Набор реагентов для иммуноферментного выявления иммуноглобулинов класса G к рецептор-связывающему домену поверхностного гликопротеина S (spike) коронавируса SARS-CoV-2 «ГAM-COVID-aнти-RBD» по ТУ 21.20.23-094-01894956-2020 — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 1 --- МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ федеральное государственное бюджетное учреждение «Национальный исследовательский центр эпидемиологии и микробиологии имени почетного академика Н.Ф. Гамалеи» Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБУ «НИЦЭМ им. Н.Ф. Гамалеи» Минздрава России) «УТВЕРЖ ЗАМ Д И Р Е К Т О Р А / П Р О Н И Н А.В. ! П О Л О В - Ni67/01-08 2057 О Т 30.12,20 2 0 алей» ИНСТРУКЦИЯ п о ПРИМЕНЕНИЮ Набора реагентов для иммуноферментного выявления иммуноглобулинов класса G к рецептор-связывающему домену поверхностного гликопротеина S (spike) коронавируса SARS-CoV-2 «ГАМ-COVID-aHTH-RBD» по ТУ 21.20.23-094-01894956-2020 ФГБУ «НИЦЭМ им. Н.Ф, Гамалеи» Минздрава России (Филиал «Медгамал» Ф]'БУ «НИЦЭМ им. Н.Ф. Гама. 1еи» Минздрава России) Россия, 123098, Москва, ул. Гамалеи, 18 тел: +7 (499)193-30-50,(499)193-44-59 факс: +7 (499)190-66-71 --- стр. 2 --- Оглавление СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ...................................................................................................................................3 1. НАЗНАЧЕНИЕ...................................................................................................................................................3 2. ПРИНЦИП МЕТОДА........................................................................................................................................4 3. КОМПЛЕКТНОСТЬ...........................................................................................................................................4 4. СОСТАВ НАБОРА.............................................................................................................................................5 5. АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА РЕАГЕНТОВ .....................................................6 6. ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА РЕАГЕНТОВ ..............................................7 7. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ И СВЕДЕНИЯ ОБ УТИЛИЗАЦИИ..................................................7 8. УКАЗАНИЯ ПО ЭКСПЛУАТАЦИИ..............................................................................................................9 9. ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ МАТЕРИАЛЫ И ОБОРУДОВАНИЕ.................................................................10 10. ИССЛЕДУЕМЫЙ МАТЕРИАЛ...................................................................................................................10 11. ПОДГОТОВКА АНАЛИЗИРУЕМЫХ ОБРАЗЦОВ................................................................................10 12. ПОДГОТОВКА РЕАГЕНТОВ ДЛЯ АНАЛИЗА......................................................................................11 13. ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА........................................................................................................................... 12 14. РЕГИСТРАЦИЯ И ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ.....................................................................13 15. КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА...............................................................................................................................15 16. УСЛОВИЯ ТРАНСПОРТИРОВКИ И ХРАНЕНИЯ НАБОРА РЕАГЕНТОВ ..................................15 17. СРОК ГОДНОСТИ..........................................................................................................................................16 18. ОГРАНИЧЕНИЯ МЕТОДА...........................................................................................................................16 19. ОЦЕНКА ВЕРОЯТНЫХ СОБЫТИЙ.........................................................................................................17 20. СВЕДЕНИЯ О ПРОИЗВОДИТЕЛЕ............................................................................................................17 21. ГАРАНТИИ ИЗГОТОВИТЕЛЯ И СВЕДЕНИЯ О РЕКЛАМАЦИЯХ ................................................17 22. СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ..............................................................................................................................18 23. СИМВОЛЫ, НАНОСИМЫЕ НА УПАКОВКУ НАБОРА.....................................................................19 24. ШТРИХ-КОДЫ КОМПОНЕНТОВ НАБОРА...........................................................................................19 С тр. 2 из 1 9 .Г Ё Я 0421 --- стр. 3 --- с п и с о к СОКРАЩ ЕНИЙ В настоящей инструкции применяются следующие сокращения и обозначения: IgG - иммуноглобулины G RBD - рецептор-связывающий домен ИП - индекс позитивности ПБА - патогенные биологические агенты 1. НАЗНАЧЕНИЕ «Набор реагентов для иммуноферментного выявления иммуноглобулинов класса G к рецептор-связывающему домену поверхностного гликопротеина S (spike) коронавируса SARS- CoV-2 «ГАМ-СОУШ-анти-КВО» по ТУ 21.20.23-094-01894956-2020» (далее - Набор реагентов «ГАМ-СОУШ-анти-КБП», Набор реагентов или Набор) предназначен для полуколичественного выявления иммуноглобулинов класса G к рецептор-связывающему домену поверхностного гликопротеина S (spike) коронавируса SARS-CoV-2, в сыворотке (плазме) крови человека методом иммуноферментного анализа при проведении диагностических исследований в качестве вспомогательного средства для диагностики текущей инфекции, для анализа вируснейтрализующей активности сыворотки и плазмы крови человека и в качестве основного средства для оценки иммунного ответа на текущую или перенесенную инфекцию, а также при оценке напряженности поствакцинального протективного иммунитета всех групп населения. Область применения - клиническая лабораторная диагностика. Функциональное назначение: Выявление иммуноглобулинов класса G к рецептор-связывающему домену поверхностного гликопротеина S (spike) коронавируса SARS-CoV-2 с использованием Набора реагентов «ГАМ- СОУШ-анти-КВО» имеет вспомогательное значение для диагностики текущей инфекции и основное для оценки иммунного ответа на текущую или перенесенную инфекцию. Тестирование на IgG антитела, специфические RBD домену коронавируса SARS-CoV-2, рекомендуется использовать в следующих случаях: - в качестве дополнительного метода диагностики острой инфекции (с учетом серонегативного периода) или при невозможности исследования мазков методом амплификации нуклеиновых кислот, в том числе при госпитализации в стационар по поводу соматической патологии; - для выявления лиц с бессимптомной формой инфекции; - для установления факта перенесенной ранее инфекции при обследовании групп риска и проведении массового обследования населения для оцен1Си уровня популяционного иммунитета; - для отбора потенциальных доноров иммунной плазмы; - при оценке напряженности поствакцинального протективного иммунитета. Потенциальный потребитель - специалисты с высшим и средним медицинским, биологическим, ветеринарным образованием, окончившие соответствующие курсы профессиональной подготовки с освоением методов безопасной работы с ПБА I1I-IV групп, не имеющие противопоказаний к применению средств профилактики и лечения и к работе в средствах индивидуальной защиты. Показания к применению Определение содержания иммуноглобулинов класса G к рецептор-связывающему домену поверхностного гликопротеина S (spike) коронавируса SARS-CoV-2 в сыворотке и плазме крови лиц, инфицированных вирусом SARS-CoV-2 или перенесших COVID-19 с целью выявления антител, в том числе потенциально обладающих вируснейтрализующим действием. С т р . З и з 1 9 . | у Щ 0 4 2 1 --- стр. 5 --- - Концентрат промывочного буфера (ФСБ-Т) (х25) - 1 фл; - Буфер для разведения (БР) - 1 фл; - Раствор хромогена - 1 фл; - Раствор субстрата - 1 фл; - Стоп-реагент - 1 фл; - Планшет для разведения образцов - 1 шт; - Пленка для заклеивания планшетов - 1 шт; - Инструкция по применению - 1 шт. 2. Паспорт качества — 1 шт. 4, СОСТАВ НАБОРА В работе необходимо использовать компоненты строго из одной серии Набора реагентов. Запрещается использование отдельных компонентов, относящихся к разным сериям Набора реагентов. Состав Набора реагентов представлен в Таблице 1. Таблица 1 Состав Объем Количество Описание Иммуносорбент (ИС) - 1 штука Разборный полистирольный 96- луночный планшет для иммунологических реакций с прозрачным плоским дном с адсорбированным в лунках рекомбинантным рецептор- связывающим доменом поверхностного гликопротеина S (spike) коронавируса SARS-CoV-2 (RBD) Положительный контроль (К+) 1,0 мл 1 флакон На основе сыворотки крови человека, содержащей IgG к RBD коронавируса SARS-CoV-2, инактивирован, прозрачная жидкость бесцветная или с желтоватым оттенком Отрицательный контроль (К-) 1,0 мл 1 флакон На основе сыворотки крови человека, не содержащей IgG к RBD коронавируса SARS-CoV-2, инактивирован, прозрачная жидкость бесцветная или с желтоватым оттенком Конъюгат (х20) 1,0 мл 1 флакон Прозрачная жидкость бесцветная или с желтоватым оттенком, 20-кратный концентрат Буфер для разведения конъюгата 13,5 мл 1 флакон Прозрачная жидкос ть красного цвета Концентрат промывочного буфера (ФСБ-Т) (х25) 20 мл 1 флакон Прозрачная жидкость, бесцветная или с желтоватым штенком, 25- кратный концентрат 1 Буфер для разведения 20 мл 1 флакон Прозрачная жидкость красного цвета ? 1 Раствор хромогена 13,5 мл 1 флакон Прозрачная бесцветная или слегка С т р . 5 и з 1 9 . |V ER i0421 --- стр. 6 --- желтая жидкость Раствор субстрата 1,7 мл 1 флакон Прозрачная бесцветная жидкость Стоп-реагент 20 мл 1 флакон Прозрачная бесцветная жидкость Планшет для разведения образцов - 1 штука Разборный полистирольный 96- луночный планшет для иммунологических реакций с прозрачным плоским дном Пленка для заклеивания планшетов - 1 штука Прозрачная клейкая пленка Инструкция по применению - 1 штука - Набор реагентов рассчитан на проведение 96 реакций, включая контроли. ВНИМАНИЕ! Компоновка Набора допускает возможность дробного использования компонентов для проведения нескольких серий анализов по мере поступления биоматериала. 5. АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА РЕАГЕНТОВ 5.1. Чувствительность (предел обнаружения) При проверке на стандартной панели предприятия, состоящей из нативных образцов, достоверно содержащих иммуноглобулины класса G, специфические RBD домену коронавируса SARS-CoV-2, в разведении 1:200 раз, результат анализа положительный. 5.2. Специфичность При проверке на стандартной панели предприятия, состоящей из нативных образцов, достоверно не содержащих иммуноглобулины класса G, специфические RBD домену коронавируса SARS-CoV-2, все образцы должны интерпретироваться как отрицательные. При проверке на стандартной панели предприятия, состоящей из нативных образцов, достоверно содержащих иммуноглобулины класса G, специфические RBD домену коронавируса SARS-CoV-2, все образцы должны интерпретироваться как положительные. Перекрестная реактивность оценена по результатам испытаний проб биообразцов, содержащих антитела к гетерологичным вирусам и бактериальным патогенам (образцы крови больных, содержащих антитела к вирусам гриппа А и В, вирусу гепатита Дельта, антитела к вирусу гепатита Е, антитела к вирусу кори, антитела к вирусу паротита, антитела к вирусу ветряной оспы, антитела к вирусу клещевого энцефалита, антитела к вирусу гепатита А, поверхностный антиген вируса гепатита В, антитела к вирусу гепатита С, антитела к вирусу краснухи, антитела к возбудителю коклюша, антитела к дифтерийному токсину, антитела к столбнячному токсину, антитела к Haemophilus influenza-B, антитела к вирусу иммунодефицита человека 1 и 2 типов, антитела к хламидии C.pneumoniae. Наличие перекрёстной реактивности выявлено не было. 5.3. Воспроизводимость Коэффициент вариации выявления иммуноглобулинов класса G, специфических RBD домену коронавируса SARS-CoV-2, в одном и том же образце сыворотки (плазмы) крови с использованием Набора реагентов «FAM-COVID-aHTH-RBD» не превышает 8%. 5.4. Потенциально интерферирующие вещества Потенциальные интерферирующие вещества такие как: билирубин (до 40 мкМ/мл), гемоглобин (до 141 г/л), сывороточный альбумин (до 82 г/л), холестерин (до 11,0 мМ/л), ревматоидный фактор (до 254 мг/мл) - не влияют на результат исследования. Стр. 6 из 19.|УЁ^0421 --- стр. 7 --- 6. ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА РЕАГЕНТОВ В ходе оценки диагностических характеристик Набора реагентов были исследованы образцы плазмы и парной сыворотки крови пациентов, перенесших COVID-19 (положительные образцы), образцы плазмы и парной сыворотки крови пациентов, прошедших вакцинацию «Гам-КОВИД-Вак Комбинированной векторной вакциной для профилактики коронавирусной инфекции, вызванной вирусом SARS-CoV-2», РУ №ЛП-006395 от 11.08.20 г. (положительные образцы), образцы плазмы и парной сыворотки крови пациентов до вакцинации (отрицательные образцы), а также биологические об разцы, содержащие патогены инфекций, отличных от COVID-19 (отрицательные образцы). Диагностическая (клиническая) чувствительность испытуемого Набора реагентов определя лась как доля, выраженная в процентах, истинно положительных результатов, подтвержденных данными выявления антител класса IgG к SARS-CoV-2 в плазме и сыворотке крови человека (65/65). Диагностическая чувствительность МИ «Набор реагентов для иммуноферментного выявления иммуноглобулинов класса G к рецептор-связывающему домену поверхностного гликопротеина S (spike) коронавируса SARS-CoV-2 «FAM-COVID-aHTH-RBO» по ТУ 21.20.23-094-01894956-2020» I при исследовании биообразцов плазмы и сыворотки крови, пациентов с диагнозом COVID-19, со ставляет 100% (95% ДИ: 95,5-100,0%). Диагностическая (клиническая) специфичность испытуемого Набора реагентов определялась как доля, выраженная в процентах, истинно отрицательных образцов плазмы и сывортки крови человека, не содержащих антител класса IgG к SARS-CoV-2 (65/65). Диагностическая специфичность МИ «Набор реагентов для иммуноферментного выявления иммуноглобулинов класса G к рецептор-связывающему домену поверхностного гликопротеина S (spike) коронавируса SARS-CoV-2 «ГАМ-СОУЮ-анти-ВВО» по ТУ 21.20.23-094-01894956-2020» при исследовании биообразцов плазмы и сыворотки крови, не содержащих антитела класса IgG к SARS-CoV-2, составляет 100% (95% ДИ: 95,5-100,0%). 7. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ И СВЕДЕНИЯ ОБ УТИЛИЗАЦИИ 7.1. Использовать только для диагностики in vitro. 7.2. Потенциальный риск применения Набора реагентов - класс 26. 7.3. Набор предназначен только для профессионального применения. 7.4. Организации, проводящие работу с изделием, согласно требованиям Временных методических рекомендаций «Профилактика, диагностика и лечение новой коронавирусной инфекции (COVID-19)» и СП 1.3.3118-13 должны иметь разрешение на работы с ПБА III-IV групп патогенности (опасности). 7.5. Лабораторная диагностика COVID-2019 в субъектах Российской Федерации может проводиться в лабораториях организаций, имеюших санитарно-эпидемиологическое заключение на работу с возбудителями III-IV группы патогенности с использованием методов диагностики, не предполагающих накопление возбудителя, соответствующие условия работы и обученный персонал. 7.6. Следует рассматривать исследуемые образцы как инфекционно-опасные, организовывать работу и хранение в соответствии с СП 1.3.2322-08 «Безопасность работы с микроорганизмами III-IV групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней». 7.7. Убирать и дезинфицировать разлитые образцы, используя дезинфицирующие средства в соответствии с СП 1.3.2322-08 «Безопасность работы с микроорганизмами III-IV групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней». 7.8. Все использованные одноразовые материалы подвергать обработке дезинфицирующими С т р . 7 и з 1 9 . Г Ё Я 0421 --- стр. 8 --- средствами с последующей утилизацией (см. МУ-287-113 «Методические указания по дезинфекции, предстерилизационной очистке и стерилизации изделий медицинского назначения»). 7.9. Все отмывочные растворы следует собирать в специальный контейнер и обрабатывать дезинфицирующими средствами, разрешенными для применения на территории РФ в установленном порядке. 7.10. Все твердые отходы следует собирать в специальный контейнер, обеззараживать и утилизировать в соответствии с требованиями СанПиН 2.1.7.2790-10 «Санитарно- эпидемиологические требования к обращению с медицинскими отходами». 7.11. Лабораторную посуду многоразового использования и расходные материалы, контактирующие с исследуемыми и контрольными образцами, следует обеззараживать с использованием дезинфицирующих средств, не содержащих активный кислород и хлор, оказывающих негативное воздействие на качество ИФА. 7.12. Инструменты, оборудование, а также рабочие поверхности столов необходимо протирать 70% раствором этилового спирта. 7.13. Стоп-реагент (1М раствор серной кислоты) обладает раздражающим действием. Следует избегать его разбрызгивания. В случае попадания раствора серной кислоты на кожу и слизистые необходимо промыть пораженный участок большим количеством проточной воды. 7.14. «Положительный контроль (К+)» и «Отрицательный контроль (К-)» содержат в качестве консерванта 0,1% азида натрия. Все реактивы, входящие в состав компонентов Набора реагентов в используемых концентрациях, являются нетоксичными. При попадании данных растворов на кожу и слизистые промыть пораженный участок большим количеством проточной воды. 7.15. Сыворотка крови человека, использованная для приготовления контрольных образцов, инактивирована, однако контрольные образцы следует рассматривать как потенциально инфицированный биологический материал. 7.16. При работе с Набором реагентов необходимо использовать индивидуальные средства защиты: халат, головной убор, резиновые или пластиковые перчатки, специальную обувь, защитные очки или щиток), так как образцы сыворотки или плазмы крови следует рассматривать как потенциально инфицированный биоматериал. 7.17. Набор реагентов, его компоненты и отходы, содержащие потенциально опасные материалы, (специфические реагенты, контрольные и анализируемые образцы и материалы, входившие с ними в контакт) уничтожать/утилизировать после их обеззараживания/ обезвреживания в соответствии с СанПиН 2.1.7.2790-10 «Санитарно-эпидемиологические требования к обращению с медицинскими отходами», группа отходов - класс В. 7.18. Набор реагентов готов к применению согласно данной инструкции. Применять Набор реагентов строго по назначению. 7.19. Не использовать Набор реагентов, если нарушена внутренняя упаковка или внешний вид реагента не соответствует описанию. 7.20. Не использовать Набор реагентов, если не соблюдались условия транспортирования v хранения согласно инструкции. 7.21. Не использовать Набор по истечении срока годности. 7.22. При соблюдении условий транспортировки, эксплуатации и хранения риски взрыва и возгорания отсутствуют. 7.23. Набор не содержит: лекарственные средства для медицинского применения. 7.24. Воздействие на функционирование внешних факторов в диапазоне их возможного изменения при применении Набора в медицинских учреждениях - не существенно, включая Стр. 8из19.ЕЁЯ0421 --- стр. 12 --- Для получения 14,21 мл рабочего раствора Конъюгата из флакона с Конъюгатом (х20) пере нести 710 мкл во флакон с Буфером для разведения конъюгата. Раствор готовить непосредственно перед использованием. Готовый рабочий раствор конъюгата хранить не более 30 мин при температуре от 15°С до 25°С в защищенном от света месте. 12.3. Приготовление хромоген-субстратного раствора Для приготовления 15 мл Хромоген-субстратного раствора во флакон с Хромогеном перене сти 1,5 мл Субстрата. Тщательно перемешать пипетированием при дробном использовании Набо ра или переворачиванием без пенообразования при однократном использовании Набора. Готовый раствор хранению не подлежит. Посуду и наконечники пипеток, контактирующие с раствором хромогена, буферной смесью с гидроперитом и индикаторным раствором, нельзя отмывать с применением синтетических мою щих средств, поскольку даже их следы приводят к неконтролируемому разложению хромогена в ходе пероксидазной реакции. Избегать также контакта раствора хромогена с металлом. Использо вать только новые наконечники. ^ 12.4. Иммуносорбент (ИС), Положительный контроль (К+), Отрицательный контроль (К-), Буфер для разведения (БР), Стоп-реагент - готовы к применению. 13. ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА 13.1. Внесение контрольных и испытуемых образцов сывороток В лунку А1 внести 100 мкл положительного контроля, в лунки В1-С1 - по 100 мкл отрицательного контроля. В остальные лунки планшета внести по 90 мкл буфера для разведения (БР), а затем добавить по 10 мкл, предварительно разведенных в 20 раз испытуемых образцов (по одной лунке на каждый образец), подготовленных по п.11. Рекомендуемая схема внесения контрольных и испытуемых образцов 10 11 12 i А В С D Е F G Н К Х о б Х о14 Х «22 № 3 0 № 3 ^ № *4 6№ 5 4 № 6 2 № « 7 0№ « 7 8№ « 8 6 к Х о 7 Х о15 Х « 2 3Х « 3 1№ 3 9 Х Ь 4 7№ 5 5 № « 6 3№ « 7 1№ « 7 9№ « 8 7 к т т е Х «24 № 3 2 Х о40 № 4 8 № 5 6 Х Ь 6 4№ « 7 2№ « 8 0№ « 8 8 № 1 Х о 9 Х о17 Х « 2 5№ 33 № 4 \ № 4 9 № 5 7 № « 6 5№ « 7 3№ « 8 1№ « 8 9 № 2 Х 9 1 0Х о18 Х «26 Х «34 № 4 2 № 5 0 № 5 8 № « 6 6№ « 7 4№ « 8 2№ « 9 0 № 3 Х оЦ Х о19 Х о27 № 35 № 43 № 5 \ № 5 9 № « 6 7№ « 7 5№ « 8 3№ « 9 ! Х о 1 2ш о Л о 2 8№ 3 6 № 4 4 № 5 2 № 6 0 № « 6 8№ « 7 6№ « 8 4№ « 9 2 № 5 т з Х о 2 1№ 2 9 № 3 7 № 4 5 № 53 № 61 № « 6 9№ « 7 7№ « 8 5№ « 9 3 Планшет заклеить пленкой и выдержать в течение 1 ч при температуре от 36°С до 38°С при перемешивании со скоростью 300 об/минуту. ВНИМАНИЕ! При инкубации не располагать планшеты стопкой! Анализ проб следует проводить так, чтобы в случае отсутствия автоматического анализатора на одного оператора одновременно приходилось не более четырех планшетов. 13.2. Промывание После окончания инкубации удалить жидкость из лунок и промыть планшет 4 раза рабочим раствором ФСБ-Т (см. п. 12.1.), на автоматическом промывочном устройстве или вручную. С тр. 12 из 19. 0421 --- стр. 13 --- доверху заполняя лунки (по 300 мкл/лунку). Затем жидкость окончательно удалить и подсушить планшет постукиванием по сложенной в несколько слоев фильтровальной бумаге. ВНИМАНИЕ! Недостаточное промывание планшетов может привести к получению ложных результатов. 13.3. Внесение рабочего раствора конъюгата В каждую лунку внести по 100 мкл рабочего раствора конъюгата моноклональных антител. Планшет заклеить липкой пленкой и инкубировать в течение 1 часа при темперагуре 36°С до 38 °С при перемешивании со скоростью 300 об/минуту. 13.4. Промывание После окончания инкубации удалить жидкость из лунок и промыть планшет 4 раза рабочим раствором ФСБ-Т (см. п. 12.1.), на автоматическом промывочном устройстве или вручную, доверху заполняя лунки (по 300 мкл/лунку). Затем жидкость окончательно удалить и подсушить планшет постукиванием по сложенной в несколько слоев фильтровальной бумаге. ВНИМАНИЕ! Недостаточное промывание планшетов может привести к получению ложных результатов. ^ 13.5. Внесение хромоген-субстратного раствора В каждую лунку внести по 100 мкл хромоген-субстратного раствора и инкубировать в течение 15 минут в темном месте при температуре от 15°С до 25°С. 13.6. Остановка пероксидазной реакции Остановить реакцию добавлением в каждую лунку по 50 мкл стоп-реагента (1М раствор серной кислоты) и провести учет результатов на спектрофотометре в течение 10 мин после остановки реакции. 14. РЕГИ СТРАЦ И Я И И НТЕРПРЕТАЦИ Я РЕЗУЛ ЬТАТО В 14.1. Регистрация результатов анализа Измерить величину оптической плотности субстратной смеси на спектрофотометре с вертикальным лучом при длине волны 450 нм (А450) в течение 10 мин после остановки реакции. ВНИМАНИЕ! При проведении измерения величины оптической плотности субстратной смеси необходимо убедиться в том, что у фотометра вертикального сканирования отключена референсная длина волны, и измерение проводится только при длине волны 450 нм (А450). Вычислить среднее арифметическое значение оптической плотности отрицательного (А450К-) контроля по формуле. А450 К-ср = (А450 К- 1+ А450 К-2)/2 где: - А450 К—1 - значение оптической плотности пробы 1 отрицательного контроля, - А450 К-2 - значение оптической плотности пробы 2 отрицательного контроля. Результаты измерения, полученные для контрольных образцов, должны удовлетворять тре бованиям, представленным в Таблице 3: Таблица 3 1 Значение оптической плотности в лунке с положительным контролем (А 4 50К+) не менее 0,6 Среднее значение оптической плотности в лунках с отрицательным контролем (А45оК-ср) менее 0,2 При получении иных показателей исследование следует повторить. 14.2. Интерпретация результатов анализа С тр. 13 из 19. Е | д 0421 --- стр. 14 --- Для интерпретации результатов вычисляют отсекающие значения оптической плотности А450 (Cut off). Значение Cut off вычисляют по формуле: Cut off= А 4 5 0 К ' ср X Ннкр где: - Енкр - нормированный коэффициент расчёта, указанный в паспорте качества на Набор. Вычислить значение коэффициента позитивности (КП) по формуле: КП = А 45оОПобразца/ Cut Off Исследуемый образец сыворотки считается положительным, если КП >1,1. Исследуемый образец сыворотки считается отрицательным, если КП < 0,8. Исследуемый образец сыворотки считается пограничным, если КП от 0,8 до 1,1. В случае сомнительного результата рекомендуется исследовать образец повторно. При повторном получении сомнительного результата рекомендуется тестировать эти образцы другими методами. Использование индекса позитивности позволяет проводить сравнительный анализ уровня ^ специфических антител в парных сыворотках крови. КП в пределах 1,1-7,0 пропорционален содержанию специфических антител класса IgG. Это позволяет проводить исследование парных сывороток, полученных от пациентов с интервалом в 1-2 дня. Такой способ интерпретации результатов анализа позволяет определять динамику специфических IgG-антител к SARS-CoV-2, а также сравнивать различные образцы по содержанию IgG-антител к SARS-CoV-2. Альтернативой данному методу является титрование сыворотки (плазмы) методом параллельного последовательного разведения образцов. Для этого двукратным шагом готовят разведения исследуемых образцов и отрицательного контроля в диапазоне 1\200, 1\400, 1\800, 1\1600, 1\3200, 1/6400. Анализ исследуемых образцов проводится согласно п.13 Инструкции. Титром сыворотки следует считать последнее разведение исследуемой сыворотки, в котором значение оптической плотности в 2 раза превышает значение оптической плотности отрицательного контроля. Некоторые сыворотки с высоким титром могут потребовать повторного титрования. А При использовании титрования для оценки поствакцинального иммунитета проводится ^ параллельное титрование, с двухкратным шагом готовят разведения образцов биоматериала исследуемого добровольца до вакцинации (0 сыворотка) и после вакцинации (опытная сыворотка) в диапазоне 1\200, 1\400, 1\800, 1М600, 1\3200, 1/6400. Титром сыворотки следует считать последнее разведение опытной сьторотки, в котором значение оптической плотности в 2 раза превышает значение оптической плотности 0 сыворотки в аналогичном разведении. В рамках оценки коррелятивной связи между RBD-специфическими IgG и вируснейтрализующей активностью плазмы (сыворотки) крови проведено исследование антител IgG, специфичных к рецептор-связывающему домену гликопротеина S вируса SARS-CoV-2, и вируснейтрализующих антител к SARS-CoV-2 в образцах плазмы (сыворотки) кроги доноров, содержащих и не содержащих IgG к рецептор-связывающему домену. Выявлена достоверная корреляция между RBD-специфическими IgG и вируснейтрализующими антителами в плазме (сыворотке) крови доноров и реконвалесцентов. Коэффициент корреляции Спирмена составил 0,8863 при уровне значимости р<0,0001. С тр. 14 из 1 9 .Г Ё Я 0 4 2 1 --- стр. 16 --- Таблица 5 I Компонент набора Условия хранения Срок хранения Иммуносорбент (ИС) от 2 °С до 8 °С в плотно закрытом пакете 8 недель Положительный контроль (К+) от 2 °С до 8 °С 8 недель Отрицательный контроль (К-) от 2 °С до 8 °С 8 недель Конъюгат (х20) от 2 °С до 8 °С 8 недель Буфер для разведения конъюгата от 2 °С до 8 °С 8 недель Концентрат промывочного бу фера (ФСБ-Т) (х25) от 2 °С до 8 °С До окончания срока годности Набора Буфер для разведения (БР) от 2 °С до 8 °С 8 недель Раствор хромогена от 2 °С до 8 °С До окончания срока годности Набора Раствор субстрата от 2 °С до 8 °С До окончания срока годности Набора Стоп-реагент от 2 °С до 8 °С До окончания срока годности Набора Планшет для разведения образцов от 2 °С до 25 °С До окончания срока годности Набора 17. СРОК ГОДНОСТИ 17.1. Срок годности Набора реагентов составляет 9 месяцев с даты производства Набора. Набор реагентов с истекшим сроком годности применению не подлежит. 17.2. Срок годности вскрытых реагентов Набора соответствует сроку годности, указанному в Таблице 5. 17.3. Условия отпуска. Для диагностики in vitro в специализированных лабораториях, осуществляющих диагностические, мониторинговые и научные исследования с возбудителями инфекционных болезней. 18. ОГРАНИЧЕНИЯ МЕТОДА 18.1. ТОЛЬКО ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ IN VITRO. 18.2. Результаты анализа с использованием Набора реагентов должны интерпретироваться в сочетании с данными клинического обследования, эпидемиологического анамнеза и результатов лабораторных исследований в составе комплексной диагностики острого респираторного синдрома COVID-19. 18.3. Отрицательные результаты не исключают возможность инфицирования коронавирусом SARS-CoV-2 и не должны использоваться в качестве единственной основы для принятия решения о лечении пациентов. Отрицательные результаты должны сочетаться с клиническими наблюдениями, историей болезни и эпидемиологической информацией. Набор реагентов не Стр.16из19.|УЩ0421 --- стр. 17 --- определяет иммуноглобулины класса G, специфические RED домену коронавируса SARS-CoV-2, если их концентрация ниже заявленной аналитической чувствительности, описанной в п. 5.1. 18.4. В работе необходимо использовать компоненты строго из одной серии Набора реагентов. Запрещается использование отдельных компонентов, относящихся к разным сериям Набора реагентов. 18.5. Для достижения максимальной воспроизводимости методики анализ необходимо проводить в одних и тех же условиях (температура, время инкубации с инкубации с хромоген-субстратным раствором). При использовании Набора для проведения нескольких независимых серий анализов рекомендуется подбор оптимальных условий путем постановки контролей, входящих в состав Набора. 19. ОЦЕНКА ВЕРОЯТНЫХ СОБЫТИЙ 19.1. Оценка вероятных событий, в результате наступления которых могут произойти отрица тельные последствия для организма человека. При использовании по назначению и соблюдении вышеперечисленных мер предосторожно- 4 сти Набор безопасен. При использовании по назначению и соблюдении выщеперечисленных мер предосторожности контакт с организмом человека исключен. Специфические воздействия Набора реагентов на организм человека: - Канцерогенный эффект отсутствует. - Мутагенное действие отсутствует. - Репродуктивная токсичность отсутствует. 19.2. Оценка вероятных событий, в результате наступления которых могут произойти отрицательные последствия для окружающей среды. При использовании по назначению и соблюдении вышеперечисленных мер предосторожности Набор реагентов безопасен, не являются источником загрязнения окружающей среды. Материалы, из которых изготовлены Наборы, не обладают способностью образовывать токсичные соединения в воздушной среде и сточных водах в присутствии других веществ при температуре окружающей среды. Потенциальная возможность возгорания или взрыва при использовании по назначению и ( соблюдении вьппеперечисленных мер предосторожности отсутствует. 20. СВЕДЕНИЯ О ПРОИЗВОДИТЕЛЕ ФГБУ «НИЦЭМ им. Н.Ф. Гамалеи» Минздрава России (филиал «Медгамал» ФГБУ «НИЦЭМ им. Н.Ф. Гамалеи» Минздрава России) 123098, Россия, г. Москва ул. Гамалеи, д.18 тел.: 8(499)193-30-50, 8(499)193-43-34; факс: 8(499)190-66-71 medgamal@gamaleva.org 21. ГАРАНТИИ ИЗГОТОВИТЕЛЯ И СВЕДЕНИЯ О РЕКЛАМАЦИЯХ ФГБУ «НИЦЭМ им. Н.Ф. Гамалеи» Минздрава России (филиал «Медгамал» ФГБУ «НИЦЭМ им. Н.Ф. Гамалеи» Минздрава России) гарантирует стабильность Наборов, соответствие основных параметров и характеристик Наборов требованиям, указанным в Стр. Пиз 19.171^0421 --- стр. 18 --- I I технической и эксплуатационной документации на протяжении всего срока 1'одности при соблюдении условий транспортирования, хранения и применения. По вопросам, касающимся качества Набора реагентов, а также в случае изменения аналитиче ских характеристик следует обращаться к производителю: ФГБУ «НИЦЭМ им. Н.Ф. Гамалеи» Минздрава России (филиал «Медгамал» ФГБУ «НИЦЭМ им. Н.Ф. Гамалеи» Минздрава России), 123098, Россия, г. Москва, ул. Гамалеи, д.18, тел.: 8(499)193-30-50, 8(499)193-43-34, факс: 8(499) 190-66-71, medgamal@gamaleva.org . При выявлении побочных действий, не указанных в инструкции по применению Набора реа гентов, нежелательных реакций при его использовании, фактов и обстоятельств, создающих угро зу жизни и здоровью граждан и медицинских работников при применении и эксплуатации Набора реагентов, рекомендуется направить сообщение по адресу, указанному выте, и в уполномоченную государственную регулирующую организацию (в РФ - Федеральная служба по надзору в сфере здравоохранения) в соответствии с действующим законодательством. 22. СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 1. S protein of severe acute respiratory syndrome-associated coronavirus mediates entry into hepatoma cell lines and is targeted by neutralizing antibodies in infected patients. // Hofmann H., Hattermann K., Marzi A., Gramberg T., Geier M., Krumbiegel M., Kuate S., Liberia K., Niedrig M., Pohlmann S. Journal of Virology. 2004, 78(12):6134-42. 2. Severe acute respiratory syndrome coronavirus spike protein expressed by attenuated vaccinia virus protectively immunizes mice.// Bisht H., Roberts A., Vogel L., Bukreyev A., Collins P.L., Murphy B.R., Subbarao K., Moss B. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2004, 101(17):6641-6. 3. Receptor-binding domain of severe acute respiratory syndrome coronavirus spike protein contains mul tiple conformation-dependent epitopes that induce highly potent neutralizing antibodies.// He Y, Lu H, Siddiqui P, Zhou Y, Jiang S. Journal of Immunology. 2005, 174(8):4908-15. 4. Receptor-binding domain of SARS-CoV spike protein induces highly potent neutralizing antibodies: implication for developing subunit vaccine.// He Y., Zhou Y., Liu S., Kou Z., Li W., Farzan M., Jiang S. Biochem. Biophys. Res. Commun. 2004, 324(2):773-81. 5. Generation and characterization of human monoclonal neutralizing antibodies with distinct binding and sequence features against SARS coronavirus using XenoMouse.// Coughlin M., Lou G., Martinez O., Masterman S.K., Olsen O.A., Moksa A.A., Farzan M., Babcook J.S., Prabhakar B.S. Virology. 2007, 361(1):93-102. 6. An efficient method to make human monoclonal antibodies from memory В cells: potent neutralization of SARS coronavirus. // Traggiai E., Becker S., Subbarao K., Kolesnikova L., Uematsu Y., Gismondo M.R., Murphy B.R., Rtppuoli R., Lanzavecchia A. Nat. Med. 2004, 10(8):871-5. 7. Development and characterisation of neutralising monoclonal antibody to the SARS-coronavirus.// Berry J.D., Jones S., Drebot M.A., Andonov A., Sahara M., Yuan X.Y., Weingartl H., Fernando L., Mar- szal P., Gren J., Nicolas B., Andonova M., Ranada F., Gubbins M.J., Ball T.B., Kitching P., Li Y., Kabani A., Plummer F. J. Virology Methods. 2004, 120(l):87-96. 8. Contributions of the structural proteins of severe acute respiratory syndrome coronavirus to protective immunity. // Buchholz U.J., Bukreyev A., Yang L., Lamirande E.W., Murphy B.R., Subbarao K., Collins P.L. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2004, 101(26):9804-9. Стр. 18 из 19. IVE^ 0421 --- стр. 19 --- 23. СИМВОЛЫ, НАНОСИМЫЕ НА УПАКОВКУ НАБОРА Код партии А Осторожно! Обратитесь к инструкции по применению [ j ^ Медицинское изделие для диагностики in vitro V Содержимого достаточно для проведения п-количества тестов VER Дата изменения Использовать до 1 Температурный диапазон □ и Обратитесь к инструкции по применению i j Изготовитель Не допускать воздействия сол нечного света Дата изготовления % Биологический риск 24. ШТРИХ-КОДЫ КОМПОНЕНТОВ НАБОРА Числовое обозначение штрих-кода Наименование компонента Числовое обозначение штрих-кода Наименование компонента IIIIIIIIIIIIIIIII 0 2 0 1 0 1 Иммуносорбент (ИС) IIIIIIIIIII 0 2 0 1 I I I 0 7 1 Буфер для разведения (БР) IIIIIIIIIIIII 0 2 0 1 Hill 0 2 Положительный контроль (К+) IIIIIIIIIII0 2 0 1 III!0 8 1 Раствор хромогена IIIIIIIIIIH 0 2 0 1 m il 0 3 Отрицательный кон троль (К-) Н И 1 0 2 0 1 n il 0 « > Раствор субстрата lllllllljll0 2 0 1 iiiii 0 4 Конъюгат (х20) IIIIIIIIIIIIIIIII 0 2 0 1 1 0 1 Стоп-реагент IIIIIIIIIIIIIIIII 0 2 0 1 0 S Буфер для разведения конъюгата IIIIIIIIIII 0 2 0 1 n il 1 1 1 Планшет для разведения образцов n i i i i i i I0 2 0 1 lllllll0 6 Концентрат промывочного буфера (ФСБ-Т) (х25) Стр. 19 из 19. ГЁЯ042]