Набор реагентов "Микоплазмоз-IgG-антитела", тест-система иммуноферментная для выявления антител класса G к Mycoplasma hominis по ТУ 9398-010-32157097-2010 — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 1 --- УТВЕРЖДЕНА Приказом Росздравнадзора «УТВЕРЖДАЮ» Гктр» от 20 г. № .А. Кривенчук 20 г. ИНСТРУК ПО ПРИМЕНЕНИЮ НАБОРА РЕАГЕНТОВ «Микоплазмоз-^С-антитела» - ТЕСТ-СИСТЕМА ИММУ НО ФЕРМЕНТНАЯ ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ АНТИТЕЛ КЛАССА G к M ycop lasm a hom inis 1. Н азн ачен и е 1 .1 Выявление антител класса G к Mycoplasma hominis в сыворотке (плазме) крови человека и при проведении сероэпидемиологических исследований. 1.2 Набор рассчитан на проведение анализа 45 неизвестных и 1 контрольного положительного образца в двух повторах, 1 контрольного отрицательного образца в трех повторах, 1 контроля конъюгата (всего 96 определений при использовании всех стрипов планшета). 2. Х ар ак т ер и с ти к а набора 2.1. Принцип действия Принцип действия набора реагентов основан на непрямом иммуноферментном анализе. Анализ проводят в две стадии. На первой стадии исследуемые образцы инкубируют в лунках планшета с иммобилизованным антигеном Mycoplasma hominis. Если в сыворотке (плазме) содержатся антитела к Mycoplasma hominis, образуется комплекс антиген-антитело. После промывки планшета в лунки планшета вносят антивидовой конъюгат (антитела к IgG человека, конъюгированные с пероксидазой хрена), который связывается с антителами класса G к Mycoplasma hominis, если они присутствуют в образце. Визуализация образовавшегося комплекса «антиген-антитело- конъюгат» происходит за счет ферментативной реакции пероксидазы с субстратной смесью и образования окрашенного продукта. После остановки ферментативной реакции раствором серной кислоты (стоп-реагент) результаты анализа учитывают фотометрически. Величина оптической плотности (ОП) окрашенной хромогенной смеси пропорциональна концентрации специфических антител в образце сыворотки или плазмы. 2.2 Состав набора - планшет разборный (12 восьмилуночных стрипов) с иммобилизованным на внутренней поверхности лунок антигеном Mycoplasma hominis (иммуносорбент) - 1 шт.; - контрольный положительный образец на основе сыворотки крови человека, содержащий IgG к Mycoplasma hominis (К+) -1 флакон (1,5 мл); - контрольный отрицательный образец на основе сыворотки крови человека, не содержащий IgG к Mycoplasma hominis (К-) - 1 флакон (1,5 мл); - раствор конъюгата мышиных моноклональных антител к IgG человека с пероксидазой хрена, (РКг) -1 флакон (13,0 мл); - буферный раствор для разведения сывороток, (РБР-С) - 1 флакон (11 мл); - 25-кратный концентрат фосфатно-солевого буферного раствора с твином (ФСБ-Т(концентрат х25)) - 1 флакон (26,0 мл). - раствор тетраметилбензидина, (ТМБ-субстрат) - 1 флакон (13,0 мл). --- стр. 2 --- - стоп-реагент -1 флакон (6,0 мл); - пленка для заклеивания планшета - 2 шт.; - ванночка для реагентов - 2 шт.; - наконечники для пипетки на 4-200 мкл - 16 шт.. 3. А н ал и ти ческ и е и диагностически е х ар ак тер и сти к и Набор реагентов «Микоплазмоз-^С-антитела» предназначен для выявления антител класса G к Mycoplasma hominis в сыворотке (плазме) крови человека и при проведении сероэпидемиологических исследований. Специфичность выявления иммуноглобулинов класса G Mycoplasma hominis по Стандартной панели сывороток предприятия - 100%. Чувствительность выявления иммуноглобулинов класса G Mycoplasma hominis по Стандартной панели сывороток предприятия -100 %. 4. М еры предосторож ности 4.1 Потенциальный риск применения набора - класс 2а. 4.2 Все компоненты набора, за исключением стоп-реагента, являются нетоксичными. Стоп-реагент обладает раздражающим действием. Избегать разбрызгивания и попадания на кожу и слизистые. В случае попадания раствора серной кислоты на кожу и слизистые необходимо промыть поражённый участок большим количеством проточной воды. 4.3. При работе с набором следует соблюдать «Правила устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) санитарно-эпидемиологических учреждений системы Министерства здравоохранения СССР» (Москва, 1981 г.), 4.4. При работе с набором следует надевать одноразовые резиновые или пластиковые перчатки, так как в состав набора входят компоненты крови человека, которые следует рассматривать как потенциально инфицированные, способные длительное время сохранять и передавать ВИЧ, вирус гепатита или любой другой возбудитель вирусных инфекций. 4.5. Химическая посуда и оборудование, которые используются в работе с набором, должны быть соответствующим образом промаркированы и храниться отдельно. 4.6. Запрещается приём пищи, использование косметических средств и курение в помещениях, предназначенных для работы с наборами. 5. О борудование и м атер и ал ы - спектрофотометр вертикального сканирования, позволяющий проводить измерения оптической плотности растворов в лунках стрипов при длине волны 450 нм; - прибор, позволяющий производить инкубирование при температуре 37±1 °С (термостат); - промывочное устройство для планшетов; - холодильник бытовой; - пипетки полуавтоматические одноканальные с переменным или фиксированным объёмом со сменными наконечниками, позволяющие отбирать объёмы жидкости от 20 до 1000 мкл, аттестованные по значению средней дозы и сходимости результатов пипетирования (погрешность не более 3 %); - пипетка полуавтоматическая многоканальная со сменными наконечниками, позволяющая отбирать объёмы жидкостей от 20 до 300 мкл, аттестованная по значению средней дозы и сходимости результатов пипетирования (погрешность не более 3 %); - перчатки резиновые хирургические (ГОСТ 3-88); - бумага фильтровальная лабораторная (ГОСТ 12026-76); - цилиндр мерный 2-го класса точности вместимостью 1000 мл (ГОСТ 1770-74Е); - вода дистиллированная (ГОСТ 6709-72). 2 --- стр. 3 --- 6. А н ал и зи р у ем ы е образцы Для проведения анализа используют образцы сыворотки или плазмы крови человека объемом не менее 50 мкл. Желательно использовать свежеприготовленные образцы сыворотки (плазмы) крови, допускается использование образцов, хранившихся при температуре 2 - 8 °С не более 7 сут, либо при минус 20 °С не более 3 мес. Для исключения ложноположительных результатов исследуемые сыворотки необходимо готовить и хранить в стерильных условиях, исключающих возможность контаминации посторонней микрофлорой. При необходимости осветлять образцы сывороток, содержащие осадок и агрегаты, путем центрифугирования в течение 10-15 мин при 3000 об/мин. Не использовать сыворотки с выраженным гемолизом, гиперлипидемией и бактериемией, не использовать термоинактивированные сыворотки и сыворотки с добавлением азида натрия. Избегать повторных циклов замораживания и оттаивания образцов. Для возможного повторного исследования образца сыворотки желательно образец разделить на аликвоты, которые хранить при температуре 2 - 8 °С не более 7 сут, либо при минус 20 °С не более 3 мес. Не допускать тестирование пула, содержащего несколько образцов сывороток. Каждый образец сыворотки или раствора необходимо отбирать новым наконечником. Для отбора исследуемых проб и компонентов применять автоматические пипетки. 7. П роведение ан ал и за 7.1 П о д го то вка к ан ализу 7.1.1 Извлечь набор из холодильника, вскрыть упаковку и выдержать все компоненты при температуре 18-25 °С в течение времени не менее 30 мин. 7.1.2 Подготовка планшета. Вынуть из пакета и установить на рамку необходимое количество стрипов. Оставшиеся стрипы хранить в герметично закрытом пакете при температуре 2 - 8 °С в течение всего срока годности. 7.1.3 Приготовление рабочего раствора ФСБ-Т При наличии во флаконе с ФСБ-Т(концентрат х25) визуально определяемого осадка солей флакон с концентратом выдержать при температуре 37 °С до полного растворения солей. Содержимое флакона с ФСБ-Т(концентрат х25) перенести в мерный цилиндр вместимостью 1 л и довести объем раствора до 650 мл дистиллированной водой. В случае использования одного или нескольких стрипов разборного планшета в мерный цилиндр внести концентрат ФСБ-Т из флакона и добавить дистиллированную воду в соответствии с таблицей. Таблица Приготовление рабочего раствора ФСБ-Т Количество используе мых стрипов 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 ФСБ-Т (концентрат х25), мл 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 26 Вода дис тиллиро ванная, мл до 50 Д О 100 до 150 до 200 Д О 250 Д О 300 до 350 до 400 до 450 до 500 Д О 550 Д О 650 Хранение: неиспользованный ФСБ-Т (концентрат х25) хранить при температуре от 2 до 8 °С в течение срока годности набора, рабочий раствор ФСБ-Т - при температуре от 2 до 8 °С в течение двух недель 3 --- стр. 4 --- 7.1.4 Приготовление контрольных образцов К+ и К' готовы для использования. Хранение: после вскрытия флакона контрольные образцы хранить при температуре от 20 до 25 °С до 48 ч, при температуре от 2 до 8 °С в течение срока годности набора. 7.1.5. Приготовление РБР-С, РКг , ТМБ-субстрата и стоп-реагеннта РБР-С, РКг, ТМБ-субстрат и стоп-реагент - готовы для использования. Хранение: после вскрытия флакона раствор хранить в закрытом виде при температуре от 2 до 8 °С в течение срока годности набора. ТМБ-субстрат хранить в защищенном от света месте. 7.2. П роведение им м уноф ерм ентного ан ал и за ПЕРВАЯ СТАДИЯ РЕАКЦИИ 7.2.1 В лунки А1 и В1 планшета внести по 100 мкл К+ контрольного положительного образца, в лунки С1, Д1 и Е1 внести по 100 мкл К' контрольного отрицательного образца, в лунку Б1 внести 80 мкл РБР-С для контроля конъюгата. В остальные лунки планшета внести по 80 мкл РБР-С и по 20 мкл образцов исследуемых сывороток. Таким образом, исследуемые сыворотки в лунке разбавляются в 5 раз. Внесение образцов необходимо производить быстро, в течение времени не более 10-15 мин. После этого планшет закрыть пленкой и инкубировать в течение 30 мин при температуре (37±1) °С. В ним ание! Пленка предназначена для одноразового использования! 7.2.2 По окончании инкубации планшет промыть рабочим раствором ФСБ-Т пять раз с помощью автоматического промывателя или многоканальной пипетки, при этом в каждую лунку планшета вносить не менее 250 мкл раствора в процессе одного промывания. Время между заполнением и опорожнением лунок должно быть не менее 10 сек, по окончании промывки остатки жидкости удалить, постукивая перевернутым планшетом по сложенной в несколько раз фильтровальной бумаге. ВТОРАЯ СТАДИЯ РЕАКЦИИ 7.2.3 После промывки и удаления влаги в каждую лунку планшета внести по 100 мкл раствора конъюгата (РКг). Планшет закрыть пленкой и инкубировать в течение 30 мин при температуре (37±1) °С.Для внесения рабочего РКг использовать ванночку для реагентов и одноразовые наконечники, входящие в состав набора. 7.2.4 По окончании инкубации планшет промыть рабочим раствором ФСБ-Т 5 раз и удалить остатки влаги из планшета (см. п.7.2.2). ТРЕТЬЯ (ФЕРМЕНТАТИВНАЯ) СТАДИЯ РЕАКЦИИ 7.2.5 Внести в каждую лунку планшета по 100 мкл раствора тетраметилбензидина (ТМБ-субстрат). Планшет инкубировать в защищенном от света месте в течение 15 мин при температуре (37±1) °С. Для внесения ТМБ-субстрата использовать ванночку для реагентов и одноразовые наконечники, входящие в комплект набора. В о и зб еж а н и е лож ны х р езульт а т о в п р и раскапы вании Т М Б -суб ст р а т а : а ) н е ка са й т есь ст ено к лунок п ла н ш ет а н а к о н еч н и к а м и ; б ) и зб ега й т е о б р а зо ва н и я а эр о зо лей и п о п а д а н и я суб ст р а т но й см еси н а вн ут р ен н и й ф и льт р п и п е т к и . 12.6 Внести во все лунки с той же скоростью и в той же последовательности, как и ТМБ-субстрат, по 50 мкл стоп-реагента для остановки ферментативной реакции. Внимание! С лед ует и зб ега т ь п о п а д а н и я ст о п -р еа ген т а н а о т к р ы т ы е уча ст ки т е ла и о д е ж д у . П ри п о п а д а н и и - п р о м ы т ь б о льш и м ко ли чест во м во д ы ! 4 --- стр. 5 --- Схема проведения анализа Использовать только после тщательного ознакомления с инструкцией! Планшет разборный (12 восьми луночных стрипов) с иммобилизованным на внутренней поверхности лунок антигеном Mycoplasma hominis 4 Внести: ПЕРВАЯ СТАДИЯ 2x100 мкл К+, 3x100 мкл К-, 1x80 мкл РБР-С, РЕАКЦИИ по 80 мкл РБР-С, по 20 мкл образцов сывороток во все остальные лунки I Инкубировать 30 мин, при (37±1) °С I Промыть: Рабочим раствором ФСБ-Т (не менее 250 мкл в каждую лунку), 5 раз 4 ВТОРАЯ СТАДИЯ Внести: РЕАКЦИИ по 100 мкл раствора конъюгата (РКг) I Инкубировать 30 мин при (37±1) °С I Промыть: Рабочим раствором ФСБ-Т (пе менее 250 мкл в каждую лунку), 5 раз I ТРЕТЬЯ Внести: (ФЕРМЕНТАТИВНАЯ) по 100 мкл ТМБ-субстрата СТАДИЯ | РЕАКЦИИ Инкубировать 15 мин при (37±1) °С в защищенном от света месте i Внести: по 50 мкл стоп-реагента 1 Измерять при 450 нм 8. Р еги стр ац и я р езу л ьтато в ан ал и за Результаты ИФА регистрируют на спектрофотометре. Оптическую плотность (ОП) измеряют при длине волны 450 нм. Нулевой уровень («бланк») задают по воздуху. > Измерение проводят сразу или в течение 15 мин после остановки реакции. 9. У чет и о ц ен к а резу л ьтато в Результаты учитывают только в том случае, если: - среднее значение ОП в лунках с контролем коньюгата ОПККг не превышают 0,15, - среднее значение в лунках с К' ОПК "(С Р-)не более 0,2, - среднее значение в лунках с К+ ОПК+ (ср.) не менее 1,0. В противном случае исследование необходимо повторить. На основании полученных данных вычислить критическое значение оптической плотности (ОПкрит) по формуле: ОПкрит. рассчитывают по формуле: О П к р и т.= О П К ‘(ср.)+ 0,25 Ошибка метода ИФА составляет до 15 %, поэтому, если ОП исследуемого образца сыворотки больше или меньше ОПкрит. на 15 %, результат следует считать 5 --- стр. 6 --- сомнительным. Н еобходим о повторить анализ вновь взятого образца сыворотки крови данного пациента. П олож ительны м считаю т образец со значением О П , превы ш аю щ им 1,15 х ОПкрит. О трицательны м считаю т образец со значением ОП м енее 0,85 х О П крит. При получении полож ительного результата с сы вороткам и в разведении 1:5, при необходимости, провести их дальнейш ее титрование путем последовательны х двукратных разведений в РБР-С. Титром сы воротки считать последнее разведение сы воротки, О П которого превы ш ает 0,85 х О П крит. П ациентам с сом нительны м и и полож ительны ми результатам и реком ендуется дополнительное обследование (вы явление возбудителя, обследование парны х сывороток). Все клинические и лабораторны е данны е долж ны бы ть рассм отрены в совокупности. П олож ительны м считаю т образец со значением ОП, превы ш аю щ им ОП критическое (ОПкрит.). О трицательны м считаю т образец со значением ОП м енее О П крит. 10. Условия хранения и эксплуатации набора Набор реагентов «М икоплазм оз-1§0-антитела» долж ен храниться в упаковке предприятия-изготовителя при тем пературе 2 - 8 °С в течение всего срока годности (12 мес). Зам ораж ивание ком понентов набора не допускается. Срок годности набора реагентов 12 мес. П репарат с истекш им сроком годности применению не подлеж ит Т ранспортирование производить при тем пературе 2 - 8 °С. Допускается транспортирование при тем пературе до 25 °С в течение 5 сут. Н а дальние расстояния только авиатранспортом. По вопросам, касающимся качества набора «Микоплазмоз-^С-антитела», следует обращ аться в О О О «И мДи-спектр» по адресу: 630559, Н овосибирская обл., Н овосибирский р-он, п. К ольцово, д.2а; тел/факс (383) 336-76-23 Н ачальник производства ОО О «ИмДи-спектр» «СО ГЛ А СО В А Н О » Зав. кафедрой клиничес лабораторной диагнос ГОУ ДПО «РМ А П О П о д п и сь / удостоверяю: спец1 _ кадровой работе Г0У ДПО Р М А /7Р п о д п и си В.Г М айданю к « » 20 г. д.м .н., проф ессор В.В. Долгов « ^ » _ 6 --- стр. 7 --- Пронумеровано, прошнуровано и опечатано 6 листов Директор ООО «ИмДи-спектр»