--- стр. 2 ---
0 АМПЛИТЕК
РНК-100 (R)
Набор реагентов для экстракции РНК из
биологического материала человека (РНК-100 (R))
ИНСТРУКЦИЯ по ПРИМЕНЕНИЮ
IVD
Форма 1
Форма 2
REF
REF
ЕООЗ-1
ЕООЗ-2
48
96
--- стр. 3 ---
f
ВВЕДЕНИЕ.....................................................................................................................................3
1 НАЗНАЧЕНИЕ........................................................................................................................4
1.1 Область применения...................................................................................................4
2 ФОРМЫ ВЫПУСКА...............................................................................................................4
3 СОСТАВ...................................................................................................................................4
4 ПРИНЦИП МЕТОДА.............................................................................................................5
5 НЕОБХОДИМОЕ ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ ....................................................6
6 ПРЕДУПРЕЖДЕНИЯ И МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ .............................................7
7 ИССЛЕДУЕМЫЙ МАТЕРИАЛ..............................................................................................9
7.1 Потенциально интерферирующие вещества.........................................................10
8 ПРОВЕДЕНИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ...................................................................................11
8.1 Экстракция РНК при использовании формы выпуска 1 (автоматическая
методика с использованием автоматической станции «Amplitech Е1») ...................11
8.2 Экстракция РНК при использовании формы выпуска 2 (автоматическая
методика с использованием процессора магнитных частиц KingFisher™) ................12
8.3 Экстракция РНК при использовании формы выпуска 2 (ручная методика с
использованием магнитного штатива или центрифугирования)..................................13
8.4 Хранение очищенной РНК..........................................................................................15
9 КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА......................................................................................................16
9.1 Контроли, используемые этапе экстракции РНК ..................................................16
9.2 Мониторинг лаборатории на наличие контаминации ..........................................16
10 ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА................................................16
11 УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ, ТРАНСПОРТИРОВАНИЯ И ЭКСПЛУАТАЦИИ НАБОРА
.............................................................................................................................................17
11.1 Срок годности.............................................................................................................17
11.2 Хранение....................................................................................................................17
11.3 Т ранспортирование..................................................................................................17
11.4 Эксплуатация..............................................................................................................17
12 ПЕРЕЧЕНЬ СОКРАЩЕНИЙ...........................................................................................17
13 ПЕРЕЧЕНЬ ПРИМЕНЯЕМЫХ НАЦИОНАЛЬНЫХ СТАНДАРТОВ.........................17
14 ГАРАНТИИ ПРОИЗВОДИТЕЛЯ ....................................................................................19
15 ТЕХНИЧЕСКАЯ ПОДДЕРЖКА.......................................................................................19
16 СИМВОЛЫ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ В ДОКУМЕНТАЦИИ ПРОИЗВОДИТЕЛЯ ..........19
СОДЕРЖАНИЕ
РНК-100 (R) Инструкция в. 15.03.22
--- стр. 4 ---
Настоящая инструкция по применению версии 15.03.22 распространяется на
медицинское изделие «Набор реагентов для экстракции РНК из биологического
материала человека» (РНК-100 (R))» по ТУ 21.20.23-002-19926214-2021 (далее -
набор).
Краткое наименование набора: РНК-100 (R).
Набор следует применять в соответствии с действующей версией инструкции по
применению. Для удобства работы в лаборатории допускается использовать
действующую версию краткого руководства по применению набора.
ВВЕДЕНИЕ
t
РНК-100 (R) Инструкция в. 15.03.22
--- стр. 5 ---
%
Набор предназначен для экстракции РНК SARS-CoV-2 из мазков из носоглотки
и/или ротоглотки человека, полученных от лиц с клинической симптоматикой
респираторного заболевания с подозрением на инфекцию COV1D-19, а также от лиц,
не имеющих признаков простудных заболеваний, для последующего исследования
методом ОТ-ПЦР. Противопоказания к применению набора отсутствуют.
Набор может применяться в зависимости от его формы выпуска для экстракции
РНК совместно с автоматическими станциями «Amplitech Е1» (ООО «Амплитек») и
KingFisher™ (Thermo Fisher Scientific, Финляндия), a также для ручных методик
экстракции РНК с использованием магнитного штатива или центрифуги.
Набор предназначен для применения с набором реагентов «Amplitech SARS-CoV-
2 (R)» (ООО «Амплитек»),
1.1 Область применения
Набор предназначен для лабораторной диагностики in vitro (экстракции РНК SARS-
CoV-2 из биологического материала человека). Набор может применяться в клинико-
диагностических лабораториях.
1 НАЗНАЧЕНИЕ
2 ФОРМЫ ВЫПУСКА
Набор выпускается в двух формах^ (см. таблицу 1).
Описание форм выпуска набора
Форма Назначение
Таблица 1
Количество
исследований, в том
числе для контролей
Для проведения экстракции РНК с применением
автоматической методики с использованием автоматической
станции пробоподготовки «Amplitech Е1» (ООО «Амплитек»).
48
Для проведения экстракции РНК с применением;
- ручной методики с использованием центрифугирования,
- ручной методики с использованием магнитного штатива,
- автоматической методики с использованием процессора
магнитных частиц KingFisher™ {Thermo Fisher Scientific,
Финляндия).
96
3 СОСТАВ
Состав набора указан в таблицах 2, 3 и 4.
Таблица 2
Состав формы 1
Компонент Количество Внешний вид
Картридж с реагентами РНК-100 (R) 2 шт. 9б-луночные планшеты с реагентами,
запаянные фольгированной плёнкой
Одноразовые наконечники 48 шт. Наконечники с фильтром
Одноразовые пробирки 48 шт. Стрипованные или индивидуальные
пробирки
Плёнки для картриджа 4 шт. Клейкие плёнки
' Набор в форме выпуска 1 упакован в коробку из картона, в форме выпуска 2 - в полиэтиленовый пакет
с застёжкой Zip-Lock.
РНК-100 (R) Инструкция в. 15.03.22
--- стр. 6 ---
Компонент Количество Внешний вид
Инструкция по применению 1 шт. В бумажном виде и электронном виде по
адресу: http;//www.amplitech.ru/resources/
Краткое руководство 1 шт. В бумажном виде
Паспорт 1 шт. В электронном виде^ по адресу:
httD://www.amDlitech.ru/aualitv/
Таблица 3
Расположение и объём реагентов в картридже, входящем в состав формы 1
ячеек Номинальный
объём в ячейке.' Внешний вид
А, Е <^<в><?>{Раствор для лизиса) ^ ^ОпаснпЗ
0,50 Прозрачная бесцветная
жидкость
g Р Реагент ME
(Магнетизированная силика) 0,30 Суспензия^ от рыжего до
чёрного цвета
Q Буфер В2 ф < в> < !>
(Раствор для отмывки) * * ^ ^Опасно'^
0,70 Прозрачная бесцветная
жидкость
Р ^ Буфер B3(R)
(Раствор для элюции) 1,05 Прозрачная бесцветная
жидкость
Состав формы 2
Таблица 4
Компонент Номинальный
объём, мл Количество Внешний вид
Буфер В1
(Раствор для лизиса) ^ О п^но^'^ 48,0 1 флакон Прозрачная бесцветная жидкость
Реагент М
(Магнетизированная силика) 0,96 1 пробирка Суспензия^ от рыжего до чёрного
цвета
Буфер В2
(Раствор для отмывки) ^ O i^ ho^ ' ^ 68,0 1 флакон Прозрачная бесцветная жидкость
Буфер B3(R)
(Раствор для элюции) 101,0 1 флакон Прозрачная бесцветная жидкость
Инструкция по применению - 1 шт.
В бумажном виде и электронном
виде по адресу:
http://www.amplitech.ru/resources/
Краткое руководство - 1 шт. В бумажном виде
Паспорт - 1 шт. В электронном виде^ по адресу:
http://www.amplitech.ru/quality/
Протокол экстракции
«RNA100R-KF» - 1 шт. В электронном виде по адресу:
http://www.amplltech.ru/resources/
4 ПРИНЦИП МЕТОДА
Экстракция РНК проводится методом магнитной сепарации. Процедура экстракции
РНК включает;
• обработку исследуемого образца лизирующим раствором,
• связывание РНК с частицами магнитного сорбента (магнетизированной силики),
2 в случав отсутствия доступа к Интернету обратитесь в службу технической поддержки по телефону
(495) 374-13-46 для запроса о предоставлении бумажной версии паспорта.
^ Реагенты содержат опасные вещества, информацию по которым см. в разделе 6.
* В процессе хранения возможно оседание магнетизированной силики, вследствие чего образуется
осадок от рыжего до чёрного цвета в прозрачном растворе.
РНК-100 (R) Инструкция в. 15.03.22
--- стр. 7 ---
• удаление других компонентов лизированного биологического материала
последующими отмывками сорбента при осаждении магнитного сорбента с РНК под
действием постоянного магнитного поля или с использованием центрифуги,
• элюцию РНК при добавлении раствора для элюции к магнитному сорбенту.
5 НЕОБХОДИМОЕ ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ
Для работы с набором требуются оборудование и материалы, указанные в
таблице 5.
Таблица 5
Оборудование и материалы, необходимые для работы с набором
Форма
выпуска Необходимое оборудование и материалы^
ВНИМАНИЕ! При работе с набором следует использовать только одноразовые пробирки и
наконечники, сертифицированные на отсутствие ДНКаз и РНКаз._______________________________
• автоматическая станция лроболодготовки «Amplitech Е1» (ООО «Амллитек»,
Россия):
бокс микробиологической безоласности класс II (тил А) (РУ № ФОР 2012/13259);
центрифуга-вортекс (РУ № ФС № 2005/518);
дозаторы леременного объёма, механические или электронные, с возможностью
дозирования от 10 до 100 мкл (РУ № ФСР 2009/05681);
штатив для пробирок объёмом 2,0 мл (РУ № ФСЗ 2012/11892);
холодильник с камерой, лоддерживающей темлературу от 2 °С до 8 °С;
наконечники для дозаторов переменного объёма, с фильтром, объёмом до 10 и
00 мкл, одноразовые, свободные от ДНКаз и РНКаз (РУ № ФСЗ 2012/12077);
контейнеры для элюата согласно требованиям, указанным в руководстве ло
ксплуатации автоматической станции «Amplitech Е1»;
ёмкость для сброса и инактивации использованных материалов;
перчатки медицинские, одноразовые, неопудренные._________________________
Форма 1
Форма 2
Автоматическая методика экстракции
процессор магнитных частиц для очистки нуклеиновых кислот, клеток и белков
ClngFisher^“ и расходные материалы к нему (Thermo Fisher Scientific, Финляндия; РУ №
ФСЗ 2009/05562);
бокс микробиологической безопасности класс II (тип А) (РУ № ФСР 2012/13259);
центрифуга-вортекс (РУ № ФС № 2005/518);
дозаторы переменного объёма, механические или электронные, с возможностью
дозирования от 100 до 1000 мкл (РУ № ФСР 2009/05681);
штатив для пробирок объёмом 2,0 мл (РУ № ФСЗ 2012/11892);
холодильник с камерой, поддерживающей температуру от 2 '*С до 8 "С;
наконечники для дозаторов переменного объёма, с фильтром, объёмом до 100 и
000 мкл, одноразовые, свободные от ДНКаз и РНКаз (РУ № ФСЗ 2012/12077);
ёмкость для сброса и инактивации использованных материалов;
перчатки медицинские, одноразовые, неопудренные.
_________________________
Ручная методика экстракции
бокс микробиологической безопасности класс II (тип А) (РУ № ФСР 2012/13259);
центрифуга-вортекс (РУ № ФС № 2005/518);
микроцентрифуга для пробирок типа «Эппендорф» объёмом 1,5 мл с ускорением
не менее 10000 хд (РУ № ФСЗ 20212/13316) или магнитный штатив для пробирок типа
«Эппендорф» объёмом 1,5 мл (РУ № РЗН 2022/16360) (в зависимости от выбранной
ручной методики);
• термостат для пробирок типа «Эппендорф» объёмом 1,5 мл с возможностью
нагрева не менее чем до 80 °С (РУ № ФС № 2005/519);
• вакуумный отсасыватель медицинский с колбой-ловушкой (РУ № ФСР
2010/08928);_______________________________________________________________
5 В скобках указаны номера регистрационных удостоверений (РУ) для медицинских изделий,
совместное применение с которыми было валидировано в ходе проведения клинических испытаний.
РНК-100 (R) Инструкция в. 15.03.22
--- стр. 16 ---
смеси ВК. Реагента М и Буфера В1.
8.3.3.3 Внести в промаркированные пробирки исследуемые и контрольные
образцы в объёме 100 мкл, используя для каждого образца отдельный
наконечник. Плотно закрыть крышки, перемешать на вортексе.
8.3.3.4 Поместить пробирки в термостат с температурой 70'’С на 10 мин.
8.3.3.5 Перемешать содержимое пробирок и осалить капли на вортексе.
8.3.3.6 Поместить пробирки в магнитный штатив на 2 мин.
8.3.3.7 Без снятия пробирок со штатива, по внутренней стенке пробирки осторожно
отобрать надосадочную жидкость, используя вакуумный отсасыватель и
отдельный наконечник без фильтра для каждого образца.
8.3.3.8 Добавить в пробирки по 700 мкл Буфера В2. Плотно закрыть крышки
8.3.3.9 Перемешать содержимое пробирок, осадить капли на вортексе и поместить
в магнитный штатив на 2 мин.
8.3.3.10 Удалить надосадочную жидкость аналогично п. 8.3.3.7.
8.3.3.11 Не вынимая пробирки из магнитного штатива, добавить в пробирки по
800 мкл Буфера B3(R) и подождать 3 мин.
ВНИМАНИЕ! После добавления Буфера B3(R) содержимое пробирок не
перемешивать.
8.3.3.12 Удалить надосадочную жидкость аналогично п. 8.3.3.7.
8.3.3.13 Добавить в пробирки требуемый объём Буфера B3(R). Плотно закрыть
крышки, перемешать на вортексе.
Примечание - Требуемый объём Буфера B3(R) (объём элюции) см. в инструкции по
применению набора реагентов для проведения ОТ-ПЦР.
8.3.3.14 Поместить пробирки в термостат с температурой 70“С на 5 мин,
перемешивая каждые 2 мин.
8.3.3.15 Осадить капли на вортексе и поместить пробирки в магнитный штатив на
2 мин.
8.3.3.16 Надосадочную жидкость, содержащую очищенную РНК, можно
использовать для постановки реакции ОТ или ОТ-ПЦР.
ВНИМАНИЕ! Отбор очищенной РНК для проведения дальнейшего исследования
осуществляется без снятия пробирок с магнитного штатива.
8.4 Хранение очищенной РНК
Для хранения РНК необходимо, не захватывая магнетизированною силику,
перенести надосадочную жидкость в новую пробирку. Рекомендуется хранить
очищенную РНК:
• при температуре от 2 °С до 8 не более 4 ч,
• при температуре от минус 24 °С до минус 16 °С не более недели,
• при температуре не выше минус 68 ®С не более года.
РНК-100 (R) Инструкция в. 15.03.22 15
--- стр. 17 ---
9 КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
9.1 Контроли, используемые этапе экстракции РНК
Контроль этапа экстракции РНК осуществляется одновременно с оценкой
достоверности результатов этапа ОТ-ПЦР согласно инструкции к набору реагентов
для проведения ОТ-ПЦР. Результаты исследования контролей, проходящих
экстракцию РНК вместе с исследуемыми образцами, должны соответствовать
критериям оценки, указанным в инструкции по применению набора реагентов для
проведения ОТ-ПЦР.
9.1.1 Отрицательный и положительный контроли
Каждая группа экстрагируемых образцов должна включать контрольные образцы,
если они предусмотрены для проведения исследования согласно инструкции к набору
реагентов для проведения ОТ-ПЦР:
• ОК для выявления контаминации в процессе проведения исследования;
• ПК для контроля корректного прохождения исследования.
9.1.2 Внутренний контроль
Для контроля качества экстракции РНК и оценки влияния ингибиторов на
результаты ОТ-ПЦР в исследовании используется экзогенный ВК^, который
добавляется на этапе экстракции в каждый исследуемый и контрольный образец.
Отсутствие результатов амплификации для ВК и одновременно для выявляемой
мишени свидетельствует о возможном присутствии ингибиторов ОТ-ПЦР в образце.
9.2 Мониторинг лаборатории на наличие контаминации
Для выявления возможной контаминации лаборатории продуктами амплификации,
исследуемыми и контрольными образцами рекомендуется раз в месяц исследовать
смывы с рабочих поверхностей лабораторной мебели, оборудования и поверхностей
помещений согласно процедуре, указанной в МУ 1.3.2569-09. При обнаружении
контаминации необходимо провести мероприятия по её устранению согласно
указаниям, описанным в МУ 1.3.2569-09.
10 ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА
Эффективность экстракции РНК SARS-CoV-2 для всех заявленных видов
биологического материала составляет 100% (98,9% - 100% с достоверностью
95 %)^. Указанное значение характеристики достигается при соблюдении Требований,
приведённых в разделе 7.
Набор обеспечивает экстракцию РНК с чистотой, достаточной для выявления
методом ОТ-ПЦР с детекцией продуктов амплификации в режиме «реального
времени» РНК SARS-CoV-2 в концентрации 500 копий/мл в 100 % случаев.
® ВК, входящий в состав набора реагентов для проведения ОТ-ПЦР.
® На примере экстракции РНК SARS-CoV-2 в концентрации 500 копий/мл из биоматериала,
помещенного в транспортную среду.
РНК-100 (R) Инструкция в. 15.03.22 16
--- стр. 18 ---
11 УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ, ТРАНСПОРТИРОВАНИЯ И ЭКСПЛУАТАЦИИ
НАБОРА
11.1 Срок годности
Срок годности набора составляет 12 месяцев от даты изготовления.
После вскрытия реагенты в пробирках и флаконах использовать до истечения
срока годности набора. После вскрытия ячеек картриджа с реагентами экстракция с
использованием вскрытых ячеек должна быть проведена в течение 140 мин (с учётом
времени, затрачиваемого на внесение в ячейки исследуемых образцов и контролей).
11.2 Хранение
Набор хранить при температуре от 2 °С до 25 °С в защищённом от солнечного
света месте. Не допускается замораживание реагентов.
Реагенты после вскрытия хранить в тех же условиях, что и реагенты до вскрытия.
11.3 Транспортирование
Набор транспортировать при температуре от 2 до 25'‘С всеми видами крытых
транспортных средств в термоконтейнерах с хладоэлементами или в
авторефрижераторах. Не допускается замораживание реагентов.
11.4 Эксплуатация
Реагенты, входящие в состав набора, готовы к использованию.
Ячейки картриджа с реагентами предназначены для однократного использования.
Экстракция РНК с использованием набора должно проводиться при температуре
от 18 ®С до 25 °С и относительной влажности воздуха от 25 % до 75 %.
12 ПЕРЕЧЕНЬ СОКРАЩЕНИЙ
В настоящей инструкции применены следующие сокращения:
вк - внутренний контроль
ДНКаза - дезоксирибонуклеаза
ОК - отрицательный контроль
ОТ - обратная транскрипция
ПК - положительный контроль
ПЦР - полимеразная цепная реакция
РНК - рибонуклеиновая кислота
РНКаза - рибонуклеаза
13 ПЕРЕЧЕНЬ ПРИМЕНЯЕМЫХ НАЦИОНАЛЬНЫХ СТАНДАРТОВ «
ГОСТ Р 51088-2013 Медицинские изделия для диагностики ин витро. Реагенты,
наборы реагентов, тест-системы, контрольные материалы, питательные среды.
Требования к изделиям и поддерживающей документации
ГОСТ ISO 14971-2011 Изделия медицинские. Применение менеджмента риска к
медицинским изделиям
ГОСТ Р 15.013-2016 Система разработки и постановки продукции на производство.
Медицинские изделия
РНК-100 (R) Инструкция в. 15.03.22 17
--- стр. 19 ---
го ст Р 15.301-2016 Система разработки и постановки продукции на производство.
Продукция производственно-технического назначения. Порядок разработки и
постановки продукции на производство
ГОСТ 15.309-98 Система разработки и постановки продукции на производство.
Испытания и приемка выпускаемой продукции. Основные положения
ГОСТ Р 51352-2013 Медицинские изделия для диагностики ин витро. Методы
испытаний
ГОСТ Р ИСО 18113-1-2015 Медицинские изделия для диагностики in vitro.
Информация, предоставляемая изготовителем (маркировка). Часть 1. Термины,
определения и общие требования
ГОСТ Р ИСО 18113-2-2015 Медицинские изделия для диагностики in vitro.
Информация, предоставляемая изготовителем (маркировка). Часть 2. Реагенты для
диагностики in vitro для профессионального применения
ГОСТ Р ИСО 23640-2015 Изделия медицинские для диагностики in vitro. Оценка
стабильности реагентов для диагностики in vitro
ГОСТ Р ИСО 15223-1-2020 Изделия медицинские. Символы, применяемые при
маркировании на медицинских изделиях, этикетках и в сопроводительной
документации. Часть 1. Основные требования
РНК-100 (R) Инструкция в. 15.03.22 18
--- стр. 20 ---
14 ГАРАНТИИ ПРОИЗВОДИТЕЛЯ
Производитель гарантирует соответствие характеристик набора требованиям,
указанным в технической и эксплуатационной документации, в течение указанного
срока годности при соблюдении условий его транспортирования, хранения и
применения.
Рекламации на качество набора направлять в адрес производителя: ООО
«Амплитек», 109235, Москва, ул. 1-я Курьяновская, д. 34, стр. 8, этаж 1 пом. II ком. 42,
тел. (495) 374-13-46, e-mail: support@amplitech.ru .
15 ТЕХНИЧЕСКАЯ ПОДДЕРЖКА
Консультацию по вопросам по работе с набором и его качеству можно получить по
контактам, указанным на официальном сайте производителя: www.amplitech.ru .
16 СИМВОЛЫ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ В ДОКУМЕНТАЦИИ ПРОИЗВОДИТЕЛЯ
Код серии
Hi
Изготовитель LOT
Н
Дата изготовления
2
| i v d | Медицинское изделие для
диагностики in vitro
т
Обратитесь к инструкции по
применению i
V
Содержимого достаточно для
проведения п тестов А
REF Номер по каталогу Ф ‘б > < ? >
Использовать до
Не допускать воздействия
солнечного света
Предел температуры
Осторожно!
Знаки опасности
РНК-100 (R)
м1
ООО «Амплитек»,
Россия, 109235, Москва,
ул. 1-я Курьяновская, д. 34, стр. 8, этаж 1 пом.
тел. (495) 374-13-46, www.amplitech.ru
Инструкция в. 15.03.22
ком. 42
19
--- стр. 21 ---
Лист регистрации изменений
Номера страниц Всего
страниц в
документе
Номер документа Подпись ДатаИзм. изменён
ных
заменён
ных новых аннулиро
ванных
РНК-100 (R) Инструкция 20