Набор реагентов для иммуноферментного выявления антител класса G к Lamblia intestinalis «Лямблиоз-IgG-антитела» по ТУ 9398-011-32157097-2011 — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 1 --- г- УТВЕРЖДЕНА Приказом Росздравнадзора Директор ООО «И « У Т В Е Р Ж Д А Ю » от 20 № И Н С Т Р У К Ц И Я п о П Р И М Е Н Е Н И Ю НАБОРА РЕАГЕНТОВ ДЛЯ ИММУНОФЕРМЕНТНОГО ВЫЯВЛЕНИЯ АНТИТЕЛ КЛАССА G к L am b lia in testin a lis « Л я lч б л и o з -I g G -a н т и т e л a » 1 . Н а з н а ч е н и е 1.1 Выявление антител класса G к Lamblia intestinalis в сыворотке (плазме) крови человека, может быть использован при проведении сероэпидемиологических исследований. 1.2 Набор рассчитан на проведение анализа 90 неизвестных, 1 контрольного положительного образца в двух повторах, 1 контрольного отрицательного образца в трех повторах, 1 контроля конъюгата (всего 96 определений при использовании всех стрипов планшета). 2 . Х а р а к т е р и с т и к а н а б о р а 2.1. Принцип действия Принцип действия набора реагентов основан на непрямом иммуноферментном анализе. На первой стадии анализа исследуемые образцы инкубируют в лунках планшета с иммобилизованным антигеном Lamblia intestinalis. Если в сыворотке (плазме) содержатся антитела к Lamblia intestinalis, образуется комплекс антиген-антитело. После промывки планшета в лунки планшета вносят антивидовой конъюгат (антитела к IgG человека, конъюгированные с пероксидазой хрена), который связывается с антителами класса G к Lamblia intestinalis, если они присутствуют в образце. Визуализация образовавшегося комплекса «антиген-антитело-конъюгат» происходит за счет ферментативной реакции пероксидазы с субстратной смесью и образования окрашенного продукта. После остановки ферментативной реакции раствором серной кислоты (стоп- реагент) результаты анализа учитывают фотометрически. Величина оптической плотности (ОП) окрашенной хромогенной смеси пропорциональна концентрации специфических антител в образце сыворотки или плазмы. 2.2 Состав набора - планшет разборный (12 восьмилуночных стрипов) с иммобилизованным на внутренней поверхности лунок антигеном Lamblia intestinalis (иммуносорбент) - 1 шт.; - контрольный положительный образец на основе сыворотки крови человека, содержащий IgG к Lamblia intestinalis (К+) - прозрачная красного цвета жидкость - 1 флакон (1,3 мл); - контрольный отрицательный образец на основе сыворотки крови человека, не содержащий IgG к Lamblia intestinalis (К-) - прозрачная бесцветная или светло-желтого цвета жидкость - 1 флакон (1,5 мл); - конъюгат (Кг) - моноклональные мышиные антитела к IgG человека, конъюгированные с пероксидазой хрена, прозрачная зеленого цвета жидкость - 1 флакон (0,4 мл); --- стр. 2 --- - буферный раствор для разведения сывороток (РБР-С) - прозрачная синего цвета жидкость - 1 флакон (11 мл); - буферный раствор для разведения конъюгата (РБР-К) - прозрачная зеленого цвета жидкость -1 флакон (13 мл); - 25-кратный концентрат фосфатно-солевого буферного раствора с твином (ФСБ-Т(концентрат х25)) - прозрачная, слегка опалесцирующая, бесцветная жидкость. Допускается выпадение кристаллического осадка, растворяющегося при нагревании при температуре 37 в течение 30 мин - 1 флакон (26,0 мл); - буферный раствор для субстрата (БРС) - прозрачная бесцветная жидкость - 1 флакон (13 мл); - тетраметилбензидин (ТМБ), хромоген - прозрачная бесцветная или светло-желтого цвета жидкость - 1 флакон (0,7 мл); - стоп-реагент - прозрачная бесцветная жидкость - 1 флакон (6,0 мл); - пленка для заклеивания планшета - 2 шт.; - ванночка для реагентов - 2 шт.; - наконечники для пипетки на 4-200 мкл - 16 шт.. 3 . А н а л и т и ч е с к и е и д и а г н о с т и ч е с к и е х а р а к т е р и с т и к и Набор реагентов «Лямблиоз-1£0-антитела» предназначен для выявления антител класса G к Lamblia intestinalis в сыворотке (плазме) крови человека. Специфичность выявления иммуноглобулинов класса G Lamblia intestinalis по Стандартной панели сывороток предприятия - 100 %. Чувствительность выявления иммуноглобулинов класса G Lamblia intestinalis по Стандартной панели сывороток предприятия - 100 %. 4. М е р ы п р е д о с т о р о ж н о с т и 4.1. Потенциальный риск применения набора - класс 2а. 4.2. Все компоненты набора, за исключением стоп-реагента, являются нетоксичными. Стоп-реагент обладает раздражающим действием. Избегать разбрызгивания и попадания на кожу и слизистые. В случае попадания раствора серной кислоты на кожу и слизистые необходимо промыть поражённый участок большим количеством проточной воды. 4.3. При работе с набором следует соблюдать «Правила устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) санитарно-эпидемиологических учреждений системы Министерства здравоохранения СССР» (Москва, 1981 г.). 4.4. При работе с набором следует надевать одноразовые резиновые или пластиковые перчатки, так как в состав набора входят компоненты крови человека, которые следует рассматривать как потенциально инфицированные. 4.5. Химическая посуда и оборудование, которые используются в работе с набором, должны быть соответствующим образом промаркированы и храниться отдельно. 4.6.*3апрешается приём пищи, использование косметических средств и курение в помещениях, предназначенных для работы с наборами. 5. Оборудование и материалы - спектрофотометр вертикального сканирования, позволяющий проводить измерения оптической плотности растворов в лунках стрипов при длине волны 450 нм; - прибор, позволяющий производить инкубирование при температуре 37±1 °С (термостат); - промывочное устройство для планшетов; - холодильник бытовой; --- стр. 3 --- - пипетки полуавтоматические одноканальные с переменным или фиксированным объёмом со сменными наконечниками, позволяющие отбирать объёмы жидкости от 5 до 1 О О О мкл, аттестованные по значению средней дозы и сходимости результатов пипетирования (погрешность не более 3 %); - пипетки полуавтоматические многоканальные со сменными наконечниками, позволяющие отбирать объёмы жидкостей от 5 до 300 мкл, аттестованные по значению средней дозы и сходимости результатов пипетирования (погрешность не более 3 %); - перчатки резиновые хирургические; - бумага фильтровальная лабораторная; - цилиндр мерный 2-го класса точности вместимостью 1000 мл; - вода дистиллированная. 6 . А н а л и з и р у е м ы е о б р а з ц ы Для проведения анализа используют образцы сыворотки или плазмы крови человека объемом не менее 40 мкл. Желательно использовать свежеприготовленные образцы сыворотки (плазмы) крови, допускается использование образцов, хранившихся при температуре 2 - 8 °С не более 7 сут, либо при минус 20 °С не более 3 мес. Для исключения ложноположительных результатов исследуемые сыворотки необходимо готовить и хранить в стерильных условиях, исключающих возможность контаминации посторонней микрофлорой. При необходимости осветлять образцы сывороток, содержащие осадок и агрегаты, путем центрифугирования в течение 10-15 мин при 3000 об/мин. Не использовать сыворотки с выраженным гемолизом, гиперлипидемией и бактериемией, не использовать термоинактивированные сыворотки и сыворотки с добавлением азида натрия. Избегать повторных циклов замораживания и оттаивания образцов. Для возможного повторного исследования образца сыворотки желательно образец разделить на аликвоты, которые хранить при температуре 2 - 8 °С не более 7 сут, либо при минус 20 °С не более 3 мес. Не допускать тестирование пула, содержащего несколько образцов сывороток. Каждый образец сыворотки или раствора необходимо отбирать новым наконечником. Для отбора исследуемых проб и компонентов применять автоматические пипетки. 7 . П р о в е д е н и е а н а л и з а Внимание! При проведении анализа нельзя использовать реагенты из наборов разных серий или смешивать их в процессе приготовления растворов. Окисляющие агенты, ионы металлов, моющие средства на посуде могут разлагать ТМБ. Во избежание ложных результатов необходимо тщательно отмывать посуду раствором кислоты серной или соляной 1 моль/л с последующей отмывкой дистиллированной водой. Перед постановкой реакции все компоненты тест-системы необходимо выдержать не менее 30>1ин при температуре от 18 до 25 °С. 7 .1 П р и г о т о в л е н и е р е а г е н т о в , р а с т в о р о в , и с с л е д у е м ы х о б р а з ц о в с ы в о р о т о к 7.1.1 Приготовление рабочего раствора ФСБ-Т При наличии во флаконе с ФСБ-Т(концентрат х25) визуально определяемого осадка солей флакон с концентратом выдержать при температуре 37 °С до полного растворения солей. Содержимое флакона с ФСБ-Т(концентрат х25) перенести в мерный цилиндр вместимостью 1 л и довести объем раствора до 650 мл дистиллированной водой. В случае использования одного или нескольких стрипов разборного планшета в мерный цилиндр внести концентрат ФСБ-Т из флакона и добавить дистиллированную воду в соответствии с таблицей. --- стр. 4 --- т Хранение: неиспользованный ФСБ-Т (концентрат х25) хранить при температуре от 2 до 8 °С в течение срока годности набора, рабочий раствор ФСБ-Т - при температуре от 2 до 8 °С в течение двух недель. _______Расход реагентов набора «Лямблиoз-IgG-aнтитeлa» ________________ Количество используемых стрипов 8 1 0 II 1 2 ФСБ-Т (концентрат х25), мл Вода дис тиллиро ванная, мл до 50 до 100 Приготовление рабочего раствора ФСБ-Т до 150 до 200 1 0 до 250 1 2 до 300 1 4 до 350 16 до 400 до 450 20 до 500 22 до 550 26 до 650 РБР-К, мл Конъюгат, мл 2х Приготовление рабочего раствора конъюгата Зх 4х 5х 6х 7х 8х 9х 1 0 10х 1 1 Их 1 3 13х БРС, мл ТМБ, мл 1 0,050 Приготовление рабочего раствора тетраметилбензидина 0,100 0,150 0,200 0,250 0,300 0,350 8 0,400 0,450 10 0,500 1 1 0,550 1 3 0,650 * X - объем конъюгата - подбирается для каждой серии на производстве тест-систем при изготовлении наборов 7.1.2 Приготовление РБР-С, РБР-К и БРС РБР-С, РБР-К и БРС - готовы к использованию. Хранение: после вскрытия флакона раствор хранить в закрытом виде при температуре от 2 до 8 °С в течение срока годности набора. 7.1.3 Приготовление контрольных образцов К " ^ и К' готовы к использованию. Хранение: после вскрытия флакона контрольные образцы хранить при температуре от 20 до 25 °С до 48 ч, при температуре от 2 до 8 °С в течение срока годности набора. 7.1.4 Приготовление рабочего раствора конъюгата Рабочее разведение конъюгата подбирается для каждой серии тест-системы. При постановке ИФА на полном планшете из флакона с Кг отобрать объем конъюгата, указанный в таблице для полного планшета (12 стрипов) и перенести его во флакон с РБР-К. Раствор тщательно перемешать, не допуская вспенивания. При постановке ИФА на одном или нескольких стрипах разборного планшета в чистый флакон отобрать необходимый объем РБР-К и добавить соответствующий объем конъюгата, исходя из приведенной выше таблицы. Раствор тщательно перемешать, не допуская вспенивания. Рабочий раствор конъюгата готовится непосредственно перед использованием и хранению не подлежит. При использовании нескольких стрипов планшета остаток конъюгатй хранить при температуре от 2 до 8 °С в течение срока годности набора. 7.1.5 Приготовление рабочего раствора тетраметилбензидина При постановке ИФА на полном планшете из флакона с ТМБ отобрать 650 мкл раствора и перенести его во флакон с БРС, тщательно перемешать. В случае использования одного или нескольких стрипов планшета в чистый флакон отобрать необходимый объем БРС и добавить соответствующий объем ТМБ (см. таблицу). Хранение: рабочий раствор тетраметилбензидина хранить при температуре от 20 до 25 °С в защищенном от света месте до 20 мин, остаток ТМБ хранить при температуре от 2 до 8 °С в течение срока годности набора. Внимание! Отбирать концентрат ТМБ только новыми наконечниками для пипеток. --- стр. 5 --- 7.1.6 Приготовление стоп-реагента Стоп-реагент готов к использованию. Хранение: при температуре от 2 до 8 °С в течение срока годности набора. 7.1.7 Использование планшета с иммобилизованным антигеном Перед вскрытием пакет с планшетом необходимо выдержать не менее 30 мин при температуре от 20 до 25 °С. При использовании нескольких стрипов оставшиеся стрипы планшета хранить в герметично закрытом пакете при температуре от 2 до 8 °С в течение срока годности набора. 7 . 2 . П р о в е д е н и е и м м у н о ф е р м е н т н о г о а н а л и з а ПЕРВАЯ СТАДИЯ РЕАКЦИИ 7.2.1. Планшет с иммобилизованным антигеном промыть один раз рабочим раствором ФСБ-Т с помошью автоматического промывателя или многоканальной пипетки, при этом в каждую лунку планшета вносить не менее 300 мкл раствора в процессе одного промывания. Время между заполнением и опорожнением лунок должно быть не менее 10 сек, по окончании промывки остатки жидкости удалить, постукивая перевернутым планшетом по сложенной в несколько раз фильтровальной бумаге. 7.2.2. В лунки А1 и В1 планшета внести по 100 мкл контрольного положительного образца, в лунки С1, Д1 и Е1 внести по 100 мкл К' контрольного отрицательного образца, в лунку F1 внести 90 мкл РБР-С для контроля конъюгата. В остальные лунки планшета внести по 90 мкл РБР-С и по 10 мкл образцов исследуемых сывороток, тщательно перемешать пипетированием, при этом цвет раствора в лунке должен измениться. Таким образом, исследуемая сыворотка в лунке разбавляется в 10 раз. Внесение образцов необходимо производить быстро, в течение времени не более 10-15 мин. После этого планшет закрыть пленкой и инкубировать в течение 30 мин при температуре (37±1) °С. В н и м а н и е ! Пленка предназначена для одноразового использования! 7.2.3. По окончании инкубации планшет промыть рабочим раствором ФСБ-Т пять раз и удалить остатки влаги из планшета (см. п.7.2.1). ВТОРАЯ СТАДИЯ РЕАКЦИИ 7.2.4. В каждую лунку планшета внести по 100 мкл рабочего раствора конъюгата (см. приготовление п.7.1.4). Планшет закрыть пленкой и инкубировать в течение 30 мин при температуре (37±1) °С. Для внесения рабочего раствора конъюгата использовать ванночку для реагентов и одноразовые наконечники, входящие в состав набора. 7.2.5 По окончании второй инкубации планшет промыть рабочим раствором ФСБ-Т 5 раз и удалить остатки влаги из планшета (см. п.7.2.1). • ТРЕТЬЯ (ФЕРМЕНТАТИВНАЯ) СТАДИЯ РЕАКЦИИ 7.2.6. Внести в каждую лунку планшета по 100 мкл рабочего раствора тетраметилбензидина (см. приготовление п.7.1.5). Планшет поместить на 15 мин в зашишенное от света место при температуре (37±1) °С. Для внесения рабочего раствора тетраметилбензидина использовать ванночку для реагентов и одноразовые наконечники, входящие в состав набора Во избежание ложных результатов при раскапывании рабочего раствора тетраметилбензидина: а) не касайтесь стенок лунок планшета наконечниками; --- стр. 6 --- б) избегайте образования аэрозолей и попадания субстратной смеси на внутренний фильтр пипетки. 12.1 Реакцию остановить внесением в каждую лунку планшета по 50 мкл стоп- реагента. Внимание! Следует избегать попадания стоп-реагента на открытые участки тела и одежду. При попадании - промыть большим количество.м воды! Схема проведения анализа Использовать только после тщательного ознакомления с инструкцией! Планшет разборный (12 восьмилуночных стрипов) с иммобилизованным на внутренней поверхности лунок антигеном Lamblia intestinalia i Промыть: Рабочим раствором ФСБ-Т (не менее 300 мкл в каждую лунку), 1 раз i Внести: ПЕРВАЯ СТАДИЯ 2x100 мкл К+, 3x100 мкл К-, 1x90 мкл РБР-С, РЕАКЦИИ по 90 мкл РБР-С, по 10 мкл образцов сывороток i Инкубировать 30 мин, при (37±1) °С i Промыть: Рабочим раствором ФСБ-Т (не менее 300 мкл в каждую лунку), 5 раз i ВТОРАЯ СТАДИЯ Внести: РЕАКЦИИ по 100 мкл рабочего раствора конъюгата i Инкубировать 30 мин при (37±1) °С i Промыть: Рабочим раствором ФСБ-Т (не менее 300 мкл в каждую лунку), 5 раз i ТРЕТЬЯ Внести: (ФЕРМЕНТАТИВНАЯ) по 100 мкл рабочего раствора тетраметилбензидина СТАДИЯ i РЕАКЦИИ Инкубировать 15 мин при (37±1) °С в защищенном от света месте i Внести: по 50 мкл стоп-реагента i Измерять при 450 нм 8 . Р е г и с т р а ц и я р е з у л ь т а т о в а н а л и з а Результаты ИФА регистрируют на спектрофотометре. Оптическую плотность (ОП) измеряют при длине волны 450 нм. Нулевой уровень («бланк») задают по воздуху. Измерение проводят сразу или в течение 15 мин после остановки реакции. 9 . У ч е т и о ц е н к а р е з у л ь т а т о в Результаты учитывают только в том случае, если: - среднее значение ОП в лунках с контролем коньюгата ОПККг не превышают 0,15, --- стр. 7 --- 1 - среднее значение в лунках с К‘ ОПК '(ср ) не более 0,2, - среднее значение в лунках с ОПК’ ^(ср.) не менее 1,0. В противном случае исследование необходимо повторить. На основании полученных данных вычислить критическое значение оптической плотности (ОПкрит). ОПкрит. рассчитывают по формуле: О П к р и т . = О П К ( с р .) + 0 ,2 5 Исследуемые образцы сывороток оценивают по величине оптической плотности (ОП образца) в соответствии с таблицей. О п т и ч е с к а я п л о т н о с т ь с ы в о р о т к и Р е з у л ь т а т от 0 до 0,85 X ОПкрит отрицательный от 0,85 X ОПкрит до 1,15 х ОПкрит сомнительный о т 1,15 X ОПкрит д о 2 X ОПкрит слабоположительный о т 2 X ОПкрит д о 4 X ОПкрит положительный более 4 х ОПкрит сильноположительный Образец считают сомнительным, если оптическая плотность исследуемого образца сыворотки находится в интервале от 0,85 х ОПкрит до 1,15 х ОПкрит. Такую сыворотку рекомендуется исследовать повторно. Если результат будет опять сомнительным, следует провести тестирование сыворотки, полученной через 2-4 недели. В случае повторного получения сомнительного результата такой образец считать отрицательным. Пациентам с положительными результатами рекомендуется дополнительное обследование. Для подтверждения диагноза необходимо исследовать образцы сывороток, полученных в острую и рековалесцентную стадии болезни. Диагностически значимым результатом является 4-х кратное увеличение уровня антител в парных образцах сыворотки, взятых с интервалом не менее 14-21 сут от одного пациента и определенных в одном опыте. Все клинические и лабораторные данные должны быть рассмотрены в совокупности. 1 0. У с л о в и я х р а н е н и я и э к с п л у а т а ц и и н а б о р а Набор реагентов «Лямблиоз-1§0-антитела» должен храниться в упаковке предприятия-изготовителя при температуре 2 - 8 °С в течение всего срока годности (12 мес). Замораживание компонентов набора не допускается. --- стр. 8 --- Срок годности набора реагентов 12 мес. Препарат с истекшим сроком годности применению не подлежит. Транспортирование производить при температуре 2 - 8 °С. Допускается транспортирование при температуре до 25 °С в течение 5 сут. На дальние расстояния только авиатранспортом. П о в о п р о с а м , к а с а ю щ и м с я к а ч е с т в а н а б о р а « Л я м б л и о з - 1 § С - а н т и т е л а » , следует обращаться в ООО «ИмДи-спектр» по адресу: 630559, Новосибирская обл., Новосибирский р-он, п. Кольцове, д.2а; тел/факс (383) 336-76-23 Начальник производства ООО «ИмДи-спектр» «СОГЛАСОВАНО» В.Г Майданюк « 2 0 '/■^г. Зав. кафедрой клиничай^ж Ж ^^^Ч лабораторной диаг" — ' ГБОУ ДПО РМ Минздравсоцразв ___Д.М.Н., профессор В.В. Долгов Подпис удостоверяю; Специалист Р М А П О П одп и сь “ 20/^)да --- стр. 9 --- Пронумеровано, прошнуровано и опечатано 8 листов Директор ООО «ИмД: «