Набор реагентов для одновременного выделения ДНК/РНК из 96 клинических образцов «НК-Экстра-plate» — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 1 --- '^ТестГек^ Г е н е ти к а н о в о го п о ко л е н и я УТВЕРЖДАЮ директор естГ ен» овский 2020 г. ИНСТРУКЦИЯ Набор реагентов для проведения контрольной ОТ-ПЦР «СОП-Экстра-контроль» Только для внутреннего применения сотрудниками производственной лаборатории ООО «ТестГен», инженером ТК при проведении контроля качества ^^^(Набора реагентов для одновременного выделения ДНК/РНК из 96 ЧР клинических образцов «НК-Экстра-plate» --- стр. 2 --- 1. Назначение............................................................................................. 4 2. Принцип метода.................................................................................... 4 3. Состав набора реагентов...................................................................... 5 4. Характеристики набора реагентов..................................................... 6 6. Меры предосторожности при работе с набором.............................7 7. Оборудование и материалы, необходимые при работе с набором реагентов..................................................................................................... 9 j|^ 8; Анализируемые образцы...................................................................... 9 ™9. Процедура выделения нуклеиновых кислот из исследуемых образцов КО и ОКО с использованием набора ..................................10 «НК-Экстра-plate»................................................................................. ю 11. Регистрация и интерпретация результатов ..................................14 12. Условия хранения, транспортирования и эксплуатации набора реагентов.................................................................................................. 15 13. Утилизация....................................................................................... [6 --- стр. 3 --- 1. Назначение Набор реагентов «СОП-Экстра-контроль» предназначен дг, проведения контроля качества ДНЮРНК (эффективное! выделения ДНК/РНК и контроля отсутствия контаминаци компонентов набора посторонними ДНК/РНК), выделенной г контрольного образца (ВКО, входит в состав «СОП-Экстр; контроль») с помощью набора реагентов «НК-Экстра-plate) методом одностадийной обратной транскрипции - мультиплексно аллель-специфической полимеразной цепной реакции (ОТ-ПЦР). Предназначен для внутреннего применения для проведенг контроля качества «Набора реагентов для одновременноф выделения ДНК/РНК из 96 клинических образцов «НК-Экстр; plate». Предназначенный пользователь: сотруднг производственной лаборатории ООО «ТестГен», инженер Т1 квалификация пользователя - лицо, имеющее средне профессиональное образование по направлению «Лабораторнг диагностика» без предъявления требований к стажу работы ил начальное профессиональное образование и стаж работы г специальности не менее двух лет. 3. Состав набора реагентов 2. Принцип метода Метод Одностадийная обратная транскрипция - мультиплекснс аллель-специфическая полимеразная цепная реакция (ОТ-ПЦР) реальном времени с гибридизационно-флуоресцентной детекцией Принцип метода По каналу РАМ детектируется амплификация человеческф ДНК, выход реакции по каналу РАМ указывает на присутствие материале ДНК человека (контаминация). По каналу HEX детектируется амплификация ВКО, выхс реакции по каналу HEX указывает на успешное выделение РНК прохождение реакции обратной транскрипции и ПЦР. №пп Компонент Внешний вид Состав Объём, мкл 1 Праймер- микс прозрачная жидкость розового цвета Смесь олигонуклеотидов, см. таблицу 3 1800 мкл в пробирке на 2,0 мл 2 ОТ-ПЦР- буфер Прозрачная бесцветная жидкость Буфер для одностадийной ОТ- ПЦР 5х OneStep (производства ООО «Белбиолаб») 1800 мкл в пробирке на 2,0 мл 3 ВКО Прозрачная бесцветная жидкость Смесь плазмиды pUC19 с концентрацией 100 частиц/мкл и PPIK, упакованной в капсид бактериофага с концентрацией 100 частиц/мкл 5 000 мкл во флаконе на 10 мл 4 пко Прозрачная бесцветная жидкость Смесь геномной ДНК jurkat в концентрации 1000 копий на 15 мкл и плазмиды pMS2 в концентрации 1000 копий на 15 мкл в ТЕ-буфере 700 мкл в пробирке на 1,5 мл 5 око * Прозрачная бесцветная жидкость Деионизованная стерильная вода, свободная от ДНКаз/РНКаз 700 мкл в пробирке на 1,5 мл 6 око для выделения Прозрачная бесцветная жидкость Деионизованная стерильная вода, свободная от ДНКаз/РНКаз 5 000 мкл во флаконе на 10 мл --- стр. 4 --- Таблица 2 - Состав праймер-микса Количество реакций №пп Компонент 1 315+ 1 COMT-F, 100 мкМ 0,1 40 2 COMT-R, 100 мкМ 0.1 40 3 COMT-Z, 100 мкМ 0,05 20 4 MS2rep-F4, 100 мкМ 0,075 30 5 MS2rep- R4, 100 мкМ 0,075 30 6 MS2-V1C4, 100 мкМ 0,0375 15 7 Н20 Rnase free 4,5625 1825 мл. Вторичная упаковка- упаковочный пакет с защелкоЙ 21р lock из полимерной пленки.____________________ 2. Функциональные характеристики "Положительный результат с -ТКО____________________ Отрицательный результат с ЭКО Регистрация роста сигнала флуоресценции в пробирках сПКО по каналам РАМ и HEX Ct<35. В пробирках с ОКО по каналам РАМ и HEX Ct не указан 4. Характеристики набора реагентов 4.1 Технические и функциональные характеристики 6. Меры предосторожности при работе с набором Все составные части и реагенты, входящие в состав набора реагентов «СОП-Экстра-контроль», относятся к 4 классу опасности Таблица 3 — Технические и функциональные характеристик (вещества малоопасные) в соответствии с ГОСТ 12.1.007-76 «ССБТ. Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности». Реагенты, входящие в набор «СОП-Экстра-контроль», обладают низкой упругостью пара и исключают возможность ингаляционного отравления. Реагенты, входящие в набор «СОП-Экстра-контроль», не токсичны, поскольку готовятся путём смешивания отдельных нетоксичных компонентов. Необходимо одновременно обеспечить и соблюдать персоналом правила биологической безопасности и требования к набора реагентов «СОГ -Экстра-контроль». Наименование показателя Характеристики и нормы 1. Технические характеристики 1.1 Внешний вид Праймер-микс Прозрачная жидкость розового цвета, 1 пробирка (1800 мкл) ОТ-ПЦР-буфер Прозрачная бесцветная жидкость, 1 пробирка (1800 мкл) ВКО Прозрачная бесцветная жидкость, 1 флакон (5000 мкл) ПКО Прозрачная бесцветная жидкость, 1 пробирка (700 мкл) ОКО Прозрачная бесцветная жидкость, 1 пробирка (70С мкл) 1 ОКО для выделения Прозрачная бесцветная жидкость, 1 флакон (5000 ’ мкл) 1.2. Комплектность Комплект включает: набор реагентов, паспорт. Состав: 2 флакона объёмом 10 мл, 2 пробирки объёмом 1,5 мл, 2 пробирки объёмом 2 мл. 1.3. Маркировка Наличие на пробирках, флаконах и вторичной (потребительской) упаковке. Этикетки из клеящег бумаги по ГОСТ 7625-86. 1.4. Упаковка Первичная упаковка- отдельные пластиковые флаконы 10 мл, пластиковые пробирки 1,5 мл и2 , исследуемых проб помещений и оборудования. Работа должна проводиться с соблюдением санитарно эпидемических правил СанПиН 2.1.3684-21 «Санитарно- эпидемиологические требования к содержанию территорий городских и сельских поселений, к водным объектам, питьевой воде и питьевому водоснабжению, атмосферному воздуху, почвам, жилым помещениям, эксплуатации производственных. противоэпидемических (профилактических) мероприятий». При работе всегда следует выполнять следующие требования: --- стр. 5 --- - удалять неиспользованные реактивы в соответствии СанПиН 2.1.3684-21 «Санитарно-эпидемиологические требования содержанию территорий городских и сельских поселений, к водны: объектам, питьевой воде и питьевому водоснабженик атмосферному воздуху, почвам, жилым помещениям, эксплуатаци производственных, общественных помещений, организации проведению санитарно-противоэпидемически (профилактических) мероприятий»; ВНИМАНИЕ! При удалении отходов после амплификаци (пробирок, содержащих продукты ПЦР) недопустимо открывани пробирок и разбрызгивание содержимого, поскольку это мож^ привести к контаминации продуктами ПЦР лабораторной зонь оборудования и реагентов. - применять набор строго по назначению, согласно данно инструкции; - допускать к работе с набором только сотруднике производственной лаборатории ООО «ТестГен», инженера ТЬ ознакомленных с технологической инструкцией по производств набора реагентов «НК-Экстра-plate», инструкциями по охран труда ООО «ТестГен»; - не использовать набор по истечении срока годности; - избегать контакта с кожей, глазами и слизистой оболочко! При контакте немедленно промыть поражённое место водой обратиться за медицинской помощью. Необходимых мер предосторожности в отнощении влияни магнитных полей, внещних электрических воздействи! электростатических разрядов, давления или перепадов давлени; перегрузки, источников термического воспламенения предусмотрено. В составе набора отсутствуют вещества человеческого ил животного происхождения, обладающие потенциально инфекционной природой, поэтому меры предосторожности протг любых специальных, несвойственных рисков при использовани или реализации изделия не предусмотрены. 7. Оборудование и материалы, необходимые при работе с набором реагентов Работа с набором реагентов «СОП-Экстра-контроль» осуществляется рабочей зоне для приготовления реакций (МУ 1.3.2569-09). Оборудование для проведения реакции ОТ-ПЦР: 1. ПЦР-бокс (например, «БАВ-ПЦР-«Ламинар-С», «Ламинарные системы», Россия). 2. Вортекс (например, «ТЭТА-2», «Биоком», Россия). 3. Набор электронных или автоматических дозаторов переменного объёма (типа «Eppendorf», Германия). 4. Холодильник от + 2 до +8 °С с морозильной камерой не выще минус 16 °С. 5. Амплификатор «ДТпрайм» («ДНК - Технология», Россия). Материалы и реагенты, не входящие в состав изделия: 1. Одноразовые наконечники с аэрозольным барьером до 1000 мкл, до 200 мкл, до 100 мкл, до 20 мкл и до 10 мкл. (например, «Axygen», США). 2. Штативы для наконечников (например, «Axygen», США) и микропробирок на 0,2 мл (напри.мер, «ИнтерЛабСервис», Россия). 3. Отдельный халат и одноразовые перчатки. 4. Ёмкость с крыщкой для дезинфицирующего раствора. 5. Одноразовые полипропиленовые пробирки для ПЦР на 0,2 мл (куполообразная крыщка) («Axygen», США) 8. Анализируемые образцы Тип анализируемого образца Объектом исследования служат пробы контрольного образца (КО) и отрицательного контрольного образца (ОКО). Контрольный образец (КО), представляет еобой внутренний контрольный образец (ВКО), входящий с состав набора «СОП- Экстра-контроль» (производства ООО «ТестГен», Россия). Внутренний контрольный образец (ВКО) представляет собой смесь плазмиды pUC19 с концентрацией 100 частиц/мкл и РНК, упакованной в капсид бактериофага с концентрацией 100 частиц/мкл. Отрицательный контрольный образец (ОКО), входящий с состав набора «СОП-Экстра-контроль» (производства ООО --- стр. 6 --- «ТестГен», Россия), представляет собой деионизованну[ стерильную воду, свободную от ДНКаз/РНКаз. ОКО проходит этап выделения набором реагентов «НК Экстра-plate» с последующим проведением контрольной ПЦР. 9. Процедура выделения нуклеиновых кислот из исследуемыз образцов КО и ОКО с использованием набора «НК-Э кстра-р late» Выделение ДНК/РНК проводят согласно инструкции к набор из 100 мкл исследуемых образцов КО и ОКО, еогласно п. 8. Пере проведением процедуры выделения контрольный образец (К(| тщательно перемешать на вортексе. Для контрольного образца и ОКО приготовить промаркировать по две одноразовые пробирки объёмом 1,5-2 мл. 1. Аккуратно перемешать буфер для связывани: раствор для промывки № 1, раствор для промывки №2 и элюен входящие в состав набора «НК-Экстра-plate» переворачива флаконы по 10 раз. 2. Внести в пробирки с ВКО и ОКО по 500 мкл буфер для евязывания и перемешать на вортексе в течение 5 секунд. 3. Прогреть пробирки при температуре 70°С в течени 5 мин., перемешивая на вортексе в течение 5 сек. через каждые минуты инкубации. 4. Полностью ресуспендировать содержимое пробирк е магнитными частицами на вортексе. Сброеить капли со стене пробирки, а затем дополнительно перемешать пипетированием использованием дозатора. 5. В пробирках с образцами, поеле инкубации (п. 3^ сбросить капли коротким центрифугированием, добавить в кажду пробирку по 10 мкл еуспензии магнитных частиц и перемешать н вортекее в течение 5 еек. 6. Инкубировать пробирки при комнатной температур в течение 10 минут, перемешивая раетвор во время инкубации 2- раза на вортексе в течение 5 сек. 7. Поместить пробирки в магнитный штатив на 1,5- мин., удалить надосадочную жидкость с помощью дозатора ил аспиратора. 8. Добавить в пробирки по 700 мкл раствора для про.мывки № 1, плотно закрыть крышки, ресуспендировать магнитные частицы на вортексе и ебросить капли коротким центрифугированием. 9. Поместить пробирки в магнитный штатив на 1,5-2 мин, удалить надосадочную жидкость. 10. Добавить в пробирки по 700 мкл раствора для промывки №2 плотно закрыть крышки, ресуспендировать магнитные частицы на вортексе и сбросить капли коротким центрифугированием. 11. Поместить пробирки в магнитный штатив на 1,5-2 мин, удалить надосадочную жидкость. 12. Добавить в пробирки по 700 мкл раствора для промывки №2 плотно закрыть крышки, ресуспендировать магнитные частицы на вортексе и сбросить капли коротким центрифугированием 13. Поместить пробирки в магнитный штатив на 1,5-2 мин, удалить надосадочную жидкость. 14. Поместить пробирки с открытыми крышками в термостат и инкубировать при 70 °С в течение 5 минут. 15. Добавить в каждую пробирку с образцами, используя отдельный наконечник с фильтром, по 50 мкл элюента, тщательно ресуспендировать магнитные частицы пипетированием, плотно закрыть крышки. 16. Поместить пробирки в термостат при температуре 70°С на 10 мин, перемешивая содержимое каждые 2 мин. 17. - Осадить капли коротким центрифугированием и поместить пробирки в магнитный штатив на 1,5-2 мин. 18. Надосадочную жидкость, содержащую ДНК/РНК, перенести в чистые, промаркированные пробирки и использовать для постановки реакции ОТ-ПЦР. С --- стр. 7 --- 10. Проведение ОТ-ПЦР набором реагентов «СОП-Экстра-контроль» Исследование проводится по следующей схеме: Приготовить и промаркировать 7 пробирок для ОТ-ПЦР н; о, 1-0,2 мл согласно таблице 4. Таблица - Расположение и состав пробирок для ОТ-ПЦР №ПЦР- пробирки Образец Назначение 1 КО, прошедший этап выделения ДНК/РНК набором «НК-Экстра-pIate» Контроль эффективности выделения ДНК/РНК 2 КО, прошедший этап выделения ДНК/РНК набором «НК-Экстра-plate» Контроль эффективности выделения ДНК/РНК ^ 3 ОКО, прошедший этап выделения ДНК/РНК набором «НК-Экстра-plate» Контроль отсутствия контаминации компонентов набора посторонними ДНК/РНК 4 ОКО, прошедший этап выделения ДНК/РНК набором «НК-Экстра-plate» Контроль отсутствия контаминации компонентов набора посторонними ДНК/РНК 5 ОКО, прошедший этап выделения ДНК/РНК набором «НК-Экстра-plate» Контроль отсутствия контаминации компонентов набора посторонними ДНК/РНК 6 ПКО из набора «СОП- Экстра-контроль» ПКО из набора «СОП- Экстра-контроль» 7 ОКО из набора «СОП- Экстра-контроль» (не проходит этап выделения ДНК/РНК) ОКО из набора «СОП- Экстра-контроль» 1. Приготовить мастермикс: смешать в отдельно: пробирке 40 мкл ОТ-ПЦР-буфера и 40 мкл Праймер-миксг входящих в состав набора «СОП-Экстра-контроль». 2. Внести во все пробирки по 10 мкл мастермикса. 3. Внести в пробирки 1-2 по 15 мкл КО, прошедшего эта 1 выделение набором «НК-Экстра-plate». 4. Внести в пробирки 3-5 по 15 мкл ОКО, прошедшего эта выделение набором «НК-Экстра-plate». 5. Внести 15 мкл ПКО из набора «СОП-Экстра-контроль- 1» в пробирку 6. 6. Внести 15 мкл ОКО (не проходит этап выделения ДНК/РНК) из набора «СОП-Экстра-контроль» в пробирку 7. 7. Для сброса капель со стенок отцентрифугировать пробирки в течение 1 -3 секунд на микроцентрифуге-вортексе. Для проведения ПЦР с детекцией в режиме «реального времени» используют амплификатор планшетного типа «ДТпрайм» («ДНК - Технология», Россия), регистрационное удостоверение № ФСР 2011/10228 от 03 марта 2011 г. Установить пробирки в реакционный модуль прибора для ПЦР в «реальном времени». Рекомендуется устанавливать пробирки по центру термоблока для равномерного прижима пробирок нагревающей крышкой. Запрограммировать прибор для выполнения соответствующей программы амплификации и детекции флуоресцентного сигнала, соблюдая инструкцию для используемого прибора. Протокол ОТ- ПЦР указан в таблице 5. Стадия Температура, “С Время, мин:сек Каналы детекции Веего циклов 1 52 40:00 1 2 95 02:00 1 3 95 00:15 5064 00:20 РАМ, HEX Указать количество и идентификаторы образцов, отметить расположение пробирок на матрице термоблока в соответствии с их установкой. Удостовериться, что в параметрах оптических измерений программы амплификации задействованы каналы детекции РАМ и HEX. Запустить ОТ-ПЦР с детекцией флуоресцентного сигнала. По окончании выполнения программы приступить к анализу результатов. Регистрацию результатов поводят с помощью программного обеспечения используемого прибора для проведения ПЦР с детекцией в режиме «реального времени». Анализируют наличие --- стр. 8 --- кривых накопления флуоресцентного сигнала и фиксируют пороговые циклы (Ct) прохождения реакции по каналам FAM ц HEX. 11. Регистрация и интерпретация результатов Регистрацию результатов проводят по завершении ОТ-ПЦР автоматически с помощью программного обеспеченщ используемого прибора. Принцип интерпретации результатов отражён в таблице 6 v выполняется в следующем порядке: 11.1. Интерпретация результатов в положительно контрольном образце. Набор «НК-Экстра-plate» считают годным при значении Ct i ПКО из набора «СОП-Экстра-контроль» не более 32 цикла пс каналам FAM и HEX. 11.2. Интерпретация результатов в отрицательноА контрольном образце Набор «НК-Экстра-plate» считают годным при отсутстви: подъема кривой амплификации в пробирках с ОКО (не проходящи! этап выделения ДНЬС/РНК) из набора «СОП-Экстра-контроль» ni канал FAM и HEX (то есть график накопления флуоресценци! отсутствует). 11.3. Интерпретация результатов по проведению проверк; отсутствия контаминации компонентов набора посторонним ДНК/РНК Набор «НК-Экстра-plate» считают годным, если по результат реакции Ct ОКО, прошедшем этап выделения ДНК/РНК, по канала FAM и HEX не указан (то есть график накопления флуоресценци отсутствует), что свидетельствует об отсутствии контаминаци компонентов набора посторонними ДНК/РНК. 11.4. Интерпретация результатов по проведению проверю эффективности выделения ДНК/РНК. Набор «НК-Экстра-plate» считают годным при значении Ct = КО, прошедшем этап выделения ДНК/РНК, по каналам FAM и НЕ)! не более 30 цикла и значении А Ct между выходом КО и ПКО и’ каналам FAM и HEX не более 2 циклов, что свидетельствует о тo^l что соответствует эффективности выделения ДНК/РНК не мене 25%. 1 Таблица 6 - Результаты конт роля, соответствующие норме № пп Показатель Значение порогового цикла (Ct) по оптическим каналам FAM HEX 1 КО, прошедший этап выделения ДНК/РНК набором «НК-Экстра-plate» Ct<30 Ct<30 2 А Ct между КО и ПКО <2 <2 3 ОКО, прошедший этап выделения ДНК/РНК набором «НК-Экстра-plate» 4 ПКО из набора «СОП- Экстра-контроль» Ct<32 Ct<32 5 ОКО из набора «СОП- Экстра-контроль» (не проходит этап выделения ДНК/РНК) III 12. Условия хранения, транспортирования и эксплуатации набора реагентов Условия хранения: Набор реагентов «СОП-Экстра-контроль» в упаковке предприятия-изготовителя хранить при температуре не выше минус 20 °С в течение всего срока годности набора. Не допускается замораживание реагентов. После вскрытия хранить в тех же условиях, что и реагенты до вскрытия. Набор реагентов, хранившийся с нарушением регламентированного режима, применению не подлежит. Условия транспортирования: Транспортировать набор реагентов «СОП-Экстра-контроль» следует транспортом всех видов в крытых транспортных средствах в соответствии с правилами перевозок, действующими на транспорте данного вида. Набор реагентов транспортировать при температуре .минус 20 °С в течение всего срока годности набора. Допускается транспортировка при температуре + 4 °С до 10 суток, при комнатной температуре (15-25 °С) не более двух суток. Атмосферное давление не контролируется, т.к. не влияет на качество изделия. Наборы реагентов, транспортированные с нарушением температурного режима, применению не подлежат. i l . --- стр. 11 --- T e c T ^ ^ i^ Г е н е п к а н о в о го поколений УТВЕРЖДАЮ 1Й директор ТестГен» повский 2022 г. ИНСТРУКЦИЯ по ПРИМЕНЕНИЮ Набор реагентов для одновременного выделения ДН1С/РНК из 96 клинических образцов «НК-Экстра-pIate» ТУ 21.20.23-031-97638376-2020 --- стр. 12 --- Содержание Введение.............................................................................................................................. 4 1. Назначение...................................................................................................................... 5 2. Принцип метода........................................................................................................... 6 3. Состав набора реагентов......................................................................... 7 4. Характеристики набора реагентов......................................................................1 о 5. Перечень рисков, связанных с применением набора реагентов «НК-Экстра-plate»......................................................................14 6. Меры предосторожности при работе с набором ............................................14 7. Оборудование и материалы, необходимые при работе с набором ........16 8. Анализируемые пробы............................................................................................18 9. Подготовка компонентов набора для исследования ....................................30 10. Проведение исследования.................................................................................... 31 11. Возможные проблемы и их решение ..............................................................33 12. Условия хранения, транспортировки и эксплуатации набора ...............34 13. Утилизация................................................................................................................ 35 14. Гарантийные обязательства, контакты...........................................................36 Приложение А ................................................................................................................. 37 --- стр. 13 --- Введение Целевой аналит. Набор реагентов «НК-Экстра-plate» используется на этапе пробоподготовки к последующему анализу. Определение получаемой ДНК/РНК в качестве целевого аналита не предусмотрено. Научная обоснованность. Выделение ДНК/РНК - важный шаг подготовки проб. Многие методики, такие как амплификация, проведение обратной транскрипции, детектирование накопления продуктов амплификации методом ПЦР в реальном времени и др., не могут быть выполнены непосредственно на клинических образцах без Щ предварительной очистки нуклеиновых кислот. Выделение ДНК/РНК является преаналитическим этапом при выполнении генетического анализа, который используется для научных, медицинских целей, таких как диагностика наследственных заболеваний, выявление различных молекулярно генетических маркеров, риска развития различных наследственных болезней, инфекций и т.д. Область применения набора реагентов - клиническая лабораторная диагностика. Показания и противопоказания к применению. Показания к применению: Набор реагентов «НК-Экстра- plate» рекомендуется использовать для обеспечения преаналитической стадии проведения анализов в клинической лабораторной диагностике. Выделенная ДНК из венозной крови, плазмы венозной крови, мазков со слизистой оболочки влагалища, соскобов из цервикального канала, соскобов из уретры, секрета предстательной железы и РНК, выделенная из мокроты, мазков щ носоглотки, мазков из ротоглотки, клеточного осадка мочи, не является основой для постановки диагноза, однако может использоваться для последующего проведения анализов в клинической лабораторной диагностике при исследованиях методом обратной транскрипции (РНК), полимеразной цепной реакции (ДНК), в частности при диагностике ноевой коронавирусной инфекции SARS-CoV-2 и прочих инфекций, а также в области онкологии. ,^м Противопоказания к применению: при использовании специально обученным персоналом и с учетом применения по назначению противопоказания не выявлены. 1. Назначение Назначение: Набор реагентов «НК-Экстра-plate» предназначен для выделения ДНК из венозной крови, плазмы венозной крови, мазков со слизистой оболочки влагалища, соскобов из цервикального канала, соскобов из уретры, секрета предстательной железы и выделения РНК из мокроты, мазков из носоглотки, мазков из ротоглотки, клеточного осадка мочи методом, основанном на обратимом связывании нуклеиновых кислот с поверхностью магнитных частиц, для последующего проведения анализов в клинической лабораторной диагностике методом обратной транскрипции (РНК), полимеразной цепной реакции (ДНК). Функциональное назначение: набор реагентов «НК-Экстра- plate» предназначен для обеспечения преаналитической стадии молекулярно-генетического анализа. Выделенная ДНК из венозной крови, плазмы венозной крови, мазков со слизистой оболочки влагалища, соскобов из цервикального канала, соскобов из уретры, секрета предстательной железы и РНК, выделенная из мокроты, мазков из носоглотки, мазков из ротоглотки, клеточного осадка мочи, не являетея основой для постановки диагноза, однако может использоваться для последующего проведения анализов в клинической , лабораторной диагностике при исследованиях методом обратной транскрипции (РНК), полимеразной цепной еакции (ДНК), в частности при диагностике новой коронавирусной инфекции SARS-CoV-2 и прочих инфекций, а также в области онкологии. Например, при последующем проведении анализов выделенной ДНК/РНК могут совместно применяться следующие медицинские изделия: - Набор реагентов для качественного выявления РНК коронавируса (S A R S-C o V -2 ) методом ОТ-ПЦР в реальном времени «CoV-2-Тест» по ТУ 21.20.23-015-97638376-2020, производства --- стр. 15 --- Состав набора Таблица ] - Состав набора реагентов «НК-Экетра-plate», Таблица 2 - Соетав набора реагентов «НК-Экстра-plate», № пп Наименование компонента Сокращенн ое наименован не Описание Количество 1 Буфер для связывания ГГрозрачная бесцветная жидкость, может иметь оттенок желтого цвета 1 флакон, 48 мл Л 2 Магнитные частицы мч Коричневая суспензия 1 пробирка^^ 960 мкл Раствор для промывки №1 Прозрачная бесцветная жидкость 1 флакон, 58 мл 4 Раствор для промывки №2 Прозрачная бесцветная жидкость 2 флакона, по 68 мл 5 Элюент Прозрачная бесцветная жидкость 1 флакон, 10 мл 6 Глубоколуночный планшет, 96 лунок, для KingFisher Flex/Duo Prime Пустой бесцветный полипропиленов ый 96-луночный глубокий планшет объемом 2200 мкл I шт. 7 Ванночки для реактивов Пустые белые ванночки объемом 60 мл. 4 шт. Примечание. Эксплуатационная документация (инструкция по применению и паспорт качества) не входит в состав изделия, но входит в ко.мпчект поставки изделия. Набор реагентов, для обеспечения соблюдения условий транспортирования, упаковывается в коробку из картона, туда же помещается инструкция по применению и паспорт качества на каждую поставляемую парию изделия. № пп Наименование компонента Сокраще иное наименов ание Описание Количест во 1 Буфер для связывания Прозрачная бесцветная жидкость, может иметь оттенок желтого цвета 1 флакон, 48 мл 2 Магнитные частицы мч Коричневая суспензия 1 пробирка, 960 мкл 3 Раствор для промывки №1 - Прозрачная бесцветная жидкость 1 флакон, 58 мл 4 Раствор для промывки №2 - Прозрачная бесцветная жидкость 2 флакона, по 68 мл 5 Элюент - Прозрачная бесцветная жидкость 1 флакон, 10 мл 6 Глубоколуночный планшет, 96 лунок, для KingFisher Flex/Duo Prime Пустой бесцветный полипропиленовый 96- луночный глубокий планшет объемом 2200 мкл 1 шт. 7 Ванночки для реактивов Пустые белые ванночки объемом 60 мл 4 шт. 8 Магнитный штатив для глубоколуночных планц/етов Магнитный штатив на 96 лунок для выделения ДНК/РНК из глубоколуночных планшет с объемом лунки до 2 мл 1 шт. Примечание: Эксплуатационная документация (инструкция по применению и паспорт качества) не входит в состав изделия, но входит в комплект поставки изде.чия. Ко.мплект набора реагентов, для обеспечения соблюдения условий транспортирования, упаковывается в коробку из картона, туда же помещается инструкция по применению и паспорт качества на каждую постав.чяемую парию изделия. Г --- стр. 16 --- в наборе для выделения не используются калибраторы и контрольные материалы. В составе набора отсутствуют лекарственные средства для медицинского применения, вещества человеческого или животного происхождения. Примечание: изделие не содержит другие ингредиенты, которые могут оказать влияние на проведение процедуры. 4. Характеристики набора реагентов 4.1 Технические и функциональные характеристики Таблица 3 - Технические и функциональные характеристики С« Наименование показателя Характеристики и нормы 1. Технические характеристики 1.1. Внешний вид 1.1.1 Форма комплектации 1 Буфер для связывания Прозрачная бесцветная жидкость Магнитные частицы Коричневая суспензия Раствор для промывки № 1 Прозрачная бесцветная жидкость Раствор для промывки №2 Прозрачная бесцветная жидкость Элюент Прозрачная бесцветная жидкость Г лубоколуночный планшет, 96 лунок, для KingFisher Flex/Duo Prime Пустой бесцветный полипропиленовый 96-луночный глубокий планшет объемом 2200 мкл Ванночки для реактивов Белые полистироловые ванночки объёмом 60 мл в количестве 4 штуки. 1.1.2 Форма комплектации 2 Буфер для связывания Прозрачная бесцветная жидкость Магнитные частицы Коричневая суспензия Раствор для промывки №1 Прозрачная бесцветная жидкость Раствор для промывки №2 Прозрачная бесцветная жидкость Элюент Прозрачная бесцветная жидкость Глубоколуночный планшет, 96 лунок, для KingFisher Flex/Duo Prime Пустой бесцветный полипропиленовый 96-луночный глубокий планшет объемом 2200 мкл Ванночки для реактивов Белые полистироловые ванночки объёмом 60 мл в количестве 4 штуки. Магнитный штатив для глубоколуночных планшетов Магнитный штатив на 96 лунок для выделения ДНК/РНК из глубоколуночных планшет с объемом лунки до 2 мл 1.2. Физико-химические показатели Показатели концентрации ионов водо рода, pH Буфер для связывания min 6,0 pH, max 8,0 pH Раствор для промывки №1 min 6,0 pH, max 8,0 pH Раствор для промывки №2 min 6,0 pH, max 8,0 pH 1.3. Комплектность В соответствии с п. 1.4 ТУ 21.20.23-031 -97638376-2020 1.4. Маркировка В соответствии с п. 4 ТУ 21.20.23-031-97638376-2020 1.5. Упаковка В соответствии с п. 5 ТУ 21.20.23-031 -97638376-2020 2. Функциональные характеристики 2.1 Чистота выделения ДНК/РНК, А260/280, не менее 1,7 2.2. Отсутствие контаминации компонентов набора посторонними ДНК и РНК Отрицательный результат с ОКО в контрольной ПЦР 2.3. Эффективность выделения ДНК/РНК, %, не менее 25 Примечание: при проведении контрольной ПЦР в качестве отрицательного контрольного образца (ОКО) используют деионизованную стерильную воду, свободную от ДНКаз/РНКаз. В качестве контрольного образца используют смесь плазмиды и РНК, упакованной в капсид бактериофага. 4.2 Воспроизводимость и повторяемость результатов, получаемых при использовании набора реагентов. Коэффициент вариации результатов, получаемых при использовании набора реагентов в условиях воспроизводимости, составляет не более 3%. Коэффициент вариации результатов, получаемых при использовании набора реагентов в условиях повторяемости, составляет не более 3%. --- стр. 17 --- 4.3 Характеристики клинической эффективности По результатам проведенных клинических испытаний подтверждена эффективность медицинского изделия при использовании его в соответствии с назначением путем проведения клинико-лабораторных испытаний методом обратной транскрипции (РНК), полимеразной цепной реакции (ДНК) с образцами выделенного препарата нуклеиновых кислот из 211 образцов клинического материала (ДНК из венозной крови, плазмы венозной крови, мазков со слизистой оболочки влагалища, соскобов из цервикального канала, соскобов из уретры, секрета предстательной железы; РНК из мокроты, мазков из носоглотки, мазков из ротоглотки, клеточного осадка мочи) с использованием зарегистрированных медицинских изделий для диагностики in vitro. Для оценки межсерийной сходимости процедура выделения ДНК/РНК из образцов клинического материала была проведена в двух сериях каждой формы комплектации исследуемого медицинского изделия. Для статистической обработки данных клинико лабораторных испытаний использовали метод Клоппера и Пирсона (Clopper-Pearson Confidience Interval; Clopper, С., & Pearson, E. (1934). The Use of Confidence or Fiducial Limits Illustrated in the Case of the Binomi-al. Biometrika, 26(4), 404-413. doi: 10.2307/2331986). Результаты изучения диагностических характеристик для всех форм комплектаций исследуемого медицинского изделия по образцам клинического материала приведены в таблице 4. Нижняя граница доверительного интервала определена по методу Клоппера и Пирсона. ч Тип исследуем ого материала Аналит Форма комплект ации Диагност ические характери стики Количе ство проб Количес тво наблюд ений Ди С доверительной вероятностью 95% Венозная кровь ДНК Форма комплект ации 1 100% 27 54 100% (95% ДИ:93,40%- 100%) Форма комплект ации 2 100% 27 54 100% (95% ДИ:93,40%- 100%) Плазма венозной крови ДНК Форма комплект ации 1 100% 27 54 100% (95% ДИ:93,40%- 100%) Форма комплект ации 2 100% 27 54 100% (95% ДИ:93,40%- 100%) Мокрота РНК Форма комплект ации 1 100% 28 56 100% (95% ДИ:93,62%- 100%) Форма комплект ации 2 100% 28 56 100% (95% ДИ:93,62%- 100%) Мазки из носоглотки РНК Форма комплект ации 1 100% 21 42 100% (95% ДИ;91,59%- 100%) Форма комплект ации 2 100% 21 42 100% (95% ДИ:91,59%- 100%) Мазки из ротоглотки РНК Форма комплект ации 1 100% 26 52 100% (95% ДИ:93,15%- 100%) Форма комплект ации 2 100% 26 52 100% (95% ДИ:93,15%- 100%) Мазки со слизистой оболочки влагалища ДНК Форма комплект ации 1 100% 21 42 100% (95% ДИ:91,59%- 100%) Форма комплект ации 2 100% 21 42 100% (95% ДИ:91,59%- 100%) Соскоб из цервикальн ого канала ДНК Форма комплект ации 1 100% 19 38 100% (95% ДИ:90,75%- 100%) Форма комплект ации 2 100% 19 38 100% (95% ДИ:90,75%- 100%) ► Соскоб из уретры ДНК Форма комплект ации 1 100% 15 30 100% (95% ДИ:88,43%- 100%) Форма комплект ации 2 100% 15 30 100% (95% ДИ:88,43%- 100%) Клеточный осадок мочи РНК Форма комплект ации 1 100% 15 30 100% (95% ДИ:88,43%- 100%) Форма комплект ации 2 100% 15 30 100% (95% ДИ:88,43%- 100%) --- стр. 18 --- Секрет предстател ьной железы ДНК Форма комплект ации 1 100% 12 24 100% (95% ДИ;85.75%- 100%) Форма комплект ации 2 100% 12 24 100% (95% ДИ:85,75%- 100%) 5. Перечень рисков, связанных с применением набора реагентов «НК-Экстра-plate» В пограничную зону риска вошли опасности; - потеря функциональных свойств реагентов, входящих в состав набора, из-за транспортирования, хранения или эксплуатации в несоответствующих условиях, - наличие загрязняющих примесей в полученных препаратах выделенных ДНК и РНК, проведение процедуры выделения ДНК/РНК из недостаточного количества клинического материала, невыполнение требований по пробоподготовке, проведению анализов и утилизации, вследствие работы е набором неквалифицированным персоналом, - использование непригодного для применения набора (использование по истечении срока годности или при нарушении упаковки). В области недопустимой зоны риски не выявлены. Совокупный остаточный риск применения медицинского изделия набор реагентов для выделения ДНК/РНК из клинического материала ручным методом «НК-Экстра-plate», производства ООО «ТестГен», является допустимым, польза от его применения превышает риск. ч , ♦ 6. Меры предосторожности при работе с набором Класс в зависимости от потенциального риска применения - 2а в соответствии с номенклатурной классификацией медицинских изделий, утверждаемой приказом Министерства здравоохранения Российской Федерации от 06.06.2012 N 4н. Работа должна проводиться в лаборатории, выполняющей молекулярно-биологические (ПЦР) исследования клинического материала, с соблюдением требований СанПиН 3.3686-21 "Санитарно-эпидемиологические требования по профилактике инфекционных болезней", МУ «Организация работы лабораторий, использующих методы амплификации нуклеиновых кислот при работе с материалом, содержащим микроорганизмы I-IV групп патогенности» (МУ 1.3.2569-09). При работе всегда следует выполнять следующие требования: ■ следует рассматривать исследуемые образцы как инфекционно-опасные, организовывать работу и хранение в соответствии с СанПиН 3.3686-21 "Санитарно-эпидемиологические требования по профилактике инфекционных болезней"; • убирать и дезинфицировать разлитые образцы или реактивы, иепользуя дезинфицирующие средства в соответствии с СанПиН 3.3686-21 "Санитарно-эпидемиологические требования по профилактике инфекционных болезней"; ■ лабораторный процесс должен быть однонаправленным. Анализ проводится в отдельных помещениях (зонах). Работу следует начинать в Зоне Выделения, продолжать в Зоне Амплификации и Детекции. Не возвращать образцы, оборудование и реактивы в зону, в которой была проведена предыдущая стадия процесса; ■ неиспользованные реактивы, реактивы с истекшим сроком годности, а также использованные реактивы следует удалять в соответствии с требования.ми СанПиН 2.1.3684-21 «Санитарно- эпидемиологические требования к содержанию территорий городских и сельских поселений, к водным объектам, питьевой воде и питьевому водоснабжению, атмосферному воздуху, почвам, жилы.м помещениям, эксплуатации производственных, общественных помещений, организации и проведению еанитарно- противоэпидемичееких (профилактических) мероприятий»; ■ использовать и менять при каждой операции одноразовые наконечники для автоматических дозаторов с фильтром. Одноразовую пластиковую посуду необходимо сбрасывать в специальный контейнер, содержащий дезинфицирующее средство, которое может быть использовано для обеззараживания медицинских отходов; г --- стр. 28 --- . неполный лизис - после внесения лизирующего раствора как можно тщательнее суспендировать образец (для лизиса необходимо инкубировать планщет на термощеикере при 70 течение 5 минут с включённым перемешиванием на 800 rpm), 2. nnLecH белка - нужно добиваться максимально тщательного суспендирования магнитных частиц. ™ 3. ДНКЛ-НК. причина и возможное решение - старый образец, либо образец подвергался замораживанию-обиванию - необходимо провести сбор материала повторно. Избегать замораживания образца в процессе транспортировки и хранения. эксплуатации. Набор реагентов с истекшим сроком годности применению не подлежит. • § 12. Условия хранения, транспортировки и эксплуатации набора Хранение. Набор реагентов хранить при температуре от +2 °С до +30 °С. Атмосферное давление не контролируется, т.к. не влияет на качество изделия. Набор реагентов, хранившийся с пару регламентированного режима, применению не подлежит^ ^ Срок годности вскрытых компонентов набора месяцев со дня приемки ОТК пРМпР™тия-изготовителя n j условии хранения при температуре от +2 С до +30 С. Ср ^ хранения смеси «Магнитных частиц» и «Буфера для связывания не более У^суток. хранившийся с нарушением регламентированного режима, применению не подлежит. Транспортирование. Транспортировать набор р «НК-Экстра-plate» следует транспортом всех видов в крытых транспортных средствах в соответствии с правилами перевозок, действующими на транспорте данного вида. Набор транспортировать при температуре от + ДО Атмосферн^ давление не контролируется, т.к. не влияет на качество изделия. Наборы реагентов, транспортированные нарушением температурного режима, применению не подлежат Срок годности. Срок годности набора «НК-Экстра-plate» 12 месяцев со дня приемки ОТК предприятияшзготовителя при соблюдении всех условий транспортирования, хранения и 34 13. Утилизация Наборы реагентов, пришедшие в непригодность, в том числе в связи с истечением ерока годности, подлежат утилизации в соответствии с требованиями СанПиН 2.1.3684-21 «Санитарно- эпидемиологические требования к содержанию территорий городских и сельских поселений, к водным объектам, питьевой воде и питьевому водоснабжению, атмосферному воздуху, почвам, жилым помещениям, эксплуатации производственных, общественных помещений, организации и проведению санитарно противоэпидемических (профилактических) мероприятий». В соответствии с классификацией медицинских отходов наборы относятся к классу А (эпидемиологически безопасные отходы, приближенные по соетаву к твердым бытовы.м отходам). Неиспользованные реактивы в соответствии с п. 170 СанПиН 2.1.3684-21 «Санитарно-эпидемиологические требования к содержанию территорий городских и сельских поселений, к водным объектам, питьевой воде и питьевому водоснабжению, атмосферному воздуху, почвам, жилым помещениям, эксплуатации производственных, общественных помещений, организации и проведению санитарно-противоэпидемических (профилактических) мероприятий» собираются в многоразовые емкости или одноразовые пакеты любого цвета (кроме жёлтого и красного). - Оставшиеся после выполнения работ пробирки и материалы утилизируют в соответствии с МУ 287-113 (Методические указания по дезинфекции, предстерилизационной очистке и стерилизации изделий медицинекого назначения). Жидкие ко.мпоненты (реагенты, реактивы) уничтожаются сливом в канализацию с предварительным разбавлением реагента водопроводной водой 1:100 и вывозом остатка упаковок как производственный или бытовой мусор. Потребительская упаковка набора реагентов «НК-Экстра- plate» подлежит механическому разрушению с вывозом остатков как производственного или бытового мусора. 35 --- стр. 29 --- Персонал, осуществляющий уничтожение набора реагентов, должен соблюдать правила безопасности проведения того или иного способа уничтожения. 14. Гарантийные обязательства, контакты Предприятие-изготовитель гарантирует качество и безопасность набора реагентов «НК-Экстра-plate» в течение срока годности при соблюдении требований транспортирования и хранения продукции, а также при соблюдении правил эксплуатации. При возникновении претензий по качеству наборов, нежелательных событий, которые имеют признаки неблагоприятного события (инцидента), направлять информацию по адресу: Общество с ограниченной ответственностью «ТестГен» (ООО «ТестГен»), 432072 г. Ульяновск, 44-й Инженерный проезд, дом 9, офис 13 Тел.: +7 (499) 705-03-75 www.testgen.ru Служба технической поддержки: Тел.:+7 927 981 58 81 E-mail: help@testgen.ru Инструкция по применению соответствует требованиям Приказа Минздрава России от 09.01.2014 №2н, Приказа Минздрава России от 19.01.2017 № 11 н, ГОСТ 51088-2013. ГОСТ ISO 14971- 2011 Изделия медицинские. Применение .менеджмента риска к медицинским изделиям. ГОСТ 15.309-98 Системы разработки и постановки продукции на производство. Испытания и приемка выпускаемой продукции. Основные положения ГОСТ Р 51088-2013 Наборы реагентов для клинической лабораторной диагностики. Общие технические условия. ГОСТ Р 51352-2013 Наборы реагентов для клинической лабораторной диагностики. Методы испытаний. ГОСТ РЕН 13612- 2010 Оценка функциональных характеристик медицинских изделий для диагностики in v itro ГОСТ Р 56894-2016 Сводный комплект технической документации для де.монстрации соответствия общим принципам обеспечения безопасности и основных функциональных характеристик медицинских изделий для диагностики in v itro ГОСТРИСО 18113- 1-2015 » ■ Медицинские изделия для диагностики in v itro . Информация, предоставляемая изготовителем (маркировка). Часть 1. Термины, определения и общие требования. ГОСТРИСО 18113- 2-2015 Медицинские изделия для диагностики in v itro . Информация, предоставляемая изготовителем(маркировка). Часть 2. Реагенты для диагностики in v itro для профессионального применения ГОСТ Р ИСО 23640- 2015 Изделия медицинские для диагностики in vitro. Оценка стабильности реагентов для диагностики in vitro. --- стр. 30 --- ГОСТРИСО 15223- 1-2020 Изделия медицинские. Символы, применяемые при маркировании на медицинских изделиях, этикетках и в сопроводительной документации. 4.1. Основные требования. ГОСТ ISO 13485- 2017 Изделия медицинские. Системы менеджмента качества. Требования для целей регулирования ГОСТ 2.114-2016 Единая система конструкторской документации. Технические условия. ГОСТ 2.104-2006 Единая система конструкторской документации (ЕСКД). Основные надписи ГОСТР 1.3-2018 Стандартизация в Российской Федерации. Технические условия на продукцию. Общие требования к содержанию, оформлению, обозначению и обновлению. Примечание - Указанные выше стандарты были действующими на момент утверждения инструкции по применению. В дальнейшем, при пользовании документом, целесообразно проверить действие ссылочных нормативных документов на текущий момент. Если ссылочный документ заменен или изменен, то при применении настоящего документа следует пользоваться замененным (измененным) документом. н