Набор реагентов для определения ДНК Gardnerella vaginalis, Atopobium vaginae, Lactobacillus spp. и общего количества бактерий (Bacteria) методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) для диагностики in vitro «АмплиПрайм® ФЛОРОСКРИН®-Бактериальный вагиноз» по ТУ 9398-021-09286667-2014 — инструкция и характеристики

РУ: РЗН 2016/3619 от 29.01.2016 · класс риска 2б

Производитель: ООО "НекстБио" (Россия)

В госконтрактах 44-ФЗ: 93 контракта, медианная цена за единицу 24 866 ₽.

Автоматически отфильтрованный фрагмент инструкции по применению (страницы, где похоже, что есть таблица технических характеристик) — не полный документ. Карточка РУ на портале Росздравнадзора →

Текст инструкции: технические характеристики

--- стр. 1 ---
«УТВЕРЖДАЮ»
учеральный директор 
;тва с ограниченной 
1н'6стью «НекстБио»
О. О. Лавинюков
СП. 2020 г.
ИНСТРУКЦИЯ
по применению набора реагентов для определения ДНК 
Gardnerella vaginalis, Atopoblum vaginae, Lactobacillus spp. и 
общего количества бактерий (Bacteria) методом полимеразной 
цепной реакции (ПЦР) для диагностики in vitro
«АмплиПрайм® ФЛОРОСКРИН®-Бактериальный
вагиноз»
АмплиПрайм'
id
ООО «НекстБио»,
Российская Федерация, 111394,
город Москва, улица Полимерная, дом 8, стр. 2 IVD


--- стр. 2 ---
ОГЛАВЛЕНИЕ
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ......................................................................................................3
НАЗНАЧЕНИЕ.......................................................................................................................3
ПРИНЦИП МЕТОДА..............................................................................................................4
ФОРМЫ ВЫПУСКА НАБОРА РЕАГЕНТОВ.........................................................................5
АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ..............................................................................6
ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ.........................................................................8
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ...........................................................................................9
ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ МАТЕРИАЛЫ И ОБОРУДОВАНИЕ.............................................. 11
ВЗЯТИЕ, ТРАНСПОРТИРОВАНИЕ И ХРАНЕНИЕ ИССЛЕДУЕМОГО МАТЕРИАЛА... 12
ПОДГОТОВКА ИССЛЕДУЕМОГО МАТЕРИАЛА К ЭКСТРАКЦИИ ДНК........................ 13
ИНТЕРФЕРИРУЮЩИЕ ВЕЩЕСТВА И ОГРАНИЧЕНИЯ ПО ИСПОЛЬЗОВАНИЮ ПРОБ
ИССЛЕДУЕМОГО МАТЕРИАЛА....................................................................................... 13
ПРОВЕДЕНИЕ ПЦР-ИССЛЕДОВАНИЯ........................................................................... 13
ЭКСТРАКЦИЯ ДНК ИЗ ИССЛЕДУЕМЫХ ОБРАЗЦОВ.................................................... 13
ФОРМА КОМПЛЕКТАЦИИ 1 («ПЦР-комплект» вариант FRT-100)............................... 14
СОСТАВ............................................................................................................................14
АМПЛИФИКАЦИЯ С ДЕТЕКЦИЕЙ В РЕЖИМЕ «РЕАЛЬНОГО ВРЕМЕНИ»...............14
A, Подготовка пробирок для амплификации..............................................................14
Б. Проведение амплификации с детекцией в режиме «реального времени»......15
B. Анализ и интерпретация результатов........................................................................16
ФОРМА КОМПЛЕКТАЦИИ 2 («ПЦР-комплект» вариант FRT-100 FN)...........................21
СОСТАВ...........................................................................................................................21
АМПЛИФИКАЦИЯ С ДЕТЕКЦИЕЙ В РЕЖИМЕ «РЕАЛЬНОГО ВРЕМЕНИ»...............21
A. Подготовка пробирок для амплификации.............................................................21
Б. Проведение амплификации с детекцией в режиме «реального времени»......22
B. Анализ и интерпретация результатов........................................................................24
ФОРМА КОМПЛЕКТАЦИИ 3 («ПЦР-комплект» вариант FRT-L).....................................28
СОСТАВ...........................................................................................................................28
АМПЛИФИКАЦИЯ С ДЕТЕКЦИЕЙ В РЕЖИМЕ «РЕАЛЬНОГО ВРЕМЕНИ»...............28
A. Подготовка пробирок для амплификации.............................................................28
Б. Проведение амплификации с детекцией в режиме «реального времени»......29
B. Анализ и интерпретация результатов........................................................................30
СРОК ГОДНОСТИ. УСЛОВИЯ ТРАНСПОРТИРОВАНИЯ И ХРАНЕНИЯ.......................35
ГАРАНТИЙНЫЕ ОБЯЗАТЕЛЬСТВА ПРОИЗВОДИТЕЛЯ................................................35
СИМВОЛЫ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ В ПЕЧАТНОЙ ПРОДУКЦИИ..........................................37
стр. 2 из 38


--- стр. 3 ---
список СОКРАЩЕНИЙ
В настоящей инструкции применяются следующие сокращения и обозначения:
BKO-FL - экзогенный внутренний контрольный образец
ГЭ - геномные эквиваленты
ДНК -дезоксирибонуклеиновая кислота
дНТФ - дезоксирибонуклеотидтрифосфат
иппп - инфекции, передаваемые половым путем
К1. К2 - ДНК-калибраторы
К- - отрицательный контроль ПЦР
КС - коэффициент соотношения
НК - нуклеиновые кислоты
ОК - отрицательный контроль экстракции
ОКО - отрицательный контрольный образец
ПЦР - полимеразная цепная реакция
РУ - регистрационное удостоверение
________________ - урацил-ДНК-гликозилаза
FRT - флуоресцентная детекция в режиме «реального времени»
НАЗНАЧЕНИЕ
Набор реагентов «АмплиПрайм® ФЛОРОСКРИН®-Бактериальный вагиноз» 
предназначен для количественного определения ДНК Gardnerella vaginalis, Atopobium 
vaginae, Lactobacillus spp. и общего количества бактерий {Bacteria) в биологическом 
материале {отделяемое слизистой оболочки влагалища) методом мультиплексной 
ПЦР с гибридизационно-флуоресцентной детекцией продуктов амплификации. Набор 
реагентов используется в клинической лабораторной диагностике для исследования 
биологического материала, полученного от лиц с подозрением на наличие 
бактериального вагиноза вне зависимости от формы и наличия манифестации 
заболевания.
Соотношение логарифмов концентраций Lactobacillus spp. и общего количества 
бактерий, соотношение логарифмов концентраций условно-патогенной микрофлоры - 
G. vaginalis, А. vaginae и общего количества бактерий, а также соотношение логарифмов 
концентраций Lactobacillus spp. и условно-патогенной микрофлоры - G.vaginalis и 
А.vaginae, позволяют с высокой точностью диагностировать бактериальный вагиноз - 
заболевание, связанное с подавлением нормальной микрофлоры влагалища 
{Lactobacillus spp.) и заменой ее условно-патогенной (в том числе G.vaginalis и 
A.vaginae).
Использование набора реагентов «АмплиПрайм® ФЛОРОСКРИН®-Бактериальный 
вагиноз» позволяет проводить динамические наблюдения за состоянием 
влагалищного биотопа и контролировать эффективность проводимой терапии.
стр. 3 из 38


--- стр. 5 ---
г
дезоксиуридина входит в состав смеси дНТФ в реагентах для амплификации. 
Дезоксиуридин делает контаминирующие ампликоны восприимчивыми к разрушению 
ферментом УДГ до начала амплификации ДНК-мишени, и, следовательно, они не 
могут быть в дальнейшем амплифицированы.
Фермент УДГ термолабилен и инактивируется при нагревании выше 50 °С и поэтому 
не разрушает ампликоны мишени, нарабатываемые в процессе ПЦР.
На этапе амплификации одновременно в одной пробирке проводится 4 реакции - 
амплификация фрагментов ДНК G.vaginalis, А.vaginae, Lactobacillus  spp., а также 
амплификация фрагмента ДНК eacfer/a. Результаты амплификации регистрируются по 
4 различным каналам флуоресцентной детекции:
Таблица 1
Канал для 
флуорофора FAM JOE ROX Cy5
ДНК-мишень ДНК
G. vaginalis
ДНК
A. vaginae
ДНК
Lactobacillus  spp.
участок ДНК, 
общий для 
Bacteria
Область
амплификации 16S rRNA gene 16S rRNA gene 16S rRNA gene 16S rRNA gene
ФОРМЫ ВЫПУСКА НАБОРА РЕАГЕНТОВ
Набор реагентов выпускается в 3 формах комплектации:
Форма 1 включает комплект реагентов «ПЦР-комплект» вариант FRT-100.
Форма 2 включает комплект реагентов «ПЦР-комплект» вариант FRT-100 FN.
Форма 3 включает комплект реагентов «ПЦР-комплект» вариант FRT-L.
Все формы комплектации предназначены для проведения амплификации ДНК с 
гибридизационно-флуоресцентной детекцией в режиме «реального времени» и 
позволяют выявлять ДНК в количественном формате. Для проведения полного ПЦР- 
исследования необходимо использовать комплекты реагентов для экстракции ДНК, 
рекомендованные Производителем.
Форма комплектации 2 может быть использована совместно с автоматическими 
станциями приготовления реакционных смесей.
стр. 5 из 38


--- стр. 6 ---
АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
Для данного набора реагентов применимы следующие характеристики; 
Линейный диапазон измерения и аналитическая чувствительность
Таблица 2
Вид
исследу­
емого
материала
Транспортная
среда
Комплект для 
экстракции 
ДНК
Комплект
для
амплифи­
кации
Микроор­
ганизм
Аналитичес­
кая чувстви­
тельность, 
ГЭ/мл^
Линейный
диапазон
измерения,
ГЭ/мл
отделяемое
слизистой
оболочки
влагалища
«АмплиПрайм 
ТС» или 
«АмплиПрайм 
тем» или 
«Транспортная 
среда ТС- 
ЭДЭМ»2
«АмплиПрайм
ДНК-сорб-АМ»
«ПЦР- 
комплект» 
вариант 
FRT-100, 
FRT-100 FN, 
FRT-L
G. vaginalis 1x10^
1x10'’- 1x103А. vaginae 3x103
Lactobacillus
spp. 1x103
Данные значения характеристик достигаются при соблюдении правил, указанных в 
разделах «Взятие, транспортирование и хранение исследуемого материала» и 
«Подготовка исследуемого материала к экстракции ДНК».
Аналитическая чувствительность в отношении каждого из микроорганизмов 
сохраняется и в присутствии высоких концентраций ДНК других анализируемых 
микроорганизмов - до 10^ ГЭ/мл.
Аналитическая специфичность
Набор реагентов обнаруживает фрагменты ДНК заявленных микроорганизмов и 
фрагмент ДНК, общий для Bacteria. Аналитическая специфичность набора реагентов 
доказана при исследовании ДНК следующих микроорганизмов: Staphylococcus aureus, 
Streptococcus pyogenes, Streptococcus agalactiae, Candida albicans, Candida glabrata,  
Candida krusei, Mycoplasma hominis, Ureaplasma urealyticum, Ureaplasma parvum.  
Mycoplasma genitallum. Chlamydia trachomatis. Neisseria flava. Neisseria subfiava.  
Neisseria sicca, Neisseria mucosa, Neisseria gonorrhoeae, Trichomonas vaginalis.  
Treponema pallidum. Toxoplasma gondii, HSV 1 и 2 типа, CMV, HPV, a также геномной 
ДНК человека.
При тестировании образцов ДНК вышеперечисленных микроорганизмов и ДНК 
человека неспецифических реакций выявлено не было.
' Количество геномных эквивалентов микроорганизма (ГЭ) в биологическом материале (отделяемое 
слизистой оболочки влагалища), помещенном в указанную транслортную среду, в пересчете на 1 мл.
^ Форма комплектации 3 или 4 комплекта реагентов «АмплиПрайм ЭДЭМ».
стр. 6 из 38


--- стр. 7 ---
Воспроизводимость, повторяемость и правильность
Воспроизводимость и повторяемость были определены путем тестирования 
модельного образца биоматериала. Модельный образец биоматериала был 
приготовлен разведением стандартного образца предприятия, содержащего ДНК трех 
микроорганизмов (G. vaginalis, А. vaginae, Lactobacillus  spp.) в трех диапазонах 
концентраций (от 1x10^ до 1x10^ от 1x10^ до 1x10^ от 1x10^ до ГЭ/мл) в 
биологическом материале, не содержащем ДНК каких-либо других возбудителей 
ИППП.
Правильность была определена путем тестирования стандартных образцов 
предприятия в диапазоне концентрации от1х10'*до 1x10^ ГЭ/мл.
Таблица 3
Воспроизводимость
Обра­
зец Микроорганизм
Исходное
значение
концентрации,
ГЭ/мл
Количество
повторов
Среднее
значение
концентрации,
Стандартное
отклонение
(SD)
Коэффициент
вариации
(CV). %
1
G. vaginalis 10^- 10^ 80 4,73 0,15 3,17
А. vaginae 103-10^ 80 3,87 0,07 1,86
Lactobacillus spp. 10^-10® 80 4,85 0,04 0,88
2
G. vaginali' 10^-10^ 80 5,71 0,05 0,79
A. vaginae 10^- 1Q6 80 5,33 0,04 0,68
Lactobacillus spp. 10^-108 80 6,89 0,08 1,18
3
G. vaginalis 106-108 80 7,73 0,04 0,49
A. vaginae 108-108 80 7,20 0,05 0,68
Lactobacillus spp. 108-10^ 80 3,94 0,08 1,92
Повторяемость
Таблица 4
Обра­
зец Микроорганизм
Исходное
значение
концентрации,
ГЭ/мл
Количество
повторов
Среднее
значение
концентрации,
|д
Стандартное
отклонение
(SD)
Коэффициент
вариации
(CV), %
G. vaginalis Ю'*- 108 40 4,87 0,04 0,88
А. vaginae 108- Ю -* 40 3,85 0,07 1,70
Lactobacillus spp. 108 - 106 40 4,87 0,04 0,85
2
G. vaginalis 108-10® 40 5,73 0,04 0,71
A. vaginae 108-10® 40 5,31 0,03 0,55
Lactobacillus spp. 106-106 40 6,82 0,04 0,59
3
G. vaginalis 106-108 40 7,73 0,03 0,35
A. vaginae 106-10® 40 7,18 0,03 0,44
Lactobacillus spp. 103-10'' 40 4,00 0,05 1,23
Таблица 5
Правильность
Микроорганизм Количество
повторов
Среднее значение 
измерения, 1д
Установленное
значение
Систематическая 
погрешность (В)
%G. vaginalis 100 4,97 4,72 0,25 5,27
А. vaginae 100 4,38 4,42 0,04 0,82
Lactobacillus spp. 100 4,06 4,38 0,32 7,3
стр. 7 из 38


--- стр. 8 ---
ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
Таблица 6
Результаты тестирования набора реагентов «АмплиПрайм® ФЛОРОСКРИН®- 
Бактериальный вагиноз» в сравнении с референтным методом
Тип
образцов
Количество
исследуемых
образцов
отделяемое
слизистой
оболочки
влагалища
Всего
исследовано 
528 образцов
Результаты применения набора 
реагентов «АмплиПрайм® 
ФЛОРОСКРИН®-Бактериальный 
вагиноз»
Результаты применения референтного 
метода^
при определении соотношения концентраций ДНК микроорганизмов
Количество образцов с заключением:
«Соотношения 
концентраций ДНК 
микроорганизмов 
соответствуют 
бактериальному 
вагинозу»
«На основании 
соотношений 
концентраьи^й ДНК 
микроорганизмов 
бактериальный вагиноз 
не установлен»
«Соотношения концентраций ДНК 
микроорганизмов соответствуют 
бактериальному важнозу»
299 0
«На основании соотношений 
концентраций ДНК микроорганизмов 
бактериальный вагиноз не установлен»
0 229
при определении ДНК отдельных микроорганизмов
Микроорганизм Количество
образцов Положительных Отрицательных
G.vaginalis
Положительных 326 0
Отрицательных 0 202
A.vaginae
Положительных 182 0
Отрицательных 0 346
Lactobacillus  spp. Положительных 528 0
Отрицательных 0 0
Было использовано 528 образцов отделяемого слизистой оболочки влагалища, 
полученных от первичных пациенток гинекологического профиля с жалобами на 
наличие вагинальных выделений.
Таблица 7
Диагностические характеристики набора реагентов 
«АмплиПрайм® ФЛОРОСКРИН®-Бактериальный вагиноз»
Тип
образцов Микроорганизм
Диагностическая 
чувствительность'^ (с 
доверительной вероятностью 
95 %). не менее %
Диагностическая 
специфичность®, (с 
доверительной вероятностью 
95 %). не менее %
отделяемое
слизистой
оболочки
влагалища
при определении соотношения концентраций ДНК микроорганизмов
- 99,0 98,7
при определении ДНК отдельных микроорганизмов
G. vaginalis 99,1 98,5
A.vaginae 98,4 99,1
Lactobacillus spp.® 99,4 -
^ В качестве референтного метода использовался набор реагентов 
«АмплиСенс® ФлороЦеноз / Бактериальный вагиноз-FL» (РУ № ФСР 2012/13616).
Относительная чувствительность в сравнении с использованным референтным методом.
^ Относительная специфичность в сравнении с использованным референтным методом.
® Диагностическая специфичность не может быть рассчитана для ДНК Lactobacillus spp., поскольку 
данный микроорганизм является частью нормальной микрофлоры женского урогенитального тракта и 
присутствует во всех образцах отделяемого слизистой оболочки влагалища.
стр. 8 из 38


--- стр. 9 ---
J
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
Работа должна проводиться в лаборатории, выполняющей молекулярно­
биологические (ПЦР) исследования биологического материала на наличие 
возбудителей инфекционных болезней, с соблюдением санитарно- 
эпидемиологических правил СП 1.3.2322-08 «Безопасность работы с
микроорганизмами IM-IV групп патогенности (опасности) и возбудителями 
паразитарных болезней», СанПиН 2.1.7.2790-10 «Санитарно-эпидемиологические 
требования к обращению с медицинскими отходами» и методических указаний МУ 
1.3.2569-09 «Организация работы лабораторий, использующих методы амплификации 
нуклеиновых кислот при работе с материалом, содержащим микроорганизмы I-IV групп 
патогенности».
При работе необходимо всегда выполнять следующие требования:
- Рассматривать исследуемые образцы как инфекционно-опасные, организовывать 
работу и хранение в соответствии с СП 1.3.2322-08 «Безопасность работы с 
микроорганизмами III-IV групп патогенности (опасности) и возбудителями 
паразитарных болезней».
- Убирать и дезинфицировать разлитые образцы или реагенты, используя 
дезинфицирующие средства в соответствии с СП 1.3.2322-08 «Безопасность 
работы с микроорганизмами III-IV групп патогенности (опасности) и возбудителями 
паразитарных болезней».
- Лабораторный процесс должен быть однонаправленным. Анализ проводится в 
отдельных помещениях (зонах). Работу следует начинать в Зоне Экстракции, 
продолжать в Зоне Амплификации и Детекции. Не возвращать образцы, оборудование 
и реагенты в зону, в которой была проведена предыдущая стадия процесса.
- Неиспользованные реагенты, реагенты с истекшим сроком годности, а также 
использованные реагенты, упаковку, биологический материал, включая материалы, 
инструменты и предметы, загрязненные биологическим материалом, следует 
удалять в соответствии с требованиями СанПиН 2.1.7.2790-10 «Санитарно- 
эпидемиологические требования к обращению с медицинскими отходами».
ВНИМАНИЕ! При удалении отходов после амплификации (пробирок, содержащих 
продукты ПЦР) недопустимо открывание пробирок и разбрызгивание содержимого, 
поскольку это может привести к контаминации продуктами ПЦР лабораторной зоны, 
оборудования и реагентов.
- Использовать и менять при каждой операции одноразовые наконечники для
стр. 9 из 38


--- стр. 18 ---
ФОРМА КОМПЛЕКТАЦИИ 1. КОЛИЧЕСТВЕННЫЙ ФОРМАТ
Интерпретация результатов для исследуемых образцов
Таблица 11
Заключение Расшифровка
Невалидный
Для данного исследуемого образца по каналу для 
флуорофора Су5 не определено (отсутствует) 
значение C^ или расчетное значение концентраций по 
каналу для флуорофора ROX превышает расчетное 
значение концентраций по каналу для флуорофора 
Су5 более чем на 0,5 Lg. Необходимо повторить ПЦР- 
исследование данного образца, начиная с этапа 
экстракции. В случае воспроизводимости результата 
рекомендуется повторно провести взятие 
биологического материала и ПЦР-исследование.
Соотношения концентраций ДНК 
микроорганизмов соответствуют 
бактериальному вагинозу
КСК0,5
На основании соотношений 
концентраций ДНК 
микроорганизмов бактериальный 
вагиноз не установлен
КС1>1 и общее количество ДНК бактерий более 10® 
ГЭ/мл
Соотношения концентраций ДНК 
микроорганизмов соответствуют 
промежуточному состоянию 
микрофлоры
0,5<КС1<1
Соотношения концентраций ДНК 
микроорганизмов соответствуют 
дисбиозу неуточненной этиологии
КС2>1 и КСЗ>2, 
любое значение КС1
Снижение степени бактериальной 
обсеменённости
КС1>1 и общее количество ДНК бактерий менее 
10® ГЭ/мл и более 10® ГЭ/мл
Количество бактерий недостаточно 
для анализа общее количество ДНК бактерий менее 10® ГЭ/мл
Результат ПЦР-исследования считается достоверным, если получены 
правильные результаты для контролей этапов экстракции и амплификации ДНК 
в соответствии с табл. 12 и вкладышем, прилагаемым к набору реагентов.
Таблица 12
Результаты для контролей различных этапов ПЦР-исследования
Конт­
роль
Контролируемый 
этап ПЦР- 
исследования
Результаты амплификации по каналу для флуорофора
РАМ JOE ROX Су5
ОК Экстракция ДНК
определена
концентрация
меньше
граничного
определена
концентрация
меньше
граничного
определена
концентрация
меньше
граничного
определена
концентрация
меньше
граничного
К- ПЦР
определена
концентрация
меньше
граничного
определена
концентрация
меньше
граничного
определена
концентрация
меньше
граничного
определена
концентрация
меньше
граничного
К1 ПЦР определено 
значение Ct
определено 
значение Ct
определено 
значение Ct
определено 
значение Ct
стр. 18 из 38


--- стр. 19 ---
■Viir ФОРМА КОМПЛЕКТАЦИИ 1. КОЛИЧЕСТВЕННЫЙ ФОРМАТ
определено определено определено определено
К2 ПЦР значение Ct значение Ct значение Ct значение Ct
меньше меньше меньше меньше
граничного граничного граничного граничного
Возможные ошибки
1. Для отрицательного контроля экстракции (ОК) по каналам для флуорофоров FAM 
и/или JOE и/или ROX и/или Су5 определено значение концентрации больше 
граничного. Вероятна контаминация лаборатории продуктами амплификации или 
контаминация реагентов, исследуемых образцов на каком-либо этапе ПЦР- 
исследования. Необходимо предпринять меры по выявлению и ликвидации источника 
контаминации и повторить ПЦР-исследование для всех образцов, начиная с этапа 
экстракции ДНК.
2. Для отрицательного контроля ПЦР (К-) по каналам для флуорофоров FAM и/или 
JOE и/или ROX и/или Суб определено значение концентрации больше граничного. 
Вероятна контаминация лаборатории продуктами амплификации или контаминация 
реагентов, исследуемых образцов на каком-либо этапе ПЦР-исследования. 
Необходимо предпринять меры по выявлению и ликвидации источника контаминации 
и повторить амплификацию и детекцию для всех образцов.
3- Для ДНК-калибратора К1 отсутствует значение порогового цикла (С/) по какому- 
либо из указанных каналов для флуорофоров {см. табл. 12). Необходимо повторить 
амплификацию и детекцию для всех образцов.
4. Для ДНК-калибратора К2 значение порогового цикла (Ct) по какому-либо из 
указанных каналов для флуорофоров (см. табл. 12) отсутствует или превышает 
граничное значение. Необходимо Повторить амплификацию и детекцию для всех 
образцов.
5. Показатель эффективности Е при построении калибровочной прямой менее 80 % 
или более 120%. Необходимо проверить правильность заданных концентраций 
ДНК-калибраторов в соответствии с вкладышем к набору реагентов и правильность 
выбранного уровня пороговой линии. Если при правильно заданных концентрациях 
ДНК-калибраторов и уровне пороговой линии показатель эффективности не 
укладывается в требуемый диапазон, следует повторить амплификацию и детекцию 
для всех образцов.
6. Для исследуемого образца определено значение порогового цикла, при этом на 
графике флуоресценции отсутствует участок характерного экспоненциального 
подъема (график представляет собой приблизительно прямую линию). Необходимо 
проверить правильность выбранного уровня пороговой линии или параметров
стр. 19 из 38


--- стр. 20 ---
расчета базовой линии. Если результат получен при правильном уровне пороговой 
линии (базовой линии), требуется повторно провести амплификацию и детекцию 
для этого образца.
ФОРМА КОМПЛЕ1аАЦИИ 1. КОЛИЧЕСТВЕННЫЙ ФОРМАТ______________________
стр, 20 из 38


--- стр. 26 ---
ФОРМА КОМПЛЕКТАЦИИ 2. КОЛИЧЕСТВЕННЫЙ ФОРМАТ______________________
Таблица 17
Результаты для контролей различных этапов ПЦР-исследования
Конт­
роль
Контролируемый 
этап ПЦР- 
исследования
Результаты амплификации по каналу для флуорофора
РАМ JOE ROX Су5
ОК Экстракция ДНК
определена
концентрация
меньше
граничного
определена
концентрация
меньше
граничного
определена
концентрация
меньше
граничного
определена
концентрация
меньше
граничного
К- ПЦР
определена
концентрация
меньше
граничного
определена
концентрация
меньше
граничного
определена
концентрация
меньше
граничного
определена
концентрация
меньше
граничного
К1 ПЦР определено 
значение Ct
определено 
значение Ct
определено 
значение Ct
определено 
значение Ct
К2 ПЦР
определено 
значение Ct 
меньше 
граничного
определено 
значение Ct 
меньше 
граничного
определено 
значение Ct 
меньше 
граничного
определено 
значение Ct 
меньше 
граничного
Возможные ошибки
1. Для отрицательного контроля экстракции (ОК) по каналам для флуорофоров РАМ 
и/или JOE и/или ROX и/или Су5 определено значение концентрации больше 
граничного. Вероятна контаминация лаборатории продуктами амплификации или 
контаминация реагентов, исследуемых образцов на каком-либо этапе ПЦР- 
исследования. Необходимо предпринять меры по выявлению и ликвидации источника 
контаминации и повторить ПЦР-исследование для всех образцов, начиная с этапа 
экстракции ДНК.
2. Для отрицательного контроля ПЦР (К-) по каналам для флуорофоров РАМ и/или 
JOE и/или ROX и/или Су5 определено значение концентрации больше граничного. 
Вероятна контаминация лаборатории продуктами амплификации или контаминация 
реагентов, исследуемых образцов на каком-либо этапе ПЦР-исследования. 
Необходимо предпринять меры по выявлению и ликвидации источника контаминации 
и повторить амплификацию и детекцию для всех образцов.
3. Для ДНК-калибратора К1 отсутствует значение порогового цикла (СО по какому- 
либо из указанных каналов для флуорофоров (см. табл. 17). Необходимо повторить
амплификацию и детекцию для всех образцов.
4. Для ДНК-калибратора К2 значение порогового цикла (СО по какому-либо из указанных 
каналов для флуорофоров (см. табл. 17) отсутствует или превышает граничное 
значение. Необходимо повторить амплификацию и детекцию для всех образцов.
5. Показатель эффективности Е при построении калибровочной прямой менее 80 % 
или более 120%. Необходимо проверить правильность заданных концентраций
стр. 26 из 38


--- стр. 27 ---
ДНК-калибраторов в соответствии с вкладышем к набору реагентов и правильность 
выбранного уровня пороговой линии. Если при правильно заданных концентрациях 
ДНК-калибраторов и уровне пороговой линии показатель эффективности не 
укладывается в требуемый диапазон, следует повторить амплификацию и детекцию 
для всех образцов.
6. Для исследуемого образца определено значение порогового цикла, при этом на 
графике флуоресценции отсутствует участок характерного экспоненциального 
подъема (график представляет собой приблизительно прямую линию). Необходимо 
проверить правильность выбранного уровня пороговой линии или параметров 
расчета базовой линии. Если результат получен при правильном уровне пороговой 
линии (базовой линии), требуется повторно провести амплификацию и детекцию 
для этого образца.
ФОРМА КОМПЛЕКТАЦИИ 2. КОЛИЧЕСТВЕННЫЙ ФОРМАТ______________________
стр, 27 из 38


--- стр. 28 ---
ФОРМА КОМПЛЕКТАЦИИ 3. КОЛИЧЕСТВЕННЫЙ ФОРМАТ
ФОРМА КОМПЛЕКТАЦИИ 3 («ПЦР-комплект» вариант FRT-L)
СОСТАВ
Комплект реагентов «ПЦР-комплект» вариант FRT-L для амплификации 
фрагментов ДНК G. vaginalis, А vaginae, Lactobacillus spp. и Bacteria с гибридизационно- 
флуоресцентной детекцией в режиме «реального времени» позволяет проводить ПЦР- 
исследование в количественном формате. Комплект реагентов включает:
Реагент Описание Объем, мл Количество
ПЦР-смесь Флороскрин-БВ- 
Lyo Порошок белого цвета -
96 пробирок 
объемом 0,2 мл 
или 96-луночный 
планшет для ПЦР
К1 complex Прозрачная бесцветная 
жидкость 0,5 1 лробирка
К2 complex Прозрачная бесцветная 
жидкость 0,5 1 пробирка
К- Прозрачная бесцветная 
жидкость 0,5 1 пробирка
Буфер для элюции В Прозрачная бесцветная 
жидкость 1,2 8 пробирок
Комплект реагентов рассчитан на проведение 96 реакций амплификации, включая 
контроли.
К набору реагентов прилагается диск, содержащий руководство оператора и 
программное обеспечение версии 1.0 в формате Microsoft Excel для 
автоматической обработки исходных данных и получения результатов.
АМПЛИФИКАЦИЯ С ДЕТЕКЦИЕЙ В РЕЖИМЕ «РЕАЛЬНОГО ВРЕМЕНИ»
Для внесения в пробирки реагентов, проб ДНК и контрольных образцов 
используются одноразовые наконечники с фильтрами.
А. Подготовка пробирок для амплификации
Общий объем реакционной смеси — 25 мкл, включая объем пробы ДНК — 25 мкл.
1. Отобрать необходимое количество пробирок или достать 96-луночный планшет для 
амплификации с готовой лиофилизированной реакционной ПЦР-смесью 
Флороскрин-БВ-Lyo для амплификации ДНК исследуемых и контрольных образцов 
(количество контрольных образцов см. в п, 3).
2. В подготовленные пробирки или лунки планшета внести по 25 мкл проб ДНК, 
полученных в результате экстракции из исследуемых образцов,
ВНИМАНИЕ! При добавлении проб ДНК, экстрагированных с помощью комплектов 
реагентов для проведения экстракции методом сорбции на силикагеле или магнитной 
сепарации, необходимо избегать попадания сорбента в реакционную смесь.
стр. 28 из 38


--- стр. 33 ---
<
ФОРМА КОМПЛЕКТАЦИИ 3. КОЛИЧЕСТВЕННЫЙ ФОРМАТ
определено определено определено определено
К2 ПЦР значение Ct значение Ct значение Ct значение Ct
меньше меньше меньше меньше
граничного граничного граничного граничного
Возможные ошибки
1. Для отрицательного контроля экстракции (ОК) по каналам для флуорофоров FAM 
и/или JOE и/или ROX и/или Су5 определено значение концентрации больше 
граничного. Вероятна контаминация лаборатории продуктами амплификации или 
контаминация реагентов, исследуемых образцов на каком-либо этапе ПЦР- 
исследования. Необходимо предпринять меры по выявлению и ликвидации 
источника контаминации и повторить ПЦР-исследование для всех образцов, 
начиная с этапа экстракции ДНК.
2. Для отрицательного контроля ПЦР (К-) по каналам для флуорофоров РАМ и/или 
JOE и/или ROX и/или Су5 определено значение концентрации больше граничного. 
Вероятна контаминация лаборатории продуктами амплификации или 
контаминация реагентов, исследуемых образцов на каком-либо этапе ПЦР- 
исследования. Необходимо предпринять меры по выявлению и ликвидации 
источника контаминации и повторить амплификацию и детекцию для всех образцов.
3. Для ДНК-калибратора К1, отсутствует значение порогового цикла (Ct) по какому- 
либо из указанных каналов для флуорофоров (см. табл. 22), Необходимо повторить 
амплификацию и детекцию для всех образцов.
4. Для ДНК-калибратора К2 значение порогового цикла (Ct) по какому-либо из 
указанных каналов для флуорофоров (см. табл. 22) отсутствует или превышает 
граничное значение. Необходимо повторить амплификацию и детекцию для всех 
образцов.
5. Показатель эффективности Е при построении калибровочной прямой менее 80 % 
или более 120%. Необходимо проверить правильность заданных концентраций 
ДНК-калибраторов в соответствии с вкладышем к набору реагентов и правильность 
выбранного уровня пороговой линии. Если при правильно заданных концентрациях 
ДНК-калибраторов и уровне пороговой линии показатель эффективности не 
укладывается в требуемый диапазон, следует повторить амплификацию и 
детекцию для всех образцов.
6. Для исследуемого образца определено значение порогового цикла, при этом на 
графике флуоресценции отсутствует участок характерного экспоненциального 
подъема (график представляет собой приблизительно прямую линию). 
Необходимо проверить правильность выбранного уровня пороговой линии или
стр. 33 из 38


--- стр. 34 ---
ФОРМА КОМПЛЕКТАЦИИ 3. КОЛИЧЕСТВЕННЫЙ ФОРМАТ
параметров расчета базовой линии. Если результат получен при правильном 
уровне пороговой линии (базовой линии), требуется повторно провести 
амплификацию и детекцию для этого образца.
стр. 34 из 38


--- стр. 35 ---
4v
СРОК годности. УСЛОВИЯ ТРАНСПОРТИРОВАНИЯ и ХРАНЕНИЯ 
Срок годности. 12 мес. Набор реагентов с истекшим сроком годности применению не 
подлежит. Срок годности вскрытых реагентов соответствует сроку годности, 
указанному на этикетках для невскрытых реагентов.
Транспортирование. Набор реагентов транспортировать при температуре от 2 до 
8 “С не более 5 сут. Допускается транспортирование при температуре от 2 до 25 °С не 
более 3 сут. Комплект реагентов «ПЦР-комплект» вариант FRT-100, вариант FRT-100 
FN при получении разукомплектовать в соответствии с указанными температурами 
хранения.
Хранение.
Форма комплектации 1. Комплект реагентов «ПЦР-комплект» вариант FRT-100 
хранить при температуре от 2 до 8 X, кроме ПЦР-буфера-К. ПЦР-буфер-К хранить 
при температуре от минус 24 до минус 16 °С. ПЦР-смесь Флороскрин-БВ хранить в 
защищенном от света месте.
Форма комплектации 2. Комплект реагентов «ПЦР-комплект» вариант FRT-100 FN 
хранить при температуре от 2 до 8 °С, кроме ПЦР-буфера-Н. ПЦР-буфер-Н хранить 
при температуре от минус 24 до минус 16 ‘’С. ПЦР-смесь Флороскрин-БВ хранить в 
защищенном от света месте.
Форма комплектации 3. Комплект реагентов «ПЦР-комплект» вариант FRT-L хранить 
при температуре от 2 до 8 °С. ПЦР-смесь Флороскрин-БВ-Lyo хранить в пакетах с 
влагопоглотителем в защищенном от света месте.
ГАРАНТИЙНЫЕ ОБЯЗАТЕЛЬСТВА ПРОИЗВОДИТЕЛЯ
Производитель гарантирует соответствие основных параметров и характеристик 
набора реагентов, требованиям, указанным в технической и эксплуатационной 
документации, в течение указанного срока годности при соблюдении всех условий 
транспортирования, хранения и применения.
Рекламации на качество набора реагентов «АмплиПрайм® ФЛОРОСКРИН®- 
Бактериальный вагиноз» направлять в адрес производителя ООО «НекстБио» 
{111394 г. Москва, ул. Полимерная, 8 стр. 2) в отдел по работе с рекламациями (тел. 
(495) 620-08-73, e-mail: info@nextbio.ru).
При выявлении побочных действий, не указанных в инструкции по применению 
набора реагентов, нежелательных реакций при его использовании, фактов и 
обстоятельств, создающих угрозу жизни и здоровью граждан и медицинских работников 
при применении и эксплуатации набора реагентов, рекомендуется направить сообщение 
в отдел по работе с рекламациями по адресу, указанному выше, и в уполномоченную 
государственную регулирующую организацию (в РФ - Федеральная служба по надзору 
в сфере здравоохранения) в соответствии с действующим законодательством.
стр. 35 из 38


--- стр. 36 ---
/
< 1
стр. 36 из 38


--- стр. 37 ---
символы, ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ В ПЕЧАТНОЙ ПРОДУКЦИИ
REF
LOT
IVD
VER
I
mJ
1
Номер в каталоге
V
Максимальное 
число тестов
Код партии Использовать до
Изделие для in vitro 
диагностики □ 3
Обратитесь к 
руководству по 
эксплуатации
Дата изменения
Не допускать 
попадания 
солнечного света
Ограничение
температуры Дата изготовления
Производитель
'Т
Беречь от влаги
Хрупкое. Осторожно
п
Верх
стр, 37 из 38


--- стр. 38 ---
Лист регистрации изменений
Редакция Место внесения 
изменений Суть вносимых изменений
24.07.15
По тексту Исправлены опечатки
Дополнительные 
материалы и 
оборудование
Уточнено, что комплект расходных материалов для 
автоматической станции для экстракции НК должен 
соответствовать инструкции Производителя
Форма комплектации 1 
«Состав»
Исправлена опечатка в названии реагента: «ПЦР- 
смесь-Флороценоз-БВ» заменено на «ПЦР-смесь 
Флороценоз-БВ»
Меры предосторожности
Дополнены сведения об описание утилизации или 
уничтожения упаковки, биологического материала, 
включая материалы, инструменты и предметы, 
загрязненные биологическим материалом с 
отдельным описанием правил
Диагностические
характеристики
Изменены значения диагностических 
характеристик (чувствительности и 
специфичности) на значения, лученные в 
результате клинико-лабораторных испытаний, с 
доверительной вероятности 95%
03.12.15 Диагностические
характеристики
Добавлены значения диагностических 
характеристик (чувствительности и 
специфичности) для каждого из указанных 
аналитов; G.vaqinalis, А.vaginae, Lactobacillus spp.
Изм.
Номера листов Всего 
листов в 
документе
Номер
извещения об 
изменении
Измене­
ния внес Датаизменённ
ых
заменён­
ных новых аннулиро­
ванных
3 - 1 -38 - 39-48 38 09286667,023.
1/6-2020
Колачевск 
ИЙ Н.Н. 26.08.2020
стр. 38 из 38


--- стр. 39 ---