Набор реагентов для иммуноферментного определения аллергенспецифических IgE-антител в сыворотке крови (IgE-AT-ИФА) по ТУ 9398-001-73678649-2011 в составе (см. приложение на 1 листе): — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 1 --- УТВЕРЖДЕНА Приказом Росздравнадзора «Альт» от « » ____________ 2 0__г. №____ Иванова 2 0 / / г. И н с т р у к ц и я п о п р и м е н е н и ю н а б о р а р е а г е н т о в д л я и м м у н о ф е р м е н т н о г о о п р е д е л е н и я а л л е р г е н с п е ц и ф и ч е с к и х I g E - а н т и т е л в с ы в о р о т к е к р о в и ( I g E - A T -И Ф Л ) 1 . Н а з н а ч е н и е . 1.1. Набор реагентов IgE-АТ-ИФА предназначен для определения со держания аллергенспецифических IgE в сыворотке крови человека методом твердофазного иммуноферментного анализа. 1.2.“ Определение аллергенспецифических IgE используется в клиниче ской практике для диагностики аллергических заболеваний, вызванных пыль цевыми, бытовыми, пищевыми, эпидермальными, профессиональными, ин- сектными аллергенами. 1.3. Набор рассчитан на определение содержания аллергенспецифиче ских IgE в 8 образцах сыворотки крови, включая калибровочные пробы. 2 . П р и н ц и п м е т о д а . 2.1. Принцип метода - твердофазный неконкурентный непрямой имму- ноферментный анализ. В наборе использованы моноклональные анти-IgE- антитела, входящие в пероксидазный конъюгат, способный выявлять в ^ ’ ^ыво- ротке крови человека антитела класса иммуноглобулина Е, которые аффинно взаимодействуют с аллергенами, сорбированными на поверхности полисти- ролового планшета. Активность пероксидазы на твердой фазе определяют по разложению субстрата - перекиси водорода. Продукт реакции разложения превращает мо лекулы хромогена тетраметилбензидина (ТМБ ) в окрашенное производное, количество которого пропорционально содержанию соответствующего ал лергена в сыворотке крови. Результаты анализа регистрируют с помощью фотометра вертикального сканирования при длине волны 450 нм --- стр. 2 --- 3. Состав набора. Т А Б Л И Ц А 1 Х а р а к т е р и с т и к а к о м п о н е н т о в . № П / П Шифр Наименование компонента Количество Способ применения 1 Р 1 П о л и с т и р о л о в ы й 9 6 - л у н о ч н ы й н а б о р н ы й п л а н ш е т ( о д и н 8 - л у н о ч н ы й с т р и п , п о к р ы т ы й а н т и - I g E - A T ( р е ф е р е н с - с т р и п ) 2 п л а н ш е т а ( 3 с т р и п а ) Р а с п е ч а т а т ь , п о м е с т и т ! р а м к у - д е р ж а т е л ь н е о б ) д и м о е к о л и ч е с т в о с т р п о в . Н е р е к о м е н д у е т е х р а н и т ь р а с п е ч а т а н н ) с т р и п ы . 2 Р З С т р и п ы п о к р ы т ы е а л л е р г е н а м и 2 2 ш т .Г о т о в ы к у п о т р е б л е н и ю . 3 Р 2 0 К а л и б р о в о ч н а я п р о б а н а о с н о в е э м б р и о н а л ь н о й т е л я ч ь е й с ы в о р о т к и с и с п о л ь з о в а н и е м п р е п а р а т а I g E ч е л о в е к а и а з и д а н а т р и я 0 , 1 % , с о д е р ж и т 0 К Е / л 1 п р о б и р к а ( 0 , 0 7 м л ) Г о т о в а к у п о т р е б л е н и ю . 4 P 2 DV К а л и б р о в о ч н а я п р о б а н а о с н о в е э м б р и о н а л ь н о й т е л я ч ь е й с ы в о р о т к и с и с п о л ь з о в а н и е м п р е п а р а т а I g E ч е л о в е к а и а з и д а н а т р и я 0 , 1 % , с о д е р ж и т 1 К Е / л 1 п р о б и р к а ( 0 , 0 7 м л ) Г о т о в а к у п о т р е б л е н и ю 5 Р 2 С К а л и б р о в о ч н а я п р о б а н а о с н о в е э м б р и о н а л ь н о й т е л я ч ь е й с ы в о р о т к и с и с п о л ь з о в а н и е м п р е п а р а т а I g E ч е л о в е к а и а з и д а н а т р и я 0 , 1 % , с о д е р ж и т 5 К Е / л 1 п р о б и р к а ( 0 , 0 7 м л ) Г о т о в а к у п о т р е б л е н и ю 6 Р 2 В К а л и б р о в о ч н а я п р о б а н а о с н о в е э м б р и о н а л ь н о й т е л я ч ь е й с ы в о р о т к и с и с п о л ь з о в а н и е м п р е п а р а т а I g E ч е л о в е к а и а з и д а н а т р и я 0 , 1 % , с о д е р ж и т 2 0 К Е / л 1 п р о б и р к а ( 0 , 0 7 м л ) Г о т о в а к у п о т р е б л е н и ю Уг 7 Р 2 А К а л и б р о в о ч н а я п р о б а н а о с н о в е э м б р и о н а л ь н о й т е л я ч ь е й с ы в о р о т к и с и с п о л ь з о в а н и е м п р е п а р а т а I g E ч е л о в е к а и а з и д а н а т р и я 0 , 1 % , с о д е р ж и т 5 0 К Е / л 1 п р о б и р к а ( 0 , 0 7 м л ) Г о т о в а к у п о т р е б л е н и ю 8 Р а м к а - д е р ж а т е л ь д л я с т р и п о в2 ш т . 9 Р 4 К о н ъ ю г а т М К А Т а н т и - I g E с п е р о к с и д а з о й х р е н а ( 1 0 0 0 - к р а т н ы й к о н ц е н т р а т ) 1 ф л . ( 0 , 0 3 м л ) Р а з в е с т и в 1 0 0 р а з п р о м ы в а ю щ и м р а с т в о р о м . Р а б о ч и й р а с т в о р К г Е х р а н и т ь н е б о л е е 2 д н е й п р и т е м п е р а т у р е о т + 2 ° С д о + 8 ° С 1 0 Р 5 П р о м ы в а ю щ и й р а с т в о р , 1 0 - к р а т н ы й к о н ц е н т р а т ■ [ т р и с ( о к с и м е т и л ) а м и н о м е т а н , 3 , 6 г ; 1 М р а с т в о р с о л я н о й к и с л о т ы ; н а т р и я х л о р и д , 5 ,1 г ; 1 ф л . ( 3 0 м л ) Р а з в е с т и в 1 0 р а з д и с т и л л и р о в а н н о й в о д о й . К о д н о м у о б ъ е м у Р 4 д о б а в и т ь 9 о б ъ е м о в д и с т и л л и р о в а н н о й в о д ы . Г о т о в ы й --- стр. 3 --- Т В И Н - 2 0 , 0 , 3 м л ] , p H 7 , 4 р а с т в о р х р а н и т ь н е б о л е е 1 О д н е й п р и т е м п е р а т у р е о т + 2 ° С д о + 8 ° С 11 Р 6 Т е т р а м е т и л б е н з и д и н ( Т М Б ) 1 ф л . ( 2 2 м л ) Г о т о в к у п о т р е б л е н и ю . 1 2 Р 7 С т о п - р е а г е н т (1 N р а с т в о р с е р н о й к и с л о т ы ) 1 ф л . ( 1 2 м л ) Г о т о в к у п о т р е б л е н и ю . 1 3 Т р а ф а р е т д л я а н а л и з а 1 ш т . 4 . А н а л и т и ч е с к и е х а р а к т е р и с т и к и н а б о р а . 4.1. Чувствительность набора (минимально определяемая концентрация) составляет не менее 1 КЕ/л, что соответствует 1 классу RAST. 5 . А н а л и з и р у е м ы е о б р а з ц ы . 5.1. Материалом для исследований служат негемолизированные про зрачные образцы сыворотки крови человека. Забор крови для получения сы воротки осуществляют в процедурном кабинете с соблюдением установлен ных правил предосторожности, чтобы исключить возможность заражения ВИЧ-инфекцией и вирусом гепатита . Образцы сыворотки крови должны до ставляться в контейнерах или в пробирках, герметично закрытых резиновы ми или ватно-марлевыми, обернутыми полиэтиленовой пленкой, пробками. Пробирки с кровью помещают на 1 час в термостат при температуре (36 ±1°С), а затем в холодильник при температуре + 2-8 °С на 16-18 часов. Обра зовавшиеся при этом сгустки отделяют от стенок стеклянной палочкой. Сы воротку сливают со сгустков в центрифужную пробирку и центрифугируют при 1500-2000 об/мин при комнатной температуре (18-25°С) в течение 20-30 минут. Если тестирование проводится не сразу, то пробы сыворотки miw(ho хранить в течение 2 дней при температуре от +2“С до + 8“С, или 5 месяцев при температуре от -20°С до -40“С. Замораживать только 1 раз. Повторное замораживание образцов не до пускается. 6 . М е р ы п р е д о с т о р о ж н о с т и . 6.1. Потенциальный риск применения набора - класс 2а. 6.2. Все компоненты набора в используемых концентрациях, за исклю чением стоп-реагента (1 N раствор серной кислоты), являются нетоксичны ми. Стоп-реагент обладает раздражающим действием; следует избегать его разбрызгивания и попадания на кожу и слизистые. В случае попадания стоп- реагента на кожу или слизистые покровы следует промыть пораженный уча сток большим количеством проточной воды. --- стр. 4 --- 6.3. При работе с набором следует соблюдать «Правила устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического Щ режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) ■ санитарноэпидемиологических учреждений системы Министерства здраво- ■ охранения СССР», (Москва, 1981 г.). I 6.4. При работе с набором следует надевать одноразовые резиновые или пластиковые перчатки, т.к. образцы крови человека являются потенциально инфицированным материалом, способным длительное время сохранять и пе редавать ВИЧ, вирус гепатита или любой другой возбудитель вирусных ин фекций. 7 . О б о р у д о в а н и е , м а т е р и а л ы , р е а г е н т ы ; - Фотометр вертикального сканирования для 96-луночных планшетов, позволяющий производить измерение оптической плотности при длине вол ны 450 нм; - njjneTKH полуавтоматические варьирующие со сменными наконечни ками, позволяющие отбирать объемы жидкости 10 -100 0 мкл, аттестованные по значению средней дозы и сходимости результатов пипетирования (ошибка ±3%); - прибор для встряхивания рамки со стрипами (шейкер); - термостат, поддерживающий температуру 37±1 °С; - холодильник бытовой; - штатив; - мерные колбы и цилиндры вместимостью 25, 100, 250, 500 мл; - центрифужные пробирки вместимостью 10 мл; - бумага фильтровальная; ^ - вода дистиллированная; - перчатки резиновые или пластиковые 8 . П о д г о т о в к а к а н а л и з у . 8 .1.Перед работой извлечь набор из холодильника и выдержать его при комнатной температуре (18-25°С) в течение времени не менее 30 минут. Пе ред использованием реагенты тщательно перемешать. 8.2. Приготовить рабочие растворы так, как указано в разделе 3 (табли ца!). 8.3. Поместить в рамку-держатель необходимое количество стрипов. 8.4. Составить схему расположения анализируемых образцов на прила гаемом трафарете. --- стр. 5 --- 9. Проведение анализа. 9.1. Анализы следует проводить в дублях. 9.2. При отборе проб необходимо использовать одноразовые наконечни ки . 9.3. Время внесения проб в лунки одного планшета не должно превы шать 15 минут, время инкубации необходимо исчислять от момента внесения реагента в последнюю лунку. Если анализы проводят на двух планшетах, то каждый планшет должен включать анализ калибровочных проб. 9.4. Пробы вносить в соответствии со схемой расположения на трафаре те. 9.5. Компоненты набора вносить в лунки по стадиям в следующем по рядке: ТАБЛИЦА 2 9.5.1. Иммунологическая стадия (I этап) В но с и м ы е ко м п о н е н т ы P 2 A -D РЗ Н П К а л и б р о в о ч н ы е п р о б ы Р 2 А - Е - « 0 » , « 1 » , « 5 » , « 2 0 » , « 5 0 »1 0 м к л Н е и з в е с т н а я и с с л е д у е м а я п р о б а ( Н П ) 1 0 м к л П р о м ы в а ю щ и й р а с т в о р ( Р 5 )9 0 м к л 9 0 м к л 9 0 м к л 9.5.2. Во все лунки планшета внести по 90 мкл разведенного промыва ющего раствора, затем внести по 10 мкл калибровочных проб. В остальные лунки внести по 10 мкл неизвестных исследуемых проб. 9.5.3. После внесения компонентов планшет накрыть крышкой и пере мешать на шейкере в течение 1 минуты, либо путем осторожных пока^ва- ний вручную. Время инкубации 1 час при Ъ ТС в термостате. 9.5.4. Отмывка. ■ Удалить жидкость из лунок путем стряхивания из перевернутого планшета. ■ Немедленно заполнить лунки разведенным промывающим раствором по 150 мкл в каждую лунку. ■ Через 1 минуту удалить жидкость путем стряхивания. Процедуру отмывки повторить еще 2 раза. --- стр. 6 --- 9.5.5. ТАБЛИЦА 3 И м м у н о л о г и ч е с к а я с т а д и я ( I I э т а п ) Вносимые компоненты Лунки с иммобилизованными МКА Т анти- IgE Р2Л-Е РЗ НП К о н ъ ю г а т М К А Т а н т и - I g E 100 м к л 100 м к л 100 м к л 9.5.6. Внести по 100 мкл рабочего раствора конъюгата МКАТ во все лунки. 9.5.7. Инкубировать планшеты в течение 1 часа при температуре +37° С. Удалить жидкость из лунок. 9.5.8. Отмывка. Проводить так же, как это указано в пункте 9.5.4. Про цедуру отмывки проводить 3 раза. Затем дважды лунки стрипов промыть ди стиллированной водой. Удалить следы раствора путем стряхивания. ТАБЛИЦА 4 9.5.9. Ф е р м е н т а т и в н а я с т а д и я ( I I I э т а п ) Вносимые Лунки с иммобилизованными МКАТ анти- IgE компоненты Р2А-Е РЗ HP Т М Б ( Р6) 100 м к л 100 м к л 100 м к л 9.5.10.Внести по 100 мкл ТМБ (Р 6 ) в каждую лунку планшета. Инкубировать планшет в течение 5-15 минут в темном месте при комнариой температуре (18-25°С), периодически помешивая, в зависимости от степени развития голубого окрашивания. ТАБЛИЦА 5 9.5.11. О с т а н о в к а р е а к ц и и ( I V э т а п ) Вносимые компоненты Лунки с иммобилизованными МКА Т анти- IgE Р2А-Е РЗ НП С т о п - р е а г е н т 1 N р а с т в о р H2S O4 ( Р 7 ) 5 0 м к л 5 0 м к л 5 0 м к л 9.5.12. Внести по 50мкл стоп-реагента (Р7) в каждую лунку планшета, со держимое лунок окрашивается в ярко-желтый цвет. --- стр. 7 --- 9.5.13. Измерить оптическую плотность (ОП) в каждой лунке планшета при длине волны 450 нм сразу после остановки реакции. 1 0 . У ч е т р е з у л ь т а т о в . 10.1. ОП в лунках с калибровочной пробой О КЕ/л должна быть не более 0,2 КЕ/л 10.2. ОП в лунках с калибровочной пробой 50 КЕ/л должна быть не ме нее 1,5 КЕ/л. 10.3. Построить калибровочный график, откладывая по оси абсцисс кон центрации IgE в КЕ/л, на оси ординат - оптическую плотность при длине волны 450 нм. 10.4. На калибровочном графике найти значения концентраций специ фических IgE в анализируемых образцах. 10.5. Полученные значения концентрации образцов в КЕ/л необходимо интерпретировать согласно таблице 6 . ТАБЛИЦА 6 Р е з у л ь т а т К Е / лК л а с с И н т е р п р е т а ц и я 0 - 1 0 О т р и ц а т е л ь н ы й 1 - 5 1 Л е г к а я а л л е р г и ч е с к а я р е а к ц и я 5 - 2 0 2 У м е р е н н а я а л л е р г и ч е с к а я р е а к ц и я 2 0 - 5 0 3 В ы с о к а я а л л е р г и ч е с к а я р е а к ц и я > 5 0 4 О ч е н ь в ы с о к а я а л л е р г и ч е с к а я р е а к ц и я 10.6. Общее время проведения анализа 3 часа. ^ 1 1 . У с л о в и я х р а н е н и я и э к с п л у а т а ц и и н а б о р а . 11.1. Набор должен храниться в упаковке предприятия- изготовителя при температуре от +2°С до +8 °С в течение всего срока годности. Допускает ся хранение набора при температуре до 25 °С не более 5 суток. 11.2. Срок годности набора - 6 месяцев. 11.3. Запрещается использовать стоп-реагенты из наборов других фирм- производителей. --- стр. 8 --- 11.4. При проведении исследований следует учесть, что при использова нии каждого планшета необходимо обязательно анализировать калибровоч ные пробы. 11.5. Для получения надежных результатов необходимо строгое соблю дение инструкции по применению набора. 11.6. По вопросам, касающимся качества набора реагентов IgE-АТ-ИФА, следует обращаться в ООО НПО «Альт» по адресу: 355029, г. Ставрополь, ул. Пирогова 78, кв. 275, тел: (8652) 990809. 8 Заведующая отделением контроля осложнений фармакотерапии ООО «Центр клинической фармакологии и фармакотерапии» В.П. Тельбух Директор ООО НПО «Альт» К.С. Иванова --- стр. 9 --- --- стр. 10 ---