Набор реагентов для выявления мутации N501Y SARS-CoV-2 методом обратной транскрипции и изотермической амплификации (ОТ-ИТ) АмплиСенс® SARS-CoV-2-N501Y-IT по ТУ 21.20.23-416-01897593-2021 — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 1 ---
«УТВЕРЖДАЮ»
Заместитель директора по научной
работе - ВРИО директора
Федерального бюджетного учреждения
науки «Центральный научно-
исследовательский институт
у-^й(^&М^^ологии» Федеральной службыtow-, ,
g сфере защиты прав
й и благополучия человека
А.В. Горелов
2021 г.
ИНСТРУКЦИЯ по ПРИМЕНЕНИЮ
набора реагентов для выявления мутации N501Y
SARS-CoV-2 методом обратной транскрилции и
изотермической амллификации (ОТ-ИТ)
АмплиСенс® SARS-CoV-2-N501Y-IT
ло ТУ 21.20.23-416-01897593-2021
АмплиСенс'
ш 1
ФБУН ЦНИИ Эпидемиологии
Роспотребнадзора,
Российская Федерация, 111123,
г. Москва, ул. Новогиреевская, д. ЗА
г. Москва, ул. Новогиреевская, д. ЗА, стр. 6
тел. (495) 974 9642, e-mail:
amplisens@pcr.ru IVD
--- стр. 2 ---
ОГЛАВЛЕНИЕ
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ............................................................................................................3
НАЗНАЧЕНИЕ................................................................................................................................3
ПРИНЦИП МЕТОДА.....................................................................................................................4
ФОРМЫ КОМПЛЕКТАЦИИ.........................................................................................................5
АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ...................................................................................5
ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ .............................................................................7
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ................................................................................................7
СВЕДЕНИЯ ОБ УТИЛИЗАЦИИ..................................................................................................9
ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ МАТЕРИАЛЫ И ОБОРУДОВАНИЕ ...................................................9
ВЗЯТИЕ, ТРАНСПОРТИРОВАНИЕ И ХРАНЕНИЕ ИССЛЕДУЕМОГО МАТЕРИАЛА.. 11
ИНТЕРФЕРИРУЮЩИЕ ВЕЩЕСТВА И ОГРАНИЧЕНИЯ ПО ИСПОЛЬЗОВАНИЮ ПРОБ
ИССЛЕДУЕМОГО МАТЕРИАЛА..............................................................................................11
СОСТАВ........................................................................................................................................13
ПРОВЕДЕНИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ...........................................................................................14
ОБРАТНАЯ ТРАНСКРИПЦИЯ И ИЗОТЕРМИЧЕСКАЯ АМПЛИФИКАЦИЯ С
ДЕТЕКЦИЕЙ В РЕЖИМЕ «РЕАЛЬНОГО ВРЕМЕНИ».........................................................14
A. Подготовка проб для ОТ-ИТ...........................................................................................14
Б. Проведение ОТ-ИТ с детекцией в режиме «реального времени»........................15
B. Анализ и интерпретация результатов .........................................................................16
СРОК ГОДНОСТИ. УСЛОВИЯ ТРАНСПОРТИРОВАНИЯ и ХРАНЕНИЯ ......................20
ГАРАНТИЙНЫЕ ОБЯЗАТЕЛЬСТВА ИЗГОТОВИТЕЛЯ ......................................................21
СИМВОЛЫ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ В ПЕЧАТНОЙ ПРОДУКЦИИ ...........................................22
стр. 2 из 22
--- стр. 3 ---
список СОКРАЩЕНИИ
В настоящей инструкции применяются следующие
гэ - геномные эквиваленты
ДНК - дезоксирибонуклеиновая кислота
ИТ - изотермическая амплификация
кДНК - комплементарная ДНК, получаемая в реакции обратной
транскрипции на матрице РНК
к- - отрицательный контроль ОТ-ИТ
К1, К2 - положительные контроли ОТ-ИТ
ПЦР - полимеразная цепная реакция
от - обратная транскрипция
ОТ-ИТ - изотермическая амплификация с обратной транскрипцией
ПК - персональный компьютер
РНК - рибонуклеиновая кислота
РУ - регистрационное удостоверение
ФБУН ЦНИИ
Эпидемиологии
Роспотребнадзора
- Федеральное бюджетное учреждение науки «Центральный
научно-исследовательский институт эпидемиологии»
Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав
потребителей и благополучия человека
С- - отрицательный контрольный образец
COVID-19 - Coronavirus disease 2019
IT - isothermal amplification
SARS-CoV-2 - Seyere acute respiratory syndrome coronavirus-2
НАЗНАЧЕНИЕ
Набор реагентов АмплиСенс® SARS-CoV-2-N501 Y-IT
предназначен для качественного определения мутации N501Y
SARS-CoV-2 в биологическом материале (мазки со слизистой
оболочки носо- и ротоглотки) методом обратной транскрипции
и изотермической амплификации (ОТ-ИТ). Материалом для ОТ
ИТ служат пробы РНК, экстрагированные из исследуемого
биоматериала. Набор реагентов используется для
скринингового исследования на наличие мутации N501Y в
биологическом материале, содержащем РНК SARS-CoV-2, с
последующим подтверждением наличия мутаций в гене
S-белка методом секвенирования.
Показания и противопоказания к применению набора
реагентов
Набор реагентов используется в клинической лабораторной
диагностике для исследования биологического материала,
полученного от пациентов с подтвержденным заболеванием
COVID-19.
стр. 3 из 22
--- стр. 4 ---
Противопоказания отсутствуют, за исключением случаев,
когда забор материала не может быть осуществлен по
медицинским показаниям.
Отрицательный результат исследования не исключает
возможность инфицирования коронавирусом SARS-CoV-2 с
мутацией N501Y и может быть получен при содержании вируса
в образце ниже заявленной аналитической чувствительности.
Потенциальные пользователи медицинского изделия
К работе с набором реагентов допускаются только
медицинские работники, обученные методам молекулярной
диагностики и правилам работы в клинико-диагностической
лаборатории в установленном порядке.
ПРИНЦИП МЕТОДА
Принцип тестирования основывается на одновременной
обратной транскрипции РНК и изотермической амплификации
участков кДНК выявляемого микроорганизма с флуоресцентной
детекцией ампликонов.
Обратная транскрипция РНК проводится с помощью
фермента обратной транскриптазы. Изотермическая
амплификация участка кДНК проводится при помощи
специфичных к этому участку праймеров и фермента Bst-
полимеразы.
В составе реакционной смеси присутствует флуорофор,
связывающийся с двухцепочечными продуктами
амплификации, что позволяет регистрировать накопление
специфического продукта путем измерения интенсивности
флуоресцентного сигнала с помощью термостата с системой
детекции в режиме «реального времени».
ОТ-ИТ каждого образца проводится в двух пробирках.
Существует зависимость между концентрацией РНК-мишени в
исследуемом образце, наличием мутации и циклом начала
экспоненциального увеличения флуоресцентного сигнала
(пороговый цикл, Cycle threshold, Ct). Для определения мутации
N501Y вируса SARS-CoV-2 ОТ-ИТ исследуемых образцов РНК
проводят одновременно с двумя положительными контролями.
На основании сравнения значений Ct исследуемых образцов и
положительных контролей, полученных с разными
стр. 4 ИЗ 22
--- стр. 5 ---
реакционными смесями, определяется наличие или отсутствие
мутации N501Y вируса SARS-CoV-2.
Амплифицируемые кДНК-мишени и канал детекции
флуоресценции указаны в табл. 1.
Таблица 1
Канал для флуорофора FAM
Наименование IT-mix ДНК-мишень Область амплификации
SC2-ORF1 «ДНК SARS-CoV-2 ген ORFlab
SC2-N501Y кДНК N501Y SARS-CoV-2 ген S-белка
ФОРМЫ КОМПЛЕКТАЦИИ
Форма 1: «1Т-комплект» вариант 200
Форма 1 предназначена для проведения обратной
транскрипции РНК и изотермической амплификации кДНК с
флуоресцентной детекцией в режиме «реального времени».
Для проведения полного исследования необходимо
использовать комплекты реагентов для экстракции РНК.
Форма 1 рассчитана на проведение 200 реакций ОТ-ИТ,
включая контроли. Объем контролей рассчитан на
10 независимых постановок.
АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
Для данного набора реагентов применимы следующие
характеристики:
Предел обнаружения
Таблица 2
Вид исследуемого материала Комплект для
амплификации
Предел обнаружения,
ГЭ (копийУмл
Мазки со слизистой оболочки
носо- и ротоглотки «1Т-комплект» вариант 200 1x10“
Примечание - одна копия мишени кДНК соответствует
одному геномному эквиваленту (геному) вируса.
Данный предел обнаружения достигается при соблюдении
правил, указанных в разделе «Взятие, транспортирование и
хранение исследуемого материала».
Аналитическая специфичность
Набор реагентов определяет наличие мутации N501Y вируса
SARS-CoV-2 при исследовании штамма hCoV-19/Russia/DAL-
2512/2020(UK) из коллекции ФБУН ГНЦ ВБ «Вектор» в
концентрации не менее 1x10'' ГЭ (копий)/мл.
стр. 5 из 22
--- стр. 6 ---
ч
г
Аналитическая специфичность набора реагентов доказана при
исследовании ДНК/РНК следующих микроорганизмов/штаммов в
концентрации не более 1x10® ГЭ/мл и не менее 1x10® ГЭ/мл:
- штаммы из коллекции АТСС (American Туре Culture
Collection, США); Streptococcus pneumoniae (АТСС® 49619™),
Staphylococcus epidermidis (АТСС® 12228^“), Staphylococcus
haemolyticus (АТСС® 29970™), Streptococcus agalactiae
(ATCC^ 13813™), Enterococcus faecalis (ATCC® 19433™),
Proteus mirabilis (ATCC® 12453^“), Pseudomonas aeruginosa
(ATCC® 9027™), Legionella pneumophila (ATCC® 33152™),
Staphylococcus aureus (MRSA) (ATCC® 43300™), Escherichia
coll (ATCC® 25922™), Klebsiella pneumoniae (ATCC® 27736™),
Enterobacter cloacae (ATCC® 13047™), Bordetella pertussis
(ATCC® 9340™), Haemophilus influenzae (ATCC® 9006™),
Pneumocystis jirovecii (ATCC® PRA-159™), Candida albicans
(ATCC® 14053™), Human Adenovirus 1 (ATCC® VR-1™),
Human Rhinovirus (ATCC® VR-1663™), Human Respiratory
Syncytial Virus (ATCC® VR-1540™), Human Herpesvirus
(ATCC® VR-260™), Human Enterovirus 71 (ATCC® VR-1432™);
- клинические образцы (специфичность подтверждена
методом прямого секвенирования нуклеотидных
последовательностей): SARS-CoV, MERS-CoV, Influenza
virus A, Influenza virus B, Cytomegalovirus {CMV), Epstein-Barr
virus {EBV)\
- ДНК человека в концентрации 10 мкг/мл.
При тестировании образцов ДНК/РНК вышеперечисленных
микроорганизмов и ДНК человека неспецифических реакций
выявлено не было.
Информация об интерферирующих веществах указана в
разделе «Интерферирующие вещества и ограничения по
использованию проб исследуемого материала».
Повторяемость и воспроизводимость исследования
Повторяемость и воспроизводимость исследования были
определены путем тестирования положительных и
отрицательных по содержанию мутации N501Y модельных
образцов.
Условия повторяемости включали в себя тестирование в
одной и той же лаборатории, одним и тем же оператором, с
использованием одного и того же оборудования в пределах
--- стр. 7 ---
короткого промежутка времени. Условия воспроизводимости -
тестирование в двух независимых лабораториях, разными
операторами, в разные дни, на различных приборах и разных
серий набора реагентов. Результаты представлены в табл. 3.
Таблица 3
Тип образцов
Повторяемость Воспроизводимость
Количество
образцов
Совпадение
результатов, %
Количество
образцов
Совпадение
результатов. %
Положительные 10 100 30 100
Отрицательные 10 100 30 100
ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
Таблица 4
Диагностические характеристики набора реагентов
АмплиСенс® SARS-CoV-2-N501Y-IT
Вид исследуемого материала
Диагностическая
чувствительность^
(с доверительной
вероятностью 95 %)
Диагностическая
специфичность^
(с доверительной
вероятностью 95 %)
Мазки со слизистой оболочки носо-
и ротоглотки 100 (96,4-100)% 100 (96,4-100)%
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
Работа должна проводиться в лаборатории, выполняющей
молекулярно-биологические исследования биологического
материала на наличие возбудителей инфекционных болезней,
с соблюдением санитарно-эпидемиологических правил
СП 1.3.3118-13 «Безопасность работы с микроорганизмами I-
II групп патогенности (опасности)»^, СП 1.3.2322-08
«Безопасность работы с микроорганизмами III-IV групп
^ Относительная чувствительность в сравнении с использованным референтным методом.
^Относительная специфичность в сравнении с использованным референтным методом.
® В соответствии с п.2.1.6 СП 1.3.3118-13, диагностика молекулярно-генетическими
методами (без накопления возбудителя) по детекции в клиническом материале
возбудителей инфекционных болезней может проводиться в лабораториях, имеющих
санитарно-эпидемиологическое заключение о возможности проведения работ с
микроорганизмами III группы патогенности в соответствии с требованиями санитарных
правил "Безопасность работы с микроорганизмами III - IV групп патогенности и
гельминтами", утвержденных постановлением Главного государственного врача Российской
Федерации от 28.01.2008 N 4 (зарегистрировано Минюстом России 21 февраля 2008 г.
N11197). Исследования по детекции нуклеиновых кислот проводятся в боксированных
помещениях, оборудованных системами приточной и вытяжной вентиляции или боксах
микробиологической безопасности II класса. Материал для исследований подлежит
предварительной обработке в соответствии методическими указаниями МУ 1.3.2569-09
«Организация работы лабораторий, использующих методы амплификации нуклеиновых
кислот при работе с материалом, содержащим микроорганизмы I-IV групп патогенности».
стр. 7 из 22
--- стр. 8 ---
патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных
болезней», СанПиН 2.1.3684-21 «Санитарно-
эпидемиологические требования к содержанию территорий
городских и сельских поселений, к водным объектам, питьевой
воде и питьевому водоснабжению, атмосферному воздуху,
почвам, жилым помещениям, эксплуатации производственных,
общественных помещений, организации и проведению
санитарно-противоэпидемических (профилактических)
мероприятий» и методических указаний МУ 1.3.2569-09
«Организация работы лабораторий, использующих методы
амплификации нуклеиновых кислот при работе с материалом,
содержащим микроорганизмы I-IV групп патогенности».
Набор реагентов предназначен для одноразового
применения для проведения молекулярного исследования
указанного количества проб (см. раздел «Формы
комплектации»).
Набор реагентов готов к применению согласно данной
инструкции. Применять набор реагентов строго по назначению.
При работе необходимо всегда выполнять следующие
требования:
- Температура в помещении лаборатории от 20 до 28 °С,
относительная влажность от 15 до 75%.
- Допускать к работе с набором реагентов только персонал,
обученный методам молекулярной диагностики и правилам
работы в клинико-диагностической лаборатории в
установленном порядке.
- Не использовать набор реагентов, если нарушена
внутренняя упаковка или внешний вид реагента не
соответствует описанию.
- Не использовать набор реагентов, если не соблюдались
условия транспортирования и хранения согласно
инструкции.
- Не использовать набор реагентов по истечении срока
годности.
- Использовать одноразовые неопудренные перчатки,
лабораторные халаты, защищать глаза во время работы с
образцами и реагентами. Тщательно вымыть руки по
окончании работы. Все операции проводятся только в
перчатках для исключения контакта с организмом человека.
стр. 8 из 22
--- стр. 13 ---
СОСТАВ
СОСТАВ
«IT-комплект» вариант 200 - комплект
транскрипции РНК и изотермической
реагентов для обратной
амплификации участка
Реагент Описание Объем, мл Количество
IT-mix SC2-ORF1 Прозрачная бесцветная
жидкость 1.0 1 пробирка
IT-mix SC2-N501Y прозрачная бесцветная
жидкость 1.0 1 пробирка
IT-mix-E
прозрачная жидкость от
бесцветного до бледно-
желтого цвета
1.0 2 пробирки
К1 SC2-N501Y Прозрачная бесцветная
жидкость 0.2 1 пробирка
К2 SC2-N501Y Прозрачная бесцветная
жидкость 0.2 1 пробирка
С- Прозрачная бесцветная
жидкость 0.2 1 пробирка
Электронный калькулятор на базе Microsoft® Excel
«АмплиСенс® SC2-N501Y» - на электронном носителе или на
сайте Изготовителя (www.annplisens.ru).
Эксплуатационная документация в составе: инструкция по
применению, паспорт качества набора реагентов, вкладыш к
набору реагентов, краткое руководство к набору реагентов - на
бумажном носителе или на сайте Изготовителя
(
www.annplisens.ru).
стр. 13 ИЗ 22
--- стр. 14 ---
ПРОВЕДЕНИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
ПРОВЕДЕНИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
Материалом для проведения исследования служат пробы
РНК, полученные ранее на этапе экстракции из исследуемого
материала, в которых обнаружена РНК SARS-CoV-2.
Исследование состоит из следующих этапов:
- обратная транскрипция РНК и изотермическая
амплификация кДНК с флуоресцентной детекцией в режиме
«реального времени»,
- анализ и интерпретация результатов.
ОБРАТНАЯ ТРАНСКРИПЦИЯ И ИЗОТЕРМИЧЕСКАЯ
АМПЛИФИКАЦИЯ С ДЕТЕКЦИЕЙ В РЕЖИМЕ «РЕАЛЬНОГО
ВРЕМЕНИ»
ВНИМАНИЕ! При работе с РНК необходимо использовать
только одноразовые стерильные пластиковые расходные
материалы, имеющие специальную маркировку RNase-free,
DNase-free.
Выбор пробирок для проведения ОТ-ИТ зависит от
используемого амплификатора.
Для внесения в пробирки реагентов, проб РНК и
контрольных образцов используются одноразовые
наконечники с фильтрами.
А. Подготовка проб для ОТ-ИТ
Общий объем реакционной смеси - 20 мкл, включая объем
пробы РНК - 10 мкл.
1. Рассчитать количество каждого реагента, требующееся для
приготовления двух реакционных смесей. На одну реакцию
требуется: для одной реакционной смеси - 5 мкл IT-mix SC2-
ORF1 и 5 мкл IT-mix-E; для второй реакционной смеси -
5 мкл IT-mix SC2-N501Y и 5 мкл IT-mix-E. Смеси готовить на
общее число исследуемых и контрольных образцов
(количество контрольных образцов см. в п. 7) плюс запас на
2 реакции.
ВНИМАНИЕ’. Компоненты реакционных смесей следует
смешивать непосредственно перед проведением исследования.
2. Разморозить и перемешать содержимое пробирок с IT-mix
SC2-ORF1 и IT-mix SC2-N501Y, осадить капли на вортексе.
Содержимое пробирки IT-mix-E перемешать пипетированием,
осадить капли на вортексе.
стр. 14 ИЗ 22
--- стр. 15 ---
ПРОВЕДЕНИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
ВНИМАНИЕ! В случае если реагенты 1Т-комплекта будут
израсходованы в течение 1 недели, допускается их хранение
при температуре от 2 до 8 °С. По истечении указанного срока
реагенты выбросить.
3. В двух отдельных пробирках подготовить две реакционные
смеси. В одной пробирке смешать необходимое количество
IT-mix SC2-ORF1 и IT-mix-E; в другой пробирке - IT-mix
SC2-N501Y и IT-mix-E. Тщательно перемешать, осадить
капли на вортексе.
4. Отобрать необходимое (двукратное) количество пробирок
или стрипов для амплификации исследуемых и контрольных
проб, поставить в два ряда.
5. В каждый ряд пробирок внести по одной из двух
приготовленных реакционных смесей по 10 мкл на пробу.
Неиспользованные остатки реакционных смесей выбросить.
6. В две пробирки с различными реакционными смесями
внести по 10 мкл проб РНК, полученных в результате
экстракции из исследуемых образцов.
ВНИМАНИЕ! При добавлении проб РНК, экстрагированных с
помощью комплектов реагентов для проведения экстракции
методом магнитной сепарации, необходимо избегать
попадания сорбента в реакционную смесь.
7. Поставить контрольные реакции:
а) положительный контроль ОТ-ИТ (К1) - в две пробирки
с различными реакционными смесями внести по 10 мкл
К1 SC2-N501Y;
б) положительный контроль ОТ-ИТ (К2) - в две пробирки
с различными реакционными смесями внести по 10 мкл
К2 SC2-N501Y;
в) отрицательный контроль ОТ-ИТ (К-) - в две пробирки с
различными реакционными смесями внести по 10 мкл С-.
ВНИМАНИЕ! Провести ОТ-ИТ сразу после соединения
реакционной смеси с РНК-пробами и контролями.
Б. Проведение ОТ-ИТ с детекцией в режиме «реального
времени»
1. Запрограммировать амплификатор с системой детекции в
режиме «реального времени» для выполнения
соответствующей программы амплификации и детекции
флуоресцентного сигнала (см. табл. 5).
стр. 15 ИЗ 22
--- стр. 17 ---
ПРОВЕДЕНИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
контролей, полученных на разных реакционных смесях, в
соответствии с табл. 7, где
dK1oRF1 = (Cf K2 oRF1 “ Ct K1oRFl)/3
dK1 N501Y ~ (Ct K 2n501Y “ Ct K1 N501y)/3
dK2oRFi = {Ct K2orfi - Ct K1orfi)/2 + 1
dK2N501Y = (Ct K2n501Y — Ct K1 N501y)/2 + 1
в случае, когда dK2oRPi ^ 3 или cIK 2n5oiy ^ 3, результат
считается невалидным, требуется повторить исследование.
Таблица 7
Интерпретация результатов анализа исследуемых
Значение порогового цикла (Cf) по каналу для
флуорофора РАМ Результат
>IT-mix SC2-ORF1 IT-mix SC2-N501Y
Ct ^ CfrpaHHHHoe ИЛИ
отсутствует
Ct ^ С^граничное ИЛИ
отсутствует
PHKSARS-CoV-2
НЕ обнаружена
Ct ^ CfrpaHH4Hoe ИЛИ
отсутствует Ct < С^граничное
Невалидный.
Требуется повторить
исследование
С?(К2) ^ Ct < С ^ гр ан и ч н о е Ct < Cf(K1)
Невалидный.
Требуется повторить
исследование
C t< Cf(K1) Cf<C^(K1) Мутация N501Y SARS-CoV-2
обнаружена
C^=C^(K1)±dK1oRF1 CJ=Cf(K1)±dKlN501Y
Мутация N501Y SARS-CoV-2
обнаружена
Ct{K^) < Ct<Ct{K2) Cf(K1)<Cf<Cf(K2) Мутация N501Y SARS-CoV-2
обнаружена
C t= Cf(K2) ± dK2oRFi C t= Cf(K2)±dK2N50iY
Мутация N501Y SARS-CoV-2
обнаружена
Cf(K2)< Ct < С^граничное Cf(K2) < Ct < С^грамичное
Мутация N501Y SARS-CoV-2
обнаружена
Ct < С^граничное
Ct ^ С?грамичмое
ИЛИ отсутствует
Мутация N501Y SARS-CoV-2
НЕ обнаружена
• i
Для всех остальных случаев, не указанных в табл. 7, мутация
N501Y SARS-CoV-2 не обнаружена.
ВНИМАНИЕ! Дополнительные мутации в области посадки
праймеров, обнаруживающих мутацию N501Y, могут приводить
к ложноотрицательным результатам.
ВНИМАНИЕ! Анализ результатов проводить с помощью
приведенного выше алгоритма или электронного калькулятора
на базе Microsoft® Excel «АмплиСенс® SC2-N501Y». Работа
электронного калькулятора осуществляется при использовании
стр. 17 ИЗ 22
--- стр. 18 ---
ПРОВЕДЕНИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
программы Microsoft® Excel, входящей в состав приложений
Microsoft® Office. Для начала работы необходимо скопировать
файл электронного калькулятора с носителя или сайта
Изготовителя на жесткий диск ПК. Порядок работы с
электронным калькулятором, а также его назначение и
характеристики описаны во вкладке «Инструкция»
электронного калькулятора «АмплиСенс® SC2-N501Y».
Контроль качества исследования
Результат исследования считается достоверным, если
получены правильные результаты для контролей ОТ-ИТ в
соответствии с табл. 8 и вкладышем, прилагаемым к набору
реагентов.
Таблица 8
Контроль Контролируемый этап
исследования
Значение порогового цикла {Ct)
по каналу для флуорофора РАМ
К1 ОТ-ИТ определено меньше гоаничного
К2 ОТ-ИТ опоеделено меньше гоаничного
К- ОТ-ИТ отсутствует или больше граничного
ВНИМАНИЕ! Настройки приборов и граничные значения
указаны во вкладыше, прилагаемом к набору реагентов.
Возможные ошибки:
1. Для положительного контроля ОТ-ИТ (К1 или К2) значение
порогового цикла (Ct) не определено или превышает
граничное. Необходимо повторить исследование, начиная с
fy этапа ОТ-ИТ, для всех образцов.
2. Для отрицательного контроля ОТ-ИТ (К-) определено
значение порогового цикла {Ct) меньше граничного.
Вероятна контаминация лаборатории продуктами
амплификации или контаминация реагентов, исследуемых
образцов на каком-либо этапе исследования. Необходимо
предпринять меры по выявлению и ликвидации источника
контаминации и повторить амплификацию и детекцию для
всех образцов.
3. Для исследуемого образца определено значение порогового
цикла, при этом на графике флуоресценции отсутствует
участок характерного экспоненциального подъема (график
представляет собой приблизительно прямую линию).
Необходимо проверить правильность выбранного уровня
стр. 18 ИЗ 22
--- стр. 19 ---
ПРОВЕДЕНИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
пороговой линии или параметров расчета базовой линии.
Если результат получен при правильном уровне пороговой
линии (базовой линии), требуется повторно провести
амплификацию и детекцию для этого образца.
ВНИМАНИЕ! В процессе ИТ образуется больше продуктов
амплификации, чем в ПЦР, поэтому требуется особая
осторожность при работе с продуктами ИТ.
стр. 19 ИЗ 22
--- стр. 20 ---
СРОК годности. УСЛОВИЯ ТРАНСПОРТИРОВАНИЯ и
ХРАНЕНИЯ
Срок годности. 12 мес^. Набор реагентов с истекшим сроком
годности применению не подлежит. Срок годности вскрытых
реагентов соответствует сроку годности, указанному на
этикетках для невскрытых реагентов, если в инструкции не
указано иное.
Транспортирование. Набор реагентов транспортировать при
температуре от 2 до 8 °С не более 5 сут в термоконтейнерах,
содержащих хладоэлементы, всеми видами крытых
транспортных средств.
Хранение.
Форма 1. «1Т-комплект» вариант 200 хранить в морозильной
камере при температуре от минус 24 до минус 16 °С. IT-mix-E
хранить в защищенном от света месте.
Морозильные камеры должны обеспечивать
регламентированный температурный режим.
Данные не подтверждены исследованиями в реальном времени.
стр. 20 из 22
--- стр. 21 ---
гарантийные обязательства изготовителя
Изготовитель гарантирует соответствие основных
параметров и характеристик набора реагентов требованиям,
указанным в технической и эксплуатационной документации, в
течение указанного срока годности при соблюдении всех
условий транспортирования, хранения и применения.
Медицинское изделие техническому обслуживанию и
ремонту не подлежит.
Рекламации на качество набора реагентов направлять по
адресу 111123, г. Москва, ул. Новогиреевская, дом ЗА, e-mail:
obtk@pcr.ru'*.
При выявлении побочных действий, не указанных в
инструкции по применению набора реагентов, нежелательных
реакций при его использовании, фактов и обстоятельств,
создающих угрозу жизни и здоровью граждан и медицинских
работников при применении набора реагентов, рекомендуется
направить сообщение по адресу, указанному выше, и в
уполномоченную государственную регулирующую организацию
(в РФ - Федеральная служба по надзору в сфере
здравоохранения) в соответствии с действующим
законодательством.
Заведующий НПЛ ОМДиЭ
ФБУН ЦНИИ Эпидемиологии
Роспотребнадзора
Е.Н. Родионова
Директор
ГБУЗ МО МОНИКИ
им. М.Ф. Владимирского
К.Э. Соболев
■ ' Отзывы и предложения о продукции «АмплиСенс» вы можете оставить, заполнив анкету
потребителя на сайте: www .am D lisens.ru .
стр. 21 из 22
--- стр. 22 ---
символы, ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ В ПЕЧАТНОЙ ПРОДУКЦИИ
REF
IVD
Номер по каталогу
LOTI Код партии
Медицинское изделие для
диагностики in vitro
А
V
2
Осторожно! Обратитесь к
инструкции по применению
Содержимого достаточно для
проведения п-количества
тестов
Использовать до
VER
I
Дата изменения
Температурный диапазон
Изготовитель
a s
d]
Обратитесь к инструкции по
применению
Не допускать воздействия
солнечного света
Дата изготовления
стр. 22 из 22