Набор реагентов для иммуноферментного определения интерферона гамма (IFγ) в сыворотке (плазме) крови человека "IFγ-ИФА" — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 1 ---
Исполн ООО «ХЕМА»
С. Кострикина
2022 г.
МЛ.
Инструкции по приготовлению калибровочных проб и контрольной сыворотки
медицинского изделия
«Набор реагентов для иммуноферментного определения интерферона гамма (1Ру)
в сыворотке (плазме) крови человека «1Ру-ИФА»»
--- стр. 2 ---
г ООО "ХЁМА"
/ Инструкция
/ Порядок приготовления калибровочных проб для набора реагентов
/7 «1Ку-ИФА»
Стр. 1 из 4
Дата введения
08.2020
Действителен до
08.2024 СОПЭ-КП-255-2020 Копия №
Вводится впервые Версия №1
ЬНазначение.
Настоящая инструкция определяет порядок приготовления калибровочных проб (С1, С2, СЗ,
С4, С5), входящих в состав Набора реагентов для иммуноферментного определения интерферона
гамма (1Ру) в сыворотке (плазме) крови человека «1Ру-ИФА», и предназначена для ОТК предприятия-
изготовителя.
2. Оборудование.
№ п/п Наименование оборудования
1. Холодильник бытовой
2. Mopoзильник“SO-LOW”, США, объем 250 л, температура -10-18®С, мощность 1,6 кВт
3. Баня водяная
4. Весы, ХЕ-410 инструмент США, точностью 0,001 г
5. Установка вакуумной фильтрации
6. Вошер автоматический PW-40, Sanofi Diagnostics Pasteur
7. Многоканальный спектрофотометр PR 2100.Sanofi Diagnostics Pasteur, Франция, мощность
100 Вт, длина волны 400-700 нМ точность 0,05% или спектрофотометр вертикального
сканирования для измерения оптической плотности в лунках планшета при 450 нм и/или в
двухволновом режиме при основной длине волны 450 нм и длине волны сравнения в
диапазоне 620-650 нм ф. TECAN», Австрия
8. Колба, V=500 мл
9. Колба, V=1000 мл
10. Флаконы 250-500мл
11. Дозаторный насос «Masterflex», США, 7526-05
12. Дозаторы со сменными наконечниками, позволяющие дозировать объемы жидкости 5,0-250
мкл, аттестованные по значению средней дозы и сходимости результатов пипетирования
(погрешность не более 3,0%)
13. Термостат, поддерживающий температуру +37±2°С
14. Цилиндр мерный 2-го класса точности вместимостью 1000 мл
15. Бумага фильтровальная лабораторная
3« Сырье и материалы.
№
п/п Наименование НД / фирма производитель
(для импорт, сырья)
Квалификация,
каталожный №
Основное сырье
1. Трис-буфер ООО «ХЕМА», Россия кат. № С255
2. Сыворотка крови чело
века с высоким содержа-
ДЦ ООО «ХЕМА», Россия
Человеческая сыворотка, после
Взятие и обработка крови
проведена с соблюдением
Составил (изменил) Согласовали Утвердил
Долж.: Руководитель О ТК Долж.: Н ачальник отдела производ
ства реагентов и контрольны х
препаоатов
Долж: И сполнительны й
директор
ФИО; И ванова А.В.
. f
ФИО: Ц уканов С.В. ФИО: К острикина
i l m 4 f
Подпись:
Д ата: 03.08.2020 1 Д ата: 03.08.^№О Д ата: 03.08.2020 1
--- стр. 3 ---
ем 1Ру^ проведения значимых клиниче
ских исследований.
Информированное согласие паци
ентов не требовалось ввиду осо
бенностей получения биологиче
ского материала.
стандартных лабораторных
процедур, протестирована на
отсутствие антител к ВИЧ 1,2,
антигена р24, вирусу гепатита С
и HBsAg. Транспортировка и
хранение в закрытых пробирках
без доступа воздуха при
температуре +2-8®С. в течение
не более 12 часов.
(Фирма Sigma-Aldrich, США) Характеристики представлены в
сертификате безопасности про
изводителя.
Консервант
(бензоат натрия)
* Сведения о материале человеческого происхождения.
Выбор источников (доноров):
Кровь человека, содержащая 1Ру, полученная от пациентов ДЦ ООО «ХЕМА», Россия после
проведения значимых клинических исследований. Информированное согласие пациентов не требова
лось ввиду особенностей получения клинического материала.
Взятие проб:
В качестве образца используется сыворотка крови человека. Сбор образцов крови проводить в
соответствии с текущей практикой методом венепункции, в пробирки без антикоагулянта, соблюдая
стандартные лабораторные процедуры. Использовать неразведённую сыворотку крови.
Взятие и обработка крови проведена с соблюдением стандартных лабораторных
процедур, протестирована на отсутствие антител к ВИЧ 1,2, вируса гепатита С и антигена вируса
гепатита В (HBsAg).
Контроль производится тестированием Наборами реагентов: Набор реагентов для
иммуноферментного выявления антител к вирусу иммунодефицита человека I (0), II типов {ВИЧ I (0),
II} и антигена р24 ВИЧ I в сыворотке (плазме) крови «антиВИЧ 1(0), И/р24-ИФА» по ТУ 21.20.23-
1121-18619450-2017, ООО «ХЕМА»; Набор реагентов для иммуноферментного выявления антител к
вирусу гепатита С (ВГС) в сыворотке (плазме) крови «антиВГС-ИФА» по
ТУ 9398-110-18619450-2011, ООО «ХЕМА»; Набор реагентов для иммуноферментного выявления
поверхностного антигена вируса гепатита В (HBsAg) в сыворотке (плазме) крови «HBsAg-ИФA» по
ТУ 21.20.23-0092-18619450-2020, ООО «ХЕМА».
Сыворотка получена центрифугированием при комнатной температуре из полностью
свернувшейся после сбора крови согласно правилам проведения преаналитического этапа,
утвержденным для лаборатории.
Хранение и обращение с материалом:
Транспортировка и хранение осуществлялась в закрытых пробирках без доступа
воздуха при температуре +2-8®С в течение не более 12 часов.
Допускается однократное размораживание/замораживание образцов при температуре -20°С не
более 2 месяцев.
4. Процедура.
4.1 Подготовку к работе осуществлять в соответствии с СОП-ВП-11-01, СОП-ВП-11-07.
Правила подготовки персонала для работы в производственных помещениях.
4.1.1. Сыворотку, с высоким содержанием 1Ру (более 500 пг/мл) разморозить при комнатной
температуре (20+5)°С. Работы проводить в соответствии с СОП-ПО-15-14.
Составил (изменил) Согласовали Утвердил
Руководитель ОТК Начальник отдела производства реагентов
и контрольных препаратов
Исполнительный директор
Иванова А.В. Чуканов С.В. Кострикина Е.С,
5
--- стр. 4 ---
¥. Приготовление 1Ру-концентрата.
’ыворотку, с высоким содержанием 1Ру (более 500 пг/мл) развести, используя нормальную
)ринированную термообработанную сыворотку для получения раствора с концентрацией - 250
Тщательно перемешать.
Приготовленный 1Ру-концентрат (250 пг/мл) использовать для приготовления калибровочных
^Лроб С2.5,
Занести данные в маршрутную карту.
4.3. Приготовление калибровочных проб (С 1.5).
Рассчитать количество 1Ру-концентрата и трис-буфера, необходимое для того, чтобы получить
калибровочные пробы с концентрацией 1Ру;
С[ - о пг/мл;
С2- 10 пг/мл;
Сз - 20 пг/мл;
С4- 100 пг/мл;
С5 - 250 пг/мл.
Согласно выбранному разведению и заданному объему сделать расчеты и занести их в
маршрутную карту.
Отмерить рассчитанное количество 1Ру-концентрата и добавить к трис-буферу. Тщательно и
осторожно перемешать на магнитной мешалке. Отобрать пробы для контроля.
Занести данные в маршрутную карту.
4.4. Контроль в ИФА»
Калибровочные пробы тестируются в системе «1Ру-ИФА», где в качестве калибраторов
используются сыворотки Стандартного Образца Предприятия 8255-20.
Схема постановки:
I 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
cono cono cono Ci Ci Ci Ci Ci Ci Ci Ci Ci
con 10 con 10 con 10 C2 C2 C2 C2 C2 C2 C2 C2 C2
con 20 con 20 con 20 Сз Сз Сз Сз Сз Сз Сз Сз Сз
con 100 con 100 con 100 C4 C4 C4 C4 C4 C4 C4 C4 C4
con 250 con 250con 250 Cs C5 Cs C5 C5 Cs Cs Cs Cs
А
В
С
D
Е
F
G
Н
СОП о - СОП 250 - сыворотки Стандартного Образца Предприятия (СОП)-255-20;
С1 -5 - калибровочные пробы.
Строят в линейных координатах калибровочный график зависимости средних
арифметических значений оптической плотности от концентрации IFy в пробах СОП-255-20. Для
этого по точкам, ординатами которых являются полученные в ИФА средние значения ОП СОП, а
абсциссами - концентрации IFy в этих пробах, проводится прямая линия. При использовании для
расчетов концентраций компьютерного или встроенного в спектрофотометр программного
обеспечения в настройках выбрать метод, соответствующий кусочно-линейной аппроксимации.
По полученной калибровочной кривой определяют концентрации приготовленных С1.5,
которые будут указаны на этикетках.
Составил (изменил) Согласовали Утвердил
Руководитель ОТК Начальник отдела производства реагентов
и контрольных препаратов
Исполнительный директор
Иванова А.В. Чуканов С.В. Кострикина Е.С.
--- стр. 5 ---
^ Фильтрация качибровочных проб.
Фильтрацию проводить согласно СОП-ВП-11-06 (Порядок проведения стерилизующей
(грации).
Собрать установку для фильтрации. Профильтровать сыворотку через фильтры с размером пор
^0,22 мкм. Возможна постадийная фильтрация 1) префильтр 2) с1 пор= 0,45 мкм 3) с 1 пор== 0,22 мкм.
Занести данные в маршрутную карту.
4.6. Розлив калибровочных проб.
Разливают с помощью дозирующего насоса во флаконы пластиковые с крышкой. Доза розлива
калибровочных проб С1 - 5 - 1,0 мл.
Точность дозировки контролируется с помощью автоматических пипеток не менее 3 раз в
течение розлива. Погрешность разлива: ±0,02 мл.
Каждый флакон плотно закрутить крышкой и сложить в маркированный контейнер.
Работу с отходами проводить в соответствии с СОП-ТБ-11-09.
Занести данные в маршрутную карту.
Хранить готовые сыворотки до фасовки при температуре 2-8®С в течение 1 мес.
4.7. Лиофилизированная сушка.
Флаконы не плотно закрыть резиновой пробкой и заморозить при температуре -70®С в течение
7 часов.
Поместить флаконы в лиофильную сушку и сушить в течение 2 суток.
Флаконы за вальцевать или закрыть завинчивающейся крышкой.
4.8. Маркировка.
На флакон наклеивают этикетку:
«IFt-ИФА» |REF|C2S$Z
КАЛИБРОВОЧНАЯ ПРОБА
ICAlI I I пг/мя
ркзаести • 1,0 нд дистнлднровднной
0О ДЫ
а_______ [1от1_____
■f+2-8*cf^
5. Документация.
Документирование процесса осуществляется в Маршрутной карте ЗФ01-ПО-11-74.
6. Ссылки:
СОП-ВП-11-01. правила подготовки производственных помещении.
СОП-ВП-11-07. Правила подготовки персонала для работы в производственных помещениях.
СОП-ТБ-11-09. Инструкция по охране труда с опасными отходами производства.
СОП-ВП-11-06 Порядок проведения стерилизующей фильтрации.
СОП-ПО-15-14.Порядок работы с потенциально инфицированным материалом.
1. Распределение данной инструкции:
Оригинал ООК
Копия 1 НПО «ОПР»
Составил (изменил) Согласовали Утвердил
Руководитель ОТК Начальник отдела производства реагентов
и контрольных препаратов
Исполнительный директор
Иванова А.В. Чуканов С.В. Кострикина Е.С.
--- стр. 6 ---
^ ООО "ХЕМА"
/ Инструкция
/Порядок приготовления контрольной сыворотки для набора реагентов
/ «IFy-ИФА»
Стр. 1 из 4
/ Дата введения
08.2020
Действителен до СОПЭ-КС-255-2020 Копия №
•ч
Вводится впервые Версия №1
1. Назначение.
Настоящая инструкция определяет порядок приготовления контрольной сыворотки для Набора
реагентов для иммуноферментного определения интерферона гамма (1Ру) в сыворотке (плазме) крови
человека «1Ру-ИФА» и предназначена для ОТК предприятия-изготовителя.
2. Оборудование.
№
п/п
Наименование оборудования
1. Холодильник бытовой
2. Морозильник “SO-LOW” США, объем 250 л, температура -10-18°С, мощность 1,6 кВт
3. Баня водяная
4. Весы, ХЕ-410 инструмент США, точностью 0,001 г
5. Установка вакуумной фильтрации
6. Вошер автоматический PW-40. Sanofi Diagnostics Pasteur
7. Многоканальный спектрофотометр PR 2100.Sanofi Diagnostics Pasteur, Франция, мощность
ЮОВт, длина волны 400-700 нМ точность 0,05% или спектрофотометр вертикального
сканирования для измерения оптической плотности в лунках планшета при 450 нм и/или в
двухволновом режиме при основной длине волны 450 нм и длине волны сравнения в
диапазоне 620-650 нм ф. TECAN», Австрия.
8. Колба, V=500 мл
9. Колба, V=1000 мл
10. Флаконы 250-500 мл
11. Дозаторный насос «Masterflex», США, 7526-05
12. Дозаторы со сменными наконечниками, позволяющие отбирать объемы жидкости 0,5*250
мкл, аттестованные по значению средней дозы и сходимости результатов пипетирования
(погрешность не более 3,0%)
13. Цилиндр мерный 2-го класса точности вместимостью 1000 мл
14. Бумага фильтровальная лабораторная
3 Сырье и материалы.
№
п/п Сырьевой материал Происхождение Характеристики
Основное сырье
1. Сыворотка крови человека
с содержанием IFy не менее
10 не более 100 пг/мл*
ДЦ ООО «ХЕМА», Россия
Человеческая сьшоротка, после
проведения значимых клиниче
ских исследований.
Информированное согласие
Взятие и обработка крови
проведена с соблюдением
стандартных лабораторных
процедур, протестирована на
отсутствие антител к ВИЧ
Составил (изменил) Согласовали Утвердил
Долж. Руководитель ОТК Долж.: Начальник отдела производства
реагентов и контрольных препаратов
Долж: Исполнительный шрекгор
ФИО Ива|&ва А.В.Л ФИО: Чукано(^.В. ФИО; Кострикуна Е.С. 1 -------
Подпись: Подпись: ^ Подпись:
Дета; 03.0^2020 1 Дата: 03.08.202^ ^ Дата: 03.08.2020 /
f
--- стр. 7 ---
пациентов не требовалось вви
ду особенностей получения
биологического материала.
1,2, антигена р24, вирусу ге
патита С и HBsAg. Транс
портировка и хранение в
закрытых пробирках без
доступа воздуха при
температуре +2-8®С. в тече
ние не более 12 часов.
(Фирма Sigma-Aldrich, США) Характеристики представле
ны в сертификате безопасно
сти производителя.
2 . Консервант
(бензоат натрия)
* Сведения о материале человеческого происхождения.
Выбор источников (доноров):
Кровь человека, содержащая 1Ру, полученная от пациентов ДЦ ООО «ХЕМА», Россия после
проведения значимых клинических исследований. Информированное согласие пациентов не требова
лось ввиду особенностей получения клинического материала.
Взятие проб:
В качестве образца используется сьгеоротка крови человека. Сбор образцов крови проводить в
соответствии с текущей практикой методом венепункции, в пробирки без антикоагулянта, соблюдая
стандартные лабораторные процедуры. Использовать неразведённую сыворотку крови.
Взятие и обработка крови проведена с соблюдением стандартных лабораторных
процедур, протестирована на отсутствие антител к ВИЧ 1,2, вируса гепатита С и антигена вируса
гепатита В (HBsAg).
Контроль производится тестированием Наборами реагентов: Набор реагентов для
иммуноферментного выявления антител к вирусу иммунодефицита человека I (0), II типов {ВИЧ I (0),
II} и антигена р24 ВИЧ I в сыворотке (плазме) крови «антиВИЧ 1(0), П/р24-ИФА» по ТУ 21.20.23-
1121-18619450-2017, ООО «ХЕМА»; Набор реагентов для иммуноферментного выявления антител к
вирусу гепатита С (ВГС) в сыворотке (плазме) крови «антиВГС-ИФА» по
ТУ 9398-110-18619450-2011, ООО «ХЕМА»; Набор реагентов для иммуноферментного выявления
поверхностного антигена вируса гепатита В (HBsAg) в сыворотке (плазме) крови «HBsAg-ИФA» по
ТУ 21.20.23-0092-18619450-2020, ООО «ХЕМА».
Сыворотка получена центрифугированием при комнатной температуре из полностью
свернувшейся после сбора крови согласно правилам проведения преаналитического этапа,
утвержденным для лаборатории.
Хранение и обращение с материалом:
Транспортировка и хранение осуществлялась в закрытых пробирках без доступа
воздуха при температуре +2-8®С в течение не более 12 часов.
Допускается однократное размораживание/замораживание образцов при температуре -20®С не
более 2 месяцев.
4. Процедура.
4.1 Подготовку к работе осуществлять в соответствии с СОП-ВП-11-01, СОП-ВП-11-07.
Правила подготовки персонала для работы в производственных помещениях.
4.1.1. Сыворотку, с известным содержанием 1Ру (не более 100 пг/мл) выдержать при комнатной
температуре (20+5)°С в течение 15 мин. Произвести термообработку сыворотки согласно СОП-ПО-15-
14.
Составил (изменил) Согласовали Утвердил
Руководитель ОТК Начальник отдела производства реагентов
и контрольных препаратов
Исполнительный директор
Иванова А.В. Чуканов С.В. Кострикина Е.С.
--- стр. 8 ---
f .
Приготовление контрольной сыворотки.
термообработанную сыворотку добавить консервант. Рассчитать количество консерванта
холимого для получения 0,001% раствора. Внести рассчитанное количество консерванта в
угообработанную сыворотку.
Занести данные в маршрутную карту.
4.3. Контроль в ИФА.
Контрольная сыворотка тестируется в системе «1Ру-ИФА», в сравнении с эталоном выворотки
Стандартного Образца Предприятия 8255-20.
Схема постановки:
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 И 12
Ci С, СОП 30 СОП 70 Ci КС КС КС КС КС КС КС
Ci С2 СОП 30 СОП 70 С2 КС КС КС КС КС КС КС
Сз Сз СОП 30 СОП 70 Сз КС КС КС КС КС КС КС
С4 С 4 СОП 30 СОП 70 С 4 КС КС КС КС КС КС КС
Cs Cs СОП 30 СОП 70 Cs КС КС КС КС КС КС КС
А
В
С
D
Е
F
Н
СОП 30, СОП 70 - сыворотки Стандартного Образца Предприятия (СОП)-255-20;
С1 -5 - калибровочные пробы;
КС - контрольная сыворотка.
Построить в линейных координатах калибровочный график; ось абсцисс (X) - концентрация
IFy в калибровочных пробах (пг/мл), ось ординат (У) - оптическая плотность калибровочных проб
(ОП 450 нм). Для алгоритма обсчета (аппроксимации) калибровочного графика используйте
интервальный (кусочно-линейный, «от точки к точке») метод. При использовании для расчетов
концентраций компьютерного или встроенного в спектрофотометр программного обеспечения в
настройках выбрать метод, соответствуюпщй кусочно-линейной аппроксимации.
По полученной калибровочной кривой определяют концентрации приготовленных КС,
которые будут указаны на этикетках.
4.4. Фильтрация контрольной сыворотки
Фильтрацию проводить согласно СОП-ВП-11-06 (Порядок проведения стерилизующей
фильтрации.)
Собрать установку для фильтрации. Профильтровать сыворотку через фильтры с размером
пор d = 0,22 мкм. Возможна постадийная фильтрация 1) префильтр 2) d пор= 0,45 мкм 3) d пор"= 0,22
мкм.
Занести данные в маршрутную карту.
4.5. Розлив контрольной сыворотки
Разливают с помощью дозирующего насоса во флаконы пластиковые с крьппкой. Доза
розлива - 1,0 мл.
Точность дозировки контролируется с помощью автоматических пипеток не менее 3 раз в
течение розлива. Погрешность разлива: ± 0,02 мл.
Каждый флакон плотно закрутить крьппкой и сложить в маркированный контейнер.
Работу с отходами проводить в соответствии с СОП-ТБ-11-09.
Занести данные в маршрутную карту.
Хранить готовые сыворотки до фасовки при температуре 2-8°С в течение 1 мес.
Составил (изменил) Согласовали Утвердил
Руководитель ОТК Начальник отдела производства реагентов
и контрольных препаратов
Исполнительный директор
Иванова А.В. Чуканов С.В. Кострикина Е.С.
--- стр. 9 ---
4 4.6. Лиофилизированная сушка
Флаконы не плотно закрыть резиновой пробкой и заморозить при температуре -70®С в течение
/асов.
Поместить флаконы в лиофильную сушку и сушить в течение 2 суток.
Флаконы за вальцевать или закрыть завинчивающейся крышкой.
4.7. Маркировка
На флакон наклеивают этикетку:
«IFt-ИФА» I ref ] Q255Z
КОНТРОЛЬНАЯ СЫВОРОТКА
I CONTROL I I I пг/мя
развести в 1,0 мл дистиллированной
воды
S____________
4’+2-8*С fcVDl ^
5. Документация.
Документирование процесса осуществляется в Маршрутной карте ЗФ01-ПО-11-74.
6. Ссылки
СОП-ВП-11-01. Правила подготовки производственных помещений.
СОП-ВП-11-07. Правила подготовки персонала для работы в производственных помещениях.
СОП-ТБ-11-09. Инструкция по охране труда с опасными отходами производства.
СОП-ВП-11-06 Порядок проведения стерилизующей фильтрации.
СОП-ПО-15-14.Порядок работы с потенциально инфицированным материалом.
1. Распределение данной инструкции
Оригинал ООК
Копия 1 НПО «ОПР»
Составил (изменил) Согласовали Утвердил
Руководитель ОТК Начальник отдела производства реагентов
и контрольных препаратов
Исполнительный диреююр
Иванова А.В. Чуканов С.В. Кострикина Е.С.
--- стр. 10 ---
РО Ш В Д 'О в КОЛИЧЕСТВЕ
^ листов
Исполнительный директор
4ч9в9р|хЕМА»
1&£оострикина_
/
--- стр. 11 ---
«СОГЛАСОВАНО» «УТВЕРЖДАЮ»
ж
ш
\\ у X" у/ 2022 г.
ИНСТРУКЦИЯ
по применению Набора реагентов для иммуноферментного определения интерферона
гамма (1Ру) в сыворотке (плазме) крови человека
«1Еу-ИФА»
--- стр. 12 ---
1. ОБЩАЯ ИНФОРМАЦИЯ.
1.1. Сведения о назначении:
а) Набор реагентов для иммуноферментного определения интерферона гамма (1Ру) в сыворотке
(плазме) крови человека «1Ру-ИФА» предназначен для количественного определения концентрации
интерферона гамма (1Ру) в сыворотке (плазме) крови методом твердофазного иммуноферментного
анализа.
б) Интерферон гамма (1Ру) - интерферон II типа представляет собой гликопротеин с
молекулярной массой 16,9 кДа, обладает противовирусной и тумороцидной активностью, активирует
макрофаги и моноциты, ЫК-клетки, пролиферацию и дифференцировку цитотоксических Т-
лимфоцитов, стимулирует созревание костномозговых клеток - предшественников моноцитов,
подавляет опухолевый рост и размножение вирусов.
в) в качестве анализируемого образца используется сыворотка, плазма (ЭДТА, гепарин, цитрат
натрия) крови.
1.2. Потенциальный потребитель - врачи клинико-диагностических лабораторий.
Профессиональная квалификационная группа "Врачи и провизоры" всех уровней (Приказ №526 от
06.08.2007 г. «Об утверждении профессиональных квалификационных групп должностей
медицинских и фармацевтических работников»).
Медицинский персонал клинико-диагностических лабораторий должен иметь
документированное подтверждение проведенного обучения, связанного с потенциальным риском,
сочетающимся с работой с любым медицинским (клиническим) лабораторным устройством.
1.3. Функциональное назначение.
Определение уровня интерферона гамма в сыворотке (плазме) крови используется в качестве
вспомогательного метода в комплексной диагностике, лечении и прогнозе заболеваний вирусной и
невирусной этиологии.
1.4. Применение набора не зависит от популяционных и демографических аспектов.
1.5. Набор предназначен для диагностики ин витро.
1.6. Область применения - клиническая лабораторная диагностика.
2. ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА
2.1. Набор реагентов «1Ру-ИФА» рассчитан на 96 определений, включая контроли.
2.2. Принцип работы Набора.
Определение интерферона гамма (1Ру) основано на использовании «сэндвич»-варианта
твердофазного иммуноферментного анализа. На внутренней поверхности лунок планшета
иммобилизованы мышиные моноклональные антитела к 1Ру. В лунках планшета, при добавлении
исследуемого образца, происходит связывание 1Ру, содержащегося в исследуемом образце, с
антителами на твердой фазе. После стадии отмывки добавляют антитела к другому эпитопу 1Ру,
меченые биотином. Далее - стрептавидин, конъюгированный с пероксидазой хрена. В результате
образуется связанный с пластиком «сэндвич», содержащий пероксидазу. Во время инкубации с
--- стр. 13 ---
)атным раствором тетраметилбензидина (ТМЁ) происходит окрашивание растворов в лунках,
генсивность окраски прямо пропорциональна концентрации 1Ру в исследуемом образце,
концентрацию 1Ру в исследуемых образцах определяют по калибровочному графику зависимости
оптической плотности от содержания 1Ру в калибровочных пробах.
2.3. КОМПЛЕКТНОСТЬ:
[ Состав Описание Количество
компонентвв
Планшет 96-луночный полистироловый, стрипированный, на внутренней
поверхности лунок планшета иммобилизованы антитела к
1Ру, готов к использованию.
1 шт.
Калибровочные пробы на основе Трис-буфера, содержащие известные количества
1Ру - С1; С2; СЗ; С4; С5 пг/мл, концентрация 1Ру в
калибровочных пробах указана в паспорте контроля
качества и на этикетках флаконов, лиофилизированные.
После восстановления: калибровочные пробы -
прозрачные неокрашенные жидкости.
5 шт.
Контрольная сыворотка инактивирована, на основе сыворотки крови человека с
известным содержанием 1Ру, лиофилизированная. После
восстановления: прозрачная неокрашенная жидкость.
1 шт.
Биотинилированные
антитела
прозрачная окрашенная жидкость (цвет компонента указан
в аналитическом паспорте), готовы к использованию. 1 шт. (14 мл)
Конъюгат стрептавидин-ПХпрозрачная окрашенная жидкость (цвет компонента указан
в аналитическом паспорте), готов к использованию. 1 шт. (14 мл)
Субстратный раствор
тетраметилбензидина (ТМБ)прозрачная бесцветная жидкость, готов к использованию.1 шт. (14 мл)
Концентрат отмывочного
раствора прозрачная бесцветная жидкость, 26-кратный концентрат.I шт. (22 мл)
Стоп-реагент прозрачная бесцветная жидкость, готов к использованию.1 шт. (14 мл)
Бумага для заклеивания
планшета - 2 шт.
Инструкция по применению - 1 шт.
Паспорт контроля качества - 1 шт.
3. АНАЛИТИЧЕСКИЕ, ТЕХНИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
3.1. Аналитическая чувствительность.
Минимальная достоверно определяемая Набором «1Ру-ИФА» концентрация 1Ру в сыворотке
(плазме) крови не превышает 2,0 пг/мл.
3.2. Аналитическая специфичность.
При тестировании тестового пула сывороток с известной концентрацией 1Ру путём добавления
пула с известным содержанием предполагаемых интерферирующих веществ с помощью Набора «1Ру-
ИФА» ни одна из испытанных проб не показала наличие перекрёстной реакции.
, ' Аналит Перекрестная реакция, % .
ИЛ-1-бета <0,1
ИЛ-2 <0,1
ИЛ-4 <0,1
ИЛ-6 <0,1
ИЛ-8 <0,1
ИЛ-10 <0,1
--- стр. 14 ---
ИЛ-18 <0,1
Альфа-ФНО <0,1
Альфа-ИФН <0,1
3.3. Воспроизводимость.
Коэффициент вариации результатов определения содержания IFy в одном и том же образце
сыворотки (плазмы) крови с использованием Набора «1Ру-ИФА» не превышает 8,0 %.
3.4. Линейность.
Зависимость концентрации IFy в образцах сыворотки (плазмы) крови при разведении их
сывороткой (плазмой) крови, не содержащей IFy, имеет линейный характер в диапазоне
концентраций С2-С5 в пределах 90-110%.
3.5. Точность.
Точность измерения исследована на образцах с известной концентрацией IFy, приготовленных
путем добавления Первого британского референтного материала по интерферону-гамма
(человеческий, полученный из лейкоцитов) {Non WHO Reference Material 1st British INTERFERON
GAMMA (human, leukocyte-derived), NIBSC code: 82/587) в образцы, не содержащие IFy. Для каждого
образца с известной концентрацией IFy смещение находится в пределах ± 7,0%.
3.6. Тест на «открытие».
Данный аналитический параметр проверяется тестом на «открытие» - соответствие измеренной
концентрации IFy предписанной, полученной путем смещивания равных объемов контрольной
сыворотки и калибровочной пробы СЗ. Процент «открытия» в пределах 90-110%.
3.7. Интерференция.
На результаты анализа не оказывало влияния использование антикоагулянтов ЭДТА, гепарина
и цитрата натрия, а также присутствие гемоглобина, триглицеридов, холестерина, билирубина и
общего белка в концентрациях, не превыщающих нормальные клинические значения.
3.8. Референтное значение.
"ТйсЯедуема^Ф^тп^"
Здоровые доноры
Нижний
пг/мл
ерхний предел
20
В соответствии с правилами GLP (Good Laboratory Practice, надлежащая Лабораторная
практика) рекомендуется каждой лаборатории уточнить параметры референтного интервала,
характерные для обследуемой популяции.
Примечание. Значения концентраций IFy в исследуемых образцах, находящиеся ниже границы
чувствительности Набора (2,0 пг/мл), а также превышающие значение верхней калибровочной пробы
(С5 пг/мл) следует приводить в следующей форме: в исследуемом образце X концентрация IFy ниже
2,0 пг/мл или выше С5 пг/мл.
3.9. Хук-эффект.
Вероятность Хук-эффекта исследовалась путем тестирования образцов с высокой
концентрацией IFy и их разведения. Не наблюдались отрицательные результаты на неразведенных
4
--- стр. 15 ---
зцах по сравнению с разведенными образцами. Идентичность результатов неразведенных и
введенных образцов указывает на отсутствие Хук-эффекта до концентрации 50000 пг/мл.
3.10. Метрологическая прослеживаемость осуществлялась, с использованием Первого
^5ританского референтного материала по интерферону-гамма (человеческий, полученный из
лейкоцитов) {Non WHO Reference Material 1st British INTERFERON GAMMA (human-, 'leukocyte-
derived), NIBSC code: 82/587).
4. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ.
4.1. Потенциальный риск применения Набора - класс 26.
4.2. Образцы сыворотки крови человека, используемые при приготовлении контрольной
сыворотки, инактивированы и не содержат антител к вирусу гепатита С, антител к ВИЧ 1, 2, а также
антигена р24 ВИЧ-1 и антигена вируса гепатита В (HBsAg).
4.3. Набор предназначен только для профессионального использования.
4.4. Все компоненты Набора в используемых концентрациях являются нетоксичными.
4.5. При работе с Набором необходимо использовать индивидуальные средства защиты: халат,
головной убор, резиновые или пластиковые перчатки, специальную обувь, защитные очки или
щиток), так как образцы сыворотки или плазмы крови следует рассматривать как потенциально
инфицированный биоматериал.
4.6. Все использованные одноразовые материалы подвергать обработке дезинфицирующими
средствами с последующей утилизацией (см. МУ-287-113 «Методические указания по
дезинфекции, предстерилизационной очистке и стерилизации изделий медицинского назначения»).
4.7. Все отмывочные растворы следует собирать в специальный контейнер и обрабатьшать
дезинфицирующими средствами, разрешенными для применения на территории РФ в установленном
порядке.
4.8. Лабораторную посуду многоразового использования и расходные материалы,
контактирующие с исследуемыми и контрольными образцами, следует обеззараживать с
использованием дезинфицирующих средств, не содержащих активный кислород и хлор,
оказывающих негативное воздействие на качество ИФА.
4.9. При работе следует соблюдать требования ГОСТ Р 52905 (ISO 15190:2003)
«Лаборатории медицинские Требования безопасности».
4.10. Инструменты, оборудование, а также рабочие поверхности столов необходимо протирать
70% раствором этилового спирта.
4.11. При использовании согласно инструкции по применению изделие является
безопасным (не несет физических, экологических и иных рисков).
4.12. Набор «IFy-ИФА» не содержит лекарственных средств для медицинского применения,
материалов животного и (или) человеческого происхождения, материалов, которые являются
канцерогенными, мутагенными или токсичными, возможное выделение или вымывание которых