Устройство автоматическое для иммуногистологического окрашивания и гибридизации in situ Дако Омнис/Dako Omnis, с принадлежностями — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 7 ---
Содержание — Основное руководство пользователя
аппарата Dako Omnis
Agilent
Dako
Раздел 1. Знакомство с аппаратом Dako Omnis ....................................10
Назначение....................................................................................................................................................10
Как пользоваться этим руководством....................................................................................................10
Порядок работы с аппаратом Dako Omnis...............................................................................................11
Раздел 2. Правила техники безопасности...............................................12
Значок «Внимание!»......................................................................................................................................12
Безопасность при эксплуатации...............................................................................................................12
Меры безопасности при работе с химическими веществами.............................................................14
Меры безопасности при работе с биологически опасными веществами.........................................15
Светодиодные сканеры штрихкода..........................................................................................................17
Раздел 3. Общие ограничения......................................................................18
Раздел 4. Общие сведения о системе........................................................20
Аппаратное обеспечение системы............................................................................................................21
Аппарат Dako Omnis.....................................................................................................................................21
Общие сведения об аппарате.....................................................................................................................23
Рабочая станция DakoLink Omnis Workstation.........................................................................................30
Рабочая станция на базе ПК.......................................................................................................................30
Программное обеспечение DakoLink Omnis Workstation......................................................................31
Раздел 5. Основные сведения о главном экране.................................32
Главный экран..............................................................................................................................................32
Область вкладок...........................................................................................................................................32
Область просмотра состояния..................................................................................................................33
Кнопки управления......................................................................................................................................33
Строка состояния.........................................................................................................................................33
Раздел 6. Начало работы...............................................................................36
Запуск.............................................................................................................................................................36
Вход в систему..............................................................................................................................................37
Выход из системы........................................................................................................................................37
Инициализация аппарата...........................................................................................................................38
Действия, выполняемые вручную............................................................................................................39
Основное руководство пользователя аппарата Dako Omnis - D09S14. ред. 20 стр. 4 из 223
--- стр. 8 ---
Раздел 7. Общее описание процессов.......................................................40
Общая схема процедуры иммуногистохимического окрашивания (IHC) .........................................40
Порядок проведения процедуры иммуногистохимического окрашивания (IHC) ............................41
Общая схема процедуры окрашивания методом гибридизации in situ (ISH)....................................42
Порядок проведения процедуры окрашивания методом гибридизации in situ (ISH)......................43
Раздел 8. Запрос предметных стекол.......................................................44
Запрос предметных стекол с помощью программного обеспечения DakoLink Omnis
Workstation.....................................................................................................................................................44
Раздел 9. Загрузка предметных стекол....................................................50
Область «Slide Labels» (Этикетки для предметных стекол)..................................................................51
Размещение предметных стекол в штативе............................................................................................52
Загрузка предметных стекол......................................................................................................................54
Вместимость аппарата.................................................................................................................................56
Необработанные («сухие») предметные стекла......................................................................................57
Предварительно обработанные («влажные») предметные стекла......................................................57
Раздел 10. Стрипы для смешивания .........................................................59
Загрузка стрипов для смешивания...........................................................................................................59
Раздел 11. Флаконы с реагентами .............................................................62
Загрузка флаконов с реагентами..............................................................................................................62
Перемешивание зонда для ISH до загрузки............................................................................................65
Регистрация реагентов................................................................................................................................67
Загрузка флаконов с реагентами в ходе окрашивания.........................................................................68
Раздел 12. Деионизированная вода ..........................................................71
Описание бутылей.........................................................................................................................................72
Загрузка воды................................................................................................................................................72
Цветовая маркировка бутылей..................................................................................................................73
Раздел 13. Отходы............................................................................................76
Выгрузка отходов..........................................................................................................................................77
Основное руководство пользователя аппарата Dako Omnis — D09514, ред. 20 стр. 5 из 223
--- стр. 9 ---
Раздел 14. Бутыли малого размера (промывочный буфер,
растворитель, буфер для предварительной обработки) .....................79
Цветные этикетки для бутылей малого размера..................................................................................80
Загрузка бутылей.........................................................................................................................................80
Раздел 15. Крышки для гибридизации in situ (ISH) .............................84
Описание крышек для ISH..........................................................................................................................84
Загрузка крышек..........................................................................................................................................85
Раздел 16. Выгрузка использованных крышек .....................................87
Выгрузка использованных крышек.........................................................................................................87
Раздел 17. Окрашивание................................................................................89
Начало окрашивания...................................................................................................................................90
Информация о предметных стеклах........................................................................................................90
Ночное окрашивание...................................................................................................................................92
Раздел 18. Процесс окрашивания..............................................................95
Контроль за предметными стеклами во время окрашивания............................................................95
Контроль за аппаратом во время окрашивания....................................................................................96
Раздел 19. Выгрузка окрашенных предметных стекол ......................99
Выгрузка предметных стекол..................................................................................................................100
Извлечение предметных стекол из штатива.........................................................................................103
Раздел 20. Выключение аппарата............................................................104
Выключение аппарата...............................................................................................................................104
Раздел 21. Информация о предметных стеклах..................................106
Информация о штативе для предметных стекол.................................................................................106
Всплывающее окно с информацией о стеклах.....................................................................................109
Раздел 22. Информация о реагентах ......................................................110
Информация о флаконах..........................................................................................................................110
Всплывающее окно с информацией о флаконах.................................................................................114
Всплывающее окно с информацией о необходимых продуктах.......................................................115
Информация о бутылях.............................................................................................................................117
Основное руководство пользователя аппарата Оако Omnis - D09514, ред. 20 стр. 6 из 223
--- стр. 32 ---
15. Сенсорный экран
Прикреплен к регулируемому кронштейну с
правой стороны аппарата. Сенсорный экран
можно поднимать и опускать для большего
удобства пользователя. Контроль
процедуры окрашивания осуществляется с
помощью графического пользовательского
интерфейса на сенсорном экране.
16. Предупреждающий световой
индикатор
Расположен в передней верхней части
аппарата. Если предупреждающий
индикатор горит зеленым светом,
вмешательство пользователя в работу
аппарата не требуется. Если
предупреждающий индикатор горит
красным или желтым светом, пользователь
должен выполнить определенные действия:
красный свет указывает на необходимость
немедленного вмешательства, а желтый
свет предупреждает пользователя
о предстоящих действиях.
Если индикатор горит синим светом, это
означает, что выполняется техническое
обслуживание.
В дополнение к предупреждающему
световому сигналу можно настроить
звуковой сигнал тревоги. Звук сигнала
тревоги можно отключить, коснувшись
экрана.
17. Устройство перемешивания зокцов
для ISH
Отдельное устройство, предназначенное для
перемешивания применяемых в аппарате
Dako Omnis зондов для 1SH. Подсоединяется
к рабочей станции с помощью USB-кабеля.
Для этого устройства предусмотрены два
режима работы; 1) разморозка и
перемешивание; 2) только перемешивание.
На дисплее отображается информация о
ходе выполнения перемешивания.
Дополнительная информация содержится
в отдельном руководстве пользователя
устройства перемешивания зондов для ISH
Dako Omnis.
ITIт i
Основное руководство пользователя аппарата Dako Omnis — D09514, ред. 20 стр. 29 из 223
--- стр. 33 ---
в данном разделе содержится описание рабочей станции, на которой установлено программное
обеспечение DakoLink Omnis Workstation.
Рабочая станция DakoLink Omnis Workstation
К ' Е гтш
Federer
•Н « « «
1 D jR O и л и O R H M
6 3 9 9 5 0 о 4 3 8 0
Г H e w e v le e
Рабочая станция на базе ПК
Рабочая станция DakoLink Omnis представляет собой ПК с операционной системой Microsoft
Windows®, подсоединенный к центральному серверу базы данных DakoLink Omnis.
С помощью данной рабочей станции пользователь получает полный доступ к базе данных,
содержащей все протоколы и архивы данных об уже обработанных предметных стеклах для
всех аппаратов Dako Omnis, подсоединенных к центральному серверу. Каждый установленный
экземпляр программного обеспечения рабочей станции позволяет контролировать до восьми
аппаратов Dako Omnis и осуществлять управление ими в локальной вычислительной сети
(ЛВС). Общая сеть может объединять до 10 рабочих станций.
Примечание. Каждый установленный экземпляр приложения обеспечивает работу
центрального сервера базы данных, где хранится вся информация, включая
подробные сведения о каждом окрашенном стекле. База данных хранится на
одном сервере, вне зависимости от количества подсоединенных аппаратов
Dako Omnis. Программное обеспечение сервера DakoLink Omnis управляет
хранилищем данных.
Примечание. Технические характеристики рабочей станции на базе ПК и монитора могут быть
изменены.
Основное руководство пользователя аппарата Dako Omnis - D09514, ред. 20 стр, 30 из 223
--- стр. 34 ---
программное обеспечение DakoLink Omnis Workstation выполняет функцию пользовательского
интерфейса для ввода данных пациентов, редактирования протоколов, регистрации реагентов и
просмотра сведений об окрашенных стеклах. Программное обеспечение рабочей станции
используется для управления несколькими аппаратами Dako Omnis, подключенными к одному
и тому же серверу с помощью ЛВС.
Подробные сведения приведены в расширенном руководстве пользователя аппарата
Dako Omnis.
3 Z G
Программное обеспечение DakoLink Omnis Workstation
^D ^U n fcO > n n ttW o ffca» » etf'
Request new stKMs X i invtntofy < I ln»tnnn«nt3
Federer
S IM M
Dako
Dako Link Omnis
639 9 50 0 438 0
BequtsWd fte*dy UnkM Stamed иЫомМ Compiettd today
Actfont
Raquest now slides
Svorttut to'*qu«U new
tMei
Reqister new items
Shortcut to reqew» new
items
1
Inventoiy
Menage reagent S la d e teveb.
Product tibrary
View Овка ptoducl
OeSnitions and create custom
ones.
fiH Protocol titifary
View Otto protoeeh and
create cwttom ones.
Configuration
CorAgure system settings.
О Barcode reader disconnected
Примечание. За дополнительной информацией о конфигурациях ЛВС или ЛИС обращайтесь
к представителю компании Dako.
С помощью любого компьютера, на котором установлено программное обеспечение
DakoLink Omnis. можно запрашивать предметные стекла, регистрировать реагенты и выполнять
другие операции для всех подключенных аппаратов Dako Omnis. Аппараты, подсоединенные к
DakoLink, могут работать вместе с аппаратом Dako Omnis в одной установленной системе. За
дополнительной информацией об этой конфигурации обращайтесь к представителю компании
Dako.
Основное руководство пользователя аппарата Dako Omnis — D09514, ред. 20 стр. 31 из 223
--- стр. 60 ---
Необработанные («сухие») предметные стекла
Чаще всего в аппарате Dako Omnis используются необработанные («сухие») предметные стекла.
Необработанные («сухие») микропрепараты - это стекла со срезами тканей FFPE, которые ыё
подвергались депарафинизации или предварительной обработке перед загрузкой в аппарат
Dako Omnis. Первым этапом для необработанных («сухих») предметных стекол является их
перемещение в один из трех модулей РТ.
Процесс загрузки необработанных («сухих») предметных стекол не ограничен по времени.
Загрузка в аппарат необработанных («сухих») предметных стекол выполняется следующим
образом;
1. Нажмите кнопку Load slides (Загрузить стекла) на главном экране.
2. Нажмите кнопку извлечения, чтобы открыть соответствующий пустой лоток.
3. Загрузите штатив с «сухими» предметными стеклами в открытый лоток.
4. Нажмите кнопку извлечения, чтобы закрыть лоток.
5. Повторяйте эти шаги до тех пор, пока не загрузите все штативы.
6. Нажмите кнопку Done (Готово), чтобы отправить «сухие» предметные стекла на
обработку.
Обработка «сухих» предметных стекол в аппарате Dako Omnis осуществляется в соответствии с
их протоколами, начиная с этапа предварительной обработки в модулях РТ,
Предварительно обработанные («влажные») предметные стекла
Обычно предварительно обработанные («влажные») предметные стекла загружаются в аппарат
Dako Omnis гораздо реже, чем необработанные («сухие») стекла. Предварительно обработанные
(«влажные») микропрепараты - это стекла со срезами тканей FFPE, которые были подвергнуты
депарафинизации или предварительной обработке перед загрузкой в аппарат Dako Omnis.
Высыхание может негативно повлиять на срезы тканей, поэтому предварительно
обработанные стекла можно вынимать из деионизированной воды или промывочного буфера
на очень короткое время (не более чем на 2 минуты).
Загрузка в аппарат предварительно обработанных («влажных») предметных стекол
выполняется следующим образом;
1.
2.
3.
4.
Нажмите кнопку Load slides (Загрузить стекла) на главном экране.
Нажмите кнопку извлечения, чтобы открыть соответствующий пустой лоток.
Загрузите штатив с «влажными» предметными стеклами непосредственно из емкости
для влажного хранения (например, из бачка для промывки) в открытый лоток. Удалите
любые капли жидкости с этикетки, чтобы обеспечить правильное считывание
штрихкода.
Нажмите кнопку извлечения, чтобы закрыть лоток.
После закрытия лотка сканер считывает штрихкоды предметных стекол. На экране Load slides
(Загрузка стекол) значки, обозначающие предварительно обработанные («влажные»)
предметные стекла, отмечены условным изображением капли голубого цвета.
Желтый таймер обратного отсчета, установленный на 2 минуты, показывает, сколько времени
осталось до отправки «влажных» предметных стекол на обработку.
Основное руководство пользователя аппарата Dako Omnis — D09514, ред. 20 стр. 57 из 223
--- стр. 61 ---
102 М 0;20 9 2:10 h ■12:30 |
I ^ 1 :S 2 s |
Нажмите кнопку Done (Готово), чтобы отправить «влажные» предметные стекла на обработку.
Примечание. Когда до нажатия кнопки Done (Готово) остается менее 30 секунд, цвет
таймера становится красным.
По истечении установленного времени на значках, обозначающих предметные стекла, появятся
желтые треугольники (значки «ВНИМАНИЕ!»);
□
В этом случае аппарат Dako Omnis выполнит обработку предметных стекол в соответствии с их
протоколами, однако значок «ВНИМАНИЕ!» означает, что параметры окрашивания могут быть
неоптимальными.
102 »10:20 9 2:10 h ■ 1230
- - i - - j
Примечание. Если кнопка Done (Готово) неактивна, это означает, что в аппарате в данный
момент нет места для загрузки «влажных» стекол. В этом случае поместите
предметные стекла обратно в емкость для влажного хранения.
Примечание. Окрашивание предварительно обработанных («влажных») предметных стекол
нельзя откладывать на ночь.
Основное руководство пользователя аппарата Dako Omnts — D09514. ред. 20 стр. 58 из 223
--- стр. 62 ---
Раздел 10. Стрипы для смешивания
Agilent
Dako
Смешивание реагентов в аппарате осуществляется с помощью стрипов для смешивания.
Стрипы устанавливаются в узел смешивания, рассчитанный на 5 стрипов (по 10 ячеек для
смешивания в каждом), В ходе процедуры завершения работы аппарата необходимо
утилизировать использованные стрипы для смешивания и заменить их новыми стрипами. Не
оставляйте позиции узла смешивания пустыми.
Загрузка стрипов для смешивания
Если в аппарат Dako Omnis требуется загрузить стрипы для смешивания, в области вкладок
появится вкладка Mixing (Смешивание). В процессе загрузки для того, чтобы пользователь мог
открыть переднюю панель и получить доступ к узлу смешивания, аппарат должен находиться в
режиме ожидания.
1. Нажмите на вкладку Mixing (Смешивание), чтобы открыть экран Repiace nnixing strips
(Замена стрипов для смешивания).
Replace mixing strips
Open th e fro n t c o v w and rem ove aH used raodng strips P ress *Rertx)ved* to conlirH je
Removed
Основное руководство пользователя аппарата Dako Omnis — D09514, ред. 20 стр. 59 из 223
--- стр. 73 ---
примечание. Фактическая температура в модуле хранения реагентов отображается на
экране Load reagent (Загрузка реагентов).
EDVHRP
1 3 4 1 П » E n V S u b e u r
Z-Mm.
EnVDAa*
081 m t
S U IT А СИ
ia«mi
i f l S n iC Z=3
1 ■ *в ’ШЯШ L .J
Основное руководство пользователя аппарата Dako Omnts - D09514, ред. 20 стр. 70 из 223
--- стр. 74 ---
Agilent
Dako
Р а зд е л 12 . Д е и о н и зи р о в а н н а я вода
В ходе инициализации аппарата в него необходимо загружать деионизированную воду. Аппарат
Dako Onnnis вмещает четыре бутыли с деионизированной водой (емкостью 7.0 л), которые
устанавливаются в левом отсеке. Встроенные весы непрерывно взвешивают каждую бутыль
для определения объема оставшейся воды. Система предупреждает пользователей о
необходимости заправки бутылей. Бутыли можно заполнять деионизированной водой во время
активной обработки предметных стекол в аппарате Dako Omnis.
Цветовая маркировка бутылей с деионизированной водой
На ручки четырех бутылей для деионизированной воды с серыми соединителями можно
наклеить этикетки синего цвета. Позиции для размещения этих бутылей в соответствующем
модуле также обозначены синим цветом.
Основное руководство пользователя аппарата Dako Omnis — D09514, ред. 20 стр. 71 из 223
--- стр. 75 ---
Описание бутылей
Бутыли Dako Omnis выпускаются в двух объемах; 3,5 и 7,0 л. Бутыли обоих типов одинаковы по
своей конструкции.
Бутыли подключаются к нужным
модулям с помощью трубок и
соединителей серого или красного
цвета.
^ - Бутыли снабжены ручками для
более удобной переноски.
Мембрана в крышке бутыли
предотвращает образование
давления/вакуума, которые могут
f y препятствовать активному
движению воды по трубкам.
Наличие соединителей исключает
возможность неправильной
установки бутылей.
Для правильной установки в аппарат бутыли Dako снабжены цветными этикетками и
маркировочными втулками. Подробные сведения приведены далее в этом разделе.
Загрузка воды
Появление вкладки Water (Вода) в области вкладок означает, что в аппарате Dako Omnis
недостаточно деионизированной воды для обработки загруженных стекол.
1. Нажмите на вкладку Water (Вода), чтобы открыть экран Load water (Загрузка воды).
L o a d w a te r
' Э С 1 ап * 0 1 яо (в а« * М Ы > 1 « М Р гМ М 1 > М М кфимжм H M o a d Ь о м * b y ptnv<e и п И * ctcM п р1аа
Основное руководство пользователя аппарата Dako Omnis — D09514, ред. 20 стр. 72 из 223
--- стр. 76 ---
Четыре значка, изображающих бутыли с водой, показывают, какое количество воды в данный
момент находится в аппарате. Каждый значок соответствует одной из бутылей, загруженных в
аппарат. Экран Load water (Загрузка воды) показывает, являются ли бутыли пустыми или в них
имеется вода.
2. Откройте дверцу отсека для бутылей с деионизированной водой.
А Будьте осторожны, чтобы не удариться об открытую дверцу.
3. Нажмите кнопку извлечения на изображении пустой бутыли для деионизированной
воды.
4. Извлеките выбранную бутыль из аппарата.
5. Осторожно поместите в эту же позицию бутыль, заполненную деионизированной водой.
6. Вставьте бутыль до щелчка, чтобы заблокировать ее.
7. При необходимости повторите эти действия для других бутылей.
8. Закройте дверцу отсека.
9. Нажмите кнопку Done (Готово), чтобы закрыть вкладку Water (Вода).
После загрузки полной бутыли с деионизированной водой в аппарат данные на экране Load
water (Загрузка воды) обновятся автоматически.
Значок с изображением замка показывает, что бутыль используется в
настоящий момент или зарезервирована для текущего процесса окрашивания.
Примечание. Каждый раз после использования бутылей для воды необходимо проводить их
чистку. Компания Dako рекомендует использовать для этого посудомоечную
машину. Рекомендуется иметь дополнительный комплект бутылей для их
быстрой замены.
Примечание. Деионизированная вода должна иметь следующие характеристики:
Электропроводность от 0.5 до 10 мкСм/см
Отсутствие твердых частиц и пузырьков воздуха
Температура, соответствующая обычной комнатной температуре (20-25 “С)
Ц ветовая маркировка бутылей
Чтобы обеспечить правильную загрузку бутылей в аппарат, перед их первым использованием
необходимо наклеить на их ручки этикетки с цветовой маркировкой. Маркировка на этих
этикетках соответствует маркировке позиций в аппарате.
На рисунке ниже представлена общая схема размещения бутылей в аппарате.
Основное руководство пользователя аппарата Dako Omnis - D09514. ред. 20 стр. 73 из 223
--- стр. 77 ---
с з д и к
Компания Dako выпускает следующие этикетки с цветовой маркировкой (см, рисунок выше).
Бутыли большого объема:
Синий цвет - бутыли для деионизированной воды, емкость 7,0 л Ш
Оранжевый цвет — бутыли для неопасных отходов, емкость 7,0 л В
Коричневый цвет - бутыли для опасных отходов, емкость 7.0 л В
Бутыли малого объема:
Зеленый цвет — бутыли для промывочного буфера, емкость 3,5 л В
Пурпурный цвет — бутыль для растворителя для предварительной
обработки, емкость 3.5 л В
Голубой цвет — бутыли для буфера для предварительной обработки (РТ).
емкость 3,5 л В
Наклеивание этикеток на бутыли:
1. Протрите ручку бутыли 70 % раствором изопропилового спирта для лучшего сцепления.
2. Наклейте этикетку с цветовой маркировкой на ручку, отступив примерно 1,5 см от
нижнего края.
Помимо таких этикеток компания Dako рекомендует
использовать маркировочные втулки, которые
устанавливаются в разные отверстия с задней
стороны бутылей в зависимости от их назначения.
Использование маркировочных втулок позволяет
избежать неправильной установки бутылей
в аппарате. Соединители входят в комплект
поставки бутылей.
Й1 0 $
3. Установите маркировочные втулки, как
показано на схеме ниже.
Основное руководство пользователя аппарата Dako Omnis — D09514, ред. 20 стр. 74 из 223
--- стр. 78 ---
Бутыль емкостью Деионизированная
7,0 л вода
Неопасные отходы
Опасные отходы
Бутыли емкостью Растворитель
3,5 л
Промывочный буфер
Буфер РТ
> <
> <> <
> <
> с
Основное руководство пользователя аппарата Dako Omnis - D09514, ред. 20 стр. 75 из 223
--- стр. 79 ---
Р а зд е л 13 . О тход ы
Agilent
Dako
В процессе окрашивания в аппарате Dako Omnis образуются жидкие отходы. Необходимо
ежедневно извлекать из аппарата бутыли с жидкими отходами (удобнее всего делать это в
конце рабочего дня).
В аппарат Dako Omnis можно установить четыре бутыли для неопасных отходов (емкостью 7,0 л) и
одну бутыль для опасных отходов (емкостью 7.0 л). Бутыли для жидких отходов устанавливаются
рядом с бутылями для деионизированной воды. Встроенные весы непрерывно взвешивают
каждую бутыль для определения оставшегося свободного места. Система предупреждает
пользователей о необходимости извлечения бутылей. Бутыли с отходами можно извлекать во
время активной обработки предметных стекол в аппарате Dako Omnis.
Примечание. Поскольку в аппарат Dako Omnis можно установить только одну бутыль для
опасных отходов, рекомендуется опорожнять ее ежедневно, чтобы
использовать для сбора опасных отходов весь свободный объем.
Цветовая маркировка отходов
На ручках четырех бутылей для неопасных отходов с красными соединителями находятся
этикетки оранжевого цвета. Позиции для размещения этих бутылей в соответствующем модуле
также обозначены оранжевым цветом.
На ручке одной бутыли для опасных отходов с красным соединителем находится этикетка
коричневого цвета. Позиция для размещения этой бутыли в соответствующем модуле также
обозначена коричневым цветом.
Основное руководство пользователя аппарата Dako Omnis - D09514, ред. 20 стр. 76 из 223
--- стр. 80 ---
Вь!грузка отходов
Компания Dako рекомендует ежедневно опорожнять все бутыли для отходов, используемые в
аппарате Dako Omnis. Если в течение дня для работы аппарата понадобится свободная емкость
для отходов, необходимо опорожнить заполненную бутыль или заменить ее.
Примечание. Необходимо особенно внимательно следить за своевременным удалением
опасных отходов, поскольку для них в аппарате предусмотрена только одна
бутыль.
Появление вкладки Waste (Отходы) в области вкладок указывает на необходимость удаления
отходов.
1. Нажмите на вкладку Waste (Отходы), чтобы открыть экран Unload waste (Удаление
отходов).
Unload waste container
Eject one O f more aviMebiewsstebotSes end as needed Keioadthebottlebypressoguntitckcta in place
Q a aL W u w 1!(
п (J U B T ltty691. n n to M iiyS9L C V lM tV
i U ш e l O u a n u ty e.i L
Ha экране Unload waste (Удаление отходов) отображается состояние пяти бутылей для отходов:
четыре бутыли слева предназначены для неопасных отходов (обозначены оранжевым цветом),
а крайняя правая бутыль — для опасных отходов (обозначена коричневым цветом).
2. Откройте дверцу отсека для бутылей с отходами.
А Будьте осторожны, чтобы не удариться об открытую дверцу.
3. Нажмите кнопку извлечения на изображении заполненной бутыли с отходами.
4. Извлеките выбранную бутыль с отходами. Обязательно используйте при этом
защитные перчатки!
5. Утилизируйте отходы.
6. Поместите пустую бутыль для отходов в пустую позицию.
7. Вставьте пустую бутыль для отходов до щелчка, чтобы заблокировать ее.
Основное руководство пользователя аппарата Dako Omnis - D09514, ред. 20 стр. 77 из 223
--- стр. 81 ---
8. При необходимости повторите эти действия для других бутылей.
9. Нажмите кнопку Done (Готово), чтобы закрыть вкладку Waste (Отходы),
После загрузки пустой бутыли для отходов в аппарат данные на экране Unload waste (Удаление
отходов) обновятся автоматически.
Я
Значок с изображением замка показывает, что бутыль
используется в настоящий момент или зарезервирована для
текущего процесса окрашивания.
Серым цветом обозначен зарезервированный объем.
А Все отходы необходимо обрабатывать и утилизировать в соответствии
с действующими местными, региональными и федеральными нормативными
требованиями. Руководитель отдела техники безопасности или руководитель
лаборатории несет ответственность за определение фактических компонентов
отходов и их объемов для обеспечения полного соответствия требованиям
утилизации отходов.
Примечание. Каждый раз после использования бутылей для отходов необходимо проводить
их чистку. Компания Dako рекомендует использовать для этого посудомоечную
машину. Рекомендуется иметь дополнительный комплект бутылей для их
быстрой замены.
А Во время очистки бутылей для отходов важно соблюдать особую осторожность при
обращении с бутылями для опасных отходов. Используйте защитные перчатки!
Основное руководство пользователя аппарата Dako Omnis - D09514, ред. 20 стр. 78 из 223
--- стр. 82 ---
Agilent
Dako
Р а зд е л 14 . Б уты л и м а л о го р азм ер а (п р о м ы в о ч н ы й буф ер,
р аствори тел ь, буф ер для п р е д вар и тел ьн ой обработки)
n i l
Ежедневно в ходе инициализации аппарата в него необходимо загружать промывочный буфер,
растворитель и буферы РТ. Аппарат Dako Omnis вмещает восемь бутылей малого размера
(емкостью 3,5 л), для которых предназначены два небольших отсека в правой части аппарата.
Встроенные весы непрерывно взвешивают каждую бутыль для определения объема
оставшейся воды. Система предупреждает пользователей о необходимости заправки бутылей.
Бутыли можно заполнять деионизированной водой во время активной обработки предметных
стекол в аппарате Dako Omnis.
Цветовая маркировка бутылей малого размера
На ручку двух бутылей для промывочного буфера с серыми соединителями можно наклеить
этикетки зеленого цвета. Позиции для размещения этих бутылей в соответствующем модуле
также обозначены зеленым цветом.
На ручку одной бутыли для растворителя с серым соединителем можно наклеить этикетку
пурпурного цвета. Позиция для размещения этой бутыли в соответствующем модуле также
обозначена пурпурной маркировкой.
На ручку пяти бутылей для буфера РТ с серыми соединителями можно наклеить этикетки
голубого цвета. Позиции для размещения этих бутылей в соответствующем модуле также
обозначены голубым цветом.
Основное руководство пользователя аппарата Dako Omnis - D09514, ред. 20 стр. 79 из 223
--- стр. 83 ---
На экране аппарата Dako Omnis и рабочей станции соответствующие значки бутылей
обозначаются такими же цветами, чтобы обеспечить правильную загрузку бутылей.
Цветные этикетки для бутылей малого размера
Компания Dako выпускает этикетки с цветовой маркировкой, штрихкодами и
идентификационными номерами для бутылей малого размера;
Зеленый цвет — бутыли для промывочного
буфера, емкость 3.5 л
Пурпурный цвет — бутыль для растворителя
для предварительной обработки, емкость
3.5 л
Голубой цвет — бутыли для буфера для
предварительной обработки (РТ), емкость
3.5 л
РТВ
Штрихкод
Идентификационный
номер бутыли
Цвет и сокращенное
обозначение
Идентификационный номер используется для идентификации бутыли аппаратом.
Загрузка бутылей
Компания Dako рекомендует ежедневно наполнять все бутыли, используемые в аппарате
Dako Omnis. Это обеспечит наличие в аппарате достаточного количества всех необходимых
жидкостей для обработки максимального количества предметных стекол в течение рабочего
дня. Появление вкладки Bulk (Бутыли) в области вкладок означает, что в аппарате Dako Omnis
недостаточно промывочного буфера, растворителя или буфера РТ для обработки загруженных
стекол.
Промывочный буфер и буфер РТ для аппарата Dako Omnis перед использованием необходимо
разводить (в соотношении 1:20 или 1:50), тогда как растворитель готов к применению.
Примечание. Аппарат Dako Omnis прошел испытания с использованием растворителя
Ciearify (GC81030).
Примечание. Перед использованием буферов убедитесь, что они доведены до комнатной
температуры (20-25 ®С),
Основное руководство пользователя аппарата Dako Omnis — D09S14, ред. 20 стр. 80 из 223
--- стр. 84 ---
1. Нажмите на вкладку Bulk (Бутыли), чтобы открыть экран Load bulk (Загрузка бутылей),
j Odin
Load bulk
Elect one or more evalabio bulk bcflles and fill гф as needed Reload the bn№e bv (Kessmg unU il ticks n piece
R eqim d
401 W B W S 402
— 1 0 »0 0 0 0 0 0 0 12.
{ ■ ’Ф Г а а о л
ш
4П 2/20иO u a n w y21L а
L o t0 0 0 0 0 0 0 1expm £f> n4 C K V 2 0 1 3O u a n d lY
16L
404
Ш
Ш0 0 0 0 0 0 0 1 fx p ia e o n
4 /1 2 i2 0 1 3 O u a n W v 1 .8 L
403 C M a rtfy I8 H P T B W S IS H S T 8 W S
L o t L o r
407
L O T 3.2 6 1 6 4 1 6 5Eipnlion4 /1 М 0 1 3O u s n U y1 а
0 0 0 0 0 0 0 1D ip riM o n4 /1 1 /2 0 1 3Q u w iU iy e
0 0 0 0 0 0 0 1& ф к а О М 14 Л 1 /2 0 1 3O U 4 n tly1 .3 U 23/2.5L 1.4/1.8L
Done
Восемь значков, изображающих бутыли, показывают пустые и/или заполненные позиции в
аппарате. Каждый значок соответствует одной из фактических позиций для загрузки бутылей.
Наличие кнопки извлечения означает, что бутыль доступна для использования (1), а значок
замка указывает, что бутыль заблокирована (2). Значки без каких-либо условных изображений
обозначают пустые позиции (3).
Для значков бутылей используется следующая цветовая маркировка;
• Два зеленых значка обозначают бутыли для промывочного буфера I
• Один пурпурный значок обозначает бутыль для растворителя Ш
• Пять голубых значков обозначают бутыли для буфера РТ В
2. Определите, какие бутыли нужно загрузить, с помощью списка необходимых бутылей (в
верхнем правом углу).
4. Выберите соответствующую бутыль.
О сновное руководство пользователя аппарата Dako Omnis - D09514, ред. 20 стр. 81 из 223
--- стр. 85 ---
3. Для буферов, разводимых в соотношении 1:20;
а. Наполните бутыль деионизированной водой комнатной температуры (3,325 л) до
отметки наполнения. Перед наполнением поместите бутыль на ровную
горизонтальную поверхность.
H iU E v a <- Отметка наполнения
0
с.
d.
Ь. Добавьте в бутыль весь концентрированный буфер Dako, предназначенный
для разведения в соотношении 1:20 (из флакона объемом 175 мл).
Снимите с флакона из-под концентрированного буфера отрывную этикетку и
наклейте ее на бутыль с разбавленным буфером.
Закройте бутыль крышкой и аккуратно переверните ее 4-5 раз. чтобы
надлежащим образом перемешать ее содержимое.
4. Для буферов, разводимых в соотношении 1:50:
а. Наполните бутыль деионизированной водой комнатной температуры
(3,325 л) до отметки наполнения. Перед наполнением поместите бутыль на
ровную горизонтальную поверхность.
Добавьте в бутыль весь концентрированный буфер Dako, предназначенный
для разведения в соотношении 1:50 (из флакона объемом 68 мл).
Снимите с флакона из-под концентрированного буфера отрывную этикетку и
наклейте ее на бутыль с разбавленным буфером.
d. Закройте бутыль крышкой и аккуратно переверните ее 4-5 раз. чтобы
надлежащим образом перемешать ее содержимое.
5. Для растворителя (готов к применению):
a. Наполните бутыль растворителем Clearify (3,325 л) до отметки наполнения.
Обязательно используйте защитные перчатки!
b. Закройте бутыль крышкой.
6. Зарегистрируйте бутыль на экране Inventory (Запасы) рабочей станции DakoLink Omnis
(как описано в разделе 11 «Флаконы с реагентами»).
7. Откройте дверцу отсека для бутылей малого размера (в правой части аппарата
Dako Omnis).
b.
с.
А Будьте осторожны, чтобы не удариться об открытую дверцу.
8. Нажмите кнопку извлечения на изображении нужной пустой бутыли или на любой из
бутылей нужного типа.
Основное руководство пользователя аппарата Dako Omnis - D09S14, ред. 20 стр. 82 из 223
--- стр. 108 ---
3. Для выполнения необходимых операций вручную нажмите на соответствующую вкладку
в области вкладок и выполните указанные операции. Выполненные действия отмечены
зелеными галочками.
4. Дождитесь выполнения автоматических действий. Выполненные действия отмечены
зелеными галочками.
5. Нажмите на кнопку Proceed (Далее) над разделительной линией, когда линия станет
красной.
Odin Shutdown J Slides ♦
System shutdown
Разделительная
линия
О Unload slides and remove water from wet unloading compartments
О Unload vials
О Unload lids
Remove the (asposable beg contanne any used kd sin xn the s o M tn s te d in ra r Replace
wet) 3 dean beg. ffw n m enualy cioce the diaw ei
О Proceed with shutdown sequence
By p re s s if^ 'Proceed* the shutdown sequence c o n ln ie s and can no longer be cancelled
О U r^k / Unregt^r Bulk
О Unlock front cover
О Remove used mixing strips
О Shut dcjwn insfrument
Force
После нажатия кнопки Proceed (Далее) цикл выключения нельзя отменить.
В процессе выключения аппарата необходимо заменить использованные стрипы для
смешивания. Это важно, поскольку аппарат не отслеживает состояние стрипов для
смешивания после выключения. Несоблюдение требования о замене использованных стрипов
может привести к загрязнению реагентов и получению неверных результатов.
Примечание. Обязательно закрывайте откидные колпачки крышек флаконов с реагентами
после извлечения их из аппарата. В противном случае реагент может
испариться.
Основное руководство пользователя аппарата Dako Omnis - D09514, ред. 20 стр. 105 из 223
--- стр. 109 ---
Раздел 21. Информация о предметных стеклах
Agilent
Da ко
ш
в данном разделе представлен обзор сведений о предметных стеклах, которые содержатся во
всплывающем окне с увеличенными изображениями предметных стекол на сенсорном экране.
Информация о штативе для предметных стекол
Нажмите на значок штатива для стекол в области состояния предметных стекол на главном
экране чтобы открыть увеличенное изображение штатива. Аналогичным образом информация
о штативе для стекол отображается после выбора лотка на экране Load slides (Загрузка стекол).
Slide Ю
ОаЮ2а-2б
Test
Protocol
BCL2
Status
Normal
1. Необходимость вмешательства
2. Регистрационный номер
3. Время, оставшееся до
запланированной обработки
4. Свойства стекла
Пустые позиции штатива для стекол обозначаются следующим образом.
Пустая позиция для
предметного стекла
На рисунке ниже приведено изображение занятой позиции предметного стекла в штативе
(цветная маркировка указывает на наличие/отсутствие необходимости вмешательства).
Oat02a-26
BCL2
У
Позиция штатива, занятая стеклом
с нормальным статусом (квадрат
зеленого цвета)
Основное руководство пользователя аппарата Dako Omnts — D09514, ред. 20 стр. 106 из 223
--- стр. 110 ---
в таблице ниже представлена расшифровка значков штативов для стекол.
Значок 1. Необходимость вмешательства
Вмешательство не требуется.
Стекло готово к окрашиванию.
С
Требуется вмешательство в течение установленного времени.
Можно начать процедуру окрашивания.
т Отсутствуют расходные материалы или недостаточно свободного места для
отходов.
Требуется вмешательство.
Требуется немедленное вмешательство.
Невозможно начать окрашивание.
Невозможно считать штрихкод.
Требуется немедленное вмешательство.
Несовместимые протоколы обработки предметных стекол — требуется
немедленное вмешательство.
Буквами обозначены находящиеся в одном штативе стекла, относящиеся к
разным группам совместимости.
В одном штативе находятся предметные стекла, относящиеся к
несовместимым группам, например, стекла, для предварительной обработки
которых используются разные буферы РТ (с низким и высоким pH). Оставьте в
штативе стекла, обозначенные буквой «А», и извлеките стекла, обозначенные
б у к в о й «В» (и л и «С» и Т.П.).
Откройте лоток и извлеките штатив.
Извлеките одно или несколько стекол, обозначенных буквой «В», из
штатива.
Снова поместите штатив в лоток.
- Нажмите кнопку извлечения, чтобы закрыть лоток.
Продолжите работу в обычном порядке.
Кроме того, здесь отображается значок очередности, который показывает, что
обработка данного штатива не может быть начата (см. ниже).
Нарушение последовательности рабочих операций — требуется немедленное
вмешательство.
Необходимо извлечь стекло и назначить ему протокол с помощью ЛИС или
рабочей станции.
О сновное руководство пользователя аппарата Dako Omnis - D09514, ред. 20 СТр. 107 из 223
--- стр. 124 ---
2. Нажмите кнопку Maintenance (Техобслуживание).
Maintenance |
Optional
Errors
Change language
Schedule
Disable modules
About
Shutdown
в области вкладок появится вкладка Maintenance (Техобслуживание) и откроется экран Perform
maintenance (Проведение техобслуживания). На этом экране содержится список всех процедур
обязательного технического обслуживания. Поскольку весь список не помещается на экране,
его можно прокручивать вверх и вниз с помощью соответствующих кнопок.
О сновное руководство пользователя аппарата Dako Omnis - D09514, ред. 20 стр. 121 из 223
--- стр. 125 ---
RA2242
Perform maintenance
О Clean liquid system _ 8of8days ]'
О Liquid system leakage test 9 of 14 days
i ^
Check Liquid Handling Robot reference position 17 of 30 days
E
Clean accessories 17 of 30 days
1
Check Liquid Handling Robot
4
^ 15 of 30 days j
f J
Perform
Кнопка
прокрутки
вверх
Perform
Perform Кнопка
прокрутки
вниз
Done
Примечание. Периодичность обязательного технического обслуживания может быть
настроена на рабочей станции DakoLink Omnis. Подробные сведения содержатся
в расширенном руководстве пользователя аппарата Dako Omnis.
При выполнении процедуры технического обслуживания предупреждающий индикатор
загорается синим светом. Мигание индикатора синим светом указывает на необходимость
вмешательства пользователя.
Экран Perform maintenance (Проведение техобслуживания) содержит полный список всех
операций техобслуживания. В каждом пункте этого списка находится строка состояния,
которая показывает, сколько времени осталось до очередного выполнения данной операции.
Рядом с каждой доступной операцией технического обслуживания находится активная кнопка
Perform (Выполнить).
Perform
Цвет указывает на срочность проведения техобслуживания: желтый цвет означает
необходимость выполнения операции технического обслуживания в ближайшем будущем, а
красный цвет — срочную необходимость проведения техобслуживания или нарушение
интервала технического обслуживания. Аналогичная цветовая маркировка используется для
сообщения Maintenance (Техобслуживание) в области вкладок.
Для выполнения операции технического обслуживания:
1. Нажмите активную кнопку Perform (Выполнить). Откроется соответствующий экран.
Основное руководство пользователя аппарата Dako Omnis - D09514, ред. 20 стр. 122 из 223
--- стр. 126 ---
2. Нажмите кнопку Proceed (Далее) и выполните операцию технического обслуживания в
соответствии с описанием. До нажатия кнопки Proceed (Далее) выполнение операции
технического обслуживания можно прервать.
3. Нажмите кнопку Done (Готово), чтобы закрыть соответствующий экран технического
обслуживания. После этого вы вернетесь к экрану Perform maintenance (Проведение
техобслуживания). Кнопка Perform (Выполнить) для выполненной операции станет
неактивной.
4. После выполнения всех необходимых операций технического обслуживания нажмите
кнопку Done (Готово) на экране Perform maintenance (Проведение техобслуживания).
Чтобы прервать операцию технического обслуживания;
1. Нажмите кнопку АН done (Процедура завершена) вместо кнопки Proceed (Продолжить).
После нажатия кнопки АН done (Процедура завершена) экран текущей операции
технического обслуживания закроется и вы вернетесь к главному экрану Perform
maintenance (Проведение техобслуживания).
Список операций технического обслуживания
Все обязательные процедуры техобслуживания приведены на экране Perfomri Maintenance
(Проведение техобслуживания). После нажатия кнопки Perform (Выполнить) открывается экран
с подробным описанием соответствующей процедуры технического обслуживания.
В приведенной ниже таблице представлены все процедуры обязательного техобслуживания и
их стандартная периодичность. Периодичность технического обслуживания может быть
настроена на рабочей станции DakoLinkOmnis. Подробные сведения содержатся в
расширенном руководстве пользователя аппарата Dako Omnis.
процедура техобслуживания
Установка механических манипуляторов в исходное
положение
Промывка системы
Чистка крышек с динамическим зазором и наконечника
модуля окрашивания
Чистка модулей ISH
Проверка жидкостного контура на утечки
Чистка жидкостного контура
Чистка модулей окрашивания
Чистка модулей предварительной обработки
Чистка принадлежностей
Проверка исходного положения манипулятора для работы
с жидкостями
Проверка манипулятора для работы с жидкостями
Стандартный интервал (периодичность)
После 24 часов бездействия
Каждые 48 часов
После обработки 100 штативов со стеклами
(20-100)
После обработки 100 штативов для ISH (20-100)
Каждые 14 дней (7-14)
Каждые 14 дней (7-30)
Каждые 30 дней (7-30)
Каждые 30 дней (7-30)
Каждые 30 дней (7-30)
Каждые 30 дней (7-30)
Каждые 30 дней (7-30)
Компания Dako рекомендует создать график технического обслуживания, который
соответствует вашему рабочему процессу.
Основное руководство пользователя аппарата Dako Omnis - D09514, ред. 20 стр. 123 из 223
--- стр. 145 ---
Предупреждающие сообщения, связанные с техобслуживанием
На главном экране рабочей станции Dako Omnis отображаются общие сведения обо всех
аппаратах Omnis. При необходимости выполнения процедур обязательного технического
обслуживания на экран выводятся предупреждающие сообщения.
Instruments
Просрочено
Необходимо
выполнить в
течение 2 дней
Если процедура техобслуживания аппарата просрочена, предупреждающее сообщение
отображается на красном фоне, а предметные стекла, окрашиваемые в этом аппарате,
помечаются на экране Slides (Стекла) рабочей станции как подозрительные.
S lid e id
д 1234.1
Slide-123
T e s y P ro to to l
IH C lC 0 2 0
SUIr IrKtmment
R e q u e s te dR e q u e s te d
^U g \ Case/Group
S u ^ id o u s 11 2 3 4 N o rm a l J C a s e l2 3
P a tie n t
Стандартное техническое обслуживание по мере необходимости
Регулярная чистка аппарата Dako Omnis необходима для обеспечения его надежной работы. В
противном случае срок его эксплуатации может сократиться. Техническое обслуживание
аппарата Dako Omnis должно выполняться в соответствии со следующими стандартными
процедурами.
Бутыли
Компания Dako рекомендует выполнять чистку бутылей перед первым использованием и после
каждого использования.
Выполняйте необходимую очистку бутылей, чтобы обеспечить их надлежащее
функционирование. Промывочный буфер и деионизированная вода, выпускаемые компанией
Dako, не содержат консервантов, поэтому микробное загрязнение может повлиять на качество
окрашивания.
Периодичность технического обслуживания; при заправке и опорожнении. Дополнительные
бутыли можно приобрести в компании Dako.
Вымойте все бутыли и их крышки в соответствии с надлежащей лабораторной
практикой перед заполнением бутылей реагентом или деионизированной водой.
Аккуратно очистите соединители щеткой, чтобы удалить загрязнения.
Вымойте все пустые бутыли для отходов и их крышки в соответствии с надлежащей
лабораторной практикой. Будьте особенно осторожны при обращении с бутылью для
опасных отходов. Аккуратно очистите соединители щеткой, чтобы удалить
загрязнения.
Компания Dako рекомендует ополаскивать бутыли спиртовым раствором, чтобы
подавить рост микроорганизмов.
Основное руководство пользователя аппарата Dako Omnis — D09514, ред. 20 стр. 142 из 223
--- стр. 146 ---
Примечание. После чистки проверяйте целостность соединителей с задней стороны
бутылей.
Примечание. После чистки проверяйте наличие кодовых штифтов с задней стороны
бутылей. При необходимости устанавливайте кодовые штифты повторно.
Штативы для стекол
Компания Dako рекомендует выполнять чистку штативов для стекол перед первым
использованием и после каждого использования. Дополнительные штативы можно приобрести
в компании Dako.
Промойте штативы под проточной водой или вымойте их в посудомоечной машине
(при температуре не выше 65 “С (149 Т)).
Удалите все солевые отложения с помощью чистой щетки.
Осмотрите штативы на предмет повреждений. Утилизируйте поврежденные штативы.
¥
При нормальных условиях эксплуатации штативы
для стекол рассчитаны на 2500 рабочих циклов или
на 2 года работы. Проверьте дату, указанную на
штативе.
Маркировка с датой
Флаконы с реагентами
Флаконы с реагентами предназначены исключительно для однократного применения. Их
нельзя использовать повторно. Дополнительные флаконы можно приобрести в компании Dako.
Крышки для гибридизации in situ (iSH)
Крышки для ISH предназначены исключительно для однократного применения. Их нельзя
использовать повторно. Дополнительные крышки можно приобрести в компании Dako.
Профилактическое техническое обслуживание
Компания Dako рекомендует проводить профилактическое техническое обслуживание один раз
в полгода.
О сновное руководство пользователя аппарата Dako Omnis - D09514. ред. 20 стр. 143 из 223
--- стр. 147 ---
Agilent
D a k o
Р а з д е л 24. Д о п о л н и т е л ь н о е т е х н и ч е с к о е о б с л у ж и в а н и е
Помимо обязательного техобслуживания для аппарата Dako Omnis также предусмотрен ряд
дополнительных процедур техобслуживания; они запускаются в зависимости от ситуации,
например, при устранении неисправностей или вместо некоторых этапов обязательных
процедур технического обслуживания.
Техническое обслуживание можно проводить только тогда, когда аппарат находится в режиме
ожидания.
В данном разделе описаны дополнительные процедуры технического обслуживания.
Открытие меню дополнительного технического обслуживания
Чтобы открыть экран Optional (Дополнительно), выполните следующие действия;
1. Нажмите кнопку команд приложения (▼ ) в правом верхнем углу главного экрана
4. Нажмите кнопку Optional (Дополнительно).
M a in te n a n c e
O p tio n a l
E rro rs
C h a n g e la n g u a g e
S c h e d u le
D is a b le m o d u le s
A b o u t
S h u td o w n
в области вкладок появится вкладка Optional (Дополнительно) и откроется экран Perform
maintenance (Проведение техобслуживания) На этом экране содержится список всех
дополнительных процедур техобслуживания. Поскольку весь список не помещается на экране,
его можно прокручивать вверх и вниз с помощью соответствующих кнопок.
Основное руководство пользователя аппарата Dako Omnis — D09S14, ред. 20 стр. 144 из 223
--- стр. 191 ---
П р и м е ч а н и е . Э ти п р о т о к о л ы с о з д а ю т с я п о л ь з о в а те л я м и , п о э т о м у их в се гд а н е о б хо д и м о
п р о в е р я ть, п р е ж д е че м д о п у с к а т ь к и с п о л ь з о в а н и ю в д и а гн о с т и ч е с к и х целях.
Ш аблон для непрямой иммуноф лю оресценции
Ш а б л о н д л я н е п р я м о й и м м у н о ф л ю о р е с ц е н ц и и п о з в о л я е т и с п о л ь з о в а т ь в то р и ч н ы е антител а,
с в я з а н н ы е с ф л ю о р е с ц е н тн ы м и кр а с и т е л я м и .
Д л я с о зд а н и я п р о т о ко л а в ы п о л н и т е с л е д у ю щ и е д е й с тв и я ;
2.
3.
4.
5.
6.
7.
В о к н е P ro to co l lib ra ry (Б и б л и о те ка п р о т о к о л о в ) в ы б е р и те In d ire c t im m u n o flu o re sce n ce
te m p ia te (Ш аб л он д л я н е п р я м о й и м м у н о ф л ю о р е сц е н ц и и ).
Н а ж м и т е к н о п к у N e w p ro to c o i fro m se ie cte d (Н о в ы й п р о то ко л и з вы б р а н н ы х).
П е р е и м е н у й те п р о то ко л .
В ы б е р и те н е о б х о д и м ы й буф ер РТ дл я э та п а п р е д в а р и те л ь н о й о б р а б о тки .
В ы б е р и те л ю б ы е д р у ги е н е о б х о д и м ы е э та п ы .
В ы б е р и те п е р в и ч н о е а нти те л о . П ри н е о б х о д и м о с т и и з м е н и т е в р е м я и н куб а ц и и .
В ы б е р и те д о п о л н и те л ь н ы й р е а ге н т. В п р о т о к о л а х н е п р я м о й ф л ю о р е сц е н ц и и
д о п о л н и те л ь н ы й р е а ге н т с о о т в е т с т в у е т в т о р и ч н о м у а нтител у, с о е д и н е н н о м у с
ф л ю о р е с ц е н тн ы м кр а с и т е л е м , ч т о п о з в о л я е т в ы п о л н я т ь н е п р я м у ю в и з у а л и з а ц и ю с
п о м о щ ь ю ф л ю о р е с ц е н тн о го м и к р о с к о п а . П р и м е ч а н и е . Д о п о л н и т е л ь н ы й реа ге н т
н е о б х о д и м о з а д а т ь в о к н е P ro d u c t iib ra ry (Б и б л и о те ка п р о д у кт о в ) с о гл а с н о п р и в е д е н н ы м
н и ж е и н с т р у кц и я м .
Secondary r«agcnt
Raigtwt__________
01
F
Г-
4 F0232 Mouse IgFITC В
InorfMbon:
20 mm
Seconde^y refluent
^ Biotinyteted Secondary Arrtibodies (Mous^Rabbrt)
4 EnV FLEX-» Mouse LINKER
4 EnV FLEX« Rabbit LlNI^R
< j re232MouwlgFHt
Generic Secondary reagent 2
0 Gerwric Secor>dary reagent 3
^ Generic Secondary reagent 4
^ Generic Secondary reagent 5
1 Rebbit/Mouse{UNK}
КШ Cydesfi
10
8. Н а ж м и т е к н о п к у S ave (С охранить).
П р и м е ч а н и е . С ледуйте р е ко м е н д а ц и я м по р а б о те с ф и л ь тр о м м и к р о с к о п а , п р и в е д е н н ы м
в п а с п о р т е б е з о п а с н о с т и в т о р и ч н о го антител а.
П р и м е ч а н и е . И м е й те в виду, ч т о и м м у н о ф л ю о р е с ц е н тн ы е с и гн а л ы с о в р е м е н е м о сл а б е в а ю т.
Х ра н и те о к р а ш е н н ы е п р е д м е тн ы е с те кл а в тем н о те .
П р и м е ч а н и е . Э ти п р о т о к о л ы с о з д а ю т с я п о л ь з о в а те л я м и , п о э т о м у их в с е гд а н е о б хо д и м о
п р о в е р я ть, п р е ж д е че м д о п у с к а т ь к и с п о л ь з о в а н и ю в д и а гн о с т и ч е с к и х целях.
Основное руководство пользователя аппарата Dako Omnis - D09514, ред. 20 стр. 188 из 223
--- стр. 192 ---
Создание дополнительного реагента для визуализации методом
непрямой флюоресценции
Компания Dako предоставляет готовые к настройке шаблоны для пяти реагентов Generic
Secondary reagent (Стандартный дополнительный реагент). Для создания дополнительного
реагента, который будет использоваться в протоколах с непрямым флюоресцентным
окрашиванием, выполните следующие действия;
2.
3.
Установите фильтр поиска Secondary reagent (Дополнительный реагент) в окне Product
library (Библиотека продуктов).
Выберите один из стандартных дополнительных реагентов 1 -5.
Нажмите кнопку Edit (Редактировать).
Product library
P r o d u c t lib r a r y $*con<taryr*40*nt « Any avatUiMiRy '
S e « K l> RM 9ent <au^orf S*cond«y rct9cni
New product ^ Edrt ^ C j^ o rt.. knporU. Meke wnevMlable for use ^ m tr^ o rU
Pioduct narne Reagent cateQOiy Ongin Froduacodc Version
^ BiobnylatMl S«c<y<(Ury Antibod^s (M outeilUbb.-Secondary reagent Dako 17-03-2014 I& IO
Й BiMmytsted Secondsty AnObodiM K500S Secondary reagent Dako «3005 17-03-2014 l& IO
EnV FLEX* Mouse UNKER Secondary reagent Dako DMB44 ^Г821 29ЧМ-2013 07:52
£ EflV Fl£X->^ Rabbit UKKER Secondary reagent Dako OMSiS.GVBOB 29-04-2013 07:52
— ► 1 . Generic Secondarv т ш вЛ 1 naoMift Custom 264M -20U 1 5 ^
^ Generic Secondecy re*9 ent 2 Secondary reagent Custom 2«4»-201415J0
3 Generic Secondeiy re»9 ent 3 Secondary reagent Custom 264M-201415:30
^ GenericS«onda!yrca9ent4 Secondary reegertt Custom 26-08-2014 15:30
3 Generic Secondety reagent 5 Secondary reagent Custom 26-08-2014 1530
4. Измените Product name (Название продукта) и Custom reagent name (Пользовательское
название реагента). Обратите внимание, что код реагента не изменится.
5. В качестве контейнера выберите флакон Dako Omnis на 30 мл. Задайте значения
параметров Initial fill quantity (Первоначальный объем наполнения) и In-use expiration (Срок
годности используемого продукта)
6. Нажмите кнопку Save (Сохранить).
Основное руководство пользователя аппарата Dako Omnis — DQ9514, ред. 20 стр. 189 из 223
--- стр. 193 ---
Дополнительный реагент теперь будет отображаться в окне Product library (Библиотека
продуктов) с пользовательским именем.
P r o d u c t ПЬГЭГу secondary reagent * Any availability
I Se«rch Reagent category Secondary reagent
New product Edit Ei^ ort.. In s e rt. Make unavatiable for use Print report—
Product name Reagent category Ori^ n Product code Version
^ Biotinyleted Secondary Antibo^ es {Mouse/Rabb... Secondary reagent Dako 17^ 3-20141510
^ Biotinylated Secortdaty An^>odies K5005 Secorrdary reagent D^ o K5005 17-03-2014 15:10
^ EnV FLEX* Moose UNKER Secondwy reagent D^co DM844, GV821 29-04-2013 07:52
EnV FLEX* Rabbit UNKER Secortdary reagent Oako DM84S. GV«)9 29-04-2013 07:52
,_ F0 2 3 2 Mouse IgFlTC Secot>d«y reagent Custom 23-06-2015 lS cl9
Q Generic Secondary reagent 2 Secondary reagent Custom 26-08-2014 15c30
S Generic Secondary reagent i Secorsdary reagent Custom 26-08-2014 1530
Данный продукт можно выбрать при создании протокола непрямой флюоресценции.
При заполнении флакона с помощью экрана Inventory (Запасы) выполните следующие действия;
1. Выберите дополнительный реагент с новым пользовательским названием. Примечание.
Стандартный источник (бутыль) автоматически задается в соответствии со
стандартным дополнительным реагентом.
R egister new user>fllled Items
V Aulo-idec< bm d on scanned source item
1. Scan №• source Kerns
For products without DMe bercodcs. Оч required informet'en can be entered menweSy.
ICnVFltXTRS.Highpk TRSHi
i EnViiien FLEX TM, Low pH TftS Lo
Mouse Ig FHC GenSRl
GenorkSecorsdeiy reegen... GenSR2
Д| Generic Secondary reegen.. GenSRJ
вепеПс Secondary reagent bulk 1 OenSRl
n t Seri*l: Lot: EnpuMien dMe Contanrr Qumty: Usee
(Aalci Undefined borne 30 mL MmL »
2.
3.
Введите сведения о реагенте. Примечание. Если серийный номер источника продукта
отсутствует, система Dako Omnis создаст номер автоматически.
Сканируйте в качестве конечной емкости флакон объемом 30 мл.
Основное руководство пользователя аппарата Dako Omnis — D09514, ред. 20 стр. 190 из 223
--- стр. 199 ---
10. После надлежащего перемешивания флакон готов к использованию. Откройте откидной
колпачок крышки и загрузите флакон в аппарат Dako Omnis.
Примечание. Мертвый объем флакона емкостью 2 мл с шариком для смешивания
отличается от мертвого объема стандартного флакона емкостью 2 мл и
составляет 140 мкл. Это означает, что абсолютный минимальный объем
смеси, достаточный для окрашивания методом ISH одного предметного
стекла, составляет 220 мкл (140 мкл + 80 мкл).
Примечание. Зонд для ISH можно перемешивать только с помощью специального
перемешивающего устройства Dako Omnis. Запрещается встряхивать.
Примечание. Компания Dako задает сроки стабильности в аппарате для всех реагентов
Dako. предназначенных для ISH. Это гарантирует, что реагенты не будут
храниться в аппарате дольше того срока, который считается допустимым для
обеспечения качественного окрашивания. Если по истечении срока
стабильности находящийся в аппарате реагент не будет заменен, он будет по-
прежнему использоваться, однако предметным стеклам, подвергающимся его
воздействию, будет присваиваться статус подозрительных (Suspicious).
Выполните визуальный осмотр такого стекла, чтобы определить, можно ли
присвоить ему статус нормального (Normal), или его следует отклонить и
отправить на обработку повторно.
Настройка протоколов 1SH
Компания Dako предоставляет два шаблона протокола IQFISH; с депарафинизацией и без нее.
Protocol name Test category
Template IQRSH protocol FISH
^ Template IQRSH protocol no dewax n... RSH
Protocol category
FISH protocol
RSH protocol
Для настройки протокола;
1. Выберите нужный шаблон протокола FISH.
2. Создайте копию протокола.
3. Укажите имя протокола.
4. Выполните необходимые изменения. Инструкции по редактированию протоколов ISH
содержатся в расширенном руководстве пользователя аппарата Dako Omnis.
5. Нажмите кнопку Save (Сохранить).
Примечание. Всегда необходимо проверять новые пользовательские протоколы, прежде
чем допускать их к использованию в диагностических целях.
Примечание. Выберите «сухое» извлечение, чтобы после завершения
иммуногистохимического окрашивания предметные стекла выгружались
в сухой отсек узла выгрузки. Хранение в темноте обеспечивает сохранение
интенсивности окрашивания методом ISH.
Основное руководство пользователя аппарата Dako Omnis - D09514, ред. 20 стр. 196 из 223
--- стр. 200 ---
Практические рекомендации по обработке предметных
методом ISH
стекол
Буферы
Для окрашивания предметных стекол методом ISH требуются две бутыли со специальными
буферными растворами для ISH; бутыль с раствором для предварительной обработки (GM301)
с зеленой маркировкой и бутыль с постгибридизационным промывочным буфером (GM303)
с желтой маркировкой. Перед загрузкой эти буферы необходимо разбавить, используя бутыли
емкостью 3,5 л, в соответствии с инструкциями в разделе 14 «Бутыли малого размера
(промывочные буферы, растворитель, буферы РТ)». Каждая из этих бутылей с буфером
устанавливается в одну из пяти позиций для буфера РТ с синей маркировкой. Это требование
относится и к постгибридизационному промывочному буферу для ISH. Бутыль с этим буфером
нельзя устанавливать в позиции для промывочного буфера с зеленой маркировкой;
Чистящий раствор для ISH
Во время окрашивания методом гибридизации in situ (ISH) в аппарате всегда должен
находиться флакон с соответствующим чистящим раствором (GC207) для автоматической
очистки наконечника после каждой процедуры аспирации зонда. За один раз расходуется
105 мкл чистящего раствора для ISH.
Основное руководство пользователя аппарата Dako Omnis - D09514, ред. 20 СТр. 197 из 223
--- стр. 201 ---
Product library Auxiliary Any availability
I Origin; Dako Reagent category: AunliarySearch
r^ew f^ o d u c t E d it E x p o rt.. Im p o r t.. M a ke u n a v a ila b le fo r use P rin t re p o rt..
P ro d u c t nam e ^ R ea g e nt c a te g o ry ^ O rig in ^
■ Z i DAB A w ay 1 A u x ilia y D ako
a DAB A w ay 2 A u x ilia ry D ako
* , DAB A w ay D e c o lo r i;^ A u x ilia ty D ako
^ DAB A w a y D e c o lo rire r, 250m L A uxiN aty D ako
^ DAB A w ay W o rk in g S c ^ rtio n A u x ilia ry D ako
* 1 ISH O e v m a S o lu tio n ( O a ^ A n n s ) А ш о ка гу D ako
jV S u lfu rk A d d . 0 3 M A u x ilia ry D ako
Максимальная загрузка
Одновременно в аппарате Dako Omnis может находиться не более трех штативов
с предметными стеклами, окрашиваемыми методом ISH. Если в аппарат загружены три
штатива, дополнительные стекла для ISH можно загрузить только после извлечения одного или
нескольких из этих трех штативов. Поскольку в общей сложности в аппарат можно загрузить
до 12 штативов, оставшиеся штативы могут содержать предметные стекла для IHC.
Основное руководство пользователя аппарата Dako Omnis - D09514, ред. 20 стр. 198 из 223
--- стр. 217 ---
Приложение А. Установка аппарата
Требования
Agilent
Dako
Элемент Описание
Поверхность Перед распаковкой аппарата Dako Omnis убедитесь, что его
планируется установить на твердой и ровной поверхности,
которая может выдержать его массу.
Рекомендуемое
пространство для
установки аппарата
При закрытой передней панели над аппаратом должно
оставаться не менее 50 см (19,7 дюйма) свободного
пространства.
Размеры рабочего пространства для аппарата;
250 (Ш) X 200 (Г) X 230 (В) см
(98,4 X 78,7 X 90,6 дюйма (Ш х Г х В))
Пол должен выдерживать нагрузку в 600 кг (1323 фунта).
Аппарат должен быть размещен таким образом, чтобы доступ к
кнопке питания, расположенной с правой стороны, или к розетке
питания оставался свободным.
Между аппаратом и стенами должен оставаться
вентиляционный зазор не менее 15 см (5,9 дюйма).
Размеры аппарата
(без сенсорного
экрана)
150 (Ш) X 80 (Г) X177 (В) см (при открытой передней панели
высота составляет 220 см)
(59,1 (Ш) X 31,5 (Г) X 69,7 (В) дюйма (при открытой передней
панели высота составляет 86,6 дюйма)
Рабочее
пространство для
рабочей станции
Рабочая станция - это стандартный настольный компьютер,
указанный компанией Dako. который можно расположить в
любом месте таким образом, чтобы до него доходили кабель
аппарата и сетевой кабель.
Основное руководство пользователя аппарата Оако Omnis - D09514, ред. 20 стр. 214 из 223
--- стр. 218 ---
Элемент Описание
Требования к
электропитанию
аппарата
Напряжение: 115В перем. тока/200-230 В перем. тока
(+10%; -15%)
Частота: 50/60 Г ц
Мощность: 1200 В*А
Предохранители: T12AL на 200-230 В перем. тока или Т15AL на
115В перем. тока
Категория защиты от перенапряжения: II
Настенная розетка должна быть надежно заземлена.
Используйте только одобренный компанией Dako кабель
питания с заземлением.
Сила переменного тока должна постоянно составлять не менее
15 А при 115В перем. тока или 12 А при 200-230 В перем. тока.
При нестабильном напряжении в электрической сети компания
Dako рекомендует использовать источник бесперебойного
питания (ИБП). Технические характеристики можно узнать,
обратившись в компанию Dako.
Условия
эксплуатации
Аппарат Dako Omnis предназначен для использования в
закрытых помещениях. Для надлежащей работы аппарата
Dako Omnis температура воздуха должна составлять 18-28 "С
(64-82 Т), а относительная влажность - 25-85 % (без
конденсации); кроме того, аппарат не должен подвергаться
воздействию прямых солнечных лучей.
Высота над уровнем моря: до 1000 м^’.
Степень загрязнения: 2.
Во время транспортировки и хранения необходимо держать
аппарат в сухости при температуре от от 5 до 40 *С (41-104 ®F) и
относительной влажности 10-90 % (без конденсации).
Шумообразование
(EN 61010-1)
<80 дБА (на расстоянии 1 м)
А ВАЖНО! Попытки доступа к аппаратам и/или базе данных Оако при помощи других
средств, помимо одобренного компанией Dako интерфейса прикладного программирования,
могут привести к повреждению и/или потере данных, неисправности аппарата и/или
ненадлежащему выполнению окрашивания и получению неправильных результатов.
^ в зависимости от высоты над уровнем моря может потребоваться внести изменения в протокол, чтобы температура
предварительной обработки была ниже точки кипения.
О сн о вн о е р у к о в о д ст в о п о л ь зо в а т е л я а п п а р а та D ako O m nis — D 09514, ред. 20 стр. 2 1 5 и з 223
--- стр. 219 ---
Установка и настройка
Установка аппарата Dako Omnis и проверка его работоспособности по месту его использования
заказчиком перед началом эксплуатации должна производиться специально обученным
представителем компании Dako.
Перед транспортировкой аппарата по любой причине необходимо упаковать его в
оригинальную упаковку производителя. Перед транспортировкой убедитесь, что все флаконы и
расходные материалы извлечены из аппарата, а бутыли не содержат никаких жидкостей. Перед
транспортировкой необходимо провести чистку аппарата в соответствии с установленным
порядком технического обслуживания. Для получения дополнительной информации
обратитесь к представителю компании Dako.
Входные и выходные соединения
II:
Разъем питания
(заземленная
электрическая розетка),
одна на аппарат
12.
Разъем для
подключения к сети
Ethernet
13:
USB-разъем
(используется
представителями
компании Dako)
Основное руководство пользователя аппарата Dako Omnis — D09514, ред. 20 стр. 216 из 223
--- стр. 227 ---
ДОПОЛНЕНИЕ К РУКОВОДСТВУ ПОЛЬЗОВАТЕЛЯ
НА МЕДИЦИНСКОЕ ИЗДЕЛИЕ
«Устройство автоматическое для иммуногистологического окрашивания и гибридизации in situ Дако
Омнис/Dako Omnis, с принадлежностями
производства «Аджилент Технолоджис Сингапур (Интернешнл) Пте. Лтд.» Agilent Technologies
Singapore (International) Pte. Ltd., 80 Robinson Road #02-00 Singapore (068898) (Сингапур)
2022
--- стр. 228 ---
СОДЕРЖАНИЕ
1. Наименование медицинского изделия, иная информация, позволяющая идентифицировать
медицинское изделие, например, номер модели, варианты модификаций (исполнений) медицинского
изделия 4
2. Сведения о разработчике медицинского изделия..................................................................................7
3. Сведения о производителе медицинского изделия...............................................................................8
4. Места производства медицинского изделия...........................................................................................8
5. Сведения об уполномоченном представителе производителя на территории РФ.........................8
6. Назначение медицинского изделия и принципы действия, описание назначения медицинского
изделия 8
6.1. Назначение медицинского изделия......................................................................................................8
6.2. Описание целевого аналита сведения о его научной обоснованности, указание на
качественный, полуколичественный или количественный вид аналита......................................................8
6.3. Функциональное назначение (например, скрининг, мониторинг, диагностика или
вспомогательное средство в диагностике)...........................................................................................................8
6.4. Информация о специфической патологии, состоянии или факторе риска, для обнаружения,
определения или дифференцирования которого предназначено медицинское изделие для диагност!
in vitro о
6.5. Информация о типе анализируемого образца..................................................................................9
6.6. Информация о популяционных, демографических аспектах применения медицинского
изделия 9
7. Показания при применении медицинского изделия ............................................................................9
8. Противопоказания и возможные побочные действия при применении медицинского изделия9
9. Описание принципа аналитического метода или принципа действия медицинского изделия 10
10. Описание измерительных процедур, метрологической прослеживаемости значений
калибраторов и контрольных материалов.......................................................................................................... 10
11. Информация о потенциальных потребителях медицинского изделия, конкретные требования к
профессиональному уровню потенциальных пользователей.........................................................................10
12. Классификация медицинского изделия..................................................................................................10
13. Дополнить основное руководство пользователя «Раздел 4. Общие сведения о системе»
подразделом «Состав медицинского изделия.».................................................................................................11
14. Внести изменения в основное руководство пользователя «Раздел 4. Общие сведения о системе».
Читать Подпункт «Аппарат Dako Omnis» в следующей редакции:...........................................................
15. Внести изменения в основное руководство пользователя «Раздел 4. Общие сведения о cncTev
Читать Подпункт «Общие сведения об аппарате» в следующей редакции: ..............................................37
16. Описание и способ применения составных частей медицинского изделия .................................42
16.1. Подраздел «Перемешивание зонда для ISH до загрузки» «Раздела 11. Флаконы с реагентами»
Основного руководства пользователя изложить в следующей редакции: .................................................42
16.2. Дополнить «Раздел 9. Загрузка предметных стекол» Основного руководства пользователя
следующей информацией:.....................................................................................................................................43
16.3. Подраздел «Цветовая маркировка бутылей» «Раздела 12. Деионизированная вода»
Основного руководства пользователя изложить в следующей редакции: .................................................44
16.4. «Раздел 29. Последовательное двойное окрашивание» Основного руководства пользователя
изложить в следующей редакции:........................................................................................................................46
16.5. Внести изменения в Основное Руководство по эксплуатации «Раздел 30. Окрашивание
методом гибридизации in situ (ISH). Читать подраздел «Подготовка зонда ISH» в следующей редакции:
...................................................................................................................................................47
16.6. Особенности эксплуатации медицинского изделия в Российской Федерации: .....................48
17. Перечень материалов и специальных материалов, которые требуются для проведения
тестирования (анализа), но не содержатся в комплекте поставки медицинского изделия; ..................49
2
--- стр. 229 ---
18. Дополнить «Раздел 6. Начало работы» основного Руководства пользователя подразделом
«Стартовый набор Стартовый набор для запуска и наладки «Устройство автоматическое для
иммуногистологического окрашивания и гибридизации in situ Дако Омнис/Dako Omnis, с
принадлежностями»................................................................................................................................................49
19. В Основное руководство пользователя добавить раздел «Описание принадлежностей,
медицинских изделий или изделий, не являющихся медицинскими, но предусмотренных для
использования в комбинации с заявленным медицинским изделием (при наличии)» .........................49
5. Перечень и описание материалов медицинского изделия, вступающих в непосредственный или
опосредованный контакт с организмом пациента (телом человека)............................................................54
20. Подраздел «Безопасность при эксплуатации» «Раздела 2. Правила техники безопасности»
Основного руководства изложить в следующей редакции:...........................................................................54
21. Подраздел «Меры безопасности при работе с биологически опасными веществами» «Раздела 2.
Правила техники безопасности» Основного руководства изложить в следующей редакции:..............56
22. Меры предосторожности Стартовый набор для запуска и наладки «Устройство автоматическое
для иммуногистологического окрашивания и гибридизации in situ Дако Омнис/Dako Omnis, с
принадлежностями»:................................................................................................................................................57
23. Дополнить «Раздел 13. Отходы» Основного руководства пользователя следующей
информацией: 62
24. Основное руководство пользователя дополнить разделом «Охрана окружающей среды»:.... 62
25. Основное руководство пользователя дополнить разделом «Сведения об электромагнитной
совместимости» ...................................................................................................................................................62
26. Основное руководство пользователя дополнить разделом «Срок службы медицинского изделия
и срок годности его компонентов»......................................................................................................................63
27. Информация о стерильном состоянии медицинского изделия, методе его стерилизации и о
порядке действий в случае нарушения стерильной упаковки (если медицинское изделие поставляется
в стерильном виде) или, если медицинское изделие поставляется нестерильным, указание на
необходимость его стерилизации перед использованием виде)...................................................................63
28. Основное руководство пользователя дополнить разделом «Сводные технические и
функциональные характеристики медицинского изделия»...........................................................................64
29. Перечень материалов животного и (или) человеческого происхождения, содержащихся в
медицинском изделии..............................................................................................................................................76
30. Информация о наличии в медицинском изделии лекарственного средства для медицинского
применения 76
II. Изложить условия эксплуатации, хранения и транспортировки медицинского изделия в
Основном руководстве пользователя в следующей редакции: .....................................................................76
32. Основное руководство пользователя дополнить разделом «Гарантийные обязательства» .....80
33. Основное руководство пользователя дополнить разделом «Рекламации» ....................................80
34. Основное руководство пользователя дополнить разделом «Символы на маркировке» ............80
35. Основное руководство пользователя дополнить разделом «Перечень применяемых
национальных стандартов».....................................................................................................................................87
Приложение А. «Инструкции стартового набора для запуска и наладки «Устройство автоматическое
для иммуногистологического окрашивания и гибридизации in situ Дако Омнис/Dako Omnis, с
принадлежностями»»...............................................................................................................................................89
--- стр. 230 ---
1. Наименование медицинского изделия, иная информация, позволяющая
идентифицировать медицинское изделие, например, номер модели, варианты
модификаций (исполнений) медицинского изделия
Устройство автоматическое для иммуногистологического окрашивания и гибридизации in situ Дако
Омнис/Dako Omnis, с принадлежностями, в составе:
1. Устройство автоматическое для иммуногистологического окрашивания и гибридизации in situ
Дако Омнис/Dako Omnis, 1 шт;
2. Дако Омнис Краткое справочное руководство (Dako Omnis Quick Reference Guide), 1 шт;
3. Дако Омнис Руководства пользователя на CD, международные переводы (Dako Omnis User
Guides CD, International Translations), 1шт;
4. Источник бесперебойного питания для Дако Омнис, 230 В (UPS Rack 230 V АС Omnis) модель:
АВСЕ 1442-22R (59144-60R), производтсва Power, Ltd.(npn необходимости), 1 шт;
5. Сервер Дако Омнис и Дако Линк (Dako Omnis and DakoLink Server), модель: НРБ ProLiant
MLl lOGenlO, производства Hewlett Packard Enterprise Company, 1шт;
6. Дако Омнис Рабочая станция (Dako Omnis Workstation Win 10) в составе:
• Системный блок DL 18030 HP Engage Flex Pro, производства HP Inc. -1 шт;
• Монитор для Рабочей станции/Сервера, 19 дюймов (Monitor for Workstation/Server) HP
eliteDisplay E190i LED Backlight IPS Monitor модель: HSTND-3891-W, производства HP
Inc. -1 шт;
• Мышь компьютерная - 1 шт;
• Клавиатура - 1 шт;
7. Сетевой принтер для печати этикеток (Network Label Printer) модель: GX430t, производства
Zebra Technologies Corporation (при необходимости), не более 5 шт;
8. Дако Омнис Набор этикеток для бутылей с буфером/растворителем, 6 листов/уп. (Dako Omnis
Buffer/Solvent Container Label sets, set of 6) (при необходимости), не более 5 упак.;
9. Дако Омнис Набор этикеток для бутылей с водой/отходами, 9 шт/лист (Dako Omnis Water/Waste
Container Label sets, 9 labls 1 sheet) (при необходимости), не более 5 листов;
10. Дако Омнис Набор кодовых штифтов для бутылей, 10 шт/упак (Dako Omnis cont Coding Pin)
(при необходимости), не более 10 наборов;
11. Принтер для печати отчетов Дако Линк (Dako Link Report Printer EMEA), модель: HP OfficeJet
Pro 8210 Printer SNPRC-1603-01 (D9L63A), производства HP Inc. (при необходимости). 1 шт;
12. Ручной сканер штрих-кодов (Handheld Barcode Scanner), модель: DS4308, производства Sym
Technologies, Inc. (при необходимости), не более 5 шт;
13. Подставка для ручного сканера штрих-кодов (Stand for Hand-held Barcode Scanner) (при
необходимости), не более 5 шт;
14. Дако Омнис Штатив для стекол, 6 шт/упак (Dako Omnis Slide Rack, 6 pcs) (при необходимости),
не более 20 упак;
15. Дако Омнис Крышка для in situ гибридизации, 5 шт/упак (Dako Omnis ISH Lid, 5 pcs) (при
необходимости), не более 120 упак;
16. Дако Омнис Пакет для твердых отходов, 25 шт/рул (Dako Omnis Solid Waste Bag, 1 roll of 25
bag) (при необходимости), не более 5 рул;
17. Дако Омнис Бутыль для буфера/растворителя, 3,5 л, 4 шт/упак (Dako Omnis Buffer/Solv cont, 3.5
L,4 pc) (при необходимости), не более 10 упак;
18. Дако Омнис Бутыль для воды, 7 л, 5 шт/упак (Dako Omnis Water cont, 7 L, 5 pcs) (при
необходимости), не более 10 упак;
19. Дако Омнис Бутыль для отходов (со стальным соединителем), 7 л, 5 шт/упак (Dako Omnis Waste
Container, 7 L, steel coupling) (при необходимости), не более 10 упак;
20. Дако Омнис Штатив для реагентов (Dako Omnis Reag Rack) (при необходимости), не более 30
шт;
4
--- стр. 231 ---
21. Сетевой кабель питания Schoku-C19 EU - 1 шт;
22. Набор для маркировки предметных стекол (Seymour Label Kit for 3000 Labels) (при
необходимости) - не более 20 уп. в составе:
• Лента клейкая на 500 этикеток/рулон - 6 рулонов;
• Печатающая лента на 1500 этикеток/рулон - 2 рулона.
23. Стартовый набор для запуска и наладки «Устройство автоматическое для
иммуногистологического окрашивания и гибридизации in situ Дако Омнис/Dako Omnis, с
принадлежностями»:
• Дако Омнис Стрип для смешивания, 25 шт/упак (Dako Omnis Mixing Strip, 25 pcs) - 2 упак;
• Буфер промывочный. Концентрированный (20х), для использования в Дако Омнис, 20
флаконов по 175 мл, 1700 тестов (Wash Buffer (20х) (Dako Omnis), Concentrate, 20 x 175 mL, 1700
tests) кат № GC807- 1 упак;
• Антитела моноклональные мьпииные к человеческим Цитокератинам, клон АЕ1/АЕЗ, Готовые
к применению, ФЛЕКС, для использования в Дако Омнис, 12 мл - 1 шт.
• Антитела моноклональные мьининые к человеческому CD34 Class II, клон QBEnd 10, Готовые
к применению, ФЛЕКС, для использования в Дако Омнис, 12 мл -1 шт.
• Антитела поликлональные кроличьи к человеческому S100, Готовые к применению, ФЛЕКС,
для использования в Дако Омнис, 12 мл, 1 шт.
• Антитела поликлональные кроличьи к человеческому Глиальному фибриллярному кислому
белку (GFAP), Готовые к применению, ФЛЕКС, для использования в Дако Омнис, 12 мл -1 шт.
• Антитела моноклональные мышиные к человеческому CD20cy, клон L26, Готовые к
применению, ФЛЕКС, для использования в Дако Омнис, 12 мл - 1 шт.
• Антитела моноклональные мышиные к человеческому Виментину, клон V9, Готовые к
применению, ФЛЕКС, для использования в Дако Омнис, 12 мл - 1 шт.
• Растворитель Cleanly (Cleanly, Bulk bottle. General Lab Reagent), 3,8 л - 1 шт.
• Система детекции ЭнВижн ФЛЕКС для использования в Дако Омнис, 600 тестов (EnVision
FLEX (Dako Omnis), 600 tests) - 1 набор.
• Линкер мышиный ЭнВижн ФЛЕКС+, Готовый к применению, для использования в Дако
Омнис, 1 флакон на 22,5 мл, 75 тестов (EnVision FLEX+ Mouse LINKER (Dako Omnis), Ready-to-
use, 22.5 mL, 75 tests) - 3 шт.
• Гематоксилин, Готовый к применению, для использования в Дако Омнис, 8 флаконов по 22,5
мл, 600 тестов (Hematoxylin (Dako Omnis), Ready-to-use, 8 x 22.5 mL, 600 tests) - 1 упак.
• Зонд HER2 IQFISH pharmDx для определения амплификации антигена HER2, Готовый к
применению, для использования в Дако Омнис, 20 тестов, 1,6 мл (HER2 IQFISH pharmDx (Dako
Omnis), Ready-to-use, 20 tests, 1.6 mL) - 2 шт.
• Раствор для предварительной обработки для in situ гибридизации, Концентрированный (20х),
для использования в Дако Омнис, 1 флакон на 175 мл (ISH Pre-Treatment Solution (20х) (Dako
Omnis), Concentrate, 175 mL) - 2 шт.
• Пепсин для in situ гибридизации, Готовый к применению, для использования в Дако Омнис, 20
тестов, 1 флакон на 7 мл (ISH Pepsin (Dako Omnis), Ready-to-use, 20 tests, 7 mL) - 2 шт.
• Жесткий промывочный буфер для in sim гибридизации, Концентрированный (20х), для
использования в Дако Омнис, 1 флакон на 175 мл (ISH Stringent Wash Buffer (20х) (Dako Omnis),
Concentrate, 175 mL) кат. GM303- 2 шт.
• Флуоресцентная монтирующая среда, Готовая к применению, для использования в Дако Омнис,
20 тестов, 1 флакон на 0,8 мл (Fluorescence Mounting Medium (Dako Omnis), Ready-to-use, 20 tests,
0.8 mL), не более 2 шт.
• Чистящий раствор для in situ гибридизации, для использования в Дако Омнис, Готовый к
применению, 100 тестов, 10 мл (ISH Cleaning Solution (Dako Omnis), Ready-to-use, 100 tests, 10
mL) - 1 Ш Т.
--- стр. 232 ---
• Этанол 96% для in situ гибридизации, Готовый к применению, для использования в Дако Омнис,
20 тестов, 1 флакон на 14 мл (ISH Ethanol Solution, 96% (Dako Omnis), Ready-to-use, 20 tests, 14
mL) - 2 ШТ.
• 0,3 M Раствор серной кислоты, реагент для очистки, 10 х 22,5 мл (Sulfuric Acid, 0.3 М, cleaning
Reag, 10 X 22.5 mL) -1 упак.
Принадлежности:
1. Дако Омнис Цветной зажим на штатив для стекол, красный, 25 шт/упак (Dako Omnis Slide Rack
Color Clip, Red, 25 ps), 1 упак;
2. Дако Омнис Цветной зажим на штатив для стекол, синий, 25 шт/упак (Dako Omnis Slide Rack
Color Clip, Blue, 25 ps), 1 упак;
3. Дако Омнис Цветной зажим на штатив для стекол, зеленый, 25 шт/упак (Dako Omnis Slide Rack
Color Clip, Green, 25 ps), 1 упак;
4. Дако Омнис Цветной зажим на штатив для стекол, серый, 25 шт/упак (Dako Omnis Slide Rack
Color Clip, Gray, 25 ps), 1 упак;
5. Дако Омнис Малый флакон для реагентов, 2 мл, 25 шт/упак (Dako Omnis Small Vial, 2 mL). 1
упак;
6. Дако Омнис Большой флакон для реагентов, 30 мл, 25 шт/упак (Dako Omnis Large Vial, 30 mL),
1 упак;
7. Дако Омнис Флакон для реагентов с шариком для перемешивания, 2 мл, 25 шт/упак (Dako
Omnis Vial with Mixing Ball, 2 mL), 1 упак;
П р и м е ч а н и е , В т е к с т е м о ж е т вст р еч а т ь ся н а и м ен о ва н и е: F u sio n . F u sio n эт о н а зва н и е, к о т о р о е
б ы ло п р и сво ен о У ст р о й с т ву а вт о м а т и ч е с к о м у д ля и м м ун о ги ст о хгш и ч е ск о го о к р а ш и в а н и я и
ги б р и д и за ц и и in situ Д а к о О м н и с (D a ko O m n is) н а э т а п е р а зр а б о т к и .
Также в тексте могут встречаться следующие обозначения:
И зд е л и е В а р и а н т ы н а и м ен о ва н и я
Устройство автоматическое для
иммуногистологического окрашивания и
гибридизации in situ Дако Омнис/Dako Omnis, с
принадлежностями
П р и б о р D a ko O m nis, а п п а р а т D a ko O m n is
Дако Омнис Набор кодовых штифтов для
бутылей, 10 шт/упак (Dako Omnis cont Coding
Pin) (при необходимости), не более 10 наборов;
М а р к и р о во ч н ы е вт улк и
Дако Омнис Руководства пользователя на CD,
международные переводы (Dako Omnis User
Guides CD, International Translations), 1шт;
Р ук о во д ст ва п о ль зо ва т еля D a ko O m n is B a sic
Растворитель Clearify (Clearify, Bulk bottle.
General Lab Reagent), 3,8 л
Р а ст во р и т ель C learify, C lea rify
Система детекции ЭнВижн ФЛЕКС для
использования в Дако Омнис, 600 тестов
(Envision FLEX (Dako Omnis), 600 tests)
С и с т ем а д ет ек ц и и E n V isiso n T M F le x
Линкер мышиный ЭнВижн ФЛЕКС+, Готовый к
применению, для использования в Дако Омнис,
1 флакон на 22,5 мл, 75 тестов (EnVision FLEX+
Mouse LINKER (Dako Omnis), Ready-to-use, 22.5
mL, 75 tests)
Л и н к ер , л и н к е р м ы ш и н ы й , .линкер E n V isiso n T M
F le x
--- стр. 237 ---
2 - носимые, переносные и передвижные, не предназначенные для работы при переносках и
передвижениях в пределах стационарного помещения;
3 - носисмые, переносные и передвижные, предназначенные для работы при переносках и
передвижениях в пределах стационарного помещения;
4 - перевозимые, а также постоянно установленные на подвижных медицинских установках, не
предназначенные для работы при перевозках или на ходу;
5 - перевозимые, а также постоянно установленные на подвижных медицинских установках,
предназначенные для работы при перевозках или на ходу, подвижные медицинские установки. Данное
медицинского изделие относится к Группе I
Категория перегрузки по напряжению согласно ГОСТ Р МЭК 60601-1-2010: II
Классификация медицинского изделия по степени загрязнения согласно ГОСТ Р МЭК 60601-1-2010: 2
По степени защиты от прониюювения влаги и пыли изделие классифицировано согласно ГОСТ 14254:
IP20
Класс безопасности программного обеспечения согласно IEC 62304: А.
13. Дополнить основное руководство пользователя «Раздел 4. Общие сведения о системе»
подразделом «Состав медицинского изделия.»
Устройство автоматическое для иммуногистологического окрашивания и гибридизации in situ Дако
Омнис/Dako Omnis, с принадлежностями, в составе:
1. Устройство автоматическое для иммуногистологического окрашивания и гибридизации in situ
Дако Омнис/Dako Omnis, 1 шт;
2. Дако Омнис Краткое справочное руководство (Dako Omnis Quick Reference Guide), 1 шт;
3. Дако Омнис Руководства пользователя на CD, международные переводы (Dako Omnis User
Guides CD, International Translations), 1шт;
4. Источник бесперебойного питания для Дако Омнис, 230 В (UPS Rack 230 V АС Omnis) модель:
АВСЕ 1442-22R (59144-60R), производтсва Power, Ltd.(npH необходимости), 1 шт;
5. Сервер Дако Омнис и Дако Линк (Dako Omnis and DakoLink Server), модель: HPE ProLiant
MLl lOGenlO, производства Hewlett Packard Enterprise Company, 1шт;
6. Дако Омнис Рабочая станция (Dako Omnis Workstation Win 10) в составе:
• Системный блок DL 18030 HP Engage Flex Pro, производства HP Inc. - 1 шт;
• Монитор для Рабочей станции/Сервера, 19 дюймов (Monitor for Workstation/Server) HP
eliteDisplay E190i LED Backlight IPS Monitor модель: HSTND-3891-W, производства HP Inc. -
1 шт;
• Мышь компьютерная -1 шт;
• Клавиатура ■ 1 шт;
7. Сетевой принтер для печати этикеток (Network Label Printer) модель: GX430t, производства
Zebra Technologies Corporation (при необходимости), не более5 шт;
8. Дако Омнис Набор этикеток для бутылей с буфером/растворителем, 6 листов/уп. (Dako Omnis
Buffer/Solvent Container Label sets, set of 6) (при необходимости), не более 5 упак.;
9. Дако Омнис Набор этикеток для бутылей с водой/отходами, 9 шт/лист (Dako Omnis Water/Waste
Container Label sets, 9 labls 1 sheet) (при необходимости), не более 5 листов;
10. Дако Омнис Набор кодовых штифтов для бутылей, 10 шт/упак (Dako Omnis cont Coding Pin)
(при необходимости), не более 10 наборов;
11. Принтер для печати отчетов Дако Линк (Dako Link Report Printer EMEA), модель: HP OfficeJet
Pro 8210 Printer SNPRC-1603-01 (D9L63A), производства HP Inc. (при необходимости), 1 шт;
12. Ручной сканер штрих-кодов (Handheld Barcode Scanner), модель: DS4308, производства Symbol
Technologies, Inc. (при необходимости), не более 5 шт;
13. Подставка для ручного сканера штрих-кодов (Stand for Hand-held Barcode Scanner) (при
необходимости), не более 5 шт;
11
--- стр. 238 ---
14. Дако Омнис Штатив для стекол, 6 шт/упак (Dako Omnis Slide Rack, 6 pcs) (при необходимости),
не более 20 упак;
15. Дако Омнис Крышка для in situ гибридизации, 5 шт/упак (Dako Omnis ISH Lid, 5 pcs) (при
необходимости), не более 120 упак;
16. Дако Омнис Пакет для твердых отходов, 25 шт/рул (Dako Omnis Solid Waste Bag, 1 roll of 25
bag) (при необходимости), не более 5 рул;
17. Дако Омнис Бутыль для буфера/растворителя, 3,5 л, 4 шт/упак (Dako Omnis Buffer/Solv cont, 3.5
L,4 pc) (при необходимости), не более 10 упак;
18. Дако Омнис Бутыль для воды, 7 л, 5 шт/упак (Dako Omnis Water cont, 7 L, 5 pcs) (при
необходимости), не более 10 упак;
19. Дако Омнис Бутыль для отходов (со стальным соединителем), 7 л, 5 шт/упак (Dako Omnis Waste
Container, 7 L, steel coupling) (при необходимости), не более 10 упак;
20. Дако Омнис Штатив для реагентов (Dako Omnis Reag Rack) (при необходимости), не более 30
шт;
21. Сетевой кабель питания Schoku-C19 EU - 1 шт;
22. Набор для маркировки предметных стекол (Seymour Label Kit for 3000 Labels) (при
необходимости) - не более 20 уп. в составе:
• Лента клейкая на 500 этикеток/рулон - 6 рулонов;
• Печатающая лента на 1500 этикеток/рулон - 2 рулона.
23. Стартовый набор для запуска и наладки «Устройство автоматическое для
иммуногистологического окрашивания и гибридизации in situ Дако Омнис/Dako Omnis, с
принадлежностями»:
• Дако Омнис Стрип для смешивания, 25 шт/упак (Dako Omnis Mixing Strip, 25 pcs) - 2 упак;
• Буфер промывочный, Концентрированный (20х), для использования в Дако Омнис, 20
флаконов по 175 мл, 1700 тестов (Wash Buffer (20х) (Dako Omnis), Concentrate, 20 x 175 mL,
1700 tests) кат. № GC807 - 1 упак;
• Антитела моноклональные мышиные к человеческим Цитокератинам, клон АЕ1/АЕЗ,
Готовые к применению, ФЛЕКС, для использования в Дако Омнис, 12 мл -1 шт.
• Антитела моноклональные мышиные к человеческому CD34 Class II. клон QBEnd 10, Готовые
к применению, ФЛЕКС, для использования в Дако Омнис, 12 мл - 1 шт.
• Антитела поликлональные кроличьи к человеческому S100, Г отовые к применению, ФЛЕКС,
для использования в Дако Омнис, 12 мл, 1 шт.
• Антитела поликлональные кроличьи к человеческому Глиальному фибриллярному кислому
белку (GFAP), Готовые к применению, ФЛЕКС, для использования в Дако Омнис, 12 мл
шт.
• Антитела моноклональные мышиные к человеческому CD20cy, клон L26, Готовые к
применению, ФЛЕКС, для использования в Дако Омнис, 12 мл - 1 шт.
• Антитела моноклональные мышиные к человеческому Виментину, клон V9, Готовые к
применению, ФЛЕКС, для использования в Дако Омнис, 12 мл -1 шт.
• Растворитель Clearify (Clearify, Bulk bottle. General Lab Reagent), 3,8 л -1 шт.
• Система детекции ЭнВижн ФЛЕКС для использования в Дако Омнис, 600 тестов (EnVision
FLEX (Dako Omnis), 600 tests) - 1 набор.
• Линкер мышиный ЭнВижн ФЛЕКС+, Готовый к применению, для использования в Дако
Омнис, 1 флакон на 22,5 мл, 75 тестов (EnVision FLEX+ Mouse LINKER (Dako Omnis), Ready-
to-use, 22.5 mL, 75 tests) - 3 шт.
• Гематоксилин, Готовый к применению, для использования в Дако Омнис, 8 флаконов по 22,5
мл, 600 тестов (Hematoxylin (Dako Omnis), Ready-to-use, 8 x 22.5 mL, 600 tests) -1 упак.
• Зонд HER2 IQFISH pharmDx для определения амплификации антигена HER2, Готовый к
применению, для использования в Дако Омнис, 20 тестов, 1,6 мл (HER2 IQFISH pharmDx
(Dako Omnis), Ready-to-use, 20 tests, 1.6 mL) - 2 шт.
12
--- стр. 239 ---
• Раствор для предварительной обработки для in situ гибридизации, Концентрированный (20х),
для использования в Дако Омнис, 1 флакон на 175 мл (ISH Pre-Treatment Solution (20х) (Dako
Omnis), Concentrate, 175 mL) - 2 шт.
• Пепсин для in situ гибридизации. Готовый к применению, для использования в Дако Омнис,
20 тестов, 1 флакон на 7 мл (ISH Pepsin (Dako Omnis), Ready-to-use, 20 tests, 7 mL) - 2 шт.
• Жесткий промывочный буфер для in situ гибридизации. Концентрированный (20х), для
использования в Дако Омнис, 1 флакон на 175 мл (ISH Stringent Wash Buffer (20х) (Dako
Omnis), Concentrate, 175 mL) кат № GM303 - 2 шт.
• Флуоресцентная монтирующая среда. Готовая к применению, для использования в Дако
Омнис, 20 тестов, 1 флакон на 0,8 мл (Fluorescence Mounting Medium (Dako Omnis), Ready-to-
use, 20 tests, 0.8 mL), не более 2 шт.
• Чистящий раствор для in situ гибридизации, для использования в Дако Омнис, Готовый к
применению, 100 тестов, 10 мл (ISH Cleaning Solution (Dako Omnis), Ready-to-use, 100 tests,
10 mL) - 1 Ш Т.
• Этанол 96% для in situ гибридизации. Готовый к применению, для использования в Дако
Омнис, 20 тестов, 1 флакон на 14 мл (ISH Ethanol Solution, 96% (Dako Omnis), Ready-to-use,
20 tests, 14 mL) - 2 шт.
• 0.3 M Раствор серной кислоты, реагент для очистки, 10 х 22,5 мл (Sulfuric Acid, 0.3 М, cleaning
Reag, 10 X 22.5 mL) - 1 упак.
Принадлежности:
8. Дако Омнис Цветной зажим на штатив для стекол, красный, 25 шт/упак (Dako Omnis Slide Rack
Color Clip, Red, 25 ps), 1 упак;
9. Дако Омнис Цветной зажим на штатив для стекол, синий, 25 шт/упак (Dako Omnis Slide Rack
Color Clip, Blue, 25 ps), 1 упак;
10. Дако Омнис Цветной зажим на штатив для стекол, зеленый, 25 шт/упак (Dako Omnis Slide Rack
Color Clip, Green, 25 ps), 1 упак;
11. Дако Омнис Цветной зажим на штатив для стекол, серый. 25 шт/упак (Dako Omnis Slide Rack
Color Clip, Gray, 25 ps), I упак;
12. Дако Омнис Малый флакон для реагентов, 2 мл, 25 шт/упак (Dako Omnis Small Vial, 2 mL), 1
упак;
13. Дако Омнис Большой флакон для реагентов, 30 мл, 25 шт/упак (Dako Omnis Large Vial, 30 mL),
1 упак;
14. Дако Омнис Флакон для реагентов с шариком для перемешивания, 2 мл, 25 шт/упак (Dako
Omnis Vial with Mixing Ball, 2 mL), 1 упак;
13
--- стр. 242 ---
Дако Омнис Рабочая станция (Dako Omnis Workstation Win 10) в составе:
• Системный блок DL 18030 HP Engage Flex Pro, производства HP Inc. -1 шт;
• Монитор для Рабочей станции/Сервера, 19 дюймов (Monitor for Workstation/Server)
HP eliteDisplay E190i LED Backlight IPS Monitor модель: HSTND-3891-W,
производства HP Inc. - 1 шт;
• Мьпнь компьютерная -1 шт;
Клавиатура - 1 шт;
Рабочая станция Dako Link Omnis представляет
собой ПК с операционной системой Microsoft
Windows®, подсоединенный к центральному
серверу базы данных Dako Link Omnis.
16
--- стр. 243 ---
7. Сетевой принтер для печати этикеток (Network Label Printer) модель: GX430t, производства
Zebra Technologies Corporation (при необходимости), не более 5 шт;
Сетевой принтер, подключенный к рабочей
станции Dako Link Omnis, на котором
печатаются этикетки для стекол с уникальными
штрихкодами, которые содержат информацию о
самом стекле и выбранном для него протоколе
окрашивания, а также этикетки для флаконов.
8. Дако Омнис Набор этикеток для бутылей с буфером/растворителем, 6 листов/уп. (Dako
Omnis Buffer/Solvent Container Label sets, set of 6) (при необходимости), не более 5 упак.;
(Л
т т т т т и ш ш
101 102 103 104 Ю5 10в 107 100
т ж т
201 2 0 2 2 0 3
■ 1КЭ1 m
К т se
301 3 0 2 303
ш ш л ш ш
204 205 206 207 208
S tt е и
Компания Agilent выпускает этикетки с цветовой
маркировкой. штрихкодами и
идентификационными номерами для бутылей
малого размера:
9. Дако Омнис Набор этикеток для бутылей с водой/отходами, 9 шт/лист (Dako Omnis
Water/Waste Container Label sets, 9 labls 1 sheet) (при необходимости), не более 5 листов;
Этикетки для
водой/отходами
идентификации бутылей
17
--- стр. 244 ---
10. Дако Омнис Набор кодовых штифтов для бутылей, 10 шт/упак (Dako Omnis cont Coding
Pin) (при необходимости), не более 10 наборов;
Компания Agilent рекомендует использовать
кодовые штифты для бутылей с цветной
маркировкой, которые устанавливаются в
разные отверстия на задней стороне бутылей, в
зависимости от их назначения. Использование
кодовых штифтов позволяет избежать
неправильного размещения бутылей в аппарате.
11. Принтер для печати отчетов Дако Линк (Dako Link Report Printer EMEA), модель: HP
OfficeJet Pro 8210 Printer SNPRC-1603-01 (D9L63A), производства HP Inc. (при необходимости), 1
шт;
принтер, подсоединяемый к рабочей станции,
позволяет печатать различные отчеты:
-список требуемых реагентов;
-детализацию по конкретному стеклу;
-детали протокола;
-список окрашенных стекол и т.д.
12. Ручной сканер штрих-кодов (Handheld Barcode Scanner), модель: DS4308, производства
Symbol Technologies, Inc. (при необходимости), не более 5 шт;
Сканер для ручного сканирования штрихкодов
18
--- стр. 245 ---
13. Подставка для ручного сканера штрих-кодов (Stand for Hand-held Barcode Scanner) (при
необходимости), не более 5 шт;
'J W J P
Данная подставка предназначена для хранения
ручного сканера штрихкодов, пока он не
используется.
14. Дако Омнис Штатив для стекол, 6 шт/упак (Dako Omnis Slide Rack, 6 pcs) (при
необходимости), не более 20 упак;
Штативы для стекол (относятся к расходным
материалам), в каждый из которых можно
поместить до пяти предметных стекол с
образцами тканей
15. Дако Омнис Крышка для in situ гибридизации, 5 шт/упак (Dako Omnis ISH Lid, 5 pcs) (при
необходимости), не более 120 упак;
■ *
Использование крышек для in situ гибридизации
предотвращает испарение проб во время
обработки предметных стекол. Крышки для in
situ гибридизации предназначены для
однократного применения и после
использования автоматически помещаются в
отсек для твердых отходов. Крьппки для in situ
гибридизации нельзя использовать повторно.
19
--- стр. 246 ---
16. Дако Омнис Пакет для твердых отходов, 25 шт/рул (Dako Omnis Solid Waste Bag, 1 roll of
25 bag) (при необходимости), не более 5 рул;
Устанавливается в отсек для твердых отходов и
предназначен для сбора и утилизации
использованных крьппек для in situ
гибридизации.
17. Дако Омнис Бутыль для буфера/растворителя, 3,5 л, 4 шт/упак (Dako Omnis Buffer/Solv
cont, 3.5 L,4 pc) (при необходимости), не более 10 упак;
Бутыли для загрузки буфера/растворителя в
систему
18. Дако Омнис Бутыль для воды, 7 л, 5 шт/упак (Dako Omnis Water cont, 7 L, 5 pcs) (при
необходимости), не более 10 упак;
Бутыли для загрузки деионизированной воды в
систему
19. Дако Омнис Бутыль для отходов (со стальным соединителем), 7 л, 5 шт/упак (Dako Omnis
Waste Container, 7 L, steel coupling) (при необходимости), не более 10 упак;
К * J J
» л
Бутыли для отвода отходов из системы
20
--- стр. 247 ---
20. Дако Омнис Штатив для реагентов (Dako Omnis Reag Rack) (при необходимости), не более
30 шт;
В лотке для флаконов с реагентами находится
съемный штатив для реагентов. Реагенты из
одного комплекта и/или панели можно хранить
вместе в штативах для реагентов в холодильной
камере. Это значительно облегчает загрузку
флаконов с реагентами.
21. Сетевой кабель питания Schoku-C19 EU - 1 шт;
Кабель, предназначенный для подключения
системы автоматической для
иммуногистохимического окрашивания и
гибридизации in situ Дако Омнис/Dako Omnis к
сети питания
22. Набор для маркировки предметных стекол (Seymour Label Kit for 3000 Labels) (при
необходимости) - не более 20 уп. в составе:
• Лента клейкая на 500 этикеток/рулон - 6 рулонов;
• Печатающая лента на 1500 этикеток/рулон - 2 рулона.__________________________
В набор входят 6 рулонов с этикетками и 2
печатающие ленты. Лента предназначена для
использования в гистологии, цитологии и
исследовательских лабораториях. Лента
устойчива к воздействию воды, ксилола, спирта,
этанола, метанола и других распространенных
гистологических пятен.
21
--- стр. 248 ---
23. Стартовый набор для запуска и наладки «Устройство автоматическое для
иммуногистологического окрашивания и гибридизации in situ Дако Омнис/Dako Omnis, с
принадлежностями»:
Дако Омнис Стрип для смешивания, 25 шт/упак (Dako Omnis Mixing Strip, 25 pcs) ■ 2 упак;
Смешивание реагентов в аппарате
осуществляется с помощью стрипов для
смешивания. Стрипы устанавливаются в узел
смешивания, рассчитанный на 5 стрипов (по 10
ячеек для смешивания в каждом). В ходе
процедуры завершения работы аппарата
необходимо утилизировать использованные
стрипы для смешивания и заменить их новыми
Стрипами. Не оставляйте позиции узла
смешивания пустыми.
• Буфер промывочный, Концентрированный (20х), для использования в Дако Омнис, 20 флаконо
по 175 мл, 1700 тестов (Wash Buffer (20х) (Dako Omnis), Concentrate, 20 x 175 mL, 1700 tests) кат. №
GC807 - 1 упак.; ________
Dako
[M tA SH eufF E R fW j
I (Oalia OnifM)
Промывочный буфер (20x) (Dako Omnis)
предназначен для использования в
иммуногистохимии, продукт применяется в
качестве промывочного буфера для процедур
иммуногистохимического окрашивания с
использованием инструментов Dako Omnis.
22
--- стр. 267 ---
12. Манипулятор для работы с
жидкостями
Используется для пипетирования
жидкостей (в том числе для аспирации и
дозирования), а также для смешивания
реагентов и промывки наконечника.
Наконечник манипулятора выполнен из
нержавеющей стали с тефлоновым
покрытием для повышения его
гидрофобных свойств.
13. Манипулятор для перемещения
штативов для стекол
Переносит штативы для предметных стекол
из одной позиции в другую. Механический
манипулятор может перемещаться по трем
осям и переворачивает штативы из
вертикального положения в
горизонтальное.
Этот механический манипулятор также
используется для перемещения крьппек для
ISH.
14. Узел выгрузки
Располагается между модулем хранения
реагентов и шестью модулями
окрашивания. Из этого узла пользователь
выгружает штативы со стеклами после
завершения процедуры окрашивания. Две
позиции предназначены для «сухого»
извлечения штативов, а шесть позиций —
для «влажного» извлечения. В процессе
запуска аппарата пользователь должен
заполнить позиции для «влажного»
извлечения штативов деионизированной
водой.
15. Сенсорный экран
Прикреплен к регулируемому кронштейну с
правой стороны аппарата. Сенсорный экран
можно поднимать и опускать для большего
удобства пользователя. Контроль
процедуры окрашивания осуществляется с
помощью графического пользовательского
интерфейса на сенсорном экране.
L.I - ,
iiff)ifiw aiiu iiiiw *i
41
--- стр. 268 ---
16. Предупреждающий световой
индикатор
Расположен в передней верхней части
аппарата. Если предупреждающий
индикатор горит зеленым светом,
вмешательство пользователя в работу
аппарата не требуется. Если
предупреждающий индикатор горит
красным или желтым светом, пользователь
должен выполнить определенные действия:
красный свет указывает на необходимость
немедленного вмешательства, а желтый
свет предупреждает пользователя о
предстоящих действиях.
Если индикатор горит синим светом, это
означает, что выполняется техническое
обслуживание.
В дополнение к предупреждающему
световому сигналу можно настроить
звуковой сигнал тревоги. Звук сигнала
тревоги можно отключить, коснувшись
экрана.
16. Описание и способ применения составных частей медицинского изделия
16.1. Подраздел «Перемешивание зонда для ISH до загрузки» «Раздела 11. Флаконы с
реагентами» Основного руководства пользователя изложить в следующей редакции:
Компания Agilent поставляет зонды для ISH в замороженном виде во флаконах с позолоченным
шариком для перемешивания. Перед загрузкой флаконов с зондом для ISH в устройство Dako Omnis
необходимо разморозить и тщательно перемешать зонд.
Реагент для гибридизации in situ (ISH) Dako является чрезвычайно вязким, и во время хранения
фаза реагента отделяется. Следовательно, реагент для гибридизации in situ (ISH) Dako требует особой
подготовительной обработки для размораживания и унификации содержимого (для получе!
подробной информации, пожалуйста, смотрите листок-вкладыш в упаковке конкретного реагента).
Примечание: Обратитесь к инструкциям по маркировке и технике безопасности, приведенным в
листке-вкладыше в упаковках реагентов, чтобы обеспечить их безопасное обращение.
Перемешивание зонда для ISH выполняется следующим образом:
1. Достаньте флакон с зондом для ISH из морозильной камеры, где поддерживается температура
-18 °С.
2. Оставьте флакон размораживаться при комнатной температуре (20-25 °С) на 40 минут.
3. Перемешайте зонд для ISH с помощью магнитного штатива (например, РУ № РЗН 2022/16360
от 21.01.2022).
4. Флакон с зондом необходимо двигать вертикально по штативу вверх-вниз в течение 110 циклов,
со скоростью 1 сек/цикл.
5. После смешивания флакон готов к загрузке в устройство Дако Омнис. Загрузите флакон в
модуль хранения реагентов
42
--- стр. 269 ---
Максимальное время хранения зонда для ISH в модуле хранения реагентов аппарата (при температуре
18 °С) составляет 80 часов.
После использования сразу же поместите флакон с зондом для ISH в морозильную камеру. Зонд для
ISH можно повторно замораживать до 10 раз.
Примечание. Всегда перемешивайте зонд для ISH перед загрузкой в аппарат.
Запрещается встряхивать.
Также перемешивание может осуществляться в устройстве для перемешивания Дако Омнис (в стадии
регистрации).
Устройство для перемешивания - это специальное решение, которое контролирует подготовительный
процесс размораживания и смешивания реагентов для гибридизации in situ (ISH) Dako перед
использованием в устройстве Дако Омнис (Dako Omnis). Реагенты для гибридизации in situ (ISH) Dako
поставляются в специальных флаконах для реагентов для гибридизации in situ (ISH), содержащих
перемешивающий шарик с золотым покрытием, а устройство для перемешивания разработано для
использования вместе с данными флаконами реагентов для гибридизации in situ (ISH).
16.2. Дополнить «Раздел 9. Загрузка предметных стекол» Основного руководства
пользователя следующей информацией:
Забор, обработка, подготовка и хранение проб
Рекомендованными для данного метода типами образцов являются срезы тканей человека,
зафиксированные в формалине и залитые в парафин.
Стадии получения препарата для окрашивания:
• Вырезка
Образцы должны быть толщиной 3 или 4 мм. Образцу, поступившему в лабораторию, должен быть
присвоен уникальный отслеживаемый номер. Документация должна содержать данные о пациенте и
информацию о враче/клиническую информацию.
• Фиксация
Образцы должны быть помешены в подходящий контейнер с 10% нейтральным забуференным
|)ормалином. Время фиксации: 12-36 ч. Емкости с образцами следует содержать при температуре не
ленее 4Т. Объём 10% нейтрального забуференного формалина должен быть в 15-20 раз больше
объёма образцов ткани.
• Проводка
Для оптимальной проводки используется следующее: формалин, серия спиртов, ксилол и парафин.
Используйте только качественные и сертифицированные реагенты. Температура парафина должна
быть на 2-3°С выше температуры его плавления и ежедневно проверяться
• Заливка
Используйте станцию заливки для получения парафиновых блоков с образцами, это обеспечит
стабильные условия при контролируемой и регулируемой температуре. Температура в баке для
парафина должна быть не ниже 60°С. Используйте парафин для гистологических исследований.
• Микротомирование (4 мкм)
Это процедура изготовления срезов толщиной 3-4 мкм из парафиновых блоков с образцами.
Одноразовое лезвие должно быть острым и не иметь дефектов.
• Расправление срезов и сушка стёкол:
Водяная баня для расправления срезов должна быть наполнена дистиллированной водой. Закрепите
срез ткани на область покровного стекла на боковой поверхности предметного стекла. Оптимальная
43
--- стр. 270 ---
температура при сушке - на 4-5 °С ниже температуры плавления парафина. Помещайте стёкла в
термостат в вертикальном положении
Хранение образцов
После этапов окрашивания и заключения образца под покровное стекло препарат помещается в архив
и может храниться не менее 15 лет.
16.3. Подраздел «Цветовая маркировка бутылей» «Раздела 12. Деионизированная вода»
Основного руководства пользователя изложить в следующей редакции;
Чтобы обеспечить правильную загрузку бутылей в аппарат, перед их первым использованием
необходимо наклеить на их ручки этикетки с цветовой маркировкой. Маркировка на этих этикетках
соответствует маркировке позиций в аппарате.
На рисунке ниже представлена общая схема размещения бутылей в аппарате.
к Л , с э с э
Компания Agilent выпускает следующие этикетки с цветовой маркировкой (см. рисунок выще).
Бутыли большого объема:
Я Синий цвет — бутыли для деионизированной воды, емкость 7,0 л
И Оранжевый цвет — бутыли для неопасных отходов, емкость 7,0 л
И Коричневый цвет — бутыли для опасных отходов, емкость 7,0 л
Бутыли малого объема:
Зеленый цвет — бутыли для промывочного буфера, емкость 3,5 л
Ипурпурный цвет — бутыль для растворителя для депарафинизации, емкость 3,5 л
В Голубой цвет — бутыли для буфера для предварительной обработки (РТ), емкость 3,5 л
Наклеивание этикеток на бутыли:
1. Протрите ручку бутыли 70 % раствором изопропилового спирта для лучшего сцепления.
2. Наклейте этикетку с цветовой маркировкой на ручку, отступив примерно 1,5 см от нижнего края.
44
--- стр. 271 ---
т . . s
iflS
Помимо таких этикеток компания Agilent рекомендует использовать маркировочные втулки, которые
устанавливаются в разные отверстия с задней стороны бутылей в зависимости от их назначения.
Использование маркировочных втулок позволяет избежать неправильной установки бутылей в
аппарате. Соединители входят в комплект поставки бутылей.
3. Установите маркировочные втулки, как показано на схеме ниже.
Бутыль емкостью 7,0 л
Бутыли емкостью 3,5 л
Деионизированная вода
Неопасные отходы
Опасные отходы
Растворитель
Промывочный буфер
Буфер РТ
45
--- стр. 273 ---
9. Используйте этап Endogenous enzyme block (Ингибитор эндогенных ферментов) для ингибирования
активности первого первичного антитела и меченого полимера. Рекомендуемым ингибирующим
реагентом (стандартным ингибитором эндогенных ферментов), используемым между двумя
процедурами окрашивания, является серная кислота в концентрации 0,05-0,3 М.
У Endogenous enzyme block
Reagent:
^ Generic endogenous enzyrre block
Incubation:
3 min
У Wash
Reagent fi
Д Wash Buffer
Incubation; Ш Cycles: Ш
2 min 10
10. При необходимости измените продолжительность инкубации в рамках заданного периода времени.
11. Выберите из списка первичное антитело, которое необходимо визуализировать во вторую очередь.
12. При необходимости измените продолжительность инкубации в рамках заданного периода времени.
13. Выберите по своему усмотрению субстрат/хромоген, совместимый с полимером, меченным
пероксидазой хрена. Он должен отличаться от первого субстрата/хромогена.
14. При необходимости измените продолжительность инкубации в рамках заданного периода времени.
15. Если требуется, выберите пункт Counterstain (Контрастный краситель).
16. Нажмите кнопку Save (Сохранить).
Примечание. Протоколы множественного окрашивания создаются пользователями, поэтому их
всегда необходимо проверять, прежде чем допускать к использованию в
диагностических целях.________________________________ ______
16.5. Внести изменения в Основное Руководство по эксплуатации «Раздел 30.
Окрашивание методом гибридизации in situ (ISH). Читать подраздел «Подготовка
зонда 1$Н» в следующей редакции:
Концентрат зонда для ISH необходимо развести гибридизационным буфером на основе
этиленкарбоната (IQFISH), например гибридизационным буфером IQFISH FFPE.
Реагент для гибридизации in situ (ISH) Dako является чрезвычайно вязким, и во время хранения
фаза реагента отделяется. Следовательно, реагент для гибридизации in situ (ISH) Dako требует особой
подготовительной обработки для размораживания и унификации содержимого (для получения
подробной информации, пожалуйста, смотрите листок-вкладыш в упаковке конкретного реагента).
Во избежание фазового расслоения перемешивание зонда ISH перед его загрузкой в аппарат Dako
Omnis должно осуществляться во флаконе Dako Omnis емкостью 2 мл с шариком для перемешивания
(GC20630).
47
--- стр. 274 ---
Примечание: Обратитесь к инструкциям по маркировке и технике безопасности, приведенным в
листке-вкладыше в упаковках реагентов, чтобы обеспечить их безопасное обращение.
Перемешивание зонда для ISH выполняется следующим образом:
1. Достаньте флакон с зондом для ISH из морозильной камеры, где поддерживается температ''*'*^
-18 °С.
2. Оставьте флакон размораживаться при комнатной температуре (20-25 °С) на 40 минут.
3. Перемешайте зонд для ISH с помощью магнитного штатива (например, РУ № РЗН 2022/16360
от 21.01.2022).
4. Флакон с зондом необходимо двигать вертикально по штативу вверх-вниз в течение 110 циклов,
со скоростью 1 сек/цикл.
5. После смешивания флакон готов к загрузке в устройство Дако Омнис. Загрузите флакон в
модуль хранения реагентов
Максимальное время хранения зонда для ISH в модуле хранения реагентов аппарата (при температуре
18 °С) составляет 80 часов.
После использования сразу же поместите флакон с зондом для ISH в морозильную камеру. Зонд для
ISH можно повторно замораживать до 10 раз.
Примечание. Всегда перемешивайте зонд для ISH перед загрузкой в аппарат.
Запрещается встряхивать.
Также перемешивание может осуществляться в устройстве для перемешивания Дако Омнис (в стадии
регистрации).
Устройство для перемешивания - это специальное решение, которое контролирует подготовительный
процесс размораживания и смешивания реагентов для гибридизации in situ (ISH) Dako перед
использованием в устройстве Дако Омнис (Dako Omnis). Реагенты для гибридизации in situ (ISH) Dako
поставляются в специальных флаконах для реагентов для гибридизации in situ (ISH), содержащих
перемешивающий шарик с золотым покрытием, а устройство для перемешивания разработано для
использования вместе с данными флаконами реагентов для гибридизации in situ (ISH).
16.6. Особенности эксплуатации медицинского изделия в Российской Федерации:
Просим Вас обратить внимание, что технологии визуализации на основе щелочной фосфатазы и
протокола HercepTest™ шАЬ pharmDx для Устройства автоматического для иммуногистохимического
окрашивания и гибридизации in situ Дако Омнис/Dako Omnis, описанные в следующих разделах, не
бьши валидированы в Российской Федерации:
• Раздел 27. Визуализация щелочной фосфатазы;
• Раздел 31. Набор HercepTest'^^ mAb pharmDx с реагентами из определенной партии
48
--- стр. 275 ---
17. Перечень материалов и специальных материалов, которые требуются для проведения
тестирования (анализа), но не содержатся в комплекте поставки медицинского изделия;
Не применимо для данного медицинского изделия.
18. Дополнить «Раздел 6. Начало работы» основного Руководства пользователя подразделом
«Стартовый набор Стартовый набор для запуска и наладки «Устройство автоматическое
для иммуногистологического окрашивания и гибридизации in situ Дако Омнис/Dako
Omnis, с принадлежностями»
Стартовый набор предназначен для запуска и наладки устройства. Реагенты подобраны в количестве
и составе оптимальном, только для проведения калибровки, первичного запуска, проверки корректной
установки и работоспособности прибора в соответствии с назначением.
Реагенты из стартового набора в стадии регистрации.
19. В Основное руководство пользователя добавить раздел «Описание принадлежностей,
медицинских изделий или изделий, не являющихся медицинскими, но предусмотренных
для использования в комбинации с заявленным медицинским изделием (при наличии)»
Устройство автоматическое для иммуногистологического окрашивания и гибридизации in situ Дако
Омнис/Dako Omnis, с принадлежностями в зависимости от цели и метода окрашивания используется
совместно с медицинскими изделиями зарегистрированными в установленном порядке на территории
РФ (с антителами, тест-системами, зондами, растворами и покровными стёклами), например:
1) Дако Стекло покровное 24х50мм (Dako Cover Glass, 24 х 50 mm), производства «Аджилент
Технолоджиз Сингапур (Интернешнл) Пте. Лтд.», Сингапур, Agilent Technologies Singapore
(International) Pte. Ltd., РУ № ФСЗ 2011/11187 от 06.05.2021
2) Стёкла предметные и покровные: Стёкла предметные (вид 259730): стекла предметные
«Superfrost plus», производства «Герхард Менцель Б.В. & Ко.КГ», РУ № РЗН 2015/3107 от
06.07.2017 г.
3) Дако Среда для заключения без толуола (Dako Toluence-Free Mounting Media), производства
"Аджилент Технолоджиз Сингапур (Интернешнл) Пте. Лтд.", Сингапур, Agilent Technologies
Singapore (International) Pte. Ltd., РУ № ФСЗ 2011/11187 от 06.05.2021;
4) Реагенты для иммуногистохимических исследований: Удалитель ДАБ® 1.25 л, DAB Away®
1.25 L, производства "Аджилент Технолоджис Сингапур (Интернешнл) Пте. Лтд.", Сингапур,
Agilent Technologies Singapore (International) Pte. Ltd., РУ № ФСЗ 2007/00210 от 28.04.2021;
5) Антитела моноклональные мышиные к человеческому Цитокератину, клон АЕ1/АЕЗ, Готовые
к применению, для ручного использования / для использования в Автостейнере Дако, 0.2 мл,
0.5 мл, 1 мл, 7 мл, 11 мл, Monoclonal Mouse Anti-Human Cytokeratin, Clone AE1/AE3, Ready-to-
Use, for Manual Use / for the Dako Autostainer, 0.2 mL, 0.5 mL, 1 mL, 7 mL, 11 mL; РУ № ФСЗ
2007/00216 от 14.05.2021г.
6) Антитела моноклональные мышиные к человеческому CD34 Class 11, клон QBEnd 10, Готовые
к применению, для ручного использования / для использования в Автостейнере Дако, 0.2 мл,
0.5 мл, 1 мл, 7 мл, 11 мл. Monoclonal Mouse Anti-Human CD34 Class 11, Clone QBEnd 10, Ready-
to- Use, for Manual Use / for the Dako Autostainer, 0.2 mL, 0.5 mL, 1 mL, 7 mL, 11 mL; РУ № ФСЗ
2007/00216 от 14.05.2021г.
7) Антитела поликлональные кроличьи к S100, готовые к применению, ФЛЕКС, для ручного
использования / для использования в Автостейнере Дако, Линк, 6 мл, 12 мл Polyclonal Rabbit
Anti-SlOO, Ready-to-Use, FLEX, for Manual Use / for the Dako Autostainer, Link, 6 mL, 12 mL; РУ
№ ФСЗ 2010/08213 от 28.04.2021 г.
8) Антитела поликлональные кроличьи к Глиальному Фибриллярному Кислому Белку, готовые к
применению, ФЛЕКС, для ручного использования / для использования в Автостейнере Дако,
49
--- стр. 286 ---
Непригодные Нет данных.
средства тушения
пожара
Методы и материалы для локализации разливов/россыпей и очистки
Методы очистки Остановите утечку, если нет риска. Переместите контейнеры из зоны
разлива. Если растворимо в воде, разбавить водой и вытереть досуха. В иных
случаях или если нерастворимо в воде, соберите сухим инертным
материалом и поместите в подходящий контейнер для утилизации.
Утилизируйте у лицензированного подрядчика по сбору отходов.
Правила хранения химической продукции и обращения с ней
Защитные меры Надевайте соответствующие индивидуальные средства защиты (см.
«Средства контроля за опасным воздействием и средства индивидуальной
защиты»). Не принимайте внутрь. Избегайте контакта с глазами, кожей и
одеждой. Избегайте вдыхания паров или тумана. Хранить в оригинальном
контейнере или в альтернативной утвержденной таре из совместимог
материала; плотно закрывать, когда не используется. Пустые контейнеры
содержат остатки продукта и могут представлять опасность. Не используйте
контейнер повторно.
Общие
рекомендации по
промышленной
гигиене
Запрещается принимать пищу и напитки и курить в местах, где проводится
работа с этим продуктом или в местах его хранения. Перед приемом пищи
или курением рабочие должны вымыть лицо и руки. Прежде чем входить в
зону приема пищи, снимите загрязненную одежду и защитное снаряжение.
Дополнительные сведения по мерам гигиены приведены также в «Средства
контроля за опасным воздействием и средства индивидуальной защиты».
Правила хранения химической продукции и обращения с ней
Хранение Особые условия хранения: пожалуйста, обратитесь к этикетке.
Хранить в соответствии с местными правилами. Хранить в оригинальном
контейнере, в защищенном от света, прохладном и хорошо вентилируемом
помещении, отдельно от несовместимых материалов (см. «Стабильность и
реакционная способность»), пищевых продуктов и напитков. Храни"^*
контейнер с продуктом в плотно закрытом герметическом состоянии впло:
до момента его использования. Вскрытые контейнеры должны быть хорошо
закрыты и должны храниться в вертикальном положении, чтобы
предотвратить утечку продукта. Не храните продукт в контейнерах, не
имеющих этикетки. Используйте соответствующий контейнер для
избежания загрязнения окружающей среды. См. «Стабильность и
реакционная способность» для несовместимых материалов перед
обращением или использованием.
________________ _____________
Средства контроля за опасным воздействием и средства индивидуальной защиты
Название
продукта/ингредиента
Предельные значения воздействия
Пропан-1,2-диол ЕН40/2005 WELs (Великобритания (ВБ), 8/2018).
СВЗ: 10 мг/м^ 8 часов. Форма: твердые частицы
СВЗ: 474 мг/м^ 8 часов. Форма: сулша паров и твердых частиц
СВЗ: 150 м.д. 8 часов. Форма: сумма паров и твердых частиц
60
--- стр. 287 ---
Рекомендуемые
процедуры
мониторинга
Если данный продукт содержит ингредиенты с ограничениями воздействия,
может потребоваться личный, рабочий атмосферный или биологический
мониторинг для определения эффективности вентиляции или других мер
контроля и/или необходимости использования средств защиты органов
дыхания. Следует сослаться на стандарты мониторинга, такие как:
Европейский Стандарт EN 689 (атмосфера на рабочем месте - руководство
по оценке воздействия вдыхаемых химических веществ для сравнения с
предельными значениями и стратегия измерения) Европейский стандарт EN
14042 (атмосфера на рабочем месте - руководство по применению и
применению процедур оценки воздействия химических и биологических
агентов) Европейский стандарт EN 482 (атмосфера на рабочем месте - общие
требования к выполнению процедур измерения химических веществ) Кроме
того, потребуется ссылка на национальные руководящие документы по
Меры обеспечения содержания вредных веществ в допустимых концентрациях
Применимые меры
технического
контроля
Хорощая общая вентиляция должна быть достаточной для контроля
воздействия на работника загрязняющих веществ, находящихся в воздухе.
Индивидуальные меры защиты
Гигиенические меры
предосторожности
После обращения с химическим продуктом, перед едой, курением,
посещением туалета и по окончании рабочей смены вымойте кисти рук,
предплечья и лицо. Для удаления потенциально загрязненной одежды
должна использоваться соответствующая техника. Перед повторным
использованием одежду необходимо выстирать. Убедитесь в том, что места
для промывки глаз и душевые кабины безопасности находятся недалеко от
рабочего места.
Защита глаз/лица Если оценка риска показывает, что необходимо избегать воздействия брызг
жидкости, тумана, газов или пыли, следует использовать средства для
защиты глаз, соответствующие утвержденным стандартам. Если возможен
контакт, следует надеть перечисленное ниже защитное снаряжение, если
оценка не указывает на необходимость более высокой степени защиты:
защитные очки с боковыми экранами.
Защита рук Во всех случаях при обращении с химическими продуктами, когда оценка
риска показывает необходимость, следует надевать непроницаемые
перчатки из химически стойкого материала, соответствующие
утвержденным стандартам. Учитывая параметры, указанные
производителем перчаток, во время использования проверяйте, сохраняют
ли еще перчатки свои защитные свойства. Следует отметить, что время
эксплуатации любого материала перчаток может различаться в зависимости
от производителя. В случае смесей, состоящих из нескольких веществ,
время, в течение которого перчатки будут обеспечивать защиту, невозможно
точно оценить.
Защита тела В зависимости от типа работ и предполагаемого риска, прежде чем
приступать к работе с продуктом, следует выбрать соответствующие
индивидуальные средства защиты.
Другие средства
защиты кожи
Прежде чем приступить к работе с данным продуктом, следует выбрать
подходящую обувь и принять дополнительные меры по защите кожи в
61
--- стр. 288 ---
соответствии с характером выполняемых работ и опасностями, а также
получить разрешение специалиста.
Защита органов
дыхания
Используйте правильно подогнанный респиратор для очистки или подачи
воздуха, соответствующий утвержденному стандарту, если оценка риска
показывает необходимость этого. Респиратор следует выбирать, исходя из
известного и ожидаемого уровней воздействия, вредности продукта и
защитных возможностей респиратора.
23. Дополнить «Раздел 13. Отходы» Основного руководства пользователя следующей
информацией:
Для получения информации относительно утилизации оборудования по истечении срока его службы
обратитесь к представителю компании Agilent. Запрещается утилизировать это изделие вместе с
другими бытовыми отходами.
Перед транспортировкой аппарата убедитесь, что из него извлечены все реагенты, и проведите его
чистку в соответствии с установленным порядком технического обслуживания. Для получения
дополнительной информации обратитесь к представителю компании Agilent.
Стартовый набор включает в себя реагенты, содержащие материалы животного происхождених
нельзя исключить, что остаточные количества человеческого материала могут присутствовать из
производственных процедур. Как и в случае любого продукта, полученного из биологических
источников, следует использовать надлежащее обращение и утилизировать в соответствии с
местными, государственными и федеральными правилами.
При использовании медицинского изделия образуются отходы, которые классифицируются и
уничтожаются (утилизируются) как: эпидемиологически опасные отходы (СанПиН 2.1.3684-21: класс
Б).
24. Основное руководство пользователя дополнить разделом «Охрана окружающей среды»:
При правильной эксплуатации изделия не оказывает негативного воздействия на окружающую среду.
Утилизируйте изделие в соответствии с установленные в данном документе правилами.
Буфер промьшочный обладает низким биоаккумулятивным потенциалом.
Избегайте рассредоточения пролитого веществ буфера промывочного, а также их попадания в почву,
водопровод, системы дренажа и канализации. Если продукты вызвали загрязнение окружающей среды
(сточные воды, водоёмы, почва или воздух) обратитесь в соответствующие органы. Необходимо
контролировать выбросы из вентиляции или от работающего оборудования, чтобы удостоверитьс
их соответствии экологическим нормативам. В некоторых случаях для снижения выбросов
допустимого уровня необходима установка газоочистителей и фильтров или модификация рабочего
оборудования.
25. Основное руководство пользователя дополнить разделом «Сведения об
электромагнитной совместимости»
Медицинское изделие было проверено на соответствие требованиям стандарта EN 61326-1, EN 61326-
2-6. Применимые требования помехоустойчивости оборудования указаны в таблице ниже:
Сводные данные испытаний излучения
Стандавт Описание испытания Уровень, поимечания Результат
CISPR 16-2-1
EN 55011
Кондуктивное излучение,
сеть 230 В /50 Гц и 115 В/60 Гц Класс В Соответствует
CISPR 16-2-3
EN 55011 Эмиссионное излучение Класс В Соответствует
EN 61000-3-2 Гармоники Класс А Соответствует
62
--- стр. 289 ---
EN 61000-3-3 Изменения, колебания и скачки
напряжения - Соответствует
Сводные данные испытаний на устойчивость
Стандарт Описание испытания Уровень, примечания Результат
EN 61000-4-2 Электростатический разряд 4 кВ (контактный разряд)
8 кВ (воздушный разряд)
Соответствует
Соответствует
EN 61000-4-3 Электромагнитное поле излучаемых
радиоволн 3 В/м Соответствует
EN 61000-4-4
Испытания на устойчивость к импульсным
помехам,
сеть 230 В / 50 Гц и 115 В / 60 Гц
Сеть 1 кВ
Линии передачи данных 0,5 кВ Соответствует
EN 61000-4-5 Испытания на устойчивость к скачку,
сеть 230 В / 50 Гц и 115 В /60 Гц
1 кВ симметр.
2 кВ асимметр.
Соответствует
Соответствует
EN 61000-4-6 Устойчивость к наведенным помехам, сеть
230В/50 Гци 115В/60 Гц
Среднеквадратичное значение 3
В Соответствует
EN 61000-4-8 Устойчивость к магнитному полю
промышленной частоты 30 А/м Н/П *
Кратковременные посадки и перерывы
напряжения,
сеть230 В/50 Гци 115 В/60 Гц
• 0 % Ut 0,5 цикла Соответствует
EN 61000-4-11
• 0 % U t 1 цикл Соответствует
• 40 % Ut 5/6 цикла Соответствует
• 70 % Ut 25/30 цикла Соответствует
■ 5 % Ut 250/300 цикла Соответствует
• 0 % Ut 250/300 цикла Соответствует
Примечания.
отсутствуют).
Не применимо (функции магнитной обработки или управляющие функции
26. Основное руководство пользователя дополнить разделом «Срок службы медицинского
изделия и срок годности его компонентов»
Срок службы Устройства автоматического для иммупогистохимического окрашивания и
гибридизации in situ Дако Омнис/Dako Omnis - 5 лет.
Ниже указаны сроки годности для частей состава изделия:
^еагенты из стартового набора использовать до истечения срока годности, при условии соблюдении
условий хранения.
Подробные условия транспортировки, хранения и эксплуатации на борту устройства на «Стартовый
набор для запуска и наладки «Устройство автоматическое для иммуногистологического окрашивания
и гибридизации in situ Дако Омнис/Dako Omnis, с принадлежностями» представлены в приложении А.
Дата истечения срока годности указана на маркировке изделий.
Запрещается использовать изделия по истечении срока годности.
27. Информация о стерильном состоянии медицинского изделия, методе его стерилизации и
о порядке действий в случае нарушения стерильной упаковки (если медицинское изделие
поставляется в стерильном виде) или, если медицинское изделие поставляется
нестерильным, указание на необходимость его стерилизации перед использованием виде)
Не применимо для данного медицинского изделия.
63
--- стр. 290 ---
28. Основное руководство пользователя дополнить разделом «Сводные технические и
функциональные характеристики медицинского изделия»
Устройство автоматическое для иммуногистологического окрашивания и гибридизации in situ
Дако Омнис/Dako Omnis. с принадлежностями
Размеры аппарата (без 150 (Ш) X 80 (Г) X 177 (В) см (при открытой передней панели
сенсорного экрана) высота составляет 220 см)
(59,1 (Ш) X 31,5 (Г) X 69,7 (В) дюйма (при открытой передней
панели высота составляет 86,6 дюйма)
Масса 530 кг, без реагентов
595 кг, полностью загруженный
Требования к электропитанию Напряжение: 115 В перем. тока/200-230 В перем. тока (+10 %; -
аппарата 15 %)
Частота: 50/60 Гц
Мощность: 1200 В*А
Предохранители: T12AL на 200-230 В перем. тока или T15AL на
115 В перем. тока
Категория защиты от перенапряжения: II
Настенная розетка должна быть надежно заземлена.
Используйте только одобренный компанией Agilent кабель
питания с заземлением.
Сила переменного тока должна постоянно составлять не менее
15 А при 115 В перем. тока или 12 А при 200-230 В перем. тока.
Т епловыделение Максимальное теоретическое тепловыделение составляет 4100
БТЕ(1200 Вт).
Стандартные условия эксплуатации (полная нагрузка)
составляют 1500-3000 БТЕ (440-839 Вт).
Класс защиты IP 20
Категория перенапряжения II
Степень загрязнения 2
Шумообразование (EN 61010-
1)
<80 дБА (на расстоянии 1 м)
Размеры поддерживаемых 75 X 25 мм
предметных стекол или
75,4 мм X 25 мм
Область окрашивания 17,5 X 45,0 мм (0,7 х 1,8 дюйма)
Загрузка стоек со стеклами «Дако Омнис» (Dako Omnis) предназначен для непрерывной
загрузки и разгрузки.
Прибор вмещает 12 штативов вместимостью до 5 стекол в каждом
(до 60 стекол).
Технология динамических крышек (DGL) обеспечивает
равномерное распределение реагентов по поверхности стекол, а
также надлежащее смешивание реагентов во время окрашивания.
Возможность поддержания оптимальной температуры и
влажности в модулях окрашивания обеспечивает максимально
эффективное окрашивание.
Продолжительность процесса
(длительность цикла работы)
Среднее время окрашивания IHC: 2 часа 30 минут.
Среднее время окрашивания FISH: 4 часа.
Среднее время окрашивания CISH: 5 часов.
64
--- стр. 291 ---
Допускаемая загрузка В обычный рабочий день могут быть окрашены до 165 стекол для
ШС (8 часов, включая подготовку к ночному прогону). 105 стекол
для ШС для окрашивания в рабочее время и 60 стекол для
окрашивания на ночь. (Исходя из среднего значения
длительности цикла работы 2 часа 30 минут для ШС и
непрерывной загрузки).
В обычный рабочий день могут быть окрашены до 30 стекол для
FISH / CISH (8 часов с учетом подготовки к ночному прогону). 15
стекол для FISH / CISH, окрашенные в рабочее время, и 15 стекол
в ночное время (исходя из среднего значения длительности цикла
работы 4 часа для FISH и 5 часов для CISH и непрерывной
загрузки)
Прогон за одну ночь 12 штативов (60 стекол), три из которых могут быть для ISH (та
же самая комбинация стоек, что и заявленные ранее). Два метода
прогонов за одну ночь:
Непрерывный пробег (стандартные ежедневные прогоны)
Пробег с задержкой (на основании запрошенного времени
окончания)
Тип предметных стекол Для Dako Omnis одобрены следующие типы предметных стекол:
- Стекла предметные Superfrost plus
Наружная вентиляция Не требуется.
Водоснабжение 4 бутылки по 7 литров каждая.
Характеристики дистиллированной воды:
Проводимость 0,5-1 микросименс/см (без содержания частиц и
пузырьков воздуха).
Отходы/слив Разделение отходов на опасные и неопасные.
Емкость отходов Неопасные: 4 бутылки по 7 л каждая.
Опасные, все ниже предельных значений: 1 бутылка на 7 л.
Объем опасных отходов на одно предметное стекло:
- Минимальный: 29 мл;
- Максимальный: 39 мл;
Средний объем отходов на одно предметное стекло:
- 293 мл неопасных отходов;
- 0,49 г пластика.
Штрихкоды используемые для
образцов (стандарты)
Линейный одномерный штрихкод (стандарты Codel28, Code39,
Code93, Codabar, Interleaved 2of5): Мин. высота 5 мм (0,2
дюйма); макс, ширина 24 мм (0,9 дюйма). Размешается на
предметном стекле горизонтально
Двухмерный штрихкод (DataMatrix, QR-код моделей 1 и 2 и
micro): Мин. 7 х 7 мм (0,3 х 0,3 дюйма), Макс. 19 х 19 мм (0,7 х
0,7 дюйма)
Количество загружаемых
емкостей с реагентами до 60 флаконов, до 5 стрипов по 10 ячеек
Толщина среза ткани 3-7 мкм
Длина волны светодиодного
сканера 620 - 645 нм
Мощность излучения
светодиодного сканера 53 мВт
Рабочий диапазон термостата 45 - 66 °С
Дако Омнис Краткое справочное руководство (Dako Omnis Quick Reference Guide), 1шт;
65
--- стр. 292 ---
г абаритные размеры 25 X 280 X 210 мм
Масса 910г
Дако Омнис Руководства пользователя на CD, международные переводы (Dako Omnis User Guides
CD, International Translations), 1шт;
Диаметр диска 120 мм
Масса 15г
Источник бесперебойного питания для Дако Омнис, 230 В (UPS Rack 230 V АС Omnis) модель:
АВСЕ 1442-22R (59144-60R), производтсва Power, Ltd.(npn необходимости), I шт;
Г абаритные размеры 526 X 438 X 86 мм
Масса 31 кг
Входное напряжение 230 В (185-276 В)
Входной ток Макс. 8,54 А
Входная частота 50/60 Гц
Выходное напряжение 230 В
Выходной ток Макс. 6,30/5,65 А
Выходная частота 50/60 Гц
Мощность 1440В-А/1296 Вт
Время автономной работы,
мин
30 мин
Размеры кабеля (Длина х
Диаметр)
31 см X 9,8 мм
Масса кабеля 126 г
Размеры кабеля (Длина х
Диаметр)
256 X 7,4 мм
Масса кабеля 251 г
Сервер Дако Омнис и Дако
ML1 lOGenlO, пре
1инк (Dako Omnis and DakoLink Server), модель: HPE ProLiant
изводства Hewlett Packard Enterprise Company, 1шт;
Габаритные размеры (Ш х Гх
В)
44 X 19,5 X 48,05 см
Масса От 12 до 25 кг
Процессор Intel® Xeon® Scalable
Максимальный объём памяти 192 ГБ
Электропитание 100-240 В, 50-60 Гц, 5,8-2,8 А
Дако Омнис Рабочая станция (Dako Omnis Workstation Win 10) в составе:
• Системный блок DL 18030 HP Engage Flex Pro, производства HP Inc. - 1 шт;
Габаритные размеры 100x337x384 мм
Масса 6,6 кг
Электропитание 100-240 В переменного тока 50-60 Гц, 3 А
Процессор Intel® C o r e ™ Intel Core 15-8500 6C - 3,0 ГГц
с ядром Intel® UHD Graphics 630
Количество ядер 6
Стандартный объём памяти 4 Гбайт (1x4 Гбайт) DDR4 2666
Жесткий диск 500 ГБ, 7200 об/мин SATA
Операционная система Windows 10
• Монитор для Рабочей (
sliteDisplay E190i LED Backlight
:танции/Сервера, 19 дюймов (Monitor for Workstation/Server) HP
PS Monitor модель: HSTND-389I-W, производства HP Inc. -1 шт;.
Габаритные размеры 34,8 x 41,5 X 14 C M
Масса 3,78 кг
66
--- стр. 293 ---
Электропитание 100-240 В переменного тока 50-60 Гц, 1,5 А
Потребляемая мощность 25 Вт
Максимальное разрешение
экрана
1280x1024
Диагональ 482,6 мм (19 дюймов)
Яркость 250 Кд/м"
Контрастность 1000:1
Углы обзора По вертикали 178°
По горизонтали 178°
Соотношение сторон 5:4
Тип дисплея Жидкокристаллический дисплей с LED подсветкой
Масса подставка 440 г
Размеры подставки 21 X 19,5 X 3,5 см
Масса сетевого кабеля 180г
Размеры сетевого кабеля
(Длина X Диаметр)
1820 X 6,84 мм
Масса HDMI-кабеля 160 г
Размеры HDMI-кабеля (Длина
X Диаметр)
1910 X 6,78 мм
Масса VGA-кабеля 100 г
Размеры VGA-кабеля (Длина х
Диаметр)
183,5 X 5,45 мм
Масса USB-кабеля 80 г
Размеры USB-кабеля (Длина х
Диаметр)
1820 X 4,66 мм
• Мышь компьютерная
Г абаритные размеры 110x57x36 мм
Масса 0,08 кг
Тип соединения USB
Входное напряжение 5,8 В
Входной ток 188 мА
• Клавиатура
Габаритные размеры 435x150x24 мм
Масса 0,5 кг
Тип соединения USB
Сетевой принтер для печати этикеток (Network Label Printer) модель: GX430t, производства Zebra
Technolosies Corporation (при необходимости), не более 5 шт;
Г абаритные размеры 190x245x 185 мм
Масса 2,5 кг
Электропитания 24 В постоянного тока 4,17 А или 3,125 А
Кабель USB принтера для
печати этикеток
Максимально допустимый ток - 1А
Количество жил - 3
Тип разъема - IEC 60320 С13 ^EC884/CEE7VH
Длина— 1,8 м
Диаметр - 10 мм
Масса - 0,2 кг
Дако Омнис Набор этикеток для бутьшей с буфером/растворителем, 6 листов/уп. (Dako Omnis
Buffer/Solvent Container Label sets, set of 6) (при необходимости), не более 5 упак.;
Г абаритные размеры 210 X 294 мм
Масса 81 г
67
--- стр. 294 ---
Ширина этикетки 25 мм
Длина этикетки 42 мм
Количество в наборе 6 шт.
Дако Омнис Набор этикеток для бутылей с водой/отходами, 9 шт/лист (Dako Omnis Water/Waste
Container Label sets, 9 labis 1 sheet) (при необходимости), не более 5 листов;
Г абаритные размеры 210 X 294 мм
Масса 12г
Ширина этикетки 25 мм
Длина этикетки 139 мм
Количество в наборе 9 шт.
Дако Омнис Набор кодовых штифтов для бутылей, 10 шт/упак (Dako Omnis cont Coding Pin) (при
необходимости), не более 10 наборов;
Длина 16 мм
Максимальный диаметр 12 мм
Минимальный диаметр 9 мм
Масса 2 г
Количество в упаковке 10 шт.
Принтер для печати отчетов Даь
8210 Printer SNPRC-1603-0
со Линк (Dako Link Report Printer EMEA), модель: HP OfficeJet Prc
(D9L63A), производства HP Inc. (при необходимости), 1 шт;
Г абаритные размеры 475 x390x 170 мм
Масса 8,62 кг
Электропитания 100-240 В переменного тока/1600 мА или 200-240 В
переменногог тока/850 мА, 50/60 Гц
Потребляемая мощность 30 Вт
Формат печати А4
Кабель USB принтера для
печати отчетов
Максимально допустимый ток - 1А
Количество жил - 3
Тип разъема - IEC 60320 С13 /IEC884/CEE7V11
Длина— 1,8 м
Диаметр - 10 мм
Масса - 0,2 кг
Ручной сканер штрих-кодов (Р
Technolog
andheld Barcode Scanner), модель: DS4308, производства Symbol
les, Inc. (при необходимости), не более 5 шт;
Источник света светодиод
Размеры (В X Д X Ш) 165 X 98 X 67 мм
Масса 160 г
Длина волны Рамка наведения: светодиод 617 нм
Подсветка: светодиод 660 нм
Напряжение 5 В
Сила тока 0,5 А
Длина кабеля 214 мм
Диаметр кабеля 4,9 мм
Масса кабеля 84 г
Подставка для ручного сканера штрих-кодов (Stand for Hand-held Barcode Scanner) (при
необходимости), не более 5 шт;
Габаритные размеры
подставки (Диаметр х Высота)
106,7 X 37 мм
Масса подставки 518г
Г абаритные размеры
держателя (Ш х Г х В)
91,5x82,18x266 мм
68
--- стр. 295 ---
Масса держателя 123 г
Лако Омнис Штатив для стекол, 6 шт/упак (Dako Omnis Slide Rack, 6 pcs)
Г абаритные размеры 185 X 90 X 10 мм
Масса штатива 38 г
Количество в упаковке 6 шт.
Дако Омнис Крышка для in situ гибридизации, 5 шт/упак (Dako Omnis ISH Lid, 5 pcs) (при
необходимости), не более 120 упак;
Г абаритные размеры 190 X 95 X 18 мм
Масса 50 г
Количество в упаковке 5 шт.
Дако Омнис Пакет для твердых отходов, 25 шт/рул (Dako Omnis Solid Waste Bag, 1 roll of 25 bag)
(при необходимости), не более 5 рул;
Г абаритные размеры 375 X 235 мм
Масса 325 г
Количество 25 шт.
Дако Омнис Бутыль для буфер
L,4 pc'
а/растворителя, 3,5 л, 4 шт/упак (Dako Omnis Buffer/Soly cont, 3.5
(при необходимости), не более 10 упак;
Г абаритные размеры 505 X 80 X 145 мм
Масса 475 г
Объём 3,5 л
Количество в упаковке 4 шт.
Дако Омнис Бутыль для воды, 7 л, 5 шт/упак (Dako Omnis Water cont, 7 L, 5 pcs) (при
необходимости), не более 10 упак;
Габаритные размеры 500 X 90 X 240 мм
Масса 695 г
Объём 7л
Количество в упаковке 5 шт.
Дако Омнис Бутыль для отходов (со стальным соединителем), 7 л, 5 шт/упак (Dako Omnis Waste
Container. 7 L, steel coupling) (при необходимости), не более 10 упак;
Г абаритные размеры 500 X 90 X 240 мм
Масса 810г
Объём 7л
Количество в упаковке 5 шт.
Дако Омнис Штатив для реагентов (Dako Omnis Reag Rack) (при необходимости), не более 30 шт;
Г абаритные размеры 440x190x40 мм
Масса 490 г
Сетевой кабелъ питания Schoku-C19 EU - 1 шт;
Длина 250 см
Диаметр 8 мм
Масса 367 г
Набор для маркировки предметг
необходимости) - не более 20 уг
• Лента клейкая на 500 эти
• Печатающая лента на 15С
1Ы Х стекол (Seymour Label Kit for 3000 Labels) (при
I. в составе:
кеток/рулон - 6 рулонов;
0 этикеток/рулон - 2 рулона.
Диаметр рулона ленты 32,5 мм
Длина рулона ленты ПО мм
Длина ленты 74 м
Масса рулона ленты 82 г
Ширина этикетки 38 мм
Длина этикетки 24 мм
69
--- стр. 296 ---
Диаметр рулона этикеток 94 мм
Длина рулона этикеток 54,5 мм
Масса рулона этикеток 163 г
Количество этикеток в одном
рулоне
500 шт.
Стартовый набор для запуска и наладки «Устройство автоматическое для
иммуногистологического окрашивания и гибридизации in situ Дако Омнис/Dako Omnis, с
принадлежностями»:
• Дако Омнис Стрип для смешивания, 25 шт/упак (Dako Omnis Mixing Strip, 25 pcs) - 2 упак;
Г абаритные размеры 270 X 25 X 25 мм
Масса 20 г
Количество в упаковке 25 шт.
• Буфер промывочный, Концентрированный (20х), для использования в Дако Омнис, 20
флаконов по 175 мл, 1700 тестов (Wash Buffer (20х) (Dako Omnis), Concentrate, 20 x 175 mL, 1700
tests) кат. №GC807 - 1 упак;
Габаритные размеры флакона d = 52 мм, высота = 130 мм
Масса флакона 230 г
Физическое состояние Жидкость
Наливной объём 175 мл
Состав Компонент Концентрация,
весовой %
5-бром-5-нитро-1,3-диоксан <0,25
Тригидроксиметиламинометан <3
Тригидроксиметиламинометан-
соляная кислота
>10-<20
Полиэтиленгликоль <3
Хлорид натрия >10-<25
Твин 20, pH 7,6 <3
Деионизованная вода Остальное - вода
ж 7.6 (±0,1)
Относительная плотность 1
Количество в наборе 20 шт.
Антитела моноклональные мышиные к человеческим Цитокератинам, клон АЕ1/АЕЗ, Готовые к
применению, ФЛЕКС. для использования в Дако Омнис, 12 мл - 1 шт.
Г абаритные размеры флакона 24 X 34 X 97 мм
Масса флакона 39 г.
Физическое состояние Жидкость
Наливной объём 12 мл
Состав в жидкой форме в буфере содержащей
стабилизирующий протеин и
0,015 моль/л азида натрия.
Клон: АЕ1/АЕЗ. Изотип: IgGl, kappa.
Количество в наборе 1 шт
Антитела моноклональные мьппиные к человеческому CD34 Class II, клон QBEnd 10, Готовые к
применению, ФЛЕКС, для использования в Дако Омнис, 12 мл -1 шт.
Г абаритные размеры флакона 24 X 34 X 97 мм
70
--- стр. 297 ---
Масса флакона 39 г.
Физическое состояние Жидкость
Наливной объём 12 мл
Состав в жидкой форме в буфере, содержащем
стабилизирующий протеин и 0,015 моль/л азида
натрия.
Клон: QBEnd 10. Изотип: IgGl, kappa.
Количество в наборе 1 шт
• Антитела поликлональные кроличьи к человеческому S100, Готовые к применению,
ФЛЕКС, для использования в Дако Омнис, 12 мл, 1 шт.
Габаритные размеры флакона 24 X 34 X 97 мм
Масса флакона 39 г.
Физическое состояние Жидкость
Наливной объём 12 мл
Состав поликлональные кроличьи антитела поставляются
в жидкой форме в буфере содержащей
стабилизирующий протеин и 0,015 моль/л азида
натрия
Количество в наборе 1 шт
• Антитела поликлональные кроличьи к человеческому Глиальному фибриллярному
кислому белку (GFAP), Готовые к применению, ФЛЕКС, для использования в Дако
Омнис, 12 мл -1 шт.
Габаритные размеры флакона 24 X 34 X 97 мм
Масса флакона 39 г.
Физическое состояние Жидкость
Наливной объём 12 мл
Состав поликлональные кроличьи антитела поставляются
в жидкой форме в буфере содержащем
стабилизирующий протеин и 0,015 моль/л азида
натрия
Количество в наборе 1 шт
• Антитела моноклональные мышиные к человеческому CD20cy, клон L26, Готовые к
применению, ФЛЕКС, для использования в Дако Омнис, 12 мл - 1 шт.
Габаритные размеры флакона 24 X 34 X 97 мм
Масса флакона 39 г.
Физическое состояние Жидкость
Наливной объём 12 мл
Состав моноклональные мышиные антитела поставляются
в жидкой форме в буфере содержащем
стабилизирующий протеин и 0,015 моль/л азида
натрия.
Количество в наборе 1 шт
• Антитела моноклональные мышиные к человеческому Виментину, клон V9, Готовые к
применению, ФЛЕКС, для использования в Дако Омнис, 12 мл -1 шт.
Г абаритные размеры флакона 24x34x97 мм
Масса флакона 39 г.
Физическое состояние Жидкость
Наливной объём 12 мл
Состав моноклональные мышиные антитела поставляются
в жидкой форме в буфере содержащем
71
--- стр. 305 ---
Антитела моноклональные мышиные к
человеческому Виментину, клон V9, Готовые к
применению, ФЛЕКС, для использования в Дако
Омнис, 12 мл.
Растворитель Clearify (Clearify, Bulk bottle.
General Lab Reagent), 3,8 л.
Хранить при температуре 15-30 ° С, он сохраняет
свою стабильность в стандартных лабораторных
условиях. Срок годности продукта указан на
этикетке.
Система детекции ЭнВижн ФЛЕКС для
использования в Дако Омнис, 600 тестов
(EnVision FLEX (Dako Omnis), 600 tests).
Хранить при температуре 2-8 ® С.
Линкер мышиный ЭнВижн ФЛЕКС+, Готовый к
применению, для использования в Дако Омнис,
1 флакон на 22,5 мл, 75 тестов (EnVision FLEX+
Mouse LINKER (Dako Omnis), Ready-to-use, 22.5
mL, 75 tests).
Хранить при температуре 2-8 ° С.
Гематоксилин, Готовый к применению, для
использования в Дако Омнис, 8 флаконов по 22,5
мл, 600 тестов (Hematoxylin (Dako Omnis),
Ready-to-use, 8 x 22.5 mL, 600 tests).
Хранить в темном месте при комнатной
температуре
Зонд HER2 IQFISH pharmDx для определения
амплификации антигена HER2, Готовый к
применению, для использования в Дако Омнис,
20 тестов, 1,6 мл (HER2 IQFISH pharmDx (Dako
Omnis), Ready-to-use, 20 tests, 1.6 mL).
Хранить рекомендуется от -18 °С до -25 °С
Раствор для предварительной обработки для in
situ гибридизации. Концентрированный (20х),
для использования в Дако Омнис, 1 флакон на
175 мл (ISH Pre-Treatment Solution (20х) (Dako
Omnis), Concentrate, 175 mL).
Хранить при температуре 2-8 ° С.
Пепсин для in situ гибридизации, Готовый к
применению, для использования в Дако Омнис,
20 тестов, 1 флакон на 7 мл (ISH Pepsin (Dako
Omnis), Ready-to-use, 20 tests, 7 mL).
Хранить при температуре -18 °С до 8°С
Жесткий промывочный буфер для in situ
гибридизации. Концентрированный (20х), для
использования в Дако Омнис, 1 флакон на 175 мл
(ISH Stringent Wash Buffer (20х) (Dako Omnis),
Concentrate, 175 mL).
Хранить при температуре 2-8 ° С.
Флуоресцентная монтирующая среда. Готовая к
применению, для использования в Дако Омнис,
20 тестов, 1 флакон на 0,8 мл (Fluorescence
Mounting Medium (Dako Omnis), Ready-to-use, 20
tests, 0.8 mL).
Хранить при температуре 2-8 °С
Чистящий раствор для in situ гибридизации, для
использования в Дако Омнис, Готовый к
применению, 100 тестов, 10 мл (ISH Cleaning
Solution (Dako Omnis), Ready-to-use, 100 tests, 10
mL).
Хранить флаконы при температуре 2-8 С
Этанол 96% для in situ гибридизации. Готовый к
применению, для использования в Дако Омнис,
Хранить флаконы при температуре 2-8 С
79
--- стр. 306 ---
20 тестов, 1 флакон на 14 мл (ISH Ethanol
Solution. 96% (Dako Omnis), Ready-to-use, 20
tests, 14 mL).
0,3 M Раствор серной кислоты, реагент для
очистки, 10 X 22,5 мл (Sulfuric Acid, 0.3 М,
cleaning Reag, 10 х 22.5 mL).
Хранить при комнатной температуре (15-30 °С).
Не использовать после истечения срока годности, указанного на маркировке.
Транспортировка жидких компонентов по территории владельца: транспортировку всегда следует
осуществлять в закрытых защищенных контейнерах, которые находятся в вертикальном положении.
Удостоверьтесь, что лица, которые осуществляют транспортировку продукта, знают, какие действия
им следует предпринять в случае повреждения или утечки продукта. Удостоверьтесь, что лица,
которые осуществляют транспортировку продукта, знают, какие действия им следует предпринять в
случае повреждения или утечки продукта.
Подробные условия транспортировки, хранения и эксплуатации на борту устройства на «Стартовый
набор для запуска и наладки «Устройство автоматическое для иммуногистологического окрашиваь
и гибридизации in situ Дако Омнис/Dako Omnis, с принадлежностями» представлены в приложении А.
32. Основное руководство пользователя дополнить разделом «Гарантийные обязательства»
Гарантийный срок эксплуатации устройства Dako Omnis - 12 месяцев со дня продажи.
Гарантийный срок хранения — 6 месяцев со дня изготовления.
Производитель не несет ответственности за какой-либо причиненный ущерб или повреждения,
вызванные использованием устройства после истечения срока службы, указанного на упаковке.
33. Основное руководство пользователя дополнить разделом «Рекламации»
По вопросам качества продукции обращаться:
Акционерное общество «Эрба Рус» (АО «Эрба Рус»), 109029 г. Москва, ул. Нижегородская, д. 32,
стр. 15, эт. 5, пом. I, ком. 35А, 37, 38, 39
Тел.:+7(495) 755-78-81
e-mail: saler^erbamannheim.com
34. Основное руководство пользователя дополнить разделом «Символы на маркировке»
Маркировка изделия и комплектующих может содержать следующие символы:__________________
Символ Название и описание символа
S N
REF
fP N
Серийный номер аппарата
Номер модели
Номер по каталогу
80
--- стр. 307 ---
Дата изготовления
Вход переменного тока
Медицинское устройство для диагностики in vitro
Внимание! Обратитесь к сопроводительным документам
Обозначение уполномоченного представителя в ЕС
Маркировка СЕ
Настоящее изделие включено в перечень сертифицированных изделий
Канадским агентством по стандартизации и тестированию (CSA) в США и
Канаде
Обозначение производителя ь
Обратитесь к инструкции по эксплуатации
Ограничение температур
Хрупкое, обращаться с осторожностью
Содержит достаточно для <п> тестов
81
--- стр. 308 ---
LOT Код серии
Срок годности
Хранить в темном месте
(!)
%
Раздражающее вещество
Представляет опасность при попадании внутрь, на кожу или при вдыхание
USB -соединение
Постоянный ток (Блок питания)
Вкл. / Выкл. и устройство готово к загрузке флакона
Флакон загружен
Комбинированный процесс размораживания и смещивания
о Только процесс смешивания
Процесс завершен, флакон подготовлен и готов к выгрузке
Начало процесса
Конец процесса
82
--- стр. 309 ---
Надлежащая утилизация изделия
(в соответствии с Директивой 2002/96/ЕС об отходах электрического и
электронного оборудования [WEEE], действующей в Европейском союзе и
других странах Европы с раздельными системами сбора мусора).
Категории опасности Национальной ассоциации противопожарной защиты
(NFPA)
Каждое цветное поле обозначает отдельный вид угрозы в дополнение к
общей категории опасности, которые оцениваются в соответствии с
приведенными ниже шкалами.
Синее поле — опасность для здоровья
4 —серьезная: смертельно опасное вещество. Даже минимальное
воздействие этого вещества опасно для жизни.
3 —значительная: чрезвычайно опасное вещество. Воздействие этого
вещества приводит к серьезным травмам.
2 — умеренная: опасное вещество. Воздействие этого вещества опасно для
здоровья.
1 — незначительная: воздействие этого вещества вызывает раздражение или
приводит к легким травмам.
0 — минимальная: не представляет значительной опасности для здоровья.
Красное поле — огнеопасность
4 —серьезная: чрезвычайно легковоспламеняющееся вещество.
Температура воспламенения ниже 23 °С (73 °F). Вещество чрезвычайно
легко воспламеняется, испаряется или взрывается.
3 —значительная: легковоспламеняющееся вещество.
Температура воспламенения ниже 37 °С (100 °F), но вьппе 23 °С (73 °F).
Может воспламениться, стать нестабильным или взорваться при обычных
показателях температуры и давления.
2 — умеренная: сильногорючее вещество. Температура воспламенения
ниже 93 °С (200 °F), но выше 37 °С (100 °F).
Может воспламениться при умеренном нагревании.
1 — незначительная: горючее вещество. Температура воспламенения ниже
93 °С (200 °F). Может воспламениться при нагревании.
о — минимальная: невоспламеняющееся вещество. Не горит.
Желтое поле — реакционная способность
4 —серьезная: вещество способно к детонации. Может взорваться при
обычных показателях температуры и давления.
3 —значительная: взрывоопасное вещество. Может детонировать или
взорваться при ударе, а также под воздействием тепла и воды. 2 —
умеренная: нестабильное вещество. Может подвергаться серьезным
83
--- стр. 310 ---
химическим изменени51м при обычных показателях температуры и
давления, а также при контакте с водой.
1 — обычно стабильное вещество: вещество может стать нестабильным при
повышении температуры или давления, или при контакте с водой.
О — стабильное вещество: сохраняет стабильность под воздействием тепла,
давления или воды.
Белое поле — особые факторы риска
Радиоактивное излучение
Кислота
Щелочь
Коррозионноактивное вещество
Коррозионное вещество
Не допускать контакта с водой
П
®
LISTED
US
Беречь от влаги
Указывает на то, что упаковку необходимо транспортировать в
вертикальном положении
Метка cUL применяется для изделий на канадском рынке. Изделия с
маркировкой указывают на то, что они соответствуют канадским
стандартам безопасности, которые в основном совпадают с
соответствующими стандартами компании Underwriters' Laboratories, Inc. в
Соединенных Штатах
Вторичная переработка
ш
Переносить с осторожностью
КС сертификация Южной Кореи требует, чтобы производители
электрического/электронного оборудования имели сертификационную
маркировку КС.
10
Этот символ указывает на соответствие ограничениям содержания опасных
веществ, используемых в электрическом и электронном оборудовании. В
центре приведено время в годах, в течение которого подконтрольные
84
--- стр. 311 ---
[Н [
вещества, входящие в состав изделия, не просачиваются наружу и не
разлагаются
Евразийский знак соответствия (ЕАС, Россия: Евразийское соответствие)
является маркировкой продукта, указьгоающая, что продукция
соответствует всем техническим правилам Евразийского таможенного
союза.
Н
NOM
Маркировка VCCI является символом соответствия требованиям
безопасности электроприборов в отнощении электромагнитных помех
(Япония)
BSMI (Тайвань) Маркировка указывает на соблюдение обязательных
стандартов безопасности и / или электромагнитной совместимости для
электрических и электронных изделий в рамках Закона об инспекции
товаров, принятого Бюро стандартов, метрологии и инспекции (BSMI).
Китайская сертификация ССС Так называемая сертификация Зс - система
обязательной сертификации изделий в Китае, английское название
«китайская обязательная сертификация», английская аббревиатура - ССС
NOM - все электрические продукты, экспортируемые в Мексику, должны
соответствовать требованиям NOM, так же, как и обязательным
требованиям к энергоэффективности.
Экологическая маркировка I типа
Маркировка соответствия нормативам
Этот символ обозначает, что данное оборудование отвечает
соответствующим требованиям Управления по связи и средствам массовой
информации Австралии.
Обязательный знак соответствия для Электроники и Электротехнической
продукции в Марокко
GS - это немецкий национальный знак, демонстрирующий, что изделие
было испытано и установлено, что оно соответствуют стандартам для
изделия.
Изображение знака CRS, которым должна быть маркированы импортные
электрические устройства и 1Т-товары, для которых требуется
декларирование соответствия и регистрация
85
--- стр. 312 ---
А
А
А
с;^
Символ-предупреждение о массе изделия
Опасность поражения электрическим током
Знак горячая поверхность
Знак ICT соответствия качества (Вьетнам)
IC T
CS - знак соответствия, применяемый при сертификации на соответствие
требованиям национальных стандартов Аргентины
Декларация соответствия FCC или наклейка FCC, а также маркировка
Федеральной Комиссии - это сертификационный знак, применяемый на
электронных изделиях, изготовленных или продаваемых в Соединенных
Штатах, которые удостоверяет, что уровень электромагнитных помех
устройства находится в пределах, утвержденных Федеральной Комиссией
по связи.
Знак ISC соответствия качества (Камбоджа)
Знак сертификации TUV Rheinland технического оборудования заверенно!
качества.
Маркировочный знак ТСО
SAFETYM A R K Знак соответствия Safety Mark
Символ коммутации
86
--- стр. 313 ---
€ <
G - ( r - ©
Символ, обозначающий порт USB
Постоянный ток
Знак соответствия IRAM (Аргентина)
Знак соответствия NCC (Тайвань)
Запрет на повторное применение
Внешняя клемма выходного разъема имеет отрицательный заряд,
внутренняя клемма выходного разъёма - положительный.
Изделие предназначен для использования в помещении
Символ соответствия электроприбора обязательным техническим
требованиям для рынка Японии
35. Основное руководство пользователя дополнить разделом «Перечень применяемых
национальных стандартов»
ГОСТ Р 50444-
2020
Приборы, аппараты и оборудование медицинские. Общие технические
требования.
ГОСТ Р и с о
15223-1-2020
Медицинские изделия. Символы, применяемые при маркировании на
медицинских изделиях, этикетках и в сопроводительной документации.
Часть 1. Основные требования
ГОСТ Р м эк
62366-2013
Изделия медицинские. Проектирование медицинских изделий с учетом
эксплуатационной пригодности
ГОСТ IEC 61010-
1-2014
Безопасность электрических контрольно-измерительных приборов и
лабораторного оборудования. Часть 1. Общие требования
ГОСТ IEC 61010-
2-010-2013
Безопасность электрических контрольно-измерительных приборов и
лабораторного оборудования. Часть 2-010. Частные требования к
лабораторному оборудованию для нагревания материалов
ГОСТ IEC 61010-
2-081-2013
Безопасность электрических контрольно-измерительных приборов и
лабораторного оборудования. Часть 2-081. Частные требования к
автоматическому и полуавтоматическому лабораторному оборудованию
для проведения анализов и других целей
87
--- стр. 314 ---
ГОСТ Р и с о
18113-1-2015
Медицинские изделия для диагностики in vitro. Информация,
предоставляемая изготовителем (маркировка). Часть 1. Термины,
определения и общие требования
ГОСТ Р и с о
18113-3-2015
Медицинские изделия для диагностики in vitro. Информация,
предоставляемая изготовителем (маркировка). Часть 3. Инструменты для
диагностики in vitro для профессионального применения
ГОСТ Р м эк
62304-2013
Изделия медицинские. Программное обеспечение. Процессы жизненного
цикла
ГОСТ Р м эк
61326-1-2014
Оборудование электрическое для измерения, управления и лабораторного
применения. Требования электромагнитной совместимости. Часть 1.
Общие требования
ГОСТ Р м эк
61326-2-6-2021
Оборудование электрическое для измерения, управления и лабораторного
применения. Требования электромагнитной совместимости. Часть 2-6.
Частные требования. Медицинское оборудование для диагностики в
лабораторных условиях
ГОСТ IEC 61010-
2-051-2014
Безопасность электрических контрольно-измерительных приборов и
лабораторного оборудования. Часть 2-051. Частные требования к
лабораторному оборудованию для перемешивания и взбалтывания
88
--- стр. 315 ---
6 > Dako С€
Буфер промывочный, Концентрированный (20х), для использования в Дако Омнис, 20 флаконов по 175
мл, 1700 тестов (Wash Buffer (20х) (Dako Omnis), Concentrate, 20 x 175 mL, 1700 tests)
(Dako Omnis)
Код GM303
РУССКИЙ
Предполагаемое
использование
Для диагностики in vitro.
Жесткий промывочный буфер ISH (20х) (Dako Omnis) предназначен для использования в
автоматизированных анализах гибридизации in situ совместно с прибором Dako Omnis на
фиксированных формалином и залитых парафином (FFPE) срезах тканей.
Представленный
реагент
Физиологический раствор цитрата натрия. pH 7,0, содержит моющее средство, консервант
и инертный желтый цвет для легкой идентификации и удобства использования. 6 каждой
бутылке содержится 175 мл реагента, концентрированного 20 раз. Объем предназначен для
разбавления в одной объемной бутылке Dako Omnis.
Меры
предосторожности доказательств повреждения упаковки.
1. Для профессиональных пользователей
2. Не использовать лри наличии каких-либо
бутылки или штрих-кода на бутылке.
3. Этот продукт содержит азид натрия (NaN3), химически высокотоксичный в чистом
виде. При концентрации продукта, хотя и не классифицируется как оласный, однако
азид натрия может вступать в реакцию со свинцовыми и медными трубами и
образовывать взрывоопасные соединения азидов металлов. При утилизации промыть
большим количеством воды, чтобы предотвратить накопление азида металла в
водопроводе.
4. Носите соответствующие средства
попадания в глаза и контакта с кожей.
5. Неиспользованный раствор следует
индивидуальной защиты, чтобы избежать
утилизировать в соответствии с местными,
государственными и/или федеральными правилами.
Хранение Хранить при температуре 2-8 С. Не использовать после истечения срока годности,
указанного на емкости. Неиспользованный разбавленный раствор можно хранить при
температуре 2-8 С в течение одного месяца. Выбросить раствор, если он мутный.
Разбавленный раствор можно использовать в течение 7 дней при хранении на борту Dako
Omnis. Оставшаяся рабочая стабильность отслеживается при помощи программного
обеспечения Dako Omnis. Использование просроченных реагентов приведет к появлению
предупреждения от прибора Dako Omnis. Все стекла, окрашенные просроченным
реагентом, изменят состояние на "подозрительное", и журнал стекол на рабочей станции
покажет, что был использован просроченный реагент. Если реагенты хранятся при каких-
либо условиях, отличных от указанных, пользователь должен проконтролировать
производительность реагента. Если наблюдается неожиданное окрашивание, которое
нельзя объяснить изменениями в лабораторных методиках, и есть вопросы по качеству
реагента, свяжитесь с технической поддержкой компании "Дако".
Подготовка реагента Приготовьте рабочий раствор, разбавив жесткий промывочный буфер ISH (20х) (Dako
Omnis) в концентрации 1; 20 следующим образом;
1. Наполните бутылку Dako Omnis объемом 3,5 л с маркировкой РТВ (синяя этикетка)
деионизированной водой до линии заполнения (3.325 л). Перед наполнением
убедитесь, что бутылка находится на горизонтальной поверхности.
2. Вылейте 175 мл строгого промывочного буфера (20х) (Dako Omnis) из бутылки
концентрата в бутылку.
3. Перенесите отделяемую этикетку с емкости концентрата к бутылке. Закрепите крышку
объемной бутылки и аккуратно переверните бутылку 2-3 раза.
4. Используйте ручной сканер штрих-кода Dako Omnis для идентификации реагента
(сканируйте съемную этикетку и объемную бутылку).
5. Сразу же загрузите объемную бутылку на прибор Dako Omnis.
ПРИМЕЧАНИЕ: После хранения рабочего раствора в холодильной камере (2-8 “С)
--- стр. 316 ---
убедитесь, что он уравновешен до 18 ‘ 'С перед загрузкой на Dako Omnis.
Методика
(процедура)
Инструкции по загрузке и регистрации реагента в системе Dako Omnis приведены в
руководстве пользователя Dako Omnis. См. инструкции по использованию индивидуального
зонда гибридизации Dako Omnis для получения дальнейших инструкций по использованию
строгого промывочного буфера iSH (20х) (Dako Omnis) в анализе ISH, включая
интерпретацию окрашивания на Dako Omnis.
Объяснение символов
REF i Каталожный номер Ограничение температур Производитель
IVD Медицинское изделие для
диагностики in vitro LOT I Код серии
□й
Обратитесь к инструкции
по применению 2 Срок годности
--- стр. 317 ---
D ako
С€
Антитела моноклональные
мышиные к человеческим
Цитокератинам, клон
АЕ1/АЕЗ, Готовые к
применению, ФЛЕКС, для
использования в Дако
Омнис, 12 мл
Ф Л Е К С , для использования
в Дако Омнис
Код GA053
Назначение Для диагностики in vitro.
Антитела моноклональные мышиные к человеческим Цитокератинам, клсн
АЕ1/АЕЗ, готовые к применению, ФЛЕКС, для использования в Дако Омнис
предназначены для использования в иммуногистохимии (ИГХ) на устройстве
Dako Omnis. Это антитело предназначено для Классификации опухолей
эпителиального происхождения (1-3). Дифференциальной классификации
опухолей помогают результаты, полученные с помощью панели антител.
Клиническая интерпретация любого окрашивания или его отсутствия должна
быть дополнена морфологическими исследованиями с использованием
надлежащего контроля и должна оцениваться в контексте истории болезни
пациента и других диагностических тестов квалифицированным патологом. Это
антитело предназначено для использования после того, как первичный диагноз
опухоли был поставлен с помощью обычной тстопатологии с использованием
неиммунологических гистохимических окрасок.
Сводный обзор
и пояснение
Цитокератины - это семейство водорастворимых белков с молекулярной массой
40-70 кДа, которые формируют цитоскелет эпителиальных клеток. Было
идентифицировано по меньшей мере 19 различных цитокератинов, которые
можно разделить на два подсемейства. Подсемейство А включает
относительно кислые цитокератины (с pH менее 5,5), тогда как члены
подсемейства 6 имеют основной pH 6 и более.
См. Общие инструкции Dako по иммуногистохимическому окрашиванию или
инструкцию системы детекции для процедур ИГХ; Принцип процедуры,
необходимые, но не поставляемые материалы, хранение, подготовка образцов,
процедура окрашивания, контроль качества, устранение неполадок,
интерпретация окрашивания, общие ограничения.
Реагент, входящий
в комплект
поставки
Иммуноген
Специфичность
Готовые к применению моноклональные мышиные антитела поставляются в
жидкой форме в буфере содержащей стабилизирующий протеин и
0,015 моль/л азида натрия.
Клон: АЕ1/АЕЗ. Изотип: IgGI, kappa.
Эпидермальные новообразования человека (1).
АЕ1/АЕЗ - это коктейль из двух моноклональных антител, которые были
получены путем иммунизации мышей человеческими каллусными кератинами
(2). Было показано, что АЕ1/АЕЗ идентифицирует большинство цитокератинов
человека и поэтому может использоваться в качестве инструмента для
положительной ИГХ идентификации клеток простого и стратифицированного
эпителиального происхождения (1,2,4). Антитело АЕ1 иммунореагирует с
антигенной детерминантой, присутствующей на большинстве цитокератинов
подсемейства А, включая цитокератины с обозначением Молла (4) 10, 13, 14,
15 16 и 19 (MWs 56,5, 54’, 50. 50', 48 и 40 кДа,
соответственно), но не на №N« 12, 17 и 18 (55, 47 и 45 кДа) (4). Антитело АЕЗ
реагирует с антигенной детерминантой, общей для цитокератинов
--- стр. 318 ---
Меры
предосторожности
подсемейства В, включая №№ 1 и 2, 3, 4, 5, 6, 7 и 8 (МВт 65, 67, 64, 59, 58, 56,
54 и 52 кДа, соответственно) (5).
1. Для диагностики in vitro.
2. Для профессиональных пользователей.
3. Данный продукт содержит азид натрия (NaN3), химическое вещество, очень
токсичное в чистом виде. Хотя его концентрация в реагенте не классифицируются
как опасная, азид натрия может реагировать со свинцом и медью, образуя
взрывоопасные скопления азидов металлов. При утилизации промыть большим
количеством воды, чтобы предотвратить накопление азида металла в
водопроводе.
4. Как и с любым продуктом, полученным из биологических источников,
необходимо использовать надлежащие процедуры при обращении с ним.
5. Надевайте соответствующие средства индивидуальной защиты, чтобы
избежать контакта с глазами и кожей.
6. Неиспользованный раствор следует утилизировать в соответствии с
местными, государственными и федеральными нормами.
Хранение Хранить при температуре 2-8 ‘’С. Во время хранения крышка должна быть
закрыта. Не использовать после истечения срока годности, указанного на
флаконе. Стабильность на борту составляет 280 часов. Время на борту
отслеживается с помощью программного обеспечения Dako Omnis. Если
реагенты хранятся в условиях, отличных от указанных, эти условия должны
быть проверены пользователем. Нет никаких очевидных признаков,
указывающих на нестабильность данного продукта. Поэтому позитивные и
негативные контрольные стекла должны окрашиваться одновременно с
образцами пациентов. Если наблюдается неожиданное окрашивание, которое
не может бьпъ объяснено вариациями в лабораторных процедурах, и есть
подозрение на проблему с антителом, обратитесь в службу технической
поддержки компании Agilent.
Обзор протокола
окрашивания*
Шаг П р и м е ч а н и е
Фиксация/заливка Фиксированные в
формалине, залитые в
парафин
Депарафинизация на
борту
Предварительная
обработка
Envision FLEX Система
детекции, высокий pH
(код GV804)
30 мин
высокотемпературная
демаскировка антигена
Негативный контроль FLEX Универсальный
негативный контроль,
мышиный (код GA750)
12,5 мин инкубации
Визуализация Envision FLEX Система
детекции, высокий pH
(код GV800)
Реагент для блокировки;
3 мин; Полимер; 20 мин;
Хромоген; 5 мин;
Контрастное
окрашивание
Гематоксилин (код
GC808)
3 мин инкубации
Контрольные ткани Печень Мембранное и
цитоплазматическое
окрашивание
Предметные стекла FLEX Предметные
стекла для ИГХ (код
К8020)
Рекомендуется для
большей адгезии срезов
тканей к предметным
стеклам
Среда для заливки Безводная,
перманентная среда
для заливки
После окрашивания
срезы должны быть
обезвожены, очищены и
залиты перманентной
средой
Устройство Dako Omnis Реагенты поставляются в
специальных флаконах
для данного устройства
Подготовка
образцов
'Пользователь должен всегда читать вкладыш к упаковке для получения
подробных инструкций по процедуре окрашивания и обращению с продуктом.
Залитые парафином срезы: Антитело может быть использовано для маркировки
фиксированных в формалине, залитых в парафин срезов ткани. Образцы ткани
должны быть разделены на срезы толщиной 4 мкм.
Предварительная обработка: Требуется предварительная обработка с
--- стр. 319 ---
высокотемпературной демаскировкой антигена (HIER) срезов тканей,
зафиксированных в формалине и залитых в парафин. Рекомендуется
предварительная обработка с высокотемпературной демаскировкой антигена с
использованием EnVision FLEX Раствор для восстановления антигена, высокий
pH, концентрированный (50х) (Dako Omnis), код GV804. Депарафинизация,
регидрация и восстановление антигена выполняются на борту Dako Omnis. См.
Руководство по эксплуатации Dako Omnis
Dako Omnis гарантирует, что срезы ткани не высохнут ни в процессе
предварительной обработки, ни во время последующей процедуры
иммуногистохимического окрашивания. Для лучшей адгезии срезов тканей к
предметным стеклам рекомендуется использовать FLEX Предметные стекла
для ИГХ, код К8020.
Процедура
окрашивания
Интерпретация
окрашивания
Эксплуатационные
характеристики
Программа: Этапы окрашивания и время инкубации предварительно
запрограммированы в программном обеспечении Dako Omnis. См. Руководство
по эксплуатации Dako Omnis для получения подробных инструкций по загрузке
предметных стекол и реагентов. Если протоколы недоступны в системе Dako
Omnis, пожалуйста свяжитесь со службой технической поддержки. Все этапы
инкубации на борту Dako Omnis выполняются при температуре 32 *"0.
Визуализация: Для визуализации рекомендуется использовать EnVision FLEX
Система детекции, высокий pH (код GV800). Визуализация выполняется на
борту Dako Omnis.
Контрастное окрашивание: Для контрастного окрашивания рекомендуется
использовать Гематоксилин (Dako Omnis), код GC808. Контрастное
окрашивание выполняется на борту Dako Omnis.
Заливка: После окрашивания на борту Dako Omnis срезы должны быть
обезвожены, очищены и залиты перманентной средой.
Контроль качества: Позитивные и негативные контрольные ткани, а также
реагент для негативного контроля должны проводиться одновременно по тому
же протоколу, что и образцы пациента. Ткани позитивного контроля должны
включать печень, а клетки/структуры должны показывать реакцию, как описано
для этой ткани в разделе "Эксплуатационные характеристики". Как негативный
контроль рекомендуется использовать FLEX Универсальный негативный
контроль, мышиный (Dako Omnis), код GA750.
Клеточное окрашивание имеет мембранный и цитоплазматический характер.
Нормальные ткани: Тестирование 30 различных нормальных тканей показало
окрашивание в цитоплазме сквамозного и столбчатого эпителия шейки матки,
толстой кишки, пищевода, кожи, тонкого кишечника, желудка и миндалин.
Другие ткани, которые окрашивались, включали железистую ткань (молочной
железы, паращитовидной железы, предстательной железы и щитовидной
железы), астроцит, белое вещество мозжечка, глиальные нити головного мозга,
дистальный каналец и капсулу Боумена почки, желчный проток, пневмоциты,
бронхи, мезотелий, межлобулярный проток поджелудочной железы, клетки
передней доли гипофиза, межлобулярный проток и ацинарные клетки слюнной
железы, ретикулярные клетки и тельца Хассаля тимуса, эндометрий и гладкая
мускулатура матки (6). Не было отмечено окрашивания надпочечников,
костного мозга, сердца, перикарда, периферических нервов, скелетных мышц,
селезенки и семенников.
АЕ1/АЕЗ реагирует с кератинизированным (56,5/65-67) и роговичным (55/64)
эпидермисом, расслоенным сквамозным эпителием внутренних органов (51/59),
расслоенным эпителием (50/58), гиперпролиферативными кератиноцитами
(48/56) и простым эпителием (45/52 и 46/54). Кератин 40 кДа присутствует в
большинстве эпителий, кроме эпидермиса взрослых (3,4).
Клетки желчных протоков в печени показывают умеренную или сильную
реакцию окрашивания, тогда как гепатоциты показывают слабую или
умеренную преимущественно мембранную реакцию окрашивания.
Ненормальные ткани: В патологических тканях Листром и Далтон (7)
протестировали клоны АЕ1/АЕЗ на более чем 60 плохо дифференцированных
эпителиальных новообразованиях, лимфомах, меланомах и саркомах. За
исключением окрашивания только 2/6 случаев мелкоклеточной карциномы и 3/5
переходноклеточной карциномы, в ходе исследования все 34 эпителиальных
новообразования были окрашены. В реактивном состоянии АЕ1/АЕЗ окрашивал
переходноклеточные карциномы лишь слабо, а окрашивание опухолевых
клеток было либо диффузно цитоплазматическим, либо перинуклеарным.
Монтаг и др. (8) обнаружили, что АЕ1/АЕЗ является чувствительным реагентом
для классификации диффузной злокачественной мезотелиомы
саркоматоидного (веретеноклеточного) типа (отмечена в 30/30 случаях), тогда
как другие типы веретеноклеточных новообразований были нереактивными
(0/49). При сравнении с анти-ЭМА в исследовании 87 новообразований,
включая 48 аденокарцином различных типов, Пинкус и др. (6) обнаружили, что
--- стр. 320 ---
АЕ1/АЕЗ окрашивает 33% случаев более надежно, чем анти-ЭМА.
Хотя 3/3 случаев хондроидной хордомы и 1/8 случаев лимфомы были
реактивны с анти-АЕ1/АЕЗ, среди 25 неэпителиальных новообразований,
включая по 4 случая меланомы и глиобластомы, окрашивания не наблюдалось
(7).
Список литературы 1. Tseng SCG, Jarvinen MJ, Nelson WG, Huang JW, Woodcock-Mitchell J, Sun TTI.
Correlation of specific keratins with different types of epithelial differentiation: Monoclonal
antibody studies. Cell 1982; 30:361
2. Woodcock-Mitchell J, Eichner R, Nelson WG, Sun TT. Immunolocalization of keratin
polypeptides in human epidermis using monoclonal antibodies. J Cell Biol 1982; 95:580
3. Moll R, Franke WW, Schiller Dl. The catalog of human cytokeratins: patterns of
expression in normal epithelia, tumors and cultured cells. Cell 1982; 31:11
4. Sun T-T, Eichner R, Schermer A, Cooper D, Nelson WG, Weiss RA. Classification,
expression and possible mechanisms of evolution of mammalian epithelial keratins: A
unifying model. In: Levine A, Topp W, Vande Woude G, Watson JD (eds.). Cancer cells
1 the transformed phenotype. New York: Cold Spring Harbor Laboratory 1984
5. Eichner R, Bonitz P, Sun T-T. Classification of epidermal keratins according to their
immunoreactivity. isoelectric point and mode of expression. J Cell Biol 1984; 98:1388
6. Pinkus GS, Etheridge CL, O’Connor EM. Are keratin proteins a better tumor marker
than epithelial membrane antigen? Amer J Clin Pathol 1986; 85:269
7. Listrom MB and Dalton LW. Comparison of keratin monoclonal antibodies MAK-6,
AE1:AE3 and CAM-5.2. Amer J Clin Pathol 1987; 88:297
8. Montag AG, Pinkus GS, Corson JM. Keratin protein immunoreactivity of sarcomatoid
and mixed types of diffuse malignant mesothelioma: An immunoperoxidase study of 30
cases. Hum Pathol 1988; 19:336
9. Nelson WG, Battifora H, Santana H and Sun T-T. Specific keratins as molecular
markers for neoplasms with a stratified epithelial origin. Cane Res 1984; 44:1600
Описание символов
J Каталожный номер i Температура
хранения
I I Изделие для диагностики
in vitro
Производитель I LOT Номер партии Содержит достаточный
объем для проведения <п>
анализов
и Дата истечения
срока годности
См. инструкции по
применению
Официальный
представитель в
Европейском
сообществе
«Аджилент Текнолоджис, Инк.» (Agilent Technologies, Inc.) 5301 Стивенс
Крик Бульвар Санта-Клара, Калифорния 95051 Соединенные Штаты
Америки (5301 Stevens Creek Blvd. Santa Clara, СА 95051 United States)
TX02438/01
Пересмотр 2020.06
--- стр. 322 ---
Иммуноген
Специфичность
Меры
предосторожности
Хранение
Обзор протокола
окрашивания*
Мембраны эндотелиальных клеток, полученные в виде везикул из плаценты
человека (2, 3).
АНТИ-С0Э4, QBEnd 10, был включен в Четвертый и Пятый международные
семинары и конференции по антигенам дифференцировки лейкоцитов
человека, и исследования различных лабораторий подтвердили его
реактивность с антигеном CD34 (2, 3) и эпитопом класса II (3).
В фиксированных в формалине, залитых в парафин срезах миндалин
антитело маркирует эндотелиальные клетки.
7. Для диагностики in vitro.
8. Для профессиональных пользователей.
9. Данный продукт содержит азид натрия (NaN3), химическое вещество, очень
токсичное в чистом виде. Хотя его концентрация в реагенте не классифицируются
как опасная, азид натрия может реагировать со свинцом и медью, образуя
взрывоопасные скопления азидов металлов. При утилизации промыть большим
количеством воды, чтобы предотвратить накопление азида металла в
водопроводе.
10. Как и с любым продуктом, полученным из биологических источников,
необходимо использовать надлежащие процедуры при обращении с ним.
11. Надевайте соответствующие средства индивидуальной защиты, чтобы
избежать контакта с глазами и кожей.
12. Неиспользованный раствор следует утилизировать в соответствии с
местными, государстеенными и федеральными нормами.
Хранить при температуре 2-8 °С. Во время хранения крышка должна быть закрыта. Не
использовать после истечения срока годности, указанного на флаконе. Стабильность на
борту составляет 375 часов. Время на борту отслеживается с помощью прюграммного
обеспечения Dako Omnis. Если реагенты хранятся в условиях, отличных от указанных,
эти условия должны быть проверены пользоватс.тсм. Нет никаких очевидных
признаков, указывающих на нестабильность данного продукта Поэтому позитивные и
негативные контрольные стекла должны окрашиваться одновременно с образцами
пациентов. Если наблюдается неожиданное окрашивание, которое не может быть
объяснено вариациями в лабораторных процедурах, и есть подозрение на проблему с
антителом, обратитесь в службу технической поддержки компании Agilent.
Шаг Пшмечание
Фикса ция/заливка Фиксированные в
формалине, залитые в
парафин
Депарафинизация на
борту
Предварительная
обработка
Envision FLEX Система
детекции, высокий pH
(код GV8(M)
30 мин
высокотемпературная
демаскировка антигена
Антитело Готовое к применению 12,5 мин инкубации
Негативный контроль FLEX Универсальный
негативный контроль,
мышиный (код GA750)
12,5 мин инкубации
Визуализация Envision FLEX Система
детекции, высокий pH
(код GV800) + Envision
FLEX+ Линкер
мышиный (код GV821)
Реагент для блокировки:
3 мин; Линкер; 10 мин;
Полимер; 20 мин;
Хромоген; 5 мин
Контрастное
окрашивание
Гематоксилин (код
GC808)
3 мин инкубации
Контрольные ткани Миндалина Цитоплазматическая
сторона поверхностей
клеточной мембраны
Предметные стекла FLEX Предметные
стекла для ИГХ (код
К8020)
Рекомендуется для
лучшей адгезии срезов
тканей к предметным
стеклам
Среда для заливки Безводная,
перманентная среда
для заливки
После окрашивания
срезы должны быть
обезвожены, очищены и
залиты перманентной
средой
Устройство Dako Omnis Реагенты поставляются в
специальных флаконах
для данного устройства
--- стр. 323 ---
^Пользователь должен всегда читать вкладыш к упаковке для получения
подробных инструкций по процедуре окрашивания и обращению с продуктом.
Подготовка
образцов
Залитые парафином срезы: Антитело может быть использовано для маркировки
фиксированных в формалине, залитых в парафин срезов ткани. Образцы ткани
должны быть разделены на срезы толщиной 4 мкм.
Предварительная обработка: Требуется предварительная обработка с
высокотемпературной демаскировкой антигена (HIER) срезов тканей,
зафиксированных в формалине и залитых в парафин. Рекомендуется
предварительная обработка с высокотемпературной демаскировкой антигена с
использованием EnVision FLEX Раствор для восстановления антигена, высокий
pH. концентрированный (50х) (Dako Omnis), код GV804. Депарафинизация,
регидрация и восстановление антигена выполняются на борту Dako Omnis. См.
Руководство по эксплуатации Dako Omnis
Dako Omnis гарантирует, что срезы ткани не высохнут ни в процессе
предварительной обработки, ни во время последующей процедуры
иммуногистохимического окрашивания. Для лучшей адгезии срезов тканей к
предметным стеклам рекомендуется использовать FLEX Предметные стекла
для ИГХ, код К8020.
Процедура
окрашивания
Интерпретация
окрашивания
Эксплуатационные
характеристики
Список литературы
Программа: Этапы окрашивания и время инкубации предварительно
запрограммированы в программном обеспечении Dako Omnis. См. Руководство
по эксплуатации Dako Omnis для получения подробных инструкций по загрузке
предметных стекол и реагентов. Если протоколы недоступны в системе Dako
Omnis, пожалуйста свяжитесь со службой технической поддержки. Все этапы
инкубации на борту Dako Omnis выполняются при температуре 32 ®С.
Визуализация: Для визуализации рекомендуется использовать EnVision FLEX
Система детекции, высокий pH (Dako Omnis), код GV800 в комбинанции с
EnVision FLEX+ Линкер мышиный (Dako Omnis), код GV821. Визуализация
выполняется на борту Dako Omnis.
Контрастное окрашивание: Для контрастного окрашивания рекомендуется
использовать Гематоксилин (Dako Omnis), код GC808. Контрастное
окрашивание выполняется на борту Dako Omnis.
Заливка: После окрашивания на борту Dako Omnis срезы должны быть
обезвожены, очищены и залиты перманентной средой.
Контроль качества: Позитивные и негативные контрольные ткани, а также
реагент для негативного контроля должны проводиться одновременно по тому
же протоколу, что и образцы пациента. Ткани позитивного контроля должны
включать миндалину, а клетки/структуры должны показывать реакцию, как
описано для этой ткани в разделе "Эксплуатационные характеристики". Как
негативный контроль рекомендуется использовать FLEX Универсальный
негативный контроль, мышиный (Dako Omnis), код GA750.
Клеточное окрашивание имеет мембранный характер.
Нормальные ткани: Антитело маркирует капилляры большинства тканей, а также
пупочную артерию и, в меньшей степени, вену. Антитело не маркирует
эндотелий большинства крупных сосудов и эндотелий плацентарных синусов (8).
В печени эндотелиальные клетки портальных сосудов и перипортальных
синусоидов показывают умеренную или сильную реакцию окрашивания.
Ненормальные ткани: В общей сложности 112 сосудистых опухолей, 54
карциномы различных типов и 45 неоваскулярных веретеноклеточных опухолей
были окрашены анти-С034, клон QBEnd-10 (2). Все (22/22) доброкачественные
опухоли сосудистого происхождения показали иммунореактивность, тогда как
только пять из восьми лимфангиом продемонстрировали слабую очаговую
реакцию с QBEnd-10 (2). Опухолевые клетки в ангиосаркоме, образующие
вазообразные участки и солидные участки, проявили иммунореактивность к
QBEnd-10 в 17/23 и 13/24 случаях, соответственно (2). Пролиферирующие
сосуды и большинство веретенообразных клеток в саркоме Калоши были
помечены во всех 40 случаях.
Только в одном из 54 случаев карциномы наблюдалась люминальная реакция
на QBend-10. Однако в 17 из 45 веретеноклеточных опухолей наблюдалась
иммунореакция (2).
10. Campos L, Guyotat D, Archimbaud E, Devaux Y, Treille D, Larese A, et al. Surface
marker expression in adult acute myeloid leukaemia: correlations with initial
characteristics, morphology and response to therapy. Br J Haematol 1989;72:161-6.
11. Ramani P,Bradley NJ, Fletcher CDM. QBEND/10, a new monoclonal antibody to
endothelium: assesment of its diagnostic utility in paraffin sections. Histopathology
1990:17:237-242.
12. Fina L, Molgaard HV, Robertson D, Bradley NJ, Monaghan P, Delia D, et al.
--- стр. 324 ---
Expression of the CD34 gene in vascular endothelial cells. Blood 1990;75(12):2417-
2426.
13. Nishio H, Tada J, Hashiyama M, Him J, Ingles-Esteve J, Suda T. MC7, CD34
workshop panel report. In: Kishimoto T, Kikutani H, von dem Borne AEG, Goyert SM,
Mason DY, Miyasaka M, et al., editors. Leucocyte typing VI. White cell differentiation
antigens. Proceedings of the 6th International Workshop and Conference; 1996 Nov 10-
14; Kobe, Japan. New York, London: Garland Publishing Inc.; 1997. p. 974-76.
14. Krause DS, Fackler MJ, Civin Cl, May WS. CD34: structure, biology, and clinical
utility (review). Blood 1996;87:1-13.
15. Civin Cl, Trischmann TM, Fackler MJ, Bernstein ID, Buhring HJ, Campos L, et al.
M7.1. Report on the CD34 cluster workshop. In: Knapp W, DOrken B, Gilks WR, Rieber
EP. Schmidt RE, Stein H, et al., editors. Leukocyte typing IV. White cell differentiation
antigens. Proceedings of the 4th International Workshop and Conference; 1989 Feb 21-
25; Vienna, Austria. Oxford, New York, Tokyo: Oxford University Press; 1989. p. 818-
25.
16. Civin Cl, Strauss LC, Fackler MJ, Trischmann TM, Wiley JM, Loken MR. Positive
stem cell selection - basic science. Prog Clin Biol Res 1990;333:387-402.
17. Dercksen MW, Daams GM, de Haas M, von dem Borne AEG, van der Schoot CE.
M10.2 Characterization of the CD34 cluster. In: Schlossman SF, Boumsell L, Gilks W.
Harlan JM, Kishimoto T, Morimoto C, et al., editors. Leucocyte typing V. White cell
differentiation antigens. Proceedings of the 5th International Workshop and Conference;
1993 Nov 3-7; Boston, USA. Oxford. New York, Tokyo: Oxford University Press; 1995.
p. 850-3.
Описание символов
I I Каталожный номер i Температура
хранения
I, и ',У Р .„и 1 Изделие для диагностики in vitro
Производитель I I Номер партии Содержит достаточный объем для
проведения <п> анализов
Дата истечения
срока годности
См. инструкции по
применению
Официальный
представитель в
Европейском сообществе
Agilent Technologies Singapore (International) Pte Ltd. No.
Singapore, 768923
Tel. +44 1 61 492 7050
www.agilent.com
Yishun Avenue 7
--- стр. 325 ---
D ako
Антитела поликлональные
кроличьи к человеческому S100,
Готовые к применению, ФЛЕКС,
для использования в Дако Омнис,
12 мл
готовые к применению
ФЛЕКС, для использования
в Дако Омнис
Код GA504
Назначение Для диагностики in vitro
Антитела поликлональные кроличьи к человеческому S100, готовые к
лрименению, ФЛЕКС. для использования в Дако Омнис лредназначены для
использования в иммуногистохимии (ИГХ) на устройстве Dako Omnis. Это
антитело маркирует клетки, экспрессирующие S100, и является полезным для
классификации 8100-положительных новообразований, таких как
злокачественная меланома (1, 2), гистиоцитоз Лангерганса (3),
хондробластома (4) и шваннома (5). Дифференциальной классификации
опухолей помогают результаты, полученные с помощью панели антител.
Клиническая интерпретация любого окрашивания или его отсутствия должна
быть дополнена морфологическими исследованиями с использованием
надлежащего контроля и должна оцениваться в контексте истории болезни
пациента и других диагностических тестов квалифицированным патологом.
Это антитело предназначено для использования после того, как первичный
диагноз опухоли был поставлен с помощью обычной гистопатологии с
использованием неиммунологических гистохимических окрасок.
Сводный обзор
и пояснение
S100 - это мультигенное семейство низкомолекулярных (Mr от 9000 до 13000)
Са2+-связывающих белков. Семейство включает 19 представителей, которые
дифференциально экспрессируются в большом количестве типов клеток. Так,
S100B (ранее SIOOj) наиболее распространен в глиальных клетках
центральной и периферической нервной системы, в меланоцитах, хондроцитах
и адипоцитах, тогда как S100A1 (ранее S100A/S100a) наиболее распространен
в кардиомиоцитах, медленно сокращающихся клетках скелетных мышц,
эпителиальных клетках слюнных желез и клетках почек. Кроме того, S100B был
обнаружен в опухолевых клетках и субпопуляциях нейронов, а S100A1 также
был обнаружен в нейронах гиппокампа. S100A6 экспрессируется
фибробластами, гладкими и сердечными мышечными клетками (5).
Представители семейства S100 были вовлечены в Са2+-зависимую регуляцию
различных внутриклеточных действий, например, фосфорилирования белков,
пролиферации клеток (включая неопластическую трансформацию) и
дифференциации (7).
Панель антител, включающая поликлональный анти-8100 компании Dako, была
применена Международной группой по изучению лимфомы для классификации
опухолей с подозрением на гистиоцитарный/дендритный клеточный тип (6).
См. Общие инструкции Dako по иммуногистохимическому окрашиванию или
инструкцию системы детекции для процедур ИГХ; Принцип процедуры,
необходимые, но не поставляемые материалы, хранение, подготовка образцов,
процедура окрашивания, контроль качества, устранение неполадок,
интерпретация окрашивания, общие ограничения.
Реагент, входящий
в комплект
поставки
Иммуноген
Специфичность
Готовые к применению поликлональные кроличьи антитела поставляются в жилкой
форме в буфере содержащей стабилизирующий протеин и 0,015 моль/л азида натрия.
SI00, выделенный из мозга коровы.
Антитело было твердофазно абсорбировано с белками человеческой плазмы и
коровьей сыворотки.
При Вестерн-блоттинге очищенных рекомбинантных белков 8100 человека
--- стр. 326 ---
антитело сильно маркирует S100B, слабо - S100A1 и очень слабо - S100A6. Не
наблюдалось реакции с другими протеинами S100, S100A2, S100A3 и S100A4
(8).
В непрямом ИФА антитело не дает реакции с человеческой плазмой и коровьей
сывороткой.
Как было продемонстрировано методом ИГХ на фиксированных в формалине,
залитых в парафин срезах тканей, антитело перекрестно реагирует с
эквивалентным белком 5100 человека.
Меры
предосторожности
13. Для диагностики in vitro.
14. Для профессиональных пользователей.
15. Данный продукт содержит азид натрия (NaN3), химическое вещество, очень
токсичное в чистом виде. Хотя его концентрация в реагенте не классифицируются
как опасная, азид натрия может реагировать со свинцом и медью, образуя
взрывоопасные скопления азидов металлов. При утилизации промыть большим
количеством воды, чтобы предотвратить накопление азида металла в
водопроводе.
16. Как и с любым продуктом, полученным из биологических источников,
необходимо использовать надлежащие процедуры при обращении с ним.
17. Надевайте соответствующие средства индивидуальной защиты, чтобы
избежать контакта с глазами и кожей.
18. Неиспользованный раствор следует утилизировать в соответствии с
местными, государственными и федеральными нормами.
Хранение
Обзор протокола
окрашивания*
Хранить при температуре 2-8 ^С. Во время хранения крышка лолжна быть закрыта. Не
использовать после истечения срока годности, указанного на флаконе. Стабильность на
борту составляет 375 часов. Время на борту отслеживается с помощью программного
обеспечения Dako Omnis. Если реагенты хранятся в условиях, отличных от указанных,
эти условия должны быть проверены пользователем. Нет никаких очевидных
признаков, указывающих на нестабильность данного продукта. Поэтому позитивные и
негативные контрольные стекла должны окрашиваться одновременно с образиа.ми
пациентов. Если наблюдается неожиданное окрашивание, которое не может быть
объяснено вариациями в лабораторных процедурах, и есть подозрение на проблему с
антителом, обратитесь в службу технической поддержки компании Agilent.
Шаг Прима чаши
Фиксация/заливка Фиксированные в
формалине, залитые в
парафин
Деларафинизация на
борту
Предварительная
обработка
Envision FLEX Система
детекции, высокий pH
(код GV804)
30 мин
высокотемпературная
демаскировка антигена
Антитело Готовое к применению 17.5 мин инкубации
Негативный контроль FLEX Универсальный
негативный контроль,
кроличий (код СА6(Ю)
17.5 мин инкубации
Визуализация Envision FLEX Система
детекции, высокий pH
(код GV8(Ю)
Реагент для блокировки:
3 мин; Полимер; 20 мин;
Хромоген; 5 мин
Контрастное
окрашивание
Гематоксилин (код
GC808)
3 мин инкубации
Контрольные ткани Толстая кишка Мембранное и
цитоплазматическое
окрашивание
Предметные стекла FLEX Предметные
стекла для ИГХ (код
К8020)
Рекомендуется для
большей адгезии срезов
тканей к предметным
стеклам
Среда для заливки Безводная,
перманентная среда
для заливки
После окрашивания
срезы должны быть
обезвожены, очищены и
залиты перманентной
средой
Устройство Оако Omnis Реагенты поставляются в
слециальных флаконах
для данного устройства
Подготовка
*Пользователь должен всегда читать вкладыш к упаковке для получения
подробных инструкций по процедуре окрашивания и обращению с продуктом.
Залитые парафином срезы: Антитело может быть ислользовано для маркировки
--- стр. 327 ---
образцов
Предварительная обработка: Требуется предварительная обработка с
высокотемпературной демаскировкой антигена (HIER) срезов тканей,
зафиксированных в формалине и залитых в парафин. Рекомендуется
предварительная обработка с высокотемпературной демаскировкой антигена с
использованием EnVision FLEX Раствор для восстановления антигена, высокий
pH, концентрированный (50х) (Dako Omnis), код GV804. Депарафинизация,
регидрация и восстановление антигена выполняются на борту Dako Omnis. См.
Руководство по эксплуатации Dako Omnis
Dako Omnis гарантирует, что срезы ткани не высохнут ни в процессе
предварительной обработки, ни во время последующей процедуры
иммуногистохимического окрашивания. Для лучшей адгезии срезов тканей к
предметным стеклам рекомендуется использовать FLEX Предметные стекла
для ИГХ, код К8020.
фиксированных в формалине, залитых в парафин срезов ткани. Образцы ткани
должны быть разделены на срезы толщиной 4 мкм.
Процедура
окрашивания
Программа: Этапы окрашивания и время инкубации предварительно
запрограммированы в программном обеспечении Dako Omnis. См. Руководство
по эксплуатации Dako Omnis для получения подробных инструкций по загрузке
предметных стекол и реагентов. Если протоколы недоступны в системе Dako
Omnis, пожалуйста свяжитесь со службой технической поддержки. Все этапы
инкубации на борту Dako Omnis выполняются при температуре 32 ®С.
Визуализация: Для визуализации рекомендуется использовать EnVision FLEX
Система детекции, высокий pH (код GV800). Визуализация выполняется на
борту Dako Omnis.
Контрастное окрашивание: Для контрастного окрашивания рекомендуется
использовать Гематоксилин (Dako Omnis), код GC808. Контрастное
окрашивание выполняется на борту Dako Omnis.
Заливка: После окрашивания на борту Dako Omnis срезы должны быть
обезвожены, очищены и залиты перманентной средой.
Контроль качества: Позитивные и негативные контрольные ткани, а также реагент для
негативного контроля должны проводиться одновре.менно по тому же протоколу, что и
образцы пациента. Ткани позитивного контроля должны включать толстую кишку, а
клетки/структуры должны показывать реакцию, как описано для этой ткани в разделе
"'Эксплуатационные характеристики". Как негативный контроль рекомендуется
использовать FLEX Универсальный негативный контроль, кроличий (Dako Omnis). код
GA600.
И нте рп рета ция
окрашивания
Эксплуатационные
характеристики
Клетки, помеченные антителом, демонстрируют ядерное и цитоплазматическое
окрашивание.
Нормальные ткани: Маркировка антителом наблюдается в некоторых клетках
Лангерганса и меланоцитах кожи, интердигитирующих ретикулярных клетках в
лимфатических узлах, медуллярных эпителиальных ретикулярных клетках в
тимусе, хондроцитах в хрящевой ткани, адипоцитах в некоторых, но не в других
биопсиях, миоэпителиальных клетках в слюнных железах и молочной железе,
фолликулостеллатных клетках гипофиза, шванновских и глиальных клетках
нервной ткани. Слабая маркировка обнаружена в эпителиальных клетках
молочных и потовых желез. Иммунореакция с антителом не наблюдается в
нормальных гепатоцитах, эпителии желчных протоков, эпителии желчного
пузыря, эпителии пищевода, желудка, тонкого и толстого кишечника, почечном
эпителии, уротелиальных и эндотелиальных клетках (9). В толстой кишке
клетки-спутники периферических нервов в сплетении Ауэрбаха показывают
умеренную или сильную ядерную и цитоплазматическую реакцию окрашивания,
тогда как адипоциты и ганглиозные клетки в сплетении Ауэрбаха показывают
слабую или умеренную ядерную и цитоплазматическую реакцию окрашивания.
Ненормальные ткани: Из злокачественных меланом 31/31 (100%) обычных
кожных, 23/24 (96%) метастатических, включая 10 амеланотических, 6^
десмопластических и 1/1 миксоидных злокачественных меланом были
помечены антителом. У 30 доброкачественных и 15 дислластических невусов
универсальная однородная маркировка наблюдалась во всех случаях (1). В
другом исследовании первичных злокачественных меланом кожи (2) 67^7
(1()0%) были помечены антителом, включая 5/5 веретеноклеточных и
десмопластических опухолей. В 27 случаях гистиоцитоза Лангерганса 88,5%
были помечены антителом, это включало как локализованное, так и
диссеминированное заболевание (3). Из 30 исследованных хондробластом все
продемонстрировали сильную маркировку хондробластов антителом (4). Из
типичных доброкачественных шванном 12/12 были помечены антителом, а
также 2/4 злокачественных шванном. Из нейрофибром 6/6 показали слабую
экспрессию S100, за исключением некоторых изолированных клеток и ряда
угревидных клеточных отростков, которые были отчетливо помечены (5).
Следует отметить, что S100 экспрессировали 15 из 133 немеланоцитарных
--- стр. 328 ---
Список литературы
первичных кожных новообразований, т.е. 7/16 эккриновых карцином, 2/8
метастатических висцеральных карцином, 2/2 злокачественных шванном и 4/5
лейомиосарком (2). Из первичных аденокарцином 24/25 (84%) яичников, 12/15
(80%) слюнных желез, 28/36 (78%) эндометрия, 15/23 (65%) почек, 12/20 (60%)
молочной железы, 7/28 (25%) толстой/прямой кишки, 2Л0 (20%) желудка и 2/27
(7%) аденокарцином легких были помечены антителом. Аденокарциномы
пищевода, желчного пузыря, поджелудочной железы и простаты не были
помечены в этом исследовании. Большинство первичных новообразований,
которые экспрессировали S100,
также окрашивались на этот белок в метастатических очагах (10), Из
рабдомиосаркомы 7/60 (12%) были помечены антителом. Помеченные S100
опухоли также окрашивались на виментин и десмин (11),
18. Orchard GE. Comparison of immunohistochemical labelling of melanocyte
differentiation antibodies melan-A, tyrosinase and HMB45 with NKIC3 and SI00 protein
in the evaluation of benign naevi and malignant melanoma. Histochem J 2000; 32:475-
81.
19. Wick MR, Swanson PE, Rocamora A. Recognition of malignant melanoma by
monoclonal antibody HMB-45. An immunohistochemical study of 200 paraffin-
embedded cutaneous tumors. J Cutan Pathol 1988; 15:201-7.
20. Ye F, Huang S-W, Dong H-J. Histiocytosis X. S-100 protein, peanut agglutinin, and
transmission electron microscopy study. Am J Clin Pathol 1990; 94:627 -31.
21. Edel G, Ueda Y, Nakanishi J, Brinker KH. Roessner A, Blasius S, et al.
Chondroblastoma in bone. A clinical, radiological, light and immunohistochemical study.
Virchows Arch A Pathol Anat 1992; 421:355-66.
22. Gould VE, Moll R, Moll I, Lee I, Schwechheimer K, Franke WW. The intermediate
filament complement of the spectrum of nerve sheath neoplasms. Lab Invest 1986
55:463-74.
23. Pileri SA, Grogan TM, Harris NL, Banks P, Campo E, Chan JKC, et al. (review).
Tumours of histiocytes and accessory dendritic cells: an immunohistochemical approach
to classification from the International Lymphoma Study Group based on 61 cases.
Histopathology 2002; 41:1-29.
24. Donato R. Functional roles of S100 proteins, calcium-binding proteins of the EF-hand
type (review), Biochim Biophys Acta 1999; 1450:191-231.
25. Ilg EC, Schafer BW, Heizmann CW. Expression pattern of S100 calcium-binding
proteins in human tumors. Int J Cancer 1996; 68:325-32.
26. Vanstapel M-J, Gatter КС, de Wolf-Peeters C, Mason DY, Desmet VD. New sites of
human S-100 immunoreactivity detected with monoclonal antibodies. Am J Clin Pathol
1986; 85:160-8.
27. Herrera GA, Turbat-Herrera EA, Lott RL. S-100 protein expression by primary and
metastatic adenocarcinomas. Am J Clin Pathol 1988; 89:168-76.
28. Coindre J-M, de Mascarel A, Trojani M, de Mascarel I, Pages A.
Immunohistochemical study of rhabdo-myosarcoma. Unexpected staining with S100
protein and cytokeratin. J Pathol 1988; 155:127- 32.
Описание символов
LSELJ Каталожный номер Температура
хранения
1 Изделие для диагностики in
vitro
iiil Производитель Номер партии Содержит достаточный объем
для проведения <п> анализов
S Дата истечения
срока годности
С® См. инструкции по
применению
1 1 1 Официальный
представитель в
Европейском
сообществе
Agilent Technologies Singapore (International) Pte Ltd. No. 1 Yishun Avenue 7
Singapore, 768923
Tel. +44 161 492 7050
www.agilent.com
TX02438/01
Пересмотр 2020.06
--- стр. 329 ---
( Л D ako
С€
Антитела поликлональные кроличьи к человеческому Глиальному фибриллярному кислому белку
(GFAP), Готовые к применению, ФЛЕКС, для использования в Дако Омнис, 12 мл
Ф Л Е К С , для использования
в Дако Омнис
Код GA524
Назначение Для диагностики in vitro
Антитела поликлональные кроличьи к человеческому Глиальному
фибриллярному кислому белку (GFAP), Готовые к применению, ФЛЕКС. для
использования в Дако Омнис предназначены для использования в
иммуногистохимии (ИГХ) на устройстве Dako Omnis. Это антитело
предназначено для идентификации астроцитов в центральной нервной системе
(ЦНС). Результаты анализа помогают в классификации новообразований
астроцитарного/глиального происхохадения (2-4). Дифференциальной
классификации опухолей помогают результаты, полученные с помощью панели
антител. Клиническая интерпретация любого окрашивания или его отсутствия
должна быть дополнена морфологическими исследованиями с использованием
надлежащего контроля и должна оцениваться в контексте истории болезни
пациента и других диагностических тестов квалифицированным патологом. Это
антитело предназначено для использования после того, как первичный диагноз
опухоли был поставлен с помощью обычной гистопатологии с использованием
неиммунологических гистохимических окрасок.
Сводный обзор
и пояснение
Реагент, входящий
в комплект
поставки
Иммуноген
Специфичность
GFAP - это интрацитоплазматический нитевидный белок с массой 50 кДа,
составляющий часть цитоскелета астроцитов, и он оказался наиболее
специфичным маркером клеток астроцитарного происхождения. В центральном
стержневом домене молекулы GFAP имеет значительную структурную
гомологию с другими промежуточными филаментами (5). Функционально
считается, что GFAP играет важную роль в подвижности и форме астроцитов,
обеспечивая структурную стабильность астроцитарных процессов (1). После
повреждения ЦНС человека, вызванного травмой, генетическими нарушениями
или химическими веществами, астроциты пролиферируют и демонстрируют
обширную гипертрофию клеточного тела и процессов, а GFAP заметно
повышается. Напротив, при увеличении степени злокачественности астроцитов
наблюдается прогрессирующая потеря продукции GFAP (5).
За пределами ЦНС чувствительные методы обнаружения могут
демонстрировать GFAP в шванновских клетках, клетках энтеральной глии,
новообразованиях слюнных желез и метастазирующих карциномах почек.
Кроме того, иммунореактивность GFAP была продемонстрирована в
эпиглоточном хряще, питуицитах, незрелых олигодендроцитах. папиллярных
менингиомах (1) и миоэпителиальных клетках молочной железы (6).
См. Общие инструкции Dako по иммуногистохимическому окрашиванию или
инструкцию системы детекции для процедур ИГХ: Принцип процедуры,
необходимые, но не поставляемые материалы, хранение, подготовка образцов,
процедура окрашивания, контроль качества, устранение неполадок,
интерпретация окрашивания, общие ограничения.
Готовые к применению поликлональные кроличьи антитела поставляются в
жидкой форме в буфере содержащем стабилизирующий протеин и 0,015 моль/л
азида натрия
GFAP, выделенный из спинного мозга коров.
Антитело было твердофазно-абсорбировано с белками сыворотки крови
человека и коровы.
При перекрестном иммуноэлектрофорезе с использованием 50 мкл
--- стр. 330 ---
концентрированного антитела на см2 площади геля не наблюдается реакции с
2 мкл человеческой плазмы и 2 мкл коровьей сыворотки. Антитело показывает
один отчетливый преципитат (GFAP) с экстрактом мозга коровы. Окрашивание:
Кумасси бриллиантовый голубой.
В непрямом ИФА антитело не дает реакции с человеческой плазмой и коровьей
сывороткой.
Меры
предосторожности
19. Для диагностики in vitro.
20. Для профессиональных пользователей.
21. Данный продукт содержит азид натрия (NaN3), химическое вещество, очень
токсичное в чистом виде. Хотя его концентрация в реагенте не классифицируются
как опасная, азид натрия может реагировать со свинцом и медью, образуя
взрывоопасные скопления азидов металлов. При утилизации промыть большим
количеством воды, чтобы предотвратить накопление азида металла в
водопроводе.
22. Как и с любым продуктом, полученным из биологических источников,
необходимо использовать надлежащие процедуры при обращении с ним.
23. Надевайте соответствующие средства индивидуальной защиты, чтобы
избежать контакта с глазами и кожей. *
24. Неиспользованный раствор следует утилизировать в соответствии с
местными, государственными и федеральными нормами.
Хранение
Обзор протокола
окрашивания*
Хранить при температуре 2-8 ® С . Во время хранения крышка должна быть закрыта. Нс
использовать после истечения срока годности, указанного на флаконе. Стабильность на
борту составляет 375 часов. Время на борту отслеживается с помощью программного
обеспечения Dako Omnis. Если реагенты хранятся в условиях, отличных от указанных,
эти условия должны быть проверены пользователем. Нет никаких очевидных
признаков, указывающих на нестабильность данного проду1гга. Поэтому позитивные и
негативные контрольные стекла должны окрашиваться одновременно с образца.ми
пациентов. Если наблюдается неожида1пюе окращивание. которое не может быть
объяснено вариациями в лабораторных процедурах, и есть подозрение на проблему с
антителом, обратитесь в службу технической поддержки компании Agilent.
Шаг
Ф икса ция/за л и вка Фиксированные в
формалине, залитые в
парафин
Депарафинизация на
борту
Предварительная
обработка
Envision FLEX Система
детекции, высокий pH
(код GV804)
30 мин
высокотемпературная
демаскировка антигена
Антитело Готовое к применению 12.5 мин инкубащ1и
Негативный контроль FLEX Универсальный
негативный контроль,
кроличий (код GA6(X))
12,5 мин инкубации
визуализация Envision FLEX Система
детекции, высокий pH
(код GV8(Ю)
Реагент для блокировки:
3 мин; Полимер: 20 мин;
Хромоген: 5 мин
Контрастное
окрашивание
Гематоксилин (код
GC808)
3 мин инкубации
Контрольные ткани Мозг, толстая кишка Цитоплазматическое
окрашивание
Предметные стекла FLEX Предметные
стекла для ИГХ (код
К8020)
Рекомендуется для
лучшей адгезии срезов
тканей к предметным
стеклам
Среда для заливки Безводная,
перманентная среда
для заливки
После окрашивания
срезы должны быть
обезвожены, очищены и
залиты перманентной
средой
Устройство Dako Omnis Реагенты поставляются в
специальных флаконах
для данного устройства
*Пользоватепь должен всегда читать вкладыш к упаковке для получения
подробных инструкций по процедуре окрашивания и обращению с продуктом.
Подготовка Залитые парафином срезы: Антитело может быть использовано для маркировки
--- стр. 331 ---
образцов
Предварительная обработка: Требуется предварительная обработка с
высокотемпературной демаскировкой антигена (HIER) срезов тканей,
зафиксированных в формалине и залитых в парафин. Рекомендуется
предварительная обработка с высокотемпературной демаскировкой антигена с
использованием EnVision FLEX Раствор для восстановления антигена, высокий
pH, концентрированный (50х) (Dako Omnis), код GV804. Депарафинизация,
регидрация и восстановление антигена выполняются на борту Dako Omnis. См.
Руководство по эксплуатации Оако Omnis
Dako Omnis гарантирует, что срезы ткани не высохнут ни в процессе
предварительной обработки, ни во время последующей процедуры
иммуногистохимического окрашивания. Для лучшей адгезии срезов тканей к
предметным стеклам рекомендуется использовать FLEX Предметные стекла
для ИГХ, код К8020.
фиксированных в формалине, залитых в парафин срезов ткани. Образцы ткани
должны быть разделены на срезы толщиной 4 мкм.
Процедура
окрашивания
Интерпретация
окрашивания
Эксплуатационные
характеристики
Программа: Этапы окрашивания и время инкубации предварительно
запрограммированы в программном обеспечении Dako Omnis. См. Руководство
по эксплуатации Dako Omnis для получения подробных инструкций по загрузке
предметных стекол и реагентов. Если протоколы недоступны в системе Dako
Omnis, пожалуйста свяжитесь со службой технической поддержки. Все этапы
инкубации на борту Dako Omnis выполняются при температуре 32 *"С.
Визуализация: Для визуализации рекомендуется использовать EnVision FLEX
Система детекции, высокий pH (код GV800). Визуализация выполняется на борту Dako
Omnis.
Контрастное окрашивание: Для контрастного окрашивания рекомендуется
использовать Гематоксилин (Dako Omnis), код GC808. Контрастное
окрашивание выполняется на борту Dako Omnis.
Заливка: После окрашивания на борту Dako Omnis срезы должны быть
обезвожены, очищены и залиты перманентной средой.
Контроль качества: Позитивные и негативные контрольные ткани, а также
реагент для негативного контроля должны проводиться одновременно по тому
же протоколу, что и образцы пациента. Ткани позитивного контроля должны
включать мозг и толстую кишку, а клетки/струюуры должны показывать
реакцию, как описано для этой ткани в разделе "Эксплуатационные
характеристики". Как негативный контроль рекомендуется использовать FLEX
Универсальный негативный контроль, кроличий (Dako Omnis), код GA600.
Клетки, помеченные антителом, демонстрируют цитоплазматическое
окрашивание.
Нормальные ткани: Антитело маркирует астроциты в мозге (3), фолликулярно
звездчатые клетки гипофиза (7), клетки Шванна и клетки энтеральной глии.
Кроме того, маркируются миоэпителиальные клетки молочной железы (6). В
мозге астроциты показывают умеренную или сильную реакцию окрашивания. В
толстой кишке ганглиозные клетки в сплетениях Ауэрбаха и Мейсснера
показывают слабую или умеренную реакцию окрашивания. Окрашивание не
наблюдается в мочевом пузыре, соединительной ткани, печени, лимфатической
ткани, мышцах, поджелудочной железе, коже и мочеточниках.
Ненормальные ткани: Все 23 глиобластомы мультиформной (ГБМ) были
маркированы антителом. В 20 из 23 ГБМ по меньшей мере 50% злокачественных
клеток были положительны на GFAP. Только 3 из 22 случаев карциномы,
метастазирующей в мозг, были промаркированы. Эта маркировка была очаговой
и ограничивалась менее чем 10% злокачественных клеток (3). 5/5 полушарных
астроцитом редкого гранулярного типа показали фокальное маркирование GFAP
антителом (4), которое также маркировало 7/7 плеоморфных ксантоастроцитом
(8) и фолликуло-стеллатные клетки передней доли в 20/20 новообразованиях
гипофиза (7). При медуллобластоме (МБ) "десмопластического варианта"
антитело маркировало 8/11 случаев. Маркировка проявлялась в виде очагов
меченых GFAP клеток с неопластической морфологией. Только в 4/31 МБ
"классического варианта" был обнаружен этот тип неопластических клеток, но в
классических МБ GFAP-меченые клетки с морфологией реактивных астроцитов
наблюдались в 27/31 случаев (9). Также было показано, что антитело маркирует
15/38 шванном (38%) и 2 случая плексиформной нейрофибромы, в то время как
16 случаев дермальной нейрофибромы были нереактивными (10). При
различных неопластических и неопластических заболеваниях молочной железы
процент миоэпителиальных клеток, реагирующих с антителом, был значительно
увеличен по сравнению с нормальной молочной железой, тогда как в
злокачественных клетках 183 карцином молочной железы различных типов
маркировка не встречалась (6). Антитело не маркировало менингиомы в
исследовании, включавшем 36 пациентов (11).
--- стр. 332 ---
Список литературы 29. Eng LF, Ghimikar RS. Lee YL. Glial fibrillary acidic protein: GFAP-thirty-one years
(1969-2000). Neurochem Res 2000;25:1439-51,
30. Reske-Nielsen E. Oster S, Reintoft I. Astrocytes in the prenatal central nervous
system. Acta path microbiol immunol scand Sect. A 1987;95:339-46.
31. Oh D, Prayson RA. Evaluation of epithelial and keratin markers in glioblastoma
multiforme. An immuno-histochemical study. Arch Pathol Lab Med 1999;123:917-20.
32. Geddes JF, Thom M, Robinson SFD, Revesz T. Granular cell change in astrocytic
tumors. Am J Surg Pathol 1996;20:55-63.
33. Rutka JT. Murakami M. Dirks PB, Hubbard SL. Becker LE, Fukuyama K, et al. Role
of glial filaments in cells and tumors of glial origin: a review. J Neurosurg 1997-87 420-
30.
34. Viale G, Gambacorta M, Coggi G, Dell'Orto P. Milan! M, Doglioni C. Glial fibrillary
acidic protein immunoreactivity in normal and diseased human breast Virchows Arch A
Pathol Anat 1991;418:339-48.
35. Morris CS, Hitchcock E. Immunocytochemistry of folliculo-stellate cells of normal and
neoplastic human pituitary gland. J Clin Pathol 1985;38:481-8.
36. Powell SZ, Yachnis AT, Rorke LB, Rojiani AM, Eskin ТА. Divergent differentiation in
pleomorphic xantho-astrocytoma. Evidence for a neuronal element and possible
relationship to ganglion cell tumors. Am J Surg Pathol 1996;20:80-5.
37. Giangaspero F. Chieco P, Ceccarelli C, Lisignoli G, Pozzuoli R, Gambacorta M, et
al. "Desmoplastic" versus "classic" medulloblastoma: comparison of DMA content,
histopathology and differentiation. Virchows Arch A Pathol Anat 1991;418:207-14.
38. Kawahara E, Oda Y, Ooi A, Katsuda S. Nakanishi I, Umeda S. Expression of glial
fibrillary acidic protein (GFAP) in peripheral nerve sheath tumors. A comparative study
of immunoreactivity of GFAP, vimentin. S-100 protein, and neurofilament in 38
schwannomas and 18 neurofibromas. Am J Surg Pathol 1988;12:115-20.
39. Thompson L, Bouffard JP, Sandberg GD, Mena H. Primary ear and temporal bone
meningiomas: a clinicopathologic study of 36 cases with a review of the literature. Mod
Pathol 2003;16:236-45.
Описание символов
Каталожный номер
Производитель
Температура
хранения
I LOT Номер партии
I IVD
vitro
Изделие для диагностики in
Содержит достаточный
объем для проведения <п> анализов
Дата истечения
срока годности
См. инструкции по
применению
Официальный
представитель в
Европейском
сообществе
Agilent Technologies Singapore (International) Pte Ltd. No. I Yishun Avenue 7
Singapore. 768923
Tel. +44 161 492 7050
www.agilent.com
TX02438/01
Пересмотр 2020.06
--- стр. 333 ---
Dako
а
Антитела моноклональные
мышиные к человеческому CD20cy,
клон L26, Готовые к применению,
ФЛЕКС, для использования в Дако
Омнис, 12 мл
ФЛЕКС, для использования
в Дако Омнис
Код GA604
Назначение
Синоним антигена
Сводный обзор
и пояснение
Реагент, входящий
в комплект
поставки
Иммуноген
Специфичность
Для диагностики in vitro
Антитела моноклональные мышиные к человеческому CD20cy, клон L26,
готовые к применению, ФЛЕКС, для ислользования в Дако Омнис
предназначены для использования в иммуногистохимии (ИГХ) на устройстве
Dako Omnls. Это антитело маркирует клетки В-клеточной линии и является
полезным для классификации новообразований В-клеточного происхождения
(1). Дифференциальной классификации опухолей помогают результаты,
полученные с помощью панели антител. Клиническая интерпретация любого
окрашивания или его отсутствия должна быть дополнена морфологическими
исследованиями с ислользованием надлежащего контроля и должна
оцениваться в контексте истории болезни пациента и других диагностических
тестов квалифицированным патологом. Это антитело предназначено для
использования после того, как первичный диагноз опухоли был поставлен с
помощью обычной гистопатологии с использованием неиммунологических
гистохимических окрасок.
L26 (2).
CD20 • это трансмембранный, негликозилированный белок, который
экслрессируется на лредшественниках В-клеток и зрелых В-клетках, но
теряется после дифферекцировки в ллазматические клетки (3). В дремлющих
В-клетках CD20 появляется в нефосфорилированной форме 33 кДа. После
стимуляции митогеном CD20 сильно фосх^рилируется (изоформы 35-37 кДа) и
является доминирующим фосфопротеином в активированных В-клетках.
линиях В-клеток и волосатоклеточных лейкозах (2). Длинные N- и С-концы белка
расположены на цитоплазматической стороне мембраны, и только
незначительная часть белка находится на поверхности клетки (3). Антитела,
реагирующие с цитоплазматическими эпитопами С020, обозначаются как
CD20cy (2). Предполагается, что С020 играет непосредственную роль в
регуляции трансмембранного проводящего потока Са2+ в В-клетках, что
указывает на возможную функцию CD20 как регулятора пролиферации и
дифференцировки (3).
См. Общие инструкции Dako по иммуногистохимическому окрашиванию или
инструкцию системы детекции для процедур ИГХ; Принцип процедуры,
необходимые, но не поставляемые материалы, хранение, подготовка образцов,
процедура окрашивания, контроль качества, устранение неполадок,
интерпретация окрашивания, общие ограничения.
Готовые к применению моноклональные мышиные антитела поставляются в
жидкой форме в буфере содержащем стабилизирующий протеин и 0,015 моль/л
азида натрия.
Клон: L26 (1,4). Изотип; lgG2a, kappa.
В-клетки миндалины человека (4).
Анти-человеческий CD20cy, клон L26, был кластеризован как анти-СС20 на
Пятом международном семинаре и конференции по антигенам
дифференцировки лейкоцитов человека (2).
Анализ методом электрофореза в полиакриламидном геле с
додецилсульфатом натрия иммунопреципитатов, образованных между 1251-
меченным лизатом клеток миндалин и антителом, показывает реакцию
преимущественно с полипептидами 30 кДа и 33 кДа (4).
Исследования с использованием клеток COS-1, трансфицированных кДНК,
--- стр. 334 ---
Меры
предосторожности
Хранение
кодирующей молекулу CD20, показывают, что антитело маркирует
внутрицитоплаэматический эпитоп, локализованный на молекуле CD20 (5).
25. Для диагностики in vitro.
26. Для профессиональных пользователей.
27. Данный продукт содержит азид натрия (NaN3), химическое вещество, очень
токсичное в чистом виде. Хотя его концентрация в реагенте не классифицируются
как опасная, азид натрия может реагировать со свинцом и медью, образуя
взрывоопасные скопления азидов металлов. При утилизации промыть большим
количеством воды, чтобы предотвратить накопление азида металла в
водопроводе.
28. Как и с любым продуктом, полученным из биологических источников,
необходимо использовать надлежащие процедуры при обращении с ним.
29. Надевайте соответствующие средства индивидуальной защиты, чтобы
избежать контакта с глазами и кожей.
30. Неиспользованный раствор следует утилизировать в соответствии с
местными, государственными и федеральными нормами.
Хранить при температуре 2-8 °С. Во время хранения крышка должна быть закрыта. Не
использовать после истечения срока годности, указанного на флаконе. Стабильность на
борту составляет 375 часов. Время на борту отслеживается с помощью программного
обеспечения Dako Omnis. Если реагенты хранятся в условиях, отличных от указанных,
эти условия должны быть проверены пользователем. Нет никаких очевидных
признаков, указывающих на нестабильность данного продукта. Поэтому позитивные и
негативные контрольные стекла должны окращиваться одновременно с образцами
пашентов. Если наблюдается неожиданное окрашивание, которое не может быть
объяснено вариациями в лабораторных процедурах, и есть подозрение на проблему с
антителом, обратитесь в службу технической поддержки компании Agilent.
Обзор протокола
окрашивания*
Шаг Прммечмто
Фиксация/заливка Фиксированные в
формалине, залитые в
парафин
Депарафинизация на
борту
Предварительная
обработка
Envision FLEX Система
детекции, высокий pH
(код GV804)
30 мин
высокотемпературная
демаскировка антигена
Антитело Готовое к применению 12,5 мин инкубации
Негативный контроль FLEX Универсальный
негативный контроль,
мышиный (код GA750)
12,5 мин инкубации
Визуализация Envision FLEX Система
детекции, высокий pH
(код GV800) + Envision
FLEX+ Линкер
мышиный (код GV821)
Реагент для блокировки:
3 мин; Линкер; 10 мин;
Полимер; 20 мин;
Хромоген: 5 мин
Контрастное
окрашивание
Гематоксилин (код
GC808)
3 мин инкубации
Контрольные ткани Миндалина Цитоплазматическая
сторона поверхностей
клеточной мембраны
Предметные стекла FLEX Предметные
стекла для ИГХ (код
К8020)
Рекомендуется для
лучшей адгезии срезов
тканей к предметным
стеклам
Среда для заливки Безводная,
перманентная среда
для заливки
После окрашивания
срезы должны быть
обезвожены, очищены и
залиты перманентной
средой
Устройство Dako Omnis Реагенты поставляются в
слециальных флаконах
для данного устройства
^Пользователь должен всегда читать вкладыш к упаковке для получения
подробных инструкций по процедуре окрашивания и обращению с продуктом.
Подготовка
образцов
Залитые парафином срезы: Антитело может быть использовано для маркировки
фиксированных в формалине, залитых в парафин срезов ткани. Образцы ткани
должны быть разделены на срезы толщиной 4 мкм.
Предварительная обработка: Требуется предварительная обработка с
--- стр. 335 ---
высокотемпературной демаскировкой антигена (HIER) срезов тканей,
зафиксированных в формалине и залитых в парафин. Рекомендуется
предварительная обработка с высокотемпературной демаскировкой антигена с
использованием EnVision FLEX Раствор для восстановления антигена, высокий
pH, концентрированный (50х) (Dako Omnis), код GV804. Депарафинизация,
регидрация и восстановление антигена выполняются на борту Dako Omnis. См.
Руководство по эксплуатации Dako Omnis
Dako Omnis гарантирует, что срезы ткани не высохнут ни в процессе
предварительной обработки, ни во время последующей процедуры
иммуногистохимического окрашивания. Для лучшей адгезии срезов тканей к
предметным стеклам рекомендуется использовать FLEX Предметные стекла
для ИГХ, код К8020.
Процедура
окрашивания
Ограничения,
связанные с
данным продуктом
Интерпретация
окрашивания
Эксплуатационные
характеристики
окрашивания рекомендуется
код GC808. Контрастное
Программа: Этапы окрашивания и время инкубации предварительно
запрограммированы в программном обеспечении Dako Omnis. См. Руководство
по эксплуатации Dako Omnis для получения подробных инструкций по загрузке
предметных стекол и реагентов. Если протоколы недоступны в системе Dako
Omnis, пожалуйста свяжитесь со службой технической поддержки. Все этапы
инкубации на борту Dako Omnis выполняются при температуре 32 “ С .
Визуализация: Для визуализации рекомендуется использовать EnVision FLEX
Система детекции, высокий pH (Dako Omnis), код GV800 в комбинанции с
EnVision FLEX-b Линкер мышиный (Dako Omnis), код GV821. Визуализация
выполняется на борту Dako Omnis.
Контрастное окрашивание: Для контрастного
использовать Гематоксилин (Dako Omnis),
окрашивание выполняется на борту Dako Omnis.
Заливка: После окрашивания на борту Dako Omnis срезы должны быть
обезвожены, очищены и залиты перманентной средой
Контроль качества: Позитивные и негативные контрольные ткани, а также
реагент для негативного контроля должны проводиться одновременно по тому
же протоколу, что и образцы пациента. Ткани позитивного контроля должны
включать миндалину, а клетки/структуры должны показывать реакцию, как
описано для этой ткани в разделе "Эксплуатационные характеристики". Как
негативный контроль рекомендуется использовать FLEX Универсальный
негативный контроль, мышиный (Dako Omnis), код GA750.
Сообщалось о редких случаях С020-экслрессирующих периферических Т-
клеточных лимфом (7, 8).
В-клетки, меченные антителом, окрашивают цитоплазматическую сторону
мембраны клеточной поверхности.
Нормальные ткани: в нормальной лимфоидной ткани антитело маркирует клетки
герминального центра, лимфоциты мантийной зоны и рассеянные
межфолликулярные лимфоциты, но не Т-клетки, гистиоциты и плазматические
клетки (6. 7). Маркировка не наблюдается в эпидермисе, сальных железах,
волосяных фолликулах и эккриновых железах кожи, фолликулярном эпителии
щитовидной железы, пневмоцитах и бронхиальном эпителии легких, а также в
большом количестве других протестированных нормальных нелимфоидных
тканей (6). Мантийная зона и В-клетки герминального центра в миндалине
показывают умеренную или сильную реакцию окрашивания, тогда как
изолированные В-клетки в печени показывают слабую или умеренную реакцию
окрашивания.
Ненормальные ткани: Реакция с антителом была выявлена в большинстве из 131
протестированных В-клеточных новообразований (1). Мечение антителом
показывает, что при дифференцировке В-клеток антиген CD20 не
экспрессируется на очень незрелых лимфоидных клетках (0/6 острых
недифференцированных лейкозов), но начинает экспрессироваться на ранних
стадиях созревания (14/34 общих острых лимфобластных и 7/9 пре-В острых
лимфобластных лейкозов), а затем антиген CD20 полностью экспрессируется на
зрелых В-клетках (15/15 хронических лимфоцитарных, 3/3 пролимфоцитарных,
3/3 волосатоклеточных, 6/7 лимфосаркомоклеточных лейкозов и 45/46 В-
клеточных злокачественных лимфом, включая лимфомы Буркитта,
Вальденстрема и иммунобластные В-клеточные лимфомы. Антиген CD20
исчезает на плазматических клетках, и только 1/2 плаэмоклеточных лейкозов и
0/12 миелом были помечены антителом (1). Другие исследования дали
сопоставимые результаты, показав положительную маркировку 44/44
крупноклеточных и иммунобластных В-кпеточных лимфом (6), а также всех 40 В-
клеточных лимфом, за исключением распространенных острых лимфобластных
лейкозов и злокачественной плазматической лимфомы. При болезни Ходжкина
сильное окрашивание поверхностной мембраны клеток Рида-Штернберга
--- стр. 336 ---
Список литературы
наблюдалось в 9/27 случаях (7). При лимфопролиферативных заболеваниях Т-
клеточного ряда антитело было выявлено в 0/73 случаях (1), тогда как в других
исследованиях выявлено 1/18 (7) и 1/111 (8) случаев.
40. TakamI Т, Qi C-F, Yamada Т, Yamashina М, Коп S-I, Ishii Y. et al. В20.3. Reactivity
and specificity of l_26 (pan-B-cell mAb) on 322 cases of fresh and paraffin-embedded
lymphoproliferative diseases. In: Knapp W, Dorken B, Gilks WR, Rieber EP, Schmidt
RE, Stein H, et al., editors. Leukocyte typing IV. White cell differentiation antigens.
Proceedings of the 4th International Workshop and Conference; 1989 Feb 21-25;
Vienna, Austria. Oxford, New York, Tokyo: Oxford University Press; 1989. p. 134-6.
41. Zhou L-J, Tedder TF. CD20 workshop panel report. In: Schlossman SF, Boumsell L,
Gilks W, Harlan JM, Kishimoto T, Morimoto C, et al., editors. Leukocyte typing V. White
cell differentiation antigens. Proceedings of the 5th International Workshop and
Conference: 1993 Nov 3-7; Boston, USA. Oxford, New York, Tokyo: Oxford University
Press; 1995. p. 511*4.
42. Tedder TF, Engel P. CD20; a regulator of cell-cycle progression of В lymphocytes.
Immunology Today 1994;15:450-4.
43. Ishii Y, Takami T, Yuasa H, Takei T, Kikuchi K. Two distinct antigen systems in
human В lymphocytes: identification of cell sur^ce and intracellular antigens using
monoclonal antibodies. Clin Exp Immunol 1984;58:183-92.
44. Mason DY, Comans-Bitter WM, Cordell JL, Verhoeven MAJ, van Dongen JJM.
Antibody L26 recognizes an intracellular epitope on the B-cell-associated CD20 antigen.
Am J Pathol 1990:136:1215- 22.
45. Cartun RW, Coles FB, Pastuszak WT. Utilization of monoclonal antibody L26 in the
identification and confirmation of B-cell lymphomas. A sensitive and specific marker
applicable to formalin- and B5- fixed, paraffin-embedded tissues. Am J Pathol
1987:129:415-21.
46. Norton AJ, Isaacson PG. Monoclonal antibody L26: an antibody that is reactive with
normal and neoplastic В lymphocytes in routinely fixed and paraffin wax embedded
tissue. J Clin Pathol 1987;40:1405-12.
47. Blakolmer K, Vesely M, Kummer JA, Jurecka W, Mannhatter C. Chott A.
Immunoreactivlty of B-cell markers (CD79a, L26) in rare cases of extranodal cytotoxic
peripheral T- (NIOT-) cell lymphomas. Mod Pathol 2000:13:766-72.
Описание символов
5EfJ Каталожный номер Температура
хранения
jyEJ Изделие для диагностики in
vitro
Производитель I LOT Номер партии V Содержит достаточный
объем для проведения <п> анализов
2 Дата истечения
срока годности
I*' См. инструкции по
применению
I f Официальный
представитель в
Европейском
________сообществе
Agilent Technologies Singapore (International) Pte Ltd. No. 1 Yishun Avenue 7
Singapore, 768923
Tel.+44 161 492 7050
www.agilent.com
--- стр. 337 ---
6 >D ako
С€
Антитела моноклональные
мышиные к человеческому
Виментину, клон V9, Готовые
к применению, ФЛЕКС, для
использования в Дако
Омнис, 12 мл ФЛЕКС, для
использования
в Дако Омнис
Код GA630
Назначение
Сводный обзор
и пояснение
Реагент, входящий
в комплект
поставки
Иммуноген
Специфичность
Для диагностики in vitro
Антитела моноклональные мышиные к человеческому Виментину, клон V9,
готовые к применению, ФЛЕКС, для использования в Дако Омнис
предназначены для использования в иммуногистохимии (ИГХ) на устройстве
Dako Omnis. Это антитело применяется для идентификации клеток
мезенхимального происхождения в нормальных и неопластических тканях и
является полезным помощником при классификации опухолей
мезенхимального происхождения (1). Дифференциальной классификации
опухолей помогают результаты, полученные с помощью панели антител.
Клиническая интерпретация любого окрашивания или его отсутствия должна
быть дополнена морфологическими исследованиями с использованием
надлежащего контроля и должна оцениваться в контексте истории болезни
пациента и других диагностических тестов квалифицированным патологом. Это
антитело предназначено для использования после того, как первичный диагноз
опухоли был поставлен с помощью обычной гистопатологии с использованием
неиммунологических гистохимических окрасок.
Виментин - это белок промежуточной нити (ПН) размером 57 кДа, который
является частью цитоскелета клеток позвоночных. Среди ПН виментин
относится к классу III, демонстрируя высокую степень специфичности для
клеток мезенхимального происхождения. Изначально считалось, что
специфичность типа клеток, проявляемая каждым из подтипов ПН, сохраняется
как в злокачественных клетках, так и в их нормальных аналогах, что делало ПН
важными маркерами в гистогенезе. Коэкспрессия промежуточных филаментов,
в частности виментина и цитокератина, в настоящее время
продемонстрирована в различных нормальных клетках/псанях и в
неопластических поражениях, что обуславливает необходимость
использования панели антител при классификации опухолей (2).
См. Общие инструкции Dako по иммуногистохимическому окрашиванию или
инструкцию системы детекции для процедур ИГХ; Принцип процедуры,
необходимые, но не поставляемые материалы, хранение, подготовка образцов,
процедура окрашивания, контроль качества, устранение неполадок,
интерпретация окрашивания, общие ограничения.
Готовые к применению моноклональные мышиные антитела поставляются в
жидкой форме в буфере содержащем стабилизирующий протеин и 0,015 моль/л
азида натрия.
Клон: V9. Изотип; IgGI, kappa
Очищенный виментин из хрусталика глаза свиньи (3).
При Вестерн-блоттинге очищенного виментина свиньи антитело маркирует
единственную полосу 57 кДа, соответствующую виментину. При использовании
цельноклеточных экстрактов клеточных линий, экспрессирующих виментин
плюс глиальный фибриллярный кислый белок (GFAP) и виментин плюс десмин,
соответственно, антитело специфически маркирует полосу 57 кДа виментина.
Как непосредственно показали эти эксперименты, антитело не реагирует с
двумя белками ПН, наиболее тесно связанными с виментином. т.е. десмином и
GFAP (3).
6 ИГХ антитело маркирует виментин-положительные линии человеческих
клеток IMR90, RD, глиомы и HeLa (3).
--- стр. 338 ---
Меры
предосторожности
Хранение
Обзор протокола
окрашивания*
31. Для диагностики in vitro.
32. Для профессиональных пользователей.
33. Данный продукт содержит азид натрия (NaN3), химическое вещество, очень
токсичное в чистом виде. Хотя его концентрация в реагенте не классифицируются
как опасная, азид натрия может реагировать со свинцом и медью, образуя
взрывоопасные скопления азидов металлов. При утилизации промыть большим
количеством воды, чтобы предотвратить накопление азида металла в
водопроводе.
34. Как и с любым продуктом, полученным из биологических источников,
необходимо использовать надлежащие процедуры при обращении с ним.
35. Надевайте соответствующие средства индивидуальной защиты, чтобы
избежать контакта с глазами и кожей.
36. Неиспользованный раствор следует утилизировать в соответствии с
местными, государственными и федеральными нормами.
Хранить при температуре 2-8 °С. Во время хранения крышка должна быть закрыта. Не
использовать после истечения срока годности, указанного на флаконе. Стабильность на
борту составляет 375 часов. Время на борту отслеживается с помощью программного
обеспечения Dako Omnis. Если реагенты хранятся в условиях, отличных от указанных,
эти условия должны быть проверены пользователем. Нет никаких очевидных
признаков, указывающих на нестабильность данного продукта. Поэтому позитивные и
негативные контрольные стекла должны окрашиваться одновременно с образцами
пациентов. Если наблюдается неожиданное окрашивание, которое не может быть
объяснено вариациями в лабораторных процедурах, и есть подозрение на проблему с
антителом, обратитесь в службу технической поддержки компании Agilent.
Шаг Поммечанме
Фиксация/заливка Фиксированные в
формалине, залитые в
парафин
Депарафинизация на
борту
Предварительная
обработка
Envision FLEX Система
детекции, высокий pH
(код GV804)
30 мин
высокотемпературная
демаскировка антигена
Антитело Готовое к применению 12,5 мин инкубации
Негативный контроль FLEX Универсальный
негативный контроль,
мышиный (код GA750)
12,5 мин инкубации
Визуализация Envision FLEX Система
детекции, высокий pH
(код GV800) + EnVision
FLEX+ Линкер
мышиный (код GV821)
Реагент для блокировки;
3 мин; Линкер; 10 мин;
Полимер; 20 мин;
Хромоген: 5 мин
Контрастное
окрашивание
Гематоксилин (код
GC808)
3 мин инкубации
Контрольные ткани Миндалина Цитоплазматическая
сторона поверхностей
клеточной мембраны
Предметные стекла FLEX Предметные
стекла для ИГХ (код
К8020)
Рекомендуется для
лучшей адгезии срезов
тканей к предметным
стеклам
Среда для заливки Безводная,
перманентная среда
для заливки
После окрашивания
срезы должны быть
обезвожены, очищены и
залиты перманентной
средой
Устройство Dako Omnis Реагенты поставляются в
специальных флаконах
для данного устройства
'Пользователь должен всегда читать вкладыш к упаковке для получения
подробных инструкций по процедуре окрашивания и обраи^ению с продуктом.
Подготовка
образцов
Залитые парафином срезы: Антитело может быть использовано для маркировки
фиксированных в формалине, залитых в парафин срезов ткани. Образцы ткани
должны быть разделены на срезы толщиной 4 мкм.
Предварительная обработка: Требуется предварительная обработка с
высокотемпературной демаскировкой антигена (HIER) срезов тканей,
зафиксированных в формалине и залитых в парафин. Рекомендуется
--- стр. 339 ---
предварительная обработка с высокотемпературной демаскировкой антигена с
использованием EnVision FLEX Раствор для восстановления антигена, высокий
pH, концентрированный (50х) (Dako Omnis), код GV804. Депарафинизация,
регидрация и восстановление антигена выполняются на борту Dako Omnis. См.
Руководство по эксплуатации Dako Omnis
Dako Omnis гарантирует, что срезы ткани не высохнут ни в процессе
предварительной обработки, ни во время последующей процедуры
иммуногистохимического окрашивания. Для лучшей адгезии срезов тканей к
предметным стеклам рекомендуется использовать FLEX Предметные стекла
для ИГХ, код К8020.
Процедура
окрашивания
Программа: Этапы окрашивания и время инкубации предварительно
запрограммированы в программном обеспечении Dako Omnis. См. Руководство
по эксплуатации Dako Omnis для получения подробных инструкций по загрузке
предметных стекол и реагентов. Если протоколы недоступны в системе Dako
Omnis, пожалуйста свяжитесь со службой технической поддержки. Все этапы
инкубации на борту Dako Omnis выполняются при температуре 32 °С.
Визуализация: Для визуализации рекомендуется использовать EnVision FLEX
Система детекции, высокий pH (Dako Omnis), код GV800 в комбинанции с
EnVision FLEX+ Линкер мышиный (Dako Omnis), код GV821. Визуализация
выполняется на борту Dako Omnis.
Контрастное окрашивание: Для контрастного окрашивания рекомендуется
использовать Гематоксилин (Dako Omnis), код GC808. Контрастное
окрашивание выполняется на борту Dako Omnis.
Заливка: После окрашивания на борту Dako Omnis срезы должны быть
обезвожены, очищены и залиты перманентной средой
Контроль качества: Позитивные и негативные контрольные ткани, а также
реагент для негативного контроля должны проводиться одновременно по тому
же протоколу, что и образцы пациента. Ткани позитивного контроля должны
включать миндалину, а клетки/структуры должны показывать реакцию, как
описано для этой ткани в разделе "Эксплуатационные характеристики". Как
негативный контроль рекомендуется использовать FLEX Универсальный
негативный контроль, мышиный (Dako Omnis), код GA750.
Интерпретация
окрашивания
Эксплуатационные
характеристики
Список литературы
Клеточное окрашивание имеет цитоплазматический характер.
Нормальные ткани: В целом, антитело маркирует большинство мезенхимальных
клеток человека, включая фиброциты, липоциты, гладкомышечные клетки,
эндотелиальные клетки сосудов, астроциты, клетки периферических нервов
(Шванна), макрофаги (включая клетки Купфера), а также миоэпителиальные
клетки потовых и слюнных желез и молочной железы, которые сильно
маркируются. Также помечены, с различной интенсивностью и распределением,
фолликулярные клетки щитовидной железы, коры надпочечников, дистальных
канальцев почек, мезангиальные и эндотелиальные клетки почечного
гломерула, а также ацинарные клетки поджелудочной железы (1, 3). В
человеческом глазу антитело маркирует пигментированный задний и передний
эпителий радужной оболочки глаза, включая мышечную часть (dilator pupillae)
переднего эпителия, а также непигментированный и пигментированный
цилиарный эпителий (4). В цилиарном эпителии виментин коэкспрессируется
вместе с цитокератином (4). Клетки скелетных и сердечных мышц,
эпидермальные, сквамозные, уротелиальные, слизистые оболочки толстой
кишки и желудка, глиальные клетки, а также нейроны обычно не маркируются
антителом (1,3). В миндалине лимфоциты и эндотелиальные клетки показывают
умеренную или сильную реакцию окрашивания. В печени гладкомышечные
клетки синусоидов дают слабую или умеренную реакцию окрашивания.
Ненормальные ткани: Антитело маркировало 17/20 сарком, 16/18 меланом, 4/4
менингеом и 3/3 шванном, и было единственным промежуточным филаментом,
присутствующим в этих опухолях. Кроме того, антителом были помечены
различные проценты (10-57%) карцином, нейроэндокринных карцином,
нейробластом, тимом и мезотелиом. За исключением нейробластомы,
цитокератин в этих опухолях коэкспрессировался вместе с виментином. Среди
аденокарцином более 50% папиллярных карцином щитовидной железы, а также
карцином почек, эндометрия, яичников и легких были помечены этим антителом
и совместно экспрессировали кератины и виментин (1).
48. Azumi N, Battifora Н. The distribution of vimentin and keratin in epithelial and
nonepithelial neoplasms. Am J Clin Pathol 1987;88:286-96.
49. Herrmann H. Aebi U. Intermediate filaments and their associates: multi-talented
structural elements specifying cytoarchitecture and cytodynamics. Curr Opin Ceil Biol
2000:12:79-90.
50. Osborn M, Debus E, Weber K. Monoclonal antibodies specific for vimentin. Eur J
Cell Biol 1984:34:137-43.
--- стр. 340 ---
SI.Kivela Т, Fuchs U. Tarkkanen A. Cytoskeleton in neuroectodetmally derived
epithelial and muscle cells of the human iris and ciliary body. J Histochem Cytochem
1992;40:1517-26.
Описание символов
L5ELJ Каталожный номер Температура
хранения
1 1 Изделие для диагностики in
vitro
i i i l Производитель Номер партии WV Содержит достаточный
объем для проведения <п> анализов
S Дата истечения
срока годности
D® См. инструкции по
применению
Официальный
представитель в
Европейском
сообществе
Agilent Technologies Singapore (International) Pte Ltd. No. 1 Yishun Avenue 7
Singapore. 768923
Tel. +44 161 492 7050
www.agilent.com
--- стр. 341 ---
CLEARIFY
Растворитель Clearify (Clearify, Bulk bottle. General Lab Reagent), 3,8 л
Заменитель ксилола
(Рсд. 6/3/2015)
Clearify, Продукт и его назначение:
Clearify представляет собой биоразлагаемый просветляющий агент без запаха, который разработан в
качестве альтернативы ксилолу и предназначается для диагностики In Vitro. Как правило. Clearify’
можно использовать в качестве замены ксилола как вручную, так и в устройствах для проводки
образцов. Clearify смешивают с заливочной средой при изготовлении гистологических препаратов, он
совместим с большинством сред для заключения ткани. Активный компонент: 100% Нафтеновый
изопарафиновый углеводород.
Clearify, Инструкция по применению:
Для Clearify требуется небольшая корректировка при проведении рутинных процедур. Вращайте и
меняйте конечный спирт устройства для проводки образцов, чтобы избежать переноса воды. Для
обеспечения полной очистки необходимо два раза заменять Clearify в течение одного часа. Для
достижения наилучших результатов используйте Clearify со спиртами, денатурированными
изопропиловым спиртом, а не метанолом. Clearify не рекомендуется использовать для циклов очистки
парафином на устройствах для проводки образцов.
Депарафинизация:
1. Извлеките стекла из сушильного кафа и поместите в Clearify, пока парафин
находится в расплавленном состоянии.
2. Депарафинизируйте посредством двух замен Clearify, каждая в течение 10 минут.
Дегидратация, просветление и покрытие
1. удалите со стекла воды посредством 4 замен абсолютного спирта.
2. Очистите стекла посредством 3 замен Clearify. 2 минуты в первых двух заменах
и 5 минут в последней замене.
Clearify, Хранение и стабильность:
Clearify следует хранить при температуре 15-30 ° С, он сохраняет свою стабильность в стандартных
лабораторных условиях. Срок годности продукта указан на этикетке.
Clearify, Меры Предосторожности:
Меры предосторожности приведены в Паспорте безопасности продукта (ПБ).
Clearify, Утилизация:
Утилизируйте Clearify в соответствии со всеми местными, государственными, федеральными,
экологическими и/или европейскими правилами.
МАРКИРОВКА И ОБОЗНАЧЕНИЯ СЕ:
REF Кетапожный номер
4
Огран • температуры
m J
производитель
--- стр. 342 ---
--- стр. 347 ---
с. Опциональные реактивы
GV804
DM848
GV805
DM 849
GC807
D M 85I
GC808
DM 846
G V809
DM845
G V 82I
DM844
GV825
DM 847 +
EnVision F LE X
Раствор для восстановления антигена,
вы сокий pH, концентрированны й (50х)
(Dako O m nis)
EnVision F L E X Раствор для восстановления антигена, вы сокий pH, концентрированны й (50х)
(Dako O m nis)
3 X 68 мл, 50х концентрированный
Трис/ЭДТА буфер, рИ 9
EnVision F LE X
Раствор для восстановления антигена,
низкий pH , концентрированны й (50х)
(Dako O m nis)
EnVision F L E X Раствор для восстанов. 1ення антигена, низкий pH , концентрированны й (50х) (Dako
O m nis)
3 X 68 мл, 50х концентрированный
Цнгратный буфер. pH 6.1
П Р О М Ы В О Ч Н Ы Й
Б У Ф Е Р ,
концентрированны й
(20х)
(Dako O m nis]
П ром ы вочны й буфер, концентрированны й (20х) (Dako O m nis)
20 X 175 мл, 20х концентрированный
Трис-буферный солевой раствор, содержащий Твин 20, pH 7,6 (± 0.1).
Г Е М А Т О К С И Л И Н
(Dako O m nis)
Гем атоксилин (Dako O m nis)
8 X 22.5 мл готовый к употреблению
Водный раствор гематоксилина.
E nV ision F L E X +
Л и н ке р крол ичий
(Dako O m nis)
EnVision F L E X + Л и н ке р кроличий (Dako O m nis)
1 X 22,5 мл, готовый к применению
Буферный раствор, содержащий стабилизирующий белок и антимикробный агент.
E nV ision F L E X +
Л и н ке р м ы ш и н ы й
(Dako O m nis)
E nV ision F L E X + Л и н ке р м ы ш ины й (Dako O m nis)
1 X 22,5 мл, готовый к применению
Буферный раствор, содержащий стабилизирующий белок и а)«тимикробный агент.
E nV ision F L E X D A B + Система субстрата хромогена (Dako O m nis)
DM843 EnVision F L E X D A B +
Х Р О М О Г Е Н
(Dako O m nis)
EnVision F L E X D A B + Хромоген (Dako O m nis)
2 X 1 мл
3,3’-диа.минобензилин тетрагидрохлорид в органическом растворителе.
Цвет этого реактива может варьироваться от насыщенного фиолетового до бесцветного без какого-либо
влияния на производительность набора.
EnVision F LE X
С У Б С Т Р А Т Н Ы Й
Б У Ф Е Р
(Dako O m nis)
EnVision F L E X С убстратны й буфер (Dako O m nis)
4 X 26 мл
Буферный раствор, содержащий перекись водорода и консервант.
--- стр. 348 ---
Меры предосторожности
1. Для диагностики in vitro.
2. Для профессиональных пользователей.
3 E nvision FLE X /HRP содержит материалы животного происхождения, и также нельзя исключить, что остаточные
количества человеческо 10 материала могут присутствовать по причине особенностей производства. Как и в случае
любого продукта, полученного из биологических источников, следует соблюдать надлежащие меры предосторожности
при обращении с ним.
4. Не подвергайте EnVision FLEX Реакгив для блокировки пероксидазы. EnVision FLEX /HRP, EnVision FLE X
Субстратный буфер. EnVision FLEX DAB+ Хромоген или EnVision FLEX Рабочий раствор субстрата воздействию
прямых солнечных лучей.
5. Для EnVision F LE X Реашива для блокировки пероксидазы и EnVision FLEX /HRP по запросу профессиональных
пользователей предоставляется паспорт безопасности.
6. EnVision FLEX Раствор для восстановления антигена, высокий pH, концентрированный (50х) содержит 5-10%
трометамол, 1-5% нонилфенол, зтоксилированную, и 1-5% уксусную кислоту, (этилендинитрило) тетра уксусную
кислоту (EDTA), динатриевую соль, дигидрат.
Маркировка EnVision FLEX Раствор для восстановления антигена, высокий pH, концентрированный (50х):
Предупреждение
Н319
Н411
Р280
Р273
Р264
Р302 + Р352 + Р362+Р364
Вызывает раздражение кожи.
Вызывает серьезное раздражение глаз.
Токсично для водных организмов с долгосрочными последствиями.
Используйте средствами защиты глаз/лица.
Не допускать попадания в окружающую среду.
Тщательно вымойте руки после работы.
При попадании на кожу: промойте большим количеством воды с мылом.
Снимите загрязненную одежду и постирайте ее перед повторным
использованием.
В случае раздражения кожи: обратитесь к врачу.
При попадании в глаза: осторожно промойте водой в течение нескольких
минут. Снимите контактные линзы, если вы ими пользуетесь и, если это легко
сделать. Продолжите промывание глаз.
Р337+ РЗ13 Если раздражение глаз не проходит: обратитесь к врачу.
Р501 Утилизируйте содержимое и упаковку в соответствии с местными.
региональными, национальными и международными нормами.
7. Маркировка EnVision FLEX Субстратный буфер, который содержит <1% имидазола:
О пасность
Р332 + Р313
Р305 +Р351+Р338
Н360 Может наносить вред нерожденным детя.м.
Р201 Перед использованием получите специальные инструкции.
Р202 Не приступайте к работе до тех пор, пока не прочитана и не усвоена
информация о мерах предосторожности.
Р280 Используйте защитные перчатки, средства защиты глаз/лица и защитную
одежду.
Р308/РЗ13 В случае контакта или подозрения на контакт: обратитесь к врачу.
Р405 Хранить под замком.
Р501 Утилизируйте емкости и упаковку в соответствии с местными,
региональными, национальными и международными требованиями.
8. Маркировка EnVision F LE X DAB+ Хромоген, который содержит <10% 3,3-диаминобензидин тетрагидрохлорида:
Опасность
H 3 I9
Н350
Н341
Р201
Р202
Вызывает серьезное раздражение глаз
Может вызывать рак.
Предположительно вызывает генетические дефекты.
Перед использованием получите специальные инструкции.
Не приступайте к работе до тех пор. пока не прочитана и не усвоена
информация о мерах предосторожности.
--- стр. 349 ---
Р264
Р308 + Р313
Р305 + Р351 +Р338
Р337 + Р313
Р405
Р501
Р280 Используйте защитные перчатки, средства защиты глаз/лица и защитную
одежду.
После работы тщательно вымойте руки
В случае контакта или подозрения на контакт: обратитесь к врачу.
При попадании в глаза: осторожно прюмойте водой в течение нескольких
минут.
Снимите контактные линзы, если вы ими пользуетесь и, если это легко
сделать. Продолжите промывание глаз.
Если раздражение глаз не проходит: обратитесь за медицинской помощью.
Хранить под замком.
Утилизируйте содержимое и упаковку в соответствии с местными,
региональными, национальными и международными нормами.
9. Envision F LE X Реактив для блокировки пероксидазы содержит азид натрия (NaNj), химическое вещество,
высокотоксичное в чистом виде. Хотя концентрация этого вещества в реактиве не классифицируется как опасная, азид
натрия может вступать в реакцию со свинцовыми и медными трубами с образованием взрывоопасньпс соединений
азидов металлов. При утилизации промойте бо,тьши.м количеством волы, чтобы предотвратить накопление азидов
металлов в трубах.
10. Используйте соответствующие средства индивидуальной зашиты, чтобы избежать попадания в глаза и контакта с кожей.
11. Неиспользованный раствор следует утилизировать в соответствии с местными, государственными и федеральными
правилами.
Как правило, лицам, не достигшим 18-летнего возраста, запрещается работать с продуктом.
Пользователи должны тщательно ознакомиться с надлежащими рабочими процедура.ми. опасными свойствами продукта и
необходимыми инструкциями по безопасности. Пожалуйста, обретитесь к паспорту безопасности (Safety Data Sheet - SDS)
для получения дополнительной информации.
Хранение
Храните EnVision FLEX Раствор для восстановления антигена, высокий pH, концентрированный (50х) при температуре 2-8 ®
С. Храните EnVision FLEX Реактив для блокировки пероксидазы. EnVision FLEX /HRP, EnVision FLEX D A B + Хромоген и
EnVision FLEX Субстратный буфер в темноте при те.мпературе 2-8 ° С. Во время .хранения крышка должна быть закрыта.
Стабильность EnVision FLEX Реактива для блокировки пероксидазы. EnVision FLEX /HRP, EnVision FLE X D A B + Хромот'ена
и EnVision FLE X Субстратного буфера после вскрытия и помещения в прибор составляет 75 часов. Стабильность
разбавленного EnVision FLEX Раствора для восстановления антигена, высокий pH и EnVision F LE X Раствора для
восстановления антигена, низкий pH, после разведения и помещения в прибор составляет 7 дней. Программное обеспечение
Dako Omnis автоматически отслеживает срок годности реактивов в приборе.
Не используйте реактивы после истечения срока годности, указанного на флаконах. Если реактивы хранились в условиях,
отличных от указанных, пользователь должен проверить их состояние. Свяжитесь с технической поддержкой компании Dako
A gilent, если вы получили результат окрашивания отличный от ожидаемого, который нельзя объяснить изменениями в
лабораторных методиках и у вас есть подозрение на проблемы с набором реактивов.
П одготовка реагента
А Л E nV ision F L E X Раствор для восстановления антигена, в ы сокий pH (50х) (DM 848, код G V804) или EnVision FLE.X
Раствор для восстановления антигена, н и зки й pH (50х) (DM 849, код GV805).
Подготовьте рабочий раствор, разбавив EnVision FLEX Раствор для восстановления антигена, высокий pH.
концентрированный (50х) или EnVision FLEX Раствор для восстановления антигена, низкий pH, концентрированный (50х) в
концентрации 1:50 в дистиллированной или деионизированной воде. Рекомендуется следующая процедура:
1. Наполните емкость Dako Omnis дистиллированной или деионизированной водой до линии наполнения (3.325 л). Перед
наполнением убедитесь, что бутылка находится на горизонтальной поверхности.
2. Перелейте 68 мл EnVision FLEX Раствор для восстановления антигена, высокий pH, концентрированный (50х) или
EnVision F LE X Раствор для восстановления антигена, низкий pH, концентрированный (50х) в емкость.
3. Отклейте отделяемую этикетку с емкости концентрата и наклейте ее на бутыль.
4. Закройте кры ш ку и аккуратно переверните бутылку 2-3 раза.
Неиспользованный разбавленный раствор можно хранить при температуре 2-8° С в течение одного месяца. Разбавленный
раствор можно использовать в течение 7 дней при хранении на борту прибора Dako Omnis. Утилизируйте раствор, если он
мутный.
Л. 2 П ром ы вочны й буфер, концентрированны й (20х) (D M 8 5 I, код GC807)
Приготовьте рабочий раствор, разбавив Промывочный буфер, концентрированный (20х) (Dako Omnis) в соотношении 1:20 в
объемной бутылке Dako Omnis с использованием дистиллированной или деионизированной воды. Для минимизации
вспенивания рекомендуется следующая процедура:
1. Наполните емкость Dako Omnis дистиллированной или деионизированной водой до линии наполнения (3,325 л). Перед
наполнением убедитесь, что бутылка находится на горизонтальной поверхности.
2. Перелейте 175 мл Промывочного буфера, концентрированного (20х) (Dako Omnis) из флакона в бутыль.
3. Отклейте отделяемую этикетку с емкости концентрата и наклейте ее на бутыль.
--- стр. 358 ---
6>D a к о
С€
Зонд HER2 IQFISH phatrriDx для определения амплификации антигена HER2, Готовый к применению, для
использования в Дако Омнис, 20 тестов, 1,6 мл (HER2 IQFISH pharmDx (Dako Omnis), Ready-to-use, 20 tests,
1.6 mL) (Dako Omnis)
Код GM333
HER2 IQFISH pharmDx (Dako Omnis) представляет собой прямой флуоресцентный анализ гибридизации in situ
(FISH), предназначенный для количественного определения амплификации гена HER2 в фиксированных
формалином, залитых парафином образцах ткани рака молочной железы (FFPE) и образцах FFPE пациентов с
метастатической аденокарциномой желудка или гастроэзофагеального перехода.
HER2 IQFISH pharmDx (Dako Omnis) показан в дополнение к HercepTest при оценке состояния пациентов, для
которых рассматривается лечение герцептином.
Флакон содержит реагент, достаточный для проведения 20 тестов.
Вспомогательные реагенты для использования вместе с HER2 IQFISH pharmDx (Dako Omnis)
Код Название продукта
GM300 Раствор этанола ISH, 96 % (Dako Omnis)
GM301 Раствор для предварительной обработки ISH (20х) (Dako Omnis)
GM302 Пепсин ISH (Dako Omnis)
GM303 Жесткий промывочный буфер ISH (20х) (Dako Omnis)
GM304 Флуоресцентная среда для закрепления ткани (Dako Omnis)
--- стр. 359 ---
Содержание
Страница
РУССКИЙ
Предполагаемое использование
Резюме и объяснение — молочная железа
Принцип процедуры — молочная железа
Реагенты — молочная железа
Меры предосторожности — молочная железа
Хранение — молочная железа
Подготовка образца — молочная железа
ИНСТРУКЦИЯ ПО ПРИМЕНЕНИЮ — молочная железа
A. 5
B , 6
Контроль качества — молочная железа
Интерпретация окрашивания — молочная железа
Ограничения — молочная железа
Эксплуатационные характеристики — молочная железа
Устранение проблем — молочная железа
Приложение 1. Молочная железа
Приложение 2. Молочная железа
Резюме и объяснение — гастральный
Принцип процедуры — гастральный
Реагенты — гастральный
Меры предосторожности — гастральный
Хранение — гастральный
Подготовка образца — гастральный
ИНСТРУКЦИЯ ПО ПРИМЕНЕНИЮ — гастральный
A. 27
B. 28
Контроль качества — гастральный
Интерпретация окрашивания — гастральный
Ограничения — гастральный
Эксплуатационные характеристики — гастральный
Устранение проблем — гастральный
Приложение 3. Желудок
Приложение 4. Желудок
Приложение 5. Желудок
Ссылки на литературу
Объяснение символов
1 2
13
15
15
24
26
28
29
29
30
31
32
33
34
37
39
41
41
49
51
52
53
54
56
--- стр. 360 ---
р у с с к и й
Предполагаемое использование
Для диагностики in vitro.
HER2 IQFISH pharmDx (Dako Omnis) представляет собой гибридизационный зонд для автоматизированного
прямого флуоресцентного анализа in situ (FISH) на приборах Dako Omnis и, вместе со вспомогательными
реагентными устройствами, предназначается для количественного определения амплификации гена HER2 в
фиксированных формалином, залитых парафином (FFPE) образцах ткани рака молочной железы и образцах FFPE
пациентов с аденокарциномой желудка, включая гастроэзофагеальный переход.
HER2 IQFISH pharmDx показан в дополнение к HercepTest при оценке пациентов, для которых рассматривается
лечение герцептином (трастузумабом) (см. вкладыш в упаковку Herceptin).
Для пациентов с раком молочной железы результаты HER2 IQFISH pharmDx (Dako Omnis) предназначены для
использования в качестве дополнения к клинико-патологической информации, используемой в настоящее время
для оценки прогноза у пациентов с раком молочной железы с поражением лимфатических узлов II стадии.
Аденокарцинома желудка или гастроэзофагеального перехода в этом документе также упоминается как рак
желудка.
Применения для рака молочной железы см. на страницах 6-28.
Применения для рака молочной железы см. на страницах 29-52.
Важно! Обратите внимание на различия в ткани рака молочной железы и ткани рака желудка, особенно в
интерпретации окрашивания срезов
--- стр. 362 ---
HER2 IQFISH pharmDx (Dako Omnis) и вспомогательные реагенты можно заказать отдельно в качестве отдельных
реагентов.
Реагенты — молочная железа
Предоставленные материалы
HER2 IQFISH PharmDx (Dako Omnis): 1,6 мл готовой к использованию смеси меченых техасским красным ДНК-
зондов HER2 и меченых флуоресцеином ПНК-зондов CEN-17, поставляемых в буфере для гибридизации IQISH.
HER2 IQFISH pharmDx (Dako Omnis) поставляется на сухом льду. Для гарантии того, что реагент не подвергался
воздействию высоких температур во время транспортировки, при получении должен присутствовать сухой
лед. Флаконы с реа 1стивами с размороженным содержимым должны храниться и постоянно обрабатываться в
вертикальном положении.
Флакон с реагентом содержит металлический шарик с золотым покрытием, который позволяет смешивать реагенты
с помощью смесительного устройства Dako Omnis (см. Руководство пользователя смесительного устройства Dako
Omnis). Важно тщательно перемешать реагент перед загрузкой в Dako Omnis.
Необходимые, но не поставляемые материалы
Вспомогательные реагенты
Для проведения анализа амплификации генов HER2 при помощи HER2 IQFISH pharmDx (Dako Omnis) на борту
прибора Dako Omnis необходимы следующие реагенты;
Раствор для предварительной обработки ISH (20х) Шако Omnis): 175 мл, концентрированный 20х; разбавляется в
соотношении 1:20 в объемной бутылке Dako Omnis объемом 3,5 л (код GC109). Продукт содержит антимикробное
средство и инертный зеленый цвет для легкой идентификации и удобства использования.
Раствор этанола ISH. 96 % (Dako Omnis): 14 мл 96 % этанола (готового к употреблению).
Пепсин ISH (Dako Omnis): 7 мл раствора пепсина А (готового к применению), pH 2,0; содержит стабилизатор и
антимикробное средство. Пепсин поставляется на сухом льду. Для гарантии того, что реагент не подвергался
воздействию высоких температур во время транспортировки, при получении должен присутствовать сухой
лед.
Жесткий ПРОМЫВОЧНЫЙ буфер ISH (20х) Шако Omnis): 175 мл солевого раствора цитратного буфера,
концентрированного 20х; развести 1:20 в объемной бутылке Dako Omnis 3,5 л (код GC109). В продукте содержится
антимикробное средство, детергент и инертный желтый цвет для легкой идентификации и удобства использования.
Флуоресцентная среда для закрепления ткани (Dako Omnis): 0.8 мл флуоресцентной среды для закрепления ткани
(готовой к использованию) с DAPI.
Хотя вышеуказанные реагенты не поставляются с HER2 IQFISH pharmDx (Dako Omnis), ниже имеется их краткое
описание. Для получения дополнительной информации обратитесь к инструкции по использованию каждого
устройства.
Дополнительные реагенты и приборы
Dako Omnis, код GI100
Промывочный буфер (20х) (Dako Omnis), код GC807
Clearify, код GC810
Смесительное устройство Dako Omnis, код GC116
Крышка ISH, код GC102
Очищающий раствор для гибридизации in situ, код GC207
Покровные стекла из стекла для закрепления ткани (24 мм х 50 мм)
Пожалуйста, обратитесь к руководству пользователя Dako Omnis Basic и Advanced касательно информации по
использованию дополнительных реагентов и устройств.
Оборудование и аксессуары для микроскопа
Фильтры для флуоресцентного микроскопа: Dapi и FITC/двойной фильтр техасского красного, или FITC и
монофильтры техасского красного — подробнее см. приложение 2. Использование фильтра DAPI при высоком
увеличении отрицательно влияет на интенсивность сигнала. Следует избегать длительного воздействия.
В качестве источника света следует использовать флуоресцентный микроскоп со 100-ваттной ртутной лампой.
Другие источники света с этими фильтрами не рекомендуются.
--- стр. 363 ---
Папка для стекол микроскопа (картонный лоток на 20 стекол с откидной крышкой или аналогичный).
Меры предосторожности — молочная железа
1. Для диагностики in vitro.
2. Для профессиональных пользователей.
3- HER2 IQFISH pharmDx (Dako Omnis) содержит ^10-<25 %этиленкарбоната и s 3 -
<5%хлорида натрия. HER2 IQFISH pharmDx (Dako Omnis) имеет маркировку;
ф Предупреждение
Н319
Р280
Р264
Р305 + Р351+ Р338
5.
6 .
7.
8 .
9 .
Вызывает серьезное раздражение глаз.
Пользоваться средствами защиты глаэ/лица.
После работы тщательно вымыть руки.
При попадании в глаза; осторожно промывать водой в течение нескольких
минут. Снять контактные линзы, если вы ими пользуетесь и если это легко
сделать. Продолжить промывание глаз.
Как правило, лицам, не достигшим 18-летнего возраста, запрещается работать с продуктом. Пользователи
должны тщательно ознакомиться с надлежащими рабочими процедурами, опасными свойствами продукта и
необходимыми инструкциями по безопасности. Для получения дополнительной информации обратитесь к
паспорту безопасности.
Образцы тканей до и после фиксации, а также со всеми материалами, подвергающимися их воздействию,
следует обращаться так, как если бы они были способны передавать инфекцию, и их необходимо
утилизировать надлежащим образом (14). Никогда не пипетируйте реагенты ртом и избегайте контакта кожи
и слизистых оболочек с реагентами и образцами. Если реагенты попали на чувствительные участки, промойте
их большим количеством воды.
Минимизируйте загрязнение реагента микробами, чтобы избежать ошибочных результатов.
Методы фиксации тканей и толщина образца, отличные от указанных, могут влиять на морфологию тканей
и (или) интенсивность сигнала.
Реагент оптимально разбавлен. Дальнейшее разведение может привести к потере производительности.
Носите соответствующие средства индивидуальной защиты, чтобы избежать попадания в глаза и контакта с
кожей. Пожалуйста, обратитесь к паспорту безопасности (ПБ) для получения дополнительной информации.
Неиспользованный раствор следует утилизировать в соответствии с местными, государственными и
федеральными правилами.
Хранение — молочная железа
Храните HER2 IQFISH pharmDx (Dako Omnis) <-18 “С (рекомендуется от -18 "С до -25 ®С) в темном помещении.
Постоянно держите размороженный флакон с реагентом в вертикальном положении. Замораживание и оттаивание
реагента до 10 раз не влияет на производительность. Не оставляйте компонент при комнатной температуре.
HER2 IQFISH pharmDx (Dako Omnis) и вспомогательные реагенты; Пепсин ISH (Dako Omnis) и флуоресцентная
среда для закрепления ткани (Dako Omnis) могут подвергаться неблагоприятному воздействию при воздействии
тепла. Не оставляйте эти компоненты при комнатной температуре.
HER2 IQFISH pharmDx (Dako Omnis) и вспомогательная реагентная флуоресцентная среда для закрепления ткани
(Dako Omnis) могут подвергаться неблагоприятному воздействию при чрезмерном освещении. Не храните эти
компоненты и не проводите анализ при сильном освещении, например под прямыми солнечными лучами.
Храните вспомогательные реагенты Раствор для предварительной обработки ISH (20х) (Dako Omnis), раствор
этанола ISH, 96 % (Dako Omnis), жесткий промывочный буфер ISH (20х) (Dako Omnis) и флуоресцентную среду для
закрепления ткани (Dako Omnis) в темном помещении при 2-8 Храните пепсин ISH (Dako Omnis) при -18-8 °С.
Крышку флакона, включая откидную крышку, необходимо закрыть на всех реагентах во время хранения.
Разбавленные растворы (рабочий раствор строгого промывочного буфера ISH и рабочий раствор предварительной
обработки ISH) можно хранить при температуре 2-8 “С в течение 30 дней.
Не используйте никакие реагенты после истечения срока годности, указанного на контейнере с реагентами. Во
время хранения колпачок реагента, включая откидную верхнюю крышку, должен быть закрыт. Если реагенты
хранятся в условиях, отличных от указанных, пользователь должен проверить работоспособность реагентов (15).
Явные признаки, указывающие на нестабильность данного продукта, отсутствуют. Поэтому важно оценить здоровые
клетки в анализируемом участке ткани. Если наблюдается неожиданная необъяснимая картина флуоресценции и
--- стр. 364 ---
есть подозрение на проблему с HER2 IQFISH pharmDx (Dako Omnis) или его вспомогательными реагентами,
пожалуйста, свяжитесь с технической службой Dako
Стабильность на борту прибора Dako Omnis
Рабочая стабильность HER2 IQFISH pharmDx (Dako Omnis) и вспомогательных реагентов Раствор этанола ISH,
96 % (Dako Omnis) и Пепсин ISH (Dako Omnis) составляет 80 часов. Рабочая стабильность разбавленного раствора
для предварительной обработки ISH (Dako Omnis) и строгого промывочного буфера ISH (Dako Omnis) составляет 7
дней. Оставшаяся рабочая стабильность отслеживается при помощи программного обеспечения Dako Omnis.
Использование просроченных реагентов приведет к появлению предупреждения от прибора Dako Omnis. Все
стекла, окрашенные просроченным реагентом, изменят состояние на «подозрительное», и журнал стекол на
рабочей станции покажет, что был использован просроченный реагент.
Подготовка образца — молочная железа
Образцы из биопсий, иссечений или резекций следует обработать, чтобы сохранить ткань для анализа FISH. Для
всех образцов должны использоваться стандартные методы обработки тканей для иммуноцитохимического
окрашивания (16).
Погруженные в парафин срезы
Для использования пригодна ткань, хранящаяся в нейтральном забуференном формалине и залитая в парафин.
Образцы должны быть разрезаны на блоки толщиной 3 или 4 мм и закреплены в течение 18-24 часов в нейтрально
буферном формалине. Затем ткани обезвоживают в градуированном ряду этанола и ксилола с последующей
инфильтрацией расплавленным парафином, выдержанным при температуре не более 60 °С. Правильно
закрепленные и залитые ткани будут храниться неопределенно долго до секционирования и закреплении на
стеклах, если их хранить в прохладном месте (15-25 ®С) (16-17). Другие фиксаторы не подходят.
Образцы тканей следует разрезать на срезы размером 4-6 мкм.
Стекла, необходимые для анализа амплификации гена HER2 и проверки наличия опухоли, должны быть
подготовлены одновременно. Рекомендуется как минимум два последовательных среза: один срез для
определения наличия опухоли, окрашенной гематоксилином и эозином (Н&Е stain), и один срез для анализа
амплификации гена HER2. Рекомендуется закреплять срезы тканей на предметные стекла микроскопа Dako FLEX
IHC, код К8020. Также подходят стекла Superfrost Plus (Thermo Fischer Scientific, J1800AMNZ). Убедитесь, что
используются стекла с не истекшим сроком годности.
Образцы следует проанализировать в течение <6 месяцев после секционирования при хранении при температуре
2-25 X.
ПРИМЕЧАНИЕ. Образцы тканей следует помещать на стекло в пределах определенной области окрашивания
стекла. Пожалуйста, обратитесь к руководству пользователя Dako Omnis Basic для определения размеров области
окрашивания стекла.
--- стр. 365 ---
ИНСТРУКЦИЯ по ПРИМЕНЕНИЮ — молочная железа
Подготовка образца — молочная железа
А.1 HER2IQFISH pharmDx (Dako Omnis)
Во флаконе HER2 IQFISH pharmDx (Dako Omnis) содержится металлический шарик с золотым покрытием, который
используется для смешивания. Перед загрузкой флакона в Dako Omnis разморозьте и тщательно перемешайте
реагент, поскольку он отделяется от фазы во время замораживания.
Используйте смесительное устройство Dako Omnis для смешивания зонда.
Следуйте приведенной ниже процедуре смешивания зонда на смесительном устройстве Dako Omnis и обратитесь
к руководству пользователя смесительного устройства для получения более подробной информации.
1. Достаньте из морозилки флакон HER2 IQFISH pharmDx (Dako Omnis).
2. Загрузите флакон в смесительное устройстео Dako Omnis.
3. Подключите смесительное устройство и убедитесь, что индикатор состояния загорелся зеленым.
Выберите программу «Thaw + mix». Важно! Флаконы, хранящиеся при температуре ниже -25 ®С, следует
разморозить (немного) перед загрузкой флакона в смесительное устройство Dako Omnis и использовать
программу Mix.
4. Извлеките флакон из смесительного устройства.
5. Откройте откидную верхнюю крышку, откиньте ее назад и установите в положение выреза (подробнее см. в
руководстве пользователя Dako Omnis Basic).
6. Немедленно загрузите флакон в модуль хранения реагентов на приборе Dako Omnis. Если во время
окрашивания используется функция непрерывной загрузки реагента, убедитесь, что время от смешивания до
аспирации флакона в Dako Omnis составляет не менее 10 минут.
Зонд HER2 IQFISH pharmDx (Dako Omnis) можно повторно разморозить и использовать до 10 раз.
Всегда смешивайте смесь зонда HER2 IQFISH pharmDx (Dako Omnis) непосредственно перед загрузкой на прибор.
Не трясти. Общая рабочая стабильность HER2 IQFISH pharmDx ISH (Dako Omnis) составляет 80 часов при хранении
в модуле хранения реагентов на Dako Omnis. Оставшаяся рабочая стабильность отслеживается при помощи
программного обеспечения Dako Omnis (см. выше). HER2 IQFISH PharmDx (Dako Omnis) после пребывания на борту
в Dako Omnis следует немедленно перевести на температуру <-18 " С (рекомендуется от-18 “ С до-25 * С).
А.2 Раствор для предварительной обработки ISH (20х) (Dako Omnis)
Приготовьте рабочий раствор, разбавив раствор для предварительной обработки ISH (20к) (Dako Omnis) в
концентрации 1:20 следующим образом.
1. Наполните бутылку Dako Omnis объемом 3,5 л с маркировкой РТВ (синяя этикетка) деионизированной водой
до линии заполнения (3,325 л). Перед наполнением убедитесь, что бутылка находится на горизонтальной
поверхности.
2. Опорожните одну бутылку концентрата 175 мл раствора предварительной обработки ISH (20^) (Dako Omnis) в
объемную бутылку.
3. Перенесите отделяемую этикетку с емкости концентрата к бутылке. Закрепите крышку объемной бутылки и
аккуратно переверните бутылку 2-3 раза.
4. Используйте ручной сканер штрих-кода Dako Omnis для идентификации реагента (сканируйте съемную
этикетку и объемную бутылку).
5. Сразу же загрузите объемную бутылку на прибор Dako Omnis.
Разбавленный раствор можно использовать в течение 7 дней при хранении на борту Dako Omnis. Оставшаяся
рабочая стабильность отслеживается при помощи программного обеспечения Dako Omnis (см. выше).
Неиспользованный разбавленный раствор можно хранить при температуре 2-8 “С в течение одного месяца. После
хранения в холодильной камере убедитесь, что разбавленный раствор уравновешен, по крайней мере, до 18 ‘С
перед загрузкой в Dako Omnis.
ПРИМЕЧАНИЕ. Выбросить разбавленный раствор, если он мутный.
А.З Жесткий промывочный буфер ISH (20х) (Dako Omnis)
Приготовьте рабочий раствор, разбавив жесткий промывочный буфер ISH (20х) (Dako Omnis) в концентрации 1:20
следующим образом.
--- стр. 366 ---
1. Наполните бутылку Dako Omnis объемом 3,5 л с маркировкой РТВ (синяя этикетка) деионизированной водой
до линии заполнения (3,325 л). Перед наполнением убедитесь, что бутылка находится на горизонтальной
поверхности.
2. Вылейте 175 мл строгого промывочного буфера (20х) (Dako Omnis) из бутылки концентрата в бутылку.
3. Перенесите отделяемую этикетку с емкости концентрата к бутылке. Закрепите крышку объемной бутылки и
аккуратно переверните бутылку 2-3 раза.
4. Используйте ручной сканер штрих-кода Оако Omnis для идентификации реагента (сканируйте съемную
этикетку и объемную бутылку).
5. Сразу же загрузите объемную бутылку на прибор Оако Omnis.
Разбавленный раствор можно использовать в течение 7 дней при хранении на борту Dako Omnis. Оставшаяся
рабочая стабильность отслеживается при помощи программного обеспечения Dako Omnis (см. выше).
Неиспользованный разбавленный раствор можно хранить при температуре 2-8 в течение одного месяца. После
хранения в холодильной камере убедитесь, что разбавленный раствор уравновешен, по крайней мере, до 18 °С
перед загрузкой в Dako Omnis.
ПРИМЕЧАНИЕ. Выбросить разбавленный раствор, если он мутный.
А.4 Раствор этанола ISH, 96 % (Dako Omnis)
Раствор этанола ISH 96 % (Dako Omnis) является готовым к применению реагентом. Перед загрузкой на Dako Omnis
откройте откидную верхнюю крышку флакона, откиньте ее назад и нажмите на нее в вырезе.
Общая рабочая стабильность раствора этанола ISH 96 % (Dako Omnis) составляет 80 часов при хранении в модуле
хранения реагентов на Dako Omnis. Оставшаяся рабочая стабильность отслеживается при помощи программного
обеспечения Dako Omnis (см. выше). После завершения запуска раствор этанола ISH 96 % (Dako Omnis) можно
перевести на температуру хранения (2-8 "С) для сохранения рабочего времени стабильности.
А.5 Пепсин ISH (Dako Omnis)
Пепсин ISH (Dako Omnis) является готовым к применению реагентом. Перед загрузкой на Dako Omnis убедитесь,
что реагент оттаял. Откройте откидную верхнюю крышку флакона, откиньте ее назад и нажмите на нее в вырезе.
Общая рабочая стабильность пепсина ISH (Dako Omnis) составляет 80 часов при хранении в модуле хранения
реагентов на Dako Omnis. Оставшаяся рабочая стабильность отслеживается при помощи программного
обеспечения Dako Omnis (см. выше). После завершения запуска пепсин ISH (Dako Omnis) следует перевести на
температуру хранения (-18-8 '’С) для сохранения рабочего времени стабильности.
А.6 Флуоресцентная среда для закрепления ткани (Dako Omnis)
Флуоресцентная среда для закрепления ткани (Dako Omnis) представляет собой готовую к использованию среду
для закрепления ткани, которая используется за бортом прибора Dako Omnis. Переведите флуоресцентную среду
для закрепления ткани на температуру хранения (2-8 *С) сразу после использования.
А.7 Дополнительные аксессуары
Кроме того, на борт Dako Omnis следует загрузить следующие аксессуары: Деионизированную воду, разбавленный
промывочный буфер 20х (Dako Omnis), код GC807, Cleahfy, код GC810, очищающий раствор ISH, код GC207 и
крышку ISH (Dako Omnis), код GC102, как указано в руководстве пользователя Dako Omnis.
В. Процедура окрашивания — молочная железа
В.1 Примечания к процедуре
HER2 IQFISH PharmDx (Dako Omnis) — это гибридизационный зонд для автоматизированного анализа прямой
флуоресцентной гибридизации in situ (FISH) на приборе Dako Omnis, который вместе с дополнительными
реагентами GM300, GM301, GM302, GM303 и GM304 (GM304 вне прибора) предназначается для количественного
определения амплификации гена HER2. Перед использованием пользователь должен внимательно прочитать все
инструкции и ознакомиться со всеми компонентами и мерами предосторожности.
Автоматизированная процедура окрашивания FISH на Dako Omnis включает депарафинизацию срезов тканей,
демаскировку антигена, расщепление пепсина, гибридизацию и строгую промывку. Стекла выгружаются в сухую
разгрузочную станцию. Все шаги протокола предварительно запрограммированы в программном обеспечении Dako
Omnis.
Пожалуйста, обратитесь к руководству пользователя Dako Omnis для получения инструкций по загрузке стекол,
крышки ISH, реагентов и т.д. Проверены три протокола HER2 IQFISH: HER2 IQFISH Пепсин Short, HER2 IQFISH
--- стр. 367 ---
Пепсин Medium и HER2 IQFISH Пепсин Long, которые отличаются только временем расщепления пепсина,
предварительно запрограммированы в программное обеспечение Dako Omnis и могут быть выбраны для каждого
из пяти стекол в стойке стекол. Это позволяет оптимизировать расщепление тканей, которое может зависеть от
преданалитических условий. Протокол HER2 IQFISH Пепсин Medium считается стандартным протоколом.
Различные протоколы окрашивания можно просмотреть на рабочей станции Dako Link Omnis.
Кроме того, пользователь может выбрать использование шаблона протокола IQFISH. Оптимальные условия могут
варьироваться в зависимости от типа образца и метода подготовки, и должны одобряться отдельной лабораторией.
В.2. Процедура предварительного окрашивания
1. Выберите протокол HER2 IQFISH, который будет применяться для каждого стекла из программного
обеспечения рабочей станции Dako Link Omnis в разделе протоколы IQFISH.
2. Распечатайте этикетки стекол и прикрепите их к стеклам из стекла.
3. Поместите стекла в стойку для стекол. Для получения более подробной информации обратитесь к руководству
пользователя Dako Omnis Basic.
Стойка для стекол может вместить от одного до пяти стекол. Рекомендуется, чтобы по крайней мере два стекла
окрашивались в ходе окрашивания HER2 IQFISH.
4. Установите стойку для стекол на Dako Omnis.
5. Загрузите крышку ISH (одну крышку ISH на стойку для стекол) на Dako Omnis.
6. Убедитесь, что объемные бутылки с жидкостями находятся на борту и регистрируются прибором Dako Omnis.
Бутылки с жидкостью; Clearify (просветляющий агент), разбавленный раствор для предварительной обработки
ISH (Dako Omnis), разбавленный промывочный буфер ISH (Dako Omnis) и разбавленный промывочный буфер
(Dako Omnis).
7. Загрузите раствор этанола ISH 96 % (Dako Omnis) и пепсин ISH (Dako Omnis), свежесмешанный HER2 IQFISH
pharmDx (Dako Omnis) и очищающий раствор ISH в модуль хранения реагентов. Убедитесь, что все крышки
флаконов с откидным верхом открыты.
8. Следуйте инструкциям на сенсорном экране и нажмите «Готово», чтобы начать процедуру окрашивания.
В.З. Процедура (методика) окрашивания
Процедуру окрашивания HER2 IQFISH на приборе Dako Omnis (обобщена в таблице 1) можно контролировать на
рабочей станции Dako Link Omnis;
Таблица 1. Упрощенный обзор шагов протокола окрашивания HER2 IQFISH
Этап Реагент Время и температура
Депарафинизация Clearify (просветляющий агент) 10 минут, 38 *С
Демаскировка антигенаРаствор для предварительной
обработки ISH (Dako Omnis)
15 минут, 97 “С
Промывка Раствор этанола ISH, 96 % (Dako
Omnis)
2x3 минуты. 32 ®С
Расщепление* Пепсин ISH (Dako Omnis) 10 минут, 15 минут или 20 минут
Сушка 15 минут, 45 “С
Денатурация 10 минут, 66 “С
Гибридизация HER2 IQFISH pharmDx (Dako Omnis) 75 минут, 45 “С
Сильная промывка Жесткий промывочный буфер ISH
(Dako Omnis)
10 минут, 61 *С
* Три проверенных времени расщепления пепсина можно выбрать с использованием протоколов HER2 IQFISH,
указанных выше.
Если требуется дальнейшее окрашивание ISH, перенесите все реагенты на рекомендуемую температуру хранения.
В.4. Процедура после окрашивания
Разгрузите стекла и нанесите до 30 мкл флуоресцентной среды для закрепления ткани (Dako Omnis), содержащей
DAPI, на область стекла с антигеном. Участок ткани должен быть полностью покрыт флуоресцентной средой для
закрепления ткани (Dako Omnis). Нанесите покровное стекло.
--- стр. 368 ---
ПРИМЕЧАНИЕ, Стекла можно прочесть через 15 минут или в течение 7 дней после закрепления. Однако при
воздействии на стекла света или высоких температур может произойти выцветание стекол. Чтобы свести к
минимуму выцветание, храните стекла в темном помещении при температуре от-18 до -8 °С.
Контроль качества — молочная железа
1. Сигналы должны быть яркими, четкими и легко поддаваться оценке.
Здоровые клетки позволяют осуществлять внутренний контроль процесса окрашивания.2 ,
3.
4.
5.
• Здоровые клетки должны иметь 1-2 четко видимых зеленых сигнала, указывающих на то, что зонд CEN-
17 ПНК успешно гибридизовался с центромерной областью хромосомы 17.
• Здоровые клетки также должны иметь 1-2 четко видимых красных сигнала, указывающих на то, что ДНК-
зонд HER2 успешно гибридизовался с геном (генами) H ER2.
• Из-за секционирования ткани некоторые здоровые клетки будут иметь меньше двух сигналов каждого
цвета, чем ожидалось.
• Неспособность обнаружить сигналы в здоровых клетках указывает на неудачу анализа, и результаты
должны считаться недействительными.
Ядерная морфология должна оставаться неповрежденной при оценке при помощи фильтра DAPI.
Многочисленные призрачные клетки и общая плохая ядерная морфология указывают на чрезмерное
расщепление образца, что приводит к потере или фрагментации сигналов. Такие образцы следует считать
недействительными.
Необходимо оценить как минимум 20 опухолевых клеток.
Различия в фиксации, обработке и внедрении тканей, полученные в лаборатории пользователя, могут
приводить к вариабельности результатов, что требует регулярной оценки внутреннего контроля.
Интерпретация окрашивания — молочная железа
Оцениваемая ткань
Следует изучать только образцы от пациентов с инвазивной карциномой. В случаях с карциномой in situ и
инвазионной карциномой в таком же образце, следует учитывать только инвазионный компонент. Избегайте
областей некроза и областей с неоднозначными ядерными границами. Не включайте ядра, которые требуют
субъективного суждения. Пропускайте ядра со слабой интенсивностью сигнала и неспецифическим или высоким
фоном.
Перечисление сигналов
Найдите опухоль в контексте окрашенного Н&Е стекла и оцените ту же область на окрашенном FISH стекле.
Отсканируйте несколько областей опухолевых клеток, чтобы учесть возможную гетерогенность. Выберите область
с хорошим распределением ядер. Начните анализ в верхнем левом квадранте выбранной области и, сканируя слева
направо, подсчитайте количество сигналов в пределах ядерной границы камщого оцениваемого ядра в соответствии
с приведенными ниже руководящими принципами (см. также приложение 2).
Сфокусируйтесь вверх и вниз, чтобы найти все сигналы в отдельном ядре.
Считайте два сигнала одинакового размера и разделенные расстоянием равного или меньшего диаметра
сигнала только одним сигналом
В ядрах с высоким уровнем амплификации гена HER2, сигналы HER2 могут располагаться очень близко друг
к другу и образовывать кластер сигналов. В этих случаях количество сигналов HER2 не может быть
подсчитано, но должно быть оценено. Особое внимание следует уделять зеленым сигналам, так как скопления
сигналов HER2 могут закрывать зеленые сигналы, делая их невидимыми. В случае сомнений, пожалуйста,
проверьте зеленые сигналы с помощью специального фильтра FITC.
Не считайте ядра без сигналов или с сигналами только одного цвета. Оценивайте только ядра с одним или
несколькими сигналами FISH каждого цвета.
Руководство по подсчету сигналов
1
Не считать. Ядра перекрываются, видны не все участки ядер
2
ф
Два зеленых сигнала, не считайте ядра с сигналами только одного
цвета
--- стр. 369 ---
3 ф
Подсчитайте как 3 сигнала зеленого цвета и 12 сигналов красного
(кластерная оценка)
4
Ф
Подсчитывайте как 1 зеленый и 1 красный сигнал. Два сигнала
одинакового размера, разделенные расстоянием, равным или
меньшим диаметра одного сигнала, считаются как один.
5 или
Не считайте (расщепленные или нерасщепленные ядра).
Отсутствуют сигналы в центре ядер (ядра в форме пончиков).
6
ф
Подсчитывайте как 2 зеленых и 3 красных сигнала. Два сигнала
одинакового размера, разделенные расстоянием, равным или
меньшим диаметра одного сигнала, считаются как один.
7
ф
Подсчитывайте как 1 зеленый и 5 красных сигналов.
8
ф
Считайте как 3 зеленых (1 зеленый вне фокуса) и 3 красных сигнала
9
ф
Кластер красных сигналов скрывает зеленые сигналы, проверьте
зеленые сигналы с помощью специального фильтра FITC^ или не
учитывайте их
Записывайте подсчеты в таблицу, приведенную в приложении 1.
Когда это возможно, подсчитайте 20 ядер на образец ткани из различных областей опухоли (18).
Вычислите отношение HER2/CEN-17, разделив общее количество красных сигналов HER2 на общее количество
зеленых сигналов CEN-17.
Образцы с соотношением HER2/CEN-17 выше или равным 2 следует считать амплифицированными генами HER2
(3, 18-20),
Результаты в точке отсечения или вблизи нее (1,8-2,2) следует интерпретировать с осторожностью.
Если соотношение граничное (1,8-2,2), подсчитайте дополнительные 20 ядер и пересчитайте соотношение для 40
ядер.
В случае сомнений следует повторно подсчитать стекло с образцом. В пограничных случаях необходима
консультация специалиста по лабораторной диагностике и лечащего врача.
--- стр. 370 ---
Ограничения — молочная железа
1. Только для автоматического использования на инструменте Dako Omnis.
2. Специализированная подготовка необходима для отбора тканей, фиксации и подготовки стекол, а также для
интерпретации окрашивания 1QFISH. Интерпретация окрашивания HER2 IQFISH pharmDx (Dako Omnis) не
должна выполняться лицами с нарушением цветового зрения.
3. Результаты FISH зависят от обращения и обработки ткани до окрашивания. Неправильная фиксация,
промывка, сушка, нагревание, секционирование или загрязнение другими тканями или жидкостями могут
повлиять на гибридизацию зонда. Непоследовательные результаты могут быть вызваны различиями в методах
фиксации и встраивания или внутренними нарушениями в ткани.
4. Эффективность анализа HER2 IQFISH phamiDx (Dako Omnis) не оценивалась на образцах опухолей молочной
железы с микрокальцификациями.
5. Пользователь несет ответственность за проверку шаблона протокола IQFISH.
Эксплуатационные характеристики — молочная железа
Эффективность гибридизации
Эффективность гибридизации HER2 IQFISH pharmDx была исследована с использованием 180 фиксированных
формалином, залитых в парафин срезов ткани, протестированных на трех исследуемых площадках. Все 180
участков ткани можно было перечислить в соответствии с руководящими принципами перечисления продуктов.
Эффективность гибридизации составила 100 %.
Соотношения HER2/CEN-17, рассчитанные и используемые в исследованиях эксплуатационных характеристик,
основаны на подсчете сигналов в 20 ядрах с использованием рекомендаций по подсчету, приведенных в разделе
«Интерпретация окрашивания» настоящей инструкции по применению.
Аналитическая чувствительность
Аналитическая чувствительность HER2 IQFISH pharmDx (Dako Omnis) была исследована с использованием 20
различных образцов ткани рака молочной железы (10 образцов с амплифицированным статусом гена HER2 и 10 не
амплифицированных образцов). Соотношение между количеством сигналов HER2 и сигналами CEN-17
рассчитывали на основе подсчета сигналов в 20 ядрах здоровых клеток внутри образца ткани. Соотношение
H E R 2/C E Ы -^ 7 для здоровых клеток, выявленных в 20 образцах ткани рака молочной железы, находилось в пределах
0,97-1,11.
Аналитическая специфичность
ДНК-зонды HER2 в HER2 IQFISH PharmDx (Dako Omnis) были секвенированы по концам и картированы для
подтверждения общего охвата 218 кЬ, включая ген H ER2.
ПНК-зонды CEN-17 в HER2 IQFISH pharmDx (Dako Omnis) были индивидуально и в комбинации протестированы
FISH для подтверждения их специфической гибридизации с центромерной областью хромосомы 17.
Чтобы исключить перекрестную гибридизацию с хромосомами, отличными от хромосомы 17, были проведены
исследования метафазных пластинок в соответствии со стандартными процедурами проверки качества Dako. Всего
275 метафазных пластинок с различными сигналами были оценены для специфической гибридизации смесей
зондов ДНК HER2 и CEN-17 ПНК. Во всех 275 случаях гибридизация была специфичной для хромосомы 17. Ни в
одном из 275 случаев не наблюдалось перекрестной гибридизации с локусами на других хромосомах.
Специфичность зонда составила, таким образом, 100 % (275 из 275).
Чтобы измерить способность анализа IQFISH идентифицировать только антигенные вещества HER2 и CEN-17 без
вмешательства других веществ, исследования проводились на образцах тканей рака молочной железы путем
исключения зондов HER2 и CEN-17 из гибридизационной смеси и только с использованием гибридизационного
буфера. В общей сложности 20 образцов были оценены на наличие сигналов, не связанных с зондовой смесью. Ни
в одном из 20 образцов не было обнаружено других хромосомных антигенов или интерференции с
близкородственными веществами.
Исследования надежности
Надежность анализа HER2 IQFISH pharmDx (Dako Omnis) была проверена путем изменения концентрации зонда
ПНК, времени демаскировки антигена, времени инкубации пепсина, времени денатурации, времени гибридизации,
а также строгого времени и температуры промывки. Различные параметры были протестированы на пяти образцах
ткани рака молочной железы FFPE (были представлены как амплифицированные, так и не амплифицированные
образцы ткани).
--- стр. 371 ---
Все параметры были протестированы как ниже, так и выше стандартных настроек протокола, за исключением
концентрации зонда ПНК и строгой температуры промывки, при которой стандартная настройка протокола была
включена в настройку.
Параметры теста были следующими.
Концентрация зонда ПНК: испытано на 100 % и *!-М %.
Время демаскировки антигена: испытано при 13 мин 45 с и 16 мин 15 с.
Время инкубации пепсина: испытано при 14 мин 45 с и 16 мин 15 с.
Время денатурации: испытано при 9 мин 45 с и 10 мин 45 с.
Время гибридизации: испытано при 70 мин и 80 мин.
Время сильной промывки: испытано при 8 мин 45 с и 11 мин 15 с.
Температура сильной промывки: испытано при температуре 59 “С, 61 °С и 63 '’С.
Три концентрации ПНК-зонда оценивались во фракционированном дизайне эксперимента (инструмент JMP, SAS),
который проводился с использованием 12 различных протоколов окрашивания, как указано в таблице 2.
Таблица 2. В исследовании прочности использовались двенадцать различных протоколов окрашивания
Протокол на
прочность №
Параметр испытания
Время
демаскировки
антигена
(мин)
Время
пепсина
(мин)
Время
денатурации
(мин)
Время
гибридизации
(мин)
Время
сильной
промывки
(мин)
Температура
сильной
промывки
(°С)
Конц.
ПНК в
зондовой
смеси
1 16,25 16,25 9,75 80 8,75 59 83%
2 13,75 14,75 10,75 70 8,75 59 100%
3 16,25 14,75 9,75 70 8,75 63 100%
4 13,75 14,75 10,75 80 8,75 61 83%
5 13,75 14,75 9,75 80 11,25 59 117%
6 13,75 16,25 10,75 70 11,25 63 83%
7 13,75 16,25 10,75 70 11,25 63 100%
8 16,25 14,75 9,75 70 11,25 61 83%
9 13,75 16,25 9,75 70 8,75 61 117%
10 16,25 16,25 10,75 70 11,25 59 117%
11 16,25 16,25 10,75 80 11,25 61 100%
12 16,25 14,75 10,75 80 8,75 63 117%
Все пять образцов тканей были окрашены по всем 12 протоколам.
Индикатором для исследования на прочность служили интенсивность сигнала и качество морфологии. Все
протоколы производили окрашивание во всех образцах тканей (всего 60) с сигналами, которые были яркими,
отчетливыми и легко поддавались оценке, что, таким образом, подходило для перечисления сигналов.
Кроме того, влияние толщины ткани на результаты анализа HER2 IQFISH pharmDx (Dako Omnis) было проверено
путем изменения толщины срезов образцов ткани рака молочной железы FFPE.
В общей сложности пять последовательных срезов пяти образцов рака молочной железы человека с различной
толщиной (3, 4, 5, 6 и 7 мкм) были протестированы с помощью HER2 IQFISH pharmDx (Dako Omnis). Средний
коэффициент вариации соотношения HER2/CEN-17 составил 5,8 % (в диапазоне от 4,3 % до 7,1 %).
--- стр. 372 ---
Воспроизводимость
Внутрилабораторная воспроизводимость изо дня в день и от партии к партии была протестирована с
использованием HER2 IQFISH pharmDx (Dako Omnis). Исследование было разработано как внутреннее, слепое,
рандомизированное исследование соотношения HER2/CEN-17 с использованием срезов из восьми различных
фиксированных формалином, залитых в парафин образцов рака молочной железы с различными уровнями
амплификации гена HER2. Восемь образцов были протестированы с HercepTest и представлены два образца с
HER2 IHC 0/1-^, два образца с HER2 IHC 2+, два образца с HER2 IHC 3+, и два образца с заданным соотношением
HER2/CEN-17 FISH между 1,5 и 2,5, полученным с помощью HER2 и IQFISH pharmDx (код К5731), Каждый образец
окрашивали тремя различными партиями HER2 IQFISH pharmDx (Dako Omnis) в течение пяти дней подряд. Всего
за все время исследования было обработано 240 окрашиваний тканей, так как каждая комбинация окрашивалась в
дубликатах. Изменение соотношения между днями и партиями показано на рис.1. Данные анализировались с
помощью преобразования Бокса-Кокса с помощью модели случайных эффектов для получения однородности
дисперсии данных. Общий коэффициент вариации был оценен в 4,3 %, и было обнаружено, что вариации между
днями и партиями внесли свой вклад в 1,5 % и 0 % соответственно.
f|siCCOZ^
•IS Л .
Партия
■ J 4 5 Д е н ь
6IU 2 Ткань
12 3-
61С6
S 1 2 3
61*43
: 3 4 S 1 2 3 4 6 1
6 1 * 4 4 6im
2 3 4 6 1
62219
: 3
6622?
6 12 3.
66'^
Рис. 1. Соотношения HER2/CEN-17, полученные в рамках лабораторного исследования воспроизводимости HER2
IQFISH pharmDx (Dako Omnis), включая конечные точки воспроизводимости от партии к партии и изо дня в день.
Кроме того, воспроизводимость HER2 IQFISH pharmDx (Dako Omnis) между днями и лабораториями была
проверена внешне в трех местах (одна лаборатория в США и две в Европе) в стратифицированном и слепом
исследовании на срезах тканей из 12 различных фиксированных формалином, залитых в парафин образцов рака
молочной железы. Три образца были HER2 IHC 0/1+, три образца были HER2 IHC 2+, три образца были HER2 IHC
3+, и три образца имели предварительно определенное отношение HER2/CEN-17 FISH между 1.5 и 2,5, полученного
при использовании HercepTest и HER2 IQFISH pharmDx (код К5731), соответственно. Образцы окрашивались и
анализировались в участвовавших в исследовании лабораториях. Каждый образец окрашивался минимум пять раз
в течение пяти дней подряд и оценивался одним наблюдателем в каждой лаборатории. 192 среза были окрашены
и включены в статистический анализ. Данные анализировались с помощью преобразования Бокса-Кокса и
вычислялись компоненты дисперсии. Общий коэффициент вариации, основанный на верхнем 95 % доверительном
пределе, составил 15 %. Изменение соотношения HER2/CEN-17 между днями и лабораториями представлено на
рис. 2.
1 2 -
1 0-
8 -
Соотношение
IQFISH
HER2/CEN 17 И
2-
t • I • I > '
Лаборатория 1
• • t • • • •
е гч 1 со
Лаборатория 2
• • • •
Лаборатория 3
Состояние
образца
|Амплифйцированный
^Нвампгифйцироваиный
Идентификатор ткани
Лаборатория
--- стр. 373 ---
Рис. 2. Диаграмма вариабельности соотношений HER2/CEN-17 в нетрансформированных единицах, полученная в
ходе исследования воспроизводимости HER2 IQFISH pharmDx (Dako Omnis) между днями и лабораториями на
образцах тканей рака молочной железы.
Анализ HER2 IQFISH pharmDx (Dako Omnis) был протестирован на воспроизводимость между наблюдателями в
рамках внутреннего исследования сравнения методов с использованием трех наблюдателей для независимой
оценки окрашенных образцов. Воспроизводимость проверялась на 140 различных образцах рака молочной железы
человека с не амплифицированным или амплифицированным статусом гена HER2. Данные анализировались с
помощью преобразования Бокса-Кокса. Средний коэффициент вариации между наблюдателями составил 9 %.
Повторяемость
Внутрилабораторная повторяемость HER2 IQFISH phannDx (Dako Omnis) была протестирована с использованием
последовательных срезов восьми образцов рака молочной железы человека с не амплифицированным или
амплифицированным статусом гена HER2. Ткани тестировались в двух экземплярах в течение пяти дней подряд с
тремя различными партиями в общей сложности 240 стекол (120 срезов двух экземплярах). Модель случайных
эффектов, использованная для анализа данных, привела к дисперсии, относящейся к дням и партиям (как указано
в исследовании внутренней воспроизводимости). Остаточная дисперсия равна дисперсии между репликами и,
следовательно, повторяемости. Верхний 95 % доверительный предел для коэффициента повторяемости вариации
составлял 4,4 %.
Исследования метода сравнения
Сравнение результатов HER2 IQFISH pharmDx (Dako Omnis) с результатами HER2 IQFISH PharmDx
HER2 IQFISH pharmDx (Dako Omnis) сравнивали c HER2 IQFISH pharmDx (код K5731) в сравнительном
исследовании на 140 образцах ткани рака молочной железы человека. Образцы состояли из 77 HER2-He
амплифицированных случаев и 63 НЕ/?2-амплифицированных случаев с известной оценкой HercepTest, как
показано в таблице 3.
--- стр. 374 ---
Таблица 3. Распределение образцов на основе оценки HercepTest и оценки HER2 FISH (статус гена HER2),
полученных с помощью HER2 IQFISH pharmDx (код К5731)
Оценка окрашивания HercepTest 0 1+ 2+ 3+ Всего
п 27 11 53 49 140
Статус HER2 FISH
Амплифицированный 2 0 13 48 63
Неамплифицированный 25 11 40 77
Всего проверенных FISH-
образцов
27 11 53 49 140
Результаты кросстабуляции статуса гена HER2, полученные двумя анализами с расчетом общей согласованности
параметров (ОРА), положительной согласованности параметров (РРА) и отрицательной согласованности
параметров (NPA), представлены в таблице 4. Корреляция между соотношениями HE/72/CEN-17 с использованием
двух анализов показана на рис. 3.
Таблица 4. Перекрестная табуляция статуса гена HER2 получена с использованием HER2 IQFISH phamiDx
(код К5731) и HER2 IQFISH pharmDx (Dako Omnis)
Статус гена HER2 (К5731)
Всего
НеамплифицированныйАмплифицированный
Статус гена HER2
(Dako Omnis)
Неамплифицированный 77 0 77
Амплифицированный 0 63 63
Всего 77 63 140
ОРА: 100 %
РРА: 100%
NPA: 100%
Рис. 3. Корреляция между соотношениями HER2/CEN-17 с использованием HER2 IQFISH pharmDx (Dako Omnis) и
HER2 IQFISH pharmDx (код K5731) на 140 образцах рака молочной железы (линейное соответствие: у = 0,11 + 0,95*х;
= 0,97. Взвешено с обратной дисперсией для линейного соответствия),
Соотношения HER2/CEN-17 были логарифмически преобразованы для анализа. Установлено, что 95%
доверительный интервал для средней разницы между двумя методами окрашивания при соотношении HER2/CEN-
17 = 2 составляет [0,002; 0,031]. Это означает, что разница выше 3 % не ожидается с 95-процентной уверенностью.
Было установлено, что среднеквадратичная ошибка (RMSE) составляет 9 %, что указывает на величину среднего
колебания вокруг среднего значения.
Сравнение результатов HER2 IQFISH pharmDx (Dako Omnis) с результатами набора ДНК-зондов PathVvsion HER-2
--- стр. 375 ---
HER2 IQFISH pharmDx (Dako Omnis) сравнивали c набором ДНК-зондов PathVysion HER-2 в сравнительном
исследовании на 140 образцах ткани рака молочной железы человека. Образцы состояли из 80 H ER2-He
амплифицированных случаев и 60 Н£/?2-амплифицированных случаев с известной оценкой HercepTest, как
показано в таблице 5.
Таблица 5. Распределение образцов на основе оценки HercepTest и оценки HER2 FISH (статус гена HER2),
полученных с помощью HER2 IQFISH pharmDx (код К5731)
Оценка окрашивания HercepTest 0 1 + 2+ 3+ Всего
п 28 10 54 48 140
Статус HER2mm
Амплифицированный 1 0 12 47 60
Неамплифицированный 27 10 42 80
Всего проверенных FISH-
образцов
28 10 54 48 140
Результаты кросстабуляции статуса гена HER2, полученные двумя анализами с расчетом общей согласованности
параметров (ОРА), положительной согласованности параметров (РРА) и отрицательной согласованности
параметров (NPA), представлены в таблице 6. Корреляция между соотношениями HER2/CEN-17 с использованием
двух анализов показана на Рис. 4.
Таблица 6. Перекрестная табуляция статуса гена HER2 получена с помощью набора ДНК-зондов PathVysion
HER-2 и HER2 IQFISH pharmDx (Dako Omnis)
Статус гена HER2 (PathVysion)
Всего
НеамплифицированныйАмплифицированный
Статус гена HER2
(Dako Omnis)
Неамплифицированный 80 0 80
Амплифицированный 0 60 60
Всего 80 60 140
ОРА; 100 %
РРА: 100%
NPA: 100 %
о
Рис. 4. Корреляция между соотношениями HER2/CEN-17 с использованием HER2 IQFISH pharmDx (Dako Omnis) и
PathVysion на 140 образцах рака молочной железы (линейное соответствие; у = 0.01 + 0.98*х; R2 = 0.96. Взвешено
с обратной дисперсией для линейного соответствия).
Соотношения HER2/CEN-17 были логарифмически преобразованы для анализа. Установлено, что 95%
доверительный интервал для средней разницы между двумя методами окрашивания при соотношении HER2/CEN-
17 = 2 составляет [0,001; 0,031}. Это означает, что разница выше 3 % не ожидается с 95-процентной уверенностью.
--- стр. 376 ---
Было установлено, что среднеквадратичная ошибка (RMSE) составляет 10 %, что указывает на величину среднего
колебания вокруг среднего значения.
Клиническая польза при отборе пациентов для лечения герцептином (трастузумабом)
Набор HER2 FISH pharmDx был исследован в сравнительных исследованиях как с набором ДНК - зондов PathVysion
HER-2, так и с Dako HercepTest. Результаты тестирования HER2 FISH доступны в общей сложности для 940
образцов рака молочной железы.
Сравнение результатов набора HER2 FISH oharmPx с результатами теста набора ДНК-зонда PathVysion HER-2
Было проведено три исследования, в которых сравнивались результаты теста набора HER2 FISH pharmDx с
результатами теста набора ДНК-зонда PATHVYSION HER-2 (см. таблицу 7). Исследования проводились в
географически обособленных местах, и не было никакого дублирования в использовании образцов. Всего было
испытано 328 образцов.
Таблица 7. Сводные данные сравнительных исследований метода FISH
Назначение исследования
Исследование
согласованности (датские
образцы, N=190)
Исследование
согласованности
(японские образцы,
N=52)
Исследование
согласованности
(французские образцы,
N=86) (21)*
Согласованность
(95 % доверительный интервал)
93,68 %
(90,22-97,14 %)
96,15% н/д
Положительная
согласованность параметров
(95 % доверительный интервал)
86%
(77,34-95,08 %)
97% н/д
Отрицательная
согласованность параметров
(95 % доверительный интервал)
97%
(94,05-99,89 %)
96% н/д
* 8 статье были представлены сравнительные данные, но анализ HER2 FISH не был идентифицирован.
Всего было получено 12 противоречивых результатов теста между тестом набора HER2 FISH pharmDx и тестом
ДНК-зонда PATHVYSION HER-2 для датских клинических образцов (см. таблицу 8).
Таблица 8. Краткое изложение данных по 12 противоречивым результатам испытаний
HER2 FISH (пoлoжитeльнaя)/PathVys^on
(отрицательная)
HER2 FISH (OTpHuaTenbHaB)/PathVysion
(положительная)
ИДЕНТИФИКАТ
ОР:
Коэффици
ент HER2
FISH
Коэффици
ент
PathVysion
Оценка
НегсерТ
est
ИДЕНТИФИКАТ
ОР:
Коэффици
ент HER2
FISH
Коэффици
ент
PathVysion
Оценка
НегсерТ
est
160 2,10* 1,51 2+ 234 1,68 2,02* 2+
(1,82-2,51) (1,39-1,68) (1,38-1,83) (1,84-2,29)
208 3,61 1,62 2+ 284 1,44 2,21* 2+
(2,95-4,73) (1,51-1,82) (1,07-1,83) (1,94-2,64)
306 2,20* 1,33 1 + 423 1.7 2,15 1 +
(1,79-2,24) (1,18-1,44) (1,52-1,95) (2,02-2,45)
846 2,58 1,51 2+ 474 1,44 2,55 2+
(2,06-3,50) (1,42-1,76) (1,16-1,83) (2,38-3,26)
735 1,68 2,03* 2+
(1,40-1,99) (1,89-2,19)
746 1,05 4,53 3+
(0,96-1,18) (4,27-5.17)
837 1.52 2,15 3+
(1,48-1,79) (2,10-2.67)
--- стр. 377 ---
881 1,83* 2,68 2+
(1.15-2,69) (2,39-3,14)
* ДИ средних логарифмических коэффициентов включал 2,0. Цифры в скобках — 95 % ДИ.
В этом анализе расхождений использовались протоколированные соотношения. 95 % доверительный интервал был
рассчитан для 60 зарегистрированных соотношений из ядер, которые были использованы для расчета отношения
ДНК-зонда PathVysion HER-2. Для 4 случаев, когда набор HER2 FISH pharmDx был положительным, а ДНК-зонд
PathVysion HER-2 был отрицательным, ни один интервал не включал критическое значение 2. Из 8 случаев, когда
набор HER2 FISH pharmDx был отрицательным, а ДНК-зонд PathVysion HER-2-положительным, 95 % ДИ 3 (234, 284
и 735) включал критическое значение 2. Аналогичным образом, 95 % доверительный интервал был рассчитан для
зарегистрированных соотношений из ядер, которые были использованы для расчета коэффициента набора HER2
FISH phanm Dx. Для 4 случаев, когда набор HER2 FISH pharmDx был положительным, а ДНК-зонд PathVysion HER-
2 был отрицательным, 2 включали критическое значение 2 (160 и 306). Из 8 случаев, когда набор HER2 FISH
pharmDx был отрицательным, а ДНК-зонд PathVysion HER-2-положительным, 95 % ДИ 1 (881) включал критическое
значение 2.
Сравнение результатов набора HER2 FISH pharmDx с результатами HerceoTest
Было проведено четыре исследования, в которых сравнивали набор HER2 FISH pharmDx с результатами
HercepTest. Всего было сравнено 940 образцов, использовался результат оценки окрашивания 3+ в качестве
положительного результата IHC в анализе HercepTest (см. таблицу 9).
Таблица 9. Резюме сравнительных исследований набора HER2 FISH phannDx и IHC (HercepTest)
Назначение исследования
Датские
клинические
образцы (N«682)
Японские
образцы
(N=52)
Французское
исследование
(N=86) (31)
Датское
экспериментальное
исследование
(N=120) (22)
Согласованность 93,11 %
(95 % доверительный интервал) (91,21-95,01 %) 96,15% 87,21 % 93,33 %
Положительная
согласованность параметров
91 % 96% 87% 84%
(95 % доверительный интервал) (87,39-94,57 %)
Отрицательная согласованность
параметров
94% 96% 87% 97%
(95 % доверительный интервал) (92,12-96,46%)
Данные о распределении результатов испытаний HercepTest и HER2 FISH для датских клинических образцов
представлены в таблице 10.
--- стр. 378 ---
Таблица 10. Распределение статуса HER2 с помощью HercepTest и набора HER2 FISH phamiDx
Оценка окрашивания HercepTest 0 1 + 2+ 3+ Всего
п 221 267 84 248 820
% 27 33 10 30 100%
Статус HER2 FISH
Амплифицированный 0 8 17 222 247
Неамплифицированный 106 245 62 22 435
Всего проверенных FISH-образцов 106 253 79 244 682
--- стр. 381 ---
Подсчитайте сигналы в дополнительных 20 ядрах
№ ядра
Подсчет
HER2
(красный)
Подсчет
CEN-17
(зеленый
цвет)
№ ядра
Подсчет
HER2
(красный)
Подсчет CEN-
17
(зеленый
цвет)
21 31
22 32
23 33
24 34
25 35
26 36
27 37
28 38
29 39
30 40
Итого (21-30) Итого (31-
40)
Вычислите соотношение HER2/CEN-17 на основе 40 подсчитанных ядер
HER2 CEN-17 Соотношение HER2/CEN-17
Общий подсчет (1-40)
□ Коэффициент < 2: амплификация гена HER2 не наблюдалась
□ Коэффициента 2: амплификация гена HER2 наблюдалась
Дата и подпись, техник:
Дата и подпись, специалист по лабораторной диагностике:
Рекомендации по подсчету см. в разделе «Интерпретация окрашивания».
--- стр. 382 ---
Приложение 2. Молочная железа
HER2IQFISH pharmDx (Dako Omnis), код GM333
Технические характеристики флуоресцентного микроскопа
Оако рекомендует следующее оборудование для использования с HER2 IQFISH pharmOx, (Dako Omnis),
GM333:
1. Тип микроскопа
• Эпифлуоресцентный микроскоп
2. Лампа
• Ртутная лампа мощностью 100 Вт (вести учет времени горения)
3. Объективы
• Для скрининга ткани применяются погружаемые в масло16Х или 20Х объективы
• Для увеличения большой мощности и для перечисления сигналов рекомендуется использовать только
погружаемые в масло объективы, например ЮОХ
4. Фильтры
Фильтры индивидуально разработаны для конкретных флуорохромов и должны подбираться соответствующим
образом. Dako рекомендует использовать специальный фильтр DAPI в сочетании с высококачественным техасским
красным/двойным фильтром FITC.
• Фильтр DAPI
• Техасский красный/двойной фильтр FITC
• Техасский красный и одноступенчатые фильтры FITC можно использовать как для подтверждения, так и
для перечисления
Флуорохром Длина волны возбуждения Длина волны излучения
FITC 495 Нм 520 Нм
Техасский
красный 596 Нм 615 Нм
Фильтры специфичны для каждого типа микроскопа, и использование соответствующих фильтров имеет решающее
значение для интерпретации. Если вам нужна подробная информация, пожалуйста, свяжитесь с вашим
поставщиком микроскопов или представителем Dako.
5. Масло
• Нефлуоресцирующее масло
Меры предосторожности
• Не рекомендуется использовать 50-ваттную ртутную лампу
• Родаминовые фильтры использовать нельзя
• Тройные фильтры не рекомендуются
Неоптимизированный микроскоп может вызвать проблемы при считывании флуоресцентных сигналов. Важно,
чтобы срок службы источника света не истек и чтобы он был правильно выровнен и сфокусирован. Клиенты должны
следить за рекомендациями производителя ртутной лампы и следовать им. Микроскоп следует осматривать, а
ртутную лампу выровнять до интерпретации результатов.
Необходимо приложить усилия, чтобы подвергнуть образец воздействию как можно меньшего количества
возбуждающего света, чтобы свести к минимуму угасание флуоресценции.
Мы рекомендуем обсудить настройку конкретного микроскопа с производителем перед началом гибридизации
флуоресценции in situ или обратиться к литературным источникам.
--- стр. 383 ---
Человеческий ген HER2 (также известный как ERBB2 или NEU) расположен на хромосоме 17 и кодирует белок HER2
или р185”^'’^. Белок HER2 лредставляет собой мембранный рецептор тирозинкиназы с гомологией к рецептору
эпидермального фактора роста (EGFR или HER1) (1-2). Ген HER2 присутствует в двух экземплярах во всех
здоровых диплоидных клетках.
Сверхэкспрессия белка HER2 и амплификация гена HER2 при раке желудка были продемонстрированы в большом
количестве исследований (пересмотрено в (23)). Положительность HER2 может быть обнаружена приблизительно
у 20 % пациентов либо при помощи IHC, либо FISH (23). Доклинические исследования in vitro и in vivo показали, что
трастузумаб (Herceptin) эффективен в различных моделях рака желудка, что приводит к началу нескольких
клинических исследований (23-27).
Все пациенты в исследовании III фазы В018255 (ToGA «открытое рандомизированное многоцентровое
исследование III фазы траустузумаба в комбинации с фторпиримидином и цисплатином против химиотерапии
только в качестве терапии первой линии у пациентов с HER2-пoзитивным прогрессирующим раком желудка»),
спонсируемом Hoffmann-La Roche AG, были отобраны с использованием Dako HercepTest (IHC) и набора Dako HER2
FISH pharmDx (FISH) c положительностью HER2, определяемой как IHC 3+ или FISH+ (HER2/CEN-17 г 2,0).
Исследование продемонстрировало клиническую полезность
как HercepTest (IHC), так и набора HER2 FISH pharmDx (FISH) для оценки статуса HER2 у пациентов с
прогрессирующей аденокарциномой желудка или гастроэзофагеального перехода, для которых рассматривается
лечение трастузумабом (28).
Не было зарегистрировано ни одного пациента, опухоли которого не были бы амплифицированы генами, но слабо
или сильно экспрессировали бы белок HER2 [FISH(-)/IHC 2+]. Поэтому неясно, выиграют ли пациенты, опухоли
которых не амплифицированы генами, а сверхэкспрессируют белок HER2 [например, FISH (-), IHC 2+ или 3+J, от
лечения герцептином. Исследование также показало, что амплификация генов (FISH) и сверхэкспрессия белков
(IHC) не так коррелируют, как с раком молочной железы, поэтому для определения статуса HER2 не следует
использовать один метод.
Этот продукт (HER2 IQFISH pharmDx (Dako Omnis) представляет собой смесь зондов IQISH для автоматического
прямого FISH — определения амплификации гена HER2. Этот продукт следует использовать вместе с указанными
вспомогательными реагентами на борту Dako Omnis. Его получают из выполненного вручную анализа
амплификации гена HER2, HER2 IQFISH pharmDx. код К5731.
Принцип процедуры — гастральный
HER2 IQFISH pharmDx (Dako Omnis) представляет собой зонды IQISH. которая состоит из смеси меченых техасским
красным ДНК-зондов, охватывающих область 218 кЬ, включая ген HER2 на хромосоме 17, и смеси флуоресцеин-
меченых пептидных нуклеиновых кислот (ПНК) (13), нацеленных на центромерную область хромосомы 17 (CEN-17).
Специфическая гибридизация с двумя антигенами приводит к образованию отчетливого красного флуоресцентного
сигнала в каждом локусе гена HER2 и отчетливого зеленого флуоресцентного сигнала в каждой центромере
хромосомы 17.
Оценка амплификации гена HER2 с помощью HER2 IQFISH pharmDx (Dako Omnis) является полностью
автоматизированным методом на приборе Dako Omnis. В программном обеспечении рабочей станции Dako Link
Omnis можно выбрать три различных проверенных протокола окрашивания FISH HER2. Протоколы различаются
только временем расщепления пепсина, следовательно, можно выбрать расщепление пепсина в течение 10 минут
(короткий (Short) протокол), 15 минут (средний (Medium) протокол) или 20 минут (длинный (Long) протокол) (см.
подробнее ниже). Для первоначального анализа рекомендуется использовать протокол Medium.
После окрашивания на борту Dako Omnis образцы закрепляют с помощью флуоресцентной среды для закрепления
ткани (Dako Omnis) с содержанием 4', 6-диамидино-2-фенилиндол (DAP1), и закрывают крышкой. При помощи
флуоресцентного микроскопа с соответствующими фильтрами (см. приложение 5), локализуют опухолевые клетки
и проводят подсчет красного {HER2) и зеленого (CEN-17) сигналов. Затем вычисляют отношение /-/ER2/CEN-17.
Здоровые клетки в анализируемом участке ткани будут служить внутренним положительным контролем
эффективности предварительной обработки и гибридизации.
Дополнительные сведения см, в разделе Интерпретация окрашивания.
Пожалуйста, обратитесь к руководству пользователя Dako Omnis для получения подробных инструкций по загрузке
и выгрузке стекол, крышек ISH (Dako Omnis), код GC102, реагентов, сыпучих жидкостей и отходов.
Реагенты — гастральный
Резюме и объяснение — гастральный
HER2 IQFISH pharmDx (Dako Omnis) и вспомогательные реагенты можно заказать отдельно в качестве отдельных
реагентов.
--- стр. 384 ---
Предоставленные материалы
HER2 IQFISH pharmPx (Dako Omnis): 1,6 мл готовой к использованию смеси меченых техасским красным ДНК-
зондов HER2 и меченых флуоресцеином ПНК-зондов CEN-17, поставляемых в буфере для гибридизации IQISH.
HER2 IQF1SH pharmDx {Dako Omnis) поставляется на сухом льду. Для гарантии того, что реагент не подвергался
воздействию высоких температур во время транспортировки, при получении должен присутствовать сухой
лед. Флаконы с реактивами с размороженным содержимым должны храниться и постоянно обрабатываться в
вертикальном положении.
Флакон с реагентом содержит металлический шарик с золотым покрытием, который позволяет смешивать реагенты
с помощью смесительного устройства Dako Omnis (см. руководство пользователя смесительного устройства Dako
Omnis). Важно тщательно перемешать реагент перед загрузкой в Dako Omnis.
Необходимый, но не поставляемый материал
Вспомогательные реагенты
Для проведения анализа амплификации генов HER2 при помощи HER2 IQFISH pharmDx (Dako Omnis) на борту
прибора Dako Omnis необходимы следующие реагенты:
Раствор яля предварительной обработки ISH (20х) (Dako Omnis): 175 мл, концентрированный 20х; разбавляется в
объемной бутылке Dako Omnis объемом 3,5 л (код GC109). Продукт содержит антимикробное средство и инертный
зеленый цвет для легкой идентификации и удобства использования.
Раствор этанола ISH. 96 % Юако Omnis): 14 мл 96 % этанола (готового к употреблению).
Пепсин ISH (Dako Omnis): 7 мл раствора пепсина А (готового к применению), pH 2,0; содержит стабилизатор и
антимикробное средство. Пепсин поставляется на сухом льду. Для гарантии того, что реагент не подвергался
воздействию высоких температур во время транспортировки, при получении должен присутствовать сухой
лед
Жесткий ПРОМЫВОЧНЫЙ буфер ISH (20х) Шако Omnis): 175 мл солевого раствора цитратного буфера,
концентрированного 20х; развести 1:20 в объемной бутылке Dako Omnis 3,5 л (GC109). В продукте содержится
антимикробное средство, детергент и инертный желтый цвет для легкой идентификации и удобства использования.
Флуоресцентная среда для закрепления ткани (Dako Omnis): 0,8 мл флуоресцентной среды для закрепления ткани
(готовой к использованию) с DAPI.
Хотя вышеуказанные реагенты не поставляются с HER2 IQFISH pharmDx (Dako Omnis), ниже имеется их краткое
описание. Для получения дополнительной информации обратитесь к инструкции по использованию каждого
устройства.
Дополнительные реагенты и приборы
Dako Omnis, код GI100
Промывочный буфер (20х) (Dako Omnis), код GC807
Cleahfy, код GC810
Смесительное устройство Dako Omnis, код GC116
Крышка iSH, код GC102
Очищающий раствор для гибридизации in situ, код GC207
Покровные стекла из стекла для закрепления ткани (24 мм х 50 мм)
Пожалуйста, обратитесь к руководству пользователя Dako Omnis Basic и Advanced касательно информации по
использованию дополнительных реагентов и устройств.
Оборудование и аксессуарь> для микроскопа
Фильтры для флуоресцентного микроскопа: Dapi и двойной фильтр FITC/техасский красный, или FITC и
Монофильтры техасского красного — подробнее см. в приложении 5. Использование фильтра DAPI при высоком
увеличении отрицательно влияет на интенсивность сигнала. Следует избегать длительного воздействия.
В качестве источника света следует использовать флуоресцентный микроскоп со 100-ваттной ртутной лампой.
Другие источники света с этими фильтрами не рекомендуются.
Папка для стекол микроскопа (картонный лоток на 20 стекол с откидной крышкой или аналогичный)
--- стр. 385 ---
Меры предосторожности — гастральный
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
14,
Для диагностики in vitro.
Для профессиональных пользователей.
HER2 IQFISH pharmDx (Dako Omnis) содержит гЮ-<25 %этиленкарбоната и г З -
<5%хлорида натрия. HER2 IQFISH pharmDx (Dako Omnis) имеет маркировку:
❖
n ре ду п режде н ие
Н319 Вызывает серьезное раздражение глаз.
Р280 Пользоваться средствами защиты глаз/лица.
Р264 После работы тщательно вымыть руки.
Р305 + Р351 + Р338 При попадании в глаза: осторожно промывать водой в течение нескольких
минут. Снять контактные линзы, если вы ими пользуетесь и если это легко
сделать. Продолжить промывание глаз.
Как правило, лицам, не достигшим 18-летнего возраста, запрещается работать с продуктом. Пользователи
должны тщательно ознакомиться с надлежащими рабочими процедурами, опасными свойствами продукта и
необходимыми инструкциями по безопасности. Для получения дополнительной информации обратитесь к
паспорту безопасности.
Образцы тканей до и после фиксации, а также со всеми материалами, подвергающимися их воздействию,
следует обращаться так, как если бы они были способны передавать инфекцию, и их необходимо
утилизировать надлежащим образом (14). Никогда не пипетируйте реагенты ртом и избегайте контакта кожи
и слизистых оболочек с реагентами и образцами. Если реагенты попали на чувствительные участки, промойте
их большим количеством воды.
Минимизируйте загрязнение реагента микробами, чтобы избежать ошибочных результатов.
Методы фиксации тканей и толщина образца, отличные от указанных, могут влиять на морфологию тканей
и (или) интенсивность сигнала.
Реагент оптимально разбавлен. Дальнейшее разведение может привести к потере производительности.
Носите соответствующие средства индивидуальной защиты, чтобы избежать попадания в глаза и контакта с
кожей. Пожалуйста, обратитесь к паспорту безопасности (ПБ) для получения дополнительной информации.
Неиспользованный раствор следует утилизировать в соответствии с местными, государственными и
федеральными правилами.
Из-за гетерогенной природы образцов рака желудка важно выполнить тщательное сканирование всего
образца, чтобы оценить распределение сигнала, прежде чем выбрать область для перечисления сигналов.
Не рекомендуется оценивать очень мелкие образцы (т. е. образцы должны иметь неповрежденную
морфологию и достаточное количество ядер для перечисления).
Если анализ HER2 FISH проводится на биоптате, то для обеспечения надежного определения статуса HER2
следует проанализировать несколько (7-8) оцениваемых биопсий из разных областей опухоли.
Для идентификации всех ядер тканей в биопсийном образце важно осмотреть окрашенное Н&Е стекло.
Амплификация гена HER2 и сверхэкспрессия белка HER2 не так хорошо коррелируют при раке желудка, как
при раке молочной железы; поэтому для определения статуса HER2 не следует использовать один метод.
Хранение — гастральный
Храните HER2 IQFISH pharmDx (Dako Omnis) при <-18 "С (рекомендуется от-18 "С до-25 *С) в темном помещении.
Постоянно держите размороженный флакон с реагентом в вертикальном положении. Замораживание и оттаивание
реагента до 10 раз не влияет на производительность. Не оставляйте компонент при комнатной температуре.
HER2 IQFISH pharmDx (Dako Omnis) и вспомогательные реагенты Пепсин ISH (Dako Omnis) и флуоресцентная среда
для закрепления ткани (Dako Omnis) могут подвергаться неблагоприятному воздействию при воздействии тепла.
Не оставляйте эти компоненты при комнатной температуре.
HER2 IQFISH pharmDx (Dako Omnis) и вспомогательная реагентная флуоресцентная среда для закрепления ткани
(Dako Omnis) могут подвергаться неблагоприятному воздействию при чрезмерном освещении. Не храните эти
компоненты и не проводите анализ при сильном освещении, например под прямыми солнечными лучами.
Храните вспомогательные реагенты Раствор для предварительной обработки ISH (20х) (Dako Omnis), раствор
этанола ISH, 96 % (Dako Omnis), жесткий промывочный буфер ISH (20х) (Dako Omnis) и флуоресцентную среду для
--- стр. 386 ---
закрепления ткани (Dako Omnis) в темном помещении при 2-8 °С. Храните пепсин ISH (Dako Omnis) при -18-8 “С.
Крышку флакона, включая откидную крышку, необходимо закрыть на всех реагентах во время хранения.
Разбавленные растворы (рабочий раствор строгого промывочного буфера ISH и рабочий раствор предварительной
обработки ISH) можно хранить при температуре 2-8 °С в течение 30 дней.
Не используйте реагенты после истечения срока годности, указанного на контейнере с реагентами. Во время
хранения колпачок, включая откидную верхнюю крышку, должен быть закрыт. Если реагенты хранятся в условиях,
отличных от указанных, пользователь должен проверить работоспособность реагентов (15).
Явные признаки, указывающие на нестабильность данного продукта, отсутствуют. Поэтому важно оценить здоровые
клетки в анализируемом участке ткани. Если наблюдается неожиданная необъяснимая картина флуоресценции и
есть подозрение на проблему с HER2 IQFISH pharmDx, пожалуйста, свяжитесь с технической службой Dako
Стабильность на борту прибора Dako Omnis
Рабочая стабильность HER2 1QFISH pharmDx (Dako Omnis) и вспомогательных реагентов: Раствор этанола ISH,
96 % (Dako Omnis) и пепсина ISH (Dako Omnis) составляет 80 часов. Рабочая стабильность разбавленного раствора
для лредварительной обработки ISH (Dako Omnis) и строгого промывочного буфера ISH (Dako Omnis) составляет 7
дней. Оставшаяся рабочая стабильность отслеживается лри помощи программного обеспечения Dako Omnis.
Использование просроченных реагентов приведет к появлению предупреждения от прибора Dako Omnis. Все
стекла, окрашенные просроченным реагентом, изменят состояние на «подозрительное», и журнал стекол на
рабочей станции покажет, что был использован просроченный реагент.
Подготовка образца — гастральный
Образцы аденокарциномы желудка или гастроэзофагеального перехода из биопсии, иссечения или резекции
должны быть обработаны для сохранения ткани для анализа FISH. Для всех образцов должны использоваться
стандартные методы обработки тканей для иммуногистохимического окрашивания (16). При тестировании
небольших биопсийных образцов необходимо установить морфологию интактной опухоли и наличие достаточного
количества ядер для подсчета. Если анализ HER2 FISH проводится на биоптате, то для обеспечения надежного
определения статуса HER2 следует проанализировать несколько (7-8) оцениваемых биопсий из разных областей
опухоли.
Погруженные в парафин срезы
Для использования пригодна ткань, хранящаяся в нейтральном эабуференном формалине и залитая в парафин.
Образцы должны быть разрезаны на блоки толщиной 3 или 4 мм и закреплены в течение 18-24 часов в нейтрально
буферном формалине. Биопсийные образцы фиксировались в течение 6-8 часов в испытании ToGA [для справки
об исследовании см. (28)]. Затем ткани обезвоживают в градуированном ряду этанола и ксилола с последующей
инфильтрацией расплавленным парафином, выдержанным при температуре не более 60 °С. Правильно
закрепленные и залитые ткани будут храниться неопределенно долго до секционирования и закреплении на
стеклах, если их хранить в прохладном месте (15-25 “С) (16-17). Другие фиксаторы не подходят.
Образцы тканей следует разрезать на срезы размером 3-6 мкм.
Стекла, необходимые для анализа амллификации гена HER2 и проверки наличия опухоли, должны быть
подготовлены одновременно. Рекомендуется как минимум два последовательных среза; один срез для
определения наличия опухоли, окрашенной гематоксилином и эозином (Н&Е stain), и один срез для анализа
амплификации гена HER2. Рекомендуется закреплять срезы тканей на предметные стекла микроскопа Dako FLEX
IHC, код К8020. Также подходят стекла Superfrost Plus (Thermo Fischer Scientific. J1800AMNZ). Убедитесь, что
используются стекла с не истекшим сроком годности. Образцы следует проанализировать в течение <6 месяцев
после секционирования при хранении при температуре 2-25 °С.
ПРИМЕЧАНИЕ. Образцы тканей следует помещать на стекло в пределах определенной области окрашивания
стекла. Пожалуйста, обратитесь к руководству пользователя Dako Omnis Basic для определения размеров области
окрашивания стекла.
--- стр. 387 ---
А.
ИНСТРУКЦИЯ по ПРИМЕНЕНИЮ — гастральный
Препарат реагента — гастральный
А.1 HER2IQFISH pharmDx (Dako Omnis)
Во флаконе HER2 IQFISH pharmDx (Dako Omnis) содержится металлический шарик с золотым покрытием, который
используется для смешивания. Перед загрузкой флакона в Dako Omnis разморозьте и тщательно перемешайте
реагент, поскольку он отделяется от фазы во время замораживания.
Используйте смесительное устройство Dako Omnis для смешивания зонда.
Следуйте приведенной ниже процедуре смешивания зонда на смесительном устройстве Dako Omnis и обратитесь
к руководству пользователя смесительного устройства для получения более подробной информации.
1. Достаньте из морозилки флакон HER2 IQFISH pharmDx (Dako Omnis).
2. Загрузите флакон в смесительное устройство Dako Omnis.
3. Подключите смесительное устройство и убедитесь, что индикатор состояния загорелся зеленым.
4. Выберите программу «Thaw + mix». Важно! Флаконы, хранящиеся при температуре ниже -25 "С, следует
разморозить (немного) перед загрузкой флакона в смесительное устройство Dako Omnis и использовать
программу Mix.
5. Извлеките флакон из смесительного устройства.
6. Откройте откидную верхнюю крышку, откиньте ее назад и установите в положение выреза (подробнее см. в
руководстве пользователя Dako Omnis Basic).
7. Немедленно загрузите флакон в модуль хранения реагентов на приборе Dako Omnis. Если во время
окрашивания используется функция непрерывной загрузки реагента, убедитесь, что время от смешивания до
аспирации флакона в Dako Omnis составляет не менее 10 минут.
Зонд HER2 IQFISH pharmDx (Dako Omnis) можно повторно разморозить и использовать до 10 раз.
Всегда смешивайте смесь зонда HER2 IQFISH pharmDx (Dako Omnis) непосредственно перед загрузкой на прибор.
Не трясти. Общая рабочая стабильность HER2 IQFISH pharmDx ISH (Dako Omnis) составляет 80 часов при хранении
в модуле хранения реагентов на Dako Omnis. Оставшаяся рабочая стабильность отслеживается при помощи
программного обеспечения Dako Omnis (см. выше). HER2 IQFISH PharmDx (Dako Omnis) после пребывания на борту
в Dako Omnis следует немедленно перевести на температуру <-18 " С (рекомендуется от-18 “ С до-25 “ С).
А.2 Раствор для предварительной обработки ISH (20х) (Dako Omnis)
Приготовьте рабочий раствор, разбавив раствор для предварительной обработки ISH (20^) (Dako Omnis) в
концентрации 1 ;20 следующим образом.
1. Наполните бутылку Dako Omnis объемом 3,5 л с маркировкой РТВ (синяя этикетка) деионизированной водой
до линии заполнения (3,325 л). Перед наполнением убедитесь, что бутылка находится на горизонтальной
поверхности.
2. Опорожните одну бутылку концентрата 175 мл раствора предварительной обработки ISH (20><) (Dako Omnis) в
объемную бутылку.
3. Перенесите отделяемую этикетку с емкости концентрата к бутылке. Закрепите крышку объемной бутылки и
аккуратно переверните бутылку 2-3 раза.
4. Используйте ручной сканер Dako Omnis для идентификации реагента (сканируйте съемную этикетку и
объемную бутылку).
5. Сразу же загрузите объемную бутылку на прибор Dako Omnis.
Разбавленный раствор можно использовать в течение 7 дней при хранении на борту Dako Omnis. Оставшаяся
рабочая стабильность отслеживается при помощи программного обеспечения Dako Omnis (см. выше).
Неиспользованный разбавленный раствор можно хранить при температуре 2-8 °С в течение одного месяца. После
хранения в холодильной камере убедитесь, что разбавленный раствор уравновешен, по крайней мере, до 18 °С
перед загрузкой в Dako Omnis.
ПРИМЕЧАНИЕ. Выбросить разбавленный раствор, если он мутный.
А.З Жесткий промывочный буфер ISH (20х) (Dako Omnis)
Приготовьте рабочий раствор, разбавив жесткий промывочный буфер ISH (20х) (Dako Omnis) в концентрации 1 ;20
следующим образом.
--- стр. 388 ---
1. Наполните бутылку Dako Omnis объемом 3,5 л с маркировкой РТВ (синяя этикетка) деионизированной водой
до линии заполнения (3,325 л). Перед наполнением убедитесь, что бутылка находится на горизонтальной
поверхности.
2. Вылейте 175 мл строгого промывочного буфера (20х) (Dako Omnis) из бутылки концентрата в бутылку.
3. Перенесите отделяемую этикетку с емкости концентрата к бутылке. Закрепите крышку объемной бутылки и
аккуратно переверните бутылку 2-3 раза.
4. Используйте ручной сканер штрих-кода Dako Omnis для идентификации реагента (сканируйте съемную
этикетку и объемную бутылку).
5. Сразу же загрузите объемную бутылку на прибор Dako Omnis.
Разбавленный раствор можно использовать в течение 7 дней при хранении на борту Dako Omnis. Оставшаяся
рабочая стабильность отслеживается при помощи программного обеспечения Dako Omnis (см. выше).
Неиспользованный разбавленный раствор можно хранить при температуре 2-8 в течение одного месяца. После
хранения в холодильной камере убедитесь, что разбавленный раствор уравновешен, по крайней мере, до 18 °С
перед загрузкой в Dako Omnis.
ПРИМЕЧАНИЕ. Выбросить разбавленный раствор, если он мутный.
А.4 Раствор этанола ISH, 96 % (Dako Omnis)
Раствор этанола ISH 96 % (Dako Omnis) является готовым к применению реагентом. Перед загрузкой на Dako Omnis
откройте откидную верхнюю крышку флакона, откиньте ее назад и нажмите на нее в вырезе.
Общая рабочая стабильность раствора этанола ISH 96 % (Dako Omnis) составляет 80 часов при хранении в модуле
хранения реагентов на Dako Omnis. Оставшаяся рабочая стабильность отслеживается при помощи программного
обеспечения Dako Omnis (см. выше). После завершения запуска раствор этанола ISH 96 % (Dako Omnis) можно
перевести на температуру хранения (2-8 °С) для сохранения рабочего времени стабильности.
А.5 Пепсин ISH (Dako Omnis)
Пепсин ISH (Dako Omnis) является готовым к применению реагентом. Перед загрузкой на Dako Omnis убедитесь,
что реагент оттаял. Откройте откидную верхнюю крышку флакона, откиньте ее назад и нажмите на нее в вырезе.
Общая рабочая стабильность пепсина ISH (Dako Omnis) составляет 80 часов при хранении в модуле хранения
реагентов на Dako Omnis. Оставшаяся рабочая стабильность отслеживается при помощи программного
обеспечения Dako Omnis (см. выше). После завершения запуска пепсин ISH (Dako Omnis) следует перевести на
температуру хранения (-18-8 °С) для сохранения рабочего времени стабильности.
А.6 Флуоресцентная среда для закрепления ткани (Dako Omnis)
Флуоресцентная среда для закрепления ткани (Dako Omnis) представляет собой готовую к использованию среду
для закрепления ткани, которая используется за бортом прибора Dako Omnis. Переведите флуоресцентную среду
для закрепления ткани на температуру хранения (2-8 °С) сразу после использования.
А.7 Дополнительные аксессуары
Кроме того, на борт Dako Omnis следует загрузить следующие аксессуары; Деионизированную воду, разбавленный
промывочный буфер 20х (Dako Omnis), код GC807, Clearify (Dako Omnis), код GC810, очищающий раствор ISH, код
GC207 и крышку ISH(Dako Omnis), код GC102, как указано в руководстве пользователя Dako Omnis.
В. Процедура окрашивания — гастральный
В.1 Примечания к процедуре
HER2 IQFISH PharmDx (Dako Omnis) — это гибридизационный зонд для автоматизированного анализа прямой
флуоресцентной гибридизации In situ (FISH) на приборе Dako Omnis, который вместе с дополнительными
реагентами GM300, GM301, GM302, GM303 и GM304 (GM304 вне прибора) предназначается для количественного
определения амплификации гена HER2. Перед использованием пользователь должен внимательно прочитать все
инструкции и ознакомиться со всеми компонентами и мерами предосторожности.
Автоматизированная процедура на Dako Omnis включает депарафинизацию срезов тканей, демаскировку антигена,
расщепление пепсина, гибридизацию и строгую промывку. Стекла выгружаются в сухую разгрузочную станцию. Все
шаги протокола предварительно запрограммированы в программном обеспечении Dako Omnis.
Пожалуйста, обратитесь к руководству пользователя Dako Omnis для получения инструкций по загрузке стекол,
крышки ISH, реагентов и т.д. Проверены три протокола HER2 IQFISH; HER2 IQFISH Пепсин Short, HER2 IQFISH
--- стр. 389 ---
Пепсин Medium и HER2 IQFISH Пепсин Long, которые отличаются только временем расщепления пепсина,
предварительно запрограммированы в программное обеспечение Dako Omnis и могут быть выбраны для каждого
из пяти стекол в стойке стекол. Это позволяет оптимизировать расщепление тканей, которое может зависеть от
преданалитических условий. Протокол HER2 IQFISH Пепсин Medium считается стандартным протоколом.
Различные протоколы окрашивания можно просмотреть на рабочей станции Dako Link Omnis.
Кроме того, пользователь может выбрать использование шаблона протокола IQFISH. Оптимальные условия могут
варьироваться в зависимости от типа образца и метода подготовки, и должны одобряться отдельной лабораторией.
В.2. Процедура предварительного окрашивания
1. Выберите протокол HER2 IQFISH, который будет применяться для каждого стекла из программного
обеспечения рабочей станции Dako Link Omnis в разделе протоколы IQFISH.
2. Распечатайте этикетки стекол и прикрепите их к стеклам из стекла.
3. Поместите стекла в стойку для стекол. Для получения более подробной информации обратитесь к руководству
пользователя Dako Omnis Basic. Стойка для стекол может вместить от одного до пяти стекол. Рекомендуется,
чтобы по крайней мере два стекла окрашивались в ходе окрашивания HER2 IQFISH.
4. Установите стойку для стекол на Dako Omnis.
5. Загрузите крышку ISH {одну крышку ISH на стойку для стекол) на Dako Omnis.
6. Убедитесь, что объемные бутылки с жидкостями находятся на борту и регистрируются прибором Dako Omnis.
Бутылки с жидкостью; Clearify (просветляющий агент), разбавленный раствор для предварительной обработки
ISH (Dako Omnis), разбавленный промывочный буфер ISH (Dako Omnis) и разбавленный промывочный буфер
(Dako Omnis).
7. Загрузите раствор этанола ISH 96 % (Dako Omnis) и пепсин ISH (Dako Omnis). свежесмешанный HER2 IQFISH
pharmDx (Dako Omnis) и очищающий раствор ISH в модуль хранения реагентов. Убедитесь, что все крышки
флаконов с откидным верхом открыты.
8. Следуйте инструкциям на сенсорном экране и нажмите «Готово», чтобы начать процедуру окрашивания.
В.З. Процедура (методика) окрашивания
Процедуру окрашивания HER2 IQFISH на приборе Dako Omnis (обобщена в таблице 11) можно контролировать на
рабочей станции Dako Link Omnis:
Таблица 11. Упрощенный обзор шагов протокола окрашивания HER2 IQFISH
Этап Реагент Время и температура
Депарафинизация Clearify (просветляющий агент) 10 минут, 38 " С
Демаскировка антигена Раствор для предварительной обработки
ISH (Dako Omnis)
15 минут, 97 "С
Промывка Раствор этанола ISH, 96 %
(Dako Omnis)
2x3 минуты, 32 "С
Расщепление* Пепсин ISH (Dako Omnis) 10 минут, 15 минут или
20 минут
Сушка 15 минут, 45 ®С
Денатурация 10 минут, 66 ®С
Г ибридизация HBR2 IQFISH pharmDx
(Dako Omnis)
75 минут, 45 ®С
Сильная промывка Жесткий промывочный буфер ISH
(Dako Omnis)
10 минут, 61 “С
Три проверенных времени расщепления пепсина можно выбрать с использованием протоколов HER2 IQFISH,
указанных выше.
Если требуется дальнейшее окрашивание ISH, перенесите все реагенты на рекомендуемую температуру хранения.
В.4. Процедура после окрашивания
--- стр. 390 ---
Разгрузите стекла и нанесите до 30 мкл флуоресцентной среды для закрепления ткани (Dako Omnis), содержащей
DAPI, на область стекла с антигеном. Участок ткани должен быть полностью покрыт флуоресцентной средой для
закрепления ткани (Dako Omnis). Нанесите покровное стекло.
ПРИМЕЧАНИЕ. Стекла можно прочесть через 15 минут или в течение 7 дней после закрепления. Однако при
воздействии на стекла света или высоких температур может произойти выцветание стекол. Чтобы свести к
минимуму выцветание, храните стекла в темном помещении при температуре от -18 до -8 °С.
Контроль качества — гастральный
1. Сигналы должны быть яркими, четкими и легко поддаваться оценке.
2. Здоровые клетки позволяют осуществлять внутренний контроль процесса окрашивания.
• Здоровые клетки должны иметь 1-2 четко видимых зеленых сигнала, указывающих на то, что зонд CEN-
17 ПНК успешно гибридизовался с центромерной областью хромосомы 17.
• Здоровые клетки также должны иметь 1-2 четко видимых красных сигнала, указывающих на то, что ДНК-
зонд HER2 успешно гибридизовался с геном (генами) H ER2.
• Из-за секционирования ткани некоторые здоровые клетки будут иметь меньше двух сигналов каждого
цвета, чем ожидалось.
• Неспособность обнаружить сигналы в здоровых клетках указывает на неудачу анализа, и результаты
должны считаться недействительными.
3. Ядерная морфология должна оставаться неповрежденной при оценке при помощи фильтра DAPI.
Многочисленные призрачные клетки и общая плохая ядерная морфология указывают на чрезмерное
расщепление образца, что приводит к потере или фрагментации сигналов. Такие образцы следует считать
недействительными.
4. Необходимо оценить как минимум 20 опухолевых клеток.
5. Различия в фиксации, обработке и внедрении тканей, полученные в лаборатории пользователя, могут
приводить к вариабельности результатов, что требует регулярной оценки внутреннего контроля.
--- стр. 391 ---
Интерпретация окрашивания — гастральный
Оцениваемая ткань
Найдите опухоль в контексте окрашенного Н&Е стекла и оцените ту же область на окрашенном FISH стекле (в
фильтре DAPI). Должны быть проанализированы только образцы от пациентов с аденокарциномой желудка или
желудочно-пищеводного перехода. В случаях с кишечной метаплазией и аденокарциномой в одном и том же
образце следует оценивать только компонент карциномы. Избегайте областей сильного воспаления, некроза и
областей с неоднозначными ядерными границами. Не включайте ядра, которые требуют субъективного суждения.
Не включайте ядра со слабой интенсивностью сигнала и неспецифическим или высоким фоном.
Начните с микроскопической оценки всего окрашенного FISH среза и области, назначенной на срез Н&Е,
соответственно. Перед перечислением окрашенного участка FISH обратите внимание на общее распределение
сигнала (гомогенное или гетерогенное) на листе перечисления сигналов. В случае гетерогенного распределения
обратите внимание, присутствует ли фокальная амплификация или одноклеточная амплификация (мозаика).
1) Однородное распределение сигнала
Если распределение сигналов однородно, перечислите количество центромеров хромосом (зеленые сигналы) и
количество генов HER2 (красные сигналы) соответственно из 20 клеток в 1-2 репрезентативные области опухоли.
2) Неоднородное распределение сигнала
Если распределение сигнала неоднородно, перечислите в общей сложности 20 клеток из выбранных областей, как
указано ниже.
A) При наличии фокального усиления следует выбирать участки с амплифицированными клетками.
B) Если присутствуют мозаичное распределение или амплифицированные, полисомальные и дисомальные
клетки, подсчитывайте в областях с амплифицированными клетками. В пределах этих областей должны быть
подсчитаны не только амплифицированные клетки, но и соседние неамплифицированные клетки в общей
сложности на 20 клеток.
Если возможно, не выбирайте перекрывающиеся области.
Игнорирование окрашивания бактериальной ДНК
Ряд специализированных клеток (тучные клетки и макрофаги), которые присутствуют вкралленно в ткани желудка,
демонстрируют высокий уровень окрашивания зондом HER2 из-за присутствия бактериальной ДНК. Это приводит к
образованию флуоресцентных клеток интенсивно красного цвета, которые четко отличаются от опухолевых клеток
с высокой амплификацией гена HER2.
Перечисление сигналов
После выбора области для оценки сигнала начните анализ в одном из 20 соседних выбранных ядер, а затем
подсчитайте клетку за клеткой, оставляя только те ядра, которые не соответствуют критериям качества. Найдите
опухоль в контексте окрашенного Н&Е стекла и оцените ту же область на окрашенном FISH стекле. Сканируйте все
окрашенное стекло, чтобы учесть возможную неоднородность. Выберите область с хорошим распределением ядер.
Начните анализ в верхнем левом квадранте выбранной области и, сканируя слева направо, подсчитайте количество
сигналов в пределах ядерной границы каждого оцениваемого ядра в соответствии с приведенными ниже
руководящими принципами (см. также приложение 5).
Сфокусируйтесь вверх и вниз, чтобы найти все сигналы в отдельном ядре.
Считайте два сигнала одинакового размера и разделенные расстоянием равного или меньшего диаметра
сигнала только одним сигналом Расстояние должно быть по меньшей мере равно диаметру одного сигнала
нормального размера, чтобы посчитать два отдельных сигнала. Если расстояние между двумя сигналами
меньше диаметра сигнала, то оно считается за одно.
В ядрах с высоким уровнем амплификации гена HER2, сигналы HER2 могут располагаться очень близко друг
к другу и образовывать кластер сигналов. В этих случаях количество сигналов HER2 не может быть
подсчитано, но должно быть оценено. Особое внимание следует уделять зеленым сигналам, так как скопления
красных сигналов HER2 могут закрывать зеленые сигналы, делая их невидимыми. В случае сомнений,
пожалуйста, проверьте зеленые сигналы с помощью специального фильтра FITC.
Не считайте ядра без сигналов или с сигналами только одного цвета. Оценивайте только ядра с одним или
несколькими сигналами FISH каждого цвета.
Руководство по подсчету сигналов
1 Не считать. Ядра перекрываются, видны не все участки ядер
--- стр. 392 ---
2
9
Два зеленых сигнала, не считайте ядра с сигналами только одного
цвета
3
W
Подсчитайте как 3 сигнала зеленого цвета и 12 сигналов красного
(кластерная оценка)
4
ш
Подсчитывайте как 1 зеленый и 1 красный сигнал. Два сигнала
одинакового размера, разделенные расстоянием, равным или меньшим
диаметра одного сигнала, считаются как один.
5
или
Не считайте (расщепленные или нерасщепленные ядра).
Отсутствуют сигналы в центре ядер (ядра в форме пончиков).
6
9
Подсчитывайте как 2 зеленых и 3 красных сигнала. Два сигнала
одинакового размера, разделенные расстоянием, равным или меньшим
диаметра одного сигнала, считаются как один.
7
Ф
Подсчитывайте как 1 зеленый и 5 красных сигналов.
8
Ф
Считайте как 3 зеленых (1 зеленый вне фокуса) и 3 красных сигнала
9
Ф
Кластер красных сигналов скрывает зеленые сигналы, проверьте
зеленые сигналы с помощью специального фильтра FITC или не
учитывайте их
Записывайте подсчеты в таблицу, приведенную в приложении 3 и 4.
Когда это возможно, подсчитайте 20 ядер на образец ткани из различных областей опухоли.
Вычислите отношение HER2/CEN-17, разделив общее количество красных сигналов HER2 на общее количество
зеленых сигналов CEN-17.
Образцы с соотношением HER2/CEN-17 выше или равным 2 следует считать амплифицированными генами HER2
(29).
Результаты в точке отсечения или вблизи нее (1,8-2,2) следует интерпретировать с осторожностью.
Если соотношение является пограничным (1,8-2,2), подсчитайте 40 различных ядер и вычислите соотношение для
40 ядер. Если перечисление продолжает быть пограничным, то результат второй оценки является допустимым. При
наличии возможности следует включить иммуногистохимическое окрашивание HER2 для лучшей ориентации во
время второго перечисления.
В случае сомнений следует повторно подсчитать стекло с образцом. В пограничных случаях необходима
консультация специалиста по лабораторной диагностике и лечащего врача.
--- стр. 393 ---
1. Только для автоматического использования на инструменте Dako Omnis.
2. Специализированная подготовка необходима для подготовки стекол и ткани, а также для интерпретации
окрашивания IQFISH. Интерпретация окрашивания HER2 IQFISH pharmDx (Dako Omnis) не должна
выполняться лицами с нарушением цветового зрения.
3. Результаты FISH зависят от обращения и обработки ткани до окрашивания. Неправильная фиксация,
промывка, сушка, нагревание, секционирование или загрязнение другими тканями или жидкостями могут
повлиять на гибридизацию зонда. Непоследовательные результаты могут быть вызваны различиями в методах
фиксации и встраивания или внутренними нарушениями в ткани.
4. Пользователь несет ответственность за проверку шаблона протокола IQFISH.
Эксплуатационные характеристики — гастральный
Эффективность гибридизации
Эффективность гибридизации HER2 IQFISH pharmOx была исследована с использованием 180 фиксированных
формалином, залитых в парафин срезов ткани, протестированных на трех исследуемых площадках. Все 180
участков ткани можно было перечислить в соответствии с руководящими принципами перечисления продуктов.
Эффективность гибридизации составила 100 % .
Соотношения HER2/CEN-17, рассчитанные и используемые в исследованиях эксплуатационных характеристик,
основаны на подсчете сигналов в 20 ядрах с использованием рекомендаций по подсчету, приведенных в разделе
«Интерпретация окрашивания» настоящей инструкции по применению.
Аналитическая чувствительность
Аналитическая чувствительность HER2 IQFISH pharmDx (Dako Omnis) была исследована с использованием 20
'различных образцов аденокарциномы рака желудка (10 образцов с амплифицированным статусом гена HER2 и 10
не амплифицированных образцов). Соотношение между количеством сигналов HER2 и сигналами CEN-17
рассчитывали на основе подсчета сигналов в 20 ядрах здоровых клеток внутри образца ткани. Соотношение
HER2/CEN-17 для 20 образцов ткани аденокарциномы рака желудка составляло от 0,94 до 1,19.
Аналитическая специфичность
ДНК-зонды HER2 в HER2 IQFISH PharmDx (Dako Omnis) были секвенированы по концам и картированы для
подтверждения общего охвата 218 кЬ, включая ген HER2.
ПНК-зонды CEN-17 в HER2 IQFISH pharmDx (Dako Omnis) были индивидуально и в комбинации протестированы для
подтверждения их специфической гибридизации с центромерной областью хромосомы 17.
Чтобы исключить перекрестную гибридизацию с хромосомами, отличными от хромосомы 17, были проведены
исследования метафаэных пластинок в соответствии со стандартными процедурами проверки качества Dako. Всего
275 метафаэных пластинок с различными сигналами были оценены для специфической гибридизации смесей
зондов ДНК HER2 и CEN-17 ПНК. Во всех 275 случаях гибридизация была специфичной для хромосомы 17. Ни в
одном из 275 случаев не наблюдалось перекрестной гибридизации с локусами на других хромосомах.
Специфичность зонда составила, таким образом, 100 % (275 из 275).
Чтобы измерить способность анализа IQFISH идентифицировать только антигенные вещества HER2 и CEN-17 без
вмешательства других веществ, исследования проводились на образцах тканей аденокарциномы желудка путем
исключения зондов HER2 и CEN-17 из гибридизационной смеси и только с использованием гибридизационного
буфера. В общей сложности 20 образцов были оценены на наличие сигналов, не связанных с зондовой смесью. Ни
в одном из 20 образцов не было обнаружено других хромосомных антигенов или интерференции с
близкородственными веществами.
Ограничения — гастральный
Исследования надежности
Надежность анализа HER2 IQFISH pharmDx (Dako Omnis) была проверена путем изменения концентрации зонда
ПНК, времени демаскировки антигена, времени инкубации пепсина, времени денатурации, времени гибридизации,
а также строгого времени и температуры промывки. Различные параметры были протестированы на трех различных
образцах ткани рака аденокарциномы желудка FFPE и двух образцах ткани FFPE из гастроэзофагеального
перехода (GEJ) (как амплифицированные, так и не амплифицированные образцы ткани были представлены в
каждой группе).
Все параметры были протестированы как ниже, так и выше стандартных настроек протокола, за исключением
концентрации зонда ПНК и строгой температуры промывки, при которой стандартная настройка протокола была
включена в настройку.
--- стр. 394 ---
Параметры теста были следующими.
Концентрация зонда ПНК: испытано на 100 % и +/-17 %.
Время демаскировки антигена; испытано при 13 мин 45 с и 16 мин 15 с.
Время инкубации пепсина: испытано при 14 мин 45 с и 16 мин 15 с.
Время денатурации; испытано при 9 мин 45 с и 10 мин 45 с.
Время гибридизации; испытано при 70 мин и 80 мин.
Время сильной промывки: испытано при 8 мин 45 с и 11 мин 15 с.
Температура сильной промывки; испытано при температуре 59 °С, 61 °С и 63 " С .
Три концентрации ПНК-зонда оценивались во фракционированном дизайне эксперимента (инструмент JMP, SAS),
который проводился с использованием 12 различных протоколов окрашивания, как указано в таблице 12.
Таблица 12. В исследовании прочности использовались двенадцать различных протоколов окрашивания
Параметр испытания
Протокол на
прочность №
Время
демаскировки
антигена
(мин)
Время
пепсина
(мин)
Время
денатурации
(мин)
Время
гибридизации
(мин)
Время
сильной
промывки
(мин)
Температура
сильной
промывки
(Х)
Конц.
ПНК
В
эондовой
смеси
1 16,25 16,25 9,75 80 8,75 59 83%
2 13,75 14,75 10,75 70 8,75 59 100%
3 16,25 14,75 9,75 70 8,75 63 100%
4 13,75 14,75 10,75 80 8,75 61 83%
5 13,75 14,75 9,75 80 11,25 59 117%
6 13,75 16,25 10,75 70 11,25 63 83%
7 13,75 16,25 10,75 70 11,25 63 100%
8 16,25 14,75 9,75 70 11,25 61 83%
9 13,75 16,25 9,75 70 8,75 61 117%
10 16,25 16,25 10,75 70 11,25 59 117%
11 16,25 16,25 10,75 80 11,25 61 100 %
12 16,25 14,75 10,75 80 8,75 63 117%
Все пять образцов тканей были окрашены по всем 12 протоколам.
Индикатором для исследования на прочность служили интенсивность сигнала и качество морфологии. Все
протоколы производили окрашивание во всех образцах тканей (всего 60) с сигналами, которые были яркими,
отчетливыми и легко поддавались оценке, что, таким образом, подходило для перечисления сигналов.
Кроме того, влияние толщины ткани на результаты анализа HER2 IQFISH pharmDx (Dako Omnis) было проверено
путем изменения толщины срезов образцов ткани рака желудка FFPE.
В общей сложности шесть последовательных срезов пяти образцов аденокарциномы желудка человека с различной
толщиной (2, 3, 4, 5, 6 и 7 мкм) были протестированы с помощью HER2 IQFISH pharmDx (Dako Omnis). Средний
коэффициент вариации соотношения HER2/CEN-17 составил 3,9 % (в диапазоне от 3,2 % до 5,0 %).
Воспроизводимость
Внутрилабораторная воспроизводимость изо дня в день и от партии к партии была протестирована с
использованием HER2 IQFISH pharmDx (Dako Omnis). Исследование было разработано как внутреннее, слепое,
рандомизированное исследование соотношения HER2/CEH-M с использованием срезов из восьми различных
фиксированных формалином, залитых в парафин образцов рака желудка и гастроэзофагеального перехода с
различными уровнями амплификации гена HER2. Восемь образцов были протестированы с HercepTest и
представлены два образца с HER2 IHC 0/1+, два образца с HER2 IHC 2+, два образца с HER2IHC 3+, и два образца
с заданным соотношением HER2/CEN-17 FISH между 1,5 и 2,5, полученным с помощью HER2 и IQFISH pharmDx
(код К5731). Каждый образец окрашивали тремя различными партиями HER2 IQFISH pharmDx (Dako Omnis) в
течение пяти дней подряд. Всего за все время исследования было обработано 240 окрашиваний тканей, так как
--- стр. 395 ---
каждая комбинация окрашивалась в дубликатах. Изменение соотношения между днями и партиями показано на
рис. 8. Данные анализировались с помощью преобразования Бокса-Кокса с помощью модели случайных эффектов
для получения однородности дисперсии данных. Общий коэффициент вариации был оценен в 6,5 %, и было
обнаружено, что вариации между днями и партиями внесли свой вклад в 0,7 % и 0,8 % соответственно.
12
N 10
гш 8
шX
6
VS 4
X 2
1 0
! i ! ! !
! I
i i
123-l5lJ345l23451234S12S4Si234512J45l2}45 День
67759 67761 б тт 69М2 69143 69157 69160 69165 Ткамь
Рис. 8. Соотношения HER2/CEN-17, полученные в рамках лабораторного исследования воспроизводимости HER2
IQFISH pharmDx (Dako Omnis), включая конечные точки воспроизводимости от партии к партии и изо дня в день.
Среднее значение для каждого образца ткани показано горизонтальной линией.
Кроме того, воспроизводимость HER2 IQFISH pharmDx (Dako Omnis) между днями и лабораториями была
проверена внешне в трех местах (одна лаборатория в США и две в Европе) в стратифицированном и слепом
исследовании на срезах тканей из 12 различных фиксированных формалином, залитых в парафин образцов
аденокарциномы желудка, включая гастроэзофагеальный лереход. Три образца были HER2 IHC 0/1+, три образца
были HER2 IHC 2+, три образца были HER2 IHC 3+, и три образца имели предварительно определенное отношение
HER2/CEN-17 FISH между 1.5 и 2.5, полученного при использовании HercepTest и HER2 IQFISH pharmDx (код
К5731), соответственно. Образцы окрашивались и анализировались в участвовавших в исследовании
лабораториях. Каждый образец окрашивался минимум семь раз в течение семи дней подряд и оценивался одним
наблюдателем в каждой лаборатории. 314 среза были окрашены и включены в статистический анализ. Данные
анализировались с помощью преобразования Бокса-Кокса и вычислялись компоненты дисперсии. Общий
коэффициент вариации, основанный на верхнем 95% доверительном пределе, составил 24%. Изменение
соотношения HER2/CEN-M между днями и лабораториями представлено на рис. 9.
10
J-
,1|^
• I • • • > *
t I
Состояни*
образца
|^ .и П Л И ф И 13(р 0в *Н Н Ы 1>
Неаиплифмцироинный
i’
I • • • I
•А« О1 ш Г > ] ^ VW ^ | ^1 - л-ч| д ч' 2«о; > 4 » ' W:?j 51 г С ' ^ — 1eel в > 1 Гч3 S 35 4
• Л ' Л ^ ^ ^. - * 1 .*1 ^ \ ' Л Х ^ ' Л9 -Л Г-! ф •»! ’ Л S•X Ф Ф Ф
Лаборатория 1 Лаборатория 2
• • • * •
2' STicaHb
Лаборатория 3 Лаборатория
J
Рис. 9. Диаграмма вариабельности соотношений HER2/CEN-17 в нетрансформированных единицах, полученная в
ходе исследования воспроизводимости HER2 IQFISH pharmDx (Dako Omnis) между днями и лабораториями на
образцах тканей рака желудка.
Анализ HER2 IQFISH pharmDx (Dako Omnis) был протестирован на воспроизводимость между наблюдателями в
рамках внутреннего исследования сравнения методов с использованием трех наблюдателей для независимой
оценки окрашенных образцов. Воспроизводимость проверялась на 139 различных образцах аденокарциномы
желудка с не амплифицированным или амплифицированным статусом гена HER2. Данные анализировались с
помощью преобразования Бокса-Кокса. Средний коэффициент вариации между наблюдателями составил 18%.
--- стр. 396 ---
Образцы аденокарциномы желудка состояли из 96,4% резекционных и 5,6% биопсийных образцов. 81,3%
образцов были получены из желудка и 18,7 % — из гастроэзофагеального перехода.
Повторяемость
Внутрилабораторная повторяемость HER2 IQFISH pharmDx (Dako Omnis) была протестирована с использованием
последовательных срезов восьми образцов аденокарциномы желудка человека с не амплифицированным или
амплифицированным статусом гена HER2. Ткани тестировались в двух экземплярах в течение пяти дней подряд с
тремя различными партиями в общей сложности 240 стекол (120 срезов двух экземплярах). Модель случайных
эффектов использовали для анализа данных, что привело к дисперсии, относящейся к дням и партиям (см. в
исследовании внутренней воспроизводимости выше). Остаточная дисперсия объясняет дисперсию между
репликами и, следовательно, повторяемость. Верхний 95% доверительный предел для коэффициента
повторяемости вариации составлял 7,1 %.
Исследование метода сравнения
Сравнение результатов HER2 IQFISH pharmDx (Dako Omnis) с HER2 IQFISH pharmPx (K5731)
Исследование включало 140 образцов рака желудка, состоящих из различных типов тканей аденокарциномы
желудка, то есть желудка или гастроэзофагеального перехода (GEJ), а также резекции или биопсии с однородным
или гетерогенным (фокальным или мозаичным) распределением сигналов, как показано в таблице 13,
Таблица 13. Распределение образцов по типу рака желудка (желудок или GEJ), категории распределения
сигнала (гомогенный или гетерогенный) и типу ткани (резекция или биопсия).
Тип рака желудка Количество
образцов
Распределение
сигнала
Количество
образцов
Тип ткани Количество
образцов
Желудок 113 Однородный 58 Резекция 134
Гастроэзофагеальный
переход (GEJ)
27 Гетерогенно
фокальный
61 Биопсия 6
Гетерогенно-
мозаичный
21
Всего 140 Всего 140 Всего 140
Образцы состояли из 76 H E R 2 -H e амплифицированных случаев и 64 НСД2-амплифицированных случаев с известной оценкой
HercepTest, как показано в таблице 14.
Таблица 14. Распределение образцов на основе оценки HercepTest и оценки HER2 FISH, полученных с
помощью набора HER2 FISH pharmDx (К5731)
Оценка окрашивания HercepTest 0 1 + 2+ 3+ Всего
п 39 14 45 42 140
Статус HER2 FISH
Амплифицированный 4 1 19 40 64
Неамплифицированный 35 13 26 2 76
Всего проверенных FISH-
образцов
39 14 45 42 140
Результаты кросстабуляции статуса HER2, полученные двумя анализами с расчетом общей согласованности
параметров (ОРА), положительной согласованности параметров (РРА) и отрицательной согласованности
параметров (NPA), представлены в таблице 15. Корреляция между соотношениями HER2/CEN-17 с использованием
двух анализов показана на рис. 10.
Таблица 15. Перекрестная табуляция статуса гена HER2 получена с использованием HER2 IQFISH pharmDx
(К5731) и HER2 IQFISH pharmDx (Dako Omnis)
Статус гена HER2 (К5731)
Всего
НеамплифицированныйАмплифицированный
Статус гена HER2
(Dako
Неамплифицированный 76 1 77
Амплифицированный 0 63 63
--- стр. 397 ---
Omnis)
Всего
OPA: 99,3 %
PPA: 98,4 %
NPA: 100 %
76 64 140
<£ U J
Ш P ^ я
I fa z 0.
Рис. 10. Корреляция между соотношениями HER2/CEN-17 от HER2 FISH pharmDx (Dako Omnis) и HER2 IQFISH
pharmDx (код K5731) на 140 образцах рака желудка (линейное соответствие: у = 0,06 + 0,97*х; = 0,97. Взвешено
с обратной дисперсией для линейного соответствия).
Установлено, что 95 % доверительный интервал для средней разницы между двумя методами окрашивания при
соотношении HER2/CEN-17 = 2 составляет [0,007; 0,022]. Это означает, что разница выше 2 % не ожидается.
Клинические данные
Клиническая эффективность и безопасность трастузумаба (Герцептин) была продемонстрирована в исследовании
В018255 (исследование ToGA «Открытое, рандомизированное, многоцентровое исследование III фазы
трастузумаба в комбинации с цисплатином и фторпиримидина (капецитабин или 5-фторурацил) (FC+H) в сравнении
с химиотерапией (FC) как монотерапии в качестве терапии первой линии у пациентов с HER2 положительным раком
желудка поздней стадии») (28). Исследование было разработано как открытое меченое рандомизированное
многоцентровое исследование III фазы у НЕР2-позитивных пациентов с аденокарциномой желудка или
гастроэзофагеального перехода поздней стадии. В В018256 исследовании позитивность HER2 определяется как
1НС-положительная (3+) при использовании HercepTest(Dako) и (или) FISH положительный (HER2/CEN-17 s 2,0)
при помощи набора HER2 FISH pharmDx (Dako). После включения в исследование пациенты были
рандомизированы для получения химиотерапии (5-FU или капецитабин и цисплатин) или химиотерапии плюс
трастузумаб.
Основным показателем эффективности исхода была общая выживаемость (OS). проанализированная с помощью
стратифицированного теста логарифмических рангов. Окончательный анализ OS, основанный на 351 смерти, был
статистически значимым (номинальный уровень значимости 0,0193). Обновленный анализ OS также проводился
через год после окончательного анализа. Медиана общей выживаемости 13,5 месяцев при проведении
химиотерапии Herceptin была значительно длиннее по сравнению с медианой общей выживаемости 11,0 месяцев
при проведении только химиотерапии. Результаты эффективности как окончательного, так и обновленного
анализов обобщены в таблице 16 и диаграмме 11.
Таблица 16. Общая выживаемость в популяции с назначенным лечением (ITT)
FC
N= 296 FC + Н Arm N=298
Окончательная общая выживаемость
--- стр. 398 ---
Отсутствие смертей {%) 184 (62,2%) 167 (56,0%)
Медиана 11,0 13,5
95 % ДИ (mos.) (9,4, 12,5) (11,7, 15,7)
Коэффициент опасности 0.73
95 % ДИ (0,60, 0,91)
р-значение*. двустороннее 0,0038*
Обновленная общая выживаемость
Отсутствие смертей (%) 227 (76,7 %) 221 (74,2%)
Медиана 11,7 13.1
95 % ДИ fmos.) (10,3,13,0) (11,9. 15,1)
Коэффициент опасности 0.80
95 % ДИ (0,67, 0.97)
сравнение с номинальным уровнем значимости 0,0193
10 2 0 3 0
Время выживаемости (в мес.)
4 0 5 0
Фторпиримидин + ЦИСПЛ8ТИН_____Фторпиримидин + цисплатин + трастузумаб
Рис. 11. Обновленная общая выживаемость пациентов с метастатическим раком желудка
Исследовательский анализ OS, основанный на тестировании амплификации генов (FISH) и сверхэкспрессии белков
(IHC), представлен в таблице 17.
Таблица 17. Исследовательские анализы по статусу HER2 с обновленными общими результатами
выживаемости
FC
N=296»
FC+H
N=298^
FISH+ 1IHC 0, 1+ подгруппа (N=133)
Отсутствие смертей / п (%) 57/71 (80,3 %) 56/62 (90,3 %)
Медиана продолжительности OS (mos.) 8,8 8,3
95 % ДИ (mos.) (6,4, 11,7) (6,2, 10,7)
Коэффициент опасности (95 % ДИ) 1,33 (0,92, 1,92)
FISH+ 1IHC2+ подгруппа (N=160)
Отсутствие смертей / п (%) 65/80 (81 %) 64/80 (80 %)
Медиана продолжительности OS (mos.) 10,8 12,3
95 % ДИ (mos.) (6,8, 12,8) (9,5, 15,7)
--- стр. 399 ---
Коэффициент опасности (95 % ДИ) 0,78 (0,55, 1,10)
FISH+ или FISH-/IHC3+*= подгруппа (N=294)
Отсутствие смертей / п (%)
Медиана продолжительности OS (mos.)
95 % ДИ (mos.)
104/143 (73%)
13,2
(11,5, 15,2)
96/151 (64%)
18,0
(15,5, 21,2)
Коэффициент опасности (95 % ДИ) 0,66 (0.5, 0,87)
Медиана выживаемости оценивалась по кривым Каплана-Мейера.
® Два пациента на FC arm, которые были FISH+, но с неизвестным статусом IHC, были исключены из анализа.
Из анализа были исключены пять пациентов, получавших Герцептин arm, которые были FISH+, но статус IHC
был неизвестен.
Включает 6 пациентов в группе химиотерапии, 10 пациентов в группе Герцептина с FISH-, IHC3+ и 8 пациентов
в группе химиотерапии, 8 пациентов в группе Герцептина с неизвестным статусом FISH, IHC3+.
--- стр. 400 ---
Устранение проблем — гастральный
Проблема Вероятная причина Предлагаемые действия
1. Нет сигнала или слабый
сигнал
1а. Реагенты подвергались
воздействию высоких температур
во время транспортировки или
хранения
1а. Проверьте условия хранения.
Убедитесь, что сухой лед
присутствовал при получении
смеси зонда IQISH и партий
пепсина. Убедитесь, что реагенты
хранились в соответствии с
инструкциями.
1Ь. Микроскоп не работает должным
образом
- Неподходящий набор
фильтров
-■ Неподходящая лампа
- Ртутная лампа слишком
старая
- Грязные и (или) треснувшие
коллекторные линзы
- Неподобающе иммерсионное
масло
1Ь. Проверьте микроскоп и убедитесь,
что используемые фильтры
подходят для использования с
зондом смешивания
флуорохромов, а также что
ртутная лампа исправна и не
использовалась сверх ожидаемого
срока службы (см. приложение 5).
В случае сомнений, пожалуйста,
свяжитесь со своим местным
поставщиком микроскопов.
1с. Блеклые сигналы 1с. Избегайте длительного
исследования под микроскопом и
сведите к минимуму воздействие
сильных источников света.
1d. Неправильно
буферы
определенныеId. Замените объемные буферы и
обеспечьте правильную
регистрацию (на рабочей станции)
и идентификацию (на сенсорном
экране) объемных буферов. Для
получения более подробной
информации обратитесь к
руководству пользователя Dako
Omnis Basic. Пожалуйста,
обратите внимание: Раствор
предварительной обработки ISH
имеет зеленый цвет, а жесткий
промывочный буфер ISH-желтый.
2. Зоны без сигнала 2. Во время закрепления
образовались пузырьки воздуха
2. Избегайте пузырьков воздуха.
Если вы их заметили, аккуратно
отодвиньте при помощи щипцов.
3. Чрезмерное фоновое
окрашивание
За. Неправильная фиксация тканей За Убедитесь, что используются
только фиксированные
формалином и залитые
парафином срезы тканей.
ЗЬ. Длительное воздействие сильного
света на участок гибридизации
ЗЬ. Избегайте длительного
исследования под микроскопом и
сведите к минимуму воздействие
сильного света.
4. Плохая
тканей
морфология4а. Неправильная
пепсином
обработка 4а. Перейдите к
различных
окрашивания,
пепсин 1SH
другому из трех
протоколов
Убедитесь, что
хранится при
правильной температуре.
4Ь. Слишком длительная обработка
пепсином или очень тонкая
толщина среза может привести к
появлению призрачных клеток или
клеток в виде пончика
4Ь. Попробуйте протокол
окрашивания с более коротким
временем инкубации пепсина.
Убедитесь, что
составляет 3-6 мкм.
толщина среза
--- стр. 401 ---
Проблема Вероятная причина Предлагаемые действия
5. Высокий уровень
зеленой автоматической
флуоресценции на
срезе, включая участки
без ткани FFPE
5. Использование просроченных или
не рекомендованных стеклянных
стекол
5. Выберите стеклянные стекла, как
указано. Убедитесь, что
используются стекла с не
истекшим сроком годности.
ПРИМЕЧАНИЕ. Если проблему нельзя отнести ни к одной из вышеперечисленных причин, или если предлагаемое
корректирующее действие не помогло устранить проблему, обратитесь в службу технической поддержки Dako для
получения дополнительной помощи.
Приложение 3. Желудок
HER2IQFISH pharmDx (Dako Omnis), код GM333
Схема подсчета
Дата запуска:
HER2 IQFISH pharmDx (Dako Omnis) Партия:
Характеристика распределения сигнала в ткани;
Однородный: О
Гетерогенно-фокальный: О или Гетерогенно-мозаичный:
Идентификатор журнала
окрашивания:
Идентификатор образца:
запуска
О
Подсчитайте сигналы в 20 ядрах
№
ядра
Подсчет
HER2
(красны
й)
Подсчет
CEN-17
(зеленый
цвет)
№ ядра
Подсчет
HER2
(красный
)
Подсчет
CEN-17
(зеленый
цвет)
1 11
2 12
3 13
4 14
5 15
6 16
7 17
8 18
9 19
10 20
Итого (1-
10) Итого (11-20)
Для определения отношения HER2/CEN-17 подсчитайте количество сигналов HER2 и количество сигналов CEN-17
в тех же 20 ядрах и разделите общее количество сигналов HER2 на общее количество сигналов CEN-17. Если
отношение HER2/CEN-17 является пограничным (1,8-2,2), подсчитайте 40 различных ядер и пересчитайте
соотношение для 40 ядер (см. схему пересчета, приложение 4).
Соотношение на границе отсечения или вблизи нее (1,8-2,2) следует толковать с осторожностью (см. руководство
по подсчету).
HER2 CEN-17 Соотношение HER2/CEN-17
Общий подсчет (1-20)
--- стр. 402 ---
о Коэффициент < 2: амплификация гена HER2 не наблюдалась
О Коэффициента 2 ; амплификация гена HER2 наблюдалась
Дата и подпись, техник:
Дата и подпись, специалист по лабораторной диагностике;
Рекомендации по подсчету см. в разделе «Интерпретация окрашивания».
--- стр. 403 ---
приложение 4. Желудок
HER2IQFISH pharmDx, код GM333
Схема пересчета
Дата запуска:
HER2 IQFISH pharmDx (Dako Omnis) Партия:
Идентификатор журнала запуска
окрашивания:
Идентификатор образца:
Сигналы в дополнительных 40 ядрах 1-40)
№
ядра
HER2
(красны
й)
CEN17
(зелены
й)
№
ядра
HER2
(красны
й)
CEN-17
(зелены
й)
№
ядра
HER2
(красны
й)
CEN-17
(зелены
й)
№
ядра
HER2
(красны
й)
CEN-17
(зелены
й)
1 11 21 31
2 12 22 32
3 13 23 33
4 14 24 34
5 15 25 35
6 16 26 36
7 17 27 37
8 18 28 38
9 19 29 39
10 20 30 40
Всег
о
Cl
io)
Итог
О
(11-
20)
Итог
о
(21-
30)
Итог
о
(SI-
40)
Для определения отношения HERZ^CE/V-t 7 подсчитайте количество сигналов HER2 и количество сигналов CEN-17
в тех же 40 ядрах и разделите общее количество сигналов HER2 на общее количество
сигналов CEN-17. Запишите общий подсчет от 1-40 ядер в таблице ниже.
HER2 CEN-17 Соотношение HER2/CEN-17
Общий подсчет (1-40)
□ Коэффициент < 2: амплификация гена HER2 не наблюдалась
□ К о э фф ициента 2 : амплификация гена HER2 наблюдалась
Дата и подпись, техник:
Дата и подпись, специалист по лабораторной диагностике;
Рекомендации по подсчету см. в разделе «Интерпретация окрашивания».
--- стр. 404 ---
Приложение 5. Желудок
HER2IQFISH pharmDx, код GM333
Технические характеристики флуоресцентного микроскопа
Dako рекомендует следующее оборудование для использования с HER2 IQFISH pharmDx, (Dako Omnis),
GM333:
1. Тип микроскопа
• Эпифлуоресцентный микроскоп
2. Лампа
• Ртутная лампа мощностью 100 Вт (вести учет времени горения)
3. Объективы
• Для скрининга ткани применяются погружаемые в масло16Х или 20Х объективы
• Для увеличения большой мощности и для перечисления сигналов рекомендуется использовать только
погружаемые в масло объективы, например 100Х
4. Фильтры
Фильтры индивидуально разработаны для конкретных флуорохромов и должны подбираться соответствующим
образом. Dako рекомендует использовать специальный фильтр DAPI в сочетании с высококачественным техасским
красным/двойным фильтром FITC.
• Фильтр DAPI
• Техасский красный/двойной фильтр FITC
• Техасский красный и одноступенчатые фильтры FITC можно использовать как для подтверждения, так и
для перечисления
Флуорохром Длина волны возбуждения Длина волны излучения
FITC 495 Нм 520 Нм
Т ехасский
красный 596 Нм 615 Нм
Фильтры специфичны для каждого типа микроскопа, и использование соответствующих фильтров имеет решающее
значение для интерпретации. Если вам нужна подробная информация, пожалуйста, свяжитесь с вашим
поставщиком микроскопов или представителем Dako.
5. Масло
• Нефлуоресцирующее масло
Меры предосторожности
• Не рекомендуется использовать 50-ваттную ртутную лампу
• Родаминовые фильтры использовать нельзя
• Тройные фильтры не рекомендуются
Неоптимизированный микроскоп может вызвать проблемы при считывании флуоресцентных сигналов, важно,
чтобы срок службы источника света не истек и чтобы он был правильно выровнен и сфокусирован. Клиенты должны
следить за рекомендациями производителя ртутной лампы и следовать им. Микроскоп следует осматривать, а
ртутную лампу выровнять до интерпретации результатов.
Необходимо лриложить усилия, чтобы подвергнуть образец воздействию как можно меньшего количества
возбуждающего света, чтобы свести к минимуму угасание флуоресценции.
Мы рекомендуем обсудить настройку конкретного микроскопа с производителем перед началом гибридизации
флуоресценции in situ или обратиться к литературным источникам.
--- стр. 405 ---
Ссылки на литературу
1. Куссенс Л., Янг-ФенгТ. Л., Лиао И. К., Чен Е., Грей А., Макграт Дж. исоавт. Рецептор тирозинкиназы с обширной
гомологией к рецептору EGF разделяет хромосомное расположение с онкогеном пей. Наука. 1985;230:1132-9.
2. Мулерис М., Алмейда А., Малфой Б., Дитрилло Б. Назначение v-erb-b2 гомолога 2 вирусного онкогена
эритробластного лейкоза птиц (ERBB2) полосе хромосомы человека 17q21.1 путем гибридизации in situ.
Cytogenet Cell Genet. 1997;76:34-5.
3. Каллиониеми О. П.. Каллиониеми А., Курису В., Тор А., Чен Л. С.. Смит X. С. и др. Амплификация ERBB2 при
раке молочной железы анализируется методом флуоресцентной гибридизации in situ. Ргос Natl Acad Sci USA.
1992:89:5321-5.
4. Кинг К. P., Краус М. X.. Ааронсон С. А. Амплификация нового гена, связанного с v-erbB, в карциноме молочной
железы человека. Наука. 1985;229:974-6.
5. Пирсоне Д. Л., Буй М. М., Ловери М. К., Марк X. Ф., Янг Дж. Ф,, Биркмейер Дж. М. и соавт. Флуоресцентная
гибридизация in situ (FISH) для обнаружения амплификации HER-2/neu при раке молочной железы:
многоцентровое исследование переносимости. Ann Clin Lab Sci. 2000;30:41-8.
6. Реннстам К., Балдеторп Б., Кытола С., Таннер М., Изола Дж. Хромосомные перестройки и амплификация
онкогенов предшествуют анеуплоидизации в генетической эволюции рака молочной железы. Cancer Res.
2001;61:1214-9,
7. Шваб М. Амплификация онкогена в солидных опухолях. Semin Cancer Biol. 1999;9:319-25.
8. Слэмон Д. Дж., Кларк Г. М., Вонг С. Г.. Левин В, Дж.. Ульрих А., Макгуайр В. Л. Рак молочной железы человека:
корреляция рецидива и выживаемости с амплификацией онкогена HER-2/neu. Наука. 1987;235:177-82.
9. Борг А., Тандон А. К., Сигурдссон X., Кларк Г. М., Ферно М., Фукуа С. А. и др. Амплификация HER-2/neu
предсказывает плохую выживаемость при раке молочной железы с метастазами в лимфатические узлы.
Cancer Res. 1990;50:4332-7.
10. Росс Дж.С., Слодковска Е. А.. Симманс В. Ф. и соавт. Рецептор HER-2 и рак молочной железы: десять лет
целенаправленной анти-НЕР-2 терапии и персонализированной медицины. Oncologist 2009;14: 320-368.
11. Николс Д. В., Вольф Д. Д., Селф С., Меткалф Дж. С., Джейкобс Д., Нойпер-Холл Р. и др. Разработанный
тестовый алгоритм определения НЕР2-статуса у больных раком молочной железы. Ann Clin Lab Sci. 2002;32:3-
11.
12. БилоусМ , ДоусеттМ., Ханна В., Изола Дж., Лебо А., Морено А. и др. Текущие перспективы тестирования HER2:
обзор национальных руководящих принципов тестирования. Mod Pathol. 2003;16:173-82.
13. Нильсен П. Е., Эгхольм М., редакторы. Пептидные нуклеиновые кислоты: Протоколы и применение. Норфолк
NR18 ОЕН, Англия: Horizon Scientific Press. 1999.
14. Институт клинических и лабораторных стандартов. Защита лабораторных работников от профессиональных
инфекций; утвержденное руководство— третье издание. Документ CLSI М29-АЗ. Институт клинических и
лабораторных стандартов, 940 Уэст Вэлли Роуд, офис 1400, Вейн, Пенсильвания 19087-1898 США, 2005.
15. Clinical Laboratory Improvement Amendments of 1988: Окончательное правило, FR 7163, 28 февраля. 1992.
16. Шихан Д. С. и Храпчак Б. Б. Теория и практика гистотехнологии. Сент-Луис: CV Mosby Company. 1980.
17. Кирнан Дж. А. Гистологические и гистохимические методы: теория и практика. Нью-Йорк: Pergamon Press. 1981.
18. Цуда X., Акияма Ф., Терасаки X., ХасегаваТ., Куросуми М., Шимадзу М. и др. Обнаружение амплификации ДНК
HER-2/neu (оегЬ В-2) при первичном раке молочной железы. Воспроизводимость между наблюдателями и
корреляция с иммуногистохимической сверхэкспрессией HER-2. Cancer. 2001;92:2965-74.
19. Эллис И. О., Доусетт М,, Бартлетт Дж., Уокер Р., КукТ., Гуллик В. и др. Рекомендации по тестированию HER2
в Великобритании. J Clin Pathol. 2000;53:890-2.
20. Ханна У. Тестирование на статус HER2. Oncology. 2001 ;61 Suppt 2:22-30.
21. Генестьер К., Шараф-Джоффрэ Е., Пено-Ллорка Ф., Генеикс Дж., Аделаиде Дж.. Шаффанэ М. и соавт.
Сравнительное измерение статуса ERBB2 различными методами при раке молочной железы. J Pathol.
2004;202(3):286-98.
22. Ольсен К. Е., Кнудсен X., Расмуссен Б. Б., Баслев Е., Кнооп А., Эйлертсен Б. и соавт. Амплификация HER2 и
ТОР2А и делеция генов ТОР2А при раке молочной железы исследовались новыми зондами FISH. Acta Oncol.
2004:59:795-805.
23. Йоргенсен Дж. Т. Целенаправленное лечение HER2 при раке желудка поздней стадии. Oncology. 2010;78:26-
33.
--- стр. 407 ---
D a k o
С€
Раствор для предварительной
обработки для in situ
гибридизации,
Концентрированный (20х), для
использования в Дако Омнис,
1 флакон на 175 мл (ISH Pre-
Treatment Solution (20х) (Dako
Omnis), Concentrate, 175 mL)
Д/1Я использования
в Дако Омнис
Код GU301
Назначение Для диагностики in vitro
Раствор для предварительной обработки для in situ гибридизации,
концентрированный (20х) для использования в Дако Омнис предназначен для
лабораторного использования в автоматизированных анализах гибридизации in situ
(ISH) на приборе Dako Omnis. Реагент представляет собой вспомогательное
средство, используемое для подготовки предметного стекла для доступа ISH-зонда
к ядрам на фиксированных в формалине, залитых в парафин (FFPE) срезах ткани в
процедурах качественного или количественного ISH.
Сводный обзор
и пояснение
См. общие инструкции по гибридизации in situ: Принцип процедуры, необходимые,
но не поставляемые материалы, хранение, подготовка образцов, процедура
окрашивания, контроль качества, оценка результата окрашивания,
интерферирующие вещества, общие ограничения, устранение неполадок.
Размещена по адресу agilent.com/library/eifu
Реагент, входящий в
комплект поставки
Необходимые
материалы, не
входящие в состав
поставки
Меры
предосторожности
2-Морфолиноэтансульфоновая кислота (MES) забуференный солевой раствор.
Буфер содержит консервант (азид натрия) и инертный зеленый цвет для легкой
идентификации и удобства пользователя. Флакон содержит 175 мл реагента, 20-
кратной концентрации. Объем рассчитан на разведение в одном бутыле для Dako
Omnis
См. общие инструкции по гибридизации in situ
37. Для диагностики in vitro.
38. Для профессиональных пользователей.
39. Только для рецептурного использования (Rx Only).
40. Не используйте, если имеются какие-либо признаки повреждения упаковки,
флакона или штрих-кода на флаконе.
41. Данный продукт содержит азид натрия (NaN3), химическое вещество, очень
токсичное в чистом виде. Хотя его концентрация в реагенте не классифицируются как
опасная, азид натрия может реагировать со свинцом и медью, образуя взрывоопасные
скопления азидов металлов. При утилизации промыть большим количеством воды,
чтобы предотвратить накопление азида металла в водопроводе.
42. Надевайте соответствующие средства индивидуальной защиты, чтобы избежать
контакта с глазами и кожей.
43. Неиспользованный раствор следует утилизировать в соответствии со всеми
местными, региональными, национальными и международными нормами.
44. Свяжитесь со службой поддержки патологов Agilent по адресу www.agilent.com,
чтобы сообщить о необычном результате окрашивания. О любом серьезном
инциденте, произошедшем в связи с изделием, необходимо сообщить производителю
и компетентному органу страны, в которой находится пользователь и/или пациент.
--- стр. 408 ---
45. Маркировка раствора для предварительной обработки для in situ гибридизации,
концентрированного (20х)
Предупреждение
Содержит: реакционную массу: 5-хлор-2-метил-4-изотиазолин-3-он [ЕС № 247-500-7]
и 2-метил-2Н-изотиазол-3-он [ЕС № 220-239-6] (3:1)
Н315 Ьызывает раздражение кожи.
Может вызвать аллергическую реакцию кожи.
Вызывает серьезное раздражение глаз.
I окончен для водной флоры и фауны с длительным
Йействием.
адевайте защитные перчатки. Носите средства защиты глаз или лица.
Избегайте попадания в окружающую среду.
Избегайте вдыхания паров.
I щательно мойте руки после работы.
Запзязненную рабочую одежду нельзя выносить за пределы рабочего места.
Соберите пролитую жидкость
11НИ IIOI1АДАМИИ НА КОЖУ: вымойте большим количеством
воды с мылом. Постирайте загрязненную одежду перед повторным использованием.
fipH появлении раздражения кожи или сыпи: Обратитесь за медицинской помощью.
ПРИ ПОПАДАНИИ В ГЛАЗА: Осторожно промойте водой в
течение нескольких минут. Снимите контактные линзы, если
они есть и это легко сделать. Продолжайте промывать.
Если раздражение глаз сохраняется: Обратитесь за медицинской помощью.
Утилизируйте содержимое и контейнер в соответствии со
всеми местными, региональными, национальными и
международными нормами.
46. Паспорт безопасности доступен на сайте www.agilent.com или по запросу
47. Как правило, лица моложе 18 лет не допускаются к работе с данным продуктом.
Пользователи должны быть тщательно проинструктированы о надлежащей процедуре
работы, опасных свойствах продукта и необходимых инструкциях по технике
безопасности. Дополнительную информацию см. в паспорте безопасности (SDS).
Н319
Н411
Р2Й0
Н273
Н261
К264
Р272'
Н391
K3U2 + Р352 + К363
РЗЗЗ + Р313
Р305 + Р351 + Р338
Р337 + Р313
Р501
Хранение
Подготовка реагента
Храните при температуре 2-8 °С, когда не используете реагент в приборе Dako
Omnis. Во время хранения крышка должна быть закрыта. Не использовать после
истечения срока годности, указанного на флаконе. Неиспользованный рабочий
раствор можно хранить при температуре 2-8 "С в течение одного месяца.
Утилизируйте раствор, если он стал мутным. После разбавленния раствор можно
использовать в течение 7 дней при хранении на борту Dako Omnis. Остаток срока
годности отслеживается с помощью программного обеспечения Dako Omnis.
Использование просроченных реагентов приведет к появлению предупреждения на
приборе Dako Omnis, все слайды, окрашенные просроченным реагентом, изменят
состояние на "подозрительное", а журнал слайдов на рабочей станции покажет, что
был использован просроченный реагент. Если реагенты хранятся в условиях,
отличных от указанных, пользователь должен проверить работоспособность
реагента. Нет никаких очевидных признаков, указывающих на нестабильность
данного продукта. Поэтому позитивные и негативные контрольные стекла должны
окрашиваться одновременно с образцами пациентов. Если наблюдается
неожиданное окрашивание, которое нельзя объяснить различиями в лабораторных
процедурах, и есть подозрение на проблему с реагентом, обратитесь в службу
поддержки патологов компании Agilent.
Приготовьте рабочий раствор, разбавив концентрат Раствора для предварительной
обработки для in situ гибридизации 1:20 следующим образом:
1. Заполните бутыль Dako Omnis объемом 3,5 л с маркировкой РТВ (синяя этикетка)
до линии заполнения деионизированной водой (3,325 л). Перед наполнением
убедитесь, что бутыль установлена на горизонтальной поверхности.
2. Перелейте один флакон концентрата 175 мл Раствора для предварительной
обработки для in situ гибридизации в бутыль.
3. Перенесите съемную этикетку с бутылки с концентратом на бутыль с раствором.
Закройте крышку и осторожно переверните бутыль 2-3 раза.
4. Используйте ручной сканер штрих-кода Dako Omnis для идентификации реагента
(сканируйте съемную этикетку и бутыль).
5. Сразу загрузите бутыль в прибор Dako Omnis.
Примечание: После хранения рабочего раствора на холоде (2-8 “С) убедитесь, что он
его температура поднялась до 18 ®С перед загрузкой в Dako Omnis.
--- стр. 409 ---
процедура Обратитесь к руководству пользователя Dako Omnis для получения инструкций по
загрузке и регистрации реагента в системе Dako Omnis.
См. инструкции по применению отдельных зондов для гибридизации на Dako Omnis
для получения дальнейших инструкции по использованию Раствора для
предварительной обработки для in situ гибридизации, концентрированного (20х)
(Dako Omnis) в анализе гибридизации in situ, включая оценку окрашивания на Dako
Omnis.
Описание символов
м и Каталожный номер Температура хранения Изделие для диагностики in vitro
Производитель i *-^-1 Номер партии Содержит достаточный объем для
проведения <п> анализов
Дата истечения срока
годности
См. инструкции по
применению
1 3 Официальный представитель
в Европейском сообществе
< !> < ^
А Опасно
UPI
Уникальный
идентификацио
нный номер
изделия
Пиктограмма
СГС(см. раздел
"Меры
предосторожности")
A gilent Technologies Singapore (International) Pte Ltd. No. 1 Yishun Avenue 7
Singapore. 768923
I'el. +44 161 492 7050
www.agilent.com
--- стр. 410 ---
D a к о С €
Пепсин для in situ гибридизации, Готовый к применению, для использования в Дако Омнис, 20 тестов, 1
флакон на 7 мл (ISH Pepsin (Dako Omnis), Ready-to-u$e, 20 tests, 7 mL)
(Dako Omnis)
Код GM302
РУССКИЙ
Предполагаемое
использование
Для диагностики in vitro.
Пепсин ISH (Dako Omnis) предназначен для использования в автоматизированных анализах
гибридизации in situ совместно с прибором Dako Omnis на фиксированных формалином и
залитых парафином (FFPE) срезах тканей.
Представленный
реагент
Пепсин iSH (Dako Omnis) поставляется готовым к применению раствором. Во флаконе
содержится 7 мл реагента, достаточного для 20 стекол iSH на приборе Dako Omnis. Продукт
содержит пепсин А, консервант, детергент и небольшое количество органического
растворителя.
Меры
предосторожности 2
3.
4.
5.
6.
1. Для профессиональных пользователей.
Не использовать при наличии каких-либо доказательств повреждения упаковки, флакона
или штрих-кода на флаконе.
Носите соответствующие средства индивидуальной защиты, чтобы избежать попадания в
глаза и контакта с кожей.
Неиспользованный раствор следует утилизировать в соответствии с местными,
государственными и/или федеральными правилами.
Содержит пепсин А. Может вызвать аллергическую реакцию.
ISH пепсин содержит &5- <10% пропан-2-ола, г0,1- <0,3%
пепсинаАи >0,011- <0,1% 5-хлор-2-метил-4-изотиазолин-3-
она и 2-метил -2Н-изотиазол-3-она. Пепсин ISH Pepsin
имеет маркировку:
Опасность
Н314
Н317
Р280
Р304+ Р340+ РЗЮ
Р301 +Р310 + Р331
РЗОЗ + Р361 + Р353
РЗЮ
Р305 + Р310
Р405
Р501
Вызывает серьезные ожоги кожи и повреждения глаз.
Может вызывать аллергическую кожную реакцию.
Пользоваться защитными перчатками. Пользоваться средствами
защиты глаз/лица. Пользоваться защитной одеждой.
ПРИ ВДЫХАНИИ: Выведите человека на свежий воздух и обеспечьте
комфортное дыхание. Немедленно обратитесь в токсикологический
центр или к врачу.
ПРИ nPOrriATbiBAHHH: Немедленно обратитесь в токсикологический
центр или к врачу. Не вызывайте рвоту.
+ ПРИ ПОПАДАНИИ НА КОЖУ (ИЛИ ВОЛОСЫ): Немедленно снять всю
загрязненную одежду. Промыть кожу водой или принять душ.
Немедленно обратитесь в токсикологический центр или к врачу.
При попадании в глаза: Немедленно обратитесь в токсикологический
центр или к врачу.
Хранить в закрытом помещении.
Утилизируйте содержимое и упаковку в соответствии с местными,
региональными, национальными и международными нормами.
Хранение Неоткрытые флаконы хранить при температуре от -18 до 8 С. Не использовать после
истечения срока годности, указанного на флаконе. Реагент поставляется на сухом льду. Для
гарантии того, что реагент не подвергался воздействию высоких температур во время
транспортировки, при получении должен присутствовать сухой лед. Раствор можно
--- стр. 411 ---
использовать в течение 80 часов при хранении на борту Dako Omnis. Оставшаяся рабочая
стабильность отслеживается при помощи программного обеспечения Dako Omnis.
Использование просроченных реагентов приведет к появлению предупреждения от прибора
Dako Omnis. Все стекла, окрашенные просроченным реагентом, изменят состояние на
"подозрительное", и журнал стекол на рабочей станции покажет, что был использован
просроченный реагент. Если реагенты хранятся при каких-либо условиях, отличных от
указанных, пользователь должен проконтролировать производительность реагента. Если
наблюдается неожиданное окрашивание, которое нельзя объяснить изменениями в
лабораторных методиках, и есть вопросы по качеству реагента, свяжитесь с технической
поддержкой компании "Дако".
Подготовка Пепсин ISH (Dako Omnis) поставляется в готовом к использованию флаконе для инструмента
реагента Dako Omnis. ПРИМЕЧАНИЕ: Перед загрузкой в Dako Omnis убедитесь, что реагент
разморожен.
Методика Инструкции по загрузке и регистрации реагента в системе Dako Omnis приведены в
(процедура) руководстве пользователя Dako Omnis. См. инструкции по использованию индивидуального
зонда гибридизации Dako Omnis для получения дальнейших инструкций по использованию
пепсина ISH (Dako Omnis) в анализе ISH, включая интерпретацию окрашивания на Dako Omnis.
Объяснение символов
REF Каталожный номер уб*С Ограничение
•18*С4 температур Производитель
IVD Медицинское изделие
для диагностики in vitro I LOT I Код серии
Пиктограмма опасности
GHS
(см. раздел «Меры
предосторожности»)
Обратитесь к
□В инструкции по
применению
Срок годности
Пиктограмма опасности
GHS
(см. раздел «Меры
предосторожности»)
--- стр. 412 ---
D a k o
Жесткий промывочный буфер
для in situ гибридизации,
Концентрированный (20х), для
использования в Дако Омнис,
1 флакон на 175 мл (ISH
Stringent Wash Buffer (20х)
(Dako Omnis), Concentrate, 175
mL) для использования
в Дако Омнис
Код GM303
Назначение Для диагностики in vitro
Жесткий промывочный буфер для in situ гибридизации,
концентрированный (20х), для использования в Дако
Омнис предназначен для лабораторного использования в
автоматизированных анализах гибридизации in situ (ISH)
на приборе Dako Omnis на фиксированных в формалине,
залитых в парафин (FFPE) срезах тканей. Реагент
является вспомогательным средством, используемым
для удаления несвязанных и неспецифически связанных
зондов FISH в процедурах качественного или
количественного ISH.
С€
Сводный обзор
и пояснение
См. общие инструкции по гибридизации in situ; Принцип процедуры, необходимые,
но не поставляемые материалы, хранение, подготовка образцов, процедура
окрашивания, контроль качества, оценка результата окрашивания,
интерферирующие вещества, общие ограничения, устранение неполадок.
Размещена по адресу agilent.com/library/ei^j
Реагент, входящий в
комплект поставки
Необходимые
материалы, не
входящие в состав
поставки
Меры
предосторожности
Физраствор цитрата натрия. pH 7.0, содержит моющее средство, консервант (азид натрия) и
инертный желтый цвет для легкой идентификации и удобства пользователя. Флакон
содержит 175 мл реагента, 20-кратной концентрации. Объем рассчитан на разведение в
одном бутыле для Dako Omnis.
См. общие инструкции по гибридизации in situ
48. Для диагностики in vitro.
49. Для профессиональных пользователей.
50. Только для рецептурного использования (Rx Only).
51. Не используйте, если имеются какие-либо признаки повреждения упаковки,
флакона или штрих-кода на флаконе.
52. Данный продукт содержит азид натрия (NaN3), химическое вещество, очень
токсичное в чистом виде. Хотя его концентрация в реагенте не классифицируются как
опасная, азид натрия может реагировать со свинцом и медью, образуя взрывоопасные
скопления азидов металлов. При утилизации промыть большим количеством воды,
чтобы предотвратить накопление азида металла в водопроводе.
53. Надевайте соответствующие средства индивидуальной защиты, чтобы избежать
контакта с глазами и кожей.
54. Неиспользованный раствор следует утилизировать в соответствии со всеми
местными, региональными, национальными и международными нормами.
55. Свяжитесь со службой поддержки патологов Agilent по адресу www.agilent.com,
чтобы сообщить о необычном результате окрашивания. О любом серьезном
инциденте, произошедшем в связи с изделием, необходимо сообщить производителю
--- стр. 413 ---
и компетентному органу страны, в которой находится пользователь и/или пациент.
56. Маркировка жесткого промывочного буфера для in situ гибридизации,
концентрированного (20х)
Предупреждение
Содержит: реакционную массу: 5-хлор-2-метил-4-изотиазолин-3-он [ЕС N^ 247-500-7]
и 2-метил-2Н-изотиазол-3-он [ЕС № 220-239-6] (3:1)
Н315 Вызывает раздражение кожи.
Может вызвать аллергическую реакцию кожи.
Вызывает серьезное раздражение глаз.
Токсичен для водной флоры и фауны с длительным действием.
Надевайте защитные перчатки. Носите средства зашиты глаз или
лица.
Избегайте попадания в окружающую среду.
Избегайте вдыхания паров.
Тщательно мойте руки после работы.
Загоязненную рабочую одежду нельзя выносить за пределы
рабочего места.
Соберите пролитую жидкость
11РИ 11011АДАНИИ Н А К О Ж У : Вымойте большим количесгвом
воды с мылом. Постирайте загрязненную одежду перед повторным
использованием.
11ри появлении раздражения кожи или сыпи: Обратитесь за
медицинской помощью.
ПРИ П О П А Д А Н И И В ГЛА ЗА : Осторожно промойте водой в
течение нескольких минут. Снимите контактные линзы, если они
есть и это легко сделать. Продолжайте промывать.
Вели раздражение глаз сохраняется: Обратитесь за медицинской
помощью.
Утилизируйте содержимое и контейнер в соответствии со всеми
местными, региональными, национальными и международными
нормами.
57. Паспорт безопасности доступен на сайте www.agilent.com или по запросу
58. Как правило, лица моложе 18 лет не допускаются к работе с данным продуктом.
Пользователи должны быть тщательно проинструктированы о надлежащей процедуре
работы, опасных свойствах продукта и необходимых инструкциях по технике
безопасности. Дополнительную информацию см. в паспорте безопасности (SDS).
Н319
H 4U
F280
Р273
P26I
Р264
Р272*
Р391
Р302 + Р352 + Р363
РЗЗЗ + Р313
Р305 + Р351 +Р338
P337-I-P313
Р501
Хранение
Подготовка реагента
Храните при температуре 2-8 ®С, когда не используете реагент в приборе Dako Omnis. Во
время хранения крышка должна быть закрыта. Ие использовать после истечения срока
годности, указанного на флаконе. Неиспользованный рабочий раствор можно хранить при
температуре 2-8 °С в течение одного месяца. Утилизируйте раствор, если он стал мутным.
После разбавленния раствор можно использовать в течение 7 дней при хранении на борту
Dako Omnis. Остаток срока годности отслеживается с помощью программного обеспечения
Dako Omnis. Использование просроченных реагентов приведет к появлению
предупреждения на приборе Dako Omnis. все слайды, окрашенные просроченным реагенто.м,
изменят состояние на "подозрительное", а журнал слайдов на рабочей станции покажет, что
был использован просроченный реагент. Если реагенты хранятся в условиях, отличных от
указанных, пользователь должен проверить работоспособность реагента. Нет никаких
очевидных признаков, указывающих на нестабильность данного продукта. Поэтому
позитивные и негативные контрольные стекла должны окрашиваться одновременно с
образца.ми пациентов. Если наблюдается неожиданное окрашивание, которое нельзя
объяснить различия.ми в лабораторных процедурах, и есть подозрение на проблему с
реагентом, обратитесь в службу поддержки патологов компании Agilent.
Приготовьте рабочий раствор, разбавив концентрат Ж есткого промывочного буфера для in
situ гибридизации 1:20 следующим образом:
1. Заполните бутыль Dako Omnis объемом 3,5 л с м ^ки р о вко й РТВ (синяя этикетка) до
линии заполнения деионизированной водой (3,325 л). Перед наполнением убедитесь,
что бутыль установлена на горизонтальной поверхности.
2. Перелейте один флакон концентрата 175 мл Ж есткого промывочного буфера для in situ
гибридизации в бутыль.
3. Перенесите съемную этикетку с бутылки с концентратом на бутыль с раствором.
Закройте крышку и осторожно переверните бутыль 2-3 раза.
4. Используйте ручной сканер штрих-кода Dako Omnis для идентификации реагента
(сканируйте съемную этикетку и бутыль).
5. Сразу загрузите бутыль в прибор Dako Omnis.
Примечание: После хранения рабочего раствора на холоде (2-8 ®С) убедитесь, что он его
температура поднялась до 18 ®С перед загрузкой в Dako Omnis.
--- стр. 414 ---
процедура Обратитесь к руководству пользователя Dako Omnis для получения инструкций по загрузке
и регистрации реагента в системе Dako Omnis.
См. инструкции по при.менению отдельных зондов для гибридизации на Dako Omnis для
получения дальнейших инструкций по использованию Ж есткого промывочного буфера для
in situ гибридизации, концентрированного (20х), для использования в Дако Омнис в анализе
гибридизации in situ, включая оценку окрашивания на Dako Omnis.
Описание символов
1 1 Каталожный номер
У
^ Температура хранения 1 1 Изделие для диагностики in vitro
in i Производитель 1 i Номер партии \ / Содержит достаточный объем
для проведения <п> анализов
2 Дата истечения срока
годности
СЙ См. инструкции по
применению
1 1 1 Официальный
представитель в
Европейском сообществе
/К Опасно
1 ии 1
Уникальный
идентификацио
нный номер
изделия
Пиктограмма
СГС(см. раздел
"Меры
предосторожнос
ти")
Agilent Technologies Singapore (International) Pte Ltd. No. 1 Yishun Avenue 7
Singapore. 768923
T e l.+44 161 492 7050
www.agilent.com
--- стр. 416 ---
h'г - ■
m
Обратитесь к инструкции
no применению I LOT I Код серии
--- стр. 417 ---
6 > Da ко С€
Чистящий раствор для in situ гибридизации, для использования в Дако Омнис, Готовый к
применению, 100 тестов, 10 мл (ISH Cleaning Solution (Dako Omnis), Ready-to-use, 100 tests, 10
mL)
(Dako Omnis)
РУССКИМ
Код GC207
Предполагаемое
использование
Для диагностики in vitro.
Очищающий раствор ISH (Dako Omnis) используется в качестве вспомогательного приспособления к
прибору Dako Omnis. Очищающий раствор ISH используется для очистки наконечника пипетки между
дозировками зонда гибридизации in situ (ISH).
Резюме и объяснение Очищающий раствор ISH (Dako Omnis) представляет собой реагент, который используется для
удаления зонда ISH с различных поверхностей. Промывка реагентом растворяет зонды ISH, позволяя
оставшемуся зонду эффективно смываться водой. Реагент имеет решающее значение для
обеспечения правильной очистки наконечника пипетки между каждой аспирацией зонда на Dako
Omnis.
Представленный реагент Очищающий раствор ISH поставляется в виде готового к использованию раствора во флаконе Dako
Omnis. Флакон содержит 10 мл реагента, достаточного для 100 ISH стекол.
Меры предосторожности 1. Для профессиональных пользователей.
2. Очищающий раствор ISH (Dako Omnis) содержит 30*60% Ы-метил-2-пирролидона и имеет
маркировку:
Ф Ф
Опасность
Н319
Н315
Н360
Н335
Р201
Р202
Р281
Р280
Р271
Р261
Вызывает серьезное раздражение глаз.
Вызывает раздражение кожи.
Может нанести вред детородной функции или нерожденному ребенку.
Может вызвать раздражение дыхательных путей.
Перед использованием получить специальные инструкции.
Не приступать к работе до тех пор. пока не прочитана и не понята информация о
мерах предосторожности.
При необходимости используйте средства индивидуальной защиты.
Пользоваться защитными перчатками. Пользоваться средствами защиты
глаз/лица. Пользоваться защитной одеждой.
Использовать только на открытом воздухе или в хорошо проветриваемом
помещении.
Избегайте вдыхания паров.
--- стр. 418 ---
Р264
Р308 +
Р304 +
Р312
Р302
Р362-2
Р332 +
Р305 +
Р337 +
Р405
Р501
После работы тщательно вымыть руки.
Р313 В случае воздействия или обеспокоенности: Обратиться к врачу.
Р340 + ПРИ ВДЫХАНИИ: Выведите пострадавшего на свежий воздух и поместите в
комфортное для осуществления дыхания положение. Позвоните е
ТОКСИКОЛОГИЧЕСКИЙ ЦЕНТР или к врачу, если вы чувствуете недомогание.
+ Р352 +При попадании на кожу: Промыть большим количеством воды с мылом. Снять
+ Р363 загрязнённую одежду. Промыть загрязнённую одежду перед последующим
использованием.
Р313 В случае раздражения кожи: Обратиться к врачу.
Р351 + Р336 При попадании в глаза: Осторожно промывать водой в течение нескольких
минут. Снять контактные линзы, если вы ими пользуетесь и, если это легко
сделать. Продолжить промывание глаз.
Р313 Если раздражение глаз не проходит; Обратиться к врачу.
Хранить в закрытом помещении.
Утилизируйте содержимое и упаковку в соответствии с местными,
региональными, национальными и международными нормами.
Хранение Хранить флаконы при температуре 2-8 С. Не использовать после истечения срока годности,
указанного на флаконе. Реагент можно использовать в течение 280 часов при хранении на борту Dako
Omnis. Оставшаяся рабочая стабильность отслеживается при помощи программного обеспечения
Dako Omnis. Использование просроченных реагентов приведет к появлению предупреждения от
прибора Dako Omnis. Все стекла, окрашенные просроченным реагентом, изменят состояние на
"подозрительное", и журнал стекол на рабочей станции покажет, что был использован просроченный
реагент. Если реагенты хранятся при каких-либо условиях, отличных от указанных, пользователь
должен проконтролировать производительность реагента. Если наблюдается неожиданное
окрашивание, которое нельзя объяснить изменениями в лабораторных методиках, и есть вопросы по
качеству реагента, свяжитесь с технической поддержкой компании "Дако".
Подготовка реагента Очищающий раствор ISH (Dako Omnis) поставляется в готовом к использованию флаконе для
инструмента Dako Omnis.
Методика (процедура) Во время окрашивания всегда загружайте флакон с очищающим раствором ISH (Dako Omnis) для
автоматической очистки наконечника между каждой аспирацией зонда ISH.
При необходимости Dako Omnis позволяет вручную запустить процедуру технического обслуживания
для обеззараживания наконечника робота для обработки жидкости (LiHa). выполните это действие,
если вы подозреваете загрязнение наконечника.
Дополнительная информация содержится в руководстве пользователя Dako Omnis Basic.
Объяснение символов
I R EF^ Каталожный номер Reference du catalogue Срок годности
IVD I Медицинское изделие для диагностики in vitro Производитель
Обратитесь к инструкции по применению I LOT Код серии
г^сТ
8*С Ограничение температур
--- стр. 419 ---
D ako С€
Этанол 96% для in situ гибридизации, Готовый к применению, для использования в Дако
Омнис, 20 тестов, 1 флакон на 14 мл (ISH Ethanol Solution, 96% (Dako Omnis), Ready-to-use, 20
tests, 14 mL)
(Dako Omnis)
Код GM300
РУССКИЙ
Предполагаемое
использование
Для диажостики in vitro.
Раствор этанола ISH 96% (Dako Omnis) предназначен для использования в автоматизированных
анализах гибридизации in situ совместно с прибором Dako Omnis на фиксированных формалином и
залитых парафином (FFPE) срезах тканей.
Представленный
реагент
96% этанол предоставляется в виде готового к использованию раствора. Во флаконе содержится 14 мл
реагента, достаточного для 20 стекол ISH на приборе Dako Omnis.
Меры
предосторожности
1. Для профессиональных пользователей.
2. Не использовать при наличии каких-либо доказательств повреждения упаковки, флакона или иггрих-
кода на флаконе.
3. Может раздражать глаза и обезжиривать кожу. Длительный контакт с кожей может вызвать
покраснение и раздражение.
4. Носите соответствующие средства индивидуальной защиты, чтобы избежать попадания в глаза и
контакта с кожей.
5. Неиспользованный раствор следует утилизировать в соответствии с местными, государственными
и/или федеральными правилами.
6. Раствор этанола ISH содержит £90% этанола и имеет маркировку:
< |> Опасность
Н225
Р280
Р210
Р241
РЗОЗ + Р361 + Р353
Р235
Р501
Легковоспламеняющаяся жидкость и пар.
Пользоваться защитными перчатками. Пользоваться средствами защиты
глаз/лица.
Беречь вдали от тепла, горячих поверхностей, искр, открытого пламени и других
источников воспламенения. Не курить.
Используйте вэрывозащищенное электрическое, вентиляционное,
осветительное и другое оборудование для погрузочно-разгрузочных работ.
ПРИ ПОПАДАНИИ НА КОЖУ (ИЛИ ВОЛОСЫ): Немедленно снять всю
загрязненную одежду. Промыть кожу водой или принять душ.
Хранить охлаждённым.
Утилизируйте содержимое и упаковку в соответствии с
региональными, национальными и мехшународными нормами.
местными,
--- стр. 420 ---
Хранение Хранить флаконы при температуре 2-8 С. Не использовать после истечения срока годности, указанного
на флаконе. Раствор можно использовать в течение 80 часов при хранении на борту Dako Omnis.
Оставшаяся рабочая стабильность отслеживается при помощи программного обеспечения Dako Omnis.
Использование просроченных реагентов приведет к появлению предупреждения от прибора Dako Omnis.
Все стекла, окрашенные просроченным реагентом, изменят состояние на "подозрительное”, и журнал
стекол на рабочей станции покажет, что был использован просроченный реагент. Если реагенты хранятся
при каких-либо условиях, отличных от указанных, пользователь должен проконтролировать
производительность реагента. Если наблюдается неожиданное окрашивание, которое нельзя объяснить
изменениями в лабораторных методиках, и есть вопросы по качеству реагента, свяжитесь с технической
поддержкой компании "Дако".
Подготовка реагента Раствор этанола ISH, 96% (Dako Omnis) поставляется в готовом к использованию флаконе для
инструмента Dako Omnis.
Методика (процедура) Инструкции по загрузке и регистрации реагента в системе Dako Omnis приведены в руководстве
пользователя Dako Omnis. См. инструкции по использованию индивидуального зонда гибридизации Dako
Omnis для получения дальнейших инструкций по использованию раствора этанола ISH 96% (Dako Omnis)
в анализе ISH, включая интерпретацию окрашивания на Dako Omnis.
Объяснение символов
REF 1 Каталожный номер Ограничение температур Производитель
Медицинское изделие для
диагностики in vitro Код серии
Пиктограмма GHS
^ ^ (см. раздел «Меры
предосторожности»)
1 IVD 1 1 LOT 1
Обратитесь к инструкции по
применению 2 Срок годности