Набор реагентов "FirstKit" для подготовки библиотек и секвенирования нуклеиновых кислот на системе "F-Genetics" по ТУ 21.20.23-004-03569019-2019 — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 2 --- (fjgenetics First complex decisions IVD Набор реагентов «FirstKit» для подготовки библиотек и секвенирования нуклеиновых кислот на системе «F-Genetics» ИНСТРУКЦИЯ по ПРИМЕНЕНИЮ ш А АО "Ферст Генетике", 121205, Россия, г. Москва, территория инновационного центра "Сколково", Большой бульвар, дом 42, строение 1, помещение 619 тел. (499) 673-02-88, e-mail: info@f-genetics.com --- стр. 3 --- ОГЛАВЛЕНИЕ 1 .ОПИСАНИЕ МЕДИЦИНСКОГО ИЗДЕЛИЯ ..............................................................................3 1.1. НАИМЕНОВАНИЕ И СОСТАВ............................................................................................3 1.2. НАЗНАЧЕНИЕ..........................................................................................................................6 1.3. ПОТЕНЦИАЛЬНЫЙ ПОТРЕБИТЕЛЬ.................................................................................6 1.4. ОПИСАНИЕ ЦЕЛЕВОГО АНАЛИТА..................................................................................6 1.5. УСЛОВИЯ ПРИМЕНЕНИЯ...................................................................................................6 1.6. ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ....................................................................................................7 1.7. ПОКАЗАНИЯ К ПРИМЕНЕНИЮ..........................................................................................7 1.8. ПРОТИВОПОКАЗАНИЯ К ПРИМЕНЕНИЮ .....................................................................7 1.9. ВОЗМОЖНЫЕ ПОБОЧНЫЕ ДЕЙСТВИЯ.........................................................................7 1.10. РИСКИ ПРИМЕНЕНИЯ МЕДИЦИНСКОГО ИЗДЕЛИЯ ..............................................7 1.11. КЛИНИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ ИССЛЕДОВАНИЯ....................................................7 1.11.1. Обоснованность метода..................................................................................................7 1.11.2. Принцип метода.................................................................................................................8 1.11.3. Клиническая значимость исследования..................................................................10 1.11.4. Функциональные характеристики набора................................................................10 1.11.4.1. Повторяемость и воспроизводимость ..............................................................10 1.11.4.2. Потенциально интерферирующие вещества..................................................12 1.11.4.3. Процент позитивного согласия и процент негативного согласия набора13 1.11.4.4. Биоинформатические параметры набора........................................................14 2. ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА...................................................................................................16 2.1. Варианты исполнения, состав и комплектность..........................................................16 3. КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА............................................................................................................25 3.1. Внутренний контроль качества.........................................................................................25 3.1.1. Отрицательный и положительный контроля исследования ..........................25 3.1.2. Мониторинг лаборатории на наличие контаминации .......................................26 4. ОГРАНИЧЕНИЯ МЕТОДИКИ ИССЛЕДОВАНИЯ.................................................................26 5. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ И ПРЕДУПРЕЖДЕНИЯ ................................................27 6. ДОПОЛНИТЕЛЬНОЕ ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ ...............................................31 7. ИССЛЕДУЕМЫЙ МАТЕРИАЛ...................................................................................................33 8. ПРОВЕДЕНИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ...........................................................................................34 8.1. Создание Запланированного запуска секвенатора...................................................35 8.2. Запуск станции пробоподготовки для подготовки матрицы....................................35 8.3. Инициализация секвенатора............................................................................................52 8.4. Очистка станции пробоподготовки..................................................................................56 8.5. Анализ результатов секвенирования.............................................................................62 ДОПОЛНЕНИЕ А Поиск и устранение неисправностей .......................................................63 ДОПОЛНЕНИЕ Б Дополнительные процедуры ......................................................................66 9. УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ, ТРАНСПОРТИРОВАНИЯ И ПРИМЕНЕНИЯ НАБОРА ......68 10. МАРКИРОВКА..............................................................................................................................70 11. УПАКОВКА....................................................................................................................................72 12. ГАРАНТИИ ПРОИЗВОДИТЕЛЯ .............................................................................................74 13. БИБЛИОГРАФИЯ........................................................................................................................74 14. ПЕРЕЧЕНЬ НАЦИОНАЛЬНЫХ НОРМАТИВНЫХ ДОКУМЕНТОВ/ СТАНДАРТОВ.75 15. УТИЛИЗАЦИЯ............................................................................................................................76 16. ТРЕБОВАНИЯ К ОХРАНЕ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ ПРИ ПРИМЕНЕНИИ МЕДИЦИНСКОГО ИЗДЕЛИЯ.........................................................................................................76 Версия 25.02.2022 --- стр. 4 --- 1.ОПИСАНИЕ МЕДИЦИНСКОГО ИЗДЕЛИЯ 1.1. НАИМЕНОВАНИЕ И СОСТАВ «Набор реагентов «FirstKit» для подготовки библиотек и секвенирования нуклеиновых кислот на системе «F-Genetics»» по ТУ 21.20.23-004-03569019-2019, в составе: I. Набор реагентов, в вариантах исполнения: 1. «FirstKit 550», в составе: 1.1. Набор полупроводниковых чипов 550 (4 чипа в упаковке), 2 шт. 1.2. Набор материалов «ОФ» для станции пробоподготовки, 4 шт.: 1.2.1. Планшет 96-луночный; 1.2.2. Профольгированная крышка; 1.2.3. Наконечники одноразовые (96 шт. в штативе); 1.2.4. Пробирки (12 шт. в упаковке); 1.2.5. Крышка для центрифуг (2 шт.); 1.2.6. Штатив с пробирками для модуля обогащения; 1.2.7. Адаптер для чипа (2 шт.). 1.3. Набор картриджей «ОФ» с растворами для амплификации библиотек для станции пробоподготовки (4 картриджа в упаковке). 1.4. Набор картриджей «ОФ» с реагентами для станции пробоподготовки (4 картриджа в упаковке). 1.5. Набор растворов «ОФ» для секвенирования: 1.5.1. Промывочный раствор «ОФ», 4 бутыли (4 х 1,5 л); 1.5.2. Раствор для очистки «ОФ», 1 бутыль (250 мл). 1.6. Набор картриджей «ОФ» с реагентами для секвенирования (4 картриджа в упаковке). 2. «FirstKit 540», в составе: 2.1. Набор полупроводниковых чипов 540 (4 чипа в упаковке), 2 шт. 2.2. Набор материалов «ОФ» для станции пробоподготовки, 4 шт.: 2.2.1. Планшет 96-луночный; 2.2.2. Профольгированная крышка; 2.2.3. Наконечники одноразовые (96 шт. в штативе); 2.2.4. Пробирки (12 шт. в упаковке); 2.2.5. Крышка для центрифуг (2 шт.); 2.2.6. Штатив с пробирками для модуля обогащения; 2.2.7. Адаптер для чипа (2 шт.). 2.3. Набор картриджей «ОФ» с растворами для амплификации библиотек для станции пробоподготовки (4 картриджа в упаковке). 2.4. Набор картриджей «ОФ» с реагентами для станции пробоподготовки (4 картриджа в упаковке). 2.5. Набор растворов «ОФ» для секвенирования: 2.5.1. Промывочный раствор «ОФ», 4 бутыли (4 х 1,5 л); 2.5.2. Раствор для очистки «ОФ», 1 бутыль (250 мл). 2.6. Набор картриджей «ОФ» с реагентами для секвенирования (4 картриджа в упаковке). Версия 25.02.2022 3 --- стр. 10 --- микросфер, не несущих ампликоны. Комплексы имеют более низкую плотность и остаются в супернатанте, в то время как микросферы без ДНК образуют осадок. Супернатант отделяют и обрабатывают щёлочью для разрушения комплексов. Парамагнитные микросферы с ДНК отделяют от немагнитных полистирольных частиц при помощи магнитной сепарации. Такой протокол позволяет провести многократное обогащение микросфер, несущих одноцепочечные амплифицированные фрагменты ДНК. Для получения готовой для полупроводникового секвенирования матрицы, к микросферам с ДНК добавляют олигонуклеотид-затравку и ДНК-полимеразу для секвенирования, которые образуют комплекс с одноцепочечными фрагментами ДНК, закрепленными на поверхности микросфер. Далее станция пробоподготовки автоматически наносит исследуемые образцы на специализированный чип для полупроводникового секвенирования. Данный процесс является полностью автоматизированным и выполняется на станции пробоподготовки, входящей в состав системы высокопроизводительного секвенирования «F-Genetics». Чип извлекают из станции пробоподготовки и переносят в генетический секвенатор, входящий в состав системы высокопроизводительного секвенирования «F-Genetics». Полупроводниковое секвенирование основано на регистрации локального изменения pH в микролунках на полупроводниковом микрочипе при последовательном удлинении олигонуклеотидной затравки ДНК-полимеразой. Микролунки, содержащие микрочастицы с амплифицированными на поверхности фрагментами ДНК-библиотек, предназначенными для секвенирования, поочередно промывают реагентами, содержащими дезоксирибонуклеотидтрифосфаты (dNTP) одного вида, входящими в состав картриджа для секвенирования. Если введенный dNTP является комплементарным к нуклеотиду матрицы, он включается в растущую комплементарную цепь. Это вызывает высвобождение ионов водорода и срабатывание ионного датчика, который указывает, что реакция произошла. Если в последовательности матричной цепи присутствует повтор одного нуклеотида, несколько молекул dNTP будут присоединены в одном цикле. Это приводит к увеличению количества образовавшихся ионов водорода и пропорционально более высокому электрическому сигналу. Секвенатор считывает сигнал из каждой лунки чипа и формирует пул DAT файлов, содержащих информацию о разнице потенциалов в каждой отдельной лунке во время каждой подачи нуклеотидов. Затем эти данные суммируются, формируя данные по каждой лунке со всеми подачами нуклеотидов (flow). Затем аналоговые значения переводятся в цифровые, формируя файл WELLS. Последний передается с дискового пространства секвенатора на сервер, управляемый программным обеспечением секвенатора. Здесь происходит определение последовательности нуклеотидов и распознавание финальных прочтений. ПО осуществляет тримминг (удаление последовательности адаптеров, удаление З'-концов низкого качества) и фильтрацию прочтений низкого качества для увеличения точности консенсусных последовательностей библиотек (удаление коротких фрагментов, димеров адаптеров, прочтения, потерявшие исходно заданный нуклеотидный ключ «нуклеотидный ключ» из 4-х нуклеотидов, прочтения с низким качеством сигнала, поликлональные прочтения). Затем осуществляется распределение прочтений по исходным библиотекам согласно идентифицированным в ходе секвенирования молекулярным баркодам. Полученные последовательности прочтений выравниваются на референсный геном и формируется выходной файл BED. BED файл передается в программное обеспечение «1оп Reporter» (доступ к ПО, установленному на сервере "Ion Версия 25.02.2022 9 --- стр. 11 --- Reporter", входящему в состав системы "F-Genetics", осуществляется по локальной сети). Далее интерпретация результатов осуществляется с использованием программного обеспечения «1оп Reporter». 1.11.3. Клиническая значимость исследования Молекулярная диагностика в настоящее время играет важную роль в медицине и, в частности, в онкологии, так как возникновение злокачественных новообразований напрямую связано с накоплением мутаций в молекуле ДНК. Важность молекулярного тестирования у пациентов со злокачественными новообразованиями продолжает расти с каждым годом по мере появления большего количества таргетных препаратов. Лечение, ранее основанное на анатомическом происхождении рака (например, легких, молочной железы, толстой кишки, предстательной железы), расширяется и включает использование геномных тестов для стратификации пациентов на подгруппы, основанные на специфических молекулярных факторах отдельных опухолей. Молекулярно-генетическое тестирование, являясь неотъемлемой частью практической онкологии, позволяет врачам выбирать наиболее подходящие методы лечения для каждого индивидуального пациента. Клинические рекомендации для лечения различных видов рака содержат указания на перечни схем противоопухолевой лекарственной терапии с использованием таргетных препаратов [10]. Использование набора реагентов «FirstKit» совместно с панелями для создания библиотек для различных целевых регионов нуклеиновых кислот человека позволяет своевременно выявлять молекулярные мишени опухоли и назначать эффективное лечение, с учетом исследуемых целевых регионов и выявленных маркеров прогноза агрессивности опухоли, эффективности или резистентности опухоли к тем или иным препаратам. Набор «FirstKit» позволяет провести автоматизированную подготовку библиотек и дальнейшее секвенирование ДНК в кратчайшие сроки, что немаловажно для выбора стратегии и своевременного назначения терапии онкологического заболевания. Набор реагентов используется с панелями для создания библиотек для различных целевых регионов нуклеиновых кислот человека и позволяет получать большое количество данных о генетической информации тестируемого образца с целью подбора таргетной терапии, определения прогноза течения заболевания, а также выявления органной локализации опухолей с неизвестным первичным очагом. Результаты, полученные при использовании набора, следует рассматривать и интерпретировать врачу-генетику в сочетании с данными анамнеза и других инструментальных и лабораторных исследований при ведении пациента, для определения и прогнозирования заболевания и выбора тактики лечения. 1.11.4. Функциональные характеристики набора 1.11.4.1. Повторяемость и воспроизводимость Повторяемость результата набора «FirstKit» оценивали путем тестирования разведений стандартных образцов предприятия одним оператором, на одном приборе в один день. Воспроизводимость результата набора «FirstKit» оценивали путем тестирования разведений стандартных образцов предприятия двумя операторами, на двух разных приборах, в разные дни. Определяли последовательность генов, указанных в паспорте стандартного образца предприятия. Версия 25.02.2022 10 --- стр. 12 --- Тестирование каждого разведения для оценки повторяемости проводилось в 192 повторах, для оценки воспроизводимости - в 384 повторах. Значения характеристик, приведенные в таблицах 1 и 2, достигаются при соблюдении правил, указанных в разделе «Исследуемый материал». Таблица 1 Повторяемость Обозначе ние СОП Всего количест во повторов /система «F- Genetics Плюс» Позитивн ое согласие (Система «F- Genetics Плюс») Негативн ое согласие (Система «F- Genetics Плюс») Повторяе мость, % Всего количест во повторов /система «F- Genetic» Позитивн ое согласие (Система «F- Genetic») Негативн ое согласие (Система «F- Genetic») Повторяе мость, %* соп ж- 10 ДНК 12 12 0 100 12 12 0 100 сопж- 15 ДНК 12 12 0 100 12 12 0 100 соп ж- 10 РНК 12 12 0 100 12 12 0 100 сопж- 15 РНК 12 12 0 100 12 12 0 100 соп м- 10 ДНК 12 12 0 100 12 12 0 100 соп м- 15 ДНК 12 12 0 100 12 12 0 100 соп м- 10 РНК 12 12 0 100 12 12 0 100 соп м- 15 РНК 12 12 0 100 12 12 0 100 * с применением панелей для создания ДНК и РНК-библиотек, входящих в состав «ОнкоФокус» Воспроизводимость набора реагентов Таблица 2 Обозначе ние СОП Всего количест во повторов /система «F- Genetics Плюс» Позитивн ое согласие (Система «F- Genetics Плюс») Негативн ое согласие (Система «F- Genetics Плюс») Воспроиз водимост ь, % Всего количест во повторов /система «F- Genetic» Позитивн ое согласие (Система «F- Genetic») Негативн ое согласие (Система «F- Genetic») Воспроиз водимост ь, %* СОПЖ- 10 ДНК 24 24 0 100 24 24 0 100 СОПЖ- 15 ДНК 24 24 0 100 24 24 0 100 СОПЖ- 10 РНК 24 24 0 100 24 24 0 100 сопж- 15 РНК 24 24 0 100 24 24 0 100 СОП М- 10 ДНК 24 24 0 100 24 24 0 100 соп м- 15 ДНК 24 24 0 100 24 24 0 100 Версия 25.02.2022 11 --- стр. 13 --- Обозначе ние СОП Всего количест во повторов /система «F- Genetics Плюс» Позитивн ое согласие (Система «F- Genetics Плюс») Негативн ое согласие (Система «F- Genetics Плюс») Воспроиз води мост ь, % Всего количест во повторов /система «F- Genetic» Позитивн ое согласие (Система «F- Genetic») Негативн ое согласие (Система «F- Genetic») Воспроиз водимост ь, %* соп м- 10 РНК 24 24 0 100 24 24 0 100 соп м- 15 РНК 24 24 0 100 24 24 0 100 * с применением панелей для создания ДНК и РНК-библиотек, входящих в состав набора реагентов «ОнкоФокус» 1.11.4.2. Потенциально интерферирующие вещества Потенциально интерферирующими веществами могут быть формалин, фиксирующий ткань, во время подготовки образца, протеаза, ксилол, этанол, парафин, содержание гемоглобина в образце, содержание некротической и неопухолевой ткани в образце. Данные потенциально интерферирующие вещества могут оказывать влияние на этапе выделения ДНК/РНК из биологического материала и создания библиотек, в то время как набор «FirstKit» предназначен для подготовки и секвенирования уже созданных библиотек. Исследуемые потенциально интерферирующие вещества не относятся к этапам анализа, проводимых набором «FirstKit», однако данные вещества могут оказывать влияние на качество созданных библиотек. Исследование проведено с применением компонентов набора реагентов «ОнкоФокус» (выделение ДНК/РНК из образцов с помощью Набора реагентов «РНК/ДНК ОнкоЭкстракт», обратная транскрипция РНК с помощью Набора реагентов для обратной транскрипции, создание баркодированных амплифицированных библиотек ДНК и РНК с помощью Набора «ОФ» для ручного создания библиотек, баркодирование библиотек с помощью Набора баркодов 1-16, измерение концентрации библиотек с помощью Набора для измерения концентрации библиотек). Влияние интерферирующих веществ устраняется следующим образом: - оптимальным для фиксации является 10%-ный раствор формалина, забуференный при pH 6,8-7,0, время фиксации не более 24 часов. Не рекомендуется использовать фиксирующие растворы с неустановленным pH. Кислый формалин приводит к образованию в ткани формалинового пигмента, вследствие взаимодействия с гемоглобином, что снижает качество образца; - добавление протеазы в образец в концентрации 20 мг/мл не оказывает интерферирующего влияния на результаты тестирования набора; - более длительная инкубация ксилолом (до 15 мин) и значительный избыток ксилола (до 200 мкл) на этапе депарафинизации могут оказывать влияние на качество образца, однако не оказывают интерферирующего влияния на результаты тестирования набора реагентов; - остаток этанола (до 5% от общего объема реакционной смеси) в образцах в процессе очистки библиотек может негативно повлиять на качество библиотеки и секвенирование данных. При отмывке образца на магнитных частицах необходимо убедиться, что пробирка высушена и не содержит остатков этанола; Версия 25.02.2022 12 --- стр. 14 --- - избыток парафина (до количества, эквивалентного размеру образца) не оказывает интерферирующего влияния на результаты исследования, однако может забивать картридж и снижать выход нуклеиновых кислот. Чтобы избежать этого, не следует превышать количество срезов (в одной реакции может быть использовано до четырех срезов толщиной 20 мкм, оптимальный размер образца 4x4 мм); - наличие гемоглобина в образце в концентрации 4 мг/мл не оказывает интерферирующего влияния на результаты тестирования набора; - допустимое содержание некротической ткани в образце не должно превышать 60%. - допустимое содержание неопухолевых клеток в образце не должно превышать 80%. Необходимо, чтобы процент опухолевых клеток в образце составлял не менее 20%, в случае если процент опухолевых клеток в образце составлял 10-20%, то образцы тканей могут быть подвергнуты макродиссекции и обогащены опухолевыми клетками. 1.11.4.3. Процент позитивного согласия и процент негативного согласия набора Для определения характеристик процентов позитивного и негативного согласия набора «FirstKit» были использованы 176 образцов опухолей человека, фиксированных в формалине, залитых в парафиновые блоки (FFPE), и цитологических опухолевых препаратов (из которых с применением панелей для создания ДНК и РНК-библиотек, входящих в состав набора реагентов «ОнкоФокус», были созданы баркодированные амплифицированные библиотеки ДНК и РНК). В качестве референтного метода для выявления наличия или отсутствия отклонений от референсной последовательности использовали метод высокопроизводительного секвенирования с использованием генетического секвенатора MiSeq (РЗН 2014/1568), метод секвенирования по Сэнгеру с использованием на анализатора генетического Applied Biosystems 3500 Dx (РУ ФСЗ 2011/09862), метод сравнительной геномной гибридизации с использованием системы анализа нуклеиновых кислот «Геноскан 3000» (РУ № РУ ФСР 2010/08511), метод флуоресцентной гибридизации in situ (FISH - fluorescence in situ hybridization) c использованием ДНК-зондов для диагностики солидных опухолей. В ходе испытаний использовали зонды производства Kreatech Biotechnology B.V. (РУ ФСЗ 2012/13468). Оценку сигнала осуществляли с помощью микроскопа Axio Imager Z2 (РУ ФЗС 2009/04802) с помощью ПО Isis версии 2.0 (РУ ФСЗ 2009/05560). Результаты тестирования набора в сравнении с референтным методом приведены в таблице 3. Таблица 3 Результаты тестирования образцов биологического материала с помощью набора «FirstKit» Всего исследовано образцов Результаты испытаний 176 с истинно положительными результатами 128 с истинно отрицательными результатами 48 имеющие ложноположительный результат 0 имеющие ложноотрицательный результат 0 Версия 25.02.2022 13 --- стр. 15 --- Значения процента позитивного согласия и процента негативного согласия набора «FirstKit» с доверительной вероятностью 95 %, рассчитанные, исходя из полученных данных, приведены в таблицах 4-5. Таблица 4 Характеристики процентов позитивного и негативного согласия Сокращения, представленные в таблице: ИП - истинно положительные ИО - истинно отрицательные ЛП - ложно положительные ЛО - ложно отрицательные Результаты тестирования Отклонения от референсной последовательности ИП ЛП ИО ЛО Всего Процент позитивного согласия (с доверительной вероятностью 95 %). % Нуклеотидная замена (SNV) 79 0 0 0 79 100,0 (96,3-100%) Инсерции/делеции (InDels) 5 0 0 0 5 100,0 (54,9-100%) Вариация числа копий генов (CNV) 21 0 0 0 21 100,0 (86,7-100%) Химерный транскрипт (fusion) 23 0 0 0 23 100,0 (87,8-100%) Всего выявленных отклонений: 128 0 0 0 128 100,0 (97,7-100%) Таблица 5 Отсутствие отклонений от референсной последовательности ИП ЛП ИО ЛО Всего Процент негативного согласия(с доверительной вероятностью 95 %). % Всего выявленных отсутствий отклонений от реф. последовательности 0 0 48 0 48 100,0 (93,9-100%) с применением панелей для создания ДНК и РНК-библиотек, входящих в состав набора реагентов «ОнкоФокус» 1.11.4.4. Биоинформатические параметры набора 1.11.4.4.1. Длина прочтения и количество прочтений Проверку длины прочтения и количества прочтений проводили с помощью специализированных биоинформатических средств из «сырых» данных, содержащихся в FastQ файле. Показатель количества прочтений используется как критерий качества прочтения каждого образца. Значения характеристики, приведенные в таблице 6, достигаются при соблюдении правил, указанных в разделе «Исследуемый материал». Версия 25.02.2022 14 --- стр. 16 --- Таблица 6 Вариант исполнения набора реагентов Длина прочтения (выход)* Количество прочтений* Набор реагентов «FirstKit 550» 200 п.н. (20-25 Гб) 100-130 млн Набор реагентов «FirstKit 540» 200 п.н. (10-15 Гб) 60-80 млн Набор реагентов «FirstKit 530» 200 п.н. (3-4 Гб) 15-20 млн Набор реагентов «FirstKit 520» 200 п.н. (0,6-1 Гб) 4-6 млн Набор реагентов «FirstKit 510» 200 п.н. (0,3-0,5 Гб) 2-3 млн 1.11.4.1.2. Точность прочтения Для оценки точности прочтения используется шкала Phred. В процессе выравнивания прочтений на рефренсную последовательность любое расхождение с референсной последовательностью (биологическое или техническое, означающее реальный вариант или ошибку секвенирования) указывается как несоответствие. В результате выравнивания на рефренсную последовательность каждое прочтение оснований классифицируется как корректное или некорректное. Значения характеристики, приведенные в таблице 7, достигаются при соблюдении правил, указанных в разделе «Исследуемый материал». Таблица 7 Показатель Значение Точность прочтения не менее 98,5%* Версия 25.02.2022 15 --- стр. 17 --- 2. ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА 2.1. Варианты исполнения, состав и комплектность Набор выпускается в пяти вариантах исполнения (варианты исполнения, состав и комплектность поставки см. в таблицах 8, 9 и 10). Все варианты исполнения предназначены для подготовки библиотек из ДНК и РНК, выделенных из образцов опухолей человека, фиксированных в формалине, залитых в парафиновые блоки (FFPE), и цитологических опухолевых препаратов, и высокопроизводительного секвенирования следующего поколения (NGS) нуклеиновых кислот на системе «F- Genetics». Варианты исполнения различаются по типу чипов для секвенирования и, соответственно, по количеству образцов, которые могут быть проанализированы с помощью одного набора. Таблица 8 Варианты исполнения набора Вариант исполнения Комплект реагентов/материалов/ картриджей/чипов Кол-во, шт. Вариант исполнения «FirstKit 550» 1.1. Набор полупроводниковых чипов 550 (4 чипа в упаковке) 2 шт. 1.2. Набор материалов «ОФ» для станции пробоподготовки 4 шт. 1.3. Набор картриджей «ОФ» с растворами для амплификации библиотек для станции пробоподготовки (4 картриджа в упаковке) 1 шт. 1.4. Набор картриджей «ОФ» с реагентами для станции пробоподготовки (4 картриджа в упаковке) 1 шт. 1.5. Набор растворов «ОФ» для секвенирования 1 шт. 1.6. Набор картриджей «ОФ» с реагентами для секвенирования (4 картриджа в упаковке) 1 шт. Вариант исполнения «FirstKit 540» 2.1. Набор полупроводниковых чипов 540 (4 чипа в упаковке) 2 шт. 2.2. Набор материалов «ОФ» для станции пробоподготовки 4 шт. 2.3. Набор картриджей «ОФ» с растворами для амплификации библиотек для станции пробоподготовки (4 картриджа в упаковке) 1 шт. 2.4. Набор картриджей «ОФ» с реагентами для станции пробоподготовки (4 картриджа в упаковке) 1 шт. 2.5. Набор растворов «ОФ» для секвенирования 1 шт. 2.6. Набор картриджей «ОФ» с реагентами для секвенирования (4 картриджа в упаковке) 1 шт. Вариант исполнения «FirstKit 530» 3.1. Набор полупроводниковых чипов 530 (4 чипа в упаковке) 2 шт. 3.2. Набор материалов «ОФ» для станции пробоподготовки 4 шт. 3.3. Набор картриджей «ОФ» с растворами для амплификации библиотек для станции пробоподготовки (4 картриджа в упаковке) 1 шт. 3.4. Набор картриджей «ОФ» с реагентами для станции пробоподготовки (4 картриджа в упаковке) 1 шт. 3.5. Набор растворов «ОФ» для секвенирования 1 шт. 3.6. Набор картриджей «ОФ» с реагентами для секвенирования (4 картриджа в упаковке) 1 шт. Вариант исполнения «FirstKit 520» 4.1. Набор полупроводниковых чипов 520 (4 чипа в упаковке) 2 шт. 4.2. Набор материалов «ОФ» для станции пробоподготовки 4 шт. 4.3. Набор картриджей «ОФ» с растворами для амплификации библиотек для станции пробоподготовки (4 картриджа в упаковке) 1 шт. 4.4. Набор картриджей «ОФ» с реагентами для станции пробоподготовки (4 картриджа в упаковке) 1 шт. 4.5. Набор растворов «ОФ» для секвенирования 1 шт. Версия 25.02.2022 16 --- стр. 18 --- Вариант исполнения Комплект реагентов/материалов/ картриджей/чипов Кол-во, шт. 4.6. Набор картриджей «ОФ» с реагентами для секвенирования (4 картриджа в упаковке) 1 шт. Вариант исполнения «FirstKit 510» 5.1. Набор полупроводниковых чипов 510 (4 чипа в упаковке) 2 шт. 5.2. Набор материалов «ОФ» для станции пробе подготовки 4 шт. 5.3. Набор картриджей «ОФ» с растворами для амплификации библиотек для станции пробоподготовки (4 картриджа в упаковке) 1 шт. 5.4. Набор картриджей «ОФ» с реагентами для станции пробоподготовки (4 картриджа в упаковке) 1 шт. 5.5. Набор растворов «ОФ» для секвенирования 1 шт. 5.6. Набор картриджей «ОФ» с реагентами для секвенирования (4 картриджа в упаковке) 1 шт. Таблица 9 Состав набора Компонент набора Объем Кол-во Внешний вид изделия 1. «FirstKit 550», в составе: 1.1. Набор полупроводниковых чипов 550 (4 чипа в упаковке), 2 шт. Полупроводни ковый чип 550 - 4 чипа Чипы, запаянные в индивидуальные фольгированные упаковки 1.2. Набор материалов «ОФ» для станции пробоподготовки, 4 шт.; 1.2.1. Планшет 96- луночный - 1 планшет Планшет 96-луночный из прозрачного пластика размером 12x8 см 1.2.2. Профольгиро ванная крышка - 1 крышка Крышка профольгированная размером 13,3 х 9,3 см 1.2.3. Наконечники одноразовые (96 шт. в штативе) - 1 штатив Штатив с наконечниками (96 шт., в том числе 54 наконечника объемом 1000 мкл, 40 наконечников объемом 200 мкл, 2 прокалывателя) 1.2.4. Пробирки - 12 пробирок Пробирки для разбивания эмульсии объемом 2 мл 1.2.5. Крышка для центрифуг - 2 штуки Крышки для центрифуг станции пробоподготовки диаметром 12 см 1.2.6. Штатив с пробирками для модуля обогащения - 1 штатив В штативе 8 пробирок объемом 1,5 мл 1.2.7. Адаптер для чипа 2 адаптера Пластиковый адаптер 1.3. Набор картриджей «ОФ» с растворами для амплификации библиотек для станции пробоподготовки (4 Картридж «ОФ» с растворами для амплификаци и библиотек для станции - 4 картриджа Картридж содержит 24 профольгированные лунки, из них 8 лунок объемом 5 мл содержат прозрачную бесцветную жидкость объемом 4 мл и 15 лунок объемом 2 мл содержат Версия 25.02.2022 17 --- стр. 19 --- Компонент набора Объем Кол-во Внешний вид изделия картриджа упаковке): ффф пробоподгото вки' прозрачную бесцветную жидкость объемом 1,5 мл, 1 лунка объемом 2 мл (третья в первом ряду) содержит прозрачную жидкость объемом 1 мл с осадком коричневого цвета 1.4. Набор картриджей «ОФ» с реагентами для станции пробоподготовки (4 картриджа в упаковке): Картридж «ОФ» с реагентами для станции пробоподгото вки^ картриджа Картридж содержит 20 профольгированных лунок, из них 4 лунки объемом 5 мл пустые, 15 лунок объемом 2 мл содержат прозрачную бесцветную жидкость, 1 лунка (первая во втором ряду) содержат прозрачную розовую жидкость, а также и 4 лунки с вставленными пробирками: позиция А: пустая прозрачная пробирка для образцов объемом 1,5 мл с закручивающейся белой крышкой: позиция В: пустая прозрачная пробирка для образцов объемом 1,5 мл с закручивающейся белой крышкой: позиция С: прозрачная пробирка объемом 1,5 мл с закручивающейся красной крышкой, содержащей 2М NaOH: позиция D: пустая прозрачная пробирка объемом 1,5 мл с закручивающейся белой крышкой 1.5. Набор растворов «ОФ» для секвенирования: 1.5.1. Промывочный раствор «ОФ» 1,5л 4 бутыли Бутыль из белого пластика, запаянная в фольгу, содержащая бесцветную жидкость 1.5.2. Раствор для очистки «ОФ» 250 мл 1 бутыль Бутыль из прозрачного пластика, содержащая бесцветную жидкость 1.6. Набор картриджей «ОФ» с реагентами для секвенирования (4 картриджа в упаковке): Картридж «ОФ» с реагентами для секвенирован ия^ картриджа Картридж содержит 5 лунок фиолетового, черного, синего, зеленого и красного цветов, каждая из которых сообщается с отдельной емкостью с реагентами. К набору реагентов прилагается краткое руководство по применению набора и паспорт качества ^ Реагенты содержат опасные вещества. Информацию по опасным веществам и мерам предосторожности при работе с реагентами см. в разделе инструкции «Меры предосторожности и предупреждения». Версия 25.02.2022 18 --- стр. 20 --- Компонент набора Объем Кол-во Внешний вид изделия 2. «FirstKit 540», в составе: 2.1. Набор полупроводниковых чипов 540 (4 чипа в упаковке), 2 шт. Полупроводни ковый чип 540 - 4 чипа Чипы, запаянные в индивидуальные фольгированные упаковки 2.2. Набор материалов «ОФ» для станции пробоподготовки, 4 шт.; 2.2.1. Планшет 96- луночный - 1 планшет Планшет 96-луночный из прозрачного пластика размером 12x8 см 2.2.2. Профольгиро ванная крышка - 1 крышка Крышка профольгированная размером 13,3 х 9,3 см 2.2.3. Наконечники одноразовые (96 шт. в штативе) - 1 штатив Штатив с наконечниками (96 шт., в том числе 54 наконечника объемом 1000 мкл, 40 наконечников объемом 200 мкл, 2 прокалывателя) 2.2.4. Пробирки - 12 пробирок Пробирки для разбивания эмульсии объемом 2 мл 2.2.5. Крышка для центрифуг - 2 штуки Крышки для центрифуг станции пробоподготовки диаметром 12 см 2.2.6. Штатив с пробирками для модуля обогащения - 1 штатив В штативе 8 пробирок объемом 1,5 мл 2.2.7. Адаптер для чипа 2 адаптера Пластиковый адаптер 2.3. Набор картриджей «ОФ» с растворами для амплификации библиотек для станции пробоподготовки (4 картриджа в упаковке): ф ф ф Картридж «ОФ» с растворами для амплификаци и библиотек для станции пробоподгото вки^ - 4 картриджа Картридж содержит 24 профольгированные лунки, из них 8 лунок объемом 5 мл содержат прозрачную бесцветную жидкость объемом 4 мл и 15 лунок объемом 2 мл содержат прозрачную бесцветную жидкость объемом 1,5 мл, 1 лунка объемом 2 мл (третья в первом ряду) содержит прозрачную жидкость объемом 1 мл с осадком коричневого цвета 2.4. Набор картриджей «ОФ» с реагентами для станции пробоподготовки (4 картриджа в упаковке): <!>^ Картридж «ОФ» с реагентами для станции пробоподгото вки^ - 4 картриджа Картридж содержит 20 профольгированных лунок, из них 4 лунки объемом 5 мл пустые, 15 лунок объемом 2 мл содержат прозрачную бесцветную жидкость, 1 лунка (первая во втором ряду) содержат прозрачную розовую жидкость, а также и 4 лунки с вставленными пробирками: позиция А: Версия 25.02.2022 19 --- стр. 21 --- Компонент набора Объем Кол-во Внешний вид изделия пустая прозрачная пробирка для образцов объемом 1,5 мл с закручивающейся белой крышкой; позиция В: пустая прозрачная пробирка для образцов объемом 1,5 мл с закручивающейся белой крышкой; позиция С: прозрачная пробирка объемом 1,5 мл с закручивающейся красной крышкой, содержащей 2М NaOH; позиция D: пустая прозрачная пробирка объемом 1,5 мл с закручивающейся белой крышкой 2.5. Набор растворов «ОФ» для секвенирования: 2.5.1. Промывочный раствор «ОФ» 1,5 л 4 бутыли Бутыль из белого пластика, запаянная в фольгу, содержащая бесцветную жидкость 2.5.2. Раствор для очистки «ОФ» 250 мл 1 бутыль Бутыль из прозрачного пластика, содержащая бесцветную жидкость 2.6. Набор картриджей «ОФ» с реагентами для секвенирования (4 картриджа в упаковке): Картридж «ОФ» с реагентами для секвенирован ия^ - 4 картриджа Картридж содержит 5 лунок фиолетового, черного, синего, зеленого и красного цветов, каждая из которых сообщается с отдельной емкостью с реагентами. К набору реагентов прилагается краткое руководство по применению набора и паспорт качества 3. «FirstKit 530», в составе: 3.1. Набор полупроводниковых чипов 530 (4 чипа в упаковке), 2 шт. Полупроводни ковый чип 530 - 4 чипа Чипы, запаянные в индивидуальные фольгированные упаковки 3.2. Набор материалов «ОФ» для станции пробоподготовки, 4 шт.: 3.2.1. Планшет 96- луночный - 1 планшет Планшет 96-луночный из прозрачного пластика размером 12x8 см 3.2.2. Профольгиро ванная крышка - 1 крышка Крышка профольгированная размером 13,3 х 9,3 см 3.2.3. Наконечники одноразовые (96 шт. в штативе) - 1 штатив Штатив с наконечниками (96 шт., в том числе 54 наконечника объемом 1000 мкл, 40 наконечников объемом 200 мкл, 2 прокалывателя) 3.2.4. Пробирки - 12 пробирок Пробирки для разбивания эмульсии объемом 2 мл 3.2.5. Крышка - 2 штуки Крышки для центрифуг Версия 25.02.2022 20 --- стр. 22 --- Компонент набора Объем Кол-во Внешний вид изделия для центрифуг 3.2.6. Штатив с пробирками для модуля обогащения 3.2.7. Адаптер для чипа станции пробоподготовки диаметром 12 см 1 штатив В штативе 8 пробирок объемом 1,5 мл 2 адаптера Пластиковый адаптер 3.3. Набор картриджей «ОФ» с растворами для амплификации библиотек для станции пробоподготовки (4 картриджа в упаковке): Картридж «ОФ» с растворами для амплификаци и библиотек для станции пробоподгото вки^ картриджа Картридж содержит 24 профольгированные лунки, из них 8 лунок объемом 5 мл содержат прозрачную бесцветную жидкость объемом 4 мл и 15 лунок объемом 2 мл содержат прозрачную бесцветную жидкость объемом 1,5 мл, 1 лунка объемом 2 мл (третья в первом ряду) содержит прозрачную жидкость объемом 1 мл с осадком коричневого цвета 3.4. Набор картриджей «ОФ» с реагентами для станции пробоподготовки (4 картриджа в упаковке): <*>^ Картридж «ОФ» с реагентами для станции пробоподгото вки^ картриджа Картридж содержит 20 профольгированных лунок, из них 4 лунки объемом 5 мл пустые, 15 лунок объемом 2 мл содержат прозрачную бесцветную жидкость, 1 лунка (первая во втором ряду) содержат прозрачную розовую жидкость, а также и 4 лунки с вставленными пробирками: позиция А: пустая прозрачная пробирка для образцов объемом 1,5 мл с закручивающейся белой крышкой: позиция В: пустая прозрачная пробирка для образцов объемом 1,5 мл с закручивающейся белой крышкой; позиция С: прозрачная пробирка объемом 1,5 мл с закручивающейся красной крышкой, содержащей 2М NaOH; позиция D: пустая прозрачная пробирка объемом 1,5 мл с закручивающейся белой крышкой 3.5. Набор растворов «ОФ» для секвенирования: 3.5.1. Промывочный раствор «ОФ» 1,5 л 4 бутыли Бутыль из белого пластика, запаянная в фольгу, содержащая бесцветную жидкость Версия 25.02.2022 21 --- стр. 23 --- Компонент набора Объем Кол-во Внешний вид изделия 3.5.2. Раствор для очистки «ОФ» 250 мл 1 бутыль Бутыль из прозрачного пластика, содержащая бесцветную жидкость 3.6. Набор картриджей «ОФ» с реагентами для секвенирования (4 картриджа в упаковке): Картридж «ОФ» с реагентами для секвенирован ия^ - 4 картриджа Картридж содержит 5 лунок фиолетового, черного, синего, зеленого и красного цветов, каждая из которых сообщается с отдельной емкостью с реагентами. К набору реагентов прилагается краткое руководство по применению набора и паспорт качества 4. «FirstKit 520», в составе: 4.1. Набор полупроводниковых чипов 520 (4 чипа в упаковке), 2 шт. Полупроводни ковый чип 520 - 4 чипа Чипы, запаянные в индивидуальные фольгированные упаковки 4.2. Набор материалов «ОФ» для станции пробоподготовки, 4 шт.: 4.2.1. Планшет 96- луночный - 1 планшет Планшет 96-луночный из прозрачного пластика размером 12x8 см 4.2.2. Профольгиро ванная крышка - 1 крышка Крышка профольгированная размером 13,3 х 9,3 см 4.2.3. Наконечники одноразовые (96 шт. в штативе) - 1 штатив Штатив с наконечниками (96 шт., в том числе 54 наконечника объемом 1000 мкл, 40 наконечников объемом 200 мкл, 2 прокалывателя) 4.2.4. Пробирки - 12 пробирок Пробирки для разбивания эмульсии объемом 2 мл 4.2.5. Крышка для центрифуг - 2 штуки Крышки для центрифуг станции пробоподготовки диаметром 12 см 4.2.6. Штатив с пробирками для модуля обогащения - 1 штатив В штативе 8 пробирок объемом 1,5 мл 4.2.7. Адаптер для чипа 2 адаптера Пластиковый адаптер 4.3. Набор картриджей «ОФ» с растворами для амплификации библиотек для станции пробоподготовки (4 картриджа в упаковке): Картридж «ОФ» с растворами для амплификаци и библиотек для станции пробоподгото вки"' - 4 картриджа Картридж содержит 24 профольгированные лунки, из них 8 лунок объемом 5 мл содержат прозрачную бесцветную жидкость объемом 4 мл и 15 лунок объемом 2 мл содержат прозрачную бесцветную жидкость объемом 1,5 мл, 1 лунка объемом 2 мл (третья в первом ряду) содержит прозрачную жидкость объемом 1 мл с осадком Версия 25.02.2022 22 --- стр. 24 --- Компонент набора Объем Кол-во Внешний вид изделия коричневого цвета 4.4. Набор картриджей «ОФ» с реагентами для станции пробоподготовки картриджа (4 в упаковке): Картридж «ОФ» с реагентами для станции пробоподгото вки^ картриджа Картридж содержит 20 профольгированных лунок, из них 4 лунки объемом 5 мл пустые, 15 лунок объемом 2 мл содержат прозрачную бесцветную жидкость, 1 лунка (первая во втором ряду) содержат прозрачную розовую жидкость, а также и 4 лунки с вставленными пробирками: позиция А: пустая прозрачная пробирка для образцов объемом 1,5 мл с закручивающейся белой крышкой: позиция В: пустая прозрачная пробирка для образцов объемом 1,5 мл с закручивающейся белой крышкой; позиция С: прозрачная пробирка объемом 1,5 мл с закручивающейся красной крышкой, содержащей 2М NaOH; позиция D: пустая прозрачная пробирка объемом 1,5 мл с закручивающейся белой крышкой 4.5. Набор растворов «ОФ» для секвенирования: 1.5.1. Промывочный раствор «ОФ» 1,5 л 4 бутыли Бутыль из белого пластика, запаянная в фольгу, содержащая бесцветную жидкость 1.5.2. Раствор для очистки «ОФ» 250 мл 1 бутыль Бутыль из прозрачного пластика, содержащая бесцветную жидкость 4.6. Набор картриджей «ОФ» с реагентами для секвенирования (4 картриджа в упаковке): ФФ Картридж «ОФ» с реагентами для секвенирован ия^ картриджа Картридж содержит 5 лунок фиолетового, черного, синего, зеленого и красного цветов, каждая из которых сообщается с отдельной емкостью с реагентами. К набору реагентов прилагается краткое руководство по применению набора и паспорт качества 5. «FirstKIt 510», в составе: 5.1. Набор полупроводниковых чипов 510 (4 чипа в упаковке), 2 шт. Полупроводни ковый чип 510 - 4 чипа Чипы, запаянные в индивидуальные фольгированные упаковки Версия 25.02.2022 23 --- стр. 25 --- Компонент набора Объем Кол-во Внешний вид изделия 5.2. Набор материалов «ОФ» для станции пробоподготовки, 4 шт.: 5.2.1. Планшет луночный 96- 5.2.2. Профольгиро ванная крышка 5.2.3. Наконечники одноразовые (96 шт. в штативе) 5.2.4. Пробирки 5.2.5. Крышка для центрифуг 5.2.6. Штатив с пробирками для модуля обогащения 5.2.7. Адаптер для чипа 1 планшет 1 крышка 1 штатив 12 пробирок 2 штуки 1 штатив 2 адаптера Планшет 96-луночный из прозрачного пластика размером 12x8 см Крышка профольгированная размером 13,3 х 9,3 см Штатив с наконечниками (96 шт., в том числе 54 наконечника объемом 1000 мкл, 40 наконечников объемом 200 мкл, 2 прокалывателя) Пробирки для разбивания эмульсии объемом 2 мл Крышки для центрифуг станции пробоподготовки диаметром 12 см В штативе 8 объемом 1,5 мл пробирок Пластиковый адаптер 5.3. Набор картриджей «ОФ» с растворами для амплификации библиотек для станции пробоподготовки (4 картриджа в упаковке): Картридж «ОФ» с растворами для амплификаци и библиотек для станции пробоподгото вки^ картриджа Картридж содержит 24 профольгированные лунки, из них 8 лунок объемом 5 мл содержат прозрачную бесцветную жидкость объемом 4 мл и 15 лунок объемом 2 мл содержат прозрачную бесцветную жидкость объемом 1,5 мл, 1 лунка объемом 2 мл (третья в первом ряду) содержит прозрачную жидкость объемом 1 мл с осадком коричневого цвета 5.4. Набор картриджей «ОФ» с реагентами для станции пробоподготовки (4 картриджа в упаковке): Картридж «ОФ» с реагентами для станции пробоподгото вки^ картриджа Картридж содержит 20 профольгированных лунок, из них 4 лунки объемом 5 мл пустые, 15 лунок объемом 2 мл содержат прозрачную бесцветную жидкость, 1 лунка (первая во втором ряду) содержат прозрачную розовую жидкость, а также и 4 лунки с вставленными пробирками: позиция А: пустая прозрачная пробирка для образцов объемом 1,5 мл с закручивающейся белой крышкой; позиция В: пустая прозрачная пробирка Версия 25.02.2022 24 --- стр. 26 --- Компонент набора Объем Кол-во Внешний вид изделия для образцов объемом 1,5 мл с закручивающейся белой крышкой; позиция С: прозрачная пробирка объемом 1,5 мл с закручивающейся красной крышкой, содержащей 2М NaOH; позиция D: пустая прозрачная пробирка объемом 1,5 мл с закручивающейся белой крышкой 5.5. Набор растворов «ОФ» для секвенирования: 5.5.1. Промывочный раствор «ОФ» 1,5 л 4 бутыли Бутыль из белого пластика, запаянная в фольгу, содержащая бесцветную жидкость 5.5.2. Раствор для очистки «ОФ» 250 мл 1 бутыль Бутыль из прозрачного пластика, содержащая бесцветную жидкость 5.6. Набор картриджей «ОФ» с реагентами для секвенирования (4 картриджа в упаковке): <6>Ф Картридж «ОФ» с реагентами для секвенирован ия^ - 4 картриджа Картридж содержит 5 лунок фиолетового, черного, синего, зеленого и красного цветов, каждая из которых сообщается с отдельной емкостью с реагентами. к набору реагентов прилагается краткое руководство по применению набора и паспорт качества Комплектность набора Таблица 10 Компонент Формат Количество Набор реагентов (вариант исполнения) - 1 Инструкция по применению набора в электронном виде на официальном сайте Производителя: www.f-genetics.com 1 Краткое руководство по применению набора в бумажном виде 1 Паспорт качества в бумажном виде 1 3. КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА 3.1. Внутренний контроль качества 3.1.1. Отрицательный и положительный контрол и исследования Для оценки качества получаемых результатов каждая группа экстрагируемых и амплифицируемых баркодированных образцов должна включать отрицательные контрольные образцы. В качестве отрицательных контролей используются: 1. вода ультрачистая (контроль контаминации лаборатории). 2. стандартный образец дикого типа по потенциально выявляемым мишеням (при необходимости, контроль ложноположительных результатов секвенирования). Отрицательные контроли тестируются, начиная с этапа таргетной амплификации как ДНК, так и РНК при создании библиотек, и позволяют контролировать возможную Версия 25.02.2022 25 --- стр. 27 --- контаминацию другими образцами, ампликонами или геномной ДНК. В пробирках с отрицательными контролями не должна происходить реакция амплификации (т.е. не должна детектироваться ДНК и кДНК). ДНК и кДНК детектируют с использованием ПЦР в реальном времени или с использованием анализатора NanoDrop (согласно инструкции). В случае детекции ДНК или кДНК в пробирке с отрицательным контролем (п. 1), результаты для всех пробирок с образцами в постановке считаются недостоверными, образцы бракуются. В случае детекции положительных событий в образце дикого типа на этапе секвенирования ДНК или РНК-библиотек в образце дикого типа, результаты для всех образцов в постановке считаются недостоверными, образцы бракуются. В качестве положительного контроля используется оценка концентрации нуклеиновых кислот на этапе экстракции нуклеиновых кислот, прохождение реакции таргетной амплификации перед началом исследования. В случае если ДНК или РНК- библиотеки не детектируются с помощью заявленных методов оценки, это с высокой долей вероятности приведет к отсутствию прочтений для данных образцов в ходе секвенирования и результаты для таких образцов в постановке считаются недостоверными, образцы бракуются. Также в качестве положительного контроля детекции отклонений от референсной последовательности можно использовать стандартный образец с известными подтвержденными отклонениями. Также положительным контролем могут служить биоинформатические характеристики, присущие набору реагентов, содержащего панель для создания библиотек. 3.1.2. Мониторинг лаборатории на наличие контаминации Рекомендуется один раз в месяц проводить мониторинг лаборатории на контаминацию продуктами амплификации, исследуемыми образцами. Оценка наличия/отсутствия контаминации проводится путем исследования смывов с различных объектов: пипеток, рабочих поверхностей лабораторной мебели, оборудования и поверхностей помещений. Взятие и исследование смывов следует проводить согласно процедуре, описанной в МУ 1.3.2569-09 «Организация работы лабораторий, использующих методы амплификации нуклеиновых кислот при работе с материалом, содержащим микроорганизмы I-IV групп патогенности». При обнаружении контаминации необходимо провести обработку лаборатории моющими и дезинфицирующими растворами согласно указаниям, описанным в МУ 1.3.2569-09. 4. ОГРАНИЧЕНИЯ МЕТОДИКИ ИССЛЕДОВАНИЯ 4.1. Набор применяется только для диагностики in vitro. 4.2. Набор предназначен для работы только с материалом, указанным в разделе «Исследуемый материал». Исследование других видов биологического материала может привести к получению недостоверных результатов. 4.3. Получение достоверных результатов обеспечивается выполнением требований, предъявляемых к взятию, транспортированию и хранению образцов исследуемого материала (см. раздел «Исследуемый материал»). 4.4. Применение набора возможно только персоналом, обученным методам молекулярной диагностики и правилам работы в клинико-диагностической лаборатории. Версия 25.02.2022 26 --- стр. 28 --- 5. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ И ПРЕДУПРЕЖДЕНИЯ 5.1. Работа должна проводиться в лаборатории, выполняющей молекулярно биологические исследования биологического материала. 5.2. При работе необходимо всегда выполнять следующие требования: - Применять набор строго по назначению в соответствии с данной инструкцией. Отклонение от прописанных процедур и порядка действий может привести к получению недостоверных результатов анализа. - Лабораторный процесс должен быть однонаправленным. Анализ следует проводить в отдельных помещениях (зонах) для пре-ПЦР и пост-ПЦР этапов инструкции. Не возвращать образцы, оборудование и реагенты в зону, в которой была проведена предыдущая стадия процесса. - Утилизировать и дезинфицировать реагенты и образцы, используя дезинфицирующие средства в соответствии с внутренними правилами лаборатории по утилизации и дезинфекции. - Утилизировать неиспользованные реагенты, реагенты с истекшим сроком годности, а также использованные реагенты, упаковку^, биологический материал^, включая материалы, инструменты и предметы, загрязненные биологическим материалом, в соответствии с требованиями СанПиН 2.1.3684-21. ВНИМАНИЕ! При удалении отходов (пробирок и картриджей, содержащих продукты ПЦР и секвенирования) недопустимо открывание пробирок и разбрызгивание содержимого, поскольку это может привести к контаминации продуктами ПЦР лабораторной зоны, оборудования и реагентов. - Использовать и менять при каждой операции одноразовые наконечники для автоматических дозаторов с фильтром. Одноразовую пластиковую посуду (пробирки, наконечники) необходимо сбрасывать в специальный контейнер, содержащий дезинфицирующее средство, которое может быть использовано для обеззараживания медицинских отходов. - Набор предназначен для однократного применения для проведения исследования указанного количества образцов (см. раздел «Варианты исполнения, состав и комплектность»). - К работе с набором допускается только персонал, обученный методам молекулярной диагностики и правилам работы в клинико-диагностической лаборатории в установленном порядке. - Не использовать набор, если нарушена внутренняя упаковка или внешний вид реагента не соответствует описанию. - Не использовать набор, если не соблюдались условия транспортирования и хранения согласно инструкции. - Не смешивать реагенты разных серий. - Не использовать набор по истечении срока годности. - Использовать одноразовые неопудренные перчатки, лабораторные халаты, защищать глаза во время работы с образцами и реагентами. Тщательно вымыть руки по окончании работы. Все операции проводятся только в перчатках для исключения контакта с организмом человека. 2 Неиспользованные реагенты, реагенты с истекшим сроком годности, использованные реагенты, упаковка относятся к классу опасности медицинских отходов Г. 3 Биологический материал, включая инструменты и предметы, загрязненные материалом, относятся к классу опасности медицинских отходов Б. Версия 25.02.2022 27 --- стр. 32 --- 6. ДОПОЛНИТЕЛЬНОЕ ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ 6.1. Оборудование 1. Система высокопроизводительного секвенирования «F-Genetics» (РУ № РЗН 2020/10521 от 22.09.21). 2. Микротом (Микротом Leica SM 2400 РУ РЗН 2014/2236 от 02.06.2015 или анлогичный) или одноразовый скальпель (РУ № ФСЗ 2010/08258 от 15.11.2016). 3. Вортекс лабораторный (Центрифуга «Фуга/вортекс Микро-Спин FV-2400», РУ № ФС № 2005/518, истекло 05.04.2015 или аналогичный). 4. Спектрофотометр для измерения концентрации продуктов таргетной амплификации и ДНК-библиотек (Анализатор NanoDrop 2000, номер в Госреестре СИ 56026-13, или аналогичный). 5. Термостат или инкубатор на температуры 55 °С и 95 °С (Термостат твердотельный с таймером ТТ-2 «Термит», РУ № ФСР 2012/14090 от 23.11.2012г. или аналогичный) - 2 штуки. 6. Амплификатор в режиме реального времени (Система регистрации полимеразной цепной реакции в режиме реального времени StepOne, РУ № ФСЗ 2010/06259 от 25.01.2017) и традиционный амплификатор (Термоциклер для амплификации нуклеиновых кислот Т100 (Т100 Thermal Cycler), РУ № ФСЗ 2012/12788 от 21.06.2016) или аналогичный. 7. Микроцентрифуга для пробирок типа «Эппендорф» объемом 1,5 мл и 0,2 мл с ускорением не менее 15 500д (Центрифуга лабораторная «Eppendorf» Centrifuge 54хх, РУ № ФСЗ 2009/04411 от 03.06.2009). 8. Ламинарный бокс микробиологической безопасности II, тип А (Бокс микробиологической безопасности (класс II тип А2) БМБ-11-«Ламинар-С»-1,5, РУ № ФСР 2010/07111 от 18.03.2010). 9. Бокс абактериальный воздушной среды (ПЦР-бокс) (Бокс абактериальной воздушной среды БАВ-ПЦР-«Ламинар-С.», РУ № ФСР 2012/13259 от 05.05.2012). 10. Набор автоматических дозаторов переменного объема на 1 -10,2-20,20-200,100- 1000 мкл (Дозаторы пипеточные одно- и многоканальные «Лайт», номер в госреестре СИ 37682-13, Дозаторы пипеточные одно- и многоканальные «Техно», номер в госреестре СИ 43129-15; Дозаторы пипеточные одно- и многоканальные «Блэк», номер в госреестре СИ 41939-15). 11. Машина для производства лабораторного льда, коробка для льда или охлаждающий блок. 12. Магнитный штатив. 6.2. Материалы 13. Низкоадгезивные пробирки объемом 1,5 мл Eppendorf DNA LoBind Tubes (Пробирки DNA LoBind объемом от 0,5 до 5 мл, РУ Nq ФСЗ 2009/04520 от 19.06.2009). 14. Микроцентрифужные пробирки для ПЦР с плоской крышкой объемом 1,5 мл. (Микроцентрифужные пробирки градуированные объемом от 0,6 мл до 2,0 мл, РУ № ФСЗ 2009/05024 от 08.06.2018). 15. Одноразовые наконечники с фильтром объемом 10 мкл, 20 мкл, 200 мкл, 1000 мкл (Наконечники универсальные пластиковые в штативах и без штативов для лабораторных дозаторов и роботизированных систем, РУ Nq ФСЗ 2009/05025 от 08.06.2018). Версия 25.02.2022 31 --- стр. 33 --- 16. Безворсовая салфетка. 17. Отдельный халат (РУ № ФСЗ 2011/10269 от 13.10.2011), шапочки (РУ № ФСЗ 2008/02099 от 03.07.2008), обувь (РУ № ФОР 2009/05903 от 22.10.2009), маски (ФСЗ 2008/02100 от 03.07.2008) и одноразовые неопудренные нитриловые или латексные перчатки (РУ № ФСЗ 2010/07368 от 05.07.2010) в соответствии с МУ 1.3.2569-09. 18. Емкость для сброса наконечников (Емкости-контейнеры для медицинских отходов классов А, Б, В, Г, РУ № ФСР 2010/09367 от 27.02.2014). 6.3. Реагенты 19. Набор реагентов «ОнкоФокус» для высокопроизводительного секвенирования следующего поколения (NGS) генов, ассоциированных с возникновением опухолей человека, на системе «F-Genetics» или набор реагентов, содержащий панель для создания библиотек для различных целевых регионов нуклеиновых кислот человека. 20. В качестве отрицательных контролей используются: 1. вода ультрачистая на этапах подготовки библиотек и секвенирования (контроль контаминации лаборатории); 2. стандартный образец дикого типа по потенциально выявляемым мишеням (при необходимости, контроль ложноположительных результатов секвенирования). 21. В качестве положительного контроля используется оценка концентрации нуклеиновых кислот на этапе экстракции нуклеиновых кислот, прохождение реакции таргетной амплификации перед началом исследования. В случае если ДНК или РНК-библиотеки не детектируются с помощью заявленных методов оценки, это с высокой долей вероятности приведет к отсутствию прочтений для данных образцов в ходе секвенирования и результаты для таких образцов в постановке считаются недостоверными, образцы бракуются. Также в качестве положительного контроля детекции отклонений от референсной последовательности можно использовать стандартный образец с известными подтвержденными отклонениями. Также положительным контролем могут служить биоинформатические характеристики, присущие набору реагентов, содержащего панель для создания библиотек. 22. Этанол, 100%. 23. Ксилол, 100 %. 24. Реагент для очистки продуктов ПЦР на магнитных частицах («Agencourt АМРиге ХР» пр-ва Beckman Coulter S.A., США). 25. Буферный раствор LowTE (10 мМ Трис+0,1 мМ ЭДТА, рН=8,0) 26. Вода без нуклеаз или ультрачистая вода. Версия 25.02.2022 32 --- стр. 34 --- 7. ИССЛЕДУЕМЫЙ МАТЕРИАЛ В качестве материала используют предварительно баркодированные амплифицированные библиотеки из ДНК и РНК, выделенных из образцов опухолей человека, фиксированных в формалине, залитых в парафиновые блоки (FFPE), и цитологических опухолевых препаратов, созданные с помощью панелей для создания библиотек для различных целевых регионов нуклеиновых кислот человека. Библиотеки могут храниться при температуре 4-8 °С до 1 месяца. Для более длительного хранения поместите образцы на -20 °С. Версия 25.02.2022 33 --- стр. 36 --- 8.1. Создание Запланированного запуска секвенатора Создание Запланированного запуска секвенатора осуществляется с помощью программного обеспечения набора реагентов, содержащего панели для создания библиотек (например, см. Инструкция по применению набора реагентов «ОнкоФокус»). 8.2. Запуск станции пробоподготовки для подготовки матрицы использования станции пробоподготовки Действия перед началом работы Перед началом • Убедитесь в том, что станция пробоподготовки очищена после предыдущего рабочего цикла. В противном случае очистите станцию перед загрузкой материалов. Примечание: Чтобы получить дополнительную информацию о методах очистки, смотрите 8.6.3. Очистка станции пробоподготовки. • Проверьте пустые отделения для реагентов и растворов на предмет наличия конденсата. Конденсат может собираться в этих отделениях при определенных условиях температуры и влажности. Прежде чем загрузить расходные материалы в изделие, протрите отделения лабораторной салфеткой или абсорбирующей тканью, если необходимо. • Убедитесь в том, что станция пробоподготовки подключена к серверу «Torrent Server». В главном окне станции нажмите Settings (Настройки), а затем «Torrent Server» для того, чтобы проверить статус подключения вашего изделия. Необходимые Набор материалов «ОФ» для станции пробоподготовки материалы (входит в состав набора «FirstKit») Картридж «ОФ» с растворами для амплификации библиотек для станции пробоподготовки (входит в состав набора «FirstKit») Картридж «ОФ» с реагентами для станции пробоподготовки ((входит в состав набора «FirstKit») Полупроводниковые чипы 550/540/530/520/510 (входят в состав набора «FirstKit») Вода без нуклеаз Дозаторы 10 мкл и 200 мкл и наконечники с фильтром 8.2.1. Подготовка расходных материалов Распакуйте Картридж «ОФ» с реагентами для станции пробоподготовки за 45 минут перед использованием. Подождите, пока картридж нагреется до комнатной температуры. ВНИМАНИЕ! Картридж с реагентами должен выдерживаться в течение 45 минут при комнатной температуре перед использованием. Извлеките другие картриджи и материалы из упаковки. Затем разместите их на столе рядом со станцией пробоподготовки. Подготовьте следующие позиции: • Адаптер для чипов (2 шт.) Версия 25.02.2022 35 --- стр. 37 --- • Штатив с пробирками для модуля обогащения • Наконечники в штативе • Планшет с профольгированной крышкой • Крышки для центрифуг (2 шт.) • Пробирки (12 шт.) • Картридж «ОФ» с растворами для амплификации библиотек для станции пробоподготовки • Картридж «ОФ» с реагентами для станции пробоподготовки ВНИМАНИЕ! Перед использованием, аккуратно постучите по картриджу с реагентами и картриджу с растворами для того, чтобы реагенты переместились на дно пробирки. Встряхните пробирку с NaOH (Позиция С на картридже с реагентами) на вортексе чтобы собрать содержимое пробирки. Примечание: При хранении в нормальных условиях в некоторых пробирках картриджа с реагентами может выпадать осадок. Если осадок присутствует, загрузите картридж, как указано в инструкции. Осадок растворяется, когда реагенты смешиваются во время использования прибора. 8.2.1.1. Добавление библиотек в пробирки для образцов С помощью дозатора перенесите по 25 мкл каждой разбавленной библиотеки на дно пробирок для образцов библиотек (пробирок с штрихкодами), находящихся в положении А и В на картридже с реагентами. Закройте крышками пробирки с образцами библиотек и храните их во льду до тех пор, пока вы не будете готовы загрузить пробирки в картридж с реагентами и в станцию пробоподготовки. 8.2.2. Загрузка станции пробоподготовки ВАЖНО! • Режимы номинальной частоты вращения центрифуги предназначены для предоставленных люлек и рекомендованных чипов, пробирок и реагентов для подготовки образцов. • Центрифуга для загрузки чипа предназначена для работы при указанных частотах вращения, которые подходят для определенных люлек, чипа, адаптера и противовеса для чипов. Центрифуга должна быть сбалансирована по нагрузке. Необходимо предпринять меры, чтобы надлежащим образом загрузить люльку. В случае высокого уровня вибрации, убедитесь в том, что все компоненты правильно установлены и роторы правильно сбалансированы. • Используйте только материалы, которые входят в набор реагентов «FirstKit», для номинальной частоты вращения центрифуги. Не снимайте или не заменяйте роторы. Проверяйте люльки перед каждым использованием для того, чтобы обеспечить нормальную работу. • Убедитесь в том, что изделие включено и было очищено после последнего использования. • Убедитесь в том, что все компоненты очищены и высохли перед загрузкой в станцию пробоподготовки. • Убедитесь в том, что компоненты станции для реагентов и растворов являются сухими и не содержат конденсата перед загрузкой компонентов. Версия 25.02.2022 36 --- стр. 38 --- Выполните нижеописанные процедуры для того, чтобы загрузить станцию пробоподготовки. Полностью загруженная станция показана на рисунке ниже: 0 ® ® N ..'5? - •^ • f • l* • i W -a ' г 1г L г ® (1) Новый штатив с наконечниками (2) Профольгированная крышка (установлена) (3) Штатив для пустых наконечников (перемещен из позиции с новым штативом (1)). (4) Планшет 96-луночный (5) Картридж «ОФ» с реагентами (6) Картридж «ОФ» с растворами для амплификации библиотек (7) Центрифуги для регенерации (извлечения образцов); пробирки и крышки для центрифуг (8) Штатив с пробирками для модуля обогащения (9) Центрифуга для загрузки чипа: Адаптер/ чип - 2 шт. 8.2.2.1. Загрузка штативов с наконечниками и планшета для ПЦР 8.2.2.1.1. Нажмите кнопку © (Открыть дверцу) на сенсорном экране изделия для того, чтобы отрыть дверцу. Затем подождите, пока защелка не откроется. 8.2.2.1.2. Поднимайте дверцу прибора вверх до тех пор, пока не сработает механизм блокировки. (1) Нажмите здесь, затем поднимите. 8.2.2.1.3. Установите пустой штатив из-под наконечников от предыдущего запуска в положение «Использованные наконечники». Затем смените перчатки. Версия 25.02.2022 37 --- стр. 41 --- (1) Позиция А (Пробирка для образцов библиотек) (2) Позиция В (Пробирка для образцов библиотек) (3) Позиция С (NaOH) (4) Позиция D (Пустая пробирка) ВНИМАНИЕ! Расположите пробирки с образцами библиотек таким образом, чтобы баркоды были видны и ориентированы вправо. Убедитесь, что с пробирок с образцами библиотек сняты крышки. 8.2.2.2.4. Снимите колпачок с пробирки с NaOH которая находится в позиции С, а также с пустой пробирки в позиции D. ВНИМАНИЕ! Во время загрузки картриджей с реагентами: • Прижмите пробирку для образцов библиотек для того, чтобы она прочно зафиксировалась в картридже. • Убедитесь в том, что со всех четырех пробирок сняты колпачки. 8.2.2.2.5. Аккуратно постучите по картриджу с растворами для того, чтобы реагенты опустились на дно пробирок. 8.2.2.2.6. Установите картридж с растворами в станцию для растворов таким образом, чтобы он был на одном уровне с платформой. (1) Станция для растворов (комнатная температура) (2) Картридж с растворами 8.2.2.3. Загрузка пробирок и штатива с пробирками для модуля обогащения 8.2.2.3.1. Установите по шесть пробирок в каждую центрифугу для регенерации (извлечения образцов). Версия 25.02.2022 40 --- стр. 42 --- (1) Центрифуга для регенерации (извлечения образцов) (2) Пробирки Перед закрытием каждой центрифуги крышкой, проверьте что: • Центрифуга сбалансирована по нагрузке с использованием всех необходимых материалов. ВНИМАНИЕ! Центрифуга должна быть сбалансирована по нагрузке. • Люльки надежно закреплены в роторах центрифуги. • Люльки установлены в правильном положении в центрифуге, и центробежная сила при вращении направлена от центра. 8.2.2.3.2. Установите крышку на каждую центрифугу, отрегулировав положение крепления таким образом, что оно совпадало с углублением на платформе. Затем вставьте ее в нужное положение. Убедитесь в том, что крышки полностью вставлены, слегка нажимая на них вдоль всего периметра. 8.2.2.3.3. Закройте откидную крышку центрифуги для регенерации (извлечения образцов). . Убедитесь в том, что порт крышки размещен в направлении задней части прибора. (1) Установленные пробирки (2) Установленные крышки для центрифуг (3) Закрытая крышка центрифуги для регенерации (извлечения образцов) (4) Порт ВНИМАНИЕ! Не ставьте какие-либр предметы на крышку центрифуги. ВНИМАНИЕ! Используйте только поставленные материалы, включая люльки и расходные материалы для того, чтобы обеспечить работу центрифуги при номинальной частоте вращения. Не снимайте или не заменяйте роторы. Чтобы обеспечить нормальную работу, проверяйте люльки перед каждым использованием. 8.2.2.3.4. Установите штатив с пробирками для модуля обогащения. Затем прижмите штатив для того, чтобы он был на одном уровне с платформой. ВНИМАНИЕ! Убедитесь в том, штатив с пробирками для модуля обогащения расположен таким образом, что буквенные обозначения находятся с правой стороны штатива. Версия 25.02.2022 41 --- стр. 43 --- (1) Станция для обогащения (2) Штатив с пробирками для модуля обогащения (3) Буквенные обозначения S.2.2.4. Загрузка центрифуги для загрузки чипов 8.2.2.4.1. Установите каждый чип для секвенирования в люльку центрифуги. Затем прикрепите адаптеры для чипов к устройству. Примечание: (опционально) Пометьте верхнюю сторону чипов для того, чтобы иметь возможность их идентифицировать. Не закрывайте баркод чипа. а. Разместите чип в люльке для загрузки чипов. Затем выровняйте лунки адаптера для чипа по отношению к лункам чипа, расположив адаптер на чипе в таком положении, чтобы был виден баркод. б. Разместите адаптер на чипе. Затем вставьте встроенные крепежи на конце адаптера в разъемы люльки. в. Аккуратно прижимайте гибкие крепежи на другом конце адаптера к разъемам люльки до тех пор, пока адаптер не зафиксируется в определенном положении. г. Убедитесь в том, что крепежи на всех четырех углах адаптера вставлены в разъемы люльки центрифуги. Установка будет считаться неверной, если адаптер прикреплен непрочно. 1. Адаптер для чипа 2. Чип 3. Люлька 4. Порты (выровнены по отношению к чипу) 5. Крепежи 6. Закрепленный угол (выровнен по отношению к люльке) 7. Разъемы 8.2.2.4.2. Установите конструкции адаптер /чип/люлька на центрифуге для загрузки чипов. Версия 25.02.2022 42 --- стр. 55 --- 8.3.3.4. Замените картридж с реагентами для секвенирования на новый картридж, который нагрет до комнатной температуры. 8.3.3.5. Убедитесь в том, что новая бутыль с промывочным раствором тщательно взболтана. Затем снимите колпачок и установите бутыль. 8.3.3.6. Убедитесь в том, что чип для секвенирования, использованный в предыдущем рабочем цикле, надлежащим образом закреплен в зажиме и вставлен до упора. 8.3.3.7. Если необходимо, установите новую бутыль с раствором для очистки. Примечание: Бутыль с раствором для очистки содержит объем реагентов, достаточный для проведения 4 процедур очистки. 8.3.3.8. Закройте дверцу и нажмите кнопку «Next» (Далее). Прибор подтверждает, что расходные материалы и чип надлежащим образом установлены, и раствор для очистки содержит достаточный объем реагентов для проведения очистки после процедуры секвенирования. Следуйте всем рекомендациям на экране для того, чтобы обеспечить надлежащую установку необходимых материалов. ВНИМАНИЕ! После осуществления достаточного количества циклов очистки, на экране прибора может появиться сообщение, предупреждающее пользователя о необходимости заменить бутыль с раствором для очистки. Примечание; См. Дополнение А. Поиск и устранение неисправностей. Результаты 1оп Reporter, если на экране появляется сообщение «Проверка реагента: ошибка». 8.3.3.9. После завершения инициализации (приблизительно 50 минут), нажмите кнопку «Ноте» (Главный экран). Теперь прибор готов для секвенирования. 8.3.4. Начало процедуры секвенирования Для того чтобы поместить чип в зажим необходимо: Версия 25.02.2022 ® L __'J ® (1) Выдвинуть зажим для чипа (2) Вынуть чип, расположенный в зажиме во время инициализации (3) Поместить чип, загруженный в станции пробоподготовки, а зажим скошенным углом в нижний передний угол зажима Примечание: Не применяйте силу, когда вставляете чип. Если чип не вставляется легко, убедитесь, что угол чипа ориентирован как показано на рисунке. (4) Задвинуть зажим до конца, затем закрыть дверцу прибора. 54 --- стр. 56 --- Мы рекомендуем секвенировать загруженные чипы с помощью секвенатора «F- Genetics Плюс» и «F-Genetics» сразу после завершения инициализации прибора. Однако, успешное секвенирование может осуществляться в течение 24 часов после инициализации прибора. Примечание: • Не нажимайте кнопку питания во время работы. Сбой питания прибора во время запуска может привести к прекращению секвенирования или потере образца. • Мы рекомендуем проверить статус Запланированного запуска перед установкой загруженного чипа. 8.3.4.1. После завершения инициализации, нажмите кнопку «Run» (Запуск) на сенсорном экране прибора. Дверца и зажим для чипа открываются. 8.3.4.2. Достаньте использованный чип для секвенирования. Затем закрепите чип, загруженный станции пробоподготовки перед данным секвенированием, в зажим. 8.3.4.3. Задвиньте зажим, закройте дверцу и нажмите кнопку «Next» (Далее). Примечание: Не вынимайте чип из зажима до тех пор, пока не закончится запуск. Удаление и повторная установка чипа может привести к образованию воздушных пузырьков в чипе. 8.3.3.4. Убедитесь в том, что параметры Запланированного запуска заданы автоматически. При проведении первой процедуры секвенирования во время инициализации снимите галочку в поле «Enable post-run clean» (Провести очистку после запуска), затем нажмите Review (Просмотр). ВНИМАНИЕ! • Если галочка не снята в вышеуказанном поле, процедура очистки осуществляется автоматически после первого рабочего цикла. При этом второй цикл не проводится. • Во время начала второго цикла секвенирования в рамках одной инициализации убедитесь в том, что напротив поля «Enable post-run clean» (Провести очистку после запуска) установлена галочка для того, чтобы система осуществляла очистку автоматически после секвенирования. 8.3.4.5. Убедитесь в том, что оставшиеся предварительно заданные настройки являются верными и, если необходимо, внесите изменения, используя кнопки и ниспадающие меню. Версия 25.02.2022 55 --- стр. 57 --- Select Run rIO ;^-.t Confirm the selected run R.2016 03 24 10_20 02.ion8ervlce.rl0 te9t-28 test barcode Ion S5 Sequencing Kit Run type. AMPS Chip barcode DABF0127B ibrary name; hgIB Post tun clean true Notes This г я test of use 8.3.4.6. Убедитесь в том, что дверца прибора закрыта. Затем нажмите кнопку «Start run» (Старт запуска) для того, чтобы начать цикл секвенирования. ВНИМАНИЕ! Во время рабочего цикла не открывайте дверцу и не прикасайтесь к ее поверхности. Прикосновение к прибору во время секвенирования может отрицательно сказаться на качестве измерения. После завершения секвенирования прибор автоматически проводит процедуру очистки, если в поле «Enable post-run clean» (Провести очистку после рабочего цикла) стоит галочка. После очистки на сенсорном экране появляется главное меню. В случае проведения секвенирования второго чипа в рамках одной инициализации начните второй цикл в течение 24 часов с момента начала инициализации. 8.3.5. Обслуживание секвенатора Необходимые материалы Очистка или дезинфекция секвенатора • Безворсовая ткань • 70% изопропанол • (Дополнительно) 10% раствор гипохлорита натрия В случае утечки или пролива жидкости внутрь прибора, выполните следующие действия. Примечание: Все отходы должны утилизироваться в соответствующем контейнере для жидких или твердых отходов. 1. Снимите бутыль с раствором для очистки, затем снимите и опустошите емкость для отходов. 2. Снимите картридж с реагентами для секвенирования. 3. Проверьте емкости для отходов и реагентов на предмет наличия жидкости. 4. Используя абсорбирующую бумагу, соберите столько жидкости, сколько возможно. Затем промойте загрязненную зону 10% раствором гипохлорита натрия. 5. Промойте загрязнённые зоны 70% раствором изопропанола. Затем подождите, пока она не высохнет. 8.4. Очистка станции пробоподготовки 8.4.1. Информация о протоколе очистке Станция пробоподготовки имеет функцию автоматической очистки, которая должна выполняться после каждого рабочего цикла. Процедура очистки запускается с сенсорного экрана станции пробоподготовки и сводит к минимуму риск загрязнения. Во Версия 25.02.2022 56 --- стр. 70 --- 5.3. Набор картриджей «ОФ» с растворами для амплификации библиотек для станции пробоподготовки 5.4. Набор картриджей «ОФ» с реагентами для станции пробоподготовки от -25 до -15°С 5.5. Набор растворов «ОФ» для секвенирования от +15 до + 30°С 5.6. Набор картриджей «ОФ» с реагентами для секвенирования от -25 до -15°С 9.3. Хранение Набор хранить при температурах, указанных в таблице ниже в течение всего срока годности набора. Таблица 14 №№ Компонент набора Условия хранения 1. «FirstKit 550» 1.1. Набор полупроводниковых чипов 550 от +15 до + 30°С1.2. Набор материалов «ОФ» для станции пробоподготовки 1.3. Набор картриджей «ОФ» с растворами для амплификации библиотек для станции пробоподготовки 1.4. Набор картриджей «ОФ» с реагентами для станции пробоподготовки от -25 до -15°С 1.5. Набор растворов «ОФ» для секвенирования от +15 до + 30°С 1.6. Набор картриджей «ОФ» с реагентами для секвенирования от -25 до -15°С 2. «FirstKit 540» 2.1. Набор полупроводниковых чипов 540 от +15 до + 30°С2.2. Набор материалов «ОФ» для станции пробоподготовки 2.3. Набор картриджей «ОФ» с растворами для амплификации библиотек для станции пробоподготовки 2.4. Набор картриджей «ОФ» с реагентами для станции пробоподготовки от -25 до -15°С 2.5. Набор растворов «ОФ» для секвенирования от +15 до + 30°С 2.6. Набор картриджей «ОФ» с реагентами для секвенирования от -25 до -15°С 3. «FirstKit 530» 3.1. Набор полупроводниковых чипов 530 от +15 до + 30°С3.2. Набор материалов «ОФ» для станции пробоподготовки 3.3. Набор картриджей «ОФ» с растворами для амплификации библиотек для станции пробоподготовки 3.4. Набор картриджей «ОФ» с реагентами для станции пробоподготовки от -25 до -15°С 3.5. Набор растворов «ОФ» для секвенирования от +15 до + 30°С 3.6. Набор картриджей «ОФ» с реагентами для секвенирования от -25 до -15°С 4. «FirstKit 520» 4.1. Набор полупроводниковых чипов 520 от +15 до + 30°С4.2. Набор материалов «ОФ» для станции пробоподготовки 4.3. Набор картриджей «ОФ» с растворами для амплификации библиотек для станции пробоподготовки 4.4. Набор картриджей «ОФ» с реагентами для станции пробоподготовки от -25 до -15°С 4.5. Набор растворов «ОФ» для секвенирования от +15 до + 30°С 4.6. Набор картриджей «ОФ» с реагентами для секвенирования от -25 до -15°С 5. «FirstKit 510» 5.1. Набор полупроводниковых чипов 510 от +15 до + 30°С5.2. Набор материалов «ОФ» для станции пробоподготовки 5.3. Набор картриджей «ОФ» с растворами для амплификации библиотек для станции пробоподготовки 5.4. Набор картриджей «ОФ» с реагентами для станции пробоподготовки от -25 ДО-150С 5.5. Набор растворов «ОФ» для секвенирования от +15 до + 30°С 5.6. Набор картриджей «ОФ» с реагентами для секвенирования от -25 ДО-150С Реагенты после вскрытия хранить в тех же условиях, что и реагенты до вскрытия. Версия 25.02.2022 69 --- стр. 71 --- Невскрытые и вскрытые реагенты стабильны в течение срока годности, указанного на этикетке, при соблюдении указанных условий хранения. Набор, хранившийся с нарушением указанного режима хранения, применению не подлежит. 10. МАРКИРОВКА Маркировка внутренней (индивидуальной) упаковки компонентов набора реагентов должна содержать: - наименование производителя; - сокращенное наименование набора реагентов; - наименование компонента; - объем/количество компонента; - номер по каталогу; - номер серии; - срок годности; - условия хранения; - символ «Медицинское изделие для диагностики in vitro»; - символы опасности и сигнальное слово (на этикетке картриджа «ОФ» с растворами для амплификации библиотек для станции пробоподготовки, картриджа с реагентами «ОФ» для станции пробоподготовки и картриджа «ОФ» с реагентами для секвенирования). Место и способ нанесения маркировки: этикетка на клеящейся основе (ОСТ 29.1) на упаковку каждого реагента (пробирка, планшет, картридж, бутыль, чип) с информацией, нанесенной печатным способом. Маркировка внешней (потребительской) упаковки набора реагентов должна содержать: - наименование производителя; - адрес, телефон и сайт производителя; - лолное и сокращенное наименование набора реагентов; - состав Набора реагентов; - номер по каталогу; - номер серии; - дата производства; - срок годности; - условия хранения; - символ «Медицинское изделие для диагностики in vitro»; - символ «Обратитесь к инструкции по применению»; - символы опасности, сигнальное слово, список опасных компонентов, входящих в состав реагента, предупреждения об опасности (на этикетке картриджа «ОФ» с растворами для амплификации библиотек для станции пробелодготовки, картриджа с реагентами «ОФ» для станции пробоподготовки и картриджа «ОФ» с реагентами для секвенирования); - номер «Технических условий»; - номер и дата регистрационного удостоверения. Место и способ нанесения маркировки: этикетка на клеящейся основе (ОСТ 29.1) с информацией, нанесенной печатным способом, или надпись, нанесенная типографским методом на внешней упаковке набора. Маркировка транспортной упаковки должна содержать: Версия 25.02.2022 70 --- стр. 72 --- - наименование набора реагентов; - наименование и адрес производителя; - номер по каталогу; - номер серии; - дату изготовления набора реагентов (год, месяц включительно); - срок годности набора реагентов (год, месяц включительно); - требования к условиям хранения и транспортирования изделия; - предупреждения и меры предосторожности в отношении изделия, которые необходимо исполнять при транспортировании, манипуляционные надписи; - число единиц потребительской упаковки изделий; - масса нетто и масса брутто. Данная информация может быть нанесена в виде символов согласно ГОСТР ИСО 15223-1. Таблица 15 Расшифровка символов маркировки M i Изготовитель ywT Дата изготовления 2 Использовать до LOT Код партии IVD Изделие для in vitro диагностики REF Номер в каталоге Символ опасности < § > Опасность возгорания Опасность для здоровья Опасность коррозии I Температурный диапазон Версия 25.02.2022 71 --- стр. 73 --- т Обратитесь к инструкции по применению 1! Объем 11. УПАКОВКА 11.1. Внутренняя (потребительская) упаковка должна представлять собой индивидуальные коробки из картона коробочного, в которые помещены компоненты набора реагентов №№ 1.1-1.6/2.1-2.6/3.1-3.6/4.1-4.6/5.1-5.6, паспорт качества и краткое руководство по применению набора. 11.2. Следующие компоненты Набора (№№ 1.4, 1.6, 2.4, 2.6, 3.4, 3.6, 4.4, 4.6, 5.4, 5.6), хранящиеся при температуре -25 - -15°С, должны быть совместно упакованы в совместную внешнюю упаковку (потребительскую тару) в пакеты из пленки полиэтиленовой: Вариант исполнения «FirstKit 550»: 1.4. Набор картриджей «ОФ» с реагентами для станции пробоподготовки (4 картриджа в упаковке); 1.6. Набор картриджей «ОФ» с реагентами для секвенирования (4 картриджа в упаковке). Вариант исполнения «FirstKit 540»: 2.4. Набор картриджей «ОФ» с реагентами для станции пробоподготовки (4 картриджа в упаковке); 2.6. Набор картриджей «ОФ» с реагентами для секвенирования (4 картриджа в упаковке). Вариант исполнения «FirstKit 530»: 3.4. Набор картриджей «ОФ» с реагентами для станции пробоподготовки (4 картриджа в упаковке); 3.6. Набор картриджей «ОФ» с реагентами для секвенирования (4 картриджа в упаковке). Вариант исполнения «FirstKit 520»: 4.4. Набор картриджей «ОФ» с реагентами для станции пробоподготовки (4 картриджа в упаковке); 4.6. Набор картриджей «ОФ» с реагентами для секвенирования (4 картриджа в упаковке). Вариант исполнения «FirstKit 510»: 5.4. Набор картриджей «ОФ» с реагентами для станции пробоподготовки (4 картриджа в упаковке); 5.6. Набор картриджей «ОФ» с реагентами для секвенирования (4 картриджа в упаковке). Потребительская тара упаковывается в транспортную упаковку - термоконтейнер с хладоэлементами. 11.3. Следующие компоненты набора (№№ 1.1, 1.2, 1.3, 1.5, 2.1,2.2, 2.3, 2.5, 3.1, 3.2, 3.3, 3.5, 4.1,4.2,4.3,4.5, 5.1,5.2, 5.3, 5.5, хранящиеся при температуре +15 - +30°С, должны быть совместно упакованы в совместную внешнюю упаковку (потребительскую тару) в пакеты из пленки полиэтиленовой: Вариант исполнения «FirstKit 550»: Версия 25.02.2022 72 --- стр. 74 --- 1.1. Набор полупроводниковых чипов 550 (4 чипа в упаковке) - 2 шт.; 1.2. Набор материалов «ОФ» для станции пробоподготовки - 4 шт.; 1.3. Набор картриджей «ОФ» с растворами для амплификации библиотек для станции пробоподготовки (4 картриджа в упаковке); 1.5. Набор растворов «ОФ» для секвенирования. Вариант исполнения «FirstKit 540»: 2.1. Набор полупроводниковых чипов 540 (4 чипа в упаковке) - 2 шт.; 2.2. Набор материалов «ОФ» для станции проболодготовки - 4 шт.; 2.3. Набор картриджей «ОФ» с растворами для амплификации библиотек для станции пробоподготовки (4 картриджа в упаковке); 2.5. Набор растворов «ОФ» для секвенирования. Вариант ислолнения «FirstKit 530»: 3.1. Набор лолупроводниковых чипов 5310 (4 чипа в упаковке) - 2 шт.; 3.2. Набор материалов «ОФ» для станции пробоподготовки -4 шт.; 3.3. Набор картриджей «ОФ» с растворами для амплификации библиотек для станции лробоподготовки (4 картриджа в упаковке); 3.5. Набор растворов «ОФ» для секвенирования. Вариант исполнения «FirstKit 520»: 4.1. Набор полупроводниковых чипов 520 (4 чипа в упаковке) - 2 шт.; 4.2. Набор материалов «ОФ» для станции пробоподготовки - 4 шт.; 4.3. Набор картриджей «ОФ» с растворами для амллификации библиотек для станции пробоподготовки (4 картриджа в упаковке); 4.5. Набор растворов «ОФ» для секвенирования. Вариант исполнения «FirstKit 510»: 5.1. Набор лолупроводниковых чипов 510 (4 чипа в упаковке) - 2 шт.; 5.2. Набор материалов «ОФ» для станции проболодготовки -4 шт.; 5.3. Набор картриджей «ОФ» с растворами для амллификации библиотек для станции пробоподготовки (4 картриджа в упаковке); 5.5. Набор растворов «ОФ» для секвенирования. Потребительская тара упаковывается в транспортную упаковку - ящик из картона гофрированного. 11.4. Транспортная упаковка представляет собой ящик из картона гофрированного. 11.5. Транспортная упаковка оклеена упаковочной лентой общего назначения (скотчем) на полимерной или тканевой основе шириной не менее 45 мм. На каждую транспортную упаковку нанесена этикетка с транспортной маркировкой. 11.6. Термоконтейнеры с хладоэлементами для транспортирования компонентов набора №№ 1.1. 1.2, 1.3, 1.5. 2.1,2.2, 2.3, 2.5, 3.1, 3.2, 3.3, 3.5, 4.1,4.2, 4.3, 4.5, 5.1,5.2, 5.3, 5.5 должны соответствовать требованиям, указанным в таблице 16. Таблица 16 Транспортная тара и вспомогательные материалы Требования и нормы Термоконтейнер одноразового использования внутренний объем до 92 л, толщина стенок не менее 40 мм Термоконтейнер многоразового использования внутренний объем до 80 л, толщина стенок не менее 40 мм Версия 25.02.2022 73 --- стр. 75 --- для поддержания температуры внутри термоконтейнера от -30 до -10“С при воздействии положительной температуры внешней среды 12. ГАРАНТИИ ПРОИЗВОДИТЕЛЯ Производитель гарантирует соответствие характеристик набора требованиям, указанным в технической и эксплуатационной документации, в течение указанного срока годности при соблюдении всех условий транспортирования, хранения и применения. Рекламации на качество набора «FirstKit» направлять в адрес производителя АО «Ферст Генетике»: 121205, Россия, г. Москва, территория инновационного центра "Сколково", Большой бульвар, дом 42, строение 1, поме 1дение 619, тел. (499) 673-02- 88, e-mail: info@f-genetics.com. При выявлении нежелательных реакций при использовании набора, фактов и обстоятельств, создающих угрозу жизни и здоровью граждан и медицинских работников при обращении и эксплуатации набора, рекомендуется направить сообщение по адресу, указанному выше, и в уполномоченную государственную регулирующую организацию (в Российской Федерации - Федеральная служба по надзору в сфере здравоохранения) в соответствии с действующим законодательством. Консультацию по работе с набором, а также по вопросам, касающимся качества набора, можно получить по контактам, указанным на официальном сайте Производителя: www.f-genetics.com. 13. БИБЛИОГРАФИЯ 1. Keller А., Harz С., Matzas М. et а1. Identification of novel SNPs in glioblastoma using targeted resequencing. // PLoS One. 2011. V. 6. N. 6: el8158. 2. Guo G., Gui Y., Gao S. et al. Frequent mutations of genes encoding ubiquitin-mediated proteolysis pathway components in clear cell renal cell carcinoma. // Nat Genet. 2011. V. 44. N. 1. P. 17-19. 3. Иванов M.B., Новикова Е.И., Баранова A.B. и др. Опыт использования высокопроизводительного секвенирования (NGS) для подбора таргетной терапии при немелкоклеточном раке легкого: преимущества и ограничения. // Международный ежеквартальный научно-практический журнал по онкологии "Злокачественные опухоли". Москва. 2015. Nq4. С.310-311. 4. Pleasance Е D., Cheetham К., Stephens Р J. et а1. А comprehensive catalogue of somatic mutations from a human cancer genome. // Nature. 2010. V. 463. N. 7278. P. 191-196. 5. Berger M F., Lawrence M S., Demichelis F. et al. The genomic complexity of primary human prostate cancer. // Nature. 2011. V. 470. N. 7333. P. 214-220. 6. Ley T J., Mardis E R., Ding L. et al. DNA sequencing of a cytogenetically normal acute myeloid leukaemia genome. // Nature. 2008. V. 456. N. 7218. P. 66-72. 7. Mardis E R., Ding L., Dooling D J. et al. Recurring mutations found by sequencing an acute myeloid leukemia genome. // N Engl J Med. 2009. V. 361. N. 11. P. 1058-1066. 8. Puente X S., Pinyol M., Quesada V. et al. Whole-genome sequencing identifies recurrent mutations in chronic lymphocytic leukaemia. // Nature. 2011. V. 475. N. 7354. P. 101-105. 9. Gui Y., Guo G., Huang Y. et al. Frequent mutations of chromatin remodeling genes in Версия 25.02.2022 74 --- стр. 76 --- transitional cell carcinoma of the bladder. // Nat Genet. 2011. V. 43. N. 9. P. 875-878. 10. Письмо Министерства здравоохранения РФ и Федерального фонда обязательного медицинского страхования от 19 сентября 2018 г. NN 17-9/10/2- 6177, 11722/30/и "О типовых стандартизированных схемах лечения пациентов при злокачественных новообразованиях". 14. ПЕРЕЧЕНЬ НАЦИОНАЛЬНЫХ НОРМАТИВНЫХ ДОКУМЕНТОВ/ СТАНДАРТОВ Таблица 28 Обозначение Наименование Приказ Минздрава России № 4н от 06.06.2012 г. Об утверждении номенклатурной классификации медицинских изделий ГОСТ 12.1.005-88 Система стандартов безопасности труда. Общие санитарно- гигиенические требования к воздуху рабочей зоны ГОСТ Р 51088- 2013 Медицинские изделия для диагностики ин витро. Реагенты, наборы реагентов, тест-системы, контрольные материалы, питательные среды. Требования к изделиям и поддерживающей документации. ГОСТ Р ИСО 18113-1-2015 Медицинские изделия для диагностики in vitro. Информация, предоставляемая изготовителем (маркировка). Часть 1. Термины, определения и общие требования. ГОСТ Р ИСО 18113-2-2015 Медицинские изделия для диагностики in vitro. Информация, предоставляемая изготовителем(маркировка). Часть 2. Реагенты для диагностики in vitro для профессионального применения. ГОСТ Р ИСО 15223-1-2020 Изделия медицинские. Символы, применяемые при маркировании медицинских изделий, на этикетках и в сопроводительной документации. Часть 1. Основные требования ГОСТ Р ИСО 23640-2015 Изделия медицинские для диагностики in vitro. Оценка стабильности реагентов для диагностики in vitro ГОСТ 14192-96 Маркировка грузов ОСТ 29.1-2001 Этикетки, отпечатанные способами офсетной и флексографской печати. Издательско-полиграфическое оформление. Общие технические условия ГОСТ 33781-2016 Упаковка потребительская из картона, бумаги и комбинированных материалов. Общие технические условия ГОСТ Р 52901- 2007 Картон гофрированный для упаковки продукции. Технические условия ГОСТ 10354-82 Пленка полиэтиленовая. Технические условия СанПиН 2.1.3684- 21 Санитарно-эпидемиологические требования к содержанию территорий городских и сельских поселений, к водным объектам, питьевой воде и питьевому водоснабжению, атмосферному воздуху, почвам, жилым помещениям, эксплуатации производственных, общественных помещений, организации и проведению санитарно противоэпидемических (профилактических) мероприятий МУ 1.3.2569-09 Организация работы лабораторий, использующих методы амплификации нуклеиновых кислот при работе с материалом, содержащим микроорганизмы I-IV групп патогенности ГОСТ Р 15.301- 2016 Система разработки и постановки продукции на производство. Продукция производственно-технического назначения. Порядок разработки и постановки продукции на производство ГОСТ 15.309-98 Система разработки и постановки продукции на производство. Испытания и приемка выпускаемой продукции. Основные положения Версия 25.02.2022 75 --- стр. 77 --- 15. УТИЛИЗАЦИЯ 14.1. Утилизация набора реагентов должна проводиться специализированными службами согласно правилам и нормативам СанПиН 2.1.3684-21 «Санитарно- эпидемиологические требования к содержанию территорий городских и сельских поселений, к водным объектам, питьевой воде и питьевому водоснабжению, атмосферному воздуху, почвам, жилым помещениям, эксплуатации производственных, общественных помещений, организации и проведению санитарно противоэпидемических (профилактических) мероприятий». 14.2. Неиспользованные наборы реагентов, реагенты с истекшим сроком годности, а также использованные наборы реагентов и упаковка должны быть утилизированы как отходы класса Г в соответствии с СанПиН 2.1.3684-21 «Санитарно- эпидемиологические требования к содержанию территорий городских и сельских поселений, к водным объектам, питьевой воде и питьевому водоснабжению, атмосферному воздуху, почвам, жилым помещениям, эксплуатации производственных, общественных помещений, организации и проведению санитарно противоэпидемических (профилактических) мероприятий». 14.3. Биологический материал, включая материалы, инструменты и предметы, загрязненные биологическим материалом, должны быть утилизированы как отходы класса Б, в соответствии с СанПиН 2.1.3684-21 «Санитарно-эпидемиологические требования к содержанию территорий городских и сельских поселений, к водным объектам, питьевой воде и питьевому водоснабжению, атмосферному воздуху, почвам, жилым помещениям, эксплуатации производственных, общественных помещений, организации и проведению санитарно-противоэпидемических (профилактических) мероприятий». 16. ТРЕБОВАНИЯ К ОХРАНЕ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ ПРИ ПРИМЕНЕНИИ МЕДИЦИНСКОГО ИЗДЕЛИЯ Информация, касающаяся экологической безопасности и воздействия на окружающую среду, содержится в листе безопасности на медицинское изделие. В целях предупреждения вреда окружающей среде, здоровью и генетическому фонду человека следует: - не допускать попадания реактивов в водостоки и сброса в окружающую среду, - использовать, хранить и транспортировать набор строго в соответствии с инструкцией по применению, - соблюдать меры безопасности при работе с набором, - утилизировать использованные наборы, наборы с истекшим сроком годности согласно требованиям СанПиН 2.1.3684-21, предъявляемым к утилизации отходов класса Г. При эксплуатации изделия не образуется вредных материалов, к которым необходимо предъявлять специальные требования при их утилизации. Версия 25.02.2022 76