Набор реагентов для количественного определения ДНК Ureaplasma parvum, Ureaplasma urealyticum, Mycoplasma hominis в биологическом материале человека методом ПЦР с детекцией в режиме "реального времени" (Amplitech UP/UU/MH) по ТУ 21.20.23-022-19926214-2023 — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 2 ---
АМПЛИТЕК
Amplitech UP/UU/MH
Набор реагентов для количественного определения ДНК
Ureaplasma рап/ит, Ureaplasma urealyticum, Mycoplasma
hominis в биологическом материале человека методом
ПЦР с детекцией в режиме «реального времени»
(Amplitech UP/UU/MH) по ТУ 21.20.23-022-19926214-2023
ИНСТРУКЦИЯ по ПРИМЕНЕНИЮ
IVD REF Р014-0 96
--- стр. 3 ---
u
ВВЕДЕНИЕ...................................................................................................................................3
1 НАЗНАЧЕНИЕ........................................................................................................................4
2 ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ...................................................................................................4
3 ПРОТИВОПОКАЗАНИЯ К ПРИМЕНЕНИЮ .....................................................................4
4 РИСКИ ПРИМЕНЕНИЯ, ПОБОЧНЫЕ ЭФФЕКТЫ..................................................... 4
5 СОСТАВ.......................................................................................................................... 4
6 ПРИНЦИП МЕТОДА.............................................................................................................5
6.1 Прослеживаемость значений положительного контроля ПК U ..........................6
7 НЕОБХОДИМОЕ ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ....................................................6
8 МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ........................................................................................6
9 ИССЛЕДУЕМЫЙ МАТЕРИАЛ .............................................................................................8
10 ПРОВЕДЕНИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ.................................................................................9
10.1 Экстракция ДНК....................................................................................................... 9
10.2 Подготовка к проведению ПЦР .............................................................................10
10.3 Проведение ПЦР и детекции.................................................................................10
11 УЧЁТ И ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ ...............................................................11
12 ВОЗМОЖНЫЕ ОШИБКИ................................................................................................12
13 КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА....................................................................................................13
13.1 Контроли, используемые в процессе исследования ........................................13
13.2 Мониторинг лаборатории на наличие контаминации .......................................14
13.3 Внутренний контроль качества лабораторных исследований........................14
14 ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА................................................14
14.1 Предел обнаружения...............................................................................................14
14.2 Диапазон измерения и предел измерения..........................................................14
14.3 Аналитическая специфичность..............................................................................14
14.4 Прецизионность измерения...................................................................................16
14.5 Правильность измерения.......................................................................................16
14.6 Диагностическая специфичность..........................................................................16
14.7 Корреляция................................................................................................................16
15 УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ, ТРАНСПОРТИРОВАНИЯ И ЭКСПЛУАТАЦИИ НАБОРА
.............................................................................................................................................17
15.1 Срок годности............................................................................................................17
15.2 Хранение....................................................................................................................17
15.3 Транспортирование.................................................................................................17
15.4 Эксплуатация............................................................................................................17
16 ПЕРЕЧЕНЬ СОКРАЩЕНИЙ...........................................................................................18
17 БИБЛИОГРАФИЯ.............................................................................................................18
18 ПЕРЕЧЕНЬ ПРИМЕНЯЕМЫХ НАЦИОНАЛЬНЫХ СТАНДАРТОВ .........................18
19 ГАРАНТИИ ПРОИЗВОДИТЕЛЯ ................ 19
20 ТЕХНИЧЕСКАЯ ПОДДЕРЖКА......................................................................................19
21 СИМВОЛЫ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ В ДОКУМЕНТАЦИИ ПРОИЗВОДИТЕЛЯ ..........19
СОДЕРЖАНИЕ
Amplitech UP/UU/MH Инструкция в. 12.04.23
--- стр. 4 ---
м
1. Настоящая инструкция по применению версии 12.04.23 распространяется на
медицинское изделие «Набор реагентов для количественного определения ДНК
Ureaplasma parvum, Ureaplasma urealyticum, Mycoplasma hominis в биологическом
материале человека методом ПЦР с детекцией в режиме «реального времени»
(Amplitech UP/UU/MH) по ТУ 21.20.23-022-19926214-2023» (далее - набор).
Краткое наименование набора: Amplitech UP/UU/MH.
Набор следует применять в соответствии с действующей версией инструщии по
применению. Для удобства работы в лаборатории допускается использовать
действующую версию краткого руководства по применению набора.
2. Условно-патогенные микоплазмы (Ureaplasma parvum, Ureaplasma urealyticum.
Mycoplasma hominis) могут встречаться в урогенитальном тракте в условиях нормы.
Для данных микроорганизмов качественный результат выявления не является
информативным. Набор реагентов «Amplitech UP/UU/MH» позволяет
дифференцированно выявлять ДНК условно-патогенных микоплазм в
количественном формате с определением превышения порогов клинической
значимости их концентраций.
ВВЕДЕНИЕ
Amplitech UP/UU/MH Инструкция в. 12.04.23
--- стр. 5 ---
4 )
1 НАЗНАЧЕНИЕ
Набор предназначен для количественного определения ДНК Ureaplasma parvum,
Ureaplasma urealyticum, Mycoplasma hominis в биологическом материале человека
методом ПЦР с гибридизационно-флуоресцентной детекцией в режиме «реального
времени». Материалом для проведения ПЦР-исследования служат образцы ДНК,
экстрагированной из следующих видов биологического материала:
• мазки со слизистой оболочки влагалища;
• соскобы эпителия со слизистой оболочки цервикального канала, уретры;
• моча (осадок первой порции утренней мочи).
Набор предназначен для лабораторной диагностики in vitro (выявление й
количественное определение U. parvum, U. urealyticum, М. hominis). Применение
набора не зависит от популяционных и демографических аспектов.
2 ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ
Набор предназначен для применения в клинической лабораторной диагностике
для исследования биологического материала, полученного от женщин с подозрением
на наличие воспалительных инфекционных заболеваний мочеполовой системы.
Отрицательные результаты исследования с помощью набора не исключают
возможность инфицирования U. parvum, U. urealyticum, М. hominis и не должны
использоваться в качестве единственной основы для принятия решения о лечении
пациента. Отрицательные результаты исследования должны сочетаться с
клиническими наблюдениями, историей болезни и эпидемиологической
информацией.
Набор может применяться в клинико-диагностических лабораториях.
3 ПРОТИВОПОКАЗАНИЯ К ПРИМЕНЕНИЮ
Противопоказания к применению набора отсутствуют.
4 РИСКИ ПРИМЕНЕНИЯ, ПОБОЧНЫЕ ЭФФЕКТЫ
При применении набора по назначению, в соответствии с данной инструкцией
риски и побочные эффекты отсутствуют.
5 СОСТАВ
Состав набора^ указан в таблице 1.
Таблица 1
Состав набора
Компонент Номинальный
объём, мл Кол-во Внешний вид
Смесь-1 и/МН
(Буферный раствор со специфическими
праймерами, флуоресцентно-мечеными
зондами и дНТФ)
0,48 1 пробирка Прозрачная жидкость от светло-
розового до фиолетового цвета
Смесь-2 В
(Буферный раствор с сульфатом магния,
термостабильной ДНК-полимеразой)
0,48 1 пробирка Прозрачная бесцветная
жидкость
^ Набор упакован в полиэтиленовый пакет с застёжкой Zip-Lock.
Amplitech UP/UU/MH Инструкция в. 12.04.23
--- стр. 6 ---
Компонент Номинальный
объём, мл Кол-во Внешний вид
вки
(Раствор, содержащий генно-инженерную
конструкцию с ДНК внутреннего контроля)
0,96 1 пробирка Прозрачная бесцветная
жидкость
ОК
(Буферный раствор) 0,8 1 пробирка Прозрачная бесцветная
жидкость
ПК и
(Раствор, содержащий генно-инженерные
«шструкции с фрапиентами ДНК
эыяэляемых микроорганизмов)
0,8 1 пробирка Прозрачная бесцветная
жидкость
Инструкция по применению - 1 шт.
В бумажном виде и электроннсш
виде по адресу:
http:/y WWW. amplitech. шУгезоигсез/
Краткое руководство - 1 шт. В бумажном виде
Паспорт - 1 шт. В электронном внде^ по адресу:
http: //WWW. amplitech. ru/qualityy
i i
Набор рассчитан на проведение исследования 96 образцов, включая контрояи,
6 ПРИНЦИПМЕТОДА
Исследование с помощью набора проводится методом ПЦР с гибридизационно-
флуоресцентной детекцией продуктов амплификации в режиме «реального
времени». Детекция продуктов ПЦР и раздельное выявление мишеней (ДНК
выявляемых микроорганизмов и внутреннего контроля (ВК)) обеспечивается
применением в реакционной смеси для ПЦР флуоресцентно-меченых
олигонуклеотидов, сигналы от которых регистрируются по четырём различным
каналам флуоресцентной детекции (см. таблицу 2).
Таблица 2
Каналы детекции мишеней
Канал детекции сигнала
от флуорофора Мишень Область амплификации
РАМ ДНК и. parvum UreC gene
R603 ДНК и. urealyticum UreC gene
ROX ДНК М. hominis 16S рРНК
Су5 ДНКВК Искусственно синтезированная
последовательность
Линейная зависимость между исходной концентрацией ДНК-мишени в
исследуемом образце и циклом начала экспоненциального увеличения
флуоресцентного сигнала (порогового цикла, Ct) позволяет определять концентрацию
ДНК выявляемых мишеней в образце относительно положительного контроля ПК U
(образца с известной концентрацией ДНК-мишеней), который проходит этап
экстракции ДНК и ПЦР одновременно с исследуемыми образцами. Определение
концентрации ДНК производится в соответствии с заданными значениями
концентраций ПК U и полученными значениями Ct для ПК U и исследуемых образцов.
2 в случае отсутствия доступа к Интернету обратитесь в службу технической поддержки по телефону
(495) 374-13-46 для запроса о предоставлении бумажной версии паспорта.
3 Сигнал от флуорофора R6G регистрируется по каналу детекции сигнала от аналогичных
флуорофоров Hex и Joe.
Amplitech UP/UU/MH Инструкция в.12.04.23
--- стр. 7 ---
4»
6.1 Прослеживаемость значений положительного контроля ПК U
Концентрация клонированных фрагментов ДНК всех выявляемых микроорганизмов
в ПК и составляет 5 1д ± 0,5 1д копий/мл. Концентрация определяется с помощью
установленной производителем методики выполнения измерений на основе метода
лимитирующих разведений [1,2].
7 НЕОБХОДИМОЕ ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ
Для работы с набором требуются следующие оборудование и материалы:
• ПЦР-бокс;
• центрифуга-вортекс (РУ № ФС № 2005/518);
• дозаторы переменного объёма, механические или электронные, с возможностью
дозирования от 5 до 200 мкл (РУ № ФСР 2009/05681);
• программируемый амплификатор с системой детекции флуоресцен'шого
сигнала в режиме «реального времени» (ДТпрайм (ООО «НПО ДНК-Технология»; РУ
№ ФСЗ 2011/10229), CFX96 (Bio-Rad Laboratories, Inc.; РУ № ФСЗ 2008/03399), Applied
Biosystems QuantStudio 5 (Life Technologies Holdings Pte. Ltd.; РУ № P3H 2019/8446),
Rotor-Gene Q (QIAGEN GmbH; РУ № ФСЗ 2010/07595));
• штатив для пробирок объёмом 0,2 и 1,5 мл;
• холодильник с камерой, поддерживающей температуру от 2 °С до 8 ""С;
• пробирки для ПЦР объёмом 0,2 мл с оптически прозрачной крышкой,
одноразовые, свободные от ДНКаз, при использовании амплификаторов планшетного
типа;
• пробирки для ПЦР объёмом 0,2 мл с плоской крышкой, одноразовые, свободные
от ДНКаз, при использовании амплификаторов роторного типа;
• пробирки объёмом 1,5 мл, одноразовые, свободные от ДНКаз, для
приготовления реакционной смеси;
• наконечники для дозаторов переменного объёма, с фильтром, объёмом до 10,
100 и 200 мкл, одноразовые, свободные от ДНКаз;
• ёмкость для сброса использованных материалов;
• перчатки медицинские, одноразовые, неопудренные.
8 МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
Класс потенциального риска применения набора (согласно Приказу Министерства
здравоохранения РФ № 4н от 06.06.2012) - 26.
Работа должна проводиться в лаборатории, использующей методы амплификации
нуклеиновых кислот для исследования материала, с соблюдением требований ГОСТ
Р 52905 «Лаборатории медицинские. Требования безопасности», МУ 1.3.2569-09
«Организация работы лабораторий, использующих методы амплификации
нуклеиновых кислот при работе с материалом, содержащим микроорганизмы I-IV
групп патогенности», СанПиН 3.3686-21 «Санитарно-эпидемиологические требования
по профилактике инфекционных болезней».
При работе необходимо всегда выполнять следующие требования:
Amplitech UP/UU/MH Инструкция в. 12.04.23
--- стр. 13 ---
4
9
11.5 Провести интерпретацию результатов для исследуемых образцов согласно
таблице 9.
Таблица 9
Интерпретация результатов для исследуемых образцов
Результат Интерпретация
По каналу Суб значение Ct определено не больше
граничного®.
По каналам РАМ, R6G, ROX значения Ct отсутствуют.
ДНК и. parvum, U. urBafyticum,
М. hominis в образце не выявлены.
Рассчитано значение концентрации ДНК возбудителя, возбудителя в образце выявлена
укладывающееся в диапазон измерения набора. ® концентрации в пределах диапазона
_______________________________[________________________измерения набора.__________________
Рассчитано значение концентрации ДНК возбудителя, не возбудителя в образце выявлена
укладывающееся в диапазон измерения набора. ® концентрации вне пределов
^ диапазона измерения набора. ________
По каналу Су5 значение Ct отсутствует или определено
больше граничного. Невалидный результат
По каналам РАМ, R6G, ROX значения Ct отсутствуют. ____________________________
Клинически значимой является концентрация ДНК U. parvumJ U. ureaiytfcumi
М. hominis свыше 10000 ГЭ/мл.
Результат исследования считают достоверным, если получены валидные
результаты для контролей в соответствии с таблицей 10.
Таблица 10
Критерии оценки для контролей
Контроль Норма
ОК По каналу Суб значение Ct определено не больше граничного®. По
каналам РАМ, R6G, ROX значение Ct отсутствует.
ПК и По каналам РАМ, R6G, ROX, Суб значение Ct определено
не больше граничного.
12 ВОЗМОЖНЫЕ ОШИБКИ
Рекомендации по устранению возможных ошибок, получаемых для исследуемых
образцов и контролей в процессе исследования с помощью набора, указаны в
таблице 11.
Таблица 11
Рекомендации по устранению ошибок
Ошибка Возможная причина
возникновения Рекомендации по устранению
Для ПК значение Ct по
каналу РАМ и/или R6G
и/или ROX и/или Су5
отсутствует или
определено больше
граничного^._____________
Некорректное
проведение экстракции
ДНК и/или ПЦР.
Повторить исследование для всех
образцов, начиная с этапа
экстракции ДНК.
Для ОК по каналу Суб
значение Ct отсутствует
или определено больше
граничного. ______________
Некорректное
проведение экстракции
ДНК и/или ПЦР.
Повторить исследование для всех
образцов, начиная с этапа
экстракции ДНК.
® Граничные значения Ct указаны в кратком руководстве по применению набора.
Amplitech UP/UU/MH Инструкция в. 12.04.23 12
--- стр. 14 ---
Ошибка Возможная причина
возникновения Рекомендации по устранению
Для ОК по каналу РАМ
и/или R6G и/или ROX
определено значение Ct.
Контаминация реагентов
или исследуемых
образцов продуктами
амплификации.
Предпринять меры по выявлению
и ликвидации источника
контаминации и повторить
исследование для всех образцов,
начиная с этапа экстракции ДНК.
Невалидный результат
для исследуемого образца
(значение Ct по каналу Су5
отсутствует или
определено больше
граничного, по каналам
РАМ, R6G, ROX значения
Ct отсутствуют).
_________
Некорректное
проведение экстракции
ДНК.
Наличие в образце
ингибиторов ПЦР.
Повторить исследование данного
исследуемого образца, начиная с
этапа экстракции ДНК. В случае
воспроизводимого результата
рекомендуется повторное взятие и
исследование биологического
материала.
Для исследуемого
образца/контролей
определено значение
порогового цикла, при
этом на графике
флуоресценции
отсутствует участок
характерного экспонен
циального подъёма
(график представляет
собой приблизительно
прямую линию).
Некорректный выбор
уровня пороговой линии
или параметров расчёта
базовой линии.
Некорректное
проведение ПЦР.
Проверить правильность
выбранного уровня пороговой
линии или параметзх>а рас>^та
базовой линии. Если результат
получен при правильном уровне
пороговой линии (базовой линии),
требуется повторно провести
амплификацию и детекцию для
этого образца или, в случае
некорректного вида графика для
контроля, амплификацию и
детекцию для всех исследуемых
образцов и контролей
___________
13 КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
13.1 Контроля, используемые в процессе исследования
Результаты исследования контролей должны соответствовать критериям оценки,
указанным в разделе 11.
13.1.1 Отрицательный и положительный контроля
Каждая группа экстрагируемых образцов должна включать контрольные образцы;
• ОКдля выявления контаминации в процессе проведения исследования;
• ПК и для контроля корректного прохождения исследования, а также для
количественного определения ДНК выявляемых с помощью набора микроорганизмов
в биологическом материале человека.
13.1.2 Внутренний контроль
Для контроля качества экстракции ДНК и оценки влияния ингибиторов на
результаты амплификации используется экзогенный ВК, который добавляется на
этапе экстракции ДНК в каждый исследуемый образец и контроли. Отсутствие
результатов амплификации для ВК и одновременно для выявляемых
микроорганизмов свидетельствует о присутствии ингибиторов ПЦР в образце или
некорректном проведении экстракции ДНК.
Amplitech UP/UU/MH Инструкция в. 12.04.23 13
--- стр. 15 ---
13.2 Мониторинг лаборатории на наличие контаминации
Для выявления возможной контаминации лаборатории продуктами амплификации,
исследуемыми и контрольными образцами рекомендуется раз в месяц исследовать
смывы с рабочих поверхностей лабораторной мебели, оборудования и поверхностей
помещений согласно процедуре, указанной в МУ 1.3.2569-09. При обнаружении
контаминации необходимо провести мероприятия по её устранению согласно
указаниям, описанным в МУ 1.3.2569-09.
13.3 Внутренний контроль качества лабораторных исследований
Рекомендуется проводить контроль качества выполнения исследований с
использованием панелей контрольных образцов, предназначенных для проведения
внутреннего и внешнего контролей качества лабораторных исследований по
количественному определению ДНК U. рап/ит, U. urealyticurr), М. hominis, либо
сравнительным исследованием с использованием зарегистрированных в РФ наборов
реагентов для количественного определения ДНК выявляемых микроорганизмов в
биологическом материале методом ПЦР.
14 ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА®
14.1 Предел обнаружения
Предел обнаружения набора указан в таблице 12.
Предел обнаружения
Таблица 12
Мишень Предел обнаружения, ГЭ/мл 95 %-ый ДИ, ГЭ/мл
ДНК и, рап /ит 1000 440-1919
ДНК и. urealyticum 1000 557-1785
ДНК М. hom inis 500 214-607
14.2 Диапазон измерения и предел измерения
Диапазон измерения и предел измерения набора указаны в таблице 13.
Таблица 13
Диапазон измерения и предел измерения
Мишень Диапазон измерения, ГЭ/мл Предел измерения, ГЭ/мл
ДНК и . рап/ит ЗЮ=-5Ю® 3-103
ДНК и . urealyticum ЗЮ^-5-10® 3 103
ДНК М. hom inis 1,5 103-2,5-108 1,5-103
14.3 Аналитическая специфичность
Аналитическая специфичность набора оценивалась при тестировании
микроорганизмов, указанных в таблице 14, и геномной ДНК человека. ДНК
9 Заявленные аналитические характеристики набора, кроме аналитической специфичности, проверены
с использованием стандартных образцов предприятия, содержащих векторы со специфическими
последовательностями ДНК выявляемых микроорганизмов.
Amplitech UP/UU/MH Инструкция в. 12.04.23 14
--- стр. 16 ---
микроорганизмов исследовалась в концентрации не менее 1-10® копий/мл, геномная
ДНК человека - в концентрации 1 мкг/мл. По итогам тестирования
ложноположительных результатов выявлено не было.
Таблица 14
Микроорганизмы, используемые для оценки аналитической специфичности
Наименование Наименование Наименование
Candida albicans Neisseria flava Ureaplasma parvum
Chlamydia trachomatis Neisseria gonorrhoeae Ureaplasma urealyticum
Gardnerelfa vaginalis Staphylococcus aureus CMV
Enterococcus faecium Staphylococcus epidermidis HSV 1 типа
Escherichia coli Staphylococcus saprophyticus HSV 2 типа
Lactobacillus spp. Toxoplasma gondii HPV
Mycoplasma hominis Treponema pallidum -
Mycc^lasma genitalium Trichomonas vaginalis -
14.3.1 Потенциально интерферирующие вещества
Потенциально интерферирующие вещества (ингибиторы ПЦР) и их максимальные
концентрации в образце, для которых оценивалось их ингибирующее влияние на ПЦР,
перечислены в таблице 15.
Таблица 15
Потенциально интерферирующие вещества
Исследуемый
материал Интерферент Активный
компонент
Тип
интерфе-
рента
Концентрация
вещества в
образце
Обоснование
исследованной
концентрации
Мазки со слизи-
стой оболочки
влагалища,
соскобы эпителия
со слизистых
оболочек
цервикального
канала, уретры
Цельная кровь -
Эндогенная
5 % V/V
Объем в
Муцин Очищенный
белок
” суостанцил
150 мкг/мл
образце в
условиях
«наихудшего
случая»
Моча (осадок Альбумин Белок Эндогенная
субстанция 500 мг/л
первой порции) Азитромицин Азитромицин Антибиотик-
азалид 1 мг/мл
Наличие возможного ингибирующего эффекта оценивалось путём проведения
процедуры экстракции из модельных образцов биологического материала, в
которые добавлялись потенциальные интерференты в концентрациях согласно
таблице 15 и стандартные образцы предприятия, содержащие ДНК выявляемых
микроорганизмов. Далее с экстрагированными образцами проводили ПЦР с
детекцией в режиме «реального времени» с использованием набора реагентов
«Amplitech UP/UU/МН».
В результате испытаний подтверждено, что влияние исследованных потенциально
интерферирующих веществ на ПЦР, проводимую с использованием набора
«Amplitech UP/UU/МН», отсутствует.
Экстракция проводилась с использованием набора реагентов «ДНК-100» (ООО «Амплитек»).
Amplitech UP/UU/МН Инструкция в. 12.04.23 15
--- стр. 18 ---
Рисунок 1
15 УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ, ТРАНСПОРТИРОВАНИЯ И ЭКСПЛУАТАЦИИ
НАБОРА
15.1 Срок годности
Срок годности набора составляет 12 месяцев от даты изготовления.
После вскрытия реагенты использовать до истечения срока годности набора.
15.2 Хранение
Набор хранить при температуре от 2 °С до 8 °С в защищённом от солнечного света
месте.
Реагенты после вскрытия хранить в тех же условиях, что и реагенты до вскрытия.
15.3 Транспортирование
Набор транспортировать при температуре от 2 °С до 8 °С всеми видами крытых
транспортных средств в термоконтейнерах с хладоэлементами или в
авторефрижераторах.
15.4 Эксплуатация
Реагенты, входящие в состав набора, готовы к использованию.
Повторное применение использованных для исследования реагентов не
допускается.
Исследование образцов с использованием набора должно проводиться при
температуре от 18 °С до 25 °С и относительной влажности воздуха от 25 % до 75 %.
Amplitech UP/UU/MH Инструкция в. 12.04.23 17
--- стр. 19 ---
16 ПЕРЕЧЕНЬ СОКРАЩЕНИЙ
В настоящей инструкции применены следующие сокращения:
ct - cycle threshold (пороговый цикл)
вк - внутренний контроль
ди - доверительный интервал
ДНК - дезоксирибонуклеиновая кислота
ДНКаза - дезоксирибонуклеаза
ОК - отрицательный контроль
ПК - положительный контроль
ПЦР - полимеразная цепная реакция
17 БИБЛИОГРАФИЯ
1. Taswe!! С. Limiting dilution assays for the determination of immuncxxHnpelent oei
frequencies//J. Immunology. - 1981. - Vol. 126. - P. 1614-1619.
2. Allen G. Rodrigo, Paul C. Goracke, Kiarash Rowhanian, James I. Mullins. Quantitation
of target molecules from polymerase chain reaction-based limiting dilution assays //AIDS
research and human retroviruses. - 1997. - Vol. 13 (9). - P. 737-742.
18 ПЕРЕЧЕНЬ ПРИМЕНЯЕМЫХ НАЦИОНАЛЬНЫХ СТАНДАРТОВ
ГОСТ Р 51088-2013 Медицинские изделия для диагностики ин витро. Реагенты,
наборы реагентов, тест-системы, контрольные материалы, питательные среды.
Требования к изделиям и поддерживающей документации
ГОСТ Р 51352-2013 Медицинские изделия для диагностики ин витро. Методы
испытаний
ГОСТ Р ИСО 18113-2-2015 Медицинские изделия для диагностики in vfrro.
Информация, предоставляемая изготовителем (маркировка). Часть 2. Реагенты для
диагностики in vitro для профессионального применения
ГОСТ Р ИСО 23640-2015 Изделия медицинские для диагностики in vitro. Оценка
стабильности реагентов для диагностики in vitro
ГОСТ Р ИСО 15223-1-2020 Изделия медицинские. Символы, применяемые при
маркировании на медицинских изделиях, этикетках и в сопроводительной
документации. Часть 1. Основные требования
Amplitech UP/UU/MH Инструкция в. 12.04.23 18
--- стр. 20 ---
19 ГАРАНТИИ ПРОИЗВОДИТЕЛЯ
Производитель гарантирует соответствие характеристик набора требованиям,
указанным в технической и эксплуатационной документации, в течение указанного
срока годности при соблюдении условий его транспортирования, хранения и
применения.
Рекламации на качество набора направлять в адрес производителя; ООО
«Амплитек», 109235, Москва, ул. 1-я Курьяновская, д. 34, стр. 8, этаж 1 пом. И ком. 42,
теп. (495) 374-13-46, e-mail: support@amplitech.ru .
Сообщения о неблагоприятных событиях (инцидентах), возникших при работе с
набором и не указанных в данной инструкции, следует направлять производителю по
указанному выше адресу и в уполномоченный регуляторный орган соглашо
действующему законодательству.
20 ТЕХНИЧЕСКАЯ ПОДДЕРЖКА
Консультацию по вопросам по работе с набором и его качеству можно получить по
контактам, указанным на официальном сайте производителя; www.amplitech.ru .
21 СИМВОЛЫ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ В ДОКУМЕНТАЦИИ ПРОИЗВОДИТЕЛЯ
t d Изготовитель |REF[ Номер по каталогу
IVD
СИ
V
Дата изготовления
Медицинское изделие для
диагностики in vitro
Обратитесь к инструкции по
применению
Содержимого достаточно для
проведения п тестов
LOT
о *6^
Ж
Код серии
Использовать до
Предел температуры
Не допускать воздействия
солнечного света
i d
Общество с ограниченной ответственностью «Амплитек»
(ООО «Амплитек»),
Россия, 109235, Москва,
ул. 1-я Курьяновская, д. 34, стр. 8, этаж 1 пом. II ком. 42
тел. (495) 374-13-46, www.amplitech.ru ,
e-mail: support@amplitech.ru
Amplitech UP/UU/MH Инструкция в. 12.04.23 19
--- стр. 21 ---
Лист регистрации изменений
Изм.
Номера страниц Всего
страниц в
документе
Номер документа Подпись Датаизменён
ных
заменён
ных новых аннулиро
ванных
5 -- — — —
1
1
Amplitech UP/UU/MH Инструкция 20
--- стр. 26 ---
иJШigпReшйii
1 Учёт результатов осуществляется с помощью программного обеспечения используемого
амплификатора согласно инструкции по его применению. Рекомендуется выставлять пороговую
линию на уровне 10 % от разгорания положительного контроля. Кривые флуоресценции,
пересекающие пороговую линию, должны иметь сигмообразную форму.
1 Проверить наличие значений Ct для исследуемого образца по каналам РАМ, R6G, ROX. Каналы
детекции мишеней указаны в таблице, приведённой ниже.
Канал детекции Мишень
FAM ДНК Ureaplasma parvum I
R6G ДНК Ureaplasma urealyticum '
ROX ДНК Mycoplasma hominis
Су5 ДНК ВК
3 При наличии значений Ct по каналам FAM/R6G/ROX рассчитать концентрацию ДНК выявленного
возбудителя согласно формуле (1).
100000
Сднк воэб = ш т
где Сднквол ” концентрация ДНК выявленного возбудителя, копий/мл;
ACt - разность между значением порогового цикла (Ct) для исследуемого образца и значением
Ct для ПК и по каналу FAM/R6G/ROX.
4 Рассчитать концентрацию ДНК выявленного возбудителя в геномных эквивалентах в одном
миллилитре (ГЭ/мл) согласно формуле (2).
Сднк возб
Сгз -
К
(2)
где Сгэ - концентрация ДНК выявленного возбудителя, ГЭ/мл;
Сднквоэб - концентрация ДНК выявленного возбудителя, копий/мл;
К - коэффициент пересчёта концентрации ДНК возбудителя из копий/мл в ГЭ/мл {см. таблицу
ниже).
Возбудитель____ _____ коэффициент пересчёта
Ureaplasma parvum ~ 1 _________!
Ureaplasma urealyticum 1
T
Mycoplasma hominis 2
т Провести интерпретацию результатов для исследуемых образцов согласно таблицам, приведённым
ниже.
Результат Интерпретация
rio каналу Cy5 значение Ct определено не больше 30
(амплификатор роторного типа)/
35 (амплификатор планшетного типа).
По каналам FAM, R6G, ROX значения Ct отсутствуют.
ДНК и. parvum, U. urealyticum, М. hominis
в образце не выявлены.
Рассчитано значение концентрации ДНК возбудителя,
укладывающееся в диапазон измерения набора.
ДНК возбудителя в образце выявлена в
концентрации в пределах диапазона!
измерения набора.
Рассчитано значение концентрации ДНК возбудителя, не
укладывающееся в диапазон измерения набора.
ДНК возбудителя в образце выявлена в
концентрации вне пределов диапазона
измерения набора.
По каналу Суб значение Ct отсутствует или определено
больше 30 (амплификатор роторного типа)/
35 (амплификатор планшетного типа).
По каналам FAM, R6G, ROX значения Ct отсутствуют.
Невалидный результат
Клинически значимой является концентрация ДНК U. parvum/U. urealyticum/M. hominis свыше
10000 ГЭ/мл. __________________________
Amplitech UP/UU/MH КР в. 12.04.23
--- стр. 27 ---
6 Результат исследования считают достоверным, если получены валидные результаты для контролей
в соответствии с таблицей, приведённой ниже.
Контроль
ОК
Тип амплифи- Значение порогового цикла (Ct) по каналу
ПК и
FAM R6G RO^ Су5 I
роторный отсутствует отсутствует отсутствует 5 30
планшетный отсутствует отсутствует отсутствует 5 35
роторный ^32 ^32 5 31 5 30 I
планшетный S34 5 35 5 35 S35 I
7 Рекомендации по устранению возможных ошибок в процессе проведения исследования указаны в
таблице, приведённой ниже.
Ошибка
Для ПК значение Ct по каналу
FAM и/или R6G и/или ROX и/или
Су5 отсутствует или определено
больше граничного. ____
Для ОК по каналу Су5 значение
С1 отсутствует или определено
больше граничного.___________
Возможная причина
возникновения Рекомендации по устранению
Некорректное проведение
экстракции ДНК и/или ПЦР.
Повторить исследование для всех образцов,
начиная с этапа экстракции ДИК.
я ОК по каналу FAM и/или R6G
и/или ROX определено значение
Ct.
Некорректное проведение
экстракции ДНК и/или ПЦР.
Повторить исследование для всех
начиная с этапа экстракции ДНК.
Контаминация реагентов
или исследуемых образцов
проду1аами амплификации.
г1"Невалидный результат для
исследуемого образца (значение
Ct по каналу Суб отсутствует или
определено больше граничного,
по каналам FAM, R6G, ROX
значения_С1 отсутствуют).
Для исследуемого
с^разца/контролей определено
значение порогового цикла, при
этом на графике флуоресценции
отсутствует участок характерного
экспоненциального подъёма
(график представляет собой
приблизительно прямую линию).
Некорректное проведение
экстракции ДНК. |
Наличие в образце i
ингибиторов ПЦР.
Некорректный выбор
уровня пороговой линии
или параметров расчёта
базовой линии.
Некорректное проведение
ПЦР.
Предпринять меры по выявлению и
ликвидации источника контаминации и
повторить исследование для всех образцов,
начиная с этапа экстракции ДНК.______
Повторить исследование данного
исследуемого образца, начиная с этапа
экстракции ДНК. В случае воспроизводимого
результата рекомендуется повторное взятие
и исследование биологического материала.
Проверить правильность выбранного уровня
пороговой линии или параметров расчёта
базовой линии. Если результат получен при
правильном уровне пороговой пинии (базовой
линии), требуется повторно провести
амплификацию и детекцию для этого обра^
или, в случае некорректного вида графика для
контроля, амплификацию и детекцию для
всех исследуемых образцов и контролей
____
Amplitech UP/UU/MH КР в.12.04.23
--- стр. 28 ---
Лист регистрации изменений
Amplitech UP/UU/MH КР
--- стр. 29 ---
Прошито, пронумеровано и
скреплено печатью листа
Генеральный директор
ООО «Ампл^вк»
У [ ХодЛ
Подпись
V
)
--- стр. 30 ---
ООО «Амплитек».
Россия, 109235, Москва, ул. 1-я Курьяновская, д. 34, стр. 6. этаж 1 пом. П ком. 42
тел. (495) 374-13-46. e-mail: support(gampI(tech.ru О АМПЛИТЕК
К О Г Н ^
в е р и ть .
ПАСПОРТ № 464-23
Amplitech UP/UU/MH
Набор реагентов для количественного определения ДНК Ureaplasma parvum, Ureapiasma ureatythum^
Mycop/asma hominis в биологическом материале человека методом ПЦР с детекцией в режиме
времени» (Amplitech UP/UU/MH) по ТУ 21.20.23-022-19926214-2023
REFР014-0 LOT0464 2023-04-24 2024-04-24
Условия YtMHCnop* при температуре от 2 *С до 8 всеми видами крытых транслс^тных средств а
гс^ваиия: с хладоэлвментами или е авторефрижераторах.
хранения: при температура от 2 *С до 8 ’’С в защищённом от солнечного света месгта.
Кбмтроль качества набора проведён по ТУ 21.20.23-022-19926214-2023.
Состав набора и внешний вид компонентов
Лот ком- Норма Результат
понента наименование количество внешний вид контроля
00004 Смесь-1 и/МН 0,48 мл X1 пробирка Прозрачная жидкость от светло-
розового до фиолетового цвета Соответствует
00008 Смесь-2 В 0,48 мл X1 пробирка Прозрачная бесцветная жидкость Соответствует
00004 вки 0,96 мл X1 пробирка Прозрачная бесцветная жидкость Соответствует
00026 ОК 0,8 мл X1 пробирка Прозрачная бесцветная жидкость Соответствует
00007 ПК и 0,8 мл X1 пробирка Прозрачная бесцветная жидкость Соответствует
- Инструкция по
применению 1 шт.
В бумажном виде и электронном
виде по адресу:
http://www.amplitech.ru/resources/
Соответствует
- Краткое руководство 1 шт. в бумажном виде Соответствует
- Паспорт 1 шт. В элв1аронном виде по адресу:
http://www.amplitech.ru/quarrty/ Соошетстэует
Упаковка набора
Показатель Норма Результат контроля
Вид первичной и вторичной упаковки Соответствует требованиям ТУ. Соответствует
Отсутствие видимых дефектов Отсутствие дефе(стов Соответствует
Маркировка набора
Показатель Норма Результат контроля
Наличие информации на внутренней упаковке инсЬоомания cooTBGTCTBveT компонентов набора и внешней упаковке инс^рмация ^ответствует
набора в соответствии с требованиями ТУ ваниям у.
Соответствует
Функциональные характеристики набора
Показатель Норма Результат контроля
Предел обнаружения
Выявление ДНК в концентрации;
и. parvum, U. urealyticum ~ ^00Q ГЭ/мл;
М. hominis-6 0 0 ГЭ/мл.
ДНК и. parvum, U. urealyticum, М. hominis
обнаружены. Соответствует
Валидность результатов тестирования
для исследуемых образцов Последовательность ВК обнаружена. Соответствует
Валидность результатов тестирования
для контролей исследования (ОК, ПК)
Результаты соответствуют критериям
оценки, указанным в инструкции по
применению набора.
Соответствует
--- стр. 31 ---
Показатель Норма Результат контроля
Предел измерения
Количественное определение ДНК в
концентрации^;
и, parvum, U . urealyticum - 9500 ГЭ/мл,
М. hominis - 4800 ГЭ/мл.
Полученное расчётное значение
концентрации в диапазоне;
и. parvum, U . urealyticum от 3000 до
30000 ГЭ/мл;
М. hominis от 1500 до 15000 ГЭ/мл.
Соответствует
валидность результатов тестирования
для исследуемых образцов Последовательность ВК обнаружена. Соответствует
Ва?^ед^«зсть. результатов тестирования
дая Ш9грот^ ш:ледсжания (ОК. ПК)
Результаты соответствуют крите|жям
оценки, указанным в инструкции по
применению набора
Н^ор указанного лота соответствует требованиям ТУ 21.20.23-022-1992621-4-S?23.
&ьщачи пааюрта: 25.04.2023
Руководитель ОЮ(, Романенкова Е.С.
^ Нижняя граница диапазона измерения набора плюс 0,5 Ig.