--- стр. 2 ---
АМПЛИТЕК
!
ДНК-100
Набор реагентов для экстракции ДНК из
биологического материала человека (ДНК-100)
ИНСТРУКЦИЯ по ПРИМЕНЕНИЮ
IVD
Форма 1
Форма 2
REF
r e f
Е002-1
Е002-2
96
96
--- стр. 3 ---
ВВЕДЕНИЕ..................................................................................................................................5
1 НАЗНАЧЕНИЕ.......................................................................................................................^
1.1 Область применения......................................................................... ......*.................^
2 ФОРМЫ ВЫПУСКА ...........................................................................................................]
3 СОСТАВ ..............................................................................................................................I
4 ПРИНЦИП МЕТОДА........................................................................................... ................^
5 НЕОБХОДИМОЕ ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ...................................................6
6 МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ.......................... .............................................................7
7 ИССЛЕДУЕМЫЙ МАТЕРИАЛ.............................................................................................9
7.1 Потенциально интерферирующие вещества...................................................."I '
8 ПРОЦЕДУРА ЭКСТРАКЦИИ ДНК..................................................................................1 ^
8.1 Экстракция ДНК при использовании формы выпуска 1 (автоматическая
методика с использованием автоматической станции «Arnplitech Е1»)...................”12
8.2 Экстракция ДНК при использовании формы выпуска 2 (автоматическая
методика с использованием процессора магнитных частиц KingFisher™) ................13
8.3 Экстракция ДНК при использовании формы выпуска 2 (ручная методика с
использованием центрифугирования).............................................................................
9 КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА ...................................................................................................
9.1 Контрол и, используемые на этапе экстракции ДНК ...........................................16
9 2 Мониторинг лаборатории на наличие контаминации........................................13
10 ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА...................... ..............г;:-;:-"
11 УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ, ТРАНСПОРТИРОВАНИЯ И ЭКСПЛУАТАЦИИ НАБОРА17
12 ПЕРЕЧЕНЬ СОКРАЩЕНИЙ...................................................................... Ц
13 ПЕРЕЧЕНЬ ПРИМЕНЯЕМЫХ НАЦИОНАЛЬНЫХ СТАНДАРТОВ ............................1»
14 ГАРАНТИИ ПРОИЗВОДИТЕЛЯ .......................................................................................Ц
15 ТЕХНИЧЕСКАЯ ПОДДЕРЖКА.......................................................................................... Ц
16 СИМВОЛЫ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ В ДОКУМЕНТАЦИИ ПРОИЗВОДИТЕЛЯ ..............19
СОДЕРЖАНИЕ
ДНК-100 Инструкция в.01.09.21
--- стр. 4 ---
Настоящая инструкция по применению версии 01,09,21 распространяется на
медицинское изделие «Набор реагентов для экстракции ДНК из биологического
материала человека (ДНК-100)» по ТУ 21.20.23-001-19926214-2021 (далее - набор).
Краткое наименование набора: ДНК-100.
Набор следует применять в соответствии с действующей версией инструкции по
применению. Для удобства работы в лаборатории допускается использовать
действующую версию краткого руководства по применению набора.
ВВЕДЕНИЕ
ДНК-100 Инструкция В.01.09.21
--- стр. 5 ---
Набор предназначен для экстракции ДНК из биологического материала человека
для последующего исследования методом ПЦР. Для проведения экстракции ДНК с
помощью набора следует использовать следующие виды биологического материала:
• мазки со слизистой оболочки влагалища, прямой кишки, ротоглотки, с
конъюнктивы, с пузырьковых высыпаний и эрозивно-язвенных поражений кожи и
слизистых оболочек;
• соскобы эпителия со слизистой оболочки цервикального канала, уретры;
• секрет предстательной железы, моча (осадок первой порции утренней мочи).
1.1 Область применения
Набор предназначен для лабораторной диагностики in vitro (экстракции ДНК из
биологического материала человека). Набор может применяться в клинико-
диагностических лабораториях и научно-исследовательских организациях.
1 НАЗНАЧЕНИЕ
2 ФОРМЫ ВЫПУСКА
Набор выпускается в двух формах^ (см. таблицу 1).
Описание форм выпуска набора
Форма Назначение
Таблица 1
Количество
исследований, в том
числе для контролей
Для проведения экстракции ДНК с применением
автоматической методики с использованием
автоматической станции пробоподготовки «Amplitech Е1»
(ООО «Амплитек»).
________________________________
96
Для проведения экстракции ДНК с применением:
- ручной методики с использованием центрифугирования,
автоматической методики с использованием
процессора магнитных частиц KingFisher™ (Thermo Fisher
Scientific, Финляндия).
_____________________________
96
3 СОСТАВ
Состав форм выпуска набора указан в таблицах 2, 3 и 4.
Таблица 2
Состав формы 1
Компонент Количество Внешний вид
Картридж с реагентами
ДНК-100 2 шт. 96-луночные планшеты с реагентами,
запаянные фольгированной плёнкой
ОКО
(Буферный раствор) 1,2 мл X 1 пробирка Прозрачная бесцветная жидкость
Одноразовые наконечники 96 шт. Наконечники с фильтром
Одноразовые пробирки 96 шт. Стрипованные или индивидуальные
пробирки
Плёнки для картриджа 8 шт. Клейкие плёнки
■ ’ Набор в форме выпуска 1 упакован в коробку из картона, в форме выпуска 2 - в полиэтиленовый пакет
с застёжкой Zip-Lock.
ДНК-100 Инструкция в.01.09.21
--- стр. 6 ---
iM
Компонент Количество Внешний вид
Инструкция по применению 1 шт. В электронном виде^ по адресу:
http://www.amplitech.ru/resources/
Краткое руководство 1 шт. В бумажном виде
Паспорт 1 шт. В электронном виде^ по адресу:
http://www.amplitech.ru/quality/
Таблица 3
Расположение и объём реагентов в картридже, входящем в состав формы 1
Ряды
ячеек Реагент Номинальный объём „
в ячейке, мл Внешний вид
А, С,
Е, G
Буфер А1
(Раствор для лизиса с
магнетизированной силикой и
внутренним контролем BKO-FL)
< |> ^ < !>
Опасно^
0,20 Суспензия'* от коричневого
до чёрного цвета
В, D,
F, Н
Буфер А2
(Раствор для отмывки и элюции) 0,75 Прозрачная бесцветная
жидкость
Состав формы 2
Таблица 4
Компонент Номинальный
объём, мл Количество Внешний вид
Буфер А1
Опасно^
(Раствор для лизиса с магнетизированной
силикой и внутренним контролем BKO-FL)
19,2 1 флакон Суспензия'* от коричневого до
чёрного цвета
Буфер А2
(Раствор для отмывки и элюции) 72,0 1 флакон Прозрачная бесцветная жидкость
ОКО
(Буферный раствор) 1.2 1 пробирка Прозрачная бесцветная жидкость
Инструкция по применению - 1 шт. В электронном виде^ по адресу:
http://www.amplitech.ru/resources/
Краткое руководство - 1 шт. В бумажном виде
Паспорт - 1 шт. В электронном виде^ по адресу:
http://www.ampiitech.ru/quaiitv/
4 ПРИНЦИП МЕТОДА
Экстракция ДНК проводится методом магнитной сепарации. Процедура экстракции
ДНК включает:
• обработку исследуемого образца лизирующим раствором,
• связывание ДНК с частицами магнитного сорбента (магнетизированной силики),
• удаление других компонентов лизированного биологического материала
последующими отмывками сорбента при осаждении магнитного сорбента с ДНК под
действием постоянного магнитного поля или с использованием центрифуги,
• элюцию ДНК при добавлении раствора для элюции к магнитному сорбенту.
2 в случае отсутствия доступа к Интернету обратитесь в службу технической поддержки по телефону
(495) 374-13-46 для запроса о предоставлении бумажной версии инструкции и паспорта,
2 Реагент содержит опасные вещества, информацию по которым см. в разделе 6.
В процессе хранения возможно оседание магнетизированной силики, вследствие чего образуется
осадок от коричневого до чёрного цвета в прозрачном растворе.
ДНК-100 Инструкция В.01.09.21
--- стр. 7 ---
5 НЕОБХОДИМОЕ ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ
Для работы с набором требуются оборудование и материалы, указанные в
таблице 5.
Таблица 5
Оборудование и материалы, необходимые для работы с набором
Форма
выпуска Необходимое оборудование и материалы
ВНИМАНИЕ! При работе с набором следует использовать
наконечники, сертифицированные на отсутствие ДНКаз._______
только одноразовые пробирки и
• автоматическая станция пробоподготовки «Amplitech Е1» (ООО «Амплитек»,
Россия);
бокс микробиологической безопасности класс II (тип А);
центрифуга-вортекс;
дозаторы переменного объёма, механические или электронные, с возможностью
дозирования от 10 до 100 мкл;
штатив для пробирок объёмом 2,0 мл;
холодильник с камерой, поддерживающей температуру от 2 °С до 8 °С;
наконечники для дозаторов переменного объёма, с фильтром, объёмом до 10 и 100
мкл, одноразовые, свободные от ДНКаз;
контейнеры для элюата согласно требованиям, указанным в руководстве по
эксплуатации автоматической станции «Amplitech Е1»;
ёмкость для сброса и инактивации использованных материалов;
перчатки медицинские, одноразовые, неопудренные.__________________________
Форма 1
Форма 2
Автоматическая методика экстракции
процессор магнитных частиц для очистки нуклеиновых кислот, клеток и белков
KingFisher™ (Thermo Fisher Scientific, Финляндия);
бокс микробиологической безопасности класс II (тип А);
центрифуга-вортекс;
дозаторы переменного объёма, механические или электронные, с возможностью
дозирования от 10 до 1000 мкл;
штатив для пробирок объёмом 2,0 мл;
холодильник с камерой, поддерживающей температуру от 2 °С до 8 °С;
наконечники для дозаторов переменного объёма, с фильтром, объёмом до 10,100,
00 и 1000 мкл, одноразовые, свободные от ДНКаз;
расходные материалы для процессора магнитных частиц KingFisher™;
ёмкость для сброса и инактивации использованных материалов;
перчатки медицинские, одноразовые, неопудренные.__________________________
Ручная методика экстракции
бокс микробиологической безопасности класс II (тип А);
центрифуга-вортекс;
микроцентрифуга для пробирок типа «Эппендорф» объёмом 1,5 мл с ускорением не
менее 10000 х д;
термостат для пробирок типа «Эппендорф» объёмом 1,5 мл с возможностью
агрева не менее чем до 80 °С;
вакуумный отсасыватель медицинский с колбой-ловушкой;
дозаторы переменного объёма, механические или электронные, с возможностью
дозирования от 100 до 1000 мкл;
штатив для пробирок объёмом 1,5 и 2,0 мл;
холодильник с камерой, поддерживающей температуру от 2 “С до 8 °С;
микроцентрифужные пробирки объёмом 1,5 мл с крышками, одноразовые,
свободные от ДНКаз;
наконечники для дозаторов переменного объёма, с фильтром, объёмом до 100, 200
1000 мкл, одноразовые, свободные от ДНКаз;
наконечники для дозаторов переменного объёма, без фильтра, объёмом до 200 мкл,
одноразовые;
ёмкость для сброса и инактивации использованных материалов; •
• перчатки медицинские, одноразовые, неопудренные. __________________________
ДНК-100 Инструкция В.01.09.21
--- стр. 17 ---
центрифугирования препарат не был внесён в реакцию, необходимо провести
повторное центрифугирование.
8.4 Хранение очищенной ДНК
Для хранения ДНК необходимо, не захватывая магнетизированную силику,
перенести надосадочную жидкость в новую пробирку. Рекомендуется хранить
очищенную ДНК:
• при температуре от 2 X до 8 °С не более недели,
• при температуре от минус 24 X до минус 16 X не более 6 месяцев,
• при температуре не выше минус 68 X не более года.
9 КОНТРОЛЬКАЧЕСТВА
9.1 Контроли, используемые на этапе экстракции ДНК
Контроль этапа экстракции ДНК осуществляется одновременно с оценкой
достоверности результатов этапа амплификации согласно инструкции к
Щ используемому набору реагентов для проведения амплификации. Результаты
исследования контролен, проходящих экстракцию ДНК вместе с исследуемыми
образцами, должны соответствовать критериям оценки, указанным в инструкции по
применению набора реагентов для проведения амплификации.
9.1.1 Отрицательный и положительный контроли
Каждая группа экстрагируемых образцов должна включать контрольные образцы,
если они предусмотрены для проведения исследования согласно инструкции к
используемому набору реагентов для проведения амплификации:
• ОКдля выявления контаминации в процессе проведения исследования;
• ПК для контроля корректного прохождения исследования.
9.1.2 Внутренний контроль
^ Для контроля качества экстракции ДНК и оценки влияния ингибиторов на
^ 1^ результаты амплификации в исследовании может использоваться экзогенный''® и
эндогенный^'' ВК. Экзогенный ВК добавляется на этапе экстракции в каждый
исследуемый и контрольный образец. Отсутствие результатов амплификации для ВК
и одновременно для выявляемой мишени свидетельствует о возможном присутствии
ингибиторов ПЦР в образце.
9.2 Мониторинг лаборатории на наличие контаминации
Для выявления возможной контаминации лаборатории продуктами амплификации,
исследуемыми и контрольными образцами рекомендуется раз в месяц исследовать
смывы с рабочих поверхностей лабораторной мебели, оборудования и поверхностей
помещений согласно процедуре, указанной в МУ 1.3.2569-09. При обнаружении
BKO-FL из набора ДНК-100 или ВК, входящий в состав набора реагентов для проведения
амплификации.
В качестве эндогенного ВК используются мишени, предусмотренные набором реагентов для
проведения амплификации.
ДНК-100 Инструкция в.01.09.21 16
--- стр. 18 ---
контаминации необходимо провести мероприятия по ее устранению согласно
указаниям, описанным в МУ 1.3.2569-09.
10 ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА
Эффективность экстракции ДНК для набора составляет 100%. Указанное
значение характеристики достигается при соблюдении требований, приведённых в
разделе 7.
Набор обеспечивает экстракцию ДНК с чистотой, достаточной для последующего
проведения ПЦР с детекцией продуктов амплификации в режиме «реального
времени».
11 УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ, ТРАНСПОРТИРОВАНИЯ
НАБОРА И ЭКСПЛУАТАЦИИ
11.1 Срок годности
Срок годности набора составляет 12 месяцев от даты изготовления.
После вскрытия реагенты в пробирках и флаконах использовать до истечения
срока годности набора. После вскрытия ячеек картриджа с реагентами экстракция с
использованием вскрытых ячеек должна быть проведена в течение 140 мин (с учётом
времени, затрачиваемого на внесение в ячейки исследуемых образцов и контролей).
11.2 Хранение
Набор хранить при температуре от 2 °С до 25 °С в защищённом от солнечного
света месте. Не допускается замораживание реагентов.
Реагенты после вскрытия хранить в тех же условиях, что и реагенты до вскрытия.
11.3 Транспортирование
Набор транспортировать при температуре от 2 “С до 25 °С всеми видами крытых
транспортных средств в термоконтейнерах с хладоэлементами или в
авторефрижераторах. Не допускается замораживание реагентов.
11.4 Эксплуатация
Реагенты, входящие в состав набора, готовы к использованию.
Ячейки картриджа с реагентами предназначены для однократного использования.
Экстракция ДНК с использованием набора должна проводиться при температуре
от 18 °С до 25 °С и относительной влажности воздуха от 25 % до 75 %.
12ПЕРЕЧЕНЬ СОКРАЩЕНИЙ
В настоящей инструкции применены следующие сокращения;
ВК
ДНК
ДНКаза
ОК
ПК
ПЦР
- внутренний контроль
- дезоксирибонуклеиновая кислота
- дезоксирибонуклеаза
- отрицательный контроль
- положительный контроль
- полимеразная цепная реакция
ДНК-100 Инструкция в.01.09.21 17
--- стр. 19 ---
13 ПЕРЕЧЕНЬ ПРИМЕНЯЕМЫХ НАЦИОНАЛЬНЫХ СТАНДАРТОВ
ГОСТ Р 51088-2013 Медицинские изделия для диагностики ин витро. Реагенты,
наборы реагентов, тест-системы, контрольные материалы, питательные среды.
Требования к изделиям и поддерживающей документации
ГОСТ ISO 14971-2011 Изделия медицинские. Применение менеджмента риска к
медицинским изделиям
ГОСТ Р 15.013-2016 Система разработки и постановки продукции на производство.
Медицинские изделия
ГОСТ Р 15.301-2016 Система разработки и постановки продукции на производство.
Продукция производственно-технического назначения. Порядок разработки и
постановки продукции на производство
ГОСТ 15.309-98 Система разработки и постановки продукции на производство.
Испытания и приёмка выпускаемой продукции. Основные положения
ГОСТ Р 51352-2013 Медицинские изделия для диагностики ин витро. Методы
испытаний
ГОСТ Р ИСО 18113-1-2015 Медицинские изделия для диагностики in vitro.
Информация, предоставляемая изготовителем (маркировка). Часть 1. Термины,
определения и общие требования
ГОСТ Р ИСО 18113-2-2015 Медицинские изделия для диагностики in vitro.
Информация, предоставляемая изготовителем (маркировка). Часть 2. Реагенты для
диагностики in vitro для профессионального применения
ГОСТ Р ИСО 23640-2015 Изделия медицинские для диагностики in vitro. Оценка
стабильности реагентов для диагностики in vitro
ГОСТ Р ИСО 15223-1-2020 Изделия медицинские. Символы, применяемые при
маркировании на медицинских изделиях, этикетках и в сопроводительной
документации. Часть 1. Основные требования
М
Примечание - При использовании данного документа целесообразно проверить
действие ссылочных нормативных документов на текущий момент. Если ссылочный документ
заменён или изменён, то при применении настоящей инструкции следует пользоваться
заменённым (изменённым) ссылочным документом.
ДНК-100 Инструкция в.01.09.21 18
--- стр. 20 ---
14ГАРАНТИИ ПРОИЗВОДИТЕЛЯ
Производитель гарантирует соответствие характеристик набора требованиям,
указанным в технической и эксплуатационной документации, в течение указанного
срока годности при соблюдении условий его транспортирования, хранения и
применения.
Рекламации на качество набора направлять в адрес производителя ООО
«Амплитек»: 109235, Москва, ул. 1-я Курьяновская, д. 34, стр. 8, этаж 1 пом. II ком. 42,
тел. (495) 374-13-46, e-mail; support@amplitech.ru .
15ТЕХНИЧЕСКАЯ ПОДДЕРЖКА
Консультацию по вопросам по работе с набором и его качеству можно получить по
контактам, указанным на официальном сайте производителя: www.amplitech.ru .
16СИМВОЛЫ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ В ДОКУМЕНТАЦИИ ПРОИЗВОДИТЕЛЯ
и т Изготовитель LOT Код серии
^ллЛ" Дата изготовления
2 Использовать до
IVD Медицинское изделие для
диагностики in vitro 4l\
Не допускать попадания
солнечного света
г т>1
L —
Обратитесь к инструкции по
применению i
Предел температуры
V
Содержимого достаточно для
проведения п тестов A Осторожно!
REF Номер по каталогу ф ^ фЗнаки опасности
ДНК-100
mJ
ООО «Амплитек»,
Россия, 109235, Москва,
ул. 1-я Курьяновская, д. 34, стр. 8, этаж 1 пом.
тел. (495) 374-13-46, www.amplitech.ru
Инструкция В.01,09.21
ком.42
19
--- стр. 21 ---
Лист регистрации изменений
Изм.
Номера страниц Всего
страниц в
документе
Номер документа Подпись Датаизменён
ных
заменён
ных новых аннулиро
ванных
/ — / t o - CJ.
•- —
..................................
е й J /'
J -'t'S ,— — — ..... ' P / 9& J /
4
ДНК-100 Инструкция 20