Набор реагентов для выявления ДНК Candida albicans и ДНК Gardnerella vaginalis методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени (РеалБест ДНК Candida albicans/Gardnerella vaginalis) по ТУ 21.20.23-152-23548172-2021 — инструкция и характеристики

РУ: РЗН 2022/16472 от 03.02.2022 · класс риска 2б

Производитель: АО "Вектор-Бест" (Россия)

Вид изделия: Множественные организмы связанные с вагинитом нуклеиновые кислоты ИВД, набор, анализ нуклеиновых кислот

В госконтрактах 44-ФЗ: 6 контрактов, медианная цена за единицу 12 835 ₽.

Автоматически отфильтрованный фрагмент инструкции по применению (страницы, где похоже, что есть таблица технических характеристик) — не полный документ. Карточка РУ на портале Росздравнадзора →

Текст инструкции: технические характеристики

--- стр. 1 ---
/
«УТВЕРЖДАЮ»
ИНСТРУКЦИЯ
по применению набора реагентов для выявления ДНК Candida albicans  и ДНК Gardnerella
vaginalis методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени  
«РеалБест ДНК Candida albicans/Gardnerella vaginalis»
1. НАЗНАЧЕНИЕ
Набор реагентов для выявления ДНК Candida albicans и ДНК Gardnerella vaginalis мето­
дом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени «РеалБест ДНК Candida  
albicans/Gardnerella vaginalis» предназначен для качественного выявления ДНК Candida albi­
cans и ДНК Gardnerella vaginalis^ выделенной из клинических образцов (соскобов эпителиаль­
ных клеток, образцов мочи) методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с гибридизаци-  
онно-флуоресцентной детекцией продуктов ПЦР в режиме реального времени. Набор может  
быть использован при диагностике инфекций, передающихся половым путём.
2. ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА
2.1. Принцип метода.
Принцип анализа основан на регистрации процесса амплификации выбранного участка  
ДНК возбудителей инфекций в ходе проведения ПЦР.
Процесс амплификации заключается в повторяющихся циклах: температурная денату­
рация ДНК-матрицы, отжиг праймеров с комплементарными последовательностями ДНК-  
матрицы, синтез комплементарной цепи с этих праймеров Taq ДНК-полимеразой. В основе  
регистрации процесса амплификации лежит измерение сигналов флуоресценции в каждом  
цикле ПЦР. Увеличение сигналов флуоресценции происходит благодаря использованию ги-  
бридизационного ДНК-зонда, специфичного для выбранного участка ДНК возбудителя ин­
фекции, который в ходе реакции связывается с одной из цепей ДНК, обеспечивая также до­
полнительную специфичность метода. ДНК-зонд содержит на 5'-конце флуоресцентный кра­
ситель, а на З'-конце -  гаситель флуоресценции, значительно снижающий интенсивность
Инструкция составлена сотрудниками АО «Вектор-Бест»: Директором  
по производству Ткачевым В.К. и нач. отделения производства ПЦР-наборов Трухиной А.В.


--- стр. 2 ---
флуоресценции. В ходе полимеразного синтеза комплементарной цепи, благодаря 5'-3'-нук-  
леазной активности Taq ДНК-полимеразы, зонд расщепляется с 5'-конца и происходит раз­
общение красителя и гасителя, приводящее по мере накопления продукта реакции к возрас­
танию сигнала флуоресценции. При этом измеряемая интенсивность флуоресценции зависит  
от количества образовавшихся специфических ампликонов и динамика нарастания флуорес­
ценции определяется исходным количеством целевой ДНК в образце.
Учёт эффективности выделения ДНК из образцов обеспечивается выделением ДНК  
возбудителей инфекций из исследуемых образцов совместно с предварительно внесённым  
внутренним контрольным образцом (ВКО).
2.2. Состав набора:
компонент набора (сокращение)  
Описание.
Количество
Положительный контрольный образец универсальный
(ПКО)
Бесиветная жидкость, содержит натрия азид (0,05%)
1 пробирка, 1 мл
Готовая реакционная смесь для ПЦР
Лиофилизированная
96 пробирок
Оптическая пленка 1,5 листа
Вкладыш со штрих-кодом 1 шт.
2.3. Условия применения.
Аналитические и диагностические характеристики набора были валидированы при вы­
делении ДНК из клинических образцов (соскобов эпителиальных клеток, образцов мочи) с  
использованием наборов: «РеалБест ДНК-экспресс», «РеалБест ДНК-экстракция 3», «Реал-  
Бест экстракция 100», «РеалБест УниМаг» и «Лизирующий раствор» производства АО «Век-  
тор-Бест».
Набор применяется с регистрирующими амплификаторами планшетного типа:  
«СРХ96» (фирма Bio-Rad, США); «ДТпрайм» (ООО «НПО ДНК-Технология», Россия).
Набор рассчитан на проведение анализа 96 образцов, включая контрольные образцы.
3. АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
3.1. Аналитическая чувствительность:
Чувствительность выявления ДНК Candida albicans -  не более 100 копий в пробе. Опре­
деляется по стандартному образцу предприятия. Образцы с содержанием ДНК Candida albicans 
100 копий в пробе в 100 % случаев дают положительный результат.
Чувствительность выявления ДНК Gardnerella vaginalis -  не более 100 копий в пробе.  
Определяется по стандартному образцу предприятия. Образцы с содержанием ДНК Card- 
nerella vaginalis 100 копий в пробе в 100 % случаев дают положительньш результат.


--- стр. 3 ---
3.2. Аналитическая специфичность:
Был проведен in silico анализ последовательностей праймеров и зондов по базам после­
довательностей микроорганизмов и вирусов, которые могут присутствовать в урогенитальном  
тракте человека {Chlamydia trachomatis, Ureaplasma species, Mycoplasma hominis, Mycoplasma  
genitalium, Trichomonas vaginalis. Neisseria gonorrhoeae, Candida albicans, Gardnerella  
vaginalis, ЦМВ, ВПГ- i ,2, ВЭБ, Lactobacillus species^ Atopobium vaginae, Prevotella species, Mo-  
biluncus curtisii, Mobiluncus mulieris,  ВПЧ разных типов и т.д.). Возможность перекрестных  
реакций исключена.
Аналитическая специфичность выявления ДНК Candida albicans  и ДНК Gardnerella 
vaginalis была подтверждена отсутствием перекрестных ложноположительных сигналов при  
анализе образцов, содержащих возбудители других урогенитальных заболеваний {Chlamydia  
trachomatis, Ureaplasma species, Mycoplasma hominis. Mycoplasma genitalium. Trichomonas  
vaginalis. Neisseria gonorrhoeae,  ЦМВ, ВПГ-1,2, ВЭБ, ВПЧ 16/18, Lactobacillus species,  
Atopobium vaginae, Prevotella species, Mobiluncus curtisii, Mobiluncus mulieris).
3.3. Диагностическая чувствительность выявления ДНК Candida albicans:  клинические  
испытания, проведенные на 64 положительных образцах, содержащих ДНК Candida albicans,  
показали 100 % чувствительность (интервал 94,4 % -100 %, с доверительной вероятностью 95  
%);
Диагностическая чувствительность выявления ДНК Gardnerella vaginalis:  клинические  
испытания, проведенные на 77 положительных образцах, содержащих ДНК Gardnerella  
vaginalis, показали 100 % чувствительность (интервал 95,3 % - 100 %, с доверительной веро­
ятностью 95 %);
3.4. Диагностическая специфичность выявления ДНК Candida albicans:  клинические ис­
пытания, проведенные на 138 отрицательных образцах, не содержащих ДНК Candida albicans,  
показали 100 % специфичность (интервал 97,4 % - 100 %, с доверительной вероятностью 95  
%);
Диагностическая специфичность выявления ДНК Gardnerella vaginalis:  клинические ис­
пытания, проведенные на 125 отрицательных образцах, не содержащих ДНК Gardnerella  
vaginalis, показали 100 % специфичность (интервал 97,1 % - 100 %, с доверительной вероят­
ностью 95 %);
3.5. Воспроизводимость результатов:
При тестировании в двух независимых постановках двумя разными операторами на двух  
сериях набора образцов с разной вирусной нагрузкой в 8 повторах каждый внутрипостановоч-  
ная, внутрисерийная и межсерийная воспроизводимость результатов составила 100 %. Коэф­
фициент вариации Ct не более 4 %.


--- стр. 8 ---
7.6. Запрограммировать положение пробирок с исследуемыми образцами и контроль­
ными образцами, согласно инструкции к используемому прибору.
7.7. Запустить амплификатор для вьшолнения заданного протокола.
8. АНАЛИЗ И УЧЁТ РЕЗУЛЬТАТОВ
8.1. Условия анализа и учёта результатов.
8.1.1. В ПКО программа должна фиксировать:
-  нарастание сигнала амплификации ДНК ВКО (канал «РАМ») и определять значение  
порогового цикла Ct ВКО;
-  нарастание сигнала амплификации ДЖ" Candida albicans  (канал «ROX») и определять 
значение порогового цикла Ct ПКО;
-  нарастание сигнала амплификации ДНК Gardnerella vaginalis  (канал «НЕХ»^ и опре­
делять значение порогового цикла Ct ПКО;
8.1.2. В ОКО программа должна фиксировать нарастание сигнала амплификации ДНК  
ВКО (канал «РАМ») и определять Ct ВКО, при этом программа не должна регистрировать  
нарастания сигнала специфического продукта амплификации ДНК с Ct по каналу «НЕХ»  
меньше или равно 32 и по каналу «ROX» меньше или равно 35.
Если для ОКО значение Ct по каналу «НЕХ» меньше или равно 32 и/или значение Ct  
по каналу по каналу «ROX» меньше или равно 35, то это свидетельствует о наличии конта­
минации (см. п. 8.2.4).
8.1.3. В каждом исследуемом образце программа должна фиксировать нарастание сиг­
нала амплификации ДНК ВКО (канал «РАМ») и определять CtBKO.
8.2. Учёт результатов.
8.2.1 Вычислить (Ct ВКО)ср как среднее значение Ct ВКО всех анализируемых образцов  
(включая ПКО и ОКО). Отбраковке подлежат значения Ct ВКО, отличающиеся более чем на  
2 от значения (Ct ВКО)ср. После отбраковки пересчитать (Ct ВКО)ср для оставшихся значений.
8.2.2. Анализируемый образец считается отрицательным (не содержащим ДНК  
Gardnerella vaginalis  и ДНК Candida albicans),  если для этого образца значение Ct по каналу  
«НЕХ» больше 32 или не определяется и по каналу «ROX» больше 35 или не определяется.
Если для такого образца значение Ct ВКО отличается от значения (Ct ВКО)ср более чем  
на 2, то результат по данному образцу не подлежит анализу и учету как отрицательный. Необ­
ходимо провести повторный анализ данного образца, начиная с этапа выделения ДНК.
8.2.3 Анализируемый образец считается положительным, содержащим ДНК Candida  
albicans, если для этого образца значение Ct по каналу «ROX» меньше или равно 35.
Анализируемый образец считается положительным, содержащим ДНК Gardnerella  
vaginalis, если для этого образца значение Ct по каналу «НЕХ» меньше или равно 32.
8


--- стр. 9 ---
8.2.4. В случае контаминации все положительные результаты по данной индивидуаль­
ной постановке ПЦР считаются недостоверными. Требуется предпринять меры по выявлению  
и ликвидации источника контаминации и повторить анализ всех образцов данной постановки,  
для которых получен положительный результат. Образцы данной постановки, анализ которых  
дал отрицательный результат, следует учитывать, как отрицательные.
9. УСЛОВИЯ ТРАНСПОРТИРОВАНИЯ, ХРАНЕНИЯ И ПРИМЕНЕНИЯ НАБОРА
9.1. Транспортировать изделия следует транспортом всех видов в крытых транспорт­
ных средствах в соответствии с правилами перевозок, действующими на транспорте данного  
вида, при температуре (2-8) °С. Допускается транспортирование при температуре до 26 °С не  
более 10 суток.
9.2. Хранение набора в упаковке предприятия-изготовителя должно осуществляться  
при температуре (2-8) °С в течение всего срока годности в холодильных камерах или холо­
дильниках, обеспечивающих регламентированный температурный режим с ежедневной реги­
страцией температуры.
9.3. Срок годности набора -  12 месяцев со дня выпуска. Не допускается применение  
наборов по истечении срока их годности.
9.4. Для получения надёжных результатов необходимо строгое соблюдение инструк­
ции по применению набора.
9.5. Изделие не требует технического обслуживания и не подлежит ремонту.
10. ГАРАНТИЙНЫЕ ОБЯЗАТЕЛЬСТВА
10.1. Производитель гарантирует соответствие выпускаемых изделий требованиям нор­
мативной и технической документации.
Безопасность и качество изделия гарантируются в течение всего срока годности.
10.2. Производитель отвечает за недостатки изделия, за исключением дефектов, воз­
никших вследствие нарушения правил пользования, условий транспортирования и хранения,  
либо действия третьих лиц, либо непреодолимой силы.
10.3. Производитель обязуется за свой счет заменить изделие, технические и функцио­
нальные характеристики (потребительские свойства) которого не соответствуют нормативной  
и технической документации, если указанные недостатки явились следствием скрытого де­
фекта материалов или некачественного изготовления изделия производителем.


--- стр. 10 ---
По вопросам, касающимся качества набора «РеалБест ДНК Candida albicans/Gardnerella 
vaginalis», следует обращаться в АО «Вектор-Бест» по адресу:
630117, г. Новосибирск-117, аУя 492,  
тел.: (383) 252-51-62, 227-60-30; тел./факс: (383) 252-51-81, 252-51-77;
E-mail: plkobtk(^.vector-best. ru
Консультацию специалиста по работе с набором можно получить по тел.: (383) 252-51-75.
Начальник отделения 
производства ПЦР-наборов  
АО «Вектор-Бест»
Директор по производству  
АО «Вектор-Бест»
Проректор по научной работе  
ФГБОУ ВО НГМУ Минздрава России  
Д.М.Н., профессор
м.п.
А.В. Трухина
В.К. Ткачев
10


--- стр. 11 ---


--- стр. 12 ---
/ ЪЕРЖДАЮ»
[ьный директор 
)-Бест»
М.Д. Хусаинов  
2021 г.
Образцы маркировки на Набор реагентов
и ДНК Gardnerella vaginalis  методом по,
в режиме реального вр  
«РеалБест ДНК Candida albicans/Gardnerella vaginalis»
Candida albicans  
\ реакции
1. Образцы этикеток на компоненты набора “РеалБест ДНК Candida albicans/Gardnerella vaginalis’
Наименование компонента Этикетка
Готовая реакционная смесь для ПЦР 
(ГРС)
IYD I РеалБест ДНК Candida albicans/ ^
--------1 Gardnerella vaginalis ^
готовая реакционная 
I Г  W  смесь для ПЦР
(96 пробирок)
СТхххх хххх-хх
Положительный контрольный образец
универсальный
(ПКО)
АО «Вектор-Бест»
® п к о - Г |
универсальный
1  мл
[ ^ Х Х Х Х  Й ХХХХ-ХХ
2. Образцы этикеток на коробке набора “РеалБест ДНК Candida albicans/Gardnerella vaginalis’
2.1. Верхняя этикетка.
х-хххх
набор реегектовдля выявления 
ДНК Csndida albicans  
и ДНК Gardnerella vaginalis  
методом полимеразной цепной 
реаю^ии в режиме реального времени
РеалБест ДНК Candida albicans/ 
Gardnerella vaginalis
[ l o t I^  XXXX состав:
1. Положительный контрольный образец 1 np. 1мл хххх 
универсальный
2. Готовая реакционная смесь для ПЦР 96 пр. хххх
3. Оптическая пленка 1,5 листа
4. Вкладыш со штрих-кодом 1 шт.
ТУ 21,20.23-152-23548172-2021 
РУ
2.2. Боковая этикетка №1.
Х-ХХХХ
■ ' T s V . .
LOT ХХХХ
cf] хххх-хх-хх 
^ хххх-хх-хх
РеалБест ДНК Candida albicans/ 
Gardnerella vaginalis
□ 3
xxxxxxxxxxxxxxx


--- стр. 13 ---
2.3. Боковая этикетка №2.
АО «Вектор-Бест»
Россия, 630559, Новосибирская область, р.п. Кольцово, 
Научно-производственная зона, корпус 36, комната 211, 
тел./факс: (383) 332-67-49, 332-67-52 
E-mail: vbmarket@vector-best.ru  
WWW.vector-best.ru
Примечание. Текст боковой этикетки №2 может быть нанесен непосредственно  
на коробку типографским способом
«СОГЛАСОВАНО» 
Директор по производству 
АО «Вектор-Бест» В.К. Ткачев
2021 г.