Набор реагентов для выявления и количественного определения ДНК вируса гепатита В (HBV) методом полимеразной цепной реакции с детекцией в режиме "реального времени" "АмплиПрайм® HBV" по ТУ 21.20.23-160-09286667-2022 — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 4 ---
АМПЛИФИКАЦИЯ с ДЕТЕКЦИЕЙ В РЕЖИМЕ «РЕАЛЬНОГО ВРЕМЕНИ»
ВНИМАНИЕ! Для внесения в пробирки реагентов, проб ДНК и контрольных образцов использовать одноразовые
наконечники с фильтрами.
1. Рассчитать объемы реагентов, необходимые для приготовления реакционной смеси, согласно таблице:
Компонент реакционной смеси | Объем, мкл Обозначения
ПЦР-смесь HBV j 10*(N+1) N - количество амплифицируемых образцов, включая
контролиБуфере ! 5*{N+1)
Taq полимераза 1 1*(N+1)
ВНИМАНИЕ! В случае приготовления реакционной смеси с помощью автоматической станции следуйте указаниям
инструкции по ее использованию.
ВНИМАНИЕ! Необходимо минимизировать время нахождения Taq полимеразы при комнатной температуре.
ВНИМАНИЕ! Компоненты реакционной смеси следует смешивать непосредственно перед проведением ПЦР.
ВНИМАНИЕ! Неиспользованные остатки реакционной смеси хранению не подлежат.
2. Разморозить реагенты. Перед смешиванием реагентов перемешать содержимое пробирок с реагентами,
осадить капли на вортексе.
3. Приготовить реакционную смесь, добавив компоненты в объемах, рассчитанных в п. 1. Перемешать смесь и
осадить капли на вортексе.
4. Отобрать необходимое количество пробирок или стрипов для проведения амплификации ДНК исследуемых и
контрольных образцов. Выбор пробирок для амплификации зависит от используемого амплификатора с
системой детекции в режиме «реального времени».
5. Внести в подготовленные пробирки реакционную смесь и образцы согласно таблице:
Добавляемый реагент / образец
Внести по 15 мкл
Приготовленной реакционной смеси В пробирки для исследуемых и контрольных образцов
Внести по 10 мкл
ВНИМАНИЕ! Избегать попадания сорбента в реакционную смесь.
Пробы ДНК, экстрагированной из исследуемого
образца в пробирки для исследуемых образцов
Пробы, экстрагированной из ОКО в пробирку для образца ОКО (отрицательного контроля
экстракции)
Реагент К- в пробирку для образца К- (отрицательного контроля ПЦР)
Пробы, экстрагированной из ПКО-1 HBV
(только при количественном анализе) в пробирку для образца ПК1 (положительного контроля)
Пробы, экстрагированной из ПКО-2 HBV
(при качественном или количественном анализе) в пробирку для образца ПК2 (положительного контроля)
6. При ручном анализе запрограммировать амплификатор с системой детекции в режиме «реального времени»
согласно инструкции по его применению для выполнения следующей программы:
Единая программа амплификации и детекции флуоресцентного сигнала
Цикл Температура, Время Детекция по каналам для Количество
циклов
1 50 15 мин - 1
2 95 15 мин - 1
3 95 Юс - 45
60 20 с РАМ, R6G^
2 Детекция сигнала для флуорофора R66 осуществляется по каналу детекции для аналогичных флуорофоров HEX, JOE, Yellow, VIC.
Версия 27,06.22-1
--- стр. 5 ---
примечания
1) Рекомендуемые параметры для программирования амплификаторов указаны во вкладыше, прилагаемом к
набору.
2) В случае, если в одном приборе одновременно проводятся тесты только для выявления ДНК, можно удалить из
указанной программы первый шаг (50 ®С - 15 мин) для экономии времени.
ВНИМАНИЕ! При использовании программного обеспечения FRT Manager программирование амплификатора
устанавливается автоматически.
7. Перед постановкой в амплификатор планшетного типа осадить капли со стенок пробирок на вортексе.
8. Установить пробирки или стрипы в ячейки реакционного модуля прибора.
9. Запустить выполнение программы амплификации с детекцией флуоресцентного сигнала согласно инструкции
по применению используемого амплификатора.
АНАЛИЗ, ВЫЧИСЛЕНИЕ И ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ
ВНИМАНИЕ! При ручном анализе обработку данных (флуоресцентных кривых), полученных в программном
обеспечении прибора, используемого для проведения ПЦР с детекцией в режиме «реального времени»,
проводить согласно инструкции по его применению. Рекомендуемые параметры для обработки данных указаны
во вкладыше, прилагаемом к набору.
Анализ, вычисление и интерпретацию результатов можно проводить:
- в качественном и количественном формате в автоматическом режиме с использованием программного
обеспечения FRT Manager (ООО «ИнтерЛабСервис», Россия) согласно руководству пользователя, выбрав
методику, указанную во вкладыше, прилагаемом к набору. Руководство пользователя размещено на
официальном сайте ООО «ИнтерЛабСервис» по адресу:
https://www.interlabservice.ru/service/frt/ ;
- в качественном формате в ручном режиме с помощью программного обеспечения прибора, используемого для
проведения ПЦР с детекцией в режиме «реального времени», согласно инструкции по его применению и
инструкции к набору.
Версия 27.06.22-1
--- стр. 6 ---
^ ::П
АмплиПрайм у ДНекстБИО
ЬИГ'ЧЧНО.' и
•^омпамиг
Краткое руководство
по применению набора реагентов для выявления и
количественного определения ДНК вируса гепатита В
(HBV) методом полимеразной цепной реакции с
детекцией в режиме «реального времени»
«АмплиПрайм® HBV» по ТУ 21.20.23-160-09286667-2022
АмплиПрайм® HBV
Форма выпуска 2
ВНИМАНИЕ!
Перед использованием набора реагентов
необходимо ознакомиться с инструкцией по его
применению. Инструкция размещена в электронном
виде на официальном сайте Производителя:
www.nextbio.ru (для ее получения необходим доступ
в интернет). Печатная версия инструкции доступна по
запросу по телефону (495) 620-08-73.
МАТЕРИАЛ ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ
^ плазма крови
REF Р2121-22
ООО «НекстБио», Россия, 111394,
г. Москва, ул. Полимерная, д. 8, стр. 2
I тел. (495) 620-08-73, e-mail: info@nextbio.ru IVD
СОСТАВ КОМПЛЕКТНОСТЬ
Компонент Описание Объем,
мл Количество
ПЦР-смесь
HBV
Прозрачная
жидкость,
раскапана под
парафин
0,01
100 пробирок
(12,5 Стрипов по
8 пробирок)^
Буфер D Прозрачная
жидкость 0,6 2 пробирки
Тар
полимераза
Прозрачная
жидкость 0,06 2 пробирки
ПКО-1 HBV Прозрачная
жи/м<осгь 0,025 4 пробирки
ПКО-2 HBV Прозрачная
жидкоаь 0,025 4 пробирки
ВКО В Прозрачная
жидкость 0,6 2 пробирки
ОКО Прозрачная
жидкость 1Д 2 пробирки
К- Прозрачная
жидкость 0,3 2 пробирки
Набор реагентов рассчитан на проведение исследования |
100 образцов, включая контроли. |
Компонент Формат
Набор реагентов форма выпуска 2
Инструкция по
применению
в электронном виде по адресу:
www.nextbio.ru
Паспорт
качества
в электронном виде по адресу:
www.nextbio.ru
Краткое
руководство в бумажном виде
Комплект
вкладышей в бумажном виде
ХРАНЕНИЕ
Условия хранения набора
Набор хранить при температуре от - 24 до -16 *С в
защищенном отсвета месте. Необходимо
минимизировать время нахождения Тар полимеразы
при комнатной температуре. Контрольные образцы
(ПКО-1 HBV, ПКО-2 HBV, ВКО В и ОКО) после
разморозки хранить при температуре от 2 до 8 °С в
течение 6 месяцев. Не допускается повторная
_____заморозка контрольных образцов.________
^ Пробирки с голубым парафином не использу»отся.
Версия 27.06.22-1
--- стр. 8 ---
с
АМПЛИФИКАЦИЯ С ДЕТЕКЦИЕЙ В РЕЖИМЕ «РЕАЛЬНОГО ВРЕМЕНИ»
ВНИМАНИЕ! Для внесения в пробирки реагентов, проб ДНК и контрольных образцов использовать одноразовые
наконечники с фильтрами.
1. Рассчитать объемы реагентов, необходимые для приготовления реакционной смеси, согласно таблице:
1 Компонент реакционной смеси Объем, мкл Обозначения
Буфер D 10*(N+1) N - количество амплифицируемых образцов, включая
контролиTaq полимераза 1*(N+1)
ВНИМАНИЕ! Необходимо минимизировать время нахождения Taq полимеразы при комнатной температуре.
ВНИМАНИЕ! Компоненты реакционной смеси следует смешивать непосредственно перед проведением ПЦР.
ВНИМАНИЕ! Неиспользованные остатки реакционной смеси хранению не подлежат.
2. Разморозить Буфер D. Перед смешиванием реагентов перемешать содержимое пробирок с реагентами,
осадить капли на вортексе.
3. Приготовить реакционную смесь, добавив компоненты в объемах, рассчитанных в п. 1. Перемешать смесь и
осадить капли на вортексе.
4. Отобрать необходимое количество стрипованных пробирок с ПЦР-смесью HBV для проведения амплификации
ДНК исследуемых и контрольных образцов.
5. Убедиться, что парафин полностью покрывает раствор на дне пробирок. В противном случае, не использовать
данные пробирки.
6. Внести в подготовленные пробирки реакционную смесь и образцы согласно таблице:
Добавляемый реагент / образец
Внести по 10 мкл
Приготовленной реакционной смеси
в пробирки с ПЦР-смесью HBV на поверхность парафина
ВНИМАНИЕ! Реакционная смесь не должна проваливаться
под парафин.
внести по 10 мкл
ВНИМАНИЕ! Избегать попадания сорбента в реакционную смесь.
Пробы ДНК, экстрагированной из
исследуемого образца в пробирки для исследуемых образцов
Пробы, экстрагированной из ОКО в пробирку для образца ОКО (отрицательного контроля
экстракции)
Реагент К- в пробирку для образца К- (отрицательного контроля ПЦР)
Пробы, экстрагированной из ПКО-1 HBV
^только при нопичественноАА анализе) в пробирку для образца ПК1 (положительного контроля)
Пробы, экстрагированной из ПКО-2 HBV
(при начественном или количественном анализе)в пробирку для образца ПК2 (положительного контроля)
7. При ручном анализе запрограммировать амплификатор с системой детекции в режиме «реального времени»
согласно инструкции по его применению для выполнения следующей программы:
Единая программа амплификации и детекции флуоресцентного сигнала
Цикл Температура, °С Время Детекция по каналам для Количество
1 50 15 мин 1 1
2 95 15 мин - 1
3 95 Юс -
45
60 20 с РАМ, R6G^
^ Детекция сигнала для флуорофора R6G осуществляется по каналу детекции для аналогичных флуорофоров HEX, JOE, Yellow, VIC.
Версия 27.06.22-1
--- стр. 9 ---
Примечания
1} Рекомендуемые параметры для программирования амплификаторов указаны во вкладыше, прилагаемом к
набору.
2) В случае, если в одном приборе одновременно проводятся тесты только для выявления ДНК, можно удалить из
указанной программы первый шаг (50 "С -15 мин) для экономии времени.
ВНИМАНИЕ! При использовании программного обеспечения FRT Manager программирование амплификатора
устанавливается автоматически.
8. Перед постановкой в амплификатор планшетного типа осадить капли со стенок пробирок на вортексе.
9. Установить стрипы в ячейки реакционного модуля прибора.
Ю.Залустить выполнение программы амплификации с детекцией флуоресцентного сигнала согласно инструкции
по применению используемого амплификатора.
АНАЛИЗ, ВЫЧИСЛЕНИЕ И ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ
ВНИМАНИЕ! При ручном анализе обработку данных (флуоресцентных кривых), полученных в программном
обеспечении прибора, используемого для проведения ПЦР с детекцией в режиме «реального времени»,
проводить согласно инструкции по его применению. Рекомендуемые параметры для обработки данных указаны
во вкладыше, прилагаемом к набору.
Анализ, вычисление и интерпретацию результатов можно проводить:
- в качественном и количественном формате в автоматическом режиме с использованием программного
обеспечения FRT Manager (ООО «ИнтерЛабСервис», Россия) согласно руководству пользователя, выбрав
методику, указанную во вкладыше, прилагаемом к набору. Руководство пользователя размещено на
официальном сайте ООО «ИнтерЛабСервис» по адресу:
https://www.interlabservice.ru/service/frt/ ;
- в качественном формате в ручном режиме с помощью программного обеспечения прибора, используемого для
проведения ПЦР с детекцией в режиме «реального времени», согласно инструкции по его применению и
инструкции к набору.
Версия 27.06.22-1
--- стр. 10 ---
4
АмплиПрайм у £^НекстБИО
ттт Ьи:
Краткое руководство
по применению набора реагентов для выявления и
количественного определения ДНК вируса гепатита В
{HBV) методом полимеразной цепной реакции с
детекцией в режиме «реального времени»
«АмплиПрайм® HBV» по ТУ 21.20.23-160-09286667-2022
АмплиПрайм® HBV
Форма выпуска 3
ВНИМАНИЕ!
Перед использованием набора реагентов
необходимо ознакомиться с инструкцией по его
применению. Инструкция размещена в электронном
виде на официальном сайте Производителя:
www.nextbio.ru {для ее получения необходим доступ
в интернет). Печатная версия инструкции доступна по
запросу по телефону (495) 620-08-73.
МАТЕРИАЛ ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ
плазма крови
REF Р2121<23
ООО «НекаБио», Россия, 111394,
г. Москва, ул. Полимерная, д. 8, стр. 2
тел. (495) 620-08-73, e-mail: info@nextbto.ru IVD
СОСТАВ КОМПЛЕКТНОСТЬ
Компонент Описание Объем,
мл Количество
ПЦР-смесь
HBV
Прозрачная
жидкость,
раскапана под
парафин
0,01 100 пробирок
Буфер D Прозрачная
жидкость 0,6 2 пробирки
Taq
полимераза
Прозрачная
жидкость 0,06 2 пробирки
ПКО-1 HBV Прозрачная
жидкость 0,025 4 пробирки
ПКО-2 HBV Прозрачная
жидкость 0,025 4 пробирки
ВКО В Прозрачная
жидкоаь 0,6 2 пробирки
ОКО Прозрачная
жидкость 1,1 2 пробирки
К- Прозрачная
жидкость 0,3 2 пробирки
Набор реагентов рассчитан на проведение исследования
100 образцов, включая контроли.
Компонент Формат
Набор реагентов форма выпуска 3
Инструкция по
применению
в электронном виде по адресу:
www.nextbio.ru
Паспорт
качества
в электронном виде по адресу:
www.nextbio.ru
Краткое
руководство в бумажном виде
Комплект
вкладышей в бумажном виде
ХРАНЕНИЕ
Условия хранения набора
Набор хранить при температуре от - 24 до - 16 *С в
защищенном от света месте. Необходимо
минимизировать время нахождения Taq полимеразы
при комнатной температуре. Контрольные образцы
(ПКО-1 HBV, ПКО-2 HBV, ВКО В и ОКО) после
разморозки хранить при температуре от 2 до 8 *С в
течение 6 месяцев. Не допускается повторная
________заморозка контрольных образцов.________
Версия 27.06.22-1
--- стр. 12 ---
i
АМПЛИФИКАЦИЯ С ДЕТЕКЦИЕИ В РЕЖИМЕ «РЕАЛЬНОГО ВРЕМЕНИ»
ВНИМАНИЕ! Для внесения в пробирки реагентов, проб ДНК и контрольных образцов использовать одноразовые
наконечники с фильтрами.
1. Рассчитать объемы реагентов, необходимые для приготовления реакционной смеси, согласно таблице:
Компонент реакционной смеси Объем, мкл Обозначения
Буфер D 10*(N+1) N - количество амплифицируемых образцов, включая
контролиTaq полимераза 1*{N+1)
ВНИМАНИЕ! Необходимо минимизировать время нахождения Taq полимеразы при комнатной температуре.
ВНИМАНИЕ! Компоненты реакционной смеси следует смешивать непосредственно перед проведением ПЦР.
ВНИМАНИЕ! Неиспользованные остатки реакционной смеси хранению не подлежат.
2. Разморозить Буфер D. Перед смешиванием реагентов перемешать содержимое пробирок с реагентами,
осадить капли на вортексе.
3. Приготовить реакционную смесь, добавив компоненты в объемах, рассчитанных в п. 1. Перемешать смесь и
осадить капли на вортексе.
4. Отобрать необходимое количество пробирок с ПЦР-смесью HBV для проведения амплификации ДНК
исследуемых и контрольных образцов.
5. Убедиться, что парафин полностью покрывает раствор на дне пробирок. В противном случае, не использовать
данные пробирки.
6. Внести в подготовленные пробирки реакционную смесь и образцы согласно таблице:
Добавляемый реагент / образец
Внести по 10 мкл
Приготовленной реакционной смеси
В пробирки с ПЦР'Смесью HBV на поверхность парафина
ВНИМАНИЕ! Реакционная смесь не должна проваливаться
под парафин.
Внести по 10 мкл
ВНИМАНИЕ! Избегать попадания сорбента в реакционную смесь.
Пробы ДНК, экстрагированной из
исследуемого образца 5 пробирки для исследуемых образцов
Пробы, экстрагированной из ОКО в пробирку для образца ОКО (отрицательного контроля
экстракции)
Реагент К- в пробирку для образца К- (отрицательного контроля ПЦР)
Пробы, экстрагированной из ПКО-1 HBV
(только пои количественном анализе) в пробирку для образца ПК1 (положительного контроля)
Пробы, экстрагированной из ПКО-2 HBV
(при качественном или количественном анализе)в пробирку для образца ПК2 (положительного контроля)
7. При ручном анализе запрограммировать амплификатор с системой детекции в режиме «реального времени»
согласно инструкции по его применению для выполнения следующей программы:
Единая программа амплификации и детекции флуоресцентного сигнала
1 Цикл Температура, Время Детекция по каналам для Количество
циклов
1 1 50 15 мин 1
! 2 95 15 мин - 1
1 3
t
95 Юс -
45
60 20 с FAM, R6G‘
^ Детекция сигнала для флуорофора R6G осуществляется по каналу детекции для аналогичных флуорофоров HEX, JOE, Yellow, VIC.
Версия 27.06.22-1
--- стр. 13 ---
примечания
1) Рекомендуемые параметры для программирования амплификаторов указаны во вкладыше, прилагаемом к
набору.
2) В случае, если в одном приборе одновременно проводятся тесты только для выявления ДНК, можно удалить из
указанной программы первый шаг {50 *С -15 мин) для экономии времени.
ВНИМАНИЕ! При использовании программного обеспечения FRT Manager программирование амплификатора
устанавливается автоматически.
8. Перед постановкой в амплификатор планшетного типа осадить капли со стенок пробирок на вортексе.
9. Установить пробирки в ячейки реакционного модуля прибора.
10.Запустить выполнение программы амплификации с детекцией флуоресцентного сигнала согласно инструкции
по применению используемого амплификатора.
АНАЛИЗ, ВЫЧИСЛЕНИЕ И ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ
ВНИМАНИЕ! При ручном анализе обработку данных (флуоресцентных кривых), полученных в программном
обеспечении прибора, используемого для проведения ПЦР с детекцией в режиме «реального времени»,
проводить согласно инструкции по его применению. Рекомендуемые параметры для обработки данных указаны
во вкладыше, прилагаемом к набору.
Анализ, вычисление и интерпретацию результатов можно проводить:
- в качественном и количественном формате в автоматическом режиме с использованием программного
обеспечения FRT Manager (ООО «ИнтерЛабСервис», Россия) согласно руководству пользователя, выбрав
методику, указанную во вкладыше, прилагаемом к набору. Руководство пользователя размещено на
официальном сайте ООО «ИнтерЛабСервис» по адресу: https://www.interlabservice.ru/service/frt/ ;
- в качественном формате в ручном режиме с помощью программного обеспечения прибора, используемого для
проведения ПЦР с детекцией в режиме «реального времени», согласно инструкции по его применению и
инструкции к набору.
Версия 27.06.22-1
--- стр. 14 ---
АмплиПрайм J ^?^НекстБИО
Краткое руководство
по применению набора реагентов для выявления и
количественного определения ДНК вируса гепатита В
(HBV) методом полимеразной цепной реакции с
детекцией в режиме «реального времени»
«АмплиПрайм* HBV» по ТУ 21.20.23-160-09286667-2022
АмплиПрайм® HBV
Форма выпуска 4
ВНИМАНИЕ!
Перед использованием набора реагентов
необходимо ознакомиться с инструкцией по его
применению. Инструкция размещена в электронном
виде на официальном сайте Производителя;
www.nextbio.ru (для ее получения необходим доступ
в интернет). Печатная версия инструкции доступна по
запросу по телефону (495) 620-08-73.
МАТЕРИАЛ ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ
плазма крови
REF 2121-24
ООО «НекстБио», Россия, 111394,
г. Москва, ул. Полимерная, д. 8, стр. 2
' тел. (495) 620-08-73, e-mail: info@nextbio.ru IVD
СОСТАВ КОМПЛЕКТНОСТЬ
Компонент Описание Объем,
мл Количество
ПЦР-смесь
HBVLyo
Лиофилизат
белого цвета
96 пробирок
(12 стрипов по
8 пробирок)
ПКО-1 HBV
Lyo
ЛиофиЛИЗ()Т
белого цвета 4 пробирки
ПКО-2 HBV
Lyo
Лиофилизат
белого цвета 4 пробирки
ВКО В Lyo Лиофилизат
белого цвета 2 пробирки
ОКО Прозрачная
жидкость 1,1 2 пробирки
Разбавитель Прозрачная
жидкость 1,2 2 пробирки
Набор реагентов рассчитан на проведение исследования
96 образцов, включая контроли. __________________
Компонент Формат
Набор реагентов форма выпуска 4
Инструкция по
применению
в электронном виде по адресу;
www.nextbio.ru
Паспорт
качества
в электронном виде по адресу;
www.nextbio.ru
Краткое
руководство в бумажном виде
Комплект
вкладышей в бумажном виде
ХРАНЕНИЕ
Условия хранения набора
Набор беречь от влаги. Хранить при температуре от 2
до 8 *С в защищенном от света месте. Восстановленные
контрольные образцы (ПКО-1 HBV Lyo, ПКО-2 HBV Lyo,
ВКО В Lyo) хранить при температуре от 2 до 8 *С не
более 3 месяцев. ПЦР-смесь HBV Lyo хранить в пакете с
силикагелем. Упаковку слиофилизированными
реагентами необходимо вскрывать непосредственно
перед их восстановлением. Не допускается
замораживание реагентов набора._________
Версия 27.06.22-1
--- стр. 15 ---
ЭКСТРАКЦИЯ ДНК из ИССЛЕДУЕМОГО МАТЕРИАЛА
Для экстракции ДНК использовать наборы реагентов, рекомендованные Производителем в инструкции по
применению набора «АмплиПрайм* HBV». Порядок работы с наборами для экстракции ДНК смотрите в
инструкции по их применению.
ВНИМАНИЕ! Для экстракции из 100 мкл исследуемого образца используется комплект «АмплиПрайм РИБО-преп», из
200 или 1000 мкл-«МагноПрайм* Ультра» или другие наборы, рекомендуемые в инарукции по применению набора.
ВНИМАНИЕ) Калибратор ПКО-1 HBV Lyo используется только при проведении количественного анализа: в двух
повторах при первой постановке используемой серии набора, в одном - при последующих. Калибратор ПКО-2 HBV Lyo
используется в двух повторах при первой постановке в количественном формате, в одном - при последую 1дих
постановках в количественном формате и при постановке в качественном формате.
ВНИМАНИЕ! Реагент 6КО В Lyo вносится в каждую пробирку с исследуемыми и контрольными образцами (включая
положительные (ПКО-1 HBV Lyo, ПКО-2 HBV Lyo) и отрицательный (ОКО) контроли).
ВНИМАНИЕ! Реагенты ПКО-1 HBV Lyo, ПКО-2 HBV Lyo и ВКО В Lyo требуют восстановления.
Для восстановления лиофилизированных реагентов необходимо в пробирку с лиофилизатом добавить
Разбавитель в объеме, указанном в таблице ниже.
Реагент Разбавитель, мкл
ПКО-1 HBV Lyo 25
ПКО-2 HBV Lyo 25
ВКО в Lyo 600___________________________________________________1
Объемы реагентов и исследуемых образцов, используемые при экстракции ДНК с помощью рекомендуемых
наборов реагентов, указаны в таблице ниже.
Добавляемый реагент / образец
При экстракции из 100 мил образца
Исследуемые образцы 100 мкл в пробирки для исследуемых образцов
ВКО В Lyo (восстановленный) 10 мкл в каждую пробирку
ОКО 100 мкл в пробирку для ОКО (отрицательного контроля)
ПКО-1 HBV Lyo (восстановленный) 10 мкл + 90 мкл ОКО в пробирку для ПК1 (положительного контроля)
ПКО-2 HBV Lyo (восстановленный) 10 мкл + 90 мкл ОКО в пробирку для ПК2 (положительного контроля)
Реагент для элюции ДНК 50^ мкл в каждую пробирку
При экстракции из 200 мкл образца
Исследуемые образцы 200 мкл в пробирки для исследуемых образцов
ВКО В Lyo (восстановленный) 10 мкл в каждую пробирку
ОКО 200 мкл в пробирку для ОКО (отрицательного контроля)
ПКО-1 HBV Lyo (восаановленный) 10 мкл + 190 мкл ОКО в пробирку для ПК1 (положительного контроля)
ПКО-2 HBV Lyo (восстановленный) 10 мкл + 190 мкл ОКО в пробирку для ПК2 (положительного контроля)
Реагент для элюции ДНК 100 мкл в каждую пробирку
При экстракции из 1000 мкл образца
Исследуемые образцы 1000 мкл в пробирки для исследуемых образцов
ВКО В Lyo (восстановленный) 10 мкл в каждую пробирку
ОКО 1000 мкл в пробирку для ОКО (отрицательного контроля)
ПКО-1 HBV Lyo (восстановленный) 10 мкл + 990 мкл ОКО в пробирку для ПК1 (положительного контроля)
ПКО-2 HBV Lyo (восстановленный) 10 мкл + 990 мкл ОКО в пробирку для ПК2 (положительного контроля)
Реагент для элюции ДНК 100 мкл в каждую пробирку
^ При необходимости допускается увеличение объема элюции до 90 мкл.
Версия 27.06.22-1
--- стр. 16 ---
АМПЛИФИКАЦИЯ С ДЕТЕКЦИЕЙ В РЕЖИМЕ «РЕАЛЬНОГО ВРЕМЕНИ»
ВНИМАНИЕ! Для внесения в пробирки реагентов, проб ДНК и контрольных образцов использовать одноразовые
наконечники с фильтрами.
1. Отобрать необходимое количество стрипованных пробирок с ПЦР-смесью HBV Lyo для проведения
амплификации ДНК исследуемых и контрольных образцов.
2. Внести в пробирки с ПЦР-смесью HBV Lyo образцы согласно таблице:
Добавляемый реагент / образец
Внести по 20 мкл
ВНИМАНИЕ! Избегать попадания сорбента в реакционную смесь.
Пробы ДНК, экстрагированной из исследуемого
образца В пробирки для исследуемых образцов
Пробы, экстрагированной из ОКО в пробирку для образца ОКО (отрицательного контроля
экстракции)
Разбавитель в пробирку для образца К- (отрицательного контроля ПЦР)
Пробы, экарагированной из ПКО-1 HBV Lyo
(mo/ibHO при количественном анализе) в пробирку для образца ПК1 (положительного контроля)
Пробы, экстрагированной из ПКО-2 HBV Lyo
(при качественном или количественном анализе)в пробирку для образца ПК2 (положительного контроля)
3. При ручном анализе запрограммировать амплификатор с системой детекции в режиме «реального времени»
согласно инструкции по его применению для выполнения следующей программы:
Единая программа амплификации и детекции флуоресцентного сигнала
Цикл Температура, Время Детекция по каналам для Количество :
Мклов
1 50 15 мин - 1
2 95 15 мин - 1
3 95 Юс -
45
60 20 с FAM, R6G^
Примечания
1) Рекомендуемые параметры для программирования амплификаторов указаны во вкладыше, прилагаемом к
набору.
2) В случае, если в одном приборе одновременно проводятся тесты только для выявления ДНК, можно удалить из
указанной программы первый шаг (50 “С -15 мин) для экономии времени.
ВНИМАНИЕ! При использовании программного обеспечения FRT Manager программирование амплификатора
устанавливается автоматически.
4. Перед постановкой в амплификатор планшетного типа осадить капли со стенок пробирок на вортексе.
5. Установить стрипы в ячейки реакционного модуля прибора.
6. Запустить выполнение программы амплификации с детекцией флуоресцентного сигнала согласно инструкции
по применению используемого амплификатора.
^ Детекция сигнала для флуорофора R6G осуществляется по каналу детекции для аналогичных флуорофоров HEX, JOE, Yellow, VIC.
Версия 27,06.22-1
--- стр. 17 ---
1
АНАЛИЗ, ВЫЧИСЛЕНИЕ И ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ
ВНИМАНИЕ! При ручном анализе обработку данных (флуоресцентных кривых), полученных в программном
обеспечении прибора, используемого для проведения ПЦР с детекцией в режиме «реального времени»,
проводить согласно инструкции по его применению. Рекомендуемые параметры для обработки данных указаны
во вкладыше, прилагаемом к набору.
Анализ, вычисление и интерпретацию результатов можно проводить:
- в качественном и количественном формате в автоматическом режиме с использованием программного
обеспечения FRT Manager (ООО «ИнтерЛабСервис», Россия) согласно руководству пользователя, выбрав
методику, указанную во вкладыше, прилагаемом к набору. Руководство пользователя размещено на
официальном сайте ООО «ИнтерЛабСервис» по адресу:
https://www.interlabservice.ru/service/frt/ ;
- в качественном формате в ручном режиме с помощью программного обеспечения прибора, используемого для
проведения ПЦР с детекцией в режиме «реального времени», согласно инструкции по его применению и
инструкции к набору.
Версия 27.06.22-1
--- стр. 18 ---
Пронумеровано, скреплепо и прошито
лист (а/ов)
иый директор Общества с
отве тствеииостъю
0.0. Лавипюков
--- стр. 20 ---
АмплиПрайм IVD
’••••♦•в****
Набор реагентов для выявления и количественного определения ДНК вируса
гепатита В (HBV) методом полимеразной цепной реакции с детекцией в
режиме «реального времени» «АмплиПрайм® HBV»
по ТУ 21.20.23-160-09286667-2022
АмплиПрайм® HBV
ИНСТРУКЦИЯ ПО ПРИМЕНЕНИЮ
и Л
ООО «НекстБио», Россия, 111394,
г. Москва, ул. Полимерная, д. 8, стр. 2,
тел. (495) 620-08-73, e-mail: info@nextbio.ru
£^НекстБИО
Биотехнологическая
компания
--- стр. 21 ---
ОГЛАВЛЕНИЕ
СПИСОК СОКРАЩЕНИИ И ОБОЗНАЧЕНИЙ...........................................................................................3
1. НАЗНАЧЕНИЕ......................................................................................................................................4
2. ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА..............................................................................................................4
2.1. Формы выпуска, состав и комплектность.............................................................................4
2.2. Принцип метода.......................................................................................................................б
2.3. Прослеживаемость значений калибраторов.......................................................................7
3. КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА........................................................................................................................8
3.1. Внутренний контроль качества...............................................................................................8
3.2. Рекомендуемые контрольные материалы...........................................................................9
4. ОГРАНИЧЕНИЯ МЕТОДИКИ ИССЛЕДОВАНИЯ..............................................................................10
5. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ И ПРЕДУПРЕЖДЕНИЯ .................................................................10
6. ДОПОЛНИТЕЛЬНОЕ ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ ...............................................................12
6.1. Взятие и предварительная обработка исследуемого материала ..................................12
6.2. Экстракция ДНК из исследуемых образцов.......................................................................12
6.3. Амплификация, детекция продуктов амплификации, анализ и интерпретация
результатов.........................................................................................................................................12
7. ИССЛЕДУЕМЫЙ МАТЕРИАЛ............................................................................................................13
8. ПРОВЕДЕНИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ......................................................................................................14
8.1 Экстракция ДНК из исследуемого материала....................................................................14
8.2 Подготовка реагентов для амплификации.........................................................................17
8.3 Внесение проб ДНК, проведение амплификации и детекции........................................18
8.4 Анализ и вычисление результатов.......................................................................................19
8.5 Интерпретация результатов..................................................................................................21
8.6 Возможные ошибки и рекомендации по их решению....................................................22
8.7 Диагностическое значение полученного результата.......................................................23
9. ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА........................................................................23
9.1. Предел обнаружения............................................................................................................23
9.2. Линейный диапазон измерения и предел измерения....................................................23
9.3. Аналитическая специфичность.............................................................................................24
9.4. Воспроизводимость и повторяемость измерения ...........................................................24
9.5. Правильность измерения......................................................................................................24
9.6. Диагностическая специфичность и диагностическая чувствительность.......................25
9.7. Оценка влияния интерферирующих веществ....................................................................25
10. УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ, ТРАНСПОРТИРОВАНИЯ И ПРИМЕНЕНИЯ НАБОРА ...............................27
10.1. CpoK годности.......................................................................................................................27
10.2. Транспортирование............................................................................................................27
Ю.З.Хранение..................................................................................................................................27
11. ГАРАНТИИ ПРОИЗВОДИТЕЛЯ.........................................................................................................28
12. СИМВОЛЫ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ В ДОКУМЕНТАЦИИ ПРОИЗВОДИТЕЛЯ .....................................29
Версия 15.12.22-1
--- стр. 22 ---
список СОКРАЩЕНИИ И ОБОЗНАЧЕНИЙ
а - Cycle threshold (пороговый цикл)
HBV - Hepatitis В virus
вко - внутренний контрольный образец
воз - всемирная организация здравоохранения
МЕ - международные единицы
ДНК - дезоксирибонуклеиновая кислота
ДНКаза - дезоксирибонуклеаза
дНТФ - дезоксирибонуклеотидтрифосфаты
НК - нуклеиновая кислота
ПК1 - положительный контрольный образец 1, калибратор ПКО-1 HBV
илиПКО-lHBV Lyo
ПК2 - положительный контрольный образец 2, калибратор ПКО-2 HBV
или ПКО-2 HBV Lyo
К- - отрицательный контроль ПЦР
ОКО - отрицательный контрольный образец экстракции
ПЦР - полимеразная цепная реакция
РУ - регистрационное удостоверение
ТУ - технические условия
УДГ - урацил-ДНК-гликозилаза
НАИМЕНОВАНИЕ ИЗДЕЛИЯ
Набор реагентов для выявления и количественного определения ДНК вируса гепатита В (HBV)
методом полимеразной цепной реакции с детекцией в режиме «реального времени»
«АмплиПрайм® HBV» по ТУ 21.20.23-160-09286667-2022.
Далее по тексту употребляется краткое наименование: Набор реагентов «АмплиПрайм® HBV», а
также сокращение Набор реагентов.
Версия 15.12.22-1
--- стр. 23 ---
1. НАЗНАЧЕНИЕ
1.1. Набор реагентов «АмплиПрайм* HBV» предназначен для выявления и количественного
определения ДНК вируса гепатита В (HBV) в плазме крови методом ПЦР с гибридизационно-
флуоресцентной детекцией продуктов амплификации в режиме «реального времени».
1.2. Материалом для проведения ПЦР служат пробы ДНК, экстрагированные из исследуемого
материала с помощью наборов реагентов, рекомендованных а разделе инструкции «Дополнительное
оборудование и материалы».
1.3. Функциональное назначение: Набор реагентов предназначен для диагностики in vitro
(выявление и количественное определение ДНК вируса гепатита В (HBV) методом ПЦР в плазме
крови).
1.4. Показания к проведению исследования: Набор реагентов используется в клинической
лабораторной диагностике для исследования плазмы крови, полученной отлиц с диагнозом вирусный
гепатит В (после положительного серологического теста), для диагностики вирусного гепатита В, а
также для скрининга и мониторинга эффективности лечения вирусного гепатита В. Результаты ПЦР-
исследования учитываются в комплексной диагностике заболевания.
1.5. Применение набора реагентов не зависит от популяционных и демографических аспектов.
1.6. Потенциальные пользователи: Набор реагентов должен использоваться только
квалифицированным, обученным (в области клинической лабораторной диагностики) персоналом
(врачи клинической лаборатории и медицинские лабораторные техники, обученные молекулярным
биологическим методикам).
1.7. Применять набор реагентов строго по назначению согласно инструкции по применению.
1.8. Противопоказания к применению: Нарушение целостности упаковки, истекший срок
годности, несоблюдение требований инструкции.
2. ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА
2.1. Формы выпуска, состав и комплектность
Набор реагентов выпускается в четырех формах (состав набора и комплектность поставки указаны
в таблице 1 и 2 соответственно). Все формы предназначены для проведения амплификации ДНК с
гибридизационно-флуоресцентной детекцией продуктов амплификации в режиме «реального
времени». Для проведения полного исследования необходимо использовать наборы реагентов для
экстракции ДНК, рекомендованные в разделе «Дополнительное оборудование и материалы».
Форма выпуска 1 включает смесь для проведения ПЦР а пробирке объемом 1,5 или 2 мл для
дозирования в любые типы пробирок. Форма предназначена для применения совместно с
амплификаторами планшетного и роторного типа и рассчитана на проведение исследования
100 образцов, включая контроли. Форма может быть использована как для ручной раскапки, так и
совместно с автоматическими станциями для приготовления и дозирования реакционных смесей.
Форма выпуска 2 включает смесь для проведения ПЦР, раскапанную под прослойку парафина по
стрипованным (12,5 стрипов по 8 пробирок) пробиркам объемом 0,2 мл. Форма предназначена для
применения совместно с амплификаторами планшетного типа и рассчитана на проведение
исследования 100 образцов, включая контроли.
Версия 15.12.22-1
--- стр. 24 ---
Форма выпуска 3 включает смесь для проведения ПЦР, раскапанную под прослойку парафина по
пробиркам объемом 0,2 мл. Форма предназначена для применения совместно с амплификаторами
планшетного и роторного типа и рассчитана на проведение исследования 100 образцов, включая
контроли.
Форма выпуска 4 включает лиофилиэированную смесь для проведения ПЦР в стрипованных
пробирках (12 стрипов по 8 пробирок) объемом 0,2 мл. Форма предназначена для применения
совместно с амплификаторами планшетного типа и рассчитана на проведение исследования 96
образцов, включая контроли.
Таблица 1
Состав набора
Реагент Объем, мл Количество Описание
Форма выпуска 1
ПЦР-смесь HBV 0,6 2 пробирки
Буферный раствор со специфическими праймерами,
флуоресцентно-мечеными зондами и дНТФ.
Прозрачная жидкость.
Буфер С 0,3 2 пробирки
Буферный раствор, содержащий ионы
двухвалентного магния.
Прозрачная жидкость.
Taq полимераза 0,06 2 пробирки
Раствор с термостабильной ДНК-полимеразой Taq и
урацил-ДНК-гликозилазой.
Прозрачная жидкость.
ПКО-1 HBV 0,025 4 пробирки Положительный контрольный образец, калибратор.
Прозрачная жидкость.
ПКО-2 HBV 0,025 4 пробирки Положительный контрольный образец, калибратор.
Прозрачная жидкость.
ВКО В 0,6 2 пробирки Внутренний контрольный образец.
Прозрачная жидкость.
ОКО 1,1 2 пробирки Отрицательный контрольный образец.
Прозрачная жидкость.
К- 0,3 2 пробирки Отрицательный контрольный образец.
Прозрачная жидкость.
Форма выпуска 2
ПЦР-смесь HBV 0,01
100 пробирок
(12,5 стрипов по
8 пробирок)^
Буферный раствор со специфическими праймерами,
флуоресцентно-мечеными зондами и дНТФ.
Прозрачная жидкость, раскапана в стрипованные
пробирки под парафин белого цвета.
Буфер D 0,6 2 пробирки
Буферный раствор, содержащий ионы
двухвалентного магния.
Прозрачная жидкость.
Taq полимераза 0,06 2 пробирки
Раствор с термостабильной ДНК-полимеразой Taq и
урацил-ДНК-гликозилазой.
Прозрачная жидкость.
ПКО-1 HBV 0,025 4 пробирки Положительный контрольный образец, калибратор.
Прозрачная жидкость.
ПКО-2 HBV 0,025 4 пробирки Положительный контрольный образец, калибратор.
Прозрачная жидкость.
ВКО В 0,6 2 пробирки Внутренний контрольный образец.
Прозрачная жидкость.
ОКО 1,1 2 пробирки Отрицательный контрольный образец.
Прозрачная жидкость.
К- 0,3 2 пробирки Отрицательный контрольный образец.
Прозрачная жидкость.
Форма выпуска 3
ПЦР-смесь HBV 0,01 100 пробирок
Буферный раствор со специфическими праймерами,
флуоресцентно-мечеными зондами и дНТФ.
Прозрачная жидкость, раскапана под парафин.
^ пробирки с голубым парафином не используются.
Версия 15.12,22-1
--- стр. 27 ---
измерения концентрации контрольных образцов на основе генно-модифицированных конструкций с
использованием спектрофотометра. Коэффициент вариации измерений аттестованного значения
концентраций калибраторов составляет не более 5% (с уровнем доверительной вероятности 95%).
Концентрация рабочих положительных контролей измерена относительно четвертого
международного стандарта ВОЗ для ДНК HBV (NIBSC code 10/266) и выражена в МЕ/мл, Коэффициент
вариации измерений аттестованного значения концентраций калибраторов составляет не более 5% (с
уровнем доверительной вероятности 95%), Концентрация новых серий положительных контролей
производится относительно рабочих контролей (каждая серия) и относительно стандарта ВОЗ (одна из
10-ти серий).
3. КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
3.1. Внутренний контроль качества
3.1.1.0трицательный и положительный контроли исследования
Для контроля всех этапов исследования, эффективности экстракции ДНК и оценки влияния
ингибиторов ПЦР предусмотрено использование экзогенного ВКО - искусственной ДНК-содержащей
конструкции, которая вносится в каждый исследуемый образец биоматериала, отрицательный
контрольный образец этапа экстракции и положительные контрольные образцы. Результаты
исследования образцов должны соответствовать заданным критериям валидности, указанным в
разделе «Интерпретация результатов». Если результаты тестирования исследуемых образцов,
полученные для ВКО, не соответствуют заданным критериям валидности, указанным в разделе
«Интерпретация результатов», то результаты исследования данных образцов считаются
невалидными, требуется повторить их анализ, начиная с этапа экстракции.
Отрицательный контрольный образец (ОКО) тестируется, начиная с этапа экстракции, и позволяет
контролировать возможную контаминацию другими образцами или ампликонами. В пробирке с
отрицательным контролем не должна детектироваться ДНК HBV. В случае несоответствия результата,
полученного для контрольного образца, заданным критериям валидности, положительные
результаты для исследуемых образцов в постановке считаются недостоверными, необходимо
предпринять меры по выявлению и ликвидации источника контаминации и повторить исследование
всех исследуемых образцов, в которых обнаружена ДНК HBV и отрицательного контроля, начиная с
этапа экстракции.
Отрицательный контроль ПЦР (К-) тестируется, начиная с этапа ПЦР, и позволяет дополнительно
контролировать возможную контаминацию ампликонами. В пробирке с отрицательным контролем
ПЦР не должна детектироваться ДНК HBV или ВКО. В случае несоответствия результата, полученного
для контрольного образца заданным критериям валидности, положительные результаты для
исследуемых образцов в постановке считаются недостоверными, необходимо предпринять меры по
выявлению и ликвидации источника контаминации и повторить исследование всех образцов, в
которых обнаружена ДНК HBV или ВКО, начиная с этапа ПЦР.
В качестве положительного контроля используются реагенты ПКО-1 HBV (или ПКО-1 HBV Lyo) и
ПКО-2 HBV (или ПКО-2 HBV Lyo), входящие в состав набора. В случае несоответствия результатов для
положительных контролей заданным критериям валидности, результаты для всех образцов в
постановке считаются недостоверными, требуется повторить исследование всех исследуемых
образцов и контролей, начиная с этапа ПЦР.
Версия 15.12.22-1
--- стр. 28 ---
/
3.1.2. Анализ калибровки
Количественная оценка концентрации ДНК HBV в исследуемых образцах проводится относительно
количеавенно охарактеризованных калибровочных образцов ПКО-1 HBV (или ПКО-1 HBV Lyo) и ПКО-
2 HBV (или ПКО-2 HBV Lyo). Положительные контрольные образцы представляют собой
модифицированный бактериофаг \ с извеаной концентрацией ДНК HBV. Исследование
калибровочных образцов проводится параллельно с исследованием образцов, начиная с этапа
экстракции.
Определение концентрации ДНК проводится в соответствии с заданными значениями
концентраций калибровочных образцов и полученными значениями порогового цикла (Ct) для
калибровочных образцов и исследуемых образцов. Эффективность калибровки должна укладываться
в заданный диапазон. Если результаты, полученные для положительных контрольных образцов, не
соответавуют заданным, необходимо повторить исследование, начиная с этапа экстракции.
3.1.3. Контроль ингибирования
Для контроля всех этапов исследования, эффективности экстракции ДНК и оценки влияния
ингибиторов ПЦР предусмотрено использование экзогенного ВКО (реагент ВКО В), который
добавляется в каждый исследуемый и контрольные образцы на этапе экстракции. Результаты
исследования ВКО должны соответствовать заданным критериям валидности для положительных и
отрицательных исследуемых образцов, указанным в разделе «Интерпретация результатов». Если в
исследуемых образцах не обнаружена ДНК ВКО, то результаты исследования данных образцов
считаются недостоверными, требуется повторить их анализ, начиная с этапа экстракции.
3.1.4. Мониторинг лаборатории на наличие контаминации
Рекомендуется раз в месяц проводить мониторинг лаборатории на контаминацию продуктами
амплификации, исследуемыми образцами, положительными контрольными образцами. Оценка
наличия/отсутствия контаминации проводится путем исследования смывов с различных объектов;
пипеток, рабочих поверхностей лабораторной мебели, оборудования и поверхностей помещений.
Взятие и исследование смывов следует проводить согласно процедуре, описанной в
МУ 1.3.2569-09 «Организация работы лабораторий, использующих методы амплификации
нуклеиновых кислот при работе с материалом, содержащим микроорганизмы I-IV групп
патогенности». При обнаружении контаминации необходимо провести обработку лаборатории
моющими и дезинфицирующими растворами согласно указаниям, описанным в МУ 1.3.2569-09, Также
для предотвращения контаминации лаборатории или в качестве мер по деконтаминации рабочих зон
рекомендуется использовать раствор для дезактивации нуклеиновых кислот, например, «Олигатор»
производства ООО «НекстБио», Россия.
3.2. Рекомендуемые контрольные материалы
В качестве контрольных материалов для проверки заявленных функциональных характеристик
набора могут быть использованы зарегистрированные на территории Российской Федерации панели
контрольных образцов, предназначенные для проведения внутреннего и внешнего контролей
качества лабораторных исследований по обнаружению ДНК HBV.
Версия 15.12.22-1
--- стр. 29 ---
<
4. ОГРАНИЧЕНИЯ МЕТОДИКИ ИССЛЕДОВАНИЯ
4.1. Набор применяется только для диагностики in vitro.
4.2. Набор предназначен для работы только с исследуемым материалом, указанным а разделе
«Назначение». Исследование других видов биологического материала может привести к получению
недоаоверных результатов.
4.3. Получение достоверных результатов обеспечивается выполнением требований,
предъявляемых к взятию, транспортированию, подготовке и хранению образцов исследуемого
материала (см. раздел «Исследуемый материал»}.
4.4. С помощью набора возможно ПЦР-исследование только проб ДНК, экстрагированных из
исследуемого материала совместно с внутренним контрольным образцом - ВКО В. Без использования
ВКО В невозможно провести оценку валидности постановки.
4.5. Набор предназначен для профессионального применения. Набор должен использоваться
только квалифицированным, обученным (в области клинической лабораторной диагностики)
персоналом (врачи клинической лаборатории и медицинские лабораторные техники, обученные
молекулярным биологическим методикам).
4.6. При работе с набором следует использовать только амплификаторы с системой детекции
флуоресцентного сигнала, характеристики которыхудовлетворяюттребованиям, указанным в разделе
«Дополнительное оборудование и материалы».
5. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ И ПРЕДУПРЕЖДЕНИЯ
5.1. Работа должна проводиться в лаборатории, выполняющей молекулярно-биологические
(ПЦР) исследования биологического материала на наличие возбудителей инфекционных болезней, с
соблюдением требований СанПиН 3.3686-21 «Санитарно-эпидемиологические требования по
профилактике инфекционных болезней» и СанПиН 2.1.3684-21 «Санитарно-эпидемиологические
требования к содержанию территорий городских и сельских поселений, к водным объектам, питьевой
воде и питьевому водоснабжению, атмосферному воздуху, почвам, жилым помещениям,
эксплуатации производственных, общественных помещений, организации и проведению санитарно
противоэпидемических (профилактических) мероприятий». В соответавии с п. 4.4. МУ 1.3.2569-09
«Организация работы лабораторий, использующих методы амплификации нуклеиновых кислот при
работе с материалом, содержащим микроорганизмы HV групп патогенности» допускается
проведение исследований биологического материала (без предварительного накопления
возбудителя) на наличие ДНК (РНК) возбудителей парентеральных вирусных гепатитов в лаборатории,
имеющей санитарно-эпидемиологическое заключение о возможности проведения работ с
возбудителями lll-IV группы патогенности. Материал для исследований подлежит предварительной
обработке в соответствии с методическими указаниями МУ 1.3.2569-09.
5.2. При работе необходимо всегда выполнять следующие требования:
- Применять набор строго по назначению в соответствии с данной инструкцией. Отклонение от
прописанных процедур и порядка действий может привести к получению недостоверных результатов
анализа.
- Лабораторный процесс должен быть однонаправленным. Анализ следует проводить в
отдельных помещениях (зонах) в соответствии с МУ 1.3.2569-09. Не возвращать образцы,
оборудование и реагенты в зону, в которой была проведена предыдущая стадия процесса.
Версия 15.12.22-1 10
--- стр. 30 ---
- Рассматривать исследуемые образцы как инфекционно-опасные, организовывать работу и
хранение в соответствии с СанПиН 3.3686-21.
- Убирать и дезинфицировать разлитые образцы или реагенты, используя дезинфицирующие
средства в соответствии с СанПиН 3.3686-21.
- Удалять неиспользованные реагенты, реагенты с истекшим сроком годности, а также
использованные реагенты, yпaкoвкy^ биологический мaтepиaл^ включая материалы, инструменты и
предметы, загрязненные биологическим материалом, в соответствии с требованиями
СанПиН 2.1.3684-21.
ВНИМАНИЕ! При удалении отходов после амплификации (пробирок, содержащих продукты ПЦР)
недопустимо открывание пробирок и разбрызгивание содержимого, поскольку это может привести к
контаминации продуктами ПЦР лабораторной зоны, оборудования и реагентов.
- Использовать и менять при каждой операции одноразовые наконечники для автоматических
дозаторов с фильтром. Одноразовую пластиковую посуду (пробирки, наконечники) необходимо
сбрасывать в специальный контейнер, содержащий дезинфицирующее средство, которое может быть
использовано для обеззараживания медицинских отходов.
- Набор предназначен для однократного применения для проведения ПЦР-исследования
указанного количества образцов (см. раздел «Формы выпуска, состав и комплектность»).
- К работе с набором допускается только персонал, обученный методам молекулярной диагностики
и правилам работы в клинико-диагностической лаборатории в установленном порядке (в соответствии с
требованиями СанПиН 3.3686-21).
- Не использовать набор, если нарушена внутренняя упаковка или внешний вид реагента не
соответствует описанию.
- Не использовать набор, если не соблюдались условия транспортирования и хранения согласно
инструкции.
- Не смешивать реагенты разных серий.
- Не использовать набор по истечении срока годности.
- Использовать одноразовые неопудренные перчатки, лабораторные халаты, защищать глаза во
время работы с образцами и реагентами. Тщательно вымыть руки по окончании работы. Все операции
проводятся только в перчатках для исключения контакта с организмом человека.
- Не есть, не пить и не курить в процессе использования набора. Избегать контакта реагентов с
кожей, глазами и слизистой оболочкой. Не глотать.
- При контакте немедленно промыть пораженное место большим количеством воды и при
плохом самочувствии обратиться за медицинской помощью. При попадании внутрь рвоту не
вызывать, прополоскать рот водой, обратиться к врачу при плохом самочувствии.
5.3. При использовании по назначению и соблюдении вышеперечисленных мер
предосторожности набор безопасен. Реагенты набора (кроме Taq полимеразы и Разбавителя)
содержат натрия азид в концентрации не более 0,1 % и соответственно не классифицируются как
опасные и не требуют соблюдения специальных мер предосторожности, кроме указанных в данном
разделе.
^ Неиспользованные реагенты, реагенты с истекшим сроком годности, использованные реагенты, упаковка
относятся к классу опасности медицинских отходов Г.
® Биологический материал, включая инструменты и предметы, загрязненные материалом, относятся к классу
опасности медицинских отходов Б.
Версия 15.12.22-1 11
--- стр. 31 ---
5.4. Специфические воздействия набора на организлл человека:
- Канцерогенный эффект отсутствует.
- Мутагенное действие отсутствует.
- Репродуктивная токсичность отсутствует.
6. ДОПОЛНИТЕЛЬНОЕ ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ
6.1. Взятие и предварительная обработка исследуемого материала
Взятие и предварительную обработку исследуемого материала проводить согласно МУ 1.3.2569-09.
6.2. Экстракция ДНК из исследуемых образцов
6.2.1. Набор реагентов для экстракции нуклеиновых кислот, зарегистрированный в РФ и
соответствующий следующим требованиям:
- набор позволяет выделять ДНК из биологического материала (плазма крови) для последующего
исследования методом полимеразной цепной реакции;
- набор не относится к экспресс-методам экстракции ДНК;
- набор позволяет исследовать образцы объемом не менее 100 мкл;
- набор позволяет проводить элюцию очищенной ДНК в объеме не менее 50 мкл.
В ходе проведения клинических испытаний валидацию прошли «МагноПрайм* Ультра» и
«АмплиПрайм РИБО-преп» (РУ № ФСР 2012/14017).
6.2.2. Дополнительные материалы и оборудование, необходимые для экстракции ДНК, - согласно
инструкции к набору реагентов для экстракции ДНК.
6.3. Амплификация, детекция продуктов амплификации, анализ и интерпретация
результатов
6.3.1. Одноразовые полипропиленовые пробирки, свободные от ДНКаз, следующих видов (при
использовании формы выпуска 1):
- тонкостенные пробирки для ПЦР объемом 0,2 мл с выпуклой или плоской оптически прозрачной
крышкой или пробирки объемом 0,2 мл в стрипах по 8 шт. с прозрачными крышками - для проведения
ПЦР при использовании прибора планшетного типа;
- тонкостенные пробирки для ПЦР объемом 0,2 мл с плоской крышкой или пробирки для ПЦР
объемом 0,1мл в стрипах по 4 шт. с крышками - для проведения ПЦР при использовании прибора
роторного типа.
6.3.2. Завинчивающиеся пробирки и крышки к ним или плотно закрывающиеся пробирки объемом
1,5 - 2 мл - для приготовления реакционной смеси.
6.3.3. Одноразовые наконечники, свободные от ДНКаз, для дозаторов переменного объема с
фильтром до 100 мкл.
6.3.4. Штативы для пробирок объемом 0,2 мл или 0,1 мл (в соответствии с используемыми
пробирками для ПЦР).
6.3.5. Бокс абактериальной воздушной среды (ПЦР-бокс).
6.3.6. Центрифуга-вортекс.
Версия 15.12.22-1 12
--- стр. 32 ---
6.3.7. Автоматические дозаторы переменного объема.
6.3.8. Станция автоматическая с модулем для приготовления и раскапки реакционных смесей и
комплект расходных материалов к ней согласно инструкции Производителя, - при использовании
формы выпуска 1 в случае приготовления реакционной смеси с использованием автоматической
станции.
6.3.9. Программируемый амплификатор с системой детекции флуоресцентного сигнала в режиме
«реального времени» роторного типа, либо планшетного типа, зарегистрированный в РФ и
соответствующий следующим требованиям:
- наличие независимых каналов флуоресцентной детекции для флуорофоров РАМ и R6G со
следующими характеристиками:
Таблица 4
Требуемые характеристики каналов флуоресцентной детекции
Канал для флуорофора
Длины волн, нм
Возбуждения Детекции
Минимум 1 Максимум Минимум 1 Максимум
FAM 450 470 510 530
R6G 515 532 545 580
- для приборов планшетного типа наличие подогреваемой крышки с температурой более 100 “С;
- точность поддержания температуры < ±0,4 ®С;
- скорость нагрева не менее 2 “С/сек;
- скорость охлаждения не менее 1 *С/сек.
В ходе проведения клинических испытаний валидацию прошли следующие программируемые
амплификаторы с системой детекции флуоресцентного сигнала в режиме «реального времени»:
Rotor-Gene Q (РУ № ФСЗ 2010/07595), Applied Biosystems QuantStudio 5 (РУ № РЗН 2019/8446), С1000
Touch в комплекте с модулем CFX96 (РУ N9 ФСЗ 2008/03399), ДТпрайм (РУ № ФСР 2011/10229).
6.3.10. Холодильник от 2 до 8 *С с морозильной камерой от минус 24 до минус 16 *С.
6.3.11. Отдельный халат, шапочки, обувь и одноразовые перчатки в соответствии с МУ 1.3.2569-09.
6.3.12. Емкость для сброса наконечников.
7. ИССЛЕДУЕМЫЙ МАТЕРИАЛ
Материалом для исследования служит плазма крови.
Взятие, предварительную обработку, транспортирование и хранение исследуемого
биологического материала следует проводить в соответствии с МУ 1.3.2569-09.
Версия 15.12.22-1 13
--- стр. 33 ---
8. ПРОВЕДЕНИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
Исследование должно проводиться при нормальных показателях микроклимата клинико-
диагностической лаборатории®:
- температура окружающего воздуха от 20 до 28 “С;
- относительная влажность 40-75 %.
8.1 Экстракция ДНК из исследуемого материала
Для экстракции ДНК использовать наборы реагентов, рекомендованные Производителем в
разделе «Дополнительное оборудование и материалы». Порядок работы с наборами для экстракции
ДНК смотрите в инструкции по их применению.
ВНИМАНИЕ! При проведении исследования недопустимо использование экспресс-методов
экстракции ДНК.
8.1.1 При использовании форм выпуска 1, 2, 3.
Каждая группа экстрагируемых образцов должна сопровождаться постановкой отрицательного
контроля (ОКО) и положительных контрольных образцов (ПКО-1 HBV и ПКО-2 HBV) в указанном числе
повторов:
- ОКО - в одном повторе;
- ПКО-1 HBV - в двух повторах при первой постановке используемой серии набора, в одном - при
последующих (только при постановке в количественном формате);
- ПКО-2 HBV - в двух повторах при первой постановке в количественном формате, в одном - при
последующих постановках в количественном формате и при постановке в качественном формате,
ВНИМАНИЕ! Калибратор ПКО-1 HBV используется только при проведении количественного анализа.
Перед экстракцией необходимо разморозить контрольные образцы: ВКО В, ОКО, ПКО-1 HBV и ПКО-
2 HBV.
ВНИМАНИЕ! Размораживать следует только необходимое количество пробирок с реагентами. Для
одной постановки ПЦР требуется разморозка не более одной пробирки с ПКО-1 HBV и ПКО-2 HBV.
В процессе экстракции ДНК использовать объемы реагентов и исследуемых образцов согласно
таблице 5.
ВНИМАНИЕ! Реагент ВКО В вносится в каждую пробирку с исследуемыми и контрольными образцами
(включая положительные и отрицательный контроли).
ВНИМАНИЕ! Для экстракции ДНК из 100 мкл исследуемого образца используется комплект
«АмплиПрайм РИБО-преп», из 200 мкл - «МагноПрайм* Ультра», форма выпуска 1, из 1000 мкл -
«МагноПрайм® Ультра» форма выпуска 2 или другие рекомендуемые наборы (см. п. 6.2).
® Указаны допустимые нормы температуры и относительной влажности воздуха в рабочей зоне
производственных помещений в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 «Система стандартов
безопасности труда. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны».
Версия 15.12.22-1 14
--- стр. 36 ---
8.2 Подготовка реагентов для амплификации
8.2.1 При использовании формы выпуска 1.
ВНИМАНИЕ! Компоненты реакционной смеси следует смешивать непосредственно перед
проведением ПЦР.
ВНИМАНИЕ! Необходимо минимизировать время нахождения Taq полимеразы при комнатной
температуре.
ВНИМАНИЕ! В случае приготовления реакционной смеси с помощью автоматической станции
следуйте указаниям инструкции по ее использованию.
8.2.1.1 Рассчитать объемы реагентов, требующиеся для приготовления реакционной смеси (см.
таблицу 8). Смесь готовить на общее число исследуемых и контрольных образцов плюс запас не менее
чем на одну реакцию.
Таблица 8
Расчет объемов компонентов для одной реакционной смеси
Реагент Объем, мкл 1 Обозначения '
ПЦР-смесь HBV 10*(N+1)
Буфер С 5*(N+1) ” количество амплифицируемых образцов,
' ' включая контроли
Taq полимераза l’(N+l)
8.2.1.2 Разморозить реагенты. Перед смешиванием реагентов перемешать содержимое
пробирок с реагентами, осадить капли на вортексе.
8.2.1.3 Приготовить реакционную смесь, добавив компоненты в объемах, рассчитанных в
п. 8.2.1.1. Перемешать смесь и осадить капли на вортексе.
8.2.1.4 Отобрать необходимое количество пробирок или стрипов для амплификации ДНК
исследуемых и контрольных образцов. Выбор пробирок для амплификации зависит от используемого
амплификатора с системой детекции в режиме «реального времени».
8.2.1.5 внести в пробирки по 15 мкл приготовленной реакционной смеси.
ВНИМАНИЕ! Неиспользованные остатки реакционной смеси хранению не подлежат.
8.2.2 При использовании формы выпуска 2 и 3.
ВНИМАНИЕ! Необходимо минимизировать время нахождения Taq полимеразы при комнатной
температуре.
ВНИМАНИЕ! Компоненты реакционной смеси следует смешивать непосредственно перед
проведением ПЦР.
8.2.2.1 Рассчитать объемы Буфера D и Taq полимеразы, требующиеся для приготовления
реакционной смеси (см. таблицу 9). Смесь готовить на общее число исследуемых и контрольных
образцов плюс запас не менее чем на одну реакцию.
Таблица 9
Расчет объемов компонентов реакционной смеси
1 ■ "' ■ Реагент Объем, мкл Обозначения
Буфер D 10*(N+1) N - количество амплифицируемых образцов,
включая контролиTaq полимераза 1*(N+1)
Версия 15.12.22-1 17
--- стр. 37 ---
i
8.2.2.2 Разморозить Буфер D. Перед смешиванием реагентов перемешать содержимое пробирок
с реагентами, осадить капли на вортексе.
8.2.2.3 Приготовить реакционную смесь, добавив компоненты в объемах, рассчитанных в
п. 8.2.2.1. Перемешать смесь и осадить капли на вортексе.
8.2.2.4 Отобрать необходимое количество пробирок или стрипов с ПЦР-смесью HBV для
амплификации ДНК исследуемых и контрольных образцов.
8.2.2.5 Убедиться, что парафин полностью покрывает раствор на дне пробирок. В противном
случае, не использовать данные пробирки.
8.2.2.6 На поверхность парафина внести по 10 мкл приготовленной реакционной смеси, при этом
она не должна проваливаться под прослойку парафина и смешиваться с ПЦР-смесью.
ВНИМАНИЕ! Неиспользованные остатки реакционной смеси хранению не подлежат.
8.2.3 При использовании формы выпуска 4.
Отобрать необходимое количество стрипованных пробирок с ПЦР-смесью HBV Lyo для
амплификации ДНК исследуемых и контрольных образцов.
8.3 Внесение проб ДНК, проведение амплификации и детекции
ВНИМАНИЕ! При добавлении проб ДНК, экстрагированных с помощью наборов реагентов для
проведения экстракции методом сорбции на силикагеле или магнитной сепарации, необходимо
избегать попадания сорбента в реакционную смесь.
ВНИМАНИЕ! При ручном анализе (качественный формат) программирование и запуск амплификатора
проводить согласно инструкции по его применению. Рекомендуемые параметры для
программирования амплификаторов указаны во вкладыше, прилагаемом к набору. При
использовании программного обеспечения FRT Manager программирование амплификатора
устанавливается автоматически.
8.3.1 Внести в подготовленные пробирки с реакционной смесью/лиофилизатом пробы ДНК,
полученные в результате экстракции из тестируемых и контрольных образцов, и отрицательный
контроль ПЦР - реагент К- или Разбавитель в соответствии с таблицей 10.
Таблица 10
Образцы и их объемы для проведения амплификации
Объем тестируемого
ёА м & мкл Контрольный образец Объем контрольного
^1ййМимкл
При использовании форм выпуска 1,2,3
ПКО-1 HBV
(только при количественном анализе)
10
ПКО-2 HBV
(при качественном или количественном анализе) 10
ОКО
к-
При использовании формы выпуска 4
ПКО-1 HBV Lyo
(только при количественном анализе)
20
ПКО-2 HBV Lyo
(при качественном или количественном анализе) 20
ОКО
Разбавитель
Версия 15.12.22-1 18
--- стр. 38 ---
8.3.2 Запрограммировать амплификатор с системой детекции в режиме «реального времени» для
выполнения единой программы амплификации и детекции флуоресцентного сигнала (см. таблицу 11).
Таблица 11
Единая программа амплификации и детекции флуоресцентного сигнала
Цикл Температура, *С Время Детекция по каналам для Количество
1 50 15 мин - 1
2 95 15 мин - 1
3
95 Юс -
45
60 20 с РАМ, R6G^
Примечание • С использованием единой программы можно одновременно проводить в одном
приборе любое сочетание тестов, включая тесты с обратной транскрипцией и амплификацией. При
одновременном проведении нескольких тестов детекция флуоресцентного сигнала назначается и по
другим используемым каналам, помимо указанных в таблице. В случае если в одном приборе
одновременно проводятся тесты только для выявления ДНК, можно удалить из данной программы
первый шаг обратной транскрипции (50 "С -15 минут) для экономии времени.
8.3.3 Перед поаановкой в амплификатор планшетного типа осадить капли со стенок пробирок на
вортексе.
8.3.4 Установить пробирки или стрипы в ячейки реакционного модуля прибора.
8.3.5 Запустить выполнение программы амплификации с детекцией флуоресцентного сигнала.
8.3.6 Прибор проводит регистрацию флуоресцентного сигнала автоматически в режиме
«реального времени».
8.4 Анализ и вычисление результатов
ВНИМАНИЕ! При ручном анализе обработку данных (флуоресцентных кривых), полученных в
программном обеспечении прибора, используемого для проведения ПЦР с детекцией в режиме
«реального времени», проводить согласно инструкции по его применению. Рекомендуемые
параметры для обработки данных указаны во вкладыше, прилагаемом к набору.
ВНИМАНИЕ! Количественный анализ результатов возможно проводить только в автоматическом
режиме с использованием программного обеспечения FRT Manager (ООО «ИнтерЛабСервис», Россия,
РУ № РЗН 2019/8870) согласно руководству пользователя, выбрав методику, указанную во вкладыше,
прилагаемом к набору. Руководство пользователя размещено на официальном сайте ООО
«ИнтерЛабСервис» по адресу:
https://www.mterlabservice.ru/service/frt/ .
Обработка и расчет результатов происходит на основании наличия (или отсутствия) пересечения
кривой флуоресценции 5-образной (сигмообразной) формы с установленной на соответствующем
уровне пороговой линией, что определяет наличие (или отсутствие) для данной пробы ДНК значения
порогового цикла (Ct) в соответствующей графе таблицы результатов. Параметры обработки
флуоресцентных кривых зависят от используемой модели амплификатора (см. вкладыш к набору и
инструкцию по применению амплификатора).
^Детекция сигнала для флуорофора R6G осуществляется по каналу детекции для аналогичных флуорофоров HEX,
JOE, Yellow, VIC.
Версия 15.12.22-1 19
--- стр. 39 ---
<
кривые накопления флуоресцентного сигнала анализируются по двум каналам детекции
(см. таблицу 12).
Таблица 12
Детекция флуоресцентного сигнала
Канал для флуорофора РАМ R6G
Продукт амплификации ВКО ДНК HBV
На основании полученных значений порогового цикла (Ct) и заданных значений концентраций для
калибраторов строится калибровочная кривая, по которой проводится автоматический расчет
концентрации международных единиц ДНК HBV в 1 мл биологического образца (МЕ/мл).
При количественном анализе расчет концентрации ДНК HBV выполняется в двух вариантах:
• в ME ДНК возбудителя на 1 мл образца;
• в логарифмах ME ДНК возбудителя на 1 мл образца.
Расчет концентрации ДНК HBV проводится по формуле:
Собр= Коэффициент А х ((Co6p-i+ Собр-г) / 2 ),
Коэффициент А = 100 / объем экстракции (мкл),
Собр-1 “ CoKl/2* ((Cto6p. спец “ CtnKlcnen) ” (Cto6p. вко ~ CtoKl вко))/
Со6р-2 - Сп«г/2^ ({Cto6p. спец “ ССпк2 спец) “ (Cto6p. вко “ С1пк2 вко})/
где:
Собр- расчетное значение концентрации ДНК HBV (МЕ/мл) для каждого тестируемого образца;
Собр-1- расчетное значение концентрации ДНК HBV (МЕ/мл) для каждого тестируемого образца,
рассчитанное с учетом значений, полученных для ПК1;
Собр-г - расчетное значение концентрации ДНК HBV (МЕ/мл) для каждого тестируемого образца,
рассчитанное с учетом значений, полученных для ПК2;
Спк1 - концентрация ПК1 (МЕ/мл), указана во вкладыше к набору реагентов для калибратора
ПКО-1 HBV/ ПКО-1 HBV Lyo;
Спк2 - концентрация ПК2 (МЕ/мл)), указана во вкладыше к набору реагентов для калибратора
ПКО-2 HBV/ ПКО-2 HBV Lyo;
Cto6p. спец-значение Ct для тестируемого образца по каналу R6G;
CtnKicneu^“- значение Ct для образца ПК1 по каналу R6G;
С1пк2спец^®“ значение Ct для образца ПК2 по каналу R6G;
Cto6p. вко - значение Ct для тестируемого образца по каналу РАМ;
CtnKiBKo^°- значение Ct для образца ПК1 по каналу РАМ;
CtnK2BKo^°- значение Ct для образца ПК2 по каналу РАМ.
Для получения результатов в Lg X МЕ/мл необходимо воспользоваться функцией LOG в программе
Microsoft Excel.
При первой постановке серии набора для расчета используется среднее значение Ct, полученное для двух
повторов калибраторов.
Версия 15.12.22-1 20
--- стр. 41 ---
Результат Интерпретация
ДНК HBV обнаружена в концентрации менее
25 МЕ/мл при экстракции из 1000 мкл
образца
Рассчитанное значение концентрации ДНК по каналу для
флуорофора R6G находится в пределах линейного
диапазона измерения набора, при этом значение Ct по
каналу для флуорофора ГАМ определено не выше
граничного
ДНК HBV обнаружена в концентрации
ХхЮ'' МЕ/мл или Lg X МЕ/мл
Рассчитанное значение концентрации ДНК по каналу для
флуорофора R6G выше верхнего предела линейного
диапазона измерения набора, при этом значение Ct по
каналу для флуорофора ГАМ определено не выше
граничного
ДНК HBV обнаружена в концентрации более
1x10® МЕ/мл
Значение Ct по каналу для флуорофора R6G не определено,
а по каналу для флуорофора ГАМ определено не выше
граничного
ДНК HBV не обнаружена
Таблица 15
Критерии валидности для контрольных образцов
Контроль
Результаты амплификации по каналу для флуорофора
ГАМ R6G
ОКО
(отрицательный контроль
экаракции)
Определено значение Ct не выше
граничного^^ Значение Ct отсутствует
к-
(отрицательный контроль ПЦР) Значение Ct отсутствует
ПК2 Определено значение Ct не выше граничного
ПК1
ПК2
1 Показатель эффективности
амплификации (Е) для калибраторов
1 укладывается в диапазон 0,8 -1,2^®;
• Коэффициент детерминации (R^) не
менее 0,99^®-
8.6 Возможные ошибки и рекомендации по их решению
8.6.1 Для отрицательного контроля экстракции (ОКО) по каналу для флуорофора R6G определено
значение порогового цикла (Ct). Вероятна контаминация лаборатории продуктами амплификации или
контаминация реагентов или исследуемых образцов на каком-либо этапе исследования. Необходимо
предпринять меры по выявлению и ликвидации источника контаминации и повторить исследование
всех образцов, в которых обнаружена ДНК выявляемого вируса, начиная с этапа экстракции ДНК.
8.6.2 Для отрицательного контроля ПЦР (К-) по каналу для флуорофора FAM и/или
R6G/HEX/JOE/VIC определено значение порогового цикла (Ct). Вероятна контаминация лаборатории
продуктами амплификации или контаминация реагентов, исследуемых образцов на каком-либо этапе
ПЦР-исследования. Необходимо предпринять меры по выявлению и ликвидации источника
контаминации и повторить ПЦР-исследование всех образцов, в которых обнаружена ДНК выявляемого
вируса, начиная с этапа амплификации ДНК.
Граничные значения Ct указаны во вкладыше, прилагаемом к набору.
Данные критерии учитываются только при постановке в количественном формате.
Коэффициент детерминации (R^) учитывается при первой постановке используемой серии набора.
Версия 15.12.22-1 22
--- стр. 42 ---
8.6.3 Если показатель эффективности Е при построении калибровочной прямой менее 80% или
более 120 %, необходимо проверить правильность заданных значений концентраций калибраторов в
соответствии с вкладышем к набору реагентов и правильность выбранного уровня пороговой линии.
Если при правильно заданных концентрациях калибраторов и уровне пороговой линии показатель
эффективности не укладывается в требуемый диапазон, следует повторить исследование, начиная с
этапа ПЦР.
8.6.4 Для исследуемого образца определено значение порогового цикла, при этом на графике
флуоресценции отсутствует участок характерного экспоненциального подъема (график представляет
собой приблизительно прямую линию). Необходимо проверить правильность выбранного уровня
пороговой линии или параметров расчета базовой линии. Если результат получен при правильном
уровне пороговой линии (базовой линии), требуется повторно провести амплификацию и детекцию
для этого образца.
8.6.5 В случае получения невалидных или сомнительных результатов требуется повторное
исследование образца, начиная с этапа экстракции нуклеиновых кислот. В случае воспроизводимого
результата рекомендуется повторно провести взятие, предварительную подготовку и исследование
образца.
8.7 Диагностическое значение полученного результата
ПЦР-исследование является одним из методов всестороннего обследования пациента, на
основании которых лечаш,ий врач устанавливает диагноз и выбирает мероприятия по лечению
пациента. Результаты, полученные при использовании набора, следует рассматривать и
интерпретировать в сочетании с данными других клинических и лабораторных исследований.
9. ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА
9.1. Предел обнаружения 15
Предел обнаружения набора «АмплиПрайм® HBV» был определен с использованием пробит-анализа с
95%-ой доверительной вероятностью (см. таблицу 16).
Значения характеристики, указанные в таблице 16, достигаются при соблюдении правил, указанных в
разделе «Исследуемый материал».
Таблица 16
Предел обнаружения набо ра
Объем биоматериала при
экстракции, мкл
Предел обнаружения по
Probit 95%, МЕ/мл
95%-ый доверительный интервал,
МЕ/мл
100 50 42,8-58,6
200 25 22,5-28,2
1000 5 4,8 - 5,3
9.2. Линейный диапазон измерения и предел измерения
Диапазон, в котором набор дает линейный ответ, приведен в таблице 17. Предел измерения набора
является нижним пределом линейного диапазона измерения набора. Указанные значения характеристики
достигаются при соблюдении правил, указанных в разделе «Исследуемый материал».
Предел обнаружения - 95%-ое положительное пороговое значение концентрации (концентрация ДНК
выявляемого возбудителя, при которой 95% тестов дают положительный результат),
Версия 15.12.22-1 23
--- стр. 43 ---
Таблица 17
Линейный диапазон измерения набора
Объем биоматериала при экстракции, мкл ' Линейный диапазон измерения, МЕ/мл
100 2,5x10^ - 1x10®
200 1,25x10^-1x10®
1000 2,5x10^-1x10®
9.3. Аналитическая специфичность
Набор реагентов обнаруживает только фрагмент ДНК вируса гепатита В (HBV).
Аналитическая специфичность набора «АмплиПрайм® HBV» оценивалась тестированием НК
микроорганизмов и вирусов (см. таблицу 18) и геномной ДНК человека. НК микроорганизмов и
вирусов в концентрации не менее 1x10^ копий/мл и геномную ДНК человека в концентрации 1 мкг/мл
вносили в образцы биологического материала, не содержащие ДНК HBV.
Таблица 18
Микроорганизмы и вирусы, используемые для оценки аналитической специфичности
-
Микроорганизмы и вирусы
Hepatitis С virus (HCV) Herpes simplex virus 1 (HSV1)
Human immunodeficiency virus typel (HIV-1) Herpes simplex virus II (HSV II)
Human immunodeficiency virus type 2 (HIV-2) Staphylococcus aureus
Epstein-Barr virus (EBV) Streptococcus pyogenes
Cytomegalovirus (CMV) Streptococcus agalactiae
Human herpesvirus 6 (HHV6) Pseudomonas aeruginosa
Varicella Zoster virus (VZV) Escherichia coli
При тестировании образцов НК вышеперечисленных микроорганизмов и вирусов и геномной ДНК
человека с использованием набора перекрестных реакций выявлено не было.
9.4. Воспроизводимость и повторяемость измерения
Воспроизводимость и повторяемость результатов с использованием набора оценивали путем
тестирования модельных образцов. Модельные образцы были приготовлены путем контаминации
образцов плазмы крови стандартным образцом предприятия, содержащим искусственно-
синтезированную ДНК HBV. Каждый образец проходил все этапы исследования (экстракцию ДНК,
амплификацию ДНК и детекцию результатов).
При оценке повторяемости коэффициент вариации, рассчитанный по результатам определения
концентрации ДНК HBV, не превышал 5 %.
При оценке воспроизводимости коэффициент вариации, рассчитанный по результатам
определения концентрации ДНК HBV, не превышал 10 %.
9.5. Правильность измерения
Правильность измерения с использованием набора «АмплиПрайм® HBV» была определена путем
теаирования стандартного образца предприятия, содержащего искусственно-синтезированную ДНК
HBV, в 160 повторах (см. таблицу 19).
Версия 15.12.22-1 24
--- стр. 44 ---
/
Таблица 19
Правильность измерения
Среднее значение
концентрации ДНК HBV,
logio
Установленное
значение
концентрации, logic
5,67 5,7
Систематическая погрешность (В)
logic %
0,03 0,5
9.6. Диагностическая специфичность и диагностическая чувствительность
Для определения диагностической специфичности и диагностической чувствительности набора
«АмплиПрайм® HBV» были использованы 828 образцов плазмы крови,
В качестве наборов сравнения, с помощью которых устанавливали наличие/отсутствие ДНК HBV
использовались наборы реагентов «АмплиСенс® HCV/HBV/HIV-FL» (РУ № ФСР 2009/06187) и
«АмплиСенс® НВУ-Монитор-Р!» (РУ № ФСР 2007/00584).
Результаты тестирования набора «АмплиПрайм® HBV» в сравнении с наборами сравнения
приведены в таблице 20.
Таблица 20
Результаты тестирования образцов биологического материала с помощью набора
«АмплиПрайм® HBV»
Исследуемые образцы Результаты тестирования
Тип Количество Образцы
Тестируемый набор
АмплиПрайм* HBV
Наборы сравнения
АмплиСенс*
HCV/Hgtf/WV-ft
АмплиСенс*
HBV-MoKtyeiHFL
Положительных 184
Плазма крови 828 Отрицательных 644
184
644
184
Тестирование не
проводилось
Значения диагностической специфичности и диагностической чувствительности набора
«АмплиПрайм® HBV» с доверительной вероятностью 95%, рассчитанные, исходя из полученных
данных, приведены в таблице 21.
Таблица 21
Диагностические характеристики набора реагентов «АмплиПрайм® HBV»
1 Тип образцов 1 Диагностическая специфичность j Диагностическая чувствительность
j Плазма крови j 100% (99,43%-100%) 100 % (98,02 % - 100 %)
9.7. Оценка влияния интерферирующих веществ
Влияние интерферирующих вещеав, потенциально содержащихся или присутавующих в
исследуемом биоматериале, на эффективноаь ПЦР при использовании набора «АмплиПрайм® HBV»
отсутствует. Не выявлено ингибирование реакции амплификации при добавлении к образцам
биоматериала на этапе экаракции интерферирующих веществ, представленных в таблице 22, в
максимально возможной концентрации.
Версия 15.12.22-1 25
--- стр. 45 ---
Таблица 22
Интерферирующие вещества; использованные при тестировании набора
«АмпЛиПрайм® HBV»
Интерферент Концентрация интерферента в образце
гемоглобин 200 мг/мл
иммуноглобулин G 16 мг/мл
лактоферрин 1 мкг/мл
билирубин 200 мг/мл
триглицериды 5000-30000 мг/мл
альбумин 50000 - 60000 мг/мл
ДНК человека 1x10® копий/мл
Версия 15.12.22-1 26
--- стр. 46 ---
10. УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ, ТРАНСПОРТИРОВАНИЯ И ПРИМЕНЕНИЯ НАБОРА
10.1. срок годности
Срок годности всех форм выпуска набора составляет 12 месяцев от даты изготовления. После
вскрытия реагенты использовать согласно срокам, указанным в п.10.3. Набор с истекшим сроком
годности применению не подлежит.
10.2. Транспортирование
10.2.1. Формы выпуска 1, 2 , 3
Набор транспортировать при температуре от минус 24 до минус 16 *С всеми видами крытых
транспортных средств в термоконтейнерах с хладоэлементами или в авторефрижераторах.
Допускается транспортирование при температуре от 2 до 8 “С не более 5 суток.
Набор, транспортированный с нарушением указанного температурного режима, применению не
подлежит.
10.2.2. Форма выпуска 4
Набор транспортировать при температуре от 2 до 8 *С всеми видами крытых транспортных средств
в термоконтейнерах с хладоэлементами или в авторефрижераторах. Допускается транспортирование
при температуре от 8 до 25 *С не более 3 суток.
Не допускается замораживание реагентов набора.
Набор, транспортированный с нарушением указанного температурного режима, применению не
подлежит.
10.3. Хранение
10.3.1. Формы выпуска 1 , 2 , 3
Набор хранить при температуре от минус 24 до минус 16 “С взаш,ищенном от света месте в течение
всего срока годности набора.
Контрольные образцы (ПКО-1 HBV, ПКО-2 HBV, ВКО В и ОКО) после разморозки хранить при
температуре от 2 до 8 в течение 6 месяцев. Не допускается повторная заморозка контрольных
образцов. Остальные реагенты после вскрытия хранить в тех же условиях, что и до вскрытия.
Невскрытые и вскрытые реагенты стабильны в течение срока годности, указанного на этикетке, при
соблюдении указанных условий хранения. Необходимо минимизировать время нахождения Tag
полимеразы при комнатной температуре.
Реакционная смесь, приготовленная из реагентов, хранению не подлежит.
Набор, хранившийся с нарушением указанного режима хранения, применению не подлежит.
10.3.2. Форма выпуска 4
Набор беречь от влаги. Хранить при температуре от 2 до 8 ‘’С в защищенном от света месте в
течение всего срока годности набора. ПЦР-смесь HBV Lyo хранить в пакете с силикагелем.
Восстановленные контрольные образцы (ПКО-1 HBV Lyo, ПКО-2 HBV Lyo, ВКО В Lyo) хранить при
температуре от 2 до 8 "С не более 3 месяцев.
Версия 15.12.22-1 27
--- стр. 47 ---
Упаковку с лиофилизированными реагентами (ПКО-1 HBV Lyo, ПКО-2 HBV Lyo, ВКО В Lyo)
необходимо вскрывать непосредственно перед их восстановлением.
Реагенты после вскрытия хранить в тех же условиях, что и до вскрытия. Невскрытые и вскрытые
реагенты (за исключением восстановленных) стабильны в течение срока годности, указанного на
этикетке, при соблюдении указанных условий хранения. Не допускается замораживание реагентов
набора.
Набор, хранившийся с нарушением указанного режима хранения, применению не подлежит.
11. ГАРАНТИИ ПРОИЗВОДИТЕЛЯ
Производитель гарантирует соответавие характеристик набора требованиям, указанным в
технической и эксплуатационной документации, в течение указанного срока годности при
соблюдении всех условий транспортирования, хранения и применения.
Рекламации на качество набора «АмплиПрайм*^ HBV» направлять в адрес производителя
ООО «НекстБио»: 111394, г. Москва, ул. Полимерная, 8 стр. 2, тел. (495) 620-08-73, e-mail:
info@nextbio.ru.
При выявлении нежелательных реакций при использовании набора, фактов и обстоятельств,
создающих угрозу жизни и здоровью граждан и медицинских работников при обращении и
эксплуатации набора, рекомендуется направить сообщение по адресу, указанному выше, и в
уполномоченную государственную регулирующую организацию (в Российской Федерации -
Федеральная служба по надзору в сфере здравоохранения) в соответствии с действующим
законодательством.
Консультацию по работе с набором, а также по вопросам, касающимся качества набора, можно
получить по контактам, указанным на официальном сайте Производителя: www.nextbio.ru.
версия 15.12.22-1 28
--- стр. 48 ---
12. СИМВОЛЫ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ В ДОКУМЕНТАЦИИ ПРОИЗВОДИТЕЛЯ
REF Номер по каталогу
ш Л
Изготовитель
LOTI Код партии
н
Дата изготовления
IVD
V
т
Медицинское изделие для
диагностики in vitro
Содержимого достаточно для
проведения п-количества
тестов
Обратитесь к инструкции по
применению
I
Использовать до
Температурный
диапазон
Не допускать
попадания солнечного
света
А
Осторожно! Обратитесь к
инструкции по применению f
Беречь от влаги
Версия 15.12.22-1 29
--- стр. 50 ---
I
УТВЕРЖДАЮ
НАБОР РЕАГЕНТОВ ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ И КОЛИЧЕСТВЕННОГО
ОПРЕДЕЛЕНИЯ ДНК ВИРУСА ГЕПАТИТА В (HBV) МЕТОДОМ
ПОЛИМЕРАЗНОЙ ЦЕПНОЙ РЕАКЦИИ С ДЕТЕКЦИЕЙ В РЕЖИМЕ
«РЕАЛЬНОГО ВРЕМЕНИ» «АМПЛИПРАЙМ® HBV»
ПО ТУ 21.20.23-160-09286667-2022
Форма выпуска 1
Форма выпуска 2
Форма выпуска 3
Форма выпуска 4
Шаблон паспорта качества
Лист утверждения
--- стр. 51 ---
\ щАмплиПрайм® HBV
Набор реагентов для выявления и количественного определения ДНК вируса гепатита В (HBV)
методом полимеразной цепной реакции с детекцией в режиме «реального времени»
«АмллиПрайм* HBV» поТУ 21.20.23-160-09286667-2022
ФОРМА ВЫПУСКА 1 2
Контроль качества проведен по ТУ 21.20.23-160-09286667-2022.
1. УПАКОВКА И МАРКИРОВКА НАБОРА
Упаковка и маркировка набора указанной серии соответствуют требованиям ТУ 21.20.23-160-09286667-2022.
2. КОМПЛЕКТНОСТЬ ПОСТАВКИ
гггг-мм-дд
гггг-мм-дд
Компонент Характеристика Норма Результаты
контроля
Набор реагентов «АмплиПрайм* HBV»форма выпуска 1 в наличии соответствует
Инструкция по применению набора в электронном виде на официальном
Производителя: www.nextbio.ru
сайте в наличии соответствует
Краткое руководство по применению
набора в бумажном виде в наличии соответствует
Комплект вкладышей в бумажном виде в наличии соответствует
Паспорт качества в электронном виде на официальном
Производителя: www.nextbio.ru
сайте в наличии соответствует
3. СОСТАВ НАБОРА И ВНЕШНИЙ ВИД КОМПОНЕНТОВ
Компонент Норма Результаты
контроля
ПЦР-смесьНВУ 2 пробирки. Прозрачная жидкость. соответствует
Буфер С 2 пробирки. Прозрачная жидкость. соответствует
Taq полимераза 2 пробирки. Прозрачная жидкость. соответствует
ПКО-1 HBV 4 пробирки. Прозрачная жидкость. соответствует
ПКО-2 HBV 4 Пробирки. Прозрачная жидкость. соответствует
ВКО В 2 пробирки. Прозрачная жидкость. соответствует
ОКО 2 пробирки. Прозрачная жидкость. соответствует
К- 2 пробирки. Прозрачная жидкость. соответствует
4. ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА^
Показатель Норма Результаты
контроля
Предел обнаружения
Выявление ДНК HBV при исследовании разведения
стандартного образца предприятия «СОП 115-22 ДНК HBV» до
концентрации 25 МЕ/мл
ДНК HBV обнаружена. соответствует
Предел измерения
Количественное определение ДНК HBV при исследовании
разведения стандартного образца предприятия «СОП 115-22
ДНК HBV» до концентрации 125 МЕ/мл
Получен количественный результат,
укладывающийся в диапазон
39,5-395 МЕ/мл.
соответствует
Результаты тестирования исследуемых образцов и контролем исследования соответствуют критериям валидности, указанным
в инструкции по применению набора.
Тестируются при экстракции из 200 мкл образца.
--- стр. 52 ---
5. УСЛОВИЯ ТРАНСПОРТИРОВАНИЯ И ХРАНЕНИЯ
Условия транспортирования Условия хранения
Набор транспортировать при температуре от - 24 до - 16-°С.
Допускается транспортирование при температуре от 2 до 8 °С
не более 5 суток.
Набор хранить при температуре от - 24 до - 16 “С в
защиш,енном от света месте. Контрольные образцы (ПКО-1
HBV, ПКО-2 HBV, ВКО В и ОКО) после разморозки хранить при
температуре от 2 до 8 ‘С в течение 6 месяцев. Не допускается
повторная заморозка контрольных образцов.
Дата выдачи паспорта ХХ.ХХ.ХХ
Должность печать подразделения подпись (расшифровка)
--- стр. 53 ---
-£=НекстБИО ООО «НекстБио», Россия,111394, г. Москва, уя. Полимерная, д. 8, стр. 2,
тел. (495) 620-08-73, e-mail: info@nextbio.ru
ПАСПОРТ КАЧЕСТВА
№ номер лота/Р2121-22
АмплиПрайм® HBV
Набор реагентов для выявления и количеавенного определения ДНК вируса гепатита В (HBV)
методом полимеразной цепной реакции с детекцией в режиме «реального времени»
« АмплиПрайм» HBV» по ТУ 21.20.23-160-09286667-2022
ФОРМА ВЫПУСКА 2
Контроль качества проведен по ТУ 21.20.23-160-09286667-2022.
1. УПАКОВКА И МАРКИРОВКА НАБОРА
Упаковка и маркировка набора указанной серии соответствуют требованиям ТУ 21.20.23-160-09286667-2022.
2. КОМПЛЕКТНОСТЬ ПОСТАВКИ
ГГГГ-ММ-ДД
гггг-мм-дц
Компонент Характеристика Норма Результаты
WPilTpOWt
Набор реагентов «АмплиПрайм* HBV»форма выпуска 2 в наличии соответствует
Инструкция по применению набора в электронном виде на официальном
Производителя: www.nextbio.ru
сайте в наличии соответствует
Краткое руководство по применению
набора в бумажном виде в наличии соответствует
Комплект вкладышей в бумажном виде в наличии соответствует
Паспорт качества в электронном виде на официальном
Производителя: www.nextbio.ru
сайте в наличии соответствует
3. СОСТАВ НАБОРА И ВНЕШНИЙ ВИД КОМПОНЕНТОВ
Компонент Норма Результаты
контроля
ПЦР-смесьНВУ 100 пробирок (12,5 стрипов по 8 пробирок). Прозрачная жидкость,
раскапана под парафин белого цвета. соответствует
Буфер 0 2 пробирки. Прозрачная жидкость. соответствует
Taq полимераза 2 пробирки. Прозрачная жидкость. соответствует
ПКО-IHBV 4 пробирки. Прозрачная жидкость. соответствует
ПКО-2 HBV 4 пробирки. Прозрачная жидкость. соответствует
ВКОВ 2 пробирки. Прозрачная жидкость. соответствует
ОКО 2 пробирки. Прозрачная жидкость. соответствует
К- 2 пробирки. Прозрачная жидкость. соответствует
4. ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА^
Показатель Норма Результаты
контроля
Предел обнаружения
Выявление ДНК HBV при исследовании разведения
стандартного образца предприятия «СОП 115-22 ДНК HBV» до
концентрации 25 МЕ/мл
ДНК HBV обнаружена. соответствует
Предел измерения
Количественное определение ДНК HBV при исследовании
разведения стандартного образца предприятия «СОП 115-22
ДНК HBV» до концентрации 125 МЕ/мл
Получен количественный
укладывающийся в
39,5-395 МЕ/мл.
результат,
диапазон соответствует
Результаты тестирования исследуемых образцов и контролей исследования соответствуют критериям валидности, указанным
в инструкции по применению набора.
Тестируются при экстракции из 200 мкл образца.
--- стр. 54 ---
у 5. УСЛОВИЯ ТРАНСПОРТИРОВАНИЯ И ХРАНЕНИЯ
Условия транспортирования Условия хранения
Набор транспортировать при температуре от - 24 до - 16/С.
Допускается транспортирование при температуре от 2 до 8®С
не более 5 суток.
Набор хранить при температуре от - 24 до - 16 “С в
защищенном от света месте. Контрольные образцы (ПКО-1
HBV, ПКО-2 HBV, ВКО в и ОКО) после разморозки хранить при
температуре от 2 до 8 *С в течение 6 месяцев. Не допускается
повторная заморозка контрольных образцов.
Дата выдачи паспорта ХХ.ХХ.ХХ
Должность печать подразделения подпись (расшифровка)
--- стр. 55 ---
НекстБИО
&иотехноло'имсск^я
<OwndH>«fl
ООО «НекстБио», РоссияД11394, г. Москва, ул. Полимерная, д. 8, стр. 2,
тел. (495) 620-08-73, e-mail: info@nextbio.ru
ПАСПОРТ КАЧЕСТВА
№ номер лота/Р2121-23
АмплиПрайм® HBV |ЮТ|
Набор реагентов для выявления и количественного определения ДНК вируса гепатита В (HBV)
методом полимеразной цепной реакции с детекцией в режиме «реального времени»
«АмплиПрайм* HBV» по ТУ 21.20.23-160-09286667-2022
ФОРМА ВЫПУСКА 3 2
Контроль качества проведен по ТУ 21.20.23-160-09286667-2022.
1. УПАКОВКА И МАРКИРОВКА НАБОРА
Упаковка и маркировка набора указанной серии соответствуют требованиям ТУ 21.20.23-160-09286667-2022.
2. КОМПЛЕКТНОСТЬ ПОСТАВКИ
гггг-мм-дц
гггг-мм-дд
Компонент Характеристика Норма Результаты
контроля
Набор реагентов «АмплиПрайм® НВУ»форма выпуска 3 в наличии соответствует
Инструкция по применению набора в электронном виде на официальном
Производителя: www.nextbio.ru
сайте в наличии соответствует
Краткое руководство по применению
набора в бумажном виде в наличии соответствует
Комплект вкладышей в бумажном виде в наличии соответствует
Паспорт качества в электронном виде на официальном
Производителя: www.nextbio.ru
сайте в наличии
‘
соответствует
3. СОСТАВ НАБОРА И ВНЕШНИЙ ВИД КОМПОНЕНТОВ
Компонент Норма Результаты
контроля
ПЦР-смесь HBV 100 пробирок. Прозрачная жидкость, раскапана под парафин. соответствует
Буфер D 2 пробирки. Прозрачная жидкость. соответствует
Тар полимераза 2 пробирки. Прозрачная жидкость. соответствует
ПКО-1 HBV 4 пробирки. Прозрачная жидкость. соответствует
ПКО-2 HBV 4 пробирки. Прозрачная жидкость. соответствует
ВКОВ 2 пробирки. Прозрачная жидкость. соответствует
ОКО 2 пробирки. Прозрачная жидкость. соответствует
К- 2 пробирки. Прозрачная жидкость. соответствует
4. ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА^
Показатель Норма Результаты
контроля
предел обнаружения
Выявление ДНК HBV при исследовании разведения
стандартного образца предприятия «СОП 115-22 ДНК HBV» до
концентрации 25 МЕ/мл
ДНК HBV обнаружена. соответствует
Предел измерения
Количественное определение ДНК HBV при исследовании
разведения стандартного образца предприятия «СОП 115-22
ДНК HBV» до концентрации 125 МЕ/мл
Получен количественный
укладывающийся в
39,5-395 МЕ/мл,
результат,
диапазон соответствует
Результаты тестирования исследуемых образцов и контролей исследования соответствуют критериям валидности, указанным
в инструкции по применению набора.
• Тестируются при экстракции из 200 мкл образца,
--- стр. 56 ---
5. УСЛОВИЯ ТРАНСПОРТИРОВАНИЯ И ХРАНЕНИЯ
Условия транспортирования Условия хранения
Набор транспортировать при температуре от - 24 до ~ 16.“С.
Допускается транспортирование при температуре от 2 до 8 “С
не более 5 суток.
Набор хранить при температуре от - 24 до - 16 °С в
заш,иш,енном от света месте. Контрольные образцы (ПКО-1
HBV, ПКО-2 HBV, ВКО В и ОКО) после разморозки хранить при
температуре от 2 до 8 °С в течение 6 месяцев. Не допускается
повторная заморозка контрольных образцов.
Дата выдачи паспорта ХХ.ХХ.ХХ
Должность печать подразделения подпись (расшифровка)
--- стр. 57 ---
fF, НекстБИО ООО «НекстБио», Россия,111394, г. Москва, уя. Полимерная, д. 8, стр. 2,
тел. (495) 620-08-73, e-mail: info@nextbio.ru
ПАСПОРТ КАЧЕаВА
№ номер лота/2121-24
АмплиПрайм® HBV
Набор реагентов для выявления и количественного определения ДНК вируса гепатита В (HBV)
методом полимеразной цепной реакции с детекцией в режиме «реального времени»
«АмплиПрайм* HBV» по ТУ 21.20.23-160-09286667-2022
ФОРМА ВЫПУСКА 4 ^
Контроль качества проведен по ТУ 21.20.23-160-09286667-2022.
1. УПАКОВКА И МАРКИРОВКА НАБОРА
Упаковка и маркировка набора указанной серии соответствуют требованиям ТУ 21.20.23-160-09286667-2022.
2. КОМПЛЕКТНОСТЬ ПОСТАВКИ
ГГГГ-ММ-ДД
гггг-мм-дд
Компонент Характериаика Норма Результаты
И011?рВЯЯ
Набор реагентов «АмплиПрайм* HBV»форма выпуска 4 в наличии соответствует
Инструкция по применению набора в электронном виде на официальном
Производителя: www.nextbio.ru
сайте в наличии соответствует
Краткое руководство по применению
набора в бумажном виде в наличии соответствует
Комплект вкладышей в бумажном виде в наличии соответствует
Паспорт качества в электронном виде на официальном
Производителя: www.nextbio.ru
сайте в наличии соответствует
3. СОСТАВ НАБОРА И ВНЕШНИЙ ВИД КОМПОНЕНТОВ
Компонент Норма Результаты
контроля
ПЦР-смесьНВУ Lyo 96 пробирок (12 стрипов по 8 пробирок). Лиофилизат белого цвета.соответствует
ПКО-lHBVLyo 4 пробирки. Лиофилизат белого цвета. соответствует
ПКО-2 HBV Lyo 4 пробирки. Лиофилизат белого цвета. соответствует
ВКО В Lyo 2 пробирки. Лиофилизат белого цвета. соответствует
ОКО 2 пробирки. Прозрачная жидкость. соответствует
Разбавитель 2 пробирки. Прозрачная жидкость. соответствует
4. ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА^
Показатель Норма Результаты
контроля
предел обнаружения
Выявление ДНК HBV при исследовании разведения
стандартного образца предприятия «СОП 115-22 ДНКНВУ»до
концентрации 25 МЕ/мл
ДНК HBV обнаружена. соответствует
Предел измерения
Количественное определение ДНК HBV при исследовании { Получен количественный результат,
разведения стандартного образца предприятия «СОП 115-22 укладывающийся в диапазон
ДНК HBV» до концентрации 125 МЕ/мл 39,5-395 МЕ/мл.
соответствует
Результаты тестирования исследуемых образцов и контролен исследования соответствуют критериям валидности, указанным
в инструкции по применению набора.
Тестируются при экстракции из 200 мкл образца.
--- стр. 58 ---
5. УСЛОВИЯ ТРАНСПОРТИРОВАНИЯ И ХРАНЕНИЯ
Условия транспортирования Условия хранения
Набор транспортировать при температуре от 2 до 8 “С.
Допускается транспортирование при температуре от 8 до 25 *С
не более 3 суток. Не допускается замораживание реагентов
набора.
Набор хранить при температуре от 2 до 8 *С в защиш,енном от
света месте. Восстановленные контрольные образцы (ПКО-1
HBV Lyo, ПКО-2 HBV Lyo, ВКО В Lyo) хранить при температуре от
2 до 8 °С не более 3 месяцев. ПЦР-смесь HBV Lyo хранить в
пакете с силикагелем. Упаковку с лиофилиэированными
реагентами необходимо вскрывать непосредственно перед их
восстановлением. Не допускается замораживание реагентов
набора.
Дата выдачи паспорта ХХ.ХХ.ХХ
Должность печать подразделения подпись (расшифровка)