Набор реагентов для выделения нуклеиновых кислот из клинических образцов на основе сорбции на магнитных частицах "МагноСП-НК-Био", по ТУ 21.20.23-646-98539446-2022 — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 1 ---
и Intifica
Иктифика • наборы ддя молекулярных исследований
ООО «Компания Алкор Био»
г. Санкт-Петербург, Железнодорожный пр., дом 40, литЛ
Телефон/факс: (812) 677-87-79
ПАСПОРТ № Е005
«Набор реагентов для выделения нуклеиновых кислот из клинических
образцов на основе сорбции на магнитных частицах
«МагноСП-НК-Био», по ТУ 21.20.23-646-98539446-2022»
Серия № Е005 Форма F Количество 3QQ шт.
Кат.№ 425-01 Формирование. V 9 1
Наименование
компонента
Внешний вид и
форма выпуска Комплектация Номер
серии
Результаты
контроля
Лизирующий буфер
прозрачная
бесцветная
жидкость
1 флакон (40 мл) 005 Соответствует
Раствор для сорбции
прозрачная
бесцветная
жидкость
1 флакон (40 мл) 005 Соответствует
Магнитный сорбент
прозрачная
бесцветная
жидкость с
мелкодисперсным
осадком
коричневого цвета,
переходящим в
суспендированное
состояние при
встряхивании
1 пр. (2 мл) 005 Соответствует
Раствор для отмывки
№1
прозрачная
бесцветная
жидкость
1 флакон (50 мл) 005 Соответствует
Раствор для отмывки
№2
прозрачная
бесцветная
жидкость
2 флакона
(по 50 мл) 005 Соответствует
Элюирующий буфер
прозрачная
бесцветная
жидкость
1 флакон (12 мл) 005 Соответствует
Отрицательный
контрольный
образец (ОКО)
прозрачная
бесцветная
жидкость
1 пр. (1,5 мл) 005 Соответствует
Инструкция по
применению
- 1 шт. - Соответствует
Паспорт на набор
реагентов
- 1 шт. - Соответствует
ПаоаметЬы кон тро ля качества
Наименование
контролируемого
параметра
Норма
Значение
контролируемого
параметра
Эффективность
выделения ДНК, Е,
процент, не менее
80 Соответствует
--- стр. 2 ---
Эффективность
выделения РНК, Е,
процент, не менее
80 Соответствует
Пригодность ДНК
для ПЦР
Флуоресцентный сигнал по каналу ROX должен
регистрироваться менее CqUsp, по каналу РАМ
менее CqBK
Соответствует
Пригодность РНК
для ОТ-ПЦР
Флуоресцентный сигнал по каналу HEX должен
регистрироваться менее Cq5C2, по каналу РАМ
менее CqBK
Соответствует
Отрицательный
контроль выделения
ДНК
Флуоресцентный сигнал по каналу ROX не
определен или более Cqt/s/j, по каналу РАМ
менее CqBK
Соответствует
Отрицательный
контроль выделения
РНК
Флуоресцентный сигнал по каналам HEX и РАМ
не определен или более CqSC2 и CqBK
контрольного образца, соответственно
Соответствует
Влияние
интерферирующих
веществ при
выделении ДНК
Флуоресцентный сигнал по каналу ROX должен
регистрироваться менее Cc{U sp, по каналу РАМ
менее CqBK
Соответствует
Влияние
интерферирующих
веществ при
выделении РНК
Флуоресцентный сигнал по каналу HEX должен
регистрироваться менее C(\SC2, по каналу РАМ
менее CqBK
Соответствует
Упаковка и
маркировка
Прозрачные пластиковые пробирки
вместимостью 1,5 и 2 мл с завинчивающейся
крышкой, бесцветные пластиковые флаконы
вместимостью 50 мл и 20 мл с
завинчивающимися пластиковыми крышками,
пакет закрывающийся полиэтиленовый размером
50x70 мм, пачка из картона, этикетки из ленты
клеевой на бумажной основе
Соответствует
Паспорт выдан 01.09.2022
Срок годности набора до 01.09.2024
Условия хранения +2...+25 ®С
Условия транспортирования до +25
ОТК
не более 14 суток
ТОЛЬКО ДЛЯ 1N VITRO ДИАГНОСТИКИ
Набор соответствует ТУ 21.20.23-646-98539446-2022
РУ
бирина М.Н.
--- стр. 3 ---
Ш Intifica
Интифика * наборы для молекулярных исследований
ООО «Компания Алкор Био»
г. Санкт-Петербург, Железнодорожный пр., дом 40, лит.А
Телефон/факс: (812) 677-87-79
ПАСПОРТ № Е006
«Набор реагентов для выделения нуклеиновых кислот из клинических
образцов на основе сорбции на магнитных частицах
«МагноСП-НК-Био», по ТУ 21.20.23-646-98539446-2022»
Серия № Е006 Форма F Количество 3 Q Q , шт.
Кат.№ 425-01 Формирование, Vo 1
Наименование
компонента
Внешний вид и
форма выпуска Комплектация Номер
серии
Результаты
контроля
Лизирующий буфер
прозрачная
бесцветная
жидкость
1 флакон (40 мл) 006 Соответствует
Магнитный сорбент
прозрачная
бесцветная
жидкость с
мелкодисперсным
осадком
коричневого цвета,
переходящим в
суспендированное
состояние при
встряхивании
1 пр. (2 мл) 006 Соответствует
Раствор для сорбции
прозрачная
бесцветная
жидкость
1 флакон (40 мл) 006 Соответствует
Раствор для отмывки
№1
прозрачная
бесцветная
жидкость
1 флакон (50 мл) 006 Соответствует
Раствор для отмывки
№2
прозрачная
бесцветная
жидкость
2 флакона
(по 50 мл) 006 Соответствует
Элюирующий буфер
прозрачная
бесцветная
жидкость
1 флакон (12 мл) 006 Соответствует
Отрицательный
контрольный
образец (ОКО)
прозрачная
бесцветная
жидкость
1 пр. (1,5 мл) 006 Соответствует
Инструкция по
применению
- 1 шт. - Соответствует
Паспорт на набор
реагентов
- 1 шт. - Соответствует
Паоаметоы контроля качества
Наименование
контролируемого
параметра
Норма
Значение
контролируемого
параметра
Эффективность
выделения ДНК, Е,
процент, не менее
80 Соответствует
--- стр. 4 ---
Эффективность
выделения РНК, Е,
процент, не менее
80 Соответствует
Пригодность ДНК
для ПЦР
Флуоресцентный сигнал по каналу ROX должен
регистрироваться менее Cql/sp, по каналу РАМ
менее CqBK
Соответствует
Пригодность РНК
для ОТ-ПЦР
Флуоресцентный сигнал по каналу HEX должен
регистрироваться менее CqSC2, по каналу РАМ
менее CqBK
Соответствует
Отрицательный
контроль выделения
ДНК
Флуоресцентный сигнал по каналу ROX не
определен или более CqUsp, по каналу РАМ
менее CqBK
Соответствует
Отрицательный
контроль выделения
РНК
Флуоресцентный сигнал по каналам HEX и РАМ
не определен или более CqSC2 и CqBK
контрольного образца, соответственно
Соответствует
Влияние
интерферирующих
веществ при
выделении ДНК
Флуоресцентный сигнал по каналу ROX должен
регистрироваться менее CqUsp, по каналу РАМ
менее CqBK
Соответствует
Влияние
интерферирующих
веществ при
выделении РНК
Флуоресцентный сигнал по каналу HEX должен
регистрироваться менее CqSC2, по каналу РАМ
менее CqBK
Соответствует
Упаковка и
маркировка
Прозрачные пластиковые пробирки
вместимостью 1,5 и 2 мл с завинчивающейся
крышкой, бесцветные пластиковые флаконы
вместимостью 50 мл и 20 мл с
завинчивающимися пластиковыми крыщками,
пакет закрывающийся полиэтиленовый размером
50>^70 мм, пачка из картона, этикетки из ленты
клеевой на бумажной основе
Соответствует
lacnopT выдан 21.09.2022
Срок годности набора до 21.09.2024
Условия хранения +2...+25 °С
Условия транспортирования до +25 °С не более 14 суток
ТОЛЬКО для IN VITRO ДИАГНОСТИКИ
Набор соответствует ТУ 21.20.23-646-98539446-2022
РУ
отк (орБио" _ »,тт — 1 8 Обирина М.Н.
--- стр. 5 ---
Й Intifica
Интифика - наборы для молекулярных исследований
ООО «Компания Алкор Био»
г. Санкт-Петербург, Железнодорожный пр., дом 40, лит.А
Телефон/факс: (812) 677-87-79
ПАСПОРТ № Е005
«Набор реагентов для выделения нуклеиновых кислот из клинических
образцов на основе сорбции на магнитных частицах
«МагноСП-НК-Био», по ТУ 21.20.23-646-98539446-2022»
Серия № Е005 Форма W Количество 3Q0 шт.
Кат.№ 425-02 Формирование. У Ь 1
Наименование
компонента
Внешний вид и
форма выпуска Комплектация Номер
серии
Результаты
контроля
Лизирующий
буфер
Прозрачная
бесцветная
жидкость
1 флакон (40 мл) 005 Соответствует
Магнитный
сорбент
Прозрачная
бесцветная
жидкость с
мелкодисперсным
осадком
коричневого цвета,
переходящим в
суспендированное
состояние при
встряхивании
1 пр. (2 мл) 005 Соответствует
Раствор для
сорбции
Прозрачная
бесцветная
жидкость
1 флакон (40 мл) 005 Соответствует
Раствор для
отмывки №1
Прозрачная
бесцветная
жидкость
1
глубоколуночный
планшет 96
лунок (по 500
мкл)
005 Соответствует
Раствор для
отмывки №2
Прозрачная
бесцветная
жидкость
1
глубоколуночный
планшет 96
лунок (по 900
мкл)
005 Соответствует
Элюирующий
буфер
Прозрачная
бесцветная
жидкость
1
глубоколуночный
планшет 96
лунок (по 120
мкл)
005 Соответствует
Отрицательный
контрольный
образец (ОКО)
Прозрачная
бесцветная
жидкость
1 пр. (1,5 мл) 005 Соответствует
Глубоколуночный
планшет
Полипропиленовый
бесцветный
глубоколуночный
планшет 96 лунок
1 шт. - Соответствует
--- стр. 6 ---
Гребенка
Полипропиленовый
бесцветный
глубоколуночный
планшет 96 лунок и
соответствующая
полипропиленовая
бесцветная насадка
на магнитные
стержни
1 шт. - Соответствует
Инструкция по
применению
- I шт. - Соответствует
Паспорт на набор
реагентов
- 1 шт. - Соответствует
Параметры контроля качества ' ' ^ ‘
Наименование
контролируемого
параметра
Норма
Значение
контролируемого
параметра
Эффективность
выделения ДНК, Е,
процент, не менее
80 Соответствует
Эффективность
выделения РНК, Е,
процент, не менее
80 Соответствует
Пригодность ДНК
для ПЦР
Флуоресцентный сигнал по каналу ROX должен
регистрироваться менее CqUsp, по каналу РАМ
менее CqBK
Соответствует
Пригодность РНК
для ОТ-ПЦР
Флуоресцентный сигнал по каналу HEX должен
регистрироваться менее CqSC2, по каналу РАМ
менее CqBK
Соответствует
Отрицательный
контроль
выделения ДНК
Флуоресцентный сигнал по каналу ROX не
определен или более CqUsp, по каналу РАМ менее
CqBK
Соответствует
Отрицательный
контроль
выделения РНК
Флуоресцентный сигнал по каналам HEX и РАМ
не определен или более CqSC2 и CqBK
контрольного образца, соответственно
Соответствует
Влияние
интерферирующих
веществ при
выделении ДНК
Флуоресцентный сигнал по каналу ROX должен
регистрироваться менее CqUsp, по каналу РАМ
менее CqBK
Соответствует
Влияние
интерферирующих
веществ при
выделении РНК
Флуоресцентный сигнал по каналу HEX должен
регистрироваться менее Cq5’C2, по каналу РАМ
менее CqBK
Соответствует
Упаковка и
маркировка
Прозрачные пластиковые пробирки вместимостью
1,5 и 2 мл с завинчивающейся крышкой,
бесцветные пластиковые флаконы вместимостью
50 мл и 20 мл с завинчивающимися пластиковыми
крышками, пакеты закрывающиеся
полиэтиленовые размером 50x70 мм и 150x200
мм, пачка из картона, этикетки из ленты клеевой
на бумажной основе
Соответствует
Паспорт выдан 01.09.2022
Срок годности набора до 01.09.2024
Условия хранения +2...+25 ®С
Условия транспортирования до +25 °С не более 14 суток
ТОЛЬКО для IN VITRO ДИАГНОСТИКИ
Набор соответствует ТУ 21.20.23-646-98539446-2022
РУ_______________________________
ОТК Обирина М.Н.
--- стр. 7 ---
0 Intifica
Икгафика • наборы для молекулярных исследований
ООО «Компания Алкор Био»
г. Санкт-Петербург, Железнодорожный пр., дом 40, лит.А
Телефон/факс: (812) 677-87-79
ПАСПОРТ № Е006
«Набор реагентов для выделения нуклеиновых кислот из клинических
образцов на основе сорбции на магнитных частицах
«МагноСП-НК-Био», по ТУ 21.20.23-646-98539446-2022»
Серия № Е006 Форма W Количество 300 шт.
Сат.№ 425-02 Формирование. Vo 1
Наименование
компонента
Внешний вид и
форма выпуска Комплектация
Номер
серии Результаты
контроля
Лизирующий буфер
Прозрачная
бесцветная
жидкость
1 флакон (40 мл) 006 Соответствует
Магнитный сорбент
Прозрачная
бесцветная
жидкость с
мелкодисперсным
осадком
коричневого цвета,
переходящим в
суспендированное
состояние при
встряхивании
1 пр. (2 мл) 006 Соответствует
Раствор для сорбции
Прозрачная
бесцветная
жидкость
1 флакон (40 мл) 006 Соответствует
Раствор для отмывки
№1
Прозрачная
бесцветная
жидкость
глубоколуночный
планшет 96 лунок
(по 500 мкл)
006 Соответствует
Раствор для отмывки
№2
Прозрачная
бесцветная
жидкость
глубоколуночный
планшет 96 лунок
(по 900 мкл)
006 Соответствует
Элюирующий буфер
Прозрачная
бесцветная
жидкость
глубоколуночный
планшет 96 лунок
(по 120 мкл)
006 Соответствует
Отрицательный
контрольный
образец (ОКО)
Прозрачная
бесцветная
жидкость
1 пр. (1,5 мл) 006 Соответствует
Г лубоколуночный
планшет
Полипропиленовый
бесцветный
глубоколуночный
планшет 96 лунок
1 шт. - Соответствует
Гребенка
Полипропиленовый
бесцветный
глубоколуночный
планшет 96 лунок и
соответствующая
1 шт. - Соответствует
Ч
--- стр. 8 ---
полипропиленовая
бесцветная насадка
на магнитные
стержни
Инструкция по
применению
- 1 щт. - Соответствует
Паспорт на набор
реагентов
- 1 шт. - Соответствует
Параметры контроля качества
Наименование
контролируемого
параметра
Норма
Значение
контролируемого
параметра
Эффективность
выделения ДНК, Е,
процент, не менее
80 Соответствует
Эффективность
выделения РНК, Е,
процент, не менее
80 Соответствует
Пригодность ДНК
для ПЦР
Флуоресцентный сигнал по каналу ROX должен
регистрироваться менее C(\Usp, по каналу РАМ
менее CqBK
Соответствует
Пригодность РНК
для ОТ-ПЦР
Флуоресцентный сигнал по каналу HEX должен
регистрироваться менее Cq5C2, по каналу РАМ
менее CqBK
Соответствует
Отрицательный
контроль выделения
ДНК
Флуоресцентный сигнал по каналу ROX не
определен или более CqfAp, по каналу РАМ
менее CqBK
Соответствует
Отрицательный
контроль выделения
РНК
Флуоресцентный сигнал по каналам HEX и РАМ
не определен или более Cq5'C2 и CqBK
контрольного образца, соответственно
Соответствует
Влияние
интерферирующих
веществ при
выделении ДНК
Флуоресцентный сигнал по каналу ROX должен
регистрироваться менее CqUsp, по каналу РАМ
менее CqBK
Соответствует
Влияние
интерферирующих
веществ при
выделении РНК
Флуоресцентный сигнал по каналу HEX должен
регистрироваться менее CqSC2, по каналу РАМ
менее CqBK
Соответствует
Упаковка и
маркировка
Прозрачная пластиковая пробирка
вместимостью 1,5 и 2 мл с завинчивающейся
крыщкой, бесцветные пластиковые флаконы
вместимостью 50 мл и 20 мл с
завинчивающимися пластиковыми крышками,
пакеты закрывающиеся полиэтиленовые
размером 50x70 мм и 150x200 мм, пачка из
картона, этикетки из ленты клеевой на бумажной
основе
Соответствует
Паспорт выдан 21.09.2022
Срок годности набора до 21.09.2024
Условия хранения +2...+25 °С
Условия транспортирования до +25
отк
не более 14 суток
ТОЛЬКО дл я 1N VITRO ДИАГНОСТИКИ
Набор соответствует ТУ 21.20.23-646-98539446-2022
РУ
биринаМ.Н.
--- стр. 9 ---
прошита пронумеровано, cкJ^плeнo печатью
) лист^
Генеральный
ООО «Комй1 о»
олынцев
--- стр. 11 ---
ЩагноСП-НК-Био
СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМЫХ СОКРАЩЕНИЙ
ПЦР полимеразная цепная реакция
ОТ-ПЦР полимеразная цепная реакция с обратной транскрипцией
вко внутренний контрольный образец
пко положительный контрольный образец
око отрицательный контрольный образец
ДНК дезоксирибонуклеиновая кислота
РНК рибонуклеиновая кислота
НК нуклеиновые кислоты
К Т комнатная температура
1. НАЗНАЧЕНИЕ
1Л. «Набор реагентов для вьщеления нуклеиновых кислот из клинических образцов на основе
сорбции на магнитных частицах «МагноСП-НК-Био», по ТУ 21.20.23-646-98539446-2022» (далее
«МагноСП-НК-Био») предназначен для вьщеления ДНК и РНК из клинических образцов (цельная
кровь, плазма и сыворотка крови, сухие пятна крови, лейкоцитарная масса) методом сорбции на
силиканизированных частицах магнитного сорбента для последующего исследования нуклеиновых
кислот (далее НК) методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) или ПЦР с обратной транскрипцией
(ОТ-ПЦР) с целью диагностики инфекционных заболеваний или генетических особенностей организма
человека.
1.2. Функциональное назначение набора «МагноСП-НК-Био» - вспомогательное средство в
диагностике in vitro. Применяется на этапе пробоподготовки образцов с целью последующего анализа
НК.
1.3. Набор «МагноСП-НК-Био» предназначен для совместного использования с ПЦР-наборами
производства ООО «Компания Алкор Био»^ Тип исследуемого аналита (ДНК и РНК), а также вид
исследуемого биоматериала, для пробоподготовки которого может применяться набор «МагноСП-НК-
Био», указаны в инструкциях к наборам для детекции НК.
1.4. Показания к применению
Набор «МагноСП-НК-Био» применяется для подготовки клинических образцов к ПЦР-
исследованию, которое может быть использовано в клинической лабораторной диагностике
специфической патологии.
Экстракцию ДНК и РНК из клинических образцов методом сорбции проводят ручным и
автоматизированным^ способами.
1.5. Область применения - клиническая лабораторная диагностика.
Исследования проводят в клинико-диагностических или ПЦР-лабораториях областных,
городских, районных государственных или частных больницах и других ЛПУ.
1.6. Набор «МагноСП-НК-Био» предназначен только для диагностики in vitro для
профессионального применения. Исследования с использованием данного набора реагентов могут
выполнять специалисты не моложе 18 лет с высшим и средним медицинским, биологическим или иным
образованием: врач КЛД, врач-бактериолог, биолог, медицинский лабораторный техник, медицинский
1 Допустимо использовать набор «МагноСП-НК-Био» с ПЦР-наборами других производителей, зарегистрированными в РФ
в установленном порядке.
2Процессор магнитных частиц для очистки нуклеиновых кислот, клеток и белков KingFisher (вариант исполнения
Kingfisher Flex) (Thermo Fisher Scientific, США), Система для автоматического выделения и очистки нуклеиновых кислот
из биологического материала Auto-Pure 96 (Hangzhou Allsheng Instruments, Китай).
2
--- стр. 12 ---
4
/МагноСП-НК-Био
I технолог. Персонал, проводящий исследования с использованием данного набора реагентов, должен
/ владеть навыками проведения молекулярно-биологических исследований и работы на
I соответствующем оборудовании.
1.7. Набор «МагноСП-НК-Био» предназначен для обследования всех групп населения любого
возраста без градации по демографическому или популяционному признаку.
1.8. Набор «МагноСП-НК-Био» не имеет противопоказаний к применению.
2. ХАРАКТЕРИСТИКИ ИЗДЕЛИЯ
2.1. Принцип метода
Набор «МагноСП-НК-Био» используется для проведения этапа экстракции ДНК и РНК из
клинических образцов сорбционной методикой.
На первой стадии при термической обработке образца происходит разрущение мембран клеток
и органелл, вькод свободных нуклеиновых кислот (далее НК) в раствор и последующее их связывание
с частицами магнитного сорбента, в то время как другие компоненты клинического материала остаются
в растворе. На второй стадии магнитный сорбент дважды отмывают от остатков реагентов,
использованных на предьщущем этапе, и от других примесей и компонентов образца, после чего
сорбент просушивают. На заключительной стадии НК элюируют с поверхности высушенного сорбента
в раствор. Элюат, содержащий высокоочищенную ДНК и РНК, используют для ПЦР-исследования.
2.2. Состав и комплектация
Набор «МагноСП-НК-Био» вьптускается в двух вариантах исполнения.
В состав набора входят следующие компоненты (Таблица 1):
Таблица 1
Вариант
исполнения Кат. № Состав Количество/объем
Форма F 425-01
1. Лизирующий буфер
2. Магнитный сорбент
3. Раствор для сорбции
4. Раствор для отмывки №1
5. Раствор для отмывки №2
6. Элюирующий буфер
7. Отрицательный контрольный образец
(ОКО)
1 флакон (40 мл)
I пробирка (2 мл)
1 флакон (40 мл)
1 флакон (50 мл)
2 флакона (по 50 мл)
1 флакон (12 мл)
1 пробирка (1,5 мл)
Форма W 425-02
1. Лизирующий буфер
2. Магнитный сорбент
3. Раствор для сорбции
4. Раствор для отмывки №1
5. Раствор для отмывки №2
6. Элюирующий буфер
7. Отрицательный контрольный образец
(ОКО)
8. Гребенка
9. Глубоколучный планшет
1 флакон (40 мл)
1 пробирка(2 мл)
1 флакон (40 мл)
1 глубоколуночньЕЙ планшет 96 лунок
(по 500 мкл)
1 глубоколуночный планшет 96 лунок
(по 900 мкл)
1 глубоколуночный планшет 96 лунок
(по 120 мкл)
1 пробирка (1,5 мл)
1 шт. в глубоколуночном планшете
1 шт.
В комплект поставки входят: набор реагентов, инструкция по применению (может быть
предоставлена потребителю на бумажном носителе и в форме электронного документа), паспорт.
Набор рассчитан на вьщеление ДНК и РНК из 96 образцов, включая контрольные образцы.
3. АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА
3.1. Эффективность выделения ДНК и РНК (отношение между количеством выделенной
--- стр. 13 ---
'ДНК и РНК к количеству ДНК и РНК, исходно находящемуся в контрольном образце) с применением
набора «МагноСП-НК-Био» составляет 80-100 %.
3.2. Пригодность НК для ПЦР и ОТ-ПЦР
Набор «МагноСП-НК-Био» позволяет получить препарат ДНК и РНК хорошего качества,
достаточного для последующего проведения исследований методами ПЦР/ОТ-ПЦР. Детекция
специфических фрагментов ДНК и РНК, выделенных из контрольных образцов, при проведении
ПЦР/ОТ-ПЦР соответствует их паспортным значениям.
4. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
4.1. Потенциальный риск применения набора - класс 2а (согласно Приказу Министерства
здравоохранения РФ №4н от 06.06.2012 г.).
4.2. Следует рассматривать анализируемые образцы как потенциально инфицированный
материал и обеспечивать условия для безопасного хранения и работы.
4.3. Работа должна проводиться в лаборатории, выполняющей молекулярно-биологические
(ПЦР) исследования клинического материала с соблюдением СанПиН 3.3686-21 и МУ 1.3.2569-09.
4.4. При работе с набором следует соблюдать ГОСТ Р 52905-2007.
4.5. Все работы должны выполняться только с использованием одноразовых наконечников с
аэрозольным барьером для полуавтоматических пипеток. Для каждого образца ДНК и РНК (в том числе
контролей) использовать отдельный наконечник.
4.6. Обработку клинического материала и выделение ДНК и РНК необходимо проводить в зоне
выделения нуклеиновых кислот, в боксах биологической безопасности II-III класса с включенным
ламинарным потоком.
4.7. Лизирующий буфер в составе набора гарантирует полное обеззараживание материала. При
работе с образцами, содержащими патогены I-II класса опасности разбор образцов и этап лизиса
осуществлять в зоне подготовки и обеззараживания материала согласно СанПиН 3.3686-21.
4.8. При работе с ПКО следует соблюдать особую осторожность, так как его разбрызгивание
может привести к контаминации и, как следствие, к ложноположительным результатам.
4.9. Все лабораторное оборудование, в том числе пипетки, щтативы, лабораторная посуда и др.,
а также рабочие растворы должны быть строго стационарными. Запрещается их перемещение из одного
помещения в другое.
4.10. Для снижения риска контаминации следует использовать два набора дозаторов:
- для работы с клиническими образцами;
- для внесения реагентов и ВКО.
4.11. Персонал, проводящий исследования с использованием данного набора реагентов, должен
владеть навыками выделения ДНК и РНК из клинического материала и работы на соответствующем
оборудовании.
4.12. Перед началом работы ознакомьтесь с пользовательскими инструкциями на все
используемое оборудование и комплекты реагентов. Для получения надежных результатов необходимо
строгое соблюдение инструкции.
4.13. Все поверхности в лаборатории (рабочие столы, щтативы, оборудование и др.) ежедневно
подвергают влажной уборке с применением дезинфицирующих/моющих средств, регламентированных
санитарными правилами СанПиН 3.3686-21.
4.14. Наборы, в которых обнаружена контаминация реагентов, должны быть утилизированы как
биологический материал.
4.15. Все использованные одноразовые материалы и остатки образцов должны быть
подвергнуты обработке дезинфицирующими средствами с последующей утилизацией в соответствии с
1агноСП-НК-Био
--- стр. 15 ---
tмагноСП-НК-Био
/ 6.3. Интерферирующие вещества и ограничения, связанные с пробой
/ Наличие интерферирующих веществ в .образцах биологического материала (слизь, кровь,
/ элементы тканевого распада и воспаления, местные лекарственные препараты) может быть причиной
f ингибирования ПЦР и получения сомнительных результатов. Для получения достоверной клинической
картины необходимо информировать пациентов о правилах подготовки к исследованию и соблюдать
правила взятия биологического материала.
Набор гарантирует получение высокоочищенной ДНК/РНК после экстракции из
соответствующего вида биоматериала. Оценка влияния интерферирующих веществ на эффективность
ПЦР после использования набора «МагноСП-НК-Био» показала отсутствие негативного эффекта при
наличии в клинических образцах следующих потенциальных ингибиторов (Таблица 2):
Таблица 2
Тип образца Название интерферирующего вещества Концентрация
гемоглобин 3 мг/мл
билирубин 0,1 мг/мл
глюкоза 1 г/л
липиды 5 мг/мл
Цельная кровь, плазма крови,
сыворотка крови, сухие пятна крови,
лейкоцитарная масса
Несмотря на отсутствие значимого негативного влияния от присутствия большинства
вышеперечисленных потенциально интерферирующих веществ в клинических образцах,
рекомендуется строго придерживаться правил забора биоматериала с соблюдением рекомендаций,
приведенных в инструкции к используемому набору для детекции НК. Для получения достоверной
клинической картины необходимо информировать пациентов о правилах подготовки к ПЦР-
исследованию. В качестве дополнительной меры для контроля качества выделенной ДНК и РНК в
каждое исследование включать ВКО, начиная с этапа экстракции, с целью оценки эффективности
экстракции НК и отсутствия ингибирования ПЦР.
7. ПРОЦЕДУРА ЭКСТРАКЦИИ НК
Графические схемы протоколов экстракции нуклеиновых кислот с использованием набора
МагноСП-НК-Био представлены на сайте http://forpcr.ru/info/ .
Внимание! В состав ПЦР-наборов для выявления инфекционньрс заболеваний производства
ООО «Компания Алкор Био» входят положительный контрольный образец (ПКО) и внутренний
контрольный образец (ВКО), соответствующие анализируемому объекту.
ПКО не добавляется на этапе выделения ДНК и РНК, а используется в качестве контроля на
этапе ПЦР. ВКО добавляется перед началом процедуры вьщеления во все анализируемые образцы,
включая отрицательный контрольный образец (ОКО). ВКО предназначен для контроля экстракции в
каждом конкретном образце.
При использовании тест-систем с эндогенным внутренним контролем добавление ВКО на этапе
выделения нуклеиновых кислот не требуется.
Внимание! Лизирующий буфер гарантирует полное обеззараживание материала.
Внимание! Каждая процедура выделения ДНК и РНК должна содержать как минимум один К-
(ОКО, прошедший этап экстракции).
7.1. Подготовка компонентов набора
Извлечь компоненты набора из холодильника (+2...+8°С). Вьщержать все компоненты при
комнатной температуре (+18...+25 °С) (КТ) в течение 15 минут.
Для варианта исполнения Форма F тщательно перемешать Лизирующий буфер
вращательными движениями. При наличии осадка прогреть буфер при +65 °С. При образовании пены
--- стр. 16 ---
^дождаться ее оседания, чтобы при открывании флакона избежать загрязнения поверхностей.
Магнитный сорбент тщательно ресуспендировать.
Для варианта исполнения Форма F протоколом экстракции с использованием магнитного
штатива следует отобрать и промаркировать необходимое для работы количество пробирок объемом
1,5 - 2 мл (по количеству исследуемых образцов, включая ОКО) и включить термостат, установив
температуру +75 °С.
Для варианта исполнения Форма W извлечь компоненты набора, разлитые в глубоколуночные
планшеты, из защитных пакетов. Убедиться в отсутствии протечек реагентов. Плотно зафиксировав
планшеты на столе, полностью снять защитную пленку, избегая разбрызгивание жидкости.
Примечание: Если пленка порвалась, необходимо снимать ее с другого края, чтобы полностью
освободить планшет.
Внимание! До снятия пленки следует убедиться в отсутствии капель компонентов набора на
внутренней части пленки. При наличии капель на закрывающей пленке планшетов с компонентами
набора, необходимо сбросить капли, аккуратно встряхнув планшет или постучав им об стол.
При использовании набора Формы W следует расчитывать количество образцов с учетом
дополнительных образцов - ОКО и ПКО. ПКО не требует вьщеления, но при заполнении ПЦР
планшета для него необходимо оставить свободную лунку.
7.2. Протокол экстракции с использованием магнитного штатива (для варианта
исполнения Форма F)
7.2.1. Подготовить и расставить в штативе пробирки с клиническими образцами. Перед
проведением процедуры вьщеления НК клинические образцы перемешать на вортексе 3 - 5 секунд,
сбросить капли со стенок пробирки и внутренней части крышки коротким центрифугированием.
7.2.2. В подготовленные промаркированные пробирки внести по 400 мкл тщательно
ресуспендированного Лизирующего буфера.
Примечания:
Лизирующий буфер следует набирать методом обратного пипетирования, чтобы избежать
образования пузырей.
Если вьщеленная НК будет использоваться для диагностики инфекций с использованием
наборов производства ООО «Компания Алкор Био» с экзогенным внутренним контролем, необходимо
выполнить следующие действия: тщательно перемешать ВКО, сбросить капли коротким
центрифугированием; в каждую пробирку внести по 20 мкл ВКО. При использовании тест-систем с
эндогенным внутренним контролем добавление ВКО на этапе вьщеления НК не требуется.
Допускается добавление ВКО в Лизирующий буфер в расчете 2 мл ВКО на 40 мл Лизирующего
буфера. При этом раскапывать полученную смесь следует по 420 мкл на образец. Смесь с ВКО
храненить в течение 8 часов при +2...+8 °С.
7.2.3. В подготовленные пробирки внести по 100 мкл клинического материала, используя для
каждого образца отдельный наконечник с аэрозольным барьером. В пробирку, маркированную «ОКО»,
внести 100 мкл ОКО. Пробирки плотно закрыть. Перемешать на вортексе 3 -5 секунд.
Примечания:
При вьщелении из цельной крови рекомендуется использовать по 25 мкл клинического
материала.
При выделении из сухих пятен крови рекомендуется использовать 1 диск диаметром 6 мм или
3 диска диаметром 3 мм клинического материала. В случае использования панчера для сухих пятен
крови следует выбивать 3 - 4 диска из участков бумаги, не пропитанных клиническими образцами,
после каждого образца.
f
^farHoCn-НК-Био
--- стр. 17 ---
7.2.4. Инкубировать при +75 °С в течение 15 минут в термостате. В процессе инкубации
'необходимо тщательно перемешивать содержимое пробирок на 5 - 7 секунд через каждые 3 минуты.
Если у термостата предусмотрена функция шейкирования, вортексирование не требуется, достаточно
выставить скорость вращения 800 об/мин.
Внимание! Пробирки должны быть плотно закрыты во избежание их открывания в процессе
прогрева.
7.2.5. По окончании инкубации достать пробирки из термостата, сбросить капли со стенок
пробирок коротким центрифугированием.
Внимание! При выделении из сухих пятен крови необходимо перенести весь объем
Лизирующего буфера в чистую пробирку и далее продолжить работу с ним. Использованные пятна
подлежат утилизации.
7.2.6. Внести в каждую пробирку с лизатом по 20 мкл Магнитного сорбента и 400 мкл
Раствора для сорбции. Пробирки плотно закрыть. Перемешать на вортексе 3 -5 секунд.
Внимание! Допускается добавление Магнитного сорбента в Раствор для сорбции в расчете
2 мл Магнитного сорбента на 40 мл Раствора для сорбции. При этом раскапывать полученную смесь
следует по 420 мкл на образец. Смесь с Магнитным сорбентом хранить в течение 8 часов
при +2...+8 °С.
7.2.7. Выдержать пробирки при КТ в течение 5 минут, после чего сбросить капли со стенок
пробирок коротким центрифугированием и поместить в магнитный штатив на 3 минуты.
Внимание! Магнитный сорбент должен полностью осесть на стенку пробирки.
7.2.8. Выставить температуру нагрева термостата +65 °С.
7.2.9. С помощью медицинского отсасывателя по внутренней стенке пробирки,
противоположной осадку, осторожно отобрать супернатант, используя одноразовые наконечники для
пипеток без аэрозольного барьера до 200 мкл.
Примечание: Если невозможно полностью отобрать надосадочную жидкость, не захватив
сорбент, отбор супернатанта следует проводить не полностью (оставить жидкость на уровне около 3 мм
от сорбента).
Внимание! Для каждой пробы использовать отдельный наконечник.
7.2.10. Перенести пробирки в обычный штатив и добавить в пробирки по 500 мкл Раствора для
отмывки №1, стараясь смыть осадок со стенки пробирки. Пробирки плотно закрыть.
7.2.11. Перемешать магнитный сорбент в пробирках на вортексе до полного ресуспендирования,
затем осадить капли коротким центрифугированием.
7.2.12. Поместить пробирки в магнитный штатив на 2 минуты.
Внимание! Магнитный сорбент должен полностью осесть на стенку пробирки.
7.2.13. Провести отбор надосадочной жидкости (согласно п.7.2.9.). Перенести пробирки в
обычный штатив.
Внимание! Для каждой пробы использовать отдельный наконечник.
7.2.14. Повторить отмывку Раствором для отмывки №2, используя 900 мкл для каждой пробы
(пп.7.2.10.-7.3.13.).
7.2.15. Высушить магнитный сорбент, оставив пробирки с открытыми крышками на магнитном
штативе в течение 2 -4 минут.
Внимание! Раствор для отмывки №2 содержит вещества, которые могут ингибировать ПЦР.
Если после подсушивания сорбент влажный, необходимо увеличить время сушки на 2 - 3 минуты.
Внимание! Не допускать пересушивания сорбента. Пересушивание сорбента снижает
эффективность вьщеления НК.
f
/(агноСП-НК-Био
8
--- стр. 18 ---
7.2.16. Добавить 120 мкл Элюирующего буфера. Пробирки плотно закрыть, перемешать на
вортексе до полного ресуспендирования магнитного сорбента и поместить в термостат с температурой
/ +65 °С на 10 минут. В процессе инкубации необходимо тщательно перемешивать содержимое
/ пробирок на вортексе 5 -7 секунд через каждые 2 минуты. Если у термостата предусмотрена функция
шейкирования, вортексирование не требуется, достаточно выставить скорость вращения 800 об/мин.
Внимание! Пробирки должны быть плотно закрыты во избежание их открывания в процессе
прогрева.
7.2.17. После прогрева коротким центрифугированием осадить капли и поместить пробирки в
магнитный штатив на 2 минуты.
Внимание! Магнитный сорбент должен полностью осесть на стенку пробирки.
7.2.18. Отобрать надосадочную жидкость, не захватывая магнитный сорбент, и перенести в
чистые пробирки. Пробы готовы к использованию, надосадочная жидкость содержит очишенную ДНК
и РНК.
Примечания:
Полученные пробы ДНК можно хранить в течение 1 недели при температуре +2...+S °С или в
течение года при температуре -18...-22 ®С.
Полученные пробы РНК можно хранить в течение 4 часов при температуре +2.. .+8 ®С, в течение
месяца при температуре -18...-22 °С и в течение года при температуре не выше -68 °С.
Внимание! Перед постановкой ПЦР пробы ДНК и РНК необходимо перемешать на вортексе
3 -5 секунд и осадить капли коротким центрифугированием.
7.3. Протокол экстракции с использованием процессора KingFisher Flex или системы Auto-
Pure 96
Вьщеление ДНК и РНК проводят согласно инструкции по эксплуатации процессора KingFisher
Flex или системы Auto-Pure 96.
7.3.1. Отобрать и промаркировать 4 глубоколуночных планшета^ и 1 насадку на магнитные
стержни для автоматической станции (подсчет образцов проводить с учетом дополнительного образца
- ОКО и, при необходимости, ПКО).
Внимание! Для загрузки в прибор насадка на магнитные стержни должна быть помещена в
дополнительный пустой глубоколуночный планшет.
Примечание: При использовании Формы W гребенка и глубоколунчные планшеты входят в
состав набора.
7.3.2. При использовании Формы F внести в соответствующие планшеты реагенты согласно
Таблице 3. При использовании Формы W внесение раствора требуется только для Планшета №1
согласно Таблице 3.
Таблица 3
#
jrfarHoCn-НК-Био
Планшет Планшет №1 Планшет №2 Планшет №3 Планшет №4
Компонент
набора
Лизирующий
буфер
ВКО
(при необходимости)
Раствор для
отмывки №1
Раствор для
отмывки №2
Элюирующий
буфер
Объем на одну
лунку, мкл 400 20 500 900 120
Примечания:
Лизирующий буфер следует набирать методом обратного пипетирования, чтобы избежать
образования пузырей.
^Для Элюирующего буфера допустимо использовать планшет для элюции объемом лунки в 200 мкл.
--- стр. 19 ---
Если вьщеленная НК будет использоваться для диагностики инфекций с использованием
наборов производства ООО «Компания Алкор Био» с экзогенным внутренним контролем, необходимо
выполнить следующие действия: тщательно перемещать ВКО, сбросить капли коротким
центрифугированием; в каждую лунку внести по 20 мкл ВКО. При использовании тест-систем с
эндогенным внутренним контролем добавление ВКО на этапе выделения НК не требуется.
Допускается добавление ВКО в Лизирующий буфер в расчете 2 мл ВКО на 40 мл Лизирующего
буфера. При этом раскапывать полученную смесь следует по 420 мкл на образец. Смесь с ВКО
храненить в течение 8 часов при +2...+8 °С.
7.3.3. Подготовить и расставить в щтативе пробирки с клиническими образцами. Перед
проведением процедуры вьщеления НК клинические образцы перемешать на вортексе 3 - 5 секунд,
сбросить капли со стенок пробирки и внутренней части крышки коротким центрифугированием.
7.3.4. В подготовленные лунки с Лизирующим буфером внести по 100 мкл клинического
материала, используя для каждого образца отдельный наконечник с аэрозольным барьером. В лунку,
маркированную «ОКО», внести 100 мкл ОКО.
Примечания:
При выделении из цельной крови рекомендуется использовать по 25 мкл клинического
материала.
При вьщелении из сухих пятен крови рекомендуется использовать 1 диск диаметром 6 мм или
3 диска диаметром 3 мм клинического материала. В случае использования панчера для сухих пятен
крови следует выбивать 3 - 4 диска из участков бумаги, не пропитанных клиническими образцами,
после каждого образца.
7.3.5. Поместить планшеты и насадку на магнитные стержни в соответствующем порядке на
рабочую поверхность станции согласно Таблице 4.
#
МагноСП-НК-Био
Процессор KingFisher Flex Система Auto-Pure 96 Компоненты набора
Положение №1 Положение №1 Планшет с гребенкой
Положение №2 Положение №2 Планшет с Лизирующим буфером
с внесенными образцами и ВКО
Положение №3 Положение №3 Планшет с Раствором для отмывки №1
Положение №4 Положение №4 Планшет с Раствором для отмывки №2
Положение №5 Положение №8 Планшет с Элюирующим буфером
7.3.6. Запрограммировать станцию согласно инструкции по применению прибора, при этом
необходимо использовать протокол, полученный в ООО «Компания Алкор Био».
7.3.7. Провести лизис образцов (при необходимости лизис образцов допускается проводить с
использованием термостата согласно п.7.2.4.).
7.3.8. По окончании 1-й части программы внести в каждую пробирку с лизатом по 20 мкл
Магнитного сорбента и 400 мкл Раствора для сорбции.
Внимание! Допускается добавление Магнитного сорбента в Раствор для сорбции в расчете
2 мл Магнитного сорбента на 40 мл Раствора для сорбции. При этом раскапывать полученную смесь
следует по 420 мкл на образец. Смесь с Магнитным сорбентом хранить в течение 8 часов при
+2...+8 °С.
7.3.9. Вернуть планшет с лизатом в то же положение на борт станции и провести экстракцию
НК, запустив протокол выделения, полученный в ООО «Компания Алкор Био».
7.3.10. После завершения процедуры экстракции очищенные растворы ДНК и РНК
располагаются в лунках планшета, маркированного «Элюирующий буфер».
Примечания:
Полученные пробы ДНК можно хранить в течение I недели при температуре +2...+8 ®С или в
течение года при температуре -18...-22 ®С.
10
--- стр. 20 ---
Полученные пробы РНК можно хранить в течение 4 часов при температуре +2.. .+8 °С, в течение
месяца при температуре ‘18...-22 °С и в течение года при температуре не выше -68 ®С.
УСТРАНЕНИЕ ПРОБЛЕМ
В процессе пробоподготовки могут возникать проблемы, в той или иной степени влияющие на
результат анализа.
7.4. Низкий выход ДНК и РНК
• Использован избыточный объем образца. Не используйте объемы больше указанных в
протоколе. Магнитный сорбент имеет ограниченную емкость.
• Ненадлежащие условия хранения образца. Храните образцы в соответствии с инструкцией.
Старайтесь использовать свежие образцы.
• Исходный материал не был полностью лизирован. При наличии осадка в Лизирующем
буфере необходимо прогреть его перед использованием до полного растворения осадка.
7.5. ПЦР идет с низкой эффективностью
Очищенная ДНК и РНК содержит остатки Раствора для отмывки №2. Максимально удаляйте
раствор для отмывки и проводите высушивание магнитного сорбента в соответствии с протоколом.
7.6. ДНК и РНК разрушена
• Образец ДНК и РНК был подвергнут неоднократному замораживанию. Избегайте
повторения циклов замораживания-оттаивания. Используйте свежий образец для выделения ДНК и
РНК.
• Ненадлежащие условия хранения ДНК и РНК. Храните образцы в соответствии с
рекомендациями в инструкции к используемому набору для детекции НК.
8. ТРАНСПОРТИРОВАНИЕ И ХРАНЕНИЕ
8.1. Транспортирование наборов следует производить всеми видами крытого транспорта при
температуре не выше +25 °С в течение 14 суток (не более).
8.2. Наборы, транспортированные с нарушением температурного режима, применению не
подлежат.
8.3. Срок годности набора - 24 месяца от даты производства.
8.4. Наборы должны храниться в упаковке предприятия-изготовителя при указанной
температуре в течение всего срока годности при температуре +2...+25 ®С.
8.5. После вскрытия первичной упаковки компоненты набора хранить в упаковке
предприятия-изготовителя при температуре +2...+25 °С в течение всего срока годности.
8.6. Наборы с истекшим сроком годности применению не подлежат.
8.7. Не допускается смешивание или одновременное использование реагентов из разных
серий набора.
9. ГАРАНТИЙНЫЕ ОБЯЗАТЕЛЬСТВА
Гарантийный срок хранения набора - 24 месяца от даты производства.
Набор не подлежит ремонту и обслуживанию. Набор предназначен для однократного
применения.
.farHoCn-НК-Био
10. БЕЗОПАСНАЯ УТИЛИЗАЦИЯ
10.1. Изделия, пришедшие в негодность, в том числе в связи с истечением срока годности,
нарушением условий хранения и транспортирования, подлежат утилизации.
10.2. При утилизации отходов необходимо руководствоваться требованиями СанПиН 2.1.3684-
21, СанПиН 3.3686-21 и МУ 287-113.
II
--- стр. 21 ---
10.3. Класс опасности отходов при применении - Б (эпидемиологически опасные). Отходы
класса Б собираются в твердую (непрокалываемую) упаковку (контейнеры) желтого цвета или
имеющие желтую маркировку с надписью «Отходы. Класс Б». Отходы класса Б подлежат
обязательному обеззараживанию. Выбор метода обеззараживания определяется возможностями
организации, осуществляющей исследования с применением данного набора в соответствии с СанПиН
2.1.3684-21.
10.4. После истечения срока годности флаконы/планщеты с элюирующим буфером, гребенки,
пачки и пакеты утилизируются как отходы класса А (эпидемиологически безопасные).
10.5. Жидкие компоненты (реагенты, реактивы) уничтожаются раздавливанием внутренней
упаковки с последующим разведением водой 1:100, сливом раствора в канализацию и вывозом остатка
упаковок как бытового мусора. Компоненты изделий, нерастворимые в воде, уничтожаются путем
сжигания.
10.6. Компоненты изделия с наличием предупредительных знаков об опасности на упаковке
следует уничтожать с соблюдением соответствующих мер безопасности.
10.7. Азид натрия, входящий в состав компонентов МИ, может реагировать с медными,
свинцовыми трубами. При утилизации следует смывать растворы большим количеством воды во
избежание накопления азида.
10.8. Персонал, осуществляющий уничтожение изделий, должен соблюдать правила
безопасности при проведении того или иного способа уничтожения.
11. ИНФОРМАЦИЯ О ПРОИЗВОДИТЕЛЕ
По вопросам качества МИ «Набор реагентов для выделения нуклеиновых кислот из
клинических образцов на основе сорбции на магнитных частицах «МагноСП-НК-Био», по ТУ 21.20.23-
646-98539446-2022» следует обращаться в ООО «Компания Алкор Био» по адресу: 192148, г. Санкт-
Петербург, Железнодорожный пр., д. 40, лит.А, тел/факс: (812) 677-87-79.
Бесплатный телефон горячей линии по России: 8-800-234-37-79, email support^alkorbio.ru.
12. СИМВОЛЫ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ НА ЭТИКЕТКАХ
(/агноСП-НК-Био
R E F Номер по каталогу
V
Содержимого достаточно для проведения
п тестов
Il o t I Код партии (номер серии) Обратитесь к инструкции по применению
i J Изготовитель Использовать до
сгЗ Дата изготовления
t
Предел температур
А Осторожно!
f
Беречь от влаги
Опасно! Легковоспламеняющаяся
жидкость! livD l Медицинское изделие для диагностики in vitro
Ж
Не допускать воздействия солнечного
света tU J Верх
Инструкция разработана в соответствии с ТУ 21.20.23-646-98539446-2022.
12
--- стр. 22 ---
пронумеровано. CKjrenneHo печатью
лисГ§9
Био»
. Полынцев