Тест-система дот-иммуноферментная для детекции туляремийного микроба моноклональная (ДИАТул-М) по ТУ 9388-040-01898109-2011 — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 1 ---
У ТВ ЕРЖ Д ЕН А
П риказом Росздравнадзора
от 20 г. №
/^Ж ВЕРЖ ДАЮ »
'Директор; > ^ # о с :
Роспо1феЙ[з|^ор|
2 0 г.
ИНСТРУКЦИЯ
п о ПРИМ ЕНЕНИЮ ТЕСТ-СИСТЕМ Ы ДОТ-ИМ М УНОФ ЕРМ ЕНТНОЙ ДЛЯ
ДЕТЕКЦИ И ТУЛЯРЕМ ИЙНОГО М ИКРОБА М ОНОКЛОНАЛЬНОЙ
(ДИАТул-М )
1. НАЗНАЧЕНИЕ
«Т ест-си стем а дот-им м уноф ерм ентная для детекции тулярем ийного микроба
моноклональная (Д И А Т ул-М )», далее - тест-систем а «Д И А Т ул-М », предназначена для
вы явления возбудителя тулярем ии в биологическом м атериале и объектах окружаю щ ей
среды методом дот-им м уноф ерм ентного анализа (ДИА).
2. ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА
2.1 Принцип действия. В основу м етода полож ена схем а сэндвич-варианта ДИ А. При
постановке Д И А тулярем ийны й антиген, содерж ащ ийся в исследуемом материале,
специфически взаим одействует с тулярем ийны м и моноклональны ми
им м уноглобулинам и, сорбированны м и на ф ильтре м ем бранном нитроцеллю лозном
(Ф М И Ц). О бразовавщ ийся ком плекс «антиген-антитело» вы являю т с помощ ью конъю гата
(туляремийны е м оноклональны е антитела, м еченны е пероксидазой хрена). Визуализация
реакции происходит после добавления субстрат-индикаторного раствора, содерж ащ его
перекись водорода и 3,3'-ди ам и н обен зи ди н (ДАБ). При полож ительном результате на
Ф М Н Ц появляю тся коричневы е пятна специф ической реакции различной интенсивности.
Тест-систем а позволяет вы являть F. tularensis в количестве не м енее 5X 10^ м.к./мл.
2.2 Состав набора:
Компонент Описание Количество
1 2 3
Фосфатно-солевой
буфер (ФСБ)
таблетка белого цвета 1 шт.
Лактальбумин Порошок кремового цвета 1 пробирка
конъюгат
пероксид азный
иммуноглобулиновый
туляремийный
(МКАТул*)
аморфная масса коричневатого цвета, представляющая
собой моноклональные иммуноглобулины к
липополисахариду (ЛПС) F. tularensis, конъюгированные
с пероксидазой хрена, лиофилизированные
1 пробирка
Tween-20 вязкая слегка желтоватая жидкость 1 пробирка
3,3'- диаминобензидин
(ДАБ)
порошок коричневого цвета 1 пробирка
--- стр. 2 ---
Г идроперит таблетка белого цвета 1 шт.
Положительный
контрольный образец
(ПКО-ТМ)
аморфная масса желтоватого цвета, представляющая
собой лиофилизированную инактивированную взвесь F .
tularensis
1 пробирка
Фильтр мембранный
нитроцеллюлозный
(Ф М Щ )
пластины белого цвета 20x25 мм с нанесенной разметкой
3x3 мм, сенсибилизированные мышиными
иммуноглобулинами моноклональными к ЛПС F .
tularensis, блокированный в растворе лактальбумина
1 шт.
Тест-систем а «Д И А Т ул-М » рассчитана на проведение 42 определений с учетом
полож ительного и отрицательного контролей.
3. АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
Специфичность и чувствительность. Тест-систем а долж на вы являть F. tularensis в
количестве 5x10^ м .к./м л и не долж на давать полож ительны х результатов с
м икроорганизмам и других видов в концентрации 1 xlO^ м.к./мл.
4. МЕРЫ ПРЕДО СТО РОЖ НО СТИ
4.1 И спользование тест-систем ы «Д И А Тул-М » с истекш им сроком годности
недопустимо. У ничтож ение ком понентов тест-систем ы проводить в соответствии с
СанП ин 2.1.7.728-99.
4.2 Работу проводят в соответствии с требованиям и СП 1.3.1285-03 «Безопасность работы
с м икроорганизм ам и I-II групп патогенности» (М осква, 2003 г.)
5. ОБОРУДОВАНИЕ И М АТЕРИАЛЫ '
Н аименование О бозначения документации,
производитель
1 2
Термостат Термостат суховоздушный INCUCELL 111
(ВМТ, Чехия). Диапазон термостатирования
от 22 “С до 70 “С.
Холодильник от плюс 2 до плюс 8 °С с морозильной
камерой не выше минус 18°С
«Атлант», Россия
Ламинарный бокс биологической безопасности
класс II**
Бокс абактериальной воздушной среды
класс 1 1 БАВп-01-«Ламинар-С»,
«Ламинарные системы», Россия
Набор полуавтоматических дозаторов переменного
объема
Набор полуавтоматических дозаторов
переменного объема (0,5-10, 10-100 мкл,
100-1000 мкл), Biohit, Финл^{|ашс=г:::^
Штатив-подставка для дозаторов «Хеликон», Россия
Наконечники универсальные для дозаторов
переменного объема с аэрозольным барьером до 10
мкл
«Axygen», США
Наконечники универсальные для дозаторов
переменного объема с аэрозольным барьером до 100
мкл
«Ахуееп». США
ЗАМ. д и Р Е К т й ^ ^ " % ; ^ > 5 * ' ^ ^
-------------по ЭКСПЕРИМЁНТдМойУ* ------
И ПРОИЗВОДСТВЕН
А. к НИКИФОРОВ
Р А Б О Т Е
--- стр. 3 ---
Наконечники универсальные для дозаторов
переменного объема с аэрозольным барьером до
1000 мкл
«Axygen», США
Штатив «рабочее место» для пробирок на 0,2 мл «Хеликон», Россия
Штатив «рабочее место» для пробирок на 1,5 мл «Хеликон», Россия
Емкость (для сброса отработанных расходных
материалов)
«Гем», Россия
Посуда мерная стеклянная ГОСТ 1770-74
Одноразовый халат** «Здравмедтехника», Россия
Одноразовые перчатки Имп.
Вода очищенная ФС 42-2619-97
Примечание: * допускается прим енение оборудования и м атериалов другого типа, по
своим характеристикам не уступаю щ их реком ендуемы м;
** при работе с необеззараж енны м материалом .
6. А Н А Л И З И Р У Е М Ы Е О Б Р А З Ц Ы
М атериалом для исследования служат: суспензии культур тулярем ийного микроба
или подозрительны х изолятов, плазм а или сы воротка крови, почва, остатки пищ и из гнезд
хищ ных птиц, их погадки, пробы органов лабораторны х и диких ж ивотны х, экскременты
грызунов и хищ ников, вода откры ты х водоемов.
М атериал для исследования забираю т в стерильны е емкости с герметично
завинчиваю щ им ися кры ш кам и в соответствии с требованиям и СП 1.3.1285-03
«Безопасность работы с м икроорганизм ам и I-II групп патогенности», М У 4.2.2039-05
«Техника сбора и транспортирования биом атериалов в м икробиологические
лаборатории», М У 3.1.2007-05 «Э пидем иологический надзор за туляремией».
Т ранспортирование м атериала в лабораторию для исследований проводят при
тем пературе от плю с 2 до плю с 8 °С в течение 1 суток в соответствии с СП 1.2.036-95
«П орядок учета, хранения, передачи и транспортирования м икроорганизм ов I-IV групп
патогенности». П осле проведения предварительной обработки проб допускается их
транспортировка при тем пературе от м инус 16 до минус 20 °С в течение 7 суток.
6.1 П л а зм а к р о в и . В енозную кровь в количестве 4,5 мл, стабилизированную цитратом
натрия (3,8 % -ны й раствор цитрата натрия в соотнош ении 1/9) или ЭДТА (1,2-2 мг/мл
крови), аккуратно перем еш иваю т покачиванием до полного смеш ивания с
антикоагулянтом и центриф угирую т при 500 об/м ин (g ~ 45) в течение 3 мин. Для
исследования используется надосадочная ж идкость (плазм а), смеш анная с 0,9 % -ный
раствором натрия хлористого в соотнош ении 1/20.
6.2 С ы в о р о т к а к р о в и . Д ля получения сы воротки кровь вы держ иваю т в тераадвзще при
тем пературе плю с 37 °С в течение 30 минут. Затем центриф угирую т
45) в течение 3 м ин или пом ещ аю т в холодильник при тем пературе
часа. О бразовавш ую ся сы воротку аккуратно отсасы ваю т пипеткой,
эритроцитов. Г ем олизированная сы воротка исследованию 1^Ц ||0Д
П О Э К С П Е Р И К
И ПРОИЗВОДСТВЕ'
А- К-НИКИФОРОВ
--- стр. 4 ---
к исследуем ой сы воротке добавляю т 0,9 % -ны й раствор натрия хлористого в
соотнош ении 1/20.
6.3 Чистые культуры микроорганизмов. Из культур тулярем ийного микроба,
инкубированны х в течение 72 ч при тем пературе (37+1) “С или подозрительны х изолятов
готовят взвеси в 2 мл 0,9 % -ного раствора натрия хлористого по отраслевому
стандартному образцу м утности 10 единиц (О СО 42-28-59-86П ), что соответствует 5x10^
м.к./мл F. tularensis. П осле приготовления взвеси с концентрацией lxlO ^ м.к./мл готовят
10-кратны е разведения подготовленны х взвесей в 0,9 % -ном растворе натрия хлористого
до конечной концентрации 1x10^ м.к./мл.
6.4 Пробы органов лабораторны х и диких животных. О рганы лабораторны х и диких
ж ивотных отбираю т при вскры тии, соблю дая реглам ентированны е м еры безопасности.
Кусочки органов м ассой до 10 г растираю т в стерильной ступке со стеклянны м порош ком,
после чего добавляю т 0 ,9 % раствор натрия хлористого в соотнош ении 1/10 (вес/объем).
Н адосадочную ж идкость отбираю т с пом ощ ью пипетки через ватны й там пон в отдельную
пробирку и оставляю т на 2 ч при тем пературе (20±2) “С. Затем готовят разведения проб
последовательны м двукратны м титрованием в Ф СБ до разведения 1/160.
6.5 Почва, остатки пищи из гнезд хищных птиц, их погадки, экскременты грызунов
и хищников. П робы почвы с м ест вероятного обсем енения берут в количестве 20-30 г на
глубине до 15 см. О тобранны е пробы почвы, остатки пищ и из гнезд хищ ны х птиц, их
погадки, экскрем енты гры зунов и хищ ников пом ещ аю т в стерильны е пробирки или в
банки. К исследуем ом у м атериалу добавляю т 0,9 % -ны й раствор натрия хлористого в
соотнош ении 1/10, тщ ательно перем еш иваю т в течение 15 мин, отстаиваю т в течение 10
мин для оседания крупны х частиц. Н адосадочную ж идкость переносят в пробирку и
использую т для анализа.
6.6 Вода открытых водоемов. П робы берут в затененном м есте, на глубине 10-20 см от
поверхности стоячей или слабопроточной воды в объем е 100-200 мл в стерильные
емкости объем ом 200-250 мл с завинчиваю щ ейся кры ш кой. Из одной точки берут 2
пробы. Д ля концентрирования бактериальны х клеток использую т центриф угирование. Из
пробы воды переносят по 45 мл в центриф уж ны е пробирки с винтовой горловинной
кры ш кой типа Falcon объем ом 50 мл и центриф угирую т при 6000 об/м ин (g ~ 4000) в
течение 15 мин. О садок в каж дой пробирке ресуспендирую т в 500 мкл 0,9 % раствора
натрия хлористого и использую т для анализа.
7. ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА
П остановку ан ализа осущ ествляю т в боксе биологической безопасности II класса
(Бокс абактериальной воздуш ной среды для работы с П БА - <<Ламинар-С>>^^«Дам^^
системы», Россия) с соблю дением требований СП 1.3.1285-03 «Безо^
м икроорганизм ам и 1-П групп патогенности» (М осква, 2003 г.).
7.1 Обеззараживание материала. К исследуемы м образцам сыворо'^^15фов|й
добавляю т натрия м ертиолят до концентрации 1/10000 (0,01'
ЛАМ. Д И Р Е К Т О Р
прогреванием их при (56±1) С в течение 30 минут. И сследуем ы е
П О Э К С П Е Р И М Е Н Т А ’ ’
И П Р О И З В О Д С Т В Е Н Н О Й
А . К-Н И К И Ф О Р О В
--- стр. 7 ---
10. УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ И ЭКСПЛУАТАЦИИ НАБОРА
У словия хранения: Т ест-систем а «Д И А Тул-М » хранится при тем пературе от плю с 2
до плю с 8 ”С. Внимание! Д А Б хранится при тем пературе от м инус 16 до минус 20 °С.
Разуком плектовать при получении. С рок годности - 6 месяцев.
Рекламации н а качество «Т ест-систем ы дот-им м уноф ерм ентной для детекции
тулярем ийного м икроба м оноклональной (Д И А Тул-М )» в течение срока годности
направлять в Ф К У З РосН И П Ч И «М икроб» (4J0005, г. С аратов, ул. У ниверситетская, 46;
тел. (845-2) 51-59-65).
Зам. директора по экспериментально'й" ^
и производственной работе
Ректор ГБО У ВП О
Саратовский ГМ У им. В.И. Разум овск
М инздравсоцразвития России
Д иректор Ф БУ Н С аратовский Н И И С Г
Роспотребнадзора
Н икиф оров А.К.
П опков В.М .
Спирин В.Ф.
--- стр. 8 ---
Приложение 1
Варианты маркировки ФМНЦ’
А. Маркировка начала нанесения образцов
Б. Маркировка конца нанесения образцов
В. Маркировка квадратов
1 2 3 4 5 6
7 8 ч 1 0 I I 1 2
и 1 4 1 5 1 61 7 1 8
1 9 2 02 1 2 22 3 2 4
2 5 2 62 7 2 8 2 9 з и
Л п 3 3 3 4 3 5 3 6
3 73 8 3 9 4 U К ' + К -
Д опускаю тся другие варианты м аркировки.
Д И РЕ К Т О Р
ПО^ Э К С П Е Р И М Е Н Т
V ¥ ПРОИЗВОДСТВЕНН
[. К Н И К И Ф О Р О В
--- стр. 9 ---
ЦВЕТОВАЯ ШКАЛА
для визуального учета результатов при использовании
«Тест-системы дот-иммуноферментной для детекции
туляремийного микроба моноклональной (ДИАТул-М)»
Приложение 2
Окрашивание
пятна
специфической
реакции
Оценка реакции
▼
Результат
Т
«+ + + + » Резко-
положительиый
> «+ + + » Положительный
«++» Слабо
положительный
> «+» Сомнительный
«±»
(следы)
Отрицательный
* Полное отсутствие окрашивания пятна также расценивается как
отрицательный результат.
ЗАМ. ДИ РЕК ТО Р
П О Э К С П Е Р И уЕ Н Т А
И ПРОИЗВОДИТ
А. к НИКИФОРОВ