Набор реагентов для дифференциального выявления РНК коронавирусов человека ОС43 и HKU1 методом ОТ-ПЦР в режиме реального времени (РеалБест-ОРВИ РНК hCoV OC43/HKU1) по ТУ 21.20.23-135-23548172-2020 — инструкция и характеристики

РУ: РЗН 2022/18825 от 18.11.2022 · класс риска 2б

Производитель: АО "Вектор-Бест" (Россия)

Вид изделия: Множественные коронавирусы человека нуклеиновая кислота ИВД, набор, анализ нуклеиновых кислот

В госконтрактах 44-ФЗ: 28 контрактов, медианная цена за единицу 12 634 ₽.

Автоматически отфильтрованный фрагмент инструкции по применению (страницы, где похоже, что есть таблица технических характеристик) — не полный документ. Карточка РУ на портале Росздравнадзора →

Текст инструкции: технические характеристики

--- стр. 2 ---
полимеразной цепной реакции в реальном времени отличается оперативностью выполнения 
исследования, высокой специфичностью и чувствительностью. Он может эффективно 
применяться для:
— раннего назначения специфических средств этиотропной терапии, в том числе для 
избегания неоправданного применения антибактериальных препаратов,
— дифференциальной диагностики с другими инфекционными болезнями,
— своевременной госпитализации больных, а также для контроля излеченности и 
коррекции проводимой терапии,
— прогнозирования тяжести течения заболевания, возможных осложнений и исходов 
болезни,
— рационального размещения больных по этиологическому принципу (во избежание 
перекрестного внутрибольничного инфицирования).
Коронавирусы - РНК-содержащие вирусы, принадлежащие к семейству СогопаУШ(1ае. 
Подразделяются на 4 группы: альфа-, бета-, гамма- и дельта-, при этом человека заражают 
вирусы из альфа- и бета- групп. Коронавирусы находятся на втором месте по 
распространенности после риновирусов. На альфа-коронавирусы 229Е и ЫЕбЗ и бета- 
коронавирусы ОС43 и НК1Л приходится 15-30% острых респираторных вирусных инфекций. 
Заболевания, вызванные коронавирусами, чаще протекают с поражением верхних 
дыхательных путей легкой или средней тяжести, и в редких случаях — с поражением нижних 
дыхательных путей. Вирусы регистрируются в течение всего года с пиком активности в 
зимние месяцы и в большом проценте случаев встречаются в составе коинфекций совместно 
с другими ОРВИ. Коронавирусная инфекция (229Е, ЫЕбЗ, ОС43, НК1Л) обнаруживается 
преимущественно у детей младшего возраста (до 10 лет) с симптоматикой крупа и ларингита. 
У детей старшего возраста и у взрослых может отмечаться гриппоподобная симптоматика, а 
также кашель и ринит. Иммунодефициты и сопутствующие системные заболевания повышают 
вероятность тяжелого течения и осложнений.
1. НАЗНАЧЕНИЕ
Набор реагентов для дифференциального выявления РНК коронавирусов человека ОС43 
и НК1Л методом ОТ-ПЦР в режиме реального времени «РеалБест-ОРВИ РНК ЬСоУ 
ОС43/НКиЬ> предназначен для качественного дифференциального выявления РНК 
коронавирусов человека ОС43 (ЬСоУ ОС43) и НКЕП (ЬСоУ НК1Л), выделенной из 
клинических образцов (мазки со слизистой носа и задней стенки глотки, мокрота, 
бронхоальвеолярный лаваж), методом, основанным на обратной транскрипции вирусной РНК 
с последующей амплификацией кДНК в полимеразной цепной реакции (ОТ-ПЦР) с 
гибридизационно-флуоресцентной детекцией продуктов ПЦР в режиме реального времени.
2


--- стр. 3 ---
Набор реагентов используется при диагностике коронавирусной инфекции, обусловленной 
ЬСоУ ОС43 и ЬСоУ НК1Л у лиц с симптомами ОРВИ.
2. ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА
2Л. Принцип метода.
Принцип анализа основан на регистрации процесса амплификации выбранных 
специфических фрагментов кДНК (полученных методом обратной транскрипции из РНК 
НСоУ ОС43 и ЬСоУ НК1Л), заключающегося в повторяющихся циклах: температурная 
денатурация, отжиг праймеров на комплементарные последовательности, достройка 
полинуклеотидных последовательностей с этих праймеров Тац-полимеразой.
В основе используемого метода регистрации лежит измерение уровня флуоресценции в 
каждом цикле ПЦР. Увеличение уровня флуоресценции происходит благодаря использованию 
специфичного для данной кДНК гибридизационного ДНК-зонда, который в ходе реакции 
связывается с одной из цепей кДНК, обеспечивая также дополнительную специфичность 
метода. ДНК-зонд содержит на 5'-конце флуоресцентный краситель, а на З'-конце - гаситель 
флуоресценции, значительно снижающий интенсивность флуоресценции. В ходе 
полимеразного синтеза комплементарной цепи зонд расщепляется с 5'-конца, благодаря 5’-3'- 
нуклеазной активности Тац ДНК-полимеразы и происходит разобщение красителя и гасителя, 
приводящее по мере накопления продукта реакции к возрастанию уровня флуоресценции. При 
этом измеряемая интенсивность флуоресценции зависит от количества образовавшихся 
специфических ампликонов, и динамика нарастания уровня флуоресценции определяется 
исходным количеством РНК возбудителей инфекции в образце.
Учёт эффективности вьщеления НК возбудителей инфекции из образцов клинического 
материала обеспечивается внутренним контрольным образцом (ВКО), который входит в 
состав наборов для выделения НК.
Компонент набора (сокращение) 
Описание.
Количество
Положительный контрольный образец (ПКО) 
Бесцветная жидкость, содержит натрия азид (0,05%)
1 пробирка, 1 мл
Готовая реакционная смесь для ОТ-ПЦР (ГРС) 
Лиофилизированная
96 пробирок
Оптическая пленка 1,5 листа
2.3. Условия применения.
Аналитические и диагностические характеристики набора были валидированы при 
выделении РНК из клинических образцов (мазки со слизистой носа и задней стенки глотки, 
мокрота, бронхоальвеолярный лаваж) с использованием наборов: «РеалБест экстракция 100», 
«РеалБест УниМаг» и «РеалБест Сорбитус» производства АО «Вектор-Бест».
3


--- стр. 4 ---
4
Набор применяется с регистрирующими амплификаторами планшетного типа: «CFX96» 
(фирма Bio-Rad, США); «ДТпрайм» (ООО «НПО ДНК-Технология», Россия).
Набор рассчитан на проведение анализа 96 образцов, включая контрольные образцы.
Показания к применению.
Набор реагентов используется при диагностике коронавирусной инфекции, 
обусловленной hCoV ОС43 и hCoV HKU1, у лиц с симптомами ОРВИ.
Противопоказаний к применению медицинского изделия нет (не применимо).
3. АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
3.1. Аналитическая чувствительность:
За аналитическую чувствительность принята величина концентрации целевой НК, для 
которой при экспериментальной проверке на двух сериях набора на 32 повторах для каждой 
серии и каждого из заявленных амплификаторов и наборов для выделения НК был получен 
положительный результат в 100% случаев.
Набор гарантированно выявляет РНК hCoV ОС43 и hCoV НКШ в концентрации 25 
копий в ПЦР-пробе (соответствует 1x10^ копий/мл исходного образца при использовании для 
выделения РНК наборов «РеалБест экстракция 100», «РеалБест УниМаг» или «РеалБест 
Сорбитус»), что подтверждается при выпуске каждой серии набора реагентов тестированием 
образцов, приготовленных из стандартного образца предприятия с соответствующим 
содержанием вирусной НК.
3.2. Аналитическая специфичность:
Был проведен in silico анализ последовательностей праймеров и зондов по базам 
последовательностей вирусов (грипп А и В, парагрипп 1, 2, 3 и 4 типов, аденовирусы, 
бокавирусы, метапневмовирусы, респираторно-синцитиальные вирусы, риновирусы и 
коронавирусы hCoV 229Е, hCoV NL63, SARS-CoV-2) и микроорганизмов {Chlamydophila 
pneumoniae, Mycoplasma pneumoniae, Legionella pneumophila, Streptococcus pneumoniae,  
Haemophilus influenzae, Streptococcus pyogenes. Streptococcus agalactiae, Staphylococcus aureus.  
Staphylococcus spp. Streptococcus spp, Prevotella spp, Leptotrichia spp, Corynebacterium spp,  
Neisseria spp), которые могут присутствовать в респираторном тракте человека. Возможность 
перекрестных реакций исключена.
Аналитическая специфичность дифференциального выявления РНК коронавирусов 
человека ОС43 (hCoV ОС43) и HKU1 (hCoV HKU1) была подтверждена отсутствием 
перекрестных ложноположительных сигналов при анализе образцов от больных с острыми 
респираторными инфекциями иной этиологии (вирусы гриппа типа А и В, респираторно­
синцитиальный вирус (Human respiratory syncytial virus), метапневмовирус (Human 
metapneumovirus), 4 вида вирусов парагриппа (Human parainfluenza virus 1 -4), коронавирусы
4


--- стр. 5 ---
т
(Human Coronavirus 229E, Human Coronavirus NL63, SARS-CoV-2), риновирусы (Rhinovirus), 
аденовирусы (Human mastadenovirus) и бокавирус (Human bocavirus)), содержащих HK в 
концентрациях 10"^- 10^ копий на пробу.
В рамках международной системы контроля качества QCMD (Quality Control for 
Molecular Diagnostics, Великобритания) при анализе респираторных панелей (QCMD 2021 
Respiratory I EQA Programme, QCMD 2021 Respiratory II EQA Programme, QCMD 2021 
Respiratory III EQA Programme) показано наличие специфических сигналов в образцах, 
содержащих коронавирус, отсутствие неспецифических реакций в образцах содержащих 
прочие респираторные патогены (грипп А и В, респираторный синцитиальный вирус, 
аденовирус, вирус парагриппа, метапневмовирус, риновирус, энтеровирус, Legionella 
pneumophila, Streptococcus pneumonia, Haemophilus influenza. Mycoplasma pneumonia, 
Bordetella pertussis), что подтверждено Сертификатом QCMD (Quality Control for Molecular 
Diagnostics, Великобритания).
3.3. Диагностическая чувствительность дифференциального выявления РНК 
коронавируса человека ОС43 (hCoV ОС43): клинические испытания, проведенные на 
50 положительных образцах, содержащих РНК hCoV ОС43, показали 100 % чувствительность 
(интервал 92,9 % - 100 %, с доверительной вероятностью 95 %);
Диагностическая чувствительность дифференциального выявления РНК коронавируса 
человека HKU1 (hCoV HKU1): клинические испытания, проведенные на 53 положительных 
образцах, содержащих РНК hCoV HKU1, показали 100 % чувствительность (интервал 93,3 %
- 100 %, с доверительной вероятностью 95 %);
3.4. Диагностическая специфичность дифференциального выявления РНК коронавируса 
человека ОС43 (hCoV ОС43): клинические испытания, проведенные на 52 отрицательных 
образцах, не содержащих РНК hCoV ОС43, показали 100 % специфичность (интервал 93,2 %
- 100 %, с доверительной вероятностью 95 %);
Диагностическая специфичность дифференциального выявления РНК коронавируса 
человека HKU1 (hCoV HKU1): клинические испытания, проведенные на 51 отрицательном 
образце, не содержащем РНК hCoV HKU1, показали 100 % специфичность (интервал 93,0 % - 
100 %, с доверительной вероятностью 95 %;
3.5. Воспроизводимость результатов:
При тестировании в двух независимых постановках двумя разными операторами на двух 
сериях набора образцов в 8 повторах каждый внутрипостановочная, внутрисерийная и 
межсерийная воспроизводимость результатов составила 100 %. Коэффициент вариации Ct не 
более 4 %.
3.6. Потенциально интерферирующие вещества.
5


--- стр. 10 ---
8. АНАЛИЗ И УЧЁТ РЕЗУЛЬТАТОВ
8Л. Условия анализа и учёта результатов.
8.1.1. В ПКО проп)амма должна фиксировать:
- нарастание сигнала амплификации кДНК ВКО (канал «РАМ») и определять значение 
порогового цикла Ct ВКО;
- нарастание сигнала амплификации кДНК hCoV ОС43 (канал «КОХ») и кДНК hCoV 
HKU1 (канал «НЕХ») и определять значение порогового цикла Ct ПКО.
8.1.2. В ОКО программа должна фиксировать нарастание сигнала амплификации кДНК 
ВКО (канал «РАМ») и определять Ct ВКО, при этом программа не должна регистрировать 
нарастания сигнала специфического продукта амплификации по каналам «КОХ» и «НЕХ» с 
Ct меньше или равно 40.
Если для ОКО определяется значение Ct по каналу «КОХ» или «НЕХ» с Ct меньше 40, 
то это свидетельствует о наличии контаминации (см. п. 8.2.4).
8.1.3. В каждом исследуемом образце программа должна фиксировать нарастание 
сигнала амплификации кДНК ВКО (канал «РАМ») и определять Ct ВКО.
8.2. Учёт результатов.
8.2.1. Вычислить (Ct ВКО)ср как среднее значение Ct ВКО всех анализируемых образцов 
(включая ПКО и ОКО). Отбраковке подлежат значения Ct ВКО, отличающиеся более чем на 
2 от значения (Ct ВКО)ср. После отбраковки пересчитать (Ct ВКО)ср для оставшихся 
значений.
8.2.2. Анализируемый образец считается отрицательным (не содержащим РНК hCoV 
ОС43 и hCoV HKU1), если для этого образца значения Ct по каналам «КОХ» и «НЕХ» не 
определяются.
Если для такого образца значение О ВКО превышает значение (Ct ВКО)ср более чем на 
2, то результат по данному образцу не подлежит анализу и учёту как отрицательный. 
Необходимо провести повторный анализ данного образца, начиная с этапа выделения РНК.
8.2.3. Анализируемый образец считается положительным (содержащим РНК hCoV 
ОС43), если для этого образца значение Ct по каналу «КОХ» меньше или равно 40.
Анализируемый образец считается положительным (содержащим РНК hCoV HKU1), 
если для этого образца значение Ct по каналу «НЕХ» меньше или равно 40.
Если для анализируемого образца определяется Ct больше 40, результат следует считать 
неопределенным, рекомендуется проведение дополнительных исследований (исследование 
вновь забранного материала или исследование с использованием другого набора реагентов).
8.2.4. В случае контаминации все положительные результаты по данной индивидуальной 
постановке ПЦР считаются недостоверными. Требуется предпринять меры по выявлению и
10


--- стр. 11 ---
А
ликвидации источника контаминации и повторить анализ всех образцов данной постановки, 
для которых получен положительный результат. Образцы данной постановки, анализ которых 
дал отрицательный результат, следует учитывать, как отрицательные.
9. УСЛОВИЯ ТРАНСПОРТИРОВАНИЯ, ХРАНЕНИЯ И ПРИМЕНЕНИЯ НАБОРА
9.1. Транспортировать изделия следует транспортом всех видов в крытых 
транспортных средствах в соответствии с правилами перевозок, действующими на транспорте 
данного вида, при температуре (2-8) ®С. Допускается транспортирование при температуре до 
26 ®С не более 10 суток.
9.2. Хранение набора в упаковке предприятия-изготовителя должно осуществляться 
при температуре (2-8) °С в течение всего срока годности в холодильных камерах или 
холодильниках, обеспечивающих регламентированный температурный режим с ежедневной 
регистрацией температуры.
9.3. Срок годности набора - 12 месяцев со дня выпуска. Не допускается применение 
наборов по истечении срока их годности.
9.4. Для получения надёжных результатов необходимо строгое соблюдение 
инструкции по применению набора.
9.5. Изделие не требует технического обслуживания и не подлежит ремонту.
10. ГАРАНТИЙНЫЕ ОБЯЗАТЕЛЬСТВА
10.1. Производитель гарантирует соответствие выпускаемых изделий требованиям 
нормативной и технической документации.
Безопасность и качество изделия гарантируются в течение всего срока годности.
10.2. Производитель отвечает за недостатки изделия, за исключением дефектов, 
возникших вследствие нарушения правил пользования, условий транспортирования и 
хранения, либо действия третьих лиц, либо непреодолимой силы.
10.3. Производитель обязуется за свой счет заменить изделие, технические и 
функциональные характеристики (потребительские свойства) которого не соответствуют 
нормативной и технической документации, если указанные недостатки явились следствием 
скрытого дефекта материалов или некачественного изготовления изделия производителем.
По вопросам, касающимся качества набора «РеалБест-ОРВИ РНК hCoV ОС43/НК1Л», 
следует обращаться в АО «Вектор-Бест» по адресу:
630117, г. Новосибирск-] 17, а/я 492,
тел.: (383) 252-51-62, 227-60-30; тел./факс; (383) 252-51-81,252-51-77;
E-mail: plkobtk(a).vector-best. ru
11


--- стр. 12 ---
Консультацию специалиста по работе с набором можно получить по тел.: (383) 252-51-75.
Начальник отделения 
производства ПЦР-наборов 
АО «Вектор-Бест» А.В. Трухина
Директор по производству 
АО «Вектор-Бест»
Директор клинических исследований 
и дополнительных сервисов Дирекции 
ООО «Независимая лаборатория ИНВИТРО» 
м.п.
12