Набор реагентов для сполиготипирования микобактерий туберкулеза человеческого и бычьего типов методом гибридизации на биологическом микрочипе (Сполиго-Биочип) по ТУ 9398-011-02699501-2009 — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 1 --- о т У Т В Е Р Ж Д Е Н А П р и к а з о м Р о с з д р а в н а д з о р а 2 0 1 г . № « У Т В Е Р Ж Д А Ю » Г е н е р а л ь н ы й д и р е к т о р О О О « Б и о ч и п - И М Б » . Е р м о л и н с к а я ^ 2 0 1 1 г . ИНСТРУК1 п о П Р И М Е Н Е Н И Ю Н А Б О Р А Р Е А Г Е Н Т О В Д Л Я С П О Л И Г О Т И П И Р О В А Н И Я М И К О Б А К Т Е Р И Й Т У Б Е Р К У Л Е З А Ч Е Л О В Е Ч Е С К О Г О И Б Ы Ч Ь Е Г О Т И П О В МЕТОДОМ ГИБРИДИЗАЦИИ НА БИОЛОГИЧЕСКОМ МИКРОЧИПЕ (СПОЛИГО-БИОЧИП) 1 . Н А З Н А Ч Е Н И Е . 1 . 1 . Н а б о р р е а г е н т о в С П О Л И Г О - Б И О Ч И П п р е д н а з н а ч е н д л я с п о л и г о т и п и р о в а н и я м и к о б а к т е р и й т у б е р к у л ё з н о г о к о м п л е к с а с ф л у о р е с ц е н т н ы м и з о б р а ж е н и е м н а б и о л о г и ч е с к о м м и к р о ч и п е . Н а б о р п о з в о л я е т н е т о л ь к о в ы я в л я т ь н а л и ч и е м и к о б а к т е р и й т у б е р к у л е з а ч е л о в е ч е с к о г о и л и б ы ч ь е г о т и п о в , н о и п р о в о д и т ь в н у т р и в и д о в о е т и п и р о в а н и е , т е м с а м ы м п о з в о л я я п о л у ч и т ь э п и д е м и о л о г и ч е с к и е д а н н ы е о т о м и л и и н о м о б н а р у ж е н н о м ш т а м м е . 1 . 2 . С п о л и г о т и п и р о в а н и е п р е д с т а в л я е т м е т о д г е н о т и п и р о в а н и я м и к о б а к т е р и й т у б е р к у л ё з н о г о к о м п л е к с а ( М Б Т ) , о с н о в а н н ы й н а п о л и м о р ф и з м е л о к у с а п р я м ы х п о в т о р о в Д Н К М Б Т . 1 . 3 . Н а б о р р а с с ч и т а н н а п р о в е д е н и е 1 0 0 а н а л и з о в , в к л ю ч а я п о л о ж и т е л ь н ы е и о т р и ц а т е л ь н ы е к о н т р о л ь н ы е о б р а з ц ы ( и х к о л и ч е с т в о з а в и с и т о т к о л и ч е с т в а а н а л и з и р у е м ы х е д и н о в р е м е н н о и с с л е д у е м ы х о б р а з ц о в ) . 2 . Х А Р А К Т Е Р И С Т И К А Н А Б О Р А . ' 2 . 1 . П р и н ц и п д е й с т в и я . 2 . 1 . 1 . Н а б о р р е а г е н т о в С П О Л И Г О - Б И О Ч И П о с н о в а н н а П Ц Р с и с п о л ь з о в а н и е м с п е ц и ф и ч е с к и х ф л у о р е с ц е н т н о - м е ч е н н ы х п р а й м е р о в и п о с л е д у ю щ е й г и б р и д и з а ц и и п о л у ч е н н о г о П Ц Р - п р о д у к т а н а б и о л о г и ч е с к о м м и к р о ч и п е . П Ц Р с и с п о л ь з о в а н и е м ф л у о р е с ц е н т н о м е ч е н ы х п р а й м е р о в п р и м е н я е т с я д л я п о л у ч е н и я П Ц Р - п р о д у к т а , с о д е р ж а щ е г о ф л у о р е с ц е н т н у ю м е т к у - д л я п о с л е д у ю щ е й в и з у а л и з а ц и и р е з у л ь т а т о в г и б р и д и з а ц и и . 2 . 1 . 2 . Г и б р и д и з а ц и я н а б и о л о г и ч е с к о м м и к р о ч и п е о с у щ е с т в л я е т с я д л я в ы я в л е н и я 4 3 с п е й с е р о в л о к у с а п р я м ы х п о в т о р о в м и к о б а к т е р и й т у б е р к у л е з н о г о к о м п л е к с а . 2 . 1 . 3 . Б и о л о г и ч е с к и й м и к р о ч и п п р е д с т а в л я е т с о б о й п о д л о ж к у с и м м о б и л и з о в а н н ы м и з о н д а м и , с п е ц и ф и ч н ы м и 4 3 с п е й с е р а м л о к у с а п р я м ы х п о в т о р о в Д Н К м и к о б а к т е р и й т у б е р к у л ё з а ч е л о в е ч е с к о г о и б ы ч ь е г о т и п о в . И н т е р п р е т а ц и я р е з у л ь т а т о в о с у щ е с т в л я е т с я п р о г р а м м н о ( п о л у а в т о м а т и ч е с к и ) в з а в и с и м о с т и о т т о г о , с к а к и м и и з и м м о б и л и з о в а н н ы х з о н д о в п р о щ л а р е а к ц и я а м п л и ф и к а ц и и . Н а о с н о в а н и и к а р т и н ы г и б р и д и з а ц и и д е л а е т с я в ы в о д о п р и н а д л е ж н о с т и ш т а м м а к м и к о б а к т е р и я м т у б е р к у л е з а ч е л о в е ч е с к о г о и л и б ы ч ь е г о т и п о в , а т а к ж е п р о в о д и т с я в н у т р и в и д о в о е т и п и р о в а н и е . --- стр. 2 --- 2 . 2 . С о с т а в н а б о р а . В с о с т а в н а б о р а р е а г е н т о в в х о д я т с л е д у ю щ и е к о м п о н е н т ы : а ) к о м п л е к т № 1 д л я в ь щ е л е н и я Д Н К М и к о б а к т е р и й т у б е р к у л е з н о г о к о м п л е к с а и з б и о л о г и ч е с к о г о м а т е р и а л а , в к л ю ч а ю щ и й : - Д е к о н т - А ( р е а г е н т А д л я д е к о н т а м и н а ц и и о б р а з ц о в ) - 1 0 п р о б и р о к ( п о 0 , 2 5 г ) ; - Д е к о н т - Б ( р е а г е н т Б д л я д е к о н т а м и н а ц и и о б р а з ц о в ) - 1 0 ф л а к о н о в ( п о 5 0 м л ) ; - П Б - 1 ( п р о м ы в о ч н ы й б у ф е р № 1 ) - 5 ф л а к о н о в ( п о 2 5 м л ) ; - П Б - 2 ( п р о м ы в о ч н ы й б у ф е р № 2 ) - 1 ф л а к о н ( 2 0 м л ) ; - Л Б ( л и з и р у ю щ и й б у ф е р ) - 1 ф л а к о н ( 1 0 м л ) ; б ) к о м п л е к т № 2 д л я п р о в е д е н и я П Ц Р , в к л ю ч а ю щ и й : - П Ц Р - б у ф ( 1 0 - к р а т н ы й б у ф е р д л я П Ц Р с х л о р и д о м м а г н и я ) - 1 п р о б и р к а ( 1 , 5 м л ) ; - д Н Т Ф ( в о д н ы й р а с т в о р д е з о к с и н у к л е о з и д т р и ф о с ф а т о в д л я п р о в е д е н и я р е а к ц и и П Ц Р ) - 1 п р о б и р к а ( 1 , 4 м л ) ; - П Р - 1 ( в о д н ы й р а с т в о р п р а й м е р о в д л я п р о в е д е н и я П Ц Р ) - 1 п р о б и р к а ( 0 , 1 м л ) ; - П Р - 2 ( в о д н ы й р а с т в о р ф л ю о р е с ц е н т н о - м е ч е н н ы х п р а й м е р о в д л я с п е ц и ф и ч е с к о й м е т к и п р о д у к т а р е а к ц и и П Ц Р ) - 1 п р о б и р к а ( 0 , 5 м л ) ; - T a q ( Т а ц - п о л и м е р а з у ) - 1 п р о б и р к а ( 0 , 2 м л ) ; - У ( в о д н ы й р а с т в о р ф л у о р е с ц е н т н о м е ч е н н ы х у р а ц и л н у к л е о з и д т р и ф о с ф а т о в ) - 1 п р о б и р к а ( 0 , 0 5 м л ) ; - У Д Г ( У р а ц и л - Д И К - г л и к о з и л а з а ) - 1 п р о б и р к а ( 0 , 2 м л ) ; - Б С А ( в о д н ы й р а с т в о р б ы ч ь е г о с ы в о р о т о ч н о г о а л ь б у м и н а ) - 1 п р о б и р к а ( 0 , 6 м л ) ; - К + ( п о л о ж и т е л ь н ы й к о н т р о л ь н ы й о б р а з е ц Д Н К М. tuhercidosis) - 1 п р о б и р к а ( 0 , 1 м л ) ; - К - ( о т р и ц а т е л ь н ы й к о н т р о л ь н ы й о б р а з е ц ) - 1 п р о б и р к а ( 1 , 5 м л ) ; - М М ( м а с л о м и н е р а л ь н о е ) - 1 ф л а к о н ( 1 0 м л ) ; - M Q ( в о д а д е и о н и з о в а н н а я д л я п р о в е д е н и я П Ц Р ) - 1 ф л а к о н ( 1 0 м л ) . в ) к о м п л е к т № 3 д л я п р о в е д е н и я г и б р и д и з а ц и и н а б и о ч и п е , в к л ю ч а ю щ и й : - Г Б ( б у ф е р д л я г и б р и д и з а ц и и ) - 2 п р о б и р к и ( п о 2 , 0 м л ) ; г ) к о м п л е к т № 4 , в к л ю ч а ю щ и й б и о ч и п ы - 1 0 0 ш т у к . 3 . А Н А Л И Т И Ч Е С К И Е И Д И А Г Н О С Т И Ч Е С К И Е Х А Р А К Т Е Р И С Т И К И Н А Б О Р А . 3 . 1 . С п е ц и ф и ч н о с т ь . Н а б о р с п е ц и ф и ч н о о п р е д е л я е т у ч а с т к и л о к у с а п р я м ы х п о в т о р о в Д Н К М и к о б а к т е р и й т у б е р к у л е з н о г о к о м п л е к с а в и с с л е д у е м о м о б р а з ц е . 3 . 2 . Ч у в с т в и т е л ь н о с т ь . Н а б о р с п о с о б е н в ы я в л я т ь 4 3 у ч а с т к а л о к у с а п р я м ы х п о в т о р о в Д Н К М и к о б а к т е р и й т у б е р к у л е з н о г о к о м п л е к с а н е б о л е е 4 0 0 г е н о м - э к в и в а л е н т о в в 2 м к л о б р а з ц а Д Н К п о с л е о б р а б о т к и к о м п л е к т о м № 1 . 4 . М Е Р Ы П Р Е Д О С Т О Р О Ж Н О С Т И . 4 . 1 . П о т е н ц и а л ь н ы й р и с к п р и м е н е н и я н а б о р а - к л а с с 2 6 . 4 . 2 . В с е к о м п о н е н т ы н а б о р а в и с п о л ь з у е м ы х к о н ц е н т р а ц и я х я в л я ю т с я н е т о к с и ч н ы м и . 4 . 3 . П р и р а б о т е с н а б о р о м н е о б х о д и м о с о б л ю д а т ь т р е б о в а н и я " П р а в и л у с т р о й с т в а , т е х н и к и б е з о п а с н о с т и , п р о и з в о д с т в е н н о й с а н и т а р и и , п р о т и в о э п и д е м и ч е с к о г о р е ж и м а и л и ч н о й г и г и е н ы п р и р а б о т е в л а б о р а т о р и я х ( о т д е л е н и я х , о т д е л а х ) с а н и т а р н о - э п и д е м и о л о г и ч е с к и х у ч р е ж д е н и й с и с т е м ы М и н и с т е р с т в а з д р а в о о х р а н е н и я С С С Р " ( М о с к в а . 1 9 8 1 г ) . 4 . 4 . Х и м и ч е с к а я п о с у д а и о б о р у д о в а н и е , к о т о р ы е и с п о л ь з у ю т с я в р а б о т е с н а б о р о м , д о л ж н ы б ы т ь с о о т в е т с т в у ю щ и м о б р а з о м м а р к и р о в а н ы и х р а н и т ь с я о т д е л ь н о . 4 . 5 . З а п р е щ а е т с я п р и е м п и щ и , и с п о л ь з о в а н и е к о с м е т и ч е с к и х с р е д с т в и к у р е н и е в п о м е щ е н и я х , п р е д н а з н а ч е н н ы х д л я р а б о т ы с н а б о р о м . 4 . 6 . В с е л а б о р а т о р н о е о б о р у д о в а н и е , в т о м ч и с л е п и п е т к и , ш т а т и в ы , л а б о р а т о р н а я п о с у д а и д р . , а т а к ж е р а б о ч и е р а с т в о р ы д о л ж н ы б ы т ь с т р о г о с т а ц и о н а р н ы м и . З а п р е щ а е т с я и х п е р е м е щ е н и е и з о д н о г о п о м е щ е н и я в д р у г о е . 2 --- стр. 3 --- 4 . 7 . В с е р а б о т ы с в ы д е л е н н ы м и н у к л е и н о в ы м и к и с л о т а м и и р е а г е н т а м и д л я п р о в е д е н и я П Ц Р д о л ж н ы в ы п о л н я т ь с я т о л ь к о с и с п о л ь з о в а н и е м о д н о р а з о в ы х н а к о н е ч н и к о в ( с а э р о з о л ь н ы м ф и л ь т р о м и м а р к и р о в к о й “ D N a s e , R N a s e F R E E ” ) д л я п о л у а в т о м а т и ч е с к и х п и п е т о к . 4 . 8 . П е р е м е щ е н и е п е р с о н а л а и з п о м е щ е н и я в п о м е щ е н и е д о л ж н о п р о х о д и т ь п о д с т р о г и м к о н т р о л е м . С м е н а в е р х н е й о д е ж д ы , г о л о в н ы х у б о р о в , о б у в и и п е р ч а т о к я в л я е т с я о б я з а т е л ь н ы м у с л о в и е м п р и п е р е х о д е и з п о м е щ е н и я д л я э л е к т р о ф о р е з а . 4 . 9 . П о в е р х н о с т и р а б о ч и х с т о л о в , а т а к ж е п о м е щ е н и я , в к о т о р ы х п р о в о д и т с я п о с т а н о в к а П Ц Р , д о л ж н ы о б я з а т е л ь н о д о н а ч а л а и п о с л е о к о н ч а н и я р а б о т о б л у ч а т ь с я у л ь т р а ф и о л е т о в ы м с в е т о м . 5 . О Б О Р У Д О В А Н И Е И М А Т Е Р И А Л Ы , Н Е О Б Х О Д И М Ы Е П Р И Р А Б О Т Е С Н А Б О Р О М : - К о м п л е к с у н и в е р с а л ь н ы й а п п а р а т н о - п р о г р а м м н ы й ( У А П К ) ; - Д И К - а м п л и ф и к а т о р а в т о м а т и ч е с к и й ; - ц е н т р и ф у г а д л я м и к р о п р о б и р о к , п о з в о л я ю щ а я р а з в и в а т ь у с к о р е н и е 1 0 0 0 0 g ; - х о л о д и л ь н и к б ы т о в о й ; ) - в с т р я х и в а т е л ь в и х р е в о й д л я м и к р о п р о б и р о к ( в о р т е к с ) ; - т е р м о с т а т с у х о в о з д у ш н ы й з а к р ы т ы й , п о д д е р ж и в а ю щ и й т е м п е р а т у р у + 3 7 ° С ; - т е р м о с т а т с у х о в о з д у и ш ы й д л я м и к р о ц е н т р и ф у ж н ы х п р о б и р о к в м е с т и м о с т ь ю 5 0 0 и 1 5 0 0 м к л , п о д д е р ж и в а ю щ и й т е м п е р а т у р у д о + 9 5 ° С ; - п л и т к а э л е к т р и ч е с к а я , п о д д е р ж и в а ю щ а я т е м п е р а т у р у + 1 5 0 ° С , и л и С В Ч - п е ч ь ; - п и п е т к и п о л у а в т о м а т и ч е с к и е о д н о к а н а л ь н ы е с о с м е н н ы м и н а к о н е ч н и к а м и , п о з в о л я ю щ и е з а б и р а т ь о б ъ е м ы ж и д к о с т и 2 , 1 0 , 2 0 , 1 0 0 , 2 0 0 и 1 О О О м к л ; - к о л б ы м е р н ы е в м е с т и м о с т ь ю 5 0 и 1 О О О м л ; - к о л б а к о н и ч е с к а я п л о с к о д о н н а я т е р м о с т о й к а я в м е с т и м о с т ь ю 2 0 0 м л ; - п р о б и р к и п л а с т и к о в ы е с т е р и л ь н ы е в м е с т и м о с т ь ю 2 0 0 и л и 5 0 0 м к л в з а в и с и м о с т и о т т и п а с т о л и к а а м п л и ф и к а т о р а и 1 5 0 0 м к л с к р ы ш к а м и ; - п е р ч а т к и р е з и н о в ы е и л и п л а с т и к о в ы е б е з т а л ь к а ( н е о п у д р е н н ы е ) ; - в о д а д и с т и л л и р о в а н н а я . 6 . А Н А Л И З И Р У Е М Ы Е О Б Р А З Ц Ы . Д л я а н а л и з а и с п о л ь з у е т с я м о к р о т а и л и з а р а н е е п о д г о т о в л е н н ы е к у л ь т у р ы ’ м и к о б а к т е р и й . 7 . П Р О В Е Д Е Н И Е А Н А Л И З А . 7 . 1 . П о д г о т о в к а р е а г е н т о в д л я а н а л и з а . 7 . 1 . 1 . П р и г о т о в л е н и е с м е с и д л я о б р а б о т к и м о к р о т ы ( к о м п л е к т № 1 ) . С о д е р ж и м о е о д н о й п р о б и р к и Д е к о н т - А к о л и ч е с т в е н н о п е р е н е с т и в о ф л а к о н с р а с т в о р о м Д е к о н т - Б и т щ а т е л ь н о п е р е м е щ а т ь д о п о л н о г о р а с т в о р е н и я . П о л у ч е н н о й с м е с и д о с т а т о ч н о д л я о б р а б о т к и 1 0 о б р а з ц о в . П р и г о т о в л е н н а я с м е с ь д о л ж н а б ы т ь и с п о л ь з о в а н а в т е ч е н и е в р е м е н и н е б о л е е 8 ч . 7 . 1 . 2 . П р и г о т о в л е н и е п р о м ы в а ю щ е г о р а с т в о р а П Б - 1 . С о д е р ж и м о е ф л а к о н а П Б - 1 к о л и ч е с т в е н н о п е р е н е с т и в м е р н у ю к о л б у в м е с т и м о с т ь ю 1 0 0 0 м л , д о в е с т и о б ъ е м д и с т и л л и р о в а н н о й в о д о й д о м е т к и и т щ а т е л ь н о п е р е м е щ а т ь . Д о п у с к а е т с я с т е р и л и з а ц и я р а с т в о р а а в т о к л а в и р о в а н и е м п р и 1 а т м . в т е ч е н и е 4 0 м и н . П р и г о т о в л е н н ы й р а с т в о р м о ж н о х р а н и т ь п р и т е м п е р а т у р е + 2 - 8 ° С н е б о л е е 1 м е с . 7 . 2 . П р о ц е д у р а а н а л и з а . 7 . 2 . 1 . О б р а б о т к а м о к р о т ы и в ы д е л е н и е Д Н К ( к о м п л е к т № 1 ) . --- стр. 4 --- € п р и к о м н а т н о й т е м п е р а т у р е о б ъ е м п р о м ы в а ю щ е г о р а с т в о р а g п р и к о м н а т н о й т е м п е р а т у р е . 7 . 2 . 1 . 1 . К 2 - 5 м л а н а л и з и р у е м о г о о б р а з ц а м о к р о т ы д о б а в и т ь р а в н ы й о б ъ е м ( 2 - 5 м л ) с м е с и д л я о б р а б о т к и м о к р о т ы ( с м п . 7 . 1 ) . 7 . 2 . 1 . 2 . С м е с ь и н к у б и р о в а т ь в т е ч е н и е 2 0 м и н ( + 1 8 - 2 5 ° С ) , п е р и о д и ч е с к и п о м е ш и в а я . 7 . 2 . 1 . 3 . П о с л е о к о н ч а н и я и н к у б а ц и и д о б а в и т ь к с м е с и 1 П Б - 1 ( с м п . 7 . 2 ) и п е р е м е ш а т ь н а в о р т е к с е . 7 . 2 . 1 . 4 . Ц е н т р и ф у г и р о в а т ь в т е ч е н и е 2 0 м и н п р и 3 0 0 0 н а д о с а д о ч н у ю ж и д к о с т ь у д а л и т ь . 7 . 2 . 1 . 5 . О с т а в ш у ю с я с у с п е н з и ю к л е т о к ( 2 0 0 - 4 0 0 м к л ) п е р е н е с т и в п л а с т и к о в у ю ц е н т р и ф у ж н у ю п р о б и р к у в м е с т и м о с т ь ю 1 5 0 0 м к л . Д л я э т о г о и с п о л ь з о в а т ь о т д е л ь н у ю п о л у а в т о м а т и ч е с к у ю п и п е т к у , р а с с ч и т а н н у ю н а о б ъ е м д о 1 О О О м к л , и о д н о р а з о в ы й н а к о н е ч н и к с ф и л ь т р о м . 7 . 2 . 1 . 6 . Д о б а в и т ь к с у с п е н з и и к л е т о к 1 о б ъ е м п р о м ы в а ю щ е г о р а с т в о р а П Б - 1 и п е р е м е ш а т ь с м е с ь н а в о р т е к с е . 7 . 2 . 1 . 7 . Ц е н т р и ф у г и р о в а т ь в т е ч е н и е 1 0 м и н п р и 1 0 0 0 0 g п р и к о м н а т н о й т е м п е р а т у р е . 7 . 2 . 1 . 8 . Д о б а в и т ь 1 0 0 м к л п р о м ы в о ч н о г о б у ф е р а П Б - 2 и п е р е м е ш а т ь н а в о р т е к с е . 7 . 2 . 1 . 9 . Ц е н т р и ф у г и р о в а т ь с м е с ь в т е ч е н и е Ю м и н п р и 1 0 0 0 0 g п р и к о м н а т н о й т е м п е р а т у р е . 7 . 2 . 1 . 1 0 . П о в т о р и т ь п у н к т ы 7 . 2 . 1 . 8 - 7 . 2 . 1 . 9 . 7 . 2 . 2 . П р и г о т о в л е н и е с м е с и д л я а м п л и ф и к а ц и и и п о с т а н о в к а П Ц Р ( к о м п л е к т № 2 ) . 7 . 2 . 2 . 1 . П р и г о т о в и т ь п р о б и р к и в м е с т и м о с т ь ю 5 0 0 м к л д л я п р о в е д е н и я П Ц Р , п р о н у м е р о в а т ь и х в с о о т в е т с т в и и с к о л и ч е с т в о м и с с л е д у е м ы х о б р а з ц о в и р а с п о л о ж и т ь в ш т а т и в е с о о т в е т с т в у ю щ и м о б р а з о м . 1.22.2. П р и г о т о в и т ь р е а к ц и о н н у ю с м е с ь д л я п р о в е д е н и я П Ц Р ( к о м п л е к т № 2 ) . В с т е р и л ь н у ю п р о б и р к у д л я п р и г о т о в л е н и я р е а к ц и о н н о й с м е с и в м е с т и м о с т ь ю 5 0 0 - 1 5 0 0 м к л в з а в и с и м о с т и о т ч и с л а а н а л и з и р у е м ы х о б р а з ц о в N в н е с т и с л е д у ю щ и е к о м п о н е н т ы н а б о р а в у к а з а н н ы х н и ж е п о с л е д о в а т е л ь н о с т и и к о л и ч е с т в е : В о д а д е и о н и з о в а н н а я ( M Q ) П Ц Р - б у ф е р Д Н Т Ф П Р - 1 П Р - 2 T a q У У Д Г Б С А О б щ и й о б ъ е м 1 4 , 5 X ( N + 1 ) м к л 3 . 0 X ( N + 1 ) м к л 3 . 0 X ( N + 1 ) м к л 0 , 8 X ( N + 1 ) м к л 5 . 0 X ( N + 1 ) м к л 0 , 6 X ( N + 1 ) м к л 0 , 3 ( N + 1 ) м к л 0 , 3 X ( N + 1 ) м к л 0 , 5 ( N + 1 ) м к л 2 8 X ( N + 1 ) м к л 7 . 2 . 2 . 3 . В н е с т и с м е с ь п о 2 8 м к л в п р о б и р к и , п о д г о т о в л е н н ы е д л я п р о в е д е н и я П Ц Р . 7 . 2 . 2 . 4 . В н е с т и а л и к в о т у ( 2 м к л ) а н а л и з и р у е м ы х о б р а з ц о в ( с м п . 7 . 2 . 1 . 1 0 ) , а т а к ж е к о н т р о л и П Ц Р К + и К - в п р о б и р к и с р е а к ц и о н н о й с м е с ь ю . П р и и с п о л ь з о в а н и и а м п л и ф и к а т о р а б е з п о д о г р е в а к р ы ш к и в к а ж д у ю п р о б и р к у д о б а в и т ь п о 3 0 м л м а с л а м и н е р а л ь н о г о в а з е л и н о в о г о М М . 7 . 2 . 2 . 5 . П о м е с т и т ь п р о б и р к и в а в т о м а т и ч е с к и й Д Н К - а м п л и ф и к а т о р и п р о в е с т и а м п л и ф и к а ц и ю п о с л е д у ю щ е й п р о г р а м м е ( с м т а б л и ц у 1 ) . Т а б л и ц а 1 . Т е м п е р а т у р н о - в р е м е н н о й п р о ф и л ь П Ц Р . Ш а г п р о г р а м м ыТ е м п е р а т у р а . ° СВ р е м я и н к у б а ц и иК о л и ч е с т в о ц и к л о в 1 + 9 5 3 0 0 с 1 2 + 9 5 4 0 с + 6 3 4 0 с 5 2 + 7 2 4 0 с 3 + 7 2 4 2 0 с 1 --- стр. 5 --- 7 . 2 . 3 П р о в е д е н и е г и б р и д и з а ц и и ( к о м п л е к т ы № № 4 и 5 ) 7 . 2 . 3 . 1 . П е р е н е с т и п о 1 2 м к л р е а к ц и о н н о й с м е с и п о с л е П Ц Р в п р о б и р к и в м е с т и м о с т ь ю 5 0 0 мкл. 7 . 2 . 3 . 2 . Д о б а в и т ь в к а ж д у ю п р о б и р к у п о 2 4 м к л р а с т в о р а Г Б и п е р е м е ш а т ь н а в о р т е к с е в т е ч е н и е 5 с . 7 . 2 . 3 . 3 . Н а н е с т и н а б и о ч и п 3 2 м к л п о л у ч е н н о й с м е с и . 7 . 2 . 3 . 4 . П р о в е с т и г и б р и д и з а ц и ю в з а к р ы т о м с у х о в о з д у ш н о м т е р м о с т а т е п р и т е м п е р а т у р е + 3 7 ° С в т е ч е н и е в р е м е н и 1 0 - 1 6 ч 7 . 2 . 3 . 5 . П о с л е г и б р и д и з а ц и и с н я т ь з а щ и т н у ю п л е н к у с к а м е р ы б и о ч и п а , о т с о с а т ь ж и д к о с т ь и з к а м е р ы п о л у а в т о м а т и ч е с к о й п и п е т к о й и д в а ж д ы п р о м ы т ь д и с т и л л и р о в а н н о й в о д о й , п р е д в а р и т е л ь н о п о д о г р е т о й д о т е м п е р а т у р ы + 3 7 ° С . В ы с у ш и т ь б и о ч и п в с т р у е в о з д у х а д о п о л н о г о и с ч е з н о в е н и я к а п е л ь н а п о в е р х н о с т и п о д л о ж к и . 8 . Р Е Г И С Т Р А Ц И Я Р Е З У Л Ь Т А Т О В . 8 . 1 . Р е з у л ь т а т ы г и б р и д и з а ц и и р е г и с т р и р у ю т с п о м о щ ь ю К о м п л е к с а у н и в е р с а л ь н о г о а п п а р а т н о - п р о г р а м м н о г о ( У А П К ) д л я а н а л и з а б и о ч и п о в . И н с т а л л я ц и я и э к с п л у а т а ц и я К о м п л е к с а о с у щ е с т в л я ю т с я в с о о т в е т с т в и и с И н с т р у к ц и е й п о п о л ь з о в а н и ю к о м п л е к с о м У А П К . 8 . 2 . О п е р а т о р м о ж е т в и з у а л ь н о п р о к о н т р о л и р о в а т ь ф л у о р е с ц е н т н о е и з о б р а ж е н и е н а б и о л о г и ч е с к о м м и к р о ч и п е . Д л я э т о г о п о с л е з а в е р ш е н и я п р о ц е д у р ы а в т о м а т и ч е с к о й и н т е р п р е т а ц и и р е з у л ь т а т о в ( с м п . 8 . 1 ) с л е д у е т п е р е к л ю ч и т ь с я н а з а к л а д к у “ С н и м о к ” в п р а в о й ч а с т и э к р а н а и в и з у а л ь н о п р о к о н т р о л и р о в а т ь а в т о м а т и ч е с к о е н а л о ж е н и е с е т к и н а и з о б р а ж е н и я я ч е е к м и к р о ч и п а ( Р и с . 2 ) . В с л у ч а е н е к о р р е к т н о г о н а л о ж е н и я с е т к и с л е д у е т « п р о т а щ и т ь » м ы ш к о й л е в у ю и п р а в у ю н и ж н и е э л е м е н т ы с е т к и д о с о о т в е т с т в у ю щ и х я ч е е к м и к р о ч и п а . П р и э т о м с е т к а д о л ж н а п о л н о с т ь ю н а л о ж и т ь с я н а и з о б р а ж е н и е м и к р о ч и п а . П о с л е э т о г о с л е д у е т п е р е к л ю ч и т ь с я н а з а к л а д к у « О т ч е т » и с н о в а п р о в е р и т ь в ы д а в а е м ы е п р о г р а м м о й р е з у л ь т а т ы ( Р и с . 3 ) . О Ф Ф Ф Ф ш т Ф Ш Ф тО Ф Ф Ф Ф ш т т т Ф т • • • • • • • • • • • тоотттооФ [fitiUTumiiaAai | Рис. 1. Диалоговое окно режима ‘Ш аблон’. Рис. 2. Диалоговое окно режима ‘Просмотр’. --- стр. 6 --- Отчет (СП О Л И ГО -БИ О Ч И П ) 1.07.2008 14:21:57 В образце отсутствуют 1-Э4 спеисеры из 43 локуса прямьи повторов ДНК микобаетврии туберку'Л^зного комплекса. Полученный профиль соответствует сполиготипу Beijing и м б л о н С > М « Ж О т и т I о » « - □ потч (Ж Z] ИТ«. Рис. 3. Диалоговое окно режима ‘Отчет’. 9 . У Ч Е Т Р Е З У Л Ь Т А Т О В . П о л у ч е н н ы е р е з у л ь т а т ы н е о б х о д и м о с о х р а н я т ь в в и д е э л е к т р о н н ы х о т ч е т о в , в ы д а в а е м ы х с п е ц и а л и з и р о в а н н о й п р о г р а м м о й , в х о д я щ е й в с о с т а в К о м п л е к с а у н и в е р с а л ь н о г о а п п а р а т н о - п р о г р а м м н о г о ( У А П К ) д л я а н а л и з а б и о ч и п о в ( с м . п . 8 . ) 1 0 . У С Л О В И Я Х Р А Н Е Н И Я И Э К С П Л У А Т А Ц И И Н А Б О Р А . 1 0 . 1 . Х р а н е н и е н а б о р о в в у п а к о в к е п р е д п р и я т и я - и з г о т о в и т е л я д о л ж н о п р о и з в о д и т ь с я п р и с л е д у ю щ и х у с л о в и я х : к о м п л е к т ы № № 1 , 3 и 4 - п р и т е м п е р а т у р е 2 - 8 ° С в т е ч е н и е в с е г о с р о к а г о д н о с т и н а б о р а ; д о п у с к а е т с я х р а н е н и е к о м п л е к т о в № № 1 , 3 и 4 п р и т е м п е р а т у р е д о 2 5 ° С н е б о л е е 3 с у т ; к о м п л е к т № 2 - п р и т е м п е р а т у р е м и н у с 2 0 ° С в т е ч е н и е в с е г о с р о к а г о д н о с т и н а б о р а ; д о п у с к а е т с я х р а н е н и е к о м п л е к т а № 2 п р и т е м п е р а т у р е н е в ы ш е О ° С н е б о л е е 1 с у т . 1 0 . 2 . С р о к г о д н о с т и н а б о р а - 6 м е с . 1 0 . 3 . Д л я п о л у ч е н и я н а д е ж н ы х р е з у л ь т а т о в н е о б х о д и м о с т р о г о е с о б л ю д е н и е и н с т р у к ц и и п о п р и м е н е н и ю н а б о р а . П о в о п р о с а м , к а с а ю щ и м с я к а ч е с т в а н а б о р а С П О Л И Г О - Б И О Ч И П , с л е д у е т о б р а щ а т ь с я в О б щ е с т в о с о г р а н и ч е н н о й о т в е т с т в е н н о с т ь ю « Б и о ч и п - И М Б » п о а д р е с у : 1 1 7 3 1 2 , г . М о с к в а , у л . В а в и л о в а , д . 1 7 , п о м е щ . Б 2 , т е л . / ф а к с ( 4 9 9 ) 1 3 5 - 9 7 - 6 1 . З а м . д и р е к т о р а п о п р о и з в о д с т в у П а н ь к о в С . В . И . О . З а в . О т д е л а М и к р о б и о л о г и и Г У Ц Н И И Т Р А М Н , д . м . н . , п р о ф . Л . Н . Ч е р н о у с о в а --- стр. 7 --- П ронумеровано, прош нуровано и скреплено ^ листа (-ов) Ген рр ООО «Биочип-И М Б» .0 . Ермолинская