Набор реагентов для качественного выявления ДНК микроорганизмов класса Mollicutes в биологическом материале человека методом ПЦР (Mollicutes) по ТУ 21.20.23-001-01897475-2022 — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 4 --- ООО «Лабцентр АГ» Инструкция по применению Motlicutes Лист 4 Листов 20 1. ПРЕДНАЗНАЧЕННОЕ ПРИМЕНЕНИЕ 1.1 Полное наименование набора реагентов: «Набор реагентов для качественного выявления ДНК микроорганизмов класса Mollicutes в биологическом материале человека методом ПЦР (Mollicutes) по ТУ 21.20.23-001-01897475-2022» 1.2 Назначение: Набор реагентов предназначен для качественного выявления ДНК класса Mollicutes в биологическом материале человека (соскоб из урогенитального тракта, мазок из носоглотки, культура клеток человека) и образцах бактериальных культур, полученных путем посева биологического материала на плотную или жидкую питательную среду, методом ПЦР в режиме реального времени. Материалом для проведения ПЦР служат пробы ДНК, экстрагированные из исследуемого материала. 1.3 Функциональное назначение: изделие предназначено для диагностика in vitro (для качественного выявления ДНК микроорганизмов класса Mollicutes методом ПЦР в биологическом материале человека) 1.4 Показания к проведению исследования: симптомы инфекционного заболевания урогенитального и респираторного трактов. 1.5 Противопоказания к применению: противопоказаний к применению нет. 1.6 Популяционные и демографические аспекты: применение набора реагентов не зависит от популяционных и демографических аспектов. 1.7 Область применения: набор реагентов может быть использован в медицинских учреждениях для клинической лабораторной диагностики и при контроле качества биомедицинских клеточных продуктов. 1.8 Потенциальные пользователи: квалифицированный персонал, обученный методам молекулярной диагностики и правилам работы в клинико-диагностической лаборатории. 1.9 Применять набор реагентов строго по назначению согласно данной инструкции по применению. 1.10 Побочные действия: не применимо для данного медицинского изделия L --- стр. 5 --- ООО «Лабцентр АГ» Инструкция по применению Лист 5 Mollicutes Листов 20 2. ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА РЕАГЕНТОВ 2.1.Состав набора реагентов Наименование компонентов Внешний вид Количество пробирок Номинальный объём компонента Набор реагентов 1 шт. Смесь для амплификации, запечатанная парафином Прозрачная бесцветная жидкость под воскообразным белым слоем 96 пробирок по 20 мкл Раствор Taq-полимеразы Прозрачная бесцветная жидкость 2 пробирки по 500 мкл Минеральное масло Прозрачная бесцветная вязкая маслянистая жидкость 2 пробирки по 1,0 мл Положительный контрольный образец (К+) Прозрачная бесцветная жидкость 1 пробирка 130 мкл Инструкций по применению 1 шт. Паспорт 1 шт. Все компоненты набора реагентов готовы к применению и не требуют дополнительной подготовки к работе. 2.2. Количество анализируемых образцов Набор реагентов предназначен для однократного применения и рассчитан на 96 определений (включая контрольные образцы), что соответствует исследованию не более 94 неизвестных образцов, отрицательного контрольного образца и положительного контрольного образца. 2.3. Принцип метода Метод: Полимеразная цепная реакция (ПЦР) с детекцией результатов «в режиме реального времени»; качественный анализ. Принцип метода основан на использовании процесса амплификации ДНК, заключающегося в повторяющихся циклах температурной денатурации ДНК, отжига праймеров с комплементарными последовательностями и последующей достройки полинуклеотидных цепей с этих праймеров Taq-полимеразой. Для повышения чувствительности и специфичности реакции предусмотрено применение «горячего» старта. «Горячий» старт обеспечивается методикой приготовления реакционной смеси, состоящей из двух слоёв, разделённых прослойкой из парафина. Смешение слоёв и превращение их в амплификационную смесь происходит только после плавления парафина. Помимо этого, парафин обеспечивает запечатывание реакционной смеси и дополнительную защиту от контаминации ампликонами. В смесь для амплификации введены ДНК-зонды, каждый из которых содержит флуоресцентную метку и гаситель флуоресценции. При образовании специфического продукта ДНК-зонд разрушается, действие гасителя на флуоресцентную метку прекращается, --- стр. 6 --- ООО «Лабцентр АГ» Инструкция по применению Molllcutes Лист 6 Листов 20 что ведёт к возрастанию уровня флуоресценции, который фиксируется специальными приборами. Количество разрушенных зондов (а, следовательно, и уровень флуоресценции) увеличивается пропорционально количеству образовавшихся специфических ампликонов. Уровень флуоресценции измеряется на каждом цикле амплификации. В состав смеси для амплификации включен внутренний контроль (ВК), который предназначен для оценки качества прохождения полимеразной цепной реакции. Таблица 1 - Каналы детекции продуктов амплификации Fam Hex Класс Mollicutes ВК Исследование состоит из следующих этапов: выделение ДНК (пробоподготовка), ПЦР-амплификация ДНК с детекцией результатов в режиме реального времени. 2.4. Время проведения анализа (исключая пробоподготовку): от 1,5 часов. 3. АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ 3.1. Специфичность анализа В образцах биологического материала человека, содержащих микроорганизмов класса Mollicutes, при проведении амплификации программное обеспечение детектирующего амплификатора фиксирует положительный результат амплификации специфического продукта по каналу детекции Fam. В образцах биологического материала, не содержащих микроорганизмов класса Mollicutes, при проведении амплификации программное обеспечение детектирующего амплификатора фиксирует отрицательные результаты амплификации специфического продукта и положительный результат амплификации внутреннего контроля (ВК). Аналитическая специфичность набора регентов подтверждена с использованием генно-инженерных конструкций (рекомбинантных плазмид) соответствующих последовательностям ДНК выявляемых консенсусных последовательностей 16S РНК родов класса Mollicutes. Показано отсутствие неспецифических положительных результатов амплификации при исследовании в высокой концентрации ДНК микроорганизмов, потенциально присутствующих в исследуемых образцах: Gardnerella vaginalis, Neisseria gonorrhoeae, Candida albicans. Streptococcus sp., Staphylococcus sp., a также ДНК человека в концентрации до 1,0x10^ копий/мл образца. 3.2. Интерферирующие вещества Наличие ингибиторов ПЦР в образце биологического материала может быть причиной сомнительных (неопределённых) результатов. Признаком ингибирования ПЦР --- стр. 7 --- ООО «Лабцентр АГ» i Инструкция по применению Mollicutes Лист 7 Листов 20 является одновременное отсутствие амплификации внутреннего контроля и специфического продукта. К ингибиторам ПЦР, источником которых может являться образец ДНК, отнесены следующие вещества: лекарственные препараты, присутствующие в образце ДНК в результате неполного удаления в ходе выделения ДНК из образца биоматериала, а также изопропиловый спирт и метилацетат, присутствующие в образце ДНК в результате неполного удаления промывочных растворов в ходе пробоподготовки. Максимальные концентрации интерферирующих веществ, при которых не наблюдалось влияние на амплификацию лабораторного контрольного образца и внутреннего контрольного образца составляют: изопропиловый спирт - 100 мкл/мл образца ДНК, метилацетат - 100 мкл/мл образца ДНК. Для оценки возможной интерференции лекарственных препаратов были выбраны те, которые потенциально могут присутствовать в остаточных количествах в биологических образцах человека, взятых из соответствующих исследуемых биотопов (Мирамистин®, хлоргексидин биглюконат). Для всех исследуемых лекарственных препаратов было показано отсутствие их влияния в концентрации до 10% в образце биоматериала. 3.3. Предел обнаружения: Предел обнаружения составляет не менее 5 копий ДНК каждого микроорганизма на амплификационную пробирку. Предел обнаружения установлен путём анализа серийных разведений лабораторного контрольного образца (ЛКО). Для каждой концентрации было Копий ДНК-мишени в ЛКО /на амплификационную пробирку Количество повторов Количество положительных результатов % положительных результатов 5,0 40 40 100 2,5 40 27 67,5 3.4. Внутрисерийная и межсерийная воспроизводимость Внутрисерийная воспроизводимость - 100% (86,28-100%) Межсерийная воспроизводимость - 100% (86,28-100%) 3.5. Диагностические характеристики Диагностическая чувствительность составляет (95% ДИ): 100% (96,41-100%) Диагностическая специфичность составляет (95% ДИ): 100% (97,0-100%) --- стр. 8 --- ООО «Лабцентр АГ» Инструкция по применению Лист 8 Mollicutes Листов 20 4. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ Организация работы ПЦР-лаббратории, оборудование и материалы должны соответствовать требованиям ГОСТ Р 52905-2007, методических указаний МУ 1.3.2569-09 «Организация работы лабораторий, использующих методы амплификации нуклеиновых кислот, при работе с материалом, содержащим микроорганизмы I-IV групп патогенности», с соблюдением санитарно-эпидемиологических правил и норм СанПиН 3.3686- 2021 «Санитарно-эпидемиологические требования по профилактике инфекционных болезней». Исследуемые образцы рассматриваются как потенциально-опасные. При работе с микроорганизмами I-1V групп патогенности выбор типа защитного костюма (рабочей одежды и средств индивидуальной защиты) проводится в строгом соответствии с СанПиН 3.3686-2021 и определяется видом возбудителя, диагностическим методом, рабочей зоной, оснащением ее боксами биологической безопасности. Следует использовать только одноразовые наконечники и пробирки. Не допускается использование одних и тех же наконечников при обработке различных образцов биологического материала. К работе с набором реагентов допускается персонал, обученный методам молекулярной диагностики и правилам работы в клинико-диагностической лаборатории. Выделение ДНК следует проводить в боксах биологической безопасности II класса. Подготовку к ПЦР с использованием набора реагентов возможно проводить в ПЦР-боксах. Запрещается перемещение лабораторного оборудования, в том числе дозаторов, штативов, лабораторной посуды, халатов, головных уборов и пр., а также растворов реагентов из одного помещения в другое. Дозаторы должны быть соответствующим образом поверены (в аккредитованных лабораториях) и промаркированы. Использованные одноразовые принадлежности (пробирки, наконечники и др.) должны сбрасываться в контейнер для медицинских отходов, содержащий дезинфицирующий раствор (при необходимости). Поверхности рабочих столов, а также помещений, в которых проводится ПЦР, следует обязательно, до и после проведения работ, облучать с помощью бактерицидных установок в течение 30 минут. Все поверхности в лаборатории (рабочие столы, штативы, оборудование и др.) ежедневно подвергают влажной уборке с применением дезинфицирующих/моющих средств, регламентированных правилами и нормами СанПиН 3.3686-2021. --- стр. 11 --- ООО «Лабцентр АГ» Инструкция по применению Лист 11 Mollicutes Листов 20 6. АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ 6.1. Материал для исследования Для исследования используют пробы ДНК из биологического материала человека: - соскобы из урогенитального тракта, - мазки из носоглотки, - культуры клеток человека, - образцы бактериальных культур, полученных путем посева биологического материала на плотную или жидкую питательную среду. i 6.2. Общие требования Исследование методом ПЦР относится к прямым методам лабораторного исследования, поэтому взятие биологического материала человека необходимо проводить из места локализации инфекционного процесса. Решение о необходимости исследовать ту или иную локализацию принимает лечащий врач на основании собранного анамнеза и клинической картины заболевания. Для получения корректных результатов большое значение имеет качество взятия образца биоматериала для исследования, его хранение, транспортирование и предварительная обработка. Неправильное взятие биоматериала может привести к получению недостоверных результатов и, вследствие этого, необходимости его повторного взятия. Примечание - Взятие, предварительную обработку, хранение и перевозку, передачу исследуемого материала в другие организации осуществляют согласно инструктивно-методическим документам, регламентирующим выполнение исследований в соответствии с требованиями МУ 1.3.2569-09 и СанПиН 3.3686-2021. 6.3. Взятие материала на исследование 6.3.1.Соскобы из урогенитального тракта Взятие материала осуществляется с помощью специальных стерильных одноразовых зондов, согласно установленной процедуре. Ограничение метода - местное применение лекарственных препаратов, УЗИ вагинальным датчиком менее чем за 24 часа до исследования. После взятия биологического материала перенесите зонд в пробирку с транспортной средой, предназначенной производителем для транспортирования и хранения образцов биологического материала для ПЦР-исследований, и тщательно промойте его в жидкости в течение 10-15 с, избегая её разбрызгивания. Извлеките зонд из раствора и, вращательным движением прижимая его к внутренней стенке пробирки выше уровня раствора, отожмите избыток жидкости. Полностью удалите зонд из пробирки и утилизируйте. Плотно закройте крышку пробирки и промаркируйте пробирку. --- стр. 12 --- ООО «Лабцентр АГ» Инструкция по применению Лист 12 Mollicutes Листов 20 I При необходимости взятия биоматериала из нескольких биотопов повторите процедуру, каждый раз забирая материал TioBbiM зондом в новую пробирку. Примечание - Перед получением соскоба эпителиальных клеток из уретры, с заднего свода влагалища и цервикального канала, свободно стекающее отделяемое необходимо удалить стерильным ватным тампоном. 6.3.2. Мазок из носоглотки Мазки берут сухим стерильным зондом, для чего зонд вводят легким движением по наружной стенке носа на глубину 2-3 см до нижней раковины. Затем зонд слегка опускают к низу, вводят в нижний носовой ход под нижнюю носовую раковину, делают вращательное движение и удаляют вдоль наружной стенки носа. После взятия биологического материала перенесите зонд в пробирку с транспортной средой и тщательно промойте его в жидкости в течение 10-15 с, избегая её разбрызгивания. Затем извлеките зонд из раствора и, вращательным движением, прижимая его к внутренней стенке пробирки выше уровня раствора, отожмите избыток жидкости. Полностью удалите зонд из пробирки и утилизируйте. Плотно закройте крышку пробирки и промаркируйте пробирку. Ограничение метода - местное применение лекарственных препаратов (спреи, капли, кремы и мази) - менее чем за 24 часа до исследования. При использовании аэрозолей и других форм лекарственных препаратов для ингаляций при лечении бронхиальной астмы, материал для исследований следует брать не ранее чем через три часа после ингаляции или приёма пищи. it 6.3.3. Культуры клеток человека Материал забирают из зоны предполагаемого местонахождения возбудителя инфекции, из поврежденной ткани или из пограничного с поврежденным местом участка. Кусочки ткани диаметром не более 5 мм помещают в одноразовые стерильные пробирки объемом 2 мл, содержащие соответствующую транспортную среду. Пробирку плотно закрывают. Необходимо поместить 1 мл культуральной среды после культивирования клеток в одноразовую пробирку объёмом 1,5 мл. Центрифугировать пробирку 15 минут при 10000 х g. Удалить супернатант и ресуспенидировать осадок в 100 мкл транспортной среды. 6.3.4.Образцы бактериальных культур Взятие материала с жидких и плотных сред осуществляется при помощи одноразовой микробиологической петли или шпателя. Поместите в одноразовую пробирку объёмом 1,5 мл, в которую предварительно внесено 400 мкл лизирующего раствора, от 5,0 мкл одиночной колонии клеток или до 50 мкл жидкой среды. --- стр. 13 --- ООО «Лабцентр АГ» Инструкция по применению 1 Лист 13 Mollicutes Листов 20 Примечание - Взятие материала (одиночная колония клеток или 100 мкл жидкой среды) при необходимости производится в одноразовую пластиковую пробирку объёмом 1,5-2,0 мл, в которую предварительно внесено 500 мкл стерильного физиологического раствора. Плотно закройте крышку пробирки и промаркируйте пробирку. 6.4. Транспортирование и хранение исследуемых образцов Условия транспортирования и хранения исследуемого материала в соответствии с инструкцией к Набору реагентов для выделения ДНК человека, бактерий, вирусов и грибов из биологического материала человека и культур микроорганизмов (ПРОБА-ОПТИМА) (РУ № РЗН 2022/17496, ООО «ДНК-Технология ТС»). 6.5. Подготовка биологического материала человека для исследования Подготовка биологического материала в соответствии с инструкцией к Набору реагентов для выделения ДНК человека, бактерий, вирусов и грибов из биологического материала человека и культур микроорганизмов (ПРОБА-ОПТИМА) (РУ № РЗН 2022/17496, ООО «ДНК-Технология ТС»). 7. ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА 7.1. Выделение ДНК из биологического материала Для выделения ДНК рекомендуется использовать Набор реагентов для выделения ДНК человека, бактерий, вирусов и грибов из биологического материала человека и культур микроорганизмов (ПРОБА-ОПТИМА) (РУ № РЗН 2022/17496, ООО «ДНК-Технология ТС»). Выделение ДНК из исследуемого материала проводят в соответствии с инструкцией к используемому набору/комплекту реагентов. ВНИМАНИЕ! Одновременно с выделением ДНК из биологического материала необходимо подготовить отрицательный контрольный образец и провести его через все этапы пробоподготовки. В качестве отрицательного контрольного образца рекомендуется использовать физиологический раствор или отрицательный контрольный образец, входящий в состав набора/комплекта реагентов для выделения нуклеиновых кислот в объёме, указанном в инструкции к соответствующему набору/комплекту реагентов. 7.2. Подготовка и проведение ПЦР ВНИМАНИЕ! При проведении всех последующих действий следует избегать воздействия прямых солнечных лучей на пробирки со смесью для амплификации! 7.2.1.1. Промаркируйте необходимое количество пробирок/стрипованных пробирок со смесью для амплификации, запечатанной парафином, для исследуемых образцов, для положительного контрольного образца «К+» и отрицательного контрольного образца «К-». --- стр. 17 --- ООО «Лабцентр АГ» Инструкция по применению Лист 17 Mollicutes Листов 20 10.2. Хранение 10.2.1. Компоненты набора реагентов следует хранить в холодильнике или холодильной камере при температуре от 2 °С до 8 °С в течение всего срока годности. 10.2.2. Смесь для амплификации, запечатанную парафином, следует хранить в холодильнике или холодильной камере при температуре от 2 °С до 8 °С в защищённом от света месте в течение всего срока годности набора реагентов. 10.2.3. Наборы реагентов, хранившиеся с нарушением регламентированного режима, а также с истекшим сроком годности, применению не подлежат. 10.3. Указания по эксплуатации 10.3.1. Набор реагентов должен применяться согласно действующей версии утвержденной инструкции по применению. 10.3.2. Для получения достоверных результатов необходимо строгое соблюдение инструкции по применению набора реагентов. 10.3.3. После вскрытия упаковки компоненты набора реагентов следует хранить при следующих условиях: компоненты набора реагентов следует хранить в холодильнике или холодильной камере при температуре от 2 °С до 8 °С в течение всего срока годности набора реагентов; смесь для амплификации, запечатанную парафином, следует хранить в холодильнике или холодильной камере при температуре от 2 °С до 8 °С в защищенном от света месте в течение всего срока годности набора реагентов. 11. УКАЗАНИЯ ПО УТИЛИЗАЦИИ 11.1. При использовании набора реагентов в клинико-диагностической лаборатории образуются отходы класса В, которые утилизируются в соответствии с требованиями СанПиН 2.1.3684-21 и МУ 1.3.2569-09.. 11.2. Наборы реагентов, пришедшие в непригодность, в том числе в связи с истечением срока годности, подлежат утилизации в соответствии с требованиями СанПиН 2.1.3684-21. --- стр. 18 --- ООО «Лабцентр АГ» Инструкция по применению Mollicutes Лист 18 Листов 20 12. ГАРАНТИИ ИЗГОТОВИТЕЛЯ 12.1 Предприятие-изготовитель гарантирует соответствие набора реагентов требованиям технических условий при соблюдении условий транспортирования, хранения и эксплуатации, установленных техническими условиями. 12.2 Срок годности набора реагентов - 12 месяцев при соблюдении всех условий транспортирования, хранения и эксплуатации. 13. РЕМОНТ И ТЕХНИЧЕСКОЕ ОБСЛУЖИВАНИЕ Набор реагентов предназначен для однократного использования и не подлежит техническому обслуживанию и текущему ремонту. 14. СИМВОЛЫ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ ПРИ МАРКИРОВКЕ НАБОРА РЕАГЕНТОВ Медицинское изделие для диагностики in vitro [ЗЛ Обратитесь к инструкции по применению i Предел температуры 1МЁ1 Номер по каталогу W Содержимого достаточно для проведения п тестов iJ Изготовитель 2 Использовать до Не допускать воздействия солнечного света ILOTI Код партии А Нестерильно Дата изготовления Запрет на повторное применение --- стр. 19 --- ООО «Лабцентр АГ» Инструкция по применению Лист 19 Mollicutes Листов 20 ПЕРЕЧЕНЬ ПРИМЕНЯЕМЫХ НАЦИОНАЛЬНЫХ СТАНДАРТОВ ГОСТР 1.3-2018 Технические условия на продукцию. Общие требования к содержанию, оформлению, обозначению и обновлению. ГОСТ 2.105-2019 ЕСКД Общие требования к текстовым документам ГОСТ 15.309-98 Система разработки и постановки продукции на производство. Испытания и приёмка выпускаемой продукции. Основные положения ГОСТР 15.013-2016 Система разработки и постановки продукции на производство. Медицинские изделия ГОСТР 51088-2013 Медицинские изделия для диагностики ин витро. Реагенты, комплекты реагентов, тест-системы, контрольные материалы, питательные среды. Требования к изделиям и поддерживающей документации ГОСТРИСО 18113-1-2015 Медицинские изделия для диагностики in vitro. Информация, предоставляемая изготовителем (маркировка). Часть 1. Термины, определения и общие требования. ГОСТРИСО 18113-2-2015 Медицинские изделия для диагностики in vitro. Информация, предоставляемая изготовителем (маркировка). Часть 2. Реагенты для диагностики in vitro для профессионального применения ГОСТР 51352-2013 Медицинские изделия для диагностики ин витро. Методы испытаний ГОСТРИСО 23640-2015 Изделия медицинские для диагностики in vitro. Оценка стабильности реагентов для диагностики in vitro ГОСТ Р 52905-2007 (ИСО 15190:2003) Лаборатории медицинские. Требования безопасности ГОСТРИСО 15223-1-2020 Изделия медицинские. Символы, применяемые при маркировании медицинских изделий, на этикетках и в сопроводительной документации. Часть 1. Основные требования. ГОСТ ISO 14971-2021 Изделия медицинские. Применение менеджмента риска к медицинским изделиям СанПиН 2.1.3684-21 Санитарно-эпидемиологические требования к содержанию территорий городских и сельских поселений, к водным объектам, питьевой воде и питьевому водоснабжению, атмосферному воздуху, почвам, жилым помещениям, эксплуатации производственных, общественных помещений, организации и проведению санитарно-противоэпидемических (профилактических) мероприятий СанПиН 3.3686-21 Санитарно-эпидемиологические требования по профилактике инфекционных болезней МУ 1.3.2569-09 Организация работы лабораторий, использующих методы амплификации нуклеиновых кислот, при работе с материалом, содержащим микроорганизмы I-IV групп патогенности Приказ Минздрава России от 06.06.2012 №4н Об утверждении номенклатурной классификации медицинских изделий. ш --- стр. 20 --- ООО «Лабцентр АГ» Инструкция по применению Mollicutes Лист 20 Листов 20 АДРЕС ДЛЯ ОБРАЩЕНИЯ По вопросам качества набора реагентов обращаться по адресу: Общество с ограниченной ответственностью «Лабцентр АГ», ООО «Лабцентр АГ», Россия. 117198, г.Москва, вн.тер.г. муниципальный округ Обручевский, ул. Академика Опарина, д. 4 E-mail: 89161611445@mail.m