразовые, неопудренные. 8 МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ Класс потенциального риска применения набора (согласно Приказу Министерства здравоохранения РФ № 4н от 06.06.2012) - 3. Работа должна проводиться в лаборатории, использующей методы амплификации нуклеиновых кислот для исследования материала, с соблюдением требований ГОСТ Р 52905 «Лаборатории медицинские. Требования безопасности», МУ 1.3.2569-09 «Организация работы лабораторий, использующих методы амплификации нуклеиновых кислот при работе с материалом, содержащим микроорганизмы I-IV Amplitech HBV Инструкция в. 14.03.23 6 --- стр. 8 --- групп патогенности», СанПиН 3.3686-21 «Санитарно-эпидемиологические требования по профилактике инфекционных болезней». При работе необходимо всегда выполнять следующие требования: • Применять набор по назначению в соответствии с данной инструкцией. Отклонение от прописанных процедур и порядка действий может привести к получению недостоверных результатов исследования. • К работе с набором допускается только персонал, обученный методам молекулярной диагностики и правилам работы в клинико-диагностической лаборатории с освоением методов безопасной работы с патогенными биологическими агентами в соответствии с СанПиН 3.3686-21 (раздел IV). • Рассматривать исследуемые образцы как инфекционно-опасные, организовывать работу и хранение в соответствии с СанПиН 3.3686-21. • Утилизировать реагенты (использованные, неиспользованные, пришедшие в негодность в связи с истечением срока годности и/или несоблюдением регламентированного режима хранения, транспортирования и применения) в соответствии с требованиями СанПиН 2.1.3684-21 «Санитарно-эпидемиологические требования к содержанию территорий городских и сельских поселений, к водным объектам, питьевой воде и питьевому водоснабжению, атмосферному воздуху, почвам, жилым помещениям, эксплуатации производственных, общественных помещений, организации и проведению санитарно-противоэпидемических (профилактических) мероприятий» к утилизации медицинских отходов класса Г. • Не открывать пробирки с продуктами амплификации в процессе их сбора и утилизации. • Утилизировать внешнюю упаковку набора, инструкцию по применению и краткое руководство в соответствии с требованиями СанПиН 2.1.3684-21 к утилизации медицинских отходов класса А. • Утилизировать биологический материал, а также расходные материалы и инструменты, загрязнённые биологическим материалом, в соответствии с требованиями СанПиН 2.1.3684-21 к утилизации медицинских отходов класса В. • Не использовать набор, если нарушена внутренняя упаковка или внешний вид реагента не соответствует описанию, указанному в таблице 1. • Не использовать набор, если не соблюдались условия транспортирования и хранения согласно инструкции. • Не использовать набор по истечении срока годности. • Использовать отдельный для каждого образца/реагента одноразовый наконечник с фильтром. • Использовать защитную одежду в соответствии с МУ 1.3.2569-09. Все операции проводить только в одноразовых неопудренных перчатках для исключения контакта с организмом человека. • Не есть, не пить и не курить в процессе использования набора. Избегать контакта реагентов с кожей, глазами и слизистой оболочкой. Не глотать. Amplitech HBV Инструкция в. 14.03.23 --- стр. 12 --- 11.4 Провести интерпретацию результатов для исследуемых образцов согласно таблице 7. Таблица 7 Интерпретация результатов для исследуемых образцов Результат Интерпретация Качественное определение ДНК HBV По каналу Суб значение Ct определено не больше граничного®. По каналу R6G значение Ct отсутствует. ДНК HBV в образце не выявлена. По каналу Суб значение Ct определено или отсутствует. По каналу R6G определено значение Ct. В образце выявлена ДНК HBV. По каналу Суб значение Ct отсутствует или определено больше граничного. По каналу R6G значение Ct отсутствует. Невалидный результат Количественное определение ДНК HBV По каналу Суб значение Ct определено не больше ДНК HBV в образце не граничного. По каналу R6G значение Ct отсутствует. выявлена. Рассчитано значение концентрации ДНК HBV, укладывающееся в диапазон измерения набора. ^ ДНК HBV в образце выявлена в концентрации в пределах диапазона измерения набора. Рассчитано значение концентрации ДНК HBV, не укладывающееся в диапазон измерения набора. ДНК HBV в образце выявлена в концентрации вне пределов диапазона измерения набора. По каналу Суб значение Ct отсутствует или определено больше граничного. По каналу R6G значение Ct отсутствует. Невалидный результат Результат исследования считают достоверным, если получены валидные результаты для контролей в соответствии с таблицей 8. Таблица 8 Критерии оценки для контролей Контроль Норма ОК По каналу Суб значение Ct определено не больше граничного®. По каналу R6G значение Ct отсутствует. ПК1 По каналам R6G, Суб значение Ct определено не больше граничного. По каналам R6G, Суб значение Ct определено не больше граничного. ПК2 Рассчитанное значение® концентрации ПК2 укладывается в диапазон ±0,6 1д относительно значения, указанного в кратком руководстве для используемого лота набора. 12ВОЗМОЖНЫЕ ОШИБКИ Рекомендации по устранению возможных ошибок, получаемых для исследуемых образцов и контролей в процессе исследования с помощью набора, указаны в таблице 9. 5 Граничные значения Ct указаны в кратком руководстве по применению набора. ® Концентрация ПК2 рассчитывается по формуле (1), как для исследуемого образца. Amplitech HBV Инструкция в. 14.03.23 11 --- стр. 13 --- Таблица 9 Рекомендации по устранению ошибок Ошибка Возможная причина возникновения Рекомендации по устранению Для ПК1 значение Ct по каналу R6G и/или Суб отсутствует или определено больше граничного^._______ Для ПК2 значение концентрации определено вне заданного диапазона. Для ОК и/или ПК2 по каналу Суб значение Ct отсутствует или определено больше граничного. ______________ Некорректное проведение экстракции ДНК и/или ПЦР. Повторить исследование для всех образцов, начиная с этапа экстракции ДНК. Для ОК по каналу R6G определено значение Ct. Контаминация реагентов или исследуемых образцов продуктами амплификации.______ Предпринять меры по выявлению и ликвидации источника контаминации и повторить исследование для всех образцов, начиная с этапа экстракции ДНК. Невалидный результат для исследуемого образца (значение Ct по каналу Суб отсутствует или определено больше граничного, по каналу R6G значения Ct отсутствуют). Некорректное проведение экстракции ДНК. Наличие в образце ингибиторов ПЦР. Повторить исследование данного исследуемого образца, начиная с этапа экстракции ДНК. В случае воспроизводимого результата рекомендуется повторное взятие и исследование биологического материала. Для исследуемого образца/контролей определено значение порогового цикла, при этом на графике флуоресценции отсутствует характерного экспоненциального подъёма представляет приблизительно линию). ______ участок (график собой прямую Некорректный выбор уровня пороговой линии или параметров расчёта базовой линии. Некорректное проведение ПЦР. Проверить правильность выбранного уровня пороговой линии или параметров расчёта базовой линии. Если результат получен при правильном уровне пороговой линии (базовой линии), требуется повторно провести амплификацию и детекцию для этого образца или, в случае некорректного вида графика для контроля, амплификацию и детекцию для всех исследуемых образцов и контролей____________ 13 КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА 13.1 Контрол и, используемые в процессе исследования Результаты исследования контролей должны соответствовать критериям оценки, указанным в разделе 11. 13.1.1 Отрицательный и положительные контроли Каждая группа экстрагируемых образцов должна включать контрольные образцы: • ОК для выявления контаминации в процессе проведения исследования; • ПК1 HBV для контроля корректного прохождения исследования, а также для количественного определения ДНК HBV; • ПК2 HBV для контроля корректности расчёта концентрации ДНК HBV. 7 Граничные значения Ct указаны в кратком руководстве по применению набора. Amplitech HBV Инструкция в. 14.03.23 12 --- стр. 14 --- 13.1.2 Внутренний контроль Для контроля качества экстракции ДНК и оценки влияния ингибиторов на результаты амплификации используется экзогенный ВК, который добавляется на этапе экстракции ДНК в каждый исследуемый образец и контроли. Отсутствие результатов амплификации для ВК и одновременно для ДНК HBV свидетельствует о присутствии ингибиторов ПЦР в образце или некорректном проведении экстракции ДНК. 13.2 Мониторинг лаборатории на наличие контаминации Для выявления возможной контаминации лаборатории продуктами амплификации, исследуемыми и контрольными образцами рекомендуется раз в месяц исследовать смывы с рабочих поверхностей лабораторной мебели, оборудования и поверхностей помещений согласно процедуре, указанной в МУ 1.3.2569-09. При обнаружении контаминации необходимо провести мероприятия по её устранению согласно указаниям, описанным в МУ 1.3.2569-09. 13.3 Внутренний контроль качества лабораторных исследований Рекомендуется проводить контроль качёства выполнения исследований с использованием панелей контрольных образцов, предназначенных для проведения внутреннего и внешнего контролей качества лабораторных исследований по обнаружению и количественному определению ДНК HBV, либо сравнительным исследованием с использованием зарегистрированных в РФ наборов реагентов для качественного и количественного определения ДНК HBV в биологическом материале методом ПЦР. 14 ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА» 14.1 Предел обнаружения Предел обнаружения набора составляет: -10 ME ДНК HBV в 1 мл исследуемого материала (95 % ДИ; 5,09-12,98 МЕ/мл) при экстракции из 400 мкл плазмы крови; - 5 ME ДНК HBV в 1 мл исследуемого материала (95 % ДИ; 2,82-7,30 МЕ/мл) при экстракции из 800 мкл плазмы крови. 14.2 Диапазон измерения и предел измерения Диапазон измерения набора составляет: - от 30 до 1000000000 ME ДНК HBV в 1 мл исследуемого материала при экстракции из 400 мкл плазмы крови; - от 15 до 1000000000 ME ДНК HBV в 1 мл исследуемого материала при экстракции из 800 мкл плазмы крови. Предел измерения набора совпадает с нижней границей диапазона измерения набора. ^ Заявленные аналитические характеристики набора, кроме аналитической специфичности, проверены с использованием стандартных образцов предприятия, содержащих вектор со специфической последовательностью ДНК HBV. Amplitech HBV Инструкция в. 14.03.23 13 --- стр. 15 --- 14.3 Аналитическая специфичность Аналитическая специфичность набора оценивалась при тестировании микроорганизмов, указанных в таблице 10, и геномной ДНК человека. НК микроорганизмов исследовалась в концентрации не менее 1-10® копий/мл, геномная ДНК человека - в концентрации 1 мкг/мл. По итогам тестирования ложноположительных результатов выявлено не было. Таблица 10 Микроорганизмы, используемые для оценки аналитической специфичности Наименование Наименование Наименование Staphylococcus aureus CMV HIV Staphylococcus epidermidis EBV HHV6 Staphylococcus saprophyticus HAV HSV 1 типа Streptococcus agalactiae HCV HSV 2 типа Streptococcus pyogenes HDV VZV 14.3.1 Потенциально интерферирующие вещества Потенциально интерферирующие вещества (ингибиторы ПЦР) и их максимальные концентрации в образце, для которых оценивалось их ингибирующее влияние на ПЦР, перечислены в таблице 11. Таблица 11 Потенциально интерферирующие вещества Интерферент Активный компонент Тип интерферента Концентрация вещества в образце Обоснование исследованной концентрации Цельная кровь Гемоглобин, холестерин, Триглицериды Эндогенная субстанция 10%v/v Объём в образце в условиях «наихудшего случая» Гепарин Гепарин 0,15 МЕ/мл Концентрация в ЭДТА-К2 ЭДТА-К2 Антикоагулянт 0,5 мМ/мл вакуумной пробирке Лайфферон® Интерферон альфа-2Ь Препараты, 500 МЕ/мл Двукратное nn^RuimPuiH^ Зеффикс® Ламивудин назначаемые при трряпии 0,02 мг/мл максимальной Энтекавир Сандоз® Энтекавир гепатитов 0,1 мг/мл терапевтической концентрации в плазме Наличие возможного ингибирующего эффекта оценивалось путём проведения процедуры экстракции ДHK^ из образцов биологического материала, в которые добавлялись потенциальные интерференты в концентрациях согласно таблице 11 и стандартный образец предприятия, содержащий ДНК HBV в концентрации 20 МЕ/мл. Далее с экстрагированными образцами проводили ПЦР с детекцией в режиме «реального времени» с использованием набора реагентов «Amplitech HBV». По результатам оценки было определено вещество (гепарин), ингибирующее ПЦР, а также показано, что влияние остальных испытанных веществ в концентрациях согласно таблице 11 на ПЦР, проводимую с использованием набора «Amplitech HBV», отсутствует. 9 Экстракция проводилась с использованием набора реагентов «НК-400» (ООО «Амплитек»). Amplitech HBV Инструкция в.14.03.23 14 --- стр. 16 --- 14.4 Прецизионность измерения Коэффициент вариации повторяемости CVn значений концентрации, характеризующий внутрисерийную повторяемость измерений с использованием набора, не превышает 5 %. Коэффициент вариации воспроизводимости CV b значений концентрации, характеризующий межсерийную воспроизводимость измерений с использованием набора, не превышает 10 %. 14.5 Правильность измерения Систематическая погрешность, характеризующая правильность измерения с использованием набора, не превышает 15 %. 14.6 Диагностические характеристики Значения диагностической чувствительности (ДЧ) и диагностической специфичности (ДС) набора с доверительной вероятностью 95 % указаны в таблице 12. - Таблица 12 Диагностические характеристики Объём образца при Количество образцов ДЧ, % ДС, %экстракции, мкл положит. отрицат. 400 100 100 97,0-100 97,0-100 800 100 100 97,0-100 97,0-100 14.7 Корреляция Корреляция экспериментальных значений концентраций, полученных при исследовании образцов биологического материала с использованием набора реагентов «Amplitech HBV» и референтного набора реагентов, представлена на рисунке 1. 9.0 ш S 7.0 ^ 5,0 S >5 4.0 М X X 3.0 0) о. 0) 2.0 -0- 0) Q. 2,0 5.0 6 .0 9,0 Amplitech HBV, Ig МЕ/мл Рисунок 1 Amplitech HBV Инструкция в.14.03.23 15 --- стр. 17 --- 15 УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ, ТРАНСПОРТИРОВАНИЯ И ЭКСПЛУАТАЦИИ НАБОРА 15.1 Срок годности Срок годности набора составляет 12 месяцев от даты изготовления. После вскрытия реагенты использовать до истечения срока годности набора. 15.2 Хранение Набор хранить при температуре от 2 °С до 8 °С в защищённом от солнечного света месте. Реагенты после вскрытия хранить в тех же условиях, что и реагенты до вскрытия. 15.3 Транспортирование Набор транспортировать при температуре от 2 °С до 8 °С всеми видами крытых транспортных средств в термоконтейнерах с хладоэлементами или в авторефрижераторах. 15.4 Эксплуатация Реагенты, входящие в состав набора, готовы к использованию. Повторное применение использованных для исследования реагентов не допускается. Исследование образцов с использованием набора должно проводиться при температуре от 18 °С до 25 °С и относительной влажности воздуха от 25 % до 75 %. 16 ПЕРЕЧЕНЬ СОКРАЩЕНИЙ В настоящей инструкции применены следующие сокращения: Ct - cycle threshold (пороговый цикл) в. - версия ВК - внутренний контроль ДИ - доверительный интервал ДНК - дезоксирибонуклеиновая кислота ДНКаза - дезоксирибонуклеаза ОК - отрицательный контроль ПК - положительный контроль ПЦР - полимеразная цепная реакция 17 ПЕРЕЧЕНЬ ПРИМЕНЯЕМЫХ НАЦИОНАЛЬНЫХ СТАНДАРТОВ ГОСТ Р 51088-2013 Медицинские изделия для диагностики ин витро. Реагенты, наборы реагентов, тест-системы, контрольные материалы, питательные среды. Требования к изделиям и поддерживающей документации ГОСТ Р 51352-2013 Медицинские изделия для диагностики ин витро. Методы испытаний ГОСТ Р ИСО 18113-2-2015 Медицинские изделия для диагностики in vitro. Информация, предоставляемая изготовителем (маркировка). Часть 2. Реагенты для диагностики in vitro для профессионального применения ГОСТ Р ИСО 23640-2015 Изделия медицинские для диагностики in vitro. Оценка стабильности реагентов для диагностики in vitro Amplitech HBV Инструкция в. 14.03.23 16 --- стр. 18 --- го ст Р ИСО 15223-1-2020 Изделия медицинские. Символы, применяемые при маркировании на медицинских изделиях, этикетках и в сопроводительной документации. Часть 1. Основные требования 18 ГАРАНТИИ ПРОИЗВОДИТЕЛЯ Производитель гарантирует соответствие характеристик набора требованиям, указанным в технической и эксплуатационной документации, в течение указанного срока годности при соблюдении условий его транспортирования, хранения и применения. Рекламации на качество набора направлять в адрес производителя: ООО «Амплитек», 109235, Москва, ул. 1-я Курьяновская, д. 34, стр. 8, этаж 1 пом. II ком. 42, тел. (495) 374-13-46, e-mail: support@amplitech.ru . Сообщения о неблагоприятных событиях (инцидентах), возникших при работе с набором и не указанных в данной инструкции, следует направлять производителю по указанному выше адресу и в уполномоченный регуляторный орган согласно действующему законодательству. 19 ТЕХНИЧЕСКАЯ ПОДДЕРЖКА Консультацию по вопросам по работе с набором и его качеству можно получить по контактам, указанным на официальном сайте производителя: www.amplitech.ru . 20 СИМВОЛЫ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ В ДОКУМЕНТАЦИИ ПРОИЗВОДИТЕЛЯ У Изготовитель |REF| Номер по каталогу (г£] IVD Ш V Дата изготовления Медицинское изделие для диагностики in vitro Обратитесь к инструкции по применению Содержимого достаточно для проведения п тестов LOT ' Ж Код серии Использовать до Предел температуры Не допускать воздействия солнечного света Id Общество с ограниченной ответственностью «Амплитек» (ООО «Амплитек»), Россия, 109235, Москва, ул. 1-я Курьяновская, д. 34, стр. 8, этаж 1 пом. II ком. 42 тел. (495) 374-13-46, www.amplitech.ru , e-mail: suppoiKgampiitech.ru Amplitech HBV Инструкция B.14. 03.23 17 --- стр. 19 --- Лист регистрации изменений Amplitech HBV Инструкция 18 --- стр. 24 --- Канал детекции R6G Суб Мишень ДНК HBV днквк При наличии значений Ct по каналу R6G рассчитать концентрацию ДНК HBV в международных единицах измерения в одном миллилитре (МВ/мл) согласно формуле (1). Сднк Спк1 HBV 2 (^ ct - да в к ) (1) где Сднкнву - концентрация ДНК HBV, МЕ/мл; Спк1 - концентрация ДНК HBV в ПК1, МЕ/мл; ACt - разность между значением порогового цикла (Ct) для исследуемого образца и значением Ct для ПК1 по каналу R6G; ACt ВК- разность между значением Ct для исследуемого образца и значением Ct для ПК1 по каналу Суб. Значения концентрации контролей указаны в таблице, приведённой ниже. Контроль ПК1 нву ПК2 HBV” Значение концентрации МЕ/мл ХХХЮОС ХХХХХХ 1д (МЕ/мл) Х,ХХ Х.ХХ Провести интерпретацию результатов для исследуёмых образцов согласно таблицам, приведённым ниже. Значение R6G отсутствует определено Качественное определение ДНК HBV порогового цикла (Ct) по каналу . . . . . . . . . .Г " " _Су5 ^’зз . отсутствует определено или отсутствует > 33 или отсутствует Интерпретация ДНК НВУ в образце не выявлена. В образце выявлена ДНК HBV. Невалидный результат Количественное определение ДНК НВУ Результат 1о каналу Суб значение Ct определено не больше 33. По каналу R6G значение Ct отсутствует. Рассчитано значение концентрации ДНК HBV, укладь1вающееся в диапазон измерения набора. ^Рассчитано значение концентрации ДНК HBV, не укладывающееся в диапазон измерения набора. По каналу Суб значение Ct отсутствует или определено больше 33. По каналу R6G значение Ct отсутствует. ____________Интерпретация ДНК HBV в образце не выявлена. ДНК HBV в образце выявлена в концентрации в пределах диапазона измерения набора.___ ДНК HBV в образце выявлена в концентрации | вне пределов диапазона измерения набора.__| 1 Невалидный результат | Результат исследования считают достоверным, если получены валидные результаты для контролей в соответствии с таблицей, приведённой ниже. Контроль Значение порогового РАМ » цикла (Ct) по каналу Суб Значение концентрации, 1д (МЕ/мл) о к I отсутствует <33 - ПК1 i £28 _________ ПК22 ^ Г ..... <31 <33 ^ 33 Х,ХХ±0,б Рекомендации по устранению возможных ошибок в процессе проведения исследования указаны в таблице, приведённой ниже. Концентрация ПК2 рассчитывается по формуле (1), как для исследуемого образца. Tiplitech HBV КР в.14.03.23 --- стр. 25 --- Ошибка Для ПК1 значение Ct по каналу R6G и/или Су5 отсутствует или определено больше граничного. Для ПК2 значение концентрации определено вне заданного диапазона. _ Для ОК и/или ПК2 по каналу Су5 значение Ct отсутствует или определено больше граничного. Для ОК по каналу определено значение Ct. R6G Невалидный результат для исследуемого образца (значение Dt по каналу Су5 отсутствует или определено больше граничного, [Ю каналу R6G значение Ct отсутствует). Для исследуемого образца/контролей определено значение порогового цикла, при рм на графике флуоресценции ■сутствует участок характерного экспоненциального подъёма (график представляет собой приблизительно прямую линию). Возможная причина возникновения Некорректное ,проведение экстракции ДНК и/или ПЦР. Контаминация реагентов или исследуемых образцов продуктами амплификации. Некорректное проведение экстракции ДНК. Наличие в образце ингибиторов ПЦР. Некорректный выбор уровня пороговой линии или параметров расчёта базовой линии. ^ Некорректное проведение ПЦР. Рекомендации по устранению Повторить исследование для всех образцов, начиная с этапа экстракции ДНК. Предпринять меры по выявлению и ликвидации источника контаминации и повторить исследование для всех образцов, начиная с этапа экстракции ДНК. Повторить исследование данного исследуемого образца, начиная с этапа экстракции ДНК. В случае воспроизводимого результата рекомендуется повторное взятие и исследование биологического материала. Проверить правильность выбранного уровня пороговой линии или параметров расчёта базовой линии. Если результат получен при правильном уровне пороговой линии (базовой линии), требуется повторно провести амплификацию и детекцию для этого образца или, в случае некорректного вида графика для контроля, амплификацию и детекцию для всех исследуемых образцов и контролей. mplitech HBV КР в.14.03.23 --- стр. 26 --- Лист регистрации изменений Изм. Номера страниц Всего страниц в документе Номер документа Подпись Датаизменён ных заменён ных новых аннулиро ванных У ■Scz. — — / - — 1 1 - mplitech HBV КР --- стр. 27 --- прошито, пронумеровано и скреплено печатью ^ Генеральный дире 1стор ООО «Амплит^» Подпись --- стр. 28 --- ООО «Амплитек», Россия, 109235. Москва, ул. 1-я Курьяновская, д. 34. стр. 8, этаж 1 пом. II юм. 42 тел, (495) 374-13-46, e-mail: support@amplrtech.ru А М П Л И Т Е К К О П И Я ! B E R t-IA ПАСПОРТ № 433-23 Amplitech HBV Набор реагентов для качественного и количественного определения ДНК HBV методом ПЦР с детекцией в режиме «реального времени» (Amplitech НВ\0 по ТУ 21.20.23-023-19926214-2023 BEFР016-0 LOT0433 d] 2023-03-23 2024-03-23 Условия транспор- при температуре от 2 *С до 8 *С всеми видами крытых транспортных средств в термоконтейнерах тирования: с хладоэлементами или в авторефрижераторах. Условия хранения: при температуре от 2 *С до 8 *С в защищённом от солнечного света месте. Контроль качества набора проведён по ТУ 21.20.23-023-19926214-2023. Состав набора и внешний вид компонентов Лот ком- Норма Результат понента наименование количество внешний вид контроля 00004 Смесь-1 HBV 0,96 мл X1 пробирка Прозрачная жидкость от бесцветного до светло-лилового цвета Соответствует 00004 Смесь-2 G 0,96 мл X1 пробирка Прозрачная бесцветная жидкость Соответствует 00004 ВКО 0,96 мл X 1 пробирка Прозрачная бесцветная жидкость Соответствует 00004 ОК 4,8 мл X 2 пробирки Прозрачная бесцветная жидкость Соответствует 00004 ПК1 HBV 4,8 мл X 2 пробирки Прозрачная бесцветная жидкость Соответствует 00004 ПК2 HBV 4,8 мл X 2 пробирки Прозрачная бесцветная жидкость Соответствует Инструкция по применению 1 USX. В бумажном виде и электронном виде по адресу; http://www.amplitech.ru/resources/ Соответствует - Краткое руководство 1 шт. В бумажном виде Соответствует - Паспорт 1 шт. В электронном виде по адресу: http;//www. amplitech. ru/quaiity/ Соответствует Упаковка набора Показатель Норма Результат контроля Вид первичной и вторичной упаковки Соответствует требованиям ТУ. Соответствует Отсутствие видимых дефектов Отсутствие дефектов Соответствует Маркировка набора Показатель Норма Результат контроля Наличие информации на внутренней упаковке компонентов набора и внешней упаковке набора в соответствии с требованиями ТУ Информация соответствует требованиям ТУ. Соответствует Функциональные характеристики набора Показатель Норма Результат контроля Предел обнаружения Выявление ДНК HBV в концентрации 5 МЕ/мл при экстракции из 800 мкл образца ДНК HBV обнаружена. Соответствует Валидность результатов тестирования для исследуемых образцов Последовательность ВК обнаружена. Соответствует Валидность результатов тестирования для контролей исследования (ОК, ПК1, ПК2) Результаты соответствуют критериям оценки, указанным в инструкции по применению набора. Соответствует --- стр. 29 --- Показатель Норма Результат контроля Предел измерения Количественное определение ДНК HBV в концентрации'* 30 МЕ/мл при экстракции из 800 мкл образца Полученное расчётное значение концентрации ДНК HBV в диапазоне от 15 до 60 МЕ/мл. Соответствует Количественное определение ДНК HBV в концентрации 50000 МЕ/мл при экстракции из 800 мкл образца Полученное расчётное значение концентрации ДНК HBV в диапазоне от 25000 до 100000 МЕ/мл. Соответствует Валидность результатов тестирования для исследуемых образцов Последовательность ВК обнаружена. Соответствует Валидность результатов тестирования для контролей исследования (ОК, ПК1, ПК2) Результаты соответствуют критериям оценки, указанным в инструкции по применению набора. Соответствует Заключение: Набор указанного лота соответствует требованиям ТУ 21.20.23-023-19926214-2023. Дата выдачи паспорта; 23.03.2023 Руководитель ОКК, Романенкова Е.С. ^ Нижняя граница диапазона измерения набора плюс 0,3 1д.