Набор реагентов для определения содержания тестостерона в сыворотке крови человека методом радиоиммунологического анализа (РИА-ТЕСТОСТЕРОН-НБ) по ТУ 9398-014-40310348-2011 — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 1 --- У Т В Е РЖ Д Е Н А П риказом Росздравнадзора о т « » 2 0 1 1 г . № Ко|цюков ■' / о ( И Н С Т РУ К Ц И Я по П Р И М Е Н Е Н И Ю Н А Б О Р А РЕ А ГЕ Н Т О В Д Л Я О П Р Е Д Е Л Е Н И Я С О Д Е РЖ А Н И Я Т Е С Т О С Т Е Р О Н А В С Ы В О РО Т К Е К РО ВИ Ч Е Л О В Е К А М Е Т О Д О М Р А Д И О И М М У Н О Л О Г И Ч Е С К О Г О А Н А Л И ЗА (РИ А -Т Е С Т О С Т Е РО Н -Н Б ) 1. Н А ЗН А Ч Е Н И Е 1.1. Н абор реагентов РИ А -ТЕС Т О С Т ЕРО Н -Н Б предназначен для определения со держания тестостерона в сы воротке крови человека м етодом радиоимм унологического ана лиза. Набор предназначен для прим енения только in vitro. 1.2. Т естостерон синтезируется главным образом в сем енниках, а такж е в сущ ественно меньш их количествах в яичниках и коре надпочечников. К оличественное определение тес тостерона необходим о для диагностики и контроля за лечением наруш ений функций репро дуктивной системы . 1.3. Н абор рассчитан на проведение анализа в дубликатах 42 неизвестны х образцов, 6 калибровочных проб, 1 пробы контрольной сы воротки и 1 пробы общ ей активности тесто стерона, меченного ’^^1, всего 100 определений. 1.4. П родолж ительность анализа составляет 3,5 ч. 1.5. Д иапазон определяем ы х концентраций тестостерона в сы воротке крови человека 0,5-100 нмоль/л. 2. Х А РА К Т Е РИ С Т И К И Н А Б О РА . 2.1. П ринцип дей стви я . П ринцип работы набора состоит в следую щ ем. В аналитической пробирке, содерж ащ ей компоненты набора и образец сы воротки крови, во время инкубации устанавливается равнове сие между тестостероном , м еченны м '^^1, и эндогенны м горм оном анализируемого образца сыворотки крови с антителам и, им мобилизованны м и на стенках пробирки. Количество связан ного антителами тестостерона, м еченного '^^1, находится в обратной зависим ости от концен трации тестостерона в анализируем ом образце. Разделение свободного и связанного антитела Ф --- стр. 2 --- ми тестостерона осущ ествляю т удалением инкубационной среды из пробирок с помощ ью водоструйного насоса. К онцентрацию тестостерона в неизвестны х образцах находят по калиб ровочному графику зависим ости связанного тестостерона, м еченного ’^^1, от концентрации тестостерона в калибровочны х пробах. 2.2. С остав набора. 2.2.1. В состав набора РИ А -Т Е С Т О С Т Е РО Н -Н Б входят следую щ ие компоненты: - тестостерон, м еченны й '^^1, готовый к использованию - 1 ф лакон (55 мл); - пробирки полистирольны е с им м обилизованны м и м оноклональны м и антителами к тестостерону, готовы к использованию - 100 шт.; - калибровочны е пробы на основе сы воротки крови человека с азидом натрия (< 0,01% ), откалиброванны е относительно контрольной сы воротки с известны м содерж анием тестостерона (ф ирм а BIO -R A D , С Ш А кат. № 370), содерж ащ ие известны е количества тес тостерона: О нм оль/л; 1,0 нмоль/л; 3,0 нмоль/л; 10 нм оль/л; 30 нм оль/л и 100 нмоль/л; кон центрации тестостерона в калибровочны х пробах могут несколько отличаться от указанных величин, точны е значения указаны на этикетках ф лаконов, готовы к использованию - 6 флаконов (по 0,5 мл); контрольная сы воротка на основе сы воротки крови человека, содерж ащ ая азид натрия (< 0,01% ), ли оф и ли зат - 1 флакон. 3. А Н А Л И Т И Ч Е С К И Е Х А РА К Т Е Р И С Т И К И Н А Б О РА 3.1. С пециф ичность П ерекрестная реакция антител к тестостерону со структурны м и аналогами тестосте рона приведена в таблице 1. Т аблица 1. И сследуем ы е вещ ества П ерекрестная реакция, % Т естостерон 100 5 -Д игидротестостерон 9 11 - Гидрокситестостерон 1 5-А ндростан-3,17-диол 1 Д иги дроэпиандростерон сульфат 0,01 Д иги дроэп и ан дростерон 0,008 А ндростерон 0,08 П рогестерон 0,03 11- Г идроксипрогестерон 0,03 К ортизол 0,01 Д езоксикортикостерон 0,03 К ортикостерон 0,002 --- стр. 3 --- 3.2. Ч увствительность анализа М иним альная концентрация тестостерона, определяем ая с пом ощ ью набора, составляет не более 0,3 нмоль/л. 3.3 В оспроизводим ость К оэф ф ициент вариации результатов определений концентрации тестостерона в об разцах сы воротки крови не превы ш ает 8%. 3.4. Тест на «открытие» П роцент «откры тия» тестостерона в пробе, полученной при смеш ивании одинаковых количеств контрольной сы воротки и калибровочной пробы, содерж ащ ей 3,0 нмоль/л тесто стерона, составляет 90-110% . 3.5. Т ест на «линейность» О тклонение от расчетной величины содерж ания тестостерона в диапазоне концентра ций 1,0-100 нм оль/л составляет ± 10%. 3.6. К онцентрация тестостерона в сы воротке крови здоровы х лиц, определяемая с по мощ ью набора РИ А -Т Е С Т О С Т Е РО Н -Н Б, составляет: м уж чины (8-32) нмоль/л, ж енщ ины - менее 5 нмоль/л. 3.7. Реком ендуется в каж дой лаборатории при использовании набора уточнить значе ния норм альны х величин для обследуемого контингента лю дей. 4. М Е Р Ы П Р Е Д О С Т О Р О Ж Н О С Т И 4.1. П отенциальны й риск прим енения набора - класс 2а. 4.2. Все ком поненты набора, за исклю чением тестостерона, м еченного ’^^1, являю тся нетоксичными. Т естостерон, меченны й '^^1, является источником м ягкого гамма-излучения. П ериод полураспада изотопа ['^^1] составляет 60,04 суток. При работе с набором следует соблю дать правила работы с радиоактивны ми вещ ествам и по 3-му классу, излож енные в «Нормах радиационной безопасности Н РБ-99/2009» и в «О сновны х санитарны х правилах обеспечения радиационной безопасности О С П О РБ-99/2010». 4.3. К ом поненты набора (калибровочны е пробы, контрольная сы воротка) содерж ат азид натрия в качестве консерванта. А зид натрия м ож ет вступать в реакцию со свинцом, ме дью , латунью , образуя взры воопасны е азиды м еталлов. С ледует избегать попадания этих компонентов на кож у и слизисты е оболочки, при попадании пром ы ть пораж енное место больш им количеством проточной воды. 4.4. При работе с набором следует соблю дать «П равила устройства, техники безопас ности, производственной санитарии, противоэпидем ического реж им а и личной гигиены при --- стр. 4 --- т работе в лабораториях (отделениях, отделах) санитарно-эпидем иологических учреждений системы М инистерства здравоохранения СССР» (М осква, 1981 г.). 4.5. При работе с набором следует надевать одноразовы е резиновы е или пластиковые перчатки, так как образцы крови человека следует рассм атривать как потенциально инф ици рованны е, способны е длительное время сохранять и передавать ВИ Ч, вирус гепатита или лю бой другой возбудитель вирусны х инфекций. П ерчатки следует сдавать вместе с другими радиоактивны ми отходам и. 4.6. Рабочие м еста долж ны бы ть обеспечены приточно-вы тяж ной вентиляцией. 4.7. Х им ическая посуда и оборудование, которы е использую тся в работе с набором, долж ны быть соответствую щ им образом пром аркированы и храниться отдельно. 4.8. Запрещ ается приём пищ и, использование косм етических средств и курение в по мещ ениях, предназначенны х для работы с набором. 5. О Б О Р У Д О В А Н И Е И М А Т ЕРИ А Л Ы - Гам м а-счетчик колодезного типа; - прибор для встряхивания пробирок (не менее 350 встряхиваний в мин); - насос водоструйны й; - см еситель вихревой; - холодильник бы товой, поддерж иваю щ ий тем пературу (2-8) °С; - пипетки полуавтом атические одноканальны е с перем енны м или фиксированным объёмом со см енны м и наконечникам и, позволяю щ ие отбирать объём ы ж идкостей 0,05 и 0,5 мл, аттестованны е по значению средней дозы и сходим ости результатов пипетирования (по греш ность не более 3 % ); - пробирки пластмассовы е вм естимостью 3,0 - 5,0 мл с пробкам и - 2 шт.; - ш татив для пробирок; - перчатки резиновы е или пластиковы е; - бумага ф ильтровальная лабораторная; - вода дистиллированная. 6. А Н А Л И ЗИ Р У Е М Ы Е О Б Р А ЗЦ Ы 6.1. Н егем олизированная сы воротка крови человека. (Е ) --- стр. 5 --- 7.1. П одготовка реагентов для анализа. 7.1.1. К ом поненты набора и исследуемы е образцы сы воротки крови следует вьщер- жать комнатной при тем пературе (18-25) °С в течение врем ени не м енее 30 мин. 7.1.2. Во ф лакон, содерж ащ ий контрольную сы воротку, внести 0,5 мл дистиллирован ной воды, вы держ ать при ком натной температуре в течение 10 мин, после чего содерж имое флакона тщ ательно перем еш ать, избегая образования пены. При вскры тии и растворении не обходимо следить, чтобы на пробке не осталось сухого вещ ества. К онтрольную сы воротку, подготовленную к работе, м ож но хранить при температуре (2-8)°С не более 7 сут; при необходим ости более длительного хранения (до 3 мес) кон трольную сы воротку следует разделить на аликвоты и хранить при тем пературе не выше минус 20 °С . П овторное зам ораж ивание исклю чается. 7.1.3. П робирки с им м обилизованны м и м оноклональны м и антителам и к тестостерону поместить в ш татив и м аркировать следую щ им образом ( в дубликатах): Т - для определения общ ей активности тестостерона, меченного ; В 0-В 5 - калибровочны е пробы тестостерона; Вкс - контрольная сы воротка; Вх - исследуемы е образцы сы воротки крови человека. 7.2. П роведение анализа. 7.2.1. В пробирки В 0-В 5 внести по 0,05 мл соответствую щ их калибровочны х проб. В пробирки Вкс внести по 0,05 мл контрольной сы воротки. В пробирки Вх внести по 0,05 мл .исследуемых образцов сы вороток крови человека. 7.2.2. Во все пробирки внести по 0,5 мл раствора тестостерона, меченного *^^1. 7.2.3. И нкубировать все пробирки в течение 3 ч при постоянном встряхивании на приборе для встряхивания пробирок (не менее 350 встряхиваний в мин) и комнатной тем пе ратуре (18-25) °С. 7.2.4. П осле окончания инкубации тщ ательно удалить из всех пробирок, кроме Т, ж идкость с пом ощ ью водоструйного насоса. 7.2.5. Все пробирки пом естить в гамма-счетчик и изм ерить скорость счета в каж дой пробирке в течение 1 мин. 7.2.6. П оследовательность внесения реагентов в пробирки и проведение других опе раций анализа приведены в таблице 2. У казанную последовательность не нарушать! 7. ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА. --- стр. 6 --- Таблица 2. •I Пробир ки (в дубли катах) Вп B.-Bs В КС Вх П оследовательность операций К алиб ровоч ные пробы, мл 0,05 0,05 К он троль ная сы воротка и иссле дуемы е сы во ротки крови, мл 0,05 0,05 Тестостерон, меченны й '^^ 1, мл 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 И нкубировать в течение 3 ч при постоян ном встряхива нии П осле инкуба ции тщ ательно удалить из всех пробирок, кроме Т, ж идкость с пом ощ ью водо струйного насоса И змерить скорость счета в каж дой пробирке в течение 1 мин. 8. Р А С Ч Е Т Ы И Г Р А Ф И Ч Е С К О Е П О С Т Р О Е Н И Е 8.1. Н айти среднее ариф м етическое значение скорости счета (имп/мин) для каждой пары пробирок . 8.2. Рассчитать величину отнош ения Bq/T. (% ), где: Во.- средняя скорость счета в пробирках, содерж ащ их калибровочную пробу с кон центрацией О нм оль/л тестостерона; Т - общ ая активность тестостерона, меченного ’^^1 , изм еряем ая средней скоростью счета в пробирках Т. 8.3. Рассчитать величину отклонения В /В о (% ) для каж дой калибровочной пробы, контрольной сы воротки и исследуемы х образцов, где: Bi - среднее ариф м етическое значение скорости счета в пробирках В 0-В 5 ,Вкс и Вх. 8.4. П остроить калибровочны й график в полулогариф м ических координатах, откла дывая на оси ординат (линейная) отнош ение Bj/Bo (% ), а по оси абсцисс (логариф мическая) - значения концентраций тестостерона (нмоль/л) в соответствую щ их калибровочны х пробах. 8.5. О пределить по калибровочном у графику содерж ание тестостерона в контрольной сыворотке и исследуем ы х образцах. Для перевода м олярной концентрации тестостерона в м ассовую следует пользоваться соотнош ением: м кг/л = нм оль/л X 0,362 --- стр. 7 --- 9.1. К онцентрация тестостерона в сы воротке крови здоровы х лиц, определяемая с по мощ ью набора РИ А -Т Е С Т О С Т Е РО Н -Н Б, составляет: м уж чины (8-32) нм оль/л, ж енщ ины - менее 5 нмоль/л. 9. У Ч Е Т РЕ ЗУ Л Ь Т А Т О В А Н А Л И ЗА . О 10. У С Л О В И Я Х РА Н ЕН И Я И П Р И М Е Н Е Н И Я Н А Б О РА 10.1 Н абор реагентов РИ А -ТЕС Т О С Т ЕРО Н -Н Б долж ен храниться в упаковке пред- приятия-изготовителя при тем пературе (2-8) °С в течение всего срока годности набора. Д о пускается хранение набора при температуре до 25 °С не более 3 сут. 10.2 При вскры тии и растворении контрольной сы воротки необходим о следить, чтобы в пробирках не оставалось сухого вещ ества. 10.3. Ф лаконы с калибровочны м и пробами и раствором тестостерона, меченного ’^^1, после вскры тия м ож но хранить в плотно закрытом виде при тем пературе (2-8) °С в течение всего срока годности набора. Вскры тую коробку с пробирками мож но хранить при тем пературе (2-8) °С в течение всего срока годности набора. Рекомендуется не наруш ать после вскры тия коробки с пробир ками целостность упаковки для неиспользованны х пробирок. 10.4. Д ля проведения анализа не следует использовать гемолизированную , мутную и гиперлипидимическую сы воротку крови человека. 10.5. О бразцы сы воротки крови мож но хранить при тем пературе (2-8) °С, если анализ проводят в течение 24 ч после взятия крови. О бразцы сы воротки крови мож но хранить при температуре минус 20 °С в течение более длительного врем ени - до 3 мес (допускается толь ко одноразовое зам ораж ивание и размораж ивание образцов). Разм ораж ивание образцов про водят при ком натной тем пературе (18-25) °С . 10.6. И сследуем ы е образцы сыворотки крови следует проверять на остаточную ак тивность радионуклидов, если обследуемому лицу до отбора крови вводили радиоактивны е препараты. 10.7. Запрещ ается использовать реагенты из наборов других фирм-производителей. 10.8. Д ля получения надёж ны х результатов необходим о строгое соблю дение инструк ции по прим енению набора. © --- стр. 8 --- По вопросам , касаю щ им ся качества набора РИ А -Т Е С Т О С Т Е РО Н , следует обращ аться в ЗАО «Н уклидбиомед» по адресу: 115478, М осква, К аш ирское ш оссе, д. 24, строение 23, тел. (8-495) 781-45-97, 781-45-98, или в Ф ГУ «Н И И ф изико-хим ической м едицины » Ф М БА России по адресу: 119435, М осква, ул. М алая П ироговская, д. 1а, тел (8-499) 246-43-32. Г енеральны й ЗАО «Нукл: Руководитель ^'СС<ЗЛ иммунологии и регул: механизмов в хирургии РН Ц Х им. акад. Б.В .П етровского РА М Н , дмн., проф ессор Подпись Л. И. В инницкого заверяю : ученый секретарь РН Ц Х им. акад. Б.В .П етровского РА М Н к.м.н. А.В. Кодю ков . В инницкий М . И. Секачева