Набор реагентов "ДС-ИФА-HCV-АГАТ" Тест-система иммуноферментная для одновременного выявления антигена и антител к вирусу гепатита С, набор диагностический по ТУ 9398-195-05941003-2011 — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 1 --- / ^ «УТВЕРЖДАЮ» Заместитель генеральнс^о директора ООО «Научно-произврдетвенное oбъ9ДiI1Ш!1te^5<Диaгнocтичecкиe системы», О.Н.Шлюндин 2012 г. ИНСТРУКЦИЯ п о применению набора реагентов «ДС-ИФА-НСУ-АГАТ» Тест-система иммуноферментная для одновременного выявления антигена и антител к вирусу гепатита С, набор диагностический --- стр. 2 --- r 'f Содержание I. Назначение.............................................................................................................. 3 II. Соетав набора....................................................................................................... 3 Ш. Аналитические и диагностические характеристики набора............................ 5 IV. Меры предосторожности.................................................................................... 6 V. Инструкции по безопасности.............................................................................. 7 VI. Необходимые материалы и оборудование, не поставляемые с набором 8 реагентов.................................................................................................................... VII. Отбор и подготовка образцов............................................................................ 8 VIII. Подготовка реагентов...................................................................................... 9 IX. Проведение анализа........................................................................................... 10 X. Учет результатов................................................................................................. 12 XI. Ограничения теста.............................................................................................. 13 XII. Срок годности. Условия хранения и транспортирования.............................. 13 XIII. Объяснение символов..................................................................................... 14 XIV. Список литературы.......................................................................................... 14 Приложение 1............................................................................................................ 15 Приложение 2............................................................................................................ 16 --- стр. 3 --- Набор реагентов выпускается в трех комплектах: комплект № 1 рассчитан на проведение 96 (один разборный планшет) определений, включая контрольные, предназначен для ручной постановки с возможностью дробного использования набора или для одновременной постановки 96 определений на автоматических анализаторах для иммуноферментного анализа открытого типа; комплект № 2 рассчитан на проведение 192 (два разборных планшета) определений, включая контрольные, предназначен для ручной постановки с возможностью дробного использования набора или для одновременной постановки 192 (96 х 2) определений на автоматических анализаторах для иммуноферментного анализа открытого типа; комплект № 3 расечитан на проведение 480 (пять разборных планшетов) определений, включая контрольные, предназначен для ручной постановки с возможностью дробного использования набора или для одновременной постановки 480 (96 х 5) определений на автоматических анализаторах для иммуноферментного анализа открытого типа. _____________ I. НАЗНАЧЕНИЕ Набор реагентов «ДС-ИФА-НСУ-АГАТ» - тест-система иммуноферментная для одновременного выявления антигена и антител к вирусу гепатита С в сыворотке (плазме) крови человека. Рекомендуется для первичной лабораторной диагностики гепатита С и обследования доноров крови. II. СОСТАВ НАБОРА РЕАГЕНТОВ «ДС-ИФА-НСУ-АГАТ» Таблица 1 Характеристики реагентов с)орма выпуека Комплект 1 Комплект 2 Комплект 3 Иммуносорбент - планшет полистироловый 96-луночный разборный, в лунках которого сорбированы: смесь рекомбинантных антигенов вируса гепатита С - core, NS3, NS4, NS5, и моноклональные антитела к антигену вируса гепатита С. 1 планшет 2 планшета 5 планшетов Конъюгат-1, жидкий - моноклональные антитела к антигену вируса гепатита С, конъюгированные с биотином. Прозрачная или слегка опалесцируюшая бесцветная или светло-желтого цвета жидкость, допустимо наличие аморфных образований 1 флакон 0,8 мл 1 флакон 1,5 мл 1 флакон 4,0 мл Конъюгат-2, жидкий - смесь стрептавидина, конъюгированного с пероксидазой хрена и моноклональных антител к иммуноглобулинам человека, коньюгированных с пероксидазой хрена. Прозрачная или слегка опалесцируюшая бесцветная или светло-желтого цвета жидкость. 1 флакон 1,5 мл 1 флакон 3,0 мл 2 флакона по 3,0 мл К+Ат (контрольный положительный образец антител), жидкий - сыворотка крови человека, содержащая антитела к вирусу гепатита С, не содержашая антиген вируса гепатита С, HBsAg, р24 ВИЧ-1, антитела к ВИЧ-1,2, инактивированная. Прозрачная или слегка опалесцируюшая оранжевого цвета жидкость. 1 флакон 1,0 мл 1 флакон 2,0 мл 1 флакон 4,0 мл К+Аг (контрольный положительный образец антигена), жидкий - очищенный рекомбинантный антиген вируса гепатита С, не содержащий антитела к вирусу гепатита С, HBsAg, р24 ВИЧ-1, антитела к ВИЧ-1,2, инактивированный. Прозрачная или слегка опалесцирующая малиново красного цвета жидкость. 1 флакон 1,0 мл 1 флакон 2,0 мл 2 флакона по 2,0 мл --- стр. 4 --- / \У К- (контрольный отрицательный образец), жидкий - сыворотка крови человека, не содержащая антитела к вирусу гепатита С, антитела к ВИЧ-1,2, р24 ВИЧ-1, HBsAg; инактивированная. Прозрачная или слегка опалесцирующая зеленого цвета жидкость. 1 флакон 2,0 мл 2 флакона по 2,0 мл 3 флакона по 2,0 мл РРК-1 - раствор для разведения конъюгата-1. Прозрачная или опалесцирующая оранжевого цвета жидкость, допустимо наличие осадка или аморфных образований, исчезающих при взбалтывании. 1 флакон 8,0 мл 1 флакон 15,0 мл 2 флакона по 20,0 мл РРК-2 - раствор для разведения конъюгата-2. Прозрачная или слегка опалесцирзлощая желтого цвета жидкость, допустимо образование осадка. 1 флакон 15,0 мл 1 флакон 30,0 мл 2 флакона по 30,0мл или 1 флакон 60,0 мл ПР - концентрат фосфатно-солевого буферного раствора с твином (ФСБ-Т). Прозрачная или слегка опалесцирующая бесцветная или светло-жёлтого цвета жидкость, допустимо образование осадка, полностью растворяющегося при температуре от 35 до 39 °С и встряхивании. 1 флакон 50,0 мл 1 флакон 120,0 мл 2 флакона по 120,0 мл СБ - субстратный буферный раствор, содержащий лимонную кислоту, ацетат натрия, раствор перекиси водорода. Прозрачная бесцветная жидкость. 1 флакон 15,0 мл 1 флакон 25,0 мл 2 флакона по 50,0 мл ТМБ - раствор, содержащий 3,3',5,5'- тетраметилбензидин-дегидрохлорид. Прозрачная бесцветная или пурпурно-розового цвета жидкость. 1 флакон 1,5 мл 1 флакон 2,5 мл 2 флакона по 3,5 мл Стоп-реагент - раствор серной кислоты. Прозрачная бесцветная жидкость. 1 флакон 25,0 мл 2 флакона по 25,0 мл 2 флакона по 50,0 мл или 1 флакон 100,0 мл Набор комплектуется готовыми реагентами или концентрированными растворами. Имеется цветовая кодировка реагентов. Набор упакован в коробку картонную, куда вкладывается инструкция по применению. Комплект 1 Комплект 2 Комплект 3 Дополнительно набор может быть укомплектован Крышка к полистироловым 96-луночным планшетам или зашитная пленка для планшетов 1 шт. 2 шт. 5 шт. 2 шт. 4 шт. 10 шт. Одноразовые наконечники 16 шт. 32 шт. 80 шт. Пластиковая ванночка для жидких реагентов 2 шт. 4 шт. 10 шт. Пластиковая скрепка для закрывания пакета с иммуносорбентом или полиэтиленовый пакет с замком zip-lock. 1 шт. 2 шт. 3 шт. --- стр. 5 --- / у II. АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА Аналитическая чувствительность Для оценки чувствительности набора реагентов «ДС-ИФА-НСУ-АГАТ» по выявлению штигена вируса гепатита С были использованы различные концентрации рекомбинантного штигена вируса гепатита С (ООО «НПО «Диагностические системы», Россия). Показатель чувствительности тест-системы соответствует наименьшему количеству антигена, которое определяется данной тест-системой. Предел чувствительности тест-системы при определении антигена вируса гепатита С - 1,0 нг/мл. Диагностическая чувствительность Диагностическая чувствительность набора реагентов «ДС-ИФА-НСУ-АГАТ» оценивалась при тестировании: 1. Образцов сывороток крови от 606 пациентов, инфицированных гепатитом С - 100%. 2. 19 коммерческих сероконверсионных панелей сывороток крови человека, (SeraCareLife Sciences, Inc., США; Zeptometrix, США). Результаты представлены в таблице 2. Таблица 2 Панель Генотип* Дни до выявления ПСУ с первой кроводачи Изменение серологического окна для ДС-ИФА- НСУ-АГАТ в сравнении с тестом на анти-НСУ , дни НСУ- PCR* Anti-HCy Ortho ПСУ 3.0* ДС-ИФА- НСУ-АГАТ** 9041 ND 24 62 24 -38 9044 ND 0 25 0 -25 9045 ND 0 41 0 -41 9047 ND 0 28 0 -28 6212 1 0 23 32 9 6213 ND 15 43 30 -13 6214 1 0 32 0 -32 6215 1а 0 20 0 -20 6222 ND 17 40 17 -23 РНУ901 1а 65 97 0 -97 РНУ917 2Ь 20 85 20 -65 10003 3 26 АП negative 30 10008 1а/1Ь 9 АП negative 15 10016 2 43 АП negative 47 10020 1а 25 АП negative ‘25 10021 1а 35 АП negative 37 10023 1а 39 АП negative 42 10029 1 48 АП negative 48 10051 1Ь 36 АП negative 38 Среднее, дни, 11 панелей 13 45 11 -34 Среднее, дни, 19 панелей 21 21 результаты из информационных листов на сероконверсионные панели ** - результаты НПО «Диагностические системы» ND - не определен --- стр. 6 --- По 11 панелям «ДС-ИФА-НСУ-АГАТ» выявляет HCV-инфекцию в среднем на 34 дня анее, чем тест для выявления только антител к HCV. 3. Было протестировано 58 сывороток крови с известным генотипом HCV. 'аспределение по генотипам представлено в таблице 3: Таблица 3 Генотип 1 1а 1Ь 2 2а 2Ь 2с 3 За Количество образцов 3 7 25 2 1 1 3 8 8 Зсе данные образцы были позитивными в «ДС-ИФА-НСУ-АГАТ»: 100% чувствительность. Специфичность Специфичность по результатам исследования на случайной выборке в количестве 5005 доноров составила 99,81%. При исследовании выборки донорских сывороток, состоящей из 1466 образцов, полученный показатель специфичности составил 99,86%. Была протестирована панель из 520 образцов сывороток крови пациентов, состоящая из: • 200 образцов сывороток крови, содержащих антитела к возбудителям гепатита А, В, ВИЧ 1,2, герпеса, сифилиса, хламидиоза; • 20 образцов сывороток крови, содержащих ревматоидный фактор; • 300 образцов сывороток крови, взятых от беременных женщин. Специфичность набора составила - 99,5%. Точность Внутрисерийная воспроизводимость анализа была оценена при тестировании 3 положительных образцов в 8 повторах на наборах реагентов «ДС-ИФА-НСУ-АГАТ» одной и той же серии. Коэффициент вариации не превышал 6,9%. Межсерийная воспроизводимость анализа была оценена при тестировании 3 положительных образцов в течение 3 дней 2 разными операторами. Коэффициент вариации не превышал 9,5%. IV. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ Достоверность результатов зависит от правильного выполнения следзлощих правил лабораторной практики: • Постановку ИФА следует проводить в помещении с температурой от 18 до 24°С. • Нельзя использовать реагенты с истекшим сроком годности. • Нельзя использовать реагенты из наборов разных серий или смешивать их при приготовлении растворов, кроме: о неспецифических компонентов (ПР, СБ), которые взаимозаменяемы во всех тест-системах производства ООО «НПО «Диагностические системы»; о стоп-реагента, который может быть взаимозаменяемым в зависимости от молярности раствора; о другие реагенты также могут быть взаимозаменяемыми для постановки в большинстве тест-систем производства ООО «НПО «Диагностические системы». о за более детальной информацией относительно других реагентов обратитесь в нашу службу поддержки пользователей по телефону бесплатной линии 8-800- 555-0300 (доб 7606, 7655) или по E-mail: info@npods.nnov.ru. • Перед использованием все реагенты выдержать при температуре от 18 до 24 ”С в течение 30 мин. • Рабочие растворы готовить осторожно, исключая какое-либо загрязнение. --- стр. 11 --- дкость для сбора инфицированного материала. Рекомендуется использование автоматического икропланшетного вошера. Недостаточная промывка может неблагоприятно повлиять на зчность анализа. 5. Во все лунки микропланшета внести по 100 мкл рабочего раствора конъюгата-2. 6. Планшет инкубировать 30 мин в термошейкере при 500 об/мин и температуре 57.0 ± 0,5)°С. 7. Содержимое лунок аккуратно удалить в ёмкость для сбора инфицированного [атериала с помощью промывочного устройства, планшет промыть 4 раза рабочим ПР, как казано в п 4. 8. Во все лунки планшета внести по 100 мкл СС и выдержать планшет в защищенном от ;вета месте в течение 20 мин при от 18 до 24 °С или в течение 15 мин при температуре 37.0 ± 0,5)°С. 9. Реакцию остановить добавлением во все лунки по 150 мкл стоп-реагента и провести щет результатов через 2-3 минуты в течение 15 минут после остановки реакции. Далее см. раздел X. Схема проведения ИФА приведена в Приложении 2. Процедура 2 - инкубатор микропланшетный: 1. Во все лунки планшета внести по 50 мкл рабочего раствора конъюгата-1. 2. В зависимости от количества используемых стрипов рекомендуется внести в лунки 50 мкл контрольных образцов следующим образом: 1-2 стрипа - К+Ат -1 лунка, К+дг -1 лунка. К- - 2 лунки; 3 стрипа и более - К+дт -1 лунка, К+дг - 1 лунка. К- - 3 лунки. В остальные лунки внести по 50 мкл неразведенных исследуемых образцов сыворотки (плазмы) крови. Содержимое лунок тщательно перемешать пипетированием. Время внесения образцов не должно превышать 15 мин. При внесении образцов оранжевый цвет рабочего раствора конъюгата-1 должен изменитъся на розово-малиновый. При внесении образцов с кислым pH оранжевый цвет рабочего раствора конъюгата-1 может измениться на желтый. Некоторые образцы сывороток (плазм), имеющих pH близкий к нейтральному, после внесения цвет конъюгата-1 не меняют. 3. Планшет закрыть крышкой или защитной пленкой и инкубировать 60 мин в инкубаторе микропланшетном при температуре (37,0 ± 0,5)°С. 4. Содержимое лунок аккуратно удалить в емкость с дез. раствором с помощью промывочного устройства, планшет промыть 4 раза рабочим ПР, наполняя лунки планшета до краёв (не менее 350 мкл в лунку), выдержать 10 с, затем удалить промывочный раствор в ёмкость для сбора инфицированного материала. Рекомендуется использование автоматического микропланшетного вошера. Недостаточная промывка может неблагоприятно повлиять на точность анализа. 5. Во все лунки микропланшета внести по 100 мкл рабочего раствора конъюгата-2. 6. Планшет закрытъ крышкой или защитной пленкой и инкубировать 30 мин в инкубаторе микропланшетном при температуре (37,0 ± 0,5)°С. 7. Далее постановку проводить аналогично п.7-9 Процедуры 1. Далее см. раздел X. Схема проведения ИФА приведена в Приложении 2. i 11 --- стр. 12 --- 10. Проведение анализа в автоматическом режиме на анализаторе открытого типа «TECAN Freedom EVOlyzer» производства фирмы «TECAN», Швейцария (возможна постановка на других моделях ИФА-анализаторах открытого типа). Таблица 5 Расход реагентов набора на один планшет при постановке ИФА на автоматических Рабочий промывочный раствор (ИР) Рабочий раствор конъюгата-1 Рабочий раствор конъюгата-2 СС ПР (х25) (мл) Вода дистиллированная (мл) Конъюгат-1 (х11) (мл) РРК-1 (мл) Конъюгат-2 (х11)(мл) РРК-2 (мл) ТМБ (мл) СБ (мл) 40,0 960,0 0,60 6,0 1,2 12,0 1,2 12,0 g Э 2 я S ч с но « (N 3 1 = Г 10.1. Задать программу проведения ИФА и включить анализатор. 10.2. Приготовленный рабочий промывочный раствор залить в предназначенную для него емкость, остальные рабочие растворы и реагенты поместить в специальные контейнеры или емкости, контрольные образцы К+дт, К + а г и К- - в о флаконах, образцы исследуемых сывороток - во флаконах или пробирках в объеме не менее 300 мкл установить в соответствующие штативы анализатора. В анализатор поместить необходимое количество планшетов. Далее постановку проводить в соответствии с инструкцией по применению ИФА- анализатора и программой проведения ИФА. 10.3. По окончании анализа прибор выдает протокол по результатам исследования, в котором дается характеристика каждого исследуемого образца и контрольных образцов К+дт, К+дг и К-. 10.4. Далее учет результатов проводить аналогично п. X. 11. Спектрофотометрический контроль внесения сывороток и реагентов при постановке тест-системы «ДС-ИФА-НСУ-АГАТ» на автоматических ИФА-анализаторах: 11.1. Контроль внесения коньюгата-1 и образцов сыворотки рекомендуется проводить при длине волны 450 нм, критерий: ОП > 0,800. 11.2. Контроль внесения коньюгата-2 рекомендуется проводить при длине волны 450 нм, критерий: ОП > 0,200. 11.3. Контроль внесения СС рекомендуется проводить при длине волны 405 нм, критерий: ОП > 0,050. Протоколы постановки тест-системы на автоматических ИФА анализаторах предоставляются ООО «НПО «Диагностические системы» по запросу. Тел. 8-800-555-0300 (звонок по России бесплатный). X. УЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ Учет результатов провести спектрофотометрически при двух длинах волн - 450 нм и при референс-длине волны в диапазоне от 620 до 680 нм с настройкой прибора по «воздуху». Допустим учёт результатов при одной длине волны - 450 нм. Наличие определяемого антигена вируса гепатита С или антител к вирусу гепатита С оценивается сравнением оптической плотности (ОП), измеряемой для каждого образца, с расчетной величиной ОП критической. 12 --- стр. 13 --- Результаты анализа учитывать, если среднее значение ОП в 2 или 3 лунках с К- (ОП К-ср) не более 0,2, значение ОП в лунках с К+дт и с К+дг - не менее 0,6. ОП Крит, рассчитывать по формуле: ОП Крит. = ОП К- ср + А, I где А - коэффициент, определяемый методом статистической обработки результатов постановки ИФА на предприятии-изготовителе. i Исследуемые образцы расценивать как положительные: если ОП >ОПкрит. : Исследуемые образцы расценивать как отрицательные: если ОП < ОПкрит. Образцы, значения ОП которых равны или превышают ОПкрит., должны быть исследованы повторно в 2 лунках. При получении положительного результата хотя бы в одной из 2-х лунок образцы расценивать как положительные. XI. ОГРАНИЧЕНИЯ ТЕСТА • Для анализа следует использовать только неразведенные образцы сыворотки или плазмы. • Заключение о положительной реактивности образцов к вирусу гепатита С не должно быть основано на единственном реактивном результате тестирования. Все положительные образцы должны быть проверены в подтверждающих тестах • ч - ИФА, иммуноблоттинге или ПЦР . • Различия в результатах тестирования различными тестами образцов от пациентов, зараженных вирусом гепатита С, могут быть вызваны отличиями в иммунологических реакциях в зависимости от вида используемых антигенов^. • Изменчивость вируса гепатита С не позволяет исключить возможность ложноотрицательных результатов. Ни один из известных методов тестирования не может дать полную гарантию, что вирус гепатита С отсутствует. XII. СРОК ГОДНОСТИ. УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ И ТРАНСПОРТИРОВАНИЯ Набор следует хранить до даты, указанной на упаковке. Набор с истекшим сроком годности использованию не подлежит. Хранение - в сухом, защищенном от света месте при температуре от 2 до 8 °С. Транспортирование - при температуре от 2 до 8 °С. Допустимо транспортирование и хранение при температуре до 25 °С 10 суток и до 30 °С 5 суток. Замораживание не допускается. Рекламации на специфические и физические свойства набора направлять в адрес предприятия-изготовителя - ООО «Научно-производственное объединение «Диагностические системы» 603093 Россия, г. Нижний Новгород, ул. Яблоневая, д. 22, тел./факс: (831) 434-86-83 или тел.: (831) 434-97-12. E-mail: info@npods.nnov.ru. www.npods.ru. Для проведения расследования и получения объективных выводов по заявленной рекламации необходимо предоставление: 1. Рекламируемого набора; 2. Всех образцов кроводач пациента; 13 --- стр. 14 --- 3. Протоколов исследований с использованием других методов с указанием серии, ков годности и фамилией оператора; 4. Протоколов исследований с использованием референтных тестов с указанием серии, ков годности и фамилии оператора. [I. ОБЪЯСНЕНИЕ СИМВОЛОВ С€ СЕ маркировка (Европейская директива 98/79/СЕ по МВД медицинским устройствам) IVD Только для лабораторного использования (in vitro diagnostic) m i Производитель REF Каталожный номер I Количество определений LOT Номер партии (серии) Ь2'■ 4 +8“С Температурные пределы хранения ЕХР. Срок годности дата/месяц/год Используйте инструкцию по применению X XI Содержит раздражающее вещество XIV. СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ См. Приложение 1 к данной инструкции. Директор по производству ООО «Научно-производственное объединение «Диагностические системы» СОГЛАСОВАНО Зав.кафедрой клиническ( лабораторной диагностик |УДостоверя^ ГБОУ ДНО РМАПО Минздравсоцразвития Pojcilii^ д.м.н, профессор В.К. Пименов 7Ф'71 --- стр. 15 --- СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 1. Соринсон С.Н. Вирусные гепатиты. Санкт-Петербург, 1998.-С.201-245 2. Кузина Л.У., Ястребова О.Н. и др. Сравнительная оценка результатов определения антител к вирусу гепатита С при использовании различных иммуноферментных тест- систем и подтверждающих тестов// Вопросы вирусологии.-2004. №6-С.41-44. 3. Пат.№2262704. Российская Федерация. Набор антигенов для определения антител к вирусу гепатита С «ДС-НСУ-антигены»/ Бурков А.Н. и др. - Заявлено 06.10.2004. - № 2004129264. - Зарегист. 20.10.2005. 4. Colin С., Lanoir D., Tauzet S. et.al. Sensibility and apecificity of third-generation hepatitis C virus antibody detection assays: an analysis of literature// J.Viral Hepatitis. - 2001.-V.8- p.87-95. 5. Ulanova T.I., Puzyrev V.F., Kulikova L.V., Bochkova G.B., Golubeva I.F., Obriadina A.P., Burkov A.N. A new anti-HCV EIA based on recombinant antigens derived from different sequences variants of hepatitis C virus//15-th European Congress of Clinical Microbiology and Infectious Diseases/ - Copengagen, Denmark, 2005.-P.203. 6. Bochkova G.B., Puzyrev V.F., Obriadina A.P., Burkov A.N., Ulanova T.I. The evaluation of the ELISA kit “EIA-anti-HCV” with new recombinant antigens.// 20-th European Congress of Clinical Microbiology and Infectious Diseases/ - Vienna, 2010.-P.118. 7. Bochkova G.B., Fomina S., Puzyrev V.F., Obriadina A.P., Burkov A.N., Ulanova. T.I. The evaluation of the ELISA kit “DS-EIA-anti-HCV- SPECTR-GM” as supplemental assay for confirmation of anti-HCV screening positive results //21-th European Congress of Clinical Microbiology and Infection Diseases. - Milan, May 7-10, 2011. - P.2235. 8. Evaluation of MONOLISA HCV Ag-Ab ULTRA. MiDAS, London 2006:1-19. Приложение 1 -