Набор реагентов для выделения нуклеиновых кислот из клинического материала (НУКЛЕО-преп РS) — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 4 ---
противочумные учреждения, научные opiamnaiuui. санигарно-эпидсмиологнческие
службы министерств и ведомств), а также спсциа; 1исгы медицинских учрежденш'(.
имеющие специальность врача клинической лаборатор}юй диагностики или биолош
согласно требованиям Приказа Мшпдравсоцразвнтия №541н от 23.07.2010 г. и Приказа
Минздрава №707н от 8.10.2015 г.
К работе с МИ допускаются только специалисты, обученные методам
молекулярной диагностики и правилам работы в клинико-диагностической лаббраюрни и
усгановленном порядке (СП 1.3.3118-13 «Везоиасность работы с микроорганизмами ! - II
групп патогенности (опасности)». СИ 1.3.2.S18-09 (1.3.2322-08) «Всзопаспость работы с
микроорганизмами III - IV групп иагогенности (опасноези) и возб> дизелями
паразитарных болезней»).
1.5 Целевой анализ
МИ не имеет измерительной функции, и оирслсленнс аналита не предусмотрено
1.6 Специфическая патология
Использование МИ НУКЛНО-прсп PS в качестве средства пробоподгоп^нки
клинического материала для проведения ПЦР-исследования имеет универса.и,ный
характер, не ограниченный специфической пато.чогией. Препаративная подгоговка
нуклеиновых кислот распространяется нракзнчсскм на любую пробу биологическою
материала. Пользователь МИ самостоятельно решает, из какого источника (соскобы.
СМ Ы В1.1. мазки, образцы биологического материала, содержащие клетки человека,
микроорганизмы, вирусы, простейшие, грибы и т.д.) выделять нуклеиновые кисло n.i
(ДИК/РИК). 1 !0 каким показаниям и с какой целью иодверп 1узь их дальнейшему изучешио
методом ПЦР. ^
1.7 Предназначение МИ для клинической лабораторной диагностики
Основное значение для этиологической лаборагориой диагностики бак 1сриал 1.и1»|\
и вирусных инфекций имеет выявление ДНК/РИК с помощью методов амплификации
специфической последовательности нуклеиновых кислог. (выделение ну'клсиновых кислот
(НК) — важный шаг подготовки проб перед диагностическими процесса.\ш.
Амплификация, чгроведснис обратной транскрипции, детекция накопления продуктов
амплификации методом ПЦР в реальном времени не могут быть выполнены
непосредственно на биологических образцах без предваризелыю 1о выдслсш!я
(экстракции) НК и их последующей очистки Поэтому комплексная обработка
клинических образцов перед амплификацией, заключающаяся в получении препара тв
--- стр. 5 ---
I
т
/бчищеипых ДНК/РНК. является ключевым фактором, определяющим эффективносгь
диагностического ПЦР-анализа.
2. Риски применения
Все компоненты МИ в используемых концентрациях являются нетоксичными,
иозгому при использовании по целевому назначению МИ безопасно и нс обладас!
юкснчностью.
Риски возникновения опасных послсдствир! применения МИ при его
использовании определены согласно требованиям ГОСТ Р 51088-2013.
2.1 Потенциальный риск применения ^
По степени потенциального риска применения МИ относится к классу 2а (п. 9.3.
Приказа М3 РФ X» 4н от 06.06.2012 г. Раздел II. Классификация медицинских изделий для
диагностики ш vitro и п. 5.2.3 ГОСТ Р 51088 ~ 2013.
2.2 Прямой риск применения
При использовании МИ требуется соблюдение мер биологической безопасности и
асептической техники взятия биологических образцов. Следует исхолип. из
предположения, что все собранные для анализа с помощью МИ образцы представляют
собой потенциально инфекционный материал, обращаться с которым следует, соблюдая
технику безопасности согласно ГОСТ Р 52905-2007.
2.3 Косвенный риск применения
Косвенный риск при.менения МИ связан с вероятностью получения
ложноо'фицатсльных результатов, что может прнвеезм к ошибочному медицинскому
решению и отрицательно повлиять на тактику терапевз ических и нротивоэпиде.мических
мероприятий.
Причинами ложноотрицательных результатов могут быть:
1) порча отдельных компонентов МИ в результате несоблюдения условий его
гранспортировки и хранения до использования;
2) превышение гарантийных сроков хранения, указанных на этикетках;
3) несоблюдение требований инструкции по прнмеиенню в ходе обработки
образцов.
4) использование при проведении работ лабораторной посуды и реагентов,
содержащих активые рибонуклеазы.
Поскольку любой тип клеток, присутствующих в биологическом магериалс,
содержит оба типа нуклеиновых кислот (ДНК и РНК) ложиоположительные рсзулы*а 1ы
при использовании набора реагентов НУКЛЕО-преп PS идентифицировать невозможно.
3. Характеристика МИ
--- стр. 6 ---
3.1 Ирштип метода 'жсгракшш нуклеиновых кислот
Исследуемые пробы биологического магсрила (матки ит носа и тева, обратны
платмы периферической крови, ликвора, слюны) смешивают с литирующим pacieopoM
(Раствор №1). в результате чею нроис.ходит дсструкиия клеточных .мембран и вирусных
оболочек, разрушение липидного cjtoH клеток, денатурация нуклеопро 1еиновых
комплексов с последующим высвобождением нуклеиновых кислот. Добавление
прецишпирующего раствора (1*астнор №2) иринодит к осаждению пуклсиионых кислот.
Последующая 2-кратная 01мывка остика растворами ;ыя oiMi.tBKH (Раствор Х *» .3 и Расгвор
Ку 4) способствует получению высокоочишсниых коииетрироваи! 1ых препаратов
нуклеиновых кислот. На заключительном этане оса;юк НК подсушивается и Г1ерев1>л1ися н
водную фазу с помощью раствора ; 1ля растворения НК (Раствор № 5). Н laxoM инле
образец экстрагированных НК пригоден ;тля исследования методом полимеразной nemioi!
реакции (НЦР).
i3.2 Эффективность выдслеиия НК
Показатель эффективности выделения НК. рассчитанный, как опюшсмис
количества выделенных НК ш клеток линии фибрсюластов легких эмбриона чс.юиска
ФЛЭЧ-104 к теоретическому содержанию НК в.них, сое 1авляет не менее ЗОЯй.
3.3 Степень чистоты выделенных НК
Степень чистоты НК, экстрагируемых из клеток линии ФЛЭЧ-104. оцеиивае.мая Hi)Ф
COOT1 1 0H1CHHIO оптических нлотностен финального препарата НК при 260 н 280 нм.
сос 1ан.1яег нс менее 1,7.
3.4 Минимальное количество биологического материала, из которого можс! Гм.т.
выделен препарат нуклеиновых кислот (ДИК/РНК) при использовании МИ для
последующего анализа методом полимеразной цепной реакции соответствует 1001)
1'еномных копий/мл.
3.5 Влияние интерферентов на степень чистоты выделенных НК
Установлено, что нрисутешие в исследуе.мом образце гемоглобина в концстранни
105 мг/мл н муцина в концентрацни 0.9 мг/мл нс оказывают влияние на степень чмегты
выделенных НК.
3.6 Состав МИ
Набор реагентов НУКЛИО-прсп PS выпускается в одном варианте KOMiuiCKiaiuiii.
рассчитанном на выделение НК из 100 образцов (табл. 1).
'1'аблица I
('остав медицинскою изделия
--- стр. 9 ---
- избегать вдыхания паров, контакта реагентов МИ с кожей, глазами н слизистой
ooojioHKoii. При kohiukic немедленно промыть пораженное место водой, при
необходимое! и обратиться за медицинской помощью;
- при соблюдении условий транспортировки, эксплуатации и хранения риски
взрыва и B03I ораиия отсузствуют;
- информационное письмо о безопасности набора реагентов доступно по запросу.
4.3 Особые указания
Допускается хранение недоиспользованных компонентов Набора реагентов л. 1я
.чхзьисйшсю использования, которое осуществляется при температурах, указанных в л. К.
в зоне экстракции НК.
4.4 Оценка вероя тных событий, в результате наступления которых могут npOH3t)ii i и
огрицатсльпые последствия для организма человека.
При использовании по назначению и соблюдении вышеперечисленных мер
иредосторожиост МИ безопасно.
5. Требуемое лополннгельное оборудование и материалы:
1) Ламинарный бокс биологической безопасности II класса {например, БАВи-01-
«Ламииар-С-1,2» - Ламинарные системы. Россия, или аналогичный);
2) Микроцентрифуга для пробирок «Эппенлорф» с макси.мальиой скорое i t,ю
цситрифутроваиия не мспсс 12000 g (например^ MiniSpin. Eppendorf. Германия. и;т
аиа:кпнчиая).
3) Вортскс (например. S1A Biosan. Латвия, или аналш нчный).
4) Термостат для пробирок типа «'Зппендорф» на 25 - 100 "С (например. Si.\
Bio.san. Латвия, или аналогичный).
5) Вакуумный отсасыватель мелишшскии с ко.збой ловушкой ;щя удаления
шиюсадочной жидкости (например. «ОМ-1». ООО «Утес». Россия, или анаюгнчный).
6) Хололилышк с камера.ми, поддерживающими тс.мпературу от 2 до 8 °С и oi
минус 18 до минус 25 ®С.
7) Отдельпын набор автоматических пипеток переменного объема из ipex
дозаторов объемом 1-10 мк. 1, 10-100 мкл. 100-1000 мкл (например, дозаторы «ЛАШ
Лениипет, Россия, или анаюгичные)
V
8) Одноразовые полипропиленовые завинчивающиеся или плотно
закрывающиеся микроиробирки объемом 1.5 мл (например, .\xigcn. C11I.A. иди
анаюгичные)
--- стр. 10 ---
4
9) Одноразовые наконечники с аэрозольным барьером хчя пипеток переменного
объема: до 10 мкл, до 200 мкл и до 1000 мкл. евободные oi РНКаз и ДНКаз, стерильные
(например, Axigen. США. или аналогичные)
10) Штативы ;и 1Я микропробирок объемом 1.5 мл (например. ИнтерЛабСервис.
Россия, или аналогичные);
11) Емкость для сброса отработанных расходных материалов;
12) Комплею спецодежды - халат, шапочка, обувь, предназначенные ;ыя рабогы и
каждой зоне отдельно; i
13) Резиновые (лалексные. нтрилоные. виниловые) неопудренные перчагкн
ол1юразового применения;
14) Раствор для лекоптаминашш (в случае контаминации) (0.2%-ный paciBop J\\\-
2Т. хлорацнда или аналогичный).
6. Взятие, транспоргнривание и хранение нсс. 1едуемо1 о мазериала
Все работы с клиническим материалом, включая забор, транспоргиронание и
подготовку материала для исследований, проводятся в соответс1вии с денс1вую1Ш1ми
нормативными и методическими локумептами, peiламентируюшнми дсякмыюс 11. с
возбудителями III-IV групп патогенное in. согласно санитарным правилам СП I1.V2322-08
«Безопасность работы с микроорганизмами 1IMV групп патогенности (опасносли)» и
сог ласно требованиям МУ 1.3. 2569-09 и СП 1.2.036-95.
В случае подозрения на инфнцнрованность диагностического магеридла S.AK.S*
CoV-2 его забор, упаковка, маркировка и транспортировка осутес1в.ляе!ся в cooiBeiuHiin
с требованиями и правилами к работе с материалами, потенциально иифшшрова 1шымц
возбудителями II ipyniihi патогсшюсти, их хранении и транспоргировки сог.ласио \ ] \
1.3.2569-09 «Организация работы лабораторий, использующих МАПК при рабозс с
магериалом. содержащим микроорганизмы 1 - IV групп пагогенности» и Мсгодическимп
рекомендациями Росногребиалзора МР 3.1.0169-20 «Лаборашрная диатоешка C’OVID*
19». Временными мелодическими рекомендациями М3 РФ «Профилактики. лна1'иостнка и
лечение новой коронавирусной инфекции (COVID-19) в последней версии (в настоящее
время версия 9 от 26.10.2020 г ).
7. Проведечте аиа.тиза
7.1 Меры предосторожности
Необходимо строго соблюдать «Правила устройства, лехники безопасноеш.
цроизнолегнецпой санитарии, мрогииоэпидемического режима и личной гигиены при
10
--- стр. 11 ---
I
раГнмс в лабораториях (отлелениях. отделах) санитарио-эпнлемнологаческих учрсжлент!
системы ллравоохрансиня СССР», Москва. 1^>81 г.
Набор реагентов гоюв к мрнмспсишо сшласно данной инструкции. Все рабсиы
нроволятся при 20-28 * ’С и огноситсльнон в.тажносгн воздуха 15-75%.
Набор реагентов нс содержит ветест и материалов, требующих обсснечення
специальных .мер безопасности, н не нрелсган.тяег опасности для люден в течение всею
срока годности.
При работе с МИ необхоли.мо использовать одноразовые неопудренные перчатки.
.таб1>ратор1 1ые халаты, защищать глаза во время работы с образца.\ 1н и реагентами,
тщательно вымыть руки по окончании работы.
Каждое рабочее место должно быть сшабжено собственным набором лотап^рои
переменного объема, необходимыми вспомогательными матерна-тамн н оборудованием
'Запрещается их перемещение между рабочими местами.
При выполнении выделения ДПК/РПК необходимо использовать только нр<юирки
н одноразовые наконечники с фильтром для дозаторов, сертифтшровамиые
производителем на отсутствие ДНКаз. РНКаз. Пс допускается повюрное исполнижанне
наконечников.
Все использованные одноразовые материалы должны подвергаться обработке
дсзннфтшрующи.ми срслствамн с последующей ухнлпзапней.
7.2 Требования к персоналу
Набор реагентов ПУКЛ[Ю-п|х*п PS предназначен для профссснональмою
применения и должен использоваться специа-тисгами, имеющими достаточную
квалификацию,
7.3 Процедура выделения ПК из клинического матерната
13ылелс11ис ПК с помощью МИ 11УКЛВО-прсп PS [фоволят в специальной зоне для
работы с образцами.
Для выделепня ПК нз образцов клинического материала необходимо провести
следующие стадии.
7.3.1 Подготовить и промаркировать необходимое котшчсство
сертифицированных пронзнодителем на отсутствие ДНКаз, РПКаз мнкроиробирок
объемом 1.5 мл в соответствии с количество.м исследуемых проб и две дополнительные
мнкропробирки для (ЖО и ПКО, если они предусмотрены для анализа данного
возбуди геля инфекнин.
11
--- стр. 12 ---
I
: 7.3.2 Внести в каждую подготовленную .мнкропробирку ВКО. семи он
г1рслусмотрен Х1я анализа данного возбудителя инфекции в объеме, реко.мснлованно.м
нрои ^водителем ПЦР-набора.
7.3.3 Добавить в каждую мнкропробирку по 300 мкл Раствора № 1. 1'слн распюр
хранился при температуре 2-К * ’С и в нем образовался криста 1лическнГ! 1н:аток, ю сю
необходимо предварительно прогреть при температуре 65 до полного растворения
осалка.
7.3.4 Пробирки с обраша.мн предварительно встряхнуть или вылержагь на
вортексе в течение I мии.
7.3.5 В пр^тбирки лля образцов внести по 100 .мкл подготоаленных пр(тб. используя
сертнфнцнрованныс пр<тизволителем на отсутствие ДНКаз, РНКаз наконечники с
аэрозольным барьером. В пробирку отрицательного контроля внести 100 мк.т ОКО В
пробирку положительного контроля внести 90 мкл ОКО и К) мк.т НКО (если
используются).
7.3.6 С'одержимос пробирок тщательно ncpcMeiJiaib на воркжее.
огис1прифуп 1роватт> в течение 5 с на микроцен 1рифу|с лля удатеиия ка 1гель с виутрепней
поверхности крышки и iipoipcib 5 мни при 65 в термостате.
7.3.7 В каждую мнкропробирку внести по 4(И) мкл Раствора № 2. плотно закрыл,
крышки и перемешать на вортексе.
7.3.8 Отцентрнфугнровать микропробирки на микроцентрифуге при 13000 об. мин
в течение 5 мни при комнат пой температуре.
7.3.9 Из каждой микронробиркн аккуратно отобрать, не задевая осадок,
падосадочную жидкость, иснош.зуя вакуумный огсасыватсль и отдельный наконечник д.1я
каждой пробы.
7.3.10 В каждую микропробирку внести по 500 мкл Раствора № 3. Пробирк>
закрыть крышкой и иерсметать на вортексе.
7.3.! I Процептрифугировать микропробирки при 13000 об./мим в течение 1-2 мин
при комнатной температуре.
7.3.12 Из каждой микронробиркн осторожно, не захватывая осадок, отобрать
падосадочную жидкость, используя вакуумный огсасыватсль и отдельные наконечники
;шя каждой пробы.
7.3.13 Добавить в каждую мнкропробирк\ по 200 мкл Раствора 4 и
иеитрифугнровать при при 13000 об./мин н течение 2 мин при комнатной температлре.
12
--- стр. 13 ---
i
I
7.3.14 Из каждой микр<) 1 1робирки осторожно, не захватывая осадок, оюбрать
надосадочную жидкость, используя вакуумный отсасыватель и отдельные наконечники
для каждой пробы.
7.3.15 Поместить пробирки в термосзат при температуре 65 °С на 5 мин для
подсушивания осадка (при этом крышки пробирок должны быть открыты).
7.3.16 Добавить в каждую микронробирку по 50 мкл Раствора № 5, предварительно
прогретого до 65 °С, и перемепшть содержимое пробирок на вортексе.
7.3.17 Поместить пробирки в термостат при температуре 65 °С на 5 мин.
7.3.18 Ошентрифугировать пробирки при 13000 об./мин в течение 1 мии на
мнкроценгрнфуге. '
7.3.19 Иадосадочная жидкость содержит очищенный препарат НК. 11р()бы го юны к
постановке реакции ОТ-ПЦР или ПЦР.
7.3.20 Препараты очищенных НК moi^t храниться до 24 ч при темперагурс or 2 до
8 и до г ода при температуре не выше минус 16 °С.
7.4 Предупреждения
При работе с НК необходимо использовать только одноразовые С 1сри.ты1ые
пластиковые расходные Marepiiajibi, сср1иф|1нированные нро113волнтс.1см па
oicyiciBiie ДНКаз, РНКаз и имеющие специальную маркировку «RNasc-free»,
«DNase-free». •
8. Условия трапспоргироваиия и хранения
Срок 10ДНОСТИ - 12 .месяцев со дня утверждения ОБТК производства, при
соблюдении условий транспортирования и хранения.
Набор реагентов с истекшим сроком годности применению не подлежит.
Срок годности н условия храпения вскрытых реагентов соотвсгствуют сроку
юдности и условиям храпения, указанным на этикетках для невскрытых pcaienioB.
Набор реагентов, транспортировавшийся или хранившийся с нарушением
температурного режима, с нарушением целостности упаковки предприятия-изготовителя,
исиользоваиню не подлежи!.
Граиспортироваиис набора peai cinoB можег производиться любы.м видо.м крытого
фаисиорта при темпера lypc or 2 до 25 °С.
Набор реагентов хранить при те.мперагуре от 2 до 8 ‘’С.
Условия отпуска - Д.тя лечебно-профилактических и санитарно-профилактических
учреждений.
9. Указания по vnuinaiiini
13
--- стр. 14 ---
i
I
I
При проведении исследований обра^укчся отходы, относящиеся к классам А. Б. li.
i' (СанПнН 2.1.7.2790-10 «Санитарно-эпидемиологические требования к обращению е
медицинскими отходами»).
Отходы, образующиеся в ходе применения МИ, утилизируются в соответсшии с
гином отходов. При этом упаковка набора, компоненты набора реагентов, осгавшиссн
неиспользованными по истечении срока годности набора реагентов, относятся к отх(»дам
класса Л и утилизируется с бытовыми отходами.
Учигывая потенциальную инфекционную опасность исследуе.мых образцов и их
отходов, следует соблюдать меры прсдосторожиосги. принязые при paGoie е
иотешиитыю ии(1)СКциониым материалом. - остатки исследуемых образцов, не
исиользус.мые для дальнейших исследований или биобанкировиния, относя 1ся к класс) Ь.
Утилизация, уничтожение, дезинфекция отходов проводятся в cootbcicibhh с
требованиями СанПиН 2.1.7.2790-10 «Саиигарпо-эпидемиологические гребования к
обрашсиию с медицинскими отходами». МУ-287-113 «Методические указаш!я по
дезинфекции, прсдстерилизациоиной очистке и стерилизации изделий мслиЦипскою
назначения». СП 1.3.2322-08 «Безопасность работы с микроорганизмами I1I-1V групп
патогенности (опасности)»; МУ 1*3.2569-09 «Организация рабо 1ы лабораторий,
использующих методы амплификации нуклеиновых кислот при работе с материаю.м.
содержащим микроорганизмы 1-IV групп патогенности».
По вопросам, касающимся качества Набора реагентов для выделения нуклеиионых
кислот из клинического магериала (НУКЛЕО-преп PS). следует обрашазься к
[|редпрнятию-изготовнгелю ФЬУП ПИН эпидемиологии и микробиоло!ии имеии Ilacicpa
но адресу: 197101, Санкт-Петербург, ул. Мира, 14, тел/факс: (812) 233 17 03, телефон;
(812) 325 27 10, e-mail: pastcurdnti?/)yandex.ru. http://www.dntDasteur.ru.
14