Набор реагентов для качественного и количественного определения ДНК Trichomonas vaginalis методом ПЦР с детекцией в режиме "реального времени" (Amplitech TV) — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 2 --- 0 АМПЛИТЕК « I Amplitech TV Набор реагентов для качественного и количественного определения ДНК Trichomonas vaginalis методом ПЦР с детекцией в режиме «реального времени» (Amplitech TV) ИНСТРУКЦИЯ по ПРИМЕНЕНИЮ 0 IVD REF Р011-0 96 --- стр. 3 --- 4» ВВЕДЕНИЕ....................................................................................................................................3 1 НАЗНАЧЕНИЕ........................................................................................................................4 1.1 Область применения....................................................................................................4 2 СОСТАВ...................................................................................................................................4 3 ПРИНЦИП МЕТОДА.............................................................................................................5 3.1 прослеживаемость значений положительного контроля ПК и .............................5 4 НЕОБХОДИМОЕ ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ....................................................5 5 МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ........................................................................................6 6 ИССЛЕДУЕМЫЙ МАТЕРИАЛ .............................................................................................7 7 ПРОВЕДЕНИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ.....................................................................................9 7.1 Экстракция ДНК..............................................................................................................9 7.2 Подготовка к проведению ПЦР ..................................................................................9 7.3 Проведение ПЦР и детекции.....................................................................................10 8 УЧЁТ И ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ .................................................................11 9 ВОЗМОЖНЫЕ ОШИБКИ................................................................................................... 12 10 КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА.................................................................................................. 13 10.1 Контроли, используемые в процессе исследования ........................................13 10.2 Мониторинг лаборатории на наличие контаминации .......................................13 10.3 Внутренний контроль качества лабораторных исследований .........................13 11 ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА.................................................14 11.1 Предел обнаружения...............................................................................................14 11.2 Диапазон измерения и предел измерения..........................................................14 11.3 Аналитическая специфичность .............................................................................14 11.4 Прецизионность измерения.................................................................................... 15 11.5 Правильность измерения....................................................................................... 15 11.6 Диагностические характеристики..........................................................................16 11.7 Корреляция................................................................................................................ 16 12 УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ. ТРАНСПОРТИРОВАНИЯ И ЭКСПЛУАТАЦИИ НАБОРА ........................................................................................................................................... 16 12.1 Срок годности............................................................................................................16 12.2 Хранение....................................................................................................................17 12.3 Транспортирование.................................................................................................17 12.4 Эксплуатация............................................................................................................17 13 ПЕРЕЧЕНЬ СОКРАЩЕНИЙ...........................................................................................17 14 БИБЛИОГРАФИЯ............................................................................................................. 17 15 ПЕРЕЧЕНЬ ПРИМЕНЯЕМЫХ НАЦИОНАЛЬНЫХ СТАНДАРТОВ.........................18 16 ГАРАНТИИ ПРОИЗВОДИТЕЛЯ....................................................................................19 17 ТЕХНИЧЕСКАЯ ПОДДЕРЖКА......................................................................................19 18 СИМВОЛЫ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ В ДОКУМЕНТАЦИИ ПРОИЗВОДИТЕЛЯ ..........19 СОДЕРЖАНИЕ Атр111есЬ ТУ Инструкция в.26.08.22 --- стр. 4 --- é $ 1. Настоящая инструкция по применению версии 26.08.22 распространяется на медицинское изделие «Набор реагентов для качественного и количественного определения ДНК Trichomonas vaginalis методом ПЦР с детекцией в режиме «реального времени» (Amplitech TV)» по ТУ 21.20.23-017-19926214-2022 (далее - набор). Краткое наименование набора: Amplitech TV. Набор следует применять в соответствии с действующей версией инструкции по применению. Для удобства работы в лаборатории допускается использовать действующую версию краткого руководства по применению набора. 2. Микроорганизм Trichomonas vaginalis является возбудителем инфекционно воспалительных заболеваний урогенитального тракта. Для данного микроорганизма отсутствуют специфические клинические признаки, на основании которых можно установить этиологию заболевания. ПЦР в реальном времени обладает высокой чувствительностью, специфичностью и объективностью полученных результатов [1]. Набор реагентов «Amplitech TV» позволяет выявлять и количественно измерять ДНК Trichomonas vaginalis. ВВЕДЕНИЕ Amplitech TV Инструкция в.26.08.22 --- стр. 5 --- м Набор предназначен для качественного и количественного определения ДНК Trichomonas vaginalis в биологическом материале человека методом ПЦР с гибридизационно-флуоресцентной детекцией в режиме «реального времени». Материалом для проведения ПЦР-исследования служат образцы ДНК, экстрагированной из следующих видов биологического материала: • мазки со слизистой оболочки влагалища; • соскобы эпителия со слизистой оболочки цервикального канала, уретры; • секрет предстательной железы, моча (осадок первой порции утренней мочи). 1.1 Область применения Набор предназначен для применения в клинической лабораторной диагностике для исследования биологического материала, полученного от лиц с подозрением на наличие инфекций, передаваемых половым путём. Отрицательные результаты исследования с помощью набора не исключают возможность инфицирования Т. vaginalis и не должны использоваться в качестве единственной основы для принятия решения о лечении пациента. Отрицательные результаты исследования должны сочетаться с клиническими наблюдениями, историей болезни и эпидемиологической информацией. Набор может применяться в клинико-диагностических лабораториях. 1 НАЗНАЧЕНИЕ 2 СОСТАВ Состав набора^ указан в таблице 1. Состав набора Таблица 1 Компонент Номинальный объём, мл Кол-во Внешний вид Смесь-1 ТУ (Буферный раствор со специфическими праймерами, флуоресцентно-мечеными зондами и дНТФ) 0,48 1 пробирка Прозрачная жидкость от бесцветного до светло-лилового цвета Смесь-2 в (Буферный раствор с сульфатом магния, термостабильной ДНК-полимеразой) 0,48 1 пробирка Прозрачная бесцветная жидкость вки (Раствор, содержащий генно-инженерную конструкцию с ДНК внутреннего контроля) 0,96 1 пробирка Прозрачная бесцветная жидкость ОК (Буферный раствор) 0.8 1 пробирка Прозрачная бесцветная жидкость ПК и (Раствор, содержащий генно-инженерную конструкцию с фрагментом ДНК 7. vaQinalis) 0.8 1 пробирка Прозрачная бесцветная жидкость В бумажном виде и электронном Инструкция по применению 1 шт. виде по адресу; http://www.amplitech.ru/resources/ Краткое руководство - 1 шт. В бумажном виде Паспорт - 1 шт. В электронном виде^ по адресу: http://www.amplitech.ru/quality/ ^ Набор упакован в полиэтиленовый пакет с застёжкой Zip-Lock. 2 В случае отсутствия доступа к Интернету обратитесь в службу технической поддержки по телефону (495) 374-13-46 для запроса о предоставлении бумажной версии паспорта. Amplitech TV Инструкция В.26.08.22 --- стр. 6 --- « I J Набор рассчитан на проведение исследования 96 образцов, включая контроли. 3 ПРИНЦИП МЕТОДА Исследование с помощью набора проводится методом ПЦР с гибридизационно- флуоресцентной детекцией продуктов амплификации в режиме «реального времени». Детекция продуктов ПЦР и раздельное выявление ДНК Т. vaginalis и внутреннего контроля (ВК) обеспечивается применением в реакционной смеси для ПЦР флуоресцентно-меченых олигонуклеотидов, сигналы от которых регистрируются по различным каналам флуоресцентной детекции (см. таблицу 2). Таблица 2 Каналы детекции мишеней Канал детекции сигнала от Фл уошлЬора Мишень Область амплификации R6G^ ДНК Т. vaginalis G3 hypothetical protein gene Су5 ДНКВК Искусственно синтезированная последовательность Линейная зависимость между исходной концентрацией ДНК-мишени в исследуемом образце и циклом начала экспоненциального увеличения флуоресцентного сигнала (порогового цикла, Ct) позволяет определять концентрацию ДНК Т. vaginalis в образце относительно положительного контроля ПК U (образца с известной концентрацией ДНК-мишени), который проходит этап экстракции ДНК и ПЦР одновременно с исследуемыми образцами. Определение концентрации ДНК производится в соответствии с заданными значениями концентраций ПК U и полученными значениями Ct для ПК U и исследуемых образцов. 3.1 Прослеживаемость значений положительного контроля ПК U Концентрация клонированного фрагмента ДНК Т. vaginalis в ПК U составляет 5 1 д ± 0,51 д копий/мл. Концентрация определяется с помощью установленной производителем методики выполнения измерений на основе метода лимитирующих разведений [2, 3]. 4 НЕОБХОДИМОЕ ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ Для работы с набором требуются следующие оборудование и материалы: • ПЦР-бокс; • центрифуга-вортекс (РУ № ФС № 2005/518); • дозаторы переменного объёма, механические или электронные, с возможностью дозирования от 5 до 200 мкл (РУ № ФСР 2009/05681); • программируемый амплификатор с системой детекции флуоресцентного сигнала в режиме «реального времени» (ДТпрайм (ООО «НПО ДНК-Технология»; РУ № ФСЗ 2011/10229), CFX96 (Bio-Rad Laboratories, Inc.; РУ № ФСЗ 2008/03399), Applied 2 Сигнал от флуорофора R6G регистрируется по каналу детекции сигнала от аналогичных флуорофоров Hex и Joe, Amplitech TV Инструкция в.26.08.22 --- стр. 14 --- 10 КОНТРОЛЬКАЧЕСТВА 10.1 Контроли, используемые в процессе исследования Результаты исследования контролей должны соответствовать критериям оценки, указанным в разделе 8. 10.1.1 Отрицательный и положительный контроли Каждая группа экстрагируемых образцов должна включать контрольные образцы: • ОКдля выявления контаминации в процессе проведения исследования; • ПК и для контроля корректного прохождения исследования, а также для количественного определения ДНК Т. vaginalis в биологическом материале человека. 10.1.2 Внутренний контроль Для контроля качества экстракции ДНК и оценки влияния ингибиторов на результаты амплификации используется экзогенный ВК, который добавляется на этапе экстракции ДНК в каждый исследуемый образец и контроли. Отсутствие результатов амплификации для ВК и одновременно для выявляемого микроорганизма свидетельствует о присутствии ингибиторов ПЦР в образце или некорректном проведении экстракции ДНК. 10.2 Мониторинг лаборатории на наличие контаминации Для выявления возможной контаминации лаборатории продуктами амплификации, исследуемыми и контрольными образцами рекомендуется раз в месяц исследовать смывы с рабочих поверхностей лабораторной мебели, оборудования и поверхностей помещений согласно процедуре, указанной в МУ 1.3.2569-09. При обнаружении контаминации необходимо провести мероприятия по её устранению согласно указаниям, описанным в МУ 1.3.2569-09. 10.3 Внутренний контроль качества лабораторных исследований Рекомендуется проводить контроль качества выполнения исследований с использованием панелей контрольных образцов, предназначенных для проведения внутреннего и внешнего контролей качества лабораторных исследований по обнаружению и количественному определению ДНК Т. vaginalis, либо сравнительным исследованием с использованием зарегистрированных в РФ наборов реагентов для качественного и количественного определения ДНК Т. vaginalis в биологическом материале методом ПЦР. Amplitech TV Инструкция В.26.08.22 13 --- стр. 15 --- 11.1 Предел обнаружения Предел обнаружения набора составляет 0,75 ГЭ ДНК Т. vaginalis в 1 мл исследуемого материала (95 % ДИ: 0,47-1,1 ГЭ/мл) для всех заявленных видов биологического материала. 11.2 Диапазон измерения и предел измерения Диапазон измерения составляет от 1,6 до 1000000 ГЭ ДНК Т. vaginalis в 1 мл исследуемого материала для всех заявленных видов биологического материала. Предел измерения набора совпадает с нижней границей диапазона измерения набора. 11.3 Аналитическая специфичность Аналитическая специфичность набора оценивалась при тестировании микроорганизмов, указанных в таблице 11, геномной ДНК человека, а также ДНК Т. vaginalis. ДНК микроорганизмов в концентрации не менее 1-10® копий/мл и геномную ДНК человека в концентрации 1 мкг/мл вносили в образцы биологического материала, не содержащие ДНК Т. vaginalis. По итогам тестирования ложноположительных результатов выявлено не было. Таблица 11 Микроорганизмы, используемые для оценки аналитической специфичности 11 ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА^*» Наименование Наименование Наименование Candida albicans Mycoplasma hominis Treponema pallidum Chlamydia trachomatis Neisseria gonorrhoeae Ureaplasma parvum Gardnerella vaginalis Neisseria flava Ureaplasma urealyticum Enterococcus faecium Staphylococcus aureus CMV Escherichia coli Staphylococcus epidermidis HSV 1 типа Lactobacillus spp. Staphylococcus saprophyticus HSV 2 типа Mycoplasma genitalium Toxoplasma gondii HPV 11.3.1 Потенциально интерферирующие вещества Потенциально интерферирующие вещества (ингибиторы ПЦР) и их максимальные концентрации в образце, для которых оценивалось их ингибирующее влияние на ПЦР, перечислены в таблице 12. Заявленные аналитические характеристики набора, кроме аналитической специфичности, проверены с использованием стандартного образца предприятия, содержащего вектор со специфической последовательностью ДНК Т. vaginalis. Amplitech TV Инструкция В.26.08.22 14 --- стр. 16 --- Таблица 12 Потенциально интерферирующие вещества Исследуемый материал Интерферент Активный компонент Тип интерфе- рента Концентрация вещества в образце Обоснование исследованной концентрации Мазки со слизистой оболочки влагалища, соскобы эпителия со слизистых оболочек цервикального канала, уретры Цельная кровь - Эндогенная 5 % V/V Муцин Очищенный белок субстанция 150 м кг/мл Объём в образце в условиях Моча (осадок Альбумин Белок Эндогенная субстанция 500 мг/л «наихудшего случая» первой порции) Азитромицин Азитромицин Антибиотик- азалид 1 мг/мл Секрет предстательной железы Фруктоза - Эндогенная субстанция 10 мг/мл Ибупрофен Ибупрофен НПВС 300 м кг/мл Наличие возможного ингибирующего эффекта оценивалось путём проведения процедуры экстракции из модельных образцов биологического материала, в которые добавлялись потенциальные интерференты в концентрациях согласно таблице 12 и стандартный образец предприятия, содержащий ДНК Т. vaginalis в концентрации 2000 копий/мл. Далее с экстрагированными образцами проводили ПЦР с детекцией в режиме «реального времени» с использованием набора реагентов «Amplitech TV». В результате испытаний подтверждено, что влияние исследованных потенциально интерферирующих веществ на ПЦР, проводимую с использованием набора «Amplitech TV», отсутствует. 11.4 Прецизионность измерения Коэффициент вариации повторяемости CVn значений концентрации, характеризующий внутрисерийную повторяемость измерений с использованием набора, не превышает 5 %. Коэффициент вариации воспроизводимости CV b значений концентрации, характеризующий межсерийную воспроизводимость измерений с использованием набора, не превышает 10 %. 11.5 Правильность измерения Систематическая погрешность, характеризующая правильность измерения с использованием набора, не превышает 15 %. Экстракция проводилась с использованием набора реагентов «ДНК-100» (ООО «Амплитек»). Атр111есЬТ\/ Инструкция в.26.08.22 15 --- стр. 17 --- 11.6 Диагностические характеристики Значения диагностической чувствительности (ДЧ) и диагностической специфичности (ДС) набора с доверительной вероятностью 95 % указаны в таблице 13. Таблица 13 Диагностические характеристики Количество Исследуемый материал образцов дч% дс,% положит. отрицат. Мазки со слизистой оболочки влагалища 101 105 9 7 ,1 -1 0 0 9 7 ,2 -1 0 0 Соскобы эпителия со слизистой оболочки цервикального канала 100 107 9 7 ,0 -1 0 0 9 7 ,2 -1 0 0 Соскобы эпителия со слизистой оболочки уретры 102 100 9 7 .1 -1 0 0 9 7 ,0 -1 0 0 Моча (осадок первой порции) 100 101 9 7 ,0 -1 0 0 97,1 -1 0 0 Секрет предстательной железы 14 60 8 0 ,7 -1 0 0 95,1 -100 11.7 Корреляция Корреляция экспериментальных значений концентраций, полученных при исследовании образцов биологического материала с использованием набора реагентов «Amplitech ТУ» и референтного набора реагентов, представлена на рисунке 1. 7 ,0 п Г П Фг ЛXI - X фо.ф<9'фо_ 0 ,0 5,0 3.0 2.0 У ) у-0,»54х«0,Э199 Н>>0Д95б Ш г ■ 1.0 2,0 3.0 4.0 5.0 АтрИ1есЬ ТУ, lg ГЭ 0.0 7 » 12 УСЛОВИЯ НАБОРА Рисунок 1 ХРАНЕНИЯ, ТРАНСПОРТИРОВАНИЯ И ЭКСПЛУАТАЦИИ 12.1 Срок годности Срок годности набора составляет 12 месяцев от даты изготовления. После вскрытия реагенты использовать до истечения срока годности набора. Атр111ес1п ТУ Инструкция В.26.08.22 16 --- стр. 18 --- 12.2 Хранение Набор хранить при температуре от 2 до 8 “С в защищённом от солнечного света месте. Реагенты после вскрытия хранить в тех же условиях, что и реагенты до вскрытия. 12.3 Транспортирование Набор транспортировать при температуре от 2 “С до 8 “С всеми видами крытых транспортных средств в термоконтейнерах с хладоэлементами или в авторефрижераторах. 12.4 Эксплуатация Реагенты, входящие в состав набора, готовы к использованию. Повторное применение использованных для исследования реагентов не допускается. Исследование образцов с использованием набора должно проводиться при температуре от 18 °С до 25 °С и относительной влажности воздуха от 25 % до 75 %. 13 ПЕРЕЧЕНЬ СОКРАЩЕНИЙ В настоящей инструкции применены следующие сокращения; ct - cycle threshold (пороговый цикл) BK - внутренний контроль ДИ - доверительный интервал ДНК - дезоксирибонуклеиновая кислота ДНКаза - дезоксирибонуклеаза OK - отрицательный контроль ПК - положительный контроль ПЦР - полимеразная цепная реакция 14 БИБЛИОГРАФИЯ 1. Гущин А.Е., Рыжих П.Г., Савочкина Ю.А., Шипулина О.Ю., Шипулин ГА. Изучение распространенности возбудителей ИППП (С. trachomatis, N. gononhoeae, М. genitalium, Т. vaginalis) с помощью ПЦР в реальном времени в формате «МУЛЬТИПРАЙМ» И Клиническая дерматология и венерология. - 2011. - № 9(4). - С. 90-94. 2. Taswell С. Limiting dilution assays for the determination of immunocompetent cell frequencies // J. Immunology. - 1981. - Vol. 126. - P. 1614-1619. 3. Allen G. Rodrigo, Paul C. Goracke, Kiarash Rowhanian, James I. Mullins. Quantitation of target molecules from polymerase chain reaction-based limiting dilution assays //AIDS research and human retroviruses. - 1997. - Vol. 13 (9). - P. 737-742. Amplitech TV Инструкция B.26.08.22 17 --- стр. 19 --- ГОСТ Р 51088-2013 Медицинские изделия для диагностики ин витро. Реагенты, наборы реагентов, тест-системы, контрольные материалы, питательные среды. Требования к изделиям и поддерживающей документации ГОСТ Р 51352-2013 Медицинские изделия для диагностики ин витро. Методы испытаний ГОСТ Р ИСО 18113-2-2015 Медицинские изделия для диагностики in vitro. Информация, предоставляемая изготовителем (маркировка). Часть 2. Реагенты для диагностики in vitro для профессионального применения ГОСТ Р ИСО 23640-2015 Изделия медицинские для диагностики in vitro. Оценка стабильности реагентов для диагностики in vitro ГОСТ Р ИСО 15223-1-2020 Изделия медицинские. Символы, применяемые при маркировании на медицинских изделиях, этикетках и в сопроводительной документации. Часть 1. Основные требования 15 ПЕРЕЧЕНЬ ПРИМЕНЯЕМЫХ НАЦИОНАЛЬНЫХ СТАНДАРТОВ Amplitech TV Инструкция в.26.08.22 18 --- стр. 20 --- 16 ГАРАНТИИ ПРОИЗВОДИТЕЛЯ Производитель гарантирует соответствие характеристик набора требованиям, указанным в технической и эксплуатационной документации, в течение указанного срока годности при соблюдении условий его транспортирования, хранения и применения. Рекламации на качество набора направлять в адрес производителя: ООО «Амплитек», 109235, Москва, ул. 1-я Курьяновская, д. 34, стр. 8, этаж 1 пом. II ком. 42, тел. (495) 374-13-46, e-mail; support@amplitech.ru . Сообщения о неблагоприятных событиях (инцидентах), возникших при работе с набором и не указанных в данной инструкции, следует направлять производителю по указанному выше адресу и в уполномоченный регуляторный орган согласно действующему законодательству. 17 ТЕХНИЧЕСКАЯ ПОДДЕРЖКА Консультацию по вопросам по работе с набором и его качеству можно получить по контактам, указанным на официальном сайте производителя; www.amplitech.ru . 18 СИМВОЛЫ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ В ДОКУМЕНТАЦИИ ПРОИЗВОДИТЕЛЯ у Изготовитель |ПЕр] Номер по каталогу IVD т W Дата изготовления Медицинское изделие для диагностики in vitro Обратитесь к инструкции по применению Содержимого достаточно для проведения п тестов LOT Код серии Использовать до Предел температуры Не допускать воздействия солнечного света H i Общество с ограниченной ответственностью «Амплитек» (ООО «Амплитек»), Россия, 109235, Москва, ул. 1-я Курьяновская, д. 34, стр. 8, этаж 1 пом. II ком. 42 тел. (495) 374-13-46, www.amplltech.ru , е-та1Г. support@amplitech.ru Amplitech TV Инструкция в.26.08.22 19 --- стр. 21 --- Лист регистрации изменений Изм. Номера страниц Всего страниц в документе Номер документа Подпись Датаизменён ных заменён ных новых аннулиро ванных — — . — — Атр1ИесИ 1У Инструкция 20