Диагностикум оспенный сухой для РТГА и РП по ТУ 21.10.60-064-20401675-2019 — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 1 --- «СОГЛАСОВАНО» Директор «УТВЕН Начал и ме АО « ации ИНСТРУКЦИЯ по применению медицинского изделия Диагностикум оспенный сухой для РТГА и РП по ТУ 2U0.60-064-20401675-2019 Регистрационное удостоверение N 2 ФСР 2009/04193 --- стр. 2 --- ^ i НАЗНАЧЕНИЕ Изделие для диагностики in vitro «Диагностикум оспенный сухой для РТГА и РП» предназна чено для определения антител к ортопоксвирусам в сыворотках крови людей в реакции торможения гемагглютинации (РТГА) и в качестве контрольного антигена при выявлении ортопоксвирусов в биологических материалах от людей в реакции преципитации (РП). Функциональное назначение - вспомогательное средство в диагностике оспы. Показания к применению изделия в соответствии с его назначением. Противопоказания при применении изделия - отсутствуют. ХАРАКТЕРИСТИКА ИЗДЕЛИЯ Состав изделия. Диагностикум оспенный сухой 10 ампул, лиофилизат из 1,0 мл для РТГА и РП Комплектация: компоненты изделие (Диагностикум оспенный сухой для РТГА и РП, 10 ам пул, лиофилизат из 1,0 мл) в пачке картонной с инструкцией по применению, паспорт (в комплекте поставки). Характеристика компонентов изделия. Диагностикум оспенный сухой для РТГА и РП представляет собой лиофилизированный вирус осповакцины, полученный путем культивирования на хорионаллантоисных оболочках (ХАО) 12-дневных куриных эмбрионов. Стабилизатор - пептон. Консервант - бензилпенициллина натрие вая соль. Имеет вид сухой пористой массы от темно-розового до коричневого цвета. Примечание: В производстве используют эмбрионы кур, соответствующие спецификации, которые получают из хозяйств, свободных от вирусных и других возбудителей заболеваний. ПРИНЦИП АНАЛИТИЧЕСКОГО МЕТОДА И ПРИНЦИП ДЕЙСТВИЯ Принцип метода РТГА основан на способности вируса осповакцины агглютинировать эритро циты петуха. В присутствии антител к ортопоксвирусу, агглютинация тормозится (подавляется), благодаря блокировке ответственного за этот феномен антигена, обычно располагающегося на поверхности вириона. Принцип метода РП основан на образовании иммунного комплекса антиген-антитело, дающе го видимую в проходящем свете на темном фоне полосу преципитации в агаре. ОСНОВНЫЕ ПОТРЕБИТЕЛЬСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ Изделие предназначено для лабораторной диагностики для однократного применения по назначению. Изделие является стерильным. Вид аналита - качественный. --- стр. 3 --- I м Содержимое одной ампулы предназначено для проведения 10 определений в РП или от 1 до эпределений в РТГА. Ремонту и обслуживанию не подлежит. Монтаж, наладка, калибровка и прочие операции, не- бходимые для ввода изделия в эксплуатацию и его правильной эксплуатации не требуются. Пользователями изделия могут быть медицинские специалисты бактериологических лаборато рий с высшим и средним профессиональным образованием, прошедшие специальную подготовку и допущенные к работе в соответствии с СП 1.3.2322-08 или СП 1.3.3118-13 в зависимости от вида исследований/работ. ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ ИЗДЕЛИЯ Чувствительность. В реакции гемагглютинации (РГА) титр гемагглютининов - не ниже 1:160. Специфичность. В реакции преципитации (РП) дает четкую полосу преципитации с сыворот кой, содержащей антитела к ортопоксвирусам и с сывороткой диагностической оспенной в разведе нии 1:10. При этом с сывороткой, не содержащей антител к ортопоксвирусам, полосу преципитации не образует. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ ПРИ РАБОТЕ С ИЗДЕЛИЕМ Класс потенциального риска применения изделия - 2 б. Изделие является безопасным, не приносит вреда окружающей природной среде и здоровью человека при транспортировании, хранении, применении. Компоненты изделия являются негорю чими, невзрывоопасными, не способными самовозгораться, не радиоактивными, нетоксичными, не обладают канцерогенным, мутагенным действием или отрицательно влияющим на репродуктивную функцию человека, в том числе не образуют токсичных соединений с другими веществами, не обладают кумулятивными свойствами. Хорионаллантоисные оболочки 12-дневных куриных эмбрионов, используемые для произ водства диагностикума, получены от птиц из хозяйств, свободных от вирусных и других возбудите лей. Исследуемые образцы, а также их растворы, инструменты, оборудование и материалы, нахо дящиеся с ними в контакте, следует рассматривать как потенциально инфицированные. При работе следует соблюдать правила техники безопасности в соответствии с: - ГОСТ Р 52905-2007 «Лаборатории медицинские. Требования безопасности»; - СП 1.3.2322-08 «Безопасность работы с микроорганизмами III-IV групп патогенности (опас ности) и возбудителями паразитарных болезней» (для лабораторий учреждений, осуществляющих государственный санитарно-эпидемиологический надзор и лечебно-профилактических зщрежде- ний); - СП 1.3.2518-09 «Дополнения и изменения № 1 к СП 1.3.2322-08 «Безопасность работы с микроорганизмами III-IV групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болез ней»; --- стр. 4 --- I J L - СП 1.3.2885-11 «Дополнения и изменения № 2 к СП 1.3.2322-08 «Безопасность работы с микроорганизмами III-IV групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болез ней». При определении ортопоксвирусов в материалах от людей необходимо соблюдать СП 1.3.3118- 13 «Безопасность работы с микроорганизмами I-II групп патогенности (опасности)». При работе с потенциально-инфицированньши биологическими образцами, инструментом, обо рудованием, материалами, изделиями, находящимися с ними в контакте, следует соблюдать осто рожность: - работать в боксах микробиологической безопасности или боксированных помещениях для про ведения микробиологических исследований с применением индивидуальных средств защиты (за щитной одежды, одноразовых резиновых перчаток, защитного экрана или очков); - в случае пролива образцов и рабочих растворов на рабочие поверхности и по окончании рабо ты, необходимо проводить дезинфекционную обработку с использованием дезинфицирующих средств, разрешенных к использованию на территории РФ; - инструменты и оборудование (после работы) подвергать обработке с использованием химиче ских и физических методов обеззараживания предусмотренных СП 1.3.2322-08 или СП 1.3.3118-13 в зависимости от объекта, подлежащего обеззараживанию; - избегать образования аэрозолей, попадания исследуемых образцов и их растворов, реагентов, используемых при работе с изделием в рот, их проглатывания, контакта с кожей и слизистыми оболочками; - при проведении анализа не принимать пищу, напитки и не курить, после работы тщательно вымыть руки; - утилизировать все использованные материалы, а также их растворы, исследуемые образцы и их растворы в соответствии с действующими санитарными правилами и нормами. Утилизация изделий, пришедших в негодность, с истекшим сроком годности и неиспользован ных изделий осуществляется в соответствии с требованиями СанПиН 2.1.7.2790-10 «Санитарно- эпидемиологические требования к обращению с медицинскими отходами». Все растворы (которые могут содержать биологические образцы), изделия после контакта с биологическими образцами как потенциально инфицированный материал, перед утилизацией следует обеззараживать кипячением в течение 30 мин или 6 % раствором водорода перекиси (3 % р-ром хлорамина Б) в течение 24 ч при соотношении объемов обеззараживаемого материала и дезраствора 1:2, или автоклавированием при давлении пара 0,2 МПа и температуре 132 °С, в тече ние 45 мин с последующей утилизацией в соответствии СП 2.1.7.2790-10. СПОСОБ ПРИМЕНЕНИЯ МЕРЫ ПО СНИЖЕНИЮ РИСКОВ ПРИ ПРИМЕНЕНИИ ИЗДЕЛИЯ. Объективные результаты анализа гарантируются при вьшолнении следующих условий: --- стр. 5 --- if I • - соблюдение условий хранения и транспортирования изделия. Изделия, транспортирован ные и хранившиеся с нарушением температурного режима, применению не подлежат; - не использовать изделие при отсутствии на его упаковке соответствующей маркировки, нарушении целостности внутренней (первичной) упаковки изделия; - не использовать изделие с истёкшим сроком годности; - для отбора исследуемых образцов и реагентов необходимо использовать дозаторы пипе- точные автоматические с погрешностью измерения объёмов не более 5 %; - отбор реагентов следует производить чистыми наконечниками для дозаторов пипеточ- ных автоматических. ОБОРУДОВАНИЕ, МАТЕРИАЛЫ И РЕАГЕНТЫ, НЕОБХОДМЫЕ ПРИ РАБОТЕ С ИЗДЕЛИЕМ Оборудование и материалы для РТГА : - дозаторы пипеточные автоматические одноканальные с изменяющимся объемом типа «Ленпипет», «Эппендорф» или аналогичные; - наконечники одноразовые, соответствующие дозаторам пипеточным; - планшет для серологических реакций 72 луночный (М) (6x12 VI,5 мл) с U-образным дном; - флакон стеклянный вместимостью (50 мл); - центрифуга лабораторная (2-2,5 тыс. об/мин); - натрия хлорида раствор 0,9 % pH 7,2-7,4; - натрия гидроксида раствор 10 %; - вода очищенная; - взвесь эритроцитов петуха 1 %. ' Оборудование и материалы для РП: - пипетки стеклянные градуированные 2-го класса точности вместимостью 10 мл; 5 мл; 2 мл; 1мл и 0,2 мл, или пипетки серологические стерильные аналогичной вместимости; - дозаторы пипеточные автоматические одноканальные с изменяющимся объемом типа «Ленпипет», «Эппендорф» или аналогичные; - наконечники одноразовые, соответствующие дозаторам пипеточным; - пробирки стеклянные вместимостью 10 мл; - штативы для пробирок; - груша резиновая или автоматическая типа ТРР Pipettor Turbo-Fix; - предметное стекло; - термобаня Л14С на (56-100) ®С; - термостат (37±1) °С; --- стр. 6 --- ф $ - натрия хлорида раствор 0,9 %; - сыворотка диагностическая оспенная сухая (АО «НПО» Микроген»); - сыворотка кроличья нормальная; - антиген нормальный (20 % суспензия незараженных хорионаллантоисных оболочек 12-дневных куриных эмбрионов); - консервированная кровь барана или дефибринированная свежая кровь барана (возраст барана 1-5 лет); - вода очищенная; - Bacto™ Agar «Becton Dicrkinson and Compani» Допускается использование других материалов аналогичных по качеству. АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ Тип анализируемого образца для РТГА — пробы сывороток крови человека, полученные стан дартными лабораторными методами; для анализа в РП используют суспензию корок, везикуляр ную, пустулезную жидкости и прочее от людей больных или подозрительных на заболевания оспенной этиологии. Сбор, хранение и транспортирование образцов, содержащих биологический материал, должны осуществляться с учетом требований действующих санитарных правил и норм. Все исследуемые образцы должны иметь четкую маркировку (идентификацию). Образцы хранить до исследования при 2-8 ° С не более 24 ч. Подготовка исследуемых образцов. 1. Сыворотки, подлежащие исследованию в РТГА, предварительно прогревают при темпе ратуре (56±1) °С в течение 30 мин для разрушения термолабильных ингибиторов. 2. При использовании в РП в качестве исследуемого материала корок больных, они предва рительно растираются в фарфоровой ступке, и готовится суспензия в буферном растворе Мак- Ильвейнав концентрации 0,004 моль/л, pH 7,2-7,4 из расчета 1:3-1:5. ПОДГОТОВКА КОМПОНЕНТОВ ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ (АНАЛИЗА) Реакция торможения гемагглютинации (РТГА): Натрия хлорида раствор 0,9 %, p H 7,2-7,4. Навеску 9 г натрия хлорида растворяют в 1 л воды очищенной, pH раствора доводят до 1,2-7А раствором натрия гидроксида 10 %. Диагностикум оспенный. Содержимое ампулы растворяют в 1,0 мл натрия хлорида рас твора 0,9 %, получая разведение диагностикума 1:5. Полученный раствор хранят при темпера туре от 2 до 8 °С в течение рабочей смены. Взвесь эритроцитов крови петуха 1 %. Учитывая тот факт, что эритроциты не всех пе тухов обладают равной способностью агглютинироваться вирусом, необходимо перед выбо --- стр. 7 --- ром петуха-донора испытать его эритроциты в РГА. Во флакон со стеклянными бусами вносят 15-30 мл натрия хлорида раствора 0,9 % и 5-10 капель крови, которую берут из надреза греб ня петуха породы «ЛЕГГОРН БЕЛЫЙ», кроссов «ЛОМАН БРАУН» или «ХАЙСЕКС УАЙТ». Кровь начинают дефибринировать вращательными движениями в процессе взятия и продол жают после окончания взятия в течение 15-20 мин. Затем фильтруют через 3-4 слоя марли. Эритроциты осаждают центрифугированием при 2-2,5 тыс. об/мин в течение 4-5 мин или при 1,5 тыс. об/мин в течение 10 мин. Надосадочную жидкость осторожно удаляют при помоши пипетки. Затем эритроциты отмывают: к эритроцитам добавляют натрия хлорида раствор 0,9 % в соотношении 1:3; взвесь центрифугируют по тем же режимам, надосадочную жид кость осторожно удаляют при помощи пипетки. Операцию повторяют 2-3 раза, надосадочная жидкость последнего отмывания должна быть бесцветной. Для приготовления 1 % взвеси эритроцитов к 9,9 мл натрия хлорида раствора 0,9 % добавляют 0,1 мл осадка эритроцитов. Взвесь эритроцитов используют в течение рабочей смены и не хранят более продолжительные сроки. Реакция преципитации (РП): Диагностикум оспенный. Содержимое ампулы растворяют в 1,0 мл натрия хлорида рас твора 0,9 %, получая разведение диагностикума 1:5. Полученный раствор хранят при темпера туре от 2 до 8 °С в течение рабочей смены. Сыворотка диагностическая оспенная сухая. Содержимое ампулы растворяют в 1,0 мл воды очищенной, затем готовят разведение 1:10 на натрия хлорида растворе 0,9 %. В пробир ку вносят 0,9 мл натрия хлорида раствора 0,9 % и 0,1 мл раствора сыворотки диагностической оспенной (разведение 1:10). Сыворотка крови кроликов нормальная, предварительно обработанная эритроцитами крови барана. Сыворотку крови кроликов нормальную получают из крови неиммунизирован- ного кролика. Сыворотку прогревают при температуре (56±1) °С в течение 30 мин, после чего добавляют эритроциты крови барана (консервированные или свежеприготовленные) из расче та 1 мл на 10 мл сыворотки. Смесь вьщерживают при температуре (37±1) °С в течение 15 мин. Эритроциты удаляют центрифугированием. Полученную сыворотку хранят при температуре минус 20 °С не более 3 лет. Bacto™ Agar «Becton Dicrkinson and Compani» 1 %. Навеску агара 10 г заливают 1 л натрия хлорида раствора 0,9 %, pH 7,2-7,4, помещают в водяную баню и нагревают до полного расплавления. Раствор агара 1 % разливают во флаконы по 30-50 мл и стерилизуют разлитый во флаконы агар при температуре 100 °С (кипящая водяная баня) в течение 10 мин. Срок год ности при температуре от 2 до 8 °С не более 1 мес. Для хранения более 1 мес при приготовле- --- стр. 8 --- НИИ агара добавляют мертиолят в конечной концентрации 1:10000, стерилизацию в данном случае не проводят. Предметное стекло, обработанное спиртом или спирто-эфирной смесью (1:1), поме щают на горизонтальную поверхность, на стекло наносят предварительно расплавленный на водяной бане и охлажденный до 58 - 62 °С Bacto™ Agar «Becton Dicrkinson and Compani» 1 %. Толщина слоя агара должна быть 1 мм (примерно 2 мл на предметное стекло размером 26 X 76 мм). В застывшем агаре штампом из четырех трубок диаметром 4 мм и расстоянием между центрами трубок 7 мм просекают контуры лунок. Агаровые пробки отсасывают с по мощью трубки, подсоединенной к резиновой груше, или осторожно вьшимают иглой. ПРОВЕДЕНИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ (АНАЛИЗА) Постановка РТГА. Постановка РГА. В качестве вируссодержащей взвеси используют диагностикум оспенный с известным титром в РГА. В том случае, если титр в РГА с эритроцитами испытуе мого петуха совпадет с титром диагностикума оспенного (указанного в паспорте) - эритроци ты данного петуха можно использовать для РТГА. В шесть последовательных лунок планшета для серологических реакций вносят по 0,5 мл натрия хлорида раствора 0,9 %. В первую лунку добавляют 0,5 мл раствора диагности кума (разведение 1:5), получая разведение 1:10. Титрование на планшете проводят с помощью автоматической пипетки. Начиная с первой лунки, последовательно переносят по 0,5 мл в по следующие лунки планшета, получая двукратные разведения от 1:10 до 1:320. Из последней лунки 0,5 мл раствора с разведением 1:320 удаляют. Одну лунку на планшете используют для контроля эритроцитов петуха на спонтанную гемагглютинацию: в неё вносят только 0,5 мл натрия хлорида раствора 0,9 %. Затем во все лунки (с разведениями диагностикума и натрия хлорида раствором 0,9 %), включая и контрольную лунку, вносят по 0,5 мл 1 % взвеси эритроцитов петуха. Планшет ак куратно встряхивают и выдерживают при температуре 20-25 °С в течение 30 мин. Учет результатов РГА. Результат учитывают по четырехкрестовой системе: плюс 4 (+4) - полная гемагглютинация (однородная пленка эритроцитов в виде «зонти ка»); плюс 3 (+3) - гемагглютинация меньшей степени интенсивности (однородная пленка эритроцитов в виде «зонтика» меньшего размера); плюс 2 (+2) - частичная гемагглютинация (однородная пленка эритроцитов на дне лун ки, в сочетании с осадком эритроцитов); --- стр. 9 --- плюс 1 (+1) - следы гемагглютинации (следы однородной пленки эритроцитов на дне лунки в сочетании с плотным осадком эритроцитов); минус (-) - отсутствие гемагглютинации (скопление эритроцитов в центре лунки - «пу говка»). Учет результата проводят в том случае, если в лунке контроля эритроцитов на спонтан ную гемагглютинацию гемагглютинация отсутствует - минус (-) Выбор рабочей дозы диагностикума. В реакции торможения гемагглютинации используют диагностикум, разведенный таким обра зом, чтобы в 0,5 мл его раствора содержалось 2 агглютинирующих единицы (2 АЕ), учитывая начальное разведение диагностикума, равное 1:5. Например, титр диагностикума 1:160, для получения 2 АЕ содержимое ампулы диагностикума сухого разводят путем растворения со держимого 1 ампулы диагностикума в 16 мл натрия хлорида раствора 0,9 %. Правильность выбора рабочей дозы диагностикума подтверждают в РГА проведением титрования диагностикума в коротком ряду с разведениями, содержащими 2 АЕ, 1 АЕ и 0,5 АЕ в лунке. При титре диагностикума 1:160 это соответствует разведениям 1:80, 1:160, 1:320. Титрование в коротком ряду проводят дважды: до исследования сывороток и одновре менно с постановкой РТГА. Для получения разведения диагностикума 1:80 к 15 мл натрия хлорида раствора 0,9 % в пробирке добавляют 1,0 мл раствора диагностикума. Для получения разведения диагностикума 1:160 к 1,0 мл натрия хлорида раствора 0,9 % в пробирке добавляют 1,0 мл раствора диагностикума 1:80. Для получения разведения диагностикума 1:320 к 1,0 мл натрия хлорида раствора 0,9 % в пробирке добавляют 1,0 мл раствора диагностикума 1:160. В три последовательных лунки планшета для серологических реакций дозатором пипе- точным автоматическим носят по 0,5 мл полученных разведений диагностикума: в первую лунку планшета вносят разведение 1:80, во вторую -1:160, в третью - 1:320. Одну лунку на планшете используют для контроля эритроцитов петуха на спонтанную гемагглютинацию: в неё вносят только 0,5 мл натрия хлорида раствора 0,9 %. Затем во все лунки вносят по 0,5 мл 1 % взвеси эритроцитов петуха. Планшет аккурат но встряхивают и вьщерживают при температуре 20-25 °С в течение 30 мин. Учет результатов проводят по четырехкрестовой системе при отсутствии гемагглюти нации в лунке контроля эритроцитов на спонтанную гемагглютинацию. В лунках с разведениями диагностикума, содержащими 2 АЕ и 1 АЕ гемагглютинация должна быть на (+4) или (+3), в лунке 0,5 АЕ - гемагглютинация должна быть (+1) или (— ). В