Набор реагентов "ДС-ИФА-Анти-НCV-АВИДНОСТЬ" Тест-система иммуноферментная для определения индекса авидности антител к вирусу гепатита С, набор диагностический по ТУ 9398-072-05941003-2006 — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 3 --- РРК - прозрачная или слегка опалесцирующая жидкость жёлтого цвета, допустимо образование аморфного осадка; БР - непрозрачная жидкость голубого цвета, допустимо образование аморфного осадка; РД “ прозрачная жидкость сиреневого цвета, при температуре от 2 до 8 °С, допустимо образование кристаллического осадка; PC - прозрачная жидкость зелено-голубого цвета; ПР (концентрат х 25) - прозрачная или слегка опалесцирующая жидкость, бесцветная или светло-жёлтого цвета, допустимо образование осадка, полностью растворяющегося при температуре от 35 до 39 °С и встряхивании; СБ - прозрачная бесцветная жидкость; ТМБ - прозрачная бесцветная жидкость; Стоп-реагент - прозрачная бесцветная жидкость. Назначение Набор предназначен для определения индекса авидности антител класса IgG к вирусу гепатита С в сыворотке (плазме) крови человека иммуноферментным методом с целью специфической диагностики первичной инфекции. Меры безопасности Для изготовления контрольных образцов набора использовать термоинактивированные сыворотки. При работе с набором в лаборатории с исследуемыми образцами обращаться, как с потенциально инфекционным материалом: работать в резиновых перчатках, не пипетировать ртом. Твёрдые отходы (использованные планшеты, наконечники к пипеткам, флаконы из- под компонентов, лабораторную посуду и т. д.) обеззараживать погружением в 6 % раствор перекиси водорода с 0,5 % синтетического моющего средства (СМС) или в 3 % раствор хлорамина Б или другого разрешенного к применению дез. средства. Длительность дезактивации - не менее 1 ч. Твёрдые отходы можно обезвреживать автоклавированием в течение часа при --- стр. 4 --- температуре от 124 до 128 °С под давлением 1,5 кГс/см^ (0,15 МПа). Жидкие отходы (промывные воды) обезвреживать добавлением сухого хлорамина Б из расчёта 30 г/л (длительность дезактивации - не менее 2 ч) или кипячением в течение 30 мин, или автоклавированием в течение 1 ч под давлением 1,5 кГс/см (0,15 МПа) и при температуре от 124 до 128 °С. Инструменты и оборудование до и после работы необходимо протирать 2 раза 70 % этиловым спиртом. Способ применения Нельзя использовать реагенты из наборов разных серий или смешивать их в процессе приготовления растворов, а также использовать реагенты но истечении срока их годности. Перед использованием все реагенты набора выдержать в течение 30 мин при температуре от 18 до 24 °С. Внимание! Иммуносорбент необходимо выдержать в закрытом пакете во избежание конденсации влаги в лунках планшета. Все растворы необходимо отбирать новыми одноразовыми наконечниками, не допускать касания жидкости в наконечнике краем дозатора! Для отбора проб использовать калиброванные пипетки переменного объема (одно- и многоканальные) с погрешностью измерения не более 5 %. Посуду для работы с субстратной смесью (ванночки, флаконы и т.д.) в случае повторного использования необходимо сразу после работы промыть 70 % раствором этилового спирта, а затем водой дистиллированной. 1. Перечень оборудования, материалов и реактивов, необходимых для постановки ИФА. 1 .Спектрофотометр вертикального сканирования, позволяющий измерять оптическую плотность раствора в лунках планшета при длинах волн 450 нм и 620-680 нм. 2. Пипетки переменного объема (одно- и многоканальные). 3. Наконечники одноразовые для пипеток переменного объема. --- стр. 5 --- 4. Термостат. 5. Устройство для промывания планшетов (вошер). 6. Автоматический анализатор для иммуноферментного анализа открытого типа. 7. Вода дистиллированная. 8. Бумага фильтровальная лабораторная. 9. Перчатки медицинские. 2. Приготовление рабочих растворов. О б'^>ёмы реагентов для проведения анализа на необходимом количестве стрипов или на целом планшете приведены в таблицах № 1 и 2. Таблица 1 Расход реагентов набора при постановке ИФА на автоматических анализаторах для иммуноферментного анализа открытого типа Количество используемых стрипов Рабочий промывочный раствор Рабочий раствор конъюгата с с Конъюгат (конц. X И ) (мл) РРК (мл) ТМБ (мл) СБ (мл)ПР (конц. X 25) (мл) Вода дистиллированная (мл) 12 50,0 1200,0 1,20 12,0 1,20 12,0 Таблица 2 Расход реагентов набора в зависимости от количества используемых стрипов при ручной постановке ИФА Количество используемых стрипов ‘ Рабочий промывочный раствор Рабочий раствор конъюгата СС Конъюгат (конц. X 11) (мл) РРК (мл) ТМБ (мл) СБ (мл) ПР (конц. X 25) (мл) Вода дистиллированная (мл) 2 8,0 192,0 0,20 2,0 0,20 2,0 4 16,0 384,0 0,40 4,0 0,40 4,0 6 24,0 576,0 0,60 6,0 0,60 6,0 8 32,0 768,0 0,80 8,0 0,80 8,0 --- стр. 8 --- образцы термоинактивированию, необходимо отбирать и хранить их в условиях, предотвращающих бактериальный рост. Каждый образец сыворотки следует отбирать новым наконечником! Отобранные образцы хранить не более 3-х суток при температуре от 2 до 8 °С. Более длительное хранение допустимо при температуре не выше минус 20°С (образцы могут подвергаться замораживанию и оттаиванию не более 1 раза). Образцы с выраженным бактериальным ростом, гемолизом и гиперлипидемией могут дать неправильный результат. Образцы сыворотки (плазмы) крови, содержащие агрегаты или осадок, необходимо «осветлять» центрифугированием. 4. Проведение ИФА при ручной постановке. 4.1’ . Вскрыть фольгированный пакет с иммуносорбентом, отступив 1,0 см от края пакета. Вынуть из пакета рамку и необходимое количество стрипов. Пакет с неиспользованными стрипами тщательно герметизировать. После первого вскрытия пакета иммуносорбент стабилен в течение 1 мес. при температуре от 2 до 8 °С. Перед использованием иммуносорбент не промывать. 4.2. В лунки двух параллельных (нечетного и четного) стрипов иммуносорбента пипеткой переменного объема внести по 100 мкл K j-H , К2+, К-. Например: в 2 лунки А1 и А2 > Ki+, в 2 лунки В 1 и В2 - К2+, в 4 лунки С1 и С2, D1 и D2 - К-. В остальные лунки внести по 30 мкл БР и по 70 мкл исследуемых образцов. Каждый образец внести попарно в соседние лунки двух параллельных стрипов (нечетного и четного). Содержимое лунок тщательно перемешать осторожным постукиванием по краю планшета. Планшет закрыть крышкой или защитной пленкой и выдержать в термостате в течение 1 ч при температуре (37,0 ± 0,5) °С. --- стр. 9 --- 4.3. Содержимое лунок удалить в ёмкость для инфицированного материала. Планшет промыть 4 раза рабочим раствором ПР, залить его до краёв лунок (не менее 380 мкл в лунку), выдерживая 40 сек, и удалить промывочный раствор в ёмкость для сбора инфицированного материала. 4.4. В лунки нечетных стрипов внести по 100 мкл раствора сравнения, в лунки четных стрипов - по 100 мкл раствора денатурирующего. Планшет выдержать 8 мин при температуре от 18 до 24 °С. ч . 4.5. Содержимое лунок удалить в ёмкость для сбора инфицированного материала, затем планшет промыть 4 раза рабочим раствором ПР (см. п. 3.2). 4.6. Во все лунки стрипов внести по 100 мкл конъюгата в рабочем разведении и покрытый крышкой или заш,итной пленкой планшет выдержать в термостате в течение 30 мин при температуре (37,0 ± 0,5) °С. 4.7. Содержимое лунок удалить в ёмкость для сбора инфицированного материала, после чего и планшет промыть 4 раза рабочим раствором ПР (см. п.4.3). 4.8. Во все лунки стрипов внести по 100 мкл СС и выдержать планшет в течение 30 мин в защищённом от света месте при температуре от 18 до 24 °С. 4.9. Реакцию остановить добавлением во все лунки по 50 мкл стоп ч реагента и провести учет результатов. 5. Учет результатов. Учет результатов проводить спектрофотометрически при 2-х длинах волн - 450 нм и 620-680 нм с настройкой прибора по «воздуху». Допустим учёт результатов при одной длине волны - 450 нм. Реакцию учитывать, если значение оптической плотности (ОП) в лунках с раствором сравнения (нечетные стрипы): для Ki+ - не менее 1,5, для К 2+ - не менее 0,5, а среднее значение ОП во всех лунках с К- - не более 0,5*. Индекс авидности рассчитывать по формуле: --- стр. 10 --- ■ % 10 Индекс авидности = ОП исследуемого образца (реакция с раствором, денатурирующим белок) / ОП исследуемого образца (реакция с раствором сравнения) х 100 %. Полученные результаты считать достоверными, если индекс авиднос 1 и для К]+ не менее 70 а индекс авидности для К 2+ не более 37 %. Внимание! Расчет индекса авидности возможен лишь для сывороток, предварительно исследованных с помощью тест-системы «ИФА-АНТИ- HCV», определяющей антитела класса IgG к вирусу гепатита С и показавших положительный результат на наличие анти-НСV. В соответствии с принятым алгоритмом подтверждения наличия антител к HCV исследуемые образцы ч должны иметь положительный профиль реактивности в подтверждающем (конфирматорном) тесте «ДС-ИФА-АНТИ-НСУ-СПЕКТР-СМ». Внимание! Набор «ДС-ИФА-АНТИ-НСУ-АВИДНОСТЬ» не предназначен для скрининговых исследований и оптические плотности образцов не будут соответствовать результатам скрининга на анти - HCV. 6. Интерпретация результатов. Если индекс авидности исследуемой положительной сыворотки менее 37 %, то сыворотка содержит низкоавидные IgG HCV антитела, что указывает на первичную инфекцию. Если индекс авидности исследуемой положительной сыворотки от 37 % и более, то сыворотка содержит высокоавидные IgG HCV антитела. Примечание. Существуют данные о возможности уточнения стадии забояеваиия по индексу авидности (А. Хаппо and Y. Kazuama. J. o f Medical Virology. 2002. M 6S.F.229^223): 1. Значение индекса авидности исследуемой положительной сыворотки от 32 % до 57 % (с использованием настоящего теста от 37 % до 72 %) указывает на паст- инфекцию. 2. Индекс авидности исследуемой положительной сыворотки, превышающий 64 % (с использованием настоящего теста более 66 % )» указывает на обострение хронического процесса. Для уточнения стадии заболевания и прогнозирования течения болезни необходимо медицинское обследование и комплексная динамическая оценка серологических маркеров HCV. Применение только настоящего теста --- стр. 11 --- недостаточно, т. к. возможны ложнопозитивные результаты у больных гипергаммоглобулинемией, системными заболеваниями соединительной ткани, хроническими заболеваниями печени, у онкологических больных, при нарушениях аутоимуиного ответа и другими патологиями. 7, Проведение ИФА в автоматическом режиме на автоматическом анализаторе типа «TECAN Freedom EVOIyzer» производства фирмы «TECAN», Швейцария (возможна постановка на других моделях ИФА- анализаторов открытого типа). 1 . Задают программу проведения ИФА и включают анализатор. 2. Приготовленный рабочий промывочный раствор заливают в предназначенную для него емкость, остальные рабочие растворы и реагенты помещают в специальные контейнеры шш емкости, контрольные образцы К+ и К- - во флаконах, образцы исследуемых сывороток - во флаконах или пробирках в объеме не менее 300 мкл устанавливают в соответствующие штативы анализатора; помещают в анализатор необходимое количество иммуносорбентов. 3. По окончании анализа прибор выдает протокол по результатам исследования, в котором дается характеристика каждого исследуемого образца и контрольных образцов К+ и К-. 4. Реакцию учитывать, если значение оптической плотности (ОП) в лунках с раствором сравнения (нечетные стрипы): для К |-ь - не менее 1,5, для К2+ - не менее 0,5, а среднее значение ОП во всех лунках с К- - не более 0,5, Далее у^ет результатов проводить аналогично п 5. Форма выпуска 4 ^ 1 1 Иммуносорбент 1 шт. Конъюгат (концентрат х 11) 1,5 мл - 1 фл. Ki+ -контрольный высокоавидный положительный образец 1,5 мл - 1 фл. Кз+ - контрольный низкоавидный положительный образец 1,5 мл - 1 фл. К- - контрольный отрицательный образец 2,5 мл - 1 фл. --- стр. 12 --- 12 БР 6,0 мл - 1 фл. РРК 13,0 мл - 1 фл. РД 8,0 мл - 1 фл PC 8,0 мл - 1 фл ПР (концентрат х 25) 50,0 мл - 1 фл. СБ 15,0 мл - 1 фл. ТМБ 1,5 мл - 1 фл. Стоп-реагент 25,0 мл - 1 фл. Реагенты помещают в коробку картонную или пакет полиэтиленовый, куда вкладывают инструкцию по применению. Дополнительно в комплект поставки могут быть включены: - крышка к полистироловым 96-луночным планшетам или защитная пленка для ИФА планшетов - 1 шт. - одноразовые наконечники - 16 шт. - пластиковая ванночка для жидких реагентов - 2 шт. - пластиковая скрепка для закрывания пакета с иммуносорбентом или ч пакет полиэтиленовый с замком zip-lock - 1 шт. Срок годности. Условия транспортирования и хранения. Срок годности набора - 12 мес. По истечении срока годности набор использованию не подлежит. Транспортирование наборов должно производиться в соответствии с СП 3.3.2Л248-03 при температуре от 2 до 8 * ^ С (допустимо транспортирование от 9 до 20 °С и не более 10 суток). Замораживание не допускается. Набор должен храниться в соответствии с СП 3.3.2.1248-03 в сухом, защищенном от света месте при температуре от 2 до 8°С в течение всего срока годности. Условие отпуска - для диагностики «in vitro». Для лечебно- профилактических и санитарно-профилактических учреждений. Рекламации на специфические и физические свойства набора направлять в ФГУН ГИСК им. Л. А. Тарасевича Роспотребнадзора по адресу 119002, Россия, г. Москва, пер. Сивцев Вражек, д. 41, тел.: (499) 241-39-22,