Набор реагентов для выявления мутаций, связанных с лекарственной устойчивостью микобактерий туберкулеза к рифампицину и изониазиду, методом полимеразной цепной реакции "АмплиТест® МБТ-Резист-I" — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 1 ---
«УТВЕРЖДАЮ»
Заместитель генерального директора
по научно-производственной деятель
ности Федерального государственного
бюджетного учреждения «Центр
стратегического планирования и
управления медико-биологическими
рисками здоровью» Федерального
мед икр^рИЙ^^^ско го а ге нтства
России)
Г.А. Шипулин
2022 г.
ИНСТРУКЦИЯ по ПРИМЕНЕНИЮ
набора реагентов для выявления мутаций, связанных
с лекарственной устойчивостью микобактерий туберкулёза
к рифампицину и изониазиду,
методом полимеразной цепной реакции
«АмплиТест® МБТ-Резист-1»
iJ
ФГБУ «ЦСП» ФМБА России,
119121, Российская Федерация,
г. Москва, Погодинская ул., д. 10 стр. 1 IV D
--- стр. 2 ---
4
ОГЛАВЛЕНИЕ
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ............................................................................................................3
НАЗНАЧЕНИЕ...............................................................................................................................4
ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ..........................................................................................................5
ПОКАЗАНИЯ И ПРОТИВОПОКАЗАНИЯ К ПРИМЕНЕНИЮ...............................................5
ПОТЕНЦИАЛЬНЫЕ ПОЛЬЗОВАТЕЛИ....................................................................................5
ПРИНЦИП МЕТОДА....................................................................................................................5
КОМПЛЕКТАЦИЯ..........................................................................................................................7
АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ..................................................................................8
ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ...........................................................................11
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ И СВЕДЕНИЯ ОБ УТИЛИЗАЦИИ .................................13
ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ МАТЕРИАЛЫ И ОБОРУДОВАНИЕ .................................................16
ВЗЯТИЕ. ТРАНСПОРТИРОВАНИЕ И ХРАНЕНИЕ ИССЛЕДУЕМОГО МАТЕРИАЛА..18
ПРОВЕДЕНИЕ ПЦР-ИССЛЕДОВАНИЯ.................................................................................20
СОСТАВ........................................................................................................................................20
АМПЛИФИКАЦИЯ С ДЕТЕКЦИЕЙ В РЕЖИМЕ «РЕАЛЬНОГО ВРЕМЕНИ» .................21
A. Подготовка проб для амплификации................................................................................21
Б. Проведение амплификации с детекцией в режиме «реального времени» ..............23
B. Анализ и интерпретация результатов...............................................................................25
СРОК ГОДНОСТИ. УСЛОВИЯ ТРАНСПОРТИРОВАНИЯ И ХРАНЕНИЯ.......................31
ГАРАНТИЙНЫЕ ОБЯЗАТЕЛЬСТВА ИЗГОТОВИТЕЛЯ.......................................................33
СИМВОЛЫ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ В ПЕЧАТНОЙ ПРОДУКЦИИ............................................34
стр. 2 из 34
--- стр. 3 ---
список СОКРАЩЕНИЙ
В настоящей инструкции применяются следующие
сокращения и обозначения:
БАЛ - бронхоальвеолярный лаваж
ВКО - внутренний контрольный образец
ГЭ - геномный эквивалент - количество ДНК-мишени, соответствующее
одному геному микобактерии туберкулёза
ДНК - дезоксирибонуклеиновая кислота
дНТФ - дезоксирибонуклеозидтрифосфат
К+ МБТ-wt
- положительный контроль ПЦР, включающий фрагменты ДНК МБТ,
которые не содержат мутаций, связанных с устойчивостью
к рифампицину и изониазиду (дикого типа)
К+ МБТ-mut
- положительный контроль ПЦР, включающий фрагменты ДНК МБТ,
которые содержат несколько мутаций, связанных
с устойчивостью как к рифампицину, так и к изониазиду
К- - отрицательный контроль ПЦР, не содержащий ДНК МБТ
МБТ - микобактерии туберкулёза, Mycobacterium tuberculosis complex
МУ - методические указания
ОК - отрицательный контроль экстракции
ОКО - отрицательный контрольный образец
ПО - программное обеспечение
ПО «FRT
Manager»
- программное обеспечение для управления приборами для
проведения полимеразной цепной реакции в режиме реального
времени, а также анализа полученных с приборов данных «FRT
Manager» (ООО «ИЛС», Россия; РУ № РЗН 2019/8870)
ПТП - противотуберкулёзный препарат
ПЦР - полимеразная цепная реакция
РУ - регистрационное удостоверение
РФ - Российская Федерация
СанПиН - санитарно-эпидемиологические правила и нормы
ООП № 1 ПКО
ДНК МБТ-wt
- стандартный образец предприятия, содержащий фрагменты ДНК
МБТ дикого типа (без мутаций в анализируемых генах)
ООП №2 ПКО
ДНКМБТти!
RH
- стандартный образец предприятия, содержащий фрагменты ДНК
МБТ с мутацией S531L в гене гроВ, связанной с устойчивостью МБТ
к рифампицину, и с мутацией S315T1 в гене katG, связанной
с устойчивостью МБТ к изониазиду
СОП №3 ПКО
ДНК МБТ
H37Ra-wt
• стандартный образец предприятия, содержащий ДНК штамма
M.tuberculosis H37Ra (без мутаций в анализируемых генах)
СОП № 4 ПКО
ДНК МБТ mut
R
• стандартный образец предприятия, содержащий фрагменты ДНК
МБТ с мутацией H526Y в гене гроВ, связанной с устойчивостью МБТ
к рифампицину
СОП № 5 ПКО
ДНК МБТ mut
Н
- стандартный образец предприятия, содержащий фрагменты ДНК
МБТ с мутацией S315T1 в гене katG
ТБ - туберкулёз
УДГ. UDG - урацил-ДНК-гликозилаза
ФГБУ «цеп»
ФМБА России
- Федеральное государственное бюджетное учреждение «Центр
стратегического планирования и управления медико-
стр. 3 из 34
--- стр. 7 ---
регистрируются по четырем различным
флуоресцентной детекции (см. табл.1).
каналам
Таблица 1 — Анализ результатов по каналам для
флуорофоров
Канал для
флуррофора FAM JOE ROX Су5
Наименование
ПЦР-смеси-FL Детектируемая ДНК-мишень (область амплификации)
МБТ-Р № 1 область RRDR гена гроВ
(дикого типа)
мутация S531L в
области RRDR
гена ГроВ
область RRDR
гена гроВ
(дикого типа)
МБТ-Р № 2 область RRDR гена гроВ
(дикого типа)
МБТ-Р № 3
участок гена
katG
(область
кодона 315)
(дикого типа)
участок гена
гроВ вне RRDR
(область
кодона 572)
(дикого типа)
ДНКВКО
(искусственная
синтезированная
последова
тельность)
участок
промоторной
области
гена inhA
(дикого типа)
Набор реагентов содержит систему защиты
от контаминации ампликонами за счет применения
термолабильного фермента урацил-ДНК-гликозилазы (УДГ,
UDG) и дезоксиуридинтрифосфата. Фермент УДГ распознает и
катализирует разрушение цепей ДНК, содержащих
дезоксиуридин, но не ДНК, содержащих дезокситимидин.
Дезоксиуридин отсутствует в природной ДНК, но всегда
присутствует в ампликонах, поскольку
дезоксиуридинтрифосфат входит в состав смеси дНТФ в
реагентах для амплификации. Дезоксиуридин делает
контаминирующие ампликоны восприимчивыми к разрушению
ферментом УДГ до начала амплификации ДНК-мишени, и,
следовательно, они не могут быть в дальнейшем
амплифицированы.
Фермент УДГ термолабилен и инактивируется
при нагревании выше 50 °С, поэтому не разрушает ампликоны
мишени, нарабатываемые в процессе ПЦР.
КОМПЛЕКТАЦИЯ
В состав набора входит:
«ПЦР-комплект» вариант FRT-50 F - комплект реагентов
для амплификации фрагментов ДНК МВТ (фрагментов генов
фоБ, katG, промоторной области inhA) и выявления мутаций.
стр. 7 ИЗ 34
--- стр. 8 ---
ассоциированных с устойчивостью МБТ к рифампицину и
изониазиду, с гибридизационно-флуоресцентной детекцией
в режиме «реального времени».
Предназначен для проведения амплификации ДНК
с гибридизационно-флуоресцентной детекцией в режиме
«реального времени» и позволяет определять ДНК
в качественном формате.
Эксплуатационная документация: инструкция по
применению (1 шт.), паспорт качества (1 шт.), вкладыш к
набору реагентов (1 шт.), краткое руководство по применению
(1 шт.).
Набор реагентов рассчитан на проведение 150 реакций
амплификации (всего 50 тестов), включая контроли.
АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
Для данного набора реагентов применимы следующие
характеристики;
Аналитическая чувствительность (лредел обнаружения)
Таблица 2 — Аналитическая чувствительность набора
реагентов «АмплиТест® МБТ-Резист-1»
Вид исследуемого
материала
Комплект для
амплификации
Аналитическая
чувствительность
(предел обнаружения),
ГЭ/мл
Проба ДНК, полученная
экстракцией из образца
биологического материала
(мокроты, БАЛ, биоптата)
«ПЦР-комплект»
вариант
FRT-50 F
1x103
Данный предел обнаружения достигается при соблюдении
правил, указанных в разделах «Взятие, транспортирование и
хранение исследуемого материала».
Аналитическая специфичность
Аналитическая специфичность набора реагентов доказана
при исследовании стандартного образца предприятия (СОП) №
3 «Положительный контрольный образец, содержащий ДНК
штамма М. tuberculosis H37Ra дикого типа (без мутаций)» (СОП
№ 3 ПКО ДНК МБТ H37Ra-wt) в концентрации 1x10^ ГЭ/мл,
а также СОП № 2 «Положительный контрольный образец,
содержащий фрагменты ДНК МБТ с мутациями S531L в
стр. 8 из 34
--- стр. 9 ---
области RRDR гена rpoB и S315T1 в гене katG» (СОП № 2 ПКО
ДНК МБТ mut RH), СОП № 4 «Положительный контрольный
образец, содержащий фрагменты ДНК МБТ с мутацией H526Y
в области RRDR гена гроВ» (СОП № 4 ПКО ДНК МБТ mut R),
СОП № 5 «Положительный контрольный образец, содержащий
фрагменты ДНК МБТ с мутацией S315T1 в гене katG» (СОП №
5 ПКО ДНК МБТ mut Н) в концентрации 1хЮ® ГЭ/мл каждого и
препарата ДНК Mycobacterium bovis Vallee № 700203 (без
мутаций в анализируемых генах) в концентрации 1x10^ ГЭ/мл.
Набор реагентов «АмплиТест® МБТ-Резист-1» не выявляет
мутации, ассоциированные с устойчивостью МБТ к рифам-
пицину и изониазиду, при тестировании СОП № 3 ПКО ДНК
МБТ H37Ra-wt и препарата ДНК Mycobacterium bovis Vallee №
4 700203, не содержащих мутации ни в одном из анализируемых
генов, и специфично выявляет мутации в ДНК МБТ, связанные
с лекарственной устойчивостью МБТ к рифампицину при
тестировании СОП № 2 ПКО ДНК МБТ mut RH и СОП № 4 ПКО
ДНК МБТ mut R, к изониазиду - при тестировании СОП № 2
ПКО ДНК МБТ mut RH и СОП № 5 ПКО ДНК МБТ mut Н.
Отсутствие неспецифических положительных результатов
подтверждено при использовании препаратов ДНК штаммов
следующих микроорганизмов в концентрации не менее 1хЮ®
ГЭ/мл: нетуберкулёзных микобактерий - Mycobacterium
avium № 700758, Mycobacterium kansasii № 700700,
Mycobacterium fortuitum № 700711 (из коллекции ФГБУ
НЦЭСМП Минздрава России); гетерологичных
микроорганизмов - Streptococcus pneumoniae АТСС® 27336,
Staphylococcus aureus АТСС® 33862, Staphylococcus epidermidis
АТСС® 12228, Klebsiella pneumoniae АТСС® 27736, Klebsiella
oxytoca ATCC® 700324, Haemophilus influenza ATCC® 33930,
Corynebacterium jeikeium ATCC® 43734 (из коллекции American
Type Culture Collection® (ATCC®), США), a также препарата
геномной ДНК человека. Неспецифических положительных
результатов выявлено не было - во всех случаях получен
результат «Недостаточно ДНК МБТ для анализа».
стр. 9 из 34
--- стр. 10 ---
'
Интерферирующие вещества и ограничения по
использованию проб исследуемого материала
Интерферирующие вещества могут как находиться в
образце биологического материала или культуры МВТ, так и
попасть в него на этапе пробоподготовки. Применение набора
реагентов «АмплиТест® МБТ-Резист-1» подразумевает
использование не предобработанных нативных образцов
биологического материала или культур МВТ, а уже выделенной
из них тотальной ДНК, которая содержит ДНК МВТ
в определенной концентрации, т.е. набор реагентов
не подвержен влиянию способа пробоподготовки
биологического материала или культуры МВТ,
а следовательно, не подвержен и влиянию интерферирующих
веществ.
Для пробоподготовки образцов перед тестированием
с помощью набора реагентов «АмплиТест® МВТ-Резист-1»
рекомендуются к применению только зарегистрированные в РФ
наборы реагентов для экстракции нуклеиновых кислот.
Для контроля эффективности реакции амплификации
в наборе реагентов предусмотрена одновременная
амплификация ДНК МВТ и внутреннего контрольного образца
(ВКО). ВКО добавляется в каждую пробу ДНК, выделенную из
биологического материала или культуры микобактерий
туберкулёза, на этапе подготовки к амплификации с детекцией
в режиме «реального времени». По окончании реакции
амплификации наличие сигнала, свидетельствующего
о накоплении фрагментов ДНК ВКО, говорит об эффективности
ПЦР.
Непригодными для исследования являются пробы ДНК
(содержащие ДНК МВТ), концентрация, объем, условия/срок
хранения и транспортирования которых не соответствуют
требованиям, указанным в разделе «Взятие,
транспортирование и хранение исследуемого материала».
Воспроизводимость
Воспроизводимость исследования была определена в двух
независимых лабораториях, разными операторами, в разные
дни, на различных приборах путем тестирования
положительных и отрицательных модельных образцов.
стр. 10 ИЗ 34
--- стр. 11 ---
Положительные модельные образцы представляли собой
разведение стандартного образца предприятия СОП № 2 ПКО
ДНК МБТ mut RH в концентрации 1x10^ ГЭ/мл, в качестве
отрицательных модельных образцов было использовано
разведение СОП № 1 ПКО ДНК МБТ-wt в концентрации 1x10^
ГЭ/мл. Для положительных образцов получен соответствующий
результат «Обнаружена мутация, связанная с устойчивостью
МБТ к рифампицину; обнаружена мутация, связанная
с устойчивостью МБТ к изониазиду». Для отрицательных
образцов получен соответствующий результат
«Не обнаружены мутации, связанные с устойчивостью МБТ
к рифампицину; не обнаружены мутации, связанные
с устойчивостью МБТ к изониазиду».
Результаты исследования для набора реагентов
представлены в табл. 3.
Таблица 3 — Воспроизводимость исследования для набора
реагентов «АмплиТест® МБТ-Резист-1»
Тип
образцов
Внутри
постановки
(повторя
емость)
Между
сериями
Между
лаборато
риями
(воспроизво
димость)
Итого
Коли
чество
об раз-
40*
Совпа
дение
резуль-
пггов.%
Коли
чество
образцов
Совпа
дение
резуль
татов, %
Коли
чество
образцов
Совпа
дение
результа
тов, %
Коли
чество
образцов
Совпа
дение
результа
тов, %
СОП № 2 ПКО
ДНК МБТ mut RH
(1x103 ГЭ/мл)-
положительные
образцы
6 100 12 100 12 100 18 100
СОП № 1 ПКО
ДНК МБТ-wt
(1x103 ГЭ/мл)-
отрицательные
образцы
6 100 12 100 12 100 18 100
ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
Диагностические показатели набора реагентов
с доверительной вероятностью 95 % определены на основании
результатов клинических испытаний с использованием 200
проб ДНК, полученных экстракцией из образцов разного вида
биологического материала (мокроты, БАЛ, биоптата
стр. 11 ИЗ 34
--- стр. 12 ---
k
(операционного материала)) от пациентов с туберкулёзом
легких и содержащих ДНК МБТ в концентрации не менее
1х10^ГЭ/мл, которая была определена с помощью набора
реагентов для выделения, обнаружения и количественного
определения ДНК микобактерий туберкулезного комплекса
методом полимеразной цепной реакции в реальном времени
«Амплитуб-РВ» по ТУ 9398-001-46395995-2008 (ООО
«Синтол», Россия; РУ № ФОР 2010/07635), а также
с использованием 100 проб ДНК, полученных экстракцией
из образцов культур микобактерий туберкулёза. В качестве
набора сравнения был использован набор реагентов для
определения лекарственной устойчивости микобактерий
туберкулезного комплекса к рифампицину и изониазиду
методом полимеразной цепной реакции в реальном времени
«Амплитуб-МЛУ-РВ» по ТУ 9398-002-46395995-2008 (ООО
"Синтол", Россия; РУ № ФСР 2010/07636). При выявлении
мутаций, не определяемых набором сравнения,
соответствующие пробы ДНК были дополнительно
исследованы с помощью секвенирования по Сэнгеру
фрагментов анализируемых генов.
Результаты клинических испытаний набора реагентов
представлены в табл. 4.
Таблица 4 — Результаты оценки диагностических
локазателей набора реагентов «АмплиТест® МБТ-Резист-1»
и набора сравнения
Вид
исследуемого
материала
(общее
количество
образцов)
птп
Результаты
применения
набора
реагентов
Результаты применения
рвфврвйтйого метода
Обнаружены
мутации
(положительные)
Не обнаружены
мутации
(отрицательные)
Проба ДНК,
полученная
экстракцией из
образца
биологического
материала
человека
(мокроты, БАЛ,
биоптата
(операционного
матерала))
(N=200)
Рифам-
пицин
Обнаружены
мутации
(положительные)
99 0
Не обнаружены
мутации
(отрицательные)
0 101
Изони-
азид
Обнаружены
мутации
(положительные)
122 0
Не обнаружены
мутации
(отрицательные)
0 78
Проба ДНК,
полученная
Рифам-
пицин
Обнаружены
мутации 50 0
стр. 12 ИЗ 34
--- стр. 13 ---
экстракцией из
образца
культуры
микобактерий
туберкулёза
(N=100)
Изони-
азид
(положительные)
Не обнаружены
мутации
(отрицательные)
0 50
Обнаружены
мутации
(положительные) 53 0
Не обнаружены
мутации
(отрицательные)
0 47
Таблица 5 — Диагностические характеристики набора
реагентов «АмплиТест® МБТ-Резист-1»
Вид исследуемого
материала
(общее количество
образцов)
Выявление
мутаций,
связанных
с устойчи*
востью
Диагностическая
чувствительность^
(с доверительной
вероятностью
95%)
Диагностическая
специфичность^*
(с доверительной
вероятностью
95%)
Проба ДНК,
полученная
экстракцией из
образца
биологического
материала человека
(мокроты, БАЛ,
биоптата
(операционного
материала) (N=200)
к рифампицину 96.34-100 % 96,41-100%
к изониазиду 97,02-100% 95,38-100 %
Проба ДНК.
полученная
экстракцией из
образца культуры
микобактерий
туберкулёза (N=100)
к рифампицину 92,89-100% 92,89-100 %
к изониазиду 93,28-100% 92,45-100 %
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ И СВЕДЕНИЯ ОБ УТИЛИ
ЗАЦИИ
Работа должна проводиться в лаборатории, выполняющей
молекулярно-биологические (ПЦР) исследования
биологического материала на наличие возбудителей
инфекционных болезней, с соблюдением санитарно-
эпидемиологических правил СанПиН 3.3686-21 «Санитарно-
^ Диагностическая чувствительность относительно использованного набора сравнения.
^Диагностическая специфичность относительно ислользованного набора сравнения.
стр. 13 из 34
--- стр. 14 ---
эпидемиологические требования по профилактике
инфекционных болезней», СанПиН 2.1.3684-21 «Санитарно-
эпидемиологические требования к содержанию территорий
городских и сельских поселений, к водным объектам, питьевой
воде и питьевому водоснабжению, атмосферному воздуху,
почвам, жилым помещениям, эксплуатации производственных,
общественных помещений, организации и проведению
санитарно-противоэпидемических (профилактических)
мероприятий» и методических указаний МУ 1.3.2569-09
«Организация работы лабораторий, использующих методы
амплификации нуклеиновых кислот при работе с материалом,
содержащим микроорганизмы I-IV групп патогенности».
При работе необходимо всегда выполнять следующие
требования:
Температура в помещении лаборатории от плюс 20
до плюс 28 °С, относительная влажность от 15 до 75 %.
Рассматривать исследуемые образцы как инфекционно
опасные, организовывать работу и хранение в соответствии
с СанПиН 3.3686-21 «Санитарно-эпидемиологические
требования по профилактике инфекционных болезней».
Убирать и дезинфицировать разлитые образцы, используя
дезинфицирующие средства в соответствии с СанПиН
3.3686-21 «Санитарно-эпидемиологические требования
по профилактике инфекционных болезней».
Лабораторный процесс должен быть однонаправленным.
Анализ проводится в отдельных помещениях (зонах). Работу
следует начинать в Зоне Экстракции, продолжать в Зонах
Амплификации и Детекции. Не возвращать образцы,
оборудование и реагенты в зону, в которой была проведена
предыдущая стадия процесса.
Неиспользованные реагенты, реагенты с истекшим сроком
годности, а также использованные реагенты, упаковку'*,
биологический материал, включая материалы, инструменты
и предметы, загрязненные биологическим материалом,
следует удалять в соответствии с требованиями
СанПиН 2.1.3684-21 «Санитарно-эпидемиологические
требования к содержанию территорий городских и
* Неиспользованные реагенты, реагенты с истекшим сроком годности, использованные
реагенты, упаковка относятся к классу опасности медицинских отходов Г.
стр. 14 из 34
--- стр. 30 ---
меньше
граничного
меньше
граничного
меньше
граничного
меньше
граничного
МБТ-Р № 3
определено
меньше
граничного
определено
меньше
граничного
определено
меньше
граничного
определено
меньше
граничного
МБТ-Р № 1
К+ mut ПЦР
отсутствует отсутствует
определено
меньше
граничного
отсутствует
МБТ-Р № 2
определено
меньше
граничного
отсутствует
определено
меньше
граничного
не
учитывается
МБТ-Р № 3 отсутствует отсутствует
определено
меньше
граничного
отсутствует
МБТ-Р № 1
OK Экстракция
ДНК и ПЦР
отсутствует отсутствует отсутствует отсутствует
МБТ-Р № 2 отсутствует отсутствует отсутствует отсутствует
МБТ-Р № 3 отсутствует отсутствует
определено
меньше
граничного
отсутствует
Возможные ошибки:
1. Для положительного контроля ПЦР (К+ wt) значение
порогового цикла (Ct) отсутствует или превышает
граничное значение по каналам, где оно должно быть
определено меньше граничного согласно таблице 7.
Необходимо повторить ПЦР-исследование для всех
образцов.
2. Для положительного контроля ПЦР (К+ mut) значение
порогового цикла {Ct) отсутствует или превышает
граничное значение по каналам, где оно должно быть
определено меньше граничного согласно таблице 7 или
определено значение порогового цикла (Ct) по каналам, где
оно должно отсутствовать согласно таблице 7. Необходимо
повторить ПЦР-исследование для всех образцов.
3. Для отрицательного контроля ПЦР (К-) определено
значение порогового цикла (Ct) по одному или нескольким
каналам. Вероятна контаминация лаборатории продуктами
амплификации или контаминация реагентов, исследуемых
образцов на каком-либо этапе ПЦР-исследования.
Необходимо предпринять меры по выявлению и ликвидации
источника контаминации и повторить ПЦР-исследование
для всех образцов.
стр. 30 из 34
--- стр. 31 ---
I
4
4. Для отрицательного контроля экстракции (ОК) определено
значение порогового цикла (Ct) по одному или нескольким
каналам, где оно должно отсутствовать согласно таблице 7.
Вероятна контаминация лаборатории продуктами
амплификации или контаминация реагентов, исследуемых
образцов на каком-либо этапе ПЦР-исследования.
Необходимо предпринять меры по выявлению и ликвидации
источника контаминации и повторить ПЦР-исследование
для всех образцов, начиная с этапа экстракции ДНК.
5. Для исследуемого образца определено значение
порогового цикла (Ct), при этом на графике флуоресценции
отсутствует участок характерного экспоненциального
подъема (график представляет собой приблизительно
прямую линию). Необходимо проверить правильность
выбранного уровня пороговой линии или параметров
расчета базовой линии. Если результат получен при
правильном уровне пороговой линии (базовой линии),
требуется повторно провести ПЦР-исследование для этого
образца.
СРОК ГОДНОСТИ. УСЛОВИЯ ТРАНСПОРТИРОВАНИЯ и
ХРАНЕНИЯ
Срок годности. 15 месяцев. Набор реагентов с истекшим
сроком годности применению не подлежит. Срок годности
вскрытых реагентов соответствует сроку годности, указанному
на этикетках для невскрытых реагентов, если в инструкции
не указано иное.
Транспортирование. Набор реагентов транспортировать
при температуре от плюс 2 до плюс 8 °С не более 5 суток
в термоконтейнерах, содержащих хладоэлементы, всеми
видами крытых транспортных средств.
Набор реагентов при получении разукомплектовать
в соответствии с указанными температурами хранения.
Хранение.
Часть 1 в составе реагентов ПЦР-смесь-FL МБТ-Р №1,
ПЦР-смесь-FL МБТ-Р № 2, ПЦР-смесь-FL МБТ-Р № 3, К+ МБТ-
wt, К+ МБТ-mut, ВКО-М хранить в холодильной камере при
стр. 31 из 34
--- стр. 32 ---
температуре от плюс 2 до плюс 8 °С. ПЦР-смесь-FL МБТ-Р
№ 1, ПЦР-смесь-FL МБТ-Р № 2, ПЦР-смесь-FL МБТ-Р № 3
хранить в защищенном от света месте.
Часть 2 в составе ПЦР-буфера-М, TaqF полимеразы (UDG),
К- хранить в морозильной камере при температуре от минус 24
до минус 16 °С.
Холодильные и морозильные камеры должны обеспечивать
регламентированный температурный режим.
стр. 32 из 34
--- стр. 33 ---
4
ГАРАНТИЙНЫЕ ОБЯЗАТЕЛЬСТВА ИЗГОТОВИТЕЛЯ
Изготовитель гарантирует соответствие основных парамет
ров и характеристик комплекта реагентов требованиям, указан
ным в технической и эксплуатационной документации, в течение
указанного срока годности при соблюдении всех условий транс
портирования, хранения и применения.
Медицинское изделие техническому обслуживанию и ре
монту не подлежит.
Рекламации на качество комплекта реагентов направлять по
адресу 119121, Российская Федерация, г. Москва, Погодинская
улица, дом 10 стр.1, e-mail;
promlab@cspfmba.ru.
При выявлении побочных действий, не указанных в инструк
ции по применению комплекта реагентов, нежелательных реак
ций при его использовании, фактов и обстоятельств, создающих
угрозу жизни и здоровью граждан и медицинских работников при
применении и эксплуатации комплекта реагентов, рекоменду
ется направить сообщение по адресу, указанному выше, и в
уполномоченную государственную регулирующую организацию
(в РФ - Федеральная служба по надзору в сфере здравоохране
ния) в соответствии с действующим законодательством.
Руководитель
производственной лаборатории
Ж. Е.Тарасова
СТр. 33 ИЗ 34
--- стр. 34 ---
символы, ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ В ПЕЧАТНОЙ ПРОДУКЦИИ
REF
| l o t |
I V D
VER
I
i M l
f
Номер по каталогу
А
Осторожно! Обратитесь к
инструкции по
применению
Код партии
Содержимого достаточно
для проведения п-
количества тестов
Медицинское изделие
для диагностики in vitro Использовать до
Дата изменения as
Обратитесь к инструкции
по применению
Температурный
диапазон
Не допускать
воздействия солнечного
света
Изготовитель Дата изготовления
Беречь от влаги
стр. 34 из 34