Набор флуоресцентных ДНК-зондов XA AneuScore I для in vitro лабораторной диагностики врожденных, наследственных заболеваний, связанных с изменением числа хромосом 13, 18, 21, X и Y, методом флуоресцентной in situ гибридизации (FISH) — инструкция и характеристики

РУ: РЗН 2023/19518 от 07.02.2023 · класс риска 2б

Производитель: "МетаСистемс Проубс ГмбХ" (Германия)

В госконтрактах 44-ФЗ: 1 контракт, медианная цена за единицу 158 400 ₽.

Автоматически отфильтрованный фрагмент инструкции по применению (страницы, где похоже, что есть таблица технических характеристик) — не полный документ. Карточка РУ на портале Росздравнадзора →

Текст инструкции: технические характеристики

--- стр. 3 ---
СГ826 List В Эксплуатационная документация
D-5604 
Декабрь 2021 
Версия 07
Инструкция по применению
СТ826 List В
Набор флуоресцентных ДНК-зондов ХА AneuScore I для in vitro 
лабораторной диагностики врожденных, наследственных заболеваний, 
связанных с изменением числа хромосом 13,18, 21, X и Y, методом 
I флуоресцентной in situ гибридизации (FISH)
MetaSystems
Probes
info@metasystems-probes.com
wvm.metasystems-probes.com


--- стр. 4 ---
Оглавление
1. Общая информация о Производителе..............................................................1
2. Перечень продукции...............................................................................................2
3. Описание Медицинского Изделия для in vitro диагностики
3.1. Назначение................................................................................................................................................3
3.2. Общая информация............................................................................................................................3
3.3. Общая информация о методе FISH .........................................................................................3
3.4. Предусмотренное применение МИ ИВД.............................................................................4
3.5. МИ ИВД для клинической диагностики...............................................................................5
3.6. Противопоказания...............................................................................................................................5
3.7. Класс потенциального риска.......................................................................................................5
3.8. Предназначенный пользователь.............................................................................................5
3.9. Условия для сбора, обработки и подготовки образцов..........................................6
3.10. Подготовка исследуемого материала...................................................................................6
3.11. Перечень поставляемых материалов.................................................................................7
3.12. Подготовка МИ ИВД к использованию................................................................................8
3.13. Правильно ли установлено МИ ИВД.....................................................................................8
3.14. МИ ИВД многоразового применения...................................................................................8
3.15. Характеристики стабильности...................................................................................................8
3.16. Ограничения по применению...................................................................................................9
3.17. Предупреждения и меры предосторожности при утилизации.........................9
3.18. Аналитические характеристики..............................................................................................9
3.19. Предел обнаружения........................................................................................................................9
3.20. Внутрисерийная воспроизводимость...................................................................................10
3.21. Межсерийная воспроизводимость.........................................................................................10
3.22. Интерферирующие вещества.....................................................................................................10
3.23. Перекрестная реактивность.........................................................................................................10
3.24. Гарантии......................................................................................................................................................10
3.25. Предупреждения и меры предосторожностей..............................................................10
3.26. Состав / Информация об ингредиентах МИ ....................................................................11
3.27. Правила представления рекламаций, дополнительный сведений ..............12
4. Инструкции по применению
4.1. ХА AneuScore I, D-5604-100-ТС...................................................................................................13-16
4.2. ХА AneuScore I, D-5604-500-TC....................................................................................................17-20
4.3. ХА 13/21, D-5602-100-OG.................................................................................................................21-24
4.4. XAX/Y/18, D-5606-100-ТС..................................................................................................................25-28
5. Примеры изображений, интерпретация результатов
5.1. ХА 13/21, D-5602-100-OG.................................................................................................................29
5.2. ХАХЛ^/18, D-5606-100-ТС..................................................................................................................30


--- стр. 5 ---
Стр. 1  из 2
Разработчик / MetaSystems Probes GmbH
Производитель /
Правообладатель:
Адрес, место 1  .Индустриштрассе 7
(разработка, 68804 Альтлюзхайм
производство); Германия
Email: info@metasystems-probes.com
Тел.: +49-6205-29276-0
Факс: +49-6205-29276-29
Официальный ООО Метасистеме
представитель в РФ
Адрес для обращений: 119619, г. Москва, ул.
Производственная, 5-36
Email: info@metasystems.su
Тел.: +7 (495)215-15-22
Факс: +7 (495)215-15-22
hSH PROBES
L
MetaSystems
Probes 1  из 30
info@metasystems-probes. com
www.metasystems-probes.com


--- стр. 7 ---
1уоресцентные ДНК-зонды MetaSystems Probes для FISH исследований
з2
/1КИ
21 .
Назначение
Набор флуоресцентных ДНК-зондов ХА AneuScore I для in vitro лабораторной диагностики 
врожденных, наследственных заболеваний, связанных с изменением числа хромосом 13,18, 21, 
X и Y, методом флуоресцентной in situ гибридизации (FISH) применяется в клинической 
лабораторной in vitro диагностике при цитогенетическом исследовании с целью диагностики, 
мониторинга или прогнозирования наличия хромосомных нарушений врожденного и/или 
наследственного характера, связанных с изменением числа хромосом 13, 18, 21, X и Y, и 
специально для оценки риска трисомии 21 (синдром Дауна).
Общая информация
Область применения
Клиническая лабораторная диагностика.
Классификация
Вид медицинского изделия в соответствии с номенклатурной классификацией медицинских 
изделий согласно Приказа Минздрава России от 6 июня 2012 г. № 4н (в ред. Приказа Минздрава
России от 25.09.2014 № 557н):
310690 - «Определенный участок одноцепочечной нуклеиновой кислоты, который 
используется в идентификации молекул специфичной комплементарной последовательности 
нуклеиновой кислоты в анализе, предназначенном для оценки клинического образца в 
диагностике, мониторинге или прогнозировании единичной или множественной анеуплоидии, 
3 том числе (но не ограничиваясь этим) трисомии 13 (синдром Патау), трисомии 18 (синдром 
Здвардса), трисомии 21 (синдром Дауна), и анэуплоидий половых хромосом.»
Согласно классификации медицинских изделий для in-vitro диагностики GMDN, данные 
флуоресцентные ДНК-зонды относятся к группе:
СТ826 (Собирательный термин. Структурные хромосомные нарушения ИВД) Диагностика In 
vitro врожденных хромосомных нарушений.
Средства диагностики In Vitro при генетическом анализе для диагностики, мониторинга или 
прогнозирования наличия хромосомных нарушений врожденного / наследственного характера 
(например, присутствуюидие во всех клетках организма).
И  соответствуют применимым требованиям директивы 98/79 ЕС от 27 Октября 1998, 
'Приложение II Список В - реагенты и полученные на их основе продукты, включая 
соответствующие калибраторы, контрольные материалы и программное обеспечение, 
разработанные специально для оценки риска трисомии 21".
Общая информация о методе FISH
Технология флуоресцентной in situ гибридизации (FISH) используется для изучения 
хромосомных и геномных нарушений в фиксированных клеточных суспензиях и в препаратах 
из тканевых блоков. Технология основывается на флуоресцентном мечении нескольких 
фрагментов ДНК различной длины (обычно длиной 100 - 1000 пароснований), которые
^ISH PROBES
MetaSystems
Probes Зиз 30
info@metasyst€ms-probes. com
WWW. metasystems-probes. com


--- стр. 8 ---
используется в цитогенетических образцах для обнаружения наличия нуклеотиднь^^д^^^^ 
последовательностей (ДНК-мишеней), комплементарных к последовательности в зонде. 
самым зонд гибридизуется к однонитевой нуклеиновой кислоте, последовательноа,^др^^д 1 
оснований которой, вследствие комплементарности, позволяет соединение зонда с мишенью. 
Технология FISH обладает высокой универсальностью. Различие между флуоресцентными ДН^^,^ззд| 
зондами заключается в изменении последовательности (длинах и участках ДНК) и маркировк^^^.^^^^ 
(цвет метки) зондов. -енети
При создании зонда используется клонированная последовательность ДНК, полученная из 
клонов или геномная ДНК. Мечение (маркировка, окрашивание) осуществляется при nOMOu^pQ^Q
ПЦР с мечеными нуклеотидами.
Литература;
Willman et al, 2006, Cancer Medicine 7,104-154 
Wolff et al, 2007, J Mol Diagn, 9,134-143 
Macarello et al, 2013, CLSI document MM07-A2, 33(10)
1редв<
-1СПОЛ1 
tynnni 
i кач 
зарубе 
^apyш 
DcHOB 
ювле' 
сромо
Предусмотренное применение МИ ИВД
Описание того, что определяется и/или измеряется:
Флуоресцентный ДНК-зонд определяет наличие ДНК-мишени в образце, комплементарно^'^^^^^ 
зонду, путем проведения флуоресцентной 1п situ гибридизации (FISH) и последующи^з^^ 
наблюдением результатов (свечений, сигналов от зонда) в световом флуоресцентное 
микроскопе. FISH исследование, с использованием ДНК-зондов, заключается в подсчете е^^тер 
анализе специалистом, количества и расположения в клетках и на хромосомах сигналов (^ryndi 
ДНК-зонда. ерре 
;tumn
Флуоресцентные ДНК-зонды применяются для качественного и количественного oпpeдeлeни^g^g 
хромосомных нарушений. С помощью ДНК-зондов можно выявить, подтвердить наличие 
отсутствие заданной патологии, а также установить количество (норма, моносомия, TpncoMH^jjj^y^Q 
анеуплоидия и др.) выбранных ДНК-мишеней. 4исло
1рИКс
Функциональное назначение:
Метод FISH, с использованием флуоресцентных ДНК-зондов, является диагностически^|рду| 
методом исследования хромосомных и геномных нарушений, применяемый в клиническо:|^.р 
лабораторной пренатальной, постнатальной и предимплантационной практике. FlSh 
исследование не является самостоятельным методом и обязательно используется в качеств^д^.^ 
дополнительного теста к другим диагностическим исследованиям, таким ка^ 
кариотипирование хромосом.
1ред|
Тип анализируемого образца:
Для проведения FISH гибридизации, исследуемый материал фиксируется на предметном cтeкл.pgц^^ 
- стандартное стекло для наблюдения под световым микроскопом, размером 75x25 м^peбo 
толщиной 1 мм. Образцом, материалом для исследования являются клеточные суспензиь 
эмбриональные клетки, цитологические мазки и отпечатки. Объектом исследования являютс
FISH PROBES = J
MetaSystems
Probes 4 из 30
info@metosy5tems-probes.ee-
www.metasystems-probes.ee


--- стр. 9 ---
ных
Гем
iCTb
о.
НК-
вки
.АК-
)ЩИ
НОИ
цим 
ном 
е и 
3 от
1НИЯ
или
иия,
жим
:кой
■1SH-
стве
как
екле
мм,
13ИИ,
ются
отдельные клетки (ядра), в ряде случаев - метафазные хромосомы, полученные из лимфоцитов 
крови (плода, родителей), пуповинной / околоплодной жидкости, клеток костного мозга, ворсин 
Хориона и т.д.
Указание на то, что МИ ИВД применяется в клинической лабораторной диагностике
Численные абберации аутосом 13, 18, 21 и половых хромосом X и Y составляют 95% всех 
генетических нарушений у новорожденных. FISH исследование на некультивированных 
амниоцитах, позволяет выявить данные абберации гораздо быстрее традиционных методов 
хромосомного анализа. FISH-анализ (исследование) становится стандартом, предоставляющим 
предварительные результаты о наличии аномалий менее чем за 12 часов. FISH исследование, с 
использованием флуоресцентных ДНК-зондов, для определения трисомии 21 хромосомы, 
дупликации хромосомного участка 21q22.13-q22.2, вовлеченного в этиологию Синдрома Дауна, 
в качестве клинически обоснованного лабораторного метода диагностики, описано в 
зарубежной и российской литературе. Синдром Трисомии 13 является редким хромосомным 
нарушением, при котором вся или часть хромосомы 13 повторяются три раза (трисомия). 
Основываясь на молекулярных исследованиях, участок 13q14-13qter является критически 
вовлеченным в Синдром Патау. Повторяющиеся последовательности вокруг центромеры 
хромосомы 18 достоверно определяют Синдром Эдварса, в то время как повторяющиеся 
последовательности вокруг центромер хромосом X и Y, достоверно определяют Синдром 
Клайнфельтера (47,XXY), Синдром Трисомии-Х (47.ХХХ), Синдром Турнера (45,Х) и 47.XYY.
Литература:
Bryndorf et а1 (1996) Am J Hum Genet 59:918-926 
Tepperberg et al (2001) Prenat Diagn 21:293-301 
Stumm et al (2006) Cytogenet Genome Res 114:296-301
Наследственные болезни: национальное руководство / под ред. Н.П. Бочкова, Е.К. Гинтера, В.П. 
Пузырева. — М .: ГЭОТАР-Медиа, 2012
Шилова Н. В., Золотухина Т. В. Интерфазная флуоресцентная гибридизация in situ в диагностике 
числовых хромосомных аберраций// Медицинская генетика. — 2007 
Приказ М3 РФ № 917 от 15.11.2012
Противопоказания
Нет.
Класс потенциального риска
26.
Предназначенный пользователь
МИ предназначено для лабораторной in vitro диагностики и должно применяться 
специалистами, имеющими необходимую квалификацию в данной области в соответствии с 
требованиями документов, регламентирующих деятельность лаборатории.
JlSH PROBES
MetaSystems
Probes 5 из 30
info@metasystems-probes. com
WWW. metasystems'probes. com


--- стр. 11 ---
,ать
дии
сти
ки.
Все 
•ата 
и и 
ных 
,НК- 
я в 
при 
,1, с 
цев
<  из
панели при 75’’С (±1®С) в течение 2 мин.
Гибридизация:
а) Инкубируйте во влажной камере при 37®С {±1®С) в течение ночи.
Отмывка после гибридизации:
a) Аккуратно удалить покровное стекло и следы клея.
b) Отмыть стекло в 0.4Х SSC (pH 7.0) при 72°С (±1 ® С) 2 мин.
с} Высушить препарат и отмыть в 2Х SSC, 0.05% Tween20 (pH 7,0) при комнатной температуре 30 секунд, 
d) Для предотвращения образования кристаллов, кратковременно промыть в дистиллированной воде, и оставить 
на воздухе до высыхания.
Контрастное окрашивание:
a) Нанести 10 мкл DAPI/antifade и накрыть покровным стеклом 24 х 32 ммА
b) Дать впитаться DAPI/antifade в течение 10min.
c) Провести анализ препарата под микроскопом.
d) Хранить стекла при -20'’С (±5®С). Сигналы гибридизации будут удовлетворительными в течение как минимум 
шести месяцев.
Перечень поставляемых материалов, входящих в состав МИ ИВД, список  
принадлежностей, а также список специальных материалов, которые требуются для  
проведения анализа
Перечень поставляемых материалов, входящих в состав МИ ИВД:
Флуоресцентные ДНК-зонды поставляются в пластиковой прозрачной пробирке, объемом 100 
мкл, растворенные в гибридизационном буфере на основе формамида: формамид (65-70%), 
смесь сульфата декстрана (20-40%), хлорид натрия (0-5%), вода (30-35%), ДНК (менее 1%). ДНК- 
?онд поставляется в виде продукта «готового к использованию».
Список принадлежностей, а также список специальных материалов, которые требуются для
-1Я
20 -
проведения анализа, но не содержатся в комплекте поставки 
Принадлежности, оборудование (не входят в комплект поставки): 
а} Водяная баня с точным контролем температуры (макс, t < 100°С)
Микропипетки с переменным объемом в диапазоне от 1 мкл до 1 мл, калиброванные 
Термометр (макс, t й 100®С)
Ph метр, калиброванный 
Таймер
Сосуд Коплина (стекло или пластик, для предметных стекол размером 75x25x2 мм, объемом > 30 мл.) 
Нагревательная панель 75®С (±1 ®С) с твердой поверхностью и точным контролем температуры до 80*С 
Морозильная камера -20®С(±5®С)
Жаровой шкаф 37®С (±1 ® С)
Пинцет 
Перчатки
Микроцентрифуга (ь 1000 об/мин)
Флуоресцентный микроскоп с необходимым набором фильтров (голубой (аквамарин): X: 426/20 нм, М; 480/30 
нм; зеленый: X: 505/20 нм, М: 530/30 нм; оранжевый: X: 552/20 нм, М: 576/30 нм)
Иммерсионное масло, рекомендованное производителем микроскопа (для флуоресценции)
Система съемки и анализа изображений, например, Isis (компании MetaSystems)
Покровные стекла; 22 х 22 мм^ и 24 х 32 мм^
Предметные стекла для микроскопического анализа размером 75x25x1 мм
Резиновый клей на основе натурального каучука (с возможностью легкого удаления после высыхания)
Среда предохраняющая препараты от выцветания DAPI/antifade
Растворы (не входят в комплект поставки):
JFISH PROBES
MetaSystems
Probes 7 из 30
info@metosystems-probes.com
www.metasystems-probes.com


--- стр. 12 ---
a)
b)
c)
d)
Дистиллированная вода, двойной очистки
Трипсин/EDTA (0.05% Трипсин, 0.02% EDTAMNa в сбалансированном солевом растворе по Хэнксу без Са2+ и 
Mg2+, 37“С) 0.075 М КС1, 37“С
Фиксатор Карнуа (3:1 Метанол / Уксусная кислота, свежеприготовленный. -20'’С) 2Х SSC при 37*С 
Серия этиловых спиртов: 100%, 95%, 70%. комнатной температуры.
Огра
По I 
темп
Калибраторы и контрольные материалы не требуются и не входят в комплект поставки.
Подробная информация о подготовке МИ ИВД. прежде чем оно будет готово  
использованию (например, стерилизация, окончательная сборка, калибровка)
Пре^
при1-
Клас(
отхо^
Утил 1
Не применимо. Все ДНК-зонды предлагаемые компанией MetaSystems Probes поставляются е
виде «готовые к использованию». ведо 1
отхо^
ПОЛЬ
Анал 
повт 
вклн 
и и»  
изм<
Информация, необходимая для того, чтобы проверить, правильно ли установлено собл 1 
ИВД и готово ли оно функционировать безопасно, а также, по применимости
Техническое обслуживание и ремонт 
Не применимо. Техобслуживанию и ремонту не подлежит.
Содержание и периодичность технического обслуживания, включая очистку и дезинфекцию 
Не применимо. Обслуживание, очистка, дезинфекция не требуются.
Информация о необходимых калибровках
Не применимо. Калибровка и проверка флуоресцентных ДНК-зондов не требуется.
Методы уменьшения рисков, с которыми сталкиваются лииа. занимающиеся установкой цуз^- 
калибровкой и обслуживанием МИ ИВД назн.
Не применимо. При работе с ДНК-зондами важно соблюдение общих правил, таких как: не 
вдыхать пары, не допускать попадания на кожу; надевать перчатки и лабораторный халат; 
случае попадания на кожу или в глаза немедленно промыть водой. числ'
МИШ(
МИ ИВД предназначено для многократного применения Спец
Многократное применение. Стандартный объем пробирки с ДНК-зондом - 100 мкл, этогс^^^н. 
количества достаточно для проведения как минимумЮ исследований. ДНК-зонд переносите!
"" " “ калиброванной микропипетки,
"общ 
Точн
Характеристики стабильности, срок годности после вскрытия первичного контейнера,  
также условия хранения и стабильность рабочих растворов знач 1
Флуоресцентные ДНК-зонды должны храниться в темноте при температуре -20®С 
Эффективность зондов не изменяется при многократных циклах разморозки/ заморозки (до 2(у 
циклов). Транспортируются ДНК-зонды при комнатной температуре 20°С (±5®С). АнализируемыЕ-pp^g, 
препараты, с нанесенным ДНК-зондом, могут быть проанализированы в течение не менеЕ^^р^ 
шести месяцев после гибридизации FISH, при условии хранения в темноте при -20“С (±5°C]pj^gp^ 
Срок годности ДНК-зондов не менее 12 месяцев с даты производства. Срок годности после  
вскрытия первичной упаковки и после многократного использования не меняет (не сокращаетрр^р 
общий срок годности ДНК-зонда. Мин 1/
из пробирки на образец с помощью одноразовой 
переменным объемом в диапазоне от 1 мкл до 1 мл.
FISH PROBES EJ
MetaSystems
Probes 8 из 30
info@metasystems-probes.cou
WWW. metasystems-probes. coi


--- стр. 13 ---
) к
:я в
МИ
<ои.
: не
1т; в
гого
1ТСЯ
I. с
а, а
i°C).
э20
vibie
1нее
3°С).
)сле
,ает)
Ограничения по применению
По истечении срока годности использовать нельзя. Транспортированные с нарушением 
температурного режима, применению не подлежат.
Предупреждения и/или меры предосторожности по безопасной утилизации МИ ИВД и  
принадлежностей
Класс опасности отходов по СанПиН 2.1.7.2790-10 - Класс Б - эпидемиологически опасные 
отходы.
Утилизация и ликвидация отходов осуществляется в соответствии с директивой 98/79/ЕС, 
^NNEX I #В 8.7(п) "информация о безопасной ликвидации отходов": местные или 
ведомственные нормы могут включать в себя специальные требования по ликвидации 
отходов. Так как компания MetaSystems не может управлять этими процессами, обязанность по 
соблюдению мер осторожности при утилизации и ликвидации отходов возлагается на 
пользователя.
Аналитические характеристики: чувствительность, специфичность, правильность,  
повторяемость, воспроизводимость, пределы обнаружения и диапазон измерения,  
включая информацию по контролю известных интерферентов, по ограничениям метода  
и информацию об использовании доступных референтных материалов и методов  
измерения
Чувствительностью ДНК-зонда является уровень вероятности того, что будет обнаружена 
назначенная мишень. Опасность неверной интерпретации препаратов связана с низкой 
чувствительностью. Поэтому минимальная чувствительность ДНК-зонда должна быть равна 
95%. Чувствительность ДНК-зонда рассчитывается по формуле: Чувствительность = "общее 
число сигналов в заданном хромосомном регионе" деленное на "общее число заданных 
мишеней для проверяемых клеток".
Специфичностью ДНК-зонда является мера того, насколько надежно обнаруживается 
назначенная мишень. Опасность неверной интерпретации препаратов связана с низкой 
специфичностью. Поэтому минимальная специфичность ДНК-зонда должна быть равна 98%. 
Специфичность = "общее число сигналов в заданном хромосомном регионе" деленное на 
"общее число сигналов во всех хромосомных регионах".
Точностью ДНК-зонда является мера того, насколько назначенная мишень обнаруживается 
более часто, чем другая мишень. Опасность неверной интерпретации препаратов в 
значительной степени связана с низкой точностью. Поэтому точность ДНК-зонда должна быть 
около 100%. Точность определяется путем оценки минимального числа метафазных пластинок 
у пяти различных лиц. Точность = отсутствие сигналов от мишеней, которые не заданы. 
Требования по валидации ДНК-зондов для FISH исследования в компании MetaSystems Probes 
определены в соответствии с документом "ММ07-А2. Методы флуоресцентной In Situ 
гибридизации для клинических лабораторий; Утвержденные указания - вторая редакция".
Предел обнаружения
Минимальным аналитом для обнаружения является единичная метафазная хромосома.
-FISH PROBES
MetaSystems
Probes 9 из 30
info@metasy5tems~probes.com
WWW. metasystems-probes. com


--- стр. 14 ---
Внутрисерийная воспроизводимость
Процент соответствия результатов для всех партий каждого образца должен составлять 1  
{95% - нижний доверительный интервал).
Межсерийная воспроизводимость
Процент соответствия результатов для всех партий в целом должен быть 100% (95% - нижни 
доверительный интервал).
Интерферирующие вещества
Отсутствуют.
Перекрестная реактивность
Отсутствуют.
Слабы
Слабь 
аквам 
высок 
в зел€
Высо»
неспе
Гарантии
Производитель гарантирует соответствие характеристик медицинского изделия заявленным 
эксплуатационной документации при условии применения изделия в соответствии 
инструкцией и по назначению, предусмотренному производителем.
.Пред
Информация в отношении предупреждений, мер предосторожностей и ограничений Епред. 
использовании МИ ИВД магн 1
Предупреждения и/или меры предосторожности, принимаемые в случае сбоя или yxyдшeни^диaг^
функционирования МИ ИВД. которые могут  быть определены по внешним признакам
Проблема Возможная причина Рекг,-,‘ ен:
Отсутствие сигналов FISH 
в микроскопе.
Спустя некоторое время 
сигналы гибридизации 
слабеют.
Закрыта шторка отраженного света / 
стоп слайдер в световом потоке.
Выключена флуоресцентная лампа. 
Используется неправильный 
флуоресцентный фильтр.
Объектив в неверном положении. 
Фототубус переведен на камеру.
Иммерсионное масло попадает 
между предметным и покровным 
стеклами.
Открыть шторку / выдвинуть слайдер из 
светового потока.
• Включить флуоресцентную лампу.
• Установить правильный фильтр в световой 
поток.
• Переключить объектив в световой поток.
• Перевести световой поток на 01уляры.
темп»
_Внеи
^►луо 
емн 
цикл. 
Вонд<
Jf is h,
■flpefl
■ VIВД.Заменить покровное стекло и DAPI/antifade. 
Использовать покровное стекло 24 х 32 мм^ 
даже если область гибридизации значительнсДНК-:
меньше. jepai
Диффузно-рассеянные
сигналы.
Препарат не освещен надлежащим 
образом.
пары
Фокусную плоскость не возможно 
настроить должным образом.
• Проверить настройку микроскопа. Сделать
необходимые регулировки. Проверить время 
работы УФ лампы. ПОПа.
• Использовать достаточное количество
иммерсионного масла. Недопустимо CoCTi
смешивать масло разных марок. Использоваи|р^щ 
масло пригодное для флуоресцентной Буфе
микроскопии._________________________________
Слишком толстый слой Antifade не 
позволяет настроить фокус.
' Не использовать слишком много DAPI/antifade 
Достаточно 10 мкл на препарат (24 х 32 мм^ 
покровное стекло)._________________________________
Хлор
Суль
ВОДс
ДНК
FISH PROBES EJ
MetaSystems
Probes 10 из 30
info@metosy5tems-probes.co,
WWW. metosystems-probes.co


--- стр. 15 ---
}%
ИИ
проблема Возможная причина Рекомендуемое решение
Слабые сигналы • Хромосомный препарат слишком 
старый.
• Слайды должны быть не старше двух недель.
• Недостаточная денатурация • Старение, сушка и дополнительная фиксация
хромосом. могут подавить гибридизацию, и поэтому, не 
рекомендуются.
• Повысьте температуру денатурации до 80“С.
• Используется многополосный • Установить соответствующий однополосный
фильтр. фильтр.
Слабые сигналы • Интенсивность DAPI слишком • Использовать DAPI/antifade меньшей
аквамарин или зеленый, высока, что вызывает попадание концентрации.
высокая диффузия фона сигнала в фильтр АКВА или
в зеленом канале. ЗЕЛЕНЫЙ.
• Слишком низкое значение pH • Убедиться что значение pH промывочного
отмывочного раствора.
!
раствора в диапазоне 7.0-7.5, Некоторые 
зеленые флуорохромы чувствительны к pH 
ниже 7.
Высокий • Остаточные цитоплазматические • Предобработать препарат Пепсином.
неспецифичный фон. белки могут влиять на 
гибеивмтвмо.
/I в 
с
1 в
ИЯ
Предупреждения и/или меры предосторожности, которые необходимо принять в отношении
предсказуемых внешних воздействии или условии окружающей среды, таких как внешние 
магнитные, электрические. электромагнитные поля и излучения. связанные с
1иагностическими или терапевтическими процедурами, атмосферное давление, влажность и
температура
}нешние воздействия не оказывают существенного влияния на функционирование 
})луоресцентных ДНК-зондов. Обязательными условиями являются: зонды должны храниться в 
гемноте при температуре -20®С (±5®С); эффективность зондов не изменяется при многократных 
циклах разморозки/ заморозки {до 20 циклов); анализируемые препараты, с нанесенным ДНК- 
юндом, могут быть проанализированы в течение не менее шести месяцев после гибридизации 
ISH, при условии хранения в темноте при -20®С (±5®С).
1редупреждения и/или меры предосторожности, касающиеся материалов, содержащихся в МИ
но
ИЯ
)ать
1ВД. которые могут оказывать канцерогенное, мутагенное, токсическое или аллергическое 
действие на пользователя или пациента:
ЦНК-зонды компании MetaSystems содержат формамид. Формамид токсичен и является 
гератогеном. Может причинять вред ребенку во время внутриутробного развития. Не вдыхать 
дары, не допускать попадания на кожу! Надевать перчатки и лабораторный халат. В случае 
юпадания на кожу или в глаза немедленно промыть водой.
ade.
Состав / Информация об ингредиентах МИ 
Вещество
Буферный раствор на основе формамида
Хлорид натрия
Сульфат декстрана натрия
Вода
ДНК
j FISH p r o b e s
CAS
75-12-7 
7647 -14-5 
9011 -18-1 
7732 -18-5 
не применимо
Объемная доля (%)
65-70 
0-5 
20-40 
30-35 
менее 1
MetaSystems
Probes 11 из 30
info@metasystems-probes.com
W W W . metasystems-probes. сот


--- стр. 17 ---
n г \о о
5»
|Н
1.11
rt>a3SSrt>n>raO^i0S(
f<a»p ааид—ши ор*»но» при 
Amfre/ikMoM/noBropfiiouteMCii м)д«йст»ии. 
использованием необходимо получить 
слецидльные инструп4ии. Нвдолуетммо иыхоние 
л»(>ое. Необходимо недетъ зещитные псрчетю* и мщитмую одежду, 
в  СЛУЧ^ еохддйстеид. обретитьсе и  медицинской помощью.
Gefthf. Кет det Kind Im Mutte^eib MhedigeA Keon уетнЛ1»сЛ Krebs 
erreucen Келл die Orgxne sc^Mlcen bei lenc^^er/wiederholtef ЕзфоооОА 
Vor Oebreueh beioodere Anweisunfen einhden. Oempf ы ф х eiisaimen 
SchtfOhenPid>ghe/SchutzUe<duf4 vefen. K i Exposition ode* Verdecht
AntiicheA R«t einholen
Denger. Pout noire eu foeiw. $о»серьЫе de provoquer le cencer. Hisque 
prdsomed d’effen peves pour les orgenes P l« suite d’exposnions rtp^tdes eu 
d'une expotKion prolongde. Se procurer les instrucbont avent utilisetion Ne 
pas resptrer 1и  xapeurs. Porter des lanu de protection/ des Element» de 
pretecben. EN CASd'expositlon prouveeou susoectde: consulter un mddicin.
Ш
tn  ^  X  
1
— - в »
о
Сп
ето
in  ^ 
г>
8
? \
IS Jо
I I
to > t
ФcС Лnо
Ф
XCyting AneuScore Probes
Только для профессионального использования
Более подробная информация доступна на www.metasystems-probes.com
Продукт Метка Кат.номер Объем
ХА AneuScore 1 оранжевая/ D-5604-100-TC 2x100 мкл
зеленая/ голубая
Набор флуорасцектных ДНК-зоидое ХА AneuScore I состоит из зондов, поставляемых в отделькьк пробирках, для определения 
анеуплоидий >фомосом 13,18, 21, X  и Y.
ХА 13/21 (D-5602-100-OG):
Специфичный ДНК-эонд ХА 13/21 позволяет определить численные вариации хромосом 13 и 21. Зеленая метка гибридизуется 
к участку 13q14 включающему локус RB1. оранжевая метка гибридизуется к участку 21q22, содержащий ген DSCR4 
(критическая область 4 Синдрома Дауна).
XAX/Y/18 (0-5606-100-ТС):
Специфичный ДНК-эонд ХА X/Y/18 позволяет определить численные вариации хромосом X, Y  и 18. Проба содержит 
повторяющиеся последовательности гибридизующиеся к центромерам X хромосомы с зеленой, к Y хромосоме -  оранжевой и 
16 хромосоме -  голубой (аква) метками.
Диаграмма ДНК-зонда:
Ij-
Ш Щ ’
=  I
ХА 13/21 (Лот 20294) и ХА X/Y/18 (Лот 20412)
Стр. 8 ИЗ 8
13 из 30
Стр. 1 из 8


--- стр. 18 ---
Поставляемые материалы
2х100р1 (^ 2 x1 0 ), ХА 13/21 и XAX/Y/18 поставляются в отдельных пробирках и должны испопь>зоватъся в раздельных 
гибридизациях. Зонды в гибридизациоииом растворе, готовые к использованию.
Применение
Все ДНК-эонды предлагаемые компанией M etaSyslems Probes, применяются для цитогенетинеских исследований методом 
флуоресцентной гибридизации in-situ (FISH ). ДМК-зонд ХА AneuScore I позволяет диагностировать и отслеживать хромосомные 
нарушения структурного характера, т.е. присутствующие во всех клетках организма (в соответствии с Общей Номенклатурой 
Медицинских Изделий (GMDN) СТ 826). FISH -анализ не является самостоятельным методом, он обязательно используется в 
качестве дополнительного теста к другим диагностическим исследования, таким как кариотипироеание клеток плода. ХА 
AneuScore 1 не предназначен для еыяеления структурных перестроек (например транслокаций) или численных аберраций 
других хромосом
Поддержка потребителей
Обращайтесь, пожалуйста, в компанию M etaSysterre Probes GmbH (информация для обращения приведена ниже) или к 
авторизованному дистрибьютору в своей стране.
M etaSystems Probes не имеет каких-либо имущественных интересов относительно товарных знаков и названий других 
компаний.
Все новости, а также изменения в свойствах или применении продукции компании M etaSyslems Probes GmbH Вы можете найти 
на сайте компании или запросить у авторизованного дистрибьютора.
Инструкции по безопасности
Все ДНК-эонды предлагаемые компанией M etaSyslem s Probes, предназначены только для профессионального применения, они 
должны использоваться только квалифицированным и обученным персоналом. Для обеспечения безопаоюй работы и 
воспроизводимости результатов, следует соблюдать указания по безопасности и учитывать предупредительные знаки, 
приведенные ниже.
MetaSystems Probes GmbH 
1. Индустриштрассе 7 
68804 Альтлюэхайм 
Германия
Тел1: +49 (0)6205 292760 
Факс. +49 (0)6205 2927629 
email: info@metasy8ten«-probes com 
URL; www.metasystems-probes.com
Редакция: RevB170222-190124v20.1
ОСТОРОЖНО; Формаыид токсичен и является потенциальным тератогеном!
ДНК-зонды компании MetaSystems содержат формамид. Формамид токсичен и является тератогеном.
Может причинять вред ребенку во время внутриутробного развития. Не вдыхать пары, не допускать попадания на 
кожу1
Надевать перчатки и лабораторный халат, в случае попадания на кожу или в глаза немедленно промыть водой.
А
ОСТОРОЖНО: Высокая температура в водяной бане и на нагревательной панели!
Для денатурации и гибридизации используется горячая водяная баня и нагревательные панели с температурой > 
37*С. Соблюдайте осторожность, чтобы не допустить контакта с горячими поверхностями или жидкостями. 
Надевать перчатки и лабораторный халат. В случае контакта с кожей немедленно охладить холодной водой _______
ВНИМАНИЕ: Правила лабораторной практики!
При использовании соблюдать принципы надлежащей лабораторной практики
/ '\ ВНИМАНИЕ: Ликвидация отходов!
Все опасные материалы должны ликвидироваться в соответствии с местными/национальными нормативными 
требованиями по ликвидации опасных отходов._____________________________________________________________________________
Хранение и использование
Зонды должны храниться в темноте при температуре -20°С (±5°С). Эффективность зондов не изменяется при многократных 
циклах разморозки/ заморозки (до 20 щлклое).
Транспортировка
ДНК-зонды кампании M etaSystems транспортируются при комнатной температуре 20*С (±5*С).
Необходимое оборудование не входящее в комплект поставки 
• Водяная баня с точным 
контролем температуры
• Микропипетки с переменным 
объемом в диапазоне от 1 мкл 
до 1 мл, калиброванные 
•Термометр
>  Нагревательная панель 75*С 
(±1 ’ С ) с твердой поверхностью 
и точным контролем 
температуры до 80*С 
• Морозильная камера -20*С 
(±5"С)
Флуоресцентный микроскоп с необходимым 
набором фильтров (см. ниже)
• Ph метр, калиброванный
• Жаровой шкаф 37’ С (±1 'С )
• Пинцет
•Таймер
• Сосуд коплина (стекло или 
пластик)
• Перчатки
• Микроцентрифуга
>  Иммерсионное масло, рекомендованное 
производителем микроскопа (для 
флуоресценции)
>  Система съемки и анализа изображений, 
например, Isis (компании MetaSystems)
>  Покровнь1в стекла:
22 X 22 мм’ и 24 X 32 мм’
>  Резиновый клей
>  Среда предохраняющая препараты от 
выцветания OAPI/antfade
Рекомендации к флуоресцентному микроскопу
• Флуоресцентный осветитель; флуоресцентные осветители с металлогалоидными лампами или осветители с обычными 
ртутными лампами на 100 Вт
• Объективы пригодные для эпи-флуоресцентного анализа.
• Флуоресцентные фильтры, для просмотра и подсчета следует использовать комплекты фильтров компании MetaSystems 
на три или четыре диапазона, или подходящие однополосные фильтры. Для съемки должны использоваться подходящие 
однополосные фильтры соответствующие флуорохромам. Подробную информацию можно получить по запросу.
Характеристики флуорохромов
Метка Максимум Поглощения Максимум Эмиссии
Голубая (аквамарин) 426 нм 480 нм
Зеленая 505 нм 530 нм
Оранжевая 552 нм 576 нм
в микроскопе. стоп слайдер в световом потоке. потока.
• Выключена флуоресцентная лампа. • включить флуоресцентную лампу.
_____ _ С т р . 7  1НЭ S
I  юдгсгтовют првпэрата
Дополнительно необходимые растворы (не входят в поставку):
• Дистиллированная вода, двойной очистки,
» Трипсин/ЕРТА (0.05%  Тригтсин, 0.02%  EDTAM Na в сбалансированном солевом растворе по Х энксу  без Ся^* и 37Т.1


--- стр. 19 ---
Стр. 2 из 8 Стр. 7 из 8
в микрос«ог>«. стоп слаядор в световом потоке.
« выключена ф луоресцентая лампа.
• H enw fciyw oi 1 1И ф Ш1Я т |Д  
ф п го е е м и те *
• Объектив в неверном положении.
• Ф стш уОус пИ И ВИ И на — И .
ПОТОК# • '
• Включить флуоресцентную лампу.
• Ув 1«н(Я 1П ЬКИ 1М М ^1 4м »1р в св а ге к1йпоток.
• Переключить объектив в световой поток.
• n e m m iiic m B K ii поток на мчиЩ Ц,'
Спустя некоторое время 
сигналы плбридизации 
слабеют.
• Игимерсионное масло попадает между 
предметным и покровным стеклами.
• Заменить покровное стекло и DAPI/antifade. 
Использовать покровное стекло 24 х 32 мьй. даже 
если область гучбоидизаиии значительно меньше
Диффузно-рассеянные
сигналы.
• n p in ip T  не осаещен надлежащим
образом.
• Фокусную плоскость не возможно 
настроить должным образом.
• Слишком толстый слой Antlfede не 
позволяет настроить фокус.
• Ц|ппп|в111 m riTpiiniQ iiiiiiifinTM iiiii Г д т п п  
необходимые регулировки. Проверить время 
рКТПТМ 1*f ПМПВ1
• Использовать достаточное количество 
иммерсионного масла. Недопустимо смеимватъ 
масло разных марок. Использовать масло 
пригодное для флуоресцентной ипфосхогыи.
• Нв использовать слишком MHore OAP>/antlfa<te. 
Достаточно 10 мкл не препарат (24 ж 32 мм’ 
ПОШИНМ CIBKnOV
Слабые сигналы • Хромосомный препарат слишком 
старый.
• Недостатсивим денатурация хромосом.
• Используется многополосный фильтр.
• Слайды должны быть не старше двух недель.
• Старение, сушка и допопкительная фиксация 
могут подавить шбридиэагачю, и поэтому, нв 
рекомендуются.
• Повысьте температуру денагур ац т до 80*С.
• Установить соответствующий однополосный 
фильтр
Слабые сигналы 
аквамарин или зеленый, 
высокая диффузия фона 
в зеленом канале.
• Интенсивность ОМЧ слишком высока, 
что вызывает попадание сигнала в 
« н л и р  АКВА И П И |^ ЕН Ы Й .
• Слишком низкое значение pH 
отмывочного раствора.
« H aw B B iaK iifcD W im lftK laiiio iM iiaH
концентрации.
• Убедиться что значение pH промывочного 
раствора в диапазоне 7.0-7.5. Некоторые 
зеленые флуорохромы чувствительны к pH ниже 
7.
Высокий нвслецифичный 
фон.
* O e w o w M  цитоплазматические бвпв1  
могут влиять на гибрадизацию.
• ПремоЦзйбстаъ препарат Папоиион.
Если рекомендованные действия не решают проблему, или Ваша проблема отсутствует а списке, обратитесь в компанию 
MetaSvstem» Probes
Дополнительно необходимые растворы (не входят в поставку):
• Дистиллированная вода, двойной очистки,
• Трилсин/ЕОТА (0.05%  Трипсин, 0.02%  EOTAMNa в сбалансированном солевом растворе по Хэнксу без Са’ *и Мд^‘ 37*С)
• 0.075 М к а . 37*С,
» Фиксатор Карнуа (3:1 Метанол / Уксусная ш слота, свежеприготовленный. -20*С),
• Предметные стекла для микроскопического анализа.
• гхззспризгс.
• Серия этиловых спиртов: 100%, 95% , 70%, комнатной температуры.
Процедура:
Центрифугировать 2-5 мл амниотической микости (без крови) 8 минут на 1000 гргп.
Удалить сулернатант и осторсото взболтать гфобирку для вэвешивания осадка.
Добавить 5 МП ТрилсинСОТА и инкубировать 30 минут при 37*С (t1*C ).
Центрифугировать 8 минут на 1000 грлт. удалить супернатант и осторожно взболтать пробирку для вэвешивания 
осадка.
Добавить 5 МП 0.075 М KCI и инкубировать 20 минут при 37*С (t1 *C ).
Медленно добавить 2 мп свежеприготовленного ^мксагора (3:1 Метанол / Уксусная киспота. -20*С), смешать. 
Центрифугировать 8 минут на 1000 грпт. удалить супернатант и осторожно вэболтать пробирку для взаеимвания 
осадка.
Добавить 5 мл фиксатора и инкубировать 30 минут в холодильной камере (2*С-8*С).
Центрифугировать 8 минут при 1000 гр т, удалить супернатант и осторожно взболтать пробирку для удаления 
осадка.
Добавить 50-100 исл фиксатора и осторожно вэболтать пробирку.
Капнуть по 10 мкл клеточной суспензии на оттиеченные области чистого предметного стекла (области можно 
отметить алмазным карандашом). Оптимальный результат получается при температуре окружающей среды 20- 
25*С и влажности 45-55%. Дать высохнуть грепарату на воздухе, при комнатной температуре и проверить 
плотность клеток под фазово-контрастным микроскопом.
Если плотность клеток низкая -  добавить еще 10 мкл клеточной суспензии и дать препарату высохнуть. 
Инкубировать препараты (стекпа) 15-30 м ту т в 2Х SSC при 37*С (±1®С).
Денатурировать стекла в серии этилоеьк спиртов (70% . 85%, и 100%) 2 минуты в каждом. Дать высохнуть на 
воздухе.
Продолхогтъ в соответствии с  протокотм к ДНК-эонду. припожекмому к кахфому зонду или набору.
Используемые обозначения
Символ Описание
Е 1 Этим символом обозначается «Медицинское Изделие для In Vitro Диагностики».
J Производитель
А
Все предупреждения отмечаются предупреждающим треугопьником с восклицательным знаком.
В зависимости от характера предупреждения он сопровождается словами ВНИМАНИЕ или ОСТОРОЖНО.
Идентификационный (каталожный) номер
|Д т] Номер партии
t Температурные условия )фзнения. Указываются еермний и нижний пределы.
Этим символом обозначается количество исследований
S Дата окончания срока годности.
Общие замечания
• ДНК-зонды компании M etaSystems предполагают использование на ьая'огенетических препаратах с фиксатором Карнуа и 
должны применяться в соответствии с лабораторной практикой и принятыми нормами учреждения.
• Подготовка препарата должна соответствовать стандартным цитогенетическим процедурам.
Стабильность гибридизованных препаратов:
• Препараты могут быть проанализированы в течение не менее шести месяцев после гибридизации FISH , при условии 
хранения в темноте при -20*С (±5*С).
Дополнительные процедурные рекомендации
• Настоятельно рекомендуется использовать калиброванный термометр для измерения температур растворов, водяной 
бани и инкубаторов, так как данные температуры критичны для оптимального результата работы зонда.
• Аккуратно проверяйте температуру предварительно нагретых рестеорое.
• Аккуратно проверяйте pH всех растворов. Значение должно быть в диапазоне 7.0 - 7.5 при комнатной температуре.
• Ж е то сть  отмывочшх растворов. Pt> и температура являются наиболее важньми параметрами, лоосольку низкая 
жесткость может вызвать неспецифичное связывание зонда, а слишком высокая привести к отсутствию сигнала.
• Перед открытием: Кратковременно взболтать, чтобы поднять смесь зонда со дне пробирки.
Стр. 6 из 8
15 из 30
Стр. 3 из 8


--- стр. 20 ---
протокол FISH для ДНК-зондов MetaSystems
Подготовка препарата
1. Использовать специально подготовленные стекла в
2. Нанести 10 мкл зонда.
3. Накрыть покровным стеклом 22 х 22 мм'.
4. Заклеить края покровного стекла резиновым клеем.
зависимости от исследуемого материала.
Денатурация
1. Денатурируйте образец и зонд одновременно, путем нагрева препарата на нагревательной панели при 75*С (41°С) 
в течение 2 мин.
Гибридизация
1. Инкубируйте во влажной камере лри37*С (±1*С) в течение ночи.
Отмывка после гибридизации
необкодимые растворы
• 0.4Х SSC <рН 7.0 -  7.5) при 72»С (± 1°С)
• 2Х SSC , 0.05%  Twean-20 (pH 7.0) при комнатной температуре
Процедура
1 Аккуратно удалить покровное стекло и следы клея.
2. Отмыть стекло в 0.4Х SSC  (pH 7.0) при Т2Х, (t1*C ) 2 мин.
3. Высушить препарет и отмыть а 2Х SS C . 0.05%  Tween20 (pH 7.0) При комнатной температуре 30 секунд.
4. Для предотвращения образования кристаллов, кратковременно промыть в дистиллированной воде, и оставить на 
воздухе до высыхания.
Контрастное окрашивание
необходимые растворы.
• Среда предохраняющая препараты от выцветания OAPI/antfade (напригивр M etaSystems OAPI/aniifade, D-0002-500-OA)
Процедура; 
1.
2.
3.
4.
Намести 10 мкл DAPI/antifade и накрыть покровным стеклом 24 х 32 мм'.
Дать впитаться DAPI/antifade в течение ЮгШп 
Провести анализ препарата под микроскопом.
Хранить стекла при -20°С (*5*С ). Сигналы гибридизации будут удовлетворительными в течение как минимум шести 
месяцев.
Ожидаемые результаты
ХА 13/21
Нормальная клатха;
Два зеленых (2G ), дев оранжевых 
(2 0 ) сигнала.
ХА 13/21
Аббераитная клетка; Трисомия 13; 
три зеленых (3G ) и два оранжевых 
(2 0 ) сигнала.
ХА 13/21
Абберантная клетка: Трисомия 21; 
два эаланых (2G ) и три оранхсевых 
(3 0 ) сигнала.
XAX/Y/18
Абберантная мужская клетка: 
Трисомия 1в, один зеленый (1G ). 
один оранжевый (1 0 ) и три голубых 
(ЗВ) сигнала.
XAX/Y/18
Абберантная женская клетка: 
Трисомия 18, два зеленых (2G) и
XAX/Y/18
Нормальная мужская клетка; Один 
зеленый (1G ), один оранжевый (10) 
и два голубых (2В) сигнала.
XAX/Y/18
Нормальная женская клетка: 
два зеленых (2G ) и два голубых 
(2В) сигнала.
XAX/Y/18
Абберантная мужская клетка:
47,XXY; два зеленых (2G ), один 
оранжевый (1 0 ) и два голубых (2В) 
сигнала
XAX7Y/18
Абберантная женская клетка:
45,ХО; один зеленый (1 6 ) и два
Показаны наиболее часто встречающиеся сочетания сигналов (90-95% случаев).
Так как флуоресцентный ДНК-эонд идентифицирует фрагмент заданной хромосомы, а е случаях слохсных или редких 
генетических нарушений (перестроек), заданные фрагменты могут многократно повторяться (увеличиваться в размере и 
количестве) или наоборот -  уменьшаться (исчезать), при исследовании могут наблюдаться комбинации сигналов отличные от 
приаеденнык выше.
Сто. 4 из 8 М Т « И И  Г Ъ Л п а > ти » ты 1 м »  •ы ш ьмт р а с  М ам г 
M tW M T v гм « р « кй м и к о р гь н м  гуж  
•литкльнонМ овторяю щ екса ьо чм В стм и  П«р«л 
м полмФ М >меы  необхойимо получить
С х р .  5  и з  8
т
ЦП \ 
п  5
ж
g
ж
ж_ _
о
O n
gi
X
м
г
ьэ<
>
э
п >


--- стр. 21 ---
Стр. 4 из 8 16 из 30
{«
»> S с
и *
V ) I  П
^ I I5  .  £
п<ц><шл>ш*и « у моб «1ря 
ААИТ«ЛЫ4О14Л>О*Т0РЙЮ(Ц«М<91 •ФМ^СТЭИМ. П«р«Д 
HtftQnM9»4M**M HtoeiCSaRUO ПО/ТуЧИТЪ
слеци 1льмые иисфучАии Нцопустммо ц ы 1*нне 
п9ро» Необходимо hmotv  шцитиые перчотни и защитную одежду. 
0 СЛУЧАЕ аоздайстмя: обратитьса за иадй1|инс110й помощью.
Gtfahr. Капп das Kind im Mumnakb uhidiitn Калп vermutfich Krebs 
e^ieucen. Kann dieOrpr>e scSMifte^ bel lanfarer/wiedefttolterfxposilion. 
Vor Gefarauch besondere An«wlsun|en einholen. Damp^nlcht elnatmen. 
SchuUhandscbuhe/SchuUkieidLfni tragen 6Cl Exposition Oder Vcrdacht; 
ArjtHchen Rat emboien
Danger. Peut nuire au foetus. Susceptible de pfovoguer le cancer. Risque 
prOsumae d’effets graves pour les organes A la suite d'exposWons rapdtaes ou 
tfune exposftion prolortg^e. Se procurer les mstrucbons avant utilisation. Ne 
pas respirer les vapeurs Porter des gants de protection/ Oes v4temenu cie 
protecbon. EN GkS d’enposRton prouvOe ou suspectde* consulter un mddicin.
Стр. 5 из 8
XCyting AneuScore Probes
Только для профессионального использования
Более подробная информация доступна на wv^.metasystems-probes.com
Продукт Метка Кат.номер Объем
ХА AneuScore I оранжевая/ 0-5604-500-ТС 2х (5x100 мкл)
зеленая / голубая
Набор флуоресцентных ДНК-зондов ХА AneuScore I состоит из зондов, поставляемых в отдельных пробирках, для определения 
анеуплоидий хромосом 1 3 ,1В, 21. Х и  Y.
ХА 13/21 (D-5602-100-OG):
Специфичный ДНК-зонд ХА 13/21 позволяет определить численные вариации хромосом 13 и 21. Зеленая метка гибридизуется 
к участку 13q14 включающему локус R B1. ораткевая метка гибридизуется к участку 21q22, содержащий ген DSCR4 
(критическая область 4 Синдрома Дауна).
ХА X/Y/18 (D-5606-100-TC):
Специфичный ДНК-зонд ХА X/Y/18 поэвопяет определить численные вариации хромосом X , Y и 18. Проба содержит 
повторяющиеся гюследоеательности гибридизующиеся к центромерам X  гфомосомы с эегюной. к Y хромосоме -  оранжевой и 
18 фомосоме -  голубой (аква) метками.
Диаграмма ДНК-зонда:
; Ч - 1
О Ф О м  1!|
' S S —It «^1* 1 рщ *
i  ■
ХА 13/21 (Лот 20294) и ХА X/Y/18 (Лот 20284)
Стр. 8 из 8
17 из 30
Стр, 1 из 8


--- стр. 22 ---
Поставляемые материалы
2x(Sx100|jl) (^ 2 x5 0 ), ХА 13/21 и ХА X/Y/18 поставляются в отдельных пробирках и должны использоваться в раздельных 
гибридизациях. Зонды в гибридизационном растворе, готовые к использованию
Применение
Все ДНК-зонды предлагаемые компанией M etaSystems Probes, применяются для цитогенетических исследований методом 
флуоресцентной гибридизации in-situ (FISH ). ДНК-эонд ХА AneuScore I позволяет диагностировать и отслеживать хромосомные 
нарушения структурного характера, т.е . присутствующие во всех клетках организма (в соответствии с Общей Номенклатурой 
Медицинских Изделий (GMON) СТ 626). FISH-анализ не является самостоятельным методом, он обязательно используется в 
качестве дополнительного теста к другим диагностическим исследования, таким как кариотипирование клеток плода. ХА 
AneuScore I не предназначен для выявления структурных перестроек (например траислокаций) или численных аберраций 
других хромосом.
Поддержка потребителей
Обращайтесь, пожалуйста, в кампанию MetaSystenrs Probes GmbH (информация для обращения приведена ниже) или к 
авторизованному дистрибьютору в своей стране.
M elaSyslem s Probes не имеет каких-либо имущественных интересов относительно товарных знаков и названий других 
компаний.
Все новости, а также изменения в свойствах или применении продукции компании M etaSystems Probes GmbH Вы можете найти 
на сайте компании или запросить у аеториэоеагыого дистрибьютора.
Инструкции по безопасности
Все ДНК-зонды предлагаемые компанией MetaSystems Probes, предназначены только для профессионального применения, они 
Д0ЛХО4Ы использоваться только квалифицированным и обученным персоналом. Для обеспечения безопасной работы и 
воспроизводимости результатов, следует соблюдать указания по безопасности и учитывать предупредительные знаки, 
приведенные ниже
M etaSystems Probes GmbH 
1. Индустриштрассе 7 
66604 Альтлюэхайм 
Германия
Тел1.+49 (0)6205 292760 
Факс: <^9 (0)6205 2927629 
em ail: 
info@metasysteme-probes.com  
U RL: www.metasystems-probes.com
Редакция; RevB170222-190124v20.1
А
ОСТОРОЖНО: Формамид токсичен и является потенциальным твратоганом!
ДНК-зонды кампании MetaSystems содержат формамид. Формамид токсичен и является тератогеном.
Может причинять вред ребенку во время внутриутробного развития. Не вдыхать пары, не допускать попадания на 
Koxryf
Надевать перчатки и лабораторный халат. В случае попадания на кожу или в глаза немедленно промыть водой. 
ОСТОРОЖНО: Высокая температура в водяной бане и на нагревательной панели!
Для денатурации и гибридизации используется горячая водяная баня и нагревательные панели с температурой > 
37*С. Соблюдайте осторожность, чтобы не допустить контакта с горячими поверхностями или жидкостями 
Надевать перчатки и лабораторный халат. В случае контакта с кохий немедленно охладить холодной водой ________
ВНИМАНИЕ: Правила лабораторной практики!
При использовании соблюдать принципы надлежащей лабораторной практики
ВНИМАНИЕ: Ликвидация откодов!
Все опасные материалы должны ликвидироваться е соответствии с местными/национвльными нормативными 
требованиями по ликвидации опасных отходов.
Хранение и использование
Зонды должны храниться в темноте при температуре -20°С (15’ C ). Эффективность зондов не изменяется при многократных 
циклах разморозки/ заморозки (до 20 циклов).
Транспортировка
ДНК-зонды компаг^ии M etaSystems транспортируются при комнатной температуре 20*С (±5*С).
Необходимое оборудование не входящее в комплект поставки
• Водяная баня с точным 
контролем температуры
• Микропипетки с переменным 
объемом в диапазоне от 1 мкл 
до 1 мл, калиброванные
• Термометр
• Нагревательная панель 75*С 
(tl* C ) с  твердой поверхностью 
и точным контролем 
темлервтуры до 60’С
• Морозильная камера -20*С 
(± 5*0
Флуоресцентный микроскоп с необходимым 
набором фильтров (см. ниже)
• Ph метр, калиброванный
• Жаровой шкаф Э7°С (±1*С)
• Пинцет
• Таймер
• Сосуд коплина (стекло или 
пластик)
• Перчатки
• Микроцентрифуга
• Иммерсионное масло, рекомендованное 
производителем микроскопа (для 
флуоресценции)
■  Система съемки и анализа изображений, 
например, tsis (компании MetaSystems)
• Покровные стекла:
22 X 22 мм’  и 24 X 32 мм’
• Резиновый клей
• Среда предохраняющая препараты от 
выцветания OAP!/antlfade
Рекомендации к флуоресцентному микроскопу
• Флуоресцентный осветитель: флуоресцентные осветители с металлогалоидными лампами или осветители с обычными 
ртутными лампами на 100 Вт
• Объективы пригодные для эли-флуоресценгного анализа.
• Флуоресцентные фильтры: для просмотра и подсчета следует использовать комплекты фильтров компании MetaSystems 
на три или четыре диапазона, или подходящие однополосные фильтры. Для съемки должны использоваться подходящие 
однополосные фильтры соответствующие флуорохромам. Подробную информацию можно получить по запросу.
Характеристики флуорохромов
Метка Максимум Поглощения Максимум Эмиссии
Голубея (акввмарин) 426 нм 480 нм
Зеленая 505 нм 530 нм
Оранжевая 552 нм 576 нм
С т р  7  и з  8
о |' ^Чивввбт<й|1ив Flaw  
в микроскопе. стоп слайдер в световом потоке. потока.
• Выключена флуоресцентная лампа. • включить флуоресцентную лампу.
Дополнительно необходимые растворы (не входят в поставку):
• Дистиллированная вода, двойной очистки,
• Тоипсин/ЕОТА го П5% Тгмпгин п П7%. РПТД’ 4Ыя в НКапаигч.п/^вв,^ил., I •хч


--- стр. 23 ---
Стр. 2 из 8
в МИ1ф>ОС«ОП*. СТОП слейдер е с*«тоеом патоке.
• выключена флуоресцентная лампе.
метоке ‘ ' I
’ Т '
• Включить флуоресцентную лампу.
* Объектив а неверном положении.
• фототу Оус W BW M III на т ят .
• Переключить объектив в световой поток.
• гм м б е ш б и п м й  поток на е я м в в г’
Спустя некоторое время 
сигналы гибридизации 
слабеют.
• Иммерсионное масло попадает между 
предметным и покровным стеклами.
• Заменить покровное стекло и OAPI/antlfaOe. 
Использовать покровное стекло 24 х 32 мм’ , даже 
если область гибоидизаиии значительно меньше
Диффузно-рассеянные
сигналы.
• Препарат не освещен надлежащим 
обрмои.
• Фокусную плоскость не возможно 
настроить должным образом.
• С лм и ви то пепА ело й А лвМ ан е
поэвогтяет настроить фокус
• npOHpilW i iM HpOBy микроскопа. СЯ8ПИВ 
необходимые регулировки. Проверить время 
рЛ пы )/^т ш ы .
» Исгтольэоватъ достаточное количество 
иммерсионного масла. Недопустимо сиеимвать 
масло разных марок Использовать масло 
пригодное для флуоресцентной микроскопии.
• Не использовать слишком много ОАРйлМ м1в. 
Достаточно 10 мкл на препарат (24 x 32 мм* 
тм а н о а с м ф ю ).
Слабые сигналы • Хромосомный препарат слишком 
старый.
• НдАОСТПТОЧНМ денатурация хромосом.
• Используется многополосный фильтр.
• Слайды должны быть не старше двух недель.
> Crapatata, сушка и дополнительная фиксация 
могут подавить гибридизацию, и поэтому, не 
р аам щ щ о тси.
• П оаыеьтвтвиирвтурулен8П1Рй|иидоМ *С.
• Установить соответствующий однополосный 
Фильтр.
Слабые сигналы 
аквамарин или зеленый, 
высокая диффузия фона 
в зеленом канале.
• 11мМН)ИММЯЬ1М1% слишком высока, 
что вызывает М П М ар а сигнала в 
« N O K K liM  м м Ш И Н Ы Й ..
• Слишком низков значение pH 
отмьвочного расгаора.
• Й У Ы а 9 в а ^ 1 М Н Ы Ы ф и м м в 8 1
концентрафти.
• Убедиться что значение pH промывочного 
раствора в диапазоне 7.0-7.5. Некоторые 
зеленые флуорохромы чувствительны к pH ниже 
7.
Высокий неелецифичный 
фон.
• О е т м ш р  цитоплазматические б м м  
могут влиять на гибридизацию.
• препарат Пепсииоы.
Если рекомендованные действия не решают проблему, или Ваша проблема отсутствует в списке, обратитесь а компанию 
MetaSvstenTB Probee
1 а и з  3 0
Используемые обозначения
Символ Описание
Этим символом обозначается «М адифеское Изделие для In Vitro Диагностики».
d Прошаадиталь
А
Все предупреждения отмечаются предупреждающим треугольником с восклицательным знаком.
В зависимости от характере предупреждения он сопровождается словами ВНИМАНИЕ или ОСТОРОЖНО.
Идентификационный (каталожный) номер
[w l Номер партии
Температурные условия ]ф8мения Указываются верхний и нижний пределы
V Этим символом обозначается количество исследований.
Дата окончания срока годности.
Дополнительно необходимые растворы (не входят е поставку):
Дистиллированная вода, двоими очистки,
Тригкин/ЕОТА (0.05%  Трипсин, 0.02%  EDTA'4Na а сбалансированном солевом растворе по Хиесу бва Са^ и Mg’* 3 7 *0  
О 076 М К О , з г е .
Фиксатор Карнуа (3:1 Метанол / Уксусная кислота, саежеприготоаленный, -20 *0 ,
Предиатные стекла для микроскопического анализа,
2Х SSC При з г е .
Сария зтилоеых спиртов: 100%, 95% , 70%, комнатной температуры.
Стр. 7 из 8
Процедура:
Центрифугировать 2-5 мл амниотической мшкости (без крови) в минут на 1000 гргп.
Удалить супернатант и осторожно взболтать пробирку для взвеииеания осадка.
Добавить 5 мл ТрипсигУЕОТА и инкубировать 30 минут при 37*С (±1*С).
Центрифугировать 8 н т у т  на 1000 гргл, удалить супернатант и осторожно взболтать пробирку для вэвеимаания 
осадка.
Добавить 5 мл 0.075 M KCI и инкубировать 20 минут при 37*е(± 1‘е ).
Медленно добавить 2 ил свежеприготовленного фиксатора (3:1 Метанол / Уксусная кислота. -20*С), смешать. 
Центрифугировать 8 минут на 1000 rpm, удалить сугврнатант и осторожно аэболтатъ пробирку для вмешивания 
осадка.
Добавить 5 мл фиксатора и инкубировать 30 минут в холодильной камере (2*С '6*е).
Центрифугировать 6 минут при 1000 гр т. удалить супернатант и осторожно вэбогттать пробирку для удаления 
осадка.
Добавить 50-100 мкл фиксатора и осторожно вэболтатъ пробирку.
Капнуть по 10 мкл клеточной суспензии на отмеченные области чистого предметного стекла (области можно 
отметить алмазным карандашом) Оптимальный результат получается при температуре окружающей среды 20- 
25*С и влажности 45-55%. Дать высохнуть препарату на воздухе, при комнатной температуре и проверить 
плотность клеток под фазово-контрастным микроскопом.
Если плотность клеток низкая -  добавить ещв 10 мкл клеточной суспензии и дать препарату высохнуть. 
Инкубировать препараты (стекла) 15-30 минут в 2Х SSC  при Э7*С (S1*C).
Денатурировать стекла в серии этиловых cfwpToe (70% . 85% . и 100%) 2 минуты в каждом. Дать высохнуть на 
воздухе
Продолжить в соответствии с  лротокогюм к ДНК-эонду. прилохсетому к каждому зонду или набору.
Общие замечания
• ДНК-зонды компании M etaSysiems предполагают использование на цитогенетических препаратах с фиксатором Карнуа и 
дотосиы применяться в соответствии с лабораторной практикой и принятыми нормами учреждения
« Подготовка препарата должна соответствовать стандартным г^тгогенетическим процедурам.
Стабильность гибридиэованных препаратов:
« Препараты геогут быть проанализированы в течение не менее шести месяцев после гибридизации FISH , при условии 
хранения в темноте при -го*С (±5’С ).
Дополнительные процедурные рекомендации
• Настоятельно рекомендуется использовать калиброванных термометр для измерения температур рветворов. водяной 
бани и инкубаторов, так как данные температуры критичны для оптимального результата работы зонда
• Аккуратно проверяйте температуру предварительно нагретых растворов.
• Аккуратно проверяйте pH всех растворов. Значение должно быть в диапазоне 7.0 • 7.5 при комнатной температуре.
• Ж есткость отмывочных растаороа. Ph и температура являются наиболее важными параметрами, поскольку низкая 
жесткость м отет вызвать неслецифичиое связывание зонда, а слишком высокая привести к отсутствию сигнала.
« Перед открытием: Кратковременно взболтать, чтобы поднять смесь зонда со дна пробирки.
Стр. 6 из 8
19 из 30
Стр. 3 из 8


--- стр. 24 ---
Протокол FISH для ДНК-зондов MetaSystems
Подготовка препарата
1. Использовать специально подготовлежые стекла в зависимости от исследуемого материала.
2. Нанести 10 мкл зонда.
3. Накрыть покровным стеклом 22 х 22 мм^.
4. Заклеить края покровного стекла резиновым клеем.
Денатурация
1. Денатурируйте образец и зонд одновременно, путем нагрева препарата на нагревательной панели при 75°С (± 1^ ) 
в течение 2 мин.
Гибридизация
1. Инкубируйте во влажной камере при 37*С (11*С) в течение ночи.
Отмывка после гибридизации 
Необходимые растворы 
.  0.4Х SSC (pH 7 о - 7.5) при 72<Ч: (t 1®С)
• 2Х SSC , 0.05%  Tween-20 (pH 7.0) при комнатной температуре
1. Аккуратно уделить покровное стекло и следы клея.
2. Отмыть стекло а 0.4Х SSC  (pH 7.0) при 72®С (±1°С) 2 мин,
3. Высушить препарат и отмыть в 2Х SSC , 0.05%  Tween20 (pH 7.0) при комнатной температуре 30 секунд.
4. Для предотвращения образования кристаллов, кратковременно промыть в дистиллированной воде, и оставить на 
воздухе до высыхания.
Контрастное окрашивание
Необходимые растворы:
• Среда предохраняющая препараты от выцветания OAPI/antifade (например M etaSystems DAPI/antIfade, D-0902-500-DA)
Процедура: 
1,
2 ,
3.
4,
Нанести 10 мкл DAPl/antifade и накрыть покровным стеклом 24 х 32 мм^
Дать впитаться DAPl/anlifade в течение lOmin,
Провести анализ препарата под микроскопом.
Хранить стекла при -20*С (i5 ’C ). Сигналы гибридизации будут удовлетворительными е течение как минимум шести 
месяцев.
Ожидаемые результаты
ХА 13/21
Нормальная клетка:
Два зеленых (2G ), два оранжевых 
(2 0 ) сигнала.
ХА 13/21
Абберантная клетка: Трисомия 13; 
три зеленых (3G ) и два оранжевых 
(2 0) сигнала.
ХА 13/21
Абберантная клетка: Трисомия 21: 
два зеленых (2G ) и три оранжевых 
(3 0 ) сигнала.
XAX/Y/18
Абберантная мужская клетка: 
Трисомия 18, один зеленый (Ю ), 
один оранжевый (1 0 ) и три голубых 
(36) сигнала.
XAX/Y/18
Абберантная женская клетка: 
Трисомия 18. два зеленых (2G ) и
XAX/Y/18
Нормальная мужская клетка: Один 
зеленый (1G ), один оранжевый (10) 
и два голубых (2В) сигнала.
XAX/Y/18
Нормальная женская клетка: 
два зеленых (2G ) и два голубых 
(2 6) сигнала.
XAX/Y/18
Абберантная мужская клетка:
47.XXY; два зеленых (2G ), один 
оранжевый (1 0 ) и два голубых (26) 
сигнала.
XAX/Y/18
Абберантная женская клетка:
45,ХО: один зеленый (1G ) и два
Показаны наиболее часто встречающиеся сочетания сигналов (90-95% случаев).
Так как флуоресцентный ДНК-зонд идентифицирует фрагмент заданной >фомосомы. а в случаях сложных или редких 
генетических нарушений (перестроек), заданные фрагменты Рьюгут многократно повторяться (увеличиваться в размере и 
количестве) или наоборот -  уменьшаться (исчезать), при исследовании могут наблюдаться комбинации сигналов отличные от 
приведенных выше.
С т о . 4  и з  ft
•мтярм Г^мдпопапггьпым ензмееет ьак Макет 
•ыдыеегь ооьреяление оргамое при 
Д|||пельноыА|« 1Горяю1цеис« ■оиейспии Переа 
мполкзманиен необкодим получить
С т р . S  и з  8
i  <й1


--- стр. 26 ---
Поставляемые материалы
100 мкл 10), ХА 13/21 зонд в г> 1бридиэационном растворе, готовый к использованию.
Применение
Все ДНК-зонды предлагаемые компанией MetaSystems Probes, применяются для цитогенетических исследоеаний методом 
флуоресцентной гибридизации In-situ (FISH ). ДНК-эонд ХА 13/21 позволяет диагностировать и отслеживать хромосомные 
нарушения структурного характера, т.е. присутствующие во всех клетках организма (в соответствии с Общей Номенклатурой 
Медицинских Изделий (GMDN) СТ 826). FISH -анализ не является самостоятельным методом, он обязательно используется в 
качества дополнительного теста к другим диагностическим исследования, таким как кариотипирование клеток плода. ХА 13/21 
не предназначен для выявления структурных перестроек (например транспокаций) ипи численных аберраций других хромосом.
Поддержка потребителей
Обращайтесь, пожалуйста, в компанию MetaSystems Probes GmbH (информация для обращения приведена ниже) ипи к 
авторизованному дистрибьютору в своей стране.
M etaSystems Probes не имеет каких-либо имущественных интересов относительно товарньос знаков и названий других 
компаний.
Все новости, а также изменения в свойствах или применении продукции компании M etaSystems Probes GmbH Вы можете найти 
на сайте компании или запросить у авторизованного дистрибьютора.
Инструкции по безопасности
Все ДНК-зонды предлагаемые компанией M etaSystems Probes, предназначены только для профессионального применения, они 
должны использоваться только квалифицированным и обученным персоналом. Для обеспечения безопасной работы и 
воспроизводимости результатов, следует соблюдать указания по безопасности и учитывать предупредительные знаки, 
приведенные ниже.
MetaSystems Probes GmbH 
1. Индустришграссе 7 
68804 Альтлюэхэйм 
Германия
Теш , *49 (0)6205 292760 
Факс «49 (0)6205 2927629 
em ail: lrtfo@metasystems-probes.com  
U RL; www.melasystems-probes.com
ОСТОРОЖНО: Формампд токсичен и является потенциальным тератогеном)
ДНК-зонды компании M etaSystems содержат формамид. Формамид токсичен и является тератогеном.
Может причинять вред ребенку во время внутриутробного развития. Не вдыхать пары, не допускать попадания на 
кожу!
Надевать перчатхи и лабораторный халат. В случае попадания на кожу или в глаза немедленно промыть водой.
/ !\ ОСТОРОЖНО: Высокая температура в водяной бане и на нагревательной панели!
Для денатурации и гибридизации используется горячая водяная баня и нагревательные панели с температурой : 
37"С. Соблюдайте осторожность, чтобы не допустить контакта с горячими поверхностями или жидкостями. 
Надевать перчатки и лабораторный халат. В случае контакта с кожей немедленно охладить холодной водой.
ВНИМАНИЕ: Правила лабораторной практики!
При использовании соблюдать принципы надлежащей лабораторной практики.
ВНИМАНИЕ: Ликвидация отходов!
Все опасные материалы должны ликвидироваться в соответствии с местными/национальными нормативными 
требованиями по ликвидации опасных отходов._____________________________________________________________________________
Редакция: RevB170222-190124v20.1
Хранение и использование
Зонды должны храниться в темноте при температуре -20*С (±5*С). Эффективность зондов не изменяется при многократных 
циклах разморозки/ заморозки (до 20 циклов).
Транспортировка
ДНК-зонды компании M etaSystems транспортируются при комнатной температуре 20"С (±5*С).
Необходимое оборудование не входящее в комплект поставки
• Водяная баня с точным 
контролем температуры
• Микропипетки с переменным 
объемом в диапазоне от 1 мкл 
до 1 мл. калиброванные 
«Термометр
• Нагревательная панель 75°С 
(tl* C ) с твердой поверхностью 
и точным контролем 
температуры до 80’С 
>  Морозильная камера -20°С 
(±5*С)
Флуоресцентный микроскоп с необходимым 
набором фильтров (см. ниже)
>  Ph метр, калиброванный
• Жаровой шкаф 37°С (±1°С)
• Пинцет
•Таймер
• Сосуд коплина (стекло или 
пластик)
• Перчатки 
■  Микроцентрифуга
• Иммерсионное масло, рекомендованное 
производителем микроскопа (для 
флуоресценции)
>  Система съемки и анализа изображений, 
например, Isis (компании MetaSystems)
• Покровные стекла:
22 X 22 ММ’  И 24 X 32 мм’
>  Резиновый клей
>  Среда предохраняющая препараты от 
выцветания DAPI/antifade
Рекомендации к флуоресцентному микроскопу
• Флуоресцентный осветитель: флуоресцентные осветители с металлогалоидными лампами или осветители с обычными 
ртутными лампами на 100 Вт
• Объективы пригодные для эпи-флуоресцентного анализа.
• Флуоресцентные фильтры: для просмотра и подсчета следует использовать комплекты фильтров компании MetaSystems 
на три или четыре диапазона, или подходящие однополосные фильтры. Для съемки должны использоваться подходящие 
однополосные фильтры соответствующие флуорохромам. Подробную информацию можно получить по запросу.
Хара!стеристики флуорохромов
Метка Максимум Поглощения Максимум Эмиссии
Голубая (аквамарин) 426 нм 480 нм
Зеленая 505 нм 530 нм
Оранжевая 552 нм 576 нм
FT5H
В микроскопе.
С т р . 7  и з  8
ImlupkiulpdWDWSUIITIf 
стоп слайдер в световом потоке. потока.
Выключена Флуоресцентная лампа
I lu u i u i uBna iip e iia p d ia --------------------------------------------------
Дополнительно необходимые растворы (не входят в поставку);
• Дистиллированная вода, двойнсм очистки,


--- стр. 27 ---
Стр. 2 из 8
т микроскоп*.
• Выключена флуоресцентная лампа.
• И сп й 1 м уи сяш п р |и яи *й  
ф|фВМ (Ц >1Н М ><1»1У.
• Обьектив в неверном положении.
• ФототубУС пвевавя* i на и м и » .
• Включить флуоресцентную пампу.
• УВ 1Ю и н ь я р и я м а1Й ф11яггрвов<Ю 0с<> поток.
• Переключить обьектив в световой поток.
• П идиаиш  flt ia iB lI поток наоииМ 1с а ."'
Спустя некоторое время 
сигналы гибридизации 
слабеют.
• Иммерсионное масло попадает между 
предметным и покровным стеклами.
» Заменить пофовное стекло и OAPl/antrfade. 
Использовать покровное стекло 24 х 32 мм’, даже 
если область гибридизации ««ачительно меньше
Диффузмурассеянные
сигналы
• П рм яраг не освещен надлажанатм 
обрпои.
• Фокусную плоскость не возможно 
настроить должным образом.
• Слишком толош й СЛОЙ АпИМ в на 
позволяет настроить фокус.
• Лроирип» IM P PM V  микроскопа CHanaie 
необходимые регулировки. Проверить время 
Р 1 Й тУ *1 1 8 И М .
• Использовать достаточное количество 
иммерсионного масла. Недопустимо смешивать 
масло разных марок. Использовать масло 
пригодное для флуоресцентной микроскогыи.
• На использовать слишком много (М РМ М М а. 
Достаточно 10 мкл на препарат (24 х 32 мм'
п о ж р и и алш яр )._______________________________________
Слабые сигналы • Хромосомный препарат слишком 
старый.
• НИ йМ пточнм денатурация хромосом.
• Используется многополосмый фильтр.
• Слайды должны быть не старше двух недель.
• Сгараниа, сушка и дополнительная фиксв 1а1я 
могут подавить гибридизацию, и поатому, на 
р аи аш щ атси .
• П в1ма7атампарчур»да1Ж ур— и д о Х Г С .
• Установить соответствующий однополосный
Слабые сигналы 
аквамарин или зеленый, 
высокая диффузия фона 
в зеленом канале.
» lin W |l» < B H H ffcn w iiK O M  еысокв, ' 
что вызывает попадание Ш Ш М  а 
А1ЙА ий1Г1Ш № ЫЙ.
» Слишком низкое значение pH 
отмывочного раствора.
£ n w a ie « ra
• Убедиться что значение pH промывочного 
раствора в диапазоне 7.0-7.5. Некоторые 
зепеныв флуорохромы чувствительны к pH ниже 
7,
Высокий наспецифшиый 
фон.
• О ош м М ф ттоплазм атическиебапм  
могут влиять на гибридизацию.
« препарат Пепсином. '
Если рекомендованные действия не решают проблему, или Ваша проблема отсутствует а списке, обратитесь в компанию 
M elaSysiem a Pfobei _________
22 ИЗ 30
Дополнительно необходимые растворы (не входят в поставку):
• Дистиллированная аода, двойной очистки.
• Триосин/ЕОТА (O.OS4 Трипсин. 0.02%  EOTAMNa в сбалансированном солевом растворе по Хэнксу беэ Са”  и Мд^', 3 7 *0 ,
• 0.075 М KCI, з г е ,
• Фиксатор Карнуа (3:1 Метанол / Уксусная кислота, свежеприготовленный, >20*0),
• Предметные стекла для микроскопического аналиэа,
• 2Х SSC  при 37*С,
• Серия этиловых спиртов: 100%, 95%, 70%, комнатной температуры.
Процедура:
1. Центрифугировать 2-5 мл амниотической жидкости (без крови) 8 минут на 1000 гр т.
Удалить супернатант и осторожно взболтать пробирку для взвешивания осадка.
Добавить 5 мл Трипсин/EDTA и инкубировать 30 минут при 37*С (±1*С).
Центрифугировать 8 минут на 1000 гр т, удалить супернатант и осторожно взболтать пробирку для взвешивания 
осадка.
Добавить 5 мл 0.075 М КО  и инкубировать 20 минут при 37*С (±1'Х:).
Медленно добавить 2 мл свежеприготовленного ((мксатора (3:1 Метанол / Уксусная кислота, -20*С), смешать. 
Центрифугироввтъ 8 минут на 1000 гр т. удалить супернатант и осторожно взболтать пробирку для взвешивания 
осадка.
Добавить 5 мл фиксатора и инкубировать 30 минут в холодильной камере (2‘С^ *С).
Центрифугировать 8 минут при 1000 гр т, удалить супернатант и осторожно взболтать пробирку для удаления 
осадка.
Добавить 50-100 мкл фиксатора и осторожно взболтать пробирку.
Капнуть г>о 10 мкл клеточной суспензии на отмеченные области чистого предметного стекла (области можно 
отметить алмазным карандашом). Оптимальный результат получается при температуре окружающей среды 20- 
25‘С и влажности 45-55%. Дать высохнуть препарату на воздухе, при комнатной температуре и проверить 
плотность клеток под фазово-контрастным микроскопом.
Если плотность клеток низкая -  добавить еще 10 мкл клеточной суспензии и дать препарату высохнуть. 
Инкубировать препараты (стекла) 15-30 минут в 2Х SSC при З Г С  (t1*C ).
Денатурировать стекла в серии этиловых спиртов (70% , 85%. и 100%) 2 минуты в каждом. Дать высохнуть на 
воздухе.
Продолжить в соответствии с протоколом к ДНК-зонду, приложенному к каждому зонду или набору.
2.
3.
4.
5.
6 .
7.
8.
9.
10 .  
11.
12.
13.
14.
15.
Используемые обозначения
Символ Описание
1*Я
1
Этим символом обозначается «Медицинское Изделие для In Vitro Диагностиш».
J Производитель
А
Все предупреждения отмечаются предупреждающим треугольником с восклицате/ыеим знаком 
В зависимости от характера предупреждения он сопровождается словами ВНИМАНИЕ или ОСТОРОЖНО.
@ Идентификационный (каталожный) номер
Номер партии
t Температурные условия фанения. Указываются верхний и тк и и й  пределы.
Этим символом обозначается количество исследований.
2 Дата окончания срока годности
Общие замечания
• ДНК-эонды компании M etaSyslem s предполагают использование на цитогенетических преларвтах с фиксатором Карнуа и 
д о л ты  применяться в соответствии с лабораторной практикой и пр4ыятъяии нормами учреждения
• Подготовка прегарата должна соответствовать стандартным цитогенетическим процедурам.
Стабильность гибридизованных препаратов:
« Препараты могут быть проанализированы в течение не менее шести месяцев после гибридиза1Э4и FISH , при условии 
хранения в темноте при -20*С (± 5'С).
Дополнительные процедурные рекомендации
• Настоятельно рекомендуется использовать калиброванный термометр для измерения температур растворов, водяной 
бани и инкубаторов, так как данные температуры фитичны для огттимального результата работы зонда.
• Аккуратно проверяйте температуру предварительно нагретых растворов.
» Аккуратно проверяйте pH всех растворов. Значение должно быть в диапазоне 7.0 • 7.5 при комнатной температуре.
• Ж есткость отмывочных растворов, Ph и температура являются наиболее важными параметрами, поскольку низкая 
жесткость может вызвать наслецифичное связывание зонда, а слиижом высокая привести к отсутствию сигнала
• Перед открытием: Кратковременно взболтать, чтобы поднять смесь зонда со дна пробирки.
Стр. 6 из 8
23 из 30
Стр. 3 из 8


--- стр. 28 ---
Протокол FISH для ДНК-зондов MetaSystems
Подготовка препарата
1. Исполмоевть специально подготовленные стекла в зависимости от исследуемого материала.
2. Нанести 10 мкл зонда.
3. Накрыть покровным стеклом 22 к 22 мм^.
4. Заклеить края покровного стекла резиновым клеем.
Ожидаемые результаты
Нормальная клетка;
Два зеленых (2G ) и два оранжевых 
сигнала (20).
Денатурация
1. Денатурируйте образец и зонд одновременно, путем нагрева препарата на нагревательной панели при 75*С (t1°C ) 
в течение 2 мин.
Гибридизация
1. Инкубируйте во влажной камере при 37°С (11°С) в течение ночи.
Отмывка после гибридизации
Необходимые растворы
• 0.4Х SSC  (pH 7.0 -  7.5) при 72‘>С (± I^C)
♦ 2Х SSC , 0.05%  Tween-20 (pH 7.0) при комнатной температуре
Абберантная клетка;
Трисомия 21
Два зеленых (2G) и три оранжевых 
(3 0 ) сигнала.
Процедура
1
2.
3.
4.
Аккуратно удалить покровное стекло и следы клея.
Отмыть стекло в 0.4Х SSC (pH 7.0) при 72°С (41*С) 2 мин.
Высушить препарат и отмыть в 2Х SSC , 0.05% Tween20 (pH 7.0) при комнатной температуре 30 секунд.
Для предотвращения образования кристаллов, кратковременно промыть в дистиллированной воде, и оставить на 
воздухе до высыхания.
Абберантная клетка:
Трисомия 13
Три зеленых (3G ) и два оранжевых 
(2 0 ) сигнала.
Контрастное окрашивание
Необходимые растворы:
• Среда предохраняющая препараты от выцветания DAPI/antifade (например M etaSystems DAPI/antifade, 0-0902-500-ОА)
Показаны наиболее часто встречающиеся сочетания сигналов (90-95% случаев).
Так как флуоресцентный ДНК-зонд идентифицирует фрагмент заданной хромосомы, а в случаях сложных или редких 
генетических нарущений (перестроек), заданные фрагменты риогут многократно повторяться (увеличиваться в размере и 
количестве) или наоборот -  уменьшаться (исчезать), при исследовании могут набподаться корибинации сигналов отличные от 
приведенных выше.
Пооцапура:
Нанести 10 мкл DAPI/antifade и накрыть покровным стеклом 24 х 32 мьК.
Дать впитаться OAPt/anbfade в течение lOmin.
Провести анализ препарата под микроскопом.
Хранить стекла при -20‘ С (±5°С). Сигналы гибридизации будут удовлетворительными в течение как минимум шести 
месяцев.
Сто- 4 иа 8 С т р . 5  и з  8
*7!?1я» > г>  
£ S ЙU  « а W
н«терм. Прей положите л^ а еыэыееетрак Может те Я - f f l - ТТ
M M ierb поереждения органов при 5 X о
длит«лкнои/поаторяющ*мсй (оздейстаин Перед ГГ t Й СЛ 7^
d•< -<


--- стр. 29 ---
Стр. 4 из 8 v^rp. о из о
24ИЭ30.
5 »
■Ы1Ы»Ж1Ь ппцшигдч—  оргдио* при
дпит«льиоиМо«го(июи|е««а1 м зд рАспм и . ГН р^  
ислоль)ор«нием имбюдиме non^orrv 
сп«чидлы4ые HHcrpyioimi Иедопустмио имярни^ 
пшрош. Нробходимо надеть защитные перчатш и защитную одежду. 
В СЛУЧАЕ аоздейстаия обратитьса за медицинской помощью
Qtfahr. Капе Kind im Mutteheib schMi|tn. Капп varmutlich Krebs 
er?eu|en. Капп d>e Orpne schad<|«n bei lingerer/wiederhoner Eipositon. 
VorGebrauch besondere АпжеЫпдеп elnholen Oampf nJch(finatmen. 
Schutahandschube/SchLitzklekJunf trafen bCl Enposition oder Verdacht: 
АгзОКЬеп Aat eirthclen
Dancer, aeut тйге au foetus. Susceptible dt provoqucr le cancer. ftisqi>e 
prasume^ d'effets craves pour les orfanes a la suite d'exposibom rdp^ttes ou 
d une expoMion prolor«d« Se procurer ks irvstrucoons aw»t utdisabon Me 
pat respirer les vapeurs. Porter des cants de protecdon/ des vatements de 
protection. CM CAS d’enpewCion proovde ou suspectde consulter un medkin.
О
<$]i
ж
? 00
XCyting AneuScore Probes
Только для профессионального использования
Более подробная информация доступна на www.metasystems-probes.com
Продукт Метка Кат.номер Объем
XAX/Y/18 зеленая/оранжевая D-5606-100-TC 100 мкл
/голубая
Специфичный ДНК-зонд ХА X/Y/18 позволяет определить численные вариации хромосом X, У и 18. Проба содержит 
повторяющиеся последовательности гибридиэующиеся к центромерам X хромосомы с зеленой, к У хромосоме -  оранжевой и 
18 хромосоме -  голубой (аква) метками.
Диаграмма ДНК-зонда:
В
Ё.
Хромосома 18, X и Y
Стр. 8 из 8
25 из 30
Стр. 1 из 8


--- стр. 30 ---
Поставляемые материалы
100р1 10), ХАХ/У/18эонд вгг1бридиаационном растворе, готовый к использованию.
Применение
Все ДНК-зонды предлагаемые компанией M elaSystem s Probes, применяются для цитогенетических исследований методом 
флуоресцентной гибридизации ln>situ (FISH ). ДНК-зонд ХА X/Y/18 позволяет диагностировать и отслеживать хромосомные 
нарушения структурного характера, т.е . присутствующие во всех клетках организма (а соответствии с Общей Номенклатурой 
Медицинских Изделий (GMON) СТ 826). FISH -аналиэ не является самостоятельным методом, он обязательно используется в 
качестве дополнительного теста к другим диагностическим исследования, таким как кариотипирование клеток ллода. ХА X/Y/18 
не предназначен для выявления структурных перестроек (например транслокаций) или численных аберраций других хромосом.
Инструкции П О  безопасности
Все ДНК'Зонды предлагаемые компанией M elaSystem s Probes, предназначены только для профессионального применения, они 
должны использоваться только квалифицированным и обученным персоналом. Для обеспечения безопасной работы и 
воспроизводимости результатов, следует соблюдать указания по безопасности и учитывать предупредительные знаки, 
приведенные ниже.
ОСТОРОЖНО: Формамид токсичен и является потенциальным тератогеном!
ДНК-эонды компании M elaSystems содержат формамид. Формамид токсичен и является тератогеном.
Может причинять вред ребенку во время внутриутробного развития. Не вдыхать пары, не допускать попадания на 
кожу!
Надевать перчатки и лабораторный халат. В случае попадания на кожу или в глаза немедленно промыть водой.
/!\
ОСТОРОЖНО: Высокая температура в водяной бане и на нагревательной панели!
Для денатурации и гибридизации используется горячая водяная баня и нагревательные панели с температурой > 
37'С . Соблюдайте осторожность, чтобы не допустить контакта с горячими поверхностями или жидкостями. 
Надевать перчатки и лабораторный халат. В случае контагста с кожей немедленно охладить холодной водой. _______
ВНИМАНИЕ: Правила лабораторной практики!
При использовании соблюдать принципы надлежащей лабораторной практики
ВНИМАНИЕ: Ликвидация отходов!
Все опасные материалы должны ликвидироваться в соответствии с местными/национальными нормативными 
требоеамиями по ликвидации опасных отходов_____________________________________________________________________________
Хранение и использование
Зонды должны храниться а темноте при температуре -20*С (tS ’C ). Эффективность зондов не изменяется при многократных 
циклах разморозки/ заморозки (до 20 циклов).
Транспортировка
ДНК-зонды компании M elaSystems транспортируются при комнатной температура 20*С (±5*С).
Необходимое оборудование не входящее в комплект поставки
• Водяная баня с точным 
контролем температуры
»Микропипетки с переменным 
обьемом в диапазоне от 1 мкл 
до 1 мл, калиброванньге 
«Термометр
■  Нагревательная панель 75*С 
(±1 *С) с твердой поверхностью 
и точным контролем 
температуры до 80‘С 
• Морозильная камера -20*С 
(± 5*0
Флуоресцактный микросхоп с необходимым 
набором фильтров (см. ниже)
>Ph метр, калиброванный
■  Жаровой ижаф 37'С  (±1 *С) 
• Пинцет
«Таймер
• Сосуд коллина (стекло или 
пластик)
• Перчатки
• Микроцентрифуга
• Иммерсионное масло, рекомендованное 
производителем микроскопа (для 
г^уоресцанции)
»Система съемки и анализа изображений, 
например, Isis (компании M elaSystem s)
• Погфоеные стекла
22 X 22 мм^ и 24 X 32 мм’
• Резиновый клей
• Среда предохраняющая препараты от 
выцветания DAPI/antIfade
Рекомендации к флуоресцентному микроскопу
• Флуоресцентный осветитель: флуоресцентные осветители с металлогалоидными лампами или осветители с обычными 
ртутными гтампами на 100 Вт
• Объективы пригодные для эпинрлуоресценгного анализа.
• Флуоресцентные фильтры: для просмотра и подсчета следует использовать комплекты фильтров камлании M elaSystem s 
на три или четыре диапазона, или подходящие однополосные фильтры. Для съемки долхсны использоваться подходящие 
однополосные фильтры соответствующие флуорохромам. Подробную информацию иохою получить по запросу.
Характеристики флуорохромов
Метка Максимум Поглощения Максимум Эмиссии
Голубая (аквамарин) 426 нм 480 ни
Зеленая 505 нм 530 нм
Оранжевая 552 нм $76 нм
степ cnat^epB (Ф «говы  патака. 
Выключена Лгтпплп  lAumatt nmt.
потока.
ш т т
Поддержка потребителей
Обрагцайтесь, пожалуйста, а компанию M elaSystem s Probes GmbH (информация для обращения приведена ниже) или к 
авторизованному дистрибьютору в своей стране.
M elaSystem s Probes не имеет каких-либо имущественных интересов относительно товарных знаков и названий других 
компаний.
Все новости, а также изменения в свойствах или применении продукции компании M elaSystems Probes GmbH Вы можете найти 
на сайте компании или запросить у авторизованного дистрибьютора.
M elaSystem s Probes GmbH 
1. Индустриштрассе 7 
68804 Альтлюэхайм 
Германия
Тел1:+49 (0)6205 292760 
Факс «49 (0)6205 2927629 
email: 
info@metasystems-probes.com  
U RL: www.metasystems-probes.com
Редакция: RevB170222-170328v10.1
С т р . 7  и з  8
Mufliumww претаратГ
Дополнительно необходимые растворы (не входят в поставку);
« Дистиллированная вода, двойной очистки _____________________________________________


--- стр. 31 ---
в МИ1фОС«ОГ>В. стоп емВвар е «seroeoM потоке.
• Выклочема флуоресцентная ламла.
• И спв№ црпвнир«вм вА
• Обьеноив в неверном положении.
• <птШ1|Я1И— >вМ11на— В».
щ ui^M iw  с л Ш Т  
ПОТОКА,
•  Включить флуоресцентную лампу
'-Л. Т ______
•  Переключить объектив а светоаой поток.
• ...............................................;
Спустя некоторое время 
ситалы гибридизации 
слабеют
• И1Мрсио**4ое масло попадает мехзду  
предмет>1ым и покроаньм стакламч.
•  Заменить покровное стекло и DAPI/antifade. 
Использовать гкяфовное стекло 24 х 32 мм^, даже 
ес(ы область гибоидизашм значительно меньше
Диффу расемни ыв  
сиг>«алы.
• ПрамрВГ не освещен надлехсащим
• Фокусную плосюстъ не воэмохмо 
настроить ДОЛХ1НЫМ образом.
• Слм1комтапбП|АелойАлМи1вне  
позволяет нвстроить фокус.
необходимые регутровш . Проверить время
•  Использовать достаточное количество 
иммерсионного масла. Недопустимо смешивать 
масло разных марок Использовать масло 
пригодное для флуоресцентной иифоскогвм.
•  Не использовать слииком много О А П М М а . 
Достаточно 10 мкл на препарат (24 х 32 им*
Слабые сигналы • Хромосомный препарат слиизеом 
старый
• Недостаточная двнатура 1В«я хромосом.
• Используется многополосный фильтр.
« Слайды дол)ты быть не старше двух недель.
•  Старение, суижа и дополнительная фиксация 
могут подавить тб|ёиизацию, и поатону. не
•  Пешвьтвтом1|рв1И1уяе1ждащ <ДОМ*С.
• Установить соответствующий однополосный 
фильтр.
Слабые сигналы 
аквамарин или зеленый, 
высокая диффузия фона 
в зеленом канале.
•  М и М М И Й М И п ел и ц ко м  высока, 
что вызывает попадание сигнала в
■IM 9IIII н а м в и м и й ,
• Слмхжом низкое значение pH  
отмывочного раствора.
•  И Ш Ш Ш 1 | IIU P U H W  \
ко»«звнтрасвв1.
• Убедиться что значение pH промывочного 
раствора в диапазоне 7.0-7.S. Некоторые 
зеленые флуорохромы чувствительны к pH ниже 
7.
быСОПВ* НёСПВЦНф|МНУН
фок.
■е О в«*«М 9ф тх1лазы атичеа(иевМ ||  
могут влиять на пзбридиэацио.
• П М М Я рВ йакпрепаратЛ И Я М М .
Если рекомендоважые действия не решают проблему, или ваша проблема отсутствует в списке, обратитесь в компанию 
MetaSvstems Probes.
26 из 30
Д ополнительно необходимые растворы (не входят в поставку):
• Д истиплиром тая м д *, дво^юй ош спм.
• Трмкин/ЕОТА (0.05%  Трипсин, 0.02%  EOTA‘4Na е сбалансиромнмом сопмом растворе по Хэж су без Са^ и Mg’*. 37*С), 
.  0.075 М KCI, з г е .
• Фиксатор Карнуа (3;1 Метанол / Уксусная кислота, свежеприготовленный, -20*С).
• Предметные стекла для микроскопического аналим .
• 2Х SSC  при 37*С.
• Серия этилош х спиртов: 100%, 95% . 70%. комнатной температуры
Процедура:
Центрйфугироевть 2*5 мл амниотической жидкости (без крови) 8 минут на 1000 rpm.
Удалить супернатант и осторожно вэболтать пробирку для взвешивания осадка.
Добавить 5 ил ТрипоьУЕОТА и инкубировать 30 минут при 37*С (±1*С).
Центрифугировать 8 минут на 1000 гргп, удалить супернатант и осторожно взболтать пробирку для взввшиввния 
осадка.
Добавить 5 мл 0.075 М КО  и инкуб$фовать 20 минут при Э7*С (t1 *C ).
Медленно добавить 2 мл свежеприготовленного фиксаторе (3:1 Метанол / Уксусная кислота, -20*С). смешать. 
Центрифугировать 8 минут на 1000 rpm. удалить супернатант и осторожно взболтать пробирку для взввимвамия 
осадка
Добавить 5 ил фиксатора и инкубировать 30 минут в холодильной камере (2’С-6*С).
Центрифугировать 8 минут при 1000 rpm, удалить супернатант и осторожно взболтать пробирку для удаления 
осадка
Добавить 50-100 нкл фиксатора и осторожно вэболтать пробирку.
Капнуть по 10 ыкл клеточной суспензии на отмеченные области чистого предметного стекла (области можно 
отметить алмазным карандашом}. Оптимальный результат получается при температуре окружаю«цей среды 20- 
25*С и влажности 45-55%. Дать высохнуть препарату на еоадухе. при комнатной температуре и проверить 
плотность клеток под фаэово-контрвстньы микроскопом.
Еегм плотность клеток низкая -  добавить еще 10 мкл клеточной суспензии и дать препарату высохнуть. 
Инкубировать препараты (стекле) 15-30 минут в 2Х SSC  при З Г С  (t1% :}
Денатурировать сгвкпа в с е р т  этиловых спиртов (70% . 85% . и 100%) 2 минуты в каждом. Дать высохнуть на 
воздуха.
Продолхоль в соответствии с протоколом к ДНК-эонду, припожежому к каждому зонду или набору
Используемые обозначения
Символ Описание
[ м ] Этим символом обозначается «Медицинское Изделие для 1п Vitro Диашостиких.
J Производитель
А
Все лредупрехедения отмечаются предупреждающим треугольником с восклицательным знаком 
В зависимости от характера предупреждения он сопровождается словами ВНИМАНИЕ или ОСТОРОЖНО.
Идентификационный (каталожный) номер
Номер партии
1 Температурные условия хранения. Указываются верхний и нижний пределы.
Этим символом обозначается количество исследований.
Дата окончания срока годности.
Общие замечания
• ДНК-эонды компании M elaSystem s предполагают использование на 1в«тогенетичвС1(их препаратах с фиксатором Карнуа и 
долкны применяться в соответствии с лабораторной практикой и примггыми нормами учреждения.
• Подготовка препарата должна соответствовать стандартным цитогенвтичежии процедурам.
Стабильность гибридизованных препаратов:
• препараты могут быть проанализированы в течение не менее шести кюсяцев после гибридизации FISH , при условии 
хранения в темноте при -20*С (iS ‘C ).
Дополнительные процедурные рекомендации
• Настоятельно рекомендуется использовать калиброванный термометр для измерения температур растворов, водяной 
бани и инкубаторов, так как данные температуры критичны для оптимального результата работы зонда.
• Аккуратно проверяйте температуру предварительно нагретых растворое.
• Аккуратно проверяйте pH всех рветворое. Значение долхено бьль в диапазоне 7.0 - 7.5 при комнатной температуре.
« Ж есткость отмывочных растворов, Ph и температура являются наиболее важными параметрами, поскольку низкая
жесткость может вызвать неслецифичное связывание зонда, а слишком высокая привести к отсутствию сигнала.
• Перед открытием: Кратковременно взболтать, чтобы поднять смесь зонда со дна пробирки.
Стр. 6 из 8
27 из 30
Стр. 3 из 8


--- стр. 32 ---
протокол FISH для ДНК-зондов MetaSystems
Подготовка препарата
1. Использовать сги(^ально подготовле»* 1ые стекла в зависимости от исследуемого иатериала.
2. Нанести 10 мкл зонда
3. Накрыть покровным стеклом 22 X 22 им>
4. Заклеить края покровного стекла реэ 1ыовьм клеем.
Ожидаемые результаты
Нормальная мужская клетка;
Один зеленый (1G ), один 
оранжевый (1 0 ) и два голубых (2В) 
сигнала.
Денатурация
1. Денатурируйте образец и зонд однооромс ч ю, путем нагрева препарата на натрваатальной панели при 75*С (±1*С) 
в течение 2 мин
Гибридизация
1. Инкубируйте во влажной камере при 37*С ( t l’C ) в течение ночи.
Отмывка после гибридизации
Н еобходм --*  Г Г ''Х Т Г
.  о 4Х SSC  (pH 7 0 -  7 5) При 72*С (± 1*С)
• 2Х SS C , 0.05%  Tween-20 (pH 7.0) при комнатной температуре
Абберантная мужская клетка 
Трисомия 16 
Один зеленый (1G ). один 
оранжевый (1 0 ) и три голубых (ЗВ) 
сигнала.
Процедура
Аккуратно удалить покровное стекло и следы клея.
Отмыть стекло в 0.4Х SSC  (pH 7.0) при 72°С (±1°С) 2 мин.
Высушить препарат и отмыть в 2Х SSC . 0.05%  Tween20 (pH 7.0) При комнатной температуре 30 секунд.
Для предотвращения образования кристаллов, кратковременно промыть в дистиллированной вода, и оставить на 
воздухе до высыхания.
Абберантная мужская клетка; 
Синдром Клайнфельтера 47. XXY 
Два зеленых (2G ). один оранжевый 
(1 0 ) и два голубых (2В) сигнала
Контрастное окрашивание
Необходимые растворы:
• Среда предохраняющая препараты от выцветания OAPI/antifade (например M etaSystems OAPI/antifade, D-0902-S00-DA)
Нормальная женская клетка: 
Два зеленых (2G ) и два голубых 
(2В) сигнала.
Абберантная женская клетка 
Трисомия 16
Два зелаиых (2G ) и три голубых 
(ЗВ) сигнала.
Абберантная женская клетка: 
Синдром Турнвра45, ХО 
Один зеленый (1G ) и два голубых 
(2В) си тала.
Процедура
1. Нанести 10 мкл OAPI/antifade и накрыть покровным стеклом 24 х 32 мм*.
2. Дать впитаться DAPi/antifade В течение lOmin.
3. Провести анализ препарата под микроскопом.
4. Хранить стекла при -20’ С (± 5'С). Сигналы пкбридиэации будут удовлетворительными в течение как минимум шести 
месяцев
Показаны наиболее часто астречамщиеся сочетания ситалов (90-95% случаев).
Так как флуорео^ентный ДНК-зонд идентифицирует фрагмент заданной >фомосомы, а в случаях сложных или редких 
генетических нарушений (перестроек), заданные фрагменты могут риногократно повторяться (увеличиваться в размере и 
количестве) или наоборот -  уменьшаться (исчезать), при исследовании могут наблюдаться комбинации ситмалое отличные от 
приведенных выше
А